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Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 및 자아존중감과 스트레스와도 밀접한 관계가 있고, 만족 정도 에 따라 전반적인 생활에도 영향을 미치므로 신체는 갈수록 개 인적, 사회적 차원에서 중요해지고 있다(안희진, 2010). 따라서 외모만족도는 개인의 신체는 타

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α 경성대학교식품응용공학부식품생명공학전공 년 월 일접수 년 월 일승인 α α α α α 활성산소종 은 체내의산화촉진물질 과산화억제물질 의불균형으로인해생성되는수퍼옥사이드라디칼 과산화수소 하이드록시라디칼 등의산소화합물을 경성대학교식품응용공학부식품생명공학전공학사과정 주저자


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RESEARCH ARTICLE Kor. J. Aesthet. Cosmetol., Vol. 10 No. 4, , November 2012 선학초에탄올추출물의미용기능성소재개발을위한연구 유민정 1 *, 정은숙 2 1 영남이공대학교박승철헤어과, 2 서울벤처정보대학

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제 출 문 경상북도 경산시 농업기술센터 귀하 본 보고서를 6차산업수익모델시범사업 농산물가공품개발 연구용역 과제의 최종보고서로 제출합니다 년 11 월 19 일 주관연구기관명 : 영남대학교 총괄연구책임자 : 한 기 동 연 구 원 : 김 상 욱 이 수 형 이 상

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112 Ⅰ. 서론 울금은 (CurcumalongaL.) 생강과 Zingiberaceae 의근경으로 phenol 류및그배당체,monoterpene 배당체,tannin, 기타 sucrose 등의성분으로항염 증작용, 항알레르기작용, 항균작용, 중추억제, 위 액분비억제, 진경

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농림축산식품부장관귀하 본보고서를 미생물을활용한친환경작물보호제및비료의제형화와현장적용매뉴 얼개발 ( 개발기간 : ~ ) 과제의최종보고서로제출합니다 주관연구기관명 : 고려바이오주식회사 ( 대표자 ) 김영권 (

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목 차 회사현황 1. 회사개요 2. 회사연혁 3. 회사업무영역/업무현황 4. 등록면허보유현황 5. 상훈현황 6. 기술자보유현황 7. 시스템보유현황 주요기술자별 약력 1. 대표이사 2. 임원짂 조직 및 용도별 수행실적 1. 조직 2. 용도별 수행실적

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Product Description Apoptosis 혹은 necrosis등에의하여죽거나손상된세포에서방출되는 Lactate dehydrogenase(ldh) 의양을고감도로측정함으로써 cytotoxicity/cytolysis를간단하게측정할수있는 kit 입니다. Cytot

Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 아사이베리 (Euterpe oleracea Mart) 는브라질북부아마존열대우림지역인근에서생명의나무라불리며, 인체에유용한단백질과불포화지방산함량이높을뿐만아니라폴리페놀, 안토시아닌, 알파토코페롤, 글루코사민, 퀴닌산, 세로토

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전체 목차 1. 주류 일반 2. 기능성 3. 숙취 4. 주세법 5. 주류 일반 상식 6. 우리술 즐기기

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연구목표 재료및방법 년도시험연구보고서

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보도자료 년 5 월 16 일 ( 목 ) 조간부터보도하여주시기바랍니다. 문의 : 에너지환경표준과최철우과장, 류지영연구사 ( ) 화장품에도국제표준이...? - 화장품도이젠표준선점으로세계시장선도를 - [ 붙임 1

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(72) 발명자 이상현 부산남구오륙도로 85, 101 동 605 호 ( 용호동, 오륙도 SKVIEW 아파트 ) 김미향 부산남구신선로 566, 308 동 1404 호 ( 용호동, GS 하이츠자이 ) 전명제 부산사하구신산북로 63, 나동 301 호 ( 신평동, 중앙쉐르빌

Pharmacotherapeutics Application of New Pathogenesis on the Drug Treatment of Diabetes Young Seol Kim, M.D. Department of Endocrinology Kyung Hee Univ

기관고유연구사업결과보고

Transcription:

Korean Chem. Eng. Res., 53(3), 289-294 (2015) http://dx.doi.org/10.9713/kcer.2015.53.3.289 PISSN 0304-128X, EISSN 2233-9558 여주열매추출물의기능성화장품소재특성 김현우 신혜진 황단비 이지은 정향리 김동욱 인제대학교제약공학과 621-749 경남김해시어방동 607 번지 (2014 년 8 월 26 일접수, 2014 년 10 월 6 일수정본접수, 2014 년 10 월 11 일채택 ) Functional Cosmetic Characteristics of Momordica charantia Fruit Extract Hyun-woo Kim, Hyejin Shin, Danbi Hwang, Jieun Lee, Hyangli Jeong and Donguk Kim Department of Pharmaceutical Engineering, Inje University, 607 Eobang-dong, Gimhae, Gyongnam 621-749, Korea (Received 26 August 2014; Received in revised form 6 October 2014; accepted 11 October 2014) 요 약 본연구에서는여주열매의열수및에탄올추출물에서기능성화장품소재로서의가능성을검토하였다. 여주열매의열수및에탄올추출물은유효성분으로폴리페놀의함량이각각 69.45±0.07 mg/g, 70.87±0.06 mg/g 로높은농도를나타내었다. 여주열매의열수및에탄올추출물은세포독성시험 (MTT assay) 결과, 100~1,000 µg/ml 범위의농도에서전혀세포독성을나타내지않았다. 미백효과시험결과 tyrosinase 억제능은대조군인 arbutin 보다는다소낮았으나, DOPA 산화억제효과는 arbutin 보다우수하였다. 주름개선효과는 elastase 억제효과로평가되었으며열수및에탄올추출물은대조군인 adenosine 보다는다소떨어졌으나농도가증가할수록비슷한수치를보여주었다. 여주열매추출물을함유한액제및로션제의온도안정성시험결과, 액제는 28 일동안 ph, 점도, 외관의변화가안정적이었으나로션제형의경우점도의변화가심하여제형의보완이필요한것으로나타났다. 따라서여주열매의열수및에탄올추출물은필요에따라미백혹은주름개선기능성화장품소재로서높은가능성을보여주었다. Abstract In this research, water and ethanol extract of Momordica charantia shells, fruits and seeds were tested to see possibility as natural functional cosmetic agent. Water and ethanol extract showed 69.45 mg/g and 70.87 mg/g polyphenol concentration, respectively. Momordica charantia water and ethanol extracts did not indicate cell toxicity up to 1,000 µg/ml concentration in MTT assay. Tyrosinase inhibition effects of water and ethanol extract were lower than arbutin, however, ethanol extract showed better DOPA oxidation inhibition effect than arbutin. Elastase inhibition effects of ethanol extract displayed similar efficacy with adenosine at higher concentrations. Solution formulations (5% extract) were stable for 28 days in both extracts, however, lotion formulation (1% extract) showed considerable variation in viscosity whereas ethanol extraction indicated relative stability. In conclusion, water and ethanol extract of Momordica charantia shells, fruits and seeds indicated strong possibility for whitening and antiwrinkle functional cosmetic ingredient. Key words: Momordica charantia, Whitening, Anti-wrinkle, Safety, Stability 1. 서론 사람은그외모를아름답게가꾸고자하는본성이있다. 인류의소득이증가함에따라자연스럽게화장품의구입이늘어나고있으며이는전세계적인현상이다. 2011년도국내화장품시장규모는 6 조 5,898억원으로매우큰시장을형성하고있으며전년대비 4.5% 의건실한성장을하였다 [1]. 또한화장품은한류의영향을가장크 To whom correspondence should be addressed. E-mail: pedkim@inje.ac.kr This is an Open-Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License (http://creativecommons.org/licenses/bync/3.0) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited. 게수혜받는품목으로화장품수출은 8,915억원으로전년대비 29.2% 가증가하는높은신장세를보이고있다. 최근급격한화장품시장의확대에발맞추기위해많은화학, 식품, 의약품분야의업체들이화장품분야에새로이진출하고있다. 화장품은크게기초화장품, 기능성화장품, 두발화장품, 색조화장품, 향수및기타 ( 영유아용제품, 면도용제품, 목욕용제품등 ) 로서구분할수있다 [2]. 이중국내시장기준으로기초화장품이 2011년기준 2조 7,310억원으로 42.8% 의점유율을보이며, 이어서기능성화장품이 1조 6,420억원으로 25.7% 의점유율을보이고있다. 두제품류를합치면 68.5% 로전체시장의 2/3를차지한다. 세계화장품시장규모역시매우방대하여 2011년기준 2,428억달러로 2010년 2,337 억달러보다 3.9% 증가하였으며, 지역별시장규모는유럽이 890억 289

290 김현우 신혜진 황단비 이지은 정향리 김동욱 달러로세계시장의 36.7%, 아시아와태평양지역 795억달러 (32.8%), 북미 / 중남미 676억달러 (27.8%) 를차지하였다 [1]. 화장품은국내화장품법에따르면 인체를청결 미화하여매력을더하고용모를밝게변화시키거나피부 모발의건강을유지또는증진하기위하여인체에바르고문지르거나뿌리는등이와유사한방법으로사용되는물품으로서인체에대한작용이경미한것을말한다 라고정의되어있다 [3]. 또한기능성화장품은 피부의미백, 주름개선에도움을주는제품과피부를곱게태워주거나자외선으로부터피부를보호하는데에도움을주는제품 으로정의되고있다. 화장품과기능성화장품에대한정의는국가마다다소차이가있어서유럽에서는기능성화장품의범위를광범위하게인증하는반면, 미국은기능성화장품자체를인증하고있지않다. 기초화장품 ( 스킨케어화장품 ) 의구성성분으로는크게수성성분 ( 정제수, 친수성성분 ), 유성성분 ( 식물성오일, 왁스등친유성성분 ), 계면활성제 ( 이온계, 비이온계, 천연계면활성제등 ) 및기타성분 ( 향료, 색소, 방부제, 항산화제, 점증제등 ) 으로이루어져있으며대부분 20 종이상의화학및천연성분이함유되어있다 [4]. 기능성화장품의경우그기능성 ( 미백, 주름개선, 자외선차단 ) 을나타내는성분이추가로배합되어있다. 화장품의개발에서가장중요한점은화장품소재의개발이다. 특히최근의화장품트렌드는세계적인자연주의바람을타고천연화장품, 유기농화장품이크게인기를끌고있다. 유기농화장품에는가능하면화학성분이적게들어가고가급적이면천연성분, 특히유기농재배가가능한식물성소재가다량으로사용되어져야한다 [5]. 따라서전세계적으로화장품기업, 연구자들은다양한화장품소재의개발을위해식물, 해조류, 미생물등다양한소재에대해화장품소재로서의가능성을시험하고있다. 본연구에서는안전하고효능적인소재의개발을위해여주열매로부터기능성화장품소재의가능성을검토하였다. 여주는박과에속하는한해살이덩굴성풀이며, 여러개의가지가분지되어있고가늘고보드라운털이있다 [6]. 여주는예전부터덩굴성열매의관상용식물로재배되었으나지금은식용으로도재배가되고있다. 여주는현재식용외에뛰어난약효가인정되어새로운각도에서주목받고있다. 여주에는 Charantin이라는혈당강하성분이분리되어당뇨병과합병증의예방에활용될것을기대하고있으며, 비타민과미네랄이풍부하게함유되어있다고알려져있다 [7, 8]. 또한여주는피부가붉은증상, 피부의염증, 피부의악창을치료하는데사용되기도하여피부와관련된역할을가질것으로기대된다. 따라서본연구에서는여주열매에서열수및에탄올추출을실시하여얻은추출물에대해기능성화장품소재로서의가능성을시험하였다. 여주열매추출물의폴리페놀함량을측정하였고, 화장품소재의안전성시험, 유효성시험 ( 미백, 주름개선, 항산화효과시험 ) 및안정성시험 ( 액제와로션의온도안정성시험 ) 을실시하여기능성화장품소재로의응용가능성을살펴보았다. 2. 실험 2-1. 여주추출물본실험에서사용한여주는경남함양의농장에서구입하였으며, 세척한후토막내어껍질, 열매속, 씨를모두포함하여실험재료로사용하였다. 여주의열수추출물은다음과같이얻어졌다 [9,10]. 여주 400 g에정제수 800 ml을더하여약 100 o C에서 4시간동안열을가 하여 40% 의중량이되도록 1회열수추출하였다. 이추출물을 200 메쉬 (0.75 µm) 여과포를이용하여여과한후동결건조하여사용하였다. 여주의에탄올추출물은다음과같이수득하였다. 여주 400 g 을 800 ml의 70% 에탄올에더하여실온 25 o C에서 4시간동안담구어 110% 의중량이되도록 1회에탄올추출하였다. 이추출물을 200 메쉬여과포를이용하여여과한후동결건조하여사용하였다. 실험시시료의농도는증류수에희석하여 100%, 50%, 35%, 20% 및 10% 의농도로시험에사용되었으며, 이를여주의건조농도로환산하면각각 1,000, 500, 350, 200 및 100 µg/ml에해당된다. 2-2. 폴리페놀 (polyphenol) 함량측정여주추출물의활성성분에대한농도측정을위해폴리페놀의함량이측정되었다. 폴리페놀함량은 Folin-Denis법을응용하여다음과같이측정하였다 [11]. 추출물 200 µl와 Folin-Denis 시액 200 µl를혼합하고실온에서 3분간반응시킨후, 2 M Na 2 CO 3 400 µl와증류수 200 µl를용액에첨가하고실온에서 30분간반응시켰다. ELISA reader(powerwave XS2, BioTek, USA) 로 725 nm에서흡광도를측정하여폴리페놀의함량을구하였다. 2-3. 안전성시험 (safety test) 화장품소재의안전성시험으로세포독성시험인 MTT assay가사용되었다. 정량은 Mosmann 방법을변형하여측정하였다 [12]. B16 F10 mouse melanoma cell( 한국세포주은행 ) 을 1 10 4 cell/ml 씩분주하여 24시간배양후 100~1,000 µl/ml의농도로희석한추출물의시료가첨가된새배지로교체하고다시 24시간동안배양하였다. 여기에 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, Sigma) 를각 well당 20 µl 첨가한후 37 o C, 5% CO 2 incubator (Sanyo, Japan) 에서배양 2시간후형성된 formazan을 200 µl DMSO에녹이고, 595 nm에서 ELISA reader(powerwave XS2, BioTek, USA) 로흡광도를측정하였다. 세포생존율 (cell viability) 은아래의식으로계산되었다. Cell viability(%) = [(Exp.-Blank)/Control] x 100 Exp: 세포를포함한추출물의흡광도 Blank: 세포를포함하지않은추출물의흡광도 Control: 세포를포함한증류수의흡광도 2-4. 효력시험 (efficacy test) 미백효과시험은 tyrosinase 억제효과시험 (tyrosinase inhibition assay) 과 DOPA 산화억제효과시험 (DOPA oxidation inhibition assay) 에의해수행되었다. Tyrosinase 억제효과시험은다음과같이수행되었다 [13]. 0.1 M sodium phosphate buffer(ph 6.8) 220 µl, 각농도별로희석시킨추출물 20 µl와 mushroom tyrosinase(2,000 U/mL, Sigma, USA) 20 µl를 1.5 mm L-tyrosine 40 µl와혼합한후 37 o C에서 10 분간반응시키고, 490 nm에서흡광도를측정하였다. DOPA산화억제효과시험은다음과같이실시되었다 [14]. 0.1 M potassium phosphate buffer(ph 7.0) 200 µl, 추출물 40 µl와 tyrosinase 20 µl를혼합후 37 o C에서 6분간반응시키고, 2 mm의 L-DOPA(3,4-Dihydroxy-Lphenylalanine) 40 µl를혼합하여 25 o C에서 1분간반응후 ELISA reader로 475 nm에서흡광도를측정하였다. 주름개선효과시험은 elastase 억제효과시험 (elastase inhibition

여주열매추출물의기능성화장품소재특성 291 assay) 를이용하여수행되었다 [15]. 0.2 M Tris-HCl buffer(ph 8.0) 200 µl에추출물을 100~1,000 µg/ml로희석시킨시료용액 20 µl와기질 1.0 mm N-succinyl-(Ala)3-ρ-nitroanilide 20 µl를첨가하였다. 2.5 U elastase(porcine pancreas solution) 20 µl를첨가하여 25 o C에서 10분반응후 ELISA reader로 410 nm에서흡광도를측정하였다. 항산화효과시험은 DPPH free radical-scavenging assay로측정하였다 [16]. 100 µl의 DPPH(α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl, Sigma, USA) 에 200 µl 추출물을실온에서빛을차단한후 20분간반응시켰다. 그후 ELISA leader(synergy HT, BIOTEK, USA) 로 517 nm 파장에서흡광도를측정하여항산화능을구하였다. 각실험결과는 3회반복측정되었으며평균 ± 표준편차로나타내었다. 2-5. 온도안정성시험 (Temperature stability test) 여주추출물이함유된액 (solution) 과로션 (lotion) 제형의화장품을제조하여온도안정성시험을실시하였다. 액은여주추출물 5%, rose water 40%, 히아루론산 2%, 글리세린 3% 와정제수 50% 로구성되었으며, 로션은여주추출물 1%, 코코넛유 12.5%, sweet almond oil 12.5%, 왁스 5.5%, 방부제 3.5% 및정제수 65% 로이루어져있다. 온도안정성시험으로 25 o C의조건에서 28일간액과로션제형의화장품에대해 ph, 점도및외관 ( 상분리, 색상 ) 의변화를관찰하였다. 점도는 Brookfield 점도계 (DV-1, USA) 를사용하였으며, 액제는 S63 spindle, 로션은 S64 spindle을이용하여 60 rpm 속도에서 30초간측정하였다. 3. 결과및고찰 3-1. 폴리페놀 (Polyphenol) 함량여주에는다양한유효성분이함유되어있는것으로알려져있으며그중대표적인성분들이 polyphenol계물질들이다. 본연구에서는여주열매추출물의유효성분분석의일환으로 Folin-Denis법을응용하여폴리페놀의농도를측정하였다. 여주열매의열수추출물은 69.45±0.07 mg/g, 에탄올추출물은 70.87±0.06 mg/g의폴리페놀함량을보여주어그농도에는큰차이가없었다. 문헌자료에는여주열매에서 95% 에탄올을사용한경우 68.8 mg/g, 열수를사용한경우 51.6 mg/g의폴리페놀농도가보고되었다 [11]. 천연소재의특성상사용된시료의품종, 지역등의차이가있어서직접정확한결과를비교할수는없지만, 본실험에사용한여주열매는매우높은폴리페놀함량을보유하고있다. 3-2. 안전성시험특정성분의화장품소재로의응용가능성을살펴보기위해서는무엇보다도소재의안전성이가장중요하다. 의약품과달리화장품은오랜기간동안피부에사용되기에소재의유효성에앞서안전성이우선검토되어야한다. 화장품소재의안전성시험으로는단회투여독성시험, 피부자극시험, 안점막시험, 감작성시험등의동물시험이주로사용되어왔으나, 동물보호등의이유로 EU 등의선진국에서는 2013년부터동물을이용한안전성시험을전면금지하였다. 이에대한대안으로가장널리사용되는안전성시험이세포독성시험인 MTT assay이다. 이시험은살아있는세포 ( 주로 mouse 유래의 melanoma cell을사용 ) 를이용하여추출물이세포를사멸시키는정도를평가하 Fig. 1. Cell toxicity of Momordica charantia fruit extracts by MTT assay. 는시험이다. 여주열수및에탄올추출물에대해세포독성을평가한결과가 Fig. 1에나타나있으며, 대조군으로화장품소재로널리사용되는비타민 C와비교하였다. 100~1,000 µg/ml 범위의농도에서여주열수추출물및에탄올추출물에서세포독성이전혀나타나지않았다. 여주열매의추출물이높은안전성을가짐으로화장품배합시고농도까지사용이가능하여여러면에서유용한장점을가질것으로보여진다. 3-3. 효력시험여주열매추출물의효력시험으로항산화효과, 미백효과및주름개선효과가평가되었다. 국내화장품법상기능성화장품은미백, 주 름개선및자외선차단효과만을인증하고있다. 화장품의기능성은나라마다다르며, 화장품선진국이라고할수있는 EU에서는보다폭넓은기능성을인증하고있으며, 국내식품의약품안전처에서도이런추세에맞추어기능성화장품의범위를넓히는것을적극검토하고있다. 피부에자외선이노출되면표피의기저층에있는 melanoma cell 에서 melanin이생성되며이를표피의대부분을차지하는각질형성세포 (keratinocyte) 에전달하여자외선을흡수함으로서피부세포가보호된다. Melanin 생성의첫번째반응은 tyrosine이 tyrosinase 효소의도움으로 DOPA(dihydroxyphenylalanine) 로전환되며, 이어서 DOPA가 tyrosinase에의해 Dopamine으로전환되는것이두번째반응이다 [17]. 따라서미백효과시험은소재가 melanin 생성의첫번째혹은두번째반응을억제하여 melanin 생성을막음으로서피부를하얗게하는정도를평가하는시험법이다. 여주열매추출물의 tyrosinase 억제효과와 DOPA 산화억제효과가 Fig. 2A, B에나타나있다. 양성대조군으로는화장품용미백소재로가장널리사용되는 arbutin과비교되었다. Tyrosinase 억제효과시험에서여주열매열수및에탄올추출물은 100~1,000 µg/ml 범위에서미백효과가농도의존적으로증가하였으나대조군인 arbutin 보다는다소낮았다. 500 µg/ml의농도에서여주열매의열수추출물, 에탄올추출물은각각 50%, 31% 의억제율을보여주었다. 추출물중에서는열수추출물이에탄올추출물보다 tyrosinase 억제효과가우수하였다. 여주열매열수및에탄올추출물은모두농도의존적으로 DOPA 산화억제효과가증가하였으며, 에탄올추출물의 DOPA 산화억제효과는대조군인 arbutin 보다우수하였다. 그리고 tyrosinase 억제효과와는달리에탄올추출물이열수추출물보다높은억제효과를보여

292 김현우 신혜진 황단비 이지은 정향리 김동욱 Fig. 3. Antiwrinkle effect of Momordica charantia fruit extracts by elastase inhibition assay. Fig. 2. Whitening effect of Momordica charantia fruit extracts. (A) Tyrosinase inhibition, (B) DOPA oxidation inhibition. 주었다. 500 µg/ml의농도에서여주열매의열수추출물, 에탄올추출물은각각 42%, 55% 의억제율을보여주었다. 따라서여주열매추출물을미백화장품에적용시열수추출물은주로 tyrosinase 억제효과를나타내며, 여주에탄올추출물은 DOPA 산화억제효과에의해미백효과를발휘한다고볼수있다. 이는여주열매추출법에대한다양성을증가시켜서여러방법으로소재를획득할수있음을보여준다. 활성산소나자외선에피부가노출되면진피에존재하는섬유아세포 (fibroblast cell) 가자극을받아서 collagenase, elastase와같은분해효소를분비하고이들이 collagen, elastin 등의진피구조구성성분을분해하며. 이는곧피부주름으로나타난다. 따라서주름발생을개선하는근본적인방법은활성산소나자외선으로부터피부를보호하는것이다. 본연구에서여주열매열수및에탄올추출물의주름개선효과가 elastase 억제효과시험 (elastase inhibition assay) 으로평가되었으며, 그결과가 Fig. 3에나타나있다. 양성대조군으로는주름개선화장품소재로널리사용되는 adenosine과비교되었다. 열수및에탄올추출물은 elastase 억제효과가 100~1,000 µg/ml 범위에서농도의존적으로증가하였으며, 에탄올추출물이열수추출물보다높은효과를보여주었다. 또한여주추출물의농도가증가할수록여주열매추출물의효과는대조군인 adenosine과유사하였다. 500 µg/ml의농도에서여주열매의열수추출물, 에탄올추출물은각각 40%, 52% 의억제율을보여주었다. 인간이공기중의산소를이용하여호흡하는한산소중의일부가활성산소 (reactive oxygen species) 로변화되는것을막을수는없다. 활성산소는짝지어지지않은산소로서 superoxide anion, peroxide, hydroxy radical 등의다양한형태를띠고있다 [4]. 인체는 SODcatalase, 비타민 C, E 등의다양한물질을보유함으로서해로운활성산소를제거하는기능을유지하고있다. 그러나과다한자외선노출등 Fig. 4. Antioxidation effect of Momordica charantia fruit extracts by DPPH free radical scavenging assay. 으로인한심한외부자극이발생하면활성산소가모두제거되지못할수가있고이는다른피부조직과의결합을통해피부조직파괴, 주름형성등의결과로나타난다. 본연구에서는항산화효과시험으로 DPPH를사용한자유전자제거효과 (DPPH free radical scavenging assay) 를사용하였다. 이시험은소재의항산화효과를평가하는여러방법중가장널리사용되는시험법이다. 여주열매의열수및에탄올추출물에대한항산화효과시험이 Fig. 4에나타나있다. 여주열매추출물은 100~1,000 µg/ml 범위에서농도의존적으로항산화능이증가하였다. 대조군으로비타민 C가이용되었는데, 비타민 C는매우우수한항산화능으로잘알려져있는물질이나, 화장품으로사용시쉽게분해되어안정성 (stability) 에문제가있는소재이다. 여주열매추출물의항산화능은대조군인비타민 C보다는낮았으나, 추출물에대해농도의존적으로증가하였다. 여주추출물중에서는에탄올추출물이열수추출물보다항산화능이우수하였고, 500 µg/ml의농도에서여주열매의열수추출물, 에탄올추출물은각각 38%, 62% 의억제율을보여주었다. 본연구에서는여주열매추출물을함유한액제와로션제형의기능성화장품의시제품을제작하였다. 액제는여주추출물 5%, rose water 40%, 히아루론산 2%, 글리세린 3% 와정제수 50% 로구성되었으며, 로션제형은여주추출물 1%, 코코넛유 12.5%, sweet almond oil 12.5%, 왁스 5.5%, 방부제 3.5% 및정제수 65% 로이루어져있다. 화장품은다양한친수성, 친유성성분들이서로배합되어있어서고온등의조건에서장기간보관시상분리등의현상이발생하여상품으로의가치를훼손하는경우가발생할수있다. 따라서대부분의화장품은제형개발완료후일정온도조건에서보관하면서화장품

여주열매추출물의기능성화장품소재특성 293 ph의경우처음 7일동안은변화되는양상을보였으나나머지 21일동안은안정적인상태를유지하였다. 점도는 28일기간동안거의변화가없어서매우안정하였다. 또한이기간동안외관을관찰한결과상분리, 색상의변화등이관찰되지않았다. 따라서 5% 여주열매추출물이함유된액제는우수한안정성을나타내었다. 로션제형에대한온도안정성시험의결과가 Fig. 6A, B에나타나있다. 로션제형은액제와달리코코넛유등의유성성분이 30.5% 로다량함유되어있어서제형의개발이한층더까다로운점이존재한다. 28일간의안정성시험결과 ph는약산성의안정한상태를유지하였다. 점도의경우시간이경과함에따라점차증가하는양상을보여주었고, 여주열매의열수추출물이에탄올추출물보다변화의정도가더심하였다. 그러나로션제형에서안정성시험기간동안상분리나색상변화등의외관변화는관찰되지않았다. 차후여주열매의추출물을함유한로션화장품의개발시제형연구에좀더보완이필요한것으로보여진다. 4. 결론 Fig. 5. Stability test of solution formulation including Momordica charantia fruit extract for 28 days. (A) ph change, (B) viscosity change. 본연구에서는여주열매의열수및에탄올추출물에서기능성화장품소재로서의가능성을검토하였다. 여주열매의열수및에탄올추출물은유효성분으로폴리페놀의함량이각각 69.45±0.07 mg/g, 70.87±0.06 mg/g로높은농도를나타내었다. 여주열매의열수및에탄올추출물은세포독성시험 ( 안전성시험 ) 결과, 100~1,000 µg/ml 범위의농도에서모두세포독성을전혀보이지않았다. 미백효과시험결과 tyrosinase 억제능은대조군인 arbutin 보다는다소낮았으나, DOPA 산화억제효과는 arbutin 보다우수하였고특히여주열매열수추출물의억제효과가뛰어났다. 주름개선효과는 elastase 억제효과로평가되었으며열수및에탄올추출물은대조군인 adenosine 보다는다소떨어졌으나농도가증가할수록비슷한수치를보여주었다. 여주열매추출물의항산화능은대조군인비타민 C보다는낮았으나, 500 µg/ml의농도에서여주열매의열수추출물, 에탄올추출물은각각 38%, 62% 의비교적우수한억제율을보여주었다. 여주열매추출물을함유한액제및로션제의온도안정성시험결과, 액제는 28 일동안 ph, 점도, 외관의변화가안정적이었으나로션제형의경우점도의변화가심하여제형의보완이필요한것으로나타났다. 따라서여주열매의열수및에탄올추출물은미백또는주름개선기능성화장품소재로서높은가능성을보여주었다. References Fig. 6. Stability test of lotion formulation including Momordica charantia fruit extract for 28 days. (A) ph change, (B) viscosity change. 의상태변화를관찰하는안정성시험이실시되어지고있다. 본연구에서는온도안정성시험으로 25 o C의조건에서 28일간액제와로션제형의화장품에대해 ph, 점도및외관 ( 상분리, 색상 ) 의변화를관찰하였다. 액제에대한온도안정성시험의결과가 Fig. 5A, B에나타나있다. 1. Health Care Industry White Paper, KHIDI (2012). 2. Korea Minstry of Food and Drug Safety, http://www.mfds.go.kr/ index.do (2014). 3. Korea Ministry of Government Legislation, http://www.law. go.kr/main.html. 4. Kim, J. D., Kim, S. J., Kim, H. S., Park, K. H., Lee, H. S. and Jin, J. E., New Cosmetology, 2nd Ed., Dongwha Publishing, (2004). 5. ECOCERT, http://www.ecocert.com(2014). 6. Muley, B., Dhongade, H., Upadhyay, A. and Pandey, A., Phytochemical Screening and Anthelmintic Potential of Fruit Peels of Benincasa hispida (curcubitaceae), Inter. J. Herbal Drug Res., 1, 5-9(2012).

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