<BCF6C1FABFC0BFB0B0F8C1A4BDC3C7E8B9E6B9FD28C8AFB0E6BACEB0EDBDC320C1A D313838C8A3292E687770>

Transcription

1 환경부고시제 호 수질환경보전법제 7 조의규정에의하여수질오염공정시험방법 ( 환경부고시제 호, 개정 ) 을다음과같이개정 하여고시합니다 환경부장관 수질오염공정시험방법

2 차 례 제1장총칙 1 제2장일반시험방법 7 제 1 항공장폐수및하수유량측정방법 7 제 2 항하천유량측정방법 25 제 3 항시료의채취및보존방법 26 제 4 항시료의전처리방법 32 제3장기기분석법 41 제 1 항흡광광도법 ( Absorptiometric Analysis ) 41 제 2 항원자흡광광도법 ( Automic Absorption Spectrophotometry ) 52 제 3 항유도결합플라스마발광광도법 ( Inductively Coupled Plasma(ICP) Emission Spectroscopy ) 72 제 4 항가스크로마토그래피법 ( Gas Chromatography ) 79 제 5 항이온크로마토그래피법 ( Ion Chromatography ) 97 제 6 항이온전극법 101 제4장항목별시험방법 106 제 1 항온도 106 제 2 항투명도 107 제 3 항수소이온농도 ( ph ) 109 제 4 항용존산소 ( DO:Dissolved Oxygen ) 112 제 5 항생물화학적산소요구량 ( BOD:Biochemical oxygen demand ) 117 제 6 항화학적산소요구량 ( COD:Chemical Oxygen Demand ) 120 제 7 항색도 124 제 8 항부유물질 ( SS:Suspended Solid ) 166 제 9 항노말헥산추출물질 168 제10항염소이온 171 제11항암모니아성질소 172 제12항아질산성질소 176 제13항질산성질소 178 제14항총질소 182 제15항용존총질소 (Dissolved Total Nitrogen) 187 제16항인산염인 188 제17항총인 191 제18항용존총인 (Dissolved Total Phosphorus) 193

3 제19항페놀류 194 제20항시 안 196 제21항불 소 199 제22항크 롬 203 제23항 6 가크롬 208 제24항아 연 211 제25항구 리 214 제26항카드뮴 217 제27항 납 221 제28항망 간 224 제29항비 소 228 제30항니 켈 232 제31항 철 236 제32항셀레늄 239 제33항수 은 241 제34항알킬수은 245 제35항유기인 249 제36항폴리클로리네이티드비페닐 ( PCB ) 253 제37항음이온계면활성제 256 제38항휘발성저급탄화수소류 258 제39항총대장균군 (Total Coliforms) 268 제40항클로로필a( Chlorophy11-a ) 279 제41항전기전도도 281 제42항분원성대장균군 (Fecal Coliforms or Thermotolerant Coliforms) 285 제43항식물성플랑크톤 ( 조류 ) 288 제5장시약및용액, 완충액, 배지, 표준액, 규정 ( 노르말 ) 액 293 제 1 항시약및용액 293 제 2 항완 충 액 316 제 3 항배 지 317 제 4 항표 준 액 319 제 5 항규 정 액 326 부 록 담수조류분류표 330 담수조류그림 342

4 제 1 장총 칙

5 제 1 장총칙 1. 목적 이시험방법은수질환경보전법제 7 조규정에의거수질오염물질을측정함에있어측정의 정확및통일을유지하기위하여필요한제반사항에대하여규정함을목적으로한다. 2. 적용범위 환경정책기본법제10조환경기준중하천및호소에대한수질기준의적합여부, 수질환경보전법제8조배출허용기준의적합여부, 동법제32조제2항및동법시행규칙제52조방류수수질기준, 하수도법제16조방류수수질기준의적합여부, 오수 분뇨및축산폐수처리에관한법률제5조방류수수질기준의적합여부와동법시행규칙제9조오수처리시설등의방류수수질기준의적합여부및지하수법제19조지하수의수질기준적합여부는수질오염공정시험방법 ( 이하 공정시험방법 이라한다 ) 의규정에의하여시험판정한다. 수질환경보전법에의한오염실태조사중하천및호소의오염상황조사, 지하수법에의한지하수오염실태조사는따로규정이없는한이공정시험방법의규정에의하여시험한다. 오수 분뇨및축산폐수의처리에관한법률제5조의규정에의한오수정화시설, 단독정화조, 분뇨처리시설, 축산폐수시설및축산폐수공동처리시설의방류수수질기준의적합여부는따로규정이없는한이시험방법에의하여시험판정한다. 3. 이공정시험방법에서필요한어원, 기호, 화학명등은 ( ) 속에기재한다. 4. 이공정시험방법의내용은총칙, 일반시험방법, 기기분석방법및항목별시험방법으로 구분한다. 5. 계량 ( 計量 ) 의단위및기호 주요단위및기호는다음과같으며, 여기에표시되지않은단위는 KS A 0105 국제단 위계 (SI) 및그사용방법에대한규정에따른다

6 종류단위기호종류단위기호 길이 무게 넓이 미 터 센 티 미 터 밀 리 미 터 마이크로미터 나 노 미 터 킬 로 그 램 그 램 밀 리 그 램 마이크로그램 나 노 그 램 제 곱 미 터 제곱센티미터 제곱밀리미터 m cmmmμmnmkg g mgμg ng m2cm2mm2 용량 부피 압력 킬 로 리 터 리 터 밀 리 리 터 마이크로리터 세제곱미터세제곱센티미터세제곱밀리미터 기압수은주밀리미터수주밀리미터 k1 1 m1 μ1 m3cm3mm3 atm mm Hg mm H 2 O 6. 농도표시 백분율 (Parts Per Hundred) 은용액 100 ml중의성분무게 (g), 또는가스 100 ml중의성분무게 (g) 를표시할때는 W/V%, 용액 100 ml중의성분용량 ( ml ), 또는가스 100 ml중의성분용량 ( ml ) 을표시할때는 V/V%, 용액 100 g중성분용량 ( ml ) 을표시할때는 V/W% 의기호를쓴다. 다만, 용액의농도를 % 로만표시할때는 W/V% 를말한다. 천분율 (Parts Per Thousand) 을표시할때는 g/1 또는 의기호를쓴다. 백만분율 (Parts Per Million) 을표시할때는mg /1 또는 ppm의기호를쓴다. 십억분율 (Parts Per Billion) 을표시할때는μg /1 또는 ppb의기호를쓰며, 1 ppm의 1/1,000이다. 기체의농도는표준상태 ( 0, 1기압, 비교습도 0 % ) 로환산표시한다. 7. 온도 온도의표시는셀시우스 (Celcius) 법에따라아라비아숫자의오른쪽에 를붙인다. 표준온도는 0, 상온은 15~25, 실온은 1~35 로하며, 찬곳은따로규정이없는한 0~15 의곳을뜻한다. 온수는 60~70, 열수는약 100, 냉수는 15 이하로한다. 수욕상 ( 水欲上 ) 또는물중탕중에서가열한다 라함은따로규정이없는한수온 100 에서가열함을뜻하고약 100 의증기욕을쓸수있다. 제반시험조작은따로규정이없는한상온에서실시하고조작직후그결과를관찰하는것으로한다. 단, 온도의영향이있는것의판정은표준온도를기준으로한다

7 8. 방울수 ( 滴水 ) 방울수라함은 20 에서정제수 ( 精製水 ) 20 방울을적하할때, 그부피가약 1 ml되는 것을뜻한다. 9. 항량 항량으로될때까지건조한다 또는 항량으로될때까지강열한다 라함은같은조건에서 1 시간더건조하거나또는강열할때전후차가 g 당 0.3 mg이하일때를말한다. 10. 액의농도 액의농도를 (1 10), (1 100) 또는 (1 1000) 등으로표시하는것은고체성분에있어서는 1 g, 액체성분에있어서는 1 ml를용매에녹여전체량을 10 ml, 100 ml또는 1000 ml로하는비율을표시한것이다. 액체시약의농도에있어서예를들어염산 ( 1+2 ) 이라고되어있을때에는염산 1 ml와물 2 ml를혼합하여조제한것을말한다. 11. 진공 감압또는진공이라함은따로규정이없는한 15 mm Hg 이하를말한다. 12. 물 시험에사용하는물은따로규정이없는한정제수또는탈염수를말한다. 13. 액성 액체의산성, 알카리성또는중성을검사할때는따로규정이없는한유리전극에 의한 ph 미터로측정하고액성을구체적으로표시할때는 ph 값을쓴다. 14. 약 이라함은기재된양에대하여 ±10 % 이상의차가있어서는안된다. 15. 이상 과 초과, 이하, 미만 이라고기재하였을때는 이상 과 이하 는기산점 또는기준점인숫자를포함하며, 초과 와 미만 은기산점또는기준점인숫자를 포함하지않는것을뜻한다

8 16. 정확히단다 라함은규정된양의시료를취하여분석용저울로 0.1 mg까지다는 것을말한다. 17. 정확히취하여 라하는것은규정한양의시료또는시액을홀피펫으로눈금까지 취하는것을말한다. 18. 냄새가없다 라고기재한것은냄새가없거나, 또는거의없을것을표시하는것이다. 19. 여과용기구및기기를기재하지아니하고 여과한다 라고하는것은 KS M 7602 거름종이 5 종 A 또는이와동등한거름종이를사용하여여과함을말한다. 20. 시약및용액, 완충액, 배지, 표준액, 규정액 시약시험에사용하는시약은따로없는한특급또는 1급이상또는이와동등한규격의시약을사용하여제 5장에수재된조제방법에따라조제하여야한다. 용액 1 용액의앞에몇 % 라고한것 ( 예 : 20 % 수산화나트륨용액 ) 은수용액을말하며, 따로조제방법을수재하지아니하였으나일반적으로물 100 ml에녹아있는용질의 g수를나타낸다. 2 용액다음의 ( ) 안에몇 N, 몇mol또는 W/V% 라고한것 예 : 아황산나트륨용액 (0.1N), 아질산나트륨용액 (0.1M), 구연산이암모늄용액 (20 W/V%) 은용액의조제방법에따라조제하여야한다. 완충액, 배지, 표준액및규정액제 5장에수재된조제방법에따라조제하여야한다. 21. 용기 용기 라함은시약또는시액을넣어두는것을말하며시약또는시액과직접접촉하는것을뜻한다. 용기를막는데사용되는것들도용기의일부로본다. 밀폐용기 ( 密閉容器 ) 라함은취급또는저장하는동안에이물이들어가거나또는내용물이손실되지아니하도록보호하는용기를말한다. 기밀용기 ( 氣密容器 ) 라함은취급또는저장하는동안에밖으로부터의공기다른가스가침입하지아니하도록내용물을보호하는용기를말한다

9 밀봉용기 ( 密封容器 ) 라함은취급또는저장하는동안에기체또는미생물이침입하지아니하도록내용물을보호하는용기를말한다. 차광용기 ( 遮光容器 ) 라함은광선이투과하지않는용기또는투과하지않게포장을한용기이며취급또는저장하는동안에내용물이광화학적변화를일으키지아니하도록방지할수있는용기를말한다. 22. 기구및기기 공정시험방법에서사용하는모든유리기구는 KS L 2302 이화학용유리기구의형상및치수에적합한것또는이와동등이상의규격에적합한것으로, 국가또는국가에서지정하는기관에서검정을필한것을사용하여야한다. 공정시험방법에서사용하는모든기구및기기는측정결과에대한오차가허용되는범위이내인것을사용하여야한다. 23. 분석용저울및분동 ( 銅 ) 분석용저울은 0.1 mg까지달수있는것이어야하며분석용저울및분동은국가검정을 필한것을사용하여야한다. 24. 연속측정또는현장측정의목적으로사용하는측정기기는공정시험방법에의한측정 값과의정확한보정을행한후사용할수있다. 25. 이공정시험방법에수재되어있지아니한방법이라도측정결과가같거나그이상의 정확도가있다고판단될경우로서국내외의공인기관에서인정하고있는방법은그 방법을사용할수있다. 26. 하나이상의시험방법으로시험한결과가서로달라제반기준의적부판정에영향을줄경우에는제 4장항목별시험방법각항목의주시험방법에의한분석성적에의하여판정한다. 단, 주시험방법은따로규정이없는한제 4장항목별시험방법각항목의 1법으로한다. 27. 유효측정농도는지정된시험방법에따라시험하였을경우그시험방법에대한최소 정량한계를의미하며, 그미만은불검출된것으로간주한다

10 28. 정량범위 라함은본시험방법에따라시험할경우표준편차율 10 % 이하에서측정할 수있는정량하한과정량상한의범위를말하며측정기기의성능및조작조건에따라 다소변할수있다. 29. 표준편차율 이라함은표준편차를평균값으로나눈값의백분율로서반복조작시의 편차를상대적으로표시한것을말한다. 30. 이공정시험방법에기재되어있지아니한항목에대해서는시료의특성을고려하여먹는물수질공정시험방법, KS M 0100 공업용수의시험방법, KS M 0111 공장폐수시험방법및외국의공인시험방법중가장적합하다고판단되는시험방법에따라시험할수있다

11 제 2 장일반시험방법

12 제 2 장일반시험방법 제 1 항공장폐수및하수유량측정방법 1. 측정방법의종류 1.1 관 ( Pipe ) 내의유량측정방법 ( 관내에압력이존재하는관수로의흐름 ) 벤튜리미터 ( Venturi Meter ) 유량측정용노즐 ( Nozzle ) 오리피스 ( Orifice ) 피토우 ( Pitot ) 관 자기식유량측정기 ( Magnetic flow Meter ) 1.2 측정용수로에의한유량측정방법 위어 ( Weir ) 파아샬플루움 ( Parshall flume ) 1.3 기타유량측정방법 용기에의한측정 개수로에의한측정 2. 측정방법의선택폐하수에는부유물질등여러가지오염물질이함유되어있으며, 때때로점성도상당히높으므로폐하수유량측정은부유물질로인한측정장애가적고침전물의청소가용이한방법을선택해야하며, 수두손실이가급적적은방법을택하여야한다. 3. 측정방법 3.1 벤튜리미터 ( Venturi Meter ) - 7 -

13 3.1.1 구조및특성벤튜리미터 (Venturi Meter) 는긴관의일부로써단면이작은목 (throat) 부분과점점축소, 점점확대되는단면을가진관으로축소부분에서정력학적수두의일부는속도수두로변하게되어관의목 (throat) 부분의정력학적수두보다적게된다. 이러한수두의차에의해직접적으로유량을계산할수있다 ( 그림1 ). 그림 1. 벤튜리미터 측정공식 Q = C A 1-[ d 2 g H 4 2 ] d 1 Q : 유량 ( cm3 / sec ) C : 유량계수 A : 목 (throat) 부분의단면적 ( cm2 ) [ = π d2 2 4 ] H : H 1 -H 2 ( 수두차 : cm ) H 1 : 유입부관중심부에서의수두 ( cm ) H 2 : 목 (throat) 부의수두 ( cm ) g : 중력가속도 ( 980 cm / sec 2 ) d 1 : 유입부의직경 ( cm ) d 2 : 목 (throat) 부직경 ( cm ) - 8 -

14 3.2 유량측정용노즐 ( Nozzle ) 특성및구조유량측정용노즐은수두와설치비용이외에도벤튜리미터와오리피스간의특성을고려하여만든유량측정용기구로서측정원리의기본은정수압이유속으로변화하는원리를이용한것이다. 그러므로벤튜리미터의유량공식을노즐에도이용할수있으며, 또한노즐은약간의고형부유물질이포함된폐하수에도이용할수있다 ( 그림 2 ) 측정공식 Q = C A 1-[ d 2 g H 4 2 ] d 1 Q : 유량 ( cm3 / sec ) C : 유량계수 A : 노즐 (Nozzle) 부분의단면적 ( cm2 ) [ = π d2 2 4 ] H : H 1 -H 2 ( 수두차 : cm ) H 1 : 유입부관중심부에서의수두 ( cm ) H 2 : 목 (throat) 부의수두 ( cm ) g : 중력가속도 ( 980 cm / sec 2 ) d 1 : 유입부의직경 ( cm ) d 2 : 목 (throat) 부의직경 ( cm ) - 9 -

15 3.3 오리피스 ( Orifice ) 특성및구조오리피스는설치에비용이적게들고비교적유량측정이정확하여얇은판오리피스가널리이용되고있으며흐름의수로내에설치한다. 오리피스를사용하는방법은노즐 (Nozzle) 과벤튜리미터와같다. 오리피스의장점은단면이축소되는목 (throat) 부분을조절하므로써유량이조절된다는점이며, 단점은오리피스 (Orifice) 단면에서커다란수두손실이일어난다는점이다 ( 그림 3) 측정공식 Q = C.A 1-[ d 2 g H 4 2 ] d 1 Q : 유량 ( cm3 / sec ) C : 유량계수 A : 노즐부분의단면적 ( cm2 ) [ = π d2 2 4 ] H : H 1 -H 2 ( 수두차 : cm ) H 1 : 유입부관중심부에서의수두 ( cm ) H 2 : 목부분의수두 ( cm ) g : 중력가속도 ( 980 cm / sec 2 ) d 1 : 유입부의직경 ( cm ) d 2 : 목부의직경 ( cm ) 3.4 피토우 ( Pitot ) 관 특성및구조 피토우관의유속은마노미터에나타나는수두차에의하여계산한다. 왼쪽의관은

16 정수압을측정하고오른쪽관은유속이 0 인상태인정체압력 (Stagnation Pressure) 을측정한다. 피토우관으로측정할때는반드시일직선상의관에서이루어져야하며, 관의설치장소는엘보우 (elbow), 티 (tee) 등관이변화하는지점으로부터최소한관지름의 15~50배정도떨어진지점이어야한다. 또한피토우관은부유물질이많이흐르는폐하수에서는사용이곤란하나부유물질이적은대형관에서는효율적인유량측정기이다 ( 그림 4 ) 측정공식 Q = C A V Q : 유량 ( cm3 / sec ) C : 유량계수 A : 관의유수단면적 ( cm2 ) [ = π D 2 4 ] V : 2 g H ( cm / sec ) H : Hs - Ho ( 수두차 : cm ) g : 중력가속도 ( 980 cm / sec 2 ) Hs : 정체압력수두 ( cm ) Ho : 정수압수두 ( cm ) D : 관의직경 ( cm )

17 3.5 자기식유량측정기 ( Magnetic flow meter ) 특성및구조고형물이많아관을메울우려가있는폐하수에이용할수있는유량측정기기로측정원리는패러데이 (Faraday) 의법칙을이용하여자장의직각에서전도체를이동시킬때유발되는전압은전도체의속도에비례한다는원리를이용한것으로이경우전도체는폐하수가되며, 전도체의속도는유속이된다. 이때발생된전압은유량계전극을통하여조절변류기로전달된다. 이측정기는전압이활성도, 탁도, 점성, 온도의영향을받지않고다만유체 ( 폐하수 ) 의유속에의하여결정되며수두손실이적다 ( 그림 5 ) 측정공식 연속방정식을이용하여유량측정함. Q = C A V C : 유량계수 E V : 유속 [= B D 106 ] ( m / sec ) A : 관의유수단면적 ( m2 ) E : 기전력 B : 자속밀도 ( GAUS ) D : 관경 ( m )

18 3.6 위어 ( Weir ) 위어의종류및구조 수로 ( 水 D) 수로는목재, 철판, PVC판, FRP 등을이용하여만들며부식성을고려하여내구성이강한재질을선택한다. 수로의크기는수로의내부치수로정하되폐수량에따라적절하게결정한다. 수로는바닥면을수평으로하며수위를읽는데오차가생기지않도록한다. 수로의측면과바닥면은안측 ( 內側 ) 이직각으로접 ( 接 ) 하게하고, 누수 ( 漏水 ) 가없도록하여야한다. 위어판에다가오는흐름을고르게하여수면의파동이없게하기위하여위어의상류에체 ( 篩, 눈금의간격 10~20 mm철재의체를사용하여도좋다 ) 혹은적당한다공판 ( 多孔板 ) 으로만든정류장치를마련한다. 그위치는따로정한다. 위어의수로는위어로부터상류로향하여수위측정부분 (L 1 ), 정류부분 ( 整流部 )(L 2 ), 유수도입부분 (L 3 ) 으로되어있으며정류장치의다공판은 2매이상, 될수있으면 4매로하고정류부분에같은간격으로유수에직각또는수직으로붙인다 ( 그림 7 ). 유수의도입부분은상류측의수로가위어의수로폭과깊이보다클경우에는없어도좋다. 저수량 ( 貯水量 ) 은될수록큰편이좋다

19 3.6.3 위어판 위어판의재료는 3 mm이상의두께를갖는내구성이강한철판으로한다. 위어판의가장자리는그림 8에표시하는것과같이위어판의안측으로부터약 2 mm의사이는위어판의양측면에직각인평면을이루고, 그것으로부터바깥쪽으로향하여약 45 의경사면을이루는것으로한다. 위어판안측의가장자리는직선이어야하며, 그귀퉁이는날카롭거나둥글지않게줄로다듬는다. 위어판의내면 ( 內面 ) 은평면이어야하며, 특히가장자리로부터 100 mm이내는될수록매끄럽게다듬는다. 위어판은유수 ( 流水 ) 의수압 ( 水壓 ) 에의하여바깥쪽으로굽지아니하도록위어판바깥면의절단하부점 ( 직각 3각위어 ), 절단하부모서리 ( 4각위어 ) 로부터 30 cm이상떨어져서그림 9와같이보강재 ( 補强材 ) 를붙인다. 위어판은수로의장축 ( 長軸 ) 에직각이거나또는수직으로하여말단의바깥틀에누수가없도록고정한다

20 위어판의크기는수로의붙인틀의크기에맞추며절단의크기는따로정한다. 직각 3각위어의절단은그림 10에표시하는것과같이절단각도를 90 로하고그 2등분선은수직이며, 또한수로폭의중앙에위치하도록붙인다. 4각위어의절단은그림 11에표시하는것과같이하부귀퉁이와양귀퉁이는각각직각을이루는것으로한다. 위어판은절단하부귀퉁이의 2등분선이수로의중앙에위치하며또그하부귀퉁이가수로밑면과수평이며, 또한평행하게되도록붙인다. 위어를만들때의주요크기는다음과같이한다. ⑴ 직각 3 각위어 ( 그림 12 )

21 ⑵ 4 각위어 ( 그림 13 ) 수두 ( 水頭 ) 의측정방법 수두란위어의상류측수두측정부분의수위와절단하부점 ( 직각 3각위어 ) 또는절단하부모서리의중앙 ( 4각위어 ) 과의수직거리를말한다. 자로서수두를측정하는경우에는다음과같이한다. ⑴ 수두의측정장소는위어판내면으로부터 300 mm상류인곳으로하고그위치를표시하기위하여적당한철제기구를사용하여수로의측벽윗면에고정하여표시한다. ⑵ 이표시는 ( 그림 14 ) 그상면에측정위치를표시하는기선을유수방향의직각으로새겨유수 ( 流水 ) 에면 ( 面 ) 한측변은자의눈금을읽기쉽도록예각 ( 銳角 ) 으로하여그능선을수위측정기선 ( 水位側定基線 ) 으로한다. ⑶ 수두측정선의기선이되는 0 점은수로의물이위어의절단하부점 ( 직각 3각위어 ) 또는절단하부귀퉁이의중앙 ( 4각위어 ) 에접하는상태일때, 그수면과측정장소표시의수두측정점으로부터수직으로내린선이접하는점을말하며, 그수직거리 ( 그림 14 ) 를mm로재어서이것을 0 점측정치로한다

22 ⑷ 유량측정에있어서수위측정은 0 점측정일때와마찬가지로수위측정점과흐름의수면과수직거리 ( 그림 15 ) 를mm단위로측정하여이것을흐름의수위측정치로한다. ⑸ 유량산출의기초가되는수두측정장치는 a - b 즉영점수위측정치 ( mm ) - 흐름의수위측정치 ( mm ) = 측정수두 ( mm ) 로한다. ⑹ 0 점수위는유량측정조사를시작하기전에한번측정하였으면측정할때마다할필요는없으나수로가조금이라도움직여서바뀌는때에는조사기간중에도적당한때에측정한다. ⑺ 수두의측정은위어를넘어서흘러내리는물이위어판바깥측에닿지않는상태로행한다 유량의산출방법수로를흐르는폐수의유량은다음공식에의하여산출한다. 다만, 폐하수측정방법으로서앞에서정한규정의수로및위어판을만들어서측정한경우에는그림 16의그래프 ( Graph ) 를사용하여측정유량으로하여도된다. 직각 3각위어 Q = K h 5/2 Q : 유량 ( m3 / 분 ) K : 유량계수 = h B : 수로의폭 ( m ) + [ D ] [ h B ]2 D : 수로의밑면으로부터절단하부점까지의높이 (m) h : 위어의수두 ( m ) 이계산식의적용범위는아래와같다. B : 0.5 ~ 1.2 m D : 0.1 ~ 0.75 m h : 0.07 ~ 0.26 m < B 3 그림 12 의크기대로만들었을경우에는그림 16 에측정수두와유량의관계를그래프 ( Graph ) 로표시하였으므로이그래프로부터유효숫자 2 자리 ( 3 자리째를사사오입 ) 까지측정수두에대한유량을읽어이것을측정유량으로한다

23 그림 16. 직각 3 각위어의수두와유량 4 각위어 Q = K b h 3/2 Q : 유량 ( m3 / 분 ) K : 유량계수 = h h D (B-b) h D B D : 수로의밑면으로부터절단하부모서리까지의높이 ( m ) B : 수로의폭 ( m ) b : 절단의폭 ( m ) h : 위어의수두 ( m ) 이계산식의적용범위는아래와같다 B : 0.5 ~ 6.3 m b = 0.15 ~ 5 m D = 0.15 ~ 3.5 m 6 D B 2 = 0.06 m 이상 h = 0.03 ~ 0.45 b m 그림 13 크기대로만들었을경우에는그림 17 에측정수두와유량의관계를그래프 ( Graph ) 로표시하였으므로이그래프로부터유효숫자 2 자리 ( 3 자리째를사사오입 ) 까지측정수두에대한유량을읽어이것을측정유량으로한다. B D 그림 각위어의수두와유량

24 3.7 파아샬플루움 ( Parshall flume ) 특성 수두차가작아도유량측정의정확도가양호하며측정하려는폐하수중에부유물질 또는토사등이많이섞여있는경우에도목 (throat) 부분에서의유속이상당히빠르므로 부유물질의침전이적고자연유하가가능하다 ( 그림 18 ) 구조및유형 구조및유형은그림 19 와같으며치수는표 1 과같다

25 표 1. 파아샬플루움의치수 ( 단위 : mm ) 수로폭 inft 2in 3in 6in 9in 1ft 1½ft 2ft 3ft 4ft 5ft 6ft 7ft 8ft W mm ,524.01,828.02,133.62,433.4 最小流量m3 /h 範圍最大m3 /h ,6412,5083,3755,1386,923 8,72310,55012,38014,220 A ,0161,1181,219 1,321 1,422 1,524 1,626 B ,3431,4191,4961,6451,794 1,943 2,092 2,241 2,391 C ,2191,524 1,829 2,134 2,438 2,743 D ,0261,2071,5721,937 2,302 2,667 3,032 3,397 E F G K N R M P ,0801,4821,6761,9542,2232,711 3,086 3,442 3,810 4,172 L ,5251,6262,8672,9433,0193,1693,318 3,467 3,616 3,765 3, 재질부식에대한내구성이강한스테인레스강판, 염화비닐합성수지, 섬유유리, 강철판, 콘크리이트등을이용하여설치하되면처리는매끄럽게처리하여가급적마찰로인한수두손실을적게한다 유량측정 그림 19 에서와같이상류측관측점 ( Ha ) 과하류측관측점 ( Hb ) 에서수위를측정, 다음의표에있는경험식을이용하여표 2 의공식에대입하여계산한다. 표 2. 유량측정공식 ( 경험식 ) 목 (throat) 폭적용공식 W= 7.6 cm W= 15.2 cm W= cm W= 30.48~243.84cm q = Ha 1.55 ( 1 / 초 ) q = Ha 1.58 ( 1 / 초 ) q = Ha 1.53 ( 1 / 초 ) q = Ha 1.52 ( 1 / 초 ) Ha : 상류부의수위 ( cm ) q : 1 / 초

26 그러나파아샬플루움내의흐름이정부 ( 頂部 ) 에서사류 ( 射流 ) 혹은잠긴수로의상태가되면유량계산은매우복잡해지므로항상자유흐름이발생되도록플루움을설치하여야한다. 이렇게하기위하여는상류측측정수심 Ha에대한하류측정수심 Hb의비 ( Hb / Ha ) 가최소한 95 % 이하이어야한다. 이러한흐름조건에서목부분의여러가지칫수 (W) 에대한유량측정그래프는그림 20과같다. 3.8 용기에의한측정 최대유량이 1 m3 / 분미만인경우 유수 ( 流水 ) 를용기에받아서측정한다. 용기는용량 100 ~ 200 L인것을사용하여유수를채우는데에요하는시간을스톱워치 ( Stop Watch ) 로잰다. 용기에물을받아넣는시간을 20초이상이되도록용량을결정한다. 다음계산식에의하여그유량을구한다. Q = 60 V t Q : 유량 ( m3 / 분 ) V : 측정용기의용량 ( m3 ) t : 유수가용량 V를채우는데에걸린시간 ( sec ) 최대유량 1 m3 / 분이상인경우이경우는침전지, 저수지기타적당한수조 ( 水槽 ) 를이용한다

27 수조가작은경우는한번수조를비우고서유수가수조를채우는데걸리는시간으로부터최대유량이 1 m3 / 분미만인경우와동일한방법으로유량을구한다. 수조가큰경우는유입시간에있어서유수의부피는상승한수위와상승수면의평균표면적 ( 平均表面積 ) 의계측에의하여유량을산출한다. 이경우측정시간은 5분정도, 수위의상승속도는적어도매분 1 cm이상이어야한다. 3.9 개수로에의한측정 수로의구성재질 ( 構成材質 ) 과수로단면의형상이일정하고수로의길이가적어도 10 m까지똑바른경우 직선수로의기울기와횡단면을측정하고이어서자 ( 尺 ) 등으로수로폭간의수위를측정한다. 다음의식을사용하여유량을계산한다. 평균유속은케이지 ( Chezy ) 의유속공식에의한다. Q = 60 V A Q : 유량 ( m3 / 분 ) V : 평균유속 (= C Ri) ( m / 초 ) A : 유수단면적 ( m2 ) i : 홈바닥의기울기 C : 유속계수 R : 경심 ( 經深 ) 유수단면적 A를윤변 ( 潤邊 ) S로나눈것 ( m ) 경심 R 은다음식에의하여구한다. R = A / S 로하여서그림 21 으로부터

28 장방형 ( 長方形 ) 일때 제형 ( 梯形 ) 일때 A = B h A = h (B 1 +B 2 ) 2 S = B + 2h S = B 2 + 2b R = B h B+2h R = h (B 1 +B 2 ) 2 (B 2 +2b) 유속계수 C( Bazin 의공식 ) C = r R ( m / s ) 단, r 은수로의매끄러운정도를나타내는상수로서표 3 과같다. 표 3. Bazin 의조도 ( 組度 ) 상수 r 의값 수로의특성 r 모르타르 (mortar) 의바름, 대패로민목재판, 기타곱게시공 ( 施工 ) 을했거나매끄러운면 곱게다듬은판바름, 절석공 ( 切石工 ) 또는연와공등의매끄러운면 콘크리이트로만든수로 보통다듬돌로쌓은수로, 거치른콘크리이트등의조잡한면 정규 ( 正規 ) 의단면으로장석 ( 張石 ) 을쌓은수로 단면이비교적정돈된보통의하천 수로의구성, 재질, 수로단면의형상, 기울기등이일정하지않은개수로 ( 開水 D) 의경우 수로는될수록직선적이며, 수면이물결치지않는곳을고른다. 10 m를측정구간으로하여 2 m마다유수의횡단면적을측정하고, 산술평균값을구하여유수의평균단면적으로한다. 유속의측정은부표를사용하여 10 m구간을흐르는데걸리는시간을스톱워치 ( Stop Watch ) 로재며이때실측유속 ( 實測流速 ) 을표면최대유속으로한다. 수로의수량 ( 水量 ) 은다음식을사용하여계산한다. V = 0.75 Ve V : 총평균유속 ( m / s ) Ve : 표면최대유속 ( m / s )

29 Q = 60 V A Q : 유량 ( m3 / 분 ) V : 총평균유속 (m / s ) A : 측정구간의유수의평균단면적 ( m2 ) 4. 유량의측정조건및측정값의정리와표시 4.1 폐하수의유량조사에있어서는배출시설 ( 공장, 사업장등 ) 의조업기간중에있어서 가능한한처리량, 운전시간, 설비가동상태에이상이없는날을택하여조사한다. 1 일조업시간을 1 단위로한다. 4.2 조사당일은그날의조업개시시간부터원칙적으로 10분또는 15분마다반드시일정간격으로폐하수량을측정하며, 당일의조업이끝나고다음날 ( 翌日 ) 조업이시작될때까지, 혹은당일의조업이끝나고다음조업이시작될때까지폐하수가흐르는경우에는폐하수의방류가종료될때까지측정을계속한다. 다만, 유량에변화가없을경우에는, 상기의시간간격을적의연장하여도무방하다. 4.3 한조사단위에있어서동일간격으로측정한유량측정값은 그래프 ( Graph ) 에조업시간과유량과의관계를표시한다. 측정값의산술평균값을계산하여평균유량으로한다. 측정값의최대값을가지고최대유량측정값으로한다. 이상 3개항에해당배수량을나타낸다. 4.4 측정을계속하는중에배출시설 ( 공장, 사업장등 ) 의조업상태가나쁘거나다른이상이 있거나폐하수의유량에유의 ( 有意 ) 한변화가있어측정값에영향이있을경우에는 재측정을한다

30 제 2 항하천유량측정방법 1. 유속 - 면적법 ( Velocity - Area Method ) 유황 ( 流況 ) 이일정하고하상의상태가고른지점을선정하여물이흐르는방향과직각이되도록하천의양끝을로프로고정하고등간격으로측정점을정한다. 그림 1과같이통수단면을여러개로소구간단면으로나누어각소구간마다수심및유속계로 1~2개의점유속을측정하고소구간단면의평균유속및단면적을구한다. 이평균유속에소구간단면적을곱하여소구간유량 ( q m ) 으로한다. 소구간단면에있어서평균유속 V m 은 수심이 0.4 m 미만일때 V m = V 0.6 수심이 0.4 m 이상일때 V m = (V V 0.8 ) ½ V 0.2, V 0.6, V 0.8 은각각수면으로부터전수심의 20 %, 60 % 및 80 % 인점의유속이다. Q = q 1 + q q m Q : 총유량 q m : 소구간유량 V m : 소구간평균유속

31 제 3 항시료의채취및보존방법 1. 시료의채취방법 1.1 시료채취방법의구분 시료는배출허용기준적합여부를판정하기위한시료와하천수등수질조사를위한 시료로구분하여채취한다 배출허용기준적합여부판정을위한시료채취배출허용기준적합여부판정을위하여채취하는시료는시료의성상, 유량, 유속등의시간에따른변화를고려하여현장물의성질을대표할수있도록채취하여야하며, 복수채취를원칙으로한다. 단, 신속한대응이필요한경우등복수채취가불합리한경우에는예외로할수있다. ⑴ 복수시료채취방법등 수동으로시료를채취할경우에는 30분이상간격으로 2회이상채취 ( Composite Sample ) 하여일정량의단일시료로한다. 단, 부득이한사유로 6시간이상간격으로채취한시료는각각측정분석한후산술평균하여측정분석값을산출한다 ( 2개이상의시료를각각측정분석한후산술평균한결과배출허용기준을초과한경우의위반일적용은최초배출허용기준이초과된시료의채취일을기준으로한다 ). 자동시료채취기로시료를채취할경우에는 6시간이내에 30분이상간격으로 2회이상채취 ( Composite sample ) 하여일정량의단일시료로한다. 수소이온농도 ( ph ), 수온등현장에서즉시측정분석하여야하는항목인경우에는 30분이상간격으로 2회이상측정분석한후산술평균하여측정분석값을산출한다 ( 단, ph의경우 2회이상측정한값을 ph 7을기준으로산과알카리로구분하여평균값을산정하고산정한평균값중배출허용기준을많이초과한평균값을측정분석값으로함 ). 시안 ( CN ), 노말헥산추출물질, 대장균군등시료채취기구등에의하여시료의성분이유실또는변질등의우려가있는경우에는 30분이상간격으로 2개이상의시료를채취하여각각측정분석한후산술평균하여측정분석값을산출한다. 단, 복수시료채취과정에서시료성분의유실또는변질등의우려가없는경우에는 ( 가 ) 의방법으로할수있다

32 ⑵ 복수시료채취방법적용을제외할수있는경우 환경오염사고, 취약시간대 ( 일요일, 공휴일및평일 18:00~09:00 등 ) 의환경오염감시등신속한대응이필요한경우 수질환경보전법제15조제1항의규정에의한비정상적행위를할경우 사업장내에서발생하는폐수를회분식 ( Batch식 ) 등간헐적으로처리하여방류하는경우 기타부득이복수시료채취방법으로시료를채취할수없을경우 하천수등수질조사를위한시료채취시료는시료의성상, 유량, 유속등의시간에따른변화 ( 폐수의경우조업상황등 ) 를고려하여현장물의성질을대표할수있도록채취하여야하며, 수질또는유량의변화가심하다고판단될때에는오염상태를잘알수있도록시료의채취횟수를늘려야하며, 이때에는채취시의유량에비례하여시료를서로섞은다음단일시료로한다. 1.2 시료채취시의유의사항가. 시료는목적시료의성질을대표할수있는위치에서시료채취용기또는채수기를사용하여채취하여야하며, 채취용기는시료를채우기전에시료로 3회이상씻은다음사용한다. 나. 유류또는부유물질등이함유된시료는시료의균일성이유지될수있도록채취해야하며, 침전물등이부상하여혼입되어서는안된다. 다. 용존가스, 환원성물질, 휘발성유기물질, 유류및수소이온등을측정하기위한시료는운반중공기와의접촉이없도록가득채워져야한다. 라. 시료채취용기에시료를채울때에는어떠한경우에도시료의교란이일어나서는안된다. 가능한한공기와접촉하는시간을짧게하여채취한다. 마. 채취된시료는즉시실험하여야하며, 그렇지못한경우에는 3. 시료의보존방법에따라보존하고규정된시간내에실험하여야한다. 바. 시료채취량은시험항목및시험횟수에따라차이가있으나보통 3~5 l정도이어야한다. 다만, 시료를즉시실험할수없어보존하여야할경우또는시험항목에따라각각다른채취용기를사용하여야할경우에는시료채취량을적의증감하여야한다

33 사. 지하수시료는취수정내에고여있는물과원래지하수의성상이달라질수있으므로고여있는물을충분히퍼낸다음새로나온물을채취한다. 이경우퍼내는양은고여있는물의 4~5 배정도이나 ph 및전기전도도를연속적으로측정하여이값이평형을이룰때까지로한다. 아. 시료채취시에시료채취시간, 보존제사용여부, 매질등분석결과에영향을미칠수있는사항을기재하여분석자가참고할수있도록한다. 2. 시료채취지점 2.1 배출시설등의폐수폐수의성질을대표할수있는곳 ( 그림 1 ) 에서채취한다. 폐수의방류수로가한지점이상일때에는각수로별로채취하여별개의시료로하며필요에따라부지경계선외부의배출구수로에서도채취할수있다. 시료채취시우수나조업목적이외의물이포함되지말아야한다. 그림 1. 시료채취지점예시 - 당연채취지점 : 필요시채취지점 : : 방지시설최초방류지점 4 : 배출시설최초방류지점 ( 방지시설을거치지않을경우 ) : 부지경계선외부배출수로 2.2 하천수 가. 하천수의오염및용수의목적에따라채수지점을선정한다

34 하천본류와하전지류가합류하는경우에는그림 2 의합류이전의각지점과합류 이후충분히혼합된지점에서각각채수한다. 나. 하천의단면에서수심이가장깊은수면의지점과그지점을중심으로하여좌우로 수면폭을 2 등분한각각의지점의수면으로부터수심 2 m 미만일때에는수심의 ⅓ 에서, 수심이 2 m 이상일때에는수심의 ⅓ 및 ⅔ 에서각각채수한다 ( 그림 3 ). 다. 기타가, 나항이외의경우에는시료채취목적에따라필요하다고판단되는지점 및위치에서채수한다. 3. 시료의보존방법 채취된시료를즉시실험할수없을때에는따로규정이없는한표 1 의보존방법에 따라보존하고어떠한경우에도보존기간이내에실험을끝내야한다

35 표 1. 시료의보존방법 측정항목 시료용기 보존방법 최대보존기간 ( 권장보존기간 ) 온 도 P, G - 즉시측정 수소이온농도 P, G - 즉시측정 용존산소 전극법 BOD 병 - 즉시측정 윙클러법 BOD 병 현장에서용존산소고정후어두운 8 시간 곳보관 생물화학적산소요구량 P, G 4 보관 48 시간 (6 시간 ) 화학적산소요구량 P, G 4, H 2SO 4 로 ph 2 이하 28 일 (7 일 ) 색 도 P, G 4 보관 48 시간 부유물질 P, G 4 보관 7 일 염소이온 P, G 28 일 노말헥산추출물질 G 4, H 2SO 4 로 ph 2 이하 28 일 ( 채취한시료전량을취하여실험 ) 암모니아성질소 P, G 4, H 2SO 4 로 ph 2 이하 28 일 (7 일 ) 아질산성질소 P, G 4 보관 48 시간 ( 즉시 ) 질산성질소 P, G 4 보관 48 시간 총질소 P, G 4 H 2SO 4 로 ph 2 이하 28 일 (7 일 ) 용존총질소 P, G 4 H 2SO 4 로 ph 2 이하 28 일 (7 일 ) 인산염인 P, G 즉시여과한후 4 보관 48 시간 총 인 P, G 4, H 2SO 4 로 ph 2 이하 28 일 용존총인 P, G 4, H 2SO 4 로 ph 2 이하 28 일 페놀류 G 4 보관, H 3PO 4 로 ph 4 이하조정 28 일 한후 CuSO 4 1 g/l 첨가 시 안 P, G 4 보관, NaOH 로 ph 12 이상 14 일 (24 시간 ) ( 잔류염소가공존할경우아스코르 빈산 1 g/l 첨가 ) 불 소 P - 28 일

36 측정항목 시료용기 보존방법 최대보존기간 ( 권장보존기간 ) 6 가크롬 P, G 4 보관 24 시간 크 롬 P, G C - HNO 3 2 ml /l 6 개월 아 연 P, G 6 개월 구 리 P, G 6 개월 카드뮴 P, G 6 개월 납 P, G 6 개월 망 간 P, G 6 개월 비 소 P, G 6 개월 니 켈 P, G 6 개월 철 P, G 6 개월 셀레늄 P, G 1 개월 수 은 P, G 1 개월 알킬수은 P, G 1 개월 유기인 G 4 보관, HCl 로 ph 5~9 7 일 ( 추출후 40 일 ) 폴리클로리네이티드 G 4 보관, HCl 로 ph 5~9 7 일 ( 추출후 비페닐 (PCB) 40 일 ) 음이온계면활성제 P, G 4 보관 48 시간 총대장균군 - 환경기준적용시료 P, G 저온 (10 이하 ) 24 시간 - 배출허용기준및방류 P, G 저온 (10 이하 ) 6 시간 수수질기준적용시료 클로로필 a P, G GF/C 여과후 -20 보관 7 일 전기전도도 P, G 4 보관 24 시간 분원성대장균군 P, G 저온 (10 이하 ) 24 시간 휘발성저급탄화수소류 G 인산 ( 1+10 ) 또는황산 ( 1+5 ) 로 7 일 ( 추출후 1 방울 / 10 ml를가하여냉암소보관 14 일 ) *P : polyethylene, G : Glass

37 제 4 항시료의전처리방법 채취된시료수에는보통유기물및부유물질등을함유하고있어탁하거나색상을띠고있는경우가있을뿐만아니라목적성분들이흡착되어있거나난분해성의착화합물또는착이온상태로존재하는경우가있기때문에실험의목적에따라적당한방법으로전처리를한다음실험하여야한다. 특히금속성분을측정하기위한시료일경우에는유기물등을분해시킬수있는전처리조작이필수적이며, 전처리에사용되는시약은목적성분을함유하지않은고순도의것을사용하여야한다. 1. 질산에의한분해이방법은유기물함량이낮은깨끗한하천수나호소수등의시료에적용된다. 시료적당량 ( 100~500 ml ) 을취하여비커에넣고여기에질산 5 ml와유리구 4~5 개를넣은다음서서히가열하여액량이약 15 ml가될때까지증발농축하고방냉한다. 필요하면여과하여거름종이를물로 2~3회씻어주고여액과씻은액을합하여정확히 100 ml로한다. 이용액의산농도는약 0.7 N이다. 2. 질산 - 염산에의한분해이방법은유기물함량이비교적높지않고금속의수산화물, 산화물, 인산염및황화물을함유하고있는시료에적용된다. 시료적당량 ( 100~500 ml ) 을취하여비커에넣고여기에질산 3 ml와유리구 4~5개를넣은다음서서히가열하여액량이약 5 ml가될때까지증발농축하고방냉한다. 다시질산 5 ml를넣고시계접시로비커를덮은상태에서서서히가열하여액이거의건고되는부근까지증발농축하고방냉한다. 여기에염산 ( 1+1 ) 10 ml와물 15 ml를넣고약 15 분간가열하여잔류물을녹인다음시계접시와비커의기벽을물로씻어서합한다. 필요하면여과하고거름종이를물로 2~3 회씻은다음여액과씻은액을합하여정확히 100 ml로한다. 이용액의산농도는약 0.5 N이다. 3. 질산 - 황산에의한분해이방법은유기물등을많이함유하고있는대부분의시료에적용된다. 그러나칼슘, 바륨, 납등을다량함유한시료는난용성의황산염을생성하여다른금속성분을흡착하므로주의하여야한다

38 시료적당량 ( 100~500 ml ) 을취하여비커또는킬달플라스크에넣고여기에질산 5ml와유리구 4~5 개를넣은다음서서히가열하여액량이약 15 ml가될때까지증발농축하고방냉한다. 질산 5 ml와황산 5~10 ml를넣고가열을계속하여백색의황산가스가발생하기시작하면가열을중지한다. 이때유기물의분해가완전히끝나지않아액이맑지않을때에는다시질산 5 ml를넣고가열을반복한다. 분해가끝나면방냉하고물 50 ml를넣어끓기직전까지서서히가열하여침전된용해성염들을녹인다. 방냉하여필요하면여과하고거름종이를물로 2~3 회씻어준다음여액과씻은액을합하여정확히 100 ml로한다. 이용액의산농도는약 1.5~3 N이다. 4. 질산 - 과염소산에의한분해 이방법은유기물을다량함유하고있으면서산화분해가어려운시료들에적용된다. 시료적당량 ( 100~500 ml ) 을취하여비커또는킬달플라스크에넣고여기에질산 5ml와유리구 4~5 개를넣은다음서서히가열하여액량이약 15 ml가될때까지증발농축하고방냉한다. 질산 5 ml와과염소산 10 ml를넣고가열을계속하여과염소산이분해되어백연이발생하기시작하면가열을중지한다. 이때유기물의분해가완전히끝나지않아액이맑지않을때에는다시질산 5 ml를넣고가열을반복한다. 분해가끝나면방냉하고물 50 ml를넣어서서히끓이면서질소산화물및유리염소를완전히제거한다. 필요하면여과하고거름종이를물로 2~3 회씻어준다음여액과씻은액을합하여정확히 100 ml로한다. 이용액의산의농도는약 0.8 N이다. 주1) 과염소산을넣을경우질산이공존하지않으면폭발할위험이있으므로반드시질산을먼저넣어주어야하며, 어떠한경우에도유기물을함유한뜨거운용액에과염소산을넣어서는안된다. = 주2) 납을측정할경우시료중에황산이온 ( SO 4 ) 이다량존재하면불용성의황산납이생성되어측정값에손실을가져온다. 이때는분해가끝난액에물대신초산암모늄용액 ( 5 6 ) 50 ml를넣고가열하여액이끓기시작하면비커또는킬달플라스크를회전시켜내벽을액으로충분히씻어준다음약 5 분동안가열을계속하고방냉하여여과한다. 5. 질산 - 과염소산 - 불화수소산에의한분해 이방법은다량의점토질또는규산염을함유한시료에적용된다. 시료적당량 ( 100~500 ml ) 를취하여비커에넣고여기에유리구 4~5 개를넣은다음서서히

39 가열하여액량이약 15 ml가될때까지증발농축하고방냉한다. 비커에있는액을테프론비커또는백금도가니에옮기고비커의기벽에붙어있는부착물을물로깨끗히씻어합한다음질산 10 ml를넣어거의액이건고할때까지가열하고방냉한다. 과염소산 5 ml와불화수소산 1 ml를넣고가열을계속하여과염소산의백연이발생하면가열을중지하고방냉한다. 여기에물 50 ml를넣고이하 4. 질산-과염소산에의한분해 에따라시험한다. 이용액의산농도는약 0.8 N이다. 6. 회화에의한분해 이방법은목적성분이 400 이상에서휘산되지않고쉽게회화될수있는시료에적용된다. 시료중에염화암모늄, 염화마그네슘등이다량함유된경우에는납, 철, 주석, 아연, 안티몬등이휘산되어손실을가져오므로주의하여야한다. 시료적당량 ( 100~500 ml ) 을취하여백금, 실리카또는자제증발접시에넣고물중탕또는열판에서가열하여증발건고한다. 용기를회화로에옮기고 400~500 에서가열하여잔류물을회화시킨다음방냉하고염산 ( 1+1 ) 10 ml를넣어열판에서가열한다. 잔류물이녹으면온수 20 ml를넣고여과하여거름종이를온수로 3 회씻어준다음여액과씻은액을합하고물을넣어정확히 100 ml로한다. 이용액의산농도는약 0.5 N이다. 7. 원자흡광광도법 ( 또는중금속측정 ) 을위한용매추출법 이방법은목적성분의농도가미량이거나측정에방해하는성분이공존할경우시료의농축또는방해물질을제거하기위한목적으로사용되며, 이방법으로시료를전처리한경우에는따로규정이없는한검량선작성용표준액도적당한농도 ( 저농도 ) 로조제하여시료와같은방법으로처리하여시험한다. 7.1 디에틸디티오카르바민산추출법 ( DDTC-MIBK, 아세트산부틸 ) 이방법은시료중구리, 아연, 납, 카드뮴및니켈의측정에적용된다. 시료 500 ml ( 또는산분해한시료의일정량 ) 를비커에넣고염산 10 ml를넣어약 5분간끓이고방냉한다음분액깔때기에옮긴다. 구연산이암모늄용액 ( 10 W/V%, 구리시험용 ) 10 ml와지시약으로서메타크레졸퍼플에틸알코올용액 ( 0.1 W/V% ) 2~3 방울을넣고암모니아수 ( 1+1 ) 를용액이자색을나타낼때까지넣는다. 디에틸디티오카르바민산나트륨용액 ( 1 W/V% ) 5 ml를넣고흔들어섞은다음아세트산부틸또는메틸이소부틸케톤 10~20 ml를넣어 1 분간세게흔들어섞고정치하여유기용매층 ( 윗층 ) 을분리한다. 수층에다시용매 5 ml씩을넣어 2~3 회반복추출하고유기용매층을

40 합한다. 분리한유기용매층을 100 ml비커에옮겨열판또는수욕상에서조용히휘산시키고여기에질산 2 ml와과염소산 1 ml를넣어가열분해시킨다. 맑은색으로분해가끝나면거의건고시키고방냉하여잔류물을질산 ( 1+15 ) 20 ml에녹여시료용액으로한다. 단즉시원자흡광광도법에따라측정이가능할경우에는일정량의용매를넣어추출한다음분리된용매자체를시료용액으로하여직접측정할수있다. 7.2 디티존추출법 Ⅰ( 디티존 -MIBK ) 이방법은시료중구리, 아연, 납, 카드뮴, 니켈및코발트등의측정에적용된다. 시료 500 ml ( 또는산분해한시료일정량 ) 를비커에넣고염산 5 ml를넣어약 5 분간끓이고방냉한다음주석산암모늄용액 ( 10 W/V%, 중금속시험용 ) 10~20 ml를넣고암모니아수또는염산 ( 1+50 ) 을넣어 ph 약 8.5로조절한다. 이용액을분액깔때기에옮기고물을넣어액량을조절한다음디티존 메틸이소부틸케톤용액 ( 0.2 W/V% ) 20~50 ml를정확히넣어약 2 분간세게흔들어섞고정치하여수층 ( 아래층 ) 을버린다. 유기용매층을건조거름종이에여과하여여액을시료용액으로하고즉시원자흡광광도법에따라측정한다. 즉시측정이불가능할경우에는 7.1에따라시험하여수용액상태로한다. 7.3 디티존추출법 Ⅱ( 디티존 - 사염화탄소 ) 이방법은시료중아연, 납, 카드뮴등의측정에적용된다. 시료 500 ml ( 또는산분해한시료일정량 ) 을비커에넣고염산 10 ml를넣어약 5 분간끓이고방냉한다음분액깔대기에옮긴다. 구연산이암모늄용액 ( 10 W/V%, 납시험용 ) 10 ml와염산히드록실아민용액 ( 10 W/V% ) 2 ml및지시약으로티몰블루우 에틸알코올용액 ( 0.1 W/V% ) 2~3 방울을넣고암모니아수 ( 1+1 ) 를용액이청색을나타낼때까지넣는다. 다시암모니아수 ( 1+1 ) 5 ml와디티존 사염화탄소용액 ( 0.01 W/V% ) 10 ml를넣어약 2 분간세게흔들어섞고정치하여용매층 ( 아래층 ) 을다른분액깔때기에옮긴다. 수층에디티존 사염화탄소용액 ( 0.01 W/V% ) 5 ml씩을넣어사염화탄소층이변색되지않을때까지추출을반복하고용매층을앞의분액깔대기에합한다. 용매층에암모니아수 ( ) 20 ml를넣고흔들어섞어서씻어주고용매층을다른분액깔때기에옮긴다. 용매층에염산 ( 1+50 ) 10 ml를넣어약 2 분간세게흔들어역추출하고다시용매층에염산 ( 1+50 ) 5 ml씩을넣어같은방법으로 2 회역추출하여수층을 25 ml용량플라스크에합한다. 물을넣어표선을채우고시료요액으로한다. 이때사염화탄소층을분리하여구리, 니켈및코발트측정용시료용액으로사용할수도있다

41 7.4 피로리딘디티오카르바민산암모늄추출법 ( APDC-MIBK ) 이방법은시료중구리, 아연, 납, 카드뮴, 니켈, 철, 망간, 6가크롬, 코발트및은등의측정에적용된다. 다만망간은착화합물상태에서매우불안정하므로추출즉시측정하여야하며, 크롬은 6가크롬상태로존재할경우에만추출된다. 또한철의농도가높을경우에는다른금속의추출에방해를줄수있으므로주의해야한다. 시료 500 ml ( 또는산분해한시료일정량 ) 를분액깔때기에넣고지시약으로브롬페놀블루우에틸알코올용액 ( 0.1 W/V% ) 2~3 방울을넣어암모니아수 ( 1+1 ) 또는 ( ) 을청색이지속될때까지넣은다음염산 ( ) 을다시청색이보이지않을때까지한방울씩넣고추가로 2 ml를더넣는다 ( 이때 ph는 2.3~2.5이며지시약대신 ph 미터를사용할수도있다 ). 피로리딘디티오카르바민산암모늄용액 ( 2 W/V% ) 5 ml를넣어흔들어섞고메틸이소부틸케톤 10~20 ml를정확히넣어약 2 분간세게흔들어섞는다. 정치한다음메틸이소부틸케톤층을분리하여시료용액으로하고즉시원자흡광광도법에따라측정한다. 8. 마이크로파 ( microwave ) 에의한유기물분해 8.1 원리및적용범위 이방법은마이크로파영역에서극성분자나이온이쌍극자모멘트 ( dipole mement) 와이온전도 ( ionic conductance ) 를일으켜온도가상승하는원리를이용하여시료를가열하는방법이다. 산과함께시료를용기에넣어마이크로파를가하면강산에의해시료가산화되면서극성성분들의빠른진동과충돌에의하여시료의분자결합이절단되어시료가이온상태의수용액으로분해된다. 이방법은밀폐형용기에마이크로파의가열조작을통하여수중에서회수할수있는금속의정량적인회화방법이며하천수, 오수및산업폐수에적용할수있다. 이방법에서제품에따라다양한모델및사양으로상세한운전조작설명은제시하지않으며, 다만실험자는사용제품의제조사에서제공하는지시를따라야한다. 8.2 개요마이크로파는전자파에너지의일종으로서빛의속도 ( 약 300,000 km /sec ) 로이동하는교류와자기장 ( 또는파장 ) 으로구성되어있다. 마이크로파주파수는 300~300,000 MHz이다. 시료의분해에이용되는대부분의마이크로파장치는 12.2 cm파장의 2,450 MHz의마이크로파주파수를갖는다. 물질이마이크로파에너지를흡수하게되면온도가상승하며가열속도는가열되는물질의절연정도에좌우된다

42 절연정도는시료에가해진마이크로파에너지중시료에흡수되어열로전환되므로서잃어버리는마이크로파에너지를말한다. 마이크로파의투과거리는진공에서는무한하고물과같은흡수물질은물에녹아있는물질의성질에따라다르며금속과같은반사물질은투과하지않는다 용액에마이크로파가흡수되는원리 ⑴ 쌍극자회전물이나산과같은흡수분자의전기쌍극자는마이크로파전기장내에서회전운동하게되며이러한쌍극자의회전운동은주위분자와충돌을일으킨다. 주위분자들사이의충돌은운동에너지를증가시켜용액의온도를상승시키게된다. 쌍극자회전속도는용액의점도와밀접한관계가있으며용액이가열됨에따라점도는감소되어마이크로파의흡수속도에영향을미친다. ⑵ 이온전도무기산과같은용액은전류를전달할수있는이온을포함하고있다. 용액에녹아있는이온은마이크로파영역에서이동하게되는데이온의이동은주위분자와충돌하며운동에너지를증가시켜용액의온도를상승시킨다. 용액은이두원리에의해가열되며각원리의역할은이온농도와그들의전도도에의해달라질수있는데, 이온농도가낮은시료는쌍극자회전에의한에너지변화에의해직접가열에영향을준다. 마이크로파에너지는용액중의투과거리가길어표면뿐만아니라용액전체를고르게가열시킬수있다. 8.3 장치 장치의개요마이크로파를이용한유기물분해기의구조와마이크로파전달과정은그림 1과같다. 마그네트론에서발생된마이크로파가정해진경로를따라밀폐형용기에도달하면다양한모양의분산기가이마이크로파를각기다른방향으로분산시켜용기내에있는시료를가열시킨다

43 8.3.2 마이크로파발생장치불꽃방전을이용하면거의모든파장의마이크로파를발생시킬수있으나출력이약하고불안정하며보통의전자관은전자운동속도가비교적느려 1 주기의시간이극히짧은마이크로파발생에적당하지않다. 따라서마이크로파를발생시키려면특별한전자관, 클라이스트론, 마그네트론 ( magnetron ), 레이저등을쓰며전송에는주로입체회로를쓴다. 이중마그네트론이가장널리이용되는데마그네트론은양극과음극으로구성된원추형의이극진공관 ( diode ) 으로구성되어있으며그구조는그림 2와같다. 이장치는 575~1000 W의마이크로파의힘을제공할수있어야하며프로그램기능으로서 1 % 전력조정과 1 초의시간조정이될수있어야한다 오븐오븐내부는플루오르카본 ( fluorocarbon ) 등으로코팅되어내산성이어야하며, 실험자의보호를위하여오븐내부의공기를 2.8 m3 /min 이상으로환기시킬수있어야한다. 또한마이크로파의노출을방지하기위하여오븐이열려져있을때는마그네트론이작동되지않도록고안되어야한다 밀폐형용기시료의분해에사용되는밀폐형용기는 100~300 ml의크기로마이크로파를흡수하지않고통과하는재질이어야하며밀폐형으로반드시 200 의고온과적어도 760±70 kpa( psi ) 의압력을견딜수있어야한다. 이용기는공극이적고밀도가높은재질이어야하며마이크로파를흡수하지않는비극성재질로테프론 ( PFA, perfluoroalkoxy ) 재질이사용되며외장재나부품, 연결부위등은폴리에틸렌이주로이용된다. 또한고온, 고압에의한용기의파손을막기위해용기내에안전밸브나안전막등이반드시설치되어야한다. 모든시료분해용용기는산으로씻고다시순수로씻어내야한다

44 새로운테프론용기또는고농도에서저농도시료로바뀔때적어도각각 2 시간동안뜨거운염산용액 ( 1:1 ) 과질산용액 ( 1:1 ) 에넣어두어씻고순수로씻은후건조시켜사용한다. 오염이의심되는용기도이방법을사용한다 회전판마이크로파에의한시료분해용용기의균일한가열을위하여교체가능하고회전되는회전판이있어야하며회전속도는 3 rpm인것이좋다 위험성마이크로파를이용한유기물분해장치는제작사가제공하는운전요령과안전수칙에따라조작되어야한다. 또한설치장소는장비부식의원인이되지않도록산가스가있는흄후드내에직접설치하는것을피하여오븐내배기가스만을외부로방출할수있도록장치하여야한다. 8.4 조작 마이크로파힘점검 시료를점검하기전에기기의마이크로파힘을점검하여야한다. 가열되는시료가 1~6 개인경우에는마이크로파최고힘의 75 % 로사용하고, 7~12 개의경우에는 마이크로파를 100 % 로사용하며가열시간은 4 분으로설정한다. 실온 ( 19~25 ) 에서 2000 ml ± 2 ml정제수를 2 l 폴리에틸렌비커에넣고온도를 0.1 까지정확히 측정 ( Ti ) 한후비커를실험자가잘볼수있는위치인오븐의오른쪽앞에놓는다. 오븐의문을닫고각각의작동조건에서가열이끝난후비커를꺼내어온도분포를 균일하게하기위해잘저은다음온도를측정 ( Tf ) 하여다음식에따라발생되는 마이크로파힘을계산한다. 마이크로파힘, w = T 35 ( W / ) 여기서, T = T f - T i T f = 가열후정제수의온도 ( ) T i = 가열전정제수의온도 ( ) 35 = K Cp M t 여기서, K = 4.2( 열량을와트로바꾸는상수 ) C p = 1.0( 물의열용량, cal g -1-1 ) M = 물의질량 ( g ) t = 시간 ( sec )

45 8.4.2 방법깨끗한용기에잘혼합된시료 50.0 ml를옮긴다. 만약불꽃원자흡광광도계 ( flame atomic absorption spectrophotometer ), 유도결합플라즈마발광광도계 ( ICP ) 로분석할경우에는질산 3 ml, 염산 2 ml를가한다. 만약시료가흑연료원자흡광광도계 ( graphite furnace atomic absorption spectrophotometer ) 가이용될경우질산 5 ml를가한다. 용기에안전밸브와뚜껑을닫고렌치로조인후무게를 0.1 g까지달아기록하고회전판에놓는다. 이방법의최종산농도는약 9 % 정도가된다. 시료와동일한방법으로바탕시험을하며전체회전판의평형을맞추기위하여남은용기에도시료와동일하게정제수에시약을가하여용기가모든일정하게가열이되도록한다. 6 개에서 12 개의용기를사용하는경우에가열은 575 W에서 635 W의마이크로파힘을내는장치에대하여 50 분간 100 % 로설정하고, 635~700 W의장치는 30 분간 100 % 로한다. 이들조건은모든시료를 164±4 의최대온도로도달하기위한것이며, 용기를 1~6 개를사용할경우에는 575~635 W일때 30 분간 75 %, 635~700 W에는 25 분간 75 % 로설정한다. 이보다높은마이크로파힘을지닌장치는시료가열을조절하기위하여마이크로파힘을감소시켜조작하여야한다. 분해가완료되면용기를분리하여시료용액이실온이되도록냉각시키고시료를혼합시키기위해용기를잘흔들어섞고용기내에남아있는가스를제거한다. 냉각된용기의무게를잰다. 만일 0.5 g이상의무게손실이있다면뚜껑을닫은후흔들어섞는다. 분해된시료가고형물을함유한다면여과하거나, 10 분간 2000~3000 rpm으로원심분리하여여과또는하루밤정치시켜사용한다. 이때시료를닦거나희석하지않는다. 최종시료량은 55 ml이다비고1) 이방법은밀폐형용기를이용한마이크로파장치에의한방법에적용되는방법이다. 2) 기기의조작에있어제작사가제시하는마이크로파힘에따른프로그램이되어있을경우이를따를수있다

46 제 3 장기기분석법

47 제 3 장기기분석법 제 1 항흡광광도법 ( Absorptiometric Analysis ) 1. 원리및적용범위이시험방법은빛이시료용액중을통과할때흡수나산란등에의하여강도가변화하는것을이용하는것으로서시료물질의용액또는여기에적당한시약을넣어발색 ( 發色 ) 시킨용액의흡광도를측정하여시료중의목적성분을정량하는방법으로파장 200~900 nm에서의액체의흡광도를측정함으로써수중의각종오염물질분석에적용한다. 2. 개요흡광광도분석법은일반적으로광원 ( 光源 ) 으로나오는빛을단색화장치 ( Monochrometer ) 또는거름종이에의하여좁은파장범위의빛 ( 光束 ) 만을선택하여액층을통과시킨다음광전측광 ( 光電測光 ) 으로흡광도를측정하여목적성분의농도를정량하는방법이다. 강도 I o 되는단색광선이그림 1과같이농도 C, 길이 l되는용액층을통과하면이용액에빛이흡수되어입사광의강도가감소한다. 통과한직후의빛의강도 I t 와 I o 사이에는램버트 -비어( Lambert-Beer ) 의법칙에의하여다음의관계가성립된다. I t = I o 10 -εc1 I o : 입사광의강도 I t : 투사광의강도 C : 농도 l : 빛의투과거리 ε : 비례상수로서흡광계수 ( 吸光係數 ) 라하고, C = 1 mol, 1 = 10 mm일때의 ε 의 값을몰흡광계수라하며 K 로표시한다. I t 와 I o 의관계에서 I t I o = t 를투과도 ( 透過度 ), 이투과도를백분율로표시한것즉, t 100 = T 를투과퍼센트라하고투과도의역수 ( 逆數 ) 의상용대수즉 log l t = A 를 흡광도 ( 吸光度 ) 라한다. 램버트 - 비어의법칙은대조액층을통과한빛의강도를 I o, 측정하려고하는액층을통 과한빛의강도를 I t 로했을때도똑같은식이성립하기때문에정량이가능한것이다

48 대조액층 ( 對照液層 ) 으로는보통용매또는바탕시험액을사용하며이것을대조액이라한다,. 흡광도를이용한램버트-비어의법칙을식으로표시하면 A = εcl 이되므로농도를알고있는표준액에대하여흡광도를측정하고흡광계수 ( ε ) 를구해놓으면시료액에대해서도같은방법으로흡광도를측정함으로서정량을할수가있다. 그러나실제로는 ε를구하는대신에농도가다른몇가지표준액을사용하여시료액과똑같은방법으로조작하여얻은검량선으로부터시료중의목적성분을정량하는것이보통이다. 3. 장치 3.1 장치의개요일반적으로사용하는흡광광도분석장치는그림 2와같이광원부 ( 光源部 ), 파장선택부 ( 波長選擇部 ), 시료부 ( 試 e 部 ) 및측광부 ( 測光部 ) 로구성되고광원부에서측광부까지의광학계 ( 光學系 ) 에는측정목적에따라여러가지형식이있다. 광원부파장선택부시료부측광부 그림 2. 흡광광도분석장치 3.2 광원부광원부의광원에는텅스텐램프중수소방전관 ( 重水素放電管 ) 등을사용하며점등 ( 點燈 ) 을위하여전원부나렌즈와같은광학계 ( 光學系 ) 를부속시킨다. 가시부 ( 可視部 ) 와근적외부 ( 近赤外部 ) 의광원으로는주로텅스텐램프를사용하고자외부 ( 紫外部 ) 의광원으로는주로중수소방전관을사용한다. 또전원부에는광원의강도를안정시키기위한장치를사용할때도있다. 3.3 파장선택부파장의선택에는일반적으로단색화장치 ( Monochrometer ) 또는거름종이를사용한다. 단색화장치로는프리즘, 회절격자또는이두가지를조합시킨것을사용하며단색광을내기위하여슬릿 ( Slit ) 을부속시킨다. 거름종이에는색유리거름종이, 젤라틴거름종이, 간접거름종이등을사용한다

49 3.4 시료부시료부에는일반적으로시료액을넣은흡수셀 ( Cell, 시료셀 ) 과대조액을넣는흡수셀 ( 대조셀 ) 이있고이셀을보호하기위한지지대와이것을광로 ( 光 D ) 에올려놓을시료실 ( 試 e 室 ) 로구성된다. 3.5 측광부측광부의광전측광에는광전관 ( 光電管 ), 광전자증배관 ( 光電子增培管 ), 광전도셀또는광전지등을사용하고필요에따라증폭기 ( 增幅器 ) 대수변환기 ( 對數變煥器 ) 가있으며지시계 ( 指示計 ), 기록계등을사용한다. 또광전관, 광전자증배관을주로자외내지가시파장범위에서광전도셀을근적외 ( 近赤外 ) 파장범위에서, 광전자는주로가시파장범위에서의광전측광 ( 光電測光 ) 에사용된다. 지시계는투과율, 흡광도, 농도또는이를조합한눈금이있고숫자로표시되는것도있다. 기록계는투과율, 흡광도, 농도등을자동기록한다. 3.6 광전분광광도계파장선택부에단색화장치를사용한장치로구조에따라단광속형 ( 單光束型 ) 과복광속형 ( 復光束型 ) 이있고복광속형에는흡수스펙트럼을자동기록할수있는것도있다. 또광전분광광도계에는미분측광 ( 微 測光 ), 2파장측광 ( 二波長測光 ). 시차측광 ( 示差測光 ) 이가능한것도있다. 3.7 광전광도계 파장선택부에거름종이를사용한장치로단광속형이많고비교적구조가간단하여 작업분석용에적당하다. 3.8 흡수셀 ( 吸收 Cell ) 흡수셀은일반적으로그림 3과같이 4각형또는시험관형의것을사용한다. 그림 3⑵의 (a) 는액량 1 ml이하액층 ( 液層 ) 의길이 10 mm이상의것, (b) 는시료액을흘려보내면서그농도를측정할때, (C) 는휘발성시료액을넣었을때마개가있는것, (d) 는액층의길이가 50 mm이상으로저농도시료를측정할때사용하는특수용도용흡수셀의보기이다

50 흡수셀의재질로는유리, 석영, 플라스틱등을사용한다. 유리제는주로가시 ( 可視 ) 및근적외 ( 近赤外 ) 부판장범위, 석영제는자외부파장범위, 플라스틱제는근적외부파장 범위를측정할때사용한다. 3.9 장치의보정 파장눈금의교정 1 광전분광광도계에서는안정한휘선스펙트럼 ( Line Spectrum ) 을갖는적당한광원을사용하고그휘선을중심으로전후의좁은파장범위에서스펙트럼의강도를측정하여그림 4와같은그래프용지위에그눈금의값을기록하고양측의직선부분을연장하여그교차점으로부터파장 λm을구한다. 이파장 λm와진파장 ( 眞波長 ) λt와의차 Δλ가파장오차를표시하는것이므로단색화장치의파장조절기구를조절하여 Δλ가영 (Zero) 이되도록한다. 파장눈금의교정은일반적으로표 1에따른다

51 표 1. 파장눈금의교정 광원의종류사용하는휘선스펙트럼의파장 ( nm ) 수소방전관중수소방전관석영저압수은방전관 자동기록식광전분광광도계의파장교정은홀뮴 ( Holmium ) 유리의흡수스펙트럼을이용한다. 그림 5는 1 nm파장폭에서측정한홀뮴유리의흡수스펙트럼을표시한보기이다. 파장을교정할때주사속도 ( 走査涑度 ) 가너무크면흡수봉우리의파장이달라지는수가있으므로적당한속도로주사 ( 走査 ) 해야한다. 또홀뮴유리나간섭거름종이를사용하여파장을교정할때도파장폭이너무크면파장이달라지는수가있으므로주의해야한다 흡광도눈금의보정 110 에서 3 시간이상건조한중크롬산칼륨 ( 1급이상 ) 을 N/20 수산화칼륨용액에녹여중크롬산칼륨용액을만든다. 그농도는시약의순도를고려하여 K 2 Cr 2 O 7 으로서 g/l가되도록한다. 이용액의일부를신속하게 10.0 mm흡수셀에취하고 25 에서 1 nm이하의파장폭에서흡광도를측정한다. 이때각파장에있어서의흡광도및투과율은이상이없는한표 2의값을나타내야하며만일다른값을나타내면표 2에의하여흡광도눈금을보정한다

52 표 2. 중크롬산칼륨용액의흡광도와투과율 ( % ) ( 25 ) 파장 ( nm ) 흡광도 투과율 (%) 파장 ( nm ) 흡광도 투과율 (%) 미광 ( 迷光, Stray Light ) 의유무조사광원이나광전측광검출기에는한정된사용파장역 ( 限定使用波長域 ) 이있어표 3에표시한파장역에는미광 ( 迷光, Stray Light ) 의영향이크기때문에그림 6에표시한것과같은투과특성을갖는컷트거름종이를사용하며미광의유무를표시하는것이좋다. 표 3. 광원또는광전측광검출기의사용파장한계 파장역 ( nm ) 200~ ~ ~800 한계파장이생기는이유검출기또는수은방전관, 중수소방전관의단파장사용한계텅스텐램프의단파장사용한계광전자증배관의장파장사용한계

53 4. 측정 4.1 장치의설치장치는되도록다음과같은조건을구비한실내에설치한다. ⑴ 전원의전압및주파수의변동이적을것 ⑵ 직사일광을받지않을것 ⑶ 습도가높지않고온도변화가적을것 ⑷ 부식성가스나먼지가없을것 ⑸ 진동이없을것 4.2 흡수셀의준비흡수셀의준비는다음과같이한다. ⑴ 시료액의흡수파장이약 370 nm이상일때는석영또는경질유리흡수셀을사용하고약 370 nm이하일때는석영흡수셀을사용한다. ⑵ 따로흡수셀의길이 ( l ) 를지정하지않았을때는 10 mm셀을사용한다. ⑶ 시료셀에는시험용액을, 대조셀에는따로규정이없는한증류수를넣는다. 넣고자하는용액으로흡수셀을씻은다음적당량 ( 셀의약 8부까지 ) 을넣고외면이젖어있을때는깨끗이닦는다. 필요하면 ( 휘발성용매를사용할때와같은경우 ) 흡수셀에마개를하고흡수셀에방향성 ( 方向性 ) 이있을때는항상방향을일정하게하여사용한다. ⑷ 흡수셀은미리깨끗하게씻은것을사용한다. 흡수셀의세척방법은다음과같이한다. 탄산나트륨용액 ( 2 W/V% ) 에소량의음이온계면활성제 ( 보기 : 액상합성세제 ) 를가한용액에흡수셀을담가놓고필요하면 40~50 로약 10 분간가열한다. 흡수셀을꺼내물로씻은후질산 ( 1+5 ) 에소량의과산화수소를가한용액에약 30 분간담가놓았다가꺼내어물로잘씻는다. 깨끗한가제나흡수지위에거꾸로놓아물기를제거하고실리카겔을넣은건조용기중에서건조하여보존한다. 급히사용하고자할때는물기를제거한후에틸알코올로씻고다시에틸에텔로씻은다음드라이어 ( Dryer ) 로건조해도무방하다. 또빈번하게사용할때는물로잘씻은다음증류수를넣은용기에담가두어도무방하다

54 질산과과산화수소의혼합액대신에새로만든크롬산과황산혼합액에약 1 시간담근다음흡수셀을꺼내어물로충분히씻어내도무방하다. 그러나이방법은크롬의정량이나자외역 ( 紫外域 ) 측정을목적으로할때또는접착하여만든셀에는사용하지않는것이좋다. 또세척후의셀에는지문이묻지않도록주의하고빛이통과하는면에는손이직접닿지않도록해야한다. 4.3 측정준비흡광도의측정준비는다음과같이한다. ⑴ 측정파장에따라필요한광원과광전측광검출기를선정한다. ⑵ 전원을넣고잠시방치하여장치를안정시킨후감도와영점 ( Zero ) 을조절한다. ⑶ 단색화장치나거름종이를이용하여지정된측정파장을선택한다. 4.4 흡광도의측정흡광도의측정은원칙적으로다음과같은순서로한다. ⑴ 눈금판의지시가안정되어있나를확인한다. ⑵ 대조셀을광로 ( 光 D ) 에넣고광원으로부터의광속 ( 光速 ) 을차단하고영점을맞춘다. 영점을맞춘다는것은투과율눈금으로눈금판의지시가영이되도록맞추는것이다. ⑶ 광원으로부터광속을통하여눈금 100에맞춘다. ⑷ 시료셀을광로 ( 光 D ) 에넣고눈금판의지시치 ( 指示値 ) 를흡광도또는투과율로읽는다. 투과율로읽을때는나중에흡광도로환산해주어야한다. ⑸ 필요하면대조셀을광로에바꿔넣고영점과 100에변화가없는가를확인한다. ⑹ 위 ⑵, ⑶, ⑷의조작대신에농도를알고있는표준액계열을사용하며각각의눈금에맞추는방법도무방하다. 4.5 흡수곡선의측정 ( 吸收曲線의測定 ) 흡수곡선의측정은다음과같이한다. 필요한파장범위에대해서 10 nm마다의흡광도를측정하여횡축 ( 가로 ) 에파장을, 종축 ( 세로 ) 에흡광도를표시하고그래프용지에양자의관계곡선을작성하여흡수곡선을만든다. 이때흡수최대치 ( Peak ) 부근에서는파장간격을 1~5 nm까지좁게하여흡광도를측정하는것이좋다

55 또흡광도의변화가적은파장에서는파장간격을적당히넓게하여도상관없다. 이때흡광도대신에투과율을종축 ( 縱軸 ) 에표시해도된다. 또한흡수곡선을작성하는데는자기분광광전광도계 ( 自記 光光電光度計 ) 를사용하는것이편리하다. 그림 7은흡수곡선의보기를표시한것이다. 4.6 성적의정리 측정결과에는다음과같은사항을기록하여둔다. ⑴ 사용한장치의명칭과형식 ⑵ 광전분광광도계를사용했을때는측정파장, 슬릿의폭및밴드폭 ⑶ 광전광도계를사용했을때는거름종이의번호 ⑷ 흡수셀의재질모양, 셀의길이또는직경 ⑸ 대조액의성분 ⑹ 시험용액또는발색된액의성분 ⑺ 시험용액의액성 ⑻ 시약첨가에서부터흡광도측정까지의시간 ⑼ 측정시의시험용액온도 ⑽ 기타필요사항

56 5. 정량방법흡광광도분석방법으로정량분석을하려면이미흡광도와시료성분의농도와의비례성과같은시료에대한흡광도의재현성을검토하여야한다. 일반적으로정량분석에는검량선을미리작성해놓는방법을이용하며경우에따라서는 ε의값 ( 몰흡광계수 ) 을미리구해놓는방법도이용한다. 5.1 검량선의작성검량선은표준액의여러가지농도에대하여적당한대조액을사용하며흡광도를측정하고표준액의농도를횡축, 흡광도를종축에취하여그래프용지위에양자의관계선을구하여작성한다. 검량선은거의직선을나타내는범위내에서사용하는것이좋다. 시약이바뀌거나시험자가바뀔때에는검량선을다시작성하는것이좋다. 단, 투과율을측정하여흡광도로환산하지않고검량선을작성할때는편대수 ( 片對數 ) 그래프용지를사용하여대수축에투과율을취하여검량선을작성한다 표준액분석하려는성분의순물질 ( 純物質 ) 또는일정농도의표준액을단계적으로취하여규정된방법에따라표준액계열을만든다. 이때의표준액농도는시험용액중의분석하려는성분의추정농도와거의같은농도범위로한다 대조액 일반적으로용매를사용하며분석하려는성분이들어있지않은같은종류의시료를 사용하여규정된방법에따라조제한다. 5.2 정량조건의검토 흡광광도법으로정량분석을할때는다음과같은조건을검토하여결정하여야한다 발색반응의검토 ⑴ 발색한시험용액에대한흡수곡선과최대흡수파장 ⑵ 바탕시험액의흡수곡선과바탕시험치 ⑶ 액성의변화에따른흡광도의변화

57 ⑷ 최적 ph 범위와완충액의종류및첨가량 ⑸ 마스킹이필요할때는마스킹제의종류와첨가량 ⑹ 안정제, 산화방지제등의종류와첨가량 ⑺ 온도변화및방치시간에의한흡광도의변화 ⑻ 시약의농도첨가량첨가순서의영향 ⑼ 시료액중의피검성분의최적농도범위 ⑽ 시료액에대한빛 ( 光 ) 의영향 ⑾ 용매추출을할때는최적용매의선정 측정조건의검토 ⑴ 측정파장은원칙적으로최고의흡광도가얻어질수있는최대흡수파장을선정한다. 단, 방해성분의영향, 재현성및안정성등을고려하여차선 ( 善 ) 의측정파장또는거름종이를선정하는수도있다. ⑵ 대조액은용매, 바탕시험액기타적당한용액을선정한다. ⑶ 측정된흡광도는되도록 0.2~0.8 의범위에들도록시험용액의농도및흡수셀의길이를선정한다. ⑷ 부득이흡광도를 0.1 미만에서측정할때는눈금확대기를사용하는것이좋다. 5.3 정량조작정량조작은원칙적으로다음과같은순서로한다. ⑴ 피검액 ( 被檢液 ) 을메스플라스크같은용기에달아넣는다. ⑵ 발색시약, 산, 알칼리, 완충액, 마스킹제, 안정제등각각규정된순서에따라가한다. ⑶ 충분한발색이되도록필요하면가열또는방치한다. ⑷ 용매를가하여일정부피로희석한다. ⑸ 광도계의측정파장또는거름종이, 슬릿의폭, 흡수셀등을규정한방법에따라조절또는준비한다. ⑹ 발색액의일부를흡수셀에넣어 4.4의순서에따라흡광도를측정한다. ⑺ 측정한흡광도를 5.1의요령에따라작성한검량선과비교하여목적하는성분의농도를구한다. 비고 : 시료중의목적성분농도가낮을때는발색액에잘녹지않는피검성분을다시잘녹는용매로추출하여흡광도를측정하고농도를구해도무방하다

58 제 2 항원자흡광광도법 ( Automic Absorption Spectrophotometry ) 1. 원리및적용범위 이시험방법은시료를적당한방법으로해리 ( 解離 ) 시켜중성원자로증기화하여생긴바닥상태 ( Ground State ) 의원자가이원자증기층을투과하는특유파장의빛을흡수하는현상을이용하여광전측광 ( 光電測光 ) 과같은개개의특유파장에대한흡광도를측정하여시료중의원소 ( 元素 ) 농도를정량하는방법으로시료중의유해중금속및기타원소의분석에적용한다. 2. 용어 ( 用語 ) ⑴ 역화 ( Flame Back ) : 불꽃의연소속도가크고혼합기체의분출속도가작을때연소현상이내부로옮겨지는것 ⑵ 원자흡광도 ( Atomic Absorptivity or Atomic Extinction Coefficient ) 어떤진동수 i의빛이목적원자가들어있지않는불꽃을투과했을때의강도를 I o ν, 목적원자가들어있는불꽃을투과했을때의강도를 Iν 라하고불꽃중의목적원자농도를 c, 불꽃중의광도의길이 ( Path Length ) 를 l 이라했을때 E AA = log 10 I O ν /I ν c l 로표시되는양을말한다. ⑶ 원자흡광 ( 분광 ) 분석 [ Atomic Absorption( Spectrochemical Analysis ) ] 원자흡광측정에의하여하는화학분석 ⑷ 원자흡광 ( 분광 )[ Atomic Absorption( Spectro ) Photometry ] 원자흡광스펙트럼을이용하여시료중의특정원소의농도와그휘선 ( 輝線 ) 의흡광정도 ( 보통은보정되지않은흡광도로나타냄 ) 와의상관관계를측정하는것 ⑸ 원자흡광스펙트럼 ( Atomic Absorption Spectrum ) 물질의원자증기층을빛이통과할때각각특유한파장의빛을흡수한다. 이빛 ( 光束 ) 을분산하여얻어지는스펙트럼을말한다. ⑹ 공명선 ( Resonance Line ) : 원자가외부로부터빛을흡수했다가다시먼저상태로돌아갈때 ( 遷移 ) 방사하는스펙트럼선 ⑺ 근접선 ( Neighbouring Line ) : 목적하는스펙트럼에가까운파장을갖는다른스펙트럼선

59 ⑻ 중공음극램프 ( Hollow Cathode Lamp ) 원자흡광분석의광원 ( 光源 ) 이되는것으로목적원소를함유하는중공음극한개또는그이상을저압의네온과함께채운방전관 ( 放電管 ) ⑼ 다음극중공음극램프 ( Multi-Cathode Hollow Cathode Lamp ) 두개이상의중공음극을갖는중공음극램프 ⑽ 다원소중공음극램프 ( Multi-Element Hollow Cathode Lamp ) 한개의중공음극에두종류이상의목적원소를함유하는중공음극램프 ⑾ 충전가스 ( Filler Gas ) : 중공음극램프에채우는가스 ⑿ 소연료불꽃 ( Fuel-Lean Flame ) : 가연성가스와조연성 ( 助燃性 ) 가스의비를적게한불꽃즉가연성가스 / 조연성가스의값을적게한불꽃 ⒀ 다연료불꽃 ( Fuel-Rich Flame ) : 가연성가스 / 조연성가스의값을크게한불꽃 ⒁ 분무기 ( Nebulizer Atomizer ) : 시료를미세한입자로만들어주기위하여분무하는장치 ⒂ 분무실 ( Nebulizer-Chamber, Atomizer-Chamber ) : 분무기와병용 ( 倂用 ) 하여분무된시료용액의미립자를더욱미세하게해주는한편큰입자와분리시키는작용을갖는장치 ⒃ 슬롯버너 ( Slot Burner, Fish Tail Burner ) : 가스의분출구가세극상 ( 細隙狀 ) 으로된버너 ⒄ 전체분무버너 ( Total Consumption Burner, Atomizer Burner ) : 시료용액을빨아올려미립자로되게하여직접불꽃중으로분무하여원자증기화하는방식의버너 ⒅ 예혼합버너 ( Premix Type Burner ) : 가연성가스, 조연성가스및시료를분무실에서혼합시켜불꽃중에넣어주는방식의버너 ⒆ 선폭 ( Line Width ) : 스펙트럼선의폭 ⒇ 선프로파일 ( Line Profile ) : 파장에대한스펙트럼선의강도를나타내는곡선 (21) 멀티패스 ( Multi-Path ) : 불꽃에서의광로 ( 光 D ) 를길게하고흡수를증대시키기위하여반사를이용하여불꽃중에빛 ( 光束 ) 을여러번투과시키는것 3. 개요원자증기화하여생긴바닥상태의원자가그원자증기층을투과하는특유파장의빛을흡수하는성질을이용한것으로원자에의한빛의흡수정도와원자증기밀도와의사이에는다음과같은관계가있다

60 즉진동수 ν 강도 I o 되는광원으로부터반사되는길이 l( cm ) 의원자증기층은투과할때 그원자에의하여흡수되어빛의강도가 Iν 가되었다고하면 Iν = I o ν exp -kν l ⑴ 이된다. 여기서 갖는다. Kν 는비례정수로진동수 ν 에서의흡수율이라부르고 ν 에따라다른값을 또 Kν 에관한적분흡수율 Kνdν의값은다음식으로표시된다. 2 π e Kν dν = mc e : 전자의전기량 m : 전자의질량 c : 광속도 Nν f ⑵ Nν : ν ~ ν+dν 의범위에서흡수에관계하는 1 cm2당의원자수즉원자의밀도 f : 진동자강도 ( 振動子强度 ) ⑵ 식으로부터적분흡수율은바닥상태의원자수 Nν( 원자밀도 ) 에비례한다는것을 알수있다. 시료의원자화수단으로일반적으로사용되는불꽃중에서의원자밀도를 N 이라하면 ⑵ 식은 2 π e Kν dν = mc 적분흡수율과원자밀도 N 은비례한다. Nν f ⑶이되고 원자흡광분석에는광원으로원자흡광스펙트럼보다는선폭이좁은휘선스펙트럼을사용 하여적분흡수율을구하는대신원자흡광스펙트럼선의중앙에서의흡수율 Kmax 를 측정하여 N 을구하는것이보통이다. 시료중의목적원소농도 C 와원자증기밀도 N 과는분석조건만일정하면비례관계가 성립하기때문에 N 을알면시료중의목적원소농도 C 를결정할수있다. 원자흡광광도법에서측정되는흡수의정도는일반적으로흡광도또는투과율 ( % ) 로 표시하고각각 ⑷⑸ 의식으로정의된다. 흡광도 A = log 10 ( I o ν / Iν ) ⑷ 투과율 T( % ) = ( Iν / I o ν ) 100 ⑸ 또 ⑴ 식을흡광도로표시하면 A = Kνl ⑹ 이되므로적분흡수율을측정하는대신에 Kmax 를측정할때는 A = Kmaxl ⑺

61 따라서흡광도 A 를측정함으로써 Kmax 를구할수있게된다. Kmax 를시료중의목적원자농도 C 로나눈값은원자흡광율 E ΑΑ 에대응하고 (7) 식은 A = E ΑΑ Cl ⑻로표시할수있다. 원자흡광율은목적원자마다고유한정수 ( 定數 ) 로나타나므로 l이결정되어있을때는 A 를측정하여 C 를구할수가있다. 분석조작으로서는미리농도를알고있는표준시료용액에대하여측정하고농도대흡광도의그래프즉, 검량선을작성하여놓는다. 다음에미지농도의시료에대하여흡광도를측정하고검량선과비교하여농도를구한다. 4. 장치 4.1 장치의개요원자흡광분석장치는일반적으로그림 1과같이광원부, 시료원자화부, 파장선택부 ( 분광부 ) 및측광부로구성되어있고단광속형 ( 單光束型 ) 과복광속형 ( 複光束型 ) 이있다. 또여러개원소의동시분석이나내표준법에의한분석을목적으로할때는그림 2와같이위의구성요소를여러개복합한멀티채널형 ( Multi-Channel 型 ) 의장치도있다

62 4.2 광원부 광원램프 ⑴ 중공음극램프 : 원자흡광분석용광원은원자흡광스펙트럼선의선폭보다좁은선폭을갖고휘도가높은 ( 高輝度 ) 스펙트럼을방사하는중공음극램프가많이사용된다. 중공음극램프는양극 (+) 과중공원통상 ( 中空圓筒狀 ) 의음극 (-) 을저압의회유가스원소와함께유리또는석영제의창판 ( 窓板 ) 을갖는유리관중에봉입 ( 封入 ) 한것으로음극은분석하려고하는목적의단일원소목적원소를함유하는합금또는소결합금 ( 燒結合金 ) 으로만들어져있다 ( 그림 3 참조 ). ⑵ 기타램프 : 나트륨 ( Na ), 칼륨 ( K ), 칼슘 ( Ca ), 루비듐 ( Rb ), 세슘 ( Cs ), 카드뮴 ( Cd ), 수은 ( Hg ), 탈륨 ( Tl ) 과같이비점 ( 沸點 ) 이낮은원소에서는열음극 ( 熱陰極 ) 이나방전램프를사용할수도있다. 또금속의할로겐화물을봉입하여고주파방전에의하여점등하는방식의방전램프를사용할수도있다 램프점등장치 중공음극램프를동작시키는방식에는직류점등방식과교류점등방식이있다. 직류점등방식에서는광원램프와시료의원자화부와의사이에빛의단속기 ( 光斷續器 ) 를넣어빛을변조시키고측광부에서는변조된교류신호만을검출증폭하여불꽃자신이나시료의발광등에의한영향을제거하도록하는것이보통이다. 교류점등방식은광원의빛자체가변조되어있기때문에빛의단속기 ( Chopper ) 는필요하지않다. 직류또는교류점등방식모두광원램프의점등장치로서는아래와같은조건을구비하여야한다. ⑴ 전원회로는전류또는전압이일정한것이어야한다. ⑵ 램프의전류값을정밀하게조정할수있는것이어야한다. ⑶ 램프의수에따라필요한만큼의예비점등회로를갖는것이어야한다. 4.3 시료원자화부 시료원자화부는시료를원자증기화하기위한시료원자화장치와원자증기중에빛을 투과시키기위한광학계로되어있다

63 4.3.1 시료원자화장치 시료를원자화하는장치는불꽃원자화장치와비불꽃원자화장치로대별할수있는데일반적인수단은용액상태로만든시료를불꽃중에분무하는불꽃원자화방법이며플라스마젯트 ( Plasma Jet ) 불꽃또는방전 ( Spark ) 을이용하는수도있다. 또고체시료를흑연도가니중에넣어서증발시키거나음극스퍼터 ( Sputtering ) 에의하여원자화시키는방법도있다. 휘발성이강한성분 ( Hg, As, Se등 ) 의측정에는환원기화법이많이사용된다. ⑴ 버너 : 버너에는크게나누어시료용액을직접불꽃중으로분무하여원자화하는전분무 ( 全噴霧 ) 버너와시료용액을일단분무실내에불어넣고미세한입자만을불꽃중에보내는예혼합 ( 豫合混 ) 버너가있다. 전분무버너는그림 4와같은구조를갖는것으로가연가스와조연가스가버너선단부에서혼합되어불꽃을형성하고이때빨아올린시료용액은모두이불꽃속으로들어가게된다. 예혼합버너는그림 5와같이분무기분무실및버너머리 ( Burner Head ) 로구성되고가연성가스에의하여분무된시료나가연성가스가미리분무실안에서혼합되어버너머리로보내지도록되어있다. 버너의선단부에는얇은판막모양 ( Laminar 形 ) 의안정된불꽃을만들기위하여그림5와같이가늘고긴간극 ( 細隙 ) 이있기때문에슬롯버너 ( Slot Burner ) 라고도불리워진다. 버너선단부에있는세극모양은사용하는가연성가스와조연성가스의종류에따라다르다. 또분무실은그림 5와같은것이외에그림 6과같은가열형분무실도사용된다

64 ⑵ 불꽃 : 원자흡광분석에사용되는불꽃을만들기위한조연성가스와가연성가스의조합은수소-공기, 수소-공기-알곤, 수소-산소, 아세틸렌-공기, 아세틸렌-산소, 아세틸렌-아산화질소, 프로판-공기, 석탄가스-공기등이있다. 이들가운데수소-공기, 아세틸렌-공기, 아세틸렌-아산화질소및프로판 -공기가가장널리이용된다. 이중에서도수소-공기와아세틸렌-공기는거의대부분의원소분석에유효하게사용되며수소-공기는원자외영역 ( 遠紫外領域 ) 에서의불꽃자체에의한흡수가적기때문에이파장영역 ( 波長領域 ) 에서분석선을갖는원소의분석에적당하다. 아세틸렌-아산화질소불꽃은불꽃의온도가높기때문에불꽃중에서해리 ( 解籬 ) 하기어려운내화성산화물 ( 耐火性酸化物, Refractory Oxide ) 을만들기쉬운원소의분석에적당하다. 프로판-공기불꽃은불꽃온도가낮고일부원소에대하여높은감도를나타낸다. 어떠한종류의불꽃이라도가연성가스와조연성가스의혼합비는감도에크게영향을주며최적혼합비는원소에따라다르다. 또불꽃중에서의원자증기의밀도분포는원소의종류와불꽃의성질에따라

65 다르다. 따라서광원에서나오는빛을불꽃의어느부분에통과시키느냐에따라감도가달라지기때문에분석온도나분석조건에따라서불꽃중의가장적당한곳에빛이통과하도록버너의위치를조절해줄필요가있다. ⑶ 기체유량조절기 : 가연성가스및조연성가스의압력과유량을조절하여적당한혼합비로안정한불꽃을만들어주기위하여사용된다 광학계 원자흡광분석에서는분석의감도를높여주고안정한측정값을얻기위하여불꽃중에빛을투과시킬때다음의조건을만족시킬수있어야한다. ⑴ 빛이투과하는불꽃중에서의유효길이를되도록길게한다. ⑵ 불꽃으로부터빛 ( 光束 ) 이벗어나지않도록한다. 가늘고긴세극을갖는슬롯버너를사용할때는빛이투과하는불꽃의길이를 10 cm정도까지길게할수는있지만유효불꽃길이를그이상으로해주려면적당한광학계를이용하여빛을불꽃중에반복하여투과시키는멀티패스 ( Multi Path ) 방식을사용한다. 그림7은그광학계의보기를나타낸것이다. 멀티패스방식의광학계에서는되도록불꽃중의동일한부분에빛을집중적으로투과시켜주고목적원소나시료농도에따라빛의투과횟수를바꿔주는것이좋다

66 4.4 분광기 ( 파장선택부 ) 분광기 ( 파장선택부 ) 는광원램프에서방사되는휘선스펙트럼가운데서필요한분석선만을골라내기위하여사용되는데일반적으로회절격자 ( 回折格子 ) 나프리즘 ( Prism ) 을이용한분광기가사용된다 분광기분광기로서는광원램프에서방사되는휘선스펙트럼중필요한분석선만을다른근접선이나바탕 ( Background ) 으로부터분리해내기에충분한분해능 ( 解能 ) 을갖는것이어야한다. 또한동시에양호한 SN 비로광전측광을할수있는밝기를가질것이요망된다. 근접선이나바탕의상태는사용하는광원램프에따라다르기때문에목적원소에따라슬릿 ( Slit ) 의폭을바꾸어목적하는분석선만을선택해내야할필요가있다. 이때슬릿의폭은목적하는분석선을분리해낼수있는범위내에서는되도록넓게하는것이좋다 거름종이 알칼리나알칼리토류원소와같이광원의스펙트럼분포가단순한것에서는분광기 대신간섭거름종이를사용하는수가있다 기타분광장치광원부에연속광원을사용할때는매우높은분해능을갖는분광기가필요하기때문에에탈론 ( Ethalon ) 간섭분광기가사용된다. 또특수한분광장치로공명발광 ( 共鳴發光 ) 의원리를응용한공명단색계 ( Resonance Monochrometer ) 가있다. 4.5 측광부측광부는원자화된시료에의하여흡수된빛의흡수강도를측정하는것으로서검출기, 증폭기및지시계기로구성된다. 검출기로부터의출력전류를측정하는방식에서직류방식과교류방식이있다. 직류방식은광원을직류로동작시키는경우에사용되며교류방식은광원을교류로동작시키는경우나광원을직류로동작시키고광단속기 ( 光斷續器, Chopper ) 로단속시키는경우에이용된다

67 4.5.1 검출기사용하는분석선의파장에따라적당한분광감도특성을갖는검출기가사용된다. 원자외영역 ( 遠赤外領域 ) 에서부터근적외영역 ( 近赤外領域 ) 에걸쳐서는광전자증배관을가장널리사용한다. 이밖에광전관광전도셀 ( 光電導 Cell ) 광전지 ( 光電池 ) 등도이용된다 증폭기직류방식일때는검출기에서나오는출력신호를직류증폭기에서증폭하고교류방식일때는교류증폭기에서증폭한후정류 ( 整流 ) 하여지시계기로보낸다. 교류방식에서는불꽃의빛이나시료의발광등의영향이적다 지시계기지시계기는증폭기에서나오는신호를흡광도흡광률 ( % ) 또는투과율 ( % ) 등으로눈금을읽기위한것으로주로직독식미터, 보상식포텐쇼미터 ( 補償式 Potentio meter), 기록계디지털표시기 ( Digital 表示器 ) 등이사용된다. 이때대수변화기나눈금확대기등이사용되고측광정밀도를높이기위하여적분장치가사용되기도한다. 4.6 시료및기타재료 표준시료순도가높은표준용시약을정확히달아목적원소의농도를단계적으로나타나도록용해희석하여여러개의표준용액을만든다. 시약은적어도 1 급이상의것을사용하며특히풍화, 조해, 화학변화등에의한농도의변화가없는것이어야한다. 이때필요하면재결정, 승화, 재침전등의수단에의하여불순물을제거또는정제한다. 용매로서의물이나유기화합물은 에표시한방법에따라정제한것을사용하고바탕시험치 ( 空試驗値 ) 는되도록적은값이되도록한다. 표준시료용액은분석시료용액과물리적화학적성질이되도록비슷하고특히공존물질의조성이나존재량이같도록조제하여간섭을피하도록한다 분석시료 고체나고체와비슷한상태의시료는물에녹여희석한다음에분석하는것을원칙 으로한다

68 물에녹지않는시료는적당한산알카리또는유기용매등을사용하여녹이든가알칼리용융 ( 溶融 ) 이나불화수소산처리, 강산화제에의한분해, 가열회화 ( 加熱灰化 ) 또는기타방법에의하여가용성으로한다음이것을물로추출한다. 어떠한경우에도여기서얻어진불용성물질은다시적당한방법에의하여따로재용해 ( 再溶解 ) 시킨다. 액체시료는직접물로희석하여분석하는일이많으나유지성 ( 油脂性 ) 시료같은물질은유기용매를사용하여용해희석한다. 이때필요하면여과원심분리또는고체시료에서와같은화학적처리를해야될경우도있다. 시료용액은일반적으로불필요하게농도를높게하는것보다오히려묽은용액의상태로하는것이측정정밀도가높은분석결과를얻을수있다. 시료용액중에있는다량또는어떤특정한공존물질로인하여미량의목적원소분석이간섭받을경우에는표준시료용액에동일공존물질을등량첨가 ( 等量添加 ) 하여분석하는방법, 특수한유기시약이나유기용매로목적원소만을추출하여분석하는방법, 일정한시약을첨가하여간섭을억제하는방법등을이용한다. 조제한시료용액은장시간방치하면가수분해산화환원등의화학변화가일어나는수가있다. 특히용기에뚜껑이없이공기중에노출되는경우에는먼지등에의한오염이나용매의증발에의한농도변화가일어나기쉬우므로조제후에는되도록신속하게분석해야한다 순수한물과유기용매시료의용액희석또는먼저행한분석시료에의한오염을세척제거하기위해서는아주순수한물이필요하다. 이목적에적합한물로서는일반적으로양, 음 ( 陽, 陰 ) 이온교환수지층을통과시켜얻은탈염수 ( 脫鹽水 ) 나재증류수를사용한다. 그러나이온교환수지로서는용존하는콜로이드 ( Colloid ) 성물질이나용존가스등을제거할수없기때문에증류와이온교환처리를병용 ( 倂用 ) 하는것이좋다. 용존하는가스는증류해도완전히제거되지는않지만실험실에서문제되는가스는수도물중의염소이외에 CO 2, SO 2 또는그밖에예상할수있는가스가대부분이기때문에적당한제거조작으로제거할수가있다. 유기용매는일반적으로증류에의하여정제할수가없지만경우에따라서는다른시약을첨가하여증류하든가분액깔때기를사용하여씻어낸다음증류하는방법을쓴다

69 4.6.4 가연성가스와조연성가스가연성가스로는순도가높은것을사용한다. 조연성가스로서의공기는일반적으로공기압축기에의하여공급되는것이보통이고먼지는충분히제거한다. 5. 조작법 5.1 시료의조제 앞의 의방법을참고하여각각분석시료에적당한방법으로시료를처리하여 시료용액을만든다. 5.2 측정조건의결정 버너및불꽃의선택 분석시료및목적원소에가장적당한버너의불꽃을선택한다 분석선의선택 감도가가장높은스펙트럼선을분석선으로하는것이일반적이지만시료농도가 높을때에는비교적감도가낮은스펙트럼선을선택하는경우도있다 램프전류값의설정일반적으로광원램프의전류값이높으면램프의감도가떨어지고수명을감수하므로광원램프는장치의성능이허락하는범위내에서되도록낮은전류값에서동작시킨다 분광기슬릿 ( Slit ) 폭의설정 양호한 SN 비를얻기위하여분광기의슬릿폭은목적으로하는분석선을분리할 수있는범위내에서되도록넓게한다.( 이웃의스펙트럼선과겹치지않는범위내에서 ) 가연성가스및조연성가스의유량과압력조정 시료의성질목적원소의감도, 안정성등을고려하여가연성가스및조연성가스의 유량과압력을가장적당한값으로설정한다

70 5.2.6 불꽃중을투과하는광속 ( 光束 ) 의위치결정불꽃중에서의시료의원자밀도분포와원소불꽃의상태등에따라다르므로불꽃의최적위치에서빛 ( 光束 ) 이투과하도록버너의위치를조절한다. 비고 : 측정조건을결정할때는장치에관한다음과같은특성을알고사용하여야한다. 1. 측정가능한파장범위 2. 분광기의슬릿폭과인접선과의관계 3. 광원램프의휘선스펙트럼의프로필과그흡광감도 4. 광원램프의특성 5. 불꽃의성질과버너의특성 6. 각원소에대한장치의흡광감도 7. 검출기의분광감도특성 6. 측정순서 ⑴ 전원스위치및관련스위치를넣어측광부에전류를통한다. ⑵ 광원램프를점등하여적당한전류값으로설정한다. 다수의광원램프를동시에사용할경우에는미리예비점등시켜두면편리하다. ⑶ 가연성가스및조연성가스용기가각각기체유량조정기를통하여버너에파이프로연결되어있는가를확인한다. ⑷ 기체유량조절기의밸브를열어불꽃을점화하여유량조절밸브로가연성가스와조연성가스의유량을조절한다. ⑸ 분광기의파장눈금을분석선의파장에맞춘다. ⑹ 0 을맞춘다 ( 이때광원으로부터광속 ( 光束 ) 을차단하고용매를불꽃중에분무시킨다 ). 0 을맞춘다는것은투과백분율눈금으로지시계기의가르킴을 0 % 에맞추는것이다. (7) 100 을맞춘다 ( 이때광원으로부터의광속은차단을푼다 ). 100을맞춘다는것은투과백분율눈금으로지시계기의가르킴을 100 % 에맞추는것이다. (8) 시료용액을불꽃중에분무시켜지시한값을읽어둔다. 지시한값이투과백분율만으로표시되는경우에는보통흡광도로환산한다. 비고 : ⑹, (7), (8) 에나타낸바와같이 0 이나 100 을맞추는조작을행하지않고표준용액영역에지시된값에대응하는적당한눈금을맞추는방법도있다

71 7. 검량선의작성과정량법 ⑴ 검량선의직선영역원자흡광분석에있어서의검량선은일반적으로저농도영역에서는양호한직선성을나타내지만고농도영역에서는여러가지원인에의하여휘어진다. 따라서정량을행하는경우에는직선성이좋은농도또는흡광도의영역을사용하지않으면안된다. ⑵ 검량선법검량선은적어도 3 종류이상의농도의표준시료용액에대하여흡광도를측정하여표준물질의농도를가로대에, 흡광도를세로대에취하여그래프를그려서작성한다. 그림 8(a) 에따라서분석시료에대하여흡광도를측정하고검량선의직선영역에의하여목적성분의농도를구한다. 이방법은분석시료의조성과표준시료와의조성이일치하거나유사하여야한다. 조성이다른경우에는조성의차로인한분석오차가분석정밀도에대하여무시될수있는가를확인해둘필요가있다. ⑶ 표준첨가법같은양의분석시료를여러개취하고여기에표준물질이각각다른농도로함유되도록표준용액을첨가하여용액열을만든다. 이어각각의용액에대한흡광도를측정하여가로대에용액영역중의표준물질농도를, 세로대에는흡광도를취하여그래프용지에그려검량선을작성한다. 그림 8(b) 에있어서목적성분의농도는검량선이가로대와교차하는점으로부터첨가표준물질의농도가 0 인점까지의거리로써구한다. 이방법이유효한범위는 7⑵ 를쓴경우에검량선이저농도영역까지양호한직선성을가지며또한원점을통하는경우에만한하고그이외에는분석오차를일으킨다. ⑷ 내부표준법이방법은분석시료중에다량으로함유된공존원소또는새로분석시료중에가한내부표준원소 ( 목적원소와물리적화학적성질이아주유사한것이어야한다 ) 와목적원소와의흡광도비를구하는동시, 측정을행한다. 목적원소에의한흡광도 A s 와표준원소에의한흡광도 A R 와의비를구하고 A s / A R 값과표준물질농도와의관계를그래프에작성하여검량선을만든다. 그림 8(c) 이방법은측정치가흩어져상쇄하기쉬우므로분석값의재현성이높아지고정밀도가향상된다

72 그림 8. 각종정량법에의한검량선 주 : 상기검량선의세로대는흡광도에비례한지시계의눈금이라도좋다. 8. 시료농도의산출 7 에의한검량선에의하여얻어진목적성분농도로부터 W/W%, W/V%, ppm 등의 단위에의하여시료농도를산출한다. 9. 간섭 원자흡광분석에서일어나는간섭은일반적으로분광학적간섭, 물리적간섭, 화학적 간섭으로나뉘어진다. 9.1 분광학적간섭 이종류의간섭은장치나불꽃의성질에기인하는것으로서다음과같은경우에일어난다. ⑴ 분석에사용하는스펙트럼선이다른인접선과완전히분리되지않은경우 ⑵ 분석에사용하는스펙트럼선의불꽃중에서생성되는목적원소의원자증기이외의물질에의하여흡수되는경우 ⑴의경우에는파장선택부의분해능이충분하지않기때문에일어나며검량선의직선영역이좁고구부러져있어분석감도와정밀도도저하된다. 이때는다른분석선을사용하여재분석하는것이좋다. ⑵의경우에는표준시료와분석시료의조성을더욱비슷하게하면간섭의영향을어느정도까지피할수있다

73 9.2 물리적간섭 시료용액의점성이나표면장력등물리적조건의영향에의하여일어나는것으로보기를들면시료용액의점도가높아지면분무능률이저하하며흡광의강도가저하된다. 이러한종류의간섭은표준시료와분석시료와의조성을거의같게하여피할수있다. 9.3 화학적간섭 이종류의간섭은원소나시료에특유한것으로다음과같은경우에일어난다. ⑴ 불꽃중에서원자가이온화하는경우 ⑵ 공존물질과작용하여해리하기어려운화합물이생성되어흡광에관계하는바닥상태 ( 基底狀態 ) 의원자수가감소하는경우 ⑴은이온화전압이낮은알칼리및알칼리토류금속원소의경우에많고특히고온불꽃을사용한경우에두드러진다. 이경우에는이온화전압이더낮은원소등을첨가하여목적원소의이온화를방지하여간섭을피할수있다. ⑵는공존하는물질이음이온의경우와양이온의경우가있으나일반적으로음이온쪽이영향이크다. 이들의간섭을피하는데는 1 이온교환이나용매추출등에의한방해물질의제거 2 과량의간섭원소의첨가 3 간섭을피하는양이온 ( 보기 : 란타늄, 스트론튬, 알칼리원소등 ) 음이온또는은폐제, 킬레이트제등의첨가 4 목적원소의용매추출 5 표준첨가법의이용등의방법이취해진다. 10. 용매 원자흡광분석은사용하는용매에따라감도가변하는경우가있다. 예를들면강한산성또는강한알칼리성용액의경우 ( 특히강한알칼리성용액의경우에현저하다 ) 용액의점성이증가하거나기타에의하여흡광도가떨어진다. 또특정의음이온 ( PO 3-4, SO 2-4 등 ) 을함유하는용매는목적원소와 에언급된간섭을일으켜흡광도를떨어뜨리는일이많다. 시료용액에유기용매를가하면흡광도가높아지는경우가있으며특히유기용매로써목적원소를킬레이트로추출하면미량원소의정량및간섭물질의제거에유효하다. 그러나이경우불꽃이불안정하게되거나불꽃자체에의한흡광이증대되지않는용매를선택할필요가있다

74 11. 주의사항 11.1 장치의설치 ⑴ 온도습도및직사일광 : 고온또는극단의저온, 급격한온도변화, 습기가많은장소및직사일광이쪼이는장소를피한다. ⑵ 먼지 : 가능한한먼지가적은장소를택한다. 실험실내에서는실내화를착용하는것이좋다. ⑶ 진동 : 가능한한진동이적은장소이어야한다. ⑷ 환기 : 통풍이잘되는장소가좋고불꽃연소부의상방에후드등의배기설비를갖추어야한다 고압가스의취급고압가스의취급은고압가스취급법에의거하여충분히주의하여행하고고압가스통을사용하는경우에는규격에맞는검사필의것을사용한다. 가스는완전히빌때까지사용하지않도록주의하지않으면안된다. 이것은아세틸렌이나프로판통이거의비었을때가스의조성이변화하기때문인데일반적으로제조원에서가스를다시충전시킬때사고가일어날위험을막기위한것이다. 가스통은가능한한옥외에설치하고가스는배관을통하여장치에도입되도록하는것이좋다. 아세틸렌을사용할경우에는구리또는구리합금의관을사용하여서는안된다 불꽃의취급불꽃의점화및소화시에는특히주의하여야한다. 아세틸렌을사용하는경우특히아세틸렌-아산화질소불꽃을사용하는경우에는역화와폭발을특별히주의하여야한다. 또아산화질소용감압밸브는동결방지형의것을사용한다. 만일의경우에대비하여소화기나소화용모래를준비해두어야한다. 12. 분석결과의정리및검토 12.1 분석결과의정리측정결과에는다음의제사항을기재하여야한다. ⑴ 장치의명칭과형식 ⑵ 분석선의파장

75 ⑶ 분광기의경우는슬릿폭 ⑷ 거름종이의경우는거름종이번호또는특성파장 ⑸ 광원램프의종류및전류치 ⑹ 버너의종류 ⑺ 가연성가스와조연성가스의종류 ⑻ 가연성가스및조연성가스의유량과압력 ⑼ 멀티패스광학계의경우는빛의투과회수 ⑽ 시료용액의조성 ⑾ 시료용액의산또는알칼리농도 ( 또는 ph 값 ) ⑿ 용매 ⒀ 시료의처리방법 ⒁ 기타필요사항 12.2 분석오차의원인 분석의오차는일반적으로다음의요인에의하여생기는경우가많으므로미리충분히검토하여야한다. ⑴ 표준시료의선택의부적당및조제의잘못 ⑵ 분석시료의처리방법과희석의부적당 ⑶ 표준시료와분석시료의조성이나물리적화학적성질의차이 ⑷ 공존물질에의한간섭 ⑸ 광원램프의드리프트 ( Drift ) 열화 ( 劣化 ) ⑹ 광원부및파장선택부의광학계의조절불량 ⑺ 측광부의불안정또는조절불량 ⑻ 분무기또는버너의오염이나폐색 ⑼ 가연성가스및조연성가스의유량이나압력의변동 ⑽ 불꽃을투과하는광속의위치의조정불량 ⑾ 검량선작성의잘못 ⑿ 계산의잘못

76 12.3 분석값의신뢰성정확한분석값을얻기위하여는사용하는장치분석조건측정조작의적정선택이당연하나얻어진분석값의신뢰성에대하여충분히검토하여야한다. ⑴ 반복정밀도 : 반복정밀도 σ M 은믿을수있는동일시료를특정의동일인의동일한분석장치와분석조건에서동일시기에반복하여여러번측정한결과로부터구한표준편차로서, 사용하는장치, 분석시료및분석원소, 시료의성질과, 농도범위, 분석조건등에따라다르다. 반복정밀도는다음의계산식에의하여구해진다. σ M = (xi-x) 2 n-1 = x i 2 -( x i) 2 n-1 / n Χi : 개개의분석값 x : 개개의분석값의산술평균 n : 분석값의개수 ( n 은 10 이상이어야한다 ) ⑵ 재현정밀도 : 상당히장기간에걸쳐서연속하여분석을행하는경우아래와같은장치가뜨거워지거나불꽃의연소조건의변화등에의하여재현성이저하한다. 따라서장치를사용하는경우에는그때마다적어도 1 회는표준시료 ( 또는특정시료 ) 를사용하여분석값또는검량선의재현정도를관리할필요가있다. 일상분석에있어서는동일장치에의하여외관상동일한측정조건에서분석을행하여도그이전에작성된검량선을그대로사용하는것을피해야한다. 새로제조한표준시료혹은상당히장기간에걸쳐서기지농도를안정하게가지는특정시료에대하여는동일조건에서측정하여고치는것이바람직하나이전에작성된검량선과완전히일치하는검량선이얻어지도록장치의감도등을조절할수도있다. 1 광원램프의열화또는특성의변화에기인하는스펙트럼선의선프로필및강도의변화 2 가연성가스및조연성가스의유량과압력의변동에의한변화 3 분무기노즐의폐색에의한분무실내에서의전회의분석시료에의한오염 4 버너선단부에있어서의탄소나탄화물기타염류등의고형물의생성이나불꽃온도의불균일 5 불꽃중을투과하는광속위치의변화

77 ⑶ 화학분석값과의비교 : 종래원자흡광광도법이적용되지않는시료를처음으로분석하는경우에는얻어진측정값을그시료에대하여같은정밀도로행해진신뢰도가높은분석법에의한화학분석법과비교하여분석값의신뢰성을충분히검토하여야한다

78 제 3 항유도결합플라스마발광광도법 ( Inductively Coupled Plasma(ICP) Emission Spectroscopy ) 1. 원리및적용범위 시료를고주파유도코일에의하여형성된알곤플라스마에도입하여 6,000~8,000 o K 에서여기된원자가바닥상태로이동할때방출하는발광선및발광강도를측정하여 원소의정성및정량분석에이용하는방법이다. 2. 개요 ICP는알곤가스를플라스마가스로사용하여수정발진식고주파발생기로부터발생된주파수 MHz영역에서유도코일에의하여플라스마를발생시킨다. ICP 의토치 ( Torch ) 는 3중으로된석영관이이용되며제일안쪽으로는시료가운반가스 ( 알곤, 0.4~2 L/min ) 와함께흐르며, 가운데관으로는보조가스 ( 알곤, 플라스마가스, 0.5~2 L/min ), 제일바깥쪽관에는냉각가스 ( 알곤, 10~20 L/min ) 가도입되는데토치의상단부분에는물을순환시켜냉각시키는유도코일이감겨있다. 이유도코일을통하여고주파를가해주면고주파가알곤가스매체중에유도되어플라스마를형성하게되는데이때테슬라코일에의하여방전하면알곤가스의일부가전리되어플라스마가점등한다. 방전시에생성되는전자는고주파전류가유도코일을흐를때발생하는자기장에의하여가속되어주위의알곤가스와충돌하여이온화되고새로운전자와알곤이온을생성한다. 이와같이생성된전자는다시알곤가스를전리하여전자의증식작용을하므로서전자밀도가대단히큰플라스마상태를유지하게된다. 알곤플라스마는토치위에불꽃형태 ( 직경 12~15 mm, 높이약 30 mm ) 로생성되지만온도, 전자밀도가가장높은영역은중심축보다약간바깥쪽 ( 2~4 mm ) 에위치한다. 이와같은 ICP의구조는중심에저온, 저전자밀도의영역이형성되어도너츠형태로되는데이도너츠모양의구조가 ICP의특징이다. 에어로졸상태로분무된시료는가장안쪽의관을통하여플라스마 ( 도너츠모양 ) 의중심부에도입되는데이때시료는도너츠내부의좁은부위에한정되므로광학적으로발광되는부위가좁아져강한발광을관측할수있으며화학적으로불활성인위치에서원자화가이루어지게된다. 플라스마의온도는최고 15,000 o K까지이르며보통시료는 6,000~8,000 o K의고온에도입되므로거의완전한원자화가일어나분석에장애가되는많은간섭을배제하면서고감도의측정이가능하게된다. 또한플라스마는그자체가광원으로이용되기때문에매우넓은농도범위에서시료를측정할수있다

79 3. 장치 ICP 발광광도분석장치는그림 1과같이시료주입부, 고주파전원부, 광원부, 분광부, 연산처리부및기록부로구성되어있으며, 분광부는검출및측정방법에따라연속주사형단원소측정장치 ( Sequential type, monochromator ) 와다원소동시측정장치 (Simultaneous type, polychromator) 로구분된다. 3.1 시료주입부 ( 그림 2 ) 분무기 ( Nebulizer ) 및챔버로이루어져있으며시료용액을흡입하여에어로졸상태로플라스마에도입시키는부분이다. 감도및정확도를높게하기위하여가능한한적은에어로졸을많이안정하게생성시킬수있어야한다. 3.2 고주파전원부 현재널리사용하고있는고주파전원은수정발전식의 MHz로 1~3 kw의출력이다. 수용액시료의경우보통 1~1.5 kw가사용되지만유기용매의경우에는 2 kw정도에서 사용된다

80 3.3 광원부 ( 그림 3 ) 광원은유도결합플라스마그자체로서그림 3과같이 3 중으로된석영제방전관 ( 토치, torch ) 의중간을흐르는알곤가스를테슬라코일에서일부전리시킴과동시에방전관상단에감겨져있는유도코일에고주파전류를흐르게하면방전관내부에루우프형태의자기장을형성하게되며이자기장의주위에는와전류가흐르게된다. 이와전류에의하여전리된알곤가스의전자나이온은가속을받게되어알곤분자와충돌을반복하게되며계속하여새로운전자와이온을생성하므로서안정된도너츠형태의플라스마를형성한다. 시료중의원자는이도너츠형의플라스마중심부에도입되어 6,000~8,000 o K의고온에서가열여기되고발광하게된다. 3.4 분광부및측광부플라스마광원으로부터발광하는스펙트럼선을선택적으로분리하기위해서는분해능이우수한회절격자가많이사용된다. 회절격자는평면상에같은간격으로 300~4,000 lines/ mm정도의평행선이그어져있는것으로서이것은정수배에상당하는각의방향에만회절선의상이나타난다. 분광기의성능은촛점거리, 회절격자의크기와간격수, 슬릿의폭등에따라좌우되며최종적으로는분해능으로결정된다

81 분광기는그기능에따라단색화분광기 ( mono chromator ) 와다색화분광기 ( poly chromator ) 로구분되는데그림 4와같이단색화분광기는광을받는부분 ( 슬릿및광전증배관 ) 이하나로회절격자를회전시켜저파장에서단파장으로주사 ( scanning ) 하면서각파장별로많은원소를연속측정할수있으며 ( sequential type ), 다색화분광기는회전격자를고정시켜놓고목적원소의파장위치에각각의슬릿및광전증배관을고정시켜여러가지원소를동시에측정 ( simultaneous type ) 할수있도록한것이다. 3.5 연산처리부광전증배관 ( photomultiplier ) 에들어간광은전류로변화되어광의강도에비례하는전류가콘덴서에저장되며, 콘덴서에축적된전하량은컴퓨터콘덴서의전하량과비례관계에있기때문에농도를측정할수있다. 또컴퓨터는이러한농도계산및데이터처리뿐만아니라파장자동설정 ( mononchromator 의경우 ) 및슬릿의위치설정등의기능도할수있으며이상적인바탕선보정도가능하다. 3.6 ICP 발광분석장치의설치조건가 ) 직사일광이들어오지않는곳나 ) 부식성가스의노출이없는곳다 ) 실온 15~27, 상대습도 70 % 이하를일정하게유지할수있는곳라 ) 강력한자장, 전기장등을발생하는장치가주위에없을것마 ) 진동이없는곳바 ) 발광부로부터의고주파가타기기에영향을미치지않는곳

82 4. 장치의조작법 4.1 플라스마가스의준비 알곤가스 : 액체알곤또는압축알곤가스로순도 %( V/V% ) 이상의것 4.2 설정조건가 ) 고주파출력 : 수용액시료의경우 0.8~1.4 kw, 유기용매시료의경우 1.5 ~2.5 kw로설정나 ) 가스의유량 : 플라스마토치및시료주입부의형식에따라다르니일반적으로냉각가스는 10~18 L/min, 보조가스는 0~2 L/min, 운반가스는 0.5~2 L/min의범위에서설정한다. 특히운반가스의경우는위범위내에서분석대상원소의최대 S/B 비를얻는유량을설정하고유황, 인과같은진공자외부영역에서발광선측정은진공분광기또는가스퍼지 (purge) 분광기를사용하여플라스마와분광기사이의광축을알곤또는질소가스로완전히치환한다. 다 ) Sequential type 분광기의경우에는파장주사 ( Scanning ) 범위및주사속도를기기특성에알맞게설정라 ) 플라스마발광부관측높이 : 유도코일상단으로부터 15~18 mm의범위에측정하는것이보통이나알칼리원소의경우는 20~25 mm의범위에서측정한다. 마 ) 분석선 ( 파장 ) 의설정 : 일반적으로가장감도가높은파장을설정한다. 4.3 조작순서가 ) 주전원스위치 (switch) 를넣고유도코일의냉각수가흐르는가를확인한다음기기를안정화시킨다. 나 ) 여기원 ( R F Power ) 의전원스위치 (switch) 를넣고알곤가스를주입하면서테슬라코일에방전시켜플라스마를점등한다. 다 ) 점등후약 1 분간플라스마를안정화시킨다. 라 ) 수은램프의발광선을이용하여분광기의파장을교정하고분석파장을정확히설정한다. 마 ) 적당한농도로조제된표준액 ( 또는혼합표준액 ) 을플라스마에도입하여각원소의스펙트럼선강도를측정하고설정파장의적부를확인한다

83 5. 시료의분석 5.1 정성분석가 ) 시료용액을플라스마에도입하여스펙트럼선강도를측정한다. 나 ) 각원소특유의스펙트럼선 ( 파장과발광강도비 ) 을검색하여그존재유무를확인한다. 5.2 정량분석 표준액의조제가 ) 단일표준액의조제 ( 1 mg / ml ) 각목적원소별표준시약을사용하여조제하거나시판되는표준용액을사용한다. 나 ) 혼합표준액의조제단일표준액을사용하여기기의특성및측정목적에따라적당한종류및농도로혼합조제하여사용한다. 필요시에는산및염류를첨가하여조제할수도있다 시료측정시료및혼합표준액을플라스마에도입하여각각의스펙트럼선강도를측정하고다음과같이정량한다.( 그림 5 ) 가 ) 검량선법농도가다른 3 종류이상의혼합표준액을사용하여각원소의농도를데이터처리장치에입력시키고각혼합표준액을플라스마에도입하여각원소의스펙트럼선강도를측정하고각원소의농도와발광강도와의관계선을작성한다. 이검량선을이용하여시료중의원소농도를산출한다. 나 ) 내표준법시료및농도가다른 3 종류이상의혼합표준액에내표준원소로서 Yttrium( Y ) 또는 Cobalt( Co ) 를 10 mg /L 되게첨가하고분석대상원소의발광강도 / 내표준원소의발광강도의비를측정하여각원소의농도와의관계선을작성하고시료중의원소농도를산출한다. 다 ) 표준첨가법시료를 10 ml씩 4 개의시험관에넣고 3 개의시험관에는혼합표준용액을시료중분석대상원소량의약 0.5, 1, 1.5배가되도록첨가하고각각의스펙트럼선강도를측정한다. 4 개의측정점으로부터얻어진직선을외삽하여각분석대상원소의농도를산출한다

84 5.3 검량선의교정 기기의운전시간의경시변화, 시료분석의누적에의한영향등에따라여기원부, 광원부, 분광부등의상태가변화하여검량선의특성이변화하므로일정시간또는일정시료수를측정할때마다표준시료 ( 또는표준액 ) 를사용하여스펙트럼선강도를측정하고검량선을교정하지않으면안된다. 5.4 바탕선의보정 근접한스펙트럼의중복또는시료조성에의한바탕선의차이로인하여각원소에 따라정량에간섭을받게되므로기기특성에맞는바탕선보정방법에따라측정값에 대한정확한보정을해야한다

85 제 4 항가스크로마토그래피법 ( Gas Chromatography ) 1. 원리및적용범위이법은적당한방법으로전처리한시료를운반가스 ( Carrier Gas ) 에의하여크로마토관내에전개시켜분리되는각성분의크로마토그램을이용하여목적성분을분석하는방법으로일반적으로유기화합물에대한정성 ( 定性 ) 및정량 ( 定量 ) 분석에이용한다. 2. 일반사항 이시험조작에있어화학분석에공통적인일반사항은제 1 항총칙에따른다. 3. 개요 3.1 이법에서충전물 ( 充塡物 ) 로서흡착성고체분말을사용할경우에는기체 - 고체크로마토그래프, 적당한담체 ( Solid Support ) 에정지상 (stationary phase) 액체를함침 ( 含侵 ) 시킨것을사용할경우에는기체-액체크로마토그래피법이라한다. 3.2 일정유량으로유지되는운반가스 ( Carrier Gas ) 는시료주입부로부터분리관내를흘러서검출기를통하여외부로방출된다. 이때, 시료주입부, 분리관, 검출기등은필요한온도를유지해주어야한다. 3.3 시료주입부로부터기체, 액체또는고체시료를도입하면기체는그대로, 액체나고체는가열기화 ( 加熱氣化 ) 되어운반가스에의하여분리관내로송입되고시료중의각성분은충전물에대한각각의흡착성또는용해성의차이에따라분리관내에서의이동속도가달라지기때문에각각분리되어분리관출구에접속된검출기를차례로통과하게된다. 3.4 검출기에는원리에따라여러가지가있으며성분의양과일정한관계가있는전기신호 ( 電氣信號 ) 로변환시켜기록계 ( 또는다른데이터처리장치 ) 에보내져서분리된각성분에대응하는일련의곡선봉우리가되는크로마토그램 ( Chromatogram ) 을얻게된다

86 3.5 실제로어떤조건에서시료를분리관에도입시킨후그중의어떤성분이검출되어기록지상에봉우리로나타날때까지의시간을머무름시간 ( Retention Time ) 이라하며이머무름시간에운반가스의유량을곱한것을머무름용량 ( Retention Volume ) 이라한다. 이값은어떤특정한실험조건하에서는그성분물질마다고유한값을나타내기때문에정성분석 ( 定性 析 ) 을할수있으며또기록지에그려진곡선의넓이또는봉우리의높이는시료성분량과일정한관계가있기때문에이것에의하여정량분석 ( 定量 析 ) 을할수가있다. 4. 장치 이장치의기본구성은그림 1 과같으며이기본구성을복수열 ( 復數列 ) 로조합시킨 형식이나복수열유로 ( 複數列流 D ) 로검출기의신호를서로보상 ( 補償 ) 하는형식도 있다. 4.1 가스유로계 ( 流 D 系 ) 운반가스유로 : 운반가스유로는유량조절부와분리관유로로구성된다. ⑴ 유량조절부는분리관입구의압력을일정하게유지하여주는압력조절밸브, 분리관내를흐르는가스의유량을일정하게유지하여주는유량조절기 ( 流量調節器 ) 등으로구성되며필요에따라유량계가첨부되어야한다. 유량조절기를갖는장치는유량조절기의일차측압력을일정하게유지해주어야하며배관의재료는내면이깨끗한금속이어야한다

87 ⑵ 분리관유로는시료주입부, 분리관, 검출기기배관 ( 檢出器機配管 ) 으로구성된다. 배관의재료는스테인레스강 ( Stainless Steel ) 이나유리등부식에대한저항이 큰것이어야한다 연소용가스, 기타필요한가스의유로이온화검출기가다른검출기를사용할때필요한연소용가스, 청소가스 ( Scavenge Gas ) 기타필요한가스의유로는각각전용조절기구 ( 專用調節器具 ) 가갖추어져야하고필요에따라압력계또는유량계가첨부되어야한다. 배관의재료는 4.1.1⑴ 과같다. 4.2 시료주입부 주사기를사용하는시료주입부는실리콘고무와같은내열성탄성체격막 ( 耐熱性彈性體隔膜 ) 이있는시료기화실로서분리관온도와동일하거나또는그이상의온도를유지할수있는가열기구가갖추어져야하고, 필요하면온도조절기구, 온도측정기구등이있어야한다 가스시료주입부는가스계량관 ( 통상 0.5~5 ml ) 과유로변환기구로구성된다. 4.3 가열오븐 ( Heating Oven ) 분리관오븐 ( Column Oven ) : 분리관오븐은내부용적이분석에필요한길이의분리관을수용할수있는크기이어야하며임의의일정온도를유지할수있는가열기구, 온도조절기구, 온도측정기구등으로구성된다. 온도조절정밀도는 ±0.5 의범위이내전원전압변동 10 % 에대하여온도변화 ±0.5 범위이내 ( 오븐의온도가 150 부근일때 ) 이어야한다. 또승온 ( 昇溫 ) 가스크로마토그래프에서는승온기구및냉각기구를부가한다. 단, 정온 ( 定溫 ) 가스크로마토그래프에서는분리관오븐에검출기를장치한것도무방하지만이때에는다음 의조건에만족해야한다 검출기오븐 ( Detector Oven ) 검출기오븐은검출기를한개또는여러개수용 ( 收容 ) 할수있고분리관오븐과동일하거나그이상의온도를유지할수있는가열기구, 온도조절기구및온도측정기구를갖추어야한다

88 방사성동위원소를사용하는검출기를수용하는검출기오븐에대하여는온도조절기구와는별도로독립작동할수있는과열방지기구를설치해야한다. 가스를연소시키는검출기를수용하는검출기오븐은그가스가오븐내에오래체류하지않도록된구조이어야한다. 4.4 검출기 ( Detector ) 가스크로마토그래프분석에사용하는검출기는각각그목적에따라다음과같은 것을사용한다 열전도도검출기 ( Thermal Conductivity Detector, TCD ) : 열전도도검출기는금속필라멘트 ( Filament ) 또는전기저항체 ( Thermister ) 를검출소자 ( 檢出素子 ) 로하여금속판 ( Block ) 안에들어있는본체와여기에안정된직류전기를공급하는전원회로, 저류조절부, 신호검출전기회로, 신호감쇄부등으로구성한다 불꽃이온화검출기 ( Flame Ionization Detector, FID ) : 불꽃이온화검출기는수소연소노즐 ( Nozzle ), 이온수집기 ( Ion Collector ) 와함께대극 ( 對極 ) 및배기구 ( 排氣口 ) 로구성되는본체와이전극사이에직류전압을주어흐르는이온전류를측정하기위한전류전압변환회로, 감도조절부, 신호감쇄부등으로구성한다 전자포획형검출기 ( Electron Capture Detector, ECD ) : 전자포획형검출기는방사선동위원소 ( 63Ni, 3H 등 ) 로부터방출되는 β선이운반가스를전리하여미소전류를흘려보낼때시료중의할로겐이나산소와같이전자포획력이강한화합물에의하여전자가포획되어전류가감소하는것을이용하는방법으로유기할로겐화합물, 니트로화합물및유기금속화합물을선택적으로검출할수있다 불꽃광도형검출기 ( Flame Photometric Detector, FPD ) : 불꽃광도형검출기는 수소염에의하여시료성분을연소시키고이때발생하는불꽃의광도를분광학적 으로측정하는방법으로서인또는황화합물을선택적으로검출할수있다 불꽃열이온화검출기 ( Flame Thermionic Detector, FTD ) : 불꽃열이온화검출기는불꽃이온화검출기 ( FID ) 에알칼리또는알칼리토류금속염의튜브를부착한것으로유기질소화합물및유기염소화합물을선택적으로검출할수있다. 운반가스와수소가스의혼합부, 조연가스공급구, 연소노즐, 알칼리원가열기구, 전극등으로구성한다

89 4.5 기록계 ( Recorder ) 기록계는스트립차아트 ( Strip Chart ) 식자동평형기록계로스팬 ( Span ) 전압 1 mv, 팬응답시간 ( Pen Response Time ) 2 초이내, 기록지이동속도 ( Chart Speed ) 는 10 mm / 분을포함한다단변속 ( 多段變速 ) 이가능한것이어야한다. 4.6 감도조정부 ( 感度調整部 ) 이장치는크로마토그램의감도보정이가능하고아래의요소들을쉽게설정, 판독또는측정할수있는것이어야한다 열전도도검출기 ( TCD ) 에서는필라멘트전류, 기록계, 스팬전압, 운반기체유량, 기록지이동속도 불꽃이온화검출기 ( FID ) 에서는직렬고저항치 ( 直列高抵抗値 ), 기록계스팬전압또는기록계전체눈금에대한이온전류치, 기록지이동속도 기타검출기에서는기록계스팬전압, 기록지이동속도및검출기원리에따른특정의값 5. 운반가스 ( Carrier Gas ) 종류 5.1 운반가스운반가스는충전물이나시료에대하여불활성 ( 不活性 ) 이고사용하는검출기의작동에적합한것을사용한다. 일반적으로열전도도형검출기 ( TCD ) 에서는순도 99.9 % 이상의수소나헬륨을, 불꽃이온화검출기 ( FID ) 에서는순도 99.9 % 이상의질소또는헬륨을사용하며기타검출기에서는각각규정하는가스를사용한다. 단, 전자포획형검출기 ( ECD ) 의경우에는순도 % 이상의질소또는헬륨을사용하여야한다. 5.2 연소가스공기및청소가스공기, 수소기타사용가스는각분석방법에서규정하는종류의순도가스를사용한다. 6. 분리관 ( Column ), 충전물질 ( Packing Meterial ) 및충전방법 ( Packing Method ) 6.1 분리관 ( Column ) 분리관은충전물질을채운안지름 2~7 mm ( 모세관식분리관을사용할수도있다 ) 의시료에대하여불활성금속, 유리또는합성수지판으로각분석방법에서규정하는것을사용한다

90 6.2 충전물질 ( Packing Meterial ) 흡착형충전물기체- 고체크로마토그래피법에서는분리관의안지름에따라다음과같이입도 ( 粒度 ) 가고른흡착성고체분말 ( 吸 性固體粉末 ) 을사용한다. 분리관안지름 ( mm ) 흡착제및담체의입경범위 ( μm ) 3 4 5~6 149~177 ( 100~80 mesh ) 177~250 ( 80~60 ) 250~590 ( 60~28 ) 여기서사용하는흡착성고체분말은실리카겔, 활성탄, 알루미나, 합성제올라이트 ( Zeolite ) 등이며, 또한이러한분말에표면처리 ( 表面處理 ) 한것을각분석방법에 규정하는방법대로처리하여활성화한것을사용한다 분배형충전물질 ( 配形充塡物質 ) 기체-액체크로마토그래피법에서는위에표시한입경범위에서의적당한담체 ( 擔體 ) 에정지상 (stationary phase) 액체 ( 固定狀液體 ) 를함침 ( 含侵 ) 시킨것을충전물로사용한다. ⑴ 담체 ( Support ) : 담체는시료및정지상 (stationary phase) 액체에대하여불활성인것으로규조토, 내화벽돌 ⑴, 유리, 석영, 합성수지등을사용하며각분석방법에서전처리를규정한경우에는그방법에따라산처리 ( 酸處理 ), 알칼리처리, 실란처리 ( Silane Finishing ) 등을한것을사용한다. 주 ⑴ 여기서내화벽돌이라함은일반적인내화점토 ( 耐火粘土 ) 를사용한것이아니고규조토를주성분으로한내화온도 1,100 정도의단열 ( 斷熱 ) 벽돌을뜻한다. ⑵ 정지상 (stationary phase) 액체정지상 (stationary phase) 액체는가능한한다음의조건을만족시키는것을선택한다. 1 분석대상성분을완전히분리할수있는것이어야한다. 2 사용온도에서증기압이낮고, 점성이작은것이어야한다. 3 화학적으로안정된것이어야한다. 4 화학성분이일정한것이어야한다

91 또한이들조건을만족시키는것으로서표 1에나타난모양의것이일반적으로널리사용되고있다. 이들이외의것으로서도분석목적을만족시키는것이있다면사용하여도상관없다.( 표 1참조 ) ⑶ 조제방법각분석방법에서규정한담체에지정된농도 ( 무게 % ) 의정지상 (stationary phase) 액체를다음의방법에의하여되도록균일하게함침시킨다. 2) 100 ml의충전물을조제하는경우 1 약 100 ml의담체를용량 300~500 ml의비커또는플라스크에취하여, 담체의무게를 1 g까지구해둔다. 표 1. 일반적으로사용하는정지상 (stationary phase) 액체의종류 종류물질명 탄화수소계실리콘계폴리글리콜계에스테르계폴리에스테르계폴리아미드계 헥사데칸스쿠아란 (Squalane) 진공용그리스메틸실리콘페닐실리콘시아노실리콘불화규소폴리에틸렌글리콜메톡시폴리에틸렌글리콜이염기산디에스테르이염기산폴리글리콜디에스테르폴리아미드수지 에테르계폴리페닐에테르기타인산트리크레실디에틸포름아미드디메틸슬포란 2 따로지정된무게 % 가되도록정지상 (stationary phase) 액체를비커에 0.1 g까지달아넣고담체와거의같은부피의지정된유기용매를가하여용해시킨다. 3 1에서취한담체에 2에서조제한정지상 (stationary phase) 액체용액을한꺼번에가하여함침시켜, 용매의냄새가나지않을때까지저어가며공기를통하여건조시킨다. 필요한경우에는체로쳐서지정입도로맞춘다. 주⑵ 저농도정지상 (stationary phase) 액체충전물의조제는여과법을사용하여도좋다

92 6.2.3 다공성고분자형충전물 ( 多孔性高 子形充塡物 ) 이물질은디비닐벤젠 ( Divinyl Benzene ) 을가교제 ( Bridge Intermediate ) 로 스티렌계단량체 ( Styrene 系單量體 ) 를중합시킨것과같이고분자물질을단독 또는정지상 (stationary phase) 액체로표면처리하여사용한다. 6.3 충전방법 내부를잘씻어말린분리관에미리한쪽끝을유리솜 ( Glass Wool ) 으로막고진동을주어감압흡인 ( 減壓吸引 ) 하면서충전물을고르고빽빽하게채운다음남은한쪽끝을유리솜으로가볍게막는다. 이분리관은그충전물질의최고사용온도부근에서적어도수시간동안헬륨또는질소를통하여건조한다. 이때건조에의하여감소되는만큼의충전물을보충하여채우고더이상감소하지않을때까지이조작을되풀이한다. 7. 조작법 ( Procedure ) 7.1 설치조건 ( 設置條件 ) 가스크로마토그래프의설치장소 설치장소는진동이없고분석에사용하는유해물질을안전하게처리할수있으며 부식가스나먼지가적고실온 5~35, 상대습도 85 % 이하로서직사일광이쪼이지 않는곳으로한다 전기관계 전기관계는다음과같은조건을갖추어야한다. ⑴ 전원 : 공급전원은지정된전력용량및주파수이어야하고전원변동은지정전압의 10 % 이내로서주파수의변동이없는것이어야한다. ⑵ 전자기유도 ( 電子氣誘導 ) : 대형변압기, 고주파가열로 ( 高周波加熱爐 ) 와같은것으로부터전자기의유도를받지않는것이어야한다. ⑶ 접지점 ( 接地點 ) : 접지저항 100 Ω이하의접지점이있는것이어야한다

93 7.2 분석전의준비 장치의고정설치 ⑴ 가스류의배관 : 장치를설치하고가스류의배관을한다음가스의누출이없는가를확인한다. 이때가스통은화기가없는실외의그늘진곳에넘어지지않도록고정하여설치한다. ⑵ 전기배선 : 장치에전원을배선하고접지점에접지선을연결한다. 또필요한부분의배선을확인한다 분리관의부착및가스누출시험각분석방법에규정된방법에따라조제된분리관을장치에부착한후운반가스의압력을사용압력이상으로올리고, 분리관등의접속부에비눗물등을칠하여가스누출시험을하여누출이없음을확인한다 시료의준비 분석하는시료를각분석방법에규정된방법에의하여준비한다. 7.3 조작 분석조건의설정각분석방법에규정된방법에의하여다음항목을소정의값으로조절한다. ⑴ 운반가스및기타가스류의유량 ⑵ 분리관온도 ( 승온법을사용하는경우에는초기온도, 승온속도, 최종온도등의각종프로그램 ) ⑶ 시료기화실온도및검출기온도 ⑷ 감도 ⑸ 기록지이동속도 바탕선 ( 基線 ) 의안정도확인 검출기및기록계를소정의작동 ( 作動 ) 상태로하여, 바탕선의안전상태를확인 한다

94 7.3.3 시료의도입 ⑴ 액체시료 : 액체시료는시료주입량에따라적당한부피의미량주사기 ( Micro Syringe, 1~100 μl ) 를사용하여, 시료도입구로부터빠르게주입한다. ⑵ 기체시료 : 보통기체시료도입장치를사용하나주사기 ( 통상 0.5~5 ml ) 를사용하여주입할수도있다. ⑶ 고체시료 : 고체시료는용매에용해시켜 ⑴의방법으로도입한다 크로마토그램의기록 시료도입직후크로마토그램에시료주입점을기입한다 ( 그림 2 참조 ). 시료의봉우리가기록계의기록지상에진동이없이, 또한가능한한큰봉우리를 그리도록성분에따른감도를조절한다 데이터의정리 데이터는다음사항을정리기재한다. ⑴ 날짜 ⑵ 장치명 ⑶ 시료명및시료주입량 ( μl또는ml ) ⑷ 운반가스의종류및유량 ( ml / 분 ) 과분리관입구압 ( kg / cm3 ) 필요하다면출구에서운반기체압력 ( mmhg ) ⑸ 충전물의종류 담체명, 처리법, 입도 ( μm또는메시 ) 정지상 (stationary phase) 액체명및함침량 ( 무게 % ) ⑹ 분리관의재질, 반지름 ( mm ) 및길이 ( cm ) ⑺ 분리관의온도 ( )( 승온법을사용하는경우에는초기온도 ( ), 승온속도 ( / 분 ), 최종온도 ( ), 기타필요사항 ) ⑻ 시료기화실, 검출기, 기타필요한부분의온도 ( ) ⑼ 검출기의종류및조작조건 ⑽ 기록계의감도 ( mv ) 및기록지이송속도 ( mm / 분 ) ⑾ 조작자명 ⑿ 기타필요한사항

95 8. 분리의평가 : 분리의평가는분리관효율과분리능에의한다 8.1 분리관효율 분리관효율은보통이론단수 ( 理 Q 段數 ) 또는 1 이론단에해당하는분리관의길이 이론단해당높이 ( Height Equivalent to a Theoritical Plate ) 로표시하며, 크로마토그램 ( 그림 2 ) 상의봉우리로부터다음식에의하여구한다. 이론단수 ( n ) = 16 ( t R W ) 2 t R : 시료주입점으로부터봉우리최고점까지의길이 ( 유지시간 ) W : 봉우리의좌우변곡점에서점선이자르는바탕선의길이 이론단해당높이 = L n L : 분리관의길이 ( mm ) 8.2 분리능 2 개의접근한봉우리의분리의정도를나타내기위하여분리계수또는분리도를 가지고다음과같이정량적으로정의하여사용한다. 분리계수 (d) = t R2 t R1 분리도 (R) = 2 (t R2 -t R1 ) W 1 +W 2 t R1 : 시료주입점으로부터봉우리 1의최고점까지의길이 t R2 : 시료주입점으로부터봉우리 2의최고점까지의길이 W 1 : 봉우리 1의좌우변곡점에서의접선이자르는바탕선의길이 W 2 : 봉우리 2의좌우변곡점에서의접선이자르는바탕선의길이

96 9. 정성분석 정성분석은동일조건하에서특정한미지성분의머무른값 ( 維持値 ) 과예측되는물질의봉우리의머무른값을비교하여야한다. 그러나어떤조건에서얻어지는하나의봉우리가한가지물질에반드시대응한다고단정할수는없으므로정지상 (stationary phase) 또는분리관온도를변경하여측정하거나또는다른방법으로정성이가능한경우에는이방법을병용하는것이좋다. 9.1 머무름값머무름의종류로는머무름시간 ( Retention Time ), 머무름용량 ( Retention Volume ), 비머무름용량, 머무름비, 머무름지수등이있다. 머무름시간을측정할때는 3 회측정하여그평균값을구한다. 일반적으로 5~30 분정도에서측정하는봉우리의머무름시간은반복시험을할때 ±3 % 오차범위이내이어야한다. 머무름값의표시는무효부피 ( Dead Volume ) 의보정유무를기록하여야한다. 9.2 다른방법을병용 ( 並用 ) 한정성 다른방법을병용할때에는반응관, 사용검출기, 분취방법, 기타사용방법등에대한 설명및의견을덧붙일수가있다. 10. 정량분석 정량분석은각분석방법에규정하는방법에따라시험하여얻어진크로마토그램 ( Chromatogram ) 의재현성, 시료성분의양, 봉우리의면적또는높이와의관계를검토하여분석한다. 이때정확한정량결과를얻기위해서는크로마토그램의각곡선봉우리는대칭적이고각각완전히분리되어야한다 곡선의면적또는봉우리의높이측정 곡선의면적또는봉우리의높이중어느것을사용할것인가는각시험법의규정 또는사용기기의특성에따라결정한다 봉우리의높이측정 곡선의정점 ( Peak ) 으로부터기록지횡축으로수직선을내려바탕선 ( Base Line ) 과 교차하는점과정점과의거리를봉우리의높이로한다

97 곡선의넓이측정곡선의넓이는다음방법에의하여측정한다. ⑴ 반높이선너비법 1 대칭적봉우리 : 그림 3과같이봉우리높이 ( h ) 의중앙으로부터바탕선에평행선을그려봉우리에의하여절단되는선분을반높이선너비 ( W ) 로하며, 이것에봉우리높이 ( h ) 를곱한것을봉우리면적 ( A ) 으로한다. 2 앞으로기울어진봉우리 : 앞으로기울어진봉우리의경우에도 1 의대칭적 봉우리의측정법이적용될수있다. 3 꼬리를끄는봉우리 : 현저하게꼬리를끄는봉우리에대해서는이반높이선너비법의적용은좋지않다. 4 중복봉우리 : 2 개이상의봉우리가접근하여중복된경우, 그정도가가벼운경우에는앞에말한 1의측정법을적용할수도있으나봉우리의중복이현저한경우에는적합치않다

98 ⑵ 적분기를사용하는방법 : 적분기에표시된기록또는지시값에의한다. 단, 봉우리의중복이현저한경우에적용하는것은좋지않다 정량법 측정된넓이또는높이와성분량과의관계를구하는데는다음방법에의한다. ⑴ 절대검량선법 : 정량하려는성분으로된순물질을단계적 3) 으로취하여크로마토그램을기록하고봉우리넓이또는봉우리높이를구한다. 이것으로부터성분량을횡축에, 봉우리넓이또는봉우리높이를종축에취하여그림 5와같이검량선을작성한다. 동일조건하에시료를주입하여크로마토그램을기록하고봉우리넓이 ( 또는봉우리높이 ) 로부터검량선에따라분석하려는각성분의절대량을구하여그조성을결정한다. 이방법은전체측정조작을엄밀하게일정조건하에서할필요가있다. 주⑶ 일반적으로여러점을취하여그림 5와같은검량선을작성하여정량을하지만기지량에대한 1 점만을취하고이점과원점과를이은직선을그려검량선으로하여정량을하는수도있다. 이경우에는검량선을그리지않고직접비례계산으로정량하여도좋다. 단, 이 1 점절대검량선에서는직선상의확인이필요하다. ⑵ 넓이백분율법 : 크로마토그램으로부터얻은시료각성분의봉우리면적을측정하고그것들의합을 100 으로하여이에대한각각의봉우리넓이비를각성분의함유율로한다. 이방법은도입시료의전성분이용출하며, 또한사용한검출기에대한각성분의상대감도가같다고간주되는경우에적용하며, 각성분의대개의함유율 ( X 1 ) 을알수가있다

99 X 1 ( % ) = A 1 A 1 : i 성분의봉우리넓이 100 n A 1 i= 1 n : 전봉우리수 ⑶ 보정넓이백분율법 : 도입한시료의전성분이용출하며또한용출전성분의상대감도가 구해진경우 4) 에는다음식에의하여정확한함유율을구할수있다. A i X i ( % ) = n i= 1 f i 100 A i f i fi : i성분의상대감도 n : 전봉우리수주⑷ 상대감도를구하는법성분량 ( 무게, 부피, 몰 ) 을알고있는혼합시료의크로마토그램으로부터각성분의봉우리넓이를측정하여, 단위성분량당의면적을산출한다. 적당한성분에대한비를구하면상대감도의역수는보정계수라부르며이것을사용하는경우에는봉우리넓이에이것을곱하면된다. ⑷ 내부표준법 : 정량하려는성분의순물질 ( X ) 일정량의내부표준물질 5) ( S ) 의일정량을가한혼합시료의크로마토그램을기록하여봉우리넓이를측정한다. 횡축에정량하려는성분량 ( Mx ) 과내부표준물질량 ( M S ) 의비 ( M X /Ms ) 를취하고분석시료의크로마토그램에서측정한정량할성분의봉우리넓이 ( A X ) 와표준물질봉우리넓이 ( A S ) 의비 ( A X /A S ) 를취하여그림 6과같은검량선을작성한다. 시료의기지량 ( M ) 에대하여표준물질의기지량 ( n ) 을검량선의범위안에들도록 적당히가해서균일하게혼합한다음표준물질의봉우리가검량선작성시와거의 같은크기가되도록도입량을가감해서동일조건하에서크로마토그램을기록한다

100 크로마토그램으로부터피검성분봉우리넓이 ( A' X ) 와표준물질봉우리넓이 ( A' S ) 의비 ( A'x/A's ) 를구하고, 검량선으로부터피검량성분 ( M' X ) 과표준물 질량 ( M' S ) 의비 ( M' X /M' S ) 가얻어지면, 다음식에따라함유율 ( X ) 을산출 한다. ( M ' x ) n M ' X( % ) = s 100 M 또한봉우리넓이대신에봉우리높이를사용하여도좋다. 이방법을시료중의각성분에적용하면시료의조성을구할수가있다. 주 ⑸ 내부표준물질에는그봉우리가정량하려는성분봉우리의위치에가능한 한가깝고, 시료중의다른성분봉우리와도완전하게분리되는안전한물질을 선택한다. ⑸ 피검성분추가법 ( 被檢性 追加法 ) : 시료의크로마토그램으로부터피검성분 A 및다른임의의성분 B 의봉우리넓이 a 1 및 b 1 을구한다. 다음에시료의일정량 W 에 성분 A 의기지량 ΔW A ⑹ 을가하여다시크로마토그램을기록하여성분 A 및 B 의 봉우리넓이 a 2 및 b 2 를구하면 K 의정수로해서다음식이성립한다. W A W B = K a 1 b 1 W A +Δ W A W B = K a 2 b 2 여기에서 W A 및 W B 는시료중에존재하는 A 및 B 성분의양, K 는비례상수이다. 위식으로부터성분 A 의부피또는무게함유율 X( % ) 를다음식으로구한다. X( % ) = ( a 2 b 2 Δ W A b 1-1) W a 주 ⑹ ΔW A 의양은 a 2 /b 2 의값이 1.2~2.0 의사이에있도록가하여야한다 정량값 ( 定量값 ) 의표시방법 10.2 에서얻어진정량값는중량 %, 부피 %, 몰 %, ppm 등으로표시한다 검출한계 ( 檢出限界 ) 검출한계는각분석방법에서규정하는조건에서출력신호를기록할때잡음신호 ( Noise ) 의 2 배의신호를검출한계로한다

101 10.5 정밀도의판정 ( 精密度判定 ) 각성분의분석결과에대한정밀도는각분석방법에규정하는기준으로부터판정한다 반복정밀도 동일인이동일장치로각분석방법에규정하는횟수의측정을반복해서시행할때 그결과의차이가허용차를초과해서는안된다 재현성 ( 再現性 ) 동일시료를임의로다른분석실에서각분석방법에서규정하는횟수의측정을할때 평균값차이가허용차를초과해서는안된다. 11. 기재요령 가스크로마토그래피법에의하여정량분석을할때에는다음과같은사항을기재하여야한다. ⑴ 적용범위 : 대상시료분석성분및그농도범위 ⑵ 시 료 : 시료채취장치, 채취방법, 전처리및보존방법 ⑶ 장치 : 1 본체 : 사용한분리관의재질, 길이, 안지름, 온도범위, 유로구성 ( 流 D 構成 ) 2 검출기 : 검출기의종류소요감도소요감도는특정성분의일정량을도입했을때의크로마토그램의봉우리 ( 높이또는면적 ) 로규정하며그시험방법도명기한다. 3 기록계 : 4.5 에규정한이외에것을사용할때는그특성을명기한다. 4 시료주입장치 : 정량도입을필요로하는정량방법을사용할때는시료주입장치의종류와특성을명기한다. 시료주입장치의특성은동일시료를반복하여도입했을때의크로마토그램봉우리의크기 ( 높이또는면적 ) 의반복정밀도를규정한다. 5 분리관충전물질 : 충전물질의종류입도 ( 粒度 ) : 담체의전처리방법, 정지상 (stationary phase) 액체의농도 ( Wt % ), 충전일자및 의 ⑶의규정한방법이외의조제방법을사용할때는그방법을명기한다. 여기서충전물질의입도는그크기가한정되어있지않을때에는요구되는분리능 ( 離能 ), 유지값 ( 維持값 ) 의최대최소값등을규정하고이에합치되는대표예 ( 代表例 ) 를명기한다. 이때에는제특성의시험방법도명기하는것이좋다

102 ⑷ 분석조건 1 온도 : 분리관오븐, 검출기오븐, 시료주입부 2 운반가스 : 종류단위시간당유량 3 시료주입 : 도입량분석 ( 도입 ) 횟수 4 기록지이동속도 ⑸ 성분의확인방법 : 대표적인크로마토그램의보기를나타낼것. ⑹ 정량법 1 봉우리의측정방법 : 적분계를사용하는경우에는그적분계에요구되는정밀도등을명기한다. 2 정량방법의종류 : 검량선이나보정계수를이용할때는그검량선이나보정계수를보기로나타낸다. 3 표준물질 : 종류, 순도와혼합물일경우에는농도범위및조제방법을명기한다. ⑺ 분석결과의표시 1 수치의취급, 표시방법, 표시단위의마무리방법 2 허용차반복시의정밀도재현정도등을명기한다

103 제 5 항이온크로마토그래피법 ( Ion Chromatography ) 1. 원리및적용범위이법은액체시료를이온교환컬럼에고압으로전개시켜분리되는각성분의크로마토그램을작성하여분석하는고속액체크로마토그래피의일종으로서물시료중음이온 ( F -, Cl -, NO - 2, NO - 3, PO - 4, Br - = 및 SO 4 ) 의정성및정량분석에이용된다. 2. 장치일반적으로이온크로마토그래피의기본구성은그림 1과같이용리액조, 시료주입부, 액송펌프, 분리컬럼, 검출기및기록계로되어있으며장치의제조회사에따라분리컬럼의보호및분석감도를높이기위하여분리컬럼전후에보호컬럼및제거장치 ( 써프레서 ) 를부착한것도있다. 2.1 액송펌프분리컬럼중의이온교환체의입자는약 10 μm의매우작은입자로서용리액및시료를고압하에서전개시키지않으면요구되는유속을얻기가어렵다. 따라서펌프는 150~350 kg / cm2압력에서사용될수있어야하며작동중맥동 ( 脈動 ) 이일어나서는안된다

104 2.2 시료의주입부 일반적으로미량의시료를사용하기때문에루우프 - 밸브에의한주입방식이많이 이용되며시료주입량은보통 50~100 μl이다. 2.3 분리컬럼 유리또는에폭시수지로만든관에이온교환체를충전시킨것으로다음과같은것이있다 써프레서형 폴리스틸렌계페리큐라형음이온교환수지 ( 10~15 μm ) 를컬럼에충전시킨것으로서 안지름 3~5 mm, 길이 5~30 mm이다 비써프레서형폴리스틸렌계페리큐라형음이온교환수지 ( 10~15 μm ), 폴리아크릴계표면다공성음이온교환수지 ( 10~12.5 μm ) 또는실리카겔전다공성형음이온교환수지 ( 6 μm ) 를컬럼에충전시킨것으로서안지름 4~6 mm길이 5~10 cm이다. 2.4 제거장치 ( 써프레서 ) 분리컬럼으로부터용리된각성분이검출기에들어가지전에용리액자체의전도도를감소시키고목적성분의전도도를증가시켜높은감도로음이온을분석하기위한장치이다. 고용량의양이온교환수지를충전시킨컬럼형과양이온교환막으로된격막형이있다. 2.5 검출기 분석목적및성분에따라전기전도도검출기, 전기화학적검출기및광학적검출기등이 있으나일반적으로음이온분석에는전기전도도검출기를사용한다. 3. 시료의분석 3.1 시료의전처리시료중에입자상물질등이존재하면분리컬럼의수명을단축시키기때문에 0.45 μm이하의멤브레인거름종이또는유리섬유거름종이 ( GF/C ) 를사용하여여과한다음시료를주입하여야한다. 또한특정이온이고농도로존재할경우더이온의정량분석을방해할수있다. 이때에는특수제작된제거컬럼을이용하거나기타적당한방법을이용하여특정이온을제거한다음시험한다

105 3.2 시약의준비 음이온표준원액 ( 1 mg / ml ) 각이온의염을 105 에서항량이되도록건조한다음다음표에기록된양을 정확히달아각각물에녹이고정확히 1 L로한다. 이액은플라스틱병에넣어냉장고에보관할경우 1 개월간안정하다. 음 이 온 표준시약 대 용 량 C1 - Br - NaC1 NaBr NO 3 - NO 2 - PO 4 = SO 4 F - * 건조기대신건조용기에서건조 NaNO NaNO 2 * KH 2 PO K 2SO NaF 검량선작성용혼합표준액 각이온의표준원액을물로희석하여사용기기의분석감도에따라적당한농도로 혼합조제한다 용리액 ( 주1 ) 써프레서형 ( 0.003M NaHCO M Na 2 CO 3 ) 탄산수소나트륨 g과탄산나트륨 g을물에녹여 4 L로한다. 비써프레서형 ( M 글루콘산 M Na 2 B 4 O 7 ) 글루콘산 1.02 g과붕산나트륨 g을물에녹여 4 L로한다 써프레서용재생액 ( 0.025N H 2 SO 4 ) 황산 2.8 ml를물에넣어 4 L 로한다. 3.3 기기의안정화및검량선작성이온크로마토그래프의전체시스템을작동시켜유속을 1~3 ml /min 으로고정시킨다음용리액및재생액을흘려보내면서펌프의압력및검출기의전도도가일정하게유지될때까지기다린다. 펌프의압력이일정하게유지되고용리액의전도도및기

106 록계의기준선이안정화되면적당히희석된음이온의표준액을각각주입하여크로마토그램을작성하고각음이온의유지시간을확인한다. 다음에혼합표준액을적어도 3 종류의각기다른농도로준비하여각각의크로마토그램을작성하고그결과로부터각농도에대한봉우리높이또는면적을그래프용지에플로트하여직선성을확인한다. 직선성이확인되면미리준비된검량선작성용혼합표준액을주입하여크로마토그램을작성하고각음이온의농도와크로마토그램상의봉우리높이또는면적에대한검량선을작성한다. 3.4 시료의측정 ( 주2 ) 여과한시료를이온크로마토그래프에주입하여검량선작성시와같은기기조건하에서크로마토그램을측정하고미리작성한검량선으로부터시료의농도 ( mg /L ) 를산출한다. 주1) 용리액의조성및농도는기기제조회사또는분리컬럼의종류등에따라달라질수있으므로사용기기에대한설명서를참조한다. 2) 써프레서형의경우시료중에저급유기산이존재하면불소이온의정량분석에방해를한다

107 제 6 항 이온전극법 1. 원리및적용범위시료중의분석대상이온의농도 ( 이온활량 ) 에감응하여비교전극과이온전극간에나타나는전위차를이용하여목적이온의농도를정량하는방법으로서시료중음이온 ( Cl -, F -, NO - 2, NO - 3, CN - ) 및양이온 ( NH + 4, 중금속이온등 ) 의분석에이용된다. 2. 개요 이온전극은 [ 이온전극 측정용액 비교전극 ] 의측정계에서측정대상이온에감응 하여네른스트식에따라이온활량에비례하는전위차를나타낸다. E = E 0 + [ R T z F ] log a (1) E : 측정용액에서이온전극과비교전극간에생기는전위차 ( mv ) E 0 : 표준전위 ( mv ) R : 기체상수 ( J/ o K, mol ) zf : 이온전극에대하여전위의발생에관계하는전자수 ( 이온가 ) F : 페러데이 ( Faraday ) 상수 ( C) a : 이온활량 ( mol/l ) R T z F 는이론전위기울기라하며이온활량의역수의상용대수를 px 라할때 1 px 당 전위차를나타내는값으로서 25 에서 1가이온은 mv, 2가이온은 mv 의값이다. 또한이온활량은활량계수 ( γ ) 와이온농도 ( C ) 간에다음과같은관계가있다. a = γ C 그러므로네른스트식은이온농도 ( C ) 와다음과같은식으로표시할수있다. E = E 0 + [ R T z F E = E 0 + [ R T z F ] log r c ] log γ + [ R T z F ] log C 따라서활량계수 ( γ ) 를알고있으면전위측정에의하여직접이온농도의측정이가 능하다

108 여기에서, E = E 0 + [ R T z F ] log γ 를일정한값이라고하면 E = E 0 + [ R T z F ] log C 가된다. 측정용액중의총이온강도가일정할때는활량계수도일정하게된다. 그러므로표준 액을사용하여이온농도의전위차와의관계를구하고미지시료용액의전위차를측정 하여대상이온의농도를구할수있다. 3. 장치 이온전극법에사용하는장치의기본구성은그림 1 과같이전위차계, 이온전극, 비교전극, 시료용기및자석교반기로되어있다. 3.1 전위차계이온전극과비교전극간에발생하는전위차를 mv 단위까지읽을수있고고압력저항 ( Ω 이상 ) 의전위차계로서 ph - mv계, 이온전극용전위차계또는이온농도계등을사용한다. 3.2 이온전극이온전극은분석대상이온에대한고도의선택성이있고이온농도에비례하여전위를발생할수있는전극으로서그감응막의구성에따라표 1과같이분류된다. 각이온전극의구조는그림 2와같다

109 표 1. 이온전극의종류와감응막조성의예 전극의종류 측정이온 감응막의조성 유리막전극 Na + K + + NH 4 산화알루미늄첨가유리 고체막전극 F - LaF 3 Cl - AgCl + 황화은, AgCl CN - AgI + 황화은, 황화은, AgI 격막형전극 Pb 2+ Cd 2+ Cu 2+ - NO 3 PbS + 황화은 Cds + 황화은 CuS + 황화은 - Ni- 베소페난트로닌 / NO 3 Cl - 디메틸디스테아릴암모늄 / Cl - + NH 4 + NH 4 - NO 2 CN - + 노낙틴 / 모낙틴 / NH 4 ph 감응유리 ph 감응유리황화은

110 3.3 비교전극이온전극과조합하여이온농도에대응하는전위차를나타낼수있는것으로서표준전위가안정된전극이필요하다. 일반적으로내부전극으로서염화제일수은전극 ( 칼로멜전극 ) 또는은-염화은전극이많이사용된다. 3.4 자석교반기 회전에의하여열이발생하여액온에변화가일어나서는안되며, 회전속도가일정 하게유지될수있는것이어야한다. 4. 이온전극법의특성 4.1 측정범위 이온농도의측정범위는일반적으로 10-1 mol/l ~ 10-4 mol/l( 또는 10-7 mol/l ) 이다. 4.2 이온강도이온의활량계수는이온강도의영향을받아변동되기때문에용액중의이온강도를일정하게유지해야할필요가있다. 따라서분석대상이온과반응하지않고전극전위에영향을일으키지않는염류를이온강도조절용완충액으로첨가하여시험한다. 4.3 ph 이온전극의종류나구조에따라서사용가능한 ph 의범위가있기때문에주의하여야 한다. 4.4 온도측정용액의온도가 10 상승하면전위기울기는 1가이온이약 2 mv, 2가이온이약 1 mv 변화한다. 그러므로검량선작성시의표준액의온도와시료용액의온도는항상같아야한다. 4.5 교반 시료용액의교반은이온전극의전극범위, 응답속도, 정량한계값에영향을나타낸다. 그러므로측정에방해되지않는범위내에서세게일정한속도로교반해야한다

111 5. 측정방법시료중에방해이온이존재할경우에는적당한방법으로제거하거나 ph 및이온강도를조절하여시료용액으로한다. 먼저각각농도가다른표준액을단계적으로조제하여이온강도조절용액을첨가하고적당량의비커에옮긴다. 이온전극과비교전극을물로깨끗이씻은후수분을제거하고전위차계에연결한다. 이온전극과비교전극을표준액이담긴비커에침적시키고교반하면서전위를측정하여안정될때의값을읽는다. 같은방법으로낮은농도부터높은농도의순서로표준액의전위차를측정하고편대수그래프지 ( semilog 그래프지 ) 의대수축에표준액의농도를, 균등축에전위차를플로트하여검량선을적정한다. 다음에준비된시료에대하여같은방법으로전위차를측정하고작성된검량선으로부터이온농도 ( mg /l) 를산출한다

112 제 4 장항목별시험방법

113 제 4 장항목별시험방법 제 1 항온도 1. 기온 1.1 측정방법 직접측정법 1.2 측정기구 KS B 5316 유리제수은막대온도계 ( 담금선붙이 50 또는 100 ) 1.3 측정위치채수현장에서직사광선이나주위의복사열의영향을받지않고통풍이잘되는지상 1 m 정도의위치에서일정온도가유지되도록충분한시간이경과한다음온도계의눈금을직접읽는다. 2. 수온수온은수중의용존산소량과관계가있다. 채수때의수온은시험할때의수온과큰차이가있을수있으며, 채수때녹아있던성분등이수온의변화에따라이화학적변화를일으킬수있기때문에중요하다. 2.1 측정방법 직접측정법 2.2 측정기구 KS B 5316 유리제수은막대온도계 ( 담금선붙이 50 또는 100 ) 2.3 측정요령 온도계를측정코자하는수중에직접담근상태에서일정온도가유지되도록시간 이경과한다음온도계의눈금을직접읽는다

114 제 2 항투명도 1. 측정원리 지름 30 cm의투명도판 ( 백색원판 ) 을사용하여호소나하천에보이지않는깊이로 넣은다음이것을천천히끓어올리면서보이기시작한깊이를 0.1 m 단위로읽어 투명도를측정하는방법이다. 2. 기구및기기 투명도판 : 무게가약 3 kg인지름 30 cm의백색원판에지름 5 cm의구멍 8 개가 뚫린것 3. 측정방법 날씨가맑고수면이온화할때직사광을피하여배의그늘등에서투명도판을조용히수중에보이지않는깊이로넣은다음천천히끌어올리면서보이기시작한깊이를반복해서측정하고그평균값을 0.1 m 단위로읽고투명도로한다. 비고1) 투명도판의색조차는투명도에미치는영향이적지만원판의광반사능도투명도에영향을미치므로표면이더러울때에는다시색칠하여야한다. 2) 투명도는일기, 시각, 개인차등에의하여약간의차이가생기므로측정조건을기록해두는것이좋다. 3) 흐름이있어줄이기울어질경우에는 2 kg정도의추를달아서줄을세워야하고줄은 10 cm간격으로눈금표시가되어있으며, 충분히강도가있는것을사용한다. 4) 강우시나수면에파도가격렬하게일때는정확한투명도를얻을수없으므로투명도를측정하지않는것이좋다

115

116 제 3 항수소이온농도 ( ph ) 1. 측정원리 ph는수소이온농도를그역수의상용대수로서나타내는값이다. ph는보통유리전극과비교전극으로된 ph 미터를사용하여측정하는데양전극간에생성되는기전력의차를이용하여다음과같은식으로정의된다. phx = phs ± F (Ex-Es) R T phx : 시료의 ph 측정값 phs : 표준용액의 ph( -log 10 [H + ] ) Ex : 시료에서의유리전극과비교전극간의전위차 ( mv ) Es : 표준액에서의유리전극과비교전극간의전위차 ( mv ) F : 패러데이 ( Faraday ) 정수 ( coulomb/mole ) R : 기체정수 ( joule/ o K, mole ) T : 절대온도 ( o K ) 2. ph 표준액 ph 표준액의조제에사용되는물은정제수를증류하여그유출액을 15 분이상끓여서이산화탄소를날려보내고산화칼슘 ( 생석회 ) 흡수관을달아식힌다음사용한다. 조제한 ph 표준액은경질유리병또는폴리에틸렌병에보관하며, 보통산성표준액은 3 개월, 염기성표준액은산화칼슘 ( 생석회 ) 흡수관을부착하여 1 개월이내에사용한다. 2.1 ph 표준액의조제가. 수산염표준액 ( 0.05M ) 테트라수산칼륨 ( ph 측정용 ) 을가루로하여건조용기 ( 실리카겔 ) 에서건조한다음 g을정확하게달아물을넣어정확히 1l로한다. 나. 프탈산염표준액 ( 0.05M ) 프탈산수소칼륨 ( ph 측정용 ) 을가루로하여 110 에서항량이될때까지건조한다음 g을정확하게달아물을넣어녹여정확히 1l로한다

117 다. 인산염표준액 ( 0.025M ) 인산이수소칼륨 ( ph 측정용 ) 및무수인산일수소나트륨 ( ph 측정용 ) 을가루로하여 110 에서항량이될때까지건조한다음인산이수소칼륨 3.40 g 및무수인산일수소나트륨 3.55 g을정확하게달아물에놓여정확히 1l로한다. 라. 붕산염표준액 ( 0.01M ) 붕산나트륨 ( ph 측정용 ) 을건조용기 ( 물로적신브롬화나트륨 ) 중에넣어항량으로한다음 3.81 g을정확하게달아물을넣어녹여정확히 1l로한다. 마. 탄산염표준액 ( 0.025M ) 테시케이터 ( 실리카겔 ) 에서항량이될때까지건조한탄산수소나트륨 ( ph 측정용 ) 2.10 g과 500~650 에서항량이될때까지건조한무수탄산나트륨 ( ph 측정용 ) 2.65 g을정확하게달아물을넣어녹여정확히 1l로한다. 바. 수산화칼슘표준액 ( 0.02M, 25 포화용액 ) 수산화칼슘 ( ph 측정용 ) 을가루로하여 5 g을플라스크에넣고물 1l를넣어잘흔들어섞어 23~27 에서충분히포화시켜그온도에서상층액을여과하여투명한여액을쓴다. 2.2 ph 표준액의온도보정 ph 표준액에대한각온도에서의 ph 값을다음표 1 에표시하였다. 이표에없는 온도의 ph 값은표의값에서내삽법으로구한다. 표 1. 온도별표준액의 ph 값 온도수산염표준액 프탈산염표준액 인산염표준액 붕산염표준액 탄산염표준액 수산화칼슘표준액

118 3. ph 미터의구조 ph 미터는보통유리전극및비교전극으로된검출부와검출된 ph를지시하는지시부로되어있다. 지시부에는비대칭전위조절 ( 영점조절 ) 용꼭지및온도보상용꼭지가있다. 온도보상용꼭지가없는것은온도보상용감온부가있다. ph 미터는다음조작법에따라임의의한종류가 ph 표준액에대하여검출부를물로잘씻은다음 5 회되풀이하여 ph를측정했을때그재현성이 ±0.05 이내의것을쓴다. 4. 시험방법유리전극은미리물에수시간이상담그어둔다. ph 미터는전원을넣어 5 분이상경과후에쓴다. 검출부물로잘씻고부착한물에거름종이등으로가볍게닦아낸다. 온도보상용꼭지가있는것은 ph 표준액의온도와같게맞추고검출부를시료의 ph 값에가까운표준액에담그어 2 분이상된후 ph 미터의지시가온도에있어서는 ph는표준액의 ph 값이되도록영점조절용꼭지를조절한다. 두점에서조절을한경우에는보통인산염 ph 표준액과시료용액의 ph 값에가까운 ph 표준액을써서앞의조작에따라조작한다. 다음에검출부를물로잘씻고부착한물을거름종이등으로가볍게닦아낸다음시료용액에담그어측정값을읽는다. 주1) ph 미터의구조및조작법에상세한것은 ph 미터에따라다르다. ph 11이상의시료는오차가크므로알칼리에서오차가적은특수전극을쓰고필요한보정을한다. 시료의온도는 ph 표준액의온도와동일한것이좋다

119 제 4 항용존산소 ( DO : Dissolved Oxygen ) 1. 윙클러 - 아지드화나트륨변법 1.1 측정원리황간망간과알칼리성요도드칼륨용액을넣을때생기는수산화제일망간이시료중의용존산소에의하여산화되어수산화제이망간으로되고, 황산산성에서용존산소량에대응하는요오드를유리한다. 유리된요오드를티오황산나트륨으로적정하여용존산소의양을정량하는방법이다. 이방법은아질산염 5 mg /l이하, 제일철염 1.0 mg /l이하에서방해를받지않으며, 하천수, 하수및공장폐수에적용한다. 정량범위는 0.1 mg /l이상이다. 1.2 시료의전처리시료가현저히착색되어있거나현탁되어있을때에는용존산소의정량이곤란하며, 시료에활성오니의미생물플록 ( floc ) 이형성되었을때에는정량에방해를준다, 또한시료중에잔류염소와같은산화성물질이공존할경우에도방해를받게되는데이러한경우에는다음과같이시료를전처리하여야한다. 가. 시료의착색, 현탁된경우시료를마개있는 1l 유리병 ( 마개는접촉부분이 45 로절단되어있는것 ) 에기울여서기포가생기지않도록조심하면서가득채우고, 칼륨명반용액 10 ml와암모니아수 1~2 ml를유리병의위로부터넣고공기 ( 피펫의공기 ) 가들어가지않도록주의하면서마개를닫고조용히위아래를바꾸어가면서 1 분간흔들어섞고 10 분간정치하여현탁물을침강시킨다. 상등액을고무판또는폴리에틸렌관을이용하여사이펀작용으로 300 ml용존산소측정병 ( 또는 BOD병, 그림 1 ) 의아래로부터침강된응집물이들어가지않도록주의하면서조용히가득채운다. 나. 황산구리-술퍼민산법 ( 활성오니의미생물의플록 ( floc ) 이형성된경우 ) 시료를마개있는 1l 유리병 ( 마개는접촉부분이 45 로절단되어있는것 ) 에기울여서기포가생기지않도록조심하면서가득채우고황산구리-술퍼민산용액 10 ml를유리병의위로부터넣고공기가들어가지않도록주의하면서마개를닫고조용히위아래를바꾸어가면서 1 분간흔들어섞고 10 분간정치하여현탁물을

120 침강시킨다. 깨끗한상등액을고무판또는폴리에틸렌관을이용하여사이펀작용으로 300 ml용존산소측정병 ( 또는 BOD병, 그림 1 ) 의아래로부터침강된응집물이들어가지않도록주의하면서조용히가득채운다. 다. 산화성물질을함유한경우시료중에는잔류염소등이함유되어있을때에는바탕시험으로별도의용존산소측정병에시료를가득채운다음알칼리성요드화칼륨-아지드화나트륨용액 1 ml와황산 1 ml를넣어마개를닫고조용히위아래를바꾸어가면서약 1 분간흔들어섞는다. 여기에황산망간용액 1 ml를넣고다시위아래를바꾸어가면서흔들어섞은다음이용액 200 ml를취하여삼각플라스크에옮기고전분용액을지시약으로하여 0.025N 티오황산나트륨액으로적정하고그측정값을용존산소량의측정값에보정한다. 라. Fe(Ⅲ) 공존하는경우 Fe(Ⅲ) 100~200 mg /l가함유되어있는시료의경우황산의첨가전불화칼륨용액 ( 300 g/l ) 1 ml를가한다. 1.3 시험방법 시료를가득채운 300 ml용존산소측정병 ( 또는 BOD 병, 그림 1 ) 에황산망간용액 1 ml와알칼리성요오드화칼륨 - 아지드화나트륨용액 1 ml를넣고기포가남지않게 조심하여마개를닫고수회병을회전하면서섞는다. 시료가해수이거나알칼리성에서 산화되기쉬운유기물을함유하는폐수의경우에는 2 분간병을회전하여섞는다. 2 분간이상정치시키고위의맑은액에미세한침전이남아있으면다시회전시켜 혼화한다음정치하여완전히침전시킨다. 100 ml이상의맑은층이생기면마개를열고황산 2.0 ml를병목으로부터넣는다. 마개를 다시닫고갈색의침전물이완전히용해할때까지병을회전시킨다. 용존산소측정 병의용액 200 ml를정확히취하여황색이될때까지 0.025N - 티오황산나트륨액 으로적정한다음, 전분용액 1 ml를넣고액의청색이무색이될때까지적정한다. V₁ 용존산소 ( ml O/l ) = a f V₂ 1000 V₁ -R 0.2 a : 적정에소비된 0.025N - 티오황산나트륨액 ( ml ) f : 0.025N - 티오황산나트륨액의농도계수 ( factor ) v 1 : 전체의시료량 ( ml ) v 2 : 적정에사용한시료량 ( ml ) R : 황산망간용액과알칼리성요오드화칼륨 - 아지드화나트륨용액의첨가량 ( ml )

121 비고 1) 용존산소량을포화율로나타낼경우에는표 1 수중의용존산소포화량으로 부터시료의온도와염소이온농도에일치하는값을찾아내서다음식에따라 계산한다. DO 용존산소포화율 ( % ) = DOt B/ DO : 시료의용존산소량 ( mg /L ) DO t : 순수증의용존산소포화량 ( mg /L ) B : 시료채취시의대기압 ( mm Hg )

122 표 1. 수중의용존산소포화량 온도 ( ) 수중의염소이온량 ( mg Cl/L ) 0 5,000 10,000 15,000 20,000 수중용존산소포화량 ( mg O/L ) 염소이온 100 mg C1/L 에대한용존산소차감량 ( mg O/L )

123 2. 격막전극법 2.1 측정원리시료중의용존산소가격막을통과하여전극의표면에서산화, 환원반응을일으키고이때산소의농도에비례하여전류가흐르게되는데이전류량으로부터용존산소량을측정하는방법이다. 산화성물질이함유된시료나착색된시료에적합하며, 특히윙클러-아지드화나트륨변법을사용할수없는폐하수의용존산소측정에유용하게사용할수있다. 정량범위는 0.5 mg /L이다. 2.2 기구및기기 용존산소측정기 측정용기 ( 용존산소측정병 ) 자석교반기 2.3 시험방법시료와같은온도의 5 % 아황산나트륨용액을가득채운측정용기에전극을담그고밀봉한다음일정한속도로교반하면서기기가안정되면계기판의지시값을영점에맞춘다. 별도로용존산소포화수를측정용기에조용히가득채우고같은조작을하여계기판의지시값을그온도에서의용존산소포화농도값 ( 표 1 ) 에맞춘다. 시료를기포가들어가지않도록조심하여측정용기에가득채우고같은조작을하여계기판의지시값이안정되면용존산소값을직접읽는다

124 제 5 항생물화학적산소요구량 ( BOD : Biochemical oxygen demand ) 1. 측정원리시료를 20 에서 5 일간저장하여두었을때시료중의호기성미생물의증식과호흡작용에의하여소비되는용존산소의양으로부터측정하는방법이다. 시료중의용존산소가소비되는산소의양보다적을때에는시료를희석수로적당히희석하여사용한다. 공장폐수나혐기성발효의상태에있는시료는호기성산화에필요한미생물을식종하여야한다. 2. 시료의전처리 시료가산성또는알칼리성을나타내거나잔류염소등산화성물질을함유하였거나 용존산소가과포화되어있을때에는다음과같이전처리를행한다. 2.1 산성또는알칼리성시료 ph가 6.5~8.5 의범위를벗어나는시료는염산 ( 1+11 ) 또는 4 % 수산화나트륨용액으로시료를중화하여 ph 7로한다. 다만이때넣어주는산또는알칼리의양이시료량의 0.5 % 가넘지않도록하여야한다. 2.2 잔류염소가함유된시료시료 100 ml에아지드화나트륨 0.1 g과요오드화칼륨 1 g을넣고흔들어섞은다음염산을넣어산성으로한다 ( ph 약 1 ) 유리된요오드를전분지시약을사용하여아황산나트륨용액 ( 0.025N ) 으로액의청색이무색으로될때까지적정하여얻은아황산나트륨액 ( 0.025N ) 의소비ml를남아있는시료의양에대응하여넣어준다. 일반적으로잔류염소가함유된시료는 BOD용식종희석수로희석하여사용한다. 2.3 용존산소가과포화된시료 수온이 20 이하이거나 20 일때의용존산소함유량이포화량이상으로과포화 되어있을때에는수온을 23~25 로하여 15 분간통기하고방냉하여수온을 20 로한다. 2.4 시료는시험하기바로전에온도를 20±1 로조정한다

125 3. 시험방법시료 ( 또는전처리한시료 ) 의예상 BOD 치로부터단계적으로희석배율을정하여 3~5 종의희석시료용액을 2 개를한조로하여조제한다. 예상 BOD치에대한사전경험이없을때에는다음과같이희석하여시료용액을조제한다. 강한공장폐수는 0.1~1.0 %, 처리하지않은공장폐수와침전된하수는 1~5 %, 처리하여방류된공장폐수는 5~25 %, 오염된하천수는 25~100 % 의시료가함유되도록희석조제한다. BOD용희석수또는 BOD용식종희석수를사용하여시료용액을희석할때에는 2 L 부피실린더에공기가갇히지않게조심하면서 ½용량만큼채우고, 시료 ( 또는전처리한시료 ) 적당량을넣은다음 BOD용희석수또는식종희석수로희석배율에맞는눈금의높이까지채운다. 공기가갇히지않게젖은막대로조심하면서섞고 2 개의 300 ml BOD병에완전히채운다음, 한병은마개를꼭닫아물로마개주의를밀봉하여 BOD용배양기에넣고 20 어두운곳에서 5일간배양한다. 나머지한병은 15 분간방치후에희석된시료자체의처음용존산소를측정하는데사용한다. 같은방법으로미리정하여진희석배율에따라몇조 ( 組 ) 의희석시료용액을조제하여 2 개의 300 ml BOD병에완전히채운다음위와같이실험한다. 처음의희석시료자체의용존산소량과 20 에서 5 일간배양할때소비된용존산소의양을제3항용존산소측정법에따라측정하여구한다. 5일간저장한다음산소의소비량이 40~70 % 범위안의희석시료용액을선택하여처음의용존산소량과 5 일간배양한다음남아있는용존산소량의차로부터 BOD를계산한다. 다만시료를식종하여 BOD를측정할때는실험에사용한식종액을희석수로단계적으로희석하여이하위의실험방법에따라실험하고배양후의산소소비량이 40~70 % 범위안에있는식종희석수를선택하여배양전후의용존산소량과식종액함유율을구하고시료의 BOD 값을보정한다. 4. BOD용희석수및 BOD용식종희석수의검토시료 ( 또는전처리한시료 ) 를 BOD용희석수 ( 또는 BOD용식종희석수 ) 를사용하여희석할때에이들중에독성물질이함유되어있거나구리, 납및아연등의금속이온이함유된시료 ( 또는전처리한시료 ) 는호기성미생물의증식에영향을주어정상적인 BOD값을나타내지않게된다. 이러한경우에다음의시험을행하여적정여부를검토한다. 글루코오스및글루타민산각 150 mg씩을취하여물에녹여 1,000 ml로한액 5~10 ml를 3 개의 300 ml BOD병에넣고 BOD용희석수 ( 또는 BOD용식종희석수 ) 를완전히채운다음이하 BOD 시험방법에따라시험할때에측정하여얻은 BOD 값은 220±20 mg /L의범위안에있어야한다. 얻은 BOD 값의편차가클때에는 BOD용희석수 ( 또는 BOD용식종희석수 ) 및시료에문제점이있으므로시험전반에대한검토가필요하다

126 5. BOD 계산 식종하지않은시료의 BOD BOD( mg /L ) = (D 1 -D 2 ) P 식종희석수를사용한시료의 BOD BOD( mg /L ) = [ (D 1 -D 2 ) - (B 1 -B 2 ) f ] P D 1 : 희석 ( 조제 ) 한시료용액 ( 시료 ) 의 15분간방치한후의 DO( mg /L ) D 2 : 5일간배양한다음의희석 ( 조제 ) 한시료용액 ( 시료 ) 의 DO( mg /L ) B 1 : 식종액의 BOD를측정할때희석된식종액의배양전의 DO( mg /L ) B 2 : 식종액의 BOD를측정할때희석된식종액의배양후의 DO( mg /L ) f : 시료의 BOD를측정할때희석시료중의식종액함유율 ( x %) 에대한식종액의 BOD를측정할때희석한식종액중의식종액함유율 ( y % ) 의비 ( x/y ) p : 희석시료중시료의희석배수 ( 희석시료량 / 시료량 )

127 제 6 항화학적산소요구량 ( COD : Chemical Oxygen Demand ) 1. 과망간산칼륨에의한화학적산소요구량 1.1 산성 100 에서과망간산칼륨에의한화학적산소요구량 측정원리시료를황산산성으로하여과망간산칼륨일정과량을넣고 30 분간수욕상에서가열반응시킨다음소비된과망간산칼륨량으로부터이에상당하는산소의양을측정하는방법이다. 염소이온이 2,000 mg /L이하인반응시료 ( 100 ml ) 에적용하며그이상일때는 2. 알칼리성법에따른다 시험방법 300 ml둥근바닥플라스크에시료적당량 ( 주 1 ) 을취하여물을넣어전량을 100 ml로 하고, 황산 ( 1+2 ) 10 ml를넣고황산은분말약 1 g( 주 2 ) 을넣어세게흔들어 준다음수분간방치하고, 0.025N- 과망간산칼륨액 10 ml를정확히넣고둥근바닥 플라스크에냉각관을붙이고물중탕의수면이시료의수면보다높게하여끓는물중탕 중에서 30 분간가열한다. 냉각관의끝을통하여물소량을사용하여씻어준다음 냉각관을떼어내고, 수산나트륨용액 ( 0.025N ) 10 ml를정확하게넣고 60~80 를 유지하면서 0.025N- 과망간산칼륨용액을사용하여액의색이엷은홍색을나타낼 때까지적정한다. 따로물 100 ml를사용하여같은조건으로바탕시험을행한다 COD( mg O/L ) = ( b-a ) f 0.2 V a : 바탕시험적정에소비된 0.025N-과망간산칼륨용액 ( ml ) b : 시료의적정에소비된 0.025N- 과망간산칼륨용액 ( ml ) f : 0.025N- 과망간산칼륨용액농도계수 ( factor ) V : 시료의량 ( ml ) 주 1) 시료의양은 30 분간가열반응한후에 0.025N 과망간산칼륨액이처음첨가한 양의 50~70 % 가남도록채취한다. 다만시료의 COD 값이 10 mg /L 이하일 경우에는시료 100 ml를취하여그대로시험하며, 보다정확한 COD 값이요구될 경우에는 0.025N 과망간산칼륨액의소모량이처음가한양의 50 % 에접근 하도록시료량을취한다

128 주2) 황산은분말 1 g 대신 20 % 질산은용액 5 ml또는질산은분말 1 g을첨가해도좋다. 다만, 시료중염소이온이존재할경우에는염소이온의당량만큼황산은또는질산은을가해준다음규정된양을추가로첨가한다. 염소이온 1 g에대한황산은의당량은 4.4 g이며, 질산은의당량은 4.8 g이다. ( 예 ) 은염은첨가량 ( g ) = 시료중염소이온의양 ( g ) 염소이온 1 g에대한은염의당량 ( g ) + 1 g 1.2 알칼리성 100 에서과망간산칼륨에의한화학적산소요구량 측정원리시료를알칼리성으로하여과망간산칼륨일정과량을넣고 60 분간수욕상에서가열반응시키고요도드화칼륨및황산을넣어남아있는과망간산칼륨에의하여유리된요오드의양으로부터산소의양을측정하는방법이다 시험방법 300 ml둥근바닥플라스크에시료적당량을취하여 ( 주 1 ) 물을넣어 50 ml로하고 10 % 수산화나트륨용액 1 ml를넣어알칼리성으로한다. 여기에 0.025N- 과망간 산칼륨용액 10 ml를정확히넣은다음둥근바닥플라스크에냉각관을붙이고물중탕의 수면이시료의수면보다높게하여끓는물중탕중에서 60 분간가열한다. 냉각관의 끝을통하여물소량을사용하여씻어준다음냉각관을떼어내고 10 %( W/V ) 요오드화칼륨용액 1 ml를넣어방냉한다. 4 %( W/V ) 아지드화나트륨한방울을 가하고황산용액 ( 2+1 ) 5 ml를넣어유리된요오드를지시약으로전분용액 2 ml를 넣고 0.025N- 티오황산나트륨용액으로무색이될때까지적정한다. 따로시료량과 같은양의물을사용하여같은조건으로바탕시험을행한다 COD( mg O/L) = ( a-b ) f 0.2 V a : 바탕시험적정에소비된 0.025N-티오황산나크륨용액 ( ml ) b : 시료의적정에소비된 0.025N- 티오황산나트륨용액 ( ml ) f : 0.025N- 티오황산나트륨용액농도계수 ( factor ) V : 시료의량 ( ml ) 주 1) 시료의양은가열반응하고남은 0.025N- 과망간산칼륨용액이처음첨가한양의 50~70 % 가남도록채취한다. 보다정확한 COD 값이요구될경우에는 0.025N- 과망간산칼륨액의소모량이처음가한양의 50 % 에접근하도록 시료량을취한다

129 2. 중크롬산칼륨에의한화학적산소요구량 2.1 측정원리시료를황산산성으로하여중크롬산칼륨일정과량을넣고 2 시간가열반응시킨다음소비된중크롬산칼륨의양을구하기위해환원되지않고남아있는중크롬산칼륨을황산제일철암모늄용액으로적정하여시료에의해소비된중크롬산칼륨을계산하고이에상당하는산소의양을측정하는방법이다. 따로규정이없는한해수를제외한모든시료의중크롬산칼륨에의한화학적산소요구량을필요로하는경우에이방법에따라시험한다. 2.2 기구 250 ml삼각플라스크또는둥근바닥플라스크로서 의냉각관과서로갈아맞춘것 300 mm리비히냉각관또는이와동등한것으로서 의플라스크와서로갈아맞춘것 열판 ( 1.4 w/ cm2 ) 또는맨틀히터 ( mantle heater ) 2.3 시험방법 250 ml플라스크에시료 ( 주 1 ) 적당량 ( 주 2 ) 를넣고여기에황산제이수은약 0.4 g ( 주 3 ) 을넣은다음, 물을넣어 20 ml로하여잘흔들어섞고몇개의비등석을넣은 다음천천히흔들어주면서황산은용액 2 ml를천천히넣고, 0.025N- 중크롬산칼륨 용액 10 ml를정확히넣은다음플라스크에냉각관을연결시키고냉각수를흘린다. 열린냉각관끝에서황산은용액 28 ml를천천히흔들면서넣은다음냉각관끝을 작은비커로덮고열판에서 2 시간동안가열한다. 방냉키고물약 10 ml로냉각관을씻은다음냉각관을떼어내고전체액량이약 140 ml가 되도록물을넣고 o- 페난트로린제일철용액 2~3 방울넣은다음 0.025N- 황산제일 철암모늄액을사용하여액의색이청록색에서적갈색으로변할때까지적정한다. 따로물 20 ml를사용하여같은조건으로바탕시험을행한다 COD( mg O 2 /L ) = ( b-a ) f 0.2 V a : 적정에소비된 0.025N-황산제일철암모늄액 ( ml ) b : 바탕화면에소비된 0.025N- 황산제일철암모늄액 ( ml ) f : 0.025N- 황산제일철암모늄용액의농도계수 ( factor ) V : 시료의양 ( ml )

130 주1) 현탁물질을포함하는경우에는잘흔들어섞어균일하게한다음신속하게분취한다. 주2) 2 시간동안끊인다음최초에넣은 0.025N-중크롬산칼륨용액의약 ½이남도록취한다. 주3) 염소이온의양이 40 mg이상공존할경우에는 HgSO 4 : Cl - = 10 : 1의비율로황산제이수은의첨가량을늘린다. 비고1) 고농도시료의경우에는시험방법의중크롬산칼륨액과황산제일철암모늄액 0.025N 규정농도와다른 0.25N 농도를사용하는것을제외하고는 시험방법 과동일하게따른다. - 비고2) 아질산성이온 ( NO 2 ) 1 mg으로 1.1 mg의산소 ( O ) 를소비한다. 아질산성이온에의한방해를제거하기위해시료에존재하는아질산성질소 ( NO 2 -N ) mg당술퍼민산 10 mg을첨가한다. 비고3) 이방법에서는수은화합물을사용하므로시험후폐액처리에특히주의하여야한다

131 제 7 항색도 1. 투과율법 1.1 측정원리색도의측정은시각적으로눈에보이는색상에관계없이단순색도차또는단일색도차를계산하는데아담스-니컬슨 ( Adams-Nickerson ) 의색도공식을근거로하고있다. 예를들면, 육안적으로두개의서로다른색상을가진 A, B가무색으로부터같은정도로색도가있다고판정되면, 이들의색도값 ( ADMI 값 : American Dye Manufacturers Institute ) 도같게된다. 이방법은백금-코발트표준물질과아주다른색상의폐하수에서뿐만아니라표준물질과비슷한색상의폐하수에도적용할수있으며, 시료중부유물질은제거하여야한다. 1.2 기구및기기 광전분광광도계 여과장치제 4장제 8항부유물질시험법 1.2 기구및기기와같다. 1.3 시험방법시료적당량을제 4장제 8항부유물질시험법 1.3 시험방법에따라시험한여액을시료용액으로한다. 미리세제를사용하여잘닦고물로잘씻어준층장 10 mm흡수셀을시료용액으로 2 회씻어준다음시료용액을채워흡수셀의표면을깨끗이닦은다음, 물을바탕시험액으로하여 10 분할법의선정파장표의각파장 ( nm ) 에서시료용액의투과율 ( % ) 을측정한다. 따로색도표준액을 10.0, 20.0, 30.0, 40.0 및 50.0 ml를각각정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고물을넣어정확히 100 ml씩으로하여시료용액과같은방법으로흡수셀에옮기고물을바탕시험액으로하여 10 분할법의선정파장표의각파장 ( nm ) 에서각농도별색도표준액의투과율 ( % ) 을측정한다

132 표 분할법의선정파장 ( 단위 : nm ) X Y Z 표 분할법의보정계수 X Y Z 계산방법 각파장에서의 X. Y. Z의투과율 ( % ) 을측정하고, X. Y, Z의보정계수를사용하여다음과같이 X. Y. Z의값을구한다. X = X i Y = Y i Z = Z i 이때 X, Y, Z의값을표준액인경우 X R, Y R, Z R 로시료용액의경우는 X S, Y S, Z S 으로표시하고, 다만바탕시험액의값은 X C = Y C = Z C = 로일정한값을갖는다. 이들값 X R, Y R, Z R, X S, Y S, Z S. X C, Y C, Z C 로부터표4 X Y Z V X, V Y, V Z 표를사용하여대응하는 V XR, V YR, V ZR, V XS, V YS, V ZS, V XC, V YC, V ZC 값을각각구한다

133 다음식에의해각표준액의색차값 ( DE ) 을계산한다. DE = {(0.23 V Y ) 2 + [ (V X -V Y )] 2 + [0.4 (V Y -V Z ) 2 ] 1/2 다만, V Y = V YR - V YC 이므로 (V X -V V ) = (V XR - V YR ) - (V XC - V YC ) (V Y -V Z ) = (V YR - V ZR ) - (V YC - V ZC ) 위식에의해구해진각표준액의색차값 ( DE ) 으로부터각표준액의보정계수 ( Fn ) 를 구하고전체평균값을표준액의보정계수 ( F ) 로한다. Fn = (CU)n (b) (DE)n F = (F 1 + F 2 + F F n ) / n (CU)n = 표준액의색도 (DE)n = 표준액의색차값 b = 흡수셀의층장 ( cm ) 시료의색차값 ( DE ) 을 와같은방법으로구한다. 다만, V Y = V YS - V YC 이므로 (V X -Y V ) = (V XS - V YS ) - (V XC - V YC ) (V Y -Y Z ) = (V YS - V ZS ) - (V YC - V ZC ) 여기서구하여진시료의색차값 ( DE ) 을사용하여아래식에따라색도값을계산한다. 색도 ( 도 ) = (F)(DE) b F : 표준액의보정계수 DE : 시료의색차값 b : 흡수셀의길이 ( cm ) 비고1) 시료용액의색도가 250도이하인경우에는흡수셀의층장이 5 cm인것을사용한다. 2) 색도를계산할때에는표 3의색도계산양식을이용하면편리하다

134 표 3. 색도계산양식 3자극치 V x V y V z (V x -V y ) (V y -V z ) Xc = Yc = Zc = X S (X R )= Y S(Y R)= Z S (Z R )= ⑴ V y = ⑵ 0.23 V y = (0.23 V y) 2 = ⑶ (V x -V y )= { (V x -V y )} 2 = ⑷ (V y -V z )= ⑸ 0.4 (V y-v z) = {0.4 (V y-v z)} 2 = ⑹ 합계 = ⑺ DE = 합계 = = 보정계수 ( F ) = 셀의층장cm ( b ) = ⑻ 색도 ( 도 ) = F DE b = ( ) ( ) ( ) =XYZ V X V Y V Z

135 XYZ V x V y V z XYZ V x V y V z

136 XYZ V x V y V z XYZ V x V y V z

137 XYZ V x V y V z XYZ V x V y V z

138 XYZ V x V y V z XYZ V x V y V z

139 XYZ V x V y V z XYZ V x V y V z ,

140 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

141 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

142 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

143 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

144 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

145 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

146 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

147 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

148 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

149 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

150 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

151 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

152 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

153 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

154 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

155 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

156 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

157 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

158 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

159 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

160 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

161 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

162 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

163 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

164 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

165 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

166 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

167 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

168 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

169 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

170 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

171 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

172 XYZ Vx Vy Vz XYZ Vx Vy Vz

173 제 8 항부유물질 ( SS : Suspended Solid ) 1. 유리섬유거름종이법 1.1 측정원리 미리무게를단유리섬유거름종이 ( GF/C ) 를여과기에부착하여일정량의시료를여 과시킨다음항량으로건조하여무게를달아여과전 후의유리섬유거름종이의무게차 를산출하여부유물질의양을구하는방법이다. 정량범위는 5 mg이상이다. 1.2 기구및기기 여과기 [ 그림 1 ] 유리섬유거름종이 ( GF/C ) 1.3 시험방법유리섬유거름종이 ( GF/C 또는이와동등한규격으로서지름 47 mm의것 ) 를여과기에부착하여미리물 20 ml씩으로 3 회흡입여과하여씻은다음시계접시위에놓고 105~110 의건조기안에서 2 시간건조시켜황산건조용기에넣어방냉하고항량으로하여무게를정밀히달고여과기에부착시킨다. 시료적당량 ( 주1 ) 을여과기에주입하면서흡인여과한다 ( 주2 ). 시료용기및여과기의기벽에붙어있는부착물질을소량의물로거름종이위에씻어내린다음즉시거름종이상의잔류물을물 10 ml씩으로 3 회씻어주고약 3 분동안계속하여흡입여과한다. 다만용존염류가다량함유되어있다고판단되는시료일경우에는세척조작을 2~3 회추가한다

174 유리섬유거름종이를핀센트로주의하면서여과기에서끄집어내어시계접시위에 놓고 105~110 의건조기안에서 2 시간건조시켜황산건조용기에넣어방냉한 다음항량으로하여무게를정밀히단다. 여과전후의유리섬유거름종이무게의차를구하여부유물질의양으로한다. 부유물질 ( mg /L ) = ( b-a ) 1,000 V a : 시료여과전의유리섬유거름종이무게 ( mg ) b : 시료여과후의유리섬유거름종이무게 ( mg ) V : 시료의량 ( ml ) 주 1) 입경이큰고형물을함유한시료는세게흔들어섞은다음 2 mm의체를통과한 시료를가지고실험한다. 주 2) 사용한여과기의하부여과재를중크롬산황산용액에넣어침전물을녹인다음 정제수로씻어준다

175 제 9 항노말헥산추출물질 1. 측정원리폐수중의비교적휘발되지않는탄화수소, 탄화수소유도체, 그리스유상물질및광유류를함유하고있는시료를 ph 4이하의산성으로하여노말헥산층에용해되는물질을노말헥산으로추출하여노말헥산을증발시킨잔류물의무게로부터구하는방법이다. 다만, 광유류의양을시험하고자할경우에는활성규산마그네슘 ( 플로리실 ) 칼럼을이용하여동식물유지류를흡착 제거하고유출액을같은방법으로구할수있다. 정량범위는 2.200mg이고표준편차율은 20.5% 이다. 폐수중의비교적휘발되지않는탄화수소, 탄화수소유도체, 그리스유상물질및광유류가노말헥산층에용해되는성질을이용한방법으로시료를직접사용하거나, 시료에적당한응집제또는흡착제등을넣어노말헥산추출물질을포집한다음노말헥산으로추출하고잔류물의무게를측정하여노말헥산추출물질의양으로하는방법이있다. 시료용기는유리병을사용하여야하며, 채취한시료전량을사용하여시험한다. 2. 기구및기기 80 온도조절이가능한전기열판또는전기맨틀 증발용기 : 알루미늄박으로만든접시, 비커또는증류플라스크로써용량이 50~250 ml인것. 자형연결관및리히비히냉각관 ( 증류플라스크를사용한경우 ) 활성규산마그네슘칼럼 ( 주 1): 안지름약 10mm, 길이약 150mm의코크가부착된유리관에유리섬유 ( 석영섬유 ) 를깔고 mm높이로활성규산마그네슘 ( 주 2) 을기포가혼입되지않도록노말헥산과함께충전한것. 3. 시험방법 총노말헥산추출물질시료적당량 ( 노말헥산추출물질로서 5.200mg해당량, 주 3) 을분액깔때기에넣고메틸오렌지용액 (0.1 W/V%) 2.3 방울을넣고황색이적색으로변할때까지염산 (1+1) 을넣어 ph 4이하로조절한다. 시료의용기는노말헥산 20ml씩으로 2회씻어서씻은액을분액깔때기에합하고마개를하여 2분간세게흔들어섞고정치하여노말헥산층을분리한다.( 주 4) 수층에한번더시료용기를씻은노말헥산 20 ml를넣어흔들어섞고정치하여노말헥산층을분리하여앞의노말헥산층과합한다. 물 20ml씩으로수회씻어준다음수층을버리고노말헥산층에무수황산나트륨을수분이제거될만큼넣어흔들어섞고수분을제거한다

176 분액깔때기의꼭지부분에건조거름종이를사용하여여과한다. 다만, 분액깔때기의꼭지부분이막힐경우따로무수황산나트륨을건조거름종이에충전하여여과한다. 노말헥산을항량으로하여무게를미리단증발용기에넣고분액깔때기에노말헥산소량을넣어씻어준다음여과하여증발용기에합한다. 다시노말헥산 5ml씩으로거름종이를 2회씻어주고씻은액을증발용기에합한다. 증발용기가알루미늄박으로만든접시또는비커일경우에는용기의표면을깨끗이닦고 80 로유지한전기열판또는전기맨틀에넣어노말헥산을날려보낸다. 증류플라스크일경우에는 U자형연결관과냉각관을달아전기열판또는전기맨틀의온도를 80 로유지하면서매초당한방울의속도로증류한다. 증류플라스크안에 2ml가남을때까지증류한다음냉각관의상부로부터질소가스를넣어주어증류플라스크안의노말헥산을완전히날려보내고증류플라스크를분리하여실온으로냉각될때까지질소를보내면서완전히노말헥산을날려보낸다. 증발용기외부의습기를깨끗이닦고 80±5 의건조기중에 30분간건조하고실리카겔건조용기에넣어정확히 30분간방냉하여무게를단다. 따로시험에사용된노말헥산전량을미리항량으로하여무게를단증발용기에넣어시료와같이조작하여노말헥산을날려보내어바탕시험을행하고보정한다. 총노말헥산추출물질의무게 ( mg /l)=(a-b) 1,000 V a: 시험전후의증발용기의무게차 ( mg ) b: 바탕시험전후의증발용기의무게차 ( mg ) V: 시료의양 ( ml ) 노말헥산추출물질중광유류앞선방법의총노말헥산추출물질의무게를측정한증발용기중에노말헥산 ml를넣고가온하여녹이고 100ml부피플라스크에옮기고 ( 주5) 증발용기에잔류물 ( 주 6) 이남지않도록다시 20.30ml의노말헥산으로녹여이를앞의 100ml부피플라스크에합한다. 헥산 10ml씩으로증발용기를 2.3회씻고, 씻은액을전량 100ml부피플라스크에합한다음노말헥산으로표선을맞춘다. 이노말헥산용액전량을 1.2ml /min의속도로활성규산마그네슘칼럼을통과시킨다. 처음의유출액약 20ml ( 주 7) 는버리고그다음유출액 50ml를증류플라스크에넣어앞의방법과같은방법으로시험한다. 따로시험에사용된노말헥산 50ml를증류플라스크에넣어시료와같은방법으로조작하여바탕시험을행하고보정한다

177 노말헥산추출물질중광유류의무게 ( mg /l)=(a-b) 100 1, V a: 유출액중의노말헥산추출물질의무게 ( mg ) b: 바탕시험에의한잔류물의무게 ( mg ) V: 노말헥산추출물질시험에사용된시료의양 ( ml ) 노말헥산추출물질중동 식물유지류노말헥산추출물질중동 식물유지류의양은다음계산식으로구한다. 노말헥산추출물질중동 식물유지류의무게 (mg/l)= 총노말헥산추출물질의무게 (mg/l)-노말헥산추출물질중광유류의무게 (mg/l) 주1) 활성규산마그네슘칼럼과동등이상의성능을나타낼수있는것을사용할수있다. 주2) 활성규산마그네슘은입경 μm로서사용전에노말헥산으로씻고 150 로약 2시간가열한후진공건조용기에서식힌것주3) 노말헥산추출물질의함량이낮은경우 (5mg/l이하) 에는 5l용량시료병에시료 4l를채취하여염화제이철용액 [ 염화제이철 (FeCl3 6H2O) 30g을염산 (1+11) 100ml에녹인용액 ] 4ml를넣고자석교반기로교반하면서탄산나트륨용액 (20W/V%) 을넣어 ph 7.9로조절한다. 5분간세게교반한다음방치하여침전물이전체액량의약1/10이되도록침강하면상등액을조용히흡인하여버린다. 잔류침전층에염산 (1+1) 을넣어 ph 약 1로하여침전물을녹이고이용액을분액깔때기에옮겨이하시험방법에따라시험한다. 주4) 추출시에멀죤을형성하여액층이분리되지않거나노말헥산층이혼탁할경우에는분액깔때기안의수층을원래의시료용기에옮기고, 에멀죤층또는헥산층에약 10g의염화나트륨또는황산암모늄을넣어환류냉각관 ( 약 300mm ) 을부착하고 80 물중탕중에서약 10분간가열분해한다음시험방법에따라시험한다. 주5) 노말헥산추출물질중에동식물유지류등의극성물질약 200mg이상을함유할경우에는용량 100ml이상의용기를사용하여 200mg이하에서와같이조제한다. 주6) 잔류물중에염류가잔류할경우에는유리막대등으로잔류물을잘게분쇄하고노말헥산을가해노말헥산추출물질을용출시킨다. 주7) 비휘발성탄화수소의유출점은활성규산마그네슘의입도와결합등에따라다소다를수있으므로미리확인하여두면좋다

178 제 10 항염소이온 1. 질산은적정법 1.1 측정원리 염소이온과질산은이정량적으로반응한다음과잉의질산은이크롬산과반응하여 크롬산은의침전으로나타나는점을적정의종말점으로하여염소이온의농도를측정 하는방법이다. 정량범위는 0.7 mg /l 이상이다. 1.2 시험방법 시료 50 ml ( 주 1 ) 을정확히취하여삼각플라스크에넣고수산화나트륨용액 ( 4 W/V% ) 또는황산용액 ( 1+35 ) 을사용하여중화한다음크롬산칼륨용액 1 ml를넣어 0.01N- 질산은용액으로적정한다. 적정의종말점은엷은적황색침전이나타날때로하며, 따로물 50 ml를취하여바탕시험액으로하고시료의시험방법에따라시험하여보정한다. 염소이온 ( mg C1/1 ) = ( a-b ) f ,000 V a : 시료의적정에소비된 0.01N- 질산은용액 ( ml ) b : 바탕시험액의적정에소비된 0.01N- 질산은용액 ( ml ) f : 0.01N- 질산은용액의농도계수 v : 시료량 ( ml ) 주 1) 시료가심하게착색되어있을경우에는칼륨명반현탁액 ( KA1(SO 4 ) 2 12H 2 O 125 g 을물에녹여 1 L 로한용액을 60 에서가온하고암모니아수 55 ml를 조금씩넣어수산화알루미늄을침전시킨다음약 1 시간방치하여상등액을버린 현탁액 ) 3 ml를넣어탈색시킨다음상등액을취하여시험한다. 2. 이온크로마토그래피법 2.1 측정원리이온크로마토그래프를이용하여염소이온을정량하는방법이다. 이방법은소량의시료로정량이가능하며, 시험조작이간편하고재현성도우수하다. 정량범위는 0.1 mg Cl - /l이상이다. 2.2 기구및기기 이온크로마토그래프 5 ml실린지 2.3 시험방법제 3장제 5항이온크로마토그래피법에따라시험한다

179 제 11 항암모니아성질소 1. 흡광광도법 ( 인도페놀법 ) 1.1 측정원리 암모늄이온이차아염소산의공존아래에서페놀과반응하여생성하는인도페놀의 청색을 630 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 0.002~0.04 mg NH 3 -N 이고, 표준 편차율은 10~2 % 이다. 1.2 기구및기계 광전광도계또는광전분광광도계 증류장치 ( 그림 1 ) 1.3 시료의전처리 시료가탁하거나착색물질등의방해물질이함유되어있는경우에는다음과같이증류하여그유출액으로시험한다. 시료적당량 ( 암모니아성질소로서 0.03 mg이상함유량 ) 을취하여수산화나트륨용액 ( 4 W/V% ) 또는황산 ( 1+35 ) 으로중화하고증류플라스크에옮긴다. 산화마그네슘 0.3 g과비등석수개를넣고물을넣어액량을약 350 ml로한다. 수기는 200 ml용량의부피실린더에 0.05N 황산용액 50 ml을넣고그림 1과같이증류장치를조립한다음가열하여 5~7 ml /min 유출속도로증류한다. 수기의액량이약 150 ml가되면증류를중지하고냉각관을증류플라스크와분리하여냉각관의내부를소량의물로씻기어수기에합하고물을넣어 200 ml로한다

180 1.4 시험방법 전처리또는여과한시료적당량 ( 암모니아성질소로서 0.04 mg이하함유 ) 을취하여 50 ml용량플라스크에넣고물을넣어약 30 ml로한다음나트륨페놀라이트용액 10 ml와니토로프루싯나트륨용액 1 ml를넣고조용히섞은다음차아염소산나트륨용액 ( 암모니아성질소시험용 ) 5 ml를넣어조용히섞는다. 물을넣어표선까지채운다음액온을 20~25 로하여약 30분간방치하고이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로물 30 ml를취하여이하시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 630 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터암모니아성질소의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성암모니아성질소표준액 ( mg NH 3 -N/ ml ) 0.5~10 ml를단계적으로취하여물을넣어약 30 ml로하고이하시료의시험방법에따라시험하여암모니아성질소의양과흡광광도와의관계선을작성한다. 비고1) 시험에사용하는물, 용액및표준액의조제에사용하는물은증류수또는탈염수 ( 이온교환수지로서탈염정제한물 ) 를사용하여야한다. 다만, 증류수또는탈염수일지라도 24 시간을초과하여사용할수없다. 2) 시료중에잔류염소가존재하면정량을방해하므로시료를증류하기전에아황산나트륨용액 ( 아황산나트륨 0.9 g을물에녹여 1 L로할것 ) 1 ml을넣어잔류염소를제거한다. 이양은시료 500 ml중에있는잔류염소 1 mg을제거할수있다. 3) 시료를전처리하지않는경우 Ca 2+, Mg 2+ 등에의하여발색시침전물이생성될수도있다. 이러한경우에는발색시료를원심분리한다음상등액을취하여흡광도를측정하거나또는시료의전처리를행한다음다시시험하여야한다. 2. 이온전극법 2.1 측정원리 시료에수산화나트륨을넣어 ph 11~13 으로하여암모늄이온을암모니아로변화시킨 다음암모니아이온전극을이용하여암모니아성질소를정량하는방법이다. 정량범위는 0.08~80 mg NH 3 -N/l 이며표준편차는 20~5 % 이다

181 2.2 기구및기기 전위차계 : -700~+700 mv 범위에서 0.1 mv까지읽을수있는고압력저항전위차계로서 ph-mv미터, 이온전극용전위차계등 암모니아전극 비교전극 자석교반기 : 회전에의하여열이발생하지않는것 증류장치 ( 그림 1 ) 2.3 시료의전처리 제 11 항 1.3 에따라시험한다. 2.4 시험방법전처리한시료또는시료적당량 ( 암모니아성질소로서 16 mg이하함유 ) 을취하여 200 ml비커에넣고수산화나트륨용액 ( 10 W/V% ) 을넣어 ph 약 8로조절하고물을넣어 200 ml로한다. 이액 100 ml를취하여 150 ml비커에옮기고전극을담근다음자석교반기로기포가발생하지않을정도로일정하게교반한다. 속히수산화나트륨용액 ( 10 W/V% ) 1 ml를넣고전위차계로부터전위가안정될때의값을측정하여 ( 주1 ) 미리작성한검량선으로부터암모니아성질소의양을구하고농도 ( mg /l) 를산출한다. 검량선의작성암모니아성질소표준원액 ( 0.1 mg NH 3 -N/ ml ) 을단계적으로취하여물을넣어정확히 0.1, 1, 10, 100 mg /l로조제한표준액 100 ml씩을 150 ml비커에각각옮기고낮은농도로부터이하시험방법에따라시험하여각표준액의전위를측정한다. 편대수그래프지 ( Semilog graph paper ) 를이용하여대수측에농도를, 균등축에측정전위값을기재하여암모니아성질소의농도와전위값과의관계선을작성한다. 주1) 표준액과시료의측정시온도차는 ±1 이하이어야하며, 교반속도는기포가일어나지않는범위내에서세게그리고일정하게유지되어야한다. 3. 중화적정법 3.1 측정원리시료를증류하여유출되는암모니아를황산용액에흡수시키고수산화나트륨용액으로잔류하는황산을적정하여암모니아성질소를정량하는방법이다. 정량범위는 0.2~30 mg NH 3 -N이며표준편차는 10~3 % 이다

182 3.2 기구및기기 증류장치 ( 그림 1 ) 3.3 시료의전처리 제 11 항 1.3 에따라시험한다. 3.4 시험방법 전처리한시료전량을 500 ml삼각플라스크에옮기고메틸레드-브롬크레졸그린혼합지시약 5~7 방울을넣은다음 0.05N- 수산화나트륨용액으로액의색이자회색 ( ph 4.8 ) 을나타낼때까지적정한다. 따로 0.05N-황산 50 ml를정확히취하여 500 ml삼각플라스크에넣고메틸레드-브롬크레졸그린혼합지시에 5~7 방울을넣은다음 0.05N- 수산화나트륨용액으로액의색이자회색 ( ph 4.8 ) 을나타낼때까지적정하여 0.05N-황산 50 ml에서대응하는 0.05N-수산화나트륨용액의ml수를구하고다음식에따라암모니아성질소의농도를산출한다. 암모니아성질소 ( mg NH 3 -N/l ) = ( b-a ) f 1,000 V 0.7 b : 0.05 N 황산 50 ml의적정에소비된 0.05 N 수산화나트륨용액의양 ( ml ) a : 시료의적정에소비된 0.05N-수산화나트륨용액의양 ( ml ) f : 0.05N-수산화나트륨용액의농도계수 v : 시료량 ( ml )

183 제 12 항아질산성질소 1. 흡광광도법 ( 디아조화법 ) 1.1 측정원리아질산이온을슬퍼닐아미드와반응시켜디아조화하고 α-나프틸에틸렌디아민이염산염과반응시켜생성된아조화합물의홍색의흡광도를 540 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 ~0.002 mg NO 2 -N이고표준편차율은 10~3 % 이다. 1.2 기기 광전광도계또는광전분광광도계 1.3 시료의전처리시료를여과하여도탁하거나착색되어있을경우에는시료 100 ml에대하여칼륨명반용액 ( 황산알루미늄칼륨 12수화물 5 g을물에녹여 100 ml로한액 ) 2 ml를넣고수산화나트륨용액 ( 4 W/V% ) 을넣어수산화알루미늄의플록을형성시킨다음수분간방치하고여과하여여액을시료로한다. 다만이때는표준액에대해서도같은조작을하여검량선을작성한다. 1.4 시험방법여과한시료적당량 ( 아질산성질소로서약 0.01 mg이하함유 ) 을취하고 50 ml비색관에넣고물을넣어표선을채운다음슬퍼닐아미드용액 ( 0.5 W/V% ) 1 ml를넣어섞고 5분간방치한다음 α-나프틸에틸렌디아민이염산염용액 ( 0.1 W/V% ) 1 ml를넣어섞고 10~30 분간방치한다, 이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로물 50 ml를취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 540 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터아질산성질소의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성아질산성질소표준액 ( mg NO 2 -N/ ml ) 1~10 ml를단계적으로취하여물을넣어 50 ml로하고이하시료의시험방법에따라시험하여아질산성질소의양과흡광도와의관계선을작성한다

184 비고1) 시료중잔류염소와같은산화성물질이함유된경우에는아황산나트륨용액 ( 0.1N ) 을대응량만큼정량적으로넣어환원시킨다음사용한다. 2) 시험에사용하는물, 용액및표준액의조제에사용하는물은증류수또는탈염수 ( 이온교환수지로서탈염정제한물 ) 를사용하여야한다. 다만증류수또는탈염수일지라도 24 시간을초과하여사용할수없다. 2. 이온크로마토그래피법 2.1 측정원리이온크로마토그래프를이용하여아질산성질소를정량하는방법이다. 이방법은소량의시료로정량이가능하며, 시험조작이간편하고재현성도우수하다. 정량범위는 0.1 mg NO 2 -N/l이상이다. 2.2 기구및기기 이온크로마토그래프 5 ml실린지 2.3 시험방법 제 3 장제 5 항이온크로마토그래피법에따라시험한다

185 제 13 항질산성질소 1. 이온크로마토그래피법 1.1 측정원리이온크로마토그래프를이용하여질산성질소를정량하는방법이다. 이방법은소량의시료로정량이가능하며시험조작이간편하고재현성도우수하다. 정량범위는 0.1 mg NO 3 -N/l 이상이다. 1.2 기구및기기 이온크로마토그래프 5 ml실린지 1.3 시험방법 제 3 장제 5 항이온크로마토그래피법에따라시험한다. 2. 흡광광도법 2.1 부루신법 측정원리황산산성에서질산이온이부루신과반응하여생성된황색화합물의흡광도를측정하여질산성질소를정량하는방법이다. 정량범위는 0.001~0.1 mg NO 3 -N이며, 표준편차는 10~3 % 이다 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 물중탕 : 100 에서시료와표준액을같이넣을수있을만큼충분한부피을갖춘것 시험방법 여과한시료적당량 ( 질산성질소로서 0.01 mg이하함유 ) 을취하여 25 ml비색관 에넣고물을넣어 10 ml로한액에염화나트륨용액 ( 30 W/V% ) 2 ml를넣어

186 섞은다음황산 ( 4+1 ) 10 ml를넣어세게흔들어섞고수냉한다. 여기에부루신 술퍼닐산용액 0.5 ml를넣어흔들어섞고끓는물중탕중에서정확히 20 분간가열반응 ( 주1 ) 시킨다음실온까지수냉하고물을넣어표선을맞춘다. 이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로물 10 ml ( 주2 ) 를취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 410 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터질산성질소의양을구하고농도 ( mg /l) 를산출한다. 검량선의작성질산성질소표준액 ( mg NO 3 -N/ ml ) 1~10 ml를단계적으로취하여 25 ml비색관에넣고물을넣어 10 ml를한다음시료의시험방법에따라시험하여질산성질소의양과흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 이방법은가열온도와시간의영항을많이받으므로시료와표준액에대하여같은조건하에서시험하여야하며, 물중탕중의물의온도분포가일정하게유지되어야한다. 주2) 시료자체의색깔이나유기성용해물질이가열시발색되어보정이필요할경우에는시료한조를더취하여부루신-술퍼닐산용액을제외한모든시약을넣어서같은방법으로시험하고보정한다. 2.2 자외선흡광광도법 측정원리 ph 12이상의알칼리성에서유기물질을활성탄으로흡착한다음혼합산성액으로산성으로하여아질산염을은폐시키고질산성질소의흡광도를 215 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 ~0.1 mg NO 3 -N이고, 표준편차율은 10~3 % 이다 기구및기기광전광도계또는광전분광광도계 시험방법여과한시료 20 ml ( 질산성질소로서 0.1 mg이하함유 ) 를정확히취하여 25 ml마개있는시험관에옮기고 3.5 % 수산화나트륨용액 1 ml, 활성탄 20 mg을넣은다음마개를하고 20 분간흔들어섞은다음 5 분간정치하고미리 3.5 % 수산화나트륨용액 50 ml로씻고다음에물 100 ml를씻어준유리섬유거름종이 ( GF/C ) 또는이와동등한규격의섬유거름종이를장치한밀리포아흡인여과기로여과한다

187 여액 10 ml를정확히취하여 25 ml마개있는시험관에옮기고혼합산성용액 1 ml를넣어흔들어섞고이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로물 20 ml를취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여층장 10 mm흡수셀에옮겨 215 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터질산성질소의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성질산성질소표준액 ( 0.01 mg NO 3 -N/ ml ) 10 ml를정확히취하여 50 ml용량플라스크에넣고물을넣어표선까지채운다음, 흔들어섞고이액 5ml, 10 ml, 15 ml를단계적으로취하여물을넣어전량을 20 ml로한다. 시료의시험방법에따라시험하여질산성질소의양과흡광도와의관계선을작성한다. 비고1) 시료에보존제를넣어준경우에는중화한다음시험하여첨가한중화제 ( 알칼리성용액 ) 의양을보정하여농도 ( mg /l) 를계산하여야한다. 일반적으로보아시료를보존할경우에는중화조작을하지않고처음넣어주는 3.5 % 수산화나트륨용액의사용량을 4 ml로하여시험하여도무방하다. 2) 시험에서사용하는물, 용액및표준액의조제에사용하는물은증류수또는탈염수 ( 이온교환수지로서탈염정제한물 ) 를사용하여야한다. 다만증류수또는탈염수일지라도 24 시간을초과하여사용할수없다. 3. 데발다합금환원증류법 3.1 측정원리 아질산성질소는술퍼민산으로분해제거하고암모니아성질소및일부분해되기쉬운유기질소를알카리성에서증류제거한다음데발다합금으로질산성질소를암모니아성질소로환원하여이를암모니아성질소시험방법에따라시험하고질산성질소의농도를환산하는방법이다. 이방법은시료가심하게착색되어있거나방해물질을많이함유한폐하수등의시료에적용할수있다. 정량범위는중화적정법에서 0.2~30 mg, 흡광광도법에서 0.004~0.8 mg NO 3 -N이며, 표준편차는 10~3 % 이다. 3.2 기구및기기 증류장치 : 제 11 항그림

188 3.3 시험방법 시료적당량 ( 주1 ) 을 1 l 증류플라스크에넣고물을넣어약 350 ml로한다. 술퍼민산용액 1 %( W/V ) 2 ml와비등석수개를넣고염산 ( 1+1 ) 을넣어 ph 3 이하로조절하여약 10 분간끓인다. 여기에수산화나트륨용액 ( 4 W/V% ) 10 ml를넣고증류장치를조립하여매분 5~7 ml의유출속도로증류하여유출액이약 200 ml가되면증류를끝내고냉각관의안쪽을물로씻어낸다음유출액은버리고증류플라스크의내용물은방냉한다. 별도의 200 ml부피실린더수기에 0.05N-황산 50 ml를미리넣고, 증류플라스크에는데발다합금분말 3 g을넣고물을넣어액량을약 350 ml로하여즉시증류장치를조립한다. 증류플라스크를가열하여매분 5~7 ml의유출속도로증류하고유출액량이약 180 ml가되면증류를끝내고냉각관의안쪽을소량의물로씻어유출액에합하여물을넣어 200 ml로한다. 이유출액의일부또는전량을취하여제 11항, 1.4 또는 3.4 에따라시험하여암모니아성질소의양을구하고다음식으로부터질산성질소의농도를산출한다. 흡광광도법 ( 제 11항 1.4 ) 으로시험하였을경우 질산성질소 ( mg NO 3 -N/l ) = a 1,000 V₃ V₂ V₁ a : 시험에사용한유출액중의암모니아성질소량 ( mg NH 3 -N ) V 1 : 증류에사용한시료량 ( ml ) V 2 : 유출액량 ( ml ) V 3 : 시험에사용한유출액의분취량 ( ml ) 중화적정법 ( 제 11항 3.4 ) 으로시험하였을경우 질산성질소 ( mg NO 3 -N/l ) = a 1,000 V 1 a : 시료중의암모니아성질소량 ( mg NH 3 -N ) V 1 : 증류에사용한시료량 ( ml ) 주 1) 흡광광도법의경우 2.5 mg이하, 중화적정법의경우 0.7~10 mg NO 3 -N 함유량

189 제 14 항총질소 1. 흡광광도법 1.1 측정원리 시료중질소화합물을알칼리성과황산칼륨의존재하에 120 에서유기물과함께분해하여질산이온으로산화시킨다음산성에서자외부흡광도를측정하여질소를정량하는방법이다. 이방법은비교적분해되기쉬운유기물을함유하고있거나자외부에서흡광도를나타내는브롬이온이나크롬을함유하지않는시료에적용된다. 정량범위는 0.005~0.05 mg N이며표준편차는 10~3 % 이다. 1.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 : 220 nm에서측정가능한것 고압증기멸균기 : 약 120 에서가열이가능한것 분해병 : 용량약 100 ml의내압 내열의마개있는유리병또는테프론병 1.3 시료의전처리 시료 50 ml ( 질소함량이 0.1 mg이상일경우에는희석 ) 를분해병에넣고알카리성 과황산칼륨용액 10 ml를넣어마개를닫고흔들어섞은다음고압증기멸균기에넣고 가열한다. 약 120 가될때부터 30 분간가열분해하고분해병을꺼내어방냉한다. 1.4 시험방법 전처리한시료의상등액을취하여유리섬유거름종이 ( GF/C ) 로여과하고처음여액 5~10 ml는버린다음여액 25 ml를정확히취하여 50 ml비커또는비색관을옮긴다. 여기에염산 ( 1+16 ) 5 ml를넣어 ph 2~3으로하고이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로물 50 ml를취하여시료의전처리시험방법에따라시험하고바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 220 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터질소의양을구하여다음식으로시료중의총질소농도 ( mg /l ) 를산출한다

190 총질소 ( mg N/l) = a ,000 V a : 검량선으로부터구한질소의양 ( mg ) V : 전처리에사용한시료량 ( ml ) 검량선의작성질산성질소표준액 ( 0.02 mg NO 3 -N/ ml ) 0~10 ml를단계적으로취하여 100 ml용량플라스크에넣고물을넣어표선을채운다. 이액 25 ml씩을정확히취하여각각 50 ml비커또는비색관에넣고염산 ( ) 5 ml를넣은다음시료의시험방법에따라시험하고질소의양과흡광도와의관계선을작성한다. 비고1) 이방법은브롬이온 10 mg /l, 크롬 0.1 mg /l정도에서영향을받으며해수와같은시료에는적용할수없다. 2. 카드뮴환원법 2.1 측정원리시료중질소화합물을알카리성과황산칼륨존재하에 120 에서유기물과함께분해하여질산이온으로산화시킨다음질산이온을다시카드뮴-구리환원칼럼을통과시켜아질산이온으로환원시키고아질산성질소의양을구하여질소로환산하는방법이다. 이방법은비교적분해되기쉬운유기물을함유한시료나시료량이소량일경우로서총질소농도가낮은시료에적용된다. 정량범위는 ~0.002 mg N이며표준편차는 10~3 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 고압증기멸균기 : 제 14항 1.2 와같은것 분해병 : 제 14항 1.2 와같은것 카드뮴-구리환원칼럼 ( 이하환원칼럼이라한다 ) 그림 1과같이칼럼의바닥에유리섬유를끼우고칼럼충전액을채운다음카드뮴 -구리칼럼충전제를액과함께흘러보내공간이없도록채운다음위에다시유리섬유를끼우고상부로부터칼럼충전액 100 ml, 질산성질소표준원액 ( 0.1 mg NO 3 -N/ ml ) 을칼럼충전액으로 100 배희석한액 200 ml, 칼럼충전액 100 ml순으로

191 매분약 10 ml의유속에서흘러보낸다. 칼럼을사용하지않을때에는항상상부에칼럼충전액을채워둠으로서 ( 약 1 cm ) 공기와의접촉을방지한다. 또한환원칼럼은시료에따라서 15~20 회정도사용하면질산이온의환원율이저하되므로이때는칼럼활성화액약 20 ml를칼럼에주입하여카드뮴-구리칼럼충전제와충분히접촉된상태에서 2~3 시간방치하고흘려보낸다음칼럼충전액약 100 ml로씻어주면환원칼럼이활성화된다. 2.3 시료의전처리 제 14 항 1.3 에따라시험한다 2.4 시험방법전처리한시료가들어있는분해병에염산 ( 1+11 ) 10 ml를넣고흔들어섞은다음 100 ml용량플라스크에옮긴다. 분해병의안쪽을소량의물로수회씻어서용량플라스크에합하고염화암모늄-암모니아용액 10 ml ( 주1 ) 를넣어물로표선을채워서환원용시료액으로한다. 이액 5 ml를환원칼럼의상부로부터매분당약 10 ml의속도로흘러보내유출액은버리고이조작을한번더반복한다. 다음에환원용시료액약 80ml를위와같은속도로흘려보내처음의유출액 20 ml는버리고다음유출액 50 ml를수기에받아측정용시료로사용한다. 측정용시료적당량을취하여제 12항 1.4에따라시험하고따로물 50 ml를취하여

192 시료의시험방법에따라시험하여시료용액의흡광도를보정한다음미리작성한 검량선으로부터환원용시료 100 ml중의총질소양을구하고다음식에서농도 ( mg /l ) 를 산출한다. 총질소 ( mg N/l) = a 1,000 V a : 환원용시료 100 ml중의총질소 ( mg ) V : 전처리에서취한시료량 ( ml ) 검량선의작성질산성질소표준액 ( mg NO 3 -N/ ml ) 0~10 ml를단계적으로취하여 100ml용량플라스크에넣고염화암모늄 암모니아용액 10 ml와물을넣어표선을채운액을환원용표준액으로하여시료의시험방법에따라시험하고총질소의양과흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 환원용시료 100 ml중총질소의양이 0.02 ml이상일경우에는 200~500 ml용량플라스크를사용하여 100 ml당염화암모늄 암모니아용액 10 ml씩을더넣어주고물로표선을채운다음환원용시료로한다. 이때는총질소농도계산식에 C/100( C : 사용한플라스크용량ml ) 를곱해준다. 3. 환원증류 - 킬달법 ( 합산법 ) 3.1 측정원리 시료에데발다합금을넣고알칼리성에서증류하여시료중의무기질소를암모니아로환원유출시키고, 다시잔류시료중의유기질소를킬달분해한다음증류하여암모니아로유출시켜각각의암모니아성질소의양을구하고이들을합하여총질소를정량하는방법이다. 정량범위는 0.008~0.16 mg N이며표준편차는 10~3 % 이다. 3.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 증류장치 : 제 11 항그림 1 과같은것 킬달분해장치

193 3,3 시료의전처리 무기질소의환원시료적당량 ( 0.7~10 mg N 함유 ) 을취하여 1 l 증류플라스크에넣고물을넣어약 350 ml로한다. 비등석수개, 데발다합금분말 3 g과수산화나트륨용액 ( 30 W/V% ) 10 ml를넣어증류장치를조립하고냉각관의끝을미리 0.05N 황산 50 ml를넣어둔 200 ml부피실린더수기에연결하여매분 5~7 ml의유출속도로증류한다. 수기의유출액량이약 180 ml가되면증류를끝내고냉각관의안쪽을소량의물로수회씻어서수기에합하여물을넣어표선을채운다 ( A액 ). 유기질소의분해 에서증류하고남은증류플라스크의내용물과증류플라스크를물로씻은액전량을조심하여적당한용량의킬달플라스크에옮기고총질소시험용분해촉진제 2 g을넣고플라스크의목부분에남아있는잔류물을소량의물로씻어넣은플라스크의내벽을따라황산 5~10 ml를넣는다. 다음에과산화수소수 1 ml를주의하여넣고석면상에서가열하여백연이발생하여내용물이투명해질때까지분해를계속한다. 방냉한다음물약 100 ml를넣어석출된결정성물질을가열용해하여분해한액을 1 l 증류플라스크에옮기고소량의물로킬달플라스크를수회씻어서합한다. 물을넣어액량을약 350 ml로하고증류장치를조립하여냉각관의끝을미리 0.05N-황산 50 ml를넣어둔 200 ml매스실린더수기에연결한다. 증류플라스크의상부로부터수산화나트륨용액 ( 50 W/V% ) 40 ml를넣고증류플라스크를가열하여매분 5~7 ml의유출속도로증류한다. 수기의유출액량이약 180 ml가되면증류를끝내고냉각관의안쪽을소량의물로수회씻어서수기에합하고물을넣어표선을채운다 ( B액 ). 3.4 시험방법 3.3, 에서얻어진 A, B액의일부또는전량을취하여제 11항 1.4 또는 3.4에따라시험하고, 따로시료와같은양의물을취하여 1 l 증류플라스크에넣고시료의전처리와같은조작을하여바탕시험액으로한다. 바탕시험을대조액으로하여각각 A, B액중의총질소농도를구하고두값을합하여시료의총질소농도 ( mg /l) 로한다

194 제 15 항용존총질소 (Dissolved Total Nitrogen) 1. 측정원리시료중용존질소화합물을알카리성광황산칼륨의존재하에 120 에서유기물과함께분해하여질소이온으로산화시킨다음산성에서자외부흡광도를측정하여질소를정량하는방법이다. 이방법은비교적분해되기쉬운유기물을함유하고있거나자외부에서흡광도를나타내는브롬이온이나크롬을함유하지않는시료에적용된다. 정량범위는 0.005~0.05mgN이며표준편차는 10~3% 이다. 2. 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 20nm에서측정가능한것 고압증기멸균기 : 약 120 에서가열이가능한것 분해병 : 용량약 100ml의내압 내열의마개있는테프론병 3. 시료의전처리 시료를유리섬유거름종이 (GF/C) 로여과하여주 1) 여액 50 ml ( 질소함량 0.01 mg이하 ) 주 2) 를 수질오염공정시험방법제 14 항총질소의전처리방법에따라시험한다. 4. 시험방법위의전처리액을가지고수질오염공정시험방법제14항총질소의시험방법에따라시험한다. 주1) 여액이혼탁할경우에는반복하여재여과한다. 주2) 전처리한여액 50ml중총질소의양이 0.1mg을초과하는경우희석하여전처리조작을실시한다

195 제 16 항인산염인 1. 흡광광도법 1.1 염화제일주석환원법 측정원리인산이온이몰리브덴산암모늄과반응하여생성된몰리브덴산인암모늄을염화제일주석으로환원하여생성된몰리브덴청의흡광도를 690 nm에서측정하여인산염인을정량하는방법이다. 정량범위는 0.002~0.05 mg PO 4 -P이며, 표준편차는 10~2 % 이다 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 시험방법여과한시료적당량 ( 인산염인으로써 0.05 mg이하함유 ) 를정확히취하여 50 ml용량플라스크에넣고물을넣어약 40 ml로한다 ( 주 1 ). 여기에몰리브덴산암모늄용액 5 ml를넣어흔들어섞고염화제일주석용액 ( 인산염시험용 ) 약 0.25 ml를넣고물을넣어표선을채운다음다시흔들어섞고 20~30 에서 10 분간방치한다음이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로물 40 ml를취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 690 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터인산염인의양을구하여농도 ( mg /l) 를산출한다. 검량선의작성인산염인표준액 ( mg P/ ml ) 1~10 ml를단계적으로취하여 50 ml용량플라스크에넣고물을넣어전량을 40 ml로한다음시료의시험방법에따라시험하여인산염인의양과흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 시료가산성일경우에는 p-니트로페놀용액 ( 0.1 W/V% ) 을지시약으로수산화나트륨용액 ( 4 W/V% ) 또는암모니아수 ( 1+10 ) 를넣어액이황색을나타낼때까지중화한다. 비고1) 발색제를넣은다음흡광도측정까지의소요시간은 10~12 분으로한다

196 2) 인산염인의농도가미량일경우또는시료에착색물질이공존할경우에는다음과같은용매추출법을이용하여측정감도를높일수있다. 시료적당량 ( 0.01 mg PO 4 -P이하함유 ) 을 125 ml분액깔때기에취하고물을넣어약 50 ml로한다음황산 ( 1+50 ) 1 ml와부틸알콜 15 ml를넣어흔들어섞고정치하여액을분리한다. 수층을다른분액깔때기에옮기고몰리브덴산암모늄용액 6.5 ml을넣어섞은다음염화제일주석용액 0.25 ml를넣어다시흔들어섞고약 10 분간방치한다. 부틸알콜 10 ml를넣어흔들어섞어서몰리브덴산청을추출하고정치하여액을분리한다. 부틸알콜층의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로하고따로물 50 ml를취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 730 nm부근에서흡광도를측정하고인산염인의농도를구한다. 검량선은인산염인표준액 ( mg P/ ml ) 을정확히 5배희석하여 1~10 ml를단계적으로취하고시료의시험방법과같이추출조작을하여흡광도를측정한다. 1.2 아스코르빈산환원법 측정원리인산이온이몰리브덴산암모늄과반응하여생성된몰리브덴산인암모늄을아스코르빈산으로환원하여생성된몰리브덴산청의흡광도를 880 nm에서측정하여인산염인을정량하는방법이다. 이방법은염소화물, 황산염등다량의염류를함유하고있는시료에적용할수있다. 정량범위는 0.002~0.05 mg PO 4 -P이며, 표준편차는 10~2 % 이다 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 시험방법여과한시료적당량 ( 인산염인으로서 0.05 mg함유 ) 을취하여 50 ml부피플라스크에넣고물을넣어약 40 ml로한다 ( 주 1 ). 몰리브덴산암모늄-아스코르빈산혼합액 4 ml를넣고물을넣어표선을채운다음, 흔들어섞고 20~40 에서약 15 분간방치한다. 이액일부를층장 10 nm흡수셀에옮겨시료용액으로하고따로물 40 ml를취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 880 nm ( 주2 ) 에서흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터인산염인의양을구하고농도 ( mg /l) 를산출한다

197 검량선의작성인산염인표준액 ( mg PO 4 -P/ ml ) 1~10 ml를단계적으로취하여 50 ml용량플라스크에넣고물을넣어약 40 ml로한다음시료의시험방법에따라시험하여인산염인의양과흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 1.1의주 1) 과같다. 주2) 880 nm에서흡광도측정이불가능할경우에는 710 nm에서측정한다. 비고1) 인산염인의농도가미량일경우에는발색후 15 분간방치한시료액을 125 ml분액깔때기에옮기고디이소부틸케톤 ( DIBK ) 10 ml를넣어약 5분간흔들어섞고정치하여액을분리한다음수층은버리고 DIBK층을흡수셀에옮겨 640 nm에서흡광도를측정한다. 단검량선은인삼염인표준액 ( mg PO 4 -P/ ml ) 을물로정확히 5 배희석한액 1~10 ml를단계적으로취하여시료의시험방법에따라시험하여작성한다

198 제 17 항총 인 1. 흡광광도법 ( 아스코르빈산환원법 ) 1.1 측정원리시료중의유기물을산화분해하여모든인화합물을인산염 ( PO 4 ) 형태로변화시킨다음인산염을아스코르빈산환원흡광광도법으로정량하여총인의농도를구하는방법이다. 정량범위는 0.001~0.025 mg P이며, 표준편차는 10~2 % 이다. 1.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 고압증기멸균기 : 제 14항 1.2 와같은것 분해병 : 제 14항 1.2 와같은것 킬달분해장치 1.3 시료의전처리 과황산칼륨분해 ( 분해되기쉬운유기물을함유한시료 ) 시료 50 ml ( 인으로서 0.06 mg이하함유 ) 를분해병에넣고과황산칼륨용액 ( 4 W/V% ) 10 ml를넣어마개를닫고섞은다음고압증기멸균기에넣어가열한다. 약 120 가될때부터 30 분간가열분해를계속하고분해병을꺼내방냉한다. 질산-황산분해 ( 다량의유기물을함유한시료 ) 시료 50 ml ( 인으로서 0.06 mg이하함유 ) 를킬달플라스크에넣고질산 2 ml를넣어액량이약 10 ml가될때까지서서히가열농축하고방냉한다. 여기에질산 2~5 ml와황산 2 ml를넣고가열을계속하여황산의백연이격렬하게발생할때까지가열한다. 만일액의색이투명하지않을경우에는방냉한다음질산 2~5 ml를더넣고가열분해를반복한다. 분해가끝나면물약 30 ml를넣고약 10 분간조용히가열하여가용성염을녹이고방냉한다. 이용액을 P-니트로페놀 ( 0.1 W/V% ) 을지시약으로하여수산화나트륨용액 ( 20 W/V% ) 및수산화나트륨용액 ( 4 W/V% ) 을넣어액의색이황색을나타낼때까지중화한다음 50 ml용량플라스크에옮기고물을넣어표선까지채운다

199 1.4 시험방법 전처리한시료의상등액 ( 주 1 ) 25 ml를취하여마개있는시험관에넣고몰리브덴 산암모늄 아스코르빈산혼합액 2 ml를넣어흔들어섞은다음 20~40 에서 15 분간 방치한다. 이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로하고따로물 50 ml를취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을 대조액으로하여 880 nm ( 주 2 ) 에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선 으로부터총인의양을구하여다음식에서농도 ( mg /l ) 를산출한다. 과황산칼륨분해한경우 총인 ( mg P/l) = a , a : 검량선으로부터구한인의양 ( mg ) 질산 - 황산분해한경우 총인 ( mg P/l) = a 1, a : 검량선으로부터구한인의양 ( mg ) 검량선의작성 인산염인표준액 ( mg P/ ml ) 1~20 ml를단계적으로취하여 100 ml용량플 라스크에넣고물을넣어표선을채운다음이액 25 ml씩을마개있는시험관에 넣고시료의시험방법에따라시험하여인의양과흡광도와의관계선을작성한다. 주 1) 전처리한시료의상등액이탁할경우에는유리섬유거름종이로여과하여여액을 사용한다. 2) 880 nm에서흡광도측정이불가능할경우에는 710 nm에서측정한다

200 제 18 항용존총인 (Dissolved Total Phosphorus) 1. 측정원리 시료중의유기물을산화분해하여용존인화합물을인산염 (PO4) 형태로변화시킨 다음인산염을아스코르빈산환원흡광광도법으로정량하여총친의농도를구하는방법이다 정량범위는 0.001~0.025 mg P/ ml이며, 표준편차는 10~2% 이다. 2. 기구및기구 광전광도계또는광전분광광도계 고압증기멸균기 : 제 14 항 1.2 와같은것 분해병 : 제 15 항 1.2 와같은것 킬달분해장치 3. 시료의전처리 시료를유리섬유거름종이 (GF/C) 로여과하여주 1) 여액 50 ml ( 인함량 0.06 mg이하 ) 주 2) 를 수질오염공정시험방법제 17 항총인의시료의전처리방법에따라시험한다. 4. 시험방법 위의전처리액을가지고수질오염공정시험방법제 17 항총인의시험방법에따라시험한다. 주 1) 여액이혼탁할경우에는반복하여재여과한다 주 2) 전처리한여액 50 ml중총인의양이 0.06 mg을초과하는경우희석하여전처리조작을 실시한다

201 제 19 항페놀류 1. 흡광광도법 1.1 측정원리증류한시료에염화암모늄-암모니아완충액을넣어 ph 10으로조절한다음 4-아미노안티피린과페리시안칼륨을넣어생성된적색의안티피린계색소의흡광도를측정하는방법으로수용액에서는 510 nm, 클로로포름용액에서는 460 nm에서측정한다. 정량범위는추출법일때 ~0.05 mg, 직접법일때 0.05~0.5 mg이며, 표준편차는 10~3 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는각각 mg /l, 0.5 mg /l 이상으로한다. 1.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 증류장치 ( 그림 1 ) 1.3 시료의전처리 시료 250 ml ( 주1 ) 를 500 ml증류플라스크에넣고메틸오렌지용액 ( 0.1 W/V% ) 수방울을넣고인산 ( 1+9 ) 을넣어 ph를약 4로조절하여황산구리용액 2.5 ml를넣는다. 증류플라스크를증류장치의냉각관과연결하여 250 ml부피실린더를수기로사용한다. 증류를행하고증류액이 225 ml가되었을때가열을중지하고증류플라스크에물 25 ml를넣어다시증류를행하고전증류액이 250 ml가되었을때증류를끝낸다. 증류액이백탁되었을때에는증류조작을반복하여재증류한다. 1.4 시험방법 추출법 ( 페놀함량 0.05 mg이하 )

202 시료 ( 또는전처리한시료 ) 100 ml를정확히취하여 250 ml분액깔때기에넣고염화암모늄-암모니아완충액 ( ph 10.0 ) 3.0 ml를넣어섞고 ph를 9.8~10.2로조절하여 4-아미노안피린용액 ( 2 W/V% ) 2.0 ml를넣어흔들어섞고페리시안화칼륨용액 2.0 ml를넣어흔들어섞은다음 3 분간방치한다. 클로로포름 10 ml를정확히넣어 1 분이상세게흔들어섞어정치하고클로로포름층에무수황산나트롬약 1 g을넣어탈수시킨다음일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로물 100 ml를사용하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로사용하여 460 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터페놀의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성페놀표준액 ( mg C 6 H 5 OH/ ml ) 2.5~50 ml를단계적으로취하여 250ml분액깔때기에각각넣고물을넣어약 100 ml씩으로한다. 이하시료의시험방법에따라시험하여페놀의양과흡광도와의관계선을작성한다 직접법 ( 페놀함량 0.05~0.5 mg ) 시료 ( 또는전처리한시료 ) 100 ml를정확히취하여플라스크또는비색관에넣고염화암모늄-암모니아완충액 ( ph 10.0 ) 3.0 ml를넣어 ph 9.8~10.2로조절한다. 4-아미노안티피린용액 ( 2 W/V% ) 2.0 ml를넣어흔들어섞고페리시안화칼륨시액 2.0ml를넣어흔들어섞은다음 3 분간방치하여일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 물 100 ml를정확히취하여이하시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 510 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터페놀의양을구하고농도 ( mg /l) 를산출한다. 검량선의작성페놀표준액 ( 0.01 mg C 6 H 5 OH/ ml ) 5~50 ml를단계적으로취하여물을넣어 100 ml로하고이하시료의시험방법에따라시험하여페놀의양과흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 페놀류의농도가 5 mg /l 이상일경우에는시료를적당량취하여물을넣어 250 ml로하며, mg /l이하인경우에는시료 500 ml를취하여 1 L 증류플라스크에넣고황산구리용액 5 ml를넣어증류하여유출액 500 ml를받는다. 이유출액전량을 1 L 분액깔때기에넣고추출법에따라시험한다. 단이때넣어주는각시약은완충액 10 ml, 4-아미노안티피린용액 3 ml, 페리시안화칼륨용액 3 ml로한다

203 제 20 항시 안 1. 흡광광도법 1.1 측정원리 ph 2이하의산성에서에틸렌디아민테트라초산이나트륨을넣고가열증류하여시안화물및시안착화합물의대부분을시안화수소로유출시키고수산화나트륨용액에포집한다. 포집된시안이온을중화하고클로라민T를넣어염화시안으로하여피리딘 피라졸론혼합액을넣어나타나는청색을 620 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 ~0.01 mg이며, 표준편차는 10~2 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 0.01 mg /l이상으로한다. 1.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 증류장치 ( 그림 1 )

204 1.3 시료의전처리시료 100 ml ( 시안으로서 0.05 mg이하 ) 를취하여 500 ml증류플라스크에넣고물을넣고약 250 ml로한다음지시약으로페놀프탈레인 에틸알코올용액 ( 0.5 W/V% ) 2~3 방울을넣고인산또는 2 % 수산화나트륨용액을사용하여중화하고그림 1과같이시안증류장치를조립한다. 주입깔때기를통하여술퍼민산암모늄용액 ( 10 W/V% ) 1 ml와인산 10 ml및에틸렌디아민테트라초산이나트륨용액 ( 시안시험용 ) 10 ml를넣고수분간방치한다음증류플라스크를가열하여매분 2~3 ml의유출속도로증류를행한다. 수기는미리 2 % 수산화나트륨용액 20 ml를넣어둔마개있는 100 ml부피실린더를사용하며수기중의액량이 90 ml가되었을때증류를끝내고, 냉각기를떼어내어냉각기의안쪽을소량의물로씻은후물을넣어정확히 100 ml로한다. 1.4 시험방법 ( 피리딘-피라졸론법 ) 전처리한시료 20 ml를정확히취하여 50 ml용량플라스크에넣고지시약으로페놀프탈레인 에틸알코올용액 ( 0.5 W/V% ) 1 방울을넣어조용히흔들어주면서용액의적색이없어질때까지초산 ( 1+8 ) 을넣는다 ( 약 1 ml소요 ). 인산염완충액 ( ph 6.8 ) 10 ml, 클로라민 T용액 ( 1 W/V% ) 0.25 ml를넣고마개를막아조용히섞는다. 약 5 분간방치하고피리딘피라졸론혼합액 15 ml를넣고물을넣어표선을채운다음조용히섞고 25 의물중탕중에서 30 분간방치한다. 이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로물 20 ml를취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 620 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터시안의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성시안이온표준액 ( mg CN - / ml ) 1~10 ml를단계적으로취하여 50 ml용량플라스크에넣고물을넣어 20 ml로한다음시료의시험방법에따라시험하여시안의양과흡광도와의관계선을작성한다. 비고1) 다량의유지류가함유된시료는초산또는수산화나트륨용액으로 ph 6~7로조절하고시료의약 2 % 에해당하는노말핵산또는클로로포름을넣어짧은시간동안흔들어섞고수층을분리하여시료를취한다. 2) 잔류염소가함유된시료는잔류염소 20 mg당 L-아스코르빈산 ( 10 W/V% ) 0.6 ml또는아비산나트륨용액 ( 10 W/V% ) 0.7 ml를넣어제거한다. 3) 황화합물이함유된시료는초산아연용액 ( 10 W/V% ) 2 ml를넣어제거한다. 이용액 1 ml는황화물이온약 14 mg에대응한다

205 2. 이온전극법 2.1 측정원리 ph 12~13의알카리성에서시안이온전극과비교전극을사용하여전위를측정하고그전위차로부터시안을정량하는방법이다. 정량범위는 0.1~100 mg CN - /l이며, 표준편차는 20~5 % 이다. 2.2 기구및기기 1 mv까지읽을수있는고압력저항전위계또는시안이온측정기 시안이온전극 비교전극 자석교반기 : 교반에의하여열이발생되지않는것 2.3 시료의전처리 1.3 에따라시험한다. 2.4 시험방법전처리한시료 100 ml를 200 ml비커에옮기고시안이온전극과비교전극을침적시켜기포가일어나지않는범위내에서일정한속도로세게교반하여전위가안정될때의값을측정하고미리작성한검량선으로부터시안의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다 ( 주1) ( 주2). 검량선의작성시안이온표준원액으로부터시안으로서 20 mg에대응하는용량을정확히취하여 200 ml용량플라스크에넣고 0.1N 수산화나트륨용액으로표선을채워시안이온표준액 ( 100 mg CN - / ml ) 를조제한다. 같은방법으로 0.1N 수산화나트륨용액을사용하여단계적으로 10배씩희석하여 0.1, 1, 10, 100mg CN - /l의표준액을준비하고, 각각 100 ml씩을취하여 200 ml비커에옮긴다. 낮은농도부터높은농도순으로시료의시험방법에따라시험하여편대수그래프지 ( semilog 그래프지 ) 의대수측에농도를균등축에측정전위값을기재하여시안의양과전위와의관계선을작성한다. 주1) 시료와표준액의측정시온도차는 ±1 이어야하고, 교반속도가일정하여야한다. 액온이 1 변화할때에약 1 mv의전위차가변화하게된다. 2) 시안이온전극은사용시시안이온표준액 ( 0.1 mg CN - /l ) 에침적시켜전위값이안정될때부터측정한다

206 제 21 항불소 1. 흡광광도법 ( 란탄 - 알리자린콤프렉손법 ) 1.1 측정원리란탄과알리자린콤프렉손의착화합물이불소이온과반응하여생성하는청색의복합착화합물의흡광도를 620 nm에서측정하는방법이다. 알루미늄및철의방해가크나증류하면영향이없다. 정량범위는 0.004~0.05 mg이고표준편차는 10~3 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 0.15 mg /l이상으로한다. 1.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 증류장치 ( 그림 1 또는그림 2 ) 그림 1. 수증기증류장치 1.3 시료의전처리 직접증류법 1 L 증류플라스크에증류수 400 ml를넣고플라스크벽을따라황산 200 ml를조심 하여가한다음흔들어섞고유리구 10 여개를넣어그림 2 와같이증류장치를

207 연결한다. 증류플라스크를가열하여 180 ( 주1 ) 가될때까지증류하고유출액은버린다. ( 이조작은기구와황산중의불소이온을제거하고산-물의용량비를맞추기위한것이다 ) 증류플라스크를 100 이하로냉각한다음시료 300 ml를서서히넣어흔들어섞고다시증류장치에연결하여위와같은방법으로증류한다 ( 주2). 유출액은 500 ml부피실린더에받아물을넣어일정한용량으로맞추고온도계산시시료용량을보정해준다. 증류플라스크에들어있는황산은오염이축적되어불소측정에방해를주지않는한계속해서사용할수있다 수증기증류법 시료적당량 ( 불소로서 0.03 mg이상함유 ) 을비커또는자제증발접시에넣고페놀프탈레인에틸알코올용액 ( 0.5 W/V% ) 2~3 방울을넣어수산화나트륨용액 ( 10 W/V% ) 을액의색이적색을나타낼때까지넣은다음가열하여약 30 ml로증발농축한다. 농축시료를물약 10 ml를사용하여그림 1 증류장치의킬달플라스크에씻어넣고이산화규소약 1 g, 인산 1 ml, 과염소산 40 ml및유리구수개를넣는다. 증류플라스크에물약 600 ml를넣고증류장치의각부분을연결한다음가열하여증류를시작하고미리물 20 ml를넣어둔 250 ml부피실린더또는용량플라스크를사용하여냉각관의끝이물에잠기도록하여유출액을받는다. 킬달플라스크안의액온이약 140 가되었을때수증기를통하기시작하여증류온도가 140~150 로유지하도록불꽃을조절한다. 유출속도는매분 3~5 ml로하여수기의액량이약 220 ml가되었을때증류를끝낸다. 냉각관을분리하여냉각관의안쪽을물소량을사용하여씻어주고씻은액과물을넣어표선을채운다

208 1.4 시험방법전처리한시료적당량 ( 30 ml이하로서불소 0.05 mg이하함유 ) 을 50 ml용량플라스크에취하여란탄-알리자린콤프렉손용액 20 ml를넣고물을넣어표선까지채우고흔들어섞은다음약 1 시간방치한다 ( 주3 ). 이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로하고, 따로물 30 ml룰취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 620 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터불소이온의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선작성불소이온표준액 ( mg F - / ml ) 2~25 ml를단계적으로취하여 50 ml용량플라스크에넣고시료의시험방법에따라시험하여불소이온의농도와흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 180 이상이되면황산이분해되어유출되므로약 178 에서가열을중지한다. 2) 염소이온이다량함유되어있는시료는증류하기전에황산은을 5 mg / mg Cl - 의비율로넣어준다. 3) 시료중불소함량이정량범위를초과할경우탈색현상이나타날수도있다. 이러한경우에는취하는시료량을정량범위이내에들도록감량하거나희석한다음다시시험한다. 2. 이온전극법 2.1 측정원리시료에이온강도조절용완층액을넣어 ph 5.0~5.5로조절하고불소이온전극과비교전극을사용하여전위를측정하고그전위차로부터불소를정량하는방법이다. 정량범위는 0.1~100 mg F - /l이고표준편차는 20~5 % 이다. 2.2 기구및기기 1 mv까지읽을수있는고압력저항전위계또는불소이온측정기 불소이온전극 비교전극 증류장치 :1.2 와같다

209 2.3 시료의전처리 1.3 시료의전처리에따라시험한다. 2.4 시험방법 전처리한시료 100 ml를 200 ml비커에옮기고티사브용액 ( ph 5.2 ) 10ml를넣어흔들어섞는다. 여기에불소이온전극및비교전극을침적시키고기포가일어나지않는범위내에서일정한속도로세게교반하여전위가안정될때의값 ( 주1 ) 을측정하고미리작성한검량선으로부터불소이온의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다 ( 주1 ) ( 주2 ). 검량선의작성불소이온표준원액 ( 1 mg F - / ml ) 20 ml를정확히취하여 200 ml용량플라스크에넣고물을넣어표선을채워불소이온표준액 ( 100 mg F - /l ) 을조제한다. 같은방법으로물을사용하여단계적으로 10 배씩희석하여 0.1, 1, 10, 100 mg F - /l의표준액을준비하고, 각각 100 ml씩을취하여 200 ml비커에옮긴다음티사브용액 ( ph 5.2 ) 10 ml씩을넣는다. 낮은농도부터높은농도순으로시료의시험방법에따라시험하여편대수그래프지 ( semilog 그래프지 ) 의대수측에농도를, 균등측에측정전위값을기재하여불소이온의양과전위와의관계선을작성한다. 주1) 시료와표준액의측정시온도차는 ±1 이어야하고, 교반속도가일정하여야한다. 2) 불소이온전극은사용시불소이온표준액 ( 0.1 mg F - /l ) 에침적시켜전위값이안정될때부터측정한다

210 제 22 항크 롬 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리시료중의크롬을원자흡광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는장치및조건에따라다르나 nm에서 0.2~5 mg /l이고표준편차율은 10~2 % 이다. 공기-아세틸렌으로는아세틸렌유량이많은쪽이감도가높지만철, 니켈의방해가많으며, 아세틸렌-일산화이질소는방해는적으나감도가낮다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 0.01 mg /l이상으로한다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 램프 : 크롬중공음극램프 가스 : 가연성가스 : 아세틸렌조연성가스 : 공기또는일산화이질소 1.3 시료의전처리 시료중유기물및현탁물질이많을경우에는제 2장제 4항시료의전처리방법에따라시험한다. 다만, 시료용액은 0.1~1N 염산또는질산산성용액으로한다. 크롬함유량이미량으로서유기물및현탁물질을거의함유하지않는시료일경우 ⑴ 시료적당량을취하여비커에넣고시료 100 ml당황산 2 ml를넣어가열하여끓이고방냉한다음황산제일철암모늄용액 1 ml를넣어흔들어섞고질산 2 ml를넣어끓여서철을산화시킨다음방냉하고암모니아수 ( 1+4 ) 를넣어약알카리성으로하여준다. 암모니아냄새가없어질때까지끓이고뜨거운상태로약 20 분간정치하여수산화철과크롬을공침시키고침전은여과한다. 거름종이의잔류물을온 1 % 질산암모늄용액으로 2 회씻은다음여액과씻은액을버리고침전은온질산 ( 1+2 ) 소량을사용하여녹이고거름종이를온수로씻는다. 여액및씻은액을합하여 0.1~1N 산성용액으로하여일정량으로한다

211 ⑵ 제 2장제 4항시료의전처리방법중질산-황산에의한유기물분해에따라시험하여일정량으로한시료용액적당량 ( 크롬으로서 0.005~0.1 mg함유 ) 을취하여 0.3 % 과망간산칼륨용액몇방울을넣어가열하고과망간산의엷은홍색이없어지면다시 0.3 % 과망간산칼륨용액을한방울넣어 5 분간끓인다. 과망간산의엷은홍색이남을때까지이조작을반복한다. 수냉하여 250 ml분액깔때기에옮기고 40 % 황산암모늄용액 10 ml, 황산용액 ( 2N ) 5 ml및물을넣어전량을 100 ml로하고 3 % 트리옥실아민 메틸이소부틸케톤용액 20 ml를넣어 5 분간흔들어섞고정치하여메틸이소부틸케톤층을취한다. 1.4 시험방법제 3장제 2항원자흡광광도법에따라 nm에서전처리한시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터크롬의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성크롬표준액 ( 0.01 mg Cr/ ml ) 2~50 ml를단계적으로취하여시료와같은조건이되도록산을넣은다음물을넣어정확히 100 ml로하고시료의시험방법에따라시험하여크롬의농도와흡광도와의관계선을작성한다. 다만 1.3 시료의전처리 ⑵에따라시험한시료용액에대한검량선의작성은크롬표준액 ( 0.01 mg Cr/ ml ) 0.5~10 ml를단계적으로취하여 250 ml분액깔때기에넣고 40 % 황산암모늄 10 ml황산용액 ( 2N ) 10 ml와물을넣어전량을 100ml씩으로하여시료의시험방법에따라시험하고크롬의농도와흡광도와의관계선을작성한다. 비고1) 공기-아세틸렌불꽃시에는철 니켈등의공존물질에의한방해영향이크므로이때는황산나트륨을 1 % 정도넣어서측정한다. 2. 흡광광도법 ( 디페닐카르바지드법 ) 2.1 측정원리과망간산칼륨으로크롬이온전체를 6가크롬으로산화시킨다음산성에서디페닐카르바지드와반응하여생성하는적자색착화합물의흡광도를 540 nm에서측정하여총크롬을정량하는방법이다. 정량범위는 0.002~0.05 mg이며표준편차율은 10~3 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계

212 2.3 시료의전처리제 2장제 4항시료의전처리방법중황산-질산분해법에따라시험한다. 다만, 황산의백연이발생하기시작할때강열을하면무수황산크롬의불용성침전이생성하므로필요이상의강열은하지않아야한다. 2.4 시험방법전처리한시료적당량 ( 크롬으로서 0.002~0.05 mg을함유 ) 을 100 ml비커에취하여시료의전처리방법에서사용한황산량을포함하여전량이 0.3 ml가되도록황산 ( 1+9 ) 을넣고 ( 주1 ) 가열하여황산의백연이발생하면방냉한다. 물약 30 ml를넣고가열하여잔류물을녹인다음주의하여 0.3 % 과망간산칼륨용액을한방울씩넣어착색시키고과망간산의엷은홍색이없어지면다시 0.3 % 과망간산칼륨용액한방울씩을넣어 5 분간끓인다. 과망간산의엷은홍색이남을때까지이조작을반복한다. 냉각시키고 20 % 요소용액 10 ml를넣고세게흔들어섞으면서아질산나트륨용액 ( 2 W/V% ) 을한방울씩넣어과잉의과망간산및이산화망간을분해하여무색으로한다. 냉각하여액의온도를 15 로하고 50 ml용량플라스크에옮겨디페닐카르바지드용액 ( 1 W/V% ) 1 ml ( 주2 ) 를넣어흔들어섞고물을표선까지채워흔들어섞은다음 5 분간방치하고이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로물약 30 ml를취하여 100 ml비커에넣고황산 ( 1+9 ) 3 ml를넣고시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하고 540 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터크롬의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성크롬표준액 ( mg Cr/ ml ) 1~25 ml를단계적으로취하여황산 ( 1+9 ) 3 ml를넣고이하시료의시험방법에따라시험하여크롬의양과흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 발색시황산의최적농도는 0.2N이다. 시료의전처리에서다량의황산을사용하였을경우에는시료에무수황산나트륨약 20 mg을넣고가열하여황산의백연을발생시켜황산을제거한다음황산 ( 1+9 ) 3 ml를넣고시험한다. 2) 시료중철이 2.5 mg이하로공존할경우에는디페닐카르바지드용액을넣기전에 5 % 피로인산나트륨 10수화물용액 2 ml를넣어주면영향이없다. 비고1) 철및기타방해원소를다량함유한경우시료적당량 ( 크롬으로서 0.05 mg이하함유 ) 을분액깔때기에넣고시료 20 ml에대하여황산 ( 1+1 ) 을 5 ml의비율로넣어산농도를약 3.6N로조절하고 0.3 % 과망간산칼륨용액을한방울씩넣어

213 액의색을엷은홍색으로한다음쿠페론용액 ( 5 W/V% ), 클로로포름 10 ml를넣어흔들어섞고정치하여클로로포름층을분리한다. 수층을 100 ml비커에옮기고증발건고한다. 잔사에소량의황산및질산을넣고다시증발건고하여유기물질을분해한다음황산 ( 1+9 ) 3 ml와물약 30 ml를넣어녹이고 2.4 시험방법중이하 0.3 % 과망간산칼륨용액몇방울을넣어가열하고 에따라시험한다. 2) 크롬함유량이미량으로서비교적깨끗한시료일경우시료적당량을취하여시료 100 ml당황산 2 ml를넣어가열하여끓이고방냉한다음황산제일철암모늄용액 1 ml를넣어흔들어섞고질산 2 ml를넣어끓여서철을산화시킨다음방냉하고암모니아수 ( 1+4 ) 를넣어약알칼리성으로하여준다. 암모니아냄새가없어질때까지끓이고뜨거운상태로약 20 분간정치하여침전을여과한다. 온 ( 溫 ) 1 % 질산암모늄용액으로 2 회씻고여액과씻은액은버린다. 침전을황산 ( 1+15 ) 5 ml에녹이고거름종이를온수로씻어서여액및씻은액을합하여이하 2.4 시험방법에따라시험한다. 3. 유도결합플라스마발광광도법 3.1 측정원리 크롬을유도결합플라스마발광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용 하는장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.007~50 mg /l 이다. 3.2 기구및기기 유도결합플라스마발광광도분석장치 아르곤가스 : 액화또는압축아르곤으로서 V/V% 이상 3.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에의한다. 3.4 시험방법제 3장제 3항유도결합플라스마발광광도법에따라 nm에서시료용액의발광광도를측정하고미리작성한검량선으로부터크롬의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다

214 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성크롬표준액 ( 0.05 mg Cr/ ml ) 0, 2, 10, 20 ml를정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml, 염산 ( 1+1 ) 10 ml및물을넣어표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여크롬의농도와발광광도와의관계선을작성한다

215 제 23 항 6 가크롬 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리 6가크롬을원자흡광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는장치및측정조건등에따라다르나 nm에서 0.2~5 mg /l이고표준편차율은 10~2 % 이다. 공기, 아세틸렌으로는아세틸렌유량이많은쪽이감도가높지만철, 니켈의방해가많으며, 아세틸렌-일산화이질소는방해는적으나감도가낮다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 0.01 mg /l이상으로한다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 램프 : 크롬중공음극램프 가스 : 가연성가스 : 아세틸렌조연성가스 : 공기또는일산화이질소 1.3 시료의전처리 3가크롬이존재하지않을경우시료를여과하고염산또는질산을넣어 0.1~1N 산성용액으로하여물을넣어일정용량으로한다. 시료중 6가크롬농도가미량이고 3가크롬이공존할경우시료적당량 ( 500 ml이하 ) 에황산제이철암모늄용액 1 ml를넣어흔들어섞고암모니아수 ( 1+4 ) 를넣어약알카리성으로하여암모니아냄새가거의없어질때까지조용히끓이고뜨거운상태로정치하여침전을완결시키고여과한다. 온 1 % 질산암모늄용액으로 2 회씻는다. 여액과씻은액을합하고이액에대하여이하제 20항크롬시험방법 1.3 시료의전처리에따라시험한다. 시료적당량 ( 6가크롬으로서 0.005~0.1 mg함유 ) 을취하여수산화나트륨용액 ( 1N ) 또는황산용액 ( 1N ) 으로중화한다음 250 ml분액깔때기에옮기고 40 % 황산암모늄용액 10 ml, 황산용액 ( 2N ) 10 ml와물을넣어전량을 100 ml로하여흔들어섞고 3 % 트리옥실아민 메틸이소부틸케톤용액 20 ml를넣어 5 분간세게흔들어섞은다음정치하여메틸이소부틸케톤층을취한다

216 1.4 시험방법 제 20 항크롬시험법 1.4 에따라시험한다. 2. 흡광광도법 ( 디페닐카르바지드법 ) 2.1 측정원리 6가크롬에디페닐카르바지드를작용시켜생성하는적자색의착화합물의흡광도를 540 nm에서측정하여 6가크롬을정량하는방법이다. 정량범위는 0.002~0.05 mg이고표준편차는 10~3 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 2.3 시험방법여과한시료적당량 ( 6가크롬으로서 0.05 mg이하함유 ) 을취하여 50 ml메스플라스크에넣고수산화나트륨 ( 1N ) 또는황산용액 ( 1N ) 으로중화한다음황산 ( 1+9 ) 3 ml를넣어흔들어섞고액온을 15 로냉각한다음, 디페닐카르바지드용액 ( 1 W/V% ) 1 ml를넣어곧흔들어섞고물을표선까지채워 5 분간방치한다. 이용액의일부를층장 10 nm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로 100 ml비커에앞에서분취한시료와동량을취하여황산 ( 1+9 ) 3ml를넣고에틸알코올 ( 95 W/V% ) 소량을넣어끓여서 6가크롬을 3가크롬으로환원시킨다. 액온을 15 로냉각하여 50 ml용량플라스크에옮기고디페닐카르바지드용액 ( W/V% ) 1 ml를넣고물을넣어표선까지채워잘흔들어섞고 5 분간방치한다음바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 540 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터 6가크롬의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성크롬표준액 ( mg Cr/ ml ) 1~25 ml를단계적으로취하여 50 ml용량플라스크에넣고시료의시험방법에따라시험하여 6가크롬의양과흡광도와의관계선을작성한다. 비고1) 시료중에잔류염소가공존하면발색을방해한다. 이때는시료에수산화나트륨용액 ( 20 W/V% ) 을넣어 ph 12 정도로조절한다음입상활성탄을 10 % 정도되게놓고자석교반기로약 30 분간교반하여여과한액을시료로사용한다

217 3. 유도결합플라스마발광광도법 3.1 측정원리 6 가크롬을유도결합플라스마발광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는 사용하는장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.007~50 mg /l 이다. 3.2 기구및기기 유도결합플라스마발광광도분석장치 아르곤가스 : 액화또는압축아르곤으로서 V/V% 이상 3.3 시료의전처리 1.3 시료의전처리 및 에의한다. 3.4 시험방법제 3장제 3항유도결합플라스마발광광도법에따라 nm에서시료용액의발광광도를측정하고미리작성한검량선으로부터크롬의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성크롬표준액 ( 0.05 mg Cr/ ml ) 0, 2, 10, 20 ml를정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml, 염산 ( 1+1 ) 10 ml및물을넣고표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여크롬의농도와발광광도와의관계선을작성한다

218 제 24 항아 연 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리아연을원자흡광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는장치및측정조건에따라다르나 nm에서 0.05~2 mg /l이고표준편차율은 10~2 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 mg /l 이상으로한다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 램프 : 아연중공음극램프 가스 : 가연성가스 : 아세틸렌조연성가스 : 공기 1.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에따라시험한다. 1.4 시험방법제 3장제 2항원자흡광광도법에따라 nm에서전처리한시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터아연의양을구하고농도 ( mg /l) 를산출한다. 검량선의작성아연표준액 ( 0.01 mg Zn/ ml ) 0.5~20 ml를단계적으로취하고 100 ml용량플라스크에넣고시료와같은양의산을넣어물로표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여아연의농도와흡광도와의관계선을작성한다. 2. 흡광광도법 ( 진콘법 ) 2.1 측정원리

219 아연이온이 ph 약 9에서진콘 ( 2-카르복시-2'-하이드록시 (hydroxy)-5' 술포포마질 -벤젠 나트륨염 ) 과반응하여생성하는청색킬레이트화합물의흡광도를 620 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 0.002~0.04 mg이고표준편차율은 10~3 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 2.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에따른다. 2.4 시험방법전처리한시료적당량 ( 아연으로서 0.04 mg이하를함유 ) 을 100 ml의비커에취하고 6N 염산또는 6N 수산화나트륨용액을한방울씩떨어뜨려 ph 약 7로중화한다음 50 ml용량플라스크에옮기고물을넣어약 30 ml로한다. 아스코르빈산나트륨 0.5 g ( 주1 ), 1 % 시안화칼륨용액 1 ml를넣고잘흔들어섞는다. 다음에염화칼륨 수산화나트륨완충액 ( ph 9.0 ) 5 ml, 진콘용액 3 ml, 포수클로랄용액 ( 10 W/V% ) 3 ml를넣어흔들어섞고물을넣어표선을채운다음 30 이하에서 2~5분간방치하여 ( 주2 ) 시료용액으로한다. 따로물 30 ml를취하여이하시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여층장 10 mm흡수셀에옮겨 620 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터아연의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성아연표준액 ( 0.002mg Zn/ ml ) 1~20 ml를단계적으로취하여 50 ml용량플라스크에넣고물을넣어약 30 ml로한다음이하시료의시험방법에따라시험하여아연의양과흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 2가망간이공존하지않은경우에는넣지않는다. 2) 발색의정도는 15~29, ph는 8.8~9.2의범위에서잘된다. 비료1) 시료중에시안화칼륨과착화합물을형성하지않는중금속이온이공존하면발색할때혼탁하여방해한다. 전처리한시료 10 ml씩을 A, B 두개의 100 ml공전비커에취하여 A공전비커는 2.4 시험방법에따라시험하여시료용액 Ⅰ로한다

220 B공전비커는포수클로랄용액 3 ml대신에물 3 ml를넣고 2.4 시험방법에따라시험하여시료용액 Ⅱ로한다. 따로아연을함유하지않은물을취하여이하 2.4 시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여층장 10 mm에흡수셀에옮겨 620 nm에서시료용액 Ⅰ 및시료용액 Ⅱ의흡광도를측정하여시료용액 Ⅰ와흡광도와시료용액 Ⅱ의흡광도와의차로보정시료용액의흡광도를산출하여아연의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 3. 유도결합플라스마발광광도법 3.1 측정원리 아연을유도결합플라스마발광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용 하는장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.002~100 mg /l 이다. 3.2 기구및기기 유도결합프라스마발광광도분석장치 아르곤가스 : 액화또는압축아르곤으로서 V/V% 이상 3.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에의한다. 3.4 시험방법제 3장제 3항유도결합플라스마발광광도법에따라 nm에서시료용액의발광광도를측정하고미리작성한검량선으로부터아연의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성아연표준액 ( 0.05 mg Zn/ ml ) 0, 2, 10, 20 ml를정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml, 염산 ( 1+1 ) 10 ml및물을넣어표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여아연의농도와발광광도와의관계선을작성한다

221 제 25 항구 리 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리구리를원자흡광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는장치및측정조건등에따라다르지만 nm에서 0.2~4 mg /l 이고표준편차율은 10~2 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 mg /l이상으로한다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 램프 : 구리중공음극램프 가스 : 가연성가스 : 아세틸렌조연성가스 : 공기 1.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에따라시험한다. 1.4 시험방법제 3장제 2항원자흡광광도법에따라 nm에서전처리한시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터구리의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하고보정한다. 감량선의작성구리표준용액 ( 0.01 mg Cu/ ml ) 2~40 ml를단계적으로취하여 100 ml용량플라스크에넣고시료와같은양의산을넣고물로표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여구리의농도와흡광도와의관계선을작성한다. 2. 흡광광도법 ( 디에틸디티오카르바민산법 ) 2.1 측정원리

222 구리이온이알칼리성에서디에틸디티오카르바민산나트륨과반응하여생성하는황갈색의 킬레이트화합물을초산부틸로추출하여흡광도를 440 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 0.002~0.03 mg이고표준편차율은 10~2 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 2.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에의한다. 2.4 시험방법전처리한시료적당량 ( 구리로서 0.03 mg이하함유 ) 을분액깔때기에넣어 m-크레솔퍼플에틸알코올용액 ( 0.1 W/V% ) 2~3 방울을넣고구연산이암모늄용액 ( 구리시험용 ) 5 ml, 에틸렌디아민테트라초산이나트륨용액 ( 구리시험용 ) 1 ml를넣고암모니아수 ( 1+1 ) 로엷은자색을나타낼때까지중화하고물을넣어 50 ml로한다. 디에틸디티오카르바민산나트륨용액 ( 1 W/V% ) 2 ml를넣어흔들어섞고초산부틸 ( 구리시험용 ) 10 ml를정확히넣어약 3 분간세게흔들어섞고정치한다. 초산부틸층을분리하여무수황산나트륨약 1 g이들어있는시험관에넣고흔들어섞는다. 이액일부를층장 10 mm흡수셀에따라시료용액으로한다. 따로물약 30 ml를취하여분액깔때기에넣고시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 440 nm에서시료용액으로흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터구리의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성구리표준용액 ( mg Cu/ ml ) 2~30 ml를단계적으로취하여이하시료의시험방법에따라시험하고구리의양과흡광도와의관계선을작성한다. 비고1) 시료의전처리를하지않고직접시료를사용하는경우, 시료중에시안화합물이함유되어있으면염산산성으로하여서끓여시안화물을완전히분해제거한다음시험한다. 2) 비스머스 (Bi) 가구리의양보다 2 배이상존재할경우에는황색을나타내어방해한다. 이때는시료의흡광도를 A 1 으로하고따로같은양의시료를취하여시료의시험방법중암모니아수 ( 1+1 ) 를넣어중화하기전에시안화칼륨용액 ( 5 W/V% ) 3 ml를넣어구리를시안착화물로만든다음중화하여시험하고이액의흡광도를 A 2 로한다. 여기에서구리에의한흡광도는 A 1 -A 2 이다

223 3) 추출용매는초산부틸대신사염화탄소, 클로로포롬, 벤젠등을사용할수도 있다. 그러나시료중음이온계면활성제가존재하면구리의추출이불완전하다. 4) 무수황산나트륨대신건조거름종이를사용하여여과하여도된다. 3. 유도결합플라스마발광광도법 3.1 측정원리 구리를유도결합플라스마발광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용 하는장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.006~50 mg /l 이다. 3.2 기구및기기 유도결합플라스마발광광도분석장치 아르곤가스 : 액화또는압축아르곤으로서 V/V% 이상 3.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에의한다. 3.4 시험방법제 3장제 3항유도결합플라스마발광광도법에따라 nm에서시료용액의발광광도를측정하고미리작성한검량선으로부터구리의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성구리표준액 ( 0.05 mg Cu/ ml ) 0, 2, 10, 20 ml를정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml, 염산 ( 1+1 ) 10 ml및물을넣어표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여구리의농도와발광광도와의관계선을작성한다

224 제 26 항카드뮴 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리카드뮴을원자흡광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.05~2 mg /l 이고표준편차율은 10~2 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 mg /l이상으로한다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 램프 : 카드뮴중공음극램프 가스 : 가연성가스 : 아세틸렌조연성가스 : 공기 1.3 시료의전처리제 2장제 4항시료의전처리방법에의한다. 다만시료중에알칼리금속, 알칼리토금속의할로겐화합물을다량함유하는경우에는분자흡수나광산란에의하여오차를발생하므로추출법으로카드뮴을분리하여시험하거나연속광원등을이용한바탕선보정을하여야한다. 1.4 시험방법제 3장제 2항원자흡광광도법에따라 nm에서전처리한시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터카드뮴의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성카드뮴표준액 ( 0.01 mg Cd/ ml ) 0.5~20 ml를단계적으로취하여 100 ml용량플라스크에넣고시료와같은양의산을넣어물로표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여카드뮴의농도와흡광도와의관계선을작성한다

225 2. 흡광광도법 ( 디티존법 ) 2.1 측정원리카드뮴이온을시안화칼륨이존재하는알카리성에서디티존과반응시켜생성하는카드뮴착염을사염화탄소로추출하고, 추출한카드뮴착염을주석산용액으로역추출한다음다시수산화나트륨과시안화칼륨을넣어디티존과반응하여생성하는적색의카드뮴착염을사염화탄소로추출하고그흡광도를 530 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 0.001~0.03 mg이고표준편차율은 10~3 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 2.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에의한다. 2.4 시험방법전처리한시료적당량 ( 카드뮴으로서 0.03 mg이하를함유 ) 을 250 ml분액깔때기에넣고수산화나트륨용액 ( 10 W/V% ) 으로철등의수산화물침전이생성하기직전까지중화한다. 염산히드록실아민용액 ( 10 W/V% ) 1 ml를넣어흔들어섞고여기에구연산이암모늄용액 ( 10 W/V% ) 5 ml, 수산화나트륨용액 ( 10 W/V% ) 10 ml및시안화칼륨용액 ( 1 W/V% ) 1 ml를넣고물에넣어전량을약 100 ml로한다음잘흔들어섞는다. 디티존사염화탄소용액 ( W/V% ) 5 ml를넣어 1 분간세게흔들어섞고정치하여사염화탄소층을 100 ml분액깔때기에옮기고다시수층에디티존사염화탄소용액 ( W/V% ) 5 ml를넣어추출한다. 사염화탄소층이변색되지않을때까지디티존사염화탄소용액 ( W/ V% ) 으로추출을반복하고전체사염화탄소층을합한다. 사염화탄소층에주석산용액 ( 2 W/V% ) 20 ml를넣어 1 분간세게흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리한다. 사염화탄소층을다른분액깔때기에옮기고주석산용액 ( 2 W/V% ) 5 ml를넣어 1 분간세게흔들어섞고정치하여사염화탄소층을버린다. 전체주석산용액층을합하고정제사염화탄소 2ml를세게흔들어섞고정치하여사염화탄소층를버린다

226 주석산용액층에염산히드록실아민용액 ( 10 W/V% ) 0.2 ml, 수산화나트륨용액 ( 10 W/V% ) 10 ml및시안화칼륨용액 ( 0.1 W/V% ) 1 ml를넣어흔들어섞고디티존사염화탄소용액 ( W/V% ) 5 ml를넣어 1 분간세게흔들어섞고정치한다. 50 ml분액깔때기에서사염화탄소층을옮기고다시수층에는디티존사염화탄소용액 ( W/V% ) 2 ml를넣어 1 분간세게흔들어섞고정치한다. 사염화탄소층이변색되지않을때까지디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 으로추출하여전체사염화탄소층을합하고수산화나트륨용액 ( 1 W/V% ) 20 ml를넣어 1 분간흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리하고정제사염화탄소를넣고전량을정확히 10 ml또는 20 ml로하여시료용액으로한다. 따로물약 50 ml로취하여시료의시험방법에따라시험하고바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여건조한거름종이로여과하고층장 10 mm흡수셀에넣어 520 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터카드뮴의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성카드뮴표준액 ( mg Cd/ ml ) 1~30 ml를단계적으로취하여물을넣어약 30 ml로묽힌다음시료의시험방법중 주석산용액층에염산히드록실아민용액 ( 10 W/V% ) 0.2 ml 시료용액으로한다 와같은방법으로시험하여카드뮴의양과흡광도와관계선을작성한다. 비고1) 시료중다량의철과망간을함유하는경우디티존에의한카드뮴추출이불완전하다. 이경우에는중화한시료일정량에염산을넣어 2N의염산산성으로하여강염기성음이온교환수지칼럼 ( R-C1형, 지름 10 mm, 길이 200 mm ) 에 3 ml /min의속도로유출시켜카드뮴을흡착하고염산 ( 1+9 ) 으로씻어준다음새로운수기에질산 ( 1+12 ) 을사용하여용출되는카드뮴을받는다. 이용출액을가지고시험방법에따라시험한다. 이때는시험방법중주석산용액 ( 2 W/V% ) 으로역추출하는조작을생략해도된다. 3. 유도결합플라스마발광광도법 3.1 측정원리 카드뮴을유도결합플라스마발광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사 용하는장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.004~50 mg /l 이다

227 3.2 기구및기기 유도결합플로스마발광광도분석장치 아르곤가스 : 액화또는압축아르곤으로서 V/V% 이상 3.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에의한다. 3.4 시험방법제 3장제 3항유도결합플라스마발광광도법에따라 nm에서시료용액의발광광도를측정하고미리작성한검량선으로부터카드뮴의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성카드뮴표준액 ( 0.05 mg Cd/ ml ) 0, 2, 10, 20 ml를정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml, 염산 ( 1+1 ) 10 ml및물을넣어표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여카드뮴의농도와발광광도와의관계선을작성한다

228 제 27 항 납 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리납을원자흡광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는장치및측정조건에따라다르나 nm에서 1~20mg /l이고, 표준편차율은 10~2 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 0.04 mg /l 이상으로한다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 램프 : 납중공음극램프 가스 : 가연성가스 : 아세틸렌조연성가스 : 공기 1.3 시료의전처리제 2장제 4항시료의전처리방법에의한다. 다만시료중에알칼리금속, 알칼리토금속의할로겐화합물을다량함유하는경우에는분자흡수나광산란에의하여오차를발생하므로추출법으로납을분리하여시험하거나연속광원등을이용한바탕선보정을하여야한다. 1.4 시험방법제 3장제 2항원자흡광광도법에따라 nm에서전처리한시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터납의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성납표준액 ( 0.1 mg Pb/ ml ) 1~20 ml를단계적으로취하여 100 ml용량플라스크에넣고시료와같은양의산을넣어물로표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여납의농도와흡광도와의관계선을작성한다

229 2. 흡광광도법 ( 디티존법 ) 2.1 측정원리납이온이시안화칼륨공존하에알카리성에서디티존과반응하여생성하는납디티존착염을사염화탄소로추출하고과잉의디티존을시안화칼륨용액으로씻은다음납착염의흡광광도를 520 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 0.001~0.04 mg이고표준편차율은 10~3 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 1.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에의한다. 1.4 시험방법전처리한시료적당량 ( 납으로서 0.04 mg이하함유 ) 을분액깔때기에취하고구연산이암모늄용액 ( 10 W/V% ) 5 ml및염산히드록실아민용액 ( 10 W/V% ) 1 ml를넣어흔들어섞고잠시정치하여암모니아수 ( 1+1 ) 를넣어알카리성 ( ph 약 8.5~9 ) 으로한다음시안화칼륨용액 ( 5 W/V% ) 5 ml를넣고물을넣어약 100 ml로한다. 디티존사염화탄소 ( W/V% ) 5 ml를넣어 1 분간세게흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리하여부피실린더에옮기고다시수층에디티존사염화탄소용액 ( W/V% ) 2~3ml넣어흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리한다. 디티존사염화탄소층이변색하지않을때까지추출조작을반복한다. 전체사염화탄소층을합하여정제사염화탄소를넣어 10 ml또는 20 ml의일정량으로한다. 여기에시안화칼륨용액 ( 0.5 W/V% ) 5 ml를넣어 1 분간흔들어섞고정치하여분리하고상부의수층은스포이드로흡인제거한다. 시안화칼륨용액층의색이무색이될때까지씻는조작을반복한다 ( 주1 ). 물 5 ml를넣어흔들어씻은다음정치하여물을완전히분리하여버리고사염화탄소층을시료용액으로한다. 따로물약 50 ml를취하여시료의시험방법에따라시험하고바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여건조거름종이로여과하고층장 10 mm흡수셀에옮겨 520 nm에서시료용액의흡광도를측정하여미리작성한검량선으로부터납의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다

230 검량선의작성납표준액 ( mg Pb/ ml ) 1~40 ml를단계적으로취하여물을넣어약 50ml로한다음이하시료의시험방법에따라시험하여납의양과흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 시료에다량의비스머스 ( Bi ) 가공존하면시안화칼륨용액으로수회씻어도무색이되지않는다. 이때에는다음과같이납과비스머스를분리하여시험한다. 추출하여 10~20 ml로한사염화탄소층에프탈산수소칼륨완충액 ( ph 3.4 ) 20 ml씩을넣어 2 회역추출하고전체수층을합하여분액깔때기에옮긴다. 암모니아수 ( 1+1 ) 를넣어약알칼리성으로하고시안화칼륨용액 ( 5 W/V% ) 5 ml및물을넣어약 100 ml로한다음이하시료의시험방법에따라추출조작부터다시시험한다. 3. 유도결합플라스마발광광도법 3.1 측정원리 납을유도결합플라스마발광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는 장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.04~100 mg /l 이다. 3.2 기구및기기 유도결합플라스마발광광도분석장치 아르곤가스 : 액화또는압축아르곤으로서 V/V% 이상 3.3 시료의전처리제 2장제 4항시료의전처리방법에의한다. 3.4 시험방법제 3장제 3항유도결합플라스마발광광도법에따라 nm에서시료용액의발광강도를측정하고미리작성한검량선으로부터납의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성납표준액 ( 0.05 mg Pb/ ml ) 0, 2, 10, 20 ml를정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml, 염산 ( 1+1 ) 10 ml및물을넣어표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여납의농도와발광광도와의관계선을작성한다

231 제 28 항망 간 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리망간을원자흡광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.1~4 mg /l 이고표준편차율은 10~2 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 mg /l 이상으로한다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 램프 : 망간중공음극램프 가스 : 가연성가스 : 아세틸렌조연성가스 : 공기 1.3 시료의전처리 제 2장제 4항시료의전처리방법에의한다. 망간함유량이미량일경우에는시료적당량을비커에넣어가열하여액온을 90 로하고황산제이철용액 ( Fe 3+, 2 mg / ml ) 5 ml와과산화수소수 ( 30% ) 5~10 ml를넣는다. 10 % 수산화나트륨용액또는암모니아수 ( 1+1 ) 를혼화하면서넣어생성된수산화제이철침전을여과한다. 침전을온수로씻고과산화수소수 ( 3% ) 소량을넣은염산 ( 1+2 ) 소량으로녹이고거름종이를온수로씻어준다. 이액및씻은액을합하여 0.1~1 N의염산산성으로하여일정량으로한다. 용해성망간을측정할경우에는시료채취즉시여과하여여액을 또는 에따라전처리한다. 1.4 시험방법 제 3 장제 2 항원자흡광광도법에따라 nm에서전처리한시료용액의흡광도를 측정하고미리작성한검량선으로부터망간의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다

232 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성망간표준액 ( 0.01 mg Mn/ ml ) 1~40 ml를단계적으로취하여 100 ml용량플라스크에넣고시료와같은양의산을넣어물로표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하고망간의농도와흡광도와의관계선을작성한다. 2. 흡광광도법 ( 과요오드산칼륨법 ) 2.1 측정원리망간이온을황산산성에서과요오드산칼륨으로산화하여생성된과망간산이온의흡광도를 525 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 0.04~0.5 mg이고표준편차율은 10~3 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 2.3 시료의전처리 제 2장제 4항시료의전처리방법중질산-황산에의한분해에따른다. 망간함유량이미량일경우에는 1.3 에따라시험하여여과한침전을온수로씻은다음침전물을주의하여비커에옮기고, 거름종이에붙어있는침전물을소량의과산화수소수 ( 1+10 ) 를넣은황산 ( 1+9 ) 50 ml로씻어서녹이고물로거름종이를씻어준다. 여액과씻은액을침전물이들어있는비커에넣고가열하여침전물을녹인다음과산화수소수를분해하기위하여액량약 40 ml까지가열농축한다. 용해성망간을측정할경우에는시료채취즉시여과하여여액을 또는 에따라전처리한다. 2.4 시험방법시료 ( 주1 ) 또는전처리한시료적당량 ( 망간으로서 0.5 mg이하 ) 을취하여비커에넣고황산의총량이 5 ml가되도록황산 ( 1+1 ) 을넣어주고 ( 주2 ) 가열하여황산의백연을발생시킨다. 방냉한다음물약 20 ml와인산 1 ml를넣고가열하여내용물을녹인다. 불용물이있을경우에는여과하여온수로씻어주고여액과씻은액을합하여

233 물을넣어약 45 ml로한다. 여기에과요오드산칼륨 0.5 g을넣고끓는물중탕중에서정확히 30 분간가열하여발색시킨다. 속히물로냉각한다음 50 ml용량플라스크에옮겨물로표선을채운다. 이용액일부를층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로하고, 따로물약 30 ml를취하여황산 ( 1+1 ) 10 ml와인산 1 ml를넣어준다음시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 525 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터망간의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성망간표준액 ( 0.02 mg Mn/ ml ) 2~25 ml를단계적으로취하여비커에넣고물을넣어약 30 ml로한다음황산 ( 1+1 ) 10 ml및인산 1 ml를넣어이하시료의시험방법에따라시험하고망간의양과흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 시료중이시험방법에영향이큰유기물질이나기타방해물질이존재하지않을경우에는전처리를생략할수도있다. 2) 시료를전처리하지않고시험할경우에는황산 ( 1+1 ) 10 ml를넣어주며, 2.3 에따라전처리한시료로서전처리한용액전량을취하여시험할경우에는황산을넣어주지않는다. 3. 유도결합플라스마발광광도법 3.1 측정원리 망간을유도결합플라스마발광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용 하는장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.002~50 mg /l 이다. 3.2 기구및기기 유도결합플라스마발광광도분석장치 아르곤가스 : 액화또는압축아르곤으로서 V/V % 이상 3.3 시료의전처리 제 2장제 4항시료의전처리방법에의한다. 용해성망간을측정할경우에는시료채취즉시여과하여여액을 에따라전처리하여시료로한다

234 3.4 시험방법제 3장제 3항유도결합플라스마발광광도법에따라 nm에서시료용액의발광강도를측정하고미리작성한검량선으로부터망간의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성망간표준액 ( 0.05 mg Mn/ ml ) 0, 2, 10, 20 ml를정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml, 염산 ( 1+1 ) 10 ml및물을넣어표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여망간의농도와발광광도와의관계선을작성한다

235 제 29 항비 소 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리염화제일주석으로시료중의비소를 3가비소로환원한다음아연을넣어발생되는비화수소를통기하여아르곤-수소불꽃에서원자화시켜 nm에서흡광도를측정하고비소를정량하는방법이다. 정량범위는사용하는장치및측정조건에따라다르나 0.005~0.05 mg /l이며, 표준편차율은 10~3 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 mg /l 이상으로한다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 램프 : 비소중공음극램프 가스 : 운반가스 : 아르곤연소가스 : 아르곤-수소 비화수소발생장치 ( 그림 1) 1.3 시료의전처리 시료적당량 ( 비소로서 mg이하함유 ) 을취하여 100 ml비커에넣고황산 ( 1+1 ) 1 ml및질산 2 ml를넣은다음과망간산칼륨용액 ( 0.3 W/V % ) 을착색될때까지넣어가열한다. 탈색되면과망간산칼륨용액 ( 0.3 W/V % ) 을추가하고황산의백연을충분히발생시켜잔류하는질산을완전히제거한다. 실온까지방냉하고염산 ( 1+1 ) 4 ml및물을넣어약 20 ml로한다. 시료중유기물, 질산염및아질산염이존재하지않을경우에는시료적당량을 100 ml비커에취하여염산 ( 1+1 ) 4 ml를넣고끓지않을정도로수분간가열한다음냉각하고물을넣어약 20 ml로한다

236 유기물등이다량함유된폐하수시료의경우에는시료적당량을 100 ml비커에취하여황산 ( 1+1 ) 1 ml, 질산 2 ml및과염소산 3 ml를넣고가열하여백연을충분히발생시킨다음방냉하고염산 ( 1+1 ) 4 ml와물을넣어약 20 ml로한다. 유기물이완전히분해되지않을경우질산 2 ml씩추가하고분해를반복한다. 1.4 시험방법전처리한시료전량을비화수소발생장치의반응용기에옮기고요드화칼륨용액 ( 20 W/V % ) 2 ml, 염화제일주석용액 ( 비소시험용 Ⅰ ) 2 ml및염화제이철용액 ( 비소시험용 ) 1 ml를넣어흔들어섞고약 15 분간방치하여시료용액으로한다. 비화수소발생장치를원자흡광분석장치에연결하고전체흐름내부에있는공기를아르곤가스로치환시킨다음 4방콕크를회전하여흐름을차단한다. 아연분말 ( 주1 ) 0.1 g을신속히반응용기에넣고자석교반기로교반하여비화수소를발생시킨다. 비화수소의발생이완전히끝나압력 ( 또는부피 ) 이일정하게되면 4 방콕크를회전시켜아르곤가스를흐르게하고비화수소를아르곤-수소불꽃중에도입하여 nm에서흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터비소의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성비소표준액 ( mg As/ ml ) 1~10 ml를단계적으로취하여비커에넣고염산 ( 1+1 ) 4 ml및물을넣어약 20 ml로한다음이하시료의시험방법에따라시험하고비소의농도와흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 아연분말은비소함량이 ppm 이하의것을사용하여야한다. 2. 흡광광도법 ( 디에틸디티오카르바민산은법 ) 2.1 측정원리시료중의비소를 3가비소로환원시킨다음아연을넣어발생되는비화수소를디에틸디티오카르바민산은의피리딘용액에흡수시켜이때나타나는적자색의흡광도를 530 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 0.002~0.1 mg이고표준편차율은 10~2 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 mg /l 이상으로한다. 2.2 기구및기기

237 광전광도계또는광전분광광도계 비화수소발생장치 ( 그림 2) 2.3 시료의전처리 시료적당량 ( 비소로서 0.01 mg이하함유 ) 을비커에취하여질산 5 ml와황산 3 ml를넣고가열하여백연을발생시킨다. 방냉한다음물소량으로비커에기벽을씻어주고백연이발생할때까지가열한다. 다시방냉하고그림2의비소발생병에옮겨염산 ( 1+1 ) 2 ml와물을넣어약 40 ml로한다. 비소함유량이미량이거나방해물질을함유하고있는시료의경우에는다음과같이시험하여비소를농축분리한다. 시료적당량 ( 비소로서 0.01 mg이하함유 ) 을취하여시료 1 L에대하여질산 3 ml와 0.3 % 과망간산칼륨용액을한방울씩떨어뜨려엷은홍색으로착색시킨다음끓인다. 과망간산의엷은홍색이탈색할때는다시 0.3 % 과망간산칼륨용액을탈색하지않을때까지넣어끓이고방냉하여과산화수소수 ( 1+30 ) 를소량씩넣어과잉의과망간산을분해한다. 염화제이철용액 ( 비소시험용 ) 5 ml를넣고액온을약 80 로하여메타크레솔퍼플에틸알코올용액 ( 0.05 W/V % ) 수방울을넣고액의색이자색이될때까지암모니아수 ( 1+2 ) 를넣는다. 이때의 ph는약 9~10이다. 침전이완결된다음작은거름종이로여과하고소량의온수로 2~3회씻어준다. 침전은온황산 ( 1+5 ) 18 ml와염산 ( 1+1 ) 2 ml를거름종이상에조금씩떨어뜨려녹이고, 거름종이는온수로씻어여액과씻은액을그림 2의비소발생병에옮기고물을넣어약 40 ml로한다. 2.4 시험방법전처리한시료가들어있는비화수소발생병에요오드화칼륨용액 ( 20 W/V % ) 15 ml와염화제일주석용액 ( 비소시험용Ⅱ ) 5 ml를넣어흔들어섞은다음 10 분간방치한다. 입상아연 3 g을넣고신속히그림 2와같이도관과디에틸디티오카르바민산은용액 ( 0.5 W/V % ) 5 ml를넣어둔흡수관을연결하고 25 물중탕중에서약 1 시간방치한다. 비화수소의흡수가끝나면흡수관안의피리딘용액을층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로시료와같은량의물을취하여시료의시험방법에

238 따라시험하고바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 530 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작정한검량선으로부터비소의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성비소표준액 ( mg As/ ml ) 2~10 ml를그림 2 비소시험장치의비화수소발생병에단계적으로넣고황산 3 ml와염산 ( 1+1 ) 2 ml및물을넣어약 40 ml로한다음이하시료의시험방법에따라서시험하여비소의양과흡광도와의관계선을작성한다. 다만, 공침법으로시료를전처리하였을경우에는각표준액에염화제이철용액 ( 비소시험용 ) 5 ml을넣어준다. 3. 유도결합플라스마발광광도법 3.1 측정원리 비소를유도결합플라스마발광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용 하는장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.05~100 mg /l 이다. 3.2 기구및기기 유도결합플라스마발광광도분석장치 아르곤가스 : 액화또는압축아르곤으로서 V/V % 이상 3.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법 1~4 에의한다. 3.4 시험방법제 3장제 3항유도결합플라스마발광광도법에따라 nm에서시료용액의발광광도를측정하고미리작성한검량선으로부터비소의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성비소표준액 ( 0.05 mg As/ ml ) 0, 2, 10, 20 ml를정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml, 염산 ( 1+1 ) 10 ml및물을넣어표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여비소의농도와발광광도와의관계선을작성한다

239 제 30 항니 켈 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리니켈은원자흡광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는장치및측정조건에따라다르나 nm에서 0.3~6 mg /l이고표준편차율은 10~2 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 0.01 mg /l 이상으로한다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 램프 : 니켈중공음극램프 가스 : 가연성가스 : 아세틸렌조연성가스 : 공기 1.3 시료의전처리 제 2장제 4항시료의전처리방법에의한다. 니켈의함유량이미량인경우에는시료 100 ml를비커에넣어염산 5 ml를넣고 5 분간끓이고냉각한다음 10 % 구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % ) ( 구리시험용 ) 2 ml를넣고지시약으로페놀프탈레인에틸알코올용액 ( 0.5 W/V % ) 수방울을넣고암모니아수 ( 1+5 ) 를한방울씩떨어뜨려적색이될때까지중화하고암모니아수 ( 1+5 ) 2~3방울을더넣는다. 이액을분액깔때기에옮기고디메틸글리옥심에틸알코올용액 ( 1 W/V % ) 2 ml, 클로로포름 10 ml를넣고 1 분간세게흔들어섞고정치하여클로로포름층을 50 ml분액깔때기에옮긴다. 수층에클로로포름 5 ml를넣어추출을반복하고전체클로로포름층을 50 ml분액깔때기에합한다. 여기에암모니아수 ( 1+50 ) 10~20 ml를넣고 30 초간세게흔들어섞고정치하여분리한다. 클로로포름층을다른 50 ml분액깔때기에옮긴다. 여기에염산 ( 1+20 ) 10 ml를넣고 1 분간세게흔들어섞고정치하여클로로포름층을분리한다. 다시염산 ( 1+20 ) 5 ml를넣어흔들어섞고정치하여클로로포름층을버린다. 역추출한전체염산층을합하여 25 ml용량플라스크에넣고물로표선을채운다

240 1.4 시험방법제 3장제 2항원자흡광광도법에따라 nm에서전처리한시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터니켈의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성니켈표준액 ( 0.01 mg Ni/ ml ) 3~60 ml를단계적으로취하여 100 ml부피플라스크에넣고시료와같은양의산을넣어물로표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여니켈의농도와흡광도와의관계선을작성한다. 2. 흡광광도법 ( 디메틸글리옥심법 ) 2.1 측정원리니켈이온은암모니아약알칼리성에서디메틸글리옥심과반응시켜생성한니켈착염을클로로포름으로추출하고이것을묽은염산으로역추출한다. 추출액에브롬과암모니아수를넣어니켈을산화시키고다시암모니아알칼리성에서디메틸글리옥심과반응시켜생성한적갈색니켈착염의흡광도 450 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 0.002~0.05 mg이고표준편차율은 10~2 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 2.3 시료의전처리 1.3 시료의전처리방법 에따른다. 2.4 시험방법전처리한시료적당량 ( 니켈로서 0.05 mg이하함유 ) 을 250 ml분액깔때기에넣고구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % )( 구리시험용 ) 2 ml를넣어흔들어섞고지시약으로페놀프탈레인에틸알코올용액 ( 0.5 W/V % ) 수방울을넣고암모니아수 ( 1+5 ) 를한방울씩떨어뜨려적색이될때까지중화하고암모니아수 ( 1+5 ) 2~3방울을더넣는다. 다음에디메틸글리옥심에틸알코올용액 ( 1 W/V % ), 2 ml, 클로로포름 10 ml를넣고 1 분간세게흔들어섞고정치하여클로로포름등을분리하여다른 50 ml분액깔때기에옮긴다

241 수층에클로로포름 5 ml씩을넣어추출을 2 회반복하고전체클로로포름층을 50 ml분액깔때기에합한다. 여기에암모니아수 ( 1+50 ) 10~20 ml를넣고 30 초간세게흔들어섞고정치하여클로로포름층을 50 ml분액깔때기에옮긴다. 클로로포름층에염산 ( 1+20 ) 10 ml를넣어 1 분간세게흔들어섞고정치하여클로로포름층을분리한다. 클로로포름층을다른분액깔때기에옮기고다시염산 ( 1+20 ) 5 ml를넣어흔들고섞고정치하여클로로포름층을버린다. 역추출한전체염산층을합하여 25 ml메스플라스크에옮긴다음브롬수 ( 포화 ) 2 ml를넣어흔들어섞고 1 분간방치한다. 여기에암모니아수 ( 1+1 ) 를한방울씩떨어뜨려중화하고암모니아수 ( 1+1 ) 2 ml를추가하고디메틸글리옥심수산나트륨용액 ( 1 W/V % ) 2 ml를넣고물로표선을채우고흔들어섞은다음 20 분간방치하여시료용액으로한다. 따로물 50 ml를취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액을대조액으로하여층장 10 mm흡수셀에옮겨 450 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터니켈의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성니켈표준액 ( mg Ni/ ml ) 0.4~10 ml를 25 ml용량플라스크에단계적으로취하여물을넣어액량을약 15 ml로하고이하시료의시험방법중 브롬수 ( 포화 ) 2 ml를넣어흔들어섞고 부터따로시험하여니켈의양과흡광도와의관계선을작성한다. 3. 유도결합플라스마발광광도법 3.1 측정원리 니켈을유도결합플라스마발광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용 하는장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.015~50 mg /l 이다. 3.2 기구및기기 유도결합플라스마발광광도분석장치 아르곤가스 : 액화또는압축아르곤으로서 V/V % 이상 3.3 시료의전처리 제 2 장제 4 항시료의전처리방법에의한다

242 3.4 시험방법제 3장제 3항유도결합플라스마발광광도법에따라 nm에서시료용액의발광광도를측정하고미리작성한검량선으로부터니켈의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성니켈표준액 ( 0.05 mg Ni/ ml ) 0, 2, 10, 20 ml를정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml, 염산 ( 1+1 ) 10 ml및물을넣어표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여니켈의농도와발광광도와의관계선을작성한다

243 제 31 항 철 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리철을원자흡광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는장치및측정조건에따라다르나 nm에서 0.3~6 mg /l이고표준편차율은 10~2 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 0.03 mg /l 이상으로한다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 램프 : 철중공음극램프 가스 : 가연성가스 : 아세틸렌조연성가스 : 공기 1.3 시료의전처리 제 2장제 4항시료의전처리방법에따른다. 철의함유량이미량인경우에는시료 100 ml를취하여질산 2 ml를넣고끓인다음암모니아수 ( 1+1 ) 를넣어약알칼리성으로하고수분간계속끓여서침전을생성시키고정치한다. 침전을여과하여온수로수회씻은다음침전을원래비커에소량의물로씻어서넣고염산 ( 1+1 ) 4 ml를넣고가열하여녹인다. 이용액을앞의거름종이를사용하여여과하면서거름종이에남아있는수산화제이철을녹이고온수로거름종이를씻어준다음여액과씻은액을합하여일정량으로한다. 용해성철을측정할경우에는시료채취즉시여과하고여액을 또는 에따라전처리하여시료용액으로한다. 1.4 시험방법제 3장제 2항원자흡광광도법에따라 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터철의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다

244 검량선의작성철표준액 ( 0.01 mg Fe/ ml ) 3~60 ml을단계적으로취하여 100 ml용량플라스크에넣고시료와같은양의산을넣어물로표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하고철의농도와흡광도와의관계선을작성한다. 2. 흡광광도법 ( 페난트로린법 ) 2.1 측정원리철이온을암모니아알칼리성으로하여수산화제이철로침전분리하고침전을염산에녹여서염산히드록실아민으로제일철로환원한다음, o-페난트로린을넣어약산성에서나타나는등적색철착염의흡광도를 510 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는 0.02~0.5 mg이고표준편차율은 10~2 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 2.3 시료의전처리 제 2장제 4항시료의전처리방법에따른다. 용해성철을측정할경우에는시료채취즉시여과하고여액을 에따라전처리하여시료로한다. 2.4 시험방법전처리한시료적당량 ( 철로서 0.5 mg이하함유 ) 을비커에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml를넣어끓여침전을생성시킨다. 물을넣어 50~100 ml로하고암모니아수 ( 1+1 ) 을넣어약알칼리성으로한다음수분간끓인다. 잠시동안방치하고여과한다음온수로침전을씻는다. 침전을원래비커에옮기고염산 ( 1+2 ) 6 ml를넣어가열하여녹인다. 이용액을처음의거름종이로여과하여거름종이에붙어있는수산화제이철을녹여내고온수로수회씻어서여액과씻은액을 100 ml용량플라스크에옮긴다. 물을넣어액량을약 70 ml로하고염산히드록실아민용액 ( 10 W/V % ) 1 ml를넣어흔들어섞는다. o-페난트로린용액 ( 0.1 W/V % ) 5 ml를넣어흔들어섞고초산암모늄용액 ( 50 W/V % ) 10 ml를넣어흔들어섞은다음실온까지식힌다. 물을넣어표선까지채워흔들어섞은다음 20 분간방치하여시료용액으로한다. 따로물 50 ml를취

245 하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여층장 10 mm흡수셀에옮겨 510 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터철의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성철표준액 ( 0.01 mg Fe/ ml ) 2~50 ml를단계적으로취하여 100 ml용량플라스크에넣고염산 ( 1+2 ) 6 ml를넣어이하시료의시험방법중 물을넣어액량을약 70 ml로하고 에따라시험하여철의양과흡광도와의관계선을작성한다. 3. 유도결합플라스마발광광도법 3.1 측정원리 철을유도결합플라스마발광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는 장치및측정조건에따라다르지만 nm에서 0.007~100 mg /l 이다. 3.2 기구및기기 유도결합플라스마발광광도분석장치 아르곤가스 : 액화또는압축아르곤으로서 V/V % 이상 3.3 시료의전처리 제 2장제 4항시료의전처리방법에의한다. 용해성철을측정할경우에는시료채취즉시여과하고여액을 에따라전처리하여시료로한다. 3.4 시험방법제 3장제 3항유도결합플라스마발광광도법에따라 nm에서시료용액의발광광도를측정하고미리작성한검량선으로부터철의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성철표준액 (0.05 mg Fe/ ml ) 0, 2, 10, 20 ml를정확히취하여 100 ml용량플라스크에넣고질산 ( 1+1 ) 2 ml, 염산 ( 1+1 ) 10 ml및물을넣어표선을채운다음이하시료의시험방법에따라시험하여철의농도와발광광도와의관계선을작성한다

246 제 32 항셀레늄 1. 원자흡광광도법 1.1 측정원리염산산성에서시료에아연분말을넣어발생되는수소화셀레늄을포집하여아르곤 ( 또는질소 )-수소불꽃에서원자화시켜 nm에서흡광도를측정하고셀레늄농도을정량하는방법이다. 정량범위는셀레늄으로서 0.005~0.05 mg /l이며, 정량한계값부근의측정정도상대표준편차율은 10 % 이다. 1.2 기구및기기 원자흡광광도계 램프 : 셀레늄중공음극램프 수소화셀레늄발생장치 1.3 시료의전처리시료적당량 ( 셀레늄으로서 ~ mg함유 ) 을비커 100 ml에염산 ( 1+1 ) 4 ml를넣은다음끓지않을정도로가열농축한다. 액량이 20 ml이하가되면가열을끝낸후방냉한다음 20 ml용량플라스크에옮기고비커를물로씻어낸후씻어낸물을용량플라스크에합하고물로표선을채운다. 시료용액이탁할경우에는여과하고여액을시료용액으로한다. 1.4 시험방법시료 20 ml ( 셀레늄으로 ~0.001 mg함유량 ) 를수소화셀레늄발생장치반응기에넣고염산 10 ml를넣어수소화셀레늄발생장치를원자흡광광도계에연결하고 4방향코크를조작하여장치내의공기를아르곤또는질소로치환한다음잠근다. 아연분말정제 1 개를신속히시험용액중에넣고자석교반기로저어수소화셀레늄을발생시킨다. 반응용기내의가스압이소정의값에도달하면 4방향코크를조작하여발생한수소화셀레늄을아르곤 ( 또는질소 )-수소불꽃에도입하여파장 nm에서흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터셀레늄의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다

247 ㅇ검량선작성셀레늄표준용액 ( mg Se/ ml ) 0~10 ml를단계적으로용량플라스크에취하고물을넣어 20 ml로한다음수소화셀레늄반응용기에옮기고이하 1.4 시험방법에따라흡광광도를측정하여셀레늄의농도와흡광도와의관계선을작성한다

248 제 33 항수 은 1. 원자흡광광도법 ( 환원기화법 ) 1.1 측정원리시료에염화제일주석을넣어금속수은으로환원시킨다음이용액에통기하여발생되는수은증기를원자흡광광도법에따라정량하는방법이다. 정량범위는사용하는장치및측정조건에따라다르나 nm에서 ~0.01 mg /l 이고표준편차율은 20~4 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 mg /l 이상이다. 1.2 기구및기기 원자흡광분석장치 : 석영제흡수셀이부착된것 램프 : 수은중공음극램프 수은환원기화장치 ( 그림1 ) 1.3 시료의전처리시료적당량 ( 수은으로서 mg이하함유 ) 을삼각플라스크에넣고물을넣어약 200 ml로하고황산 ( 1+1 ) 20 ml와질산 5 ml및과망간산칼륨용액 ( 5 W/V % ) 20 ml를넣어흔들어섞고약 15 분간색이지속될때까지반복한다. 다음에과황산칼륨용액 ( 5 W/V % ) 10 ml를넣고약 95 물중탕중에서 2 시간가열한다. 실온으로냉각하고염산히드록실아민용액 ( 10 W/V % ) 을한방울씩넣어과잉의과망간산칼륨을분해한다음물을넣어 250 ml로한다. 1.4 시험방법전처리한시료 ( 주1 ) 전량을그림 1의환원용기에옮기고환원기화장치와원자흡광분석장치를연결한다음환원용기에염화제일주석용액 ( 수은시험용 ) 10 ml를넣고송기펌프를작동시켜발생한수은증기를흡수셀로보낸다 ( 주2 ) nm에서흡광도가상승하여일정할때의값을측정하고미리작성한검량선으로부터수은의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 시료의측정이끝나면배기콕크를열고과망간산칼륨을함유한황산 ( 1+4 ) 이들어있는세척병을통과시켜대기중에방출한다

249 검량선의작성수은표준액 ( mg Hg/ ml ) 0~25 ml를단계적으로취하여환원용기에넣고황산 ( 1+1 ) 20 ml와물을넣어약 250 ml로한다음이하시료의시험방법에따라시험하고수은의농도와흡광도와의관계선을작성한다. 주1) 유기물및기타방해물질을함유하지않는시료는시료의전처리를생략하고시료를직접환원용기에넣고황산 ( 1+1 ) 20 ml와물을넣어약 250 ml로한다음시료의시험방법에따라시험한다. 2) 환원기화장치가개방식인경우에는염화제일주석용액을넣은다음밀폐하여약 2 분간세게흔들어섞고펌프의작동과동시에콕크를열어수은증기를흡수셀에보낸다. 이때에는흡광도대신봉우리의높이또는면적을측정하여계산한다. 비고1) 시료중염화물이온이다량함유된경우에는산화조작시유리염소를발생하여 nm에서흡광도를나타낸다. 이때는염산히드록실아민용액을과잉으로넣어유리염소를환원시키고용기중에잔류하는염소는질소가스를통기시켜추출한다. 2) 벤젠, 아세톤등휘발성유기물질도 nm에서흡광도를나타낸다. 이때에는과망간산칼륨분해후헥산으로이들물질을추출분리한다음시험한다. 그림 1. 수은환원기화장치의구성 A : 환원용기 ( 300~350 ml의유리병 ) B : 건조관 ( 입상의과염소산마그네슘또는염화칼슘으로충전한것 ) C : 유량계 ( 0.5~5l/min의유량측정이가능한것 ) D : 흡수셀 ( 길이 10~30 cm석영제 )

250 E : 송기펌프 ( 0.5~3 l/min의송기능력이있는것 ) F : 기록계 G : 수은중공음극램프 H : 측광부 I : 세척병 ( 또는수은제거장치 ) 2. 흡광광도법 ( 디티존법 ) 2.1 측정원리수은을황산산성에서디티존사염화탄소로일차추출하고브롬화칼륨존재하황산산성에서역추출하여방해성분과분리한다음인산-탄산염완충액존재하에서디티존사염화탄소로수은을추출하여 490 nm에서흡광도를측정하는방법이다. 정량범위는 0.001~0.025 mg이고표준편차율은 10~3 % 이다. 2.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 2.3 시료의전처리 시료적당량 ( 수은으로서 mg Hg 이하함유 ) 을비커에취하여이하 1.3 시료의 전처리방법에따라시험하고물을넣어일정량 ( 250~500 ml ) 으로한다. 2.4 시험방법전처리한시료를분액깔때기에옮기고디티존사염화탄소용액 ( W/ V % ) 20 ml를넣어약 2분간세게흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리한다. 다시수층에디티존사염화탄소 ( W/V % ) 20 ml씩을넣고 2회이상반복추출하여사염화탄소층을합한다. 사염화탄소층을 0.25N 황산용액 50 ml로씻어주고사염화탄소층을다른분액깔때기에옮겨새로운 0.25N 황산용액 50 ml와브롬화칼륨용액 ( 40 W/V % ) 10 ml를넣고세게흔들어섞은다음정치하여사염화탄소층을분리하여버린다. 수층을정제사염화탄소소량으로씻어주고수층에인산-탄산염완충액 ( 수은시험용 ) 20 ml와디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 10 ml를넣고세게흔들어섞은다음정치하여사염화탄소층을분리한다. 사염화탄소층을건조거름종이로여과하여수분을제거하고층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로시료와같은량의물을비커에취하여시료의전처리및시험방법에따라시험하여바탕시험액으로

251 한다. 바탕시험액을대조액으로하여 490 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터수은의양을구하여농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성수은표준액 ( mg Hg/ ml ) 0~25 ml를단계적으로취하여황산 ( 1+1 ) 20 ml와물을넣어시료와같은양으로하고분액깔때기에옮긴다음이하시료의시험방법에따라시험하여수은의양과흡광도와의관계선을작성한다

252 제 34 항알킬수은 1. 가스크로마토그래피 1.1 측정원리알킬수은화합물을가스크로마토그래피에따라정량하는방법이다. 알킬수은화합물을벤젠으로추출하여 L-시스테인용액에선택적으로역추출하고다시벤젠으로추출하여가스크로마토그래피으로측정하는방법이다. 정량범위는염화메틸수은에대응하는수은으로서 mg /l 이상이다. 1.2 기구및기기 가스크로마토그래프 ⑴ 검출기 : 전자포획형검출기 ( Electron Capture Detector:ECD ) ⑵ 컬럼 : 유리제, 안지름 3 mm, 길이 40~150 cm ⑶ 컬럼충전제 : 크로마토그래프용크로모솔브 W( 알킬수은시험용 ) 또는이와동등한규격의충전제에크로마토그래프용 DEGS를 5~25 % 침윤시킨것 ⑷ 운반가스 : 질소또는헬륨 ( % 이상 ) 운반가스유속 :30~80 ml / 분 ⑸ 시료주입부온도 : 140~240 컬럼온도 : 130~180 검출기의온도 : 140~ 시험방법시료 200 ml를 500 ml분액깔때기에넣고암모니아수또는염산으로중화한다음염산을넣어약 2N 염산산성으로한다 ( 주1 ). 크로마토그래프용벤젠 50 ml를넣고 2 분간흔들어섞고정치한다음, 수층을다른 500 ml분액깔때기에옮기고벤젠층을보존한다. 다시수층에크로마토그래프용벤젠 50 ml를넣고 2 분간흔들어섞고정치하여수층은버리고전체벤젠층을합한다. 염화나트륨용액 ( 20 W/V% ) 20 ml를넣어 1 분간세게흔들어섞어서씻어주고벤젠층에 L-시스테인-초산나트륨혼합액 8ml를넣어 3 분간흔들어섞고정치하여

253 수층을 20~30 ml분액깔때기에옮긴다. 염산 2 ml와크로마토그래프용벤젠 5 ml를넣어 2 분간흔들어섞고정치하여수층을버린다. 벤젠층을 5~10 ml공전시험관에옮기고크로마토그래프용무수황산나트륨을넣어탈수시킨다음미량주사기를사용하여일정량을가스크로마토그래프에주입한다. 크로마토그램을기록하고염화메틸수은또는염화에틸수은의유지시간에해당하는위치의봉우리높이또는봉우리면적을측정하여미리작성한검량선으로부터염화에틸수은또는염화메틸수은에대응하는수은의양을구하고농도 ( mg Hg/l ) 를산출한다. 바탕시험을행하여보정한다. 검량선의작성분액깔때기에 L-시스테인-초산나트륨혼합액 8 ml를넣고염화메틸수은표준액 ( mg Hg/l ) 또는염화에틸수은표준액 ( mg Hg/ ml ) 을가스크로마토그래프의검출감도에따라단계적으로취하여이하시료의시험방법에따라시험하고염화메틸수은또는염화에틸수은에대응하는수은의양과봉우리높이또는봉우리면적과의관계선을작성한다. 주1) 황화물, 티오황산염, 티오시안산염, 시안화물이시료중에함유되어있을때에는약 2N 염산산성에서염화제일구리 ( 분말 ) 100 mg을넣어흔들어섞고정치하여침전을여과하고, 침전을물소량씩으로 2~3회씻어준다음여액및씻은액을합하여 1.3 시험방법에따라시험한다. 비고1) 시료중에알킬수은화합물이벤젠추출을방해하는성분이함유되어있는경우에는시료에일정량의염화메틸수은또는염화에틸수은표준액을첨가하여회수율을구하고정량값에보정한다. 2) 크로마토그램에나타난염화메틸수은또는염화에틸수은봉우리의위치등에의심이있을경우에는다음과같이시험한다. 사용하고남아있는 5~10 ml공전시험관의벤젠 1 ml ( 시료추출액 ) 를다른공전시험관에넣고 L-시스테인-초산나트륨혼합액 1 ml를넣어 2 분간흔들어섞고정치하여벤젠층을분리하고크로마토그래프용무수황산나트륨을넣어탈수시킨다음 1.3 시험방법에서투입한양과같은양을가스크로마토그래프에주입한다. 이결과나타난크로마토그램으로부터시료의시험방법에서나타났던봉우리가없어지면염화메틸수은또는염화에틸수은이함유되어있음을나타낸다. 2. 원자흡광광도법 ( 박층크로마토그래프분리에의한원자흡광광도법 ) 2.1 측정원리 알킬수은화합물을벤젠으로추출하고알루미나칼럼으로농축한후벤젠으로다시

254 추출한다음박층크로마토그래피에의하여농축분리하고분리된수은을산화분해하여정량하는방법이다. 정량범위는염화메틸수은또는염화에틸수은에대응하는수은으로써 mg /l 이상이다. 2.2 기구및기기 크로마토그래프용알루미나컬럼 ( 그림1 ) 박층크로마토그래프용실리카겔박층판박층크로마토그래프용실리카겔 30 g에물 60 ml를넣어흔들어섞고유리판 ( mm ) 에 0.20~0.25 mm범위의균일한두께로도포한다. 105~110 로약 3 시간건조하고건조용기중에서방냉보존한다. 그림 1. 크로마토그래프용알루미나컬럼 2.3 시험방법시료 200 ml를 500 ml분액깔때기에넣고암모니아수또는염산으로중화시킨다음염산을넣어약 2N 염산산성으로한다 ( 주1 ). 벤젠 50 ml를넣어약 2 분간세게흔들어섞고정치하여수층을다른분액깔때기에옮기고벤젠층을보존한다. 다시수층에벤젠 50 ml를넣어 2 분간세게흔들어섞고정치하여벤젠층을분리하고수층을버린다. 전체벤젠층을합하여염산 ( 1+50 ) 20 ml를넣고약 1 분간흔들어섞고정치하여수층을버린다. 벤젠층은건조한거름종이로여과하여수분을제거하고그림 1의크로마토그래프용알루미나컬럼에넣어매분 10 ml의유속으로흡인조절하면서벤젠을유출시키고벤젠 10 ml로컬럼을씻어준다. 크로마토그래프용알루미나컬럼의상부유리섬유를제거하고상부에서약 2 cm두께의알루미나를취하여 50 ml분액깔때기에옮긴다. 염산 ( 1+10 ) 5 ml와클로로포름 3 ml를넣어약 3 분간세게흔들어섞고정치하여클로로포름층을분리하고건조한거름종이로여과하여수분을제거한다. 클로로포름층 1.5 ml를분취하여미리준비한박층크로마토그래프용실리카겔박층판의하단에서약 20 mm의위치에서폭 20 mm이상의간격으로 100 μl마이크로실린지를사용하여여러개로나누어점적한다. 하나의점적넓이는가능한한적게하여야한다. 같은박층크로마토그래프용실리카겔박층판에염화메틸수은또는염화에틸수은표준액 ( mg Hg/ ml ) 100 μl를시

255 료용액과같은방법으로확인용으로점적한다음박층크로마토그래프용실리카겔박층판을노말헥산-클로로포름용액 ( 1+9 ) 을전개용매로넣어둔전개조안에넣고상승법에따라높이약 150 mm까지전개한다. 전개가끝난다음풍건하고염화메틸수은또는염화에틸수은표준액의위치에디티존사염화탄소용액 ( W/V% ) 을분무하여발색시키고그전개위치를확인한다. 표준액과같은 Rf치에상당하는위치부분의실리카겔을유리판에서박리하여 300 ml분해플라스크에옮기고물을넣어약 200 ml로한다. 이하제 31항수은시험방법 1.3 시료의전처리및 1.4 시험방법에따라시험하여미리작성한검량선으로부터염화메틸수은또는염화에틸수은에대응하는수은의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성분액깔때기에염화메틸수은표준액 ( mg Hg/ ml ) 또는염화에틸수은표준액 ( mg Hg/ ml ) 를단계적으로취하여염산 ( 1+10 ) 5 ml와클로로포름 3 ml를넣고이하시료의시험방법에따라시험하여염화메틸수은또는염화에틸수은에대응하는수은의양과흡광도와의관계선을작성한다. 비고1) 시료중에알킬수은화합물의벤젠추출을방해하는성분이함유되어있는경우에는 1. 가스크로마토그래피비고 1) 에따라재현성시험을행한다

256 제 35 항유기인 1. 가스크로마토그래피 1.1 측정원리이방법은유기인화합물중이피엔, 파라티온, 메틸디메톤, 다이아지논및펜토에이트의측정에적용된다. 유기화합물을가스크로마토그래피에따라확인정량하는방법으로서크로마토그램을작성하여나타난봉우리의유지시간에따라각성분을확인하고봉우리의높이또는면적을측정하여유기인을정량한다. 정량범위는사용하는장치및측정조건에따라다르나각성분당 0.001~0.02 μg이며, 표준편차율은 10~5 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 mg /l 이상으로한다. 1.2 기구및기기 가스크로마토그래프 ⑴ 검출기 : 불꽃광도형검출기 ( Flame Photometric Detector : FPD ) ⑵ 컬럼 : 유리제, 안지름 3~4 mm, 길이 0.5~2 m ⑶ 컬럼충전제 ( 주1 ) 가정지상 (stationary phase) 담체 1 크로마토그래프용크로모솔브 W( AW-DMCS:60~80 메쉬 ) 2 크로마토그래프용크로모솔브 G( DMCS : 60~80 메쉬 ) 3 크로마토그래프용가스크롬 Q( 60~80 메쉬 ) 나정지상 (stationary phase) 액체 1 가스크로마토그래프용 10 % 실리콘 DC 가스크로마토그래프용 10 % 실리콘 DC, QF-1 3 가스크로마토그래프용 0.5 % 실리콘 OV 가스크로마토그래프용 10 % 실리콘 DC % 실리콘 DC, QF-1 5 가스크로마토그래프용 1.5 % 실리콘 OV-17 ⑷ 온도가칼럼온도 : 130~230 나시료주입구온도 : 170~250 다검출기온도 : 170~

257 ⑸ 운반가스 : 질소또는헬륨 ( 99.9 % 이상 ) 을사용하여유기인화합물이 3~30 분간에 유출될수있도록유량을조절한다. 농축장치 : 구데르나다니쉬형농축기 ( 그림 1 ) 또는회전증발농축기 정제용컬럼 : 다음중한종류를선택하여사용한다. ⑴ 규산컬럼 ( 그림 1 ) 크로마토그래프용이산화규소 0.5 g, 정제규조토 0.5 g을서로섞고니트로메탄 0.5 ml를넣어잘섞은다음헥산전개액 10 ml를넣어혼합한다. 관의밑바닥에헥산전개액으로습윤시킨탈지면또는유리섬유를깔고그위에혼합물을흘려넣는다. 소량의헥산전개액으로관의내벽을씻어주고하부의콕크를열어헥산전개액을유출시킨다. 혼합물이침착하여안정화되고헥산전개액의액면이혼합물의상단에이르면콕크를닫는다. ⑵ 플로리실컬럼 안지름 10 mm, 길이 300 mm의유리관하부에콕크를부착한것으로밑바닥에탈지면또는유리섬유를깔고크로마토그래프용헥산 10 ml로관의내부를씻어준다음헥산이탈지면또는유리섬유의위까지잠기도록한다. 플로리실 ( 입경 147~246 μm, 시간건조후건조용기에서 30 분간방냉한것 ) 3 g을비커에넣고크로마토그래프용헥산 10 ml를넣어유리막대으로저으면서기포를제거한다음크로마토그래프용헥산과함께유리관에충전한다. 플로리실층이안정화되면그위에크로마토그래프용무수황산나트륨 1 g을넣고소량의크로마토그래프용헥산으로관의내벽을씻어준다음하부의콕크를열어헥산이무수황산나트륨의상단에이를때까지유출시킨다. ⑶ 활성탄컬럼 안지름 15 mm, 길이 300 mm의유리관하부에콕크를부착한것으로바닥에탈지면또는유리섬유를끼우거나유리여과판으로된관에다르코 G-60( Darco G-60 ) 미결정셀루로오스분말 ( 1+10 ) 5 g을비커에넣고크로마토그래프용아세톤으로잘섞어서충전한다. 콕크를열어충전제상단까지아세톤을유출시키고크로마토그래프용무수황산나트륨 3 g을넣는다. 아세톤약 10 ml로크로마토그래프용컬럼내벽에묻은무수황산나트륨을씻어아래로떨어뜨리고콕크를열어아세톤이무수황산나트륨의상단에이를때까지유출시킨다

258 1.3 시료의전처리 < 추출 > 시료 500 ml를 1 L 분액깔때기에취하여염화나트륨 5 g을넣어녹인다음지시약으로메틸오렌지용액 ( 0.1 W/V% ) 을사용하여염산 ( 1+1 ) 을넣어 ph를 3~4로조절한다. 여기에크로마토그래프용헥산 50 ml를넣어약 3 분간세게흔들어섞고분리하여수층을다른분액깔때기에옮긴다. 수층에다시크로마토그래프용헥산 25 ml씩을넣어추출조작을 2 회이상반복하고헥산층을 250 ml분액깔때기에합한다. 헥산층을크로마토그래프용증류수 2 ml씩으로 2 회이상씻어주고소량의크로마토그래프용무수황산나트륨으로탈수한다음탈지면또는건조거름종이로여과하여농축기의플라스크에옮긴다. 분액깔때기와무수황산나트륨을소량의크로마토그래프용헥산으로씻은다음위에서사용한여과장치로여과하여농축기의플라스크에합한다. 농축기를 40 이하감압상태에서작동하여헥산층의대부분을휘산시키고실온에서조용히공기 ( 또는질소 ) 를송기하여잔류헥산층을모두휘산시킨다. < 정제 > 추출조작에서얻은잔류물에유기인정제용컬럼용출액 ( 이하용출액이라함 ) 2 ml를넣어녹인다 ( 주2 ). 이액을피펫으로흡입하여조용히컬럼의상부에넣고용출액 2 ml로농축기의플라스크를씻어서같은방법으로컬럼의상부에넣는다. 컬럼하부의콕크를열고액면이무수황산나트륨의상단에이를때까지유출시켜 10 ml부피실린더에받는다. 다음에용출액 70 ml를컬럼에조용히콕크를열고매초한방울의속도로유출시켜수기의액량이 5 ml가되면버리고다른 100 ml부피실린더에유출액 70 ml를받는다. 유출액을농축기에옮기고추출조작에서와같은방법으로농축하여용출액을모두휘산시킨다. 잔류물에크로마토그래프용아세톤 10 ml를정확히넣어녹이고시료용액으로한다

259 1.4 시험방법시료용액일정량 ( 2~10 μl ) 을마이크로실린지를사용하여가스크로마토그래프에주입하고크로마토그램을기록한다. 각성분별유지시간에해당되는봉우리로부터봉우리높이또는면적을측정하여미리작성한검량선으로부터각성분별양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 결과는각성분별농도를합산하여유기인으로표시한다. 검량선의작성유기인의성분별표준액 이피엔표준액 ( mg C 14 H 14 NO 4 PS/ ml ) 파라티온표준액 ( mg C 10 H 14 NO 5 PS/ ml ) 메틸디메톤표준액 ( mg C 6 H 15 O 3 PS 2 / ml ) 다이아지논표준액 ( mg C 12 H 21 N 2 O 3 PS/ ml ) 펜토에이트표준액 (0.005 mg C 12 H 17 O 4 PS 2 / ml ) 0.5~10 ml를단계적으로취하여 10 ml용량플라스크에넣고크로마토그래프용아세톤을넣어표선을채운다음일정량 ( 2~10 μl ) 을미량주사기를사용하여가스크로마토그래프에주입하고크로마토그래프을작성하여각성분의양과봉우리의높이또는면적과의관계선을작성한다. 주1) 컬럼충전제는 2종이상을사용하여크로마토그램을작성하며, 2종이상에서모두확인된성분에한하여정량을한다. 2) 방해물질을함유하지않은시료일경우에는정제조작을생략하고추출조작에서얻어진잔류물을유기인정제용컬럼용출액일정량으로녹여서시료용액으로한다. 비고1) 검출기는불꽃광도형검출기대신에알카리열이온형검출기또는전자포획형검출기를사용할수있다. 2) 헥산으로추출할경우메틸디메톤의추출율이낮아질수도있다. 이때에는헥산대신디클로로메탄과헥산의혼합액 ( 15:85 ) 을사용한다

260 제 36 항폴리클로리네이티드비페닐 ( PCB ) 1. 가스크로마토그래피 1.1 측정원리 PCB를헥산으로추출하여알칼리분해한다음다시추출하고실리카겔또는플로리실컬럼을통과시켜정제한다. 이액을농축시켜가스크로마토그래프에주입하고크로마토그램을작성하여나타난봉우리의형태에따라 PCB를확인하고정량하는방법이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 mg /l 이상으로한다. 1.2 기구및기기 가스크로마토그래프 ⑴ 검출기 : 전자포획형검출기 ( Electron Capture Detector : ECD ) ⑵ 컬럼 : 유리제, 안지름 2~4 mm, 길이 1~2 mm ⑶ 컬럼충전제 : 크로마토그래프용크로모솔브 W( PCB시험용 ) 또는이와동등한규격의충전제에가스크로마토그래프용 OV-17, SE-30, OV-1, QF-1, DEGS 등을 0.5~5 % 침윤시킨것. ⑷ 온도가컬럼온도 : 180~250 ( 3 H의경우 220 이하 ) 나시료주입구온도 : 200~250 다검출기온도 : 200~250 ( 3 H의경우 220 이하 ) ⑸ 운반가스 : 질소또는헬륨 ( 99.9 % 이상 ) 유속 30~100 mg /min 농축장치 : 제 32항과같은것 실리카겔컬럼안지름 10 mm, 길이 300 mm의유리관하부에콕크를부착한것으로밑바닥에탈지면또는유리섬유를깔고크로마토그래프용헥산을넣어위까지잠기도록한다. 크로마토그래프용실리카겔 4 g을크로마토그래프용헥산 10 ml를넣어유리막대으로저으면서기포를제거하고관의상부로부터충전한다. 크로마토그래프용헥산을넣어관의내벽을씻고실리카겔층을안정화시킨다음크로마토그래프용무수황산나트륨 1 g을넣어실리카겔층의위를덮는다. 다시크로마토그래프용헥산소량으로피펫을사용하여관의내벽을씻고콕크를열어헥산층이무수황산나트륨의상단에이를때까지유하시킨다

261 실리카겔컬럼의 PCB용출실험 PCB( 3염소 ) 표준액과 PCB( 6염소 ) 표준액의크로마토그래프용헥산용액 ( W/V% ) 을 2:1의용량비로섞은혼합액 2 ml를컬럼에조용히넣고콕크를열어액면이무수황산나트륨의상단에이르도록조절한다. 크로마토그래프용헥산 2 ml로컬럼의내벽을씻어준다음콕크를열어액면을조절하고컬럼의상부에크로마토그래프용헥산 200 ml를넣은분액깔때기를연결하여컬럼과분액깔때기의콕크를열고매초한방울의속도로유출시킨다. 유출액을 10 ml단위로시험관에분취하여각각순서에따라 5~10 μl씩을가스크로마토그래프에주입하고크로마토그램을작성하여 PCB의유출시점과종료점을확인한다. 1.3 시료의전처리 < 추출 > 시료 1 L를분액깔때기에넣고크로마토그래프용아세톤 50 ml와크로마토그래프용헥산 50 ml를넣어 5~10 분간흔들어섞고정치하여수층을다른분액깔때기에옮긴다. 수층에크로마토그래프용헥산 50 ml를넣어 5~10 분간흔들어섞고정치하여헥산층을분리한다. 전체헥산층을합하여농축기의플라스크에옮기고수욕상에서약 5 ml가될때까지농축한다. < 알칼리분해 > 추출조작에서얻어진농축액을 200 ml플라스크에옮기고수산화칼륨에틸알코올용액 ( 1M ) 50 ml를넣어환류냉각기를부착하고수욕상에서 1 시간정도끓인다음 50 까지방냉한다. 크로마토그래프용헥산 50 ml를넣고섞어서실온까지방냉하고분액깔때기에옮긴다. 플라스크는헥산, 에틸알코올용액 20 ml로깨끗이씻어서분액깔때기에합하고물 25 ml를넣어수초간세게흔들어섞고정치한다. 수층을분리하여다른분액깔때기에넣고크로마토그래프용헥산 50 ml를넣어흔들어섞은다음헥산층을분리하여앞의헥산층에합한다. 헥산층에물 100 ml씩을넣어 3 회반복세게흔들어섞어서씻어주고헥산층을분리한다. 헥산층을크로마토그래프용무수황산나트륨 10 g을충전시킨분리관에유출시켜유출액을농축기의플라스크에넣고수욕상에서약 5 ml가될때까지농축한다. < 정제 > 알칼리분해조작에서얻어진농축액을실리카겔컬럼의상부에조용히옮기고콕크를열어액면이무수황산나트륨의상단에이르도록한다음크로마토그래프용헥산 2 ml씩으로플라스크및컬럼의내벽을수회씻어서넣고컬럼의상부에크로마토그래프용헥산 200 ml를넣어분액깔때기를연결하여컬럼과분액깔때기의콕크를열고매초한방울의속도로유출시킨다. 유출액은실리카겔컬럼용출실험에서얻어진 PCB의유출범위량까지받아농축기의플라스크에옮기고수욕상에서액량이 5 ml이하가될때까지농축한다. 방냉한다음크로마토그래프용헥산을정확히 5 ml로하여시료용액으로한다

262 1.4 시험방법 확인시험전처리에서얻어진시료용액 1~10 μl를미량주사기를사용하여가스크로마토그래프에주입하고크로마토그램을작성하여같은조건에서작성된각 PCB 표준액의크로마토그램과비교한다. 크로마토그램상에나타난봉우리의형태가서로비슷하면시료중에 PCB가함유되어있음을알수있는데이때에는 2 종류이상의다른컬럼을사용하여다시크로마토그램을작성하고재확인한다. 정량시험확인시험에서가장분리능이좋은컬럼을사용하여시료용액 ( 1~10 μl ) 에대한크로마토그램을작성하고 PCB 표준액과같은위치에상당하는전체봉우리의높이또는면적의합을측정하여미리작성한검량선으로부터시료용액중의 PCB양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성확인시험에서나타난시료용액의크로마토그램과비슷한형태의 PCB 표준액 ( mg PCB/ ml ) 또는 PCB 혼합표준액을가스크로마토그래프의검출감도에따라단계적으로취하여크로마토그래프용헥산을넣어적당한농도로희석한다음시료와같은조건에서크로마토그램을작성하고전체봉우리높이또는면적의합과 PCB양과의관계선을작성한다. 비고1) 알칼리분해를하여도헥산층에유분이존재할경우에는실리카겔컬럼으로정제조작을하기전에다음과같이플로리실컬럼을통과시켜유분을분리한다 mm의유리컬럼에크로마토그래프용플로리실 20 g을크로마토그래프용헥산에침적시켜충전하고상부에크로마토그래프용무수황산나트륨을넣고소량의헥산으로안정화시킨다. 알칼리분해하여얻은헥산농축액을플르리실컬럼에조용히떨어뜨려액이무수황산나트륨층까지내려가도록콕크를열어매초 2 방울속도로유출시킨다. 계속해서 15 % 에틸에테르함유헥산 250 ml를유출시켜유출액을받아농축기의플라스크에넣고수욕상에서액량이 5 ml가될때까지농축시킨다음이농축액을실시카겔컬럼에넣어정제조작을한다

263 제 37 항음이온계면활성제 1. 흡광광도법 ( 메틸렌블루우법 ) 1.1 측정원리음이온계면활성제를메틸렌블루우와반응시켜생성된청색의복합체를클로로포름으로추출하여클로로포름층의흡광도를 650 nm에서측정하는방법이다. 정량범위는음이온계면활성제 < NaO 3 SO(CH 2 ) 11 CH 3 > 로서 0.002~0.05 mg이고표준편차율은 10~5 % 이다. 이방법에따라시험할경우유효측정농도는 0.02 mg /l이상으로한다. 1.2 기구및기기 광전광도계또는광전분광광도계 1.3 시험준비조작두개의 250 ml분액깔때기 ( A, B ) 를준비하여분액깔때기 ( A ) 에는물 50 ml, 분액깔때기 ( B ) 에는물 100 ml를넣고알카리성붕산나트륨용액 10 ml, % 메틸렌블루우용액 5 ml및 10 ml씩을넣고흔들어섞고정치하여클로로포름층을버린다. 클로로포름층이무색으로될때까지반복조작을한다. 분액깔때기 ( B ) 에는황산 ( 1+35 ) 3 ml를넣어둔다. 1.4 시험방법시료적당량 ( 음이온계면활성제로서 0.002~0.05 mg함유 ) 을취하여분액깔때기 ( A ) 에넣고클로로포름 10 ml를넣어 1 분간흔들어섞은다음정치하고클로로포름층을취하여분액깔때기 ( B ) 에옮겨 1분간흔들어섞고정치한다. 클로로포름층을미리클로로포름으로씻어둔탈지면을사용하여여과하고여액을 25 ml용량플라스크에옮긴다. 다시분액깔때기 ( A ) 에클로로포름 10 ml를넣고위와같은방법으로시험하여앞의 25 ml용량플라스크에합하고클로로포름을넣어표선까지채워이용액의일부를층장 10 mm흡수셀에넣어시료용액으로한다. 따로물 50 ml를취하여시료의시험방법에따라시험하여바탕시험액으로한다. 바탕시험액을대조액으로하여 650 nm에서시료용액의흡광도를측정하고미리작성한검량선으로부터음이온계면활성제의양을구하고농도 ( mg /l ) 를산출한다

264 검량선의작성음이온계면활성제표준액 ( 0.01 mg음이온계면활성제 / ml ) 0.2~5 ml를단계적으로취하여시료의시험방법에따라시험하고음이온계면활성제의양과흡광도와의관계선을작성한다. 비고1) 질산염, 시안화물, 티오시안산등의이온을다량함유한시료인경우에는측정에방해를주므로주의가필요하다

265 제 38 항휘발성저급탄화수소류 1. 가스크로마토그래피 ( 용매추출법 ) 1.1 측정원리시료중의트리클로로에틸렌및테트라클로로에틸렌을헥산으로추출하여가스크로마토그래피로정량하는방법이다. 정량범위는트리클로로에틸렌 ( C 2 HCl 3 ) 이 0.04~0.75 ng, 테트라클로로에틸렌 ( C 2 Cl 4 ) 이 0.01~0.2 ng이며, 표준편차율은 5~10 % 이다. 유효측정범위는각각 mg /l, mg /l이상이며, 그미만은불검출된것으로간주한다. 1.2 기구및기기 가스크로마토그래피 ⑴ 검출기 : 전자포획형검출기 ( ECD ) ⑵ 컬 럼 : 유리제로서안지름 3 mm, 길이 3 m 의것 ⑶ 컬럼충전제 : 크로마토그래프용크로모솔브 W( 알킬수은시험용 ) 또는이와동등한규격의담체에가스크로마토그래프용실리콘 DC-550, 가스크로마토그래프용실리콘 DC-200 또는그이상의분리성능을가진정지상 (stationary phase) 액체를약 20 % 피복한것 ⑷ 운반가스 : V/V % 이상의질소로서유량은 40~80 ml /min ⑸ 시료주입부온도 : 150~250 컬럼온도 : 60~100 검출기온도 : 150~250 부피실린더 : 용량 50 ml의마개있는것 마이크로실린지 : 1~10 μl용량의액체용 1.3 시료채취및보존 ⑴ 유리병에공간이없도록채취 ⑵ 인산 ( 1+10 ) 또는황산 ( 1+5 ) 을 1 방울 /10 ml로가하여 4 냉암소보존

266 1.4 시험방법채취한시료 40 ml를 50 ml공전부피실린더에조용히옮기고가스크로마토그래피용헥산 10 ml를넣어밀봉한다음 10~20 초간세게흔들어섞고정치한다. 액이분리되면상부헥산층의일부를미량주사기를사용하여정확히 5 μl취하고직접가스크로마토그래피에주입한다. 크로마토그램을기록하여트리클로로에틸렌및테트라클로로에틸렌의유지시간에해당하는위치의봉우리로부터봉우리높이또는면적을측정하고미리작성한검량선으로부터각각의양을구하여시료중의농도 ( mg /l ) 를산출한다. 검량선의작성가스크로마토그래피용헥산약 80 ml를넣은 100 ml용량플라스크에염소화탄화수소혼합표준액 ( 1.5 μg C 2 HCl 3 / ml, 0.4 μg C 2 Cl 4 / ml ) 0.5~10 ml를단계적으로취하여놓고가스크로마토그래피용헥산을넣어표선을채운다음이용액 5 μl씩을미량주사기에정확히취하여가스크로마토그래피에주입하고크로마토그램을기록한다. 크로마토그램으로부터트리클로로에틸렌및테트라클로로에틸렌에해당되는봉우리의높이또는면적을측정하고각각표준액농도와의관계선을작성한다. 비고1) 시료의봉우리높이또는면적이검량선의상한치를초과할경우에는헥산층일정량을취하여적당한농도로정확히희석한다음이액을가지고시험한다. 2) 용매추출법대신헤드스페이스법또는퍼이지-트랩 ( purge and trap ) 법을사용할수도있다. 3) 시료에혼합표준액일정량을첨가하여크로마토그램을작성하고미지의다른성분과봉우리의중복여부를확인한다. 만일봉우리가중복될경우분리컬럼을 1 % SP-1000/Carbopack B( 60/80 ), 1 % AT-1000/Graphac-GB ( 60/80 ) 및 VOCOL, DB-624 Capillary column이나또는이들과동등한분리능을가진컬럼으로서분리가양호한것을택하여시험한다. 2. 퍼지 트랩 - 가스크로마토그래프 / 질량분석법 2.1 측정원리시료중의트리클로로에틸렌, 테트라클로로에틸렌, 벤젠, 사염화탄소, 디클로로메탄및 1,1-디클로로에틸렌을불활성가스로퍼지시켜기상으로추출한다음트랩관으로흡착 농축하고, 가열 탈착시켜가스크로마토그래프 / 질량분석계로분석하는방법이다. 이방법에의한정량한계값은각휘발성화합물질로서 mg /l이고그미

267 만은불검출로한다. 따로규정이없는한산업폐수등매우혼탁한시료를제외한 하천, 호소등비교적깨끗한시료는이법에따라시험할수있다 기구및기기 가스크로마토그래프 / 질량분석계 ⑴ 가스크로마토그래프가 ) 컬럼 : 유리제로서안지름 0.25~0.53 mm, 필름두께 1.0~3.0 μm, 길이 30~100 m의 VOCOL 및 DB-624 등의모세관컬럼이나 1% SP-1000/Carbopack B ( 60/80 ) 등의충전관컬럼또는이와동등한분리성능을가진컬럼으로서대상분석물질의분리가양호한것을택하여시험한다. 나 ) 운반가스 : v/v % 이상의질소로서유량은 1~5 ml /min 다 ) 시료주입부온도 : 200~240 컬럼온도 : 35~220 at /min 검출기온도 : 220~240 ⑵ 질량분석계 ( mass spectrometer ) 가 ) 질량분리장치 : 자기장형 ( magnetic sector ), 사중극자형 ( quardrupole ) 및이온트랩형 (ion trap) 또는이와동등이상의성능을가진것나 ) 이온화방식 : 전자충격법 ( Electron Impact, EI ) 다 ) 이온화에너지 : 35~70 ev 라 ) 검출방법 : 선택이온검출법 ( Selected Ion Monitoring, SIM ) 또는질량크로마토그래피법 ( Mass Chromatography, MC ) 마 ) 운반가스 : v/v % 이상의헬륨가스바 ) 이온질량수 ( m/z ) : 트리클로로에틸렌 132, 130, 95 테트라클로로에틸렌 166, 164, 129 벤젠 78, 77, 52 사염화탄소 117, 119, 121 디클로로메탄 49, 84, 86 1,1-디클로로에틸렌 61, 96, 98 ⑶ 퍼지 트랩장치의가동조건가 ) 퍼지온도 : 30 나 ) 퍼지시간 : 11 분다 ) 탈착온도 : 180 라 ) 탈착시간 : 4 분마 ) 트랩가열 (bake) 온도 : 220 바 ) 트랩가열시간 : 7 분

268 사 ) 퍼지유량 : 약 40 ml / 분아 ) 탈착시유량 : 약 20 ml / 분자 ) 트랩 ( 주1 ) 의종류 : Tenax나 OV-1/Tenax/Silicagel/Charcoal 또는이와동등이상의성능을가진것 ⑷ 퍼지 트랩장치퍼지부, 트랩관, 탈착부및냉각응축부 ( cryofocus ) 등으로구성된다가 ) 퍼지부 : 5~25 ml의시료를주입할수있는스파저 ( sparger ) 와시료를일정온도로가온할수있는가온장치. 나 ) 트랩관 : 길이 5~30 cm이상, 안지름 2 mm이상의스테인레스강관에휘발성유기화합물을흡착 농축할수있는충전제가충전된것또는이와동등이상의성능을가진것다 ) 탈착부 : 트랩관에포집된휘발성유기화합물을가열 탈착할수있는가열장치또는이와동등이상의성능을가진것라 ) 냉각응축부 : 부착되는안지름 0.20~0.53 mm의모세관컬럼을 -50 ~ -150 정도로냉각가능하고, 또한 200 로가열가능한장치또는이와동등이상의성능을가진것. 경우에따라냉각응축과정은생략해도좋다. 2.3 시료채취및보존 1.3 의시료채취및보존방법에따른다. 2.4 시험방법시료 5 ml를기밀실린지를이용하여스파저에주입한다. 이어서상온에서트리클로로에틸렌, 테트라클로로에틸렌, 벤젠, 사염화탄소, 디클로로메탄및 1,1-디클로로에틸렌을퍼지시켜트랩에서포집한다음신속히가열탈착시켜가스크로마토그래프 / 질량분석계로분석한다. 선택이온또는이온질량수의정량이온에대한크로마토그램을작성하여트리클로로에틸렌, 테트라클로로에틸렌, 벤젠, 사염화탄소, 디클로로메탄및 1,1-디클로로에틸렌의머무름시간에해당하는위치의봉우리로부터봉우리높이또는면적을측정하고, 미리작성한검량선으로부터각각의양을구하여시료중의농도를산출한다. 검량선의작성가스크로마토그래프용메탄올약 80 ml를넣은 100 ml용량플라스크에휘발성유기화합물혼합표준액 ( 200 μg C 2 HCl 3 / ml, 200 μg C 2 Cl 4 / ml, 200 μg C 6 H 6 / ml, 200 μg CCl 4 / ml, 200 μg CH 2 Cl 2 / ml, 200 μg 1,1-C 2 H 2 Cl 2 / ml ) 0.5~10 ml를단계적으로취하여

269 넣고가스크로마토그래프용메탄올을넣어표선까지채운다. 기밀실린지에증류수 5 ml를취하고, 제조된정량용표준액 2 μl를미량주사기를이용하여주입한다음퍼지 트랩으로전처리하여가스크로마토그래프 / 질량분석계로분석하여각물질별질량크로마토그램을기록한다. 각질량별크로마토그램으로부터각물질에해당되는봉우리의높이또는면적을측정하고각각표준액농도와의관계선을작성한다. 주1) 분석대상물질에대한흡착효율이뛰어난트랩을선정하여사용한다. 비고1) 시료의봉우리높이또는면적이검량선의상한값을초과할경우에는시료일정량을취하여적당한농도로정확히희석한다음이용액을가지고실험한다. 3. 헤드스페이스 - 가스크로마토그래프 / 질량분석법 3.1 측정원리시료중의트리클로로에틸렌, 테트라클로로에틸렌, 벤젠, 사염화탄소, 디클로로메탄및 1,1-디클로로에틸렌을일정온도에서가온하여기상의일정량을가스크로마토그래프 / 질량분석계로분석하는방법이다. 이방법에의한정량한계값은시료량이 80 ml일때각휘발성화합물로써 mg/l이며그미만은불검출로한다. 정량한계값부근의측정농도상대표준편차는약 20 % 이다. 따로규정이없는한산업폐수등매우혼탁한시료도이법에따라시험할수있다. 3.2 기기및기구 가스크로마토그래프 / 질량분석계 ⑴ 가스크로마토그래프 ( Gas Chromatograph ) 2.2 ( 가 ) 의 (1) 방법에따른다. ⑵ 질량분석계 ( Mass Spectrometer ) 2.2 ( 가 ) 의 (2) 방법에따른다. 헤드스페이스장치 ⑴ 바이알 : 10~100 ml의유리제로서가온하여도밀폐성이높은것을사용한다. 사용전에메탄올로세정하고충분히건조한후사용한다. ⑵ 셋텀 : 한쪽면이두께 0.05 mm이상의폴리테트라플루오로에틸렌 ( polytetrafluoroethylene, PTFE ) 의재질로코팅된실리콘마개

270 ⑶ 알루미늄캡 ⑷ 시료보온부 : 온도를약 60~90±0.5 범위내에서 1 시간정도일정하게보온유지할수있는것 ⑸ 시료채취용장치 1 압력조절방식 : 시료주입량을조절할수있어야하고, 실린지바늘은시료와반응성을최소화하기위해백금-이리듐 ( Pt-Ir ) 재질또는이와동등의재질을사용한다. 연결부 ( 주 1) 는비활성화된모세관컬럼을사용한다. 2 시료채취용루프 ( Sampling Loop ) : GC/MS계에접속할수있는것으로스테인레스강제또는이것과동등이상의재질인것 3 기밀실린지 : 용량이 0.5~5 ml의것으로시료주입용바늘은 GC/MS에접속할수있는것으로스테인레스강제또는이것과동등이상의재질인것. 주1) 연결부는 150~250 로유지가능한것 3.3 시료채취및보존 1.3 의시료채취및보존방법에따른다. 3.4 시험방법채취한시료 10 ml를 22 ml의헤드스페이스용바이알에옮기고, 이용액을흔들어섞은후약 85 로고정한온도의항온조에서 1 시간정도가온하여상부기상의일정량을채취하여주입한후가스크로마토그래프 / 질량분석계로분석한다. 선택이온또는이온질량수의정량이온에대한크로마토그램을작성하고트리클로로에틸렌, 테트라클로로에틸렌, 벤젠, 사염화탄소, 디클로로메탄및 1,1-디클로로에틸렌의머무름시간에해당하는위치의봉우리로부터봉우리높이또는면적을측정하여, 미리작성한검량선으로부터각각의양을구하여시료중의농도를산출한다. 검량선의작성가스크로마토그래프용메탄올약 80 ml를넣은 100 ml용량플라스크에휘발성유기화합물혼합표준액 (200 μg C 2 HCl 3 / ml, 200 μg C 2 Cl 4 / ml, 200 μg C 6 H 6 / ml, 200 μg CCl 4 / ml, 200 μg CH 2 Cl 2 / ml, 200 μg 1,1-C 2 H 2 Cl 2 / ml ) 0.5~10 ml를단계적으로취하여넣고가스크로마토그래프용메탄올을넣어표선까지채운다. 단계적으로제조된검량선작성용표준액을증류수 10 ml에대해서 2 μl의비율로미량주사기를

271 이용하여헤드스페이스용바이알에주입한다음가스크로마토그래프 / 질량분석계로분석하여각물질별질량크로마토그램을기록한다. 각질량별크로마토그램으로부터각물질별해당되는봉우리의높이또는면적을측정하고각각표준액농도와의관계선을작성한다. 비고1) 검량선은절대검량선법또는내부표준법으로작성한다. 비고2) 내부표준물질을이용하여분석할경우 mg / ml의플루오로벤젠을 10배희석한후일정량을시료 10 ml에대해 2 μl ( 25 ng ) 의비율로마이크로실린지로주입한후격막과알루미늄마개를이용하여밀봉한다음사용한다. 비고3) 절대검량선법을이용하는경우는, 내부표준물질대신에메탄올을사용해도좋다. 비고4) 시료의봉우리높이또는면적이검량선의상한값을초과할경우에는시료일정량을취하여적당한농도로정확히희석한다음이용액을가지고실험한다. 4. 퍼지 트랩 - 가스크로마토그래피 4.1. 측정원리시료중의트리클로로에틸렌, 테트라클로로에틸렌, 벤젠, 사염화탄소, 디클로로메탄및 1,1-디클로로에틸렌을불활성가스로퍼지시켜기상으로추출한다음트랩관으로흡착 농축하고, 가열 탈착시켜가스크로마토그래프 ( Gas Chromatograph ) 로분석하는방법이다. 이방법에의한정량한계값은표 1과같으며그미만은불검출로한다. 따로규정이없는한산업폐수등매우혼탁한시료를제외한하천, 호소등의시료는이법에따라시험할수있다. 표 1. 퍼지 트렙 -GC 법의정량한계값 번호 휘발성유기화합물 ECD ( μg /l ) FID ( μg /l ) 1 트리클로로에틸렌 테트라클로로에틸렌 벤젠 사염화탄소 디클로로메탄 ,1-디클로로에틸렌

272 4.2. 기구및기기 가스크로마토그래프검출기는전자포획형검출기 ( ECD ), 불꽃이온화검출기 ( FID ) 를사용하며, 그외의조건은 2.2 ( 가 ) 의 (1) 방법에따른다. 퍼지 트랩장치의가동조건 2.2의 ( 가 ) 의 (3) 방법에따른다. 퍼지 트랩장치 2.2의 ( 가 ) 의 (4) 방법에따른다. 4.3 시료채취및보존 1.3 시료채취및보존방법에따른다. 4.4 시험방법채취한시료 5 ml를기밀실린지를이용하여스파저 ( Sparger ) 에주입한다. 이어서상온에서트리클로로에틸렌, 테트라클로로에틸렌, 벤젠, 사염화탄소, 디클로로메탄및 1,1-디클로로에틸렌을퍼지 ( Purge ) 시켜트랩에서포집한다음신속히가열하여탈착된성분을가스크로마토그래프로분석한다. 분석대상물질에대한크로마토그램을작성하고트리클로로에틸렌, 테트라클로로에틸렌, 벤젠, 사염화탄소, 디클로로메탄및 1,1-디클로로에틸렌의머무름시간에해당하는위치의봉우리로부터봉우리높이또는면적을측정하여, 미리작성한검량선으로부터각각의양을구하여시료중의농도를산출한다 ( 단, 벤젠은 FID 검출기를사용하여측정한다 ). 검량선의작성가스크로마토그래프용메탄올약 80 ml를넣은 100 ml용량플라스크에휘발성유기화합물혼합표준액 ( 200 μg C 2 HCl 3 / ml, 200 μg C 2 Cl 4 / ml, 200 μg C 6 H 6 / ml, 200 μg CCl 4 / ml, 200 μg CH 2 Cl 2 / ml, 200 μg 1,1-C 2 H 2 Cl 2 / ml ) 0.5~10 ml를단계적으로취하여넣고가스크로마토그래프용메탄올을넣어표선까지채운다. 기밀실린지에증류수 5 ml를취하고, 제조된정량용표준액 2 μl를미량주사기를이용하여주입한다음퍼지 트랩으로전처리하여가스크로마토그래프로분석하여각물질별크로마토그램을기록한다. 각물질별크로마토그램으로부터해당되는봉우리의높이또는면적을측정하고각각표준액농도와의관계선을작성한다

273 5. 헤드스페이스 - 가스크로마토그래피 5.1 측정원리시료중의트리클로로에틸렌, 테트라클로로에틸렌및사염화탄소를일정온도에서가온하여기상의일정량을가스크로마토그래프 ( Gas Chromatograph ) 로분석하는방법이다. 이방법에의한정량한계값은시료량이 80 ml일때각휘발성유기화합물로써 mg /l이며그미만은불검출로한다. 정량한계값부근의측정정도상대표준편차는약 20 % 이다. 따로규정이없는한산업폐수등매우혼탁한시료도이법에따라시험할수있다. 5.2 기구및기기 가스크로마토그래프검출기는전자포획형검출기 ( ECD ), 불꽃이온화검출기 ( FID ) 를사용하며, 그외의조건은 2.2 ( 가 ) 의 (1) 방법에따른다. 헤드스페이스장치 3.2의 ( 나 ) 방법에따른다. 5.3 시료채취및보존 1.3 의시료채취및보존방법에따른다. 5.4 시험방법채취한시료 10 ml를 22 ml의헤드스페이스용바이알에옮기고, 이용액을흔들어섞은후약 85 로고정한항온조에서 1 시간정도가온한다음상부기상의일정량을채취하여주입한후가스크로마토그래프로분석한다. 각물질별정량이온에대한크로마토그램을작성하고트리클로로에틸렌, 테트라클로로에틸렌및사염화탄소의머무름시간에해당하는위치의봉우리로부터봉우리높이또는면적을측정하여, 미리작성한검량선으로부터각각의양을구하여시료중의농도를산출한다. 검량선의작성가스크로마토그래프용메탄올약 80 ml를넣은 100 ml용량플라스크에휘발성유기화합물혼합표준액 ( 200 μg C 2 HCl 3 / ml, 200 μg C 2 Cl 4 / ml, 200 μg CCl 4 / ml ) 0.5~10 ml를단계적으로취하여넣고가스크로마토그래프용메탄올을넣어표선까지채운다. 단계적으로제조된검량선작성용표준액을증류수 10 ml에대

274 해서 2 μl의비율로미량주사기를이용하여헤드스페이스용바이알에주입한다음, 가스크로마토그래프로분석하여각물질별크로마토그램을기록한다. 각물질별크로마토그램으로부터해당되는봉우리의높이또는면적을측정하고각각표준액농도와의관계선을작성한다. 비고 1) 검량선은절대검량선법또는내부표준법으로작성한다. 비고 2) 내부표준물질을이용하여분석할경우 mg / ml의플루오로벤젠을 10배희석한후일정량을시료 10 ml에대해 2 μl ( 25 ng ) 의비율로마이크로실린지로주입한후셋텀과알루미늄마개를이용하여밀봉한다음사용한다. 비고 3) 절대검량선법을이용하는경우는, 내부표준물질대신에메탄올을사용해도좋다. 비고 4) 시료의봉우리높이또는면적이검량선의상한치를초과할경우에는시료일정량을취하여적당한농도로정확히희석한다음이용액을가지고실험한다

275 제 39 항총대장균군 (Total Coliforms) 1. 일반사항일반적으로미생물시험에있어서유의할점은시료중에함유된미생물의상황이시시각각으로변할수가있으며, 처음시료중에함유되어있던미생물외의다른미생물오염이조작중에일어날수있다는점이다. 이러한실험상의오염을방지하기위하여모든조작은무균조작을하여야하며, 동시에실험실내의청결을유지하여야한다. 1.1 시료의채취및조제시료는멸균된용기를이용하여무균적으로채취하고한번채취된시료는어떠한경우에도저온 (10 이하 ) 의상태로운반하여야한다. 또한, 환경기준적용을위한시료는시료채취부터시험분석까지 24시간을초과하여서는안되며, 배출허용기준및방류수수질기준적용을위한시료는시료채취후 6시간이내에실험실로운반하여 2시간이내에분석을완료하여야한다. 만약규정된시간내에분석이불가능할경우에는현장에서분석이가능하도록하여야한다. 시료중잔류염소가함유되었을때는멸균된 10% 티오황산나트륨용액으로잔류염소를제거하여야한다. 예를들어 120mL당 10% 티오황산나트륨용액 0.1mL를넣은경우잔류염소 15mg/L 중화된다. 시료의균일화를기하기위하여액상시료는강하게진탕하고고형물이포함된시료는멸균된믹서를이용하여적당량의희석액과혼합하여사용한다. 1.2 정의 총대장균군이라함은그람음성 무아포성의간균으로서유당을분해하여가스 산을발생하는모든호기성또는통성혐기성균을말한다. 또는 2. 최적확수시험법 2.1 적용범위 본시험방법은환경정책기본법제 10 조의환경기준에규정된총대장균군수시험에 적용한다

276 2.2 측정원리유당이포함된액체배지에서총대장균군을배양하면유당이분해되어가스가생성되어지는원리를이용한방법으로, 시료를최소 3단계이상의희석단계별로 5개씩접종하고그중가스를생성한양성시험관이포함되는적정범위의연속적인 3단계를선택하여확률적인수치인최적확수로표시하며, 그결과는총대장균군수 /100mL의단위로표시한다. 2.3 기구및장치 피z펫용량 1~10mL의메스피펫이나자동피펫 ( 플라스틱피펫팁포함 ) 으로서멸균된것을사용한다. 시험관안지름 16mm, 높이 150mm 정도의시험관으로마개 ( 솜, 실리콘, 플라스틱등 ) 를할수있고고압증기멸균을할수있어야한다. 다람관안지름 6mm, 높이 30mm 정도의시험관으로고압증기멸균을할수있어야하며가스포집을위해거꾸로집어넣는다. 백금이고리의안지름이약 3mm인백금이를사용한다. 페트리접시지름약 9cm, 높이약 1.5cm의유리제품이나 1회용플라스틱제품으로멸균된것을사용한다. 배양기배양온도를 35±0.5 로유지할수있는것을사용한다. 2.4 시험방법본시험법은최적확수산정을위해여러희석단계의다중시험관을사용하며, 총대장균군판정을위해추정시험ㆍ확정시험및완전시험의단계로구분된다. 총대장균군수는확정시험까지분석하여도출하는것을원칙으로하며, 완전시험은계절적간격으로총대장균군양성시료의 10% 에대하여정도관리를위해수행한다. 본시험법은총대장균군을정량하기위하여먼저시료를 10, 1, 0.1, 0.01 ml로희석단계를정하고희석단계마다시험관을각각 5개씩배양하고그중가스를발생

277 하는양성인시험관수를계수하여최적확수표에의거정량한다. 최적확수란확률적으로가장가능한수치를말한다. 시료는여러희석단계중 3단계에서그최대량을이식한 5개의시험관에서전부또는대다수가양성이고, 최소량을이식한 5개의시험관에서전부또는대다수가음성이되도록적당히희석하여사용한다. 이와같이하면총대장균군수는적정한양성시험관을나타내는최소희석과최대희석단계의희석도와그사이에나타나는각단계별양성시험관수에의해결정된다. 따라서시험을계획할때는희석단계사이에서충분한수적근거가얻어질수있는양성시험관수가나오도록계획하여야한다 추정시험라우릴트립토스액체배지또는유당액체배지와다람관을넣은시험관을 35±0.5 에서 24±2시간배양하면서가스발생여부를관찰한다. 시료는 10, 1, 0.1, 0.01, ml씩되게 10배희석법에따라희석하여사용하며, 최대희석단계는시료의오염정도에따라다르게할수있다. 각희석단계마다 5개의시험관을사용한다. 시료를 10mL로하는경우는배지가원래농도보다 2배희석되어지므로 2배농축된배지를사용하여야한다. 시료를접종하고 35±0.5 에서배양하여 24±2시간내에가스가발생하지아니하였을때에는 48±3 시간까지계속하여배양한다. 이때가스가발생하지않을때는추정시험음성으로판정하고, 가스발생이있을때는추정시험양성으로판정하며, 추정시험양성시험관은확정시험을수행한다 확정시험추정시험에서가스발생이있거나추정시험양성으로의심되는모든시험관은확정시험을실시한다. 확정시험은직경 3mm의백금이를사용하여추정시험양성시험관으로부터 BGLB(Brilliant Green Lactose Bile) 배지가든시험관에무균적으로이식하여 35±0.5 에서, 48±3시간동안배양하면서시험관에들어있는다람관을통해가스발생여부를관찰하여가스가발생하면확정시험양성으로판정한다 완전시험 완전시험은총대장균군의정도관리를위하여수행한다. 확정시험양성시험관은엔도 또는 EMB(Eosin Methylene Blue) 평판배지에이식하여다음과같은조작을한다

278 평판배지에서 24±2시간배양한후전형적인총대장균군집락또는전형적인집락이없는경우 2개이상의비전형적인집락을따서다람관이들어있는라우릴트립토스액체배지또는유당액체배지시험관과보통한천배지사면에이식한다. 액체배지시험관은 48±3시간배양하여가스발생여부를관찰하고, 보통한천사면배지는 20±2시간배양한후그집락에대하여그람염색하여검경한다. 이때의모든배양온도는 35±0.5 로한다. 라우릴트립토스액체배지또는유당액체배지에서가스가발생하고보통한천사면배지에서그람음성무아포성간균이증명되면완전시험양성으로판정한다. 2.5 최적확수계산법시험결과에의한총대장균군수는최적확수표에의하여결정하며, 여러단계로희석이되었더라도그중연속적으로희석한 3단계의희석단계를선택하여계산한다. 최적확수표에는시료량이 10, 1, 0.1mL의희석단계에대한최적확수만이최적확수 /100mL로표시되어있으므로그이상희석을한시료는희석도를곱하여기록한다. 예를들면, 시료량을 1, 0.1, 0.01mL로희석한경우에는표중의 10, 1, 0.1mL와동일하게최적확수를구하고그결과에희석도 10을곱하여기록하며, 시료량을 0.1, 0.01, 0.001mL 로한경우에는희석도 100을곱하여기록한다. 이하각희석도에따라이에준하면된다. 다음표중의예 (1) 에표시한것과같이 1mL를이식한시험관 5개가모두양성, 0.1mL를이식한시험관에서도똑같이 5개가모두양성, 0.01mL를이식한시험관에서는 5개중에 2개양성, 0.001mL를이식한시험관에서는전부음성의결과가얻어졌다면 5개의시험관에서모두양성이나온최대희석단계의것을선택하고연속하여다음희석도를선택하여양성시험관수는 5, 2, 0이된다. 이것으로부터 100mL중의최적확수를구하려면 5, 2, 0의경우를취하여표의해당하는난에서최적확수 50을구하고여기에희석도 100을곱하여시료의최적확수 5,000을산정한다. 또한예 (2) 와같은결과가얻어졌을때에는최소희석량이 1mL인것으로부터양성발효관수 5, 4, 2를취하여최적확수표로부터얻어진최적확수에서희석도 10을곱하여시료의최적확수를산정한다. 예 (3) 과같은결과가얻어졌을때는중간희석단계의결과가양성이되도록 3단계의성적을취한다. 예 (4) 와같은결과가얻어졌을때는 0.001mL의양성시험관수를한단계높은 0.01mL와양성시험관수에합하여예 (5) 에표시한것과같은성적을취한다

279 ( 분자는양성관수, 분모는이식관수 ) 시료량 (ml) 예 ⑴ 5/5 [5/5] [2/5] [0/5] ⑵ [5/5] [4/5] [2/5] 0/5 ⑶ [0/5] [1/5] [0/5] 0/5 ⑷ [5/5] 3/5 1/5 1/5 ⑸ [5/5] [3/5] [2/5] 0/

280 총대장균수시험의최적확수표양성시험관수 MPN/ 100 ml 95 % 신뢰구간양성시험관수 MPN/ 100 ml 95 % 신뢰구간하한상한하한상한

281 3. 막여과시험방법 3.1 적용범위 본시험방법은환경정책기본법제 10 조의환경기준에규정된총대장균군수시험에 적용한다. 3.2 측정원리시료의종류및특성에따라적당량의시료를취하고, 여과시료가 1mL이하인경우에는멸균된희석수를사용하여적당히희석한후여과하여, 그여과막을엠-엔도 (m-endo, 또는 m-endo agar LES) 배지에배양시키면, 총대장균군이유당을발효하여알데히드를생성하게되어붉은색의금속성광택을띠는집락을형성하는데, 이집락수를계수하여총대장균군수 /100mL의단위로표시하는방법이다. 막여과방법은균수를실제로얻을수있는방법이며, 실험시간이최적확수시험법보다단축된다. 3.3 기구및장치 막여과장치 : 제4장제8항부유물질시험방법 1, 2 기구및기기와같으며사용시에멸균한다. 멸균된부피실린더 멸균된플라스틱페트리접시 (60 15mm또는 50 12mm) 멸균된흡수패드와여과막 : 셀룰로즈나이트레이트 (Cellulose nitrate) 나셀룰로즈에스테르 (Cellulose ester) 재질의미생물분석용여과막, 직경 47mm, 공경 0.45μm 멸균된피펫및핀셋 3.4 시험방법멸균된핀셋으로여과막의눈금을위로하여여과장치의여과재지지대위에올려놓는다. 주의하여막여과장치를부착시킨후일정량의시료 ( 표참조 ) 를여과관상부에주입하면서흡입여과하고멸균수 20~30mL로씻어준다. 반고체배지인엠-엔도아가레스 (m-endo agar LES) 를사용할경우에는여과한여과막의눈금을위로하여페트리접시내의배지위에올려놓은다음페트리접시를거꾸로놓고 35±0.5 에서 22~24시간배양한다. 액체배지인엠-엔도 (m-endo) 배지를사용할경우에는 1.8~2.0mL의엠-엔도 (m-endo) 배지가들어있는페트리접시의흡수패드위에여과막을올려놓은다음페트리접시를거꾸로놓고 35±0.5 에서 22~24시간동안배양한다

282 막여과시험방법의예상시료량 시료의종류 여과해야할예상시료량 ( ml ) 호소, 저수지수 상수원수 위락용수 하천수 염소소독한하수 하수원수 3.5 계수법 총대장균군은배양후금속성광택을띠는분홍이나진홍계통의붉은색집락을형성 한다. 계수는페트리접시를저배율 (10 또는 15 배 ) 의해부현미경이나실체현미경 위에올려놓고관찰된집락수를계수한다. 총대장균군은시료 100mL 중에들어있는 총대장균군집락수로나타내며, 여과막당그집락수가 20~80 의범위에드는것을 선정하여다음의식에의해계산한다. 총대장균군수 /100mL= 생성된집락수 100 여과한시료량 (ml) 집락들이서로융합되어있을경우에는 CG( 융합성성장 ) 로표시하고멸균수로 희석하여다시실험하거나시료를적게취하여다시실험한다. 그리고여과막당집 락수가 200 이상으로, 계수가불가능한경우에는 TNTC( 너무많아계수가불가능 ) 로표시한다. 수질이양호한경우, 검출되는총대장균군수가일반적으로낮으므로계수최저집 락수인 20 을무시하고모든집락을다계수하여계산한다. 만일배지표면에너무 많은다른세균이자랐을경우는이를총대장균군의수와함께기록하고다시같은 지점의시료를채취하여검사한다. 재검사시에는여과막당시료의여과량을줄이고 여과막의수를늘려다른세균에의한간섭현상을줄인다. 예를들어, 2 개의 50mL 시료를각각여과하여배양한결과양성인총대장균군집 (5+3) 100 락수가 5와 3일때, 100mL에있는총대장균군의수는이된다. (50+50) 비슷하게시료를 50, 25 그리고 10mL씩여과하여 15, 6 그리고 <1로계수되었을 경우에그시료의총대장균군수는 (15+6+0) 100 ( ) 가된다

283 다른한편 10, 1 그리고 0.1mL 의시료를취해시험한결과 40, 9 그리고 <1 로집락 이계수되었을경우에는이상적인집락수범위에있는 10mL 시료의결과를취하여 (40 100) 총대장균군수는이된다. (10) 마지막예에서만일 40집락이계수된배지에다른세균의집락수가 200이상일경우 400/100mL 로표시하고이를기록하며, 위에언급된바와같이재검사를실시한다. 4. 평판집락시험방법 4.1 적용범위본시험방법은수질환경보전법제8조의배출허용기준, 하수도법제16조방류수의수질기준, 오수 분뇨및축산폐수의처리에관한법률제5조방류수수질기준에규정한총대장균군수시험에적용한다. 4.2 측정원리시료를유당이함유된한천배지에배양할때 1마리의총대장균군이증식하면서산을생성하며하나의집락을형성한다. 이때생성된산에의해지시약인뉴트랄레드 (Neutral Red) 가진한적색으로변화되어전형적인총대장균군집락을식별할수있으며, 그결과는총대장균군수 /ml의단위로표시한다. 배지에는그람양성간균이나구균을억제하는데속시콜린산나트륨이 0.1 W/V% 함유되어있다. 4.3 기구및장치 피펫용량 1~10mL의메스피펫이나자동피펫 ( 플라스틱피펫팁포함 ) 으로서멸균된것을사용한다. 페트리접시지름약 9cm, 높이약 1.5cm의유리제품이나 1회용플라스틱제품으로멸균된것을사용한다. 항온물중탕수온을 45±1 로유지할수있는것을사용한다. 배양기배양온도를 35±0.5 로유지할수있는것을사용한다

284 집락계수기 확대경과조명장치가부착되어있고집락을계수하기좋도록페트리접시를놓는 판에 1cm 2 로구획이그려진것을사용한다. 4.4 시험방법시료를멸균된페트리접시에 1, 0.1, 0.01, ml씩단계별로원시료또는멸균된희석수로희석한시료를무균적으로접종하며각희석단계별로 2개의페트리접시를사용한다. 접종된페트리접시에미리준비하여 45 로가온한데속시콜레이트한천배지를약 15mL 넣은후굳기전에좌우로 10회전이상흔들어시료와배지를완전히섞은후냉각하여굳힌다. 이와같이조작한페트리접시의배지표면에다시 45 로유지된데속시콜레이트한천배지를 3~5mL 넣어표면을얇게덮고상온에서냉각하여굳힌후 35±0.5 에서 18~20시간배양한다음적색의전형적인집락을계수한다. 이때실험의정확성을기하기위하여실험단위별로희석수, 배지및페트리접시에대하여 1개이상의대조군시험을상기방법과동일한조건하에서같이실시하여야하며, 이때대조군평판에서는전형적인총대장균군의집락이없어야한다. 4.5 계수법 배양이끝난평판배지는전형적인총대장균군의집락수를집락계산기와같은기기를 이용하여계수하고그집락수가 30~300 의범위에드는것을산정하여그것의산술 평균을내어계산하며, 예를들면다음과같다. 시료량 (ml) 예 예 (1) 예 (2) TNTC TNTC 예 (3) TNTC TNTC 예 (4) TNTC TNTC 예 (5) TNTC TNTC 시험성적 ( 개 /ml ) TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC 0 0 < , , ,000 TNTC > 300,000 TNTC * TNTC : 너무많아서계수가곤란하거나반이상의확산집락이형성되었을때 <: 미만 >: 보다많다

285 예 ⑴ 은모든시험평판의집락수가 30 미만이므로그결과는 < 30 으로표시하며 2,750+2,570 예⑵는 275와 257의 2평판의집락수를평균하면 = 2,660이므 2 로유효숫자 2자리미만은반올림하여그결과를 2,700으로표시한다. 2,540+3,800+3,200 예⑶는 254, 38, 32의 3평판의집락수를평균하여 = 3 3,180이므로유효숫자 2자리미만은반올림하여그결과를 3,200으로표시한 다. 29,500+33,000 예⑷는 295와 33의 2평판의집락수를평균하여 = 31,250이 2 므로유효숫자 2자리미만은반올림하여그결과를 31,000으로표시한다. 예 ⑸ 는모든시험평판의집락수가 300 보다많으므로그결과는 > 300,000 으로표 시한다

286 제 40 항클로로필 a( Chlorophy11-a ) 1. 흡광광도법 1.1 측정원리 아세톤용액으로클로로필색소를추출하여추출액의흡광도를 663 nm, 645 nm, 630 nm, 750 nm에서측정하여클로로필 a 량을계산하는방법이다. 1.2 기구및기기 여과기 조직마쇄기 ( Tissue Grinder ) 원심분리기 마개있는원심분리관 ( 15 ml, 눈금부 ) 광전광도계또는광전분광광도계 1.3 시험방법시료적당량 ( 100~2000 ml ) 을유리섬유거름종이 ( GF/C, 45 mmd ) 로여과한다음거름종이를조직마쇄기에넣고아세톤 ( 9+1 ) 적당량 ( 5~10 ml ) 을넣어마쇄한다. 마쇄한시료를마개있는원심분리관에넣고밀봉하여 4 어두운곳에서하룻밤방치한다음 500 g의원심력으로 20 분간원심분리한다. 원심분리후상등액의량을측정한다음상등액의일부를취하여층장 10 mm흡수셀에옮겨시료용액으로한다. 따로바탕시험액으로아세톤 ( 9+1 ) 용액을취하여대조액으로하여 663 nm, 645 nm, 750 nm, 630 nm에서시료용액의흡광도를측정하고다음의계산식에따라클로로필 a량을계산한다. 클로로필 a( mg / m3 ) = Y 상등액의량 ( ml ) 여과한시료의량 (l) 여기서 Y 는 Chl-a 의양 ( μg/ ml ) Y = 11.64X X X 3 X 1 = OD663 - OD750 X 2 = OD645 - OD750 X 3 = OD630 - OD750 여기에서 OD는흡광도 ( Optical density ) 임

287 비고 1) 원심력 g의계산방법 R.C.F = r N 2 R.C.F = Relative Centrifugal Force( g ) r: 원심분리기로타의반지름 ( cm ) N: 회전속도 ( rpm )

288 제 41 항전기전도도 1. 측정원리전기전도도는용액이전류를운반할수있는정도를말하며, 용액중의이온세기를신속하게평가할수있는항목으로서전기저항의역수 ohm -1 또는 mho로나타내나현재는국제적으로 S( Siemens ) 단위가통용되고있다. 측정원리는용액에담겨있는 2개의전극에일정한전압을가해주면가한전압이전류를흐르게하며, 이때흐르는전류의크기는용액의전도도에의존한다는사실을이용한것으로어떤전도체에저항 R은 R( Ω ) = ρ ι A 과같은식으로표시할수있는데여기에서 ρ 는저항도 ( Ω cm ) 이고 ι 은두전극 간의거리 ( cm ), A 는단면적 ( cm2 ) 이므로전기전도도 L 은 L = 1 R = A ι K 가된다. 여기에서 K( = 1 ρ ) 는비전도도 ( mho/ cm ) 이며, 동일측정계를사용할 경우셀의규격은일정하므로두전극간의거리와단면적은무시할수있다. 따라서측정결과는측정된시료의전기전도도값 ( mho ) 에셀정수 ( cm -1 ) 를곱하여시료의전기전도도값 ( μmhos/cm ) 으로표시한다. 그러나현재는국제단위계인 ms/m( millisiemens/meter ) 또한 μs/ cm ( microsiemens/ centimeter ) 단위로측정결과를표기하고있으며여기에서 ms/m = 10μS/ cm ( 또는 10μmhos/ cm ) 이다. 또한전기전도도는온도차에의한영향 ( 약 2 %/ ) 이크므로측정결과값의통일을기하기위하여 25 에서의값으로환산하여기록한다. 2. 기구및기기 전기전도도측정계지시부와검출부로구성되어있으며, 지시부는교류위이트스토운전교 ( Wheatstonebridge ) 회로나연산증폭기회로등으로구성된것을사용하며, 검출부는한쌍의고정된전극 ( 보통백금전극표면에백금흑도금을한것 ) 으로된전도도셀등을사용한다. 전도도셀은그형태, 위치, 전극의크기에따라각각자체에셀상수를가지고있으며, 이셀상수는전도도표준액 ( 염화칼륨용액 ) 을사용하여정하거나셀상수가

289 알려진다른전도도셀과비교하여정할수있으나일반적으로기기제작사의지침서또는설명서에명시되어있다. 또한전기도도측정계는 25 에서의자체온도보상회로가장치되어있는것이사용하기에편리하며, 그렇지않은경우에는온도에따른환산식을사용하여 25 에서의전도도값으로환산해야한다. 전기전도도셀은항상수중에잠긴상태에서보존하여야하며정기적으로점검한후사용한다. 온도계 : 0.1 까지측정가능한것 ( 다만전기전도도측정계로서온도측정이가능할경우에는필요없음 ) 3. 전도도셀의보정및셀상수측정방법 3.1 전도도표준액의조제가. 염화칼륨분말로된염화칼륨 ( KCl ) 을 105 에서 2 시간건조한다음건조용기에서방냉한다. 나. 0.01M - 염화칼륨용액염화칼륨 g을 25 의물 ( 2 μs/ cm이하 ) 에녹여 1,000 ml로한다. 이액의 25 에서의전기전도도값은 1,409μS/ cm이다. 이용액은폴리에틸렌병또는경질유리병에서밀봉하여보존한다. 다 M - 염화칼륨용액 0.01M - 염화칼륨용액 100 ml를정확히취하여 1,000 ml메스플라스크에넣고 25 의물 ( 2 μs/ cm이하 ) 을넣어눈금까지채운다. 이액의 25 에서의전기전도도값은 147 μs/ cm이다. 이용액은폴리에틸렌병또는경질유리병에밀봉하여보존한다. 3.2 셀상수의측정및셀의보정셀을물에 2~3 회씻은다음사용하고자하는염화칼륨용액 ( 시료의전도도가낮을경우 0.001M, 높을경우 0.01M ) 으로 2~3 회씻어주고염화칼륨용액에셀을잠기게하여온도를 25±0.5 로맞춘상태에서전기전도도를측정한다. 계속하여염화칼륨용액을교환해가면서동일온도에서측정치상호간의편차가 ±3 % 이하가될때까지반복측정을하고그평균값을취하여다음식에셀상수를산출한다. C= L KCI+L H2O L X

290 여기에서 C : 셀상수 ( cm -1 ), L x : 측정한전도도값 ( μs ) L KCl : 사용한염화칼륨표준액의전도도값 ( μs/ cm ) L H2O : 염화칼륨용액을조제할때사용한물의전도도값 ( μs/ cm ) 보통셀은셀상수 1~2의것을사용하면대부분의시료측정에적합하나특정시료의경우에는표 1을참조한다. 표 1. 셀상수와측정범위 셀자수 ( cm -1 ) 측정범위 ( μs/ cm ) 20 이하 1~20 10~2, ~20,000 1,000~200,000 또한 0.01M 과 0.001M - 염화칼륨용액을각각사용하여같은방법으로셀상수를산 출한결과그값이 ±1 % 이내로들지않을경우에는 [ 비고 1] 에따라백금전극을 재도금하여사용한다. 4. 시료의전기전도도측정전기전도도측정계에전원을넣고시료를사용하여셀을 2~3 회씻어준다음시료중에셀을잠기게하여 25±0.5 를유지한상태에서 3.2와같은방법으로반복측정하고그평균값을취하여다음식에따라시료의전기전도도값을산출한다. L = C L X 여기에서 L : 25 에서의시료의전기전도도값 ( μs/ cm ) C : 셀상수 ( cm -1 ) L X : 측정한전기전도도값 ( μs ) 다만, 전기전도도측정계에자체온도보상회로와셀상수자동설정회로가내장된경우에는제작사의지침에따라온도계수 ( 25 ) 와셀정수를설정해준다음시료의전기전도도값을측정하고측정계의지시부에나타난값을직접측정결과로기록한다. 또한현장측정시온도보상회로가내장되어있지않은측정계의경우에는일정조건에서의시료의전기전도도와온도를측정하고다음계산식에의하여온도보정을한값을측정결과로한다

291 L = C L x (25-t) 여기에서 t : 측정시시료의온도 ( ) 만일측정계의지시값이전기저항 ( Ω ) 으로나타날경우에는다음식에따라전기전 도율을계산한다. L = C R x 10 여기에서 R x : 측정된전기저항 ( Ω ) [ 비고 1] 백금전극의재도금방법 1) 염산 ( 1+11 ) 용액중에서백금흑전극을양극으로하고전해하여백금흑을벗겨낸다음 2) 염화백금산 ( 3 W/V% ) 과초산납 ( W/V% ) 의혼합전해액중에백금전극을담그고직류에서전류밀도 1~4 ma/ cm2로하여적당한방법으로전해액을교반하면서 1.5~3.0 / cm2으로통전하고 3) 황산 ( ) 용액중에서약 30 분간가끔전류의방향을바꾸면서통전하여부착된염화백금산이나염소를제거하고증류수로세척한다

292 제 42 항분원성대장균군 (Fecal Coliforms or Thermotolerant Coliforms) 1. 일반사항 수질오염공정시험방법제 4 장제 39 항총대장균군시험방법의일반사항에따른다. 1.1 시료의채취및조제 수질오염공정시험방법제 4 장제 39 항총대장균군시험방법의시료의채취및조제에 따른다. 1.2 정의분원성대장균군이라함은온혈동물의배설물에서발견되는그람음성 무아포성의간균으로서 44.5 에서유당을분해하여가스또는산을발생하는모든호기성또는통성혐기성균을말한다. 2. 최적확수시험법 2.1 측정원리시료를유당이포함된배지에배양할때분원성대장균군이증식하면서가스를생성하는데이때의양성시험관수를확률적인수치인최적확수로표시하는방법이며, 그결과분원성대장균군수 /100mL의단위로표시한다. 2.2 기구및장치수질오염공정시험방법제4장제39항총대장균군시험방법의 2.3 기구및장치에따른다. 2.3 시험방법분원성대장균군시험은추정시험과확정시험으로한다 추정시험 수질오염공정시험방법제 4 장제 39 항총대장균군시험방법 추정시험에따라서 시험하고배양시작후 48 시간이내에가스가발생되었거나증식이많이된시험관 또는산을생성한모든시험관에대하여분원성대장균군의확정시험을수행한다

293 2.3.2 확정시험추정시험양성시험관으로부터직경 3mm의백금이를사용, 무균조작으로이씨 (EC) 배지가분주된시험관에이식하여 44.5 의수조에서 24±2시간배양하여가스가발생하면확정시험양성으로한다. 2.4 최적확수시험법시험관에의한분원성대장균군시험법은일정량의희석액중에 1개이상의분원성대장균군유무를양성 / 음성으로판별하여통계처리하는정량적인방법이다. 분원성대장균군의최적확수는제4장제39항총대장균군시험방법 2.5 최적확수계산법에따라계산한다. 3. 막여과시험방법 3.1 측정원리시료의종류및특성에따라적당량의시료를취하고, 여과시료가 1mL이하인경우에는멸균된희석수를사용하여적당히희석한후여과한다. 그여과막을엠-에프씨 (m-fc) 배지에배양시킬때분원성대장균군은여러가지색조를띠는파란색의집락을형성하는데, 이집락수를계수하여분원성대장균군수 /100mL 단위로표시한다. 이러한막여과방법은다량의시료를여과할수있고, 실험기간이최적확수시험법보다단축된다. 3.2 기구및장치 막여과장치 : 제4장제8항부유물질시험방법 1.2 기구및기기와같으며사용시에멸균한다. 멸균된부피실린더 멸균된플라스틱페트리접시 (60 15mm 또는 50 12mm) 방수용테이프 밀봉가능한플라스틱백 멸균된흡수패드와여과막 : 셀룰로즈나이트레이트 (Cellulose nitrate) 나셀룰로즈에스테르 (Cellulose ester) 재질의미생물분석용여과막, 직경 47mm, 공경 0.45μm 멸균된피펫및핀셋

294 3.3 시험방법멸균된핀셋으로여과막의눈금을위로하여여과장치의여과재지지대위에올려놓는다. 주의하여막여과장치를부착시킨후일정량의시료 ( 표참조 ) 를여과관상부에주입하면서흡입여과하고멸균수 20~30mL로씻어준다. 1.8~2.0mL의엠-에프씨 (m-fc) 배지가들어있는페트리접시의흡수패드또는엠-에프씨 (m-fc) 한천배지로미리만들어놓은평판위에여과막을올려놓은다음페트리접시를밀봉하거나방수성플라스틱백에넣은후 44.5±0.2 의수조에잠기도록넣거나, 배양기내부전체가항상균일하게 44.5±0.2 로유지될수있는정밀배양기에넣어 24±2시간동안배양한다. [ 막여과시험방법의예상시료량 ] 시료의종류호소, 저수지수상수원수위락용수하수처리장방류수하천수생활하수축산폐수 여과해야할예상시료량 (, ml ) 계수법분원성대장균군은배양후여러가지색조를띠는파란색의집락을형성한다. 비분원성대장균군은회색이나크림색을띤다. 분원성대장균군은시료 100mL중에들어있는분원성대장균군집락수로나타내며, 여과막당그집락수가 20~60의범위에드는것을선정하여총대장균군과같은방식 (3.5 계수법 ) 으로계산한다. 이상적인집락수의범위가 20~80인총대장균군보다낮은이유는엠-에프씨 (m-fc) 배지에서의집락크기가총대장균군보다크기때문이다

295 제 43 항식물성플랑크톤 ( 조류 ) 1. 일반사항 수중부유생물인식물성플랑크톤분석은플랑크톤의종류를파악하는정성분석과 개체수를조사하는정량분석으로한다. 1.1 정의 식물성플랑크톤은운동력이없거나극히적어수체의유동에따라수체내에부유 하면서생활하는단일개체, 집락성, 선상형태의광합성생물을총칭한다. 1.2 시료의채취및보존채수기를이용하여일정량의시료를채취하여냉암소에서보관하면서운반하고즉시시험한다. 즉시시험하는것이어려울경우포르말린용액을 3~5 v/v% 가하여보존한다. 침강성이좋지않은남조류나파괴되기쉬운와편모조류등은루골용액을 1~2 v/v% 가하여보존한다. 1.3 시료의조제시료의개체수는계수면적당 10~40 정도가되도록조정한다. 시료가육안상녹색이나갈색으로보일경우증류수로적절한농도로희석하고, 시료의개체수가적을경우는농축한다. 주 ) 계수면적 : 현미경시야에서계수하기위하여계수챔버내부혹은접안마이크로미터에의하여설정된스트립혹은격자의크기 원심분리방법일정량의시료를원심침전관에넣고원심분리기를이용하여 ( 1,000 g, 20 분 ) 일정배율로농축한다. 미세조류의경우는 1,500 g에서 30 분정도를행한다. 침강성이좋지않은남조류가많은시료는루골용액으로고정한후농축한다. 자연침전법일정시료에포르말린용액을 1 v/v% 또는루골용액을 1~2 v/v% 가하여플랑크톤을고정시켜실린더용기에넣고 24 시간정치후싸이폰을이용하여상등액을따라내어일정량으로농축한다

296 2. 기구및기기 광학현미경혹은위상차현미경 ( X1,000 배율 ) 세즈윅-라프터 ( Sedgwick-Rafter ) 챔버 ( 길이 20 mm, 폭 50 mm, 깊이 1 mm : 용량 1 ml ) 팔머-말로니 ( Phalmer-Maloney ) 챔버 ( 직경 17 mm, 깊이 0.4 mm : 용량 0.1 ml ) 혈구계수기 슬라이드글라스 커버글라스 : 길이 20 mm, 폭 50 mm길이 21 mm, 폭 21 mm 대물마이크로미터 ( Stage micrometer ) 접안마이크로미터 ( Ocular micrometer ) 3. 시험방법 3.1 정성시험정성시험의목적은식물성플랑크톤의종류를조사하는것으로검경배율 100~1,000 배시야에서세포의형태와내부구조등의미세한사항을관찰하면서종분류표에따라식물성플랑크톤종을확인하여계수일지에기재한다 ( 부록담수조류분류표및그림참조 ). 3.2 정량시험 식물성플랑크톤의계수는정확성과편리성을위하여일정부피을갖는계수용챔버를사용한다. 식물성플랑크톤의동정에는고배율이많이이용되지만계수에는저~중배율이많이이용된다. 계수시식물성플랑크톤의종류에따라요구되는배율이달라지므로아래방법중하나를이용한다. 저배율방법 ( 200배율이하 ) 가 ) 스트립이용계수세즈윅-라프터챔버에커버글라스를비스듬히걸쳐놓고챔버내의모서리에기포가생성되지않도록하면서시료를조심스럽게피펫으로채운다. 계수하기전에플랑크톤을침전시키기위하여 15 분정도방치시킨다. 세즈윅-라프터챔버내부를일정한길이와넓이 ( Strip ) 로구획하여 10스트립이상반복계수하고다음계산식으로부터 1ml의개체수를산출한다

297 개체수 / ml = C L D W N 1,000 C = 계수된개체수의합 L = 검경구획의길이 ( mm ) W = 검경구획의폭 ( mm ) D = 검경구획의깊이 ( 세즈윅-라프터챔버깊이, 1mm ) N = 검경한시야의횟수 나 ) 격자이용계수세즈윅-라프터챔버에서격자를사용할경우계수챔버내에서일정한크기의격자를무작위로 10 회이상반복계수하며다음계산식으로부터 1 ml의개체수를산출한다. 개체수 / ml = C A D N 1,000 C = 계수된개체수의합 A = 격자의면적 ( mm2 ) D = 검경한격자의깊이 ( 세즈윅-라프터챔버깊이, 1mm ) N = 검경한시야의횟수주1) 세즈윅-라프터챔버는조작이편리하고재현성이높은반면중배율이상에서는관찰이어렵기때문에미소플랑크톤 ( nanno plankton ) 의검경에는적절하지않음. 2) 시료를챔버에채울때피펫은입구가넓은것을사용하는것이좋음. 3) 정체시간이짧을경우충분히침전되지않은개체가계수시제외되어오차유발요인이됨. 4) 검경시야의크기의설정은세즈윅-라프터챔버내부를구획하거나, 격자혹은스트립상의접안마이크로미터를사용함. 이때접안마이크로미터의크기는현미경상의계수배율에따라변동되기때문에대물마이크로미터를이용하여각계수배율에서의스트립혹은격자의크기를측정하여야함. 5) 계수시스트립이용경우양쪽경계면에걸린개체는경계면중하나의경계면에걸린개체는계수하고다른경계면에걸린개체는계수하지않음. 6) 계수시격자의경우격자경계면에걸린개체는격자의 4면중 2면에걸린개체는계수하고나머지 2면에들어온개체는계수하지않음. 7) 시료가희석되거나농축되었을경우개체수계산시보정계수를산출하여적용함

298 중배율방법 ( 200배율~500배율이하 ) 가 ) 팔머-말로니챔버이용계수팔머-말로니챔버에커버글라스를덮고조심스럽게시료를피펫으로채운후 15 분정도정치시킨다음계수한다. 계수는팔머-말로니챔버내에서일정격자크기를무작위로 10 회이상반복하여계수하고 1 ml내의개체수는다음식으로계산한다. 개체수 / ml = C A D N 1,000 C = 계수된개체수의합 A = 격자의면적 ( mm2 ) D = 검경한격자의깊이 ( 팔머-말로니챔버의깊이 0.4mm ) N = 검경한시야의횟수나 ) 혈구계수기이용계수혈구계수기에커버글라스를덮고조심스럽게시료용액을주입시킨다. 5분정도정치시킨다음혈구계수기격자상의개체수를계수한다. 이때혈구계수기는 5 회이상반복한다. 1 ml내의개체수는다음식으로계산한다. 개체수 / ml = C A D N 1,000 C = 계수된개체수의합 A = 혈구계수기면적 ( mm2 ) D = 혈구계수기깊이 ( mm ) N = 검경한시야의횟수주1) 팔머-말로니챔버는마이크로시스터스같은미소플랑크톤 ( nanno plankton ) 의계수에적절함. 2) 집락을형성하는조류들은필요에따라단일세포로분리한후고르게현탁하여시료로함. 3) 시료를챔버에채울때피펫은입구가넓은것을사용하는것이좋음. 4) 검경시야의설정은팔머-말로니챔버내부를구획하거나, 격자상의접안마이크로미터를사용함. 이때접안마이크로미터의크기는현미경상의계수배율에따라변동되기때문에대물마이크로미터를이용하여각계수배율하에서의스트립혹은격자의크기를측정하여야함

299 5) 혈구계수기의경우는가장큰격자크기 1 mm 1 mm를이용함. 6) 정체시간이짧을경우충분히침전되지않은개체가계수시제외되어오차유발요인이됨. 7) 계수시격자의경우격자경계면에걸린개체는격잔의 4면중 2면에걸린개체는계수하고나머지 2면에들어온개체는계수하지않음. 8) 시료가희석되거나농축되었을경우는개체수계산시보정계수를산출하여적용함. 담수조류분류표및식물성플랑크톤계수일지 : 부록참조

300 제 5 장시약및용액, 완충액, 배지, 표준액, 규정액

301 제 5 장시약및용액, 완충액, 배지, 표준액, 규정 ( 노르말 ) 액 제 1 항시약및용액 가스크롬Q( 60~80 메쉬 ) 크로마토그래프용가스크롬Q( 60~80 메쉬 ) 과망간산칼륨 [ KMnO 4 ] 과망간산칼륨 ( 표준시약 ) 과망간산칼륨황산용액 6 % 과망간산칼륨용액 10 ml와 10 % 황산용액 50 ml에물을넣어전량을 1000 ml로한다. 과산화수소 [ H 2 O 2 ] 과산화수소수 ( 30 % ) 과산화수소수 ( 3 % ) 과염소산 [ HClO 4 ]( 70~72 % ) 비중 : 약 1.67 건조용과염소산마그네슘 [ Mg(ClO 4 ) 2 ] 과황산암모늄 [ (NH 4 ) 2 S 2 O 8 ] 과황산칼륨 [ K 2 S 2 O 8 ] 알카리성과황산칼륨용액물 500 ml에수산화나트륨 ( 질소, 인시험용또는질소함량이 % 이하인것 ) 20 g을녹인다음과황산칼륨 ( 질소, 인시험용또는질소함량이 % 이하인것 ) 15 g을넣어녹인다. 이용액은사용시조제한다. 과요오드산칼륨 [ KIO 4 ] 금속구리 [ Cu ] ( 99.9 % 이상 ) 구연산나트륨 [ Na 3 C 6 H 5 O 7 ] 구연산나트륨 ( 2수화물 )[ C 6 H 5 Na 3 O 7 2H 2 O ] 구연산이암모늄 [ C 6 H 14 N 2 O 7 ] 구연산이암모늄용액 ( 25 W/V % )( 중금속시험용 ) 구연산이암모늄 25 g을물에녹여 100 ml로하여디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 소량을넣어흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리한다. 이조작을사염화탄소층이변색하지않을때까지반복한다. 다음에정제사염화탄소 5~10 ml를넣어흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리한다. 수층을건조한거름종이로여과하고사염화탄소의작은방울을제거한다

302 구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % ) 구연산이암모늄 10 g을물에녹여 100 ml로하여디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 소량을넣어흔들어섞고정치하여사염화소층을분리한다. 이조작을사염화탄소층이변색하지않을때까지반복한다. 다음에정제사염화탄소 5~10 ml를넣고흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리한다. 수층을건조한거름종이로여과하고사염화탄소의작은방울을제거한다. 구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % )( 구리시험용 ) 구연산이암모늄 10 g을물약 80 ml에녹이고메타크레졸퍼플- 에틸알코올용액 ( 0.1 W/V % ) 2~3 방울을넣고암모니아수 ( 1+1 ) 를한방울씩떨어뜨려 ph를약 9로조절하고물을넣어 100 ml로한다. 이액을분액깔때기에옮겨디에틸디티오카르바민산나트륨용액 ( 1 W/V % ) 2 ml와초산부틸 ( 구리시험용 ) 10 ml를넣어흔들어섞고정치하여분리한다. 다시구연산이암모늄층에초산부틸 ( 구리시험용 ) 10 ml를넣어흔들어섞고정치하여구연산이암모늄층을분리하여건조한거름종이로여과하여초산부틸을제거한다. 구연산제2철 [ FeC 6 H 5 O 7 ] 구연산철암모늄 정제규조토 : 세라이트 545 또는이와동등한규격의것 글루코오스 [ C 6 H 12 O 6 ] 글루콘산 [ C 6 H 12 O 7 ] 글루타민산 [ ( CH 2 )CH( NH 2 )( COOH ) 2 ] 글루타치온 ( 환원용 )[ C 10 H 17 N 3 O 6 S ] 글루타치온용액 ( 1 W/V % ) 글루타치온 ( 환원형 ) 0.1 g을물에녹여 10 ml로한다. 사용할때조제한다. 글리세린 [ C 3 H 7 O 3 ] 나트륨페놀라이트용액페놀 25 g을 20 % 수산화나트륨 55 ml에녹이고방냉한다음아세톤 6 ml와물을넣어 200 ml로한다. 사용시조제한다. α 나프틸에틸렌디아민이염산염 [ C 10 H 7 NH( CH 2 ) 2 NH 2 2HCl ] α 나프틸에틸렌디아민이염산염용액 ( 0.1 W/V % ) α 나프틸에틸렌디아민이염산염 0.1 g을물에녹여 100 ml로한다. 사용할때조제한다. 뉴트랄레드 ( Neutral Red ) 니트로메탄 [ CH 3 NO 2 ]

303 P 니트로페놀 [ C 6 H 5 NO 3 ] P 니트로페놀용액 [ 0.1 W/V % ] P 니트로페놀 0.1 g을물에녹여 100 ml로한다. 니트로프루싯나트륨 [ Na 2 Fe( CN ) 5 ( NO ) 2H 2 O ] 니트로프루싯나트륨용액 니트로프루싯나트륨 이수화물 0.15 g을물에녹여 100 ml로한다. 다르코 G-60( Darco G-60 ) 크로마토그래프용다르코 G-60 다이아지논 [ C 11 H 21 N 2 O 3 PS ]( 98.0 % 이상 ) 데속시콜린산나트륨 ( Sodium Desoxycholate )[ C 24 H 39 NaO 4 ] 데발다합금구리 50 %, 알루미늄 45 %, 아연 5 % 로된합금분말 디메틸글리옥심 [ (CH 3 ) 2 C 2 (NOH) 2 ] 디메틸글리옥심에틸알코올용액 ( 1 W/V % ) 디메틸글리옥심 1 g을에틸알코올 ( 95 V/V % ) 에녹여 100 ml로한다. 불용물을여과하여사용한다. 디메틸글리옥심 수산화나트륨용액 ( 1 W/V % ) 디메틸글리옥심 1 g을 1 % 수산화나트륨용액에녹여 100 ml로한다. 불용물은여과하여사용한다. P 디메틸아미노벤지리덴로다닌 [ 5-(4-디메틸아미노벤지리덴 ) 로다닌 [ C 12 H 12 N 2 OS 2 ]] P 디메틸아미노벤지리덴로다닌아세톤용액 ( 0.02 W/V % ) P 디메틸아미노벤지리덴로다닌 0.02 g을아세톤에녹여 100 ml로한다. 디메틸클로르시란 [ Cl( CH 3 ) 2 SiH ] 디에틸디티오카르바민산나트륨 ( 3 수화물 )[ ( C 2 H 5 ) 2 NNaCS 2 3H 2 O ] 디에틸디티오카르바민산나트륨용액 ( 1 W/V % ) 디에틸디티오카르바민산나트륨 ( 3 수화물 ) 1.3 g을물에녹여 100 ml로한다. 착색용기에보관하여 14 일이내에사용한다. 디에틸디티오카르바민산은 [ ( C 2 H 5 ) 2 NAgCS 2 ] 디에틸디티오카르바민산은용액 ( 0.5 W/V % ) 디에틸디티오카르바민산은 0.5 g을피리딘에녹여 100 ml로한다. 크로마토그래프용 DEGS( Di-Ethylene Glycol Succinate ) 디클로로메탄 [ 메틸렌클로라이드 : CH 2 Cl 2 ] 디티존 [ C 6 H 5 NHNHCSN : NC 6 H 5 ]

304 디티존사염화탄소용액 ( 0.01 W/V % ) 디티존 g을정제사염화탄소 400 ml에잘저어주면서녹이고여과한다. 이용액을분액깔때기에옮겨암모니아수 ( ) 400 ml를넣어흔들어섞어디티존을수층에옮기고정치하여사염화탄소층을분리한다. 수층에정제사염화탄소 50 ml를넣어흔들어씻어주고정치한다. 사염화탄소층을분리하고사염화탄소층이엷은녹색이될때까지수층을반복하여씻는다. 수층에정제사염화탄소 500 ml와염산 ( 1+10 ) 50 ml를넣어흔들어섞고디티존을사염화탄소층에옮기고정치하여사염화탄소층을분리한다. 수층에는정제사염화탄소 50 ml를넣어흔들어섞어나머지디티존을추출하고정치하여전체사염화탄소층을합하고정제사염화탄소를넣어 1,000 ml로하여착색병에넣어아황산수 ( 포화 ) 100 ml를넣어표면을덮고 10 이하의냉암소에서보존한다. 디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 디티존사염화탄소용액 ( 0.01 W/V % ) 을정제사염화탄소로정확히 2 배희석한다. 디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 은정제사염화탄소로정확히 1.67 배희석한다. 디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 을정제사염화탄소로정확히 5배희석한다. 디티존메틸이소부틸케톤용액 ( 0.2 W/V % ) 디티존 0.2 g을메틸이소부틸케톤에녹여 100 ml로한다. 디티존클로로포름용액 ( 0.03 W/V % ) 디티존 0.3 g을클로로포름에녹여 1,000 ml로한다. 디티존클로로포름용액 ( 0.01 W/V % ) 디티존클로로포름용액 ( 0.03 W/V % ) 을클로로포름으로 3 배희석한다. 디페닐카르바지드 [ C 13 H 14 N 4 O ] 디페닐카르바지드용액 ( 1 W/V % ) 디페닐카르바지드 0.5 g을아세톤 25 ml에녹이고물 25 ml를넣어 50 ml로한다. 이용액은약 7 일안에사용하여야한다. 1, 2-디히드록안트라키노닐-3-메틸아민-NN-이초산 라우릴황산나트륨 [ CH 3 ( CH 2 ) 10 CH 2 OSO 3 Na ] 란탄용액 산화란탄 g을염산용액 ( 2 N ) 10 ml에녹인다. 란탄알리자린콤프렉손용액 1,2-디히록시안트라키노닐-3-메틸아민-NN-이초산 g을암모니아수 ( 1+10 ) 4 ml와초산암모늄용액 ( 20 W/V % ) 4 ml에녹이고초산나트륨 ( 3수화물 ) 41 g을

305 물 400 ml에녹이고초산 24 ml를넣은액과섞는다. 이용액에아세톤 400 ml를섞으면서서서히넣고란탄용액 10 ml을넣고섞으면서실온으로냉각한다. 냉각한다음초산또는암모니아수로 ph를 4.7로조절하고물을넣어정확히 1,000 ml로하여섞는다. 루골용액 ( Lugol's solution ) 요드화칼륨 20 g을증류수 200~300 ml에녹이고여기에요오드 10 g을넣어녹인다음증류수로서 1 L로한다. 이용액을사용하기수일전에초산 20 ml를넣어갈색시약병에보존한다. 전해금속망간 [ Mn ]( 99.9 % 이상 ) 메틸렌블루우 [ C 16 C 18 CIN 3 S 3H 2 O ] 메틸레드 [ C 15 H 15 N 3 O 2 ] 메틸레드 에틸알코올용액 ( 0.1 W/V % ) 메틸레드 0.1 g을에틸알코올 ( 95 W/V % ) 에녹여 100 ml로한다. 메틸레드 브롬크레졸그린혼합지시약메틸레드 0.02 g과브롬크레졸그린 0.1 g을에틸알코올 ( 95 W/V % ) 에녹여 100 ml로한다. 메틸알코올 [ CH 3 OH ] 메틸알코올 ( 95.0 W/V % ) 메틸오렌지 [ C 14 H 14 N 3 NaO 3 S ] 메틸오렌지용액 ( 0.1 W/V % ) 메틸오렌지 0.1 g을열수 100 ml에녹인다. 냉각후사용한다. 메틸이소부틸케톤 [ CH 3 COCH 2 CH( CH 3 ) 2 ] 메틸이소부틸케톤 ( 원자흡광광도용 ) 몰리브덴산암모늄 ( 4 수화물 )[ ( NH 4 ) 6 Mo 7 O 24 4H 2 O ] 몰리브덴산암모늄용액몰리브덴산암모늄 ( 4 수화물 ) 15 g을물약 150 ml에녹이고여기에황산 182 ml를물약 600 ml에섞은액을천천히넣고방냉하여흔들어섞고술퍼민산암모늄 10 g을넣어녹인다음물을넣어 1,000 ml로한다. 몰리브덴산암모늄 아스코르빈산혼합액몰리브덴산암모늄 ( 4 수화물 ) 6 g과주석산안티몬칼륨 0.24 g을물약 300 ml에녹이고황산 ( 2+1 ) 120 ml와술퍼민산암모늄 5 g을넣어녹인다음물을넣어 500 ml로하고여기에 7.2 % L-아스코르빈산용액 100 ml를넣어섞는다. 사용시조제한다. 물 ( 정제수 : 탈염수 )

306 벤젠 [ C 6 H 6 ] 크로마토그래프용벤젠예기유지 ( 維持 ) 시간부근에서봉우리가나타나지않는벤젠을사용한다. 보통부이온 부루신 ( 2 수화물 )[ C 23 H 26 N 2 O 4 2H 2 O ] 부루신 술퍼닐산용액부루신 ( 2 수화물 ) 1 g과술퍼닐산 0.1 g을염산 3 ml에녹이고물을넣어 100 ml로한다. 불화나트륨 [ NaF ] 불화나트륨 ( 표준시약 ) 불화칼륨 [ KF ] 붕산 [ H 3 BO 3 ] 붕산나트륨 ( 10 수화물 )[ Na 2 B 4 O 7 10H 2 O ] 붕산나트륨 ( ph 측정용 ) 알카리성붕산나트륨용액붕산나트륨 ( 10 수화물 ) 9.54 g을물에녹여 500 ml로하고 0.4 % 수산화나트륨용액 500 ml와혼화한다. 브론스위크용액메틸레드 0.2 g과메틸렌블루우 0.1 g을에틸알코올 ( 95.0 W/V % ) 에녹여 300 ml로한다. 브롬 [ Br 2 ] 브롬수 ( 포화 ) 브롬산칼륨 [ KBrO 3 ] 브롬산칼륨 브롬산칼륨용액 ( 0.1 N ) 브롬산칼륨 2.78 g과브롬화칼륨 10 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 브롬티몰블루우 [ C 27 H 28 Br 2 O 5 S ] 브롬티몰블루우에틸알코올용액 ( 0.1 W/V % ) 브롬티몰블루우 0.1 g을에틸알코올 ( 95.0 W/V % ) 에녹여 100 ml로한다. 브롬페놀블루우 [ C 19 H 10 Br 4 O 5 S ] 브롬페놀블루우에틸알코올용액 ( 0.1 W/V % ) 브롬페놀블루우 0.1 g을에틸알코올 ( 95 W/V % ) 에녹여 100 ml로한다. 브롬화칼륨 [ KBr ] 브릴리언트그린 [ C 27 H 33 N 2 HSO 4 ] 사염화탄소 [ CCl 4 ] 정제사염화탄소사염화탄소에황산소량을넣어흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리한다

307 황산층이착색하지않을때까지이조작을반복한다음물소량을넣어흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리하고산화칼슘을넣어흔들어섞고산화칼슘이있는그대로증류하여 77 의유분을취한다. 산성용액황산 300 ml를물약 600 ml에천천히넣어방냉하여질산 4 ml를넣고물을넣어 1,000 ml로한다. 혼합산성용액황산 17 ml를물 400 ml에천천히넣어방냉하고술퍼민산 30 g을넣어녹이고물을넣어 500 ml로한다. 갈색유리병에넣어 2 개월안에사용하여야한다. 산화란탄 [ La 2 O 3 ] 산화마그네슘 [ MgO ] 사용전 600 에서약 3 시간가열할것 산화칼슘 [ CaO ] ( 생석회 ) 삼산화비소 [ As 2 O 3 ] 삼산화비소 ( 표준시약 ) 미결정셀루로오스분말 크로마토그래프용미결정셀루로오스분말 수산나트륨 [ Na 2 C 2 O 4 ] 수산나트륨 ( 표준시약 ) 수산나트륨용액 ( N ) 150~200 에서약 1 시간건조하고황산건조용기에서식힌수산나트륨 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 수산화나트륨 [ NaOH ] 수산화나트륨용액 ( 1 N ) 수산화나트륨 42 g을물 950 ml를넣어녹이고새로만든수산화바륨용액 ( 포화 ) 을침전이생기지않을때까지한방울씩떨어뜨려잘섞고마개를하여 24 시간방치한다음여과하여사용한다. 수산화나트륨용액 ( 0.1 N ) 수산화나트륨용액 ( 1 N ) 을물로 10 배희석한다. 수산화나트륨용액 ( 0.05 N ) 수산화나트륨용액 ( 1 N ) 을물로 20 배희석한다. 수산화나트륨용액 ( 0.02 N ) 수산화나트륨용액 ( 1 N ) 을물로 50 배희석한다. 수산화바륨 ( 8 수화물 )[ Ba( OH ) 2 8H 2 O ]

308 수산화바륨용액 ( 포화 ) 수산화바륨 ( 8 수화물 ) 적당량을물에넣어녹일때녹지않는침전이생기면상층액을여과하여여액을사용한다. 수산화칼륨 [ KOH ] 수산화칼륨에틸알코올용액 ( 1 M ) 수산화칼륨 70 g을소량의물에녹이고에틸알코올 ( 95.0 V/V % ) 을넣어 1,000 ml로하여흔들어섞고마개를하여 2~3 일간방치한다. 상층액을여과하여내 ( 耐 ) 알카리성유리마개병에넣어보관한다. 수산화칼슘 [ Ca( OH ) 2 ] 수산화칼슘 ( ph 측정용 ) 수소 ( 가스 ) [ H 2 ] ( 99.9 % 이상 ) 술퍼닐아미드 [ C 6 H 8 O 2 N 2 S ] 술퍼닐아미드용액 ( 0.5 W/V % ) 술퍼닐아미드 0.5 g을염산 ( 1+1 ) 100 ml에가온하면서녹인다. 술퍼민산 [ HOSO 2 NH 2 ] 술퍼민산용액 1 %( W/V ) 술퍼민산 1 g을물에녹여 100 ml로한다. 술퍼민산암노늄 [ NH 4 OSO 2 NH 2 ] 시 디티에이 ( cy DTA )( 1, 2 시클로헥산디아민사초산 ) { C 8 H 10 [ N( CH 2 COOH ) 2 ] 2 H 2 O } 시 디티에이 ( cy DTA ) 용액 ( 0.1 M ) 시 디티에이 3.5 g 및수산화나트륨 0.85 g을물에녹여 100 ml로한다. 필요에따라에틸렌디아민테트라초산이나트륨용액 ( 0.1 M ) ( 수은시험용 ) 과같은방법으로디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 으로씻은다음사용한다. L 시스테인 [ HSCH 2 CH( NH 2 )COOH ] L 시스테인 초산나트륨용액 L 시스테인염산염 ( 1 수화물 ) 1 g, 초산나트륨 ( 3 수화물 ) 0.8 g 및무수황산나트륨 12.8 g을물에녹여 100 ml로한다. 시안화칼륨 [ KCN ] 시안화칼륨 ( 표준시약 ) 시안화칼륨 ( 5 W/V % )( 납시험용 ) 시안화칼륨 50 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 이용액에의한바탕시험값이높을경우에는다음과같이정제하여사용한다. 강산성양이온교환수지 ( 입경 0.36~1.18mm ) 를물에침적시켜유리관 ( mm ) 에공기가들어가지않게주의하여옮긴다. 염산

309 ( 1 N ) 약 1 L를 30 ml /min으로유출시킨다음물을약 80 ml /min의유속으로유하시킨다. 유출액이메틸레드 브롬크레졸그린혼합지시약이중성이될때까지씻어주고수산화칼륨용액 ( 1 N ) 을약 20 ml /min로유출액이알카리성이될때까지유하시킨다. 여기에조제한시안화칼륨을 20 ml /min으로유출시켜최초유출액 50 ml는버리고다음유출액을받아사용한다. 시안화칼륨용액 ( 1 W/V % )( 납시험용 ) 시안화칼륨용액 ( 5 W/V % )( 납시험용 ) 을납을함유하지않은물로정확히 5 배희석한다. 시안화칼륨용액 ( 0.5 W/V % )( 납시험용 ) 시안화칼륨용액 ( 5 W/V % )( 납시험용 ) 을납을함유하지않은물로정확히 10 배희석한다. 시안화칼륨용액 ( 0.1 W/V % )( 카드뮴시험용 ) 시안화칼륨용액 ( 1 W/V % )( 납시험용 ) 을납을함유하지않은물로정확히 10 배희석한다. 실리카겔 실리카겔 ( 건조용기용 ) 박층크로마토그래프용실리카겔박층크로마토그래프용으로황산칼슘 5 % 를함유하는것. 크로마토그래프용실리카겔실리카겔을크로마토그래프용노말헥산으로씻은다음여과하여비커에넣고층의두께를 10 mm이하로하여 130 에서 18 시간건조한다음건조용기안에서 30 분간방냉한다. 실리콘 가스크로마토그래프용실리콘 DC-11 가스크로마토그래프용실리콘 DC-220 가스크로마토그래프용실리콘 DC, QF-1 가스크로마토그래프용실리콘 OV-1 가스크로마토그래프용실리콘 OV-17 가스크로마토그래프용실리콘 SE-30 가스크로마토그래프용실리콘 QF-1 4 아미노안티피린 [ C 11 H 13 N 3 O ] 4 아미노안티피린용액 ( 2 W/V % ) 4 아미노안티피린 2 g을물에녹여 100 ml로한다. 사용할때조제한다

310 아비산나트륨 [ NaAsO 2 ] 아세톤 [ CH 3 COCH 3 ] 크로마토그래프용아세톤아세톤 300 ml를취하여농축해서약 3 ml로한다. 이액 10 μl를미량주사기를사용하여가스크로마토그래프에주입하였을때아세톤의예기유지 ( 維持 ) 시간부근에서봉우리가나타나고이외의봉우리가나타나지않는것을사용한다. 아세틸렌 ( 가스 )[ C 2 H 2 ]( 99.9 % 이상 ) 아스코르빈산 [ C 6 H 8 O 6 ] 아스코르빈산나트륨 [ C 6 H 7 O 6 Na ] 금속아연 [ Zn ]( 99.9 % 이상 ) 입상아연 ( 1,410~1,000 μ ) 비소 0.1 mg /l 이하를함유하는것을염산 ( 1+10 ) 과물로표면을씻어사용한다. 아연분말 [ Zn ] 아연분말정제 [ Zn ] 아연분말 ( 시약용, 0.1 mg Se/ kg이하 ) 50 g에접착제 5 g을배합하고물 7 ml를넣어갠다음정제성형기로정제를만든다음 80 에서 10 분간건조한정제 ( 1 개가약 0.5 g정도 ) 를사용하거나아연분말 ( 시약요 )1 g을차광지에싼것을사용한다. 아지드화나트륨 [ NaN 3 ] 아질산나트륨 [ NaNO 2 ] 아질산나트륨 ( 표준시약 ) 아질산나트륨용액 ( 10 W/V % ) 아질산나트륨 10 g을물에녹여 100 ml로한다. 사용할때조제한다. 아질산나트륨용액 ( 5 W/V % ) 아질산나트륨 5 g을물에녹여 100 ml로한다. 사용할때조제한다. 아질산나트륨용액 ( 2 W/V % ) 아질산나트륨 2 g을물에녹여 100 ml로한다. 사용할때조제한다. 아황산 [ H 2 SO 3 ] 아황산수 ( 포화 ) 무수아황산나트륨 [ Na 2 SO 3 ] 아황산나트륨용액 ( 0.1 N ) 무수아황산나트륨 6.3 g을물에녹여 1,000 ml로한다

311 아황산나트륨용액 ( N ) 무수아황산나트륨 1.6 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 사용할때조제한다. 아황산수소나트륨 [ NaHSO 3 ] 크로마토그래프용알루미나알리자린콤프렉손 [ 1, 2-디히드록시안트라키노닐-3-메틸아민-N N-이초산 ] [ C 19 H 15 NO 8 ] 알카리성요오드화칼륨아지드화나트륨용액수산화나트륨 500 g( 또는수산화칼륨 700 g ), 요오드화칼륨 150 g( 또는요오드화나트륨 135 g ), 아지드화나트륨 10 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 갈색병에넣어어두운곳에서보관한다. 이용액은산성에서요오드를유리한다. 암모니아수 [ NH 4 OH ]( 28 % 이상 ) 비중 :0.90 에리오크롬블랙 T [ C 20 H 12 N 3 NaO 7 S ] 에리오크롬블랙 T 염화나트륨지시약에리오크롬블랙 T 100 mg및염화나트륨 10 g을균일하게될때까지갈아조제한다. 에오신 Y [ C 20 H 6 Br 4 Na 2 O 5 ] 에틸렌디아민테트라초산이나트륨 ( 2 수화물 )( C 10 H 14 N 2 Na 2 O 8 2H 2 O ) 에틸렌디아민테트라초산이나트륨용액 ( 시안시험용 ) 에틸렌디아민테트라초산이나트륨 ( 2 수화물 ) 10 g을물에넣어녹이고 0.4 % 수산화나트륨용액으로약알카리성으로하여물을넣어 100 ml로한다. 에틸렌디아민테트라초산이나트륨용액 ( 구리시험용 ) 에틸렌디아민테트라초산이나트륨 ( 2 수화물 ) 2 g을물에녹여 100 ml로한다. 에틸렌디아민테트라초산이나트륨용액 ( 0.1 M )( 수은시험용 ) 에틸렌디아민테트라초산이나트륨 ( 2 수화물 ) 3.8 g을물에녹여 100 ml로한다. 필요하면이것을분액깔때기에옮기고구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % ) 과같은방법으로디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 으로씻은다음사용한다. 에틸알코올 [ C 2 H 5 OH ]( 99.5 V/V % ) 에틸알코올 ( 95.0 V/V % ) 에틸에테르 [ C 2 H 5 OC 2 H 5 ] 0.4 % 수산화나트륨용액과물로차례로씻어준다음무수황산나트륨으로탈수하고증류하여사용한다. 염산 [ HCl ]( 35.0 % 이상 ) 염산용액 ( 2 N )

312 염산 180 ml에물을넣어 1,000 ml로한다. 염산용액 ( 1 N ) 염산 90 ml에물을넣어 1,000 ml로한다. 염산용액 ( 0.2 N ) N 염산용액을물로 5 배희석한다. 염산 ( 비소시험용 ) 비소 0.01 mg /l 이하를함유하는것을사용한다. 염산 ( 1+1 )( 비소시험용 ) 염산 ( 비소시험용 ) 과비소를함유하지않은물을사용하여조제한다. 염산 ( )( 비소시험용 ) 염산 ( 비소시험용 ) 과비소를함유하지않은물을사용하여조제한다. 염산 ( 수은시험용 ) 염산 1,000 ml에대하여과망간산칼륨 0.3 g을넣어증류하여얻은유출액의전체의 1/2에상당하는중류 ( 中留 ) 를취한다. 염산 ( 1+1 )( 수은시험용 ) 염산 ( 수은시험용 ) 과수은을함유하지않은물을사용하여조제한다. 염산 ( 1+37 )( 수은시험용 ) 염산 ( 수은시험용 ) 과수은을함유하지않은물을사용하여조제한다. 염산 ( )( 수은시험용 ) 염산 ( 수은시험용 ) 과수은을함유하지않은물을사용하여조제한다. 염산히드록실아민 [ NH 2 OH HCl ] 염산히드록실아민 ( 20 W/V % )( 수은시험용 ) 염산히드록실아민 20 g을물에녹여 100 ml로한다. 필요에따라서이것을분액깔때기에옮기고소량의디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 을넣고흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리하고다시수층에소량의디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 을넣어흔들어섞고정치하여사염화탄소층을분리한다. 사염화탄소층이변색하지않을때까지이조작을반복하여수층을건조한거름종이로여과하여사염화탄소의작은방울을제거한다. 염화나트륨 [ NaCl ] 염화나트륨 ( 표준시약 ) 염화메틸수은 [ CH 3 HgCl ] 염화메틸수은 ( 표준시약 ) 염화백금산칼륨 [ K 2 PtCl 6 ] 염화백금산칼륨 ( 표준시약 )

313 염화암모늄 [ NH 4 Cl ] 염화암모늄 ( 표준시약 ) 염화암모늄-암모니아용액 ( 카드뮴-구리환원컬럼용 ) 염화암모늄 100 g을물약 700 ml에녹인다음암모니아수 50 ml를넣고물을넣어 1,000 ml로한다. 염화에틸수은 [ C 2 H 5 HgCl ] 염화에틸수은 ( 표준시약 ) 염화제이수은 [ HgCl 2 ] 염화제이수은 ( 표준시약 ) 염화제이철 ( 6 수화물 )[ FeCl 3 6H 2 O ] 염화제이철용액 ( 비소시험용 ) 염화제이철 ( 6 수화물 ) 5 g을염산 ( 1+1 )( 비소시험용 ) 10 ml와물에녹여 100 ml로한다. 염화제이철용액 ( BOD용 ) 염화제이철 ( 6 수화물 ) 0.25 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 염화제일구리 [ CuCl ]( 분말 ) 염화제일주석 ( 2 수화물 )[ SnCl 2 2H 2 O ] 염화제일주석용액 ( 비소시험용Ⅰ ) 염화제일주석 ( 2 수화물 ) 10 g을염산 ( 비소시험용 ) 에넣어녹이고염산 ( 비소시험용 ) 을넣어 100 ml로한다. 염화제일주석용액 ( 비소시험용Ⅱ ) 염화제일주석 ( 2 수화물 ) 40 g을염산 ( 비소시험용 ) 100 ml에녹이고금속주석의작은입자를넣어보관한다. 사용할때물로 10 배희석하여사용한다. 염화제일주석용액 ( 수은시험용 ) 염화제일주석 ( 2 수화물 ) 10 g에황산 ( 1+20 )( 수은시험용 ) 60 ml를넣어섞으면서가열하여녹이고냉각시킨다음물을넣어 100 ml로한다. 염화제일주석용액 ( 인산염 인시험용 ) 염화제일주석 ( 2 수화물 ) 2 g을염산 10 ml에가온하여녹이고물을넣어 100 ml로한다음금속주석의작은입자를넣어보관한다. 염화칼륨 [ KCl ] 염화칼슘 ( 2 수화물 )[ CaCl 2 2H 2 O ] 염화칼슘용액염화칼슘 27.5 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 염화코발트 ( 6 수화물 )[ CoCl 2 6H 2 O ]

314 염화코발트 ( 6 수화물 )( 표준시약 ) 요소 [ NH 2 CONH 2 ] 요소용액 ( 20 W/V % )( 수은시험용 ) 요소 20 g을물에녹여 100 ml로한다. 필요하면이것을분액깔때기에옮기고구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % ) 과같은방법으로디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 으로씻은다음사용한다. 요오드 [ I 2 ] 요오드산칼륨 [ KIO 3 ] 요오드산칼륨 ( 표준시약 ) 요오드화나트륨 [ NaI ] 요오드화칼륨 [ KI ] 요오드화칼륨용액 ( 20 W/V % )( 비소시험용 ) 요오드화칼륨 20 g을물에녹여 100 ml로한다. 사용할때조제한다. 우담즙 ( 신선한것 ) 건조한우담즙 ( 분말 ) 유당 [ C 12 H 22 O 11 H 2 O ] 유기인정제용컬럼용출액 ( 규산컬럼용 ) 크로마토그래프용헥산 400 ml를분액깔때기에넣고니트로메탄 20 ml를넣어 5 분간흔들어섞은다음정치하여상층의니트로메탄포화헥산을사용한다. 유기인정제용컬럼용출액 ( 플로리실컬럼용 ) 초산부틸및이소프로필알콜각 5 ml씩을섞고크로마토그래피용헥산을넣어 100 ml로한다. 유기인정제용컬럼용출액 ( 활성탄컬럼용 ) 크로마토그래피용벤젠을사용한다. 육엑기스 이산화칼슘 ( 생석회 ) 이피엔 [ C 14 H 14 NO 4 PS ]( 98.0 % 이상 ) 인산 [ H 3 PO 4 ] 인산이수소칼륨 [ KH 2 PO 4 ] 인산이수소칼륨 ( 표준시약 ) 인산이수소칼륨 ( ph 측정용 ) 무수인산일수소나트륨 [ Na 2 HPO 4 ] 무수인산일수소나트륨 ( ph 측정용 ) 인산일수소나트륨 ( 12 수화물 )[ Na 2 HPO 4 12H 2 O ]

315 무수인산일수소칼륨 [ K 2 HPO 4 ] 일산화이질소 ( 가스 )[ N 2 O ]( 99.9 % 이상 ) 용성전분 전분용액용성전분 1 g을물 10 ml를넣어혼화하고열수 100 ml중에넣고 1 분간끓이고냉각하여정치한다. 상층액을사용한다. 사용할때조제한다. 정제수 ( 탈염수 : 이온교환수지로탈염정제한물 ) 금속주석 [ Sn ]( 99.9 % 이상 ) 주석산 [ C 4 H 6 O 6 ] 주석산용액 ( 2 W/V % )( 카드뮴시험용 ) 주석산 2 g을물에녹여 100 ml로한다. 구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % ) 과같은방법으로디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 으로씻은다음사용한다. 주석산암모늄 [ C 4 H 9 NO 6 ] 주석산암모늄용액 ( 10 W/V % ) 주석산암모늄 10 g을물에녹여 100 ml로한다음구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % ) 과같은방법으로디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 으로씻은다음사용한다. 중크롬산칼륨 [ K 2 Cr 2 O 7 ] 중크롬산칼륨 ( 표준시약 ) 중크롬산칼륨황산혼합액중크롬산칼륨 200 g을물 100 ml에녹이고황산 1,500 ml를서서히넣어흔들어섞는다. 증류수 ( 멸균증류수 ) 크로마토그래프용증류수증류수를크로마토그래프용노말헥산으로씻어주고사용한다. 진콘 [ C 20 H 15 O 6 N 4 SNa ] 진콘용액진콘 g을취하여메틸알코올 ( 95.0 V/V % ) 약 50 ml를넣어약 50 이하에서가온하여녹이고메틸알코올 ( 95.0 V/V % ) 을넣어 100 ml로한다. 질산 [ HNO 3 ] 비중 : 약 1.42 질산 ( 수은시험용 ) 질산을필요에따라증류하고전체의 1/2에상당하는중류 ( 中留 ) 를취한다

316 질산나트륨 [ NaNO 3 ] 질산납 [ Pb( NO 3 ) 2 ] 질산납 ( 표준시약 ) 질산암모늄 [ NH 4 NO 3 ] 질산은 [ AgNO 3 ] 질산칼륨 [ KNO 3 ] 질산칼륨 ( 표준시약 ) 질산칼륨용액 ( 0.3 N ) 질산칼륨 30.3 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 질산 ( 가스 )[ N 2 ]( 99.9 % 이상 ) 총질소시험용분해촉진제황산구리 ( 5 수화물 ) 와황산칼륨을 1 : 4의비율로혼화하여균등한분말로한다. 차아염소산나트륨 [ NaOCl ] 차아염소산나트륨용액 ( 유효염소 5~12 % ) 차아염소산나트륨 ( 암모니아성질소시험용 ) 차아염소산나트륨용액을유효염소농도를측정하여유효염소로서 1 g에해당하는ml수를취하여물을넣어 100 ml로한다. 사용할때조제한다. 유효염소농도의측정 차아염소산나트륨용액 10 ml를 200 ml용량플라스크에넣고물을넣어표선을채운다음이액 10 ml를취하여삼각플라스크에넣고물을넣어약 100 ml로한다. 요오드화칼륨 1~2 g 및초산 ( 1+1 ) 6 ml를넣어밀봉하고흔들어섞은다음어두운곳에약 5 분간방치하고전분용액을지시약으로하여 0.05 N 티오황산나트륨용액으로적정한다. 따로물 10 ml를취하여바탕시험을하고보정한다. 유효염소량 ( W/V % ) = a f V a : 0.05 N 티오황산나트륨용액의소비량 ( ml ) f : 0.05 N 티오황산나트륨용액의농도계수 V : 차아염소산나트륨용액을취한양 ( ml ) 초산 [ CH 3 COOH ]( 99~100 % ) 초산나트륨 ( 3 수화물 )[ CH 3 COONa 3H 2 O ] 초산나트륨용액 ( 10 W/V % )( 아연시험용 ) 초산나트륨 ( 3 수화물 ) 16.5 g을물에녹여약 90 ml로하고초산을한방울씩떨어뜨려 ph를 7로조절한다음물을넣어 100 ml로하여분액깔때기에옮기고구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % ) 과같은방법으로디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 으로씻어준다음사용한다

317 초산납 ( 3 수화물 )[ Pb( CH 3 COO ) 2 3H 2 O ] 초산납용액 ( 10 W/V % ) 초산납 ( 3 수화물 ) 11.8 g을물과초산 1~2 방울에녹이고물을넣어 100 ml로한다. 초산부틸 [ CH 3 COOCH 2 CH 2 CH 2 CH 3 ]( 구리시험용 ) 구리를함유하지않는것이어야한다. 초산암모늄 ( 3 수화물 )[ CH 3 COONH 4 3H 2 O ] 초산암모늄용액초산암모늄용액 ( 25 W/V % ) 을초산과암모니아수로 ph를 5.5로조절한다음, 구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % ) 과같은방법으로디티존사염화탄소용액 ( 0.01 W/V % ) 으로씻어준다음사용한다. 초산암모늄용액 ( 25 W/V % ) 초산암모늄 ( 3 수화물 ) 25 g을물에녹여 100 ml로한다. 초산암모늄용액 ( 20 W/V % ) 초산암모늄 ( 3 수화물 ) 20 g을물에녹여 100 ml로한다. 금속카드뮴 [ Cd ]( 99.9 % 이상 ) 카드뮴-구리환원컬럼충전액염화암모늄 10 g을물약 700 ml에녹인다음암모니아수 5 ml를넣고물을넣어 1,000 ml로한다. 카드뮴-구리환원컬럼충전제입상카드뮴 ( 입경 0.5~2 mm ) 약 40 g을삼각플라스크에넣고염산 ( 1+5 ) 약 50 ml를넣어씻어주고다시물약 100 ml씩으로 5 회정도씻어준다. 다음에질산 ( 1+39 ) 약 50 ml씩으로 2 회씻어주고다시물약 100 ml식으로 5 회정도씻어준다. 씻은액은버리고카드뮴-구리환원컬럼활성화액 200 ml를넣어 24 시간방치하여카드뮴의표면에구리의피막을형성케한다. 이충전제는그대로밀봉하여보존하여야한다. 카드뮴-구리환원컬럼활성화액물약 700 ml에 8 % 수산화나트륨용액 70 ml를넣고에틸렌디아민테트라초산이나트륨 ( 2 수화물 ) 38 g 및황산구리 ( 5 수화물 ) 12.5 g을넣어녹인다음 8 % 수산화나트륨용액을넣어 ph 7로조절하고물을넣어 1,000 ml로한다. 칼륨명반용액황산알루미늄칼륨 ( 24 수화물 ) 10 g을물에녹여 100 ml로한다. 쿠페론 [ C 6 H 9 N 3 O 2 ]( 니트로소페닐히드록실아민암모늄염 ) 쿠페론용액 ( 5 W/V % ) 쿠페론 5 g을물에녹여 100 ml로한다. 사용할때조제한다

318 m-크레솔퍼플 [ C 21 H 18 SO 5 ] m-크레솔퍼플에틸알코올용액 ( 0.1 W/V % ) m-크레솔퍼플 0.1 g을에틸알코올 ( 95.0 V/V % ) 50 ml에녹이고물을넣어 100 ml로한다. m-크레솔퍼플에틸알코올용액 ( 0.05 W/V % ) m- 크레솔퍼플 0.05 g을에틸알코올 ( 95.0 W/V % ) 50 ml에녹이고물을넣어 100 ml로한다. 클로라민 T( 3 수화물 )[ C 7 H 7 ClNNaO 2 S 3H 2 O ] 클로라민 T용액 ( 1 W/V % ) 클로라민 T( 3 수화물 ) 1.25 g을물에녹여 100 ml로한다. 사용할때조제한다. 크로모솔브 G( DMCS )[ Chromosorb G( DMCS ) ]( 60~80 메쉬 ) 크로모솔브 W( AW-DMS )[ Chromosorb W( AW-DMS ) ]( 60~80 메쉬 ) 크로모솔브 W[ Chromosorb W ]( 149~177 μ ) 크로모솔브 W[ Chromosorb W ]( 177~250 μ ) 크로마토그래프용크로모솔브 G( DMCS )( 60~80 메쉬 ) 크로마토그래프용크로모솔브 W( AW-DMS )( 60~80 메쉬 ) 크로마토그래프용크로모솔브 W( 알킬수은시험용 ) 산으로씻은다음시란처리한크로모솔브 W[ Chromosorb W ( 177~250 μ ) ] ( 비고 ) 시란처리 : 톨루엔에디메틸클로르시란을녹이고크로모솔브 W를약 1 시간수욕상에서침윤시켜건조한다. 크로마토그래프컬럼용크로모솔브 W( PCB 시험용 ) 산으로씻은다음시란처리한크로모솔브 W[ Chromosorb W ( 149~177 μ ) ] 클로로포름 [ CHCl 3 ] 키시레노올오렌지 [ C 31 H 30 N 3 Na 2 O 13 S ] 키시레노올오렌지 에틸알코올용액 ( 0.1 W/V % ) 키시레노올오렌지 0.1 g을에틸알코올 ( 95.0 V/V % ) 에녹여 100 ml로한다. 탄산나트륨 [ Na 2 CO 3 ] 무수탄산나트륨 [ Na 2 CO 3 ] 무수탄산나트륨 ( 표준시약 ) 무수탄산나트륨 ( ph 측정용 ) 탄산수소나트륨 [ NaHCO 3 ] 탄산수소나트륨 ( ph 측정용 ) 탈염수 ( 정제수 : 이온교환수지로탈염정제한물 ) 테트라수산칼륨 [ KH 3 ( C 2 O 4 ) 2 ]( ph 측정용 ) 톨루엔 [ C 6 H 5 CH 3 ] 트리옥틸아민 [ C 21 H 45 N 3 ]

319 트리프토스 [ Tryptose ] 티몰블루우 [ C 27 H 30 O 5 S ] 변색범위 ph : 산성쪽 ( 적색 ) 1.2~2.8( 황색 ), 알카리쪽 ( 황색 ) 8.0~9.6( 청색 ) 티몰블루우에틸알코올용액 ( 0.1 W/V % ) 티몰블루우 0.1 g을에틸알코올 ( 95.0 W/V % ) 에녹여 100 ml로한다. 티사브용액 ( TISAB Soln. ) 염화나트륨 50 g과구연산이암모늄 1 g을물 500 ml에녹이고초산 50 ml를넣은다음 20 % 수산화나트륨용액으로 ph 5.2로조절하고물을넣어 1,000 ml로한다. 티오황산나트륨 ( 5 수화물 )[ Na 2 S 2 O 3 5H 2 O ] 티오황산나트륨용액 ( 50 W/V % ) 티오황산나트륨 ( 5 수화물 ) 50 g을물에녹여 100 ml로한다. 파라티온 [ C 10 H 14 NO 5 PS ]( 98.0 % 이상 ) o-페난트로린 [ C 12 H 8 N 2 H 2 O ] o-페난트로린염산염 [ C 12 H 8 N 2 -HCl ] o-페난트로린 2염산염 [ C 12 H 8 N 2-2HCl ] o-페난트로린용액 ( 0.1 W/V % ) o-페난트로린 2 염산염 0.12 g을물에녹여 100 ml로한다. 또는 o-페난트로린염산염 0.1 g을에틸알코올 ( 95 % ) 20 ml에녹이고물을넣어 100 ml로한다. o-페난트로린제일철용액 o-페난트로린 1.48 g, 황산제일철 ( 7 수화물 ) 0.7 g을물에녹여 100 ml로한다. 페놀 [ C 6 H 5 OH ] 페놀레드 [ C 19 H 14 O 5 S ] 변색범위 ph : ( 황색 ) 6.8~8.4 ( 적색 ) 페놀레드에틸알코올용액 ( 0.1 W/V % ) 페놀레드 0.1 g을에틸알코올 ( 95 V/V % ) 20 ml에녹이고물을넣어 100 ml로한다. 페놀프탈레인 [ C 20 H 14 O 4 ] 변색범위 ph : ( 무색 ) 8.0~10.0( 홍색 ) 페놀프탈레인에틸알코올용액 ( 0.5 W/V % ) 페놀프탈레인 0.5 g을에틸알코올 ( 95 V/V % ) 50 ml에녹이고물을넣어 100 ml로한다. 페놀프탈레인에틸알코올용액 ( 0.2 W/V % ) 페놀프탈레인 0.2 g을에틸알코올 ( 95.0 V/V % ) 50 ml에녹이고물을넣어 100 ml로한다. 페놀프탈레인에틸알코올용액 ( 0.1 W/V % ) 페놀프탈레인 0.1 g을에틸알코올 ( 95 V/V % ) 50 ml에녹이고물을넣어 100 ml로한다. 1-페닐-3-메틸-5-피라졸론

320 비스 ( 1-페닐-3-메틸-5-피라졸론 ) 페리시안화칼륨 [ K 3 Fe( CN ) 6 ] 페리시안화칼륨용액페리시안화칼륨약 9.8 g을위하여소량의물을사용하면표면을씻고물에녹여 100 ml로한다. 필요하면여과하고 24 시간내에사용하여야한다. 펩톤 포도당 [ C 6 H 12 O 6 ] 포르말린 ( 폼알데히드 [ HCHO ] 35.0~38.0 % 를함유한다 ) 포르말린용액포르말린에탄산수소나트륨을넣어 ph를 7로조정한다. 또는폼알데히드함량 8 % 중성완충포르말린용액 ( 조직고정용 ) 을사용한다. 포수클로랄 [ CCl 3 CHOH 2 O ] 포수클로랄용액 ( 10 W/V % ) 포수클로랄 10 g을물에녹여 100 ml로한다. 염기성푹신 [ C 20 H 19 N 3 ] 플로리실 크로마토그래프용플로리실플로리실 100 g에크로마토그래프용노말헥산 50 ml를흔들어섞고여과한다. 잔사에크로마토그래프용노말헥산 25 ml를섞고여과하여풍건한다. 이액 10 μl를미량주사기를사용하여가스크로마토그래프에주입하여 PCB의예기유지시간부근에서봉우리가나타나지않는것을사용한다. 프탈산수소칼륨 [ C 6 H 4 ( COOK )( CCOH ) ] 프탈산수소칼륨 ( ph 측정용 ) 프탈산수소칼륨 ( 0.2 M ) 프탈산수소칼륨 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 피로리딘디티오카르바민산암모늄 [ APDC : N( CSSNH 4 )( CH 2 ) 4 ( 원자흡광분석용 ) 피로리딘디티오카르바민산암모늄용액 ( 2 W/V % ) 피로리딘디티오카르바민산암모늄 2 g을물에녹여 100 ml로한다음메틸이소부틸케톤 50 ml씩으로 2 회씻어준다. 피리딘 [C 6 H 5 N ] 피리딘 피라졸론혼합액 1-페닐-3-메틸-5-피라졸론 0.25 g을 75 의열수 100 ml에녹이고실온으로냉각하여비스 ( 1-페닐-3-메틸-5-피라졸론 ) 0.02 g을피리딘 20 ml에녹인액과섞는다. 사용할때조제한다

321 피 시 비 ( P C B )( 폴리클로리네이티드비페닐 ) P.C.B( 2 염소 )[ C 12 H 8 Cl 2 ]( 표준시약 ) 일반상품명 : KC-200 P.C.B( 3 염소 )[ C 12 H 7 Cl 3 ]( 표준시약 ) 일반상품명 : KC-300 P.C.B( 4 염소 )[ C 12 H 6 Cl 4 ]( 표준시약 ) 일반상품명 : KC-400 P.C.B( 5 염소 )[ C 12 H 5 Cl 5 ]( 표준시약 ) 일반상품명 : KC-500 P.C.B( 6 염소 )[ C 12 H 4 Cl 6 ]( 표준시약 ) 일반상품명 : KC-600 한천 정제한천 ( 분말 ) 노말헥산 [ C 6 H 14 ] 크로마토그래프용노말헥산노말헥산 300 ml를취하여농축하여약 3 ml로한다. 이액 10 μl를미량주사기를사용하여가스크로마토그래프에주입하였을때노말헥산의예기유지 ( 維持 ) 시간에서봉우리가나타나고이외의봉우리가나타나지않는것을사용한다. 헥산전개액유기인정제용컬럼용출액 ( 규산컬럼용 ) 과같다. 노말헥산에틸알코올용액크로마토그래프용노말헥산 50 ml와에틸알코올 ( 95.0 V/V % ) 50 ml를흔들어섞는다. 헬륨 ( 가스 )[ He ]( 99.9 % 이상 ) 활성알루미나 [ 크로마토그래프용 ( 50 μ ) ] 크로마토컬럼용활성알루미나활성알루미나 100 g에물을넣어혼합하고메틸레드에틸알코올용액 ( 0.1 W/V % ) 2~3 방울을넣고염산 ( 1+20 ) 을한방울씩떨어뜨려중화한다음여과한다. 물로씻어주고 180~220 에서약 2 시간건조하여활성화시키고건조용기 ( 실리카겔 ) 안에서방냉하여보관한다. 활성탄 [ C ] 황산 [ H 2 SO 4 ]( 95.0 % 이상 ) 황산용액 ( 2 N ) 황산 60 ml를물 1 L중에섞으면서천천히넣어식힌다. 황산 ( 수은시험용 ) 필요에따라황산을감압증류 ( 5 mmhg ) 하여전체의 1/2에상당하는증류 ( 中留 ) 를취하여같은양의수은을함유하지않은물에주의하여섞는다. 황산 ( 1+1 )( 수은시험용 ) 황산 ( 수은시험용 ) 과수은을함유하지않은물을사용하여조제한다. 황산 ( 1+20 )( 수은시험용 )

322 황산 ( 수은시험용 ) 과수은을함유하지않은물을사용하여조제한다. 황산 ( )( 수은시험용 ) 황산 ( 수은시험용 ) 과수은을함유하지않은물을사용하여조제한다. 황산구리 ( 5 수화물 )[ CuSO 4 5H 2 O ] 황산구리 ( 5 수화물 )[ 표준시약 ] 황산구리용액황산구리 ( 5 수화물 ) 100 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 황산구리용액 ( 2 % ) 황산구리 ( 5 수화물 ) 2 g을물에녹여 100 ml로한다. 황산구리술퍼민산용액술퍼민산 32 g을물 475 ml에녹인다. 따로황산구리 ( 5 수화물 ) 50 g을물 500 ml에녹인다. 양액을섞고초산 25 ml를넣는다. 무수황산나트륨 [ Na 2 SO 4 ] 크로마토그래프용무수황산나트륨무수황산나트륨 100 g에크로마토그래프용노말헥산 50 ml를흔들어섞고여과한다. 잔사에크로마토그래프용노말헥산 25 ml를섞고여과하여풍건한다. 이액 10 μl를미량주사기를사용하여가스크로마토그래프에주입하여 PCB의예기유지 ( 維持 ) 시간부근에서봉우리가나타나지않은것을사용한다. 황산니켈암모늄 ( 6 수화물 )[ Ni( NH 4 ) 2 ( SO 4 ) 2 ] 황산니켈암모늄 ( 6 수화물 )[ 표준시약 ] 황산라우릴나트륨 ( Sodium Lauryl Sulfate )[ CH 3 ( CH 2 ) 11 OSO 3 Na ] 황산마그네슘 ( 7 수화물 )[ MgSO 4 7H 2 O ] 황산마그네슘용액황산마그네슘 ( 7 수화물 ) 22.5 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 황산마그네슘용액 ( 대장균군시험용 ) 황산마그네슘 ( 7 수화물 ) 50 g을증류수에녹여 1,000 ml로한다. 황산망간 ( 4 수화물 )[ MnSO 4 4H 2 O ] 황산망간용액황산망간 ( 4 수화물 ) 480 g을물에녹이고물불용분을여과하여버리고물을넣어 1,000 ml로한다. 황산제이수은 [ HgSO 4 ] 황산아연 [ ZnSO 4 ] 황산알루미늄칼륨 ( 24 수화물 )[ K 2 Al 2 ( SO 4 ) 4 24H 2 O ]

323 황산암모늄 [ ( NH 4 ) 2 SO 2 ] 황산용액 ( 1 N ) 황산 30 ml를물 1,000 ml중에저어섞으면서천천히넣어식힌다음사용한다. 황산용액 ( 총인시험법 ) 황산 300 ml를물 600 ml와식히면서물을넣어 1,000 ml로한다. 황산은용액황산은 11 g을황산 1,000 ml에녹인다. 황산제이철암모늄 ( 12수산화물 )[ FeNH 4 ( SO 4 ) 2 12H 2 O ] 황산제이철암모늄용액황산제이철암모늄 ( 12수화물 ) 5 g을황산 ( 1+1 ) 1 ml에녹이고물을넣어 100 ml로한다. 황산제이철용액 ( Fe +3 2 mg / ml ) 황산제이철암모늄 ( 12수화물 ) 1.8 g을질산 ( 1+6 ) 10 ml와물에녹여 100 ml로한다. 황산제이철 ( 7 수화물 )[ FeSO 4 7H 2 O ] 황산제일철암모늄 ( 6 수화물 )[ FeSO 4 ( NH 4 ) 2 SO 4 6H 2 O ] 황산제일철암모늄 ( 6 수화물 )[ 표준시약 ] 황산제일철암모늄용액황산제일철암모늄 ( 6 수화물 ) 3.5 g을황산 0.5 ml와물에녹여 100 ml로한다. 황산칼륨 [ K 2 SO 4 ] 황산칼슘 [ CaSO 4 ] BOD용희석수물의온도를 20 로조절하여솜으로막은유리병에넣고용존산소가포화되도록충분히기간을두거나물이완전히채워지지않은병에넣어흔들어서포화시키거나압축공기를넣어준다. 필요한양의이액을취하여유리병에넣고 1,000 ml에대하여인산염완충액 ( ph 7.2 ), 황산마그네슘용액, 염화칼슘용액및염화제이철용액 ( BOD 용 ) 각 1 ml씩을넣는다. 이액의 ph는 7.2이다. ph가 7.2가아닐때에는염산용액 ( 1 N ) 또는수산화나트륨용액 ( 1 N ) 을넣어조절하여야한다. 이액은 20±1 에서 5 일간저장하였을때의용존산소의감소는 0.2 mg /l이하이어야한다. BOD용식종희석수시료중에유기물질을산화시킬수있는미생물의양이충분하지못할때미생물을시료에넣어주는것을말한다. BOD 용희석수 1,000 ml에대하여하수, 하천수또는토양추출액을실온에서 24~36 시간가라앉힌다음상등액을하수의경우 5~10 ml, 하천수의경우 10~50 ml, 토양추출액의경우 20~30 ml를넣는다. 사용할때조제한다

324 제 2 항완충액 염화암모늄 암모니아완충액 ( ph 10.0 ) 염화암모늄 67.5 g을암모니아수 570 ml에녹이고물을넣어 1,000 ml로한다. 유리마개병에넣어냉소에보관한다. 염화칼륨 수산화나트륨완충액 ( ph 9.0 ) 4 % 수산화나트륨용액 213 ml에물을넣어약 600 ml로하여염화칼륨 37.8 g 및붕산 31 g을녹여물을넣어 1,000 ml로한다. 유리마개병에넣어보관한다. 인산염완충액 ( ph 6.8 ) 인산이수소칼륨 34.0 g과무수인산일수소나트륨 35.6 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 인산염완충액 ( ph 7.2 ) 인산일수소칼륨 g, 인산이수소칼륨 8.5 g, 인산일수소나트륨 ( 12 수화물 ) 44.6 g, 염화암모늄 1.7 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 이완충액의 ph는 7.2이어야하며, 미생물이자라면사용할수없다. 보존인산염완충액 ( ph 7.2 ) 인산이수소칼륨 34.0 g을증류수에녹여수산화나트륨용액 ( 0.1 N ) 으로 ph를 7.2로조절하여사용한다. 인산 탄산염완충액 ( 수은시험용 ) 인산일수소나트륨 ( 12 수화물 ) 150 g과무수탄산칼륨 38 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 이액을분액깔때기에옮기고구연산이암모늄용액 ( 10 W/V % ) 과같은방법으로디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 으로씻은다음사용한다. 초산염완충용액 ( ph 4.0 ) 초산나트륨 ( 3 수화물 ) 14 g을물에녹여 100 ml로하고따로초산 23 ml에물을넣어 100 ml로한다. 양액을동량섞어분액깔때기에옮기고구연산암모늄용액 ( 10 W/V % ) 과같은방법으로디티존사염화탄소용액 ( W/V % ) 으로씻은다음사용한다. 프탈산수소칼륨완충액 ( ph 3.4 ) 프탈산수소칼륨용액 ( 0.2 M ) 250 ml에염산용액 ( 0.2 M ) 50 ml를섞고물을넣어 1,000 ml로한다

325 제 3 항배 지 데속시콜레이트한천배지펩톤 10.0g, 유당 10.0g, 데속시콜린산나트륨 1g, 염화나트륨 5.0g, 인산일수소칼륨 2.0g, 구연산제2철암모늄 1.0g, 구연산나트륨 1.0g, 정제한천 ( 분말 ) 15.0g, 뉴트랄레드 0.03g을증류수 1,000mL에넣고가열하면서녹여 ph 7.3이되도록하여완전히끓여서사용한다. 준비된배지는즉시사용하여야하며고압증기멸균하여서는안된다. 라우릴트립토스액체배지트립토스 20.0g, 유당 5.0g, 인산일수소칼륨 2.75g, 인산이수소칼륨 2.75g, 염화나트륨 5.0g, 황산라우릴나트륨 0.1g을증류수 1,000mL에넣고가열하면서녹여 ph 6.8이되도록하여다람관이들어있는시험관에 10mL씩분주하고고압증기멸균하여사용한다. 그러나시료 10mL를식종하는시험관은배지의성분을 2배로농축하여사용하여야한다. 보통한천배지소고기추출액 3.0g, 펩톤 5.0g, 포도당 1.0g, 정제한천 ( 분말 ) 15.0g을증류수 1,000mL에넣고가열하면서녹여 ph 6.9±0.1이되도록한후고압증기멸균하여사용한다. BGLB 배지 (Brilliant Green Lactose Bile 배지 ) 펩톤 10.0g, 유당 10.0g, 건조우담분말 20.0g, 브릴리언트그린 g을증류수 1,000mL에넣고가열하면서녹여 ph 7.2±0.1 이되도록한후고압증기멸균하여사용한다. 엔도배지펩톤 10.0g, 유당 10.0g, 무수인산일수소칼륨 3.5g, 한천 15.0g, 무수황산나트륨 2.5g, 염기성푹신 0.5g을증류수 1,000mL에넣고가열하여 ph 7.4±0.1이되도록하여고압증기멸균하여사용한다. 완충희석액증류수 1,000mL에보존인산완충액 (ph 7.2) 1.25mL와황산마그네슘용액 ( 대장균군용 ) 5mL를넣어고압증기멸균한후 99±2.0mL 또는 9±0.2mL가되도록시험관에분주하여시험조작한다. 유당액체배지소고기추출액 3.0g, 펩톤 5.0g, 유당 5.0g 을증류수 1,000mL 에가열하여녹인후 ph 6.9±0.1 이되도록한다음다람관이들어있는시험관에 10mL 씩분주, 고압증기멸균하여사용한다. 그러나, 시료 10mL 를식종하는시험관은배지의성분을 2배로농축하여사용하여야한다

326 EMB 한천배지 (Eosin Methylene Blue Agar) 펩톤 10.0g, 유당 10.0g, 무수인산일수소칼륨 2.0g, 정제한천분말 18.0g, 에오신 Y 4.0g, 메틸렌블루우 0.065g 을증류수 1,000mL 에넣고가열하면서녹인후 ph 7.1±0.1 이되도록한다음고압증기멸균하여사용한다. 펩톤희석액증류수에 0.1% 되도록펩톤을넣고가열하여녹이고 ph 6.8이되도록하여 15분동안고압증기멸균한후 99±2.0mL 또는 9±0.2mL가되도록시험관에분주하여시험하며, 세균의증식또는사멸을방지하기위하여시료를희석한후상온에서 30분이내로실험조작을완료하여야한다. m-endo 배지트립토스나폴리펩톤 10.0g, 티오펩톤이나티오톤 5.0g, 카지톤이나트립티케이스 5.0g, 효모추출액 1.5g, 유당 12.5g, 염화나트륨 5.0g, 인산일수소칼륨 4.375g, 인산이수소칼륨 1.375g, 무수황산나트륨 2.1g, 라우릴황산나트륨 0.05g, 데속시콜린산나트륨 0.1g, 염기성푹신 1.05g, 한천 15.0g을증류수 1,000mL에넣고 95% 에탄올 20mL를첨가한후가열하면서녹여 ph 7~7.3으로맞춘다음완전히끓여서 50 까지식힌후사용한다. 준비된배지는즉시사용하여야하며고압증기멸균하여서는안된다. 배지는 2~10 의어두운곳에 96시간동안보관할수있으며, 한천이포함되지않은, 용액으로된배지는패드를사용할수있다. m-endo Agar LES 배지트립토스 7.5g, 티오펩톤이나티오톤 3.7g, 카지톤이나트립티케이스 3.7g, 효모추출액 1.2g, 염화나트륨 3.7g, 인산일수소칼륨 3.3g, 인산이수소칼륨 1.0g, 황산나트륨 1.6g, 라우릴황산나트륨 0.05g, 데속시콜린산나트륨 0.1g, 염기성푹신 1.05g, 한천 15.0g을증류수 1,000mL에넣고 95% 에탄올 20mL를첨가하여가열하면서완전히끓여서녹인후 45~50 까지식힌다음사용한다. 5~7mL 를페트리접시에넣어굳힌다. 배지는 2~10 의냉암소에서 2주간보관하면서사용한다. 이씨 (EC) 배지트립토스나트립티케이스 20.0g, 유당 5.0g, 담즙염 1.5g, 무수인산일수소칼륨 4.0g, 무수인산이수소칼륨 1.5g, 염화나트륨 5.0g, 증류수 1,000mL에넣고녹여고압증기멸균하여사용한다. m-fc배지트립토스나바이오세이트 10.0g, 프로테오스펩톤이나폴리펩톤 5.0g, 효모추출액 3.0g, 염화나트륨 5.0g, 유당 12.5g, 담즙염 1.5g, 아닐린블루 0.1g를 0.2N 수산화나트륨에용해된 1% 로졸린산 (rosolic acid) 용액 10mL이첨가된 1,000mL 증류수에넣어끓을때까지가열한후 50 까지식힌다

327 제 4 항표준액 구리표준원액 ( 0.1 mg Cu/ ml ) 금속구리 ( 99.9 % 이상 ) g에질산 ( 1+2 ) 20 ml를넣어녹이고가열하여질소산화물을추출한다음방냉하고물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 또한황산구리 ( 5 수화물 ) ( 표준시약 ) g을질산 ( 1+1 ) 20 ml에녹이고물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 구리표준액 ( 0.05, 0.01, mg Cu/ ml ) 구리표준원액 500, 100, 10 ml씩을정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 납표준원액 ( 0.1 mg pb/ ml ) 납 ( 99.9 % 이상 ) g을질산 ( 1+3 ) 40 ml에녹이고가열하여질소산화물을추출한다음방냉하고물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 또는질산납 ( 표준시약 ) 0.16 g을질산 ( 1+1 ) 20 ml와소량의물에녹이고물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 납표준액 ( 0.05, 0.01, mg Pb/ ml ) 납표준원액 500, 100, 10 ml씩을정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 니켈표준원액 ( 0.1 mg Ni/ ml ) 니켈 ( 99.9 % 이상 ) g을질산 ( 1+1 ) 20 ml에녹이고가열하여질소산화물을축출한다음방냉하고물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 또는황산니켈암모늄 ( 6 수화물 ) ( 표준시약 ) g을물과질산 10 ml를넣어녹이고물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 니켈표준액 ( 0.05, 0.01, mg Ni/ ml ) 니켈표준원액 500, 100, 10 ml씩을정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 다이아지논표준액 ( 5 μg C 11 H 21 N 2 O 3 PS/ ml ) 다이아지논 ( 98.0 % 이상 ) 적당량을정밀히취하여크로마토그래프용노말헥산으로정확히 5 μg / ml로희석한다. 망간표준원액 ( 0.1 mg Mn/ ml ) 과망간산칼륨 ( 표준시약 ) g을물 150 ml와황산 ( 1+1 ) 10 ml에녹이고아황산수소나트륨용액 ( 10 W/V % ) 을적가하여탈색시킨다음과잉의아황산을끓여날려보낸다. 냉각한다음물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 또한금속망간 ( 99.9 % 이상 ) 0.1 g에황산 ( 1+3 ) 20 ml를넣고가열하여녹이고냉각한다음물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 망간표준액 ( 0.05, 0.02, 0.01 mg Mn/ ml ) 망간표준원액 500, 200, 100 ml씩을정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다

328 불소이온표준원액 ( 1.0 mg F / ml ) 불화나트륨 ( 표준시약 ) 을백금접시에넣어 500~550 에서 40~50 분간가열하고황산건조용기안에서방냉한다음 100 % NaF로서 2.21 g을정확하게달아물에녹여정확히 1,000 ml로하고폴리에틸렌병에보관한다. 불소이온표준액 ( mg F / ml ) 불소표준원액 10 ml를정확히취하여물을넣어정확히 100 ml로한다음여액 10 ml를정확히취하여물을넣어정확히 500 ml로한다. 비소표준원액 ( 0.1 mg As/ ml ) 삼산화비소 ( 표준시약 ) g에 4 % 수산화나트륨용액 2 ml를넣어녹이고물을넣어약 500 ml로한다음황산 ( 1+10 ) 을넣어약산성으로하고물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 비소표준액 ( mg As/ ml ) 비소표준원액 10 ml를정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 비소표준액 ( mg As/ ml ) 비소표준액 ( mg As/ ml ) 10 ml를정확히취하여염산 ( 1+1 ) 2 ml와물을넣어정확히 100 ml로한다. 수은표준원액 ( 0.5 mg Hg/ ml ) 염화제이수은 ( 표준시약 ) g을물에녹이고질산 ( 1+1 ) 10 ml와물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 수은표준액 ( 0.01, mg Hg/ ml ) 수은표준원액 10 ml를정확히취하여물을넣어정확히 500 ml로한다음이액 100, 10 ml씩을정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 사용할때조제한다. 색도표준액 ( 500 unit ) 염화백금산칼륨 ( 표준시약 ) g( 백금으로 0.5 g 함유 ) 과염화코발트 ( 6 수화물, 표준시약 ) 1.00 g( 코발트로서 0.25 g 함유 ) 을염산 100 ml와물에녹여정확히 1,000 ml한다. 셀레늄표준원액 ( 약 1 mg Se/ ml ) 이산화셀레늄 ( SeO 2 )1.45 g을 1,000 ml용량플라스크에넣어녹이고 1,000 ml로표선을맞춘다.( 이용액 1 ml는셀레늄 1 mg을함유한다. ) 셀레늄표준원액 ( 약 mg Se/ ml ) 셀레늄표준원액 ( 약 1 mg Se/ ml ) 을물로 100 배희석한용액 10 ml에물을넣어 1000ml로하며, 사용할때만든다.( 이용액 1 ml는셀레늄 mg을함유한다. )

329 시안이온표준원액 ( 약 1 mg CN / ml ) 시안화칼륨 ( 표준시약 ) 2.51 g 을물에녹여 1,000 ml로한다. 이액은사용시조제 하며정확한농도는다음과같이표정하여구한다. 표정 : 시안이온표준원액 100 ml를정확히취하여 2 W/V % 수산화나트륨용액 1 ml와 지시약으로 P- 디메틸아미노벤지리덴로다닌아세톤용액 ( 0.02 W/V % ) 0.5 ml를넣고 0.1N- 질산은액으로액의황색이적색으로되는점을종말점으로하여적정한다. C : 시안의함량 ( mg / ml ) a : 0.1 N- 질산은액소비량 ( ml ) C = a f f : 0.1 N- 질산은액의농도계수 ( factor ) 시안이온표준액 ( mg CN / ml ) 시안이온으로서 10 mg에해당하는양의시안표준원액의ml수를정확히취하여 2 % 수산화나트륨용액 100 ml와물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 이액 10 ml를정확히 취하여물을넣어정확히 100 ml로한다. 사용할때조제한다. 아연표준원액 ( 0.1 mg Zn/ ml ) 금속아연 ( 99.9 % 이상 ) g 을질산 ( 1+1 ) 20 ml에녹이고가열하여질소산화 물을추출한다음방냉하고물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 아연표준액 ( 0.01, mg Zn/ ml ) 아연표준원액 100, 20 ml씩을정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 아질산성질소표준원액 ( 약 0.25 mg NO 2 -N/ ml ) 건조용기에서 24 시간건조시킨아질산나트륨 ( 표준시약 ) g 을물에녹이고 클로로포름 1 ml와물을넣어 1,000 ml로한다. 이액은사용시다음과같이표정하여 정확한농도를구한다. 표정 250 ml삼각플라스크에 0.05N 과망간산칼륨용액 50 ml를정확히넣고 황산 ( 1+1 ) 10 ml를넣은다음아질산성질소표준원액 50 ml를피펫에취하여피펫의 끝이과망간산칼륨용액속에잠기게하여넣는다. 마개를닫고흔들어섞은다음수 욕상또는열판상에서 70~80 로가온한다. 여기에 0.05N 수산나트륨용액 20 ml를 정확히넣고 0.05N 과망간산칼륨용액으로엷은홍색이나타날때까지적정한다. A = (a f-b) A : 아질산성질소농도 ( mg NO 2 -N/ ml ) a : 0.05 N 과망간산칼륨용액의총량 ( ml ) b : 0.05N 수산나트륨용액의총량 ( ml ) f : 0.05N 과망간산칼륨용액의농도계수

330 아질산성질소표준액 ( mg NO 2 -N/ ml ) 아질산성질소표준원액 ( 12.5/A ) ml를정확히취하여물을넣어정확히 250 ml로한다음이액 10 ml를정확히취하여물을넣어 500 ml로한다. 암모니아성질소표준원액 ( 0.1 mg NH 3 -N/ ml ) 염화암모늄 ( 표준시약 ) g을물에녹여정확히 1,000 ml로한다. 암모니아성질소표준액 ( mg NH 3 -N/ ml ) 암모니아성질소표준원액 25 ml를정확히취하여물을넣어정확히 500 ml로한다. 염화메틸수은표준원액 ( 10 mg Hg/ ml ) 염화메틸수은 ( 표준시약 ) g을크로마토그래프용벤젠에녹여 10 ml로한다. 염화메틸수은표준액 ( mg Hg/ ml ) 염화메틸수은표준원액 1.0 ml를정확히취하여크로마토그래프용벤젠을넣어정확히 100 ml로한다음이액 1 ml를정확히취하여크로마토그래프용벤젠을넣어정확히 100 ml로한다. 염화에틸수은표준원액 ( 10 mg Hg/ ml ) 염화에틸수은 ( 표준시약 ) g을크로마토그래프용벤젠에녹여 10 ml로한다. 염화에틸수은표준액 ( mg Hg/ ml ) 염화에틸수은표준원액 1.0 ml를정확히취하여크로마토그래프용벤젠을넣어정확히 100 ml로한다음이액 1 ml를정확히취하여크로마토그래프용벤젠을넣어정확히 100 ml로한다. 음이온계면활성제표준원액 ( 0.5 mg NaO 3 SO( CH 2 ) 11 CH 3 / ml ) 라우릴황산나트륨을순도 100 % 로환산한 g을물에녹여 1,000 ml로한다. 음이온계면활성제표준액 ( 0.01 mg NaO 3 SO(CH 2 ) 11 CH 3 / ml ) 음이온계면활성제표준원액 10 ml를정확히취하여물을넣어정확히 500 ml로한다. 이피엔표준액 ( 5 μg C 14 H 14 O 4 NPS/ ml ) 이피엔 ( 98.0 % 이상 ) 적당량을정밀히취하여크로마토그래프용노말헥산으로정확히 5 μg / ml로희석한다. 인산염인표준원액 ( 0.1 mg PO 4 -P/ ml ) 미리 105~110 에서건조한인산이수소칼륨 ( 표준시약 ) g을정밀히달아물에녹여정확히 1,000 ml로한다. 인산염인표준원액 ( mg PO 4 -P/ ml ) 인산염인표준원액 25 ml를정확히취하여물을넣어정확히 500 ml로한다. 질산성질소표준원액 ( 0.1 mg NO 3 -N/ ml ) 미리 105~110 에서약 4 시간건조한질산칼륨 ( 표준시약 ) g을정밀히달아물에녹여정확히 1,000 ml로한다

331 질산성질소표준액 ( 0.01, 0.02 mg NO 3 -N/ ml ) 질산성질소표준원액 10, 20 ml씩을정확히취하여물을넣어정확히 100 ml로한다. 질산성질소표준액 ( 0.001, mg NO 3 -N/ ml ) 질산성질소표준액 ( 0.01 mg NO 3 - N/ ml ) 10, 20 ml씩을정확히취하여물을넣어정확히 100 ml로한다. 철표준원액 ( 1.0 mg Fe/ ml ) 황산제일철암모늄 ( 6 수화물 )( 표준시약 ) 7.02 g을염산 ( 1+1 ) 20 ml와소량의물에녹이고물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 또는철 ( 99.5 % ) 1.00 g을염산 ( 1+1 ) 20 ml에가온하여녹이고방냉후물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 철표준액 ( 0.01 mg Fe/ ml ) 철표준원액 10 ml를정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 카드뮴표준원액 ( 0.1 mg Cd/ ml ) 금속카드뮴 ( 99.9 % 이상 ) g을질산 ( 1+1 ) 20 ml에녹이고가열하여질소산화물을추출한다음물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 카드뮴표준액 ( 0.01, mg Cd/ ml ) 카드뮴표준원액 100, 10 ml씩을정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 크롬표준원액 ( 0.1 mg Cr/ ml ) 중크롬산칼륨 ( 표준시약 ) g을물에녹여정확히 1,000 ml로한다. 크롬표준액 ( 0.01, mg Cr/ ml ) 크롬표준원액 100, 20 ml씩을정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 파라티온표준액 ( 5 μg C 10 H 14 NO 5 PS/ ml ) 파라티온 ( 98.0 % 이상 ) 적당량을정밀히취하여크로마토그래프용노말헥산으로정확히 5 μg / ml로희석한다. 페놀표준원액 ( 약 1 mg C 6 H 5 OH/ ml ) 페놀 1 g을물에녹여정확히 1,000 ml로하고냉암소에보관한다. 사용시다음과같이표정하여정확한농도를구한다. 표정 : 500 ml마개있는삼각플라스크에물약 100 ml와페놀표준원액 50 ml를정확히넣어브롬산칼륨-브롬화칼륨액 ( 0.1N ) 50 ml ( 반응량약 40 ml ) 를정확히넣고염산 5 ml를넣는다. ( 트리브로모페놀의백색침전이생긴다. ) 마개를하여조용히흔들어섞어서갈색의브롬을유리시키고 10 분간방치한다음, 요오드화칼륨 1 g을넣어유리한요오드를 0.1N-티오황산나트륨액으로적정한다. 액의황색이나타났을때지시약으로전분용액 3 ml를넣어무색이될때까지적정한다. 따로물 100 ml를취하여브롬산칼륨-브롬화칼륨액 ( 0.1N ) 25 ml를정확히넣고같은방법으로시험하여보정한다

332 P = ( 2b-a ) f 1/ P : 페놀의농도 ( mg / ml ) a : 원액의적정에소비된 0.1N-티오황산나트륨액 ( ml ) b : 바탕시험적정에소비된 0.1N-티오황산나트륨액 ( ml ) f : 0.1N - 티오황산나트륨액의농도계수 페놀표준액 ( 0.01 mg C 6 H 5 OH/ ml ) 페놀 10 mg에대응하는페놀표준원액의ml수를정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 사용할때조제한다. 페놀표준액 ( mg C 6 H 5 OH/ ml ) 페놀표준액 ( 0.01 mg C 6 H 5 OH/ ml ) 10 ml를취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 사용할때조제한다. 펜토에이트표준액 ( 5 μg C 12 H 17 O 4 PS 2 / ml ) 펜토에이트 ( 98.0 % 이상 ) 적당량을정밀히취하여크로마토그래프용노말헥산으로정확히 5 μg / ml로희석한다. PCB( 2 염소 ) 표준액 ( mg C 12 H 8 Cl 2 / ml ) PCB( 2 염소 ) ( 표준시약 ) 0.1 g을정확하게달아크로마토그래프용노말헥산에녹여정확히 1,000 ml로한다. 이액 10 ml를정확히취하여크로마토그래프용노말헥산을넣어정확히 1,000 ml로한다. PCB( 3 염소 ) 표준액 ( mg C 12 H 7 Cl 3 / ml ) PCB( 3 염소 ) ( 표준시약 ) 0.1 g을정밀히취하여크로마토그래프용노말헥산에녹여정확히 1,000 ml로한다. 이액 10 ml를정확히취하여크로마토그래프용노말헥산을넣어정확히 1,000 ml로한다. PCB( 4 염소 ) 표준액 ( mg C 12 H 6 Cl 4 / ml ) PCB( 4 염소 ) ( 표준시약 ) 0.1 g을정밀히취하여크로마토그래프용노말헥산에녹여정확히 1,000 ml로한다. 이액 10 ml를정확히취하여크로마토그래프용노말헥산을넣어정확히 1,000 ml로한다. PCB( 5 염소 ) 표준액 ( mg C 12 H 5 Cl 5 / ml ) PCB( 5 염소 ) ( 표준시약 ) 0.1 g을정확하게달아크로마토그래프용노말헥산에녹여정확히 1,000 ml로한다. 이액 10 ml를정확히취하여크로마토그래프용노말헥산을넣어정확히 1,000 ml로한다. PCB( 6 염소 ) 표준액 ( mg C 12 H 4 Cl 6 / ml ) PCB( 6 염소 ) ( 표준시약 ) 0.1 g을정확하게달아크로마토그래프용노말헥산에녹여정확히 1,000 ml로한다. 이액 10 ml를정확히취하여크로마토그래프용노말헥산을넣어정확히 1,000 ml로한다

333 PCB 혼합표준액시험담당자의경험에의한판단에따라다음예와같이 PCB 표준액을일정한용량비로혼합하여사용한다. 예 KC KC-400( 1 : 1 ) KC KC-500( 1 : 1 ) KC KC-600( 1 : 1 ) KC KC-500( 1 : 1 ) KC KC-600( 1 : 1 ) KC KC-600( 1 : 1 ) KC KC KC-500( 1 : 1 : 1 ) KC KC KC-500+ KC-600( 1 : 1 : 1 : 1 ) KC KC KC-500+ KC-600( 3 : 3 : 2 : 0.5 ) 트리클로로에틸렌표준원액 ( 약 14 mg C 2 HCl 3 / ml ) 50 ml부피플라스크에가스크로마토그래프용헥산약 40 ml를넣고밀봉하여그무게를정확히측정한다음여기에트리클로로에틸렌약 0.5 ml를신속히넣고즉시밀봉하여그무게를측정하고가스크로마토그래프용헥산을넣어표선을채운다. 이표준원액의농도는전후의무게차로부터구한다. 트리클로로에틸렌표준액 ( 0.15 mg C 2 HCl 3 / ml ) 트리클로로에틸렌으로서 15 mg에상당하는트리클로로에틸렌표준원액의ml수를정확히취하여미리가스크로마토그래프용헥산약 80 ml를넣어둔 100 ml용량플라스크에넣고가스크로마토그래프용헥산을넣어표선을채운다 테트라클로로에틸렌표준원액 ( 약 42 mg C 2 Cl 4 / ml ) 50 ml용량플라스크에가스크로마토그래프용헥산약 40 ml를넣고밀봉하여그무게를정확히측정한다음여기에테트라클로로에틸렌약 1.3 ml를신속히넣고즉시밀봉하여그무게를측정하고가스크로마토그래프용헥산을넣어표선을채운다. 이표준원액의농도는전후의무게차로부터구한다. 테트라클로로에틸렌표준액 ( 0.04 mg C 2 Cl 4 / ml ) 테트라클로로에틸렌으로서 40 mg에상당하는테트라클로로에틸렌표준원액의ml수를정확히취하여미리가스크로마토그래프용헥산약 80 ml를넣어둔 100 ml용량플라스크에넣고가스크로마토그래프용헥산을넣어표선을채운다음이액 10 ml를정확히취하여같은방법으로희석하고 100 ml로한다. 염소화탄화수소혼합표준액 ( 1.5 μg C 2 HCl 3, 0.4 μg C 2 Cl 4 / ml ) 100 ml용량플라스크에가스크로마토그래프용헥산약 80 ml를넣고여기에트리클로로에틸렌표준액 ( 0.15 mg C 2 HCl 3 / ml ) 및테트라클로로에틸렌표준액 ( 0.04 mg C 2 Cl 4 / ml ) 각각 1 ml씩을정확히넣은다음가스크로마토그래프용헥산을넣어표선을채운다

334 제 5 항규정액 0.1N 과망간산칼륨액 1 L중에과망간산칼륨 ( KMnO 4 : ) g을함유한다. 조제과망간산칼륨 3.2 g을약 1,100 ml의물에녹여 1~2 시간조용히끓인다음하루동안어두운곳에방치하고유리여과기에여과하여깨끗한갈색병에넣어어두운곳에보관한다. 표정 150~200 에서 1 시간건조하여황산건조용기에서식힌수산나트륨 ( 표준시약 ) 약 0.3 g을정밀히달아 500 ml삼각플라스크에넣고물 200 ml를넣어녹인다음황산 ( 1+1 ) 10 ml를넣고열판상에서 60~80 로액온을유지하면서조제한과망간산칼륨액으로적정한다. 처음에약 40 ml는신속하게넣어반응시키고다음에는서서히적정하여과망간산칼륨의엷은홍색이약 30초간지속되면종말점으로한다. 따로물 200 ml를취하여같은방법으로시험하고보정한다. 0.1N 과망간산칼륨액 1 ml = 6.700mg Na 2 C 2 O N 과망간산칼륨액 0.1N 과망간산칼륨액 250 ml를정확히취하여물을넣어정확히 500 ml로한다 N 과망간산칼륨액 0.1N 과망간산칼륨액 250 ml를정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 0.01N 과망간산칼륨액 0.1N 과망간산칼륨액 50 ml를정확히취하여물을넣어정확히 500 ml로한다. 0.01M 에틸렌디아민테트라초산이나트륨액 1 L중에에틸렌디아민테트라초산이나트륨 2 수화물 ( C 10 H 14 N 2 Na 2 O 8 2H 2 O : ) g을함유한다. 조제 80 에서 5 시간건조하여건조용기에서식힌에틸렌디아민테트라초산이나트륨 ( 2 수화물 ) g을물에녹여 1,000 ml로한다. 표정금속아연 ( 99.0 % 이상 ) 을 10 % 염산용액으로씻은다음물로씻고다시아세톤으로씻은다음 110 에서 5 분간건조하고건조용기 ( 실리카겔 ) 에서식은후약 0.2 g을정밀히달아 10 % 염산용액 5 ml및브롬수 ( 포화 ) 5 방울을넣어낮은온도로가온하여녹이고끓여서과량의브롬을날려보낸다음물을넣어정확히 200 ml로한다. 이용액 20 ml를정확히취하여수산화나트륨용액 ( 1 50 ) 을넣어중성으로하고

335 염화암모늄 암모니아완충액 ( ph 10.0 ) 5 ml및에리오크롬블랙t 염화나트륨지시약 40mg을넣어서조제된에틸렌디아민테트라초산이나트륨액으로용액의적자색이청자색으로변할때까지적정하여물농도계수를계산한다. 0.01M 에틸렌디아민테트라초산이나트륨용액 1 ml = mg Zn 주의 : 폴리에틸렌병에보관한다 M 에틸렌디아민테트라초산이나트륨용액 0.01M 에틸렌디아민테트라초산이나트륨용액 100 ml를정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 0.25N 중크롬산칼륨액 1 L중중크롬산칼륨 ( K 2 Cr 2 O 7 : ) g을함유한다. 조제중크롬산칼륨 ( 표준시약 ) 을 103 에서 2 시간동안건조한다음건조용기 ( 실리카겔 ) 에서식혀 g을정밀히담아물에녹여 1,000 ml로한다 N 중크롬산칼륨액 0.25N 중크롬산칼륨액 100 ml를정확히취하여물에넣어정확히 1,000 ml로한다. 0.1N 질산은액 1 L중질산은 ( AgNO 3 : ) g을함유한다. 조제질산은 170 g에물을넣어녹여 1 L로하고다음과같이표정한다. 표정염화나트륨 ( 표준시약 ) 을 500~650 에서 40~50 분간건조한다음건조용기 ( 실리카겔 ) 에서식힌후약 0.15 g을정밀히달아물 50 ml를넣어녹여 10 % 크롬산칼륨용액 1 ml를넣어흔들면서조제된질산은액으로지속적인엷은적갈색을나타낼때까지적정하여규정도계수를계산한다. 0.1N 질산은액 1 ml = 5.844mg NaCl 주의 : 차광하여보관한다. 0.01N 질산은액 0.1N 질산은액 100 ml를정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 0.1N 티오황산나트륨액 1 L 중티오황산나트륨 ( Na 2 S 2 O 3 5H 2 O : ) g을함유한다. 조제티오황산나트륨 ( 5 수화물 ) 26 g 및무수탄산나트륨 0.2 g에새로끓여식힌물을넣어녹여 1 L로하고이소아밀알코올약 10 ml를넣고 2 일간방치한후다음과같이표정한다

336 표정요오드산칼륨 ( 표준시약 ) 을 120~140 에서약 2 시간건조한다음건조용기 ( 실리카겔 ) 에서식혀약 100 mg을요오드병에정밀히달아물 25 ml를넣어녹이고요오드화칼륨 2 g 및 10 % 염산용액 10 ml를넣어마개를닫고어두운곳에약 10 분간방치한다음물 100 ml를넣어유리된요오드를조제된티오황산나트륨액으로적정하여규정도계수를계산한다. 다만, 적정의종말점은액의종말점부근에서엷은황색으로되었을때전분용액 3 ml를넣어생긴청색이탈색될때로한다. 같은방법으로바탕시험을하여보정한다. 0.1N 티오황산나트륨액 1 ml = mg KIO 3 주의 : 오랫동안보관된것은표정하여보정한다 N 티오황산나트륨액 0.1N 티오황산나트륨액 250 ml를정확히취하여새로끓여식힌물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 0.01N 티오황산나트륨액 0.1N 티오황산나트륨액 100 ml를정확히취하여새로끓여식힌물을넣어정확히 1,000 ml로한다. 0.1N 황산 1 L 중 ( H 2 SO 4 : ) g을함유한다. 조제황산 3 ml를물 1 L중에저어섞으면서천천히넣어다음과같이표정한다. 표정무수탄산나트륨 ( 표준시약 ) 을 500~650 에서 40~50 분간가열한다음건조용기 ( 실리카겔 ) 에서식혀약 0.15 g을정밀히달아물 50 ml를넣어녹여메틸레드알코올용액 ( 0.1 W/V % ) 3방울을넣어조제된황산으로적정하여규정도계수를계산한다. 다만, 적정의종말점은액을조심하여끓여서가볍게마개를하고식힐때지속적인등색~등적색을나타낼때로한다. 0.1N 황산 1 ml = 5.299mg Na 2 CO N 황산 0.1N 황산 250 ml를정확히취하여물을넣어정확히 500 ml로한다. 0.01N 황산 0.1N 황산 100 ml를정확히취하여물을넣어정확히 1,000 ml로한다 N 황산제일철암모늄액 1 L중황산제일철암모늄 ( Fe( NH ) 2 ( SO 4 ) 2 6H 2 O ) g을함유한다

337 조제 황산제일철암모늄 10 g 을정밀히달아물에약 500 ml에녹이고황산 20 ml넣은 다음냉각시키고물을넣어 1,000 ml로한다. 표정 0.025N 중크롬산칼륨용액 20 ml를정확히취하여삼각플라스크에넣고물을넣어약 100 ml로한다음황산 30 ml를넣는다. 냉각한다음 o- 페난트로린제일철용액 2~3 방울을넣고 0.025N 황산제일철암모늄용액을사용하여액의색이청록색에서적갈색 으로변할때까지적정한다. 0.1N 수산화나트륨액 f = x : 적정에소비된 0.025N 황산제일철암모늄액 ( ml ) 1 L 중수산화나트륨 ( NaOH : ) g 을함유한다. 조제 20 x 수산화나트륨 35 g 을물약 30 ml가들어있는폴리에틸렌병에냉각하면서소량씩 넣어녹이고마개를닫아 1 일간방치한다음상등액 5 ml를취하여 1,000 ml부피 플라스크에넣고물을넣어표선을채운다. 조제 미리건조용기에서약 48 시간방치하여건조시킨술퍼민산 ( 표준시약 ) 약 0.2 g 을 정밀하게달아 200 ml삼각플라스크에넣고물약 25 ml를넣어녹인다. 여기에브로 모티몰블루우용액 ( 0.1 W/V % ) 3~5 방울을넣고조제한 0.1N 수산화나트륨액으로 액의색이녹색으로될때까지적정하여규정도계수를구한다. 0.05N 수산화나트륨액 0.1N 수산화나트륨액 1 ml = 9.71 mg SO 3 HNH 2 0.1N 수산화나트륨용액 250 ml를정확히취하여물을넣어정확히 500 ml로한다

338 부 록

339 부 록 담수조류분류표 1a와 1b로시작하며두가지상반된설명중하나를선택하고선택된설명의끝에주어진번호의 a 설명과 b 설명에대하여동일한순서를따른다. 열쇠번호대신에조류의이름이주어질때까지계속한다. 조류이름은최근에바뀐이름으로나타냈으며, 괄호에는바뀌기이전의이름을표시하였다. 1a. 세포에는엽록체가구분되어있지않고원형질전체에퍼져있다. 세포는일반적으로남색, 황녹색, 자주색을띠며요오드전분시험 * 음성이고, 운동성이없으며, 핵의구분이없고, 무성생식을한다.( 남조류 ) 4 1b. 세포에는엽록체가하나또는여러개있다. 원형적인일부혹은전체가엽록체에의해서차여져있다. 세포벽이명확하다. 일반적으로녹색, 갈색, 붉은색등이지만남색은아니다. 요오드전분시험은양성혹은음성이다. 2 2a. 세포벽은대단히단단하여깨질것같지않다. 규칙적으로반복되는미세한무늬를갖고 ( 줄무늬등 ), 세포의색은갈색에서녹색이며, 요오드전분시험은음성, 편모는없으며, 두개의세포벽은기본적으로비슷하게이등분되어있고하나는뚜껑처럼다른하나에얹혀져있다.( 규조류 ) 30 2b. 세포벽이존재할경우, 휘거나, 주름지거나, 부풀어오를수있으며, 견고성은세포원형질의팽압에의하여좌우된다. 세포벽에는규칙적으로반복되는미세한무늬가없고, 세포의샘은녹색, 붉은색, 갈색등으로요오드전분시험양성혹은음성, 편모는있거나없으며, 세포벽은연속적이며일반적으로양분되어있지않다. 3 3a. 세포혹은집락 (colony) 은운동성이있고, 편모가존재하며 ( 일반적으로쉽게관찰할수없고 ), 흔히세포의선두부와선미부끝의내용물이나형태가서로다르다.( 편모조류 ) 54 3b. 운동성이없고, 진정한편모가없다. 일반적으로세포의양끝은서로다르지않다.( 녹조류및관련조류 ) 80 * 슬라이드글라스상에시료 1방울떨어뜨리고거기에증류수로서 1 : 1로희석한루골용액 1방울을떨어뜨린후커버글라스를덮고 1분간정치한다. 양성반응의경우청색으로염색되며후에검게변색된다. 핵, 색소체, 세포벽등역시염색되지만갈색에서황색으로변색된다

340 1. 남조류 (Blue-Green Algae) 4a. 세포들은사상체를이룬다.( 혹은실모양으로길게신장되어있다 ) 5 4b. 세포들은사상체를이루지않는다. 23 5a. 이형세포들 (Heterocysts) 이존재한다. 6 5b. 이형세포 (Heterocysts) 들이존재하지않는다. 14 6a. 이형세포는사상체의한끝에위치한다. 7 6b. 이형세포들은사상체내외여러곳에위치한다. 9 7a. 사상체들은하나의구상점액질내에방사상으로배열하고있다. Rivularia 7b. 사상체들은분리되어있거나불규칙적으로모여있다. 8 8a. 사상체는한쪽끝으로갈수록점진적으로가늘어진다. Calothrix 8b. 사상체는한쪽끝이점진적으로가늘어지지않는다. Chlindrospermum 9a. 사상체는분지하지않는다. 10 9b. 사상체는때때로위분지를한다 a. 사상체내의격벽들의간격은사상체의폭보다좋다. Nadularia 10b. 사상체내의격벽들의간격은적어도사상체의폭만큼떨어져있다 a. 사상체들은일반적으로조밀한수평적배열의군체를형성하며, 이형세포들과포자들은모양이실린더형에서긴타원형이다. Aphanizomenon 11b. 사상체들은조밀한수평적배열의집락이아니고, 이형세포와포자는흔히구형에서타원형이다 a. 사상체들은동일한점액질내에있다. Nostoc 12b. 사상체들은동일한점액질내에있지않다. Anabaena 13a. 위분지는쌍을이룬다. Scytonema 13b. 위분지는단독으로존재한다. Tolypothrix 14a. 사상체혹은신장된세포는한쪽끝이부착되어있고다른한쪽에는하나혹은그이상의구형의세포들 ( 포자들 ) 이있다. Entophysalis(Chamaesiphon) 14b. 사상체는일반적으로한쪽끝이부착되어있지않으며, 선단포자도존재하지않는다 a. 사상체는전체적으로규칙적인나선형이다 b. 사상체는나선형이아니거나나선형인경우에는사상체의일부분에한정되어있다 a. 사상체에는격막이있다. Arthrospira 16b. 사상체에는격막이없다. Spirulina 17a. 사상체는아주가늘고폭이 0.5m에서 2.0m 정도이다. Schizothrix 17b. 사상체는폭이 3에서 93m 정도이다

341 18a. 사상체들은느슨하게모여있지만군체를이루지는않는다 b. 사상체들은조밀하게모여있고명확히보이지않는동일한점액상의분비물에의해서둘러쌓여있다 a. 사상체는벽모양의막에의해서둘러쌓여있으며이막은흔히사상체세포들의끝보다도더연장되어있다. 사상체는일반적으로운동성이없다 b. 사상체는벽모양의막에의해서둘러쌓여있지않으며사상체는운동성을나타낼수도있다 a. 세포들은공간에의해서서로분리되어있다. Johannesbaptistia 20b. 세포들은이웃세포들과접해있다. Lyngbya 21a. 모든사상체들은짧고 20개이하의세포를갖는다. 사상체의한쪽끝혹은양쪽끝이날카롭게돌출되어있다. Raphidiopsis 21b. 사상체들은길고 20개이상의세포를갖는다. 사상체들은일반적으로날카롭게돌출된끝을갖지않는다. Oscillatoria 22a. 사상체들은조밀한배열로기본적으로평행한 ( 실 ) 뭉치상이다 Microcoleus 22b. 사상체들은불규칙한형태로배열하고자주메트를형성한다. Phormidium 23a. 세포들은규칙적인형태로평행하게배열하고, 판상의형태를이룬다. Agmenellum(Merismopedia) 23b. 세포는판상의형태를이루기위해규칙적으로배열하지않는다 a. 세포는하나의구슬모양구형의점액질표면근처에규칙적으로배열한다 b. 구슬모양의점액질이존재한다해도구형은아니다 a. 세포들은계란모양에서심장모양이고무색줄기들에의해서구형의중앙에연결되어있다. Gomphospaeria 25b. 세포들은둥글고점액성줄기가없다. Gomphospaeria(Coelosphaerum type) 26a. 세포들은실린더형의타원형이다. Coccochloris(Aphanothece) 26b. 세포들은구형이다 a. 2개혹은그이상의구분되는점액질막에의해서각세포또는세포군집이쌓여져있다. Anacystis(Gloeocapsa) 27b. 세포들을둘러싼점액질막은명확하게충을이루지않는다 a. 세포들은분리되어있거나 2에서 32세포들로집락을이룬다. Anacystis(Chroococus) 28b. 집락내에서세포들은조밀하게모여있고, 고른분포를하거나규칙적으로배열한다

342 29a. 상당히많은세포들이조밀하게모여집락을이룬다. Anacystis(Microcystis, Polycystis) 29b. 세포들은점액질내에서고른분포를하며세포는구형으로흔히쌍을이룬다. Aphanocapsa 2. 규조류 (Diatoms) 30a. 각면 (valve) 은외부가원형이고무늬는방사상으로배열하고, 세포들은사상체를이루기도한다.( 중심규조 ) 31 30b. 각면은길고원형이아니다. 장축무늬는하나또는두개의장축열을이루며, 세포들은모여있다할지라도사상체를이루지않는다.( 우상규조류 ) 35 31a. 세포의각은캡슐형, 원통형, 혹은사각형으로양극의끝에흔히 1~2개의가시형돌기를갖는다. 흔히사상체를이룬다 b. 세포의각은원형이며단독으로존재하거나유연한사상체로자주각면을볼수있다 a. 각에는횡조선이있으며세포는단독으로존재한다 b. 각의내부에횡조선이없고원통형의세포가사상체를이룬다. 세포벽에는조밀한점문양이있으며, 몇몇종은양극에치상돌기혹은가시형돌기를갖는다. Melosira 33a. 대면에서볼때작은사각형을이루며내부에는휘어진비늘모양의횡조선이존재하고각각의극에는 2개의가시형돌기를갖는다. Attheya 33b. 각은극쪽으로신장되어하나의가시형돌기를형성하며곧은비늘모양의횡조선이존재하며, 격벽은존재하지않는다. Rhizosolenia 34a. 각면에서방사상의무늬는중심으로부터외곽으로뻗어있고각면의주변부에흔히짧은가시고존재한다. Stephanodiscus 34b. 각면에서돌출된부위에방사상의무늬가있고, 돌출부위는원형의바깥쪽의반에한정되어있으며일반적으로외곽면에는가시가없다. Cyclotella 35a. 각면은세포의장축에대칭이다 b. 적어도각면은장축에대하여대칭이아니다 ( 양쪽의형태가다르다 ) 52 36a. 종구 (raphe) 는각면의끝이나끝부근에존재한다 b. 종구또는위종구가가면의중앙이나중앙근처에존재한다 a. 외곽부의용골성종구가두개의각면상에반대되게놓여있다. Hantzschia 37b. 외곽부의용골성종구가두개의각면상에대각선으로놓여있다. Nitzschia 38a. 세포의각면은횡축에대하여대칭이다 b. 세포의각면은횡축에대하여비대칭이다.( 양끝의크기와모양이다르다.) 47 39a. 각면상에서세포는둥근난형이고세포폭의두배이상이아니다. Cocconeis

343 39b. 세포는길고세포길이는세포폭의두배이상이다 a. 세포는판상이다.( 대면은넓고, 각면은좁다.) Tabellaria 40b. 대면과각면의넓이는거의같다 a. 세포는각면을가로질러막지않는몇개의격막이있으며, 구멍이존재하는외곽선이없다. Diatoma 41b. 각면의표면상의근맥은위종구나종구혹은용골무늬에의해서구분된다 a. 세포들은몇개또는많은수의세포들이측면으로결합하여리본형태를이룬다. Fragilaria 42b. 세포들은쌍을이루거나단독으로존재한다 a. 세포는좁고직선상이며흔히양끝이좁아지며진종구가없다. Synedra 43b. 세포는일반적으로개각면이보트모양이고진종구가있다 a. 세포는대면에서장축에대하여비대칭이며때때로부착병 ( 가지 ) 을갖는다. Achnanthes 44b. 세포는대면뿐만아니라개각면에서도대칭이며일반적으로부착하지않는다 a. 세포의중앙연장된줄무늬가없는영역으로중앙을감도는황띠가있다. Stauroneis 45b. 세포의중앙을감도는연속적인투명한띠가없다 a. 세포는고배율관찰시실선으로보이는근맥 (cosate) 이있다. Pinularia 46b. 세포는고배율관찰시점선으로미세한횡선이있다. Navicula 47a. 세포는한쪽끝만서로부착하여별모양 ( 방시형 ) 의집락을이룬다. Asterionella 47b. 세포는느슨한방사상의집락을형성하지않는다 a. 세포들은부채형의집락들을이룬다. Meridion 48b. 세포는단독으로존재하거나쌍을이룬다 a. 점선형태의미세한횡선에부가하여뚜렷한벽모양의형태가세포의각면의표면위배민가장자리바로아래에존재한다. Surirella 49b. 벽모양의형태는점선형태의미세한횡선에제한된각면을따라배열한다 a. 세포는길고끝부분의마디를제외하고는거의평행하다. Asterionella 50b. 세포를덮고있는면들은한쪽끝을향하고있다 a. 세포는대면부가휘어있다. Rhoicosphenia 51b. 세포는대면부가곧다. Gomphonema 52a. 각면에횡격막또는근맥이있다. Epithemia 52b. 각면에횡격막또는근맥이없다 a. 종구는거의각면의중앙부를가로지르며위치한다. Cymbella 53b. 종구는중앙부를벗어나, 각면외곽부의오목한부부근처에있다. Amphora

344 3. 편모조류 (Flagellate Algae) 54a. 세포는느슨하고단단한원추형의주머니 ( 로리카 ) 에있고단독혹은분지된집락을이룬다. Dinobryon( 황색편모조류 ) 54b. 상자모양또는주머니가존재해도원추형은아니며분지하지않는다 a. 세포들은단독이거나쌍을이룬다 b. 세포들은 4개또는그이상의세포들로서하나의집락을이룬다 a. 세포에는세포를횡으로감싸고도는뚜렷한횡구 ( 횡축의홈 ) 가있다 a. 세포는돌출된단단한돌기를갖으며하나는앞쪽에있으며, 2개혹은 3개는뒤쪽끝에있다. Ceratium( 와편모조류 ) 57b. 세포에는몇개의단단한돌출돌기가없다 a. 상각과하각은종구에의해서거의같은비유로나뉜다. Peridinium( 와편모조류 ) 58b. 상각은하각보다명확히크다. Massartia( 와편모조류 ) 59a. 세포들은표면판으로부터뻗어나온기다란강모를갖는다.. Mallomonas( 황색편모조류 ) 59b. 세포들은강모와표면판이없다 a. 세포의원형질체는로리카에의하여쌓여져있다 b. 세포는단단한세포막이나세포벽은있지만로리카는없다 a. 로리카는판상이고세포는 2개의편모를갖는다. Phacotus( 녹조류 ) 61b. 로리카는판상아니고세포는하나의편모를갖는다 a. 로리카는보통불투명하고일반적으로어두운갈색에서붉은색이고색소체는녹색이다. Trachclomonas( 유글레나류 ) 62b. 로리카는보통투명하여무색에서옅은갈색이고색소체는갈색이다. Chrysococcus( 황색편모조류 ) 63a. 색소체는갈색, 적색, 황색또는남색이다 b. 색소체는초록색이다 a. 색소체는남색에서청색이다. Chroomonas( 황색편모조류 ) 64b. 색소체는갈색, 적색에서황녹색이다 a. 색소체는갈색이고하나또는두개이다 b. 색소체는갈색, 적갈색, 홍녹색으로두개의편모를갖는다. Rhodomonas( 갈색편모조류 ) 66a. 세포의전반부는비스듬하고두개의편모를갖는다. Cryptomonas( 갈색편모조류 ) 66b. 세포의전반부는둥글며하나의편모를갖는다. Chromulina( 황색편모조류 ) 67a. 세포는투명한장방형의날개를갖는다. Pteromonas( 녹조류 ) 67b. 세포로부터뻗은날개가없다

345 68a. 세포는평평하고주변이단단하다. Phacus( 유글레나류 ) 68b. 세포는평평하지않고주변이단단하거나유연하다 a. 단일색소체에피레노이드가존재하고파라밀론은없다. 주변은유연하지않으며세포당두개이상의편모를갖는다 b. 피레노이드는없으며파라밀론이있고세포당몇개의피레노이드가있고경계부위는유연하거나단단하고세포당하나의편모를갖는다 a. 세포는결함된형태이다 ( 각각의끝을붙여놓은것같은 ) Chlorogonium( 녹조류 ) 70b. 세포는결합된형태가아니고일반적으로거의구형이다 a. 색소체가많다. Vacuolraria( 갈색편모조류 ) 71b. 색소체는적으며일반적으로하나이다 a. 세포당두개의편모를갖는다. Chlamydomonas( 녹조류 ) 72b. 세포당 4개의편모를갖는다. Carteria( 녹조류 ) 73a. 세포는형태가유연하고파라밀론은캡슐이나디스크형이고, 세포는신축성이있다. Euglena( 유글레나류 ) 73b. 세포는형태가단단하고파라밀론은링형이고세포는거의구형이다. Lepocinclis( 유글레나류 ) 74a. 색소체는갈색이다 b. 색소체는녹색이다 a. 세포는서로접해있다. Synura( 황색편모조류 ) 75b. 세포는공간을두고떨어져있다. Uroglenopsis( 황색편모조류 ) 76a. 집락은판상이고세포하나정도의두께이다. Gonium( 녹조류 ) 76b. 집락은둥글고세포하나의두께보다두껍다 a. 세포들은서로접해있다 b. 세포들은공간을두고서로떨어져있다 a. 세포들은방사상으로배열하고있다. Pandorina( 녹조류 ) 78b. 세포들은모두일정방향을향하고있다. Pyrobotrys(Chlamydobotrys)( 녹조류 ) 79a. 집락당세포수는 400개이상이다. Volvox( 녹조류 ) 79b. 집락당세포수는 75개이하이다. Eudorina( 녹조류 ) 4. 녹조류및기타관련조류 (Green Algae and Associated Forms) 80a. 세포들은망상의형태를이루며서로연결되어있다. Hydrodictyon 80b. 세포들은망상의형태를이루지않는다 a. 세포들은서로측면으로결합하여판상을이루거나한세포의폭또는두께정도의리본형태를이룬다. 세포수는 2, 4 또는 8개이다. Scenedesmus

346 81b. 세포들은측면으로결합하지않는다 a. 세포들은단독으로존재하거나, 사상체혹은엽상체를형성하지않는다 b. 세포들은사상체를이루거나다른관상혹은실모양의엽상체를형성한다 a. 세포는단독으로존재하며불완전한틈새로인하여중심부가가장좁다. (Desmids) 84 83b. 세포는단독으로존재하거나중심부에틈새가없는군체이다 a. 세포의각반 (1/2) 은 3개의가시상의돌기를갖거나연장된둥근끝마디를갖는다. Staurastrum 84b. 세포의주변부에는이러한연장기관이없다 a. 중앙부가함몰되거나파인반세포이다 b. 중앙부가함몰되거나파임이없는반세포이다. Cosmarium 86a. 주변부에둥그런돌출부 ( 엽 ) 을갖는다. Euastrum 86b. 주변부에날카로운치아상의돌기를갖는다. Micrasterias 87a. 세포는길다 b. 세포는계란형으로둥글거나각이져있다 a. 세포는중심점으로부터방사상형태를이룬다. Actinastrum 88b. 세포는단독으로존재하거나불규칙한군체를이룬다 a. 세포들은뾰족한끝을갖는다. Schroederia 89b. 세포들은뾰족한끝을갖지않는다 a. 세포들은한쪽끝에무색의부착부분을갖는다. Cbaracium 90b. 세포의한쪽끝에부착부분이없다 a. 세포당두개의색소체가있으며세포의중앙부분을가로지르는부위에색소가없는부분이있다. Closterim 91b. 세포는중앙부를연속적으로가로지르는색소체를갖는다 a. 세포는폭이 5배에서 10배정도넓다 b. 세포는폭이 2배에서 4배정도넓다 a. 세포에는피레노이드가없거나하나이다. Ankistrodesmus 93b. 세포에는피레노이드가여러개있다. Closteriopsis 94a. 세포는반원형이고세포의끝은뾰족하지만끝에는가시가없다. Selenastrum 94b. 세포는반원형이라기보다는활모양으로끝이뾰족하고끝에는짧은가시가있다. Closteridium 95a. 세포들은판상, 둥근판상, 혹은각진판상형태를이룬다 b. 세포들의배열은이와다르다

347 96a. 세포들은둥근판상 ( 때로는타원형의판상 ) 형태를이루며주변부에분포하는세포들은내부에분포하는세포들과모양이다르다. Pediastrum 96b. 세포의형태는사각형, 난형, 마름모형으로 4개의세포가세포벽으로연접되어판상의 4각형을이루거나일정한배열의군체를이룬다. Crucigenia 97a. 세포들은각이져있다 b. 세포들은둥근계란형이다 a. 세포는등변삼각형이거나피라미드형으로각의끝에굵은가시형돌기가붙어있고세포의직경보다길이가더길다. Treubaria 98b. 세포는불규칙한피라미드형으로가시형돌기는굵지않다 a. 각각의모서리에두개혹은그이상의가시를갖는다. Polyedriopsis 99b. 각각의모서리에가시가없거나두개이하이다. Tetraedrom 100a. 세포들은길고뾰족한가시들을갖는다 b. 길고뾰족한가시들이없다 a. 세포들은둥글다 b. 세포들은계란형이다 a. 세포들은단독으로존재한다. Golenkinia 102b. 세포들은집락을이룬다. Micractinium 103a. 각각의세포끝에는하나의가시가있다. Diacanthos 103b. 각각의세포끝에는하나이상의가시가있다. Chodatella 104a. 둥근계란형의일정한형태의집락을이룬다 b. 집락이존재한다해도명확한둥근계란형이아니거나세포들이단독으로존재한다 a. 구형의세포들이조밀하게집락을이룬다 b. 구형의세포들이느슨하게하나의막에쌓여집락을이룬다 a. 집락은단단한구형이고, 약간은불규칙하며세포간에는서로연결되어있지않다. Planktosphaeria 106b. 집락은공간이있는구형이고, 규칙적이고, 세포간에짧은연결부가있다. Coelastrum 107a. 세포들은둥글다 b. 세포들은계란형이다. Oocystis 108a. 세포들은연결줄기에의해서집락의중앙부에연결되어있다. Dictyosphaerium 108b. 세포들을연결하는줄기가없다. Sphaerocystis 109a. 계란형의세포들이다소구형이고일반적으로황색을띠는기질내에있다. Botryococcus

348 109b. 세포들은둥글고단독으로존재하거나무색이기질내에있다 a. 현형질체사이에곧은판상의벽을갖는세포들이연결되어있다 b. 원형질체사이에둥근벽을갖는세포들이연결되어있다 a. 세포들은하나의점액성기질내에존재한다. Palmella 111b. 세포벽의외부에는기질이나막이없다. Phytoconis(Protococcus) 112a. 세포들은커다란점액상기질내에느슨하게분포한다. Tetraspora 112b. 세포들은단독으로존재하거나작은집락속에조밀하게모여있다 a. 세포들은원생동물내부에존재한다. Zoochorella 113b. 세포들은원생동물내부에존재하지않는다 a. 색소체가세포의 2/3 이하이다 b. 색소체가세포의 3/4 이상이다. Chlorococcum 115a. 세포는직경이 2μm이하이고세포분열에의해서생식한다. Nanochloris 115b. 세포는직경이 2.5μm이상이고내생포자에의해서생식한다. Chlorella 116a. 세포들의한쪽끝이서로부착되어있고분지하지않는사상체이다 b. 엽상체는분지하고세포하나의폭보다넓다 a. 색소체는세포내부에서한바퀴이상주변을감도는나선상이다. Spirogyra 117b. 색소체는나선상이아니다 a. 사상체는부러질때세포들의중앙에서분리된다 b. 사상체는부러질때세포의끝이나불규칙하게분리된다 a. 전분시험양성이며세포주변이곧고한개의색소체와한개의과립을갖는다. Microspora 119b. 전분시험음성이며세포주변이약간부풀어오르고몇개의색소체를갖는다. Tribonema 120a. 세포들사이의주변부가만입되어있다. Desmidium 120b. 세포들사이의주변부가만입되어있지않다 a. 색소체가세포당 2개이다. Zygnema 121b. 색소체가세포당하나이다 ( 때로는다수보이기도한다.) a. 일부세포들은세포의한쪽끝근처에수직의주름을갖는벽이있으며색소체는불규칙한망목상이다. Oedogonium 122b. 벽의끝에는주름이없으며색소체는망목상이아니다 a. 색소체는판상이며축을중심으로꼬인리본형이다. Mougeotia 123b. 색소체는원통상의세포를횡으로감도는띠모양이다. Ulothrix 124a. 엽상체는평평한판상의세포이다. Hildenbrandia 124b. 엽상체는위와다르다

349 125a. 엽상체는격막이없는긴관상형이다. Vaucheria 125b. 엽상체는위와다르다 a. 엽상체는연속되는표면막과규칙적으로부푼공간을갖는강한끈과같다. Lemanea 126b. 엽상체는위와다르다 a. 사상체는분지한다. Schizomeris 127b. 사상체는분지하지않는다 a. 분지는윤생형이다 b. 분지는단독이거나쌍을이룬다 a. 엽상체는점액상의기질에쌓여있다. Batrachospermum 129b. 엽상체는점액상의기질에쌓여있지않다 a. 사상체주축은세포하나의두께이다. Nitella 130b. 사상체주축은세포 3개의두께이다. Chara 131a. 사상체의대부분은몇개의세포층으로둘러쌓여있다. Compsopogon 131b. 사상체는몇개의세포층으로쌓여있지않다 a. 분지된세포의끝은둥글거나뭉툭하다 b. 분지된세포의끝은뾰족하다 a. 색소체는녹색이고전분시험양성이다 b. 색소체는적색이고전분시험음성이다. Audouinella 134a. 일부세포는조밀하고부풀고어두운녹색 ( 포자 ) 이며다른세포는밝은녹색이며실린더형이다. Pithophora 134b. 모든세포들은기본적으로동일하며중간정도녹색으로밝으며실린더형이다. Cladophora 135a. 사상체들은점액질의기질속에묻혀있다 b. 사상체들은점액질의기질속에묻혀있다 a. 사상체의주축세포는분지된기저세포들보다도훨씬넓다. Draparnaldia 136b. 사상체주축에서분지에이르기까지세포들의폭에는거의돌연한변화가없다. Chaetophora 137a. 분지는아주짧고격벽은없다. Rhizoclonium 137b. 분지는길고격벽이있다 a. 분지의끝은둥그런기부를갖는잘린가시모양이다. Bulbochaete 138b. 분지의폭은점진적으로감소되며색이있거나혹은없는기다랗게돌출된세포로끝난다. Stigeoclonium

350 최근에이름이바뀐조류 바뀌기전이름 바뀐이름 Aphanocapsa Anacystis Aphanthece Coccochloris Chamaesiphon Entophysalis Chantransia Audouinella Chlamydobotrys Pyrobotrys Chrococcus Anacystis Clathrocystis Anacystis Coelospaerium Gomphospaeria Encyonema Cymbella Gloeocapsa Anacystis Gloeothece Coccochloris Merismopedia Agmenellum Microcystis Anacystis Odontidium Diatoma Polycystis Anacystis Protococcus Phytoconis Sphaerella Haematococcus Synechococcus Coccochloris

351 부 록 Ⅱ 담수조류그림

352 2. 규조류 ( Diatoms )

353

354

355

356

357

358

359

360

361

362

363