시체( 柿蔕 ) 의약리학적효능및임상연구에대한고찰 박정환선임연구원 한국한의학연구원미래의학부 Review on pharmacological efficacy and clinical study of the calyx of Diospyros kaki Jeong Hwan Park Future Medicine Division, Korea Institute of Oriental Medicine, Daejeon 34054, Republic of Korea Abstract The calyx of Diospyros kaki has been known to be effective for the treatment of intractable hiccups for a long time in Korea medicine. In this review, we provide a summary of the latest pharmacological efficacy and clinical study of the calyx of Diospyros kaki. Seven electronic databases, including those in English (PubMed), Korean (KMbase, KoreaMED, NDSL, OASIS), Chinese (CNKI), and Japanese (J-STAGE), were systematically searched. Twenty-five studies, including 21 pharmacological efficacy studies and four clinical studies, were evaluated. The calyx of Diospyros kaki showed antioxidant, anti-inflammatory, anticoagulant, anti-thrombotic, anti-cancer, antimicrobial, anti-genotoxic, tyrosinase inhibitory, elastase inhibitory, and diaphragm contraction inhibitory effect. Antioxidant components of the calyx of Diospyros kaki were identified tannin, quercetin, catechin, gallic acid, and rutin. Also, the calyx of Diospyros kaki was effective for treatment of omphalitis of newborn, and intractable hiccups with serious diseases such as cancer in clinical studies. Further investigations are needed to explore individual bioactive compounds responsible for these pharmacological effects in vitro and in vivo. We hope to develop new potential natural drug candidates along with much scientific evidence from pharmacologic and clinical studies of the calyx of Diospyros kaki. Keywords: Diospyros kaki Thunberg, Kaki Calyx, hiccup, pharmacological efficacy, antioxidant activity, clinical study Correspondence: Jeong Hwan Park Future Medicine Division, Korea Institute of Oriental Medicine, 1672 Yuseong-daero, Yuseong-gu, Daejeon, 34054, Republic of Korea Tel: +82-42-868-9358, E-mail: siegfriegd@kiom.re.kr Received 2018-10-29, revised 2018-11-20, accepted 2018-11-25, available online 2018-11-28 doi:10.22674/khmi-6-2-11 267
박정환. 시체( 柿蔕 ) 의약리학적효능및임상연구에대한고찰 서론 감나무 (Diospyros kaki Thunb.) 는세계적으로널리재배되고있으며, 주로한국, 중국, 일본의감 생산량은전체 1) 90% 에달한다. 감은예로부터애용되던식품으로최근약리효능으로항산화및항염 증작용, 알콜대사촉진작용, 항미생물작용, 항돌연변이작용, 지질대사개선작용, 림프백혈병세포 2) 성장억제작용및심장질환, 고혈압, 비만, 암등의위험성을줄이는효과가있다고알려졌다. 감은 폴리페놀과카로티노이드, 식이섬유와미네랄등많은생리활성화합물을함유하고있으며, 특히 항산화효과는고분자량의 tannin 함량에기인한다 3). 감잎은플라보노이드배당체, 탄닌, 페놀류, 수 지, 카큐민류화합물등을함유하며항산화활성, 항부정맥효과, 항당뇨병활성, 지혈, 과민반응억제, 항균활성, 항암또는항종양효과등여러가지생물학적활성과함께약리작용을갖고있다 4). 시체( 柿蒂 : Kaki Calyx) 는감나무의열매에붙어있는꽃받침으로가을에성숙한감의꼭지를채취하 여쇄건( 晒乾 ) 한다. 그성미( 性味 ) 는평( 平 ) 하고고삽( 苦澁 ) 하며강역하기( 降逆下氣 ) 효능으로애역 ( 呃逆 ) 등의증상에사용되고있고, 위한기역( 胃寒氣逆 ) 의애역( 呃逆 ) 에많이사용하는데대개청열진 5) 강( 淸熱鎭降 ) 의약을배합한다. 이러한효능을지닌시체( 柿蔕 ) 는다양한처방에활용되어오랫동안 쓰였는데, 대표적인처방으로는정향시체탕( 丁香柿蔕湯 ) 과정향시체산( 丁香柿蔕散 ) 등이있다 6). 시체( 柿蔕 ) 의기원식물과, 함유성분, 고문헌을통한고찰은보고된바있지만시체( 柿蔕 ) 의약리학적 효능과및임상연구에대한고찰은이루어진바없다. 본연구는최근연구에서밝혀진시체( 柿蔕 ) 의 약리학적효능및시체( 柿蔕 ) 를단독으로사용한임상연구에대한문헌고찰을시도하였다. 본론 1. 연구방법 1) 문헌검색 전자검색은국내외 7 개의논문원문및서지사항을제공하는데이터베이스를대상으로하였다국내 데이터베이스인 OASIS (Oriental medicine Advanced Searching Integrated System), KMbase (Korean Medical Database), NDSL (National Discovery for Science Leaders), KoreaMED 와영어 데이터베이스인 PubMED, 중국어데이터베이스인 China National Knowledge Infrastructure (CNKI), 일본어데이터베이스인 Japan Science and Technology Information Aggregator (J-STAGE) 를이용하여검색하였다. 시체( 柿蔕 ) 의약리학적효능연구및시체( 柿蔕 ) 를단독으로사용한임상연 구를선정기준으로하였고시체( 柿蔕 ) 의유효성이나임상연구이외의연구, 시체( 柿蔕 ) 단일약물의 유효성을밝히지않은연구, 시체( 柿蔕 ) 와관련없는논문은제외하였다. 2018 년 8 월까지의약학 분야의전자저널과논문콘텐츠만선정하여시체( 柿蔕 ) 와관련된논문검색을진행하였으며, 조사기간 은 2018 년 9 월 3 일부터 21 일까지로 3 주간진행되었다. 검색시에는감꼭지, 시체, 柿蒂, Diospyros kaki calyx, Kaki Calyx, persimmon calyx 등의검색어로조사를실시하였다. 268
2) 분류과정 각논문데이터베이스별로검색키워드를입력하여검색한결과검색된논문은국내데이터베이스에 서 357 건, 국외 PubMED 에서 37 건, CNKI 에서 254 건, J-STAGE 에서 60 건으로총 708 건이었고, 중복을제거한후논문의제목, 초록및전체텍스트를살펴서본논문의주제와일치하지않는논문을 제외하여최종적으로 25 건의논문을선정하였다. 2. 결과 연구방법에따라포함된논문은총 25 편은시체( 柿蒂 ) 의약리학적효능연구 21 편및임상연구 4 편이었고, 이를분석하고정리하였다(Table 1, 2). Table1. Pharmacological efficacy of the calyx of Diospyros kaki 연구 (1 저자, 발행연도) 국가연구종류약리학적효능보고된활성성분 Du, 1987 26) 중국 in vivo 항부정맥활성 - Lee, 2001 17) 한국 in vitro 항혈액응고활성 Sa, 2003 18) 한국 in vitro 항혈액응고활성 분자량이 130,000~180,000인거대분자로 glucose와 galactose로구성된 polysaccharide Jang, 2010 8) 한국 in vitro 항산화, 항유전독성활성 - Jo, 2010 7) 한국 in vitro 항산화, 항암활성 - Zhou, 2010 12) 중국 in vitro 항산화활성 tannin Baek, 2011 19) 한국 in vitro in vivo 항혈전활성 - Jang, 2011 9) 한국 in vitro 항산화활성 - Jo, 2011 20) 한국 in vitro 항암활성 - Kim, 2011 10) 한국 in vitro 항산화, 항염증활성 - Cha, 2013 23) 한국 in vitro 피부미백, 주름개선활성 ursolic acid, daucosterol Hwang, 2013 22) 한국 in vitro 피부미백활성 - Cha, 2014 15) 한국 in vitro 항산화활성 quercetin, catechin, gallic acid Jeon, 2014 11) 한국 in vitro 항산화, 항염증활성 Zhang, 2016 27) 중국 in vivo 항부정맥작용 - Zhao, 2016 28) 중국 in vivo 횡격막수축저해 - Cho, 2016 16) 한국 in vitro 항염증활성 quercetin, quercetin-3-o-β-d-( 2 -galloyl)-gluco pyranoside Dong, 2017 13) 중국 in vitro 항산화, 항균활성 quercetin, catechin, gallic acid, rutin Kim, 2017 24) 한국 in vitro in vivo 항과민활성 - Park, 2017 21) 한국 in vitro 항암활성 - Yu, 2017 25) 한국 in vivo 항알러지활성 - 269
박정환. 시체( 柿蔕 ) 의약리학적효능및임상연구에대한고찰 1) 약리학적효능연구 (1) 항산화효과 시체( 柿蒂 ) 는 in vitro 에서항산화효과를가진다. 폴리페놀화합물은단백질및기타거대분자들과 결합하여항산화효과등의생리활성을갖는식물의 2 차대사산물의주요물질로서수산기를가지는 방향족화합물을총칭한다. 장성대봉감의시체( 柿蔕 ) 를메탄올로추출한농축물의총폴리페놀함량 은 73.00mg GAE/g 의함량으로감의씨와거의유사한수준으로껍질과심에비해매우많았다. 시체 ( 柿蔕 ) 의 DPPH 라디칼소거능은대조군인 ascorbic acid 에비해 4 배낮은활성을보였고, ABTS 라디칼소거능은대조군에비해 2 배정도낮은활성의항산화효과를보였다 7). 부유품종의시체( 柿 蔕 ) 에서도시체( 柿蔕 ) 의 DPPH 라디칼소거능과 ABTS 라디칼소거능이감의씨, 껍질, 과육에비해 높은활성을보였다. 또한시체( 柿蔕 ) 의메탄올, 에탄올, 아세톤, 물의 4 가지용매추출물중에탄올 추출물의항산화효과가가장높았다 8). 한편. 서천조생감나무의시체( 柿蔕 ) 의아세톤추출물에서 DPPH 라디칼소거능및환원력은청도반시등다른지역의 4 종의감나무보다좋은항산화활성을 보였다 9). 청도반시의시체( 柿蔕 ) 를 70% 에탄올로추출한농축물의총폴리페놀함량은 231.28mg/g 로감에비해 20 배정도많았다. 시체( 柿蔕 ) 의전자공여능은 500μg/ml 에서 91% 로서같은농도의 대조군인 ascorbic acid 유사한전자공여능을나타내었다 10). 고종시감나무의시체( 柿蔕 ) 의열수추출 물은총폴리페놀과플라보노이드함량은각각 157.44±0.51mg/g 과 6.69±0.02mg/g 으로감잎추출물 102.67±0.67mg/g 과 3.36±0.01mg/g 보다높았다. 또한시체( 柿蔕 ) 의 DPPH 및 ABTS 라디칼소거 활성은 36.5μg/mL 으로대조군인항산화제 BHT (213.5μg/mL) 보다우수한효과를보였다 11). tan- nin 은시체( 柿蔕 ) 의활성성분으로알려져, 시체( 柿蔕 ) 에서 tannin 을추출하여항산화효과를본연구 에서추출한총 tannin 함량은전체의 23.83% 이고, 추출한 tannin 은우수한하이드록시라디칼소거 능, 지질과산화감소능력및환원력이관찰되었다 12). 미성숙감나무의시체( 柿蔕 ) 는성숙한감나무의 柿蔕 13) 시체( ) 보다총페놀함량및 DPPH 및 ABTS 라디칼소거활성이유의적으로높았다. 이는 시기별성숙정도에따른시체( 柿蔕 ) 의탄닌산함량이감소한다는경향성이있다는연구결과에비추어 볼때시체( 柿蔕 ) 의성숙정도에따른항산화효과는일차적으로탄닌산함량과밀접한관계가있을 것으로보인다 14). 한편, 차등은시체( 柿蔕 ) 의항산화효과를분석하였는데, 가장높은총폴리페놀함량을보이고 DPPH 법에의한자유라디칼소거작용이가장강력한것은 5 가지다른종류의분획물중부탄올 분획물이었다고보고하였다 15). 여기서분리한 quercetin, catechin, gallic acid 에대해 DPPH 법에 의한자유라디칼소거효과를실시한결과, 모두대조군인 α-tocopherol 보다는우수하고, BHA 와는 유사또는우수한항산화효과를나타냄으로서이들이시체( 柿蔕 ) 의항산화활성주성분으로보았다. 또한, 시체( 柿蔕 ) 의총페놀함량및 DPPH 및 ABTS 라디칼소거활성이 4 가지다른종류의분획물중 가장좋았던에틸아세테이트분획물을 HPLC 로분석한결과미성숙및성숙시체( 柿蔕 ) 에서모두 rutin, quercetin, catechin, gallic acid 성분을분리하였다 16). (2) 항염증효과 염증반응은감염또는조직손상후에손상된이환부위에제한시킴으로서다양한세포와 tumor necrosis factor- α (TNF- α), interleukin-1 β (IL-1 β), interleukin-6 (IL-6) 등과같은전-염증성 사이토카인(pro-inflammatory cytokines) 이관여하는초기방어를제공하는일련의과정이다. lip- opolysaccharide (LPS) 는세포에작용하여 TNF- α, IL-1 β, IL-6 의생성분비를촉진시켜염증을 270
일으킨다. LPS 로활성화된설치류유래 RAW 264.7 세포에서염증매개물인 prostaglandin E 2 (PGE 2 ) 와염증성사이토카인(TNF- α 와 IL-1 β) 억제효과에서고종시감나무의시체( 柿蔕 ) 의열수추출물은 NO 생성억제는우수하였고, PGE 2 생성의경우는탁월한억제효과가있었다. 더욱이시체( 柿蔕 ) 농도 에의존적으로 TNF-α 와 IL-1β 를효과적으로억제하였다 11). 각질형성세포(HaCaT) 에 LPS 를처리 한결과, 청도반시의시체( 柿蔕 ) 를 70% 에탄올로추출한농축물이 LPS 로유도되어야할 NO 의생성 량과 inducible NO synthase (inos), cyclooxygenase 2 (COX-2) 의발현을크게저해하였고, 또한 IL-6 는시체( 柿蔕 ) 50μg/mL 농도에서 56% 의생성억제효과를나타내었으며, TNF-α 와 IL-1β 는 시체( 柿蔕 ) 50μg/mL 에서각각 51%, 30% 의생성억제효과를나타내염증성질환에유의한활성이 있을것으로보인다 10). LPS 로활성화된설치류유래 RAW 264.7 세포에시체( 柿蔕 ) 에서추출한 quercetin 과 quercetin-3-o-β-d-( 2 -galloyl)-glucopyranoside (Q32G) 50μM 을처리한결과세 포독성이없었으며, NO, TNF- α, IL-1 β, IL-6, inos, COX-2, mitogen-activated protein kinase (MAPKs) 발현을저해함으로써항염증효과를보였다. quercetin 과 Q32G 는 inos, COX-2 의세포 단백질수준을줄일뿐만아니라 NO, PGE 2 와사이토카인(TNF- α, IL-1 β, IL-6) 의분비된단백질 수준을줄이는결과를보여주었다 16). (3) 항혈액응고또는항혈전효과 혈액응고는 fibrinogen 이 thrombin 가수분해에의해일어나는생명을유지하는데필수불가결한 것이지만인체내에서혈액이응고된다면혈액순환이이뤄지지않게된다. 따라서형관이폐색되는 심혈관계질환과뇌혈관질환에서 antithrombotic agent 는중요한치료제가된다. 사람의 plasma 에 서 thrombin time (TT) 를사용한항혈액응고활성은시체( 柿蔕 ) 가감과육이나껍질에비해현저하게 높았다 17). 사람의 plasma 에서 TT 를사용한혈액응고저해분석을통해시체( 柿蔕 ) 에서혈액응고 저해물질을보고하였는데, 이는분자량이 130,000~180,000 인거대분자이고구성은 C, H, O 로구성 되어있으며, periodate oxidation 시거의활성이소멸되고열에안정하며주로 glucose 와 galactose 로구성된다당류로추정된다고보고하였다 18). 시체( 柿蔕 ) 의항혈전효과를알아보기위해시체( 柿蔕 ) 열수추출물로인간혈장을이용한 in vitro 실험결과, Factor Xa (FXa) inhibition assay 실험에서 시체( 柿蔕 ) 는농도의존적으로 FXa 활성을유의성있게억제하였다. Prothrombinase assay 실험결과 에서도시체( 柿蔕 ) 는농도의존적으로 thrombin 활성을유의성있게억제하였다. Prothrombin time (PT) assay 실험결과에서는시체( 柿蔕 ) 는농도의존적으로프로트롬빈시간을유의성있게증가시켰 다. Activated partial thromboplastin time (appt) assay 분석결과, 시체( 柿蔕 ) 0.33mg/mL 와 3.3mg/mL 처리군에서시체( 柿蔕 ) 를처리하지않은대조군에비해 appt 는유의성있게증가되었다. In vivo 실험결과, 랫트의전혈응고시간이시체( 柿蔕 ) 를 600mg/kg 으로구강투여한실험군에서시체 ( 柿蔕 ) 를구강투여하지않은대조군의전혈응고시간에비해유의성있게증가되었다. 또한혈장내 thromboxane B2 실험결과, 시체( 柿蔕 ) 를 600mg/kg 으로구강투여한실험군에서 thromboxane B2 함량이대조군에비해유의성있게감소되었으며, AV shunt 랫트를이용한혈전무게측정결과, 시체( 柿蔕 ) 600 mg/kg 으로구강투여한실험군의혈전무게가대조군의혈전무게에비해유의성 있게감소되었다. 결과적으로시체( 柿蔕 ) 의항혈액응고및항혈전효능이대조군에비해유의성있게 나타남을알수있었다 19). (4) 항암효과 시체( 柿蔕 ) 의메탄올추출물의농도에따른인간대장암세포(HT-29 human colon cancer cell) 에 271
박정환. 시체( 柿蔕 ) 의약리학적효능및임상연구에대한고찰 대한세포독성효과를본결과, HT-29 세포생장을농도증가에의존적으로저해하였다. 특히시체 ( 柿蔕 ) 의메탄올추출물 500μg/mL 농도에서는 HT-29 세포생장하는데 31.1 % 의억제효과를보였 다. 흥미롭게도, HT-29 세포에대한아포토시스(apoptosis) 는시체( 柿蔕 ) 의메탄올추출물 500μg/mL 농도처리후 24 시간후에일어났다. 또한, 헬라세포(HeLa human cervix adenocarcinoma cell), PANC-1 세포(human pancreatic cancer cells) 에서도세포독성활성을나타내었다 20). 시체 ( 柿蔕 ) 의 70% 에탄올추출물로인간대장암세포주(HCT116, SW480, LoVo, HT-29) 에대한세포생장 억제효과를본결과, 농도가증가함에따라모든세포주의생장억제도증가하였다. 시체( 柿蔕 ) 는 잠재적인항암표적중하나인 cyclin D1 발현수준을낮출수있음을보였주었다. 이결과들은시체 ( 柿蔕 ) 가항암효과를가진생리활성물질을함유하고있으며, 암의치료제나예방약물의잠재적인 후보라고볼수있다 21). (5) 피부미백또는주름개선효과 피부색소는기저층에존재하는멜라닌세포가만들어내는멜라닌의함량에의해결정되며색소침착 과같은피부흑화는피부에존재하는멜라닌합성이원인이다효소인 tyrosinase 는멜라노사이트에서 멜라닌색소의합성에서주요핵심효소이다. 시체( 柿蔕 ) 의에틸아세테이트분획물의경우 5μg/mL 의 농도에서 43.2% 의멜라닌생성을억제하여다른분획물에비해가장뛰어난활성을보였다. 시체( 柿 蔕 ) 분획물의 tyrosinase 활성은대조구인 kojic acid 가 5μg/mL 의농도에서무첨가군보다세포 내 tyrosinase 활성이 9.3% 저해하는것에비해, 부탄올분획물은무첨가군에비해 34%, 에틸아세테이 트분획물의경우 32% 활성이저해함으로써 tyrosinase 활성이우수하였다. 또한, 에틸아세테이트 분획물의멜라닌생성에관련된단백질발현과의연관성을확인하기위하여 western blot 을이용하여 tyrosinase, tyrosinase-related protein (TRP)-1, TRP-2 의발현양상을측정한결과, tyrosinase 의 경우시체( 柿蔕 ) 에틸아세테이트분획물 5μg/mL 의농도에서무첨가군에비해 44% 발현을저해하였 고, TRP-1 의경우 5μg/mL 의농도에서무첨가군에비해 34% 발현을저해하였고, TRP-2 의경우 18% 저해함을보여미백효과가우수한것으로나타났다 22). 또한, 차등의시체( 柿蔕 ) 의피부미백 효과를확인하는 tyrosinase 저해효과실험에서는에틸아세테이트분획물에서대조군인 ascorbic acid 보다는약하나강한억제활성을나타내었다 23). 주름개선효과를볼수있는피부단백질의분해에 의해피부노화를유발하는효소로알려진 elastase 의저해활성실험에서도에틸아세테이트분획물에 서대조군인 oleanolic acid 보다는약하나강한억제활성을나타내었다. 시체( 柿蔕 ) 의에틸아세테이 트분획물에대하여활성주성분을규명하기위해분리하여정제한결과 으로분석되었다. ursolic acid 와 daucosterol (6) 항과민또는항알러지효과 시체( 柿蔕 ) 열수추출물의즉시형과민증(type I allergic reaction) 억제효과를보기위해 imprint- ing control region (ICR) mice 의 ovalbumin 에유도된 active systemic anaphylaxis 모델에시체( 柿 蔕 ) 열수추출물이경구투여된결과, 직장(rectal) 온도감소를억제하였고혈장히스타민, totoal im- munoglobulin E (IgE), ovalbumin-specific IgE 및 interleukin-4 (IL-4) 의농도를증가시켰다. 또한 IgE-매개된 Passive cutaneous anaphylaxis 에서는에반스(Evans) 푸른색소침착을감소시켰다. 시체( 柿蔕 ) 열수추출물농도 100mg/kg 는대조구인 dexamethasone 농도 10mg/kg 와유사한억제 효과를보였다. IgE-stimulated RBL-2H3 세포에서, 시체( 柿蔕 ) 열수추출물의농도증가에따라비만 세포에서세포내칼슘감소를통해히스타민과 β-hexosaminidase 의방출을억제했다. 또한, 시체( 柿 272
蔕 ) 열수추출물은면역반응에서유전자발현에필수적인 nuclear factor (NF)-κB 의감소에의해 tumour necrosis factor- α (TNF- α) 및 IL-4 의발현및분비를감소시켰다. 시체( 柿蔕 ) 는비만세포 매개된즉시형과민증의예방이나치료제로기여할수있을것으로보인다 24). 알러지효과를보기 위하여, 아토피성피부염과같은피부병변을귀에가지고있는 BALB/c mice 모델에서시체( 柿蔕 ) 열수추출물을경구투여한결과, 실험쥐의귀의두께를감소시켰고, IgE, 집먼지진드기 (Dermatophagoides farinae) 추출물특이 IgE, IgG2a, 히스타민수준, 염증세포침윤을감소시켰다. 또한인간각질세포(HaCaT 세포) 에서 NF-κB 등의감소를통해전-염증성사이토카인과케모카인 의발현을억제했다. 이와같이시체( 柿蔕 ) 는 in vivo 와 in vitro 모델에서아토피성피부염과같은 피부병변을발생을억제하는효과가있음을알수있었다 25). (7) 항부정맥효과 심장독성을일으키는 chloroform, aconitine, BaCl 2 에대하여시체( 柿蔕 ) 추출물 0.5% ST 용액 50mg/kg 을생쥐에게복강주사한결과뚜렷한항부정맥효과를나타내었고, 만성심부전과부정맥을 일으키는 ouabain 에대해서도시체( 柿蔕 ) 추출물 0.5% ST 용액 12.5mg/kg 투여결과유의적으로 생쥐의심장의자발적활동빈도를현저하게억제하였다. 또한시체( 柿蔕 ) 추출물 0.5% ST 용액 10mg/kg 은최면진정제로사용하는펜토바르비탈(pentobarbital) 나트륨의진정효과를뚜렷하게연 장시켰다 26). 시체( 柿蔕 ) 의급성심실성부정맥에미치는영향을보기위해 200~250g 무게의랫드에 시체( 柿蔕 ) 열수추출물(3.5g/kg 상당) 을주사한결과, BaCl2 에유도된급성심실성빈맥을약하게 억제하였고그시간은짧아오래지속하지못했다. 반면, 시체( 柿蔕 ) 열수추출물을부탄올로추출한 추출물(3.5g/kg 상당) 은급성심실성빈맥을유의하게억제하였고, 리도카인 20mg/kg 투여효과와 거의같았다. 따라서시체( 柿蔕 ) 의부탄올추출물은급성심실성빈맥을억제하는분명한효과가있음 을보였다 27). (8) 항균효과 시체( 柿蔕 ) 의항균효과를확인하기위하여, 시체( 柿蔕 ) 의에틸아세테이트로추출한분획물의고초 균 (Bacillus subtilis), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 대장균(Escherichia coil) 에대한여과 지확산법에의한항균활성을측정하였다. 미성숙감나무의시체( 柿蔕 ) 의경우직경이각각 12.0, 14.0, 15.0mm 였고, 성숙한감나무의시체( 柿蔕 ) 의경우각각 11.5, 14.0, 12.5mm 으로다른에탄올, 헥산, 부탄올, 물, 메탄올추출물보다효과가좋았으며상대적으로미성숙감나무의시체( 柿蔕 ) 가성숙감나 무의시체( 柿蔕 ) 보다효과가좋았다 13). (9) 항유전독성효과 부유품종의시체( 柿蔕 ) 의메탄올, 에탄올, 아세톤, 물의 4 가지용매추출물들(50μg/mL) 의체세포를 이용한 DNA 손상억제효과를보기위해인체의백혈구를대상으로 comet assay 를이용하여 H 2 O 2 200μM 의농도로처리하여 DNA 손상을유도한후손상된 DNA tail 부분의 DNA 함량을측정한 결과모든용매추출물에서 H 2 O 2 처리대조군에비해 DNA 손상이감소하였다. 시체( 柿蔕 ) 는 H2O 2 에 의해유도되는 DNA 손상을효과적으로억제시켜항유전독성을가지고있는것을알수있었다 8). (10) 횡격막수축저해효과 딸꾹질은불수의적인횡격막의갑작스러운수축으로유발되는것으로서, 여기에관여하는반사궁에 273
박정환. 시체( 柿蔕 ) 의약리학적효능및임상연구에대한고찰 대하여불명확한점이많다. 쥐로부터분리된횡격막에서장기간전기자극에의한횡격막수축반응모 델을사용하여시체( 柿蔕 ) 수용액추출물의횡격막수축에대한효과를실험하였다. 시체( 柿蔕 ) 수용 액추출물은모든농도(1.2g/L, 2.4g/L, 3.6g/L) 에서처음 0~60 분동안은근육수축의진폭 (amplitude) 을증가시키기도했으나 180 분후에는유의적으로감소시켰다. 특히고농도(3.6g/L) 에서 는 180 분에수축반응을처음의 10.9% 로줄였다. 따라서시체( 柿蔕 ) 수용액추출물은횡격막수축를 억제하는효과가있으며, 추출물농도가높고, 억제효과가일찍나타날수록억제작용이강하게나타남 을알수있었다 28). 딸꾹질을일으키는원인의하나로횡격막의지속적인자극이있을수있다. 이런 경우에는횡격막의자극을완화시키는것이딸꾹질을멈추는데효과적이라고생각된다 29). Table 2. Clinical study of the calyx of Diospyros kaki 연구 (1 저자, 발행년도) 국가 Tan, 1983 31) 중국 5 명( 시체( 柿蔕 ) 전탕액복용) Wang, 1997 36) Wang, 2001 32) Hu, 2013 33) 중국 중국 참여환자수( 중재) 적응증치료율 35 명( 시체( 柿蔕 ) 약한불에구운후미세가루로만들어외용 ) 총 40 명: 환자군 20 명( 시체( 柿蔕 ) 우려낸물복용), 대조군 20 명(atropine과같은항콜린성약물투여 ) 완고성애역 ( 呃逆 ) 신생아제염 ( 臍炎 ) 완고성애역 ( 呃逆 ) 80%(4 명치료, 1 명호전) 100%(35 명치료) 환자군 100%(20 명치료), 대조군 65%(13 명치료, 4명호전, 3 명효과없음) 환자군 78%(28 명치료, 5명총 72 명: 환자군 36 명( 시체( 柿蔕 ) 항암요법후호전, 3 명효과없음), 중국전탕액복용), 대조군발생한대조군 75%(27 명치료, 5명 36 명(Promethazine 투여) 애역 ( 呃逆 ) 호전, 4 명효과없음) 2) 임상연구 한의학에서애역( 呃逆 ) 은기( 氣 ) 가제상( 臍上 ) 에서부터상충( 上衝 ) 하여인후를통해구강으로배출 되면서발생되는것이고, 양방에서는 glottis 와횡격막의 spasm 이오면서반복적으로흡기성 (inspiratory sound) 이나는것으로딸꾹질을정의한다. 딸꾹질은대개일시적이며수초내지수분정도 지속되면서양성적인예후를가지고저절로호전되는경우가많다. 양방에서는딸꾹질지속시간에 따라 48 시간에서한달까지지속되는지속성딸꾹질과한달이상지속되는난치성딸꾹질로구분한 다 30). 5 일부터최대 2 년간지속된완고성애역( 呃逆 ) 환자 5 명에대해시체( 柿蔕 ) 15~20 개를전탕 하여만든 200~300mL 액을 1 일 2~3 번복용시킨결과, 4 명은 1~3 일안에증상이사라져 1 년간 재발하지않았으나분문암( 噴門癌 ) 을앓는환자는 3 일후증상이호전했지만완전히낫지는않았다 31). 환자대조군연구에서, 음주, 신경증, 위장염등으로발생되어평균 23 일의완고성애역( 呃逆 ) 증상이있는환자 20 명에게시체( 柿蔕 ) 10 개를전탕하여 1 일 2 번씩복용시킨결과 1~3 일에 12 명 이, 4~6 일에 8 명이모두완치되었다. 반면 atropine 과같은항콜린성약물의투여결과 3 일내에 7 명이완치되었고, 4~6 일에 6 명은증상이사라졌고, 4 명은증상이호전하였고 3 명은효과가없었 다 32). 다른환자대조군연구에서폐암, 위암, 대장암, 유방암, 간암등으로항암화학요법후발생한 274
애역( 呃逆 ) 환자 36 명( 남자 21 명과여자 15 명, 평균나이 62 세) 을대상으로한시체( 柿蔕 ) 15~30g 을물 200g 에넣고우려낸물을 1 일 2 번씩 3 일간복용한환자군과 promethazine 25mg 을 1 일 1 회 3 일을주사한대조군 36 명( 남자 23 명과여자 13 명, 평균나이 61 세) 의치료율은각각 77.8% 와 75.0% 으로두군간통계적차이는유의하지않았다. 반면에, 환자군에서는이상반응이피로감 1 건이 지만, 대조군에서는 Promethazine 은진정작용으로졸음 19 건, 현기증 5 건, 피로감 4 건의총 28 건 의이상반응이나타났다 33). 위와같이사용된시체( 柿蔕 ) 의적응증과치료결과는암과같은큰병을 앓은이후위중허랭( 胃中虛冷 ) 으로발생한애역( 呃逆 ) 에사용되는정향시체탕( 丁香柿蔕湯 ) 을복용하 여치료된증례나뇌교경색발병다음날부터발생한지속적인재발성의애역( 呃逆 ) 에곽향정기산( 藿 香正氣散 ) 에정향시체탕( 丁香柿蔕湯 ) 을합방하여치료된증례와유사함을알수있었다 34,35). 한편, 10 일에서 2 개월된신생아가짧게는 5 일, 최대 20 일간신생아제염( 臍炎 ) 증상을가진환아 35 명( 남자 20 명과여자 15 명) 을대상으로시체( 柿蔕 ) 10g 을약한불에구운후미세가루로만들어 배꼽부위에외용한결과, 평균 5.5 일안에모두배꼽염증이진정되었고분비물이나오는증상이 사라졌다. 신생아제염( 臍炎 ) 은탯줄이탈락하고난후황색포도상구균같은병원균에감염되어염증 을일으키고이염증이주위에파급되어배꼽이나그주위의피부가발갛게붓고분비물이나오는 상태로서, 임상연구를통해시체( 柿蔕 ) 의외용법은항염및항균효과가있음을나타내었다 36). 결론 시체( 柿蔕 ) 는한의학에서오랫동안애역( 呃逆 ) 에많이사용되고있는한약재이다. 최신의약리학과 임상연구관점을가진연구를통하여시체( 柿蔕 ) 약리학적효능및시체( 柿蔕 ) 를단독으로사용한 임상연구를다음과같은결과를얻었다. 첫째, 시체( 柿蔕 ) 는 in vitro 와 in vivo 실험을통해항산화 효과, 항염증효과, 항혈액응고효과, 항혈전효과, 항암효과, 피부미백효과, 주름개선효과, 항과민 효과, 알러지효과, 항부정맥효과, 항균효과, 항유전독성효과, 횡격막수축저해효과와같은다양하 고잠재적인약리학적활성을가지고있음을보여주었다. 시체( 柿蔕 ) 의항산화효과의성분으로는 tannin, quercetin, catechin, gallic acid, rutin 등이분리동정되었다. 둘째, 시체( 柿蔕 ) 를단독으로 사용한임상연구에서암과같이큰병을앓고나서생긴위한기역( 胃寒氣逆 ) 의난치성애역( 呃逆 ) 에 유효함을나타냄으로시체( 柿蔕 ) 의본초학적, 방제학적인효능을확인할수있었다. 또한, 신생아제염 ( 臍炎 ) 을치료한임상연구결과로시체( 柿蔕 ) 의항염및항균효과도알수있었다. 앞으로시체( 柿蔕 ) 에대한많은약리학적효능연구및임상연구로과학적인근거의확립과함께질병을치료하는새로운 천연약물의후보가개발되길기대한다. 감사의글 본연구는한국한의학연구원연구사업 특허균주안전성및보존성검증(K18721) 에의하여수행되었 습니다. 논문에도움을준강영민박사님과김대욱선생님께감사를드립니다. 275
박정환. 시체( 柿蔕 ) 의약리학적효능및임상연구에대한고찰 참고문헌 1. Butt MS, Sultan MT, Aziz M, Naz,A, Ahmed W, Kumar N, Imran M. Persimmon (Diospyros kaki) fruit: hidden phytochemicals and health claims. EXCLI Journal. 2015;14: 542-561. 2. 백경민노성수. 시체( 柿蔕 ) 의 9-147. in vitro 와 in vivo 항혈전효능연구. 대한본초학회지. 2011;26(4):13 3. George AP, Redpath S. Health and medicinal benefits of persimmon fruit: A review. Advances in Horticultural Science. 2008;22(4):244-9. 4. Xie C, Xie Z, Xu, X, Yang D. Persimmon (Diospyros kaki L.) leaves: a review on traditional uses, phytochemistry and pharmacological properties. Journal of Ethnopharmacology. 2015;16 3:229-40. 5. 전국한의과대학공동교재편찬위원회. 본초학. 영림사. 2007:405-6. 6. 김대욱, 박정환, 강영민. 처방중심으로본한약재시체( 柿蔕 ) 의한의학적소고( 小考 ). 한약정보연구 회지. 2018;6(1):91-103. 7. 조영홍, 박지원, 이정민, 안광환, 박해룡, 이승철. 장성대봉감의부위별메탄올추출물의항산화 활성및항암활성. 한국식품영양과학회지. 2010;39(4):500-5. 8. Jang IC, Jo EK, Bae MS, Lee HJ, Jeon GI, Park EJ, Yuk HG, Ahn GH, Lee SC. Antioxidant and antigenotoxic activities of different parts of persimmon (Diospyros kaki cv. Fuyu) fruit. Journal of Medicinal Plants Research. 2010;4(2):155-60. 9. Jang IC, Oh WG, Ahn GH, Lee JH, Lee SC. Antioxidant activity of 4 cultivars of persimmon fruit. Food Science and Biotechnology. 2011;20(1):71-7. 10. 김희정, 박태순, 정미송, 손준호. 청도반시의과육과감꼭지( 시체: 柿蔕 ) 의항산화및항염증활성 연구. Journal of Applied Biological Chemistry, 2011;4(2):71-8. 11. 전인화, 강현주, 이현서, 신준호, 박용균, 정승일, 장선일. 고종시감나무부위별수용성추출물의 항산화및항염활성. 한국식품과학회지. 2014;6(4):505-10. 12. 周本宏, 魏嫣, 张琛霞, 沈恒, 邱振鹏. 柿蒂总鞣质的抗氧化活性研究. 广东药学院学报. 2010;2 6(6):599-601. 13. 董浩爽, 凌敏, 吕姗, 孟明佳, 曹真, 敖常伟. 青柿蒂和成熟干柿蒂提取物的抗氧化和抑菌活性 研究. 食品科技. 2017;42(3):232-7. 14. 최지은, 김학곤, 최명석, 서원택, 강승미, 김종익, 이가연, 강영민. 시기별성숙정도에따른경남지역 떫은감감꼭지( 시체: 柿蔕 ) tannic acid 함량변화. 농업생명과학연구. 2017;5(3):49-60. 15. 차배천. 감꼭지의항산화활성성분. 생약학회지. 2014;45(1):35-40. 16. Cho YH, Kim NH, Khan I, Yu JM, Jung HG, Kim HH, Jang JY, Kim HJ, Kim DI, Kwak JH, Kang SC, An BJ. Anti inflammatory potential of quercetin 3 o β d ( 2 galloyl) glucopyra noside and quercetin isolated from Diospyros kaki calyx via suppression of MAP signaling molecules in LPS induced RAW 264.7 macrophages. Journal of Food Science. 2016;81(10):C2 447-C2456. 17. 이영철, 사유선, 정춘수, 서광기, 최혜선. 감과가공식품의항응고물질활성. 한국식품영양과학회지. 2001;30(5):949-953.18. 276
18. 사유선, 김경아, 최혜선. 감꼭지로부터혈액응고저해물질의정제와특성. 한국식품영양과학회지. 2003;32(8):1323-7. 19. 백경민, 노성수. 시체( 柿蔕 ) 의 139-47. in vitro 와 in vivo 항혈전효능연구. 대한본초학회지. 2011;26(4): 20. Jo KJ, Lee JM, Lee SC, Park HR. Anticancer activity of persimmon (Diospyros kaki L.) calyx extracts on human cancer cells. Journal of Medicinal Plants Research. 2011;5(12):2546-50. 21. Park SB, Park GH, Song HM, Son HJ, Um Y, Kim HS, Jeong JB. Anticancer activity of calyx of Diospyros kaki Thunb. through downregulation of cyclin D1 via inducing proteasomal degradation and transcriptional inhibition in human colorectal cancer cells. BMC complemen tary and alternative medicine. 2017;17(1):445. 22. 황주영, 박태순, 손준호. 감꼭지추출물과분획물의미백효과. 생명과학회지. 2013;23(3):383-8. 23. 차배선, 이은희. 감꼭지의 Tyrosinase 와 Elastase 저해활성성분. 생약학회지. 2013;44(2):182-7. 24. Kim MJ, Park HR, Shin TY, Kim, SH. Diospyros kaki calyx inhibits immediate-type hypersen sitivity via the reduction of mast cell activation. Pharmaceutical biology. 2017; 55(1):1946-5 3. 25. Yu JH, Jin M, Choi Y, Jeong NH, Park JS, Shin TY, Kim SH. Suppressive effect of an aqueous extract of Diospyros kaki calyx on dust mite extract/2, 4-dinitrochlorobenzene-induced ato pic dermatitis-like skin lesions. International journal of molecular medicine. 2017;40(2):505-11. 26. 杜广门, 尚建华, 马孝本. 柿蒂的抗心律失常作用和镇静作用的研究. 中成药研究. 1987;3:28-9. 27. 张治平, 林笋镁, 马超. 柿蒂提取物抑制氯化钡诱导的大鼠快速室性心动过速的研究. 新医学. 2 016;47(6):369-72. 28. 赵庆华, 任雷鸣. 柿蒂水提物对大鼠离体膈神经膈肌收缩反应的作用. 黑龙江医药. 2016;29( 5):825-8. 29. 신철호, 서석주, 최형규, 김두식, 류시정, 장태호. 난치성딸꾹질의치료경험. 대한통증학회지. 2004;17(1):88-91. 30. 조성규, 배효상. 태음인딸꾹질치험 1 례. 동의생리병리학회지. 2008;22(2):481-6. 31. 谭天双. 柿蒂治疗顽固性呃逆 5 例疗效观察. 人民军医. 1983;3:71. 32. 王开玉, 范瑞洁, 王建法. 柿蒂治疗顽固性呱逆 20 例. 现代中西医结合杂志. 2001;10(4):341. 33. 胡志萍, 甘宁. 柿蒂治疗肿瘤化疗引起呃逆疗效观察. 实用中医药杂志. 2013;29(10):819-20. 34. 김도형, 김로사, 김승은, 고창남, 박동원. 딸꾹질환자의정향시체탕치험 2 례. 한방성인병학회지. 2000;6(1):20-6. 35. 강백규, 이선우, 박상무, 한덕진, 이정욱, 김혜정, 이인. 뇌교경색발병후병발된난치성애역의치험 1 례. 동의생리병리학회지. 2008;22(1):222-5. 36. 王清波. 柿蒂治疗新生儿脐炎 35 例. 山西中医. 1997;13(5):50. c The Author(s) 2018, khmi.or.kr 277