Journal of Life Science 2015 Vol. 25. No. 4. 456~462 ISSN (Print) 1225-9918 ISSN (Online) 2287-3406 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2015.25.4.456 Effects of Fermented Sargassum thunbergii on Platelet Aggregation and Serum Lipid Levels in Obese Rat induced by High Fat Diet Jihyeon Cheon 1, Juyeong Lee 1, Jihye Kim 1, Mi-Hwa Park 1, Sang-Hyeon Lee 2, Changsuk Kong 1, Yuck Yong Kim 3, Ki Hwan Yu 3 and Mihyang Kim 1 * 1 Department of Food and Nutrition, Silla University, Busan 617-736, Korea 2 Department of Pharmaceutical Engineering, Silla University, Busan 617-736, Korea 3 ISFOOD Co. LTD., 7, Hoenggye-gil, Ilgwang-myeon, Gijang-gun, Busan 619-912, Korea Received March 9, 2015 /Revised April 15, 2015 /Accepted April 16, 2015 We investigated the effects of fermented Sargassum thunbergii (FST) on platelet aggregation and serum lipid levels in rats made obese by a high fat diet. Six-week-old male SD-rats were randomly assigned to four groups as CON, HF-CON induced by high fat diet (HF), ST supplemented with HF (HF- ST100), and the fermented ST supplemented with HF group (HF-FST100). After 6 weeks, the results showed that the final weight and weight gain had decreased in the HF- FST100 group compared to the HF-CON group. Also, the food efficiency ratio was significantly reduced in the HF-FST100 group compared to HF-CON. The organ weights other than heart and spleen were significantly lower in the HF-FST100 group than in the HF-CON group. The levels of serum GOT and GPT significantly decreased in the HF-FST100 group over the HF-CON group. In addition, the total cholesterol, triglyceride and LDL-cholesterol levels were lower in the HF-FST100 group than in HF-CON, while the HDL-cholesterol level was higher in the HF-FST100. The ability of platelet aggregation of groups supplemented with FST was lower than the HF-CON group. These results suggest that FST may be beneficial in improving lipid profile and platelet aggregation in obesity. Key words : Fermentation, obese rats, platelet aggregation, Sargassum thunbergii, serum lipids 서 오늘날한국인의식습관은과거에비해고칼로리, 고지방 섭취에따른과체중과각종만성질환으로인한어려움을겪고 있다 [10]. 국민건강영양조사에따르면우리나라비만유병률 은 2001 년전체평균 29.2% 였던것에비해, 2012 년 32.8% 로 점점증가하는추세를나타내고있다. 또한보건복지부는우 리나라인구의 38% 가권장섭취기준이상의칼로리를섭취하 고있으며, 이로인한심혈관질환의위험또한증가하고있다 고보고하였다. 이러한식습관의변화로인해신체는여러위 험요소에노출되고있으며, 특히포화지방산이다량함유된 식품은혈중지질농도를증가시켜고콜레스테롤혈증을유발 하며, 나아가고지혈증, 심근경색등순환기계통의질환발병 률을증가시킨다 [1, 12]. 비만은신체에너지섭취와소비의불균형으로인한질환으 로, 체중감량방법으로는약물투여, 수술, 운동, 식이요법등 *Corresponding author *Tel : +82-51-999-5620, Fax : +82-51-999-5457 *E-mail : mihkim@silla.ac.kr This is an Open-Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited. 론 이있으나그중식이요법이비만의근본적인예방및치료방법으로중시되고있다 [19, 20, 25]. 식이조절은혈중지질농도에직접적인영향을미치므로, 올바른식이섭취는약물치료보다더중요한치료법으로보고되고있다 [9]. 해조류는탄수화물함량이적고난소화성다당류를함유하고있어체내에서소화율은떨어지지만, 혈중콜레스테롤침착을저해하며순환기계통질환예방에효과적이다 [32]. 현재우리나라에자생하는해조류는 750여종이며, 그중식용가능한해조류는 60여종에이른다 [6, 11, 16]. 해조류는칼슘, 요오드, 철등무기질함량이높고, 난소화성다당류에의한뛰어난정장작용등기능성생리활성물질을함유하고있는소재로써그연구가활발히진행되고있다 [13]. 특히, 갈조류는다른해조류에비해생리활성이높은것으로알려져있으며, 녹조류및홍조류보다혈중지질개선에긍정적인효과를나타낸다고보고되고있다 [4, 14, 28]. 갈조류에는 alginic acid, laminarin, fucoidan 등의다양한생리활성성분이함유되어있으며, Kim [14] 등은갈조류인톳이고지방식이로유도된쥐의혈중콜레스테롤감소효과를나타내었다고보고하였다. 갈조류의모자반과에속하는지충이는우리나라전해안의조간대하부에걸쳐군란을이루어자생하고있는해조류로항염증, 항균, 항산화및항종양등의생리활성에대한연구가보고되고있다 [10]. 한편, 일반적인해조류의유용성분추출법은열수, 에탄올추출및유기용매, 알칼리, 산또는효소에의한추출
Journal of Life Science 2015, Vol. 25. No. 4 457 가공방법이대부분이다 [13]. 그러나이러한추출공정만으로는해조류에포함된성분들을효과적으로추출해내지못하는단점을가지고있다 [31]. 그에비해발효는식품속유용성분을효과적으로추출시킬수있는기술로서기능성식품제조에매우효과적인가공방법이다. 현재발효해조류관련연구로는발효시발생하는부산물을이용한바이오에너지관련연구가대부분이며, 생리활성검증에관한연구는미비한실정이다. 따라서본연구에서는고지방식이로고지혈증을유도한흰쥐에갈조류의모자반과에속하는지충이를발효후상등액을투여하여혈중지질농도, 혈소판응집에미치는영향에대하여검토하였다. 재료및방법발효지충이상등액제조본실험에서사용한지충이 (Sargassum thunbergii) 는 2013년 파라제주에서구입하여실험에사용하였다. 발효방법은발효를위해재래식물김치상등액을멸균수로희석후 MRS 고체배지 (Difco, USA) 에도말하여배양기에서2일간배양하여순수콜로니를얻었다. 얻어진콜로니의모양, 색깔등을육안판정으로발효유산균 (Lactobacillus sp. SH-1) 을선별하였으며, MRS액체배지 (Difco, USA) 에계대배양하여발효균주를확보하였다. 본발효를위하여지충이 50 g, 미생물의생육을위해 yeast extract 30 g, 탄소원인 glucose를 1% 의농도로첨가하고, 멸균수1L를첨가하였다. 준비한시료를혼합한뒤 121 의가압조건에서 1시간멸균하여잡균및곰팡이등으로인한오염을방지하였다. 유산균을첨가하지않은군을 FH-ST군으로, 앞서수집한순수한유산균 (Lactobacillus sp. SH-1) 1% 를접종한군을 FH-FST군으로분류한후, 30 배양기에서 48시간배양하였다. 발효후 3,000 rpm, 4, 10 min 조건하에원심분리하였으며, 각각의상등액을동결건조장치 (FD8518, Ilshin BioBase, Korea) 로동결건조하여일반지충이상등액시료및발효지충이상등액건조시료를얻었다. 실험동물및식이체중이 180~190 g인 6주령의 Sprague-Dawley계수컷흰쥐를 ( 주 ) 오리엔트바이오에서분양받은후 7일간적응시킨뒤실험을진행하였다. 동물실험실사육조건은온도 24±2, 습도 50~55% 를유지하였으며, 광주기및암주기를 12시간간격으로조절하였다. 1주일후, 실험동물은난괴법 (randomized complete block design) 에따라일반식이대조군 (CON), 고지방식이대조군 (HF-CON), 고지방식이및일반지충이상등액 100 mg/kg투여군 (HF-ST100), 고지방식이및발효지충이상등액 100 mg/kg 투여군 (HF-FST100) 으로각 6마리씩, 4 군으로나누어매일 1 ml 씩 6주간상등액을투여하였다. 실험 기간동안식이섭취량과체중은매일일정한시간에측정하였으며, 체중은일주일에한번씩측정하였고, 물과사료는제한하지않고섭취시켰다. 실험시료는증류수에용해하였으며, 대조군은 (CON, HF-CON) 은동일용량의증류수를투여하였다. 시료는 4 냉장고에보관하며실험에사용하였다. 실험군은고지방식이와시료를동시에투여하여 6주간비만을유도하였고, 실험에사용된식이는중앙동물 (Central Lab. Animal Inc. Korea) 에서고지방사료 pellet (Rodent Diet with 45%Kcal Fat) 과일반사료를구입하여사용하였으며, 동물실험은신라대학교동물실험윤리위원회의승인 (SUACUC- 2014-007) 하의관리지침에따라수행하였다 (Table 1). 혈액및장기채취실험동물의혈액은해부전 24시간절식시킨후 ethyl ether 를이용하여마취한후개복하여복대정맥에서채취하였다. 심장, 신장, 부신, 비장, 폐, 간, 부고환을적출한후생리식염수로세척한다음수분을제거한후무게를측정하였다. 혈청지질분석실험동물에서채취한혈액은실온에서 30분방치후 4, 3,000 rpm에서 10분간원심분리하여혈청을분리하였다. 중성지방 (triglyceride), 총콜레스테롤 (total cholesterol), 고밀도지단백질 (HDL-cholesterol) 분석은자동측정용 slide kit (FUJI FILM, japan) 를이용하여 Dry Chemistry Analyzer 3500i (FUJI, japan) 를사용하여측정하였다. 혈청중 GPT 및 GOT 분석혈청중효소활성측정을위해 glutamic pyruvic transaminase (GPT) 와 glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) 측정용 kit (FUJI DRI-CHEM SLIDE, Japan) 를이용하여자동생화학분석기 DRY CHEM 3500i (FUJI, Japan) 를사용하여분석하였다. Platelet 분리실험동물에서채혈한혈액은 3.2% sodium citrate 용액과 1:9의비율로혼합한뒤 1,100 rpm에서 10분간원심분리하여상층의 PRP (platelet rich plasma) 를얻은후, PRP를 3,000 Table 1. Experimental design of animals Group (No) 1) Treatment CON (6) Normal diet HF-CON(6) High fat diet HF-ST100(6) HF-FST100(6) 1) No: number of rats. High fat diet supplemented with Sargassum thunbergii supernatant 100 mg/kg High fat diet supplemented with fermented Sargassum thunbergii supernatant 100 mg/kg
458 생명과학회지 2015, Vol. 25. No. 4 rpm에서 10분간더원심분리하여상층의혈장을제거하였다. EDTA를포함하는 washing buffer (138 mm NaCl, 2.7 mm KCl, 12 mm NaHCO 3, 0.36 mm NaH 2PO 4, 5.5 mm glucose, 1 mm EDTA, ph 6.5) 를가하여혈소판을재현탁시켰다. 이혈소판을 3,000 rpm에서 10분간원심분리한후다시 suspending buffer (138 mm NaCl, 2.7 mm KCl, 12 mm NaHCO 3, 0.36 mm NaH 2PO 4, 5.5 mm glucose, 0.49 mm MgCl 2, 0.25% gelatin, ph 7.4) 로현탁시켜 washed platelet을조제하였다. Washed platelet은 suspending buffer로희석하여혈소판수가 5 10 8 /ml이되도록하였다. 혈소판응집실험발효지충이의항혈소판응집효과는 Whole blood lumiaggregometer (Chrono-log, USA) 를사용하여 37 에서 optical 방법으로혈소판응집을측정하였다. 응집유도제로콜라겐을사용하였으며, micro-magnetic bar를넣은 cuvette에는미리 37 에서 incubation시킨 PRP 50 μl와 suspending buffer, 10 mm CaCl 2 를넣고다시 incubation한후콜라겐 2.5 μl를가하여 5분간반응시켰다. 교반속도는 1,100 rpm으로유지하였고, PRP를얻은후 2시간안에모든실험을진행시켰다. 혈소판응집에작용하는시료의효과는응집저해율과 slope, lag time, amplitude로나타낼수있다. Slope은반응이일어나기시작할때의속도를나타내며, lag time은반응하는시간, amplitude는최대응집력을나타낸다. 응집력은반응이최종적으로끝났을때의광학밀도로나타낸다. 통계처리본실험에대한모든실험의결과는 mean±sd로표시하였고, 통계적유의성검정은SAS 9.1 version 프로그램을이용하여실시하였다. 집단간의차이를알아보기위해일원변량분석 (one-way ANOVA) 을이용하여분석하였고, 사후검증은 Duncan`s multiple range test에의해 p<0.05 수준에서각실험군간의유의성을검증하였다. 결과및고찰실험동물의체중변화, 장기중량및식이효율측정 고지방식이및발효지충이상등액의 6주간투여에따른흰쥐의체중변화와식이섭취량및식이효율은 Table 2와같다. 고지방식이대조군인 HF-CON군과일반지충이상등액을투여한 HF-ST100군의최종체중증가량을비교하였을때유의적인차이는없었으나, 발효지충이상등액을투여한 HF- FST100군은HF-CON군에비해유의적으로체중이감소하였다. 일일체중증가량은고지방식이군 (HF-CON) 에서정상식이군 (CON) 에비해유의적으로증가하였으나, 고지방식이와발효지충이상등액을함께투여한군 (HF-FST100) 이고지방식이와일반지충이상등액을투여한 (HF-ST100) 군보다유의적으로감소하는결과를나타내었다. 식이섭취량측정결과, 고지방식이를한 HF-CON군이일반식이를한 CON 군보다적은양을섭취하였으며, 이는고지방식이의에너지밀도가높아체내에서위내용배출시간을지연시켜서일반사료대비섭취량이낮아졌다는연구결과 [26, 29] 와유사한경향을나타내었다. 그러나고지방식이군에서 HF-CON 군, 발효지충이상등액을투여한 HF-FST100군, 일반지충이상등액을투여한 HF- ST100군사이에서의유의적차이는나타나지않았다. 식이효율 (FER) 에서는고지방사료투여군 (HF-CON) 이일반사료투여군 (CON) 보다높은식이효율을나타내었다. 각군별실험동물장기중량을나타낸표는 Table 3과같다. 고지방사료투여로인해각장기중량은대조군 (CON) 에비해증가하였다. 또한심장과부신을제외한모든장기에서발효지충이상등액을투여한군 (HF-FST100) 이고지방식이만투여한군 (HF-CON) 보다유의적으로낮은결과를나타내었다. Soloff [33] 등의연구에따르면고지방식이의급여는내장지방축적을유도하며체내간장무게를증가시켰으며, 이는본연구결과와도일치하였다. 부고환중량은체내내장지방을대표하는지표로, Lee 등 [21] 의연구에따르면, 고지방식이를급여한쥐의체내부고환지방중량은증가하는것으로나타났다. 부고환중량측정결과, 체내내장지방은고지방식이를급여한군 (HF-CON, HF-FST100, HF-ST100) 이일반식이를급여한 CON 대비약2-3배증가하는경향을나타내었다. 그러나, 발효지충이상등액투여군 (HF- FST100) 은고지방식이만투여한군 (HF-CON) 보다유의적으로부고환중량이감소하였다. Kim 등 [17] 의연구에서고지방식이급여는쥐의부고환지방중량을증가시켰으나, 대황유래 Laminaran투여에의해 Table 2. Final body weight, body weight gain, food intake and food efficiency ratio of rats supplemented with fermented Sargassum thunbergii for 6 weeks Group 1) CON HF-CON HF-ST100 HF-FST100 Final body weight (g) Body weight gain (g/day) Food intake (g/day) Food efficiency ratio (FER) 3) 336.73±20.48 2)c4) 2.76±0.15 c 28.88±5.28 a 0.10±0.02 c 437.52±22.74 a 4.62±0.31 a 25.39±6.21 b 0.22±0.02 a 418.13±32.38 ab 4.08±0.63 ab 24.05±6.01 b 0.20±0.01 b 400.52±28.40 b 3.89±0.43 b 24.39±6.33 b 0.16±0.00 b 1) Refer the legend to Table 1. 2) All values are mean±sd. (n=6). 3) FER: Body weight gain / Food intake. 4)a-c The means in the same row that do not share a common superscript are significantly different between the groups (p<0.05).
Journal of Life Science 2015, Vol. 25. No. 4 459 Table 3. Organ weight of rats supplemented with fermented Sargassum thunbergii for 6 weeks Group 1) Liver Heart Lung Spleen Adrenal Kidney epididymis CON HF-CON HF-ST100 HF-FST100 12.57±0.25 2)b 14.83±0.40 a 12.63±1.93 b 11.47±0.35 b 1.23±0.06 NS3) 1.43±0.25 NS 1.30±0.30 NS 1.33±0.12 NS 1.90±0.36 b 2.77±0.60 a 2.33±0.12 ab 2.10±0.20 b 0.73±0.06 b 1.03±0.15 a 0.67±0.12 b 0.70±0.10 b 0.17±0.06 NS 0.17±0.06 NS 0.17±0.06 NS 0.13±0.06 NS 3.18±0.17 c 3.85±0.52 a 3.82±0.26 ab 3.30±0.16 bc 3.77±0.58 c 8.98±0.19 a 9.45±0.13 a 7.78±0.19 b 1) Refer the legend to Table 1. 2) All values are mean±sd. (n=6). 3) NS: Not significantly 4)a-c The means in the same row that do not share a common superscript are significantly different between the groups (p<0.05). 부고환지방의중량이감소하였으며, 이는본연구결과와유사한결과로서발효지충이상등액은내장지방억제효과가있는것으로사료된다. 혈청중 GPT 및 GOT 분석혈액내의아미노기전이효소인 glutamic pyruvic transaminase (GPT) 는 ALT 혹은 SGPT라고하며간세포가손상되었을때빠르게증가하며, 간이나담관질환의표지인자로알려져있다. 또한, glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) 는간과심장에고농도로존재하며, 세포장애정도와비교적상관성이좋을뿐만아니라다른혈중유출효소에비하여민감하게변화하고, GOT 지수가높으면급성심근경색, 간염, 간경변, 근위축증이나타난다 [18]. 이두가지효소는고지방식이나독성물질의장기간복용으로간세포가손상되면혈중으로유출되어농도가증가하게된다 [2, 3]. 혈청 GOT 및 GPT 활성측정결과는 Table 4와같다. 고지방식이를투여한 HF- CON 군이일반사료를투여한 CON군에비해 GOT 및 GPT의활성이유의적으로증가하였다. GOT활성은발효지충이상등액100 mg/kg을투여한 HF-FST100군이고지방식이를투여한 HF-CON 군에비해유의적으로감소하였다. 그러나일반지 충이상등액 100 mg/kg을투여한 HF-ST100군은 CON군과비교하였을때유의적인차이는나타나지않았다. HF- FST100군과 HF-ST100군사이의 GOT 활성은발효지충이상등액을투여한 HF-FST100군의활성이낮아지는경향을보였으나, 유의적인차이는없었다. GPT 활성측정결과고지방식이에의해활성이증가하였으며, HF-FST100군에서유의적으로활성이감소하는결과가나타났다. 따라서발효지충이상등액은일반지충이상등액보다 GOT 및 GPT 활성감소에긍정적인영향을미칠것이라사료된다. 혈청중총콜레스테롤및중성지질함량혈청중총콜레스테롤, HDL-콜레스테롤, LDL-콜레스테롤및중성지질함량측정결과는 Table 5와같다. 총콜레스테롤은혈청중으로유리된콜레스테롤이며체내지질대사지표로서내분비질환, 고지혈증, 비만등의원인으로인해증가한다 [15]. 실험동물의혈중총콜레스테롤함량은고지방식이를투여한 HF-CON군이대조군 (CON) 에비해증가하는경향을나타내었다. 발효지충이상등액을투여한군의총콜레스테롤은고지방식이를투여한군에비해감소하였으나, 유의적인차이는없었다. 혈청중중성지질함량은 CON 대비고지방식 Table 4. Effects of fermented Sargassum thunbergii on serum GOT and GPT induced by high fat diet Group 1) CON HF-CON HF-ST100 HF-FST100 GOT (unit/ml) GPT (unit/ml) 54.33±7.37 2)c3) 65.33±7.37 a 64.33±1.53 ab 57.33±1.53 bc 12.67±0.58 b 23.00±2.31 a 21.00±1.73 a 16.00±2.00 b 1) Refer the legend to Table 1. 2) All values are mean±sd. (n=6). 3)a-c The means in the same row that do not share a common superscript are significantly different between the groups (p<0.05). Table 5. Contents of total cholesterol, triglyceride and HDL-cholesterol, LDL-cholesterol in serum of rats supplemented with fermented Sargassum thunbergii Group 1) T-CHO (mg/dl) TG (mg/dl) HDL-C (mg/dl) LDL-C (mg/dl) 2) CON HF-CON HF-ST100 HF-FST100 57.00±9.17 3)NS4) 64.33±1.15 NS 63.33±15.31 NS 59.33±7.77 NS 31.67±6.51 b5) 51.33±9.02 a 38.67±1.53 ab 37.00±12.77 ab 59.67±17.79 a 32.33±3.79 b 50.00±16.70 ab 57.33±2.52 a 24.47±6.58 b 42.40±15.01 a 27.53±1.27 ab 25.07±4.01 b 1) Refer the legend to Table 1. 2) LDL cholesterol={total cholesterol-(hdl-cholesterol-triglyceride/5)}. 3) All values are mean±sd. (n=6). 4) NS: Not significantly 5)a-b The means in the same row that do not share a common superscript are significantly different between the groups (p<0.05).
460 생명과학회지 2015, Vol. 25. No. 4 이를급여한군 (HF-CON) 에서유의적으로증가하였으나, 발효지충이상등액투여에의해감소하는경향을나타내었다. Clarkson[7] 은고지방식이급여가흰쥐의혈중중성지질, 총콜레스테롤함량을증가시킨다고보고하였으며, 이는본연구결과와일치하였다. 혈중 HDL-콜레스테롤농도의증가는혈관내피세포의기능장애를방지하며, 세포내의접착물질 (adhesion molecule) 로인한세포증식을감소시킨다고보고되어있다 [7, 35]. HDL-콜레스테롤함량의경우, 고지방식이를급여한 HF-CON군에서일반사료를급여한정상 CON 군에비해유의적으로감소하는결과를나타내었다. 한편발효지충이상등액을투여한군 (HF-FST100) 은고지방식이를급여한 (HF-CON) 군에비해유의적으로혈중 HDL-콜레스테롤농도가증가하였으며, 그함량이일반사료를급여한 CON 군에근접한수치를보였다. 이는 Park 등 [27] 의연구에서 4주간갈조류인갈래곰보추출물을투여한군에서정상식이군대비혈중 HDL-콜레스테롤이유의적으로증가한패턴과유사한경향을나타내었다. LDL-콜레스테롤농도의증가는심혈관계통질환을발병시키는주요위험인자로알려져있으며, 총콜레스테롤수치보다더중요한생화학적지표역할을한다고보고되고있다 [34, 22]. 혈중 LDL-콜레스테롤함량은고지방식이를급여한 (HF-CON) 군이일반식이를급여한 CON군에비해유의적으로증가하였다. 발효지충이상등액을투여한군 (HF-FST100) 의경우고지방식이를급여한군 (HF-CON) 보다혈중 LDL-콜레스테롤농도가유의적으로감소하는경향을나타내었으며, 일반사료를급여한정상군인 CON군에근접한수치를나타내었다. 이상의결과에서, 고지방식이를급여한 HF-CON군보다발효지충이상등액을투여한 HF-FST100군의혈중총콜레스테롤, 중성지방및 LDL-콜레스테롤의농도가감소하였으며, 반면 HDL-콜레스테롤함량은증가하는결과를나타내었다. 이러한결과는해조류추출물이심혈관관련질환발병의위험을감소시킨다는연구 [24] 와유사한결과이며, 일반지충이상등액투여군보다발효지충이상등액투여군에서더뛰어난지질개선효과를나타내었다. 따라서, 발효지충이상등액은혈중지질개선을위한보조및예방식품소재로활용할수있을것으로사료된다. Table 6. Effect of fermented Sargassum thunbergii against collagen induced platelet aggregation Group 1) CON HF-CON HF-ST100 HF-FST100 Amplitude (%) 12.13±4.50 2)ab4) 15.93±0.12 a 13.93±0.12 ab 10.73±0.64 b Slope (Ω/min) 3) 19.00±4.56 c 41.00±5.15 a 31.00±0.85 b 25.00±1.32 bc Lag time (sec) 0:40±0:01 ab 0:22±0:03 c 0:35±0:02 b 0:44±0:05 a 1) Refer the legend to Table 1. 2) All values are mean±sd. (n=6). 3) Initial slope is ohm change for the first on minute. 4)a-c The means in the same row that do not share a common superscript are significantly different between the groups (p <0.05). Slope (Ω/min) 은응집곡선의기울기를말하며, 혈소판이 platinum electrodes 에부착됨으로써발생하는전기저항 (impedance:ω) 의크기를혈소판응집치로나타낸다 [35]. 혈소판응집능측정결과는 Table 6과같다. 일반식이를급여한 CON군에비해고지방식이를급여한 HF-CON 군의응집곡선기울기가증가하였다. 발효지충이상등액을투여한 HF-FST100 군이고지방식이를급여한 HF-CON 군보다 slope 가감소하였으며, 일반지충이상등액을투여한 HF-ST100 군보다곡선의기울기가유의적으로감소하였다. 따라서발효지충이상등액이일반지충이상등액보다혈전 (thrombus) 생성을저해시키며, 혈소판응집을억제하는것으로사료된다. 응집시간을나타내는 lag time은고지방식이의급여로응집시간이짧아졌으나, 일반지충이상등액을투여한군 (HF- ST100) 보다발효지충이상등액을투여한군 (HF-FST100) 의응집시간이지연되는경향을나타내었다. 이상의결과에서고지방식이의급여로혈소판응집이촉진되었으나, 발효지충이상등액투여로인해혈소판응집이억제되었다. 따라서발효지충이상등액이일반지충이상등액에비해항혈소판응집저해에긍정적인효과가있을것으로사료된다. 이러한결과를바탕으로향후발효지충이활성성분들의규명과각성분들의생리활성연구가병행된다면심혈관질환의예방과관련된새로운천연기능성소재및식품개발이가능할것으로사료된다. 혈소판응집에미치는영향혈관이손상되었을때혈소판은 collagen, thrombin, ADP 등의각종 agonists의자극에반응하여활성화되어점착반응 (adhesion), 방출반응 (secretion) 및응집반응 (aggregation) 을일으키며, 이에의해혈관이손상을받아출혈이일어난후혈액이혈괴또는조직내에서응고됨으로써혈전이생성된다 [8, 30]. 혈소판은혈관손상에반응하여혈액손실을막아주는결정적인역할을하지만, 급성죽상동맥혈전증을일으키며, 이는심혈관질환등의초기원인이되기도한다 [23]. 감사의글 본연구는교육부와한국연구재단의지역혁신창의인력양성사업으로수행된연구결과임 (No. 2013H1B8A2032201). References 1. Ah, H. S. and Gyoung, W. S. 2000. Effects of Korean leek and dietary fat on plasma lipids and platelet aggregation
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462 생명과학회지 2015, Vol. 25. No. 4 34. Zavaroni, I., Bonora, E. and Pagliara, M. 1989. Risk factors for coronary artery disease in healthy persons with hyperinsulinemia and normal glucose tolerance. N. Engl. J. Med. 320, 702-706. 35. Zeiher, A. M., Schachlinger, V. and Hohnloser, S. H., Saurbier, B. and Just, H. 1994. Coronary atherosclerotic wall thickening and vascular reactivity in humans. Elevated high-density lipoprotein levels ameliorate abnormal vasoconstriction in early atherosclerosis. Circulation 89, 2525-2532. 초록 : 발효지충이가고지방식이를급여한흰쥐의혈청내지질함량및혈소판응집에미치는영향천지현 1 이주영 1 김지혜 1 박미화 1 이상현 2 공창숙 1 김육용 3 유기환 3 김미향 1 * ( 1 신라대학교식품영양학과, 2 신라대학교제약공학과, 3 아이에스푸드 ) 본연구에서는실험동물인흰쥐를고지방식이로고지혈증을유도한후발효지충이가혈중지질함량및혈소판응집에미치는영향을검토하였다. 실험결과, 식이섭취량은발효지충이상등액을투여한군 (HF-FST100) 과일반지충이상등액을투여한군 (HF-ST100) 사이에서의유의적차이는나타나지않았다. 최종체중증가량은발효지충이상등액을투여한군 (HF-FST100) 이고지방식이투여군 (HF-CON) 에비하여유의적으로감소하였다. 일일체중증가량은발효지충이상등액을투여한군 (HF-FST100) 이일반지충이상등액을투여한군 (HF-ST100) 보다유의적으로감소하였다. 실험동물장기중량은심장과부신을제외한모든장기에서발효지충이상등액을투여한군 (HF-FST100) 이고지방식이만투여한 (HF-CON) 군보다유의적으로감소하였다. 혈청중 GOT 및 GPT 측정결과, 고지방식이를투여한군 (HF-CON) 이일반사료를투여한 CON군에비해 GOT 및 GPT의활성이유의적으로증가하였다. GPT 활성의경우, 고지방식이를투여한군 (HF-CON) 에비해 HF-FST100군에서유의적으로활성이감소하는결과가나타났다. 혈청중중성지방, 총콜레스테롤및 LDL-콜레스테롤함량은발효지충이상등액투여에의해감소하는경향을나타내었다. 혈중 HDL-콜레스테롤함량은발효지충이상등액을투여한군 (HF-FST100) 이고지방식이를급여한군 (HF-CON) 에비해유의적으로증가하였다. 혈소판응집저해능측정결과, 발효지충이상등액의투여로혈소판응집이억제되는것으로나타났다. 이상의결과로발효지충이상등액은고지방식이의급여로고지혈증이유도된흰쥐의혈중지질개선및혈소판응집저해효과를나타내었으며, 이는고지혈증및심혈관질환예방과관련된새로운천연기능성소재및식품개발에활용될수있을것으로사료된다.