(72) 발명자 최향태 경기도용인시기흥구용구대로 1920 아모레퍼시픽기술연구원 신송석 경기도용인시기흥구용구대로 1920 아모레퍼시픽기술연구원 - 2 -

Size: px

Start display at page:

Download "(72) 발명자 최향태 경기도용인시기흥구용구대로 1920 아모레퍼시픽기술연구원 신송석 경기도용인시기흥구용구대로 1920 아모레퍼시픽기술연구원 - 2 -"

혜빈 원
6 years ago
Views:

1 (19) 대한민국특허청 (KR) (12) 공개특허공보 (A) (11) 공개번호 (43) 공개일자 2015년09월07일 (51) 국제특허분류 (Int. Cl.) A61K 31/353 ( ) A61K 36/82 ( ) A61P 17/00 ( ) (21) 출원번호 (22) 출원일자 2014 년 02 월 28 일 심사청구일자 없음 전체청구항수 : 총 16 항 (54) 발명의명칭카테킨프리차수및이를포함하는조성물 (57) 요약 (71) 출원인 ( 주 ) 아모레퍼시픽 서울특별시중구청계천로 100 ( 수표동 ) (72) 발명자 유세진 경기도용인시기흥구용구대로 1920 아모레퍼시픽기술연구원 한선수 경기도용인시기흥구용구대로 1920 아모레퍼시픽기술연구원 ( 뒷면에계속 ) (74) 대리인 김영철, 임희택, 김순영 본발명에따른카테킨프리차수는가공되지않은생찻잎을증열처리하여효소불활성화시키고찻잎에포함된카테킨을제거하여, 화장료또는의약조성물에포함할경우차수가산화되는것을방지할수있다. 따라서본발명에따른상기차수를포함하는조성물이이취및변색되는것을방지할수있으므로, 식품분야뿐만아니라화장료, 의약등다양한산업분야에서안정적인활용이가능하다. 또한, 생찻잎에포함된피부유용성분들을풍부히함유할수있어우수한피부장벽기능회복또는피부보습효과를제공할수있다. 대표도 - 도 1-1 -

2 (72) 발명자 최향태 경기도용인시기흥구용구대로 1920 아모레퍼시픽기술연구원 신송석 경기도용인시기흥구용구대로 1920 아모레퍼시픽기술연구원 - 2 -

3 특허청구의범위청구항 1 카테킨을차수총중량에대하여 1 중량 % 이하로포함하는카테킨프리차수 (catechin-free tea water). 청구항 2 제 1 항에있어서, 상기차수는효소가불활성화된생찻잎에서유래한것을특징으로하는카테킨프리차수. 청구항 3 제 1 항에있어서, 상기차수는생찻잎을증열처리하여효소를불활성화시켜얻은것인카테킨프리차수. 청구항 4 제 2 항에있어서, 상기불활성화된효소는폴리페놀옥시다아제 (Polyphenol Oxidase) 를포함하는카테킨프리차수. 청구항 5 제 1 항에있어서, 상기차수는생찻잎에포함된카테킨을흡착및여과처리하여카테킨을제거한차수인것을특징으로하는카테킨프리차수. 청구항 6 제 1 항의카테킨프리차수를포함하는피부외용제조성물. 청구항 7 제 1 항의카테킨프리차수를포함하는피부장벽기능회복용또는피부보습용조성물. 청구항 8 제 6 항또는제 7 항에있어서, 상기조성물은카테킨프리차수를조성물총중량에대하여 0.01~100 중량 % 로포함하는조성물. 청구항 9 제 6 항또는제 7 항에있어서, 상기카테킨프리차수는각질형성세포의분화를촉진시키는것인조성물. 청구항 10 제 6 항에있어서, 상기조성물은화장료또는의약조성물인조성물. 청구항 11 제 7 항에있어서, 상기조성물은화장료, 의약또는식품조성물인조성물. 청구항 12 제 1 항내지제 5 항중어느한항의카테킨프리차수를제조하는방법으로, 생찻잎을증열처리하여효소를불활성화하고착즙하여차즙을수득하는단계 ; 및상기착즙한차즙의카테킨제거공정을통하여카테킨을제거한다음차수를수득하는단계 ; 를포함하는카테킨프리차수의제조방법. 청구항 13 제 12 항에있어서, 상기카테킨제거공정은, - 3 -

4 상기착즙한차즙에포함된카테킨을포함하는이취및변색성분을흡착하는탈취및탈색단계 ; 및상기탈취및탈색단계를거친차즙을여과필터로여과하여, 상기차즙내에포함되어있는흡착된카테킨을포함하는이취및변색성분및잔여고형분을제거하는여과단계 ; 를포함하는카테킨프리차수의제조방법. 청구항 14 제 13 항에있어서, 상기탈취및탈색단계는규조토및활성탄중하나이상으로카테킨을포함하는이취및변색성분을흡착하는것을포함하는카테킨프리차수의제조방법. 청구항 15 제 13 항에있어서, 상기이취및변색성분은엽록소를포함하는카테킨프리차수의제조방법. 청구항 16 제 12 항에있어서, 상기차즙을수득하는단계에서증열처리조건은 90~110 의증열처리온도및 0.1~3분의증열처리시간중하나이상을만족하는것인카테킨프리차수의제조방법. 명세서 [0001] 기술분야 본발명은카테킨프리차수, 이를포함하는조성물및카테킨프리차수의제조방법에관한것이다. [0002] [0003] [0004] [0005] 배경기술차수 (tea water) 는동백나무과의카멜리아시넨시스 (Camellia sinensis) 의싹이나잎을우려낸것으로서기원전부터기호식품으로서음용되어왔고, 차수에함유된카테킨류, 아미노산, 비타민 C, 베타-카로틴, 식이섬유등유효성분들의유익한약리적인메커니즘이점점넓고다양하게밝혀지고있다. 특히, 차에함유되어있는성분에의한항산화작용, 항노화작용, 항암작용, 혈중콜레스테롤저하작용, 중금속해독작용, 충치예방및구취제거작용등의효과들이입증되면서크게주목받고있다. 이중차카테킨은화학구조상하이드록시기 (-OH) 가많이존재하기때문에여러물질과쉽게결합하는성질이있어항산화, 항암, 심혈관질환예방, 해독작용등의효과가있으며, 이로인해녹차의유용성분중하나로알려지면서카테킨을고농도로함유하기위한차수 (tea water) 의제조방법이활발히연구되고있다. 그러나, 카테킨은떫은맛을내어음료로서차의기호성을떨어뜨릴뿐만아니라, 상기와같은많은하이드록시기 (-OH) 의존재로인해차를실온에보관할경우산화되어갈색으로변하는갈변현상이발생한다. 더욱이카테킨은차에포함된다른유효성분인카페인등의체내흡수를방해하기도한다. 따라서카테킨이포함된차수를사용하여화장료또는의약을제조할경우차수를산화시켜차수내포함된다른유효성분들을변화시켜실질적으로그유효성분들의효능이저하될뿐만아니라, 이취및변색을야기한다는문제가있다. 선행기술문헌 [0006] 특허문헌 ( 특허문헌 0001) 한국공개특허제 호 ( 특허문헌 0002) 한국공개특허제 호 발명의내용 해결하려는과제 - 4 -

5 [0007] 본발명은화장료또는의약으로서사용하기위한카테킨프리차수 (catechin-free tea water) 및이를포함하 는조성물, 그리고차수의제조방법을제공하고자한다. [0008] [0009] [0010] 과제의해결수단상기의목적을달성하기위하여본발명의구현예들은카테킨을차수총중량에대하여 1 중량 % 이하로포함하는카테킨프리차수를제공한다. 또한, 본발명의구현예들은상기카테킨프리차수를포함하는피부외용제조성물, 및피부장벽기능회복용또는피부보습용조성물을제공한다. 본발명의다른구현예들은상기와같은카테킨프리차수를제조하는방법으로, 생찻잎을증열처리하여효소를불활성화하고착즙하여차즙을수득하는단계, 및상기착즙한차즙을카테킨제거공정을통하여카테킨을제거한다음차수를수득하는단계를포함하는카테킨프리차수의제조방법을제공한다. [0011] [0012] 발명의효과본발명에따른카테킨프리차수는가공되지않은생찻잎을증열처리하여카테킨산화효소를불활성화시킴으로써찻잎의산화를방지하고, 이후카테킨제거공정을통하여카테킨을제거한다. 이를통해화장료또는의약조성물에포함할경우카테킨이산화되어차수가산화되는것을방지할수있다. 따라서본발명에따른상기차수를포함하는조성물이이취및변색되는것을방지할수있으므로, 식품분야뿐만아니라화장료, 의약등다양한산업분야에서안정적인활용이가능하다. 또한, 본발명에따른카테킨프리차수는카테킨이제거됨으로써변색, 변취되는것을막아주며, 생찻잎으로유래된미네랄, 아미노산및유리당류를풍부하게함유하여우수한피부장벽기능회복또는피부보습효과를제공할수있다. [0013] 도면의간단한설명 도 1 은본발명의일구현예에따른카테킨프리차수를제조하여이를포함하는화장료조성물을제조하기까지 의제조공정도이다. 도 2는본발명의실시예 1에포함된카테킨함량을분석하기위한카테킨 GC, EGC, C, CAF, EC, EGCG, GCG, ECG 및 CG 표준품에대한 HPLC 분석데이터 ( 표준곡선 ) 을나타낸도이다. 도 3은본발명의실시예 1의 HPLC 분석결과를나타낸것으로, 실시예 1에카테킨이포함되어있지않음을보여주는도이다. 도 4는상기카테킨표준품에대한도 2 및본발명의실시예 1에대한도 3을종합하여하나의그래프로나타낸도이다. 도 5는무처리군 (non-treat), 양성대조군 (positive control), 본발명의일구현예에따른카테킨프리차수 ( 실시예 1) 및두물차 ( 비교예 1) 의각질형성세포에서의필라그린 (Filaggrin) 유전자의발현정도를농도별로비교하여나타낸그래프이다. 도 6은본발명의일구현예에따른카테킨프리차수 ( 실시예 1) 의시간경과에따른경표피수분손실량 (Trasnepidernal Water Loss, g/m 2 h) 정도를대조군 (control) 과비교하여나타낸그래프이다. 도 7은본발명의일구현예에따른카테킨프리차수 ( 실시예 1) 의시간경과에따른경표피수분손실량 (Trasnepidernal Water Loss, g/m 2 h) 의변화정도를대조군 (control) 과비교하여나타낸그래프이다. 도 8은본발명의일구현예에따른카테킨프리차수 ( 실시예 1) 의시간경과에따른피부수분량변화 (Skin hydration change, A.U) 정도를대조군 (control) 과비교하여나타낸그래프이다. [0014] 발명을실시하기위한구체적인내용 본명세서에서 " 피부 " 라함은, 동물의체표를덮는조직을의미하는것으로서, 얼굴또는바디등의체표를덮 는조직뿐만아니라, 두피와모발을포함하는최광의의개념이다

6 [0015] 본명세서에서 " 차수 (tea water)" 란넓게는차잎에서비롯된모든액체를의미하는것으로, 구체적으로이는가공전혹은가공후차잎을우린물, 차잎추출물, 차잎을가열하여발생하는증기를냉각한액, 차잎을증열한후냉수나이온수를첨가하여추출한액등을들수있다. 상기차수는차잎에포함된수분뿐만아니라사람에게유익한성분을함유한다. [0016] [0017] [0018] [0019] 이하본발명을상세하게설명한다. 본발명의구현예들은카테킨을차수총중량에대하여 1 중량 % 이하로포함하는카테킨프리차수 (catechinfree tea water) 를제공한다. 구체적으로, 본발명의구현예들은카테킨을 0.5, 0.1, 0.1, 0.01 또는 중량 % 이하, 보다구체적으로는카테킨을완전히제거하여전혀포함하지않는차수를제공할수있다. 본발명의구현예들에따른 " 생찻잎 " 은가공하지않은차잎을의미한다. 그리고이때 " 차잎 " 은카멜리아시넨시스 (Camellia sinensis) 의싹이나잎을의미하는것으로, 그품질또는종류를구분하지않는다. 구체적으로수확시기에따른봄차, 여름, 가을차모두사용가능하며용도에따라차광막을씌워엽록소양을증가시킨옥로차를사용하는것도가능하나, 이에한정되는것은아니다. 건조된찻잎또는가공된찻잎의경우는찻잎에높은온도가가해짐으로써본래의찻잎에함유된수분, 휘발성분및기타수용성성분이손실된다는문제가있지만, 본발명의경우생찻잎을사용하기때문에미네랄및아미노산이풍부하게포함되어있어, 피부에적용시우수한피부장벽기능회복및보습증진효과를제공할수있다. 상기카테킨 (catechin) 은하기화학식 1의구조를갖는성분으로서, 구체적으로는갈로카테킨 (GC), 에피갈로카테킨 (EGC), 카테킨 (C), (CAF), 에피카테킨 (EC), 에피갈로카테킨갈레이트 (EGCG), 갈로카테킨갈레이트 (GCG), 에피카테킨갈레이트 (ECG), 카테킨갈레이트 (CG) 등이차카테킨으로지칭된다. 화학식 1 [0020] [0021] [0022] 일반적으로차잎의총건중량중 10~15% 가차카테킨함량이며이중에서 EGCG가 50~60% 를차지하고있으나재배기후, 토양또는녹차의종에따라함량의차이가있는것으로알려져있다. 상기카테킨은상기화학식 1에나타난바와같이많은하이드록시기 (-OH) 를가지고있어, 카테킨자체는항산화효능등인체에유용한효능을가지고있는반면, 차수내에카테킨이포함될경우에는상기하이드록시기로인해실온에보관할경우다른유효성분들의활성을저하시키고카테킨이산화되면서차수를이취및변색시킨다는문제가있다. 따라서화장품원료로사용시안정성확보가어렵다. 그러나본발명에따른구현예들은효소가불활성화된생찻잎에서유래한차수, 구체적으로생찻잎을증열처리한후카테킨을제거하여얻은차수를제공할수있다. 예를들면, 증열처리후카테킨을흡착및여과처리하여카테킨을제거하여얻은차수를제공할수있다. 이때본발명의일구현예에따라불활성화된효소는폴리페놀옥시다아제 (Polyphenol Oxidase) 를포함할수있다. [0023] [0024] 구체적으로, 본발명의구현예들은상기와같은카테킨프리차수를제조하는방법으로, 생찻잎을증열처리하여효소를불활성화하고착즙하여차즙을수득하는단계, 및상기착즙한차즙의카테킨제거공정을통하여카테킨을제거한다음차수를수득하는단계를포함한다. 본발명의상기제조방법을도 1을참조로하여구체적으로살펴보면하기와같다. 먼저, 본발명의일구현예로서상기차즙을수득하는단계는생차잎 (raw material) 의효소를불활성화한다음 - 6 -

7 차즙을수득하며, 이때상기생차잎은산소에의한산화를방지하기위하여냉장보관한것을사용할수있다. [0025] [0026] [0027] [0028] [0029] [0030] [0031] [0032] [0033] 또한, 본발명의일구현예에따른상기차즙을수득하는단계는생찻잎을증기에접촉시켜증열처리 (steamin g) 하여생찻잎의효소를불활성화할수있으며, 이때상기증열처리온도는 90~110, 구체적으로 95~105, 보다구체적으로 97~103 일수있다. 또한, 증열시간은 0.1~3 분, 구체적으로 0.1~2분, 보다구체적으로 25초 ~35 초일수있다. 본발명은상기증열처리를통해효소를불활성화시켜찻잎에서산화를막을수있을뿐아니라, 식물세포조직을연하게만들어차즙의수득율도높일수있다. 상기온도및시간범위를초과할경우열에의한산화가진행되며, 상기온도및시간범위미만일경우에는효소불성화가 100% 진행되지않아효소에의한산화가진행될수있다. 본발명의일구현예에따른효소가불활성화된생차잎을착즙 (juice extraction) 하여차즙 (juice) 을수득하는단계에서착즙하는방법은압착효과를이용한기어식착즙, 프레스식착즙, 분쇄식착즙및효소분해식착즙으로이루어진그룹에서선택된하나이상의방법, 구체적으로는프레스식착즙일수있다. 본발명의일구현예에따른상기카테킨제거공정은, 상기착즙한차즙에포함된카테킨을포함하는이취및변색성분을흡착하는탈취및탈색단계 (Deodorization & Decoloration), 및상기탈취및탈색단계를거친차즙을여과필터로여과하여, 상기차즙내에포함되어있는흡착된카테킨을포함하는이취및변색성분및잔여고형분을제거하는여과단계 (Filtration) 를포함할수있다. 일구현예로서, 상기탈취및탈색단계는규조토및활성탄중하나이상으로카테킨을포함하는이취및변색성분을흡착하는것을포함할수있으며, 상기이취및변색성분에는예를들어엽록소와같은색을포함하는성분들이포함된다. 구체적으로상기규조토를이용한이취및변색성분의흡착방법은상기착즙한차즙을규조토에통과시키는것을포함하며, 상기활성탄을이용한이취및변색성분의흡착방법은상기착즙한차즙에활성탄을투입하여반응시키는것을포함한다. 본발명의다른일구현예로서상기탈취및탈색단계는유기용매를이용한침전, 고압처리등을통하여카테킨을비롯한이취및변색성분을제거하는것을포함할수있으며, 이외카테킨을제거할수있는방법이라면상기방법에한정되지않고제한없이사용될수있다. 일구현예로서상기여과단계는공극크기가 0.2~1.5μm, 보다구체적으로는 1μm인여과필터에상기탈취및탈색단계를거친차즙을통과시켜차즙내에포함되어있는흡착된카테킨을포함하는이취및변색성분및잔여고형분을제거할수있다. 또한, 본발명의일구현예에따른상기차수를수득하는단계는차즙으로부터카테킨을제거한다음, 물, 유기용매또는이들의혼합물을이용하여수용성성분추출하여차수를수득하는단계를더포함할수있다. 일구현예로서상기유기용매는예를들어 1,3 부틸렌글리콜 (1,3-Butylene Glycol), 1,3 프로필렌글리콜 (1,3 propylene Glycol) 과같은폴리올류를포함할수있으며, 그농도는 0.1~12% 를예로들수있다. 본발명의구현예들에따라상기와같이제조된카테킨프리차수는카테킨에의해차수가산화되는것이방지됨으로써생찻잎에포함된다른생리활성적으로유용한성분들의변화를방지할수있다. 따라서차수가이취및변색되는것이방지될뿐만아니라, 다른유용한성분들의효능이효과적으로발휘될수있다. 이에, 본발명의구현예들은상기와같은카테킨프리차수를포함하는피부외용제조성물을제공한다. 또한, 본발명의다른구현예들은상기와같은카테킨프리차수를포함하는피부장벽기능회복용또는피부보습용조성물을제공한다. 그리고일구현예로서상기조성물은카테킨프리차수를조성물총중량에대하여 0.01~100 중량 %, 구체적으로 0.015, 0.1, 1, 10, 20, 30, 40, 50 또는 60 중량 % 이상및 100, 90 또는 80 중량 % 이하로포함할수있다. 상기피부장벽기능이란화학물질, 대기오염물질, 건조한환경, 자외선등외부환경으로부터의다양한자극으로부터피부를보호하고피부를통한체내수분의과도한발산을막는보호기능을의미하는것으로, 이러한기능은각질형성세포로구성된각질층 (Stratum corneum, horney layer) 이정상적으로형성되어있을경우에만그기능을유지할수있다. 구체적으로, 상기각질형성세포는오래된각질세포가피부에서탈락되고새로운각질세포가그기능을대신하게되는각화 (keratinization) 과정 ( 표피세포의분화 ) 중에천연보습인자 (Natural moisturizing factor; NMF) 와세포간지방질 ( 세라마이드, 콜레스테롤, 지방산 ) 을생성하면서각질층을형성하여각질층이견고함과유연성을가지게하여피부장벽 (skin barrier) 으로서의기능을보유하게한다. 그러나이러한각질층은과도한세안이나, 목욕등의생활습관적요소나, 건조한대기오염물질등의환경적인요인, 그리고아토피성피부나노인성피부같은내인성질환등으로인해쉽게그기능이손실될수있으며, 피부장벽기능의와해는피부건조증, 아토피피부염, 접촉성피부염, 건선등의다양한피부질환을유발하게된다

8 [0034] [0035] [0036] [0037] [0038] [0039] [0040] [0041] [0042] 그러나본발명의구현예들에따른카테킨프리차수는생찻잎에서유래된각질형성세포의분화촉진능을갖는미네랄, 아미노산, 유리당류등이풍부히포함되어있고카테킨이제거되어있으므로, 차수가산화되지않고그효능을효과적으로발휘할수있어, 이를포함하는조성물은우수한피부장벽기능의회복또는강화효과와피부보습효과를제공할수있다. 본발명의구현예들은상기카테킨프리차수를포함하는화장료조성물, 또는피부장벽기능회복용또는피부보습용화장료조성물을제공할수있다. 구체적으로, 본발명의구현예들에따른화장료조성물은화장품학또는피부과학적으로허용가능한매질또는기제를함유할수있다. 이는국소적용에적합한모든제형으로, 예를들면, 용액, 겔, 고체, 반죽무수생성물, 수상에유상을분산시켜얻은에멀젼, 유상에수상을분산시켜얻은에멀젼, 멀티에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구또는, 이온형 ( 리포좀 ) 및비이온형의소낭분산제의형태로, 또는크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이, 클렌져또는콘실스틱의형태로제공될수있다. 본발명에따른조성물은또한포말 (foam) 의형태로또는압축된추진제를더함유한에어로졸조성물의형태로도사용될수있다. 이들조성물은당해분야의통상적인방법에따라제조될수있다. 상기화장료조성물은상기한물질이외에주효과를손상시키지않는범위내에서바람직하게는주효과에상승효과를줄수있는다른성분들을함유하는것도무방하며, 본발명의유효성분이외에다른성분을기타화장료조성물의제형또는사용목적에따라당업자가어려움없이적의선정하여배합할수있다. 예컨대, 상기화장료조성물은그효과를증가시키기위하여피부흡수촉진물질을함유할수있다. 또한, 본발명의화장료조성물은수용성비타민, 유용성비타민, 고분자펩티드, 고분자다당, 스핑고지질및해초엑기스로이루어진군에서선택된물질을포함할수있다. 뿐만아니라, 본발명의화장료조성물은상기필수성분과더불어필요에따라통상화장료조성물에배합되는다른성분을포함할수있고, 이의예로서유지성분, 보습제, 에몰리언트제, 계면활성제, 유기및무기안료, 유기분체, 자외선흡수제, 방부제, 살균제, 산화방지제, 식물추출물, ph 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행촉진제, 냉감제, 제한 ( 制汗 ) 제, 정제수등을들수있다. 본발명의화장료조성물에포함될수있는기타배합성분은이에한정되는것은아니고, 또한상기성분의배합량은본발명의목적및효과를손상시키지않는범위내에서가능하다. 상기화장료조성물은제형이특별히한정되지않으며, 목적하는바에따라제형을적절히선택할수있다. 예를들어, 유연화장수 ( 스킨로션및밀크로션 ), 영양화장수, 에센스, 영양크림, 마사지크림, 파우더, 립스틱, 메이크업베이스, 파운데이션, 패취, 분무제, 팩, 젤, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 클렌져, 보디로션, 보디크림, 보디오일및보디에센스로이루어진군으로부터선택된하나이상의제형으로제조될수있으나, 이에제한되는것은아니다. 본발명의구현예들은상기카테킨프리차수를포함하는의약조성물, 또는피부장벽기능회복용또는피부보습용의약조성물을제공할수있다. 구체적으로, 본발명에따른조성물을의약품에적용할경우에는, 상용되는무기또는유기의담체를가하여고체, 반고체또는액상의형태로경구투여제혹은비경구투여제로제제화할수있다. 본발명의조성물을상법에따라서실시하면용이하게제제화할수있으며, 계면활성제, 부형제, 착색제, 향신료, 안정화제, 방부제, 보존제, 수화제, 유화촉진제, 현탁제, 삼투압조절을위한염및 / 또는완충제, 기타상용하는보조제를적당히사용할수있다. 상기경구투여를위한제재로서는정제 ( 錠劑 ), 환제 ( 丸劑 ), 과립제 ( 顆粒劑 ), 연질및경질캅셀제, 산제, 세립제, 분제, 액제, 유탁제 ( 乳濁濟 ), 시럽제, 펠렛제등을들수있다. 이들제형은유효성분이외에희석제 ( 예 : 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로오스또는글리신 ), 활택제 ( 예 : 실리카, 탈크, 스테아르산및그의마그네슘또는칼슘염또는폴리에틸렌글리콜 ), 또는결합제 ( 예 : 마그네슘알루미늄실리케이트, 전분페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로오스, 나트륨카르복시메틸셀룰로오스또는폴리비닐피롤리딘 ) 를함유할수있다. 경우에따라전분, 한천, 알긴산또는그의나트륨염과같은붕해제, 흡수제, 착색제, 향미제, 또는감미제등의약제학적첨가제를함유할수있다. 상기정제는통상적인혼합, 과립화또는코팅방법에의해제조될수있다. 또한, 상기비경구투여제는예를들어, 피부외용제일수있으며, 주사제, 점적제, 로션, 연고, 겔, 크림, 현탁제, 유제, 좌제 ( 坐劑 ), 패취또는분무제제형일수있으나, 이에제한되는것은아니다

9 [0043] [0044] 본발명에따른상기의약조성물은경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥내, 근육내, 복강내, 피하등으로투여될수있다. 또한, 상기유효성분의적용량은치료받을대상의연령, 성별, 체중과, 치료할특정질환또는병리상태, 질환또는병리상태의심각도, 투여경로및처방자의판단에따라달라질것이다. 이러한인자에기초한적용량결정은당업자의수준내에있다. 본발명의구현예들은상기카테킨프리차수를포함하는피부장벽기능회복용또는피부보습용식품조성물을제공할수있다. 상기식품조성물은그제형이특별히한정되지않으며고형물, 드링크제일수있다. [0045] 이하, 실시예, 비교예및시험예를들어본발명의구성및효과를보다구체적으로설명한다. 그러나이들실 시예, 비교예및시험예는본발명에대한이해를돕기위해예시의목적으로만제공된것일뿐본발명의범주 및범위가하기실시예, 비교예및시험예에의해제한되는것은아니다. [0046] [0047] [0048] [0049] [0050] [ 실시예 1] 카테킨프리차수의제조본발명의일구현예로서카테킨프리차수를하기의방법에따라제조하였다. 먼저, 장원으로부터구매한녹차생차잎 ( 생엽 ) 1kg을채엽한후 1시간이경과하기전에 100 까지 30초간증열처리하여효소를불활성화한후, 상기효소를불활성화한생차잎을냉장이송하여압착 ( 프레스 ) 방식으로착즙하여차즙 ( 착즙액 ) 3kg을수득하였다. 그다음, 카테킨을제거하기위하여상기차즙을규조토에여과시킨후, 이를공극크기가 1μm인카트리지필터를이용하여여과하였다. 여기에활성탄을투입하여반응시킨후, 다시 1μm인카트리지필터를이용하여여과하였다. 그리고상기차즙과물을 1:99의비율로혼합하여상온에서 2시간동안 1회추출하여 2톤의카테킨프리차수를추출하였다. 그다음, 상기카테킨프리차수에미생물발생방지를위해 1,3 프로판디올의원료인퍼맨디올 (Fermandiol) 과바이오시트로액 (Biocitro liquid) 을첨가하여, 카테킨프리차수 ( 실시예 1) 을제조하였다. [0051] [0052] [0053] [0054] [0055] [0056] [0057] [0058] [0059] 상기제조된카테킨프리차수에포함된카테킨의함량을 HPLC(High Performance Liquid Chromatography) 를이용하여분석하였다. 구체적으로, 측정방법은건강기능식품코드분석방법가이드 (Health Functional Food Code analytical methods guide) 에따르되주입및농도조건을약간변경하였으며, HPLC-PDA에의해분리및정량하였다. HPLC 분석조건은아래와같다. - HPLC: Waters Alliance 2695 LC (Waters, Milford, MA, USA) - 검출기 (Detector): Waters 2996 Photodiode Array detector (280 nm) - 컬럼 (Column): Thermo Syncronis C18 (250 x 4.60 mm, 5μm ) 또는 equivalent, similar column - 유량 (Flow rate): 1.0 ml/min - 주입량 (Injection): 20 μl - 컬럼온도 (Column Temperature): 40 - 챔버온도 (Chamber Temperature): 10 - 이동상 (Mobile phase): 0.1 % 초산수용액 (acetic acid in DW) (solution A), 아세토나이트릴 (Acetonitrile) (solution B) [0060] Time Flow %A %B curve (ml/min) 표 1-9 -

10 [0061] [0062] [0063] HPLC로분석된시료 ( 실시예 1) 의카테킨의곡선면적을농도로환산하기위하여, 카테킨표준품으로서갈로카테킨 (GC), 에피갈로카테킨 (EGC), 카테킨 (C), 카페인 (CAF), 에피카테킨 (EC), 에피갈로카테킨갈레이트 (EGCG), 갈로카테킨갈레이트 (GCG), 에피카테킨갈레이트 (ECG), 카테킨갈레이트 (CG) (Sigma-Aldrich, 미국 ) 를 50 % 메탄올수용액 (methanol/dw) 20mL에용해하여각농도별로희석한후, HPLC로분석하였다. 이를독립적으로 3회수행한후평균하고, 표준곡선을작성하여도 2에나타내었다. 그다음, 본발명의실시예 1의카테킨프리차수에포함된성분분석을독립적으로 2회수행한후평균한 HPLC 분석데이터를도 3에나타내었다. 마지막으로, 상기도 2의표준곡선과도 3의실시예 1 분석결과를종합하여도 4에나타내었다. 그결과, 도 2의카테킨표준품의 HPLC 분석데이터와비교할때, 도 3 및도 4에서확인할수있는바와같이본발명의실시예 1의카테킨프리차수에서는도 2의피크가전혀나타나지않았으므로, 실시예 1의차수에는카테킨이완전히제거되어포함되어있지않음을알수있다. [0064] [0065] [0066] [ 비교예 1] 일반차수 ( 두물차 ) 의제조본발명의카테킨프리차수의효과를비교분석하기위하여비교예로서종래의일반적인방법에따라두물차를제조하였다. 먼저, 장원으로부터 1차가공 ( 증열 30초, 100 증기사용 -> 45분조유, 95 열풍이용 -> 20분실온유념 -> 40분중유 -> 90 화실정유 -> 80 열풍건조 ) 한녹차를구매하였다. 그다음 3일간물에냉침하여추출하고, 합성방부제를처리한다음, 공극크기가 1μm인카트리지필터를이용하여여과하여, 두물차 ( 비교예 1) 을제조하였다. [0067] [0068] [0069] [ 실험예 1] 각질형성세포에서필라그린유전자발현촉진능의비교본발명의일구현예에따른카테킨프리차수의각질형성세포분화능을확인하기위하여, 각질형성세포에서피부장벽을구성하는케라틴결합단백질인필라그린 (Filaggrin) 유전자발현촉진능을무처리군, 비교예와비교하는실험을아래와같이실시하였다. 먼저, 정상인간케라티노사이트 (Normal human keratinocytes, NHKs) 를인비트로젠 (Invitrogen, San Diego, CA, USA) 으로부터구입한다음, 이를 37, 습한대기조건 (95% 공기및 5% CO 2 포함 ) 에서배양하였다. 그다음, 상기정상인간케라티노사이트에카테킨프리차수 ( 실시예 1) 50, 100, 200ppm (0.005, 0.01, 0.02%), 두물차 ( 비교예 1) 50, 100, 200, 500ppm (0.005, 0.01, 0.02, 0.05%), 양성대조군인 Ca mM 를각각 24 시간동안 처리하고, 리얼타임 PCR 을사용하여필라그린 (FLG) 의 mrna 를발현시켰다. [0070] 그결과, 도 5에나타난바와같이, 일반적인제조방법으로제조한비교예인두물차및본발명의실시예에따라제조된카테킨프리차수모두 50, 100ppm, 즉 0.005% 및 0.01% 의낮은농도에서는필라그린유전자가발현되지않았다. 하지만, 200ppm, 즉 0.02% 의농도에서는비교예인두물차의경우오히려필라그린유전자의발현정도가더감소한데반해, 본발명의실시예인카테킨프리차수는무처리군 (non-treat) 보다필라그린발현정도가 1.5배이상증가한것을확인할수있다. 또한, 카테킨프리차수가필라그린의발현을촉진함으로써각질형성세포의분화를촉진하여피부장벽기능을회복또는강화하고, 보습효능을나타냄을의미한다. [0071] [0072] [ 실험예 2] 피부장벽기능회복효능의비교 본발명의일구현예에따른카테킨프리차수의피부손상으로인해손상된피부장벽기능의회복 (skin

11 barrier recovery) 에미치는효능을확인하기위하여, 아래의실험을실시하였다. [0073] [0074] [0075] 먼저, 20~50세의건강한성인여성 22명을선정하였다. 이들의평균나이는 38.41세였다. 시험부위의피부장벽기능의회복능측정은 5번의방문 (Visit 1-5) 시이루어졌으며, 두번째의방문 (Visit 2) 시를기점으로총 2주간하루에한번씩매일같은시간에상기실시예 1을시험부위에도포하였다. 다. 이때경표피수분손실 (Transepidermal water loss, TEWL) 의회복정도는피부수분보유능및피부수분장벽기능을보여주는것으로서수분증산계 (Delfin VapoMeter SWL4255, Delfin Technologies Ltd, Finland) 로측정하고, 시험부위를영상분석장치 (Visioscan VC98, Courage-Khazaka electronic GmbH, Germany) 로촬영하였다. 각측정및촬영시마다대조군 (control) 으로서상기실시예 1을도포하지않은부위도함께측정, 촬영하였다. 구체적으로, 첫번째방문시피부장벽손상패치를팔뚝의시험부위에붙인다음, 경표피수분손실 (Transepidermal water loss, TEWL) 의회복정도를측정하고, 시험부위를촬영하였다 (Visit 1: day-1). 그다음날두번째로방문하여패치를제거한다음직후의피부손상정도를동일한방법으로측정및촬영하였다 (Visit 2: day 0). 그리고상기실시예 1을시험부위에도포하였다. 그리고상기두번째방문날의다음날세번째로방문하여상기와동일한방법으로피부손상정도를동일한방법으로측정및촬영하였다 (Visit 3: day 1). 그리고시험부위에상기실시예 1을도포하였다. 그뒤로하루에한번씩매일같은시간에실시예 1을시험부위에도포하였으며, 두번째방문후 1주일뒤에네번째방문을하여피부손상정도를동일한방법으로측정및촬영하였다 (Visit 3: 1 week). 마지막으로두번째방문일로부터 2주뒤다섯번째방문을하여피부손상정도를동일한방법으로측정및촬영하였다 (Visit 5: 2 weeks). 그리고상기다섯번 (Visit 1-5) 의상기수분증산계 (VapoMeter) 로측정한경표피수분손실량 (Transepidermal water loss, TEWL) 값을하기표 2 및도 6에나타내었다. 그리고이를분석하여경표피수분손실량변화정도 (TEWL change) 를도 7에나타내었다. [0076] TEWL 차이 (Mean±SD) Visit(day) 실시예 1 사용부위 대조군 Visit 1(-1, day-1) 9.51± ±1.94 Visit 2(0, day 0) 23.98± ±4.56 Visit 3(1, day 1) 20.82± ±5.04 Visit 4(8 1week) 12.78± ±2.24 Visit 5(15, 2 weeks) 9.80± ±1.88 표 2 [0077] [0078] [0079] 그결과, 도 6 및도 7에나타난바와같이본발명에따른카테킨프리차수인실시예 1을도포한지하루 (Visit 3), 1주일 (Visit 4), 2주일 (Visit 5) 이경과함에따라경표피수분손실량이급격히감소하였다 (p<0.05). 구체적으로피부회복정도가제품사용후 1일경과시 13.72%, 1주경과시 45.96%, 2주경과시 58.68% 로대조군에비하여매우증가하였다. 또한, 상기실시예 1을사용한실험자를대상으로별도의설문조사 (global assessment of efficacy survey) 를실시한결과, 피부수분량, 피부결개선, 발림성, 흡수성및점착성의항목에서각각대상자의 86%, 82%, 45%, 45% 및 91% 가정상또는그이상효과가있는것으로평가하였으며, 86% 는실시예 1의향기 (fragrance) 또한정상또는그이상에체크하였다. 이로부터, 본발명의구현예들에따른카테킨프리차수는피부장벽기능회복효능이우수할뿐만아니라, 보습, 사용감, 향기와같은기호도또한우수한것으로나타났다. [0080] [0081] [0082] [ 실험예 3] 피부보습효능의비교본발명의일구현예에따른카테킨프리차수의피부보습효능지속력을확인하기위하여, 아래의실험을실시하였다. 먼저, 20~50세의건강한성인여성 21명을선정하였다. 이들의평균나이는 41.10±4.44 세였다. 시험부위의피부수분량측정은 3번의방문시이루어졌으며, 상기실시예 1은단한번팔뚝의시험부위에도포하였다. 이때피부수분량은시험부위를깨끗이씻은다음 30분동안 의온도, 40-60% 의습도조건에서수분섭취없이

12 코르네오미터 (Corneometer CM825, Courage-Khazaka electronic GmbH, Germany) 를사용하여동일부위를 3 번반 복하여측정한다음그평균값으로하였다. [0083] 구체적으로, 첫번째방문시실시예 1을도포전과후의수분보유량을측정하였다. 첫번째방문시실시예 1을도포한후 24시간이되는때에수분보유량을다시측정하였다. 그리고상기첫번째방문시실시예 1을도포한후 72시간이되는때에마지막으로수분보유량을다시측정하였다. 그리고측정결과를하기표 3 및도 8에나타내었다. 이때도 8의 y축단위 A.U. 는피부수분량의비례값이다. [0084] 피부수분량 (Mean±SD) 대조군 (Control) 실시예 1 사용부위 실시예 1 사용전 (Before) 33.29± ±6.03 실시예 1 사용직후 (Right after) 32.28± ±10.18 실시예 1 사용 24시간후 (24 hours 34.42± ±4.33 after) 실시예 1 사용 72시간후 (72 hours 32.38± ±5.38 after) 표 3 [0085] [0086] [0087] 그결과, 상기표 3 및도 8에나타난바와같이본발명에따른카테킨프리차수인실시예 1을도포한직후, 24시간, 48시간후피부수분량이매우증가하였으며, 모든대상자에게서홍반, 발진또는가려움등의부작용은나타나지않았다. 또한, 상기실험을마친후실험자를대상으로효능및사용감에대한설문조사 (global assessment of efficacy survey) 를실시한결과, 피부수분량, 피부결개선, 흡수성, 점착성, 향기및전반적인사용감의항목에서각각대상자의 71%, 76%, 66%, 85%, 14% 및 57% 가좋음또는그이상효과가있는것으로평가하였다. 이로부터, 본발명의구현예들에따른카테킨프리차수는피부부작용이없으면서도 72시간이상지속되는우수한피부보습효능을가지고있음을확인할수있다. 도면 도면

13 도면

14 도면

15 도면 4 도면

16 도면 6 도면 7 도면

Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No μ μ

Journal of Life Science 2011 Vol. 21. No. 8. 1120~1126 ISSN : 1225-9918 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2011.21.8.1120 μ μ μ α β Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No. 8 1121 μ μ 1122 생명과학회지 2011,