KOREAN J. FOOD COOK. SCI. Vol. 30, No.5, pp. 573~578 (2014) ISSN 2287-1780(Print) ISSN 2287-1772(Online) http://dx.doi.org/10.9724/kfcs.2014.30.5.573 아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획의항산화활성효과 임정대 1 차환수 2 정명근 1 최리나 1 최덕주 윤예리 1 강원대학교생약자원개발학과, 2 한국식품연구원, 인천재능대학교한식명품조리과 Antioxidant Activities of Acidic Ethanol Extract and the Anthocyanin Rich Fraction from Aronia melanocarpa Jung-Dae Lim 1 Hwan-soo Cha 2 Myoung-gun Choung 1 Ri-na Choi 1 Duck-joo Choi Aye-Ree Youn 1 Department of Herbal Medicine Resource, Kangwon National University, Samcheok 245-905, Korea 2 Korea Food Research Institute, SungNam 463-746, Korea Department of Korean Master Work and Culinary Arts, JEI College, Incheon 401-714, Korea Abstract The objective of this study was to investigate the antioxidant activities and anthocyanin profiles in the anthocyanin rich fraction (ARFAM) of Aronia melanocarpa, which are considered functional substances and are available as food coloring agents in Korea. Anthocyanins were identified by reversed-phase C18 column chromatography and HPLC-DAD-ESI/MS analysis. The antioxidative activity of the acidic ethanol extract (AME) and the anthocyanin-rich fraction (ARFAM) was determined by scavenging of the diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) radical, the hydroxy radical, and the superoxide anion in addition to reducing power using a commercial antioxidant as a reference. Key words: Aronia melanocarpa, anthocyanins, antioxidative activity Ⅰ. 서론 베리류와적색의과일은건강상의장점을가지고있다고알려진페놀성항산화물질의주요한소재이다. 블랙초크베리 (black chokeberry) 라고불리는아로니아 (Aronia melanocarpa) 는식품산업에천연색소의원료로광범위하게사용되고있으며열매가위점막손상 (Valcheva-Kuzmanova S 등 2005) 과대장암 (Lala G 등 2006) 을포함한다양한질환에대한보호효과를가지고있다. 아로니아베리의추출물은혈소판의부착을저해하고응집을감소시키며산소래디칼의발생과염증마커의생산을감소시키는효과가있음이알려져있다 (Han GL 등 2005, Olas B 등 2008). 현재사용되는베리류에서가장높은항산화활성을나타내는것이아로니아베리이며 blueberry 나 cranberry 보다더높은항산화활성을나타내는것은높은함량의페놀성화합물과연관이있다 (Zheng W 와 Wang S 2003). 아로니아베리에 chlorogenic 및 neochlorogenic acid, 5 개 Corresponding author: Aye-Ree Youn, Jaenung College, Songnim 4-dong, Dong-gu, Incheon, Korea Tel: +82-32-890-7463 Fax: +82-32-890-7469 E-mail: miniyoun@jeiu.ac.kr 의 quercetin 유도체, 축합형탄닌성분이높은수준으로포함되어져있다 (Gu LW 등 2004, Oszmianski J 와 Wojdylo A 2005). 또한아로니아에가장풍부한폴리페놀성항산화화합물중하나가안토시아닌이며아로니아베리는 cyanidin-3-galactoside 와 cyanidin-3-arabinoside, cyanidin-3- xyloside, cyanidin-3-glucoside 등 4 가지종류의안토시아닌으로구성되어있다 (Slimestad R 등 2005). 하지만아로니아의성분및생리활성에관한연구는대부분열매에탄올및열수추출물자체, 또는특정가공공정에서나오는제품을대상으로하고있기때문에아로니아의안토시아닌분획이가지는고유한생리활성평가는진행되고있지못한실정이다. 또한다양한과실이나꽃에포함된각각의안토시아닌의비교에있어구성된안토시아니딘 (anthocyanidin) 의종류, 하이드록시기 (hydroxy group) 의개수, 부착된당의종류와개수, 아실화 (acylation) 의유무에기인하여서로다른화학적구조를가지게되고이러한화학적구조에의해서로다른생물학적활성, 생체이용률등이달라질수있다는점 (Wu X 등 2004) 을고려하여볼경우서로다른과실이나꽃에포함된안토시아닌의종류및안토시아닌에의한생리활성검정을별도로수행할필요가있다고판단되어진다. 573
574 임정대 차환수 정명근 최리나 최덕주 윤예리 따라서본연구에서는아로니아베리로부터추출물과추출물에포함되어진안토시아닌분획을획득하고아로니아추출물과아로니아안토시아닌분획의항산화효능을검토함으로써아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획을이용한식품소재개발및활용성증진을위한기초자료를제공하고자하였다. 1. 실험재료및시약 Ⅱ. 재료및방법 실험에사용한아로니아 ( 블랙초크베리, 2013 년산 ) 는전북고창에서재배, 수확된것을구입하여분석에사용하였다. 생시료를동결건조하여분쇄한다음 100 mash size 로분말화하여 -20 C 보관하여사용하였다안토시안추출물은 10 g 에 0.1% hydrochloric acid 를함유한증류수를첨가하여암조건하에서 24 시간추출하였으며, 아로니아안토시안분획물은안토시안추출물에서 C18 Sep-Pak SPE 카트리지 (Water Co., Milford, MA, USA) 를이용하여흡착시킨후증류수와 10% 메탄올로세척하고다시메탄올로용출분획하여사용하였다. 실험에사용한시약 1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), α-tocopherol, butylated hydroxyanisole (BHA), (+)-catechin, quercetin, vanillic acid, ascorbic acid 는 Sigma 사 (Sigma Chemical. Co., St. Louis. MO, USA) 의특급시약을사용하였다. 2. DPPH radical 소거활성검정 시험관에아로니아추출물 (AME) 및아로니아안토시아닌분획물 (ARFAM) 을농도별 (25, 50, 100, 200 μg/ml) 로첨가한다음 100 mm tris-hcl buffer (ph 7.4) 400 μl 과 0.5 mm 의 DPPH 1,600 μl 를첨가한후 20 분간암실에서반응시킨뒤 UV-1200 UV/VIS spectrometer (Shimadzu, Kyoto, Japan) 517 nm 에서흡광도를측정하였다 (Blois MS 1958). 이때기질과 DPPH 가없는 initial (Ai), 과 blank (Ab) 를측정하며, 시료첨가후흡광도 (As) 를측정하고, RC50 (μg/ml) 은화합물을첨가하지않은대조군의값을 50.0% 감소시키는화합물의농도를나타내며, 기존의항산화제인 α-tocopherol, BHA 등의합성항산화물과 (+)-catechin, quercetin, vanillic acid 와상호비교하였다. 3. Hydroxy radical 활성검정 아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획의 hydroxy radical 소거활성검정은 Fenton 반응에의한 2-deoxyribose 가 hydroxy radical 에의해산화되어 malonaldehyde 로변환된후 chromagen 을형성하는정도를측정하는방법을이용하였다 (Unno T 등 1997). 아로니아추출물및아로 니아안토시아닌분획농도별시료 (5.952, 11.905, 23.810, 47.619 μg/ml) 0.075 ml 을 eppendorf tube 에취했다. 1 ml 의 0.1 M sodium phosphate buffer (ph 7.4), 0.2 ml 의 10 mm 2-deoxyribose, 0.2 ml 의 10 mm FeSO 4 EDTA, 0.2 ml 의 10 mm H 2 O 2 각각가하여 37 C 에서암상태로 4 시간동안반응시켰다. 그런다음 1 ml 의 2.8% (w/v) trichloroacetic acid 를가하여반응을중지시킨후에다시 1 ml 의 1.0% (w/v) thiobarbituric acid TBA (Sigma- Aldrich) 를첨가한후이반응액을끓는물에 10 분동안처리한후급속냉각시키고, UV-1200 UV/VIS spectrometer 를이용하여 532 nm 에서흡광도로측정하여검정하였다. Hydroxyl radical 소거활성검정은아로니아안토시아닌분획물의첨가농도에따라 hydroxyl radical 에의해 2-deoxyribose 가산화되는것을저해하는비율로계산하며, 기존의합성항산화제인 (+)-catechin, quercetin 을대조군으로상호비교하였다. 4. Superoxide radical 소거활성검정 아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획의 superoxide radicals 소거활성은 NBT (nitro-blue tetrazolium) 환원법을사용하여검정하였다 (Parejo I 등 2002). 즉, 3 mm xanthine 80 μl, 0.05 mm sodium carbonate buffer (ph 10.5) 1.92 μl, 3 mm ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt (EDTA) 80 μl 과 0.75 mm NBT 80 μl 로구성된혼합액에아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획물을 4.908, 9.816, 14.724, 19.623 μg/ml 의농도로각각처리하였으며, 대조구로사용된항산화제인 ascorbic acid, quercetin, (+)-catechin 은 0.613, 1.227, 2.454, 4.098 μg/ml 의농도로각각처리하였다. 이혼합물을 25 C 에서 10 분간 incubation 하며, 다시 1.0 ml 의 XOD (6 mu/ml) 를첨가하여반응을시작한후 25 C 에서 20 분간반응하였다. 그후 0.02 ml 의 6 mm CuCl 2 를첨가하여반응을종결시킨후 560 nm 에서흡광도를측정하였다. 농도별시료첨가양에따른 NBT 환원에대한저해능을 50% 감소시키는화합물의농도 (IC50, 50% inhibition concentration) 로나타내며, 합성항산화제인 ascorbic acid 와 (+)-catechin, quercetin 대조군으로상호비교하였다. 5. 환원력검정아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획의환원력은 Oyaizu의방법에따라측정하였다 (Oyaizu M 1986). 0.2 M sodium phosphate buffer (ph 6.6) 1 ml, 시료 1 ml 및 1% potassium ferricyanide 1 ml을가하고, 이혼합물을 50 C에서 20분간반응시킨후 10% trichloroacetic acid 1 ml을넣었다. 반응이끝난혼합물을 1000 rpm에서 10분간원심분리하여얻은상징액 2 ml과메탄올 2 한국식품조리과학회지제 30 권제 5 호 (2014)
아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획의항산화활성효과 575 ml 을넣고 0.1% iron chloride 용액 0.1 ml 을넣은후 UV/VIS spectrophometer 를이용흡광도를 700 nm 에서측정하였다. 반응액은 Fe 3+ 과 Fe 2+ 간의 transformation 에의하여청록색을나타내며흡광도값이클수록높은환원력을나타낸다. 대조구로는합성항산화제인 ascorbic acid, α-tocopherol, (+)-catechin, quercetin 를사용하였다. 5. 통계처리 실험은 3 회반복실시하였으며, 유의성검증을위하여 statistical analysis system 6.0 for windows program (SAS Institute, Cary, NC, USA) 을이용하여 ANOVA analysis 와 duncan s multiple range test 방법으로 5% 수준에서유의성을분석하였다. Ⅲ. 결과및고찰 1. DPPH radical 소거활성 아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획물의 DPPH free radial 소거활성을일반적으로식물체에많이존재하는 polyphenol 화합물인 (+)-catechin, quercetin, vanillic acid 와비교하였다. 전자공여능은지질과산화반응을연쇄적으로일으키는반응에관여하는산화성 free radical 에전자를제공하여산화의진행과정을정지시킨다. 산화성 free radical 은생체내에존재하는단백질과세포막의지질등을산화시켜막에쌓인다거나 DNA 등에손상을일으켜각종질병을일으키는것으로알려져있다 (Ames BN 등 1995). DPPH 는항산화물질로부터전자혹은수소를받으면비라디컬로전환되면서흡광도가변화됨에따라짙은자주색이탈색되는정도를지표로하여항산화능력을측정하는방법이다. 하지만이방법은 DPPH 가 ph, 빛그리고온도에민감하게영향을받는것이단점으로알려져있다 (Yoo KM 등 2007). 아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획물의 DPPH radical 소거활성은합성항산화제나 polyphenol 성화합물대조군과비교하여낮은활성을보였고 IC50 (μg/ml) 값이각각 148.04 및 74.08 μg/ml 로나타나아로니아추출물보다아로니아안토시아닌분획에서더높은 DPPH radical 소거활성을 Table 1 에나타내었다. 이와비교하여 대조군으로사용된합성항산화제인 BHT 가 13.59 μg/ml, α-tocopherol 이 16.50 μg/ml 의결과값을나타내었고 (+)- catechin 은 11.79 μg/ml, quercetin 은 12.92 μg/ml 을나타내었는데 (+)-catechin, quercetin 의라디칼소거활성이높은것은동일한 o-catechol 그룹을가지고있는단량체형태의 polyphenol 의특성을가지고있기때문으로사료되며아로니아안토시아닌분획의경우이러한 o-catechol 그룹을가지고있는단량체형태의 polyphenol 과유사한정도의활성을가지기위해서는아로니아안토시아닌분획물의 74.08 μg/ml 보다높은 75 μg/ml 이상의농도가적용되어야할것으로판단된다. 반면 vanillic acid 의경우 200 μg/ml 의경우에서도 IC50 값을나타내지못하였고이러한경향은농도가증가하여도매우낮게유지되었는데이는 vanillic acid 가가지는 o-methoxyphenol 구조에기인하여분자안정화에있어전자편중 (electron concentration) 이결여되어있기때문으로생각되어진다. 비록아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획물의 DPPH radical 소거활성이합성항산화제나 polyphenol 성화합물대조군보다낮은활성을나타내었으나블루베리, 크렌베리, 적포도주에서 DPPH radical 소거활성을검정한결과 IC50 값이 280~340 μg/ml 의수준에서관찰되어진다고보고하였다 (Oszmianski J 와 Wojdylo A 2005). 이와비교하여보면아로니아추출물은다른베리류보다약 2 배, 아로니아안토시아닌분획물의경우다른베리류보다약 4 배이상의높은항산화활성을가지고있음을알수있다. Lidija J 등 (2007) 의보고에의하면아로니아추출물이 black currant red raspberry, blackberry, sour cherry, sweat cherry, straw berry 의추출물보다더많은총안토시아닌함량및총페놀함량을가지며이에따라 trolox equivalent 에의한측정에의해가장높은항산화활성을가진다고한다. 뿐만아니라 Bermudez-Soto MJ 와 Tomas barberan FA (2004) 는아로니아열매가가지는항산화활성에아로니아에포함되어져있는안토시아닌이약 33% 의공헌도를가진다는보고를통하여, 아로니아안토시아닌분획물의경우단순추출물보다안토시아닌이가지는특이성에의하여전자공여능이높고 radical 을소거하는활성이높다는것을알수있다. Table 1. DPPH radical scavenging activities of water extract and anthocyanin rich fraction in fruit of Aronia melanocarpa Samples α-tocopherol BHT AME 1) ARFAM 2) (+)-catechin Quercetin Vanillic acid IC 50 (μg/ml) 16.5±0.2 3)c 13.6±0.2 b 148.0±1.5 e 74.1±0.3 d 11.8±0.7 a 12.9±0.5 a >200 f 1) Extract of water containing hydrochloric acid (0.1%) 2) Anthocyanin rich fraction of Aronia melanocarpa fruits 3) Mean values±sd from triplicate separated experiments are shown. Mean with difference letter (a-f) within a row are significantly different at p<0.05. Korean J. Food Cook. Sci. Vol. 30, No.5 (2014)
576 임정대 차환수 정명근 최리나 최덕주 윤예리 2. Hydroxy radical 활성검정 Hydroxy radical( OH) 은활성산소중반응성이매우강하여생체산화에주된역할을하는것으로알려져있다 (Chung YC 등 1997). 특히 hydroxy radical 은 DNA 의 purine 과 pyrimidine 염기를무차별적으로공격하여다양하게변형시킬뿐만아니라 deoxyribose 부분을공격하여 DNA 사슬의절단 (scission) 을일으킨다. 암, 동맥경화증, 자가면역질환, 관절염, 폐질환, 당뇨병, 심근경색증, 뇌및신경질환등의발생과진행경과에 free radical 이관여하고있다는증거들이많이보고되고있다 (Rice-Evans CA 등 1996). Fig. 1 에서보는바와같이 quercetin 의경우 23.81 μg/ml 처리시 16.31% 의 hydroxy radical 소거활성을나타내었으며농도가증가할수록소거활성이높아져 47.62 μg/ml 처리시 27.11% 의소거활성을나타내었다. 또한 (+)-catechin 의경우 23.81 μg/ml 처리시저해활성을나타내지않다가 47.619 μg/ml 처리시 16.24% 의소거활성을나타내었다. 아로니아추출물, 아로니아안토시아닌분획물의경우 97.23 μg/ml 처리시각각 13.00, 6.46% 의소거활성을나타내었다. Hydroxy radical 저해활성을 hydroxy radical 을 50% 수준으로저해하는데요구되어지는농도 (IC50) 로비교하였을때 quercetin 과 catechin 각각 79.24, 143.41 μ g/ml 이었고아로니아추출물은 469.10 μg/ml, 아로니아안토시아닌분획물은 367.77 μg/ml 의농도를나타내었다 (Table 2). Quercetin 의경우 hydroxy radical 에대한소거활성이매우높아효과적인 hydroxy radical 을소거제로활용될수있는데이러한이유는 quercetin 은전자편중에대한높은안정성을가지므로 hydorxy radical 에쉽게수소원자를공여할수있기때문으로사료되어진다. 반면 (+)-catechin 이나아로니아안토시아닌분획물의경우 quercetin 보다다소낮은활성을나타내었는데이러한것은 (+)-catechin 이나아로니아안토시아닌분획물의경우 hydrogen peroxide 를소거하는기능뿐만아니라 hydrogen peroxide 작용을억제하여 hydroxy radical 의발생을방지하는기전으로작용하는것으로생각되어진다. 실제 Fenton 반응에서 2-deoxyribose, FeSO 4 EDTA, hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) 만첨가된것에비하여 2-deoxyribose, FeSO 4 EDTA, hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) 의혼합물에 (+)-catechin 이나아 (A) (B) Fig. 1. Inhibition rate of hydroxyl radical by different concentration. (A) Quercetin and Catechin, (B) extract of water containing of hydrochloric acid and anthocyanin rich fraction of Aronia melanocarpa Miquel fruits ARFAM). 로니아안토시아닌분획물이처리된경우파장 532 nm 에서흡광도가다소증가하였고이러한이유는아로니아안토시아닌분획물에존재하는안토시아닌성분이나 (+)-catechin 성분이 2-deoxyribose 등과 Conjugated 축합을형성하였기때문이라고생각되며이를통해 hydroxy radical 에의한손상을억제하였기때문으로생각된다. 이러한결과는 Ku M 등 (2008) 이보고한바와같이 (+)-catechin 과같은항산화제가 guaicol-hrp(horse radish peroxidase)-h 2O 2 system 을이용하여 hydrogen peroxide 의소거활성검정하는데있어 hydrogen peroxide 소거활성이다소낮으며 HRP 에의해산화된 guaicol 이 (+)-catechin 과같은 phenol 성항산 Table 2. Hydroxy radical scavenging activities of water extract and anthocyanin rich fraction in fruit of Aronia melanocarpa Miquel Sample AME 1) ARFAM 2) (+)-catechin Quercetin Hydroxy radical scavenging activity (IC 50 μg/ml 3) ) 469.1±21.7 d 367.8±34.4 c 143.4±66.4 b 79.2±18.7 a 1) Extract of water containing hydrochloric acid (0.1%) Anthocyanin rich fraction of Aronia melanocarpa fruits 3) Mean values±sd from triplicate separated experiments are shown. Mean with difference letter (a-d) within a row are significantly different at p<0.05. 한국식품조리과학회지제 30 권제 5 호 (2014)
아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획의항산화활성효과 577 화제와축합반응을한결과와유사한결과를보였다. 3. Superoxie anion radical 소거활성 정상적인산화적인산화의과정동안소모되는전체산소의 0.4~4.0% 정도는 free radical, superoxide(o 2 ) 로전환되며생성된 superoxide 는다른 Reactive oxygen species (ROS) 로전환되어직접적또는간접적으로세포손상을유발하는것으로알려져있다. 정상적으로는 superoxide 는내인성항산화방어기전에서 superoxide dismutase (SOD) 에의해빠르게과산화수소 (H 2 O 2 ) 로전환된다. 그러나이내인성항산화방어체계가세포내산화환원균형을유지하는데문제가생길경우결과적으로산화적스트레스가일어나게되며이산화적스트레스는직접적으로세포내거대분자의손상을일으키거나세포손상을일으키는데중요한역할을한다 (Korycka-Dahl M 등 1979). 아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획의 superoxide anion radical 소거활성을측정하여합성항산화제와 polyphenol 화합물과비교한결과 (Table 3), 아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획물의 superoxide anion radical 소거활성은 ascorbic acid 나 quercetin, (+)- catechin 보다는낮은소거활성을나타내었다. 하지만 Kim YC 와 Chung SK (2002) 가보고한바와같이한국약용식물의총폴리페놀함량과 superoxide 소거활성과상관관계를분석시상관계수가 0.8111 로높은것으로나타났다. 이결과와비교했을때아로니아안토시아닌분획의경우안토시아닌과같은폴리페놀성화합물이 superoxide anion radical 소거활성을나타내는것으로판단되어진다. 그리고아로니아추출물의경우비록안토시아닌의함량수준이안토시아닌분획보다낮게나타났지만, 추출물에포함되어진다른폴리페놀성화합물의기여에의하여안토시아닌분획과유사한수준의 superoxide anion radical 소거활성을나타내는것으로판단되어진다. 4. 환원력검정 기존의항산화제인 ascorbic acid, quercetin, (+)-catechin, α-tocopherol 중에서는 ascorbic acid 가가장높은환원력을나타내었으며 quercetin, (+)-catechin 그리고 α-tocopherol Fig. 2. Reducing power of several antioxidants and anthocyanin rich fraction of Aronia melanocarpa Miquel fruits (ARFAM). 의순으로높은환원력을나타내었다. 이와비교하였을때아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획은기존항산화제중가장약한환원력을나타낸 α-tocopherol 보다는더낮은활성을나타내었으나처리농도를높여분석하였을때환원력이증가하는경향을나타내었고, 아로니아추출물및아로니아안토시아닌분획이 50 μg/ml 이상에서유의할만한농도의존적환원력을나타내어항산화능력을가지고있음이기대된다. Ⅳ. 결론 아로니아베리로부터추출물과추출물에포함되어진안토시아닌분획을획득하고아로니아추출물과아로니아안토시아닌분획의항산화효능 (DPPH radical 소거활성, hydroxy radical 활성, superoxide radical 소거활성및환원력 ) 을알아보았다. DPPH radical 소거활성은합성항산화제나 polyphenol 성화합물대조군과비교하여낮은활성을보였다. IC50 은아로니아추출물 (148.04 μg/ml) 보다아로니아안토시아닌분획 (74.08 μg/ml) 에서더높은 DPPH radical 소거활성을나타내었다. Hydroxy radical 활성은농도가증가할수록소거활성이높아지는것으로나타났으며, 아로니아추출물, 아로니아안토시아닌분획물의경우 97.23 μg/ml 처리시각각 13.00, 6.46% 의 hydroxy radical 소거활성을나타내었다. 또한 hydroxy radical 을 50% 수준으로저해하는데요구되어지는농도 (IC50) 로비 Table 3. Superoxide anion radical scavenging activities of water extract and anthocyanin rich fraction in fruit of Aronia melanocarpa Miquel Sample Ascorbic acid AME 1) ARFAM 2) (+)-catechin Quercetin Superoxide anion radical scavenging activity (IC 50 μg/ml 3) ) 1.14±0.18 a 16.04±2.68 d 14.72±1.29 d 3.24±0.25 c 2.36±0.25 b 1) Extract of water containing hydrochloric acid (0.1%) Anthocyanin rich fraction of Aronia melanocarpa fruits 3) Mean values±sd from triplicate separated experiments are shown. Mean with difference letter (a-f) within a row are significantly different at p<0.05. Korean J. Food Cook. Sci. Vol. 30, No.5 (2014)
578 임정대 차환수 정명근 최리나 최덕주 윤예리 교시 quercetin 과 catechin 각각 79.24, 143.41 μg/ml, 아로니아추출물과분획물은각각 469.10 μg/ml, 367.77 μ g/ml 의농도를나타내었다. 아로니아안토시아닌분획은안토시아닌과같은폴리페놀성화합물이 superoxide anion radical 소거활성을나타내며, 아로니아추출물은안토시아닌분획과유사한수준의 superoxide anion radical 소거활성을나타났다. 환원력검정에서는가장약한환원력을보인 α-tocopherol 보다는낮은활성을보였지만처리농도를높였을때환원력이증가하는경향을나타내었고, 아로니아추출물및분획물이 50 μg/ml 이상에서유의할만한농도의존적환원력을나타내어항산화능력을가지고있음이기대되었다. References Ames BN, Gold LS, Willett WC. 1995. The causes and prevention of cancer. Proc Natl Acad Sci 92(12):5258-5265 Bermudez-Soto MJ, Tomas barberan FA. 2004. Evaluation of commercial red fruit juice concentrates as ingredients for antioxidant functional juices. European Food Res Technol 219(2):133-141 Blois MS. 1958. Antioxidant determination by the use of a stable free radical. Nature 181(4617):1199-1200 Chung YC, Huang C, Tseng CP. 1997. Removal of hydrogen sulfide by immobilized Thiobacillus sp. strain CH11 in a biofilter. J Chem Tech Bio 69(1):58-62 Gu LW, Kelm MA, Hammerstone JF, Beecher G, Holden J, Haytowitz D, Gebhardt S, Prior RL. 2004. Concentrations of proanthocyanidins in common foods and estimations of normal consumption. J Nutr 134(2):613-617 Han GL, Li CM, Mazza G, Yang XG. 2005. Effect of anthocyanin rich fruit extract on PGE2 produced by endothelia cells. J Hyg Res 34(5):581-584 Kim YC, Chung SK. 2002. Reactive oxygen radical species scavenging effects of Korean medicinal plant leaves. Food Sci Biotech 11(4):407-411 Korycka-Dahl M, Richardson T, Hicks CL. 1979. Superoxide dismutase activity in bovine milk serum and its relevance for oxidative stability of milk. J Food Prot 42(3):867-871 Ku M, Koche RP, Rheinbay E, Eric M, Chad N, Simon K. 2008. Genomewide analysis of PRC1 and PRC2 occupancy identifies two classes of bivalent domains. Plos Genet 4(10):242-248 Lala G, Malik M, Zhao CW, He J, Kwon Y, Giusti MM. 2006. Anthocyanin rich extracts inhibit multiple biomarkers of colon cancer in rats. Nutr Cancer 54(1):84-93 Lidija J, Marihan S, Martina MK, Ivana N. 2007. Anthocyanin content and antioxidant activity of various red fruits juices. Deutsche Lebensmittel-Rundschau 103(16):58-64 Olas B, Wachowicz B, Tomczak A, Erler J, Stochmal A, Oleszek W. 2008. Comparative anti-platelet and antioxidant properties of polyphenol-rich extracts from berries of Aronia melanocarpa, seeds of grape and bark of Yucca schidigera in vitro. Platelets 19(1):70-77 Oszmianski J, Wojdylo A. 2005. Aronia melanocarpa phenolics and their antioxidant activity. Eur Food Res Technol 221(2):809-813 Oyaizu M. 1986. Studies on products of browning reactiona: antioxidative activities of products of browning reaction prepared from glucosamine. Japanese J Nutr 44(16):307-315 Parejo I, Viladomat F, Bastida J, Rosas Romero A, Flerlage N, Burillo J, Conida C. 2002. Comparision between the radical scavenging activity and antioxidant activity of six distilled and nondistilled Mediterranean herbs and aromatic plants. J Agric Food Chem 50(23):6882-6890 Rice-Evans CA, Miller NJ, Paganga G. 1996. Structure-antioxidant activity relationships of flavonoids and phenolic acids. Review article. Free Rad Biol Med 20(7):933-956 Slimestad R, Torskangerpoll K, Nateland HS, Johannessen T, Giske NH. 2005. Flavonoids from black chokeberries, Aronia melanocarpa. J Food Comp Anal 18(1):61-68 Unno T, Sakane I, Masumizu T, Kohno M, Kakuda T. 1997. Antioxidative activity of water extracts of Lagerstroemia specious leaves. Biosci Biotech Biochem 4(10):1772-1774 Valcheva-Kuzmanova S, Marazova K, Krasnaliev I, Galunska B, Borisova P, Belcheva A. 2005. Effect of Aronia melanocarpa fruit juice on indomethacin-induced gastric mucosal damage and oxidative stress in rats. Exp Toxicol Pathol 56(6):385-392 Wu X, Gu L, Prior RL, Mckay S. 2004. Characterization of anthocyanins and proanthocyanindins in some cultivars of Ribes, Aronia and Sambucus and their antioxidant capacity. J Agr Food Chem 52(26):7846-78756 Yoo KM, Kim DO and Lee CY. 2007. Evaluation of different methods of antioxidant measurement. Food Sci Biotech 16(27):177-182 Zheng W, Wang S. 2003. Oxygen radical absorb-ing capacity of phenolics in blueberries, cranberries, chokeberries, and lingonberries. J Agric Food Chem 51(2):502-509 Received on May19, 2014/ Revised on Sep.12, 2014/ Accepted on Sep.15, 2014 한국식품조리과학회지제 30 권제 5 호 (2014)