< 차례 > 1. 요약 1 2. 심사경위 2 3. 심사경과 2 4. 심사방법 2 5. 심사신청자료검토 심사신청된식품의개요 식품으로의적합성검토 유전자재조합체의안전성 3 가. 유전자재조합체의개발목적및이용방법에관한자료 3 나. 숙주에관한

Similar documents
A

MON89788

< 차례> 1. 요약 1 2. 심사경위 2 3. 심사경과 2 4. 심사방법 3 5. 심사 신청 자료 검토 심사 신청된 식품의 개요 식품으로의 적합성 검토 유전자재조합체의 안전성 3 가. 유전자재조합체의 개발목적 및 이용방법에 관한

½Ç°ú¸Ó¸®¸»¸ñÂ÷ÆDZÇ(1-5)¿Ï

유전자재조합 콩 DP 안전성 평가자료 심사결과 보고서 1. 요약 (유)듀폰은 유전자재조합 콩 DP 을 식품의약품안전청에 안전성 심사를 신청 하였고, "유전자재조합식품등 안전성평가자료 심사위원회"는 유전자재조합식품의 안전성평가 심사 등에 관

조사보고서 완본(최종인쇄본).hwp

최민지 / 세계무역기구과 / :16:24-2 -


2013_1_14_GM작물실용화사업단_소식지_내지_인쇄_앙코르130.indd

5부-11장(455~459)

- 2 -

2016 학년도약학대학면접문제해설 문제 2 아래의질문에 3-4분이내로답하시오. 표피성장인자수용체 (epidermal growth factor receptor, EGFR) 는수용체티로신인산화효소군 (receptor tyrosine kinases, RTKs) 의일종으로서세

2차 수사분석사례집_최종.hwp

품종개발사고유식별기호 OED UI) 형질 옥수수 aize) Pioneer HiBred International Inc. Pioneer HiBred International Inc. Pioneer HiBred Bayer ropscience K.K orn 678) PH 6

학술원논문집 ( 자연과학편 ) 제 50 집 2 호 (2011) 콩의식품적의의및생산수급과식용콩의자급향상 李弘䄷 * 李英豪 ** 李錫河 *** * Significance of Soybean as Food and Strategies for Self Suffici

Jkafm093.hwp

어린이기호식품1회제공량표시-결과보고서-줄임.hwp

연구보고서화학물질노출에의한유전자돌연변이 ( 발암 ) 의조기확인 (II) - 실험동물을이용한고감도발암성확인기법의검증 - 임경택 김수진

목차 1. 서론 줄기세포의간세포분화능평가시고려사항 간세포분화능평가시험법 분

저작자표시 - 동일조건변경허락 2.0 대한민국 이용자는아래의조건을따르는경우에한하여자유롭게 이저작물을복제, 배포, 전송, 전시, 공연및방송할수있습니다. 이차적저작물을작성할수있습니다. 이저작물을영리목적으로이용할수있습니다. 다음과같은조건을따라야합니다 : 저작자표시. 귀하는원


Cloning

08질병-건강하게-10.7

특집1장(460~469)

차례 어린이를 위한 영양 식생활 실천 가이드 1. 골고루 먹기 4 2. 똑똑하게 먹기 요리사 되어보기 건강한 몸 만들기 복습하기 32

미생물유래물질을이용한식물병방제용작물보호제의산업화


( 제 20-1 호 ) '15 ( 제 20-2 호 ) ''16 '15 년국제개발협력자체평가결과 ( 안 ) 16 년국제개발협력통합평가계획 ( 안 ) 자체평가결과반영계획이행점검결과 ( 제 20-3 호 ) 자체평가결과 국제개발협력평가소위원회

FGUYPYUYJJHU.hwp

Chapter 26

(Establishment and Management of Proteomics Core Facility)

신성장동력업종및품목분류 ( 안 )

歯MW-1000AP_Manual_Kor_HJS.PDF


<4D F736F F F696E74202D20322DC0AFC0FCC0DAB9DFC7F6C0C7C1B6C0FD205BC8A3C8AF20B8F0B5E55D>

¹ÙÀÌ¿À´Ï¾È½º03

제1장 생리학 소개

3월 온라인 교육

안전확인대상생활화학제품지정및안전 표시기준 제1조 ( 목적 ) 제2조 ( 정의 )

(72) 발명자이현주강원삼척시도계읍전두 1리 5반김대중강원춘천시온의동 길 서동주서울서초구방배1동 327-6호유진균강원춘천시신동면증리 발산농장 - 2 -

84/84

저작자표시 - 비영리 - 변경금지 2.0 대한민국 이용자는아래의조건을따르는경우에한하여자유롭게 이저작물을복제, 배포, 전송, 전시, 공연및방송할수있습니다. 다음과같은조건을따라야합니다 : 저작자표시. 귀하는원저작자를표시하여야합니다. 비영리. 귀하는이저작물을영리목적으로이용할

130 화재안전점검매뉴얼 유별성질품명지정수량 1. 산화성고체 : 고체로서산화력의잠재적인위험성또는충격에대해민감성이있는것 * 고체 : 액체 (1 기압및 20 에서액상또는 20 초과 40 이하에서액상 ) 또는기체 (1 기압및 20 에서기상 ) 외의것 2. 가연성고체 : 고체

농림축산식품부장관귀하 본보고서를 미생물을활용한친환경작물보호제및비료의제형화와현장적용매뉴 얼개발 ( 개발기간 : ~ ) 과제의최종보고서로제출합니다 주관연구기관명 : 고려바이오주식회사 ( 대표자 ) 김영권 (

Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No μ μ

System Biology Core

Chapter 6. Nucleotides and Nucleic Acids 세포대사에서뉴클레오타이드 (nucleotide) 의기능은무엇인가? Objective 유전체학 (genomics) 과단백체학 (proteomics) 기본개념이해 재조합 DNA 기술 (recombin

뉴스레터3호-최종

제 2 차 (2013~2015) 어린이식생활안전관리종합계획

의약품의_품목허가·신고_심사 체크리스트_및_세부_업무_매뉴얼.hwp

<BBFDC8ADC7D02E687770>


- 2 -

08ȸ»ç¼Ò°³-³ª³ë¹Í½º

BN H-00Kor_001,160

PowerPoint Presentation

목 차 1. 서론 1 2. 유전자가위기술의개요 세대유전자가위기술 세대유전자가위기술 세대유전자가위기술 9 3. 유전자가위기술의개발현황 국내외유전자가위기술의특허현황 국내외유전자가위기술의비임상연구현황 2

T hwp

Regulation on Approval of Consumer Chemical Products subject to Safety Check without promulgated Safety Standard.hwp

강의 개요

<C7D1B1B9C0CEC0C720B4EBC7A5BDC4B4DCBAB8B0EDBCAD2E687770>

10_겨울호_ 트루최종_PDF

저작자표시 - 비영리 - 동일조건변경허락 2.0 대한민국 이용자는아래의조건을따르는경우에한하여자유롭게 이저작물을복제, 배포, 전송, 전시, 공연및방송할수있습니다. 이차적저작물을작성할수있습니다. 다음과같은조건을따라야합니다 : 저작자표시. 귀하는원저작자를표시하여야합니다. 비

저작자표시 - 비영리 - 변경금지 2.0 대한민국 이용자는아래의조건을따르는경우에한하여자유롭게 이저작물을복제, 배포, 전송, 전시, 공연및방송할수있습니다. 다음과같은조건을따라야합니다 : 저작자표시. 귀하는원저작자를표시하여야합니다. 비영리. 귀하는이저작물을영리목적으로이용할

보도자료 장내미생물유전자의장관련감염질환유도원리규명 - 항생제오용으로발생하는장관련감염질환의진단및치료에기여

May leaflet_final.pdf

<B0A1C0CCB5E5B6F3C0CE5F E687770>

- -

2018년 10월 12일식품의약품안전처장

248019_ALIS0052.hwp

04 Çмú_±â¼ú±â»ç

Chapter 4. Bacteria (the first microbes)


α α α α α

1. 세포의구조와구성요소 1.1 세포의구조 표 1.1 원핵세포와진핵세포의비교 원핵세포 핵막없음있음 인없음있음 DNA( 염색체 ) 한개, 히스톤등단백질과결합안됨 분열무사분열유사분열 진핵세포 여러개의염색체로존재. 히스톤등단백질과복합하게결합됨 원형질막보통스테롤이없음보통스테롤

- 2 -


붙임2-1. 건강영향 항목의 평가 매뉴얼(협의기관용, '13.12).hwp

<30322EBABBB9AE2E687770>

YXYYRXQGLWMZ.hwp

untitled

MHZFNRWLTNZL.hwp

슬라이드 1

<B3EDB4DC28B1E8BCAEC7F6292E687770>

1. 경영대학

항체 포털 서비스 Preparation Peptide 총 4주 소요 / 473,000 ~ 511,000 Free of charge 2~3 days 243,000 ~ 281,000 의뢰서 작성 Peptide epitope prediction 유전자 정보

sirna 실험은잘됐는데... 그러면이제유전자의기능을완전히억제하고싶은데... 1 화 : CRISPR 은손쉽다 CRISPR 에게맡겨봐! 내게염기서열만알려주면 knock out 을시켜버릴게! Gene editing( 게놈편집 ) 을이용하면특정유전자의기능을완전히 knock-

Contents I. 항생제내성 / 감수성기준및용어설명 II. III. 호흡기질병 5 종항생제내성검사결과 소화기질병 3 종항생제내성검사결과

PowerPoint Presentation

Microsoft PowerPoint - 9주차.pptx [읽기 전용]

b77ùµåÆ÷Ä¿½º³»Áö/L265µš


ë–¼ì‹€ìž’ë£„ì§‚ì‹Ÿì€Ł210x297(77p).pdf

[11하예타] 교외선 인쇄본_ver3.hwp

강의 개요

02장.배열과 클래스


<4D F736F F F696E74202D205BC0FCC0DAC4A5C6C7BFEBB1B3BEC85DBAEDB7E7BAA3B8AE5F BC8A3C8AF20B8F0B5E55D>

Vol. 8 No. 43 PUBLIC HEALTH WEEKLY REPORT, KCDC 국내인플루엔자유전자데이터베이스 (KISED) 소개 Introduction of the Korea Influenza Sequence and Epitope Database (KISED)


Transcription:

FG72 2014. 1. 9. 식품의약품안전처 유전자재조합식품등안전성평가자료심사위원회

< 차례 > 1. 요약 1 2. 심사경위 2 3. 심사경과 2 4. 심사방법 2 5. 심사신청자료검토 3 5-1. 심사신청된식품의개요 3 5-2. 식품으로의적합성검토 3 5-3. 유전자재조합체의안전성 3 가. 유전자재조합체의개발목적및이용방법에관한자료 3 나. 숙주에관한자료 3 (1) 분류학적특성( 일반명, 학명, 계통분류등) 3 (2) 재배및품종개량의역사 3 (3) 기지의독성또는알레르기유발성 3 (4) 안전한식경험의유무 4 다. 공여체에관한자료 4 (1) 분류학적특성( 일반명, 학명, 계통분류등) 4 (2) 안전한식경험의유무 4 (3) 공여체및근연종의독성, 항영양성, 알레르기성( 미생물의경우병원성및기지의병 원체와의관련성 ) 5 라. 유전자재조합에대한자료 5 (1) 형질전환에관한정보 5 (2) 도입유전자에대한정보 6 마. 유전자재조합체의특성에관한자료 8 (1) 유전자재조합체내도입된유전자에관한정보 8 (2) 유전자산물에관한정보 10 (3) 독성 11 (4) 알레르기성 13 (5) 숙주와의차이 14 (6) 유전자산물이대사경로에미치는영향( 숙주가함유한고유의성분을기질로하여반 응할가능성 ) 16 (7) 외국의식품유통승인및식용등의이용현황 16 6. 심사신청자료검토결과 16 7. 기타 17

FG72 1. 바이엘크롭사이언스( 주) 는유전자재조합콩 FG72를식품의약품안전처에안 전성심사를신청하였고, 유전자재조합식품등안전성평가자료심사위원회 는 유전자재조합식품등의안전성평가심사등에관한규정 에따라안전성 심사를수행하였다. FG72는 2mepsps(double mutant 5-enolpyruvylshikimate 3-phosphate synthase) 유전자및 hppdpf W336(4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase W336) 유전자를가져제초제인글리포세이트및아이소자플루톨에내성을나타낸다. FG72 에는각각한개의 2mepsps 유전자와 hppdpf W336 유전자가도입되었으며 Southern blot 을통하여도입유전자의재배열이일어나지않았음이확인되었다. 또한, FG72 에도입된유전자는 3 세대에걸쳐안정적으로유지되는것이확인되었다. 2mEPSPS 단백질, HPPD W336 단백질각각의아미노산서열과이미알려진 독소및항영양소의아미노산서열을공용단백질데이터베이스 (Uniprot_Swissprot 등 5 개) 를이용하여생물정보학적으로비교분석한결과, 서열상동성이없는것으로확인되었다. 또한각각의단백질로마우스(mouse) 단회투여독성을평가한결과독성이없는것으로확인되었다. 2mEPSPS 단백질, HPPD W336 단백질각각의아미노산서열과이미알려진 알레르겐의아미노산서열을알레르겐데이터베이스 (AllergenOnline) 를이용하여 생물정보학적으로비교분석한결과, 80 개이상의아미노산으로이루진절편에 걸쳐 35% 이상의상동성을보이는서열은없었으며, 8개씩의인접아미노산과 일치하는서열도확인되지않았다. FG72 와일반콩의주요영양성분, 미량영양성분, 항영양소등의함량을비교한 결과통계학적또는생물학적으로차이가없었다. 또한 FG72 콩이포함된사 료를 42일동안육계에계속해서먹였을때에도일반콩과비교하여영양성에 차이가없는것이확인되었다. 결론적으로, FG72는지금까지식품으로섭취해온콩과비교하여안전성에문 제가없음이확인되었다. - 1 -

2. 심사경위 바이엘크롭사이언스( 주) 는제초제글리포세이트(glyphosate) 와아이소자플 루톨(isoxaflutole) 에내성을나타내는유전자재조합콩 FG72를식품위생 법제18조에따른안전성평가심사를받기위하여 2010년 5월 7일식품 의약품안전처에 유전자재조합식품의안전성평가심사등에관한규 정 ( 이하 심사규정 이라고함) 에서규정한관련자료를첨부하여심사 신청하였다. 이에식품의약품안전처장은본품목이심사규정에따라안전성평가가 이루어졌는지여부에대하여 ' 유전자재조합식품등안전성평가자료심사위 원회'( 이하 심사위원회 라고함) 에검토의뢰하고, 심사위원회는신청인이제출한자료에근거하여아래와같이심사규정에 따라안전성평가가이루어졌음을확인하였다. 3. 심사경과 심사대상품목 대상품목신청자개발자 유전자재조합콩 FG72 바이엘크롭사이 언스( 주) Bayer CropScience 제외국의안전성승인 현황 미국 (2012), 호주 (2012), 캐나다 (2012) 심사경과 - 2010년 5월 7 일 : 안전성평가자료심사신청 - 2010년 5월 13 일 : 심사위원회서류심사의뢰 - 2010년 9월 20 일 : 1차심사위원회개최 - 2011년 12월 20 일 : 2차심사위원회개최 - 2013년 7월 30 일 : 3차심사위원회개최 - 2013년 12월 16 일 : 환경위해성심사완료 ( 농촌진흥청, 국립수산과학원, 국립환경과학원 ) - 2013년 12월 19 일~ 2014년 1월 8 일: 공개의견수렴실시 4. 심사방법 본품목과관련하여심사신청된유전자재조합체가심사규정의적용대상인지를검토하였고, 제출된안전성평가자료가심사규정에서요구하는자료를갖추었는지를확인한후자료의내용을토대로안전성평가자료를심사하였다. - 2 -

5. 심사신청자료검토 5-1. 심사신청된식품의개요 바이엘크롭사이언스( 주) 가심사신청한유전자재조합콩 FG72는 2mepsps (double mutant 5-enolpyruvylshikimate 3-phosphate synthase) 유전자및 hppdpf W336 (4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase W336) 유전자를가져제초제인글리포세이트및아이소자플루톨에내성을나타낸다. 5-2. 식품으로의적합성검토 본품목과관련하여제출된안전성평가자료가심사규정제12조에서요구하는자료를만족시키는지여부를검토하였으며, 자료의내용을토대로다음과같이식품으로서의안전성이확보되어있는지를심사하였다. 5-3. 유전자재조합체의안전성 가. 유전자재조합체의개발목적및이용방법에관한자료 바이엘크롭사이언스는제초제인글리포세이트및아이소자플루톨에내성을나타내도록 2mEPSPS 단백질및 HPPD W336 단백질을발현하는콩을개발하였다. 재배방법및이용방법은기존의콩과동일하다. 나. 숙주에관한자료 (1) 분류학적특성( 일반명, 계통분류등) - 종(Species) : max - 속(Genus): Glycine - 과(Family): Leguminosae - 일반명(Common Name): 콩, 대두 (2) 재배및품종개량의역사 - 역사적, 지리학적증거에의하면콩은동부중국에서기원전 17세기와 11 세기사이에토착화되었다. 미국에는 1765 년, 캐나다에는 1893년에 - 3 -

처음도입되어사료작물로생산되기시작했다 (3) 기지의독성또는알레르기유발성 - 인간은오랜세월콩을재배하고섭취해왔으며세계인구의상당수 - 가콩단백질을함유한식품을소비한다. 콩에는트립신저해제 (trypsin inhibitor), 렉틴(lectin) 과같은항영양소를함유한다. 트립신 저해제와렉틴은열에약하므로열을가하면분해된다. 콩은과민한사람에게는부작용을일으킬수있는알레르기유발단 백질을함유한다고보고되었다. (4) 안전한식경험의유무 - 콩이가지고있는항영양성과알레르기성에도불구하고, 콩은오래전 부터식품으로이용되었다. 두부, 식용유, 간장등의형태로섭취되고 있어, 안전한식품으로서의오랜역사를가지고있다. 콩은단백질 농축물과식물성기름의가장중요한원료이다. 다. 공여체에관한자료 (1) 분류학적특성( 일반명, 학명, 계통분류등) 1 2mepsps 유전자 - 종(Species) : mays - 속(Genus): Zea - 과(Family): Gramineae - 일반명(Common Name): 옥수수 2 hppdpf W336 유전자 - 균주(Strain): A32 - 종(Species): fluorescens - 속(Genus): Pseudomonas - 과(Family): Pseudomonadaceae (2) 안전한식경험의유무 - 옥수수는식품과사료에이용되며, 산업용연료추출을위한원료로도사 용된다. - 4 -

- P. fluorescens는직접적으로식용으로이용된적은없으나, 농업분야에 서성장촉진인자로사용되어왔고, 장억제용생물농약으로사용된다. 몇몇작물및과실에박테리아성 (3) 공여체및근연종의독성, 항영양성, 알레르기성( 미생물의경우병원 성및기지의병원체와의관련성 ) - 옥수수는인간이나동물에대한병원성생물체로알려지지않았다. - P. fluorescens 균주들은일반적으로비병원성박테리아로분류되지만, 면역체계가손상된환자들에대한기회감염균으로분류된다. 그러나 체온상태에서빠르게증식할수없으며숙주의방어체계에대응할능 력이없기때문에감염성이낮다. 라. 유전자재조합에대한자료 (1) 형질전환에관한정보 ( 가) 형질전환방법 - 입자총법을사용하였다. ( 나) 재조합에사용된벡터에대한정보 1) 기원 - 플라스미드벡터 psf10은상용플라스미드 pmsc5 의유도체이며, 2mepsps 유전자카세트와 hppdpf W336 유전자카세트가삽입되었다. 2) 숙주에서의확인 - Southern 분석과염기서열분석을통하여유전자재조합콩 FG72에는단일유전자자리에두카피의도입유전자가삽입되어있음이확인되었다. 3) 숙주에서의기능 - FG72 콩은 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질을발현하여글리 포세이트와아이소자플루톨에내성을나타낸다. ( 다) 중간숙주에대한정보 - 유전자재조합과정에서중간숙주는사용되지않았다. - 5 -

( 라) 전달성에관한정보 - 플라스미드벡터 psf10은숙주이외의다른생물체로스스로이동될수있는전달성과관련된유전자를포함하고있지않다. (2) 도입유전자에대한정보 ( 가) 구성유전자의특성 1) 선발표지유전자 - 2mepsps : Zea mays L. 의 epsps 유전자서열에서유래되었다. 2mepsps 유전자는 2mEPSPS 대한내성을부여한다. - hppdpf W336 : P. fluorescens strain A32의 단백질을암호화하며글리포세이트에 hppd 유전자서열에서유 래되었으며, HPPD W336 단백질을암호화하며아이 소자플루톨에대한내성을부여한다. 2) 조절인자 - 2mepsps 유전자는 Pha4a748At 프로모터, intron1 h3at 인트론, TPotp c 목표서열, 3 histonat 터미네이터에의해조절된다. - hppdpf W336 유전자는 Ph4a748 ABBC 프로모터, 5 tev 리더, TPotp Y 목표서열, 3 nos 터미네이터에의해조절된다. 3) DNA 의기능에영향을주는기타인자 - 삽입유전자발현과관련된인자이외의다른염기서열은삽입되지 않았다. ( 나) 크기및명칭 - 2mepsps 유전자와 hppdpf W336 유전자는각각 1,338bp와 1,077bp이 며, 다른구성인자는 [ 표 1] 과같다. [ 표 1] 플라스미드벡터(pSF10) 의주요구성요소 명칭위치 (bp) 유래및기능 3'nos 3262-3553 CaMV 유래 35S 프로모터영역의일부및 Rsyn7-SynCoreII 프로모터영역으로부터구축된전사개시를위한프로모터. - 6 -

hppdpf 3554-4630 TPotp Y 4631-5002 유전자재조합콩 FG72에서발현되는 HPPD W336 단백질은 Pseudomonase에서유래된 HPPD 의돌연변이형태로, 336번 Gly 잔기가 Trp로치환 단백질이엽록체막을통과할수있도록유도해주는기능을하며, 최 적화된식물염기서열로구성되어있다. 최적화된 transit peptide 유 도체(55 번아미노산이 Tyr 로치환됨 ) 에추가된코딩염기서열은옥 수수와해바라기 RuBisco small submit 유전자의염기서열을포함 5'tev 5003-5143 leader sequence Ph4a748 ABBC 5144-6433 Arabidopsis thaliana histone H4 gene 유래 Ph4a748 6434-7448 유전자의전사개시를위한프로모터 intron1 h3at 7449-7929 2mepsps 8302-9639 애기장대 histone H3.III 이형유전자들중유전자 II의첫번째인 트론 옥수수에서유래하였으며, 변형된 5-enolpyruvylshikimate 3-phosphate synthase 를암호화한다 3'histonAt 9640-10326 식물조직에서지속적으로유전자발현을유도 10327-1039 81-232 pmcs5 vector 233-457 puc19 벡터의 Sequences ORI ColE1 458-1244 Plasmid pfr322 E.coli 유래의복제개시점 1245-1403 puc19 벡터의 Sequences bla 1404-2264 Plasmid pfr322 E.coli 유래의 beta-lactamase 유전자단편 2265-2394 puc19 벡터의 Sequences ORI f1 2395-2840 phage에서의복제를위해 phage f1에서유래한것 2841-3261 puc19 벡터의 Sequences ( 다) 완성된벡터내의유전자염기서열의위치및방향성 - 제한효소지도, 벡터내에서의유전자위치, 방향성은 [ 그림 1] 과같다. - 7 -

[ 그림 1] psf10의유전자위치및제한효소위치 ( 라) 구성유전자의기능 - 삽입된 2mepsps 유전자는 2mEPSPS 단백질을암호화하며, 글리포세이 트에내성을부여한다. - hppdpf W336 유전자는 HPPD W336 단백질을암호화하며, 아이소자 플루톨에내성을부여한다. ( 마) 유해염기서열의유무 - 유해염기서열은존재하지않는것으로나타났다. ( 바) 외래전사해독프레임의유무와그전사및발현가능성 - 목적으로하는 2mEPSPS 및 HPPD W336 단백질의발현과관련된서 열이외전사및발현가능성이있는새로운외래전사해독프레임이존 재하지않는것으로나타났다. ( 사) 목적하는유전자이외의염기서열의혼입 - 목적하는유전자이외의염기서열은혼입되지않았다. 마. 유전자재조합체의특성에관한자료 (1) 유전자재조합체내도입된유전자에관한정보 - 8 -

( 가) 유전자재조합체의게놈에삽입된유전자의특성및기능 - 유전자재조합콩 FG72에도입된 2mepsps 유전자는 2mEPSPS를암호 화한다. 2mEPSPS 단백질은옥수수에서유래한 EPSPS 단백질에서두 개의아미노산(102 및 106 번째) 이치환되었으며, 식물에글리포세이트 내성을부여한다. - hppdpf W336 유전자는 HPPD W336 단백질을암호화한다. HPPD W336 단백질은 Pseudomonas 에서유래한 HPPD 단백질에서하나의 아미노산(336 번째: Gly Trp) 이치환되었으며, 식물에아이소자플루 톨에대한내성을부여한다. ( 나) 삽입부위의수 - 유전자재조합콩 FG72에는단일유전자자리에 2mepsps 유전자및 hppdpf W336 유전자카세트가삽입되어있는것이확인되었다 [ 그림 2]. ( 다) 각삽입부위의삽입유전자의구성 1) 복제수, 염기서열( 주변염기서열포함) - Southern 분석과염기서열분석결과, FG72의게놈에는두개의 2mepsps 및 hppdpf W336 유전자카세트가도입되었음이확인되었다. - 도입된염기서열중두개의 3 histonat 염기서열일부가마주보는 (head to head) 방향으로위치해있으며, Ph4a748 프로모터염기서 열중일부(158bp) 가 3 연결부위에삽입된것이확인되었다. - 아래의 [ 그림 2] 는유전자재조합콩 FG72 안에플라스미드삽입유 전자의전체적인모식을나타내고있다. [ 그림 2] 유전자재조합콩 FG72에서삽입유전자의모식도 2) 기지의독성이나항영양소를암호화하는유전자가없음을입증하는 자료 - 9 -

- 기지의독성이나항영양소를암호화하는것으로알려진유전인자는 FG72 콩의삽입 DNA 에존재하지않는다. ( 라) 삽입유전자및인접하는숙주게놈유전자의외래전사해독프레임의 유무와그전사및발현가능성 - 시작코돈과종결코돈으로정의된전사해독프레임(ORFs) 8개가새로 형성된것으로확인되었으나, 동 ORF는발현되더라도이미알려진알 레르겐및독소와상동성이없는것으로확인되었다. ( 마) 안정성에관한사항 1) 복수세대에서삽입된유전자의서열, 크기 - FG72에존재하는삽입 DNA 의안정성을평가하기위해 FG72 DNA 를사용하여 3 세대(T2, T7, T9) 에걸친 Southern blot 분석을실시한 결과 3세대에걸쳐 FG72에삽입된 DNA 가유지됨이확인되었다. 2) 복수세대에서발현부위, 발현시기, 발현량 - FG72의줄기와뿌리에서의 2mEPSPS 단백질발현량과 HPPD W336 단백질의발현량을 3 세대에걸쳐효소면역측정법(ELISA) 으로분석한 결과, 3 세대에걸쳐안정적으로발현됨이확인되었다. (2) 유전자산물에관한정보 ( 가) 유전자산물의화학적성질 - 유전자재조합콩 FG72의 2mEPSPS 단백질은 445개아미노산으로이 루어지며, 47kDa 의분자량을가지며, HPPD W336 단백질은 358개 아미노산으로이루어지며, 분자량은 40kDa 의분자량을가진다. ( 나) 유전자산물의기능 - 2mEPSPS 단백질은옥수수에서유래한 EPSPS 단백질에서두개아 미노산이치환된형태이며, 글리포세이트에대한내성을나타낸다. 그리고 HPPD W336 단백질은 Pseudomonas에서유래한 HPPD 단백 질에서한개아미노산이치환된형태이며, 내성을나타낸다. 아이소자플루톨에대한 - 10 -

( 다) 발현단백질의아미노산서열의번역후변이유무 - 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질에대하당화분석을실시한결과, 당화되지않았음을확인하였다. ( 라) 발현단백질의구조적변화여부 - SDS-PAGE 를통한분자량분석, Western blot을통한면역반응성분 석, LC-MS를통한질량분석을통해 FG72 유래 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질에는구조에변화가없는것으로확인되었다. ( 마) 새로운특성의표현형 - 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질이발현됨에따라글리포세이트와아이소자플루톨에내성을나타낸다. ( 바) 유전자산물의발현부위및발현량 - FG72의다양한조직에서 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질발현 수준을효소면역측정법(ELISA) 으로분석한결과, - 2mEPSPS 단백질의평균발현수준은잎(V6) 에서 6.48 μg/g 생체중량 으로가장높았으며, 알곡에서는 1.27 μg/g 생체중량으로확인되었다. - HPPD W336 단백질의평균발현수준은잎(V8) 에서 115 μg/g 생체중 량으로가장높았으며, 알곡에서는 2.37 μg/g 생체중량으로확인되었 다. (3) 독성 ( 가) 생산물이단백질인경우 1) 안전한식경험의유무 - 이미승인되어상업화중인유전자재조합옥수수(GA21) 과유전자재 조합면화(GHB614) 는 2mEPSPS 단백질을발현한다. - HPPD W336 단백질에대한직접적인식경험은없으나, HPPD 단백 질은박테리아, 곰팡이, 식물및포유류를비롯한동물등대부분의 생물계에걸쳐흔히존재한다. - 11 -

2) 기지의독성및항영양소와의아미노산서열유사성 - 공용단백질서열데이터베이스 (Uniprot_Swissprot, Uniprot_TrEMBL, DAD, 서열과 결과, GenPept) 를통해이미알려진독소및항영양소의아미노산 2mEPSPS의아미노산서열을생물정보학적으로비교분석한 데이터베이스상에존재하는독소및항영양소의아미노산서 열과상동성이없는것으로확인되었다. - 공용단백질서열데이터베이스 (Uniprot_Swissprot, Uniprot_TrEMBL, DAD, 노산서열과 PDB, GenPept) 를통해이미알려진독소및항영양소의아미 분석한결과, HPPD W336의아미노산서열을생물정보학적으로비교 패혈증비브리오에서유래한세균성독소로알려진 VLLY 단백질과 54% 상동성이확인되었고, Legionella pneumophila 에서 유래한 LLY 단백질과 49%~50% 의상동성이확인되었다. 그리고 VLLY 및 LLY 단백질은 HPPD family 에속하는것으로확인되었다. 3) 유전자산물의물리화학적처리에대한감수성 - SDS-PAGE 를통한분자량분석, Western blot을통한면역반응성분 석, LC-MS를통한질량분석을통해 FG72 유래 2mEPSPS 단백질및 HPPD W336 단백질은 E. coli 유래 2mEPSPS 단백질및 HPPD W336 단백질과비교하여특성에차이가없어대체산물로이용해도문제가 없음이입증되었다. - 인공위액안정성 : 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질모두인 공위액에서쉽게분해되는(30 초이내) 것으로확인되었다. - 인공장액안정성 : 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질모두인공 장액에서쉽게분해되는(30 초이내) 것으로확인되었다. - 열안정성 : 2mEPSPS 단백질은 60 온도조건에서 10분간의열처리 에의해완전히비활성화되는것으로확인되었다. HPPD W336 단백 질은 60 및 95 온도조건에서 2.5분간의열처리에의해완전히 비활성화되는것으로확인되었다. 4) 안전한식경험이없는단백질인경우경구독성실험 - Crl:OF1 마우스를대상으로 2mEPSPS 단백질( 실험군) 및 BSA 단백 질( 대조군) 에각각 2,000mg/kg body wt. 용량으로단회강제투여한 결과사망사례는없었으며, 처리에따른임상학적징후, 체중및체 중증가량에서부정적인영향은확인되지않았다. 부검에따른병리 소견에서실험물질투여에따른부정적인영향이발견되지않았다. - Crl:OF1 마우스를대상으로 HPPD W336 단백질( 실험군) 및 BSA 단 - 12 -

백질( 대조군) 에각각 2,000mg/kg body wt. 용량으로단회강제투여 한결과사망사례는없었으며, 처리에따른임상학적징후, 체중및 체중증가량에서부정적인영향은확인되지않았다. (4) 알레르기성 ( 가) 유전자산물이알레르겐으로알려지고있는가에관한자료 - 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질이알레르겐이라는보고는없다. ( 나) 유전자산물의물리화학적처리에대한감수성 - SDS-PAGE 를통한분자량분석, Western blot을통한면역반응성분 석, LC-MS를통한질량분석을통해 FG72 유래 2mEPSPS 단백질및 HPPD W336 단백질은 E. coli 유래 2mEPSPS 단백질및 HPPD W336 단백질과비교하여특성이차이가없어대체산물로이용해도문제가 없음이입증되었다. - 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질은모두인공위액또는인공 장액과같은소화효소에의해쉽게분해되며, 소활성을잃는것으로확인되었다. 열처리에의해쉽게효 ( 다) 유전자산물중이미알려져있는알레르겐과상동성에관한자료 - 2mEPSPS 단백질및 HPPD W336 단백질의아미노산서열과이미알려진알레르겐의아미노산서열을알레르겐데이터베이스 (AllergenOnline) 를이용하여분석한결과 80개아미노산절편에걸쳐 35% 이상의상동성을보이는알레르겐서열은없었으며, 8개씩의인접아미노산과일치하는서열도확인되지않았다. ( 라) 유전자산물이 1일단백섭취량의유의한양을차지하고있는지에관한자료 - FG72가상업화되어한국에서의모든콩수요량을 FG72로대체한다고 가정하더라도, - 보건복지부의국민건강영양조사 3 기(2005) 통계를바탕으로 kg 체중당 콩을가장많이섭취하는만 1~2세의단백질 1인 1일평균섭취량중 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 4.4 10-4 % 와 2.4 10-4 % 로계산되었다. 단백질이차지할수있는비율은각각 - 한국농촌경제연구원의식품수급표 (2005) 통계를바탕으로, 한국인의단백 질 1인 1일평균섭취량중 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질이 - 13 -

차지할수있는비율은각각 7.6 10-5 % 와 4.1 10-5 % 로계산되었다. - 이상으로한국소비자의 1일 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질 섭취량은한국소비자의 판단되었다. 1일단백섭취량과비교하면매우낮을것으로 (5) 숙주와의차이 - 2008년미국 10개지역에서 FG72 알곡과일반콩알곡을수확하여성 분분석을실시하였으며, linear mixed model 을사용하였다. ( 가) 주요영양성분 1 일반성분 - 분석한일반성분(7 개) 중회분은통계적으로유의적인차이를보였으 나, 문헌범위이내에존재하였으므로생물학적으로유의적인차이가 없음이확인되었다. - 처리시험장(treat site) 별상호작용이있는탄수화물은개별시험장별 분석(by-site analysis) 을통하여각지역별로일관성있는유의적인 차이가없음이확인되었으며, 학적으로유의적인차이가없음이확인되었다. 문헌범위이내에존재하였으므로생물 2 아미노산 - 분석한아미노산(18 개) 중통계적으로유의적인차이를보이는아미 노산은없는것으로확인되었다. - 처리시험장별상호작용이있는 serine은개별시험장별분석을통하 여각지역별로일관성있는유의적인차이가없음이확인되었으며, 문헌범위이내에존재하였으므로생물학적으로유의적인차이가없 음이확인되었다. 3 지방산 - 분석한지방산(9 개) 중 8 개지방산(C16:0, C18:0, C20:0, C22:0, C18:1, C20:1, C18:2, C18:3) 은통계적으로유의적인차이를보였으나, 모두문헌범위이내에존재하였으므로생물학적으로유의적인차이가없음이확인되었다. - 처리시험장별상호작용이있는 lignoceric acid(c24:0) 는개별시험장별분석을통하여각지역별로일관성있는유의적인차이가없음이확인되어생물학적으로유의적인차이가없음이확인되었다. - 14 -

( 나) 미량영양성분 1 미네랄 - 미네랄중칼슘, 마그네슘, 나트륨은통계적으로유의적인차이를보 - 였으나, 모두문헌범위이내에존재하였으므로생물학적으로유의적 인차이가없음이확인되었다. 처리시험장별상호작용이있는칼륨은개별시험장별분석을통하여 각지역별로일관성있는유의적인차이가없음이확인되었으며, 헌범위이내에존재하였으므로생물학적으로유의적인차이가없음이 확인되었다. 문 2 비타민 - 비타민중비타민 B1, 감마토코페롤, 총토코페롤은통계적으로유의 적인차이를보였으나, 적으로유의적인차이가없음이확인되었다. 모두문헌범위이내에존재하였으므로생물학 - 처리시험장별상호작용이있는비타민 A, 비타민 K, 알파토코페롤은 개별시험장별분석을통하여각지역별로일관성있는유의적인차 이가없음이확인되어생물학적으로유의적인차이가없음이확인되 었다. 었다. 알파토코페롤은문헌범위이내에존재하는것이추가로확인되 ( 다) 내재성독소 - 콩에대한오랜기간의안전한식경험에서내재성독소로인하여인간이나동물의건강에부정적인영향을끼쳤다는보고는없었다. ( 라) 영양억제인자 - 영양억제인자( 피트산, 라피노오스, 스타키오스, 렉틴, 트립신저해제) 중라피노오스, 트립신저해제는통계적으로유의적인차이를보였으 나, 모두문헌범위이내에존재하였으므로생물학적으로유의적인차 이가없음이확인되었다. ( 마) 알레르기유발성분 - 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질이알레르겐이라는보고는없다. - 15 -

( 바) 삽입된유전자의대사산물 - 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질모두인공위액또는인공장액과같은소화효소에쉽게분해되며, 열처리에의해쉽게면역반응성또는생물학적활성을잃는것으로확인되었다. ( 사) 영양성 - Ross 308 육계를이용하여유전자재조합콩 FG72와일반콩이각각 20% 가들어간사료를 42 일동안섭취시킨결과, 폐사율, 증체량, 모이섭취량및사료효율, 도체중량등모든항목에서특이적영향은관찰되지않았다. (6) 유전자산물이대사경로에미치는영향 - 2mEPSPS 단백질과 HPPD W336 단백질은효소활성이없고, 식물대사 경로와연관성을지니고있지않다. (7) 외국의식품유통승인및식용등의이용현황 - 현재까지미국(2012), 호주/ 뉴질랜드 (2012), 캐나다(2012) 에서승인받았다. 6. 심사신청자료검토결과 이상의검토내용과같이심사규정에따라제출된안전성평가자료를 심사한결과, 사용된공여체, 숙주및유전자재조합과정등이식품으로 이용시안전성문제를유발하지않는다고판단되었다. 유전자재조합체에관해서도도입된유전자, 유전자산물, 알레르기성, 독성 및영양성등에서안전성평가에필요한적절한자료가제출되었다. 자료를토대로검토한결과지금까지식품으로섭취해온콩과비교하여 안전성에문제가없음이확인되었다. 이 7. 기타 유전자변형생물체의국가간이동등에관한법률 에의하여유전자재 조합콩 FG72 의작물재배환경, 자연생태계, 해양생태계에대한환경위 해성은농촌진흥청, 국립환경과학원, 국립수산과학원에서심사완료하였다. - 16 -