사상체질의학회지 - PDF 무료 다운로드

사상체질의학회지 J. o f. S a s a n g. C o n s t. M e d V o l. 1 2. N o 1. 2 0 0 0 少陽人忍훈麗地骨皮漫이中消合 m 포에미 I I 는影響 서용배 *. 송정모 * E f f e c s o f S o y a n g i n I n d o n g d e u n g j i k o l p i t a n g o n t h e C o m p l i c a t i o n o f D i a b e t e s S e a Y o n g - b a e. S o n g J e o n g - m o D e p!. 이 O r i e n t a l m e d i c i n e, G r a d u a t e S c h o o l 이 W o o S u k U n i v e r s i t y T h e p u r p o s e o f t h i s r e s e a r c h w a s t o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t s o f I n d o n g d e u n g j i k o l p i t a n g w a t e r e x r r a c t ( l J T E ) o n t h e c o m p l i c a t i o n o f d i a b e t e s. I J T E d i d n o t a f f e c t t h e l e v e l o f b l o o d g l u c o s e i n 외 l o x a n - o r s r r e p t o z o t o c i n - i n d u c e d h y p e r g l y c e m i c m i c e, b u t i n h i b i t e d t h e m o t i l i t y o f g a s t r o i n t e s t i n e. I J T E i n h i b i t e d t h e w r i t h i n g s y n d r o m e i n d u c e d b y a c e t i c a c i d, t h e p e r m e a b i l i t y o f e v a n s b l u e i n t o p e r i t o n e a l c a v i t y i n d u c e d b y a c e t i c a c i d, t h e p a w e d e m a i n d u c e d b y h i s t a m i n e, a n d t h e f o r m a t i o n o f c o t r o n p e l l e t g r a n u l o m a. I J T E i n c r e a s e d t h e c e l l v i a b i l i t y o f t h y m o < 까 e s a n d s p l e n o c y t e s. I J T E d e c r e a s e d t h e r e l e a s e o f r - i n t e r f e r o n e ( r - I F N ) a n d i n t e r l e u k i n - 2 ( 1 L - 2 ), b u t d i d n o r a f f e c t t h e r e l e a s e o f i n t e r l e u k i n - 4 ( 1 L - 4 ) f r o m m u r i n e t h y m o c y t e s. I J T E i n c r e a s e d t h e r e l e a s e o f I L - 4 a n d d e c r e a s e d t h e r e l e a s e o f r u m o r n e c r o s i s f a c t o r - a ( T N F - a ) a n d i n t e r l e u k i n - l β ( l L - l ( 3 ), b u t d i d n o t a f f e c t o f r - I F N a n d I L - 2 f r o m m u r i n e s p l e n o c y t e s. I J T E d e c r e a s e d t h e r e l e a s e o f T N F - a a n d I L - l ( 3 f r o m m u r i n e p e r i t O n e a l m a c r o p h a g e s. I J T E d e c r e a s e d t h e p r o d u c t i o n o f n i r i c o x i d e ( N O ) f r o m m u r i n e p e r i t o n e a l m a c r o p h a g e s a n d i n c r e a s e d t h e p h a g o c y t i c a C t i v i t y o f m u r i n e p e r i t o n e a l m a c r o p h a g e s. T h e s e r e s u l t s s u g g e s t t h a t I J T E h a s a n a n t i - i n f l a m m a t o r y a C t i o n v i a t h e i n h i b i t i o n o f T N F - a, I L - l ( 3 a n d N O p r o d u c t i o n f r o m i m m u n e c e l l s. 초 록 少陽 A. i 忍양顧地骨皮場이中消合뺨효에미치는影響을살펴보고자하였고結果는다음과같다. l 陽管運動을柳制하였다 2. A c e t i c a c i d 에의한 w r i r h i n g s y n d r o m e 을柳制하였다 3. E v a n s b l u e 에의한毛細血管透過性을柳制하였다. 4. H i s r a m i n e 에의한急性足浮睡을柳制하였다 * 우석대학교한의과대학사상체짚의학교실교신저자 : 서용배주소 ) 전북전주시완산 F 다가동 I 가 7 6-3 연수당한의윈 T e l ) 0 6 3-2 8 3-6 6 3 6 1 8 6 -

- 서용배外 1 A : 少빼 A &. i i! & 읍 i ; 옳이 < j > 消合 { I I I! 에미치는 톨 - 5. C o t r o n p e l l e t 에의한肉흉睡形成을柳制하였다. 6. 腦線細뼈및牌훌훌細뼈의細뼈生存率올 t 홉 D r! 시켰다. 7. 뼈線細뼈로부터 ' Y - I F N 및 I L - 2 의分泌를柳制하였다. 8. 牌홉細뼈로부터 I L - 4 의分泌는增加시켰으나, T N F - a 및 I L - 1 f 3 의分泌는柳制하였다 9. n 흉脫大食細뼈로부터찌 F - a, I L - 1 f 3 및 n i t r i c o x i d e 의分泌를柳制하였다. 1 0. 隨뾰大食細뼈의 l u c i g e n i n c h e m i l u m i n e s c e n c e 및 F I T C - c o n j u g a r e d E. c o l i e n g u l f m e n t 를 l 足進하였다. 이상의寶驗結果 I J T E 는題管運動을柳制하였으며, 鎭痛및抗찢作用올나타냈고, 이들작용은免훌細 뼈로부터 T N F - a, I L - 1 β 및 n i t r i c o x i d e 의生成올柳制하기때문인것으로추정된다. 따라서이러한擬뼈 에의하여忍權地骨皮揚은中消合따효의하나인 효을柳制하는데有效한것으로思料된다. r L 績훌훌 I ) 忍장顧地骨皮楊은李濟馬의 東醫휩世保元 중 少陽 A 몹受熱짧熱病論 에수록된新定處方으로, 少陽 A 의消 1 홉중에서中消에사용하는것으로되어있다. 消獨은廳保病을포필하는넓은의미의病證으로, 역대의뽑家들에의히여三消로區分되었다ι 1 3 ) 1 ) 李는 少陽 A 消 1 홈은마음이寬遠關達하지못하고階固隊小하기때문에온다고하여그원인을性情의偏急 현상에서찾고있으며, J : 消에는핸隔散火楊, 中消 에는忍쪽顧地骨皮楊, 方으로제시하였다. 下消에는熟地黃좀흉楊을治中消는 消줬善 Q r l, 軟食倍常 혹은 善食而홈 둥 을主효으로하는당뇨병의한유형이라할수있는데 2. 1 1 ) 1 ) 李는합병증으로樓펌, 腦펌背覆, 中滿鼓眼이나失明동의眼病이발생한다고하고, 여기에 危亦林 1 1 ) 의 忍쪽麗을多用한다 는내용을예로들 어말함으로써忍쏟顧地骨皮楊의처방목적이단순 히消홈을치료하는데만있는것이아니고消뼈로 인한합병증을다스리고자하는데에도목적이있 음을시사하고 있다 忍캉顧地骨皮楊에대한실험적연구로, 崔 1 2 ) 는 허 l o x a n 투여高血廳白鼠에대하여少陽 A 消휩에 사용하는 w : n 뭘散火楊, 忍 쪽顧地骨皮場, 熟地黃줌흉 楊이高血廳의개선에유효한작용을하고있으며, 특히忍장顧地骨皮楊은廳民에수반되는高服血효 1 3 ) 을개선시키는데유효하다고하였다. 또한高는 s r r e p t o z o r o c i n 을투여한高血廳白鼠를대상으로한 實驗에서忍쪽훌훌地骨皮楊의血廳降下憐能올수있었다고하였다. 입증할 著者는이와는다른관점에서忍쪽麗地骨皮楊이 消홈의합병증으로나타나는樓펌둥의 병증에어떠 한작용을미칠것인지살펴볼필요가있올것으로생각하여鎭痛效果와消갖作用, 그리고免授作用등 을중심으로忍 캉顧地骨皮楊이中消의合뺨효에미 치는影響을살펴보고자하였다 진통작용을알아보기위해 a c e t i c a c i d 에의한 W r I - 떠 n g s y n d r o m e 며數측정을, 소염작용을관찰하기 위해毛細血管透過性, 急性足浮睡및肉흉睡形成에관한실험을실시하였고, 연역작용을관찰하기위해뼈線細뼈, 牌鷹細 8 힘및 8 흥뺨大食細 8 힘의증식, c y t o k i n e 의분비및負食能에대한실험을실시하였다. 그리고血廳에미치는영향을알아보기위하여 s t r e p r o z o r o c i n 및 a l l o x a n 에의한高血廳유발후血廳降下作用을측정하였고, 活性벚의陽內이동거리를 측정하여陽管運動의 억제효과를살펴보았다 著者는이와같은실험을통하여少陽 A 忍 쪽顧地骨皮楊의中消合 f 휴효에미치는影響을살펴본 바有意한결과가있어보고하는바이다. 1. 재료 1 ) 동물 I I. 힐힘재료및땅법 본실험에사용한생쥐는면역세포실험시에는 6-8 주령 B A L B / c 계수컷올, 기타실험에서는 2 0 : : 1 : : 2 g I C 뼈수컷올사용하였으며, 흰취는 1 5 0-1 8 0 g - 1 8 7 -

- 사상찌짙의학회지쩌 1 2 권채 1 효 m J - S D 계수컷을대한실험동물에서구입하여, 온도 2 2 : t 2 ' C, 습도 5 5 : f : 5 %, d a r k / l i g h t 1 2 시간의조건하에서 l 주일이상실험실에적웅시킨후사용하였으며, 고 형사료와물을자유스럽게섭취하도록하였다. 2 ) 시약및기구 실험에사용한시약은 D u l b e c c o s m o d 피 e d E a g l e m e d i u m { D M E ), p e n i c i l l i n - s t r e p t o m y c i n, D 띠 b e c c o p h a t e b u f f e r e d s a l i n e ( D P B S - A ), l i p o p o l y s a c c h a r i d e ( L P S ), l u c i g e n i n, 3 - { 4-5 - < 1 따 1 e t h y l - t h i a z o l - 2 y l ] - 2, 5 - d i p h e n y l t e t r a - s p h o s - z o l i u m b r o m i d e ( M T I ), ) ' - i n c e r f e r o n ( r - I F l - l ), z y m o s a n, S 띠 f a n i l a m i d e, N - n a p h t h y l e t h y l e n e d i a m i n e ' 2 H O 은 S i g m a C o. 에서, R P M I 1 6 4 0, f e t 에 b o v i n e s e r u m ( F B S ), 은 G i b e o C o. 에서, m o u s e r - i n t e r f e r o n ( r - I 애 ) i m m u n o - 따 p s m a s s a y k i t, m o u s e i n c e r l e u k i n - 2 ( 1 L - 2 ) i m m u n o a s s a y k i t, m o u s e i n t e r l e 띠 < i n - 4 ( 1 L - 4 ) i m m u n o a s s a y k i t, m o u s e t u - m o r n e c r o s i s f a c t O r - a ( T N F - a ) i m m u n o a s s a y k i t, i n c e r - l e u k i n - I { 3 ( l L - 1 ( 3 ) i m m u n o a s s a y k i t 는 R & D C o. 에서, F I T C - c o n j u g a t e d E. c o l i K - 1 2 b i o - p a r t i c l e s 는 M o l e c u l a r P r o b e s C o. 에서구입하여사용하였으며, 기타시약은 c e l l c u l t u r e 용및 1 급시약을사용하였다. 사용기구는 c u l r u r e f l a s k ( N u n c ), m u l t i - w e l l p l a t e ( 9 6 - w e l l, 2 4 - w e l l, C o s t a r ), m i c r o p l a t e - r e a d e r ( D y n a t e c h M R 5 0 0 0 ), C 0 2 i n c u b a t o r ( V i s i o n s c i e n t i f i c C o. ), m i c r o m e t e r ( M i t u t o y o C o. ), b l o o d g l u c o s e t e s t m e t e r ( s u 야 r g l u c o c a r d T M I I, A r k r a y C o. ), i n v e r t e d m i c r o s c o 야 ( N i k o n C o. ), f r e e z e d r y a p p a r a t u s ( l l s i n C o. ), l u m i n o m e t e r ( B e r t h o l d 9 6 L P ) 동을사용하였다. 2. ' l : J 밸 1 ) 검액의조쩌 본실험에사용한忍쪽顧地骨皮楊의처방구성은 \ ) 東홈홉世保元어l 준하였으며, 사용한약재들은 又 E 大學校附屬韓方病院에서정선된재료를구입 하여사용하였다. 처방 3 첩분량을중류수 1, 5 0 0 m J 로 2 회가열추 출한후, 여과하여여액을 r o t a η e v a p o r a t o r 로농축한 다음, f r e e z e d r y e r 로동결건조하여분말 4 5 g 을얻어 ( 수득율 1 8. 1 %, 以下 l J T E 라합 ) 동물실험시에는생 리식염수에용해시켜사용하였다. s P r e s c r i p t i o n o f I n d o n g d e u n g j i k o l p i t a n g ¾! J!T uöìt ÍÖÌ ( g ) 忍 훌 l¹ n i w a t F o / i " ", l 山茶횟 u m i a t C b r r e x 7. 5 I t!!š L y c i i R A d i c i l C b r r e x 7. 5 賣 J i C i J p l iµ0 j R h i L J i I, u 7 ' l l i f l 3 P h e¼ > t I n l l i r i C b r r e x 3. 7 5 : t 흉 S c r o p h u! a r i a t º u l i x 3. 7 5 줌흉 S < i p h o r a t R a d i x 3. 7 5 生地 R e m a n i a t R m l i x C r u d u I 3. 7 5 w 많 A n e m a ". h t n a e R h i z o m a 3. 7 5 톨 T G a r.ì i a t F r u aé 3. 7 5 }ÅÐ f e 1 L y c i i F r u c t.é 3. 7! i N R i F r u c té 3. 7 휴꺼 : J f S c h i z o, l t p.¹ t a t H e r b a 3. 7 防 I! \ S a p o l h n i k o v i a t R a d i x 3. 7 5 金銀?E L o n i c e r a t F / o l 3. 7 5 T o0 a l a m o u n t 7 2 ) 혈당실험 ( 1 ) S t r e p t o z o t o c i n O i I 의한혈당강하실험 생쥐를 2 4 시간절식시킨후 s r r e p t O z o t o c i n ( S 1 Z ) 4 5 m 때 < g 을 c i t r a t e b u f f e r s o l u t i o n ( p H 4. 5 ) 에용해시켜꼬 리정맥에주사하였으며, 사료는 S 1 Z 투여후부터공급하였다. 2 4 시간후에혈당을측정하여수치가 3 0 0 m g / d l 이상인생쥐 1 0 마리를 l 군으로하여실험 에사용하였다 \ 4. 1 1 ) 대조군에는생리식영수만을, 실 험군에는 I J T E 5 0 0 m 방 < g 을 l 일 l 회씩정해진시간 에경구투여하였고, 약물투여다음날부터 7 일간 매일약물을투여하기전에혈당을혈당측정기로측정하였다. ( 2 ) 때 l o x a n 에의한혈당강하실험 생쥐를 2 4 시간절식시킨후외 l o x a n 7 5 m g / k g 을꼬 리정액에주사한다음, 4 8 시간후에꼬리에서채혈 하였다. 혈당올측정하여수치가 3 0 0 m g / m l 이상인생쥐 1 0 마리를 l 군으로하여실험에사용하였다 \ 8 ) 대조군에는생리식염수만을, 실험군에는 I J T E 5 0 0 m 때 < g 을 l 일 l 회씩정해진시간에경구투여하였고, - 1 8 8 -

- 서용배外 1, A. : 少빼 A 忍 ξ 8 1 & 율 l U 이 ' * ' 消合빼 1 I 에미치는 W 톨 - 약물투여다음날부터 7 일간매일약물올투여하기전에혈당을혈당측정기로측정하였다. ( 3 ) 당부하실험 생쥐 I 군을 1 0 마리로하여 2 4 시간절식시킨후 I J T E 5 0 0 m g / k g 을 l 희경구투여하고 l 시간후에 d e x - t r o s e 2 g / k g 올경구투여한다음, 3 0, 6 0, 1 2 0 및 1 8 0 분에혈당을측정하였으여, 대조군에는생리식염수 만올투여하여혈당올혈당측정기로측정하였다. ( 4 ) 장관운동실험 생쥐 l 군을 1 0 마리로하여 2 4 시간절식시킨후 대조군에는생리식염수만을, 실험군에는 I J T E 5 0 0 m g / k g 을, 실험대조군에는 a t r o p i n e s u l f a t e I O m g / k g 을 l 회경구투여하고 1 0 분후에활성탄을 0. 5 % m e t h y l c e l l u l o s e 에현탁시켜 1 0 % 현탁액을만들어경구투여 한후 1 0 분후경추탈골하여치사시킨다음, 장전 체의길이에대한활성탄의이동거리를측정하여억제효과를평가하였다 1 9 ) 3 ) 진톰작용실험 생쥐 8 마리를 1 군으로하여 a c e t i c a c i d 에의한 w r i t h i n g s y n d r o m e 을 W h i t c l e 2 0 ) 의방법에따라측정하 였다. 대조군에는생리식염수만을, 실험군에는 I J T E 5 0 0 m g / k g 을, 실험대조군에는 a m i n o p y r i n e 1 0 0 m g / k g 을각각경구투여하고, I 시간후에 0. 7 % a c e t i c a c i d 1 0 m l / k g 을복강내에주사한다음 1 0 분후부터 1 0 분 간의 w r i t h i n g s y n d r o m e 의횟수를측정하였다. 대조군의 w r i t h i n g s y n d r o m e 횟수 - ( % ) = 실험군의 w r i t h i n g s y n d r o m e 횟수 u u 억제율 n u n X 1 0 0 4 ) 소염작용실험 대조군의 w r i t h i n g s y n d r o m e 획수 ( 1 ) 모세혈관투과성실험 b l u e 5 m V k g 올꼬리정맥에주사하였다. 주사후즉시 0. 6 % a c e t i c a c i d I O m V k g 올복강내에주사하고, I 시 간후에복강액올생리식염수 5 m l 로세척하여회수 한다음, 3, 0 0 0 r p m 에서 5 분간원심분리하였다. 상등 액올취하여 6 2 0 n m 에서홉광도를측정한다음미리 작성한검량선에의해유출된 e v a n s b l u e 의양을비색정량하였다. 대조군의 e v a n s b l u e 유출량 - 실험군의 e v a n s b l u e 유출량 억제윌 % ) = - - - & & x 1 0 0 대조군의 e v a 따 b l u e 유출량 ( 2 ) 급성足浮흩실험 생쥐 8 마리를 l 군으로하여 histamine 에의한급 성足浮睡을허둥 2 3 ) 의방법에따라측정하였다. 대조군에는생리식염수만을, 실험군에는 I J T E 5 0 0 m g / k g 을경구투여하고, I 시간후에좌측足에기염 물질로 h 잉 t a m i n e - 0. 9 % s 외 1 0 어 3 0 μ g / 2 0 μ I ) 을足廳피 하에 2 0 μ l / h i n d p a w 를주사하였다. 주사직전, 직후 1 5 분, 3 0 분, 6 0 분, 1 2 0 분, 1 8 0 분에足두께를 m l c r o - m e t e r 로측정하였다. ( 3 ) 육아증형성실험 흰쥐 5 마리를 l 군으로하여육아종형성올 H a r a 의방법에따라측정하였다. P e n t O b a r b i t a l 3 0 m g / k g 을 복강주사하여흰쥐를마취시킨, 동부위정중선을따라털을제거하고피부를절개하여, 양측견갑부피 하에미리중량읍측정 ( 약 3 5-4 0 m g ) 한멸균 c o r t O n p e l l e t 2 개를삽입하고봉합한다음, 대조군에는생 리식염수만을, 실험군에는 I J T E 5 0 0 m g / k g 을, 실험대 조군에는 p h e n y l b u t a z o n e 4 0 m g / k g 을 l 일 l 회씩 5 일 간각각경구투여하였다. 6 일째흰쥐를마취하여 c o r t O n p e l l e t 주위에증식한육아조직을조심스럽게 분리한후 6 0. C 에서항량이될때까지건조시켜중 량을측정하였다. 2 4 ) 생쥐 8 마리를 l 군으로하여 evans blue 에의한모세혈관투과성을 S h i m o m u r a 2 1 ) 의방법에따라측정하였다. 대조군에는생리식염수만을, 실험군에는 I J T E 5 0 0 m 밍 k g 을, 실험대조군에는 s o d i u m s a l i c y l a t e 3 0 0 m 밍 k g 을각각경구투여하고, I 시간후에 1 % e v a n s 억제율 { % ) = 대조군의육아종중량 - 실험군의육아종중량 X 1 0 0 n n 대조군의육아종중량 1 8 9 -

2 - 사상채짙의학회지쩌 1 2 권쩌 1 효 ; r o ) - 5 ) 연역싫험 ( 1 ) 세포분리및배양실험 생쥐의흉선세포및비장세포분리는 W y s o c k i m 및 M i z e! 둥 2 6 ) 의방법을이용하였다. 생쥐 5 마리를 l 군으로하여 I J T E 5 0 0 m 밍 k g 을 l 일 l 회씩 7 일간경구투여하였으며, 8 일째생쥐를경추탈골하여치사 시켰다. 적출한흉선및비장을 D 띠 b e c c o s p h o s p h a r e b u f f e r e d s 외 i n e A ( D P B S - A ) 를넣은 p e r r i d i s h 에서잘게 분쇄하고멸균된 s t a i n l e s s m e s h 로여과하여세포부유 액을얻은후, D P B S - A 로 2 회세척한다음 i l, 5 0 0 r p m 에서 1 0 분간원심분리 ), 흉선세포및비장세포부유 액으로하였다. 대식세포의분리는 I J T E 5 0 0 m g / k g 올 l 일 l 회씩 7 일간경구투여하였으며, 약물투여 4 일째생쥐복 강에 3 % r h i o g l y c o l l a r e 2 m! 를주입하고, 8 일째경추 탈골하여치사시킨다음, 복강에 c o l d P B S I O m l 를 넣어복강세포를수집하였다. 수집한세포를 4 " < : 에 서 1, 3 0 0 r p m 으로 1 0 분간원심분리하고 R P M I 1 6 4 0 배지로 2 회세척후, 직경 1 2 0 m m 야 r r i d 빼어 l 분주 하여 C 0 2 i n c u b a r o r 에서배양시키고 2 시간후에부 착되지않은세포를제거한다음, 부착한대식세포 를 c e l l s c r a p e r 로분리하여사용하였다. 생쥐흉선세 포, 비장세포및 m a c r o p h a g e 는 R P M I 1 6 4 0 배지를 사용하였으며, 배지에는 1 0 % F B S 와 p e O l 디 l l i n - s e r e - p r o m y c i n ( l O O u n i r s / m l, 1 0 0 μ g l m \ ) 올첨가하여사용하 였다 ( 2 ) 세포증식능측정실험 동일한방법으로분리한흉선세포및비장세포의중식에미치는 I J T E 의영향은 M T T 법 2 7 8 ) 으로측정 하였다. 9 6 - w e l l p l a r e 의각 w e l l 에분리한흉선세포및비장세포를각각 R P M I 1 6 4 0 배지로희석하여, 1. 2 x 1 0 6 c 리 I s / m l 농도로분주하고흉선세포에는 c o n - c a n a v a l i n A ( C o n A ) 5 μ g / m! 를첨가하고, 비장세포에 는 l i p o p o l y s a c c h a r i d e ( l P S ) 1 0 μ g / m l 를첨가한후, 3 7 " < : 의 C 0 2 i n c u b a r o r 에서 4 8 시간배양하되, 배양종료 4 시간전에 Mπ 시약을가하였다. 배양종료시 O. I N H C I 에용해시킨 1 0 % S D S 1 0 0 μ l 를각 w e l l 에 첨가하고차광상태에서 1 8 시간더배양한후, 발색 된각 w e l l 의홉광도를 m i c r o p l a r e - r e a d e r 로 5 7 0 n m 에서 측정하여, 대조군의홉광도에대한실험군의홉광도 를백분율로환산하여세포생존율을측정하였다. ( 3 ) 세포활성물질측정실험 통일한방법으로분리한흉선세포및비장세포를 각각 2 x l O 7 c e l l s / m l 로, 복강대식세포는 I x 1 0 7 c e l l s / m! 로조제하여, 9 6 w e l l p l a r e 에 2 0 0 μ l 씩분주한후, 7 2 시간동안 C O 2 i n c u b a r o r 에서배양하였다. 배양액올 원심분리 ( 2, 5 0 0 r p m, 5 分, 4 C ) 한다음, 상동액 5 0 μ l 룹취하여흉선세포에서분비되는 r - I F N, I L - 2 및 I L - 4 의양을, 비장세포에서분비되는 r - I F N, I L - 2, I L - 4, T N F - a 및 I L - I f l 양을, 대식세포로부터분비 되는 T N F - a 및 I L - I β 양올각각의 m o u s e u n m u - n o a s s a y k i r 를이용하여측정하였다. 즉상둥액 5 0 μ l 에 assay diluent 50 μ l 를혼합하여실온에서 2 시간 동안 incubarion 한후 4 회세척하였다. 세척후 antim o u s e c y r o k i n e s c o n j u g a r e c o n c e n t r a r e 1 0 0 μ l 를가하여실온에서 2 시간 i n c u b a r i o n 한후, 5 회세척하고 s u b - s r r a r e s o l u r i o n 1 0 0 μ l 를혼합하여 3 0 분동안실온에 서 i n c u b a r i o n 한다 S r o p s o l u r i o n 1 0 0 μ l 를가하여 4 5 0 n m 에서 m i c r o p l a r e r e a d e r 로홉광도블측정한후, 미리작성한검량선에의해 c y t O k i n e s 의양을환산하 였다 ( 4 ) N i t r i c o x i d e 측정실험 동일한방법으로분리한대식세포를 2 4 w e l l p l a r e 에 w e l l 당 2 x 1 0 6 c e l l s 을분주한후, 대식세포로부터 생성되는 n i r r i c o x i d e ( N O ) 의양올 G r i e s s 법 2 9 ) 으로측 정하였다. 각 w e l l 에 L P S I μ g / m l 와 r - I F N 2 5 u n i r s / m l 를첨가하여 2 4 시간배양한후, 배양액 1 0 0 μ l 와 G r i e s s 시왜 1 % s 띠 a n i l a m i d e + 0. 1 % N - n a p h - r h y l e n e d i a m i n e 2 H C I + 2. 5 % H j P 0 4 ) 1 0 0 μ l 를혼합 하여 9 6 w e l l m o d u l e 에넣고, 3 7 " < : 에서 1 0 분간방치 한후 5 7 0 n m 에서 m i c r o p l a r e - r e a d e r 로홉광도를측정 하여미리작성한 N a N 0 2 의검량선에의해 N O r 의 농도를환산하였다. ( 5 ) L u c i g e n i n c h e m i l u m i n e s c e n c e 측정실험 동일한방법으로분리한대식세포를 2 x 1 0 6 c e l l s / m l 가되도록 D M E ( w i r h o u r p h e n o l r e d, 0. 3 4 g / L N a H C 0 3, 2. 6 g ι H E P E S, p H 7. 2 ) 에부유시켜실험에사용하였 다 L u c i g e n i n 용액의제조는 I O m l 의 D P B S - A 에용해 - 1 9 0

- 서용배外 1 ),. : 少뼈 A 忍 g 뺑톰! U! 이 ' * ' 消合빼료에미치는 % 톨 - 한후, 여과멸균하여 - 2 0 ' C 에서보관하면서사용하 였다 { s t o c k s o l u t i o n ). L u c i g e n i n s t o c k s o l u t i o n 은사용하 기직전에 D M E 배지에 1 / 1 0 로희석하여사용하였 다 C h e m i l u m i n e s c e n c e 측정은 l u m i n o m e t e r 를이용하 여 3 7 ' C 에서측정하였다. 예. 3 1 ) 측정용 m i c r o p l a t e ( w h i t e ) 의각 w e l l 에준비된대식세포세포부유액 5 0 1 1 l 와 l u c i g e n i n 용액 5 0 1 l i 를넣고 3 7 ' C 에서 1 5 분간전 처리한후, 5 분간격으로 ω분동안 c h e m i l u m i - n e s c e n c e 를측정하였다. T a b l e I. E f f e c t o f I n d o n g d e u n g j i k o l p r t a n g w a t e r e x t r a c t O J T E ) o n b l o 여 g l u s e i n s t r e p t o z o t o c i n - i n d u c e d d i a b e t e s m i N o r m a J C o n t r o l B l o < 성 s u a r l e v c l ( m!! i ' d J ) I d a y 2 d a y 3 d a y 4 d a y d a y 6 d a y 7 d a y 9 8. 5 9 0. 3 9 1. 7 9 7. 2 9 8. 1 : : t 3. 7 : : t 4. 2 : : t 5. 8 : : t 3. 5 : : t 2. 9 9 6. 5 9 5. 5 : t 4. 1 : : t 3. 3 4 1 6. 3 3 8 1 3 7 7. 5 3 5 4. 8 3 4 3. 8 찌 6. 2 3 5 8. 8 : : t 1 1. 9 : t 1 9. 1 : t 1 9. 3 : t 1 7. 3 : t 2 1. 9 : t 3 1. 7 : t 3 8. 6 ( 6 ) E. c o l i e n g u l f m e n t 측정실험 I ] T E 4 2 0. 6 4 0 2. 3 3 8 8. 2 4 1 3. 6 4 0 8. 3 4 1 1. 6 4 0 7. 6 : t 1 8. 5 : t 1 9. 2 : t 1 6. 8 : t 2 4. 7 : t 3 4. 9 : t 1 8. 5 : t 2 3. 7 복강대식세포의식작용올확인하기위하여 F I T C - c o n j u g a t e d E. c o l i p a r t i c l e s 를 H a n k s ' b a l a n c e d s 허 t s s o l u t i o n ( H B S S ) 에현탁시켜 s o n i f i c a t i o n 한후사용하 였으며, t r y p a n b l u e 는 c i t r a t e b u f f e r { p H 4. 4 ) 에 2 5 0 μ g / m l 농도로용해하여사용하였다 3 2 ) 분리한대식세포를 R P M I 1 6 4 0 배지로 5 x 1 0 ) c e l l s / m l 되도록조정한 후, 1 0 0 μ l 를 9 6 w e l l 에분주하고 l 시간동안 C O 2 i n c u b a t o r 에서배양하였다배양후배지를제거하고, s a m p l e 1 0 μ g l m l 및 E. c o l i 현탁액 2 5 μ l 가하여 l 시 간동안배양한다음, 배양액을제거하고 e x t r a c e l l u l a r f l u o r e s c e n c e 를억제하기위해 t r y p a n b l u e 1 0 0 μ l 를첨가하여 i n v e r t e d f l u o r o m i c r o s c o p e 로관찰하 였다. 6 ) 톨계처리 모든실험결과들은 m e a n :! : S E 로나타내었고통 계처리는 s t U d e n t t - t e s t 를실시하여 P < 0. 0 5 를기준으로하여유의성여부를판정하였다. 川. 필혐결과 1. S t r e p t o z o t o c i n O i I 의한얼당감아효과 정상군의혈당치는 9 8. 5 :! : 3. 7 m g l 배이었으며, S l Z 를투여한대조군의혈당치는 S l Z 투여 2 4 시간후에 4 1 6. 3 :! : 1 1. 9 m g / d l 로증가하였고, 7 일까지약간감소 하는경향을나타내었으며, I ] T E 투여군은대조군과 별차이가없거나오히려증가하는현상을나타내 었다 { T a b l e I ). I ] T E ( 5 0 0 m g / k g ) w a s a d m i n i s r e r e d p. o. o n c e a d a y f o r 7 d a y s a n d s r r e p r o z o r i c i n ( 4 5 m ψ k g ) w a s i n j e c t e d i. v. a r r h e I s r d a y. T h e d a r a r e p r e s e n c s r h e m e a n : : t S E o f 1 0 따 c e o 2. A l l o x a n 에의안앓당강아효과 정상군의혈당치는 1 0 5. 5 :! : 4. 7 m g i 배이었으며, 외 - l o x a n 를투여한대조군의혈당치는 a l l o x a n 투여 4 8 시간후에 3 1 6. 3 :! : 1 3. 2 m g l, 배로증가하였고, 7 일까지 약간감소하는경향을나타내었으며, I ] T E 투여군은 대조군과별차이가없거나오히려증가하는현상 올나타내었다 { T a b l e I I ). T a b l e I I. E f f e c t o f I J T E o n b l α x l g l u c o s e i n a l l o x a n - i n d u c e d d i a b e t e s m i c e 빼N C o n t r o l! J T E B l α 닝 s u a r l e v c l ( m, I! / 매 ) 2 d a y 3 d a y 4 d a y 5 d a y 6 d a y 7 d a y m 5 7 잭1 0 0 3 : t 4. 2... : t. : t. : t. 3 1 6 3 3 2 1 2 3 2 7 5 1 3 2 1 5 1 1 8 2... : t l 3 2 0 3 3 4 2 3 3 6 8 1 3 : t 1 6. 7 : t 1 5. 9 9 9. 7 : : t 4. 8 l! 2. 2 : : t 3 l! l : t 4. 9.. : t. : t l. : t. 3 1 2 4 3 0 5 8 2 9 0 2 1 5 8 1 3 1 8 7 3 5 8. 9 3 3 3. 3 3 3 1. 6 : t 2 1. 4 : t 1 4. 5 : t 1 6. 4 1 0 8. 5 : t 3 1 I ] T E ( 5 0 0 m ψ k g ) w a s a d m i n i s t e r e d p. o. o n c e a d a y f o t 7 d a y s a n d a l l o x 뼈 7 5 m g / k g ) w a s i n j e c t e d i. v. a t t h e 1 s t d a y. T h e d a r a r e p r e s e n r s t h e m e a n : : t S E o f 1 0 m i c e 3. 당부아억제효과 2 4 시간절식시킨정상군의혈당치는 5 2. 2 : 1 : : 2. 5 m g / d l 이었으며, d e x t r o s e 를투여한대조군의혈당치 는 d e x t r o s e 투여 3 0 분후에 1 6 1. 2 : 1 : : 1 8. 2 m g i 배로증가 하였고, 시간이경과함에따라점차감소하여 3 시간후 1 9 1 -

- 사상채질의학회지쩌 1 2 권재 1 호 L r o J - 에는거의정상치로회복되었다. I J T E 투여군은대조군 과별차이가없었다 { T a b l e I I I ). T a b l e 1 1 1. E f f e c t o f I J T E o n b l d g l u c o s e i n d e x t r o s e - a d m i n i s t e r e d m i c e C o n t r o l I J T E B l α x i s u a r l c v e i ( m, μ / d l ) 0 3 0 6 0 1 2 0 1 8 0 m i n, 5 2. 2 1 6 1. 2 I I 4 6 9. 2 5 6. 0 : t 2. 5 : t 1 8. 2 : t 7. 2 : t 3. 2 : t 3. 3 3 2 0, 3 1 5 0. 8 l i O. 6 6 8. 8 6 0, 2 : t 1 5. 3 : t 1 1. 0 : t 7, 8 : t 6. 0 : t 5. 1 D e x t r o 잊 ( 2 g l m o 야 0 ) w a s 뼈 m i n i s t c π d p. o. I h o u r a f t e r I J T E ( 5 o o m 잉생 ) w a s a d m i n 잉 e r e d p. o. T h e d a t a r e p r e s e n t s t h e m e a n : t S E o f 1 0 m i c e. 4. 장관끌톨억제효과 대조군의장관운동거리를 1 0 0 % 로하였을때, I J T E 투여군은 7 2. 7 : : t 2. 3 % 이었으며, 실험대조군인 a r r o p i n e s u l f a t e 투여군은 5 9. 7 : : t 4. 6 % 로대조군에비 해감소하였다 { T a b l e I V ) T a b l e V. E f f e c t o f I J T E a n d a m i n o p y r i n e o n w r i t h i n g s y n d r o m e i n d u d b y a t i c a c i d i n m i D o s e ( m¼ k g, p. o. ) N o. o f w r i t h i n g s y n d r o m e C o n t r o l 2 4. 5 :! : 1. 8 U T E 5 00 8. 8 : t 1. 5 * A m i n o p y r i n e 1 0 0 1 2. 0 : t 2. 1 * I n h i b i t i o n ( % ) U T E w a s a d m i n i s t e r e d p, o. a n d t h e n u m b e r o f w r i t h i n g s y n d r o m e i n d u c e d b y 0. 7 % a c e t i c a c i d w a s d e t e r m i n e d f o r 1 0 m i n. T h e d a t a r e p r e s e n c s t h e m e a n : t S E o f 8 m i c e. * ; S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n c f r o m c o n c r o l g r o u p ( p < O, o o l ). 6. 모세얼관투과성억제효과 대조군의 e v a n s b l u e 유출량은 1 2. 5 : : t O. 5 1 1 g / m l 이 었으며. I J T E 투여군은 5. 6 : : t O. 6 μ g / m l 로실험대조군 인 s 여 i u r n s a l i c y l a t e 투여군은 4. 4 :! : 0. 5 μ g / m l 로모두 대조군에비해유의성있는억제효과가있었다. 모 세혈관투과성억제율은 s 어 l u r n S 외 l α l a t e 가 6 4. 8 % 로 I J T E 5 5. 2 % 에비해강력하였대 T a b l e V I ) 6 4. 1 5 1. 0 T a 미 e I V. E f f e c t 이 I J T E o n g a s t r o i n t e s t i n a l m o t i l i t y D o s e M o v e m e n t o f a c t i v e c a r b o n ( % ) ( mè k g ) T a b l e V I. E f f e c t 이 I J T E a n d s o d i u m s a l i c y l a l e o n t h e p e r m e a b i l i t y 이 e v a n s b l u e i n t o p e n l o n e a l c a v i t y i n d u c e d b y a c e t i c a c i d I n m i c e C o n t r o l l o o. 0 : t 3 U T E 5 0 0 7 2. 7 : t 2. 3 * D o s e ( m¼ k g, p. o. ) L e a k a g e o f e v a n s b l u e { μ g / m I ) I n h i b i t i o n ( % ) A r r o p i n e 1 0 5 9. 7 : t 4. 6 * s u l f a t e A c r i v e c a r b o n w a s a d m i n s t e r e d p. o. 3 0 m i n. a f t e r I J T E ( 5 0 0 m ) 바엄 w a s a d m i n i s t e r e d p. o, T h e d a t a r e p r e s e n t s t h e m e a n : t S E o f 1 0 띠 c e * ; S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n c r o l g r o u 아 p < O. O I ). 5. 전톰효과 1 0 분간의 w r i t h i n g s y n d r o m e 횟수는대조군 2 4. 5 : : t 1. 8 회이었으며. I J T E 투여군은 8. 8 : : t 1. 5 회로, 실험대조군인 a m i n o p y r i n e 투여군은 1 2. 0 : : t 2. 1 회로대조군에비해모두유의성있는억제효과가있었다. 진통작용은 I J T E 6 4. 1 % 로 a m i n o p y r i n e 5 1. 0 % 에비해강력하였다 { T a b l e V ). C o n t r o l 1 2 : t o, 5 I J T E 5 00 6 : t 0. 6 * S o d, s a l i c y l a t e 3 0 0 4. 4 : t o. I J T E w a s a d m i n i s t e r e d p. o 때 d t h e p e r m e a b i l i r y o f e v a n s b l u e i n d u c e d b y 0. 6 % a c e t i c a c i d w a s d e t e r m i n e d 끼 l e d a t a r e p r e s e n t s t h e m e a n : t S E o f 8 m i c e. * ; S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l g r o u p ( p < O. o o l ) 7. 급엉足浮睡억제효과 대조군의족부종율은 h i s t a m i n e 투여 3 0 분후에 3 9. 0 % 로가장강력하였으며. I J T E 투여군은대조군 에비해 1 5 분및 3 0 분에대조군에비해감소되었다 ( T a b l e V I I ) 5 * 5 5, 2 6 4. 8-1 9 2 -

- 서용배外 1 A : 少뼈 A f l. 훗 g 힘을 i ; a 이, *, i 뼈合빼료에미치는 I i 톨 - T a b l e V I I. A n t i - i n f l a m m a t o r y a c t i v i t y o f I J T E o n h i s - t a m i n e - i n d u d e d e m a i n m i - ; ; aw D o s e ( mºpæ, p. o. ) T i m c ( m i n u t e s ) 0 l 3 0 6 0 1 2 0 1 8 0 1. 5 9 2. 1 5 2. 2 1 2. 0 5 1. 8η 1. 7 3 C o n t r o l : t o. Q 2 : t o. 0 3 : t o 0 3 : t o. 0 2 : t o. 여 :! : 0. 0 3 m 긴 ( 3 9. 0 ) ( 2 8. 9 ) ( 1 8. 9 ) ( 8. 8 ) 1. 5 9 2. 0 3 2. 0 5 1. 9 9 1. 8 3 1. 6 9 I J T E :! : 0. 0 2 : t o : 0 2 ' : t o. o f ' : t o. Q 3 : t o m : t o. 0 2 ( 2 7. 7 ) ( 2 8. 9 ) ( 2 5. 2 ) ( 1 5. 1 ) ( 6. 3 ) I J T E ( 5 0 0 m g / k g ) w a s a d m i n i s t e r e d p. o. a n d t h e [ h i d n c s s o f h i n d p a w e d e m a i n d u c e d b y h i s [ a m i n 이 3 0 J. / g! μ 1 ) w a s d c c e r m i n e d w i [h m i c r o m e [ e r. T h e d a a r e p r e s e n t s t h e m e a n - t S ε o f 8 m i c e. " ; S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n c r o l g r o u p ( " ; p < O. O χ " " ; p < O. O I ) 8. 육 t 풍엉성효과 육아종의중량은대조군 3 6. 4 : t 1. 5 m g 이었으며, I ) T E 투여군은 2 8. 7 : t 1. 8 m g 으로, 실험대조군인 p h e - n y l b u t a z o n e 투여군은 2 3. 8 : t l. l m g 으로대조군에비 해유의성있게감소되었다. 육아종형성억제율은 p h e n y l b u t a z o n e 이 3 4. 6 % 로 I J T E 2 1. 2 % 에비해강력 하였다 - ( T a b l e V I I I ). T a b l e V I I I. E f f e c t o f I J T E a n d p h e n y l b u t a z o n e o n t h e f o r m a t i o n o f c o t t o n p e l l e t g r a n u l o m a i n r a t s G l a n u l o m a w e i g h [ ( m g ) 0Õ< n c r o l 3 6. 4 : t 1. 5 l J T E 5 0 0 2 8. 7 : t 1. 8 " P h e n y l b u [ a z o n e 4 0 2 3. 8 : t 1. 1 " " I n h i b i [ i o n ( % ) I J T E w a s a d m i n i s t e r e d p. o. o n c e a d a y f o r 5 d a y s a n d [ h e f o r m a t i o n o f c o r r o n 야 l I e t g r a n u l o m a w a s d e [ e r m i n e d. T h e d a t a r e p r e s e n t s [ h e m e a n : t S E o f 5 r a t s. " ; S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t t r o m c o n t r o l g r o u p ( " ; p < 0. 0 5, " " ; p < O. O l ). 9. 훌섣시 l 포및비장시 l 포의륭스앤 미지는효과 흉선세포에 c o n c a n a v a l i n A ( C o n A ) 를처리하였을 때의세포생존율을 1 0 0 % 로하였을때, I J T E 투여군 은 1 1 8. 4 : t 1. 4 % 로대조군에비해세포생존율이중 가하였으며, C o n A 를처리하지않았을때대조군의 세포생존율은 5 3. 6 : t 1. 3 % 이었으며, I ) T E 투여군은 6 8. 7 : t o. 5 % 로대조군에비해세포생존융이중가하 였다. 대조군의비장세포에 l i p o p o l y s a c c h a r i d e ( L P S ) 를처리하였을때의세포생존율을 1 0 0 % 로하였을때, 2 1. 2 3 4. 6 I ) T E 투여군은 1 2 1. 9 : t 1. 2 % 로대조군에비해세포 생존율이증가하였으며, L P S 를처리하지않았을때 대조군의세포생존융은 5 9. 4 : t o. 9 % 이었으며, I J T E 투여군은 7 4. 5 : t 1. 3 % 로대조군에비해세포생존율 이증가하였디 - ( T a b l e I X ). T a b l e I X. E f f e c t o f I J T E o n t h e c e l l v i a b i l i t y 이 m u n n e t h y m o c y t e s a n d s p l e n o c y t e s T h y m o c y t e s ( % ) C o n A ( + ) C o n A ( - ) C o n t r o l l O O. O : t 1. 1 5 3. 6 : t 1. 3 S p l e n o c y t e s ( % ) l P S ( + ) l P S ( - ) 1 0 0. 0 : t 1. 2 5 9. 4 : t o. 9 l J T E 1 1 8. 4 : t 1. 4 6 8. 7 土 0. 5 1 2 1. 9 : t 1. 2 ' 7 4 土 1. 3 ' I J T E ( 5 0 0 m 밍 k g ) w a s a d m i n i s t e r e d p. o. o n c e a d a y f o r 7 d a y s, a n d t h y m u s o r s p l e e n w a s s e p a r a t e d. T h y m o c y t e s o r s p l e n o c y t e s ( 1. 2 x 1 0 6 c e l l s l m l ) w e r e c u l t u r e d f o r 4 8 h α l π i n C 0 2 - i n c u b a t o r. T h e c e l l v i a b l i c y w a s d e [ e r m i n e d b y M 1 T m e [ h o d. T h e d a [ a [ e p r e s e n t s c h e m e a n : t S E o f 5 m i c e. " ; S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n c f r o m c o n c r o l g r o u p ( p < O. O O I ). C o n A ( + ) ; C o n c a n a v a l i n A t r e a c e d g r o u p, C o n A ( - ) ; C o n c a n a v a l i n A n o n - t r e a t e d g r o u p, l P S ( + ) ; l i p o p o l y s a c c h a r i d e t r e a r e d g r o u p, L P S ( - ) ; l i p o p o l y - s a c c h a r i d e n o n - c r e a c e d g r o u p. 1 0. 흉신세포, 비정세포및복캉대식셰포로부터 세포월성률필문비에미지는효과 흉선세포에서분비되는 r - I F N 의양을측정한결 과, 대조군은 1 2 1. 5 : t 1. 3 p g / m J 이었으며, I ) T E 투여군은 3 7. 9 : t 1. 5 p g / m J 로대조군에비해감소하였다. I L - 2 의양을측정한결과, 대조군은 1 7 3. 0 : t 8. 7 p g / m l 이었으며, I J T E 투여군은 6 1. 1 : t 4. 9 p g / m l 로대조군에비해감소하였다. I L - 4 의양을측정한결과, 대조군 은 4 5. 2 : t 1. 6 p g / m J 이었으며, M M C 투여군은 4 5. 5 : t 2. l p g / 찌로대조군과별차이가없었다 - ( T a b l e X ) 비장세포에서분비되는 r - I F N 의양을측정한결 과, 대조군은 2 5 8. 2 土 5. l p g / m l 이었으며, i J T E 투여군은 2 6 5. 8 : t 4. 7 p g / m l 로대조군과별차이가없었다. I L - 2 의양올측정한결과, 대조군은 2 5 3. 4 : t 5. 4 p g / m l 이었으며, I ) T E 투여군은 2 5 2. 2 : t 5. l p g / m l 로대조군 과별차이가없었다. ι 4 의양을측정한결과, 대 조군은 1 0 6. 7 : t 3. 4 p g / m l 이었으며, I ) T E 투여군은 2 1 9. 3 : t 4. 8 p g / 찌로대조군에비해증가하였다. T N F - a 의양을측정한결과, 대조군은 4 3 9. 5 : t 1 O. 5 p g / m l 이었으며, I ) T E 투여군은 2 0 2. 3 : t 6. 5 p 밍 m l 로대조군 에비해감소하였다 I L - I P 의양올측정한결과, 대 조군은 1 6 4. 3 : t 6. l p, 밍찌이었으며, I ) T E 투여군은 7 7. 5 : t 3. 8 p g / m J 로대조군에비해감소하였다 - ( T a b l e X I ). - 1 9 3

- 사상혜짙의학회지쩌 1 2 권쩌 1 호 2 ) ) ) - 복강대식세포에서분비되는 T N F - a 의양올측정 한결과, 대조군은 2 4 7. 0 : : t 1. 5 p g / m I 이었으며, I ) T E 투여군은 1 5 4. 3 : : t 8. 2 p g / m I 로대조군에비해감소하였다. I L - l l 3 의양을측정한 결과, 대조군은 3 2 9. 7 : : t 3. 3 p g / m l 이었으며, I J T E 투여군은 1 6 6. 0 : : t 6. 3 p g / m I 로대 조군에빅해감소하였다 { T 쇼 I e X H ). 양올측정결과, 대조군은 L P S 와 r - I F N 을처리하지않았을때는 1 ". 9 : : t o. 2 μ M 이었으나, L P S 와 r - I F N 를처리하였올때는 1 2. 9 : : t 0. 8 μ M로증가하였으며, I J T E 투여군은 L P S 와 r - I F N 올처리하지않았올때 l. l : : t 0. 1 μ M로, L P S 와 r - I F N 롤처리하였을때 9. 5 : t O A μ M로대조군에비해감소하였다 { T a b l e X I I I ). T a b l e X. E f f e c t 이 I J T E o n t h e p r o d u c t i o n o f c y t o k i n e s i n m u r i n e t h y m o c y t e s C o n t r o l π r - I N F ( p g / m l ) I L - 2 ( p g / m l ) I L - 4 ( p g / m l ) C o n t r o l 1 2 1. 5 : t 1. 3 1 7 3. 0 : t 8. 7 4 5. 2 : t 1. 6 U T E 3 7. 9 : t 1. 5 * 6 1. 1 : t 4. 9 * 4 5. 5 : t 2. 1 υ T E ( 5 0 0 m 밍 k g ) w a s a d m i n i s t e r e d p. o. o n c e a d a y f o r 7 d a y s, a n d t h y m u s w a s s e p a r a t e d. T h y m o c 까 e s ( 2 x 1 0 7 야 U s / m l w e r e c u l t u r e d f o r 7 2 h o u r s i n C 0 2 - i n c u b a t o r. T h e 얀 t o k i n e w e π d e t e r m i n e d a t 4 5 n m w i r h E U S A k i t. T h e d a t a π p r e s e n t s t h e m e a n : t S E o f 5 m i c e * ; S 밍 n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l g r o u p ( p < O. O O I ) T a b l e X I. E f f e c t o f I J T E o n t h e p r o d u c t i o n 이 c y t o k i n e s i n m u r i n e s p l e n o c y t e s r - I N F I L - 2 I L - 4 T N F - a I L - I f 1 ( p g / m l ) ( p g / m l ) ( p g / m l ) ( p g / m l ) ( p g / m l ) 2 5 8. 2 2 5 3. 4 1 0 6. 7 4 3 9. 5 1 6 4. 3 : t 5. 1 : t 5 A : t 3. 4 : t 1 0. 5 : t 6. 1 2 6 5. 8 2 2. 2 2 1 9. 3 2 0 2. 3 7 7 : t 4. 7 : t 5. 1 : t 4. 8 * : t 6. 5 * : t 3. 8 * I ) T E ( 5 0 0 m g / k g ) w a s a d m i n i s t e t e d p. o. o n c e a d a y f o r 7 d a y s, a n d s p l e e n w a s s e p a r a t e d. S p l e n o c y t e s ( 2 x 1 0 7 c e l l s / r n J ) w e r e c u l t U r e d f o r 7 2 h o u r s i n C 0 2 - i n c u b a o r. T h e c y r o k i n e w e r e d e t e r m i n e d a r 4 5 0 n m w i t h E U S A k i t. T h e d a t a r e p r e s e n t s t h e m e a n : t S E o f 5 m i c e ; S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l g r o u p ( p < 0. 0 0 I ). T a b l e X I I. E f f 없 o f U T E o n t h e α 여띠 i o n 이 c y t o k i n e s I n π u n n e mα l e a l r r a a - q : > h a g e s C o n t r o l T N F - a ( p g / r n J ) 2 4 7. 0 : t 1. 5 I L - I β ( p μ / r n J ) 3 2 9. 7 : t 3. 3 I j T E 1 5 4. 3 : t 8. 2 * l 6 6. 0 : t 섭 I ) T E ( 5 0 0 m g / k g ) w a s 때 m i n i s t e r e d p. o. o n c e a d a y f o r 7 d a y s, a n d t h e n 3 % t h i o g l y τ U a t e w a s i n j e c t e d i. p. a t t h e 4 t h d a y. P e r i t O n e a l m a c r o p h a g e s o b t a i n e d a f t e t 2 h o u r s a d h e r e n c e p e r i c 펴 w e r e c u l t U r e d f o r 2 4 h o u r s i n C O 2 - i n α b a t o r. T h e d a t a π p r e s e n t s t h e m e a n : t S E o f m i c e. 8 ; S i 명 ; n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l g r o u p ( p < O. O O I ) 1 1. 목감대식셰포로부터 n i t r i c o x i d e 문비에 미지는효과 복강대식세포로부터분비되는 n i t r i c o x i d e ( N O ) 의 T a 이 e X I I I. 댄 e e t o f I J T E o n t h e p r ' b d u c t i o n o f n i t r i c o x i d e i n m u r i n e p e r r t o n e a l m a c r o p h a g e S a m p l e s N O ( J 1 M ) N o n - t r e a t e d T r e a t e d r - I F N a n d L P S r - I F N a n d L P S C o n c r o l 1. 9 : t 0. 2 I 2. 9 : t O. 8 P M r \. l : t 0. 1 * 9. 5 : t O A * I ) T E η O O m. 밍 k g ) w 싫 a d m i n i s t e r e d p. o. o n c e a d a y f o r 7 d a y s, a n d r h e n 3 % r h i o. 엉 l y c o l l a r e w a s i n j e c t e d i. p. a r r h e 4 r h d a y. P e r i t o n e a l m a c r o p h a g e s o b r a i n e d a f t e r 2 h o u r s a d h e r e n c e p e r i o d w e r e c u l r u r e d f o r 2 4 h o u r s i n C O 2 - i n c u b a t O r. T h e d a t a r e p r e s e n r s r h e m e a n : t S E o f 5 m i c e. * ; S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f t O m c o n t r o l g r o u p ( p < O. 0 5 ). 1 2. l u c i g e n i n c h e m i l u m i n e s c e n c e 어 미 지는표과 I J T E 를투여하고분리한복강대식세포에서대조군에비해 l따u lκ C띠 1멍 g e윈 e n m l i n c I h e m i l 뻐씨삐 I t삐u 1 I찌 m n e 하였다대 { F i 멍 g. 끼l 1 μ). 이는 I JπTπE 가 7 } 을증가시킴을의미한다.. 톨i g g g 훌훌- - s g g g @ 뼈@ 빼뼈뼈빼뺑뼈@ 빼빼뼈@..... I, 0. 1 2 0 2 1 ' 0 복강대식세포의탕식능 T i l l!! 톨 I n. ) I 1 0 5 1 8 F i g. \. E f f e c t o f I ) T E o n l u c i g e n i n c h e m i l u m i n e s c e n c e i n m u r i n e p e r i r o n e a l m a c r o p h a g e. I ) T E ( S O O m 밍 k g ) w a s a d m i n i s r e r e d p. o. o n c e a d a y f o r 7 d a y s, a n d r h e n 3 % t h i o g l y c o l l a r e w a s i 띠 e c r e d i. p. a r t h e 4 t h d a y. P e r i t O n e a l m a c r o p h a g e s o b t a i n e d a f t e r 2 h o u r s a d h e r e n c e p e r i 여 w e r e c u l t U r e d i n R P M I 1 6 4 0 m e d i a m i x e d w i r h o p s o n i z e d z y m o s a n. 까 I e l u c i g e n i n c h e m i l u r n i n e s - c c n c e w a s m e a s u π d f o r 6 O m i n. w i r h l u m i n o m e t e r. O t h e r p r o c e d u r e s w e r e d e s c r i b e d a s d e r 때 e d m a t e r i a l s a n d m e r h 여 s e c r i o n.. E a c h b a r r e p r e s e n t S t h e m e a n : t S E o f 5 m i c e. * ; S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o o r r o l g r o u p ( ; p < O. O I, u ; p < O. O O I ) - 1 9 4 -

- 서용배外 1 A : 少陽 A 忍 용흉地骨皮漫이 c P 消合 f R I 에미치는影톨 - 1 3. E. c o i e n g u f m e m o i 미지는효과 복강대식세포의탐식능을확인하기위하여 F I T C - c o n j u g a t e d E c o l l p a r t l l e s 을이용하여현미경으 로복강대식세포에 u p t a k e 되는형광 p a r t l c l e s 를관 찰한결과, U T E 를투여한생쥐의복강대식세포에 서형광이현저히증가됨을확인하였다 { F l g. 2 ). F l μ 2. P h o t o n 1 l r o E r a p h s o f t h e e n g u l f m e i n o f { l l i m e s c C l n - O I i } u e a r e d E o l l p a n l d c s i n m u r l n c F r l t o n e a l m a c r o p h a g e s a l i m n l - S t e m d w l r h l j T E P h o t o g r a p h s ( t a k e n a t 2 0 0 X m a g n l 6 C a r l o n ) s h o w l I 밍 t h e u p t 외 α o f f 1 u o r c s c c l I 1 - O r l l l i g a t e d E c o l l p a n k l e s l n c o n t r o l ( A ) a n d t h e m a c r o p h a g e s a d r I M U S t e r e d w l t h I J T E ( 5 0 0 m E / k g ) ( 8 ) T h e m a c r o p h a e c s w e r e o b s e r v e d w l r h a n l n v c r r c d n u o n m u c r o s c o p e - N. 考察忍 쏟顧地骨 E E 場은많存處方에根據하지않은李 1 ) 濟馬의獨創的인處方으로 東醫壽世保元 의 r 新定少陽人病應用要藥十 t 方 중의하나이며少陽人消鴻중中消에적용되는처방이다. 忍장顧과地骨皮라는두가지藥이름으로處方名을삼은것은 이두가지藥의특성이이處方의성질을대변하는것으로볼수있다. 亦林東醫壽世保元 l ) r 少陽 A 몹受熱훌熱病論 에危 l l ) 이말한 消뼈은반드시擁힘가생기는것을 방지하여야하는데, 忍 쪽顧을量에구애받지않고 根쫓花葉을많이써서좋다 고한내용을引用한 것으로보아主藥으로선택한忍장顧은李濟馬가 中消의合힘효인첼훌펌동을治擔據防하는데사용할 목적으로선택하였을것으로짐작된다. 地骨皮는 東武遺橋 3 4 ) 에 開賢之뽑氣而消食進食 하는것으로 언급되었고, 웹賢火하며淸虛熱하는효과 ) 를가지는藥材이다. 忍쏟顧地骨皮楊은이러한두藥材를중심으로黃連黃相玄豪苦흉 生地黃知母振子金銀花山茶奭狗紀子覆益子등의淸熱, 補陰, 補精 의效果가있는藥과發散藥으로서降表陰하며大 l ) 淸뼈隔하는해츄, 防風등으로構成되어있다. j 消룹은健原病을포괄하는넓은의미의病證으로 이해되고있는데 2 l 3 ), 역대의醫家들에의하여대개三消로區分되었다 2-1? l ) 李는消獨에대하여少陽人 에있어서는 뽑受熱훌熱病論 에原因, 病證, 治法, 治方등을자세히기술하였으나太陰 A 과少陰 A 에 있어서는太陰人操熱證, 少陰人食消證이라하여간 j 략하게기술했을뿐이다. 한편少陽人消옳은마음 이寬遠關達하지못하고階固隊小하기때문에온다 고하여그원인을性情의偏急현상에서찾고있 으며, 上消에는핸隔散火場을, 中消에는忍 쪽顧地骨皮場을, 下消에는熟地黃苦쫓場을治方으로제시하 였다 廳原病은장기간지속될때多散, 多民, 多食과훨靜등과같은임상적인증상뿐만아니라急性感梁, 網體효, 健 F R 病性賢 E E, 鋼狀動 R R 硬化 E E, 壞펌등을 비롯한다 % f 한合 f 臨이나타나기때문에당뇨병자체 의治擔도중요하지만합병증이나타나지않도록據防 하는것도매우중요하다 4 8 3 6 ). 이에대하여李 l ) 또한 廳保의合 f 짜효을매우중요하게생각했음을알수 있는데, 危亦林과李果, 東醫醫方類聚 등의文句를인용하여消泡에 f짜發하는擁펌 ( 腦펌, 背擔 ) 와眼病 ( 雙目失明 ) 등은다少陽人中消의變證이라하였던것아다. 따라서少陽 A 中消證에사용하는忍 쪽顧地骨皮 l 9 5

- 사상찌짙의학회지재 1 2 권재 1 호 2 ( X X ) - 楊이만들어지게된배경에는忍캉顧을비롯하여 淸熱解毒, 즉消 * 作用이강한黃連, 黃拍, 玄쫓, 苦 흉, 金銀花동의약들올많이첨가함으로써合뺨효 으로발생되는여러증상을治標하고 f 훌防하고자하는목적이있었음을짐작할수있는것이다. 1 2 ) 忍쪽顧地骨皮場의효능과관련하여崔는 a l l o x a n 투여高血廳白鼠에대하여少陽 A t 업 1 홉에사용하는 따隔散火楊, 忍쪽顧地骨皮楊, 熟地黃좀흉傷이高血廳의개선에유효한작용을하고있으며, 특히忍혼. 麗地骨皮楊은 廳原에 수반되는 高服血효을 개선시키 I ) 는데 유효하다고 하였다 高 는 s e r e p t o z o t o c m 을투 여한高血廳白鼠를대상으로 한활驗에서忍쪽훌훌 地骨皮傷의血廳降下機能을입증할수있었다고하였다. 著者는이와는다른관점에서消 1없中消 ) 의합병 증으로나타나는盤핍등의병증에忍 4 顧地骨皮楊 이어떠한작용을할것인지알아보기위해鎭痛, 消 * 作用과免훨作用을중심으로살펴보고, 血廳에 미치는영향과陽管運動에미치는영향도관찰하 였다. 실험적으로廳탱病을유발시키는약물로는 s e r e - p t o z o t o c m 과 a l l o x a n 이있는데 a l l o x a n 은府과뽑廳機能에미치는영향이적으나 s r r e p t o z o t o c i n 은간과신 장기능에미치는영향이크다고알려져있다. J \ 7τ 꺼. \ 본실험에서는廳原病윤유발시키기위해 s t r e p t o - z o t o c m 및 a l l o x a n 쓸모두사용하였다. 생쥐에 s t r e - p t o z o t o c m 을투여하고 2 4 시간후에血廳順가가장 높았으며, 시간이경과됨에따라약간減少하는경 향을나타냈으나, 忍쪽顧地骨皮傷 \ I J T E ) 투여군은 s t r e p t o z o t o c m 투여군에비해별차이가없거나오히 려 t 曾加하는경향을나타내었다. A l l o x a n 투여시에도비슷한결과를나타내었으며, 廳負뻐실험에서도 I J T E 는혈당을강하시키지못하였다이러한결과는 1 2 ) I ) ) 崔나高의실험과는다른결과로, 本 P : 驗에서 는이들의실험보다약물투여기간이짧았던점에 비추어불때투여기간에따른작용상의차이가있다고생각할수있으며, 向後이에대한돼究도필 요할것으로생각된다. 만, 血廳低下는 i n s u l i n 분비에의해촉진되기도하지 陽運動의柳制에의해吸收가나빠져서도일어 날수있다 1 9 ). I J T E 를투여하고장운동을측정한결 과실험대조군인 a e r o p i n e s u l f a t e 보다는약하였지만 장운동이때制되었다는것은 I J T E 가장운동을억제하여血廳을低下시킬수있음을시사하는것이다. 그러나 s t 때 t o z o t o c m 및 a l l o x a n 투여시 I J T E 가혈당 강하작용이없었다는앞의실험결과와비교할때 서로相당되는결과이지만, 혈당강하작용실헝이 7 일간지속적으로훌리料를공급하연서측정한결과이 기때문에이들결과를相對的으로비교하는것은 문제점이있다고사료된다. 다만陽運動이柳制되었 다는사실은中消의특정인 消뤘善 A A ' 를解消하는 忍깡顧地骨皮傷의효능을간접적으로보여주는것으로생각할수도있올것이다. 高血鷹시나타날수있는합병증에대한作用을 검토하기위해, a c e t i c a c i d 에의한 w r i t h i n g s y n d r o m e 횟수랄측정하는鎭痛作用실험에서 I J T E 투여군은 진통효과가 6 4. 1 % 로약울대조군인 a m i n o p y r i n e 5 1 % 보다강력하게나타났다. 이는 I J T E 가鎭痛作用을 가지고 * 있음을의미한다효의정과는 3 7 1 로나눌수있는데, 제 l 기는 血管透過性 J t 進期로국소자극이가해진부위에서 h i s t a m i n e 과같은화학적媒介物이유리되어, 혈관 內皮細뼈에변화가일어나혈관이續張되고혈관투과성이항진되며, 제 2 기는白血球遊走期로주로 f f 中球의혈관벽에점착하여유주가일어나고, 제 3 기 는增植期로大食細뻔와같은세포에의한슐食作用, 繼維똥빼뼈의증식, 새로운세포간물질의합성촉진, 교원섬유의신생, 육아형성, 椰皮形成등이일어나傷處가치유되는시기이다 4 0 ) 1 1 E 에대한작용을관찰하기위해毛細血管透過性, 急性足浮睡및 } 침흉睡形成에관한실험을실시 하였다 E v a n s b l u e 에의한모세혈관투과성실험에서모세 혈관투과성억제효과가 I J T E 투여군은 5 5. 2 % 로약 물대조군인 s o d i u m s a l i c y l a t e 6 4. 8 % 보다는약하였지 만약 5 0 % 이상毛細血管透過性을휘 l 制하는작용 플나타내었다. H i s t a m i n e 에의한急性足浮睡실험에서 h i s t a m i n e 투여후 l 시간이내에억제효과가나타나연항바 - t a m m e 작용이있는것이며, 1 시간이후에억제효과 가나타나면 s t e r o i d 작용이있는것으로얄려져있 다 2 6 ) I J T E 투여군에서 3 0 분이내에억제효과를나 - 1 9 6 -

- 서용배外 1 A 少뼈 A 忍쏟훌! & 융 ) ; 킹이消슴혐훌에미치는. - ' " 타내었다는것은 I J T E 에항 h i s t a m i n e 작용이있음을 시사하는것이다. C o t r o n 야 / l e t 에의한肉흉睡形成실험에서육아종 형성柳制효과가 I J T E 투여군은 2 1. 2 % 로약물대 조군인 s 여 i u m s a l i c y l a t e 3 4. 6 % 보다는약하였지만육아종형성을柳制하는작용올나타내었다. 이러한실 험결과는 υt E 에抗찢作用이있으며, I J T E 를당뇨 병환자에복용시킬 때합병중으로나타날수있는 씻효을억제할수있는작용이있음올시사하는것 이다. 당뇨병에의한합병증을예방하는데생체의免훌系가중요하게작용할수있다. 생체의면역계에미 치는 I J T E 의효과를관찰하기위해연역을담당하 는중요한세포인 8 때線細 R 힘, 牌廣細 8 힘및願뽑大食細뼈의증식, 세포활성물질의분비및훌食能에대한실험올실시하였다. I J T E 는 c o n c a n a v a l i n A 로활성화된흉선세포및 l i p o p o l y s a c c h a r i d e 로활성화된비장세포의세포생존율 올증가시켰다. 이는 I J T E 가 T 임파구및 B 임파구 의增植을많進하는작용이있어, 이들세포에의한 면역능을증가시킬수있음올의미하는것이다. T 입파구중 T H 임파구는 T H I 과 T H 2 의 2 개의 아군으로구분되며, T H I 임파구는 r - I F N 및 I L - 2 를 분비하고, T H 2 임파구는 I L - 4 I L - 5 I L - 6 I L - I O 및 I L - 1 3 둥을분비한다. I L - 2 는 T 세포성장인지 { T C G F ) 로알려져있으며, 주로 C D H 세포에서분비되고 r - I F N 은 C D H 및 C D S + 세포에서분비된다또한 분비된 I L - 2 는 N K 세포를활성화하며, r - I F N 는대 식세포의홉食能을촉진하고, I L - 4 는 I g E 抗體의생 성올촉진하는것으로알려져있다 한편생체에感架이발생되면 C D H T 세포가감염된질병의종류 에따라 T H I 또는 T H 2 세포중어느한쪽으로분 화하게되어, T H I π H 2 의비율이변화합으로써분 비되는각종세포활성물질의종류에차이가생기게 된다 4 1 ) 뼈線細뼈에서분비되는 r - I F N, I L - 2 및 I L - 4 의양 을측정한결과, r - I F N 및 I L - 2 의양은대조군에비 해減少되었으며, I L - 4 의양은별차이가없었다. 이 는 I J T E 투여시흉선세포의 T H 세포중 T H I 임파구를柳制함올의미한다. 牌鷹細뼈에서생성되는 r - l P N, I L - 2, I L - 4, T N F - a 및 I L - I / 3 의양을측정환결과, 대조군에비해 I L - 4 의양은增加하였고, r - I F N 및 I L - 2 의양은별 차이가없었으며, T N F - a 및 I L - I / 3 의양은減少하 였다. I L - I, I L - 6, I L - S 및 T N F - a 는鏡反廳과직접 적인관련이있으며, 특히自家免훌훌훌환자에게서는이들의양이增加하는것으로알려져있다 4 2ι, 4 I J TπE 투여시牌홈훌細뼈에서 I L - 4 의양이 t 읍加하였. 다는것은 T H 중 T H 2 엄파구를활성화합올의미하 는것이다 복강대식세포에서생성되는 T N F - a 및 I L - I / 3 의 양올측정한결과, I J T E 투여시대조군에비해減少 되었다. 비장세포및복강대식세포에서 T N F - a 및 I L - I / 3 의양이감소하였다는것은 I J T E 가이들세포활성물질올조절하여 * 효反應올柳制할수있음올시사하는것이다. 포유류의호중구와대식세포는위족형성올하는 동안식작용분자의 c y r o s k e l e r o n 이 c y r o s o l i c G - a c t i n m o n o m e r s 로부터 F - a c t i n p o l y m e r i z a i o n 으로변화한 다얘찌 N i r r i c o x i d e ( N O ) 는인간호중구의 F - a a i n 양 을감소시키며, p h a g o s o m e 에서산소대사산물의생성 을억제하여 4 6 ), 성숙대식세포의위족형성과탐식능 을억제하는것으로알려져있다 4 7 ) 또한찢효時에 는 N O 의양이增加된다고알려져있다 4 8 쩨복강대식세포로부터분비되는 N O 의양을측정한결과, I J T E 투여군에서 N O 의분비가대조군에비해減少 하였다는것은 I J T E 가 N O 의分泌를柳制하여염증 에작용할수있음을시사하는것이다. 탐식능은 O p S O n i C a a l V l t y 의반웅올증가시키는 l u c i g e n i n 올이용하여식세포 c h e m i l u m i n e s c e n c e ( C L ) 를 측정하였다. ) 0 ) C L 은 l u m i n o l 또는 l u c i g e n i n 둥에의해 증가되는데, l u m i n o l - d e p e n d e n r α 은 m y c l o p e r o x i d a s e - H 2 0 2 s y s t e m 과관련되어있으며, l u c i g e n i n - d e p e n d e n r C L 은식세포에의해생성되는 s u p e r o x i d e 와관련이 있는것으로알려져있다. I J T E 를투여한복강대식세포에서대조군에비해 l u c i g e n i n α 이 t 홈加하였으며, F I T C - c o n j u g a t e d E. c o l i p a r t i c l e s 을이용하여현미경으로복강대식세포에 u p t a k e 되는 p a r t i c l e s 를관찰한결과, I J T E 투여군에서 E. c o l i p a r t i c l e s 의螢光이 t 홉加됩올확인하였다. 이는 I J T E 가복강대식세포의슐食能을증가시킴올의미 하는것이다. 이러한결과가복강대식세포로부터 - 1 9 7 -

- 사상채질의학회지재 1 2 권채 1 효 2! X X ) - n i t r i c o x i d e 의生成이柳훤 l 된결과라추정되나자세한것은추후맑究되어야할것이다. v. 結뚫 少陽 A 忍좋顧地骨皮楊이中消合 f 휴 f i E 에미치는 影響을살펴본結果는다음과같다. l 陽管運動을柳制하였다.. t i i.. 2 A c e c a c d 에 의한 w r i t h i n g s y n d r o m 을쩌1 制하였 다 3. E v a n s b l u e 에의한毛細血管透圖훈을 빼힘봐였다 4. H i s t a m i n e 에의한急性足浮睡올柳制하였다 5. C o t t o n p e l l e t 에의한肉했훌形成을柳制하였다. 6 뼈線細 8 힘 및 牌鷹細뼈의 細 8힘生存率을 t 홈加시켰 다 7. 뼈線細뼈로부터 r - I F N 및 I L - 2 의分泌룹柳制하 였다 8. 牌戰細뼈로부터 I L - 4 의分泌는 t 홈加시켰으나, T N F - a 및 I L - l { 3 의分泌는柳힘 l 하였다. 9. 題股大食細뼈로부터찌 F - a, I L - I { 3 및 n I t r i C o x i d e 의分泌를柳制하였다. 1 0. 願뺨大食細脫의 l u c i g e n i n c h e m i l u m i n e s c e n c e 및 F I T C - c o n j u g a t e d E. c o l i e n g u l f m e n t 를 t 足進하였다. 이상의實驗結果 I J T E 는陽管運動을柳制하였으 며, 鎭痛및抗作用을나타냈고, 이들작용은免授細脫로부터재 F - a, I L - I β 및 n i t r i c o x i d e 의生成을 柳制하기때문인것으로추정된다. 따라서이러한 擬轉에의하여忍 캉顧地骨皮傷은中消合 m f i E 의하 나인까 f i E 을柳制하는데有效한것으로恩料된다 參考文敵 l 李濟馬 : 東훌훌홉世保元, 서울, 종林出版, p p. 8 6-9 1, p. 1 0 4, 1 9 8 6 2. 申戰觀 : 廳民病과消뼈, 서울, 成輔社, p p. 1 3-1 7, p p. 8 9-9 1, 1 9 8 5 3. 朴炳昆 : 韓方臨똥四十年, 서울, 흙林書院, p p. 3 3 8-3 3 9, 1 9 7 3 4 金永萬 : 廳民病의韓方鷹法, 東洋醫學, 4 : 3 4, 1 9 7 8 5. 金龍國 : 廳民病의心身훌훌學的測面에對한四象 홈戰성考察, 四象톨훌學會誌, 1 ( 1 ) : 6 1, 1 9 8 9 6. 金應模 : 韓홈學的으로본廳 I / j ( 病의擔說, 大韓韓 g 훌學會誌, 2 ( 1 ) : 7 4, 1 9 8 1 7. 朴鎬끓둥 : 東홈內科學, 부천, 홈院堂, p p. 4 6 3-4 7 0, 1 9 8 5 8. 柱鎬京 : 東훌뽑系內科學, 서울, 東洋홈學돼究院, p p. 5 1 8-5 7 I, 1 9 8 6 9 許浚 : 東醫寶廳, 서울, 南山堂, p p. 5 0 6-5 1 1, 1 9 7 2 1 0 朱震亨 : f t 앓心法, 中國, 五州出版社, p p. 4 9 9-5 0 4, 1 9 7 5 I I 危亦林 : 世醫得效方, 中國짧學大系, 商務印홉館, 1 4 : 2 2 3-2 3 1, 1 9 9 0 1 2. 崔炳 - 少陽 A W - 룹散火楊과忍좋顧地骨皮楊 및熟地黃좀흉楊이 A l l o x a n 投與高血廳白鼠에미치는影響, 四象훌훌學會誌 l 어 2 ), 1 9 9 9 1 3. 高基德 : 少陽 A 에應用되는忍 쪽麗地骨皮傷이 s t r e p t o z o t o c m 投與高血廳白鼠에미치는迎香, 四象團學會誌 2 ( 1 ), 1 9 9 0 1 4. L i k e, A. A. a n d R o s s i n i, A. A. : S t r e p t o z o t o c i n - i n d u c e d p a n c r e a t i c i n s u l i t i s n e w m o d e l o f d i a b e t e s m e l l i t u s. S c i e n c e, 1 9 3 : 4 1 5-4 1 7, 1 9 7 6 1 5. O k a b a y a s h i, Y., O t s u k i, M., O h k i, A., T a n i, S. a n d B a b a, S. : I n c r e a s e d { 3 - c e l l s e c r e t o r y r e s p o n s i v e n e s s t o c e r u l e t i d e a n d T P A i n s t r e p t o z o t o c i n - i n d u c e d m i l d l y d i a b e t i c r a t s. D i a b e t e s, 3 8 : 1 0 4 2-1 0 4 7, 1 9 8 9 1 6. J u n o d, A., L a m b e r t, A. E., S c r a u f f a c h e r, W. a n d R e n o l d, A. E. : D i a b e t o g e n i c a c t i o n o f s t r e p t o z o t o c i n : R e l a t i o n s h i p o f d o s e t o m e t a b o l i c r e s p o n s e. J C l i n. I n v e s t., 4 8 : 2 1 2 9, 1 9 6 9 1 7. B o n n e r - w e i r, G. c. : R e s p o n s e s o f n e o n e t a l r a t i s l e t s t o s c r e p t o z o t o c i n. D i a b e t e s, 3 0 : 6 4, 1 9 8 2 1 8. W e a v e r, D. C., M c d a n i e l, M. L., N a b e r, S. P., B a r r y, D. a n d L a c y, P. E. : A l l o x a n s t i m u l a t i o n a n d i n h i b i - t i o n o f i n s u l i n r e l e a s e f r o m i s o l a t e d r a t i s l e t s o f μ 1 g e r h a n s. D i a b e t e s, 2 7 ( 1 2 ) : 1 2 0 5, 1 9 7 8 1 9. R h i n e h a r t, B. L., R o b i n s o n, K. M., L i u, P. S., P a y n e, A. j., W h e e l e y, M. E. a n d W a g n e r, S. R. : I n h i b i t i o n o f i n t e s t i n a l d i s a c c h a r i d a s e s a n d s u p p r e s s i o n o f b l o o d - 1 9 8 -

- 서용배外 1 A : 少빼 A 忍 I i 뺑톰! I l ; 껴이 c p 뼈슴! l 에미치는. - g l u c o s e b y a n e w a - g l u c o h y d r o l a s e i n h i b i t o r - M D L 2 5 : 6 3 7, 1 9 8 7 2 0. B. A. W h i t t l e : B r i r. ]. P h a r m a c o l., 2 2 : 2 4 6, 1 9 6 4 2 1. K. S h i m o m u r a : ]. P h a r m., 2 4 : 8 3 7, 1 9 7 2 2 2. E. S. G o l u b a n d ). K. S p i t z n a g e l : ]. I m m u n o l. 9 5 : 1 0 6, 1 9 6 0 2 3. 허인회, 이상준, 김영준 : D a i d z e n 의항영작용과그작용기전에관한연구 I ), Y a h h a k h 이 i, 3 1 ( 3 ) : 1 5 4, 1 9 8 7 2 4. Y. H a r a a n d S. T o m i z a w a : F o l i a P h a r m a c o l. J a p a n, 7 3 : 5 5 7, 1 9 7 7 2 5. W y s o c k i, L. J. a n d S a t o, V. L. : P l a n n i n g f o r l y m p h o - c y t e s : A m e t h o d f o r c e l l s e l e a i o n. P r o c. N a t 1. A c a d. S c i. U S A. 7 5 : 2 8 4 4, 1 9 7 8 2 6. M i z e l, S. B., O p e n h e i m, ]. ]. a n d R o s e n s t e i c h, D. L. : C h a r a C t e r i z a t i o n o f I y m p h o c y t e - a α i v a t i n g f a a o r ( L A F ) p r o d u c e d b y t h e m a c r o p h a g e c e l l l i n e P 3 8 8 D 1. ). I m m u n o l. 1 2 0 : 1 4 9 7, 1 9 7 9 2 7. M o s m a n n, T. : R a p i d c o l o r i m e t r i c 양 s a y f o r c e l l u l a r g r o w t h a n d s u r v i v a l : a p p l i c a t i o n t o p r o l i f e r a t i o n a n d c y t o t o x i c a s s a y s. ). I m m u n o l. m e t h o d s. 6 5 : 5 5, 1 9 8 3 2 8. K o t n i c, V. a n d F l e i s c h m a n n, W. R. J r. : A s i m p l e a n d r a p i d m e t h o d t o d e t e r m i n e h e m a t o p o i e t i c g r o w t h f a c t o r a 띠 v i t y. ). I m m u n o l. m e t h o d s. 1 2 9 : 2 3, 1 9 9 0 2 9. R o c k e t t, K. A., A w b u r n, M. M., C o w d e n, W. B. a n d C l a r k, L A. : K i l l i n g o f P l a s m o d i u m f a c i p a r u m i n v i t r o b y n i t r i c o x i d e d e r i v a t i v e s. I n f e c. I m m u n i t y, 5 9 ( 9 ) : 3 2 8 0, 1 9 9 1 3 0. B o u d a r d, F., V a l l o t, N., C a b a n e r, e. a n d B a s t i d e, M. : C h e m i l u m i n e n s c e n c e a n d n i t r i t e d e t e r m i n a t i o n s b y t h e M A L U m a c r o p h a g e c e l l l i n e. ). I m m u n o l. M e t h o d s, 1 7 4 : 2 5 9, 1 9 9 4 3 1. B l a i r, A. L., C r e e, l. A., B e c k, ). S. a n d H a t i n g, M. J. G. : M e a s u r e m e n t o f p h a g o c y t e c h e m i l u m i - n e n s c e n c e i n a m i c r o t i t e r p l a t e r m a r. ). I m m u n o l. M e t h o d s, 1 1 2 : 1 6 3, 1 9 8 8 3 2. S a h l i n, S., H e d, ]. a n d R u n d q u i s t, 1. : D i l f e r e n - t i a t i o n b e t w e e n a t t a c h e d a n d i n g e s t e d i m m u n e c o m p l e x e s b y a f l u o r e s c e n c e q u e n c h i n g c y c o f l u o r o - m e c r i c a s s a y. ]. I m m u n o. M e t h o d s, 6 0 : 1 1 5, 1 9 8 3 3 3. C h o k, P. W., C h n, S. P. a n d B e n j a m i n, H. S. : A r a p i d a n d s i m p l e m i c r o - f l u o r o m e t r i c p h a g o c y c o s i s a s s a y. ]. I m m u n o. M e c h o d s, 1 6 2 : 1, 1 9 9 3, :,,, 3 4. 洪淳用李 Z 浩四象짧學鳳꿇 서울 혼林出版 p. 3 0 4, 1 9 9 2,,,,.,. :,,,. -, 3 5. 全國韓홈科大學本草學敎室本草學 서울 永林社 p 2 3 7 1 9 9 2 3 6 李文鎬둥 內科學 서울 學林社 p p 2 2 0 9 2 2 3 1 1 9 8 6 3 7. R e r u p, e. e. : D r u g s p r o d u c i n g d i a b e t e s t h r o u g h, d a m a g e o f t h e i n s u l i n s e c r e t i n g c e l l s. P h a r m a c o l. R e v. 2 2 : 4 8 5-5 1 8, 1 9 7 0 3 8. E v a n, A. P., M o n g, S. A., G a t c o n e, V. H., C o n n o π B. A., A r o n o f f, G. R. a n d L u f t, F. e. : T h e e f f e c t o f s t r e p t o z o t o c i n a n d s t r e p t o z o t o c i n i n d u c e d d a i b e t e s o n t h e k i d n e y. R e n a l. P h y s i o l. 7 : 7 8-8 9, 1 9 8 4 3 9. L a z a r o w, A : P r o c e e d i n g s o f t h e S o c i e t y f o r E x p c - r i m e n t a l B i o l o g y a n d M e d i c i n e. 6 1 : 2 8 0, 1 9 6 4 4 0. H. S a i c o : S c r e e n i n g m e t h 여 s f o r d r u g c v a l u a r i o n ( I l l ), 9 : 4 5, H i r a k a w a p u b l i s h i n g c o m p a n y, T o k y o, J a p a n, 1 9 8 9 4 1. A b b a s, A. K., L i c h t m a n, A. H. a n d P o b e r, ]. S. : C e l l u l a r a n d m o l e c u l a r i m m u n o l o g y. 2 e d. S a u n d e r s, p p. 2 4 3-2 5 7, 1 9 9 4 4 2. R o s e n s t r e i c h, D. L. a n d Y o s r, S. L. : H u m a n u r i n e - d e r i v e d i n h i b i c o r s o f i n t e r l e u k i n - 1. R e v i e w s o f i n f e c - t i o u s d i s e a s e. 9 : S 5 9 4, 1 9 8 7 4 3. D a y e r, J. M. : C h r o n i c i n f l 없 n m a c o r y j o i n t d i s e a s e s ' n a t u r a l i n h i b i c o r s o f i n t e r l e u k i n - I a n d t u m o r n e c r o s i s f a c c o r - a. ). R h e u m a c o l o g y, 1 8 : 7 1, 1 9 9 1 4 4. S h e t e r l i n e, P. a n d R i c k a r d, J. E. : T h e c o r c i c a l a c t i n f i l a m e n t n e t w o r k o f n e u t r o p h i l l e u k o c y r e s d u r i n g p h a g o c y c o s i s a n d c h e m o t a x i s. C R C P r e s s, B o c a R a c o n, F L. p p. 1 4 1-1 6 5, 1 9 8 9 4 5. J a c o n i, M. E. E., L e w, D. P., C a r p e n t i e r, J. L., M a g n u - s s o n, K. E., S j o g r e n, M. a n d S r e n d a h l, O. : C y c o s o l i c f r e e c a l c i u m e l e v a t i o n m e d i a t e s t h e p h a g o s o m e - l y s o s o m e f u s i o n d u r i n g p h a g o c y c o s i s i n h u m a n n e u t r o p h i l s. J. C e l l B i o I., I I α 5 ) : 1 5 5 5, 1 9 9 0 4 6. F o π l u n d, T. a n d S u n d q v i s t, T. : N i t r i c o x i d e - r e l e a s i n g - 1 9 9 -

- 사상채질의학회지재 1 2 권재 1 효 2 ( X X J - p a r t i c l e s i n h i b i t p h a g o c y t O s i s i n h u m a n n e u t r o p h i l s. B i o c h e m. a n d B i o p h y s i c a l R e s e a r c h C o m m u n i c a t i o n s, 2 3 3 : 4 9 2, 1 9 9 7 4 7. J u n, C D., P a r k, S. K., K i m, J. M., K 띠 I, J. D. a n d C h u n g, H. T. : N i t r i c o x i d e i n h i b i t s m a c r o p h a g e p s e u d o p o d i a f o r m a t i o n i n t h e a c t i v a t e d m a c r o p h a g e s. K o r e a n. J. I m m u n o l. 1 8 : 6 3 5, 1 9 9 6 4 8. I a l e n t i, A., l a n a r o, A., M o n c a d a, S. a n d D i r o s a, M. : M o d u l a t i o n o f a c u t e i n f l a m m a t i o n b y e n d o - g e n o u s n i t r i c o x i d e. E u r. J. P h a r m a c o l., 2 1 1. 1 7 7-1 8 2, 1 9 9 2 4 9. I a l e n t i, A., M o n c a d a, S. a n d D i r o s a, M. : M o d 띠 a - t i o n o f a d j u v a n t a r t h r i 띠 b y e n d o g e n o u s n i t r i c o x i d e. B r. J. P h a r m a c o l., 1 1 0 : 7 0 1-7 0 6, 1 9 9 3 5 0. H o l t, M. E., R y a l l, M. E. T. a n d C a m p b e l l, A. K. : A l b u m i n i n h i b i t s h u m a n p o l y m o r p h o n u c l e a r l e u k o - e y r e I w n i n o l - d e p e n d e n t c h e m i l w n i n e s c e n c e : e v i d e n c e f o r o x y g e n r a d i c a l s c a v e n g i n g. B r. J. E x p. P a t h o l. 6 5 : 2 3 1, 1 9 8 4 5 1. B r e i h e i m, G., S t e n d a l I l, O. a n d D a h l g r e n, c. : I n t r a - a n d e x t r a c e l l u l a r e v e n t s i n Iω n i n o l - d e p e n d e n t c h e m i l u m i n e s c e n c e o f p o l y m o r p h o n u c l e a r l e u k o c y t e s. I n f e c t. I m m u n., 4 5 : 1, 1 9 8 4-2 0 0 -