발간등록번호 안내서 건강기능식품기능성평가가이드

발간등록번호 안내서 -0136-01 건강기능식품기능성평가가이드

지침서 ᆞ 안내서제 ᆞ 개정점검표 명칭 등록대상여부 지침서ㆍ안내서구분 기타확인사항 건강기능식품기능성평가가이드 _ 위건강 / 소화기능개선에도움 아래에해당하는사항에체크하여주시기바랍니다. 이미등록된지침서ㆍ안내서중동일ㆍ유사한내용 예의지침서ㆍ안내서가있습니까? 아니오 상기질문에 예 라고답하신경우기존의지침서ㆍ안내서의개정을우선적으로고려하시기바랍니다. 그럼에도불구하고동지침서ㆍ안내서의제정이필요한경우그사유를아래에기재해주시기바랍니다. ( 사유 : ) 법령 ( 법ㆍ시행령ㆍ시행규칙 ) 또는행정규칙 ( 고시ㆍ훈령 예ㆍ예규 ) 의내용을단순편집또는나열한것입니까? 아니오 예 단순한사실을대외적으로알리는공고의내용입니까? 아니오 1년이내한시적적용또는일회성지시ㆍ명령에 예해당하는내용입니까? 아니오 예 외국규정을번역하거나설명하는내용입니까? 아니오 신규직원교육을위해법령또는행정규칙을알기 예쉽게정리한자료입니까? 아니오 상기사항중어느하나라도 예 에해당되는경우에지침서ㆍ안내서등록대상이아닙니다. 지침서ㆍ안내서제ㆍ개정절차를적용하실필요는없습니다. 내부적으로행정사무의통일을기하기위하여반복적으로 예 ( 지침서 ) 행정사무의세부기준이나절차를제시하는것입니까? 아니오 ( 공무원용 ) 대내외적으로법령또는고시ㆍ훈령ㆍ예규등을알기쉽게풀어서설명하거나특정한사안에대하여식품의약품안전처의입장을기술하는것입니까? ( 민원인용 ) 상위법령을일탈하여새로운규제를신설ㆍ강화하거나민원인을구속하는내용이있습니까? 예 ( 안내서 ) 아니오 예 아니오 상기질문에 예 라고답하신경우상위법령일탈내용을삭제하시고지침서ㆍ안내서제ㆍ개정절차를진행하시기바랍니다. 상기사항에대하여확인하였음. 2017 년 6 월 1 일 담당자확인 ( 부서장 ) 구태현오금순

이안내서는기능성평가에대하여알기쉽게설명하거나 식품의약품안전처의입장을기술한것입니다. 본안내서는대외적으로법적효력을가지는것이아니므로본문의기술방식 ( 하여야한다 등 ) 에도불구하고민원인여러분께서반드시준수하셔야하는사항이아님을알려드립니다. 또한, 본안내서는 2016 년 6월 27일현재의과학적ㆍ기술적사실및유효한법규를토대로작성되었으므로이후최신개정법규내용및구체적인사실관계등에따라달리적용될수있음을알려드립니다. 민원인안내서 란대내외적으로법령또는고시ㆍ훈령ㆍ예규등을알기쉽게풀어서설명하거나특정한사안에대하여식품의약품안전처의입장을기술하는것 ( 식품의약품안전처지침서등의관리에관한규정제 2 조 ) 본안내서에대한의견이나문의사항이있을경우식품의약품안전평가원식품위해평가부영양기능연구팀으로문의하시기바랍니다. 전화번호 : 043-719-4416 팩스번호 : 043-719-4420

제 개정이력 연번제개정번호승인일자주요내용 1 B1-2016-1-003 2016. 6.27. 제정 2 안내서 -0136-01 2017. 6. 1. 식약처지침서등의관리에관한규정 에따른등록번호일괄정비 ( 규제개혁담당관실- 3761호, 2017.5.16.)

목차 약어 서론 일반적사항 개요 보건학적중요성 기능성시험방법 바이오마커의선정 바이오마커의측정방법 참고문헌

약 어 CAGA CCK ELISA FD-QOL GLP-1 GIP GIS HKID IFN-γ IgA/IgG/IgM LCFA MIC NF-KB NSAID PGA PYY ROS RT-PCR Cytotoxin-associated gene A Cholecystokinin Enzyme-linked immunosorbent assay Functional dyspepsia-related quality of life Glucagon-like peptide-1 Gastric inhibitory peptide Gastrointestinal symptom Hong Kong index of dyspepsia Interferon-γ Immunoglobulin A/G/M Long-chain fatty acid Minimum inhibitory concentration Nuclear factor kappa B Nonsteroidal anti-inflammatory drug Patient s global assessment Peptide YY Reactive oxygen species SBT Sucrose breath test Th1/Th2 T-helper cell 1/2 TLR Toll-like receptor TNF VACA PEG 5-HT Reverse-transcription polymerase chain reaction Tumor necrosis factor Vacuolating cytotoxin A Polyethylene glycol 5-Hydroxytryptamin - 1 -

Ⅰ 서론 이가이드라인은건강기능식품기능성원료를개발하는연구자및영업자에게 기능성 위건강 소화기능개선에도움 에대한바이오마커등의정보를제공 함으로써산업체의기능성원료연구개발에적정을기하고효율성을높이고자작성되었다 Ⅱ 일반적사항 개요 가 소화과정소화란음식물이구강에서시작하여식도 위 소장 대장 항문까지이어지는위장관의내강을통해이동하면서체내흡수가가능한단위로분해되는과정을말한다 소화작용은화학적소화와기계적소화로나눌수있다 화학적소화과정을통해고분자음식물이소화효소에의해저분자영양소로분해되고 기계적소화과정을통해서는소화관운동에의해음식물이분해되고 소화액과잘섞이며 이동된다 따라서위장의소화기능개선효과를평가하기위해서는소화작용의이러한두가지측면이모두고려되어야한다 즉 위장의소화기능개선에는소화효소활성촉진이나소화액분비촉진효과및소화관의운동기능개선이포함된다 - 2 -

화학적소화 가 소화효소분비 침샘에서구강으로분비되는침에는점액 항균제등과함께아밀라아제 가함유되어있다 침 속에는약 의아밀라아제가함유되어있으며 전분을맥아당 말토트리오스 올리고당등으로가수분해하는작용을한다 위에서는펩시노겐 이염산 에의해활성형인펩신으로활성화되어단백질을펩타이드로분해하는작용을한다 췌장에서만들어져췌관을통해십이지장으로분비되는췌장액에는물 중탄산염 이외에전분을맥아당과포도당으로분해하는아밀 라아제 펩티드결합을절단하는트립신 엘라스타아제 중성지방의글리세롤로부터지방산을절단하는리파아제 등의소화효소가포함된다 소장의점막은융모 라고하는주름형상을이루고있으며 이융모에배열된세포는미세융모 를가지고있다 미세융모의세포막속에소화효소가존재하는데 이들솔가장자리효소 에는 사람의경우 종류의 α 가포함된다 이중수크라아제 는서당을포도당과과당으로분해하며 말타아제는맥아당을포도당 분자로 락타아제 는유당을포도당과갈락토오스로분해한다 솔가장자리효소에는펩티다아제 도포함되는데 아미노펩티다아제 는아미노산 디펩티드 트리펩티드를생산하며 엔테로키나아제는트립신을활성화시키는작용을한다 나 담즙분비 담즙은담즙산 빌리루빈 콜레스테롤 지방산 인지 - 3 -

질등의복합체로이루어진수용성용액으로음식물이소장으로유입되면담낭에서십이지장으로분비된다 담즙산은음식으로섭취한중성지방을 유화시켜마이셀을형성하는데 이는지질성분이효율적으로소화 흡수될수있도록해준다 다 위산분비위산은위점막의벽세포 에서분비되는데 위에서분비되는가스트린 히스타민 아세틸콜린에의해양성자펌프 인 펌프를경유하여분비된다 그림 그림 위산분비기전 음식물자극에의해위전정부의 세포에서분비된가스트린이나 미 주신경의축삭에의해방출된아세틸콜린은위벽세포에작용하여위산분비를자극하고 가스트린과아세틸콜린은위점막의장크롬친화성유사세 포 로부터히스타민방출을자극한다 또한히스타민은 수용체 와결합함으로써 펌프에의한위산분비를촉진시킨다 이때 가스트린에의해서는콜레시스토키닌 수용체 가활성화되며 아세 틸콜린에의해서는무스카린아세틸콜린수용체 가활성화된다 이들수용체들에의해세 - 4 -

포내 와 의농도가증가하고 펌프가활성화 된다 고농도의위산은전체위액을 이하의산성으로만든다 위액의강한산성은섭취한단백질의 차구조를변성시켜소화되기쉽도록하며 주세포 에서분비된펩시노겐 을활성형의펩신으로분해하고 펩신을활성화하는역할을한다 펩신은단백질을부분적으로 소화시키는작용을한다 또한위산은음식물에포함된대부분의미생물을사멸시키는살균작용을한다 라 위장관호르몬 위장관점막층의상피세포에는호르몬을분비하는내분비세포가존재 하는데 위장관의분비나흡수 그리고운동은이호르몬들의작용을받는다 위장관호르몬은대부분펩티드로서약 여종이분포하고있다 소화를조절하는주요위장관호르몬의종류와대사는표 과같다 표 소화를조절하는호르몬 - 5 -

위장관호르몬은위장관기능에중요한역할을하지만 일중변동하루중시간대별로다름이크고 섭취하는음식의영향을많이받기때문에 측정시에적절한방법을선정하는것이중요하다 판정기준에있어논란의여지가있는호르몬들로서 은젊은연령층에서는오히려식후에증가하여 혈당을낮추는좋은효과도가지며 적절한식사후에자연스럽게분비되는 호르몬이므로 위배출이나위운동을억제하는기능을한다고하여 이호르몬의감소가소화기능을증진시킨다고는할수없다 또한콜레시스토키닌의경우고령에따른식욕저하의원인으로추정되는호르몬인만큼반드시증가한다고하여소화를증진시킨다고할수없다 마 소화관흡수 소장점막은영양소흡수에적합하도록넓은표면적을가지고있고 점막을통해췌장액내효소나솔가장자리효소에의해분해된최종산물이 체내로흡수된다 포도당과갈락토오스 비타민 무기질등은능동수송에 의해소장점막세포로흡수되고 수용성물질은수동확산에의해액체공극 을통해서세포막을통과하거나점막세포측면공간이나 - 6 -

연접결합 부위를통해흡수될수있다 유리지방산과모노 글리세리드 는마이셀을형성하여확산에의해비교반수층 을통과하여흡수표면에도달한후 마이셀은붕 괴되고지질은세포막을통해점막세포내로확산된다 대장에서는소장에 서소화 흡수되지않은일부비타민및무기질 수분이흡수된다 흡수불량 이란소화된영양소의위장관을통한흡수가 완전하지않고비정상적인상태를말하며 특정당류 지방 단백질 비타민 무기질등의흡수불량문제를포함한다 이러한영양소흡수불량의요인으로는췌장액효소등의결핍이있으며 철흡수불량의경우비헴철이일반적으로장에서잘흡수되지않는것이문제가된다 유당불내증 으로인한유당흡수불량 과당등의단당류흡수불 량은위장관불편감을유발한다 기계적소화 가 위운동 위는음식물을저장하고 음식물과위액을섞는작용을통해서음식물을 유미즙 형태로만들어십이지장으로내보내는역할을한다 또한 위에서단백질소화가시작된다 음식물과위액등의위내용물이섞이는 혼합작용은위전정부의수축 에의하며 이연동운동성수축 은혼합작용뿐만아니라유미즙형태의음식 물을십이지장으로밀어내기도한다 한편위내용물의배출은음식물의 영양성분구성비 성상 농도등의영향을받는다고알려져있는데 칼로리 점성 삼투압등이높은유미즙은영양소성분이없는액체류에비해천천히 배출된다그림 십이지장내지방 산등에의해십이지장수용기가활성화되고 신경 - 7 -

또는호르몬반응이촉발되면 위의평활근운동성이지연되고유문동연동운동감소로위배출이지연된다 호르몬반응으로는가스트린은위운동을 촉진하고 세크레틴 콜레시스토키닌 등은위 배출을감소시킨다 그림 위연동운동성수축 나 소장운동소장은공복동안에도주기적인소화운동 을유지하다가 위에서유미즙이소장으로내려가면서운동성 이훨씬강해지게 된다 이과정에서소장내음식물은소장평활근의수축과이완이반복되는분절운동에의해작은덩어리로나뉘면서소화액과혼합되 고 소장벽과접촉되면서영양소의흡수가원활히이루어지게된다 그림 소장상부일수록분절운동이강하고빈도도높아서십이지장의경우분당 약 회 회장은약 회정도일어난다 또한음식물을소장의상부에서하 부로이동시켜주는연동운동도소장상부일수록빠르고하부로갈수록느려진다 소장운동은근육과신경에의해조절되며 약물 음식 연령의증가 스트레스등근육과신경기능에영향을줄수있는다양한요인의영향을받는다 - 8 -

A. 소장의연동운동 소화불량소화불량은식후답답함 속쓰림 조기포만감 상복부통증등을포함하는주관적증상으로 기질적원인이있는경우와없는경우로나눌수있다 가 기질문제에의한소화불량소화불량의중요한기질적원인들에는소화성궤양 위암 위식도역류질환과같은위장관계질환 간질환 담췌질환 약물 음식 전신질환등이있다 예를들어 유당불내증의가장큰원인은유당을소화시키는효소인 유당분해효소 의활성감소이다 유당분해효소는소장솔가장자리 효소중의하나로서유전적으로이효소를생산하지못하는경우나성장과정에서분비가감소되거나설사등으로인해유당분해효소의분비가일시적으로감소되면유당불내증이발생한다 소장에서유당이충분히소화흡수되지않고대장으로내려오면대장내에서수분불균형으로설사를 일으키거나동시에대장내세균에의해분해되어포도당 유산 그리고가스가생성된다 이로인해대장의연동운동이자극되고 가스에의한복 통등의증상이나타날수있다 - 9 -

나 기능성소화불량 기능성소화불량은기질적인질환이배제된증상으로 기능성소화불량은 불쾌한식후포만감 조기만복감 명치부위통증및쓰림등이있다 불쾌한 식후포만감은보통양의식사후에헛배가부른듯한불편한충만감이느껴지는상태를말하며이러한불편감으로일반적인식사의양을다끝내지못하는경우도있다 기능성소화불량의원인으로는다양한원인이관여하는것으로알려져있으며 식이요법이나생활습관의개선이기능성소화 불량증의증상호전에도움을줄수있다 기능성소화불량증환자의 에서위배출지연이있다는보고가있으며 위장관운동촉진은기능성 소화불량개선에도움을줄수있다 나 위건강위건강과관련해서는위점막에대한공격인자들의작용을감소시키고 방어인자들의작용을증진시킴으로써위점막건강을유지하는데도움을줄수있다 또한 감염예방 증식억제를통해서도위점막건강을유지할수있다 사람의경우위건강과관련된위불편감에대한주관적평가를통해서위불편감개선효과도측정할수있다 위점막보호 위장관은점막 점막하층 근육층 장막 의 개층으로구성되며 위점막은흡수와분비를하는세포층으로구성된다 건강한점막상태에서위점막의벽세포와주세포 의세포막은위내강속의산을거의통과시키지않는데 이는알칼리성점액층 중탄산이온 프로스타글란딘 작용 연접결합 손상된세포의빠른재생등의여러가지보호기전이존재하기때문이다 - 10 -

점액은위액 의구성성분으로서점막의방어기능을수행한다 위점막의배상세포 에서는트레포일펩타이드 와뮤신당단백의혼합물을분비하고 이들이점액을형성하는데 점액은겔 형태로상피세포의표면을덮는다 뮤신은병원성미생물을감싸는작용을통해점막을보호하는작용을하는데 상재균 의경우에는특이뮤신에접착함으로써집락형성이용이하게되기도한다 산성음식물섭취로십이지장이자극을받으면세크레틴이분비되어 췌장액분비를촉진한다 췌장액에함유된중탄산염 은위산을 중화시킨다 위점막에의해생성되는프로스타글란딘은위점막을재생하고보호하는역할을하며 융합막은위산이점막하조직으로새어나가는것을 막는작용을한다 위내벽은매분 만개의세포를제거하고새로운세포로교체하여 일마다전체상피가재생되는데 이때손상된세포의재생은 위점막보호효과를가진다 위점막손상위점막손상은위점막을보호하는방어인자와위점막을손상시키는공격인자사이의균형이깨어져위염이나소화성궤양이유발되는것을 말한다그림 이때위점막을보호하는방어인자는위에서언급한위점막보호기전을나타내는요소들이고 공격인자는위산 펩신 헬리코박터파이로리 비스테로이드성항염제 등이다 위염이나소화성궤양은이러한공격인자 가강해지거나방어인자가약해짐에따라발생하며 위점막손상이발생하 였을때 위산이나펩신분비가증가할수록위점막손상이악화된다 - 11 -

그림 위점막의공격인자와방어인자균형 위산이나펩신은과다분비되거나방어인자가약해졌을때공격인자로 작용하여자기소화 작용을통해위점막에손상을일으킨다 비 스테로이드성항염제는프로스타글란딘생산을억제함으로써위궤양을일으키며 자기소화로위장벽이파괴되면위산이점막을통해점막하조직으로새어나와직접적인조직손상과염증을야기한다 염증중장크롬친화성유사세포에서방출되는히스타민은더많은산분비와점막손상을초래 하는데 이를급성위염 이라고한다 만성위염 은위의만성적염증으로위점막에나타나 는염증세포의출현 상피세포의파괴또는구조적인변형의유무및체부와전정부선의위축의유무가특징이다 만성위염의병인은아직명확히밝 혀지지않았으나 감염에의한만성위염이가장흔하다 만성위염의증상으로는복부팽만감 오심 구토 가슴앓이 상복부동통등이있다 소화성궤양이란위액중에함유된위산이나펩신의자기소화에의해서위장점막조직을지나밑에있는조직까지손상된상태를말하며 일반적 으로위 십이지장궤양이소화성궤양으로총칭되고있다 는소화 - 12 -

성궤양의주요공격인자로서최근주목받고있다 위와같이만성위염이 나소화성궤양등의위관련증상및질환은 가많은부분관여 하고있다 에의한위손상 가 의특징 위장관에는미생물이분포하고있고 미생물의종류나수는위장관부위에 따라달라진다 위액의낮은 조건때문에위에서는미생물이많이서식하지못하며 미만의 등이분포한다 외부로부터유입된 와같은미생물들은위점막층에서식한다 는편모 를이용해서위점액을뚫고들어가서상피세포에정착한다 가위나십이지장점막에집락을형성하여염증을일으키면 가스트린과위산분비가증가되며 점액세포에서의점액생성 이저하하는등의과정을통해점막손상이발생한다 나 분비물질 는요소분해효소 를가지고있다 요소분해효소는요소를 암모니아와 로분해하며 암모니아는세포독성을나타내며 는 과산화질산 의세균사멸기능을중화시킴으로써숙주의초기 방어기전을무력화시켜감염을돕는다 는세포공포독소 라고하는세포의공포화를 유발하는외독소를생성한다 세포공포독소는위점막조직의결합력에손상을 줌으로써 성장에필요한금속이온이나요소의투과성을증가시킨다 세포공포독소의발현과관련이있는것으로알려진 라는단백질은다른세포인자와의반응에서신호전달경로에 - 13 -

관여하여 사이토카인 세포주기 세포구조등에영향을주고 세포공포독 소의위점막조직결합력손상은 에의하여증가된다 다 와면역및염증반응 가위점액층을침투하여상피세포에도달하면이것을선천적면역 으로인식함에따라위상피세포는 α β 등의항균펩타이드를분비한다 는막관통단백질 집합체인 에의해인지되고 활성화된 는 κ 를활성화하여염증성사이토카인유전자를발현시킨다 에대한선천적면역반응으로 분비되는사이토카인은중성구나다른면역세포의유입을유도하는데 의경우중성구의이동과활성을조절하고 는 세포가 으로분화하는데관여한다 에감염된위상피세포에서는 γ γ α α β 등의사이토카인양이증가하는데 대부분의사이토카인들은염증을유발하는작용을하지만 은염증성 면역반응을억 제하는작용을한다 는체액성 및세포매개성면역 을유도하기도하며 에감염되면체액성면역반응으로서 등의항체가형성된다 세포매개성면역반응에서 는수지상세포 를자극하여 와같은다양한사이토카인을생산하도록한다 세포와관련된반응에서제형조력 세포 면역반응이우세하면조직손상을일으키는역할을하고 제형조력 세포 면역반응은위염증반응에대해방어적인기전을나타냄에따라 면역반응이 와관련된병인에대한숙주의방어기전에서 - 14 -

중요한역할을한다 라 와기능성소화불량 감염은육안적 현미경적변화를유발하여위축성위염과장상피화생 의원인이되며 감염이위전정부에 서발생하는경우소마토스타틴 감소와가스트린증가에의해위산분비가증가되는데 이러한위산분비변화가소화불량의원인으로보고 되고있다 또한 감염은위점막의사이토카인과케모카인을활성화시키면서위십이지장에염증반응을일으키고 이를통한염증면역학적회로 가기능성소화불량의발생에 중요한역할을한다고제안되고있다 - 15 -

보건학적중요성 음식물의소화와영양소흡수는다양한소화효소와분비기관 호르몬 작용 근육 신경이함께작용하는복잡하고도통합적 고효율적인과정이다 유전적영향 노화 스트레스 섭취하는음식 약물등여러가지요인 의영향으로소화효소분비 위장관운동등에문제가발생하면소화및흡수불량증상이생길수있다 소화및흡수불량은체내영양소손실의측 면뿐아니라그주된증상이식후답답함 속쓰림 조기포만감 상복부통 증등으로이들증상을겪는사람의삶의질을저하시킨다 따라서소화흡수불량의문제원인을해결하거나원인이불분명한경우라도소화기능을증진시키는노력이필요한데 식품섭취를통해서도소화기능증진을통해소화불량증상완화효과를얻을수있다 예를들어아티초크추출물은담즙분비촉진을통해지방소화를증진시킴으로써소화불량증상완화에도움이된다고알려진물질이다 위점막은흡수와분비를하는세포층으로구성되며 점액 중탄산염 프 로스타글란딘등의작용으로건강한점막상태가유지되지만 헬리코박터 균감염 스트레스 알코올등의여러가지요인에의해위점막손상이발생할수있다 위점막손상은급성위염 만성위염 소화성궤양으로발전할수있으며 이들은음식물소화불량의문제 위불편감등을야 기한다 헬리코박터균등위점막손상을유발하는요인을억제하거나위점막보호작용을할수있는식품의섭취는위점막의건강상태유지에도움을줄수있다 - 16 -

Ⅲ 기능성시험방법 바이오마커의선정 위건강 소화기능개선기능성을확인하기위한시험관시험 동물시험및 인체적용시험의바이오마커는아래의표를참고할수있다 α - 17 -

γ γ α α - 18 -

바이오마커의측정방법 가 소화관련바이오마커 소화효소 가 아밀라아제 α 활성 아밀라아제는타액과췌장액에함유된전분소화효소로서타액아밀라아제에의해전분이맥아당과덱스트린으로분해되며 췌장아밀라아제에 의해맥아당 말토트리오스 올리고당등으로분해된다 시험관시험과실험 동물의췌장조직에서아밀라아제활성을측정할수있으며 아밀라아제활성이증가하면소화에도움을준다고볼수있다 시험관시험에서는 에 돼지췌장 α 을용해시켜효소용액을준비하고 에 α 를 농도로용해하여기질용액을만든다 그다음효소용액 에시험물질 을넣은후 에서흡광도를측정한다 흡광도측정후 분간실온에방치한후 기질용액 을넣고 분간반응시켜흡광도를측정한다 두반응 의흡광도차이를통해서효소활성의변화를측정한다 동물시험에서시험물질섭취가끝난후 실험동물을희생시켜췌장을적출하여아밀라아제활성을측정할수있다 나 프로테아제활성 프로테아제는단백질과펩타이드등의펩타이드결합을가수분해하는 효소로서 위에서생성되는펩신뿐만아니라췌장액내트립신 엘라스타아제 그리고소장솔가장자리효소중의펩티다아제를포함한다 시험관 - 19 -

시험과시험동물의췌장조직등에서트립신 키모트립신등의활성을측정 할수있으며 프로테아제활성증가시단백질소화증진이기대된다 시험관시험에서트립신활성측정방법은다음과같다 가되도록 에용해한트립신 에시험물질 을혼합하여 에서 분간전처리한다 에 을 농도가되도록용해한후 을취하여전처리용액에첨가하여 에서 분간반응시킨뒤 을첨가하여반응을정지시킨다 상온에서 분간반응액을정치하여단백질을침전시키고 에서 분간원심분리한뒤상층액 에 을혼합하여 에서흡광도를측정한다 한편엘라스타아제 은췌장액에함유된단백분해효소로서다른췌장효소의영향을받지않고 장을통과할때담즙염과결합하여분해되지않고대변으로대부분배설되기때문에췌장의외분비기능지표가되며 주로사람의변에서그농도를효소면역측정법 을이용하여측정한다 다 리파아제활성 리파아제는주로췌장에서합성되어췌장액에함유되어분비되는지방가수분해효소로서중성지방을지방산과글리세롤로가수분해하는반응을촉매하는역할을한다 따라서리파아제활성이증가하면지방소화가증진된다 시험관시험과실험동물의췌장조직에서리파아제의활성을측정할수있다 시험관시험에서리파아제활성측정의예는다음과같다 등의방법을변형하여사용한다 농도별시험물질 - 20 -

과 을혼합하여 에서 분간전처리한후 로 에용해시킨올리브오일 을첨가하여 에서 분간진탕배양한다 아세톤 로반응을정지시킨후 을첨가하여혼합한뒤상온에서정치하여상층액 을 에 서흡광도를측정한다 동물시험의경우 개복하여소장을적출하고 소장내용물을취하여균 질화및원심분리과정을거쳐얻은상층액에대해서효소법을이용한 를사용하여측정할수있다 담즙산분비 가 담즙산농도 유미즙이십이지장에도달하면콜레시스토키닌이분비되어담낭수축을자극함으로써담즙이분비된다 담즙내존재하는담즙산은마이셀을형성하여지질을가용화시키며 수용성소화효소인췌장리파아제의작용을쉽게함으로써지방소화작용에영향을준다 따라서담즙산농도가증가되면지방소화증진이기대된다 동물시험에서담즙산분비를측정하는방법은다음과같다 실험동물 을대상으로수술을시행하여관류도관십이지장 유문부에서 원위부과흡인도관관류도관보다 원위부를삽입한다 시험식은고형 식과유동식을혼합한것으로 유동식은유동식표지자인 를함유하도록만들고 고형식은표지자인 를부착시킨다 십이지장관류액은 를함유한 을사용한다 실험은도관삽입 - 21 -

주째부터의식이있는상태에서실시하며 하루 회 주일에 회실시한다 실험동물은물을제외하고 시간동안금식시킨후 실험시작 시간전부터관류액을관류 하고 시험식을투여한다 분마다 십이지장흡인도관에서검사물을채취하여담즙산을측정한다 담즙산분비량은십이지장내유량십이지장검사물의담즙산농도의식을통해구 한다 담즙산은 를사용하여 의 위치를산화시켜유리된 이온이 와결합하여 를형성한것을분광광도계를이용하여 에서측정한다 위산분비 가 위산도위액내위산에의해위의산도는높게 는낮게유지되지만 위산 저하로위산도가낮아지면펩신기능이상 소화호르몬분비변화에따른담낭이나췌장의소화액 소화효소분비감소로인해섭취한음식의소화불량이발생할수있다 따라서위의산도를적정수준으로유지하는것이음식물소화에도움이될수있다 한편위염등위점막에손상이있을때에는위산도를낮추는것이위손상을악화시키지않는데도움을줄수있다 실험동물을 시간절식시킨후개복하여유문부를결찰하고 시험물질또는대조물질을십이지장에서위내로주입한후다시봉합한다 절식 절수하에서 시간동안방치한다음 에테르로마취하여위를적출하고위액을모아원심분리 분 한다 위액 을취하여 을지시약으로 로중화적정을통해총산도μ 를측정하였으며 총산도는총위액량을고려하여총위산분비량 - 22 -

μ 을계산한후단위시간으로환산한다 나 펩신활성 위에서분비되는펩시노겐은위산으로인한강한산성상태에서펩신으로 활성화되며 펩신은단백질분해작용을한다 따라서펩신활성이증가하 면단백질소화가증진되는효과가기대된다 한편위산과마찬가지로위손상발생시에는펩신활성을감소시키는것이위손상을악화시키지않는데도움을줄수있다 실험동물을 시간절식시킨후개복하여유문부를결찰하고시험물질 또는대조약물을십이지장에서위내로주입한후다시봉합한다 절식 절수하에서 시간동안방치한다음 에테르로마취하여위를적출하고위액을모은다 펩신활성은위액 와 의헤모글로빈기질용액 을 에녹여 로하고 에맞춘후 에서 분간원심분리한다 원심분리후상층액 와 를가하여 에서 분간원심분리 분한다 다시상층액 을취하고 를가한다음 으로희석된 을가하여 분내에 에서흡광도를측정한다 표준용액은 에용해시킨 용액 에 을가하여 의농도를조제하고 펩신활성은 로구한다 호르몬분비 가 가스트린 가스트린은주로위전정부 세포에서분비되는호르몬으로서위액 - 23 -

분비를촉진시키고 위운동을증강시키는역할을한다 실험동물과사람의 혈액을채취하여분리한혈장이나혈청에서농도를측정한다 실험최종 일에실험동물을 시간절식시킨다음 에테르로마취시키고 경동맥에서혈액을채취한다 혈액을혈청용튜브에받아 에서 분간원심분리하여혈청을얻어분석시까지 에서보관한다 혈청가스트린농도는가스트린 를이용하여분석하며 의파장에서흡광도를측정 한다 사람의경우 공복시 음식섭취후 분 분에팔의주정중피정맥 에서 가량의혈액을채취하여헤파린처리된튜브에넣고 얼음에보관한다음원심분리 하여혈장을얻는다 분리된혈장 에 을첨가하여 에보관후가스트린농도 를방사면역측정법을이용하여측정한다 나 는십이지장과공장점막의 세포에서분비되는호르몬으로십이 지장내포도당 지방이증가하거나위산도가높아지면분비되어가스트 린생성을억제하며 위운동과위산분비를억제하는역할을한다 실험동물이나사람의혈장에서 농도를분석할수있다 동물시험에서간문맥내삽관술 을이용하여십이지장내포도당이나시험물질을주입한후 간문맥혈장을취하여 혈장 를 를이용하여분석한다 사람의경우 자쪽피부정맥 에삽입된정맥캐뉼라 를통해서정맥혈을채취하며 공복시 식후 분동안일정간격으로채취한다 - 24 -

다 는말단회장 대장 직장의 형내분비세포에서생성되는 개의아미노산으로구성된펩타이드로서혈장내에서 과 의두가지형태로존재하며 은위배출억제 위산분비억제 췌장의 내분비 외분비기능 억제 장통과시간지연등의생리작용을하며 은담낭수축억제등의작용을한다 동물시험에서실험최종일에실험동물을 시간절식시킨다음 혈액 을채취하고 채취혈액을원심분리하여얻은혈청에서 혈청 은 방사선면역측정법 로중복측정하여평균치를구한다 사람의경우 시험물질섭취전과섭취후 분까지일정시간간격으로혈액을채취하여혈장을분리하고 방사선면역측정법키트를사용하여분석 한다 소화관흡수능 가 서당이소장점막의솔가장자리에존재하는수크라아제에의해분해되는원리를이용하여수크라아제활성을측정할수있다 안정동 위원소 로표지된서당을섭취하면수크라아제에의해 포도당과과당으로분해되고점막세포를통해흡수 대사되어 를발생시킨다 호흡으로나오는 를측정하면소장에서의수크라아제활성을알수있다 양이감소됨은수크라아제활성저하를의미하며 이는소장융 모상피세포의손상을의미한다 - 25 -

나 분변내총지방농도 식이지방의대부분은소장에서소화 흡수가이루어지고대장과배설 물에는소량만남겨진다 분변내의지방은장쇄지방산 콜레스테롤 중성지방 인지질로구성되며 배설된지방이증 가함은소장에서의지방소화및흡수의불량을의미할수있다 실험동물이나사람의분변에서총지방농도를측정한다 일치의분변무게를측정하고 오븐에서 시간동안건조시킨다 건조분변샘플에대해서분변내지방분석을한다 즉 일정량의건조분변을취하여 에서끓여산가수분해한다 가수분해물을여과하고 가중성이될 때까지여과지를뜨거운 물로씻어낸다 그다음건조시켜 로추출한다 지방이추출된컵을건조시키고무게를측정하 며 그무게측정값에서미리측정했던컵의무게를뺀값을분변샘플의지방함량으로한다 위 소장운동개선 가 위배출능 방사선동위원소를부착한표준식이를섭취한후 시간에따른위내남아있는방사선동위원소의양을측정함으로써위배출능을측정할수 있다 위내남아있는방사선동위원소의양이적을수록위배출량이증가할수록 위배출능이증진됨을의미한다 시험물질섭취가끝난후 공복상태에서혈액채취를위한캐뉼라를 왼쪽 정맥에삽입한다 회복 분후 유지포도당음료를섭취한다 위배출능은유지포도당음료 섭취분이내 직후부터 분동안측정하며 음료에함유된올리브유는 - 26 -

로표지되어있으며 포도당은 로표지되어있다 방사성동위원소데이터는첫 분동안에는 초간격으로 그이후 분동안은 분간격으로수집되며 위전체부위에대해측정하여 유지와포도당이남아있는비율 분을계산한다 나 위 소장운동능 동물시험에서탄말이나황산바륨이포함된유동식을투여한다음 소화관부위를떼어내어탄말이나황산바륨의이동거리를구해소화관운동 능을평가하거나장관운동기록법 으로소화관운동능을평가할수있다 실험동물의회장을약 채취하여 자체제작한연동함 에넣는다 이때 연동함은혼합기체 가공급되고 용액 이채워져있으며 용액은 로유지된다 윤상근의기계적수축을측정하기위해클립을 간격으로구측 중간 항문측장막표면에고정시킨다 클립에연결한실을장관의종축과직각방향으로하여장력변환기 에연결하고기초장력을 으로한다 분동안평형을유지시킨후 연동펌프를통해장내강내로 용액을 의유속으로관류시켜연동수축파를유발한다 컴퓨터소프트웨어로연동수축파의압력 수축곡선하면적 및전파속도를측정하여시험물질투여전 기저측정값을구한다 전파속도는소장연동운동구측수축파에서항문 측수축파까지의거리 를걸린시간으로나누어계산한다 실험물질을투여하고 분후다시연동수축파의압력 수축곡선하면적 전 - 27 -

파속도를측정한다 각추출물은연동함 용액내로 μ 부터증 량하여누적투여하고 측정값의증가나감소가뚜렷할경우다음용량 에서의실험을중단한다 다 수용체 세로토닌 은위장관에서분비되는신경전달 물질로 수용체를통해위장관의운동과감각을조절한다 수용체와 수용체가위장관에서세로토닌의수용체로서중요하게작용하며 특 히 수용체는장연동 전해질분비 내장구심성감각을매개하는 역할을한다 실험동물의위장관조직에서 수용체의발현을 방 법으로측정할수있다 라 수용체위장관운동은자율신경에의해조절되며 도파민은신경전 달물질로서콜린성신경원에서아세틸콜린유리를억제함으로써위장관 운동을억제하는역할을한다 수용체중 수용체가주로위 장관운동성과관련되어있으므로 수용체를차단하면도파민작용을 막고 아세틸콜린이유리되어위수축항진을통해위장관운동이증진될 수있다 실험동물의뇌조직 소화관조직등에서 수용체발현을 방법으로측정할수있다 임상적증상개선 가 - 28 -

은 을토대로소화불량 환자의삶의질을평가하기위한것으로섭식에대한질문 생활활력에관 한질문 정서에관한질문 사회적기능에관한질문총 영역 개문항 으로구성된설문지로서 소화불량과관련된삶의질의평가에활용되고 있다 각문항에대하여 전혀그렇지않다 점 조금그렇다 점 중간정도그렇다 점 많이그렇다 점 매우많이그렇다 점의 점 로구성된다 나 소화불량의정도를정량적으로조사하기위한타당도가검증된설문지로 총 개의소화불량증상상복부통증 경련성복통 포만감 조기만복감 식욕부진 권태감 메스꺼움 구토 흉골후방불편감 위산역류속쓰림에대해서 점척도 증상없음 가벼운정도 중간정도 심한정도 매우심함 로구성되어있다 점수가증가할수록소화불량증상이심함을나타낸다 다 는소화불량증상의심한정도를조사하기위한타당도가검증된 설문지로 개의소화불량증상일반적인위통 상복부팽만 상복부둔통 식전위통 불안시의위통 구토 메스꺼움 트림 위산역류 속쓰림 위산과다 식욕부진에대해서 점척도증상없음 경미한정도 중간정도 심한정도 매우심한정도 로구성된다 라 는대상자가증상을전체적으로어떻게느끼는지를평가하는설 문으로 시험물질섭취를통해서증상개선이있었습니까 라는첫번 - 29 -

째질문과 점척도 증상없음 뚜렷한개선 중간정도개선 변화없음 악화 중증상개선이정확하게어느쪽에더가깝습니까 의두번째질 문으로구성된다 마 삶의질개선 위소화기능관련불편감조사와함께전반적인삶의질개선여부를확인함으로써위소화기능개선여부에대한부가적인참고자료로활용할 수있다 은기능적상태 안녕상태 전반적건강상태의 개영역의 개문항으로구성되어있으며 척도를사용하여점수가높을수록 삶의질이높다고판정한다 나 위점막관련바이오마커 위점막보호 가 위손상억제율 동물시험에서시험물질을투여하고 물리적또는화학적요인으로위 손상을유도한후 시험동물의위를적출 절개하여현미경을통해서손상길이나손상면적을측정한다 시험물질투여가끝난후 실험동물을 시간절식시킨다음 를경구투여하고 절식 절수하에서 시간동안방치하여급성위염을유발한다 급성위염유발후 실험동물을에테르로마취하여위를적출한다 적출한위를 포르말린용액에 분간담궈고정시킨다 고정시킨위의대만부를절개하여손상정도를확인한다 이미지프로그램을이용하여발생된손상면적 을측정하여총합을위손상지수로한다 위손상억제율은다음식을통해구한다 - 30 -

나 궤양정도 동물시험에서위점막손상면적을측정하는방법으로 알코올에 을첨가하여 씩경구투여한다음 시간뒤희생시킨 후개복하여방혈한다음위를적출한다 적출한위는대만부를따라절개한후식염수에씻어면봉으로잘펴서핀으로고정한뒤사진촬영을한다 촬영한사진은이미지프로그램을이용하여위손상부위및위전체 면적을측정하고 궤양정도는다음식을통해구한다 다 염증지수 동물시험에서위의염증상태를조직병리학적으로점수화하여평가할수 있다 점에서 점까지로점수화하며 점은점막이나점막하에염증반응이없는상태이며 점은점막 점막하 근육층에호중구와대식세포침윤 위상피의모든부분에광범위한괴사 부종 미란 궤양이있는상태이다 라 위산분비억제능 제산능 위산은위내소화에있어서필수요소지만위손상을유발하기도한다 따라서위산을중화시키는능력 을통해위손상을감 소시키고개선시키는작용을할수있다 시험관시험과동물시험에서제산능을측정할수있다 시험관시험에서는 염산과시험물질을반응시키고 측정을통 - 31 -

해중화곡선을작성하여제산능을측정한다 동물시험에서는우레탄 을복강내투여하여실험동물을마취시키고 복부를절개한후유문과십이지장사이를봉합사로묶고 를삽입한다 생리식염수 로 회위내용물을세척한후 시간동안안정시킨다 시간안정후위액을취하여 를측정한다 경구존대를사용하여시료 을투여하고시간별로 를통하여위액 씩을취하여 를측정한다 채취한위액은 측정후 를통하여다시위에넣어준다 시료대신생리식염수를같은양투여한군을대조군으로한다 마 혈장히스타민농도 가스트린과아세틸콜린의위점막자극에의해방출되는히스타민은위자극이나염증상태에서는더많은산분비와점막손상을초래하여증상을악화시킨다 동물시험에서시험물질투여에따른히스타민저해활성을측정하기위하여실험동물의채취혈액에서혈장을분리하여 효소면역법을 이용한히스타민 를사용하여분석한다 바 히스타민 수용체 위산분비경로중하나로히스타민은위벽세포의 수용체와결합함 으로써 펌프에의한위산분비를촉진시킨다 따라서위 조직내 수용체의발현감소는위산분비억제를통해위점막보호효과를나타낼수있음을의미한다 실험동물의위조직에서위벽세포를 분리하여 시험물질을처리한후 방법을이용하여히스타민 수용체발현을측정할수있다 실험동물의위점막조직등에서히스타민 수용체의발현을 방법을이용하여측 정할수있다 - 32 -

사 콜레시스토키닌 수용체 위산분비기전중하나로가스트린은위벽세포의콜레시스토키 닌 수용체를활성화함으로써 펌프에의한위산분비를 촉진시킨다 실험동물의위벽세포를분리하여배양하거나실험동물의위 점막조직등에서콜레시스토키닌 수용체의발현을 방법을이용하여측정할수있다 아 무스카린아세틸콜린수용체 위산분비기전중하나로아세틸콜린은위벽세포의무스카린아세틸 콜린수용체 를활성화함으로써 펌프에의한위산분비 를촉진시킨다 실험동물의위벽세포를분리하여배양하거나실험동물의 위점막조직등에서무스카린아세틸콜린수용체 의발현을 방법을이용하여측정할수있다 자 농도위벽세포에서히스타민 아세틸콜린 가스트린자극에의해각수용체가활성화되고 이는세포내 와 농도를증가시켜 펌프를활성화시킨다 따라서세포내 농도의증가는위산 분비를증가시킴으로써위점막손상을악화시킬수있다 실험동물의위 조직으로부터벽세포를분리하여배양한세포에시험물질을 과함께 분동안처리한다음 를제거한후 를이용해세포를분리해낸다 을이용하여 한뒤 분간원심분리하고그상층액을사용한다 측정을위해 를이용하여제조사의프로토콜을따라서실험하고 를이 용하여측정한다 - 33 -

차 발현히스타민 아세틸콜린 가스트린의자극에의해양자펌프인 펌프가활성화되어위산이분비된다 따라서위조직내 발현감소는위산분비억제를통한위점막보호효과를나타낼 수있다 실험동물의위조직으로부터분리 배양한위벽세포나시험동물의위점막조직에서 방법을이용하여 발현을측정할수있다 카 뮤신 뮤신은위에서분비되는점액의주요성분으로서점막을보호하는작용 을한다 인체에서는최소한 개의뮤신유전자가발견되었으며 위에서는 이발현된다 위조직내뮤신분비량이나뮤신유 전자발현의증가는위점막보호효과를나타낸다 에서뮤신유전자발현을측정할수있으며 동물시험에서뮤신분비량은뮤신의 탄당를검출하는분광광도법을이용하여분석한다 사람의경우에위생검조직으로부터 이나면역조직 화학법으로분석할수있다 타 프로스타글란딘 위점막에의해생성되는프로스타글란딘은위점막을재생하고보호하는역할을하며 위조직내프로스타글란딘분비량증가는위점막보호효과 를나타낸다 동물시험에서위점막조직의무게를측정하고 을가하여균질화한다 그다음에틸에테르로 회추출하여 에테르는휘발시켜제거하고 남은잔여물로 를사용하여프로스타글란딘 함 량을측정한다 - 34 -

감염 가 최소억제농도 시험물질의 에대한항균능력을측정할때 최소억제농도를측정할수있다 시험관시험에서시험물질이첨가된배지에 를 배양하여균의생육이관찰되지않는최소한의시험물질농도를결정한다 최소억제농도값이낮을수록 에대한항균능력이강하다고할수있다 시험물질을최고농도 μ부터최저농도 μ 까지 로계열희석한다 를 농도로접종하고미호기적조건에서 일간배양한다 배양액을취하여배지에도말하 고미호기적조건에서 일간배양하여균의생육이관찰되지않는시험물질 의가장낮은농도를최소억제농도 로한다 나 균수시험물질의 에대한생장억제효과를측정하기위해서 액체배양액에시험물질첨가배지를넣어배양한후 처음원액의 균체수와배양후균체수를조사하여세균성장억제정도를평가할수있다 처음원액의균체수에서시험물질과배양후균체수가많이감소 할수록 에대한항균효과가크다고할수있다 를액체배양한다 세균배양액 μ을시험물질이 혹은 의농도로첨가된배지 에넣은후가습된 배양기에서 으로천천히진탕하면서 시간동안배양한다 처음원액의균체와 시간배양후의균체수를평판배지법으로조사한다 시험 물질이첨가되지않은대조군과비교하여시험물질첨가에의한세균성장억제율을백분율로표시한다 - 35 -

다 활성 산화효소 는 를전자공급체 산소를전자수용체로하는산화효소로서 막부착단백질인 와세포질인자인 로구성되며 자극에의해세포내활성산소 를생성한다 감염후중성구 혈관내피세포 위점막세포등에의해활성산소가생산될때 산화효소가촉매역할을한다 따라서 산화효소활성증가를통해서 감염에의한활성산소생성이증가함을알수있다 에시험물질을처리하고 시간후에 를처리한다 그다음세포의세포막과시토졸을분리하여 산화효소의활성을측정한다 산화효소활성은 를이용하여측정한다 μ 함유 와기질로서 μ 를사용한다 μ 단백질을함유하는세포막부분을첨가하여반응을시작하고 광자방출 은 를이용하여매 초마다 분간측정한다 라 요소분해효소 활성 가가지고있는요소분해효소 활성을측정함으로써시험물질의 에대한생장억제효과를확인할수있다 요소와 지시 약을처리하여요소분해효소가요소를분해하여암모니아가생성되면 상승에따라지시약의색이노란색에서빨간색으로변한다 색의변화를 통해서요소분해효소의활성및 의생장정도를평가할수있다 에배양한 를 로현탁시키고 회세척한다 를 에서 분간 - 36 -

시키고 에서 분간원심분리하여상등액을취한다 상등액의단백질농도를 방법에따라측정한다 에 μ 요소분해효소를첨가하여실온에서 시간동안반응시키면서 변화와 에서의흡광도변화를측정하여요소분해효소활성을측정한다 시 험물질처리에따른요소분해효소활성억제효과를측정하기위해서 에시험물질을최종농도가 이되도록첨가한후 를 으로보정한다 그다음 μ 의요소분해효소를첨가하여 시간동안반응시키면서 분간격으로 변화를측정한다 반응 시간후시험물질이들어가지않은대조군의 변화를 로하였을때 반응시간과시험물질에따른요소분해효소활성억제율을계산한다 마 동위원소 나 로표지한요소를섭취하여위내에서일정시간반 응시킨후호기중의 나 의농도를측정하여 감염 여부를확인할수있다 가위내에존재한다면표지된요소는 의요소분해효소에의해암모니아와이산화탄소로분해되어 나 의형태로호기중에포집된다 호흡으로검출된이산화탄소의 비 또는 를측정하여감염여부를알수있다 바 발현 는세포표면의수용체로서막관통단백질 의집합체이다 는 에의해인지되고 활성화된 는 κ를활성화하여염증성사이토카인유전자를전사한다 인 나실험동물의위점막조직에서 분석또는 - 37 -

방법을이용하여 수있다 발현이나단백질발현을측정할 사 유전자감별 을이용하여 를검출할때 의독성인자인 유전자를증폭하여검출할수있다 유전자가발현되었을때 양성으로판정한다 사람에서변이나내시경을통한위생검조직등에서 를분리하고 반응을통해 또는 유전자를증폭하여유전 자발현을확인한다 아 펩시노겐 과펩시노겐 비율 펩시노겐은위액의단백질분해효소펩신의전구물질로서 위저부와체부의주세포에서분비되는펩시노겐과전체위점막의주세포및점액 세포에서분비되는펩시노겐 종류가있다 혈청펩시노겐은위축성위염과 의지표가될수있는데 특히 감염에의한위염발생시펩시노겐 감소와펩시노겐펩시노겐 비율감소가나타난다 따라서펩시노겐펩시노겐 비율감소를통해 감염을판정할수있다 시간공복을유지한후혈액을채취하여라텍스응집면역비탁법을이용하여혈중펩시노겐 펩시노겐 펩시노겐펩시노겐 비 율을구한다 자 가스트린 가스트린은위전정부의 세포에서분비되는호르몬으로위산과펩 시노겐분비를자극하는기능을한다 감염등에의한전정부 - 38 -

위축성위염이있을경우 주로분비되는가스트린 수준이감소하므로 전정부 세포수의감소에따라 세포에서 혈청가스트린 감소를 통해 감염여부를판정할수도있다 가스트린 분석용혈액은 튜브 에채취하여 즉시얼음속에보관한다 튜브를 에서 분간 원심분리하여 혈청을분석시까지 에서보관한다 혈청가스트린은 를사용하여분석한다 와면역및염증반응 가 인체 β과 는체내에서분비되는항균펩타이드로서 과는달리 발현은 에의해증가한다 인 등에서 의방법으로측정가능하고 실험동물이나사람에서 와 의농도는혈장 위액에서방사면역측정법 으로측정할수있다 희석한검체와표준펩타이드용액 μ를 μ 를처리하여 시간동안반응시킨다 라벨용액 μ을첨가하여 다시 시간동안반응시킨다 과 을첨가하여 시간동안반응시키고 원심분리한다 모든과정은 에서수행하며 수준을측정하기위해서 의혈장과 의위액을사용 한다 - 39 -

나 κκ 는염증반응과발생과정에중요한신호전달물질로서세포에염증을발생하는자극을주게되면 가활성화되어핵내의표적유전 자에붙어좋지않은물질들을생성한다 는막관통단백질집합체인 에의해인지되고 활성화된 는 κ 를활성화하여염증성 사이토카인유전자를전사한다 등의세포 실험동물의위조직 사람의경우말초혈액단핵구 위생검조직등에서발현을측정할수있다 면역조직화학법을이용하여 κ 단백질발현을측정하거나 κ 를활성화시키는 분해의정도를 방법을이용하여측정함으로써 κ 활성화에미치는영향을분 석할수있다 다 인터페론γ γ γ 는 에감염된위상피세포에서증가하며 염증을유발하는작용을한다 등의세포 실험동물의위조직에서 방법으로유전자발현을측정할수있다 라 α α 림프구는항원제시세포가제시한항원을세포가직접인식하여반 응하는세포매개성면역 을담당하고 세균의감염 으로부터생체를보호하며 사이토카인을분비하여면역계전체를활성화 하는역할을한다 림프구는외부에서침입한특이적항원에대해서면역글로불린이라는항체를생산하여체액성면역 을제공한다 는체액성및세포매개성면역을유도한다 세포와 - 40 -

관련된반응에서는 면역반응이우세하면조직손상을일으키는역할 을하고 면역반응은위염증반응에대해방어적인기전을나타냄에따라 면역반응이 과관련된병인에대한숙주의방어기 전에서중요한역할을한다 사람의혈액으로부터추출한단핵세포를사용한 시험관시험 시험동물의위조직등에서 에의한림프구구성의 변화와시험물질의영향을 수있다 유세포분석기 를이용하여측정할 마 림프구아형 림프구 림프구 림프구는항원제시세포가제시한항원을세포가직접인식하여반 응하는세포매개성면역 을담당하고 세균의감염 으로부터생체를보호하며 사이토카인을분비하여면역계전체를활성화 하는역할을한다 림프구는외부에서침입한특이적항원에대해서면역글로불린이라는항체를생산하여체액성면역 를제공한다 는체액성및세포매개성면역을유도한다 세포와 관련된반응에서는 면역반응이우세하면조직손상을일으키는역할 을하고 면역반응은위염증반응에대해방어적인기전을나타냄에따라 면역반응이 과관련된병인에대한숙주의방어기 전에서중요한역할을한다 시험관시험과시험동물의위조직등으로부 터유세포분석기 를이용하여그구성변화를측정함으로 써어떠한면역반응이일어났는지알수있다 바 면역글로부린 에감염되면체액성면역반응으로서항체가형성되는데 특이 혈청 혈청 와 항체가나타난다 효소면역측정법을이용하여 - 41 -

혈청에서측정하는방법이일반적이다 에 시약 시약 로희석된검체혈청 를각각 μ 씩분주하여 에서 분간방치한다 그다음완충액으로 회세척후 에대한 를각 에 μ 씩분주하고 에서 분간방치한다 완충액으로 회세척후기질을 μ씩분주하고 에서 분간방치한다 정지용액을각 에 μ 씩분주하고파장 에서 흡광도를측정한다 - 42 -

Ⅳ 참고문헌 - 43 -

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강창돈등 췌장질환에서혈청및대변 측정의임상적의의 대한내과학회지 김신정 김용규 박건영 염산에탄올에의해유발된흰쥐위염에대한 생강및법제생강추출물의억제작용 한국식품영양과학회지 김재민등 동물모델을이용한 의기능성소화불량증개선효과 한국식품영양과학회지 남다은등 위염동물모델과위벽세포에서히스타민경로를통한매스틱검 의위산분비억제효과및기전연구 한국식품영양과학회지 노임환등 관련성위장질환치료를위한계란항체 의기대효과 대한소화기학회지 모정민등 알코올로유도한만성위궤양흰쥐모델에서비타민 보충이위궤양치유에미치는영향 한국식품영양과학회지 백인기 조종래 신원창 한국인의정상대조군및위장관환자군에서 항체에대한연구 감염 백창렬등 양성 음성환자에서각종상부위장관질환과나이에따른펩시노겐 비 대한소화기학회지 이바울등 소함흉탕에탄올추출물및황련알칼로이드의헬리코박터파이로리에대한항균활성 생약학회지 이상권등 식이유도비만흰쥐에서루와이위우회술이체중 그렐린및 에미치는영향 - 48 -

이재준등 지유가흰쥐의급성위염및소화성궤양에미치는영향 한국식품영양과학회지 이정선등 메밀급여가 유발당뇨쥐의췌장소화효소활성에미치는영향 한국식품영양과학회지 이정준등 약용식물추출물의 에대한항균활성 한국식품과학회지 김광진등 인체생리학 임정현등 지실추출물이기니픽위장관운동에미치는영향 연구 대한소화관운동학회지 장영선 정종문 포도씨추출물의항산화효과및소화효소저해효과 한국식품영양과학회지 정재복등 개에서회장내단백이췌효소및담즙분비와위배출및소장주행시간에미치는영향 대한소화기병학회지 최상욱등 만성위염환자의유문부 세포의분포및 농도 대한내과학회잡지 한재필 홍수진 헬리코박터파일로리감염의면역 홍예지등 양배추즙및양배추혼합즙의인체위암세포 성장억제효과와 로유발된흰쥐의항위염효과 한국식품영양과학회지 황인경 지근억 위장관관련기능성시험 식약처기능성평가가이드라인 황지영 한지숙 조릿대잎추출물의탄수화물소화효소활성저해및식후혈당강하효과 - 49 -

건강기능식품기능성평가가이드 - 위건강 / 소화기능개선에도움을줄수있음 편 - 발행인 편집위원장 편집위원 : 손여원 : 서세정 : 구용의, 이화정, 오현숙, 최윤주, 권용관, 허수정, 서일원, 오재명, 구태현, 배윤영, 강윤정, 황경미, 신용운, 문명희, 임푸름, 배민주, 정태용 발행처 발행일 문의처 : 식품의약품안전평가원 : 2016. 6. : 영양기능연구팀 (043-719-4427)