J Korn So Foo S Nutr 한국식품영양과학회지 43(11), 179~1715(14) ttp://x.o.or/1.3746/jn.14.43.11.179 추출방법에따른상지추출물의항산화활성 박혜미 홍주헌대구가톨릭대학교식품공학전공 Et o Extrton Mtos on Antoxnt Atvts o Mor rmuus Hy-M Pr n Joo-Hon Hon Dprtmnt o Foo Sn n Tnooy, Cto Unvrsty o Du ABSTRACT T ojtv o ts stuy ws to xmn t ntoxnt tvts o xtrts rom Mor rmuus usn rnt xtrton mtos (HE, ot wtr xtrton; EE, 5% tno xtrton; UE, utrson xtrton; PE, prssur xtrton). T xtrton y o PE (3.7%) ws r tn tt o UE (1.43%), EE (1.18%), n HE (1.7%). T tot pno n vono ontnts o EE wr 334.66 m/, n 35.64 m/, rsptvy. T oxyn r pty (ORAC) o EE (3,483.37 μm/ FW) ws r tn tos o HE (2,687.52 μm/ FW), UE (2,3.45 μm/ FW), n PE (2,117.62 μm/ FW). T DPPH n ABTS r svnn tvts o EE t 1, μ/ml wr 65.84%, n 97.52%, rsptvy. T suprox r svnn tvty o EE ws 67.77~98.74% (~5 μ/ml) r tn tos o otr xtrts. T rr run ntoxnt powr n run powr o EE wr 189.~974. μm, n.12~.82, rsptvy. T tyrosns ntory tvty o EE (23.25~67.%) mprov wt n nrs trtmnt onntrton. T ntoxnt n tyrosns ntory tvts o EE wr snnty r tn tos o otr xtrts. In onuson, w prov xprmnt vn tt xtrts rom Mor rmuus v potnt s unton mtrs. Ky wors: Mor rmuus, xtrton mto, pno ompouns, ntoxnt tvty, tyrosns nton tvty 서 인간을비롯한모든생명체에서산소는생체내필요한에너지를만드는과정에서중요한역할을하지만이들산소중일부분 ( 약 2~3%) 은자유라디칼반응에의해 suprox non r(o - 2 ), yron prox(h 2O 2), yroxy r(oh ), proxy r(roo ) 등을포함한활성산소종 (rtv oxyn sps, ROS) 으로전환된다 (1). 이러한활성산소종과유리라디칼은체내에서세포막손상, DNA 변성, 지질산화, 단백질분해등을초래하여생체기능을저하시킴으로써노화를유발할뿐만아니라암, 동맥경화, 심장병, 당뇨병, 류마티스성관절염등과같은여러질환의원인으로알려져있다 (2). 정상상태에서세포는활성산소의유리기를제거하는항산화방어시스템을지니고있다. 그러나활성산소종의과잉축적은생체내항산화방어시스템의산화 환원항상성을깨뜨려산화적스트레스를유발시킨다 (3). 활성산소종의원인이되는흡연, 음주, 격렬한운동, 스트레스, 각종환경오염물질및약물등에과 Rv 22 Juy 14; Apt 2 Sptmr 14 Corrsponn utor: Joo-Hon Hon, Dprtmnt o Foo Sn n Tnooy, Cto Unvrsty o Du, Gyonsn, Gyonu 712-72, Kor E-m: jon@u..r, Pon: +82-53-85-3218 론 도하게노출되어현대인에게는산화적스트레스를경감시킬수있는항산화제가필수적이다 (4). 이와같이현대인들의관심이높아짐에따라항산화제에대해전세계적으로활발히연구가진행되고있으며, 특히천연물의미량원소중폴리페놀성화합물유래항산화제가질환의예방및치료제로서관심을끌고있다 (5,6). 항산화활성이우수한천연물을활용하기위해서는천연물소재에대한활성의탐색과별도로생물자원의특징을고려한제조공정에관한검토가필요하다 (7). 적은공간과비용으로다량의기능성소재를생산할수있어야하며, 저렴한비용으로동일한양의천연물로부터가급적다량의유용물질을생산할수있는추출공정이개발되어야한다 (8). 열수추출은일반적으로식품의추출방법으로많이이용되어왔으나가용성분위주의추출로인해낮은추출수율, 높은에너지소비및열에의한유용성분파괴등과같은단점이있으므로천연물의추출효율을증가시키기위하여에탄올추출, 초음파추출, 가압추출등여러가지추출방법이시도되고있다 (8). 에탄올추출은추출시간을단축시키고유용물질을가용성화시켜높은추출효율을나타내는것으로알려져있으며 (9), 초음파추출은열에의한성분파괴를줄일수있고 (1), 가압추출은가압가열처리를하는동안발생하는다양한화학적변화에의해생리활성물질이증가한다는연구가보고된바있다 (11).
171 박혜미 홍주헌 상지 ( 桑枝, Mor rmuus) 는뽕나무과 (Mor) 에속하는낙엽교목인뽕나무 (Morus L.) 의어린가지로늦은봄과초여름에절취하여쇄건한것으로눈상지, 상조등의이명이있다 (12). 성상은긴원주형으로준비된것도있으며길이는일정하지않고지름은.5 1 m이다. 표면은회황색또는황갈색으로많은황갈색의점상의피공과가는세로주름이있으며, 회백색의약간반원형인잎의흔적과황갈색의액아가있다. 껍질은단단하고꺾인면이섬유성이며우리나라및중국의전지역에분포하고있다. 상지에대한연구로는고혈압및동맥경화에미치는영향 (13), 총콜레스테롤및혈압에미치는영향 (14,15), 당뇨병동물모델에서항당뇨효과 (16-18), 고지방식이흰쥐의체중변화와지질대사에미치는영향 (19), 콜라겐유발관절염랫트에미치는영향 () 등이보고되어있다. 또한 Son 등 (21) 은상지를화장품소재로활용하고자 7% 에탄올로추출하여 tyrosns 저해활성및정상인체멜라닌세포및흑색종세포의멜라닌생성에미치는영향을평가하였다. 이에상지추출물이미백효과가있음을확인하였으며, 그외 Sn(22), Pr(23), Jon 등 (24) 의연구에서화장품소재로의활용가능성이있다고보고되어있다. Jon과 No(25) 는상지 5% 메탄올추출물의탈모개선에미치는영향에대하여조사한결과유의적인개선효과가나타나탈모개선효과가있음을확인하였다. 이와같이상지의다양한기능성이보고되고있으나, 산업적인활용을위한추출방법에대한연구는미흡한실정이다. 본연구에서는다양한유용성분과생리활성을가진다고알려져있는상지의산업적이용증대및고부가가치소재개발의일환으로추출방법에따른상지추출물의항산화활성을조사하였으며, 가장효율적인추출방법을확립하는데기초자료로활용하고자한다. 재료및방법실험재료본실험에사용된상지는국내에서수확한것을 ( 주 ) 류충현약용버섯 (Anon, Kor) 에서제공받아사용하였다. 상지를음지에서자연건조하여수분이 3~% 일때분쇄기 (FM-99W, Hn, Co., Sjon, Kor) 로분쇄하여 - C 이하의암소에보관하면서추출용시료로사용하였다. 추출물의제조상지추출물의제조는상지분말 3 에증류수를고형분대비 배첨가하여아래와같이열수추출 (HE, ot wtr xtrton), 초음파추출 (UE, utrson xtrton) 및가압추출 (PE, prssur xtrton) 방법으로, 5% 에탄올추출 (EE, 5% tno xtrton) 은상지분말 3 에 5% 에탄올을고형분대비 배첨가하여추출물을제조하였다. 열수추출및 5% 에탄올추출은각각 C 및 C에서 3시간동안환류냉각추출기 (CA-1112, Ey Co., Toyo, Jpn) 를이용하여추출하였고초음파추출은 utrson prossor(vcx, Son & Mtrs In., Nwtown, CT, USA) 를이용하여 25 C, Hz, W에서 3시간동안추출하였다. 또한가압추출은 121 C, 1.2기압에서 3시간동안추출하였다. 각각의추출물은불순물을제거하기위하여여과지 (No. 1, Wtmn Intrnton Lt., Lstrsr, UK) 를이용하여여과시켰다. 여과된용액은감압농축기 (Mo N-1N, Ey Co.) 를사용하여감압농축한뒤, 동결건조기 (FrZon 2.5, Lono Co., Knss, MO, USA) 로건조하여 -7 C 이하의암소에보관하면서분석용시료로사용하였다. 추출수율, 총페놀및총플라보노이드함량추출수율은추출방법별추출물을동결건조시켜서건물중량을구한다음추출물제조에사용한원료건물량에대한백분율로나타내었다. 총페놀함량측정은 Fon-Dns법 (26) 에따라 1 m/ ml 농도로희석한시료 1 ml에 1 N Fon Cotu rnt 1 ml를첨가하고충분히혼합하여반응시킨후 % N 2CO 3 1 ml를첨가하고실온의암소에서 3분간반응시킨다음분광광도계 (Utrsp 2pro, Borom Lt., Cmr, UK) 를이용하여 725 nm에서흡광도를측정하였다. 총페놀함량은 tnn (Sm-Ar Co., St. Lous, MO, USA) 를정량하여작성한표준곡선으로부터계산하였다. 총플라보노이드함량측정은 J 등 (27) 의방법에따라 1 m/ml 농도로희석한시료 1 ml에 5% NNO 2 15 μl를혼합하여실온에서 6분간반응시킨다음 1% AC 3 3 μl와혼합하여다시실온에서 5분간반응시킨후 1 N NOH 1 ml와혼합한다음분광광도계 (Utrsp 2 pro, Borom Lt.) 를이용하여 51 nm에서흡광도를측정하였다. 총플라보노이드함량은 rutn(sm-ar Co.) 을정량하여작성한표준곡선으로부터계산하였다. ORAC(oxyn r pty) 측정 ORAC 측정은 Tott와 L(28) 가항산화활성측정에사용한분석법을이용하였다. 본시험에서시료및 Troox 의농도별희석과실험용시료의제조에는중성 pospt ur(61.6:38.9, v/v,.75 M K 2HPO 4 n.75 M NH 2PO 4) 를사용하였다. 검량곡선을작성하기위하여항산화활성비교표준액으로 Troox(wtr sou nou o vtmn E, 6-yroxy-2,5,7,8-ttrmtyromn-2-roxy, Sm-Ar Co.) 1 μl 를 pospt ur 5 ml에용해하여제조하였고, 측정기기는 mut pt rrs(victor 3, Prn- Emr, In., Wtm, MA, USA) 를사용하여 485 nm에서
상지추출물의항산화활성 1711 전자가여기 (xtton) 되고 538 nm에서방출 (msson) 되게조절하여본실험에적용되었다. DPPH r 소거활성측정 DPPH(1,1-pny-2-pryyrzy) r 소거활성측정 (29) 은 DPPH의환원력을이용하여측정하였다. 즉시료.5 ml에 4 1-4 M DPPH 용액 (99.9% ty oo에용해 ) 5 ml를혼합하여실온에서 15분간반응시킨다음분광광도계 (Utrsp 2pro, Borom Lt.) 를이용하여 517 nm에서흡광도를측정하였다. DPPH r 소거활성은추출물의첨가전과후의차이를아래와같이백분율로나타내었다. DPPH r svnn tvty (%) = (1- smp ABTS r 소거활성측정 ABTS(2,2'-zno-s(3-tynzotzon-6- suon )) r 소거활성측정 (3) 은 7.4 mm ABTS(Sm-Ar Co.) 와 2.45 mm potssum prsut를최종농도로혼합하여실온인암소에서 24시간동안방치하여 ABTS + 을형성시킨후 734 nm에서흡광도값이.7±.2가되게 pospt ur sn(pbs, ph 7.4) 으로희석하였다. 희석된용액 1 μl에시료 μl를혼합하여정확히 1분간반응시킨다음분광광도계 (Utrsp 2pro, Borom Lt.) 를이용하여 732 nm에서흡광도를측정하였다. ABTS r 소거활성은추출물의첨가전과후의차이를아래와같이백분율로나타내었다. ABTS r svnn tvty (%) = (1- smp Suprox r 소거활성측정 Suprox r 소거활성측정은 Nsm(31) 의방법에따라다음과같이측정하였다. 시료 5 μl에.1 M Trs-HC 완충용액 (ph 8.5) μl, μm pnzn mtosut(pms) μl를혼합하여반응시킨후 5 μm ntro u ttrzoum(nbt) μl 및 5 μm β- notnms nn nuot(nadh) μl를첨가하여실온에서 1분간반응시킨다음분광광도계 (Utrsp 2pro, Borom Lt.) 를이용하여 5 nm에서흡광도를측정하였다. Suprox r 소거활성은추출물의첨가전과후의차이를아래와같이백분율로나타내었다. Suprox r svnn tvty (%) = (1- smp FRAP(rr run ntoxnt powr) 측정 FRAP 측정은 Bnz와 Strn(32) 의방법에따라다음과같이측정하였다. FRAP rnt는 25 ml tt ur(3 mm, ph 3.6) 를 37 C에서가온한후, mm HC 에용해한 1 mm 2,4,6-trs(2-pyry)-s-trzn(TPTZ, Sm-Ar Co.) 2.5 ml와 mm rr or (FC 3) 2.5 ml를첨가하여제조하였다. 시료 3 μl에제조된 FRAP rnt 9 μl와증류수 9 μl를넣은후 37 C 에서 1분간반응시킨다음분광광도계 (Utrsp 2 pro, Borom Lt.) 를이용하여 51 nm에서흡광도를측정하였다. FRAP는 FSO 4 7H 2O(Sm-Ar Co.) 를정량하여작성한표준곡선으로부터계산하였다. 환원력측정환원력측정은 Oyzu(33) 의방법에따라다음과같이측정하였다. 시료 1 ml에.2 M pospt ur(ph 6.6) 2.5 ml와 1% potssum rryn 용액 2.5 ml를가한후 5 C에서 3분간반응시켰다. 반응후 1% trorot 용액 2.5 ml를가한후원심분리한뒤, 상등액 2.5 ml에증류수 2.5 ml와.1% FC 3 용액.5 ml를혼합한다음분광광도계 (Utrsp 2pro, Borom Lt.) 를이용하여 7 nm에서흡광도를측정하였다. Tyrosns 저해활성측정 Tyrosns 저해활성은 Kmym 등 (34) 의방법을응용하여 96 w pt에시료 μl,.175 M pospt ur(ph 6.8) μl, 5 mm L-DOPA μl를순서대로넣고 musroom tyrosns(2, U/mL, Sm- Ar Co.) μl를첨가하여 37 C 배양기에서 1분동안반응시킨다음생성된 DOPA rom을 mropt rr(uvm-3, ASYS Co., Eunor, Austr) 를이용하여 49 nm에서흡광도를측정하였다. Tyrosns 저해활성은추출물의첨가전과후의차이를아래와같이백분율로나타내었다. Tyrosns ntory tvty (%) = (1- smp 통계처리실험결과는 3회반복실험의평균 ± 표준편차로나타내었고 SPSS(19., SPSS In., Co, IL, USA) 를이용하여분산분석 (ANOVA) 을실시하였고각측정평균값의유의성 (P<.5) 은 Dunn's mutp rn tst로검정하였다. 결과및고찰추출수율, 총페놀, 총플라보노이드함량및 ORAC 추출방법에따른상지추출물의추출수율, 총페놀, 총플라보노이드함량및 ORAC 값은 T 1과같다. 추출수율은각각열수추출 (HE), 5% 에탄올추출 (EE), 초음파추출 (UE) 및가압추출 (PE) 에서유의적인차이를나타내었으며, PE(3.7%), UE(1.43%), EE(1.18%) 및 HE(1.7%) 순
1712 박혜미 홍주헌 T 1. Extrton y, tot pno, tot vono ontnts, n ORAC (oxyn r pty) o xtrts rom Mor rmuus Extrton mto 1) HE EE UE PE Y (ry ss, %) 1.7±.2 1.18±.4 1.43±.5 3.7±.9 Tot pno (Tnn m/) 247.6±2.32 334.66±.65 6.56±1.53 21.±1.33 Tot vono (Rutn m/) 35.32±1.19 NS2) 35.64±.73 34.49±3.21 33.59±2.41 1) HE, ot xtrton; EE, 5% tno xtrton; UE, utrson xtrton; PE, prssur xtrton. 2) NS: not snnt. A vus r xprss s mn±sd o trpt trmntons. Mn wt rnt suprsrpt ttrs (-) wtn t sm oumn r snnty (P<.5). ORAC (Troox μm/ FW) 2,687.52±221.44 3,483.37±189.91 2,3.45±176.36 2,117.62±178.35 으로가압추출이가장높았고열수추출구간이가장낮았다. PE가높은추출수율을나타내는것은고압하에서단백질이변성되거나세포막이비가역적으로분해되어막투과성이증가됨에따라물질이동이용이해지는관계로보다많은성분이세포밖으로용출된것이라판단되며, 이는돼지감자잎의환류냉각추출 (29.88%) 에비해가압가열추출 (31.65 %) 에서수율이향상된다고보고한 Km 등 (6) 의연구결과와유사하였다. 총페놀및플라보노이드함량은 EE에서각각 334.66 m/ 및 35.64 m/으로가장많이함유되어있었으며다른추출방법에비해상지를 5% 에탄올로추출하였을때페놀성물질의함량이가장우수함을확인하였다. 5% 에탄올은물과유기용매가혼합되어있으므로상지에함유되어있는페놀성물질의용출이용이했기때문으로사료되며, 이는추출방법및용매에따른청나래고사리의총페놀함량분석에서추출방법에관계없이 % 에탄올로추출했을때추출수율이가장우수하다는보고와유사하였다 (8). 상지의추출방법에따른총페놀함량은 6.56~ 334.66 m/으로유의적인차이를나타내었으나, 총플라보노이드함량은 33.59~35.64 m/으로유의적인차이를나타내지않았다. ORAC 분석은 AAPH로부터유도된 proxy r에대한소거활성을형광도로측정하며, proxy r 손상에대한억제시간과억제율을모두반영하는측정방법이다 (35). ORAC 측정결과 EE에서 당 3,483.37 μm로가장우수한값을나타내었으며, HE (2,687.52 μm), UE(2,3.45 μm) 및 PE(2,117.62 μm) 순으로분석되었다. T 1에서나타낸것처럼 ORAC 값은페놀화합물의함량이상대적으로높은 5% 에탄올추출물 (334.66 m/) 에서가장높은것을확인하였다. Ron 등 (36) 은총페놀함량이증가함에따라 ORAC 값이증가한다고보고하였는데, 본연구결과와일치하였다. DPPH 및 ABTS r 소거활성상지추출물의 DPPH 및 ABTS r 소거활성은 F. 1과같다. DPPH r 소거활성은 EE 실험구가 ~ 1, μ/ml 농도에서 17.34~65.84% 로가장높은활성을나타내었으며, 특히 1, μ/ml 농도에서는양성대조군으로사용한 sor (77.49%) 의약.85배의활성을 A DPPH r svnn tvty (%).. B ABTS r svnn tvty (%) sor ( µ/ml) sor ( µ/ml) no o n j m 25 5 j onntrton (μ/ml) 25 5 onntrton (μ/ml) F. 1. DPPH (A) n ABTS (B) r svnn tvty o xtrts rom Mor rmuus. Mns±SD (n=3) wt rnt ttrs (-o) ov rs r snnty rnt y Dunn's mutp rn tst (P<.5). HE, ot xtrton; EE, 5% tno xtrton; UE, utrson xtrton; PE, prssur xtrton. 나타내었다. 다른추출방법은 ~1, μ/ml 농도에서 HE 1.46~48.95%, PE 11.75~44.64% 및 UE 1.32~ 34.82% 순이었으며, 모든시료에서농도의존적으로증가하였다. Sn(22) 은상지 7% 에탄올추출물의 DPPH r 소거활성을조사한결과 1 μ/ml에서 16% 및 μ/ml에서 73% 로오미자, 홍화씨와유사한결과를나타내었으며, 농도의존적으로높은활성을나타낸다고보고하였다. ABTS r 소거활성은모든시료에서농도가증가함에따라소거활성이증가하였으며, 특히 EE에서 42.35 ~97.52% 로가장높은활성을나타내어 DPPH r 소거활성과유사한경향을나타내었다. 1, μ/ml 농도에서 EE 97.52% 로유의적으로높은활성을나타내었으며, HE
상지추출물의항산화활성 1713 Suprox r svnn. tvty (%). tn (5 µ/ml) 25 5 onntrton (μ/ml) F. 2. Suprox r svnn tvty o xtrts rom Mor rmuus. Mns±SD (n=3) wt rnt ttrs (-) ov rs r snnty rnt y Dunn's mutp rn tst (P<.5). HE, ot xtrton; EE, 5% tno xtrton; UE, utrson xtrton; PE, prssur xtrton. 93.86%, UE 87.82%, PE 86.64% 순이었다. Lm 등 (37) 은상엽, 상지및상백피메탄올추출물의 ABTS r 소거활성을조사한결과상엽에서유의적으로높은활성을나타냈으며, 상지및상백피 3~3 μ/ml에서약 5~1% 로다소낮은활성을나타내었으나이는합성항산화제인 BHA와 sor 와비교하기위해낮은농도에서조사한결과때문이라판단된다. 모든시료에서 ABTS r 소거활성이 DPPH r 소거활성에비하여높은활성을나타내었는데, 이는다수의연구에서 ABTS r 소거활성의경우 DPPH r 소거활성보다수소공여항산화물질과 n rn 항산화물질을모두측정할수있어더높은활성을나타낸다고보고하여본연구결과와일치하였다 (3,38). Suprox r 소거활성추출방법에따른상지추출물의 suprox r 소거활성은 F. 2와같다. Suprox r 소거활성은추출방법별 ~5 μ/ml 농도에서 62.56~98.74% 로높은소거활성을나타냈으며농도의존적으로증가하였다. HE, EE, UE 및 PE에서추출된상지추출물 5 μ/ml 농도에서각각 98.26%, 98.74%, 97.95% 및 97.63% 로높은활성을나타내었으며, 특히모든추출방법에서 5 μ/ ml 농도는양성대조군으로사용한 tn(87.36%) 보다높은활성을나타내어상지추출물의 suprox r 소거활성이우수함을확인하였다. Hon(39) 은생강나무가지및잎추출물의 suprox r 소거활성을조사한결과 μ/ml 에서생강나무가지열수추출물은 73.27 %, 5% 에탄올추출물은 79.95% 로높은활성을나타내었다고보고하였는데, 본연구의상지추출물과유사한활성을나타냄을확인하였다. 추출방법에따른상지추출물의 r 소거활성을조사한결과각실험에사용되는 r에따라활성이서로다르게나타남을확인하였으며이를저해하는활성을나타내는물질들의용출에도차이가있을것으 A FRAP (μm). B Run powr (O.D. 7 nm). 1 1.8.6.4.2 sor ( µ/ml) sor ( µ/ml) m m n j j 25 5 m mn n n onntrton (μ/ml) j 25 5 onntrton (μ/ml) F. 3. FRAP (rr run ntoxnt powr) (A) n run powr (B) o xtrts rom Mor rmuus. Mns±SD (n=3) wt rnt ttrs (-n) ov rs r snnty rnt y Dunn's mutp rn tst (P<.5). HE, ot xtrton; EE, 5% tno xtrton; UE, utrson xtrton; PE, prssur xtrton. 로사료된다. FRAP 및환원력 상지추출물의 FRAP 및환원력은 F. 3과같다. FRAP 는 EE 구간이 ~1, μ/ml 농도에서 189.~974. μm로가장높은활성을나타내었으며, 특히 1, μ/ml 농도에서는양성대조군으로사용한 sor (1,239.88 μm) 의대략.8배의활성을나타내었다. ~1, μ/ ml 농도에서 HE 145.48~818.28 μm, UE 81.85~488.81 μm, PE 128.68~854.55 μm로모든추출물에서농도의존적으로 FRAP가증가됨을확인하였다. Jun 등 () 은편백나무및소태나무잎의 % 메탄올추출물에대해 FRAP를조사한결과각각 1.77 μm/μ 및 8.52 μm/μ으로분석되어소태나무잎추출물의 FRAP 함량이높다고보고하였다. 환원력은추출방법별모든구간이 ~1, μ/ml 농도에서.68~.817로높은활성을나타내었으며농도의존적으로증가하였다. 특히 EE의 1, μ/ml 농도에서.82로양성대조군으로사용된 sor (.78) 보다유의적으로높은활성을나타내었다. 다른추출방법에서의환원력은 1, μ/ml에서 HE(.65), PE(.56) 및 UE(.43) 순으로활성이나타났으며 FRAP와유사한경향을나타내었다. 총페놀함량이유의적으로높았던추출방법인 EE에서다른
1714 박혜미 홍주헌 Tyrosns ntory tvty (%). sor (25 µ/ml) 25 5 onntrton (μ/ml) F. 4. Tyrosns ntory tvty o xtrts rom Mor rmuus. Mns±SD (n=3) wt rnt ttrs (-) ov rs r snnty rnt y Dunn's mutp rn tst (P<.5). HE, ot xtrton; EE, 5% tno xtrton; UE, utrson xtrton; PE, prssur xtrton. 추출방법에비해 FRAP 및환원력이높음을확인하였으며, Osw(41) 는식물로부터추출된추출물은페놀성물질의함량에영향을받으며다양한항산화활성을보인다고보고하였다. Tyrosns 저해활성추출방법에따른상지추출물의 tyrosns 저해활성은 F. 4와같다. Tyrosns 저해활성은 EE ~1, μ/ ml 농도에서 23.25~67.% 로높은활성을나타내었으며, 특히 1, μ/ml 농도에서는양성대조군으로사용한 sor (78.96%) 의약.85배의활성을나타내었다. ~1, μ/ml 농도에서 HE, UE 및 PE가각각 23.9~ 48.42%, 19.85~32.84% 및 17.3~29.78% 로분석되어모든시료에서농도의존적으로 tyrosns 저해활성이증가하였다. Son 등 (21) 은상지의 7% 에탄올추출물의 tyrosns 저해활성을조사한결과 1~ μ/ml에서농도의존적으로저해활성이증가하였으며, 정상인체멜라닌세포에서 43.2~95.4% 및 B16 흑색종세포에서 54.4~ 89.1% 로저해활성을나타낸다고보고하였다. 또한 Sn (22) 은상지 7% 에탄올추출물의 tyrosns 저해활성을조사한결과 1 μ/ml에서 43% 및 μ/ml에서 74% 로인삼, 약쑥등다른약용식물보다유의적으로높은활성을나타내어멜라닌생합성을억제할수있는화장품개발에활용될수있을것이라보고하여본연구결과와유사하였다. 따라서추출방법에따른상지추출물의다양한항산화활성의결과를살펴볼때, 5% 에탄올로추출한실험구간이가장우수하여상지를기능성소재로개발하기위한추출방법으로활용가능하다사료된다. 요 본연구에서는다양한생리활성을가진다고알려져있는상지의산업적이용증대및고부가가치소재개발을목적으로 약 열수추출, 5% 에탄올추출, 초음파추출및가압추출공정을사용하여상지추출물의추출방법에따른항산화활성을조사하였다. 추출수율은가압추출, 초음파추출, 5% 에탄올추출및열수추출순으로나타났으며, 총페놀함량및플라보노이드함량은 5% 에탄올추출물에서각각 334.66 m/ 및 35.64 m/으로가장높은함량을나타내었으며, ORAC은 5% 에탄올추출물에서 당 3,483.37 μm로가장높은값을나타내었다. DPPH r 소거활성은 5% 에탄올추출물이 ~1, μ/ml 농도에서 17.34~65.84% 로가장높은활성을나타내었으며, ABTS r 소거활성은모든시료에서농도가증가함에따라소거활성이증가하였다. Suprox r 소거활성은추출방법별 ~ 5 μ/ml 농도에서 62.56~98.74% 로높은소거활성을나타내었다. FRAP 및환원력은 5% 에탄올추출물이 ~1, μ/ml 농도에서각각 189.~974. μm 및.12 ~.82로가장우수하였다. Tyrosns 저해활성은 5% 에탄올추출물이 1, μ/ml에서 67.% 로가장높은활성을나타내었다. 따라서 5% 에탄올추출방법이상지의항산화활성이우수한추출물제조방법으로적합하였으며산업적으로적용가능할것으로사료된다. 감사의글 본연구는중소기업청에서지원하는 13년도산학연협력기술개발사업 (No.C135499) 의연구수행으로인한결과물임을밝힙니다. REFERENCES 1. Hw B, Guttr JMC. 1984. Oxyn toxty, oxyn rs, trnston mts n ss. Bom J 219: 1-14. 2. Vo M, Lrtz D, Mono J, Cronn MT, Mzur M, Tsr J. 7. Fr rs n ntoxnts n norm pysoo untons n umn ss. Int J Bom C Bo 39: 44-84. 3. Ams BN, Sn MK, Hn TM. 1993. Oxnts, ntoxnts n t nrtv sss o n. Pro Nt A S USA 9: 7915-7922. 4. Km MJ, Cu WM, Pr EJ. 12. Antoxnt n ntnotox ts o st musrooms t y rnt ryn mtos. J Korn So Foo S Nutr 41: 141-148. 5. Jo YH, Pr JW, L JM, An GH, Pr HR, L SC. 1. Antoxnt n ntnr tvts o mtno xtrts prpr rom rnt prts o Jnson Don prsmmon (Dospyros v. Hy). J Korn So Foo S Nutr 39: 5-55. 6. Km JW, Km JK, Son IS, Kwon ES, Youn KS. 13. Comprson o ntoxnt n pysoo proprts o Jrusm rto vs wt rnt xtrton prosss. J Korn So Foo S Nutr 42: 68-75. 7. Co YJ, L SK, An YH, Py JH. 3. Dvopmnt o utrsonton-ssst xtrton pross or mnuturn xtrts wt ontnt o pnosyvn rom pn
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