검체수집및전처리 1. 혈액체취및전처리 조사목적 혈액은혈관속을흐르고있는액상의조직으로크게혈구와혈장으로나뉩니다. 주요역할은각종물질의운반이며, 폐에서섭취한산소나소화관에서흡수한영양소등을전신으로보내고세포에서만들어진탄산가스나노폐물을운반해서폐 신장 피부등을통해몸밖으로배설합니다. 질환의진단, 치료및추적관찰에이르기까지다양한정보를얻을수있습니다. 소변은신장에서혈액을거른뒤나오는노폐물로서여러대사산물이포함되어있습니다. 소변을검사함으로써요로계의이상뿐만아니라전신적인내분비 / 대사질환에대한정보도알수있습니다. 또한소변은다른검체에비하여비침습적으로환자에게부담이가지않게채취할수있어서요검사는의료현장에서매우중요한역할을합니다. 검진대상자접수 1) 2 차원바코드 - 검진전에예약대상자수또는예측검진대상자수만큼의 2 차원바코드를출력하여준비해놓습니다. 2) 2 차원바코드준비 - 2 차원바코드라벨은다음과같이 1 인당총 10 장을준비합니다. - Blood 3 장, Urine 2 장, Document 5 장으로출력된바코드의모양은그림 97 과같습니다. < 그림 97. 2 차원바코드 > - 1 -
3) 2차원바코드부착 - 10ml SST tube : 뚜껑에서 3cm 하단부분에가로로끝부분이서로맞물리도록튼튼히눌러밀착시켜부착합니다. - 10ml EDTA tube : 뚜껑에서 3cm 하단부분에가로로끝부분이서로맞물리도록튼튼히눌러밀착시켜부착합니다. - 3ml EDTA tube : 뚜껑에서 2cm 하단부분에가로로끝부분이서로맞물리도록튼튼히눌러밀착시켜부착합니다. - 15 ml Conical tube : 뚜껑에서 3 cm 하단부분에가로로끝부분이서로맞물리도록튼튼히눌러밀착시켜부착합니다. - Urine cup : 용량표시가가려지지않도록 cup 중앙부분에가로로부착합니다. 혈액채취및전처리 1) 혈액채취방법 - 혈액채취장소는조용하고깨끗해야합니다. 취급물품또한위생적인곳에보관해야합니다. - 채혈전손을깨끗하게씻고위생장갑 (poly glove) 을착용합니다. - 미리채혈량을계산하여적정량을채혈하고, 채혈시발생가능한상황에대해환자에게미리설명합니다. - 채혈시채혈대를장시간묶어서용혈되지않도록주의해야하며적당한속도로거품이생기지않도록채혈합니다. ( 용혈된검체는검사결과에영향을줍니다.) - Hematoma ( 혈종 ) 부위의채혈을금합니다. - 채혈부위로부터 7.5~10 cm 떨어진부위에채혈대를묶습니다. - 검체오염과환자의오염방지를위해채혈부위를소독제로소독합니다. - 소독제는 70% 아이소프로필알코올을묻힌거즈패드또는알코올패드제품을이용하여채혈부위를원을그리면서소독합니다. - 검체의용혈방지와채혈시환자가따끔거림을느끼지않도록소독제를자연건조시킨후소독제가마르면채혈합니다. - 혈관이잡히지않을경우채혈부위를소독하는과정부터다시한번반복합니다. - 채혈은 Vacutainer needle(22~23 gauge) 을이용하여 Vacuum Tube에채혈합니다. 채혈이시작되면채혈대를가능한빠른시간내에풀고환자의손을펴게합니다. 채혈속도를천천히유지합니다. - 혈액이나오지않을경우 needle의위치를바꾸거나튜브를다른것으로교체합니다. 그래도안될경우처음채혈부위보다아래또는반대편팔에시도합니다. 그래도채혈을할수없을경우다른사람이채혈을할수있도록하고기관연구책임자에게보고합니다. - 2 -
올바른삽입각도 잘못된삽입각도 < 그림 98. Needle 삽입각도 > -채혈순서는그림 3과같이항응고제가들어있지않은 SST tube에먼저채혈한후항응고제가들어있는 EDTA 튜브에채혈합니다. -채혈후튜브는제조사의프로토콜과아래전처리방법에따라처리합니다. -채혈완료후멸균 Gauze pad를이용하여채혈부위를살짝누릅니다. -채혈완료후바늘을안전하게제거하고폐기물수거용기에분리수거합니다. -환자의채혈부위에출혈이있는지확인하고 1회용밴드를이용해채혈부위에최소 15분이상붙이게합니다. SST EDTA 1 EDTA 2 < 그림 99. 채혈용기및채혈순서 > - 채혈된용기의채혈량을측정하여냉장검체인수인계대장 ( 그림 100) 에입력합니다. - 3 -
< 그림 100. 냉장검체인수인계대장 > 2) SST tube 채혈 ( 임사검사및 Serum 자원제조용 ) - 환자정보와바코드일치여부를확인한후바코드가부착된 10 ml SST tube에 8 ml을채혈하여 BD사튜브는 5회, Grainer사튜브는 8~10회정도혼합하여실온에 30분간세워둡니다. 너무강력히혼합할경우용혈이생길수있으므로주의합니다. - 채혈량을냉장검체대장에기록합니다. - SST tube를 1,300g에서 10분간원심분리합니다.(BD사프로토콜기준 ) - 원심분리한 SST tube를냉장보관후임상검사기관으로운송합니다. < 그림 101. SST Tube 작업순서 > 3) 10 ml EDTA tube 채혈 (Plasma 자원제조용 ) - 10ml EDTA 튜브에 8 ml 이상채혈하여 Roller Mixer에 5분간혼합합니다 ( 그림 102). - 채혈량을냉장검체대장에기록합니다. - 10ml EDTA 튜브를검체운송전용랙에꽂아냉장보관후임상검사기관으로운송합니다. - 4 -
< 그림 102. EDTA Tube 작업순서 > 4) 3ml EDTA tube 채혈 ( 혈액학검사용 ) - EDTA tube에 3ml를채혈하여 Roller Mixer에 5분간혼합합니다 ( 그림 103). - 채혈량을냉장검체대장에기록합니다. - 검체운송전용랙에꽂아냉장보관후임상검사기관으로운송합니다. < 그림 103. 3 ml EDTA Tube 작업순서 > 2. 소변채취및전처리 1) 채뇨방법 - 오시는대상자순서대로번호가적힌소변컵을드리면서 옆화장실에서처음소변은흘려버리시고중간소변부터컵에 1/2이상받은후가지고오십시오 라고안내합니다. - 대상자가받아온소변을 1개의 15cc conical 튜브에약 10~12ml 담고 ( 그림 104) 남은소변이들어있는소변컵 urine stick을빠르게담갔다가꺼냅니다. - 스틱형병에부착된사용설명서에지시된검사항목별로늦어도 1분이내에담갔던부위와색참조표를비교하여판독한후그결과를소변검사결과지에소변컵에붙은번호를적고소변검사결과를기록합니다. - 채뇨량을냉장검체대장에기록합니다. - 15ml Conical 튜브에 1개를검체운송전용랙에꽂아냉장보관후임상검사기관으로운송합니다. - 5 -
< 그림 104. 소변분주 > 참고자료 소변검사결과로알아낼수있는것들은다음과같습니다. 1) 색깔및혼탁도 - 정상소변은밝은노란색이면서혼탁하지않고맑습니다. - 요혼탁의원인으로는세균, 농, 유미 (chyle), 지방구, 점액, 염류의석출등이있습니다. 2) 냄새 - 비정상적인요의냄새는단풍당밀뇨병 (maple syrup urine disease, 단풍당밀냄새 ), 페닐케톤뇨증 (phenylketonuria, 쥐오줌냄새 ), 티로신혈증 (tyrosinemia, 부패한냄새 ) 등과같은아미노산질환에서나타날수있습니다. 3) 요량 - 정상성인의소변량은하루평균 1,200~1,500mL 정도이며, 야간배뇨량은 400 ml를초과하지않으나식이, 수분섭취량, 체온, 운동량에따라달라질수있습니다. 24시간에 2,000 ml 이상의요가나올때를다뇨 (polyuria) 라하며, 수분과다섭취, 오한, 당뇨, 요붕증, 만성진행성신부전, 원발성알도스테론증등에서볼수있습니다. 24시간에 500ml 이하의요가나오면핍뇨 (oliguria) 라고하며, 탈수, 신허탈 (renal ischemia), 신질환, 심부전등에서나타날수있습니다. 4) 요단백 - 고열, 외상, 심한빈혈, 신증후군, 사구체신염, 신우신염, 간질성신염, 임신중독증, 신경화증, 다발성골수종, 약물, 방사선치료등에서나타날수있습니다. 5) 요당 - 당뇨, 만성간질환등의질환, 사구체여과속도가높을경우에서나타날수있습니다. 6) 요케톤체 - 심한운동, 기아, 스트레스, 구토, 탈수, 당뇨병성케톤산혈증, 폰기르케병 (von Gierke s disease) 등에서나타날수있습니다. 7) 요빌리루빈 - 담도폐쇄, 간질환, 혈색소대사이상등에서나타날수있습니다. 8) 요잠혈 - 요로계출혈, 용혈성질환, 근육손상등에서나타날수있습니다. 9) 요빌리노겐 - 정상적으로미량이소변에존재한다. 증가하는경우는용혈성황달, 신생아황달, 간세포성황달등에서나타날 - 6 -
수있고, 총담관이막힌경우는음성으로나타납니다. 10) 요아질산 - 질산환원효소 (nitrate reductase) 를생산하는세균감염시양성을나타낸다. 대표적인세균으로는대장균 (E. coli), Klebsiella, 호기성세균 (Aerobacter), Citrobacter 등이있습니다. 11) 요백혈구 - 요로감염증에서양성을나타냅니다. 12) 요비중 - 심한탈수, 당뇨, 단백뇨가심할경우비중이증가하고, 신세뇨과손상등에서낮게나타납니다. 13) 요산도 - 알칼리성요는급 / 만성신질환, 대사성및호흡성알칼리혈증, 구토, 요로감염, 알칼리성음식섭취등에서나타날수있고, 산성뇨는대사성및호흡성산혈증, 심한설사, 고열, 탈수, 산성음식섭취등에서나타날수있습니다. 3. 검체명부작성법 냉장검체인수인계대장작성방법 1) 엑셀파일로제공되는검체인수인계대장 ( 그림 83) 에컴퓨터를통해자료를입력합니다. 2) 검체수집기관과검체채취일자를입력합니다. 3) 성명 : 성명은붙여 2글자만입력합니다. 성명이외자 ( 예 : 이찬 ) 인경우에도붙여입력합니다. 4) 성별 : 성별은영문대문자 ( 남자 :M, 여자 :F) 로입력합니다. 5) 나이 : 대상자나이를입력합니다. 6) 아이디 : 해당대상자 ID를대문자로입력합니다. ( 예 : K0-SS-0587) 7) 채혈 tube수량 - SST 10ml: 수량 1개, 채혈량은 Full로채혈했을경우 8 ml로입력하고채혈량이부족할경우해당채혈량을입력합니다. - EDTA 10ml: 수량 1개, 채혈량은 Full로채혈했을경우 8 ml로입력하고채혈량이부족할경우해당채혈량을입력합니다. - EDTA(CBC) 3ml: 수량 1개, 채혈량은 Full로채혈했을경우 3 ml로입력하고채혈량이부족할경우해당채혈량을입력합니다. 8) 채뇨수량 - Urine: 수량 1개, 채뇨량은 10~12ml을담고양을기재합니다. 채뇨량이부족할경우해당채뇨량을입력합니다. 9) 채혈시간 : 채혈된시간을시와분으로입력합니다. 10) 원심분리시간 : 10ml SST 튜브를원심분리한시간을시와분으로입력합니다. 11) 검체인수인계일 : 해당검체를인수인계한일자를입력합니다. 12) 하단의인수인계에필요한소속, 검체담당, 연락처를입력합니다. - 7 -
< 그림 105. 냉장검체인수인계대장 > 냉장검체인수인계대장출력및전달 ( 매일운송 ) 1) 엑셀자료파일로작성된냉장검체인수인계대장을컴퓨터에서출력합니다. 2) 입력사항이정확히입력되었는지확인합니다. 3) 2차원바코드 (Document) 를부착합니다. 4) 임상검사기관운송담당자가방문하면상호인수인계서명을한뒤복사본 1부는보관하고원본 1부를임상검사기관검체인수자에게검체와함께전달합니다. 검체인수인계 1) 냉장운송 ( 매일 ) - 수집된검체를냉장보관하였다가매일임상검사기관담당자에게전달합니다. - 전달되는검체의내용과개수가정확하게입력되어있는지확인한후명부한부를복사하여임상검사기관담당자에게전달합니다. - 검체전용 Rack에꽂는순서는 10 ml SST tube, 10 ml EDTA tube, 3 ml EDTA tube 순으로합니다. 2) 검체인수확인리스트 - 검체운송에필요한사항이정확하게준비되어있는지확인합니다. - 임상검사기관담당자가센터에도착한시간을기재합니다. - 전용운송박스인지확인하고온도계, 아이스팩등이정확히구비되어있는지확인후해당리스트에확인내용을기재합니다. - 임상검사기관담당자및연락처를기재합니다. - 8 -
위생및감염관리 1) 위생관리 - 대상자검진전 후, 채혈전 후, 검체제작전 후에손을깨끗이씻거나손소독제를이용하여손소독을실시합니다. 2) 감염관리 - 조사원의위생및제작검체의오염관리를위해주기적으로소독을실시하고기록표를작성합니다. 장비, 기기및기타관리 1) 주의사항 - 참여센터에서사용하고있는장비및기기관리는 장비관리방법및사용시주의사항 을숙지한후이용합니다. 2) 점검일지작성 - 점검일지 ( 실내온습도, 냉장 냉동고, 원심분리기등 ) 를기기및장비에부착하여매일기록관리합니다. - 월간안전점검표는매월작성하고장비고장처리보고서, 검체관리표, 자원폐기요청서, 자원폐기대장등을구비하고발생시기록관리합니다. - 원심분리기의 RPM 점검은분기별실시하여해당월의점검일지에기재하여관리합니다. - 한달동안기록관리한점검일지를담당자의날인후매월첫째주월요일임상검사기관을통해질병관리본부로송부한다. - 이상발생시즉시조치할수있는시스템 (A/S 연락처등 ) 을확보합니다. - 9 -