Korean Society for Biotechnology and Bioengineering Journal 28(6): 387-393 (2013) http://dx.doi.org/10.7841/ksbbj.2013.28.6.387 연구논문 양파껍질추출물을함유한안면마스크팩의주름개선효과 전수민 1, 최문희 2, 이용조 2, 신현재 1,2 * Anti-wrinkle Effect of Facial Mask Pack Containing Oinon (Allium cepa) Skin Extracts Soo-Min Jeon 1, Moon-Hee Choi 2, Yong-Jo Lee 2, and Hyun Jae Shin 1,2 * 접수 : 2013 년 10 월 3 일 / 게재승인 : 2013 년 11 월 1 일 2013 The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering Abstract: In this study, the domestic onion skin has been used to investigate the anti-wrinkle effect of the ethanolic extract. The onion skin has been known to contain a large amount of antioxidant including quercetin. Solvent extraction by 80% ethanol was carried out of the onion skin. The high amount of quercetin have been identified using HPLC as a bioactive compound. The extraction yield of the quercetin increased according to temperature up to 80 o C. Two different antioxidant assays (DPPH and ABTS) were performed to determine the free-radical scavenging activity of onion skin extracts. The antioxidant activities (EC 50 of DPPH) of the vitamin C and the onion extracts were 2.2 and 5.09 µg/ml, respectively. The results of ABTS tests were 2.33 (of vitamin C) and 2.40 µg/ml (of the onion extracts), respectively. In a clinical study, a panel of 10 female volunteers between the ages of 30 and 40 (mean age: 42 years) was given a mask pack containing 1% of this extracts for 4 weeks. It was shown that a highly significant reduction in the deep and moderate wrinkled was obtained with those treated with this onion extracts as compared to the control group. The reduction in deep wrinkles increased with time. Eye wrinkle were reduced 1 조선대학교산업대학원미용향장학과 1 Department of Beauty and Cosmetology, Graduate School of Industry, Choson University, Gwangju 501-759, Korea 2 조선대학교화학공학과 2 Department of Chemical & Biochemical Engineering, Chosun University, Gwangju 501-759, Korea Tel: +82-62-230-7518, Fax: +82-62-230-7226 e-mail: shinhj@chosun.ac.kr statistically significant (p<0.05). The application of the proper topical cream and mask pack containing onion skin extracts has therefore shown to be effective enhancing anti-wrinkle activities. Keywords: Anti-wrinkle, Allium cepa, Onion skin, Antioxidant, Facial mask pack 1. 서론 양파 (Allim cepa L.) 는다양한약리학적기능성분을함유하고있는생물소재로알려져있으며, 특히항산화적특성으로식품및미용향장소재로주목받고있다 [1]. 우리식생활에서음식으로섭취되고있는양파는신경퇴행성장애, 암, 백내장형성, 궤양의위험을줄이고골다공증과관련된증상의감소, 혈관및심장질환의예방에도효과가있다 [2]. 양파껍질은보통음식폐기물로인식되어버려지고있는데건조된양파껍질에는항산화제로작용하는 flavonoid 배당체등이있는것으로알려져있다 [3]. 이들 flavonoid 배당체들은간보호효과, 면역향상가능성, 항감염, 항스트레스, 항암등과같은약리성분이있으며, 항산화효과와항돌연변이성효과도보고되었다 [4]. 양파에함유되어있는주요생리적구성성분은 flavonoid, phenolic acid, cepanes, thiosulfinates 및 anthocyanins 로이루어져있으며, 특히껍질부위에항산화활성을나타내는 flavonoid 배당체등이다른부위보다더높게함유되어있다 [5]. 지금까지알려진양파의 flavonoids 화합물은 quercetin, isorhamnetin 과 kaempferol 같은당유도체 16 가지가분리, 동정되었는데그중양파에함유되어있는
388 Korean Society for Biotechnology and Bioengineering Journal 28(6): 387-393 (2013) quercetin은 quercetin 4'-glucoside, quercetin 4',7-diglycoside, quercetin 3,7-diglycoside, quercetin 3,4'-diglycoside, quercetin aglycone, isorhamnetin monoglycoside, kaempferol monoglycoside 등이있으며, 이중 80% 이상이 quercetin diglycoside, quercetin monoglycoside, quercetin aglycone으로구성되어있는것으로보고되었다 [6]. 양파는 flavonol 중 quercetin의함량이가장높은데 quercetin은양파육질부분보다양파껍질에함량이더높은것으로보고되었다 [7]. 피부의주름은세포노화과정으로부터기인하는생리적현상으로생체내에서활성질소종 (reactive nitrogen species, RNS), 활성산소종 (reactive oxygen species, ROS) 과같은물질의생성으로부터발생한다. 활성산소 (oxygen free radical) 는호흡하는산소와는다른불안정한상태에있는산소로과산화수소 (hydrogenperoxide, H 2 O 2 ), 하이드록시라디칼 (hydroxylradical, OH), 슈퍼옥사이드 (superoxide, O - 2 ), 일중항산소 (singlet oxygen, 1 O 2 ) 등이있으며, 큰범위에서는생체성분과의반응으로유래된 peroxy radical (ROO), alkoxyl radical (RO), hydroperoxide (ROOH) 및 hypochlorous acid (HOCI) 등을포함한다 [8]. 활성산소는자외선, 대기오염, 화학물질, 스트레스등에의해사람몸속에서과잉생산된산소로부터산화작용을일으켜세포막, DNA 등의세포구성체를손상시키고여러아미노산을산화시켜단백질의기능을저하시키며, 당의산화분해등을일으켜돌연변이나암의원인, 또는각종질병과피부주름의생성원인이되는것으로알려져있다 [9]. 이와같은활성산소를억제또는제거하는효과가있는항산화제를활용하면다양한미용제품의개발이가능하며, 천연화장품소재로서양파추출물의 superoxide anion radical 의소거활성과같은항산화효과에대한연구들이보고되고있으나, 현재양파껍질추출물과피부주름개선에관한연구는거의없는실정이다 [10]. 따라서본연구에서는화장품원료로서사용가능한양파껍질추출물의항산화능을확인하고양파껍질추출물을이용한마스크팩과리플리카 (replica) 를이용하여피부의주름개선효과를임상적으로확인하고자한다. 2. 재료및방법 2.1. 실험재료및추출 2.1.1. 용매추출본실험에사용한양파는전남무안군에서 2011 년에생산된것을수집하여사용하였으며, 양파껍질을세척하고양파껍질외피에있는불순물을제거한후 8 등분으로세절하여상온에서 24 시간자연건조후사용하였다. 재료에존재하는천연물질의파괴를최소화하기위하여자연건조시그늘에서건조를수행하였으며, 추출에사용할때분쇄되지않은상태에서여과지에담아추출을수행하였다. 용매추출의경우자연건조된양파껍질 50 g 을 80% ethanol 5 L 에온도 40 o C, 60 o C, 80 o C 의변화를주어 120 분동안추출하였으며, 각 3 회 Table 1. HPLC conditions for quercetin analysis Items Conditions Instrument HPLC (SHIMADZU, Japan) Column Xbridge TM COSMOSILC18-MS-II, 250 mm 4.6 mm Detector UV-Vis Spectrophotometer (A) 1.0% Phosphoric acid (B) Acetonitrile, 2% Mobile phase (B) at time 0 min and linear gradient to 15% (B) at time 15 min Flow rate 1.0 ml/min Column temp. 50 o C Injection olume 5 µl 씩반복실험하였다. 추출한후회전식증류장치 (Rotavapor R II, BUCHI, SWITZERLAND) 로농축하여 4 o C 에보관하여시료로사용하였다. 초음파추출의경우자연건조된양파껍질 50 g 을 80% ethanol 5 L 에초음파기 (SONIMEDI) 를사용하여 120 분간 80 o C 에서추출하였으며, 각 3 회반복실험하였다. 2.2. Quercetin 함량분석양파껍질추출액에함유되어있는 quercetin 의함량은고속액체크래마토그래피 (high performance liquid chromatography, HPLC) 를사용하여분석하였으며, HPLC 의분석조건은 Table 1 과같다. Quercetin 에대한표준품 (Sigma, USA) 을온도별로조제하고비교 분석하여온도에따른 quercetin 의변화여부를판단하였으며, HPLC 면적값을통하여표준곡선을구하고, 이를이용하여추출물의 quercetin 함량을분석하였다. 모든실험은 3 회이상반복실험하였고, 평균과표준편차를계산후그결과를비교하였다. 2.3. 양파껍질추출물의항산화활성 2.3.1. DPPH radical 소거능측정각시료의 DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, Sigma, USA) radical 에대한소거효과를측정하였다. 95% 에탄올에용해시킨 0.1 mm DPPH 1.5 ml 와각각의추출물 1.5 ml 를 vortex 로혼합하여 30 분동안암소에방치한다음 UV-Visible spectrophotometer (SCINCO, Seoul, Korea) 를사용하여 517 nm 에서흡광도로측정하였다. 추출물의 DPPH 에대한소거능 (EC 50 ) 은용매만을사용한대조군의흡광도를 50% 감소시키는데필요한농도로나타내었으며, 제거효과의비교를위한대조구로천연항산화제인 ascorbic acid (Sigma, USA) 와 gallic acid (Sigma, USA) 를사용하였다. 2.3.2. ABTS radical 소거능측정 ABTS (2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)) scavenging activity는증류수에용해한 ABTS 7.0 mm에증류수에용해한 potassium persulfate 2.45 mm을 1:1로넣고 12~ 16시간동안암소에방치하고 radical stock solution은 730
양파껍질마스크팩의주름개선효과 389 nm 에서흡광도값이 0.70(±0.02) 이되도록흡광계수를조절하여 PBS (ph 7.4) 로희석하였다. 희석된용액 3mL 에농도별로제조된 sample 20 µl 씩을가하여 15 분동안방치후흡광도를측정하였다. 2.4. 임상실험대상자본실험의피험자들은 30~40 대의전라남도광주시에거주하는여성으로제외기준에포함되지않는 10 명을대상으로하였으며, 임상실험에참여하기전참가동의서를작성하였다. 피험자들은피부에주름이생성되기시작하였거나생성된자들로본실험에참여하기전주름개선에대한기능성화장품의사용이나미용성형외과적처치를받은지 3 개월이경과한자들로임상기간내에는주름개선기능의화장품을사용하거나피부과적처치를받지않게하였다. 2.5. 안면마스크팩화장품의제조피험자들을동일한환경의조건을만들고자외부의환경요인에의한변화를최소화할수있는 Wash-off type 의팩을선정하였다. 마스크팩의원료 1000 ml 에포함되어있는성분은 Table 2 와같으며첨가물양파껍질추출물은 1% 를넣었으며, 양파껍질추출물 16.3 배농축액을원심분리기 (Combi- 514R, Hanil, Korea) 을이용해 (3000 rpm, 30 min) 상등액을취하여사용하였다. 마스크팩제조는수상층을 65 o C 로높여열소독을한다음 50 o C 로식힌후 polyquarter 를섞어점도를증가시킨다. Blender 로짧게 2 번정도혼합하면서저어준다음 Aloe vera gel 을 Blender 로풀어서섞은후비타민 E 와 olive oil 를넣고마지막으로 essential oil 을넣어저어준다음유상층을수상층에넣고균일하게섞어제조하였다. 2.6. 주름개선평가 2.6.1. Replica 제작주름의정량적평가를하기위하여주름의정도를수치화하여나타내분석해주는장치인 Visiometer SV600 (Courage & Khazaka, Germany) 을사용하여주름의모형을뜬 replica 를 Table 2. Compositions of mask pack material Lipid layer Viscosity increasing agents Oily phase Additives Ingredients Ingredients (g) Purified water & Rose water 900 Natural glycerin 10 Aloe Vera Gel 50 Grapefruits seed extract (GSE) 5 Polyquarter 10 Vitamin E 20 Olive Liquid 20 Onion skin (control Purified water) 100 Lipidure 10 Hyaluronic acid 20 essential oil 50 drops 광원을통과시켜음영으로주름의형태를수치화하여나타내었다. Replica 제작은실리콘용액 B < 점증제 > 와실리콘용액 C < 촉매제 > 를 1:1 의비율로용액을섞어펌프를이용하여기포가생기지않도록 10~15 초가량압력을가해혼합하고만들어진용액의일부를측정부위에붙인후굳혀실리콘수지복사물 replica 를제작하였다. Replica 를투과한빛은 PC 에내장된 video digitalization unit 와 graphic card 에의해디지털정보로변환된다. 투과된빛은 256 gray value (0 = black, 256 = white) 범위내로수치화되어높이와깊이에따라나타나는 gray value 에의해이미지가생성되며, 소프트웨어는주름의깊이를 20~30 um 범위내에서계산하였다. 2.6.2. 분석에의한피부주름평가화면상에서라인을수평, 수직또는원형으로선택하게되면거칠기요소들이 R1-R5 로계산되었다. 수평과수직, Circle line 을이용하여 R1-R5 값을분석하여주름의변화를비교하였으며, R1-R5 수치의의미는다음과같다. R1: Skin roughness < 최대최소회색도 > 주름의측면도에서최고주름의포인트와최저주름의포인트와의거리를측정한값이다. R2: Maximum roughness < 최대회색도 > 주름을 5 개로분할하여각각의 R1 을구한후분할된주름중에서가장높은값이다. R3: Average roughness < 최대최소회색도의평균차 > 가장중요한변수로선택한측면을동일한크기의 5 개로분할하여얻어진각각의 R1 값의평균값이다. R4: Smoothness depth < 평균평활함 > 주름의측면도에중심선을긋고그와만나는면적을구하여중심선으로나누어그값을얻는다. R5: Arithmetic average roughness < 산술적인평균거칠기 > 주름의가장높은점에평행선을긋고그아래면적을구한후중심선으로나누어준값으로주름깊이의평균값을계산하였으며, 피부상태가고르고굵은주름이없을수록그값은작아진다. 2.6.3. 자료분석 Visiometer 를이용한측정치인 R1, R2, R3, R4, R5 값에대한대조군과시험군, 두군간의시점별통계적유의차여부에대해서는 SPSS 프로그램 (Statistical Package for the Social Science) 의 unpaired t-test 방법을이용하여분석하였다 (p<0.05). 3. 결과및고찰 3.1. 추출조건에따른 quercetin 함량분석양파껍질에포함되어있는 quercetin 을초음파파쇄기를이용하여 80% ethanol 에서, 2 시간처리하였으며, 처리시온도를변수로하여추출된 quercetin 의농도를비교하였다. 양파껍질의열수추출물과초음파추출물에대해 HPLC 를이용하
390 Korean Society for Biotechnology and Bioengineering Journal 28(6): 387-393 (2013) Fig. 1. HPLC analysis of standard solution by quercetin, for hydrothermal method. Fig. 3. Yield of quercetin extraction by the hydrothermal method with different temperature. Fig. 2. Temperature effect on quercetin extraction by the hydrothermal method through HPLC analysis. A is extracted by 40 o C. B is extracted by 60 o C. C is extracted by 80 o C. Fig. 4. Yield of quercetin extraction by the hydrothermal and ultrasonic method with different temperature. 여 quercetin 함량을분석하였으며, quercetin standard 시약을사용하여표준농도의기준을 Fig. 1 과같이표시하였다. 40 o C, 60 o C, 80 o C 온도조건에서추출하였으며, 80 o C 이상의온도에서는에탄올의증발이심하여추출조건으로선정하지않았다. 열수추출법의경우, Fig. 2 와 3 에서와같이온도가높은조건일수록 quercetin 이함량이높게나왔다. 40 o C, 60 o C, 80 o C 에서각각 quercetin 함량이평균적으로 25.83~ 28.37 mg/l, 30.46~36.83 mg/l, 71.96~77.92 mg/l 로측정되었다. 초음파추출법으로 quercetin 을추출한결과 Fig. 3 과같이 40 o C, 60 o C, 80 o C 에서각각 46.66~48.81 mg/l, 59.93~64.05 mg/l, 103.30~108.80 mg/l 의 quercetin 을확인하였다. Fig. 4 는온도에따른 quercetin 추출함량을나타낸결과로초음파추출의경우, 열수추출과비교하여온도가높아짐에따라 quercetin 이함량이높아졌으며, 열수추출방법보다많은양의 quercetin 이추출되었음이확인되었다. 추출온도 80 o C 조건에서는초음파추출이평균 100 mg/l 로가장많은양이추출되어양파로부터 quercetin 을추출하는데적합한온도로판단되었다. 이같은결과는 100 g 의양파껍질을초음파파쇄 기를이용하여 60% 에탄올에서, 4 시간동안추출하였을때가장높은함량보였던선행연구결과와유사하며, 초음파추출시높은온도에서더많은 quercetin 이추출되었던결과와일치함을확인할수있었다 [11]. 식품내함유된 flavonoid 는극성과 hydroxyaltion, glycosylation 정도와같은화학구조에따라용해도가결정되며, 분자량 5,000 이하의저분자와중분자 polyphenol 은에탄, acetone, water 등의용매에의해추출이가능하다 [12]. 그에따라시료를추출하는용매와추출방법을달리하게되는데본실험에서는양파껍질로부터추출된 quercetin 이 80 o C 까지의온도에서안정성을잃지않고, 온도가높아지면서물질전달이용이해져추출용매에대한용해도가증가됨을확인하였다. Quercetin 의녹는점이 316 o C 인것을감안할때추후실험에서용매의변경, 또는추출방법의변화와용매증발의문제를제어할수는추출방법이적용된다면더높은온도에서보다많은양의 quercetin 을추출할수있을것으로사료된다. 폴리페놀류와플라보노이드의추출역시추출온도가높을수록두물질군의함량도증가하는경향을보였으며, 특히용매를 95%
양파껍질마스크팩의주름개선효과 391 에탄올을사용한점은본연구와차이가있으나, 추출온도 80 o C 에서가장높은농도의폴리페놀과플라보노이드가추출되었던결과는매우유사한경향을나타내고있었다 [13]. 3.2. 양파추출물의항산화활성평가 3.2.1. DPPH radical 소거능측정결과피부의노화과정은활성산소에의해지질과과산화, 단백질산화, DNA 산화, 멜라닌생성, 결합조직의변성등을포함한다 [14]. 본실험에서는천연항산화소재로서가능성이있는양파껍질추출물의항산화능을평가하기위하여양파추출물과양성대조군인비타민 C, garlic acid 의 DPPH radical 소거능을비교확인하였다. 비타민 C 의농도를 2.5~12.5 µg/ml 범위에서 DPPH radical 소거능을확인하였으며, 그결과 vitamin C 의 EC 50 값은 2.2 µg/ml 으로나타났다 (data not shown). Fig. 5 에서 DPPH radical 소거능에대한 EC 50 값은 garlic acid, 양파껍질초음파추출, 열수수출에대해서각각 0.625 µg/ml, 5.09 µg/ml, 10.67 µg/ml 로나타났다. DPPH radical 소거능평가에서는 garlic acid 가양파껍질초음파추출보다 8 배정도뛰어났으며, 양파껍질을열수추출로한경우보다는 2 배정도높은것으로나타났다. 이같은결과는선행연구에서 red onion peel 추출물을 garlic acid 를양성대조군으로실험한결과보다는낮은항산화활성을나타내었지만본실험에서사용한양파껍질초음파추출물은비교적높은수준의항산화활성을확인할수있었다 [16]. 3.2.2. ABTS radical 소거능측정결과항산화평가방법으로서 ABTS+ 는친수성시료와소수성시료의 radical 소거활성을모두측정할수있어적용범위가넓다는장점을가지고있다. 양이온성 radical 인 ABTS+ 소거활성을대표적항산화물질인비타민 C 를양성대조군으로사용하여소거활성을비교하였으며, 실험결과는 Fig. 5 에나타내었다. 비타민 C 의 EC 50 값은 2.33 mg/ml, 양파껍질열수추출물은 2.05 mg/ml 이었으며, 각농도별로비교해본결과양파껍질추출물이 vitamin C 의항산화능보다조금더높게측정되었다. 다른양성대조군으로 garlic acid 를사용하여양파껍질초음파추출물과양파알초음파추출물의 ABTS radical 소거능을확인하였으며, 결과는 Fig. 6 에나타내었다. Garlic acid, 양파껍질초음파추출물, 양파알초음파추출물각각의 EC 50 값은각각 ~0.5 ug/ml, ~2.4 ug/ml, ~15.3 mg/ml 으로확인되었다. EC 50 값이낮을수록항산화능이뛰어남을의미하기때문에, 양파껍질초음파추출물에항산화능이양파알초음파추출물보다효과적임을알수있으며, 이같은결과는양파껍질추출물이양파알추출물보다높은항산화활성을보였던다른연구들과같은경향성을보인다 [17]. 3.2.3. 주름개선평가주름측정장치인 skin visiometer 를이용하여주름모형의측정결과는 R1, R2, R3, R4, R5 까지의 parameter 값으로수치화 Fig. 5. DPPH radical scavenging activity of galic acid and onion skin extracts (hot-water extraction and ultrasonication). Fig. 6. ABTS radical scavenging activity of garlic acid, onion skin, and onion fruit extracts with different concentrations. Fig. 7. Comparison of the volunteer's left eye area before and after the treatment of the formula containing onion skin extracts. The difference values of wrinkle index ( R1~ R5) after 4 weeks were described.
392 Korean Society for Biotechnology and Bioengineering Journal 28(6): 387-393 (2013) Table 3. Results of wrinkle index ( R1~ R5) for left eye rims with silicon replica containing onion-skin extracts during 4 weeks Without sample With sample t p 0W 4W 0W 4W 0W 4W 0W 4W R1 0.31±0.13 0.22±0.13 0.27±0.09 0.16±0.06-0.78-0.97 0.480 0.385 R2 0.21±0.09 0.19±0.13 0.19±0.06 0.11±0.05-0.41-1.10 0.700 0.333 R3 0.12±0.06 0.09±0.06 0.12±0.03 0.08±0.03-0.17-0.53 0.871 0.627 R4 0.13±0.07 0.14±0.20 0.11±0.05 0.06±0.02-0.70-0.83 0.522 0.452 R5 0.05±0.03 0.03±0.01 0.05±0.02 0.02±0.01-0.61-0.53 0.572 0.608 *p<0.05, n=5. Table 4. Results of wrinkle index ( R1~ R5) for right eye rims with silicon replica without onion-skin extracts during 4 weeks Without sample With sample t p 0W 4W 0W 4W 0W 4W 0W 4W R1 0.30±0.12 0.28±0.02 0.20±0.07 0.15±0.08-2.25-4.00 0.087 0.016* R2 0.25±0.10 0.21±0.04 0.15±0.05 0.11±0.05-2.62-7.10 0.059 0.002* R3 0.13±0.06 0.14±0.03 0.1±0.04 0.07±0.04-1.78-5.37 0.150 0.006* R4 0.07±0.05 0.10±0.03 0.07±0.03 0.06±0.03-0.08-1.31 0.943 0.259 R5 0.03±0.01 0.04±0.01 0.03±0.02 0.02±0.01-0.77-2.00 0.484 0.117 *p<0.05, n=5. 하였다. 각수치는값이적을수록주름상태가개선된것을의미하는데주름측정결과를보기위하여 4 주간실험한대조군과시험군간의왼쪽눈가와오른쪽눈가의변화를분석한결과는 Fig. 7 과 8 에나타내었다. 3.2.4. 왼쪽눈가피부의거칠기 (Roughness) 변화량비교왼쪽눈가피부의대조군과시험군의시점별거칠기의변화량을평가한결과 R1 값의변화량은 4 주째시험군이 0.16± 0.06, 대조군이 0.22±0.13 으로시험군의평균변화량은 -0.11 ±0.006 이었다. 대조군의평균변화량은 -0.09±0.023 으로시험군이대조군보다감소한결과가나타났으며, 시험군에서주름이완화되는경향을보였다. R2 값은대조군이 0.19±0.13, 시험군이 0.11±0.05 로대조군의평균변화량은 -0.02±0.009 Fig. 8. Comparison of the volunteer's right eye area before and after the treatment of the formula containing onion-skin extracts. The difference values of wrinkle index ( R1~ R5) after 4 weeks were described. 이고, 시험군의평균변화량은 -0.08±0.005 로시험군이대조군보다높은감소결과가나타났다. R3 값은시험군이 0.08± 0.03, 대조군이 0.09±0.06 으로시험군의평균변화량은 -0.04 ±0.003 으로시험군이낮았다. R4 값은대조군이 0.14±0.20 이고시험군은 0.06±0.02 으로시험군의평균변화량 -0.05± 0.002 로대조군보다감소한결과가나타났다. R5 값은대조군이 0.03±0.01 이고시험군은 0.02±0.01 로대조군의평균변화량은 -0.02±0.001 이고시험군의평균변화량은 -0.03±0.001 으로미미하지만대조군보다감소한결과가나왔다. Table 3 과 Fig. 7 을통해본결과를비교 분석해보면통계적으로유의하지는않았으나대조군에비해시험군은감소한결과를나타내어주름개선효과가있음을알수있었다. 3.2.5. 오른쪽눈가피부의거칠기 (Roughness) 변화량비교오른쪽눈가피부의대조군과시험군의시점별거칠기의변화량을평가한결과는 R1 값의변화량을보면 4 주째시험군이 0.15±0.08, 대조군이 0.28±0.02 이고시험군의평균변화량은 -0.05±0.007 이고대조군의평균변화량은 -0.02±0.002 로시험군이대조군보다감소한결과가나타났으며, 통계적으로도유의하여 (p<0.005) 시험군에서주름개선에효과가있다고평가할수있다. R2 값은시험군이 0.21±0.04, 대조군이 0.11±0.05 로평균변화량이시험군 -0.04±0.005 이고, 대조군 -0.04±0.004 로주름의개선도는둘다있었고, 통계적으로도유의하였다 (p<0.005). 주름개선의중요한변수로작용되는 R3 값의 4 주때시험군은 0.07±0.04, 대조군은 0.14±0.03 으로평균변화량은대조군 0.01±0.003, 시험군 -0.03±0.004 으로시험군의평균변화량이낮게나왔고통계적으로도유의한차이를보였다 (p<0.005). 따라서양파추출물이들어간마스크팩을사용하였을때대조군보다주름개선효능이높음을알수있었다. R4 값은대조군이 0.06±0.03 이고시험군은 0.10
양파껍질마스크팩의주름개선효과 393 ±0.03 으로시험군의평균변화량 -0.01±0.003 으로대조군보다큰감소한결과가나타났다. R5 값은대조군이 0.04±0.01 이고시험군은 0.02±0.01 로대조군의평균변화량은 0.01± 0.001 이고시험군의평균변화량은 -0.01±0.001 으로대조군보다감소한결과가나타났다. R 값의변화는 Table 4 과 Fig. 8 에서본결과를비교분석해보면시험군은모두감소하였다. 대조군은거의감소하지않았고통계적으로도 R1, R2, R3 값은유의하였으며, 양파껍질추출물중 ethyl acetate 분획으로제조된크림으로주름개선효과를경피수분손실량을측정한연구와동일한결과를보여주었다 [18]. 따라서양파추출물을함유한마스크팩의사용은주름개선에효능이있다고판단된다. 4. 결론 최근천연물에관한생리활성물질의연구를바탕으로천연식물소재의화장품의개발이활발하게진행되고있는데, 천연소재의경우일반적으로종류가다양하며가격이저렴하고피부에적용했을때독성이매우낮거나무해하다고알려져있어화장품소재로서각광을받고있다 [19]. 본연구는식용후음식물폐자원으로서피부에부작용이적고천연생리활성성분이뛰어난양파껍질의화장품소재가능성을검토하고자초음파추출법을이용하여온도별 quercetin 의함량을비교하였다. 열수추출과초음파추출법을이용하여양파껍질추출물의온도별 quercetin 함량을비교해본결과, 모든온도에서초음파추출물이가장높았으며, 온도가증가함에따라추출효율또한증가하였다. DPPH radical 소거능과 ABTS 소거능을확인한결과양파껍질초음파추출물의항산화능이양파알초음파추출물보다높은것으로확인되었다. 양파껍질속에포함되어있는 quercetin 의항산화활성을측정한결과를바탕으로양파껍질추출물을이용하여안면마스크팩을제조하고 replica 를이용하여피부의주름개선을실험한결과양파껍질추출물을함유한팩의제형은소비자선호도가우수하였으며, replica 를이용한실험에서도양파껍질추출물이잔주름에대한개선효과가있다는것을확인하였다. 이같은결과들을보았을때, 양파껍질추출물은주름개선을위한기능성소재로서화장품에응용가능성이매우높은것으로판단되며, 보다광범위한추가연구가필요할것으로사료된다. REFERENCES 1. Zhoh C. K., K. H. Jin, and S. R. Ahn (2010) Antioxidative and antimicrobail effects to skin flora of extracts from peel of Allium cepa L. Kor. J. Aeshthet. Comsetol. 8: 49-57. 2. Shutenko, Z., Y. Henry, E. Pinard, J. Seylaz, Potier, F. Berthet, P. Girard, and R. Sercombe (1999) Influence of the antioxidant quercetin in vivo on the level of nitric oxide determined by electron paramagnetic resonance in rat brain during global ischemia and reperfusion. Biochem. Pharmacol. 57: 199. 3. Brahma, N. S., B.R. Singh, R. L. Singh, D. Prakash, R. Dhakarey, G. Upadhyay, and H. B. Singh (2009) Oxidative DNA damage protective activity, antioxidant and anti-quorum sensing potentials of Mornga oleifera. Food. Chem. Toxi.. 47: 1161 4. Kim, H. S. (2009) The development of browning, caking and flavor suppression techniques of onion powder and extract, and its storage stability. Ph. D. Thesis. University of Dankook, Seoul, Korea. 5. Turan, B., A. Gulsen, D. P. Makris, P. Kefalas (2007) Interactions between quercerin and catechin in a model martix: effects on the in vitro antioxidant behaviour. Food Res. Int. 40: 7. 6. Skerget, M., L. Majhenic, M. Bezjak, and Z. Knez (2009) Antioxidant, radical scavenging and antimicrobial activities of Red Onion(Allium cepa L) skin and edible park extracts. Chem. Biochem. Eng. 23: 435-444. 7. Bilyk, A., P. I. Cooper, and G. M. Sapers (1984) Varietal differences in distribution of quercetin and kaempferol in onion (Allium cepa L.) tissue. J. Agrc. Food Chem. 32: 274. 8. Peiyuan, L., L. Huo, W. Su, R. Lu, C. Deng, L. Liu, Y. Deng, N. Guo, C. Lu, and C. He (2011) Free radical-scavenging capacity, antioxidant activity and phenolic content of Pouzolzia zeylanica. J. Serb. Chem. Soc. 76: 709-717. 9. Khan, R. A., M.R. Khan, S. Sahreen, and M. Ahmed (2012) Evaluation of phenolic contents and antioxidant activity of various solvent extracts of Sonchus asper (L.). Chem. Cen. J. 6: 12. 10. Jang, J. R. and S. Y. Lim (2009) Effects of onion flesh and peel on chemical components, antioxidant and anticancer activities. J. Life Sci. 19: 1225-9918. 11. Kim, E. J., M. H. Leem and T. B. Choe (2005) Effect of ultrasound treatment with vitamin C on the skin wrinkle improvement. Kor. J. Aesthet. Cosmetol. 3: 81-90. 12. Freucenveim, J. L., J. R. Marshall, J. E. Vena, R. Laughlin, J. R. Brasure, M. K. Swanson, T. Nemoto and S. Graham (1996) Premenopausal breast cancer risk and intake of vegetables, fruits and related nutrients. J. Natl. Cancer. Inst. 88: 340-348 13. Kwon, H. J. and C. K. Zhoh (2007) Studies on antioxidantive and antimicrobial effcets of Allium cepa L. peel and root. J. Kor. Soc. Esthe & Cosm. 2: 19-32. 14. Choi, M.-H., M. J. Min, D. S. Oh and H.-J. Shin (2012) Improvement of Acne condition in skin care using Camellia Japonica L. extracts. Kor. J. Aesthet. Cosmetol. 10: 661-672. 15. Lee, B. R., J. H. Jung and H. S. Kim (2012) Assessment of red onion on antioxidant activity in rat. Food. Chem. Tox. 50: 3912-3919. 16. Nuutila, A. M, R. Puupponen-Pimia, M. Aarni and K. M. Oksman-Caldentey (2003) Comparison of antioxidant activities of onion and garlic extracts by inhibition of lipid peroxidation and radical scavenging activity. Food chem. 81: 485-493. 17. Kim, J. E., A. R. Kim, M. J. Kim and S. N. Park (2011) Antibacterial, antioxidative and antiaging effects of Allium cepa peel extracts. Appl. Chem. Eng. 22: 178-184. 18. Choi, M.-H., M. J. Min, D. S. Oh and H.-J. Shin (2013) Antimicrobial and antioxidant activity of Camellia Japonica extracts. KSBB J. 28: 99-105.