Polymer(Korea), Vol. 37, No. 4, pp. 442-448 http://dx.doi.org/10.7317/pk.2013.37.4.442 ISSN 0379-153X(Print) ISSN 2234-8077(Online) 분무건조방식으로제조한에프로살탄고체분산체제조및특성분석 황준석 김소희 조선행 * 허강무 충남대학교고분자공학과, * 한국화학연구원의약화학연구센터 (2012년 12월 31일접수, 2013년 2월 3일수정, 2013년 2월 5일채택 ) Preparation and Characterization of Solid Dispersions of Eprosartan Using Spray Drying Method Jun Seok Hwang, So Hee Kim, Sun Hang Cho*, and Kang Moo Huh Department of Polymer Science and Engineering, Chungnam National University, Daejeon 305-764, Korea *Research Center for Medicinal Chemistry, Division of Drug Discovery Research, Korea Research Institute of Chemical Techonology, 141 Gajeong-ro, Yuseong-gu, Daejeon 305-600, Korea (Received December 31, 2012; Revised February 3, 2013; Accepted February 5, 2013) 초록 : 본연구에서는분무건조방법을이용하여고혈압치료제로사용되고있는난용성약물인에프로살탄의고체분산체제형을다양한조성하에서제조및평가하고, 효과적인약물의용해도향상을위한제조조건을최적화하였다. 친수성고분자기제로 hydroxylpropylcellulose(hpc) 와 poly(vinyl pyrrolidone)(pvp) 를사용하였고, 고분자계면활성제로 poloxamer 407 을첨가하여약물과고분자의다양한조성비를갖는고체분산체를제조한후, 물리화학적특성을비교평가하였다. 친수성고분자의조성비증가와함께약물결정성이감소되었으며, HPC 보다는 PVP 가약물과의우수한상용성을바탕으로결정화도감소와용출거동개선효과가상대적으로우수하였다. 친수성고분자로 PVP 를사용한경우약물의결정성이대부분사라져고체분산체내대부분의약물분자들이무정형으로분산되어있으며약물의용출률이에프로살탄대비 3~7 배이상향상되었다. Abstract: In this study, we developed and optimized hydrophilic polymer-based solid dispersion formulations (SDs) using a spray drying method for improving the aqueous solubility of eprosartan, one of poorly soluble drugs that has been broadly used for the treatment of high blood pressure. Hydroxylpropylcellulose (HPC) and poly(vinyl pyrrolidone) (PVP) were used as hydrophilic polymer matrices and poloxamer 407 (P407) added as a polymeric surfactant. Various kinds of solid dispersions with different drug/polymer compositions were prepared and their physico-chemical properties were compared. As the polymer content increased, the drug crystallinity in the SDs significantly decreased and the dissolution properties were enhanced. The PVP based SDs were observed to have relatively reduced crystallinity and an enhanced dissolution rate than HPC-based SDs, due to better miscibility between drug and polymer matrix. For PVP based SDs, the drug crystallinity almost disappeared and the dissolution properties significantly increased by more than 3~7 times. Keywords: eprosartan, solid dispersion, spray drying method, hydroxylpropylcellulose, poly(vinyl pyrrolidone), solubility. 서 생명연장및삶의질증진에바탕이되는제약산업은의학, 약학, 생물학, 물리 화학, 고분자공학등의다양한과학분야를아우르는기술집약적산업분야이다. 제약산업분야에서개량신약연구의주요분야중의하나는약물의부작용을감소시키고효능효과를극대화시켜필요한양의약물을효과적으로전달시키는약물전달시스템 (DDS, drug delivery 론 To whom correspondence should be addressed. E-mail: khuh@cnu.ac.kr system) 이며, 이기술의가장중요한목적은약물투여방법및투여량을최적화하여환자의치료효과를극대화하고환자의편의성을높이는데있다. 1 약물을투여하는일반적인경로는경구투여 (oral drug delivery) 이다. 2 경구투여로가능한제제는다양한형태의정제, 캡슐제, 산제, 액제등의형태로존재한다. 제약산업분야에서안정성및약효가검증된약물을제제화할때가장우선적으로고려하는투여방법은경구제이며, 이경우가장우선적으로고려해야하는주요인자는약물투과성 (permeability) 과약물용해도 (solubility) 이다. 국내외다수의제약사에서합성하여개발하는신약및신약후보군중상당수가낮은용해도에기인하여그효능조차 442
분무건조방식으로제조한에프로살탄고체분산체제조및특성분석 443 검증되지못한채폐기되고있거나제제화에어려움을겪고있다. 3,4 난용성약물은생물약제학적분류체계 (BCS, biopharmaceutics classification system) 중낮은용해도를가지는 BCS II와 BCS IV 약물들을의미한다. 5 본분류에해당하는약물들은체내에서흡수되어일정한혈중농도를유지하기위해위장관점막과친화성을갖는소수성을가지며일반적으로방향족그룹을포함하고있으므로결정성이높고, 물에녹기어려운특성 ( 난용성 ) 을보인다. 따라서높은생리활성을보인신약후보약물들은대부분낮은용해도 ( 0.1 mg/ml) 특성을나타내는경우가많다. 6,7 이러한난용성약물들의대부분은낮은용해도로인한생체이용률의저하, 제제화의어려움, 정제크기증가, 과량의약물복용, 경구투여후생체내낮은흡수율같은문제점을가지고있다. 8,9 따라서이러한난용성약물의제제화관련문제점들을해결하기위해약물의용해도향상을위한연구가지속적으로수행되어져왔다. 10-12 약물의용해도를증가시킬수있는가장대표적인방법은고체분산체를제조하는것이며, 고체분산체제조시사용된친수성부형제에의한약물의결정성감소, 13-16 안정화향상, 수분이동의향상은 17 난용성약물의용해도를크게향상시키고이를통해기존약물대비투여용량을줄임으로써상업적으로도성공한사례가있다. 18,19 본실험에서사용된난용성약물은에프로살탄 (eprosartan) 화학명 (E)-α-[[2-butyl-1-[(4-carboxyphenyl)methyl]-1H-imidazol- 5-yl]methyl-ene]-2-thiophenepropanoic acid monomethanesulfonate로표시되는고혈압치료제로, 혈압상승호르몬인엔지오텐신 II 수용체차단제이다. 20,21 또한에프로살탄은고혈압치료외에도울혈성심부전, 신장부전등의치료제로널리사용되고있으며약물의반복적인사용에의한내성발현율과부작용발현율이낮다는장점을가지며심혈관계질병과뇌혈관질병에대한부차적인예방이가능하다. 하지만, 에프로살탄은생체이용률이약 15% 로엔지오텐신 II 수용체차단체중가장낮은생체이용률 (bioavailability) 을보인다. 이는다른약물과동일한약효를발현하기위해복용해야하는약물의양이증가한다는의미이며, 1일 1회복용해야하는약물의용량이 600 mg으로약물의복용을어렵게하는중요한요인이된다. 이는에프로살탄이물에거의녹지않는난용성약물이기때문이며환자의복용편리성을개선하고다른엔지오텐신 II 수용체차단제와시장에서경쟁하기위해서는고체분산화를통한용해도증가와약물의투여용량감소를위한제제연구가필요하다. 본실험에서는에프로살탄과대표적인친수성고분자인 poly(vinyl pyrrolidone)(pvp) 와 hydroxylpropylcellulose(hpc) 를고분자기제로사용하고, 고분자계면활성제로 poloxamer 407(P407) 을첨가하고분무건조법 (spray drying method) 을이용하여고체분산체를제조하였다. 약물과수용성고분자의다 양한조성하에서제조된고체분산체의특성을관찰하기위해시차주사열량계 (DSC), 분말 X- 선회절기 (PXRD) 분석을이용하여고체분산체내약물의결정특성을분석하였다. 또한제조된고체분산체의형태학적변화를관찰하기위해주사전자현미경 (SEM) 을사용하였고, 난용성약물의가용화특성을분석하기위해고성능액체크로마토그래피 (HPLC) 를사용하여제조된고체분산체들의용출률을평가하였다. 실 시약및시료. 본연구에사용된난용성약물인에프로살탄 (eprosartan mesylate, Figure 1(a)) 은 Unichem Laboratory 사 ( 인도 ) 에서구입하였고 PVP 와 P407 은 BASF 사 ( 독일 ) 에서 HPC 는 Nisso 사 ( 일본 ) 에서구입하였다. 물은 3 차증류수를사용하였으며, 그외연구에사용된원료는모두약전급이상을사용하였고, 분석에사용된용매및기타시약은 HPLC 등급을별도의정제과정없이사용하였다. 고체분산체를제조할때사용한 99.8% 에탄올은 Fluka 사 ( 스위스 ) 의제품을사용하였다. HPLC 이동상제조에사용된시약인 acetonitrile 은 Burdick & Jackson 사 ( 미국 ) 의제품을 triethylamine 과 phosphoric acid 는 Fluka 사의제품을구입하여사용하였다. 고체분산체의제조. 고체분산체제조는에프로살탄, 친수성고분자 (PVP 또는 HPC), P407 을각각 1:1:1, 1:3:1, 1:5:1 의혼합비율로분무건조법을이용하여제조하였다 (Scheme 1 참조 ). 각각의조성비에해당하는친수성고분자와고분자계면활성제를에탄올에먼저용해시키고여기에약물을추가로넣어용액이완전히투명해지도록용해시켰다. 유동층건조기인 Mini-Glatt(Glatt 사, 독일 ) 을이용하여 Table 1 에제시된 Figure 1. Chemical structures of eprosartan (a); poly(vinyl pyrrolidone) (b); hydroxypropylcellulose (c); poloxamer 407 (d). 험 Polymer(Korea), Vol. 37, No. 4, 2013
444 황준석 김소희 조선행 허강무 Scheme 1. Preparation of solid dispersions using spray drying method. Table 1. Conditions of Spray Drying Method Using Fluid Bed System(Mini-Glatt) Parameter Inlet temperature Outlet temperature Atomizing Flow rate Pump speed Setting 60-65 o C 30-45 o C 0.3-0.4 bar 0.15-0.30 bar 0.8-2.0 ml/min 공정조건을적용하여분무건조고체분산체를제조하였다. 분무건조공정조건은짧은시간내에사용된유기용매가효율적으로제거될수있도록하기위해 inlet 온도를약 60-65 o C 로조절하였다. 상기의조건으로제조된고체분산체의조성비율을 Table 2 에상세히기술하였다. 제조된모든고체분산체는 200 µm 체를이용하여내리고수분흡수를차단하기위해 silica gel 를넣고사용하기전까지밀봉하여보관하였다. 시차주사열량분석 (DSC). 제조된고체분산체의열적특성을확인하기위하여 DSC(DSC S-650, 신코, 한국 ) 를이용하였다. 신코에서제작한알루미늄팬에 2~3 mg 의시료를넣어 주었으며각각의샘플들은질소기류하에서 20 o C/min 의승온속도로 20~300 o C 의온도범위에서그용융특성피크를관찰하였다. 파우더 X- 선회절분석 (PXRD). 에프로살탄고체분산체의결정성을관찰하기위하여 PXRD(D8 ADVANCE, Bruker AXS, 독일 ) 를사용하였으며소프트웨어는 TOPAS 4.2 를사용하였다. X- 선은 40 ma, 40 kv 에서 CuKα radiation (1.5406 A ) 을발생시켰다. Scan range 는 5~80 o 로하였으며 0.4 o /min 의속도로측정하였다. 또한 detector 는 PSD-Lynxeye detector(1-d) 을사용하였으며소프트웨어는 EVA 를사용하였다. 액체크로마토그래피분석 (HPLC). 고체분산체내의에프로살탄의용출양상을확인하기위해자동샘플주입기 (NS- 600A, Futecs, 한국 ) 가장착된 HPLC(High Performance Liquid Chromatography, NS-300i, Futecs, 한국 ) 를사용하였다. 약물의분석을위해컬럼은 ProntoSIL C18-ace-EPS column(250 4.6 mm, 5.0 mm, Bischoff) 을사용하였다. HPLC 측정조건은 1mL/min 의유속으로, 20 µl 의시료를주입하며상온에서측정하였다. 이때에프로살탄의 UV 검출파장 (λ) 은 234 nm 로설정하였다. 이동상은 acetonitrile 과 phosphoric acid 를이용하여 ph 3 으로적정된 0.1%v/v triethylamine Table 2. Preparation of Solid Dispersion Formulations of Eprosartan with Hydrophilic Polymers Using Spray Drying Method Samples Drug PVP K30 HPC-SL P407 Drug:Polymer:P407 (w/w/w) SD1 2.50 2.50-2.50 1:1:1 SD2 1.25 3.75-1.25 1:3:1 SD3 0.83 4.17-0.83 1:5:1 SD4 2.5-2.50 2.50 1:1:1 SD5 1.25-3.75 1.25 1:3:1 SD6 0.83-4.17 0.83 1:5:1 폴리머, 제 37 권제 4 호, 2013 년
분무건조방식으로제조한에프로살탄고체분산체제조및특성분석 445 buffer 를 5:5(v/v) 으로혼합하고탈기한후사용하였다. 형태학적분석 (SEM). 에프로살탄과제조된고체분산체형태학적변화를관찰하기위하여주사전자현미경 (Scanning Electron Microscopy, JSM-7000F, JEOL, 일본 ) 을이용하였다. 에프로살탄과제조된고체분산체입자형태의측정조건은각각의입자를탄소테이프에고정시킨후 30 초간 10.0 kv 로백금코팅하고 10.0 kv 에서주자전자현미경배율을변경하며입자표면을관찰하였다. 용출거동분석. 제조된고체분산체의용출거동을관찰하기위하여패들법 (USP 제 2 법 ) 을사용하여실험하였다. 용출시험에사용한기기는 DST-610(Lab Fine Inc., 한국 ) 을사용하였으며용출액은 500 ml 의 3 차증류수에 5mL 의 Tween 80 첨가하여완전히용해시킨후사용하였다. 사용된고체분산체의양은에프로살탄으로써 50 mg 이되도록칭량하였다. 온도는 37±0.5 o C, 패들속도는 100 rpm 으로하였다. 샘플은 0, 5, 10, 15, 20, 30, 60 분에 2mL 씩취하여 0.45 µm PTFE 필터로여과후 HPLC 를사용하여용액내약물양을분석하였다. 용출실험은 3 회반복하여평균값을얻어분석하였다. Figure 2. DSC thermograms of PVP based solid dispersions. 결과및토론 에프로살탄고체분산체의제조. 에프로살탄은 Figure 1(a) 에서보여지듯이다수의방향족구조로이루어진결정성분자구조를지니며, 경구투여시낮은용해도에기인한불완전한흡수로낮은생체이용률을보이는대표적인난용성약물로알려져있다. 이러한약물의난용성을개선하기위해본연구에서는다양한고체분산체제조방법중가장효율적인분무건조법 (spray drying method) 을적용하였다. 고체분산체기제로사용된친수성고분자인 PVP 와 HPC 는 PEG 와더불어제약산업분야에서사용되고있는대표적인친수성고분자이다. 고체분산체제조에사용되는고분자의분자량이클수록제조된고체분산체가용해될때점도가크게증가하여약물이용해되는고체분산체표면의확산계면에영향을미칠수있으며약물이가지는고유한결정성을변화시킬수있다. 22-24 친수성고분자외에약물의적심특성증가와가용화효과향상을위해비이온성고분자계면활성제인 PEG-PPG- PEG 삼중블록공중합체인 P407 을사용하였다. 약물의용해도개선을위한최적의친수성고분자및조성비율을결정하기위해실험을진행하였으며, 다양한조성비율에따라제조된고체분산체를비교평가하였다. 이와같은목적을위해약물과친수성고분자기제의조성비율을 1:1 에서 1:5 로조절하고, 분무건조법을적용하여고체분산체를제조하였으며, P407 는약물과동량으로고정하였다 (Table 2 참조 ). 고체분산체의결정학적분석. 다양한조성비율로제조된고체분산체의열적특성을알아보기위해 DSC 분석을수행 Figure 3. DSC thermograms of HPC based solid dispersions. 하였다. Figure 2 와 Figure 3 은에프로살탄의고체분산체의열적특성을나타낸 DSC 분석결과이다. 에프로살탄의용융온도는약 230 o C 부근에서나타나는데 PVP 를고분자기제로제조된고체분산체에서는 1:1:1 에서 1:5:1 의모든조성에서약물의특정한용융피크를관찰할수없었다. HPC 를고분자기제로사용하여제조한경우에는고분자함량이증가할수록약물의결정피크가감소하였고, 1:1:1 과 1:3:1 에서는여전히약물의용융피크가존재하지만 1:5:1 의조성비율에서는약물의용융피크가대부분사라진것을확인할수있었다. 결과적으로고체분산체제조시친수성고분자의비율이증가할수록약물의결정성에기인한용융피크가사라지거나, 감소되는경향을확인할수있었으며, 특히본실험에서난용성약물로선정하여실험을진행한에프로살탄의경우 PVP 가 HPC 보다약물의결정성을감소시키는데보다효과적임을확인할수있었다. Polymer(Korea), Vol. 37, No. 4, 2013
446 황준석 김소희 조선행 허강무 Figure 4. Powder X-ray diffraction patterns of PVP based solid dispersions. Figure 5. Powder X-ray diffraction patterns of HPC based solid dispersions. Figure 4 와 Figure 5 는분무건조법으로제조된고체분산체의결정구조변화를비교평가하기위해측정한 PXRD 분석결과이다. 7 o 부근에서나타나는에프로살탄의고유결정회절피크가모든조성비율의고체분산체에서대부분사라진것을확인할수있었다. 이는친수성고분자기제로선택된 PVP 과 HPC 모두에프로살탄의고체분산체제조에사용할수있는우수한기제로선택할수있다는것을의미한다. 분무건조법으로제조된고체분산체들의열적특성과결정구조변화를관찰한결과를바탕으로친수성고분자기제의조성비율이증가할수록약물의결정성이무정형으로변화되는경향이있음을확인할수있었으며, 친수성고분자기제로는약물과의상용성이좋은 PVP 를사용하는것이 HPC 를선택하는것보다에프로살탄의가용화에효과적일것으로판단할수있었다. 고체분산체의형태학적분석. Figure 6 은 PVP 와 HPC 를 사용하여분무건조법으로제조한고체분산체의형태학적특성을주사전자현미경으로관찰한사진이다. Figure 6 에서보는바와같이에프로살탄은판상형태의결정을가지며입자크기가일정하지않고비교적큰입자크기를가지는형태가관찰된다. Figure 6 의고체분산체들 (SD1~SD6) 은에프로살탄, 고분자, P407 의조성비율이각각 1:1:1, 1:3:1, 1:5:1 인분무건조법으로제조된고체분산체표면형태이다. 분무건조법에의해제조된고체분산체의표면형태는 1:1:1 의조성비율을가질경우에는우그러짐이거의없는구형을관찰할수있었다. 이는분무건조될때액적에포함된용액이증발하면서표면이건조되는시간과약물내에존재하는약물을포함한입자들의확산되는시간에큰차이가없어우그러짐이적은구형의입자형태를가지는것으로사료된다. 하지만, 친수성고분자조성비율이상대적으로높은 1:3:1 과 1:5:1 의경우에는유동층건조기노즐을통해분무된액적이챔버내의열풍에의해건조되면서액적의점성이빠르게증가하고이로인해표면이건조되는시간과약물내에존재하는약물을포함한입자들의확산되는시간의차이가발생하게된다. 또한분무건조초기에구형입자표면에비교적단단한고분자피막을형성하게된다. 이때초기의구형입자의점도가증가한상태에서표면이건조되는용액에의해변형가능한상태로바뀌어버클링효과 (buckling effect) 가발생하게된다. 25 이와같은현상에의해조성비가 1:3:1 과 1:5:1 인에프로살탄의고체분산체형태를관찰하였을경우고체분산체표면의형태가구형이아닌우그러진입자형태를가진것으로관찰되었다. 입자의크기는 PVP 의경우가낮은점성으로인하여더작은입자를형성하는것으로사료된다. 고체분산체의용출거동분석. Figure 7(a) 은에프로살탄에친수성고분자기제로 PVP 와고분자계면활성제로 P407 을포함하는고체분산체로 3 가지조성비율 (1:1:1, 1:3:1, 1:5:1) 로변경하여 Mini-Glatt 를사용하여분무건조방법을통해제조한고체분산체들의가용화정도를판단할수있는용출실험을 3 회실시하여 HPLC 로분석한결과이다. 난용성약물인에프로살탄의최대용출률은 11.5% 이였다. 분무건조법으로제조된에프로살탄의고체분산체들의용출률은조성비율에따라최대용출률은각각 37.7%(SD1=1:1:1), 69.8%(SD2= 1:3:1), 77.5%(SD3=1:5:1) 로분석되었다. 이는에프로살탄의용출률대비약 3 배에서 7 배정도증가한것이며친수성고분자인 PVP 의조성비율이증가할수록용출률이향상되는것을확인할수있었다. Figure 7(b) 는친수성고분자를 PVP 에서 HPC 로변경하여제조한에프로살탄고체분산체의용출률분석결과이다. HPC 를고분자기제로변경하여제조한에프로살탄의고체분산체들의용출률은조성비율에따라최대용출률은각각 23.7% (SD4=1:1:1), 27.0%(SD5=1:3:1), 24.0%(SD6=1:5:1) 으로분석되었다. 이는에프로살탄의용출률대비약 2 배정도용출률 폴리머, 제 37 권제 4 호, 2013 년
분무건조방식으로제조한에프로살탄고체분산체제조및특성분석 447 Figure 6. SEM photographs of PVP based solid dispersions (a); HPC based solid dispersions (b). Figure 7. Dissolution rate of PVP based solid dispersions (a); HPC based solid dispersions (b) in Tween80 (1 v/v%) (n=3). 이증가한것을확인하였다. 하지만, PVP 를이용하여제조한고체분산체와는달리고분자기제조성비율이증가하여도용출률증가에는영향이없는것을확인하였다. 이와같은결과로부터친수성고분자기제는 PVP 가 HPC 보다용출률이최대 3.2 배증가한것을확인할수있었으며, 이는에프로살탄가용화에 PVP 를선택하는것이보다효과적임을의미한다. 결 본연구에서는고혈압치료제로사용되는난용성약물인에프로살탄의가용화특성을향상시키기위해고체분산체제조방법중분무건조법을이용하고친수성고분자기제로 PVP 와 HPC 를선정한후, 고분자계면활성제인 P407 과다양한조성으로고체분산체를제조하였다. 제조된각 론 각의고체분산체의열적특성, 결정화도, 형태학적변화와용출거동특성을비교평가하였다. 에프로살탄고체분산체들의경우 DSC 와 PXRD 의분석장비를이용하여약물이결정형의변화를관찰하였을때고분자의조성비율이증가할수록약물고유의결정화도가감소한것을확인할수있었으며, 용출실험을통해확인한용출거동실험결과에서도모두에프로살탄대비 2~7 배정도의용출률증가를확인할수있었다. 또한고분자기제의선택에있어 HPC 보다는 PVP 를사용한것이약물의용출률을최대 3.2 배증가시킴을확인할수있었다. 본연구결과는에프로살탄의가용화를위한고체분산체제조에있어친수성고분자기제로 PVP 를선택하는것이에프로살탄가용화에보다효과적임을의미한다. 본연구결과는난용성약물인에프로살탄의낮은용해도및생체이용률개선을위한고체분 Polymer(Korea), Vol. 37, No. 4, 2013
448 황준석 김소희 조선행 허강무 산체제제개발에유용할것으로기대된다. 감사의글 : 이논문은 2010 년도정부 ( 교육과학기술부 ) 의재원으로한국연구재단의지원을받아수행된기초연구사업임 (No.2010-0015622). 참고문헌 1. T. M. Allen and P. P. Cullis, Science, 303, 1818 (2004). 2. M. Sugarwara, S. Kadomura, and X. He, Eur. J. Pharm. Sci., 26, 1 (2005). 3. J. W. Wong and K. H. Yuen, Int. J. Pharm., 227, 177 (2001). 4. S. R. Vippagunta, K. A. Maul, and S. Tallavajhala, Int. J. Pharm., 236, 111 (2002). 5. M. Martinez, G. Amidon, L. Clarke, W. W. Jones, A. Mitra, and J. Riviere, Adv. Drug Deliv. Rev., 54, 825 (2002). 6. M. Vasanthavada, W. Q. Tong, and Y. Joshi, Pharm. Res., 21, 1598 (2004). 7. S. R. Vippagunta, W. Zeren, and S. Hornung, J. Pharm. Sci., 96, 294 (2007). 8. S. L. Lin and J. Menig, J. Pharm. Sci., 57, 2143 (1968). 9. J. L. Ford, Pharm. Acta Helvetiae, 61, 69 (1986). 10. C. Leuner and J. Dressman, Eur. J. Pharm. Biopharm., 50, 47 (2000). 11. E. Y. Lee, M. J. Oh, S. Kim, K. Y. Seong, Y. H. Lee, S. J. Kim, H. S. She, D. Lee, and G. Khang, Polymer(Korea), 35, 113 (2011). 12. G. Khang, J. K. Jeong, J. M. Rhee, J. S. Jee, and H. B. Lee, Macromol. Chem. Symp., 14, 123 (2001). 13. J. M. Aceves, R. Cruz, and E. Hernandez, Int. J. Pharm., 195, 45 (2000). 14. M. O. Omelczuk, C. C. Wang, and D. G. Pope, Eur. J. Pharm. Biopharm., 148, 123 (1997). 15. A. Billon, B. Bataille, G. Cassanas, and M. Jacob, Int. J. Pharm., 203, 159 (2000). 16. N. Zerrouk, C. Chemtob, P. Arnaud, and S. Toscani, Int. J. Pharm., 225, 46 (2001). 17. E. Karavas, G Ktistis, and A Xenakis, Eur. J. Pharm. Biopharm., 63, 103 (2006). 18. E. Merisko-Liversidge and G. G. Liversidge, Adv. Drug Deliv. Rev., 63, 427 (2011). 19. R. Shegokar and R. H. Muller, Int. J. Pharm., 339, 129 (2010). 20. N. H. Shusterman, Am. Heart J., 138, 238 (1999). 21. A. H. Gradman, J. Gray, F. Maggiacomo, H. Punzi, and W. B. White, Clincal Ther., 21, 442 (1999). 22. D. V. Drooge, W. Hinrichs, M. Visser, and H. Frijlink, Int. J. Pharm., 310, 220 (2006). 23. A. Goldberg, M. Gibaldi, J. Kanig, and M. Mayersohn, J. Pharm. Sci., 55, 581 (1966). 24. T. Vilhelmsen, H. Eliasen, and T. Schæfer, J. Pharm. Sci., 303, 132 (2005). 25. N. Tsapis, E. R. Dufresne, S. S. Sinha, C. S. Riera, J. W. Hutchinson, L. Mahadevan, and D. A. Weitz, Phys. Rev. Lett., 94, 018302 (2005). 폴리머, 제 37 권제 4 호, 2013 년