공개특허 0-204-0038324 (9) 대한민국특허청 (KR) (2) 공개특허공보 (A) () 공개번호 0-204-0038324 (43) 공개일자 204년03월28일 (5) 국제특허분류 (Int. Cl.) C07D 207/2 (2006.0) A6K 3/405 (2006.0) A6P 35/00 (2006.0) (2) 출원번호 0-203-037 (22) 출원일자 203 년 09 월 6 일 심사청구일자 (30) 우선권주장 203 년 09 월 6 일 020200470 202 년 09 월 20 일대한민국 (KR) 전체청구항수 : 총 4 항 (7) 출원인 ( 주 ) 셀트리온 인천광역시연수구아카데미로 23 ( 송도동 ) (72) 발명자 박영준 경기도수원시영통구봉영로 526, 73 동 60 호 ( 영통동, 살구마을아파트 ) 정진교 서울특별시관악구성현로 80, 4 동 202 호 ( 봉천동, 관악드림타운아파트 ) ( 뒷면에계속 ) (74) 대리인 유수미 (54) 발명의명칭돌라스타틴 0 유도체, 그의제조방법및그를포함하는항암제조성물 (57) 요약 본발명은우수한항암활성을가지는돌라스타틴 0 유도체, 그의제조방법및그를유효성분으로포함하는항암제조성물을제공한다. - -
공개특허 0-204-0038324 (72) 발명자 최영미 경기도용인시기흥구신구로 22 번길 9, 30 호 ( 구갈동 ) 이민섭 인천광역시연수구컨벤시아대로 30 번길 80, 03 동 903 호 ( 송도동, 송도푸르지오하버뷰 ) 최준헌 경기도용인시기흥구강남동로 28, 907 동 802 호 ( 상하동, 강남마을한라비발디아파트 ) 조은주 경기도용인시기흥구동백 5 로 2-5, 603 호 ( 중동 ) 송현남 경기도화성시경기대로 990, 03 동 702 호 ( 병점동, 화성병점에스케이뷰 ) 박성준 경기도수원시장안구화산로 87 번길 9, 동 2002 호 ( 천천동, 삼성래미안아파트 ) 이종협 경기도용인시기흥구강남동로 28, 907 동 802 호 ( 상하동, 강남마을한라비발디아파트 ) 홍승서 서울특별시강남구언주로 07, 20 동 608 호 ( 개포동, 현대 2 차아파트 ) - 2 -
공개특허 0-204-0038324 특허청구의범위청구항 하기화학식 I의돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염 : [ 화학식 I] 상기식에서, R, R 2, R 3, R 4 및 R 5 는각각독립적으로수소또는 C -C 4 의알킬기이고, R 6 는수소, 히드록시, C -C 4 의알콕시기, 아미노, 옥소 (=O) 또는히드록시이미노 (=N-OH) 이며, Ar은아릴기이고, X는탄소, 산소또는황이며, R 7 은 X가탄소일때히드록시, 아미노, C -C 4 의알콕시기, C -C 4 의알킬아미노기또는옥소 (=O) 이고, X가산소또는황일때존재하지않는다. 청구항 2 제항에있어서, R, R 3 및 R 4 가 C -C 4 의알킬기이고, R 2 및 R 5 가각각독립적으로수소또는 C -C 4 의알킬기이며, R 6 는수소, 히드록시, C -C 4 의알콕시기, 아미노, 옥소 (=O) 또는히드록시이미노 (=N-OH) 이고, Ar은 C -C 4 의알킬기, C -C 4 의알콕시기및할로겐으로구성된군으로부터선택된하나이상의치환기로치환되거나치환되지않은페닐이며, X는탄소이고, R 7 은히드록시, 아미노, C -C 4 의알콕시기또는 C -C 4 의알킬아미노기인것을특징으로하는돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염. 청구항 3 제항에있어서, R, R 3 및 R 4 가메틸이고, R 2 및 R 5 가각각독립적으로수소또는메틸이며, R 6 는수소, 히드록시, 메톡시, 아미노, 옥소 (=O) 또는히드록시이미노 (=N-OH) 이고, Ar은메틸, 메톡시및할로겐으로구성된군으로부터선택된하나이상의치환기로치환되거나치환되지않은페닐이며, X는탄소이고, - 3 -
공개특허 0-204-0038324 R 7 은히드록시, 아미노, 메톡시또는 N-메틸아미노인것을특징으로하는돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염. 청구항 4 하기화학식 Ia의돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염 : [ 화학식 Ia] 상기식에서, R, R 2, R 3, R 4 및 R 5 는각각독립적으로수소또는 C -C 4 의알킬기이고, R 6 는수소, 히드록시, C -C 4 의알콕시기, 아미노, 옥소 (=O) 또는히드록시이미노 (=N-OH) 이며, Ar은아릴기이고, X는탄소, 산소또는황이며, R 7 은 X가탄소일때히드록시, 아미노, C -C 4 의알콕시기, C -C 4 의알킬아미노기또는옥소 (=O) 이고, X가산소또는황일때존재하지않는다. 청구항 5 제항에있어서, 하기화합물로부터선택되는것을특징으로하는돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염 : (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)- 4-메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((3-플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-2); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((4-플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-3); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2,4-디클로로-5-플루오로페네틸 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-4); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2R,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-3-((2-(4- 메톡시페닐 )-2-옥소에틸) 아미노 )-2-메틸-3-옥소프로필) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-5); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2R,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-(((R)--옥소--페닐프로판-2-일 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-6); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-(((S)--옥소--페닐프로판-2-일 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미 - 4 -
공개특허 0-204-0038324 노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-7); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-4-히드록시 -2-((R,2R)--메톡시- 2-메틸-3-옥소-3-( 페네틸아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-8); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((R)-2-((R,2R)-- 메톡시-2-메틸- 3-옥소-3-( 페네틸아미노 ) 프로필 )-4-옥소피롤리딘--일)-5-메틸-- 옥소헵탄-4-일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-9); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2R,4S)-4- 메톡시-2-((R,2R)- -메톡시-2-메틸-3-옥소-3-( 페네틸아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-0); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((R)--(4-플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시- 2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2- ( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((S)--(4-플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시- 2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2- ( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-2); (S)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2R,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-3-(((R)--(2- 메톡시페닐 )--옥소프로판-2-일 ) 아미노 )-2-메틸-3-옥소프로필) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸- 2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-3); (S)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2R,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-3-(((R)--(3- 메톡시페닐 )--옥소프로판-2-일 ) 아미노 )-2-메틸-3-옥소프로필) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸- 2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-4); (S)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2R,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-3-(((R)--(4- 메톡시페닐 )--옥소프로판-2-일 ) 아미노 )-2-메틸-3-옥소프로필) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸- 2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-5); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((S)--(3,5-디플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-6); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((S)--(2,6-디플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-7); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((R)--(2,6-디플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-8); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((R,Z)--( 히드록시이미노 )--(3-메톡시페닐) 프로판-2-일 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2- ((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-9); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((R)--( 히드록시이미노 )--(3-메톡시페닐) 프로판-2-일 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4-일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-20); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((R)--(4-플루오로페닐 )--( 히드록시이미노 ) 프로판-2-일 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4-일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-2); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2-(5-브로모-2-메틸페닐)-2-( 히드록시이미노 ) 에틸 ) 아미노 )-- 메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-2-((S)-2-( 디메틸아 - 5 -
공개특허 0-204-0038324 미노 )-3-메틸부탄아미도)-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-22); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2-(4-플루오로 - 2-메틸페닐 )-2-( 히드록시이미노 ) 에틸 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-23); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2-(4-플루오로-2-메틸페닐)-2-( 히드록시이미노 ) 에틸 ) 아미노 )- -메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)- 3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-24); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2S,4R)-2-((R,2R)-3-(((E)-2-(2-플루오로-4-메톡시페닐)-2- 히드록시이미노 ) 에틸 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2- ((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-25); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2-(4-플루오로 - 2-메틸페닐 )-2-( 옥소에틸 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸- -옥소헵탄-4-일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-26); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2-(4-플루오로-2-메틸페닐)-2-( 옥소에틸 ) 아미노 )--메톡시-2- 메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2- ( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-27); (S)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((2-옥소-2-(o-톨릴 ) 에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-28); (S)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((2-옥소-2-(p-톨릴 ) 에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-29); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2S,4R)-2-((R,2R)-3-(2-(4-플루오로페닐)-2-옥소에틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-30); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2S,4R)-2-((R,2R)-3-(2-(2-플루오로-4-메톡시페닐)-2- 옥소에틸 ) 아미노 )--메톡시-2- 메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2- ( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-3); (S)-N-((3R,4S,5S)--((S)-4-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필) 티아졸리딘-3-일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-32); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2S,4S)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-( 페네틸아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ- 33); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((2-옥소-2-페닐에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-34); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4R)-2-((R,2R)-3-(2-(2-히드록시-2-페닐에틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필) -4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-35); (2S)-N-((3R,4S)--((2S)-2-((R,2R)-3-(((2R)--아미노--페닐프로판-2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-36); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4R)-2-((R,2R)-3-(((2S)--아미노--페닐프로판-2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥 - 6 -
공개특허 0-204-0038324 소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-37); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((2-( 피리딘-2-일 ) 에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-38); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((2-( 티오펜-2-일 ) 에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-39); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-2-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)- 4-히드록시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)- N,3-디메틸부탄아미드 (I-40); (2S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-2-((R,2R)-3-(((S)--(4-플루오로페닐 )--옥소프로판-2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 히드록시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸- -옥소헵탄-4-일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (I-4); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-2-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)- 4-히드록시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (I-42); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-2-((R,2R)-3-(((S)--(4-플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시- 2-메틸-3-옥소프로필 )-4-히드록시피롤리딘--일)-3- 메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸- 2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (I-43); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-4-아미노-2-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 ) 피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N,3-디메틸부탄아미드 (I-44); 및 (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-2-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- ( 메틸아미노 ) 피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)- N,3-디메틸부탄아미드 (I-45). 청구항 6 하기화학식 II의화합물과하기화학식 III의화합물을축합반응시킨다음, 보호기가존재하는경우탈보호화반응시키는단계를포함하는하기화학식 I의돌라스타틴 0 유도체의제조방법 : [ 화학식 II] [ 화학식 III] - 7 -
공개특허 0-204-0038324 [ 화학식 I] 상기식에서, R 및 R 2 는각각독립적으로수소, C -C 4 의알킬기또는아미노보호기이고, R 3, R 4 및 R 5 는각각독립적으로수소또는 C -C 4 의알킬기이며, R 6 는수소, 보호화되거나되지않은히드록시, C -C 4 의알콕시기, 보호화되거나되지않은아미노, 옥소 (=O) 또는히드록시이미노 (=N-OH) 이고, Ar은아릴기이며, X는탄소, 산소또는황이고, R 7 은 X가탄소일때보호화되거나되지않은히드록시, 보호화되거나되지않은아미노, C -C 4 의알콕시기, 보호화되거나되지않은 C -C 4 의알킬아미노기또는옥소 (=O) 이고, X가산소또는황일때존재하지않는다. 청구항 7 제6항에있어서, 아미노보호기가 t-부톡시카르보닐 (t-boc), 카르보벤질옥시 (Cbz), 9-플루오레닐메톡시카르보닐 (Fmoc) 또는벤질 (Bn) 인것을특징으로하는제조방법. 청구항 8 제6항에있어서, 히드록시보호기가 t-부틸디메틸실릴인것을특징으로하는제조방법. 청구항 9 제6항에있어서, 화학식 III의화합물이염산염또는트리플루오로아세트산 (TFA) 염의형태로사용되는것을특징으로하는제조방법. 청구항 0 제6항에있어서, 축합반응이디시클로헥실카르보디이미드 (DCC), 디페닐포스포릴아지드 (DPPA), 디에틸시아노포스포네이트 (DEPC) 및벤조트리아졸--일-옥시- 트리스 ( 디메틸아미노 ) 포스포늄헥사플루오로포스페이트 (BOP 시약 ) 로구성된군으로부터선택된축합제와트리에틸아민및디이소프로필에틸아민 (DIPEA) 으로구성된군으로부터선택된유기염기의존재하에수행되는것을특징으로하는제조방법. 청구항 제6항에있어서, 아미노보호기의탈보호화반응이 0% 팔라듐카본또는 20% 수산화팔라듐을사용하여수행되는것을특징으로하는제조방법. 청구항 2 제6항에있어서, 히드록시보호기의탈보호화반응이테트라부틸암모늄플루오라이드를사용하여수행되는것을특징으로하는제조방법. 청구항 3 제항내지제5항중어느한항에따른돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염을약제학적으로허용가능한담체와함께포함하는항암제조성물. - 8 -
공개특허 0-204-0038324 청구항 4 제 3 항에있어서, 항암제가유방암치료에적용되는것을특징으로항암제조성물. 명세서 [000] 기술분야 본발명은우수한항암활성을가지는돌라스타틴 0 유도체, 그의제조방법및그를유효성분으로포함하는항 암제조성물에관한것이다. [0002] 배경기술돌라스타틴 (dolastatin) 0은 987년인도양의해양생물돌라벨라오리큘라리아 (Dolabella auricularia) 에서분리되어하기화학구조를가지는것으로규명되었다 [J. Am. Chem. Soc., 987, 09, 6883-6885]. 돌라스타틴 0의생리활성은탁산 (taxane) 과빈카알칼로이드 (vinca alkaloid) 와같은튜불린 (tubulin) 저해제이지만구조적으로상이한펩타이드이다 [Chem. Ind., 999, 5-55; Curr. Pharm. Des., 999, 5, 39-62]. [0003] [0004] [0005] 돌라스타틴 0은전임상연구로세포실험및동물모델실험에서다양한인간종양에대한활성을보여주었고, 탁산과빈카알칼로이드와상이한구조를가진다는점에서탁산과빈카알칼로이드가가지는골수독성 (myelotoxicity) 과같은독성이적을것이기대되었다. 그러나, 돌라스타틴 0은구조적인차이점에도불구하고임상실험에서탁산과빈카알칼로이드와같이골수독성, 신경독성및기타부작용을나타내었다 [Clin. Cancer Res., 2000, 6, 293-30; Drugs of the Future, 999, 24(4), 404-409]. 돌라스타틴 0의다양한유도체가합성되었으며, 합성연구는 Dov( 돌라발린 ), Val( 발린 ), 돌라이소루이신 (Dolaisoleucine), 돌라프롤린 (Dolaproline) 및돌라아민 (Dolaamine) 의 5개부분으로진행되어왔다. 그중돌라프롤린과돌라아민부분이주요연구대상이었는데, 국제공개 WO 2003/008378에는돌라프롤린부분의메톡시기를티오메톡시기로바꾼돌라스타틴 0 유도체가개시되어있으며, 미국특허제5,599,902호에는돌라아민부분이변형된돌라스타틴 0 유도체가보고되어있다. 또한유럽특허제2 260 858호에는 Dov 부분의디메틸발린을모노메틸발린으로바꾼유도체가개시되어있다. 발명의내용 [0006] [0007] [0008] [0009] 해결하려는과제본발명자들은암세포에대하여더강력한세포독성을가지는돌라스타틴 0 유도체를개발하기위해예의연구검토한결과, 돌라프롤린부분의피롤리딘고리가변형된하기화학식 I의돌라스타틴 0 유도체가우수한항암활성을가짐을발견하고본발명을완성하게되었다. 따라서, 본발명의목적은항암활성이우수한하기화학식 I의돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염을제공하는것이다. 본발명의다른목적은하기화학식 I의돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염의제조방법을제공하는것이다. 본발명의또다른목적은하기화학식 I의돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염을함유 - 9 -
공개특허 0-204-0038324 하는항암제조성물을제공하는것이다. [000] [00] 과제의해결수단 본발명은하기화학식 I 의돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염에관한것이다 : [ 화학식 I] [002] [003] [004] [005] [006] [007] [008] 상기식에서, R, R 2, R 3, R 4 및 R 5 는각각독립적으로수소또는 C -C 4 의알킬기이고, R 6 는수소, 히드록시, C -C 4 의알콕시기, 아미노, 옥소 (=O) 또는히드록시이미노 (=N-OH) 이며, Ar은아릴기이고, X는탄소, 산소또는황이며, R 7 은 X가탄소일때히드록시, 아미노, C -C 4 의알콕시기, C -C 4 의알킬아미노기또는옥소 (=O) 이고, X가산소또 는황일때존재하지않는다. [009] 본명세서에서 C -C 4 의알킬기는탄소수 내지 4 개로구성된직쇄형또는분지형탄화수소를의미하며, 예를들 어, 메틸, 에틸, n- 프로필, i- 프로필, n- 부틸, i- 부틸, t- 부틸등이포함되나이에한정되는것은아니다. [0020] [002] 본명세서에서아릴기는아로메틱기와헤테로아로메틱기및그들의부분적으로환원된유도체를모두포함한다. 상기아로메틱기는 5 내지 5각형으로이루어진단순또는융합고리형이며, 헤테로아로메틱기는산소, 황또는질소를하나이상포함하는아로메틱기를의미한다. 대표적인아릴기의예로는페닐, 나프틸, 피리디닐 (pyridinyl), 푸라닐 (furanyl), 티오페닐 (thiophenyl), 인돌릴 (indolyl), 퀴놀리닐 (quinolinyl), 이미다졸리닐 (imidazolinyl), 옥사졸릴 (oxazolyl), 티아졸릴 (thiazolyl), 테트라히드로나프틸등이있으나이에한정되는것은아니다. 본명세서에서사용되는 C -C 4 의알콕시기는탄소수 내지 4개로구성된직쇄형또는분지형알콕시기를의미하 며, 메톡시, 에톡시, n- 프로판옥시등이포함되나이에한정되는것은아니다. [0022] 본명세서에서사용되는 C -C 4 의알킬아미노기는 C -C 4 의알킬기가치환된아미노기를의미하며, 메틸아미노, 에 틸아미노, n- 프로필아미노등이포함되나이에한정되는것은아니다. [0023] 상기 C -C 4 의알킬기, 아릴기, C -C 4 의알콕시기및 C -C 4 의알킬아미노기는한개또는그이상의수소가 C -C 4 의 알킬기, C 2 -C 4 의알케닐기, C 2 -C 4 의알키닐기, C 3 -C 0 의시클로알킬기, C -C 4 의할로알킬기, C -C 4 의알콕시기, C - C 4 의티오알콕시기, 아릴기, 아실기, 히드록시, 티오 (thio), 할로겐, 아미노, 알콕시카르보닐, 카복시, 카바모 일, 시아노, 니트로등으로치환될수있다. [0024] [0025] [0026] 바람직하게는, 본발명의돌라스타틴 0 유도체는 R, R 3 및 R 4 가 C -C 4 의알킬기이고, R 2 및 R 5 가각각독립적으로수소또는 C -C 4 의알킬기이며, - 0 -
공개특허 0-204-0038324 [0027] [0028] R 6 는수소, 히드록시, C -C 4 의알콕시기, 아미노, 옥소 (=O) 또는히드록시이미노 (=N-OH) 이고, Ar 은 C -C 4 의알킬기, C -C 4 의알콕시기및할로겐으로구성된군으로부터선택된하나이상의치환기로치환되거 나치환되지않은페닐이며, [0029] [0030] X 는탄소이고, R 7 은히드록시, 아미노, C -C 4 의알콕시기또는 C -C 4 의알킬아미노기이다. [003] [0032] [0033] [0034] [0035] [0036] [0037] 보다바람직하게는, 본발명의돌라스타틴 0 유도체는 R, R 3 및 R 4 가메틸이고, R 2 및 R 5 가각각독립적으로수소또는메틸이며, R 6 는수소, 히드록시, 메톡시, 아미노, 옥소 (=O) 또는히드록시이미노 (=N-OH) 이고, Ar은메틸, 메톡시및할로겐으로구성된군으로부터선택된하나이상의치환기로치환되거나치환되지않은페닐이며, X는탄소이고, R 7 은히드록시, 아미노, 메톡시또는 N-메틸아미노이다. [0038] [0039] 본발명의돌라스타틴 0 유도체는모든입체이성질체를포함하며, 하기화학식 Ia 의화합물일수있다. [ 화학식 Ia] [0040] [004] [0042] 상기식에서, R, R 2, R 3, R 4, R 5, R 6, Ar, X 및 R 7 은상기화학식 I 에서정의한바와같다. 상기화학식 Ia 에서, R 5, R 6 및 R 7 은각각독립적으로 (R)- 형, (S)- 형또는라세미형일수있다. [0043] 본명세서에서약제학적으로허용되는염은무독성무기산염및유기산염모두를포함하며, 예를들어염산염, 황산염, 질산염, 인산염, 아세테이트산염, 벤젠설포네이트산염, 시트레이트산염등을포함하나이에한정되는 것은아니다. [0044] [0045] [0046] [0047] 본발명의돌라스타틴 0 유도체중대표적인화합물은하기그룹에서선택될수있다. (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)- 4-메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((3-플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-2); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((4-플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- - -
공개특허 0-204-0038324 메톡시피롤리딘 -- 일 )-3- 메톡시 -5- 메틸 -- 옥소헵탄 -4- 일 )-N,3- 디메틸 -2-((S)-3- 메틸 -2-( 메틸아미노 ) 부탄아미 도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-3); [0048] [0049] [0050] [005] [0052] [0053] [0054] [0055] [0056] [0057] [0058] [0059] [0060] [006] [0062] (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2,4-디클로로-5-플루오로페네틸 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-4); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2R,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-3-((2-(4- 메톡시페닐 )-2-옥소에틸) 아미노 )-2-메틸-3-옥소프로필) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-5); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2R,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-(((R)--옥소--페닐프로판-2-일 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-6); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-(((S)--옥소--페닐프로판-2-일 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-7); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-4-히드록시 -2-((R,2R)--메톡시- 2-메틸-3-옥소-3-( 페네틸아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-8); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((R)-2-((R,2R)-- 메톡시-2-메틸- 3-옥소-3-( 페네틸아미노 ) 프로필 )-4-옥소피롤리딘--일)-5-메틸-- 옥소헵탄-4-일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-9); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)- 3-메톡시--((2R,4S)-4-메톡시-2-((R,2R)-- 메톡시-2-메틸-3-옥소-3-( 페네틸아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-0); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((R)--(4-플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시- 2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2- ( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((S)--(4-플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시- 2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2- ( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-2); (S)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2R,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-3-(((R)--(2- 메톡시페닐 )--옥소프로판-2-일 ) 아미노 )-2-메틸-3-옥소프로필) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸- 2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-3); (S)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2R,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-3-(((R)--(3- 메톡시페닐 )--옥소프로판-2-일 ) 아미노 )-2-메틸-3-옥소프로필) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸- 2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-4); (S)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2R,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-3-(((R)--(4- 메톡시페닐 )--옥소프로판-2-일 ) 아미노 )-2-메틸-3-옥소프로필) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸- 2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-5); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((S)--(3,5-디플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-6); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((S)--(2,6-디플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-7); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((R)--(2,6-디플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메 - 2 -
공개특허 0-204-0038324 톡시 -2- 메틸 -3- 옥소프로필 )-4- 메톡시피롤리딘 -- 일 )-3- 메톡시 -5- 메틸 -- 옥소헵탄 -4- 일 )-N,3- 디메틸 -2-((S)-3- 메틸 -2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-8); [0063] [0064] [0065] [0066] [0067] [0068] [0069] [0070] [007] [0072] [0073] [0074] [0075] [0076] (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((R,Z)--( 히드록시이미노 )--(3-메톡시페닐) 프로판-2-일 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2- ((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-9); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((R)--( 히드록시이미노 )--(3-메톡시페닐) 프로판-2-일 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4-일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-20); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-(((R)--(4-플루오로페닐 )--( 히드록시이미노 ) 프로판-2-일 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4-일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-2); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2-(5-브로모-2-메틸페닐)-2-( 히드록시이미노 ) 에틸 ) 아미노 )-- 메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-22); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2-(4-플루오로 - 2-메틸페닐 )-2-( 히드록시이미노 ) 에틸 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-23); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2-(4-플루오로-2-메틸페닐)-2-( 히드록시이미노 ) 에틸 ) 아미노 )- -메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)- 3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-24); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2S,4R)-2-((R,2R)-3-(((E)-2-(2-플루오로-4-메톡시페닐)-2- 히드록시이미노 ) 에틸 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2- ((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-25); (S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2-(4-플루오로 - 2-메틸페닐 )-2-( 옥소에틸 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 메톡시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸- -옥소헵탄-4-일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-26); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2R,4R)-2-((R,2R)-3-((2-(4-플루오로-2-메틸페닐)-2-( 옥소에틸 ) 아미노 )--메톡시-2- 메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2- ( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-27); (S)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((2-옥소-2-(o-톨릴 ) 에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-28); (S)-N-((3R,4S,5S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((2-옥소-2-(p-톨릴 ) 에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-29); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2S,4R)-2-((R,2R)-3-(2-(4-플루오로페닐)-2-옥소에틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-30); (S)-N-((3R,4S,5S)--((2S,4R)-2-((R,2R)-3-(2-(2-플루오로-4-메톡시페닐)-2- 옥소에틸 ) 아미노 )--메톡시-2- 메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2- ( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-3); (S)-N-((3R,4S,5S)--((S)-4-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필) 티아졸리딘-3-일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-32); - 3 -
공개특허 0-204-0038324 [0077] [0078] [0079] [0080] [008] [0082] [0083] [0084] [0085] [0086] [0087] [0088] [0089] (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2S,4S)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-( 페네틸아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ- 33); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((2-옥소-2-페닐에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-34); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4R)-2-((R,2R)-3-(2-(2-히드록시-2-페닐에틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필) -4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-35); (2S)-N-((3R,4S)--((2S)-2-((R,2R)-3-(((2R)--아미노--페닐프로판-2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-36); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4R)-2-((R,2R)-3-(((2S)--아미노--페닐프로판-2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 )-4-메톡시피롤리딘--일)-3-메톡시 -5-메틸--옥소헵탄-4-일)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도 )-N,3-디메틸부탄아미드 (Ⅰ-37); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((2-( 피리딘-2-일 ) 에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-38); (2S)-N-((3R,4S)-3-메톡시--((2S,4R)-4-메톡시-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((2-( 티오펜-2-일 ) 에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘--일 )-5-메틸--옥소헵탄-4-일)-N,3-디메틸-2-((S)-3- 메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (Ⅰ-39); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-2-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)- 4-히드록시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)- N,3-디메틸부탄아미드 (I-40); (2S)-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-2-((R,2R)-3-(((S)--(4-플루오로페닐 )--옥소프로판-2-일) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- 히드록시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸- -옥소헵탄-4-일 )-N,3-디메틸부탄아미드 (I-4); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-2-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)- 4-히드록시피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (I-42); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-2-((R,2R)-3-(((S)--(4-플루오로페닐)--옥소프로판 -2-일) 아미노 )--메톡시- 2-메틸-3-옥소프로필 )-4-히드록시피롤리딘--일)-3- 메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸- 2-( 메틸아미노 ) 부탄아미도 ) 부탄아미드 (I-43); (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-4-아미노-2-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸 ) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필 ) 피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)-N,3-디메틸부탄아미드 (I-44); 및 (2S)-N-((3R,4S)--((2S,4S)-2-((R,2R)-3-((2,6-디플루오로페네틸) 아미노 )--메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)-4- ( 메틸아미노 ) 피롤리딘--일 )-3-메톡시-5-메틸--옥소헵탄-4- 일 )-2-((S)-2-( 디메틸아미노 )-3-메틸부탄아미도)- N,3-디메틸부탄아미드 (I-45). [0090] 한편으로, 본발명은상기화학식 I 의돌라스타틴 0 유도체의제조방법에관한것으로, 본발명의제조방법은 하기화학식 II 의화합물과하기화학식 III 의화합물을축합반응시킨다음, 보호기가존재하는경우탈보호화 반응시키는단계를포함한다. - 4 -
공개특허 0-204-0038324 [009] [ 화학식 II] [0092] [0093] [ 화학식 III] [0094] [0095] [0096] [0097] [0098] 상기식에서, R 및 R 2 는각각독립적으로수소, C -C 4 의알킬기또는아미노보호기이고, R 3, R 4 및 R 5 는각각독립적으로수소또는 C -C 4 의알킬기이며, R 6 는수소, 보호화되거나되지않은히드록시, C -C 4 의알콕시기, 보호화되거나되지않은아미노, 옥소 (=O) 또 는히드록시이미노 (=N-OH) 이고, [0099] [000] [00] Ar 은아릴기이며, X 는탄소, 산소또는황이고, R 7 은 X 가탄소일때보호화되거나되지않은히드록시, 보호화되거나되지않은아미노, C -C 4 의알콕시기, 보호 화되거나되지않은 C -C 4 의알킬아미노기또는옥소 (=O) 이고, X 가산소또는황일때존재하지않는다. [002] [003] [004] [005] [006] [007] [008] [009] [00] [0] 아미노보호기로는 t-부톡시카르보닐 (t-boc), 카르보벤질옥시 (Cbz), 9-플루오레닐메톡시카르보닐 (Fmoc), 벤질 (Bn) 등을사용할수있으나이에한정되는것은아니다. 히드록시보호기로는 t-부틸디메틸실릴등을사용할수있으나이에한정되는것은아니다. 상기화학식 III의화합물은염의형태로사용할수있으며, 염산염, 트리플루오로아세트산 (TFA) 염등을포함하나이에한정되는것은아니다. 상기축합반응은축합제의존재하에수행될수있으며, 축합제로는디시클로헥실카르보디이미드 (DCC), 디페닐포스포릴아지드 (DPPA), 디에틸시아노포스포네이트 (DEPC), 벤조트리아졸--일-옥시- 트리스 ( 디메틸아미노 ) 포스포늄헥사플루오로포스페이트 (BOP 시약 ) 등을사용할수있으나이에한정되는것은아니다. 축합반응시필요하다면, 트리에틸아민또는디이소프로필에틸아민 (DIPEA) 과같은유기염기를축합제와함께사용할수있다. 반응용매로는클로로포름및디클로로메탄과같은할로겐화지방족탄화수소, 에틸아세테이트, 테트라히드로퓨란 (THF), 디메틸포름아미드 (DMF), 아세토니트릴등을사용할수있으며, 반응온도는바람직하게는 0 내지 50, 보다바람직하게는 0 내지상온이다. 아미노보호기의탈보호화반응은 0% 팔라듐카본또는 20% 수산화팔라듐을사용하여수행할수있다. 히드록시보호기의탈보호화반응은테트라부틸암모늄플루오라이드를사용하여수행할수있다. 상기화학식 II의화합물은공지된방법 [ 미국특허제5,654,399호 ; Tetrahedron Letters, Vol. 32, No. 2, pp 2395-2398] 에따라용이하게제조할수있다. 한편, 상기화학식 III의화합물은공지된방법 [Tetrahedron, Vol. 49, No. 9, pp. 93-924] 을변형하여하기반응식 I에따라제조할수있다. 하기반응식에기재된방법은대표적으로사용된방법을예시한것일뿐 - 5 -
공개특허 0-204-0038324 단위조작의순서, 반응시약, 반응조건등은경우에따라얼마든지변경될수있다. [02] [ 반응식 I] [03] [04] [05] [06] [07] [08] 상기식에서, R 4 및 R 5 는각각독립적으로수소또는 C -C 4 의알킬기이며, R 6 는수소, 보호화되거나되지않은히드록시, C -C 4 의알콕시기, 보호화되거나되지않은아미노, 옥소 (=O) 또 는히드록시이미노 (=N-OH) 이고, [09] [020] [02] Ar 은아릴기이며, X 는탄소, 산소또는황이고, R 7 은 X 가탄소일때보호화되거나되지않은히드록시, 보호화되거나되지않은아미노, C -C 4 의알콕시기, 보호 화되거나되지않은 C -C 4 의알킬아미노기또는옥소 (=O) 이고, X 가산소또는황일때존재하지않으며, [022] R 8 은 C -C 4 의알킬기이다. [023] [024] [025] [026] [027] 상기반응식 I에개시된바와같이, 화학식 IV의화합물과화학식 V의화합물에염기로트리에틸아민과루이스산으로디부틸보론트리플레이트를가하고반응시켜화학식 VI의화합물을합성한다. 이때염기와루이스산의첨가순서에따라화학식 VI의화합물의입체화학을조절할수있다. 그런다음, 생성된화학식 VI의화합물에,8-비스 ( 디메틸아미노 ) 나프탈렌 (proton sponge) 과트리메틸옥소늄테트라플루오로보레이트를가하여메틸화반응시켜화학식 VII의화합물을합성한다음, 과산화수소와수산화리튬을가하고반응시켜화학식 VIII의화합물을수득한다. 수득한화학식 VIII의화합물과화학식 IX의화합물을축합반응시키면화학식 X의화합물을합성할수있다. 상기화학식 IX의화합물은염의형태로사용할수있으며, 염산염, 트리플루오로아세트산 (TFA) 염등을포함하나이에한정되는것은아니다. 축합반응은화학식 II의화합물과화학식 III의화합물의축합반응과동일한시약및조건을사용하여수행할수있다. 그런다음, 화학식 X의화합물의아미노보호기를염산또는트리플루오로아세트산으로탈보호화반응시켜화학 - 6 -
공개특허 0-204-0038324 식 III 의화합물을제조한다. [028] [029] [030] [03] [032] 본발명의돌라스타틴 0 유도체는우수한항종양활성을나타낸다 ( 시험예 참조 ). 따라서, 본발명은상기화학식 I의돌라스타틴 0 유도체또는그의약제학적으로허용되는염을약제학적으로허용가능한담체와함께포함하는항암제, 특히유방암치료제에관한것이다. 본발명에따른항암제는경구적으로 ( 예를들면, 복용또는흡입 ) 또는비경구적으로 ( 예를들면, 주사, 침착, 이식, 좌약 ) 투여될수있으며, 주사는예를들면, 정맥주사, 피하주사, 근육내주사또는복강내주사일수있다. 본발명에따른항암제는투여경로에따라, 정제, 캡슐제, 과립제, 파인서브틸래 (fine subtilae), 분제, 설하정제, 좌약, 연고, 주사제, 유탁액제, 현탁액제, 시럽제, 분무제등으로제형화될수있다. 상기여러가지형태의본발명에따른항암제는각제형에통상적으로사용되는약제학적으로허용되는담체 (carrie r) 를사용하여공지기술에의해제조될수있다. 약제학적으로허용되는담체의예는부형제, 결합제, 붕해제 (disintegrating agent), 윤활제, 방부제, 항산화제, 등장제 (isotonic agent), 완충제, 피막제, 감미제, 용해제, 기제 (base), 분산제, 습윤제, 현탁화제, 안정제, 착색제등을포함한다. 본발명에따른항암제는약제의형태에따라다르지만, 본발명의화합물또는그의약제학적으로허용되는염을약 0.0 내지 95 중량 % 로포함한다. 본발명의항암제의구체적인투여량은치료되는사람을포함한포유동물의종류, 체중, 성별, 질환의정도, 의사의판단등에따라다를수있다. 바람직하게는, 경구투여의경우에는하루에체중 kg당활성성분 0.0 내지 50 mg이투여되고, 비경구투여의경우에는하루에체중 kg당활성성분 0.0 내지 0 mg이투여된다. 상기총일일투여량은질환의정도, 의사의판단등에따라한번에또는수회로나누어투여될수있다. [033] 발명의효과본발명의돌라스타틴 0 유도체는신규합성화합물로, 종양을치료하고, 종양의성장을늦추고, 종양의수적증가를방지하는데유용하게사용될수있다. 예를들어, 전악성 (premalignant) 및악성 (malignant) 세포에서종양의성장을억제또는방지하는데효과적이고, 암종 (carcinoma) 형성고형종양, 특히대장암, 폐암, 유방암, 위암, 자궁경부암, 방광암등의고형암뿐만아니라혈액암의치료에도유용하다. [034] 발명을실시하기위한구체적인내용 이하, 실시예에의해본발명을보다구체적으로설명하고자한다. 이들실시예는오직본발명을설명하기위 한것으로, 본발명의범위가이들실시예에국한되지않는다는것은당업자에게있어서자명하다. [035] [036] 제조예 : 화학식 Ⅳ 의화합물의제조 제조예 -: N-t- 부톡시카르보닐 -L- 프롤리날 (Ⅳ-) [037] [038] [039] [040] N-t-부톡시카르보닐-L-프롤리놀 (N-t-butoxycarbonyl-L-prolinol) (2 g, 9.9 mmol) 을디메틸설폭사이드 2 ml 에녹여 5~0 로온도를낮추고, 트리에틸아민 (4.8 ml, 34.7 mmol) 를넣은뒤 5~0 에서 5분간교반하였다. 생성된반응용액에삼산화황-피리딘복합체 (5.5 g, 34.7 mmol) 을 0 에서넣은뒤 2 시간동안교반하였다. 반응이종결되면반응혼합물에물 50 ml을넣고, 디클로로메탄 20 ml로 3 회추출하였다. 유기층을 50% 구연산수용액 50 ml, 물 50 ml 및포화탄산수소나트륨 50 ml로세척하였다. 그런다음, 무수황산마그네슘으로건조시키고, 감압농축시켜얻어진잔사를컬럼크로마토그래피로분리정제하여표제화합물.87 g (94%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.43~.46 (m, 9H), 2.8~.79 (m, 4H), 3.59~3.40 (m, 2H), 4.05~4.20 (m, H), - 7 -
공개특허 0-204-0038324 9.46~9.56 (s, H) [04] 제조예 -2: N-t- 부톡시카르보닐 - 트랜스 -4- 메톡시 -L- 프롤리날 (Ⅳ-2) [042] [043] [044] N-t- 부톡시카르보닐 -L- 프롤리놀대신에 N-t- 부톡시카르보닐 - 트랜스 -4- 메톡시 -L- 프롤리놀을사용하여제조예 - 과동일한방법으로표제화합물 40.8 g (97%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.45 (s, 9H),.96~.98 (m, H), 2.~2.2 (m, H), 3.29 (S, 3H), 3.5~3.53 (m, H), 3.7~3.73 (m, H), 3.93~3.94 (m, H), 4.9~4.29 (m, H), 9.43 (S, H) [045] 제조예 -3: N-t- 부톡시카르보닐 - 시스 -4- 메톡시 -L- 프롤리날 (Ⅳ-3) [046] [047] [048] N-t- 부톡시카르보닐 -L- 프롤리놀대신에 N-t- 부톡시카르보닐 - 시스 -4- 메톡시 -L- 프롤리놀을사용하여제조예 - 과 동일한방법으로표제화합물 6.94 g (65%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.43 (s, 9H), 2.04~2.7 (m, H), 2.7 (m, H), 3.24 (S, 3H), 3.43~3.47 (m, H), 3.56~3.7 (m, H), 3.89~3.9 (m, H), 4.05~4.8 (m, H), 9.5 (S, H) [049] 제조예 -4: N-t- 부톡시카르보닐 - 시스 -4-(t- 부틸디메틸실릴 ) 옥시 -L- 프롤리날 (Ⅳ-4) [050] [05] [052] N-t- 부톡시카르보닐 -L- 프롤리놀대신에 N-t- 부톡시카르보닐 - 시스 -4-(t- 부틸디메틸실릴 ) 옥시 -L- 프롤리놀을사용 하여제조예 - 과동일한방법으로표제화합물 3.8 g (52%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ 0.04 (s, 3H), 0.07 (s, 3H), 0.85 (s, 9H),.45 (s, 9H), 2.04~2.08 (m, H), 2.5~2.24 (m, H), 3.38~3.52 (m, 2H), 4.06~4.20 (m, H), 4.36~4.36 (m, H), 9.55 (s, H) [053] 제조예 -5: N-t- 부톡시카르보닐 - 트랜스 -4-(t- 부틸디메틸실릴 ) 옥시 -L- 프롤리날 (Ⅳ-5) [054] [055] N-t- 부톡시카르보닐 -L- 프롤리놀대신에 N-t- 부톡시카르보닐 - 트랜스 -4-(t- 부틸디메틸실릴 ) 옥시 -L- 프롤리놀을사 용하여제조예 - 과동일한방법으로표제화합물 9.64 g (66%) 을수득하였다. - 8 -
공개특허 0-204-0038324 [056] H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ 0.07 (s, 6H), 0.87 (s, 9H),.45 (s, 9H),.89~2.08 (m, 2H), 3.34~3.56 (m, 2H), 4.2~4.37 (m, 2H), 9.43 (S, H) [057] 제조예 -6: (S)-t- 부틸 4- 포르밀티아졸리딘 -3- 카르복실레이트 (Ⅳ-6) [058] [059] [060] N-t- 부톡시카르보닐 -L- 프롤리놀대신에 (R)-t- 부틸 -4-( 히드록시메틸 ) 티아졸리딘 -3- 카르복실레이트를사용하여 제조예 - 과동일한방법으로표제화합물 9.2 g (44%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.47 (s, 9H), 3.6~3.23 (m, 2H), 4.27~4.65 (m, 3H), 9.57 (s, H) [06] [062] 제조예 2: 화학식 VI 의화합물의제조 제조예 2-: (S)-t- 부틸 2-((R,2R)-- 히드록시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-((R)-2- 옥소 -4- 페닐옥사졸리딘 -3- 일 ) 프로필 ) 피롤리딘 -- 카르복실레이트 (Ⅵ-) [063] [064] [065] [066] [067] (R)-4-페닐-3-프로피오닐옥사졸리딘 -2-온 ((R)-4-phenyl-3-propionyloxazolidin-2-one) (605 mg, 2.7 mmol) 을디클로로메탄 8 ml에용해하고 0 로냉각하였다. 트리에틸아민 (0.5 ml, 3.7 mmol) 을가한후, 디부틸보론트리플레이트를적가하고 45 분간교반하였다. 생성된반응용액을 -78 로냉각한후제조예 -에서수득한화합물 (Ⅳ-) (500 mg, 2.5 mmol) 을디클로로메탄 5 ml에녹여적가하고 시간동안교반한후, 0 로승온하여 시간동안교반하고, 20~25 로승온하여 시간더교반하였다. 생성된반응용액에인산완충용액 (ph 7.2, 3 ml) 과메탄올 9 ml를가하여반응을종료시키고, 0 로냉각한후메탄올 : 33% 과산화수소 (2 :, 9 ml) 을적가하여 시간동안교반한후반응혼합액을감압농축하였다. 농축잔사를에테르로용해시킨후포화염화나트륨으로세척하고무수황산나트륨으로건조시킨후, 감압농축하여노란색오일을얻었다. 이를에틸아세테이트로재결정하여흰색고체의표제화합물 0.59 g (59%) 을수득하였다. MS (EI) m/z : 49 [M+H] + H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.0 (m, 3H),.39 (s, 9H),.67~.84 (m, 7H), 3.0 (m, H), 3.67~3.8 (m, 3H), 4.4 (m, H), 4.70 (m, H), 5.03 (m, H), 5.43 (m, H), 7.26~7.4 (m, 5H) [068] 제조예 2-2: (2S,4R)-t- 부틸 2-((R,2R)-- 히드록시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-((R)-2- 옥소 -4- 페닐옥사졸리딘 -3- 일 ) 프로 필 )-4- 메톡시피롤리딘 -- 카르복실레이트 (Ⅵ-2) [069] [070] 제조예 - 에서수득한화합물 (Ⅳ-) 대신에제조예 -2 에서수득한화합물 (Ⅳ-2) 을사용하여제조예 2- 과 동일한방법으로표제화합물 3.6 g (28%) 을수득하였다. - 9 -
공개특허 0-204-0038324 [07] H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.24 (m, 3H),.47 (m, 9H),.98 (m, H), 2.25 (m, H), 3.28 (s, 3H), 3.35 (m, H), 3.48 (m, 3H), 3.6 (m, H), 3.92~4.07 (m, 4H), 4.24 (m, H), 4.69 (m, H), 5.42 (m, H), 7.37 (m, 5H) [072] 제조예 2-3: (2S,4R)-t- 부틸 4-((t- 부틸디메틸실릴 ) 옥시 )-2-((R,2R)-- 히드록시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-((R)-2- 옥소 -4- 페닐옥사졸리딘 -3- 일 ) 프로필 ) 피롤리딘 -- 카르복실레이트 (Ⅵ-3) [073] [074] [075] 제조예 - 에서수득한화합물 (Ⅳ-) 대신에제조예 -5 에서수득한화합물 (Ⅳ-5) 을사용하여제조예 2- 과 동일한방법으로표제화합물 8.9 g (7%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ 0.05 (s, 6H), 0.86 (s, 9H),.22~.25 (m, 6H),.50 (s, 9H),.87 (m, H), 2.6~2.8 (m, H), 3.22~3.25(m, H), 3.43~3.45 (m, H), 3.6 (m, H), 3.9~3.92 (m, H), 4.3 (m,h), 4.25~4.27 (m,h), 4.33 (m,h), 4.66~4.70 (m, H), 5.4~5.45 (m, H), 7.26~7.39 (m,5h) [076] [077] 제조예 3: 화학식 Ⅶ 의화합물의제조 제조예 3-: (S)-t- 부틸 2-((R,2R)-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-((R)-2- 옥소 -4- 페닐옥사졸리딘 -3- 일 ) 프로필 ) 피 롤리딘 -- 카르복실레이트 (Ⅶ-) [078] [079] [080] [08] [082] 디클로로메탄 00 ml에제조예 2-에서수득한화합물 (Ⅵ-) (5 g, 2.0 mmol) 과 4 A 분자시브 (molecular sieves) 를가하여 5 분간상온에서교반하였다. 생성된반응용액을 0 로냉각한후프로톤스폰지 (proton sponge) (6.7 g, 3.0 mmol) 와트리메틸옥소늄테트라플루오로보레이트 (4.4 g, 30.0 mmol) 을가하고 2 시간동안교반한후, 20~25 로승온하여 46 시간동안교반하였다. 반응이종결되면셀라이트로여과하고감압농축하였다. 농축잔사를컬럼크로마토그래피 (n-헥산 : 에틸아세테이트 = 5 : ) 로분리정제하여표제화합물 5. g (57%) 을수득하였다. MS (EI) m/z : 433 [M+H] + H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.2 (m, 3H),.45 (m, 9H),.79~.9 (m, 3H), 3.20-3.55 (m, 5H), 3.80 (m, 2H), 4.09 (m, 2H), 4.24 (m, H), 4.66 (m, H), 5.43 (m, H), 7.36 (m, 5H) [083] 제조예 3-2: (2S,4R)-t- 부틸 4- 메톡시 -2-((R,2R)-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-((R)-2- 옥소 -4- 페닐옥사졸리딘 -3- 일 ) 프로필 ) 피롤리딘 -- 카르복실레이트 (Ⅶ-2) [084] - 20 -
공개특허 0-204-0038324 [085] [086] 제조예 2- 에서수득한화합물 (Ⅵ-) 대신에제조예 2-2 에서수득한화합물 (Ⅵ-2) 을사용하여제조예 3- 과 동일한방법으로표제화합물.6g (45%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.2 (m, 3H),.47 (m, 9H),.92 (m, H), 2.6 (m, H), 3.33 (m, 3H), 3.47 (m, 3H), 3.76-4.0 (m, 6H), 4.24 (m, H), 4.66 (m, H), 5.30-5.39 (m, H), 7.33 (m, 5H) [087] 제조예 3-3: (2S,4R)-t- 부틸 4-((t- 부틸디메틸실릴 ) 옥시 )-2-((R,2R)-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-((R)-2- 옥소 - 4- 페닐옥사졸리딘 -3- 일 ) 프로필 ) 피롤리딘 -- 카르복실레이트 (Ⅶ-3) [088] [089] [090] 제조예 2- 에서수득한화합물 (Ⅵ-) 대신에제조예 2-3 에서수득한화합물 (Ⅵ-3) 을사용하여제조예 3- 과 동일한방법으로표제화합물 6.5g (7%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ 0.05 (s, 6H), 0.86 (s, 9H),.8~.20 (d, 3H),.45~.49 (d, 9H),.87 (m, H), 2.6~2.8 (m, H), 3.29~3.30 (m, H), 3.4 (s, 3H), 3.69~3.80 (m, H), 3.89~3.93 (m, H), 3.99~4.07 (m, H), 4.23~4.26 (m,h), 4.38 (m,h), 4.63~4.66 (m, H), 5.38~5.49 (m, H), 7.26~7.39 (m,5h) [09] [092] 제조예 4: 화학식 Ⅷ 의화합물의제조 제조예 4-: (2R,3R)-3-((S)--(t- 부톡시카르보닐 ) 피롤리딘 -2- 일 )-3- 메톡시 -2- 메틸프로판산 (Ⅷ-) [093] [094] [095] [096] 제조예 3-에서수득한화합물 (Ⅶ-) (5.7 g, 3.2 mmol) 을테트라히드로퓨란 65 ml에녹인후 0 로냉각하고, 30% 과산화수소 (6.6 ml, 66.0 mmol) 와 0.4 N 수산화리튬 (66 ml, 26.4 mmol) 을가하고 3 시간동안교반하였다. M 아황산나트륨 (72.6 ml, 72.6 mmol) 을가하여반응을종결하고 20-25 에서 6시간동안교반한후, 0~5 로냉각된포화탄산수소나트륨과디클로로메탄으로추출하였다. 분리된물층을 N HCl을사용하여 ph 2가되도록조절하고에틸아세테이트로 3회추출하였다. 유기층을합하여무수황산마그네슘으로건조하고감압농축하여표제화합물 3.8 g (99%) 을수득하였다. 25 [α] D = -57 (c=, MeOH) [097] H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.28 (m, 3H),.45 (m, 9H),.75 (m, H),.95 (m, H), 2.50 (m, H), 3.25 (m, H), 3.45 (s, 3H), 3.97 (m, H), 3.80-3.98 (m, 2H),. (br, H) [098] 제조예 4-2: (2R,3R)-3-((2S,4R)--(t- 부톡시카르보닐 )-4- 메톡시피롤리딘 -2- 일 )-3- 메톡시 -2- 메틸프로판산 (Ⅷ- 2) - 2 -
공개특허 0-204-0038324 [099] [0200] [020] 제조예 3- 에서수득한화합물 (Ⅶ-) 대신에제조예 3-2 에서수득한화합물 (Ⅶ-2) 을사용하여제조예 4- 과 동일한방법으로표제화합물.5 g (93%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.28 (m, 3H),.47 (m, 9H),.99-2.55 (m, 4H), 3.30 (s, 3H), 3.46 (s, 3H), 3.55~4.5 (m, 4H) [0202] 제조예 4-3: (2R,3R)-3-((2R,4R)--(t- 부톡시카르보닐 )-4-((t- 부틸디메틸실릴 ) 옥시 ) 피롤리딘 -2- 일 )-3- 메톡시 - 2- 메틸프로판산 (Ⅷ-3) [0203] [0204] [0205] 제조예 3- 에서수득한화합물 (Ⅶ-) 대신에제조예 3-3 에서수득한화합물 (Ⅶ-3) 을사용하여제조예 4- 과 동일한방법으로표제화합물.04 g (00%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ 0.05 (s, 6H), 0.86 (s, 9H),.26 (d, 3H),.48 (s, 9H),.84 (m, H), 2.07 (m, H), 2.45~2.57 (m, H), 3.27~3.30 (m, H), 3.34~3.53 (m, H), 3.46 (S, 3H), 3.86~3.87 (m, H), 4.05 (m, H), 4.37 (m, H) [0206] 제조예 4-4: (2R,3R)-3-((2S,4S)--(t- 부톡시카르보닐 )-4- 히드록시피롤리딘 -2- 일 )-3- 메톡시 -2- 메틸프로판산 (Ⅷ-4) [0207] [0208] [0209] [020] 제조예 3-3에서수득한화합물 (Ⅶ-3) (6.4g,.55mmol) 을테트라히드로퓨란 50ml에용해하고피리딘히드로플루오라이드 (.0ml, 69.3mmol) 을서서히가한후 20 ~ 25 에서 3시간동안교반하였다. 반응이종결되면반응혼합물에포화탄산수소나트륨수용액 50 ml을넣고, 에틸아세테이트 50 ml로추출하였다. 유기층을 N 염산 50 ml로세척한후, 무수황산나트륨으로건조시키고, 감압농축하여 (2S,4R)-t-부틸 4-히드록시-2-((R,2R)-- 메톡시-2-메틸-3-옥소-3-((R)-2-옥소-4- 페닐옥사졸리딘-3-일 ) 프로필 ) 피롤리딘--카르복실레이트 5.4g(04%) 을수득하였다. 반응농축잔사를아르곤기류하에서테트라히드로퓨란 20ml에용해하고트리페닐포스핀 (4.7g, 7.75mmol) 을넣고 0 ~ 5 로냉각하였다. 반응용액에포름산 (0.67ml, 7.75mmol) 을넣고디이소프로필아조디카르복실레이트 (3.5g, 7.75mmol) 를서서히적가한후 0 ~ 5 에서 30분동안교반하였다. 20 ~ 25 에서 6시간동안더교반한후반응이완료되면반응용액을감압농축하여 (2S,4S)-t-부틸 4-( 포밀옥시 )-2-((R,2R)--메톡시-2- 메틸-3-옥소-3-((R)-2-옥소-4-페닐옥사졸리딘 -3-일) 프로필 ) 피롤리딘--카르복실레이트를수득하였다. 반응농축잔사를 0 ~ 5 로냉각하고과산화수소수 (.ml, 5.5mmol) 을서서히적가한후 M 수산화리튬수용액 (2.42g, 57.8mmol) 을서서히첨가하였다. 반응용액을 0 ~ 5 에서 4시간동안교반하고테트라히드로퓨란을감압농축하고농축잔사에디클로로메탄 00ml과물 00ml을넣고추출하였다. 분리된물층은 N 염산으로 ph 2로조절하여에틸아세테이트 00ml로 2회추출하였다. 유기층을합하여무수황산마그네슘으로건조하고감 - 22 -
공개특허 0-204-0038324 압농축하여표제화합물 3.8 g (9%) 을수득하였다. [02] H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.34 (d, 3H, J = 7.2 Hz),.47 (m, 9H),.97~2.00 (m, H), 2.9~2.23 (m, H), 2.54~2.57 (m, H), 3.40~3.59 (m, 2H), 3.49 (s, 3H), 3.87~3.99 (m, H), 4.08~4.5 (m, H), 4.24~4.28 (m, H) [022] LC-MS m/z : 302.[M-H] [023] 제조예 4-5: (2R,3R)-3-((2S,4S)-4- 아지도 --(t- 부톡시카르보닐 ) 피롤리딘 -2- 일 )-3- 메톡시 -2- 메틸프로판산 (Ⅷ- 5) [024] [025] [026] 디이소프로필아조디카르복실레이트대신에디페닐포스포릴아지드를사용하여제조예 4-4 와동일한방법으로 표제화합물 4.94g (90%) 을수득하였다. [α] D 25 = -3.6 (c=, MeOH) [027] H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.28 (d, 3H, J = 6.8 Hz),.47 (s, 9H), 2.05 (m, H), 2.23~2.30 (m, H), 2.46~2.48 (m, H), 3.05 (m, H), 3.48 (s, 3H), 3.88~3.04 (m, 3H) [028] 제조예 4-6: (2R,3R)-3-((S)-3-(t- 부톡시카르보닐 ) 티아졸리딘 -4- 일 )-3- 메톡시 -2- 메틸프로판산 (Ⅷ-6) [029] [0220] [022] 제조예 3-에서수득한화합물 (Ⅶ-) 대신에 (R)-t-부틸-4-((R,2R)--메톡시-2-메틸-3-옥소-3-((R)-2- 옥소- 4-페닐옥사졸리딘-3-일 ) 프로필 ) 티아졸리딘-3-카르복실레이트를사용하여제조예 4-과동일한방법으로표제화합물 0.89 g (00%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.7~.25 (d, 3H),.47 (s, 9H), 2.65~3.2 (m, 4H), 3.42 (S, 3H), 3.77~4.8 (m, 2H), 4.6~4.2 (m, 2H) [0222] [0223] 제조예 5: 화학식 IX 의화합물의제조 제조예 5-: 2-(2,6- 디플루오로페닐 ) 에탄아민 (Ⅸ-) [0224] [0225] [0226] 수소화붕소칼륨 (3.29 g, 6.2 mmol) 과라니니켈 (0.897 g, 5.28 mmol) 을무수에탄올 50 ml에녹이고교반하는동안 2-(2,6-디플루오로페닐 ) 아세토니트릴 (2.34 g, 5.28 mmol) 을가한후상온에서 5 시간동안강렬하게교반하였다. 반응이종결되면반응혼합물을셀라이트로여과하고감압하에서용매를제거한후, 잔사에에테르와물을가하여추출하고소금물로세척하였다. 유기층을무수황산마그네슘으로건조한후용매를제거하여진한노란색 - 23 -
공개특허 0-204-0038324 오일의표제화합물을수득하였다. [0227] H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ 2.88 (m, 2H), 2.98 (m, 2H), 5. (br, H), 7.32(m, 2H), 7.59 (m, H) [0228] 제조예 5-2: 2-(3- 플루오로페닐 ) 에탄아민 (Ⅸ-2) [0229] [0230] [023] 2-(2,6- 디플루오로페닐 ) 아세토니트릴대신에 2-(3- 플루오로페닐 ) 아세토니트릴을사용하여제조예 5- 과동일한 방법으로표제화합물을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ 2.88 (m, 2H), 2.98 (m, 2H), 5. (br, H), 6.83 (m, H), 7.06 (m, 2H), 7.38 (m, H) [0232] 제조예 5-3: 2-(2,4- 디클로로 -5- 플루오로페닐 ) 에탄아민 (Ⅸ-3) [0233] [0234] [0235] 2-(2,6- 디플루오로페닐 ) 아세토니트릴대신에 2-(2,4- 디클로로 -5- 플루오로페닐 ) 아세토니트릴을사용하여제조예 5- 과동일한방법으로표제화합물을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ 2.83 (m, 2H), 2.98 (m, 2H), 5. (br, H), 6.7 (m, H), 7.62 (m, H) [0236] 제조예 5-4: 2- 아미노 --(2- 플루오로 -4- 메톡시페닐 ) 에타논 (Ⅸ-4) [0237] [0238] [0239] [0240] 2-아지도--(2-플루오로-4-메톡시페닐 ) 에타논 (2-azido--(2-fluoro-4-methoxyphenyl)ethanone) (4.80 g, 25.36 mmol) 을테트라히드로퓨란 00 ml에녹이고트리페닐포스핀 (6.65 g, 25.36 mmol) 과 p-톨루엔설폰산 (4.5 g, 76. mmol) 를가한후상온에서 6 시간동안교반하였다. 반응이종결되면얻어진고체를여과하고냉각된테트라히드로퓨란으로세척한다음 35 에서건조한후흰색고체의표제화합물 5.2 g (6%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ 3.83 (s, 3H), 4.33 (s, 2H), 6.92 (m, H), 7.06 (m, H), 7.88 (m, H), 7.9 (m, 2H), 8.7 (br, H) [024] 제조예 5-5: (R)-t- 부틸 [-(4- 메톡시페닐 )-- 옥소프로판 -2- 일 ] 카바메이트 (Ⅸ-5) [0242] [0243] (R)-t- 부틸 (-( 메톡시 ( 메틸 ) 아미노 )-- 옥소프로판 -2- 일 ) 카바메이트 (5.0 g, 2.5 mmol) 를테트라히드로퓨란 50 ml 에용해하고반응온도를 -20 로냉각하였다. 생성된반응용액에테트라히드로퓨란 00 ml 에마그네슘 (2. g, 86. mmol), 4- 메톡시브로모벤젠 (6. g, 86. mmol) 과촉매량의요오드를넣고교반하여제조된 4- 메톡시 - 24 -
공개특허 0-204-0038324 페닐마그네슘브로마이드 (4-methoxyphenylmagenesium bromide) 를천천히적가한후 20~25 에서 6 시간동안 교반하였다. [0244] [0245] 반응이완결되면 N 염산수용액 00 ml를가한후, 층을분리하였다. 물층을에틸아세테이트 00 ml로 3회추출한후, 유기층을모두합하여무수황산마그네슘으로건조시키고감압농축시켰다. 농축된잔류물을컬럼크로마토그래피로분리정제하여표제화합물 6.2 g (66.2%) 를수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ.40 (d, 3H),.46 (s, 9H), 3.88 (s, 3H), 5.24 (m, H), 5.62 (br, H), 6.96 (d, 2H), 7.96 (d, 2H) [0246] 제조예 5-6: (R)-t- 부틸 [-(2- 메톡시페닐 )-- 옥소프로판 -2- 일 ] 카바메이트 (Ⅸ-6) [0247] [0248] [0249] 4- 메톡시브로모벤젠대신에 2- 메톡시브로모벤젠을사용하여제조예 5-5 와동일한방법으로표제화합물 2.3 g (75.9%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ.32 (d, 3H),.45 (s, 9H), 3.92 (s, 3H), 5.32 (m, H), 5.59 (br, H), 7.0 (m, 2H), 7.49 (m, H), 7.76 (m, H) [0250] 제조예 5-7: (S)-t- 부틸 (-(3,5- 디플루오로페닐 )-- 옥소프로판 -2- 일 ) 카바메이트 (Ⅸ-7) [025] [0252] [0253] (R)-t-부틸(-( 메톡시 ( 메틸 ) 아미노 )--옥소프로판-2-일) 카바메이트대신에 (S)-t-부틸(-( 메톡시 ( 메틸 ) 아미노 )- -옥소프로판-2-일 ) 카바메이트를사용하고, 4-메톡시브로모벤젠대신에 -브로모-3,5-디플루오로벤젠을사용하여제조예 5-5와동일한방법으로표제화합물.3 g (46%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ.40 (d, J = 7.2Hz, 3H),.46 (s, 9H), 5.5~5.9 (m, H), 5.4~5.43 (m, H), 7.03~7.08 (m, H), 7.48~7.50 (m, 2H) [0254] 제조예 5-8: (R)-t- 부틸 (-(2,6- 디플루오로페닐 )-- 옥소프로판 -2- 일 ) 카바메이트 (Ⅸ-8) [0255] [0256] [0257] 4- 메톡시브로모벤젠대신에 - 브로모 -2,6- 디플루오로벤젠을사용하여제조예 5-5 와동일한방법으로표제화합물 0.6 g (0%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ.39 (d, J = 7.2Hz, 3H),.4 (s, 9H), 4.87~5.9 (m, H), 5.30~5.3 (m, H), 6.94~7.0 (m, 2H), 7.39~7.46 (m, H) - 25 -
공개특허 0-204-0038324 [0258] 제조예 5-9: (S)-t- 부틸 (-(2,6- 디플루오로페닐 )-- 옥소프로판 -2- 일 ) 카바메이트 (Ⅸ-9) [0259] [0260] [026] (R)-t-부틸(-( 메톡시 ( 메틸 ) 아미노 )--옥소프로판-2-일) 카바메이트대신에 (S)-t-부틸(-( 메톡시 ( 메틸 ) 아미노 )- -옥소프로판-2-일 ) 카바메이트를사용하고, 4-메톡시브로모벤젠대신에 -브로모-2,6-디플루오로벤젠을사용하여제조예 5-5와동일한방법으로표제화합물 0.26 g (7%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ.39 (d, J = 7.2Hz, 3H),.4 (s, 9H), 4.83~4.87 (m, H), 5.30~5.3 (m, H), 6.94~6.99 (m, 2H), 7.39~7.46 (m, H) [0262] 제조예 5-0: (R)-t- 부틸 [-(3- 메톡시페닐 )-- 옥소프로판 -2- 일 ] 카바메이트 (Ⅸ-0) [0263] [0264] [0265] 4- 메톡시브로모벤젠대신에 3- 메톡시브로모벤젠을사용하여제조예 5-5 와동일한방법으로표제화합물 2.56 g (7%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ.32 (d, 3H),.45 (s, 9H), 3.94 (s, 3H), 5.32 (m, H), 5.6 (br, H), 7.2 (m, 3H), 7.62 (m, H) [0266] 제조예 5-: (R)-t- 부틸 [-( 히드록시이미노 )--(3- 메톡시페닐 ) 프로판 -2- 일 ] 카바메이트 (Ⅸ-) [0267] [0268] 제조예 5-0 에서수득한화합물 (IX-0) (0.3 g,. mmol) 과히드록실아민염산염 (0.8 g, 2.7 mmol) 및아 세트산나트륨 (0.2 g, 2.7 mmol) 을에탄올과물 (5/) 혼합용액 5 ml 에녹인후, 3 시간동안가열환류시켰다. [0269] [0270] 반응이완결되면 20~25 로냉각시킨후, 포화탄산나트륨수용액.3 ml를가하여중화하고감압증류하여농축시켰다. 농축잔류물을물 5 ml와에틸아세테이트 20 ml에용해시킨후층을분리하고, 물층을에틸아세테이트 20 ml로 3회추출하였다. 유기층을모두합하여무수황산마그네슘으로건조시키고감압농축하였다. 농축된잔류물을컬럼크로마토그래피로정제하여 E, Z-이성질체혼합비가 : 2인표제화합물 0.27 g (85.2%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ.39 (s, 9H),.43 (m, 3H), 3.78 (s, 3H), 4.69 (m, H), 5.26 (br, H), 7.33~6.89 (m, 4H) (E- 이성질체 ) [027] H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ.39 (s, 9H),.43 (m, 3H), 3.78 (s, 3H), 5.05 (m, H), 5.82 (br, H), 7.33~6.89 (m, 4H) (Z- 이성질체 ) - 26 -
공개특허 0-204-0038324 [0272] 제조예 5-2: t- 부틸 ((2R)-- 아미노 -- 페닐프로판 -2- 일 )- 카바메이트 (Ⅸ-2) [0273] [0274] [0275] [0276] 진공후아르곤을채운반응용기에 (R)-t-부틸 [-페닐--옥소프로판-2-일] 카바메이트 0.75 g (3.0 mmol) 과염화암모늄염 0.24 g (4.5 mmol) 을넣고, 건조된테트라히드로퓨란 5 ml와트리에틸아민 0.63 ml (4.5 mmol) 를넣은다음, 티타늄테트라이소프로폭사이드.32 ml (4.5 mmol) 를첨가한뒤실온에서 8~0 시간동안교반하였다. 반응용액에암모늄보란화합물을첨가하고다시 8~0 시간동안교반하였다. M 암모니아수용액 5 ml와에테르 5 ml를넣어추출한뒤유기층을 M 염산수용액 9 ml로세척하였다. 수용액층을 M 수산화나트륨수용액을사용하여 ph 7~8로만든뒤에테르 5 ml를넣고추출하였다. 유기층을소금물로씻어주고무수황산나트륨으로건조시킨후감압농축하여표제화합물 0.096 g (7%) 를수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ 0.95 (d, H),.02 (d, 3H),.20 (d, H),.46 (s, 9H), 7.26~7.34 (m, 5H) [0277] 제조예 5-3: 벤질 t- 부틸 ((2R)-- 페닐프로판 -,2- 디일 ) 디카바메이트 (Ⅸ-3) [0278] [0279] [0280] 제조예 5-2에서수득한화합물 (IX-2) 0.37 g (.47 mmol) 에디클로로메탄 5 ml와트리에틸아민 0.45 ml (3.23 mmol) 를가한후, 0 에서벤질클로로포메이트를천천히첨가한다음실온에서 2~8 시간동안교반하였다. 물과에틸아세테이트를혼합하여추출한후무수황산나트륨으로건조시키고감압농축하여표제화합물 0.37 g (49%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ.09 (d, 3H),.42 (s, 9H), 3.93~4.42 (m, 2H), 4.70~4.75 (m, H) 4.97~5.7 (m, 2H), 6.02~6.33 (d, H), 6.92~7.34 (m, 5H) [028] 제조예 5-4: t- 부틸 ((2S)-- 아미노 -- 페닐프로판 -2- 일 ) 카바메이트 (Ⅸ-4) [0282] [0283] [0284] (R)-t- 부틸 [- 페닐 -- 옥소프로판 -2- 일 ] 카바메이트대신에 (S)-t- 부틸 [- 페닐 -- 옥소프로판 -2- 일 ] 카바메이트를 사용하여제조예 5-2 와동일한방법으로표제화합물 0.5 g (67%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ 0.95 (d, H),.0 (d, 3H),.20 (d, H),.45 (s, 9H), 7.24~7.34 (m, 5H) [0285] 제조예 5-5: 벤질 t- 부틸 ((2S)-- 페닐프로판 -,2- 디일 ) 디카바메이트 (Ⅸ-5) [0286] [0287] 제조예 5-2 에서수득한화합물 (IX-2) 대신에제조예 5-4 에서수득한화합물 (IX-4) 을사용하여제조예 5-3 과동일한방법으로표제화합물 0.22 g (28%) 을수득하였다. - 27 -
공개특허 0-204-0038324 [0288] H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ 0.98 (d, 3H),.40 (s, 9H), 3.93~4.4 (m, H), 4.68~4.73 (m, H), 4.97~5.8 (m, 2H), 6.03~6.33 (d, H), 7.2~7.52 (m, 5H) [0289] [0290] 제조예 6: 화학식 X 의화합물의제조 제조예 6-: (2R,4R)-t- 부틸 2-((R,2R)-3-((2,6- 디플루오로페네틸 ) 아미노 )-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소프로필 )-4- 메톡시피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-) [029] [0292] [0293] [0294] 제조예 4-2에서수득한화합물 (Ⅷ-2) (.00 g, 3.48 mmol) 을디메틸포름아미드 0 ml에녹이고 0 에서제조예 5-에서수득한화합물 (IX-) (0.66 g, 4.8 mmol) 을적가한후, 디이소프로필에틸아민 (.73 ml, 0.44 mmol) 과벤조트리아졸--일-옥시- 트리스 ( 디메틸아미노 ) 포스포늄헥사플루오로포스페이트 (.54 g, 3.48 mmol) 를가하고 20~25 에서 6 시간동안교반하였다. 반응이종결되면반응용매를감압농축하고에틸아세테이트에용해시킨다음, 물로 2회추출한후소금물로세척하였다. 유기층을무수황산마그네슘으로건조시키고감압농축한후, 농축잔류물을컬럼크로마토그래피 ( 에틸아세테이트 : 헥산 = : 3 에틸아세테이트 : 헥산 = : ) 로정제하여흰색의표제화합물.3 g (85%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.22 (d, 3H),.46 (s, 9H),.65~.86 (m, 4H), 2.33~3.37 (m, H), 2.82 (t, 2H), 3.22~3.24 (m, H), 3.29 (s, 3H), 3.4 (s, 3H), 3.48~3.55 (m, 2H), 3.75~3.83 (m, 2H), 5.77~6.5 (m, H), 6.65~6.74 (m, 3H) [0295] 제조예 6-2: (2R,4R)-t- 부틸 2-((R,2R)-3-((2,4- 디클로로 -5- 플루오로페네틸 ) 아미노 )-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 프로필 )-4- 메톡시피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-2) [0296] [0297] [0298] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에제조예 5-3 에서수득한화합물 (IX-3) 을사용하여제조예 6- 과 동일한방법으로표제화합물 0.65 g (78%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.25 (d, 3H),.49 (s, 9H),.67~.88 (m, 4H), 2.33~3.35 (m, H), 2.94 (t, 2H), 3.23 (m, H), 3.24 (s, 3H), 3.4 (s, 3H), 3.46~3.52 (m, 2H), 3.77~3.82 (m, 2H), 5.79~6.58 (m, H), 7.0 (m, H), 7.40 (m, H) [0299] 제조예 6-3: (2R,4R)-t- 부틸 2-((R,2R)-3-((3- 플루오로페네틸 ) 아미노 )-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소프로필 )-4- 메톡 시피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-3) [0300] - 28 -
공개특허 0-204-0038324 [030] [0302] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에제조예 5-2 에서수득한화합물 (IX-2) 을사용하여제조예 6- 과 동일한방법으로표제화합물 0.65 g (95%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.24 (m, 3H),.48 (s, 9H),.68 (m, 3H),.85 (m, 2H), 2.34 (m, H), 2.83 (t, 2H), 3.20~3.4 (m, H), 3.29 (s, 3H), 3.43 (s, 3H), 3.5~3.56 (m, 2H), 3.66~3.83 (m, 2H), 5.7~6.38 (m, H), 6.92 (d, H), 6.99 (d, H), 7.24 (m, 2H) [0303] 제조예 6-4: (2R,4R)-t- 부틸 2-((R,2R)-3-((4- 플루오로페네틸 ) 아미노 )-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소프로필 )-4- 메톡 시피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-4) [0304] [0305] [0306] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에 2-(4- 플루오로페닐 ) 에탄아민을사용하여제조예 6- 과동일한방 법으로표제화합물 0.66 g (93%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.24 (m, 3H),.49 (s, 9H),.65 (m, 3H),.76 (m, 2H), 2.32 (m, H), 2.80 (t, 2H), 3.22 (m, H), 3.23 (s, 3H), 3.27 (s, 3H), 3.43 (s, 3H), 3.48~3.55 (m, 2H), 3.72~3.82 (m, 2H), 5.68~6.32 (m, H), 6.97 (s, 2H), 7.6 (d, 2H) [0307] 제조예 6-5: (2R,4R)-t- 부틸 4-((t- 부틸디메틸실릴 ) 옥시 )-2-((R,2R)-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-( 페네틸아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘 -- 카르복실 레이트 (X-5) [0308] [0309] [030] 제조예 4-2에서수득한화합물 (Ⅷ-2) 대신에제조예 4-3에서수득한화합물 (Ⅷ-3) 을사용하고, 제조예 5-에서수득한화합물 (IX-) 대신에 2-페네타민을사용하여제조예 6-과동일한방법으로표제화합물 0.7g (95 %) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 0.04 (s, 6H), 0.85(s, 9H),.09(m, 3H),.46 (s, 9H),.70~2.82 (m, 3H), 3.26~3.33 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.74 (m, 2H), 3.86~4.3 (m, 4H), 5.70~6.25 (m, 2H), 7.2~7.30(m, 5H) [03] 제조예 6-6: (R)-t- 부틸 2-((R,2R)-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-( 페네틸아미노 ) 프로필 )-4- 옥소피롤리딘 -- 카르복 실레이트 (X-6) [032] [033] [034] 제조예 4-2에서수득한화합물 (Ⅷ-2) 대신에 (2R,3R)-3-((R)--(t-부톡시카르보닐)-4-옥소피롤리딘 -2-일)-3-메톡시-2-메틸프로피온산을사용하고, 제조예 5-에서수득한화합물 (IX-) 대신에 2-페네타민을사용하여제조예 6-과동일한방법으로표제화합물 0.33 g (85%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.08~.7 (m, 3H),.20~.27 (m, 2H),.57 (s, 9H),.73 (m, H),.99~2.06 (m, H), 2.39~2.56 (m, 2H), 2.79~2.88 (m, 2H), 3.34 (s, 3H), 3.47~3.67 (m, 2H), 3.72~3.97 (m, 3H), - 29 -
공개특허 0-204-0038324 4.3~4.4 (m, H), 5.67~5.8 (m, 2H), 7.06~7.43 (m, 5H) [035] 제조예 6-7: (2R,4R)-t- 부틸 2-((R,2R)-3-((2-(2- 플루오로 -4- 메톡시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 아미노 )-- 메톡시 -2- 메 틸 -3- 옥소프로필 )-4- 메톡시피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-7) [036] [037] [038] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에제조예 5-4 에서수득한화합물 (IX-4) 을사용하여제조예 6- 과 동일한방법으로표제화합물 0.87 g (93%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.24 (m, 3H),.46 (s. 9H),.67~.92 (m, 4H), 2.4~2.45 (m. H), 3.9~3.2 (m, H), 3.28 (s, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.78 (m, H), 3.85 (s, 3H), 3.92 (m, H), 4.60 (s, 2H), 6.77 (m, 2H), 7.95 (m, H) [039] 제조예 6-8: (2S,4R)-t- 부틸 4- 메톡시 -2-((R,2R)-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-((2- 옥소 -2- 페닐에틸 ) 아미노 ) 프로 필 ) 피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-8) [0320] [032] [0322] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에 2- 아미노 -- 페닐에타논을사용하여제조예 6- 과동일한방법으로 표제화합물.7 g (93%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.27 (d, 3H),.49 (s, 9H),.68~.73 (m, H),.82~.95 (m, 3H), 2.5 (m, H), 3.2~3.27 (m, H), 3.29 (s, 3H), 3.38~3.65 (m, H), 3.48 (s, 3H), 3.82~3.99 (m, 2H), 4.7 (S, 2H), 7.5 (m, 2H), 7.6 (m, H), 7.97 (d, H) [0323] 제조예 6-9: (2S,4R)-t- 부틸 4- 메톡시 -2-((R,2R)-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-((2- 옥소 -2-(p- 톨릴 ) 에틸 ) 아미 노 ) 프로필 ) 피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-9) [0324] [0325] [0326] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에 2- 아미노 --(p- 톨릴 ) 에타논을사용하여제조예 6- 과동일한방법 으로표제화합물 0.33 g (8%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.25 (m, 3H),.47 (s. 9H),.7~.95 (m, 4H), 2.43 (s. 3H), 2.47~2.55 (m. H), 3.2~3.27 (m, H), 3.39~3.42 (m, H), 3.48 (s, 3H), 3.8 (m, H), 3.92~3.96 (m, H), 4.73 (s, 2H), 7.30 (d, J = 8.0Hz, 2H), 7.88 (d, J = 8.0Hz, 2H) [0327] 제조예 6-0: (2S,4R)-t- 부틸 2-((R,2R)-3-((2-(4- 플루오로페닐 )-2- 옥소에틸 ) 아미노 )-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 프로필 )-4- 메톡시피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-0) - 30 -
공개특허 0-204-0038324 [0328] [0329] [0330] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에 2- 아미노 --(4- 플루오로페닐 ) 에타논을사용하여제조예 6- 과동 일한방법으로표제화합물 0.56 g (8%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.26~.33 (m, 3H),.49 (s, 9H),.69~.95 (m, 4H), 2.48~2.56 (m, H), 3.2~3.27 (m, H), 3.29 (s, 3H), 3.43~3.47 (m, H), 3.48 (s, 3H), 3.80~3.82 (m, H), 3.92~3.98 (m, H), 4.73 (s, 2H), 7.6 (m, 2H), 8.0~8.02 (m, 2H) [033] 제조예 6-: (2R,4S)-t- 부틸 4- 메톡시 -2-((R,2R)-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-( 페네틸아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘 - - 카르복실레이트 (X-) [0332] [0333] [0334] 제조예 4-2에서수득한화합물 (Ⅷ-2) 대신에 (2R,3R)-3-((2R,4S)--(t-부톡시카르보닐)-4-메톡시피롤리딘 -2-일)-3-메톡시-2-메틸프로피온산을사용하고, 제조예 5-에서수득한화합물 (IX-) 대신에 2-페네타민을사용하여제조예 6-과동일한방법으로표제화합물 0.26 g (6%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.8 (d, 3H),.47 (s, 9H),.94~2.0 (m, 4H), 2.26~2.38 (m, H), 2.83 (t, 2H), 2.98 (m, H), 3.32 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.48~3.52 (m, 2H), 3.73~3.79 (m, 2H), 5.67~6.07 (m, H), 6.99~7.32 (m, 4H) [0335] 제조예 6-2: (2S,4R)-t- 부틸 2-((R,2R)-3-((2- 히드록시 -2- 페닐에틸 ) 아미노 )-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소프로필 )- 4- 메톡시피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-2) [0336] [0337] [0338] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에 2- 아미노 -- 페닐에타놀을사용하여제조예 6- 과동일한방법으로 표제화합물 0.43 g (00%) 을수득하였다. H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ.23~.3 (m, 3H),.49 (s, 9H),.73~.99 (m, 4H), 2.34~2.4 (m, H), 3.06~3.43 (m, 3H), 3.29 (s, 3H), 3.45 (s, 3H), 3.52~4.84 (m, 4H), 4.33~4.99 (m, 2H), 7.28~7.45 (m, 5H) [0339] 제조예 6-3: (2S,4R)-t- 부틸 2-(6R,9R,0R)-6,9- 디메틸 -3,8- 디옥소 -,5- 디페닐 -2,- 디옥사 -4,7- 디아자도데칸 -0- 일 )-4- 메톡시피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-3) - 3 -
공개특허 0-204-0038324 [0340] [034] [0342] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에제조예 5-3 에서수득한화합물 (IX-3) 을사용하여제조예 6- 과 동일한방법으로표제화합물 68 mg (39%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ 0.98~.28 (m, 7H),.43 (s, 9H),.7~2.29 (m, 4H), 3.2~3.30 (m, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 3.72~3.75 (m, 2H), 4.33~4.69 (m, H), 5.0 (s, 2H), 5.82~6.3 (m, H), 6.46~7.0 (m, H), 7.2~7.40 (m, 0H) [0343] 제조예 6-4: (2S,4R)-t- 부틸 2-(6S,9R,0R)-6,9- 디메틸 -3,8- 디옥소 -,5- 디페닐 -2,- 디옥사 -4,7- 디아자도데칸 -0- 일 )-4- 메톡시피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-4) [0344] [0345] [0346] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에제조예 5-5 에서수득한화합물 (IX-5) 을사용하여제조예 6- 과 동일한방법으로표제화합물 0.3 g (73%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ 0.98~.26 (m, 7H),.40 (s, 9H),.7~2.29 (m, 4H), 3.20~3.26 (m, 2H), 3.29 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.46~3.72 (m, 2H), 4.28~4.43 (m, H), 5.0 (s, 2H), 5.82~6.3 (m, H), 6.46~7.0 (m, H), 7.2~7.40 (m, 0H) [0347] 제조예 6-5: (2S,4R)-t- 부틸 4- 메톡시 -2-((R,2R)-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-((2-( 피리딘 -2- 일 ) 에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-5) [0348] [0349] [0350] 제조예 5- 에서수득한화합물 (IX-) 대신에 2-( 피리딘 -2- 일 ) 에틸아민을사용하여제조예 6- 과동일한방법으 로표제화합물 0.5 g (64%) 을수득하였다. H NMR (400MHz, CDCl3 ): δ.20 (s, 3H),.47 (d, J = 6.8Hz, 9H),.7 (m, 2H),.72 (m, 2H),.99 (s,.h), 2.3 (m, H), 3.00 (t, 2H), 3.2 (t, H), 3.27 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.53~3.84 (m, 4H), 7.6 (t, 2H), 7.6 (t, H), 8.52 (m, H) [035] 제조예 6-6: (2S,4R)-t- 부틸 4- 메톡시 -2-((R,2R)-- 메톡시 -2- 메틸 -3- 옥소 -3-((2-( 티오펜 -2- 일 ) 에틸 ) 아미노 ) 프로필 ) 피롤리딘 -- 카르복실레이트 (X-6) [0352] - 32 -