Report of preclinical test (Analysis of INALYZER of an accuracy of body composition by using laboratory animal) Requesting Company Conducting Institution 503, BI Center, 82, Gumi-ro 173, Shingu College, 377, Bundang-gu, Gwangmyeong-ro, Address Address Seongnam-si, Jungwon-gu, Gyeonggi-do, Seongnam-si, South Korea Gyeonggi-do, South Korea Name of Name of Seoul National University Medikors Inc. Company Institution Bundang Hospital Director Guillian, Yoon Director Cheol Hee, Lee Incharge : Hak Jong, Lee
Ⅰ. Objetive of Test To check an accuracy of INALYZER's body composition, which is a product of our cooperation, we did a performance test between INALYZER and PIXImus II, which is commonly used. Ⅱ. Type of testing device 1. INALYZER <main body> <main screen of the program>
<screen image of operating> 2. PIXImus II <program screen(left) and main body(right)>
Ⅲ. Preclinical Test 1. Approval of animal study - Name of study : Analysis of INALYZER of an accuracy of body composition by using laboratory animal - Approval number : BA1405-152/021-01 - Study period : 05/May/2014 ~ 31/Nov/2015 - Plan and approval of animal study : refer to the attachment 1,2 2. Type and quantity of the laboratory animal - Breed : Balb/C Nude Mouse / female - Day age : 8 week old - Weight : about 20g - 10 mice for each test - A test completed in two times 3. Method of Study - Animal's stabilizing for a week after carrying it - Conducting an experiment at least more than 3 times with INALYZER on the same condition at the same day - Conducting a same experiment at least more than 3 times with PIXImus II of GE, which is a typical device for body composition analysis, on the same condition at the same day - In case of need take its tissue on the very day and analyze body composition - Analyzing a data difference between PIXImus II of GE and INALYZER's of the cooperation company by using paired t test 4. Observation point - Measuring at least more than 3 times a day on the same day and observing total body weight, BMC, BMC, lean and Fat
5. Standards for valuation and methods of statistical analysis Standards for valuation : - Body fat data gained by INALYZER - Ratio of Bone data gained by INALYZER - Ratio of Lean data gained by INALYZER - Ratio of body weight gained by INALYZER - Body fat data gained by GE PIXImus II - Ratio of Bone data gained by GE PIXImus II - Ratio of Lean data gained by GE PIXImus II - Ratio of body weight gained by GE PIXImus II Methods of statistical analysis : - Analysis of statistical significance using paired test by parametric statistics as it is a data of same object gained by two kinds of measuring methods - Finding a correlation coefficient of measured values between PIXImus II and INALYZER
Ⅵ. Results of Test Result of first test (05/Sep/2014) - average values of 3 times of measurement Result of second test (29/Oct/2014) -average values of 3 times of measurement
Ⅴ. Consideration - As we analyzed data on BMD, BMC, FAT, LEAN and TOTAL from the same object by INALYZER and PIXIMUS 2, we made a conclusion that the data is meaningful. - Each device's total weight of body composition and measured data by scale are correlated by 99%(PIXIMUS2) and 95%(INALYZER). Through a cause analysis of the first test, we found INALYZER's complementary points, improved the algorithm and planned second test. - After the second test, we analyzed a weight with paired T test and found that INALYZER's measured data is more approached to the data of scale than PIMIMUS2's data. It shows INALYZER's higher accuracy.
별첨.1 [ 별지제 1 호서식 ] 동물실험계획승인신청서 동물실험 과제명 ( 국문 ) 동물모델을이용한 INALYZER 의체성분정확도분석 ( 영문 ) Analysis by using INALYZER in animal model. 성명소속직급연락처 ( 내선 / 휴대폰번호 ) 이학종영상의학과부교수 7605/010-3079-7605 책임연구자 E-mail hakjlee@snubh.org 실험기간 위원회승인일이후 ~ 실험분야 교육이수 실험비제원 * 실험기간은위원회승인일이후최장 3년까지로제한하며, 승인기간은 1년을초과할수없습니다. 따라서 1년이상의실험기간승인을받은동물실험계획은 1년마다재승인신청서를제출하시어승인을받으시기바랍니다. 전임상실험센터이용에따른준수사항 1. 본인은연구를진행함에있어실험동물의윤리적사용과 3R 원칙에따라동물실험의수행에대하여충분히검토하였습니다. 2. 본인은분당서울대학교병원동물실험윤리위원회에서검토후승인한계획서의내용에따라실험을진행할것이며, 계획을변경할경우변경계획서를통해동물실험윤리위원회에알리고동의를얻을것입니다. 또한과제책임자로서등록된실험수행자들이실험동물의윤리적사용과승인된동물실험방법을준수하도록책임 지도하겠습니다. 3. 본인은동물이참을수없는고통을호소하거나질병에이환되었을때안락사를포함한수의사의조치가이루어지는것에동의합니다. ( 조치전에위원회의심의및안내가있을것입니다.) 4. 위사항의이행과함께위원회및전임상실험센터운영자의결정에적극협조하고따를것을서약하며본동물실험계획승인서를제출합니다. 동물실험신청서에기재된사항들은정확하며위사실을위반할경우실험동물시설의이용제한을포함한불이익을감수하겠습니다.
1. 연구참여자 * 동물실험을수행할모든연구자를기입하기바라며칸이모자랄경우해당칸을복사하여추가기 입하여주십시오. * 실험동물의사용 관리에관한교육 ( 동물실험수행자법정이수교육 ) 또는 전임상실험센터 이용자교육 ( 신규교육 ) 을이수한경우이수란에체크하시고이수번호를기입해주십시오. 이수번호는 Besrcare>MSRI> 기초관리 > 교육관리 > 교육내역조회에서확인하실수있습니다. ( 문의 : 내선 1242) 성명 이학종 소속 영상의학과 직급 부교수 원내번호 7605 휴대폰 010-3079-7605 E-mail hakjlee@snubh.org 교육이수 성명 조애신 소속 영상의학과 직급 연구원 원내번호 8115 휴대폰 010-8621-5320 E-mail aesin532@naver.co m 교육이수 성명 박소연 소속 영상의학과 직급 연구원 원내번호 8115 휴대폰 010-6552-8066 E-mail R1112@snubh.org 교육이수 성명 박시형 소속 영상의학과 직급 연구원 원내번호 8115 휴대폰 010-4757-5474 E-mail R1237@snubh.org 교육이수 2. 동물실험대체법과불필요한동물실험의금지 * 가능하면동물실험을줄이기위한노력을확인하고자합니다. 2-1. 수행할연구가동물에대한불필요한반복실험을하지않는다는내용을확인하기위한것입니다. 다음중검색한자료에표시해주시고검색시에사용한핵심단어를기입하여주십시오. 검색한자료 검색 Key words INALYZER, GE 사의 PIXImus II 2-2. 실험에사용할동물의수를줄이거나동물의고통을줄이기위하여동물실험을대체할연구방법등을검색한조사자료를확인하기위한것입니다. 다음중검색한자료에표시해주시고검색시에사용한핵심단어를기입하여주십시오. 검색한자료 검색 Key words 검색결과 INALYZER, GE 사의 PIXImus II 대체수단이있으나이연구에적용하기어려운이유 :
* 위에서제시한 data base 혹은그이외다른 data base를검색하여 동일한동물실험을반복하지않는다 는연구자의실험내용을확인하시기바랍니다. * 검색을하여동물실험대체수단이없는경우에는표시해주시고대체수단이있어도연구에적용하기어려운경우에는이유를기술하여주십시오. 3. 실험동물 3-1. 사용할실험동물의수량및세부사항을 기술하여주십시오. 1 2 3 품종 (Species) Mouse 계통 (strain) Nude 성별 (sex) 일령 8 주령 체중 35~40g 수량 20 미생물 성상 반입처 반입구분 구입의뢰 * 반입구분은구입의뢰 ( 전임상과단가계약된동물구입의뢰 ), 개인구입 ( 동물생산시설개인구 입 ) 외부기관반입 ( 국내외외부대학병원, 대학, 연구소등에서연구목적으로반입또는 breeding 목적으로반입 ) 자체번식 ( 연구목적에의한 breeding pair 반입후자체번식에의해 생산계획동물들 ) 중선택을하십시오. * 자체번식에의해생산되는동물은계통 (strain) 난에 substrain도적어주시고, -/-, +/+, +/- 등으 로표기통일해주시기바랍니다. * 개인구입하는경우반입처를기입하시고, Mouse와 Rat의경우동물신청시에미생물모니터 링자료를, Dog의경우백신접종증명서를첨부해야합니다. * 현재전임상실험센터와단가계약된동물품종은 Rat (SD), Mouse (BALB/C, C57BL/6, ICR, Nude, C3H, F1 Hybrid, DBA2), Dog ( 잡견 ), Pig ( 삼원잡종 ), 토끼 (NZW conventional) 입니다. 그외품종은동물생산업체에서직접개인구입하셔야합니다. 3-2. 해당동물종을선택한합리적이유 본장비는작은동물의체지방을 쉬운누드마우스를선택함. 정확하게재기위한기기이므로작은소동물이필요하고다루기 3-3. 사용동물수에대한합리적근거사유및동물의수를산출한통계학적근거제시장비를이용해촬영한자료를비교분석하기위해서최소 10마리를대상으로비교할예정이며, 유의성있는데이터산정을위해총 2번반복실험할예정이므로총 20마리정도필요함.
4. 동물실험의범주및종류 4-1. 동물의고통정도에따른동물실험계획의분류기준을선택하여주십시오. 원생동물, 무척추동물을사용하는실험 척추동물을사용하지만거의고통을주지않는 실험 척추동물에게약간의스트레스혹은단기간의 작은통증을주는실험 척추동물에게회피할수없는스트레스혹은통증을주는실험 ( 진정제, 진통제, 마취제등을사용 ) 척추동물에게회피할수없는스트레스혹은통증을주는실험 ( 진정제, 진통제, 마 취제등을사용할경우실험결과에부정적인영향을주는실험등 ) 고통등급 E 에해당되는동물실험은원칙적으로불허하나, 불가피한동물실 험은 4-2 번사유기재 1. 고통등급 B: 1) 생산, 공급목적으로사육, 2) 관찰또는검사를목적으로한단기간의보 정 2. 고통등급 C: 1) 채혈, 2) 부작용이없는물질의 I.V., S.C., I.M., I.P., 구강투여, 3) 심마취 후혈액채취를동반한안락사 ( 항혈청생산 ), 4) 안락사 ( 심마취 ) 실시후단시간내조직채 취하는비생존실험, 5) 경미한증상의전염성원인체감염후임상증상등발현시안락사 3. 고통등급 D: 1) 심마취실시하에조직등채취한다음회복하는생존실험, 2) 심마취실 시하에장시간동안조작 ( 수술등 ) 을실시하는비생존실험, 3) 장기간의물리적억압상태 유지실험, 4) 결핵사균이포함된 FCA( 면역증강제 ) 투여로염증, 괴사발생, 5) 안와채혈등 4. 고통등급 E: 1) LD50 측정또는독성시험등죽음을종료시점으로설정, 2) 항암실험, 3) 마우스복강내단클론항체 ( 복수 ) 생산등 4-2. 고통등급 E 에해당되는동물실험을수행하는사유를 ( 필요시, 별지로상세사유첨 부 ) 기술하여주십시오. ( 상세사유기재 ) 예. 통증실험수행으로진통제를사용하면연구결과에영향을미침 ( 상세사유기재 ) 예. LD50 측정을위한독성실험 연구목적상인도적종료시점을채택하지않고동물의죽음을종료시점으로설정해야함. 4-3. 동물실험의종류를선택하여주십시오 ( 해당되는모든사항에표시하시오 ). 5. 실험동물의사육관리 * 전임상실험센터에서사육되는실험동물은수의사와실험동물기술사에의해사육관리가수행 됩니다.
* SPF구역내의 mouse, rat은외부반출후 SPF zone으로의재반입이불가능하며, clean room 을이용할수있습니다. 반출전에담당자에게연락을하여 clean room의 cage현황을파악하셔야합니다 * 중대동물의특수실험의경우반출후사육실로의재반입을허가합니다. 5-1. 실험동물사육장소 5-2. 특별한주거및사육조건필요유무 [ 특정사육장비및도구반입필요성 / 특정사료공급등 ] 시설에반입이필요한 장비및도구 : 특정사료공급 : 그외기타 : 해당없음 5-3. 전임상실험센터이외의장소로실험동물이동 [ 장소및실험내용에관한 자세히기술 ] 장소 : 해당없음 이용장비 : 실험내용 : * 동물이반출되는모든경우, 반출되기최소 2일전에제출하여 실험동물이동신청서 을작성하셔서사전에허가를받아야합니다. 실험동물사육시설이외의장소로동물을이동시켜실험할경우장소, 이용장비및연구내용을기재하여주십시오. 5-4. 사료및음수제한 [ 실험과정중실험동물의사료및음수섭취를강제적으로제한할경우 ( 실험기간 / 방법 / 1회처치시간 / 반복횟수자세히기술 )] 실험기간 : 해당없음 방법 : 1 회처치시간 : 반복횟수 : 5-5. 실험기간중운동제한 [ 실험과정중실험동물의운동을강제적으로제한할경우 ( 실험기간 / 방법 / 1회처치시간 / 반복횟수자세히기술 )] 실험기간 : 해당없음 방법 : 1 회처치시간 : 반복횟수 :
6. 실험동물의수의학적관리 * 동물시험시권장하는동물종별약물용량등은그룹웨어 > 병원정보 > 업무정보 > 의생명연구원 > 전임상실험센터게시판의 동물종별진정 진통 마취제투여권장량안내 를참고하십시오. 6-1. 실험중실험동물의고통관리 [ 종류 / 용량및용법기술 ] 해당없음흡입마취 Isoflurane (1-5% with Oxygen 2L/min) 주사마취 Zoletil 50 (250mg/5ml, Vibrac) + Xylazin 마취제 (27.3mg/ml, 10ml, 바이엘 ) (Volume ratio 60μl :40μl을 saline으로 10배희석한후에 500μl IP) 진통제기타방법마약류사용 * 마취제예 ( 단위- mg/kg): Ketamine+Xylazine (Mouse 80-100+10 IP, Rat 90+10 IP, Rabbit 35+5 IM, Dog 10+2 IM, Pig 20+2 IM), Zoletil+Xylazine(Mouse 30+10 IP, Rat 30+10 IP, Rabbit 15+5 IM, Dog 5-7+0.2 IM, Pig 4-6+4.4 IM), * 진통제예 : Ketoprofen(Toradol: Rat 5 PO, SC 매일, Rabbit 3 SC 매일, Dog 1 IV, IM, SC 매일 ) 등 6-2. 안락사방법 [ 마취제사용 ( 종류및용량등기술 ), CO 2 등 ] 실시자실험을완료하거나인도적으로실험을종료한동물을호흡마취나주사마 취를통하여마취유도후경추를탈골하여안락사를유도함. 안락사유도 시반드시마취를 선행하여고통이없도록진행함. 실험동물의사체 는계획된실험외의용도로는사용되지않으며, 허가받은업체를통 박소연 하여방법적인방법으로분리, 폐기처리할예정임. * 안락사의방법 이란동물실험이종료될때또는윤리적측면에서의실험도중에인도적으로실험을 종료하는경우에별도의고통이나두려움없이빠른시간내에동물의의식소실을유발시키는방법 입니다. * 허용되는안락사방법은 1) 마취제 ( 흡입마취제, 주사마취제 ), 2) CO 2 가스, 3) 경추탈구 ( 마우 스, 200g 이하랫드대상이며, 마취상태또는숙련된기술을보유한자에의해수행 ), 4) 심 마취상태에서방혈, 5) 심마취상태에서 KCL 정맥주사투여, 등이있습니다. 기타안락사 방법은그룹웨어 > 병원정보 > 업무정보 > 의생명연구원 > 전임상실험센터게시판의 실험동물의 인도적종료시점및안락사법안내 를참고하십시오. 6-3. 수술후관리 [ 생존성수술인경우항생제투여 / 진통제투여 / 기타 방법에관해기술 ] 항생제투여 : 해당없음 진통제투여 : 기타 :
6-4. 윤리적측면에서의인도적인종료시점 (humane endpoint) 기준해당없음본실험은체성분분석장비인국내 INALYZER와 GE사의 PIXImus II의정량적체성분정확도의성능을비교분석하는내용으로동물을마취후영상촬영후바로안락사하여실험을종료하는실험이므로윤리적측면에서의인도적인종료시점에해당이없음 * 실험동물에게극도의통증또는스트레스를가하는결과가예상되는경우동물실험의윤리성과동물실험결과의신뢰성을제고하기위하여실험을중단할수있는기준을제시하여주십시오. ( 예, 통증으로인한사료섭취량감소나정상체중의 20% 이상의체중감소가나타나는경우발암시험의경우정상체중의 10% 를초과하는종양이발생하는경우등 ) * 인도적인종료시점기준은그룹웨어 > 병원정보 > 업무정보 > 의생명연구원 > 전임상실험센터게시판의 실험동물의인도적종료시점및안락사법안내 를참고하십시오. * 인도적안락사기준이필요없을경우그사유에대하여기술하여주십시오. 7. 재해유발물질사용 7-1. 실험과정중생물학적위해물질, 방사선동위원소, 유해화학물질, 해당없음재조합 DNA 및유전자변형생물체등을사용하는경우투여물질 : 용량및횟수 : 처리방법 : 투여방법 : 위해도유무및정도 ( 연구자혹은실험동물에게 ): 동물 사람전염가능성 / 동물 동물전염가능성 / 생물유해물질이동물에서배출될가능성및배출경로 * 재해유발물질에는생물학적위해물질, 방사선동위원소, 유해화학물질, 재조합 DNA 및유전자변형생물체등이포함됩니다. * 생물학적위해물질이란 감염병의예방및관리에관한법률 에따른 감염병 을일으키는병원체, 유전자재조합실험지침 따른제3군위험군과제4위험군이해당됩니다. * 유해화학물질이란 유해화학물질관리법 에서유독물, 관찰물질, 취급제한또는금지물질, 사고대비물질, 그밖에유해성또는위해성이있거나그러할우려가있는화학물질이해당됩니다. 7-2. 생물학적위해물질의사용여부및병원체 위험 군 분류 생명공학육성법 제 15 조및같은법시행령제 15 조에따라보건복 지부장관이작성한 실험지침에따름 병원 체 분류 감염병의예방및관리에관한법률 제 2 조에따름
* 생물학적위해물질 (Biohazard) 을사용하는동물실험의경우 실험동물에관한법률 제19 조에따라미리식품의약품안전청장에게보고한후사용하여야합니다. 생물학적위해물질분류의세부적인사항은그룹웨어 > 병원정도 > 업무정보 > 의생명연구원 > 전임상실험센터 > 안내문을참고하시기바랍니다. * 분당서울대학교병원전임상실험센터는제1위험군과제2위험군일부를이용한동물실험이가능한시설입니다. 그외병원균을이용한실험은전임상실험센터에문의해주십시오. ( 문의 : 1240) 7-3. 실험과정중인체혹은동물에서유래한생물학적물질을실험동물에투여하는경우 Source : Species of recipient : 위해도유무및정도 : 해당없음 IRB 승인여부 * 인체에서유래한생물학적물질을실험동물에투여할경우, 상업적으로구매가가능한샘플을 제외하고반드시분당서울대학교병원 IRB 의승인을받아야합니다. 7-4. 실험자를위한작업환경의안전성확보여부해당없음 * 동물실험전체과정중실험자의안전을위협할수있는상황을사전예측하여이를예방할수있 는대비방안을기재하여주시기바랍니다. 8. 동물실험의내용 * 비전문가도이해할수있는언어로써주시고, 인간과동물복지, 학문및사회발전에미치는영향에대해설명하여주십시오. 8-1. 동물실험의목적과예상되는성과본프로젝트는본협업기관의제품인 INALYZER의체성분정확도를현재보급되어있는외국제품인 GE사의 PIXImus II ( 이미분당서울대학교병원에구비되어있음 ) 를전임상단계인동물에서정량적체성분정확도의성능을비교분석평가하고자하는데목적이있다. 따라서예상되는성과는본연구에사용된체지방기기가기존의 GE사제품에비하여어느정도의오류를보이는지를평가할수있을것으로생각되고이러한데이터는앞으로공동연구기업의상품의정확성데이터로사용될수있을것임. 8-2. 연구계획및방법, 실험 schedule 을기술또는첨부하여주십시오. 이실험에서사용할 PIXImus II, INALYZER 두장비를사용해동물에서체성분의정확도를 분석하고자한다. 비교 1. 동물반입후 1 주일동안동물을안정화시킨다.
2. 실험방법 A. 같은날같은조건에서본협업기관의제품인 INALYZE를이용한측정을최소 3회이상실시. i. 동일실험일에동물의무게, 뼈, 근육, 지방최소한 3회이상측정. ( 필요한경우 ) 조직채취하여체지방측정후안락사. B. 동일날같은조건에서대표적인체성분기기인 GE사의 GE사의 PIXImus II 를 이용하여동일한조건에서 3회이상실시. i. 동일실험일에동물의무게, 뼈, 근육, 지방최소한 3회이상 측정 ( 필요한경우 ) 조직채취하여체지방측정후안락사. C. GE사의 PIXImus II의데이터와협력업체의 INALYZER의차이를 paired t test를이용하여분석함. i. INALYZER를이용한체지방측정데이터. ( 뼈부분, 근육부분, 체중부분분율데이터 ) ii. GE PIXImus II를이용한체지방측정데이터. ( 뼈부분, 근육부분, 체중부분분율데이터 ) iii. 통계분석- 동일한개체의두가지측정법에의한데이터이므로모수통계법 에의한 paired t test를이용한통계적유의성분석 - 유의성 5% 이 하로설정함.
별첨 2