유통화장품중보존제사용실태조사 Examination of Preservatives in Cosmetic Products Abstract This study was conducted to determine the 2-phenoxyethanol, methylparaben, ethylparaben, propylparaben, butylparaben, isopropylparaben, and isobutyl paraben levels in seventy-eight commercial cosmetic products by HPLC. The HPLC method modified from Korean FDA guideline involved Luna(2) C18 column,photo diode array detector(λ; 270 nm) and a gradient of 20 % acetonitrile + 1 % phosphoric acid(elute A) and 70 % acetonitrile + 1 % phosphoric acid(elute B). The calibration curves were linear from 25.2 to 200 mg/l. The repeatability was satisfactory.(rsd values < 5.0 %). The % deviation with respect to accuracy ranged from ± 0.1 to ± 6.6. Incorrect labeling for 2-phenoxyethanol in one imported and parabens including 2-phenoxyethanol in two domestic products were found, but the contents of all of the target presevatives in seventy-eight commercial cosmetics were within the maximum allowed amounts for the respective substances. Key words : preservatives, paraben, 2-phenoxyethanol, HPLC, cosmetics, 서 론 인체의청결또는미화를목적으로사용되는화장품은그품질을확보하고미생물로부터의오염및부패를방지하기위하여다양한살균ㆍ보존제를사용하고있으며, 그효과를높이기위해보통 2개이상의보존제가혼용되고있다 (1~3). 국내에서는화장품에사용가능한살균ㆍ보존제를파라벤류및페녹시에탄올등약 50종으로한정하고있고, 이들살균ㆍ보존제는세포독성및접촉성알레르기등안전성 -1-
에문제가있는성분들이므로화장품원료기준고시로그종류와사용량을규제하고있다.(4, 5) 특히파라벤류는동물실험중암컷랫트에서자궁의증식을유도하였을뿐아니라 in vitro 시험에서도유방암세포주인 MCF-7 세포를유의적으로증가시키고, 에스트로겐수용체와의결합시험에서높은결합력을보여내분비계장애작용능력이있음이확인되었으나 (6), 현재유통되는대부분의화장품에단독또는다른보존제와혼용되어널리사용되고있다. 한편염모제및잉크의용제, 어류의마취제및국소소독제 (7) 로사용되고있는페녹시에탄올은 in vito 실험에서 human skin' 에서 6시간동안 59. 3 % 이상흡수되고, 다량으로사용할경우피부괴사까지초래할수있는 (5) 성분으로 파라벤프리 표시제품에서보존제로많이활용되고있다. 의약품및식품에사용되는보존제에대한기준및시험법은식품공전및대한약전에수재되어있으나화장품중보존제에대한공정시험법은따로마련되어있지않고, 배합한도만설정되어있다. 그러나분석기기를활용한화장품중보존제에대한분석에대한연구들이꾸준히증가하고있고 (8-10), 비록배합한도설정된살균ㆍ보존제전부는아니지만일부살균ㆍ보존제에대해식품의약품안전청에서 2006년화장품살균ㆍ보존제에대한가이드라인 (11) 을발표함은보존제성분에대한안전성을우려하며과학적분석을원하는소비자혹은국민들의요구에기여한바크다. 최근국내에서는화장품법개정으로화장품에사용되는모든원료성분을제품의용기에표시하도록함 (12) 에따라소비자들은화장품에첨가된원료, 살균ㆍ보존제종류에대한상세정보를화장품용기, 첨부문서또는해당회사의홈페이지를통해서얻을수있다. 최근보존제를사용하지않았다는식물추출물을이용한화장품, 파라벤프리 ', 무방부제 광고제품도최근등장하고있어이들제품에서의보존제함유여부실태조사가필요할것으로판단된다. 시중유통화장품의용기ㆍ표시사항을육안으로검토한결과대부분의화장품들은보존제로파라벤류를단독으로사용하거나다른보존제와혼용하였고, 이에본연구에서는가장많이사용된것으로표시된파라벤류와페녹시에탄올을선택하여분석기기를활용한과학적인분석을통해도출된결과와화장품용기또는첨부문서에표시된사항을비교하여보고하고자한다. 실험재료및방법 1. 실험재료서울시내대형마트, 시장및지하철판매점등에서유통되는 78건의제품을구입하였으며, 그유형으로는로션이 47건, 크림이 6건, 팩이 16건, 클렌저 ( 두발용포함 ) 가 9건이다. 표시사항에파라벤, 페녹시에탄올표시가있는제품은 33건, 표시가없는제품은 45건이고, 그중수입화장품 10건이포함되어있다. 2. 표준품및시약 Methyl p-hydroxybenzoate(99.0 %, Wako, Japan), ethyl p-hydroxybenzoate(99.0 %, Wako, Japan), propyl 4-hydroxybenzoate(99 %, Fluka, Switzerland), butyl 4-hydroxybenzoate(99 %, Fluka, Switzerland), 2-phenoxyethanol,(99.5 %, Fulka, -2-
Germany), isopropyl 4-hydroxybenzoate(Sigma-aldrich, USA), isopbutyl 4-hydroxybenzoate(Tokyo chemicals, Japan), acetaminophen(kfda), acetonitrile(hplc grade, J.T.Baker, USA), methanol(hplc grade, J.T.Baker, USA) 3. 기기 HPLC(Acquiity UPLC, Waters, USA, PDA Detector, Data Analysis[Empower 2]), Ultrasonicator(FS765H, Fisher, USA), Water purifier(elga, Purelab Option, USA) 4. 실험방법 1) 분석조건식품의약품안전청 화장품살균ㆍ보존제분석법가이드라인 의이동상조건을응용하였으며, Luna(2) C 18 컬럼 (5μm,4.6x 250mm), 검출파장 270nm, 이동상 A(1 % 인산함유 20 % 아세토니트릴 ), 이동상 B(1 % 인산함유 70 % 아세토니트릴 ), 농도구배조건은 25 % B 8분, 40 % B 15분, 60 % B 25분, 100 % B 30분 0 % B 37분, 주입대기시간 3분, 유속 1.0 ml/min, 주입량 20 μl 조건으로실시하였다. 2) 표준액조제, 검량및정량한계페녹시에탄올 (2-phenoxyethanol), 메칠파라벤 (methyl p-hydroxybenzoate,methyl paraben), 에칠파라벤 (ethyl p-hydroxybenzoate, Ethylparaben), 이소프로필파라벤 (isopropyl 4-hydroxybenzoate, Isopropylparaben), 프로필파라벤 (propyl 4-hydroxybenzoate, Propylparaben), 이소부틸파라벤 (isobutyl 4-hydroxybenzoate, Isobutylparaben), 부틸파라벤 (butyl 4-hydroxybenzoate, Butylparaben) 100 mg을각각정밀하게달아메탄올을넣어녹여 25 ml로한액을표준원액으로한다. 내부표준액은아세트아미노펜약 400 mg을정밀하게달아메탄올을넣어녹여 200 ml로하였다. 표준원액 0.63 ml, 1.25 ml, 5.0 ml를각각취하여내부표준액 1.0 ml를넣고메탄올로희석하여 100 ml가되게하여표준액으로하고 0.45 μm필터로여과한후 HPLC에주입하였다. 이들의농도는각각 25.2, 50, 200 mg/l 이다. 이 3가지농도표준액을분석조건에따라주입하여얻은 peak area를이용하여검량선을작성하였다. 3) 검액조제시료약 2.0 g을정밀하게달아메탄올을넣어초음파진탕하여충분히분산시킨다음내부표준액 1.0 ml 및메탄올을넣어 100 ml로한액을 0.45 μm필터로여과하여검액으로한다. 4) 반복성및정확성 각각의표준액 25.2, 50, 200 mg/l 을 7 회반복주입하여머무름시간, 검출된양 의평균, 상대표준차, 분산정도를구하여분석방법의반복성및정확성을측정하였다. 5) 회수율 페녹시에탄올, 파라벤류 (6 종 ) 등을함유하지않는시료중팩제, 로션제각 1 건을선택하여각각약 2.0 g 을정밀하게달아용량플라스크에넣고, 페녹시에탄 -3-
올, 파라벤류각각의표준원액 0.63 ml, 5.0 ml을넣고, 메탄올로희석하여초음파진탕하여충분히분산시킨다음내부표준액 1.0 ml 씩을첨가한후최종농도가각각 25.2, 200 mg/l가되도록하였다. 각각의시료에대하여 3 회반복실험을실시하여회수율을구하였다. 결과및고찰 1. 검량선작성및검출 정량한계페녹시에탄올, 파라벤류 (6 종 ) 에대한농도별표준액을이용하여 HPLC에서얻은 peak area를이용하여얻은검량선은표 1과같다. 정량은내부표준물질법에따라실시하였다. 25.2 ~ 200 mg/l 범위에서얻어진검량선의 r값은 0.99997 이상으로양호한직선성을나타내었다. 분석기기내의데이터분석프로그램 (Empower 2) 의시스템적합성프로그램을이용하여 S/N ratio를 3으로하였을때적분되어지는한계를검출한계 (LOD) 로, 10으로하였을때를정량한계 (LOQ) 로정하여보존제별검출한계와정량한계를측정하였다. 화장품원료기준고시에서의페녹시에탄올의배합한도는 1 %, 파라벤류는단일인경우 0.4 %, 혼합사용의경우 0.8 % 이며, 실험결과정량한계는메칠파라벤이 0.136, 페녹시에탄올 0.768 mg/l 로나타났으며, 전체적으로 0.136 ~ 0.768 mg/l 이다. 2. 정확성및반복성측정값이이미알고있는표준값에근접한정도 ( 정확성 ) 를알기위해 25.2, 50, 200 mg/l의표준액 3개로얻은 peak area를기준으로검량선을작성하고각각의표준액을 7회반복주입하여검액과동일한내부표준물질법으로정량한평균측정값을 Table 2. Average of observed amount 로표시하였다. 정확성의분산편차를의미하는 % Deviation of accuracy 범위는대부분 ± 5 % 이내였으나, 페녹시에탄올 25.2 mg/l 와이소프로필파라벤, 이소부틸파라벤 50 mg/l를주입하였을때분산정도가각각 -6.3 %, +6.6 %, +6.6 % 로나타났다. 그러나검량선의직선성을나타내는 R 2 값이 0.99995 이상이므로본연구에서는이검량선을이용하여시료중 7가지보존제함유량을조사하였다. 또한검량선을작성한 3가지농도에서얻은 7종류표준액의농도별 7회반복주입에따른오차를측정하기위한반복성자료도조사하였다. 반복주입에따른머무름시간의상대표준편차는 7종류의표준액에서농도에관계없이 0.1 % 이하로전체적으로분석기기의병행정밀성은우수하였다. 본조건에서의머무름시간은식품의약품안전청 화장품중살균ㆍ보존제분석법가이드라인 과유사하였다. Luna(2) C 18 컬럼 (5μm,4.6x250mm) 에서분리되는보존제를평균머무름시간 ( 분 )± 표준편차형태로표현할때, 페녹시에탄올 10.267± 0.01, 메칠파라벤 11.566± 0.01, 에칠파라벤 15.723± 0.01, 이소프로필파라벤, 19.990± 0.02, 프로필파라벤 20.662± 0.02, 이소부틸파라벤 25.328± 0.02, 부틸파라벤 25.758± 0.02으로페녹시에탄올이가장먼저분리ㆍ용출되었으며, 부틸파라벤이 25분대에마지막으로분리되었다. 참고로내부표준액아세트아미노펜의머무름시간은약 3.9분이었고, 추출용매로사용한메탄올은약 1.8분이었다. 표준액을농도별로 7회주입하여얻은검출량의 -4-
재현성결과는 Table 2 와같다. 7 회반복주입할때평균검출량과표준편차를구하여 상대표준편차를계산한결과 25.2 mg/l 에서는 3.2 ~ 3.3 %, 50 mg/l 에서는 4.5 ~ 4.6 %, 200 mg/l 에서는 1.1 ~ 1.5 % 로모두 5.0 % 이내였다. 3. 회수율가이드라인에서제시한 50% 인산함유아세토니트릴용액대신추출용매로 100 % 메탄올을사용하여추출하였으므로, 추출용매변경에따른회수율을측정하였다. 100% 메탄올을사용하였을때내부표준물질인아세트아미노펜피크의비대칭성 @4.4 측정값이 0.949인데비해식품의약품안전청에서제시한 50% 인산함유아세토니트릴용액은 0.7 이하로아세트아미노펜내부표준물질을이용한정량단계에서좀더신뢰할만한정보를얻고자추출용매를변경하였다. 회수율측정방법은분석결과보존제가검출되지않은시료중팩제, 로션제, 각 1개를선정하여, 각각약 2.0 g을정밀하게달아용량플라스크에넣고, 페녹시에탄올, 파라벤류총 7가지표준원액 0.63 ml, 5.0 ml을구분하여첨가하고, 메탄올로희석하여초음파진탕하여충분히분산시킨다음내부표준액 1.0 ml 씩을첨가한후최종농도가 25.2, 200 mg/l 되도록하였다. 총 4개의회수율용시료를 3 회반복실험을실시하여회수율을구하였다. HPLC에주입하여얻은면적을검액과동일한방법으로정량하여제형별, 농도별회수율을측정하여 Table 3. 결과를얻었다. 팩제형의회수율은 97.8 ~ 102.0 %, 로션제형은 96.4 ~ 99.3 % 으로제형에따른큰차이는없었으며, 96 % 이상으로전반적으로양호하였다. 4. 시료의보존제함유량화장품의품질을확보하고그유용성을높이기위해사용되는보존제중가장빈번히사용되는페녹시에탄올과파라벤류를선정하여로션제 47건 ( 세럼포함 ), 팩제 16건, 크림제 6건, 클렌저 9건 ( 두발용포함 ) 등 78건을가지고분석조건에따라시험한결과 42건에서는본연구에서분석하고자하는페녹시에탄올, 파라벤류보존제는사용하지않음을알수있었다. 78건중보존제가검출된시료 36종을제형별로도표화하였다.(Fig. 1.) 로션제의 64 % 에서보존제가검출되었고, 팩제는 38 %, 크림제와클렌저 ( 두발용포함 ) 에서는본연구에서분석하고자하는보존제는검출되지않았다. 파라벤류또는페녹시에탄올이검출된시료는 36건임으로용기표면또는첨부문서에파라벤, 페녹시에탄올표시가있는제품은 33건으로 3건은표시사항과일치하지않았다. 표시사항과일치하지않은제품중 1개는일본제품이고, 2개는국산제품으로동일회사의제품이었다. 일본제품 ooo세럼 1건 (Table 4 ; No.3) 에서검출된페녹시에탄올함량은 0.02 % 였으며, 국내제품 'ooo에센스' 2개 (Table 4 ; No. 1, No.2) 에서검출된양은각각페녹시에탄올 0.68 %, 0.77 % 로모두배합한도기준 1 % 미만이었다. Fig. 2,3. 에보존제표준액과페녹시에탄올과파라벤류가동시에검출된시료 2(Table 4) 의흡수스펙트럼을나타내었다. 210 ~ 400 nm 까지스펙트럼을관찰한결과페녹시에탄올은 269 nm에서, 파라벤류는 256 nm에서 'Max Plot' 을확인할수있었다. 표준액과시료의머무름시간에따른크로마토그램을 Fig. 4, 5, 6에나타내었다. 동일농도에서페녹시에탄올의검출감도가파라벤류보다낮아동시분석을위해검출파장은페녹시에탄올의최대흡수파장값을활용하여 270 nm로 -5-
하였다. 이들 2개제품의파라벤류검출량은화장품원료기준의배합한도에따라계산할때총 p-하이드록시애씨드로서각각 0.22 %, 0.27 % 이며이수치는규정된배합한도 0.8 % 미만이었다. 수입화장품 10건중일본제품을제외한미국, 독일, 이탈리아에서수입한 9건의시료에서는표시사항과분석결과가일치하였다. 대부분의제품은표시치와분석결과가일치하였지만 3건에서보존제표시가없음에도불구하고분석결과페녹시에탄올또는파라벤류가검출됨에따라이문제점에대한구체적인논의가필요하리라생각된다. 보존제가사용된 36건의제품중페녹시에탄올만검출된제품은 2건이었으며, 15건은파라벤류만검출되었다. 19건의제품은페녹시에탄올과파라벤류가혼용되고있었다. 파라벤류가사용된 35건제품의혼용실태는메칠ㆍ프로필혼용사용이 21건, 메칠파라벤단독사용이 6건, 메칠ㆍ에칠ㆍ프로필이혼용된것은 1건, 메칠ㆍ에칠ㆍ프로필ㆍ부틸이모두혼용된제품도 7 건있었다. 36건의보존제검출량은고시된기준량페녹시에탄올 1.0 %, 파라벤류 ( 총 p-하이드록시애씨드로서 )0.8 % 미만으로나타났다. 시료15(Table 4) 는용기의표시사항에 p-하이드록시안식향산에스텔류 로되어있어파라벤각항목에 N.D로표시하였고, 시료3(Table 4) 은표시사항과일치하지않은일본제품으로표준액과동일스펙트럼으로확인은가능하였으나, 검출량이정량한계미만으로 N.D 로표시하였다. 본연구에서화장품중보존제로사용되는페녹시에탄올과파라벤류함유여부를분석기기로조사한결과 78건의제품중 3건에서용기나기타자료에표시되어있는않은페녹시에탄올, 파라벤류가검출되었으며, 다만그양은화장품에사용될수있는배합한도이내였다. 이결과는최등 (13) 이 유통크림류화장품중의살균보존제모니터링 에서일부국산및수입화장품에서표시와는다른표시기재를확인하였으나, 배합허용한도농도를초과한경우는없다고보고한결과와도유사하다. 화장품관련기관에서는화장품제조자및수입자등이 화장품원료성분표시 관련법을잘지킬수있도록지속적인관리감독과교육을실시하여, 소비자들이선택한화장품에대한올바른정보를제공받을수있도록해야할것이다. 또한화장품표시성분에대한규제가강화되고있지만의약품과달리그사용량을표시하는규정이없으므로보존제외에배합한도가설정된원료에대한과학적인분석법개발은지속되어야한다. 국내에서화장품에사용될수있는배합한도가정해진살균ㆍ보존제는 50종이상이지만, 현재까지화장품심사및허가권한이있는식품의약품안전청에서공식적으로발표한 화장품중살균보존제분석법가이드라인 에서는이미다졸리디닐우레아및파라벤류, 라우로일사르코신나트륨, 클로페네신, 소르빈산, 안식향산, 살리실산ㆍ페녹시에탄올및파라벤류등과같이일부살균ㆍ보존제로한정되어있고이가이드라인에는피크분리능, 검출한계및정량한계에대한구체적인정보가없어본연구에서는유통화장품용기표시사항과분석조건을검토하여화장품중페녹시에탄올과파라벤류을선정하여동시분석을시도하여결과를발표하였고, 앞으로도그밖의다른살균ㆍ보존제에대한분석법개발과사용실태조사를실시하여꾸준하게화장품안전성에대한관리가계속되어야할것이다. -6-
Table 1. Linearity and Quantity values of the standard solutions of seven preservatives. Compound 1) Linearity equation Correlation coefficient(r 2 ) LOD(mg/L) 2) LOQ(mg/L) 3) PE Y = 1.40 x 10 4 X - 6.9 x 10 2 1.00000 0.230 0.768 MP Y = 7.65 x 10 4 X + 7.4 x 10 4 1.00000 0.041 0.136 EP Y = 7.15 x 10 4 X - 3.7 x 10 3 0.99999 0.047 0.158 IPP Y = 6.54 x 10 4 X + 8.9 x 10 3 0.99995 0.055 0.182 PP Y = 6.66 x 10 4 X + 9.2 x 10 3 0.99995 0.053 0.177 IBP Y = 5.99 x 10 4 X - 3.6 x 10 3 1.00000 0.058 0.193 BP Y = 6.17 x 10 4 X - 4.5 x 10 3 0.99999 0.056 0.188 1) PE :2-Phenoxyethanol, MP :Methylparaben, EP :Ethylparaben, IPP:Isopropylparaben, PP : Propylparaben, IBP : Isobutylparaben, BP : Butylparaben. 2) The limit of detection(lod) is an estimation of 3 x noise 3) The limit of quantitation(loq) is an estimation of 10 x noise -7-
Table 2. Accuracy and Reproducibility of the standard solutions of seven preservatives.(n=7) Compound 1) Theoretical amount(mg/l) Average of observed amount(mg/l) Standard deviaton. 2) RSD(%) % Deviation of Accuracy 3) PE MP EP IPP PP IBP BP 25.2 23.6 0.78 3.3-6.3 50.0 51.1 2.32 4.5 +2.2 200.0 199.3 2.22 1.1-0.3 25.2 24.6 0.78 3.2-2.4 50.0 52.5 2.35 4.5 +5.0 200.0 199.8 2.74 1.4-0.1 25.2 24.5 0.78 3.2-2.8 50.0 52.3 2.37 4.5 +4.6 200.0 199.5 2.86 1.4-0.1 25.2 24.5 0.78 3.2-2.8 50.0 53.3 2.42 4.5 +6.6 200.0 199.8 2.92 1.5-0.3 25.2 24.5 0.78 3.2-2.8 50.0 52.2 2.42 4.6 +4.4 200.0 199.8 2.92 1.5-0.1 25.2 24.4 0.78 3.2-3.2 50.0 53.3 2.39 4.5 +6.6 200.0 199.5 2.97 1.5-0.3 25.2 24.4 0.79 3.2-3.2 50.0 52.2 2.42 4.6 +4.4 200.0 199.8 3.00 1.5-0.1 1) PE :2-Phenoxyethanol, MP :Methylparaben, EP :Ethylparaben, IPP:Isopropylparaben, PP : Propylparaben, IBP : Isobutylparaben, BP : Butylparaben. 2) RSD(%) : 100 * Standard deviation of individual observed amount / average observed amount(mg/l) 3) % Devation of accuracy : (Average of observed amount - Theoretical amount) / Theoretical amount *100-8-
Table 3. Recovery of spiked preservatives from two types of cosmetics.(n = 3) Compound 1) PE MP EP IPP PP IBP BP Spiked amount (mg/l) Found amount ± SD (mg/l) Pack Lotion recoveries (%) Found amount ± SD (mg/l) recoveries (%) 23.6 23.3±0.02 98.7 23.3±1.84 96.4 199.3 197.2±1.27 98.9 197.3±2.41 98.9 24.6 24.3±0.05 98.8 24.2±1.90 98.0 199.8 198.3±0.19 99.2 198.9±2.12 99.3 24.5 24.2±0.05 98.8 24.1±1.88 97.9 199.8 197.5±1.20 98.8 199.1±2.20 98.8 24.5 24.9±0.06 101.6 24.2±1.88 98.4 199.5 195.4±1.19 97.9 197.8±2.21 98.0 24.5 24.1±0.06 98.4 24.1±1.88 97.8 199.8 196.9±1.18 98.5 199.1±2.19 98.5 24.4 24.9±0.05 102.0 24.2±1.91 98.2 199.5 195.2±1.22 97.8 197.8±2.25 97.8 24.4 24.1±0.05 98.8 24.1±1.92 97.7 199.8 196.6±1.19 98.4 199.2±2.22 98.3 1) PE :2-Phenoxyethanol, MP :Methylparaben, EP :Ethylparaben, IPP:Isopropylparaben, PP : Propylparaben, IBP : Isobutylparaben, BP : Butylparaben. -9-
Table 4. Analytic results of seven preservatives in cosmetics.(%) No PE 1) MP EP IPP PP IBP BP Parabens 2) Ref. 1 0.68 0.14 0.03 N.D 0.01 0.01 0.03 0.22 2 0.77 0.16 0.04 N.D 0.02 0.02 0.03 0.27 3 0.02 N.D N.D N.D N.D N.D N.D N.D 4 0.42 - - - - - - - 5 0.31 0.20 - - - - - 0.20 6 0.21 0.09 - - - - - 0.09 7 0.60 0.35 - - - - - 0.35 8-0.09 - - - - - 0.09 9-0.07 - - - - - 0.07 10-0.17 - - - - - 0.17 11 0.06 0.04 - - 0.02-0.01 0.07 12 0.33 0.21 - - 0.04-0.08 0.33 13 0.22 0.20 - - 0.08-0.07 0.35 14 0.29 0.19 - - 0.07-0.07 0.33 15 0.48 0.19 N.D N.D 0.08 N.D N.D 0.27 16 0.32 0.15 - - 0.04 - - 0.19 17 0.52 0.20 - - 0.10 - - 0.30 18 0.37 0.18 - - 0.08 - - 0.26 19 0.52 0.31 - - 0.09 - - 0.40 20 0.73 0.15 0.03-0.06 - - 0.24 21 0.19 0.19 - - 0.08 - - 0.27 22 0.22 0.15 - - 0.04 - - 0.19 23 0.22 0.22 - - 0.09 - - 0.31 24 0.09 0.13 - - 0.01 - - 0.14 25-0.17 - - 0.08 - - 0.25 26-0.19 - - 0.04 - - 0.23 27-0.19 - - 0.08 - - 0.27 28-0.31 - - 0.04 - - 0.35 29-0.08 - - 0.03 - - 0.11 30-0.15 - - 0.04 - - 0.19 31-0.14 - - 0.04 - - 0.18 32-0.21 - - 0.05-0.04 0.30 33-0.12 - - 0.10 - - 0.22 34-0.19 - - 0.08 - - 0.27 35-0.20 - - 0.08 - - 0.28 36-0.15 - - 0.04 - - 0.19 - : no identification of 2-phenoxyethanol or parabens N.D means detected amount is lower than LOQ.(limit of quantitation) * : Detected results are not equal to the labeled. ** : Detected results are equal to the labled. 1) PE :2-Phenoxyethanol, MP :Methylparaben, EP :Ethylparaben, IPP:Isopropylparaben, PP : Propylparaben, IBP : Isobutylparaben, BP : Butylparaben. 2) Expressed as total p-hydroxy benzoic acid(%) from MP, EP, IPP, PP, IBP, and BP. * ** -10-
Fig.1.Detectedresultsofpreservativesaccordingtocosmetictype. Fig.2.3D plotofstandard solutions of seven preservatives.(210-400 nm) Fig.3.3D plotofsample soiution.(210-400 nm) -11-
Fig. 4. Chromatogram of standard solutions of seven preservatives. Fig. 5. Chromatogram of sample including 2-phenoxyethanol and Parabens. Fig. 6. Chromatogram of sample including 2-phenoxyethanol only. Column : Luna(2)C18 (5 μm,4.6 x 250 mm), Mobile phase : A = 20 % acetonitrile + 1% phosphoric acid, B = 70 % acetonitrile + 1% phosphoric acid, Flow rate : 1.0 ml/min, Gradient : start with 100 % A, 25 % B at 8 min, 40 % B at 15 min, 60 % B at 25 min, 100 % B 30 min and 0 % B 37 min, Post time 3 min, Oven temp : 40, Injection volume : 20 μl. -12-
결 론 HPLC-PDA 를이용하여시중유통화장품중에사용된페녹시에탄올및파라벤류 을분석하여다음의결과를얻었다. 1. 각 25.2 mg/l, 50 mg/l, 200 mg/l 페녹시에탄올과 6종의파라벤류표준액을 HPLC-PDA에주입하여얻은 peak area를아세트아미노펜내부표준물질액을사용한내부표준물질법으로적분ㆍ검량을하여검량선을작성하고이 3가지농도의표준액을각각 7회반복주입하여정확성과재현성을측정하였을때 % Deviation은 ± 7 % 이내였으며, 반복주입에따른머무름시간의상대표준편차는 0.1 % 이내였고, 검출량상대표준편차는 5 % 이내였다. 2. 로션제 ( 세럼포함 ), 팩, 크림, 바디클렌저 ( 두발용포함 ) 등 78건으로시험한결과 42건에서는본연구에서분석한페녹시에탄올, 파라벤류보존제는사용하지않음을알수있었다. 파라벤류또는페녹시에탄올이검출된시료는 36건으로표시사항에파라벤, 페녹시에탄올표시가있는제품이 33건임을비교할때 3건의제품이표시사항과일치하지않았다. 3. 표시사항과일치하지않는 3건의제품중 1건은일본제품이고, 2건은국산제품으로동일회사의제품이었다. 검출된페녹시에탄올함량은순서대로 0.02 %, 0.68 %, 0.77 % 로배합한도기준 1 % 미만이었다. 국내제품 2건에서는동시에파라벤류도검출되었으며화장품원료기준의배합한도에따라계산할때총 p-하이드록시애씨드로서각각 0.22 %, 0.27 % 이며이수치는규정된배합한도 0.8 % 미만이었다. 4. 78건의시료중페녹시에탄올또는파라벤류가검출된것은 36건이였다. 2건의제품은페녹시에탄올만함유하고있었으며, 15건의제품은파라벤류만검출되었다. 19건은페녹시에탄올과파라벤류를혼용하고있었다. 파라벤류혼용실태는메칠ㆍ프로필혼용사용이 21건, 메칠파라벤단독사용이 6건, 메칠ㆍ에칠ㆍ프로필이혼용된것은 1건, 메칠ㆍ에칠ㆍ프로필ㆍ부틸이모두혼용된제품도 7건있었으나, 모두화장품원료기준에서정한배합한도 0.8 % 미만이었다. -13-
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