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준석 지
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2 과제명 ( 단위 : 원) 최종보고요약서( 초록) 고로쇠수액으로부터항아토피기능성신물 질분리정제기술개발및기능성제품개발 주관기관명한국국제대학교산학협력단 참여기업명 함양지리산고로쇠영농조합법인 대표자 허상옥 과제책임자 소속직위성명한국국제대학교식품과학과부교수서종권 협약기간 2010년 8월 1 일 ~ 2011년 5월 31일 사업비 과제개발비집행내역집행비율 ( 예산) 1. 최종목표 계 현금 현물 % 100 본연구에서는오염되지않은산림자원으로부터채취되는고로쇠수액으로부터항아토피활성이우수한 기능성물질의추출, 분리기술을개발하고, 개발신물질의 in vitro 항아토피활성을검증함과동시에개발 제품을이용한 in vivo 테스트를통해항아토피크림의보습효과를확인함으로서고로쇠수액의항아토피 효능에대한과학적기반기술을마련하고산업화( 액상제품 1 종, 크림제품1 종) 를통한지역경제발전에기여 하고자함. 2. 개발내용및결과 고로쇠수액으로부터항산화및항균활성물질의추출, 분리 분리물질의 polyphenol 및 flavonoid 물질의분석 고로쇠수액의동결건조분말에대한항산화활성측정 (DPPH radical 소거능, Reducing power, ABTs radical 소거능, Nitric oxide 소거능, Nitrite 생성억제능조사) 개발소재의아토피유발균주에대한항미생물활성측정 in vivo 테스트를통한개발제품의보습효과측정 연구결과에기초한항아토피미용제품개발및시제품생산 3. 사업성과 기술적성과 - 고로쇠수액으로부터항아토피기능성물질추출, 분리기술개발 - 천연물소재의 in vitro / in vivo 항아토피활성, 보습력의검증기반기술구축 경제적성과 - 고로쇠를함양지역특화품목, 향토산업으로집중육성을통한농가소득증대(20~30 억이상) - 함양군물레방아브랜드를활용을통한고로쇠개발제품의명품화, 지역관광상품화추진 - 고로쇠재배농가및수액채취농가확대및고부가가치창출 사회적성과( 일자리창출등) 4. - 개발제품의산업화를통한일자리창출 재배농가확대(30농가 100 농가), 연구개발인력 채용(2 명), 생산인력확대(20 명), 유통 수출전문가참여 기술개발결과활용계획 - 항아토피제품화기술및제품의효능검증기술접목을통한고로쇠수액의고부가가치화창출 - 함양군지역특화품목육성정책과연계한지역관광상품화전략추진

3 제 1 장서론 1. 기술개발의개요 1-1. 개발대상기술( 또는제품) 의개요 고로쇠나무는단풍나무과에속하는낙엽교목으로표고 100~1,800m 에자생하며, 한국, 일본, 중국, 만주에까지분포한다. 우리나라의고로쇠나무는내한성이강하여지리산, 백운산, 조계산, 및강원도일대의습한고로쇠나무I(Acer mono), 붉은고로쇠나무(A.mono for. rubripes), 우산 고로쇠나무(A. okamotoanum), 만주고로쇠(A. truncatum), 긴고로쇠나무(A. mono for dissectum), 왕고로쇠나무(A. mono var. savatieri), 산고로쇠나무(A. mono var. horizontale), 집 게고로쇠나무(A. mono for. connivens), 털고로쇠나무(A. mono var. ambigunm) 등 9종의품종 과변종이생육하고있는것으로알려져있다. 우리나라에서고로쇠는 골리수( 骨利水 ) 즉뼈에이로운나무라는뜻에서유리하였다는속설이 있다(Ahn, 1975). 고로쇠나무의수액은신라시대화랑이음용했다는기복이있으며, 최근에는건강 음료등다양한형태로개발되어일반인들에게애용되면서고로쇠나무가주로분포하는강원도, 전 라도, 경상도의산촌에서폭넓게채취되고있다. 이른봄에이들수목은타수목보다수액의이동이 먼저시작되어고로쇠나무는경칩무렵에거제수나무는곡우무렵에수피상처로부터많은수액이 삼출되고이를수집약수라하여민간에서음용하는건강음료로서관심이크다. 전국적으로수액채취는대표적인고로쇠나무를포함하여박달나무, 거제수, 자작나무에서생산 되고있으며, 2006년기준약 7천톤이생산되어약 170억원의농가소득을올리고있는효자농산물 로각광받고있다. ( 수액채취현황/2007/ 통계청)

4 합계고로쇠박달나무거제수자작나무기타수액 구분 생산량( 톤) 3,871 4,748 7,416 생산액( 백만원) 9,416 10,689 16,887 생산량( 톤) 3,736 4,600 7,283 생산액( 백만원) 8,141 10,392 16,552 생산량( 톤) 생산액( 백만원) 생산량( 톤) 생산액( 백만원) 생산량( 톤) 생산액( 백만원) 생산량( 톤) 생산액( 백만원) 현재고로쇠나무수액에관한연구로국내에서는무기물과당류분석(Kim, 1991), 자작나무 수액중에칼슘, 마그네슘분석( 윤, 1992), 수액성분분석과효능(Ahn, 1975) 등을보고하였다. 일본의경우는국내에비해비교적폭넓은연구가이루어지고있으나우리나라와마찬가지로 약리적효과보다는수액의성분분석에관한것으로일본은자작나무의성분에관한연구 (Terazawa et al., 1984; Iguchi et al., 1985) 가진행되었다. 우리나라의지리산과백운산지역에서는早春期 ( 조춘기) 에고로쇠나무와자작나무과 (Betulaceae) 의거제수나무(Betula costata Trautv.) 의수액을채취하여약수로복용할뿐만아니라지역농가의소득증대에크게기여하고있다. 그러나고로쇠나무수액에대한음용의역사도깊고수액소비량도증가하는데반해고로 쇠수액을이용한산업화를뒷받침할수있는과학적연구는미흡한실정이다 기술( 또는제품) 개발의필요성및중요성 아토피, 천식, 알레르기등을흔히환경성질환이라하는데, 이는환경이오염되면서야기되거 나, 악화되는질병을의미하며불과몇년사이아토피는우리사회의중요한문제가되었으며 아이들에게서뿐아니라, 성인에게서도유의할만한증가세를보이고있다.

5 서구화, 산업화에따른급격한생활환경변화로아토피및천식질환이크게증가하고있으 며이에따른사회경제적비용도급증하고있고아토피피부염은결석및결근, 의료비증가, 사 회활동제약에따른삶의질저하등막대한사회경제적부담을낳고있다. 미국이나영국의경우아토피피부염으로인한진료비, 약제비등의직접경비와노동력상실로인한사 회경제적간접경비지출이연간수십억달러이며, 독일의경우연간약7 조원정도로추산될정도이다. 영아와소아에서가장흔한피부질환중하나인아토피피부염은생후 6개월동안에 45%, 생후 12개월이전에 60%, 5세이전에적어도 85% 에서시작된다. 미국소아의아토피피부염의유병률은 17.2%, 유럽의소아에서는 15.6%, 일본의 5-6세소아 의유병률은 24% 임. 아토피피부염은전세계적으로, 지속적으로꾸준히증가하고있으며이는 천식의유병률의증가와평행을이루고있다. 또한아토피피부염아동은잦은피부손상과소양감으로인해신체적문제와사회심리적 문제가동반되는경우가많으며소양감때문에수면장애를경험하고, 그로인해짜증이심하거 나집중력이떨어지고늘피곤하여삶의질이저하될수있다. 사용되고있는아토피피부염치료제는증상을완화시키는목적의치료제로서근본적이며, 획기적인치료제개발이절실한상황이다. 또한현재아토피피부염치료제로사용되고있는스 테로이드제, 항히스타민제, 항생제, 면역억제제등은각각인체에심각한부작용을초래할수 있어지속적인사용은어려운실정이다. 고로쇠나무수액을건강음료로서마시는풍습은소련, 중국, 일본등에서도오랜역사를가지고 있으며민간약으로서는수창, 부창, 습진, 이뇨, 변비, 위장병, 통풍, 류마티스, 관절염, 괴혈병, 신경 통, 산후통등에효험이있다고하여이들수액성분에대한관심이높다(Hashi and Takeshita, 1973). 한편고로쇠수액의페놀성물질은단백질등의기타거대분자와결합하는성질, 항산화효 과, 2 가금속이온과의결합력을가지고있어, 항미생물효과, 항산화작용에의한항암효과, 유

6 해중금속의제거등의효과를지닌기능성물질로알려져있다. 산림면적이 78% 인함양군은 산에돈이있다 는슬로건아래산지소득창출을위해다양한 사업을실시하고있는가운데매년 2월에서 3월말까지 2개월여동안청정지역에서생산되는 고로쇠수액을채취해가공정제, 저장, 유통하여고소득창출을도모하고있다. 함양군은이를위해함양군지곡면개평리에본연구사업의참여기업인함양지리산고로쇠 영농조합과연계하여지리산에서생산되는고로쇠수액을가공판매하는 터 를운영하고있다. 수액전시유통판매센 수액전시유통판매센터는지난 2005 년국가지원사업으로선정, 2007년준공하여매년고로쇠 수액가공판매를통해고소득을창출하고있으며지역경제발전에크게기여하고있다. 그러나고로쇠수액은최근웰빙건강음료로각광받으면서수액에대한수요가날로증가 하고있음에도불구하고저장및가공기술부족, 고부가가치상품화기술부족, 과학적효능 평가기술부족등으로인해지역농가뿐만아니라지역전략산업체가큰어려움을겪고있다. 따라서본연구에서는오염되지않은산림자원으로부터채취되는고로쇠수액으로부터항아토피활성이우수한기능성물질의추출, 분리기술을개발하고, 개발물질을이용한 in vitro 항아토피활성을검증함과동시에개발제품을이용한 in vivo 테스트를통한보습효과를 확인함으로서고로쇠수액의항아토피효능에대한과학적기반기술을마련하고산업화를통 한지역경제발전에기여하고자하였다 국내 외관련기술의현황 1) 국외현황 아토피피부염은발병원인이명확치않으며다양한요인에의해발생됨에따라현재사용 되고있는아토피치료제는주로증상을완화하기위한치료제들이개발되어있는실정으로, 근본적인치료제개발을위한신기능성물질개발이절실하다.

7 일반적으로아토피피부염치료는약물투여타입에따라외용방법, 내복방법, 면역치료및 기타방법으로구분할수있으며, 사용하는약물에따라스테로이드제, 항히스타민제, 면역억제 제, 항생제등으로구분할수있다. 현재사용되고있는치료제는스테로이드제와항히스타민제가주를이루며, 극심한환자의 경우면역억제제를사용하기도한다. 기개발된치료제들의단점인부작용을최소화하며, 아토 피증상초기 가려움 단계에서작용할수있으며, 효능이뛰어난새로운약물( 면역조절물질) 을 개발하기위한다양한노력들이전세계적으로활발히추진중에있다. 기개발된아토피치료제 Topical Corticosteroids, Elidel, Protopic 등은 가려움긁기더 가려움의순환(itch-scratch-Itch cycle) 에서긁기후염증반응매개체(inflammatory chemicals) 분비를억제하는약물들로, 초기 가려움 단계를억제하여 긁기 단계및이후의피부손상이 나염증반응을막을수있는약물을개발하는것은아토피를근본적으로치료할수있는방 법이다. 아토피피부염을포함한피부질환제의세계시장규모는 2005년기준 111.9억달러로 2004 년 107.9억달러에비해 3.7% 성장하였으며, 환경오염, 식습관및스트레스등으로인해세계 피부질환( 특히, 아토피피부염) 환자는급속히증가할것으로전망되고있어관련시장은지속 적으로성장할전망이다. 세계피부질환치료제를판매하고있는기업중상위 10개기업은 Novartis, GSK, Schering 등다국적제약기업들이차지하고있다. 미국, 일본등선진국을중심으로아토피피부염의치료를위한치료제개발이활발히진행 되고있으며신규고효능합성또는생물유래물질의개발및응용연구에집중하고있고 아토 피피부염의발병메카니즘규명을위한많은연구개발도추진중에있다.

8 국내외기술수준비교 개발기술명 고로쇠수액을아토피피부염억제기능성물질추출, 분리기술 개발( 아토피미용제품, 기능성식품 ) 고로쇠수액을이용한 in vitro/in vivo 아토피염증억제활성에대한연구개발 관련기술최고보유국 현재기술수준 우리나라연구신청팀 기술개발목표수준 일본 40% 40% 70% 미국 50% 50% 70% 개발기술의차별성 현재아토피치료제는주로증상을 완화하기위한합성치료제들이개 발되어있으나, 본연구에서는오 염되지않은산림자원으로부터채 취되는고로쇠수액으로부터항아 토피활성이우수한기능성물질의 추출, 분리기술을개발하고, 개발 물질을이용한 in vitro 항아토피활 성을검증함과동시에개발제품을 이용한 in vivo 테스트를통한보습 효과를확인함으로서고로쇠수액의 항아토피효능에대한과학적기반 기술을마련하고산업화를통한지 역경제발전에기여하고자하였다. 2) 국내현황 국내를비롯한전세계아토피피부질환발병률은매년증가하고있으며, 대기오염및기타 유발요인등으로증가추세는지속될것으로전망되어커다란개인적사회적문제로대두되고있 다. 대다수의아토피환자들에서호발연령이어린나이에시작되며, 일생생활중특히스트레 스와마찰등의자극, 알코올, 강한자외선, 발한등에의해쉽게피부염이유발될수있으며 환경오염및급속한산업화와도밀접한관계가있다고보고되고있다. 아토피피부염환자는타인과어울리기싫어하는대인기피증과사회와학교생활에서의부 적응증을갖기쉬우며, 우울증, 소외감, 불안증, 수면장애등심각한정신적육체적사회적장 애를유발하는것으로알려지고있다. 대한바이오링크의경우아토피성피부염과알레르기성비염등에효과가있는생약재 30 여가지를섞어만든기능성보조식품인 < 알러지나(Allergina)> 의제조방법에대해미국특허를

9 획득했으며임상결과아토피성피부염과알레르기성천식등에 되었다. 80 % 가넘는완치율이보고 아토피피부염을포함한피부질환치료제개발은전무한실정으로, 치료제보다는피부염을 개선하기위한화장품및식품분야집중되어왔으나, 90년대후반이후아토피치료제를개발하기위한연구가제약회사나벤처기업등을중심으로추진되고있다. 물, 국내주요연구로는고로쇠수액을함유하는칼슘결핍성골다공증예방용및개선용조성 고로쇠나무수액을함유하는피부미백효과를갖는피부화장료조성물개발에대한연구 결과가보고된바있으나항아토피개선용신물질개발및제품화에대한연구는매우미흡한 실정이다 국내 외시장규모 국내고로쇠관련제품은고로쇠나무, 고로쇠수액의 1차단순가공제품이주류를이루고 있으며, 아토피관련제품개발및상품화시도는매우미흡한실정이다. 아토피피부염을포함한피부질환의세계시장규모는 2005년기준 111.9억달러로 2004년 107.9억달러에비해 3.7% 성장을보였다. 약물분류에따른피부질환세계시장규모는 2001 년85.4억달러에서2004년107.9억달러로2005년111.9 억달러로, 최근 5년간31% 의성장률로 빠르게관련시장이확대되고있으며, 향후에도환경오염, 식습관및스트레스등으로인해세 계피부질환( 특히, 아토피피부염) 환자는급속히증가할것으로전망되고있어관련시장은 지속적으로성장할전망이다. 세계피부질환치료제를판매하고있는기업중상위 10개기업은 Novartis, GSK, Schering 등다국적제약기업들이차지하고있다.

고로쇠관련특허현황을보면고로쇠수액을첨가한일반식품( 한과, 아이스크림, 냉면,

표적인치료제로자리매김하고있으나심각한부작용을초래할수있어사용에주의가필요하 다.

10 고로쇠관련특허현황을보면고로쇠수액을첨가한일반식품( 한과, 아이스크림, 냉면, 음료, 간장, 김치등) 개발에관련된내용이주류를이루고있는데, 그중효능연구를통한특허로서 는칼슘결핍성골다공증예방조성물특허(2008), 피부미백효과조성물특허(1993) 가보고된 바있으며, 이러한천연물소재를활용한항아토피에관한제품화는매우미흡한실정이다. 현재항아토피제로사용되고있는일반적인스테로이드제는다양한염증성피부질환의대 표적인치료제로자리매김하고있으나심각한부작용을초래할수있어사용에주의가필요하 다. 따라서고로쇠수액과같은천연물소재로부터부작용을감소시킬수있는기능성신물질 들이꾸준히개발되고산업화된다면아토피관련시장에서의수요는무한급수적으로증가될 것으로전망된다. 고로쇠수액관련제품현황 고로쇠액상제품 ( 국내) 고로쇠수액( 국내) 가공제품( 캐나다) 고로쇠요구르트( 국내) 고로쇠장류( 국내) - 고로쇠수액단순가공품현황 -

11 산업화를통한기대효과 ( 단위 : 백만원) 항목 산업화기준 현재 2010 ( 개발단계) 2011 ( 산업화단계) 2012 ( 활성화단계) 2013 ( 활성화단계) 계 직접경제효과 ,000 2,000 4,600 경제적파급효과 ,000 1,600 3,000 6,900 부가가치창출액 ,000 2,000 5,000 8,500 합계 1,300 1,300 2,800 4,600 10,000 20,000 직접경제효과 : 본연구과제개발기술의산업화를통해기대되는제품의매출액추정치 경제적파급효과 : 본연구과제개발기술의산업화를통한농가소득효과, 비용절감효과등추정치 부가가치창출액 : 본연구과제개발기술의산업화를통해기대되는수출효과, 브랜드가치등추정치 제 2 장과제개발내용및방법 1. 기술개발의목표 1-1. 개발목표 본연구에서는오염되지않은산림자원으로부터채취되는고로쇠수액으로부터항아토피활성이우수한기능성물질의추출, 분리기술을개발하고, 개발물질을이용한 in vitro 항 아토피활성을검증함과동시에개발제품을이용한 in vivo 테스트를통한보습효과를확인 함으로서고로쇠수액의항아토피효능에대한과학적기반기술을마련하고산업화를통한지 역경제발전에기여하고자하였다.

12 1-2. 개발내용및범위( 시스템구성도, 구조등은그림으로표현) 연구개발목표 고로쇠수액으로 부터 항아토피 물질추출, 분리 기술개발 내용및범위 고로쇠수액의농도별활성검증소재제조 - 고로쇠수액의감압농축을통한농도별시료제조 동결건조분말소재의농도별아토피크림소재개발 - 고로쇠수액동결건조분말소재를이용한농도별항아토피활성, 항산화활성소재개발 비고주관, 참여기업공동 개발신물질의분석및항아토피활성연구 개발신물질의분석 - 일반성분, 기능성물질, 총페놀성화홥물, 총플라보노이드함량분석 신물질의항산화활성연구 - DPPH radical 소거능, Reducing power, ABTs radical 소거능, Nitric oxide 소거능, Nitrite 생성억제능조사 항아토피항균활성조사 - 아토피진균( 포도상구균 S.aureus) 을포함한 6종의균주에대한항아토피항균활성조사 주관 개발신물질의 in vitro 항알레르기활성및 in vivo 테스트를통한보습효과검증 고로쇠수액의 in vivo 테스트 - 건성피부, 중성피부, 지성피부에대한보습력테스트실시 개발제품( 항아토피크림) 의 in vivo 테스트 - 개발된항아토피크림 ( 농도별효과검증) - 건성, 중성, 지성피부에대한보습효과 - 크림사용전, 후보습력테스트 - 시간경과에따른보습력테스트 주관 시제품개발및 산업화 연구결과에기초한항아토피시제품개발및상품화 - 항아토피기능성식품 1 종( 액상제품) - 항알레르기, 항염증크림 1 종( 고형상크림제품) 참여기업 개발시제품의형태및용도 구분제품의유형제품형태/ 용기용도포장단위비고 개발신물질을이용한항아토피개발제품 기능성식품 항아토피크림 액상 고형상 항아토피기능성식품한의원, 한방병원공급용항아토피크림한의원, 한방병원공급용 100ml*30 포/box 시제품 60g/1PET 시제품

13 1-3. 기술개발( 또는제품) 의평가방법및평가항목 평가항목 ( 주요성능 Spec) 단위 비중 1) (%) 세계최고수준 ( 보유국/ 보유기업) 연구개발전국내수준 개발목표치평가방법 2) 1. 항아토피기능성 신물질분리정제 기술 순도 30 일본, 미국 30~50% 70~80% 신물질개발여부 2. 신물질의항산화억제능활성평가 (%) 20 일본, 미국 60~70% 80~90% 억제능평가 3. 신물질의항아토 피항균활성평가 항아토피활성 (%) 30 일본, 미국 50~60% 80~90% 항아토피활성평가 4. in vivo 임상평가 SCO RAD Index 20 한국, 중국 60~70% 80~90% SCORAD Index

14 2. 개발방법 2-1. 기업연구인력및주관기관연구인력, 기자재활용방안 기업연구인력활용방안 고로쇠수액으로부터 항아토피기능성물질추 출분리, 기술개발지원 항아토피활성연 구를위한현물지 원및결과분석, 협 의 연구결과에기초 한항아토피시제품 개발및상품화 - 항아토피기능성식 품 1 종( 액상제품) - 항알레르기, 크림 1종 항염증 ( 고형상크림제품) 주관기관활용방안기자재활용방안연구인력활용방안기자재명 고로쇠수액의농도별활성검증 소재제조 - 고로쇠수액의감압농축을통 한농도별시료제조 동결건조분말소재의농도별아 토피크림소재개발 - 고로쇠수액동결건조분말소 재를이용한농도별항아토피 활성, 항산화활성소재개발 개발신물질의분석및항아토피활 성연구 -DPPH radical 소거능, Reducing power, ABTs radical 소거능, Nitric oxide 억제능조사 소거능, Nitrite 생성 - 아토피진균( 포도상구균 S.aureus) 을포함한균주에대한항아토피 항균활성조사 - 고로쇠농도별, 동결건조분말시 료농도별개발소재에대한항아토 피항균활성조사 고로쇠농도별및개발제품의 in vivo 테스트를통한피부보습효과검증 - 개발된항아토피크림 ( 농도별효과검증 ) - 건성, 중성, 지성피부에대한보습효과 - 크림사용전, 후및시간에따른보습력테스트 시제품개발및제작지원 -항아토피파우치 1 종, 항아토피크림 1 종개발지원 - Refrigerator - 이온교화순수기 - 추출농축기, - 냉동고속원심분리기 - 저온인큐베이터 - Transilluminator - Cold chamber - 자동혈액분석기 - CO2 incubator - 속시렛추출기 - 동물실험장치 - 수분측정장치 - PCR - UV/VIS spectro. 용도 - 식품소재보관 - 기능소재개발 - 소재추출농축 - 소재분리 - 미생물실험 - 식품성분분리 - 물질분리 - 생물활성연구 - 생물활성연구 - 지방분석 - 기능성분석검증 - 수분정량 - 활성검증 - 생물활성검증

15 2-2. 연구방법 가. 실험재료 본실험에사용한고로쇠수액은경남함양군소재함양지리산고로쇠영농조합법인에 서채취된것을것을공급받아농도별, 추출, 분리조건별실험에사용하였다. 함양지리산고로쇠수액 나. 고로쇠수액수율 함양지리산고로쇠영농조합법인에서공급받은고로쇠수액 16.8L을 -40 로동결, 30~35 에서건조한후수율을측정하였다. 고로쇠수액동결건조진행과정

16 다. 개발신물질의활성연구방법 총페놀및플라보노이드함량측정 총페놀함량은 Folin-Denis법에따라각추출물 1mL에 Foline-Ciocalteau 시약및 10% Na 2 CO 3 용액을각 1mL씩차례로가한다음실온에서 1시간정치한후 700 nm에서흡광도를 측정하였으며, Caffeic acid(sigma Co., USA) 를사용한표준검량선으로부터총페놀함량을산 출하였다. 총플라보노이드는 Moreno 등의방법에따라추출물 0.5mL에 10% aluminum nitrate 0.1mL, 1M potassium acetate 0.1mL 및 ethanol 4.3mL를차례로가하여혼합한후실 온에서 40분간정치한다음 450nm 에서흡광도를측정하였으며, 표준물질로는 Quercetin(Sigma Co., USA) 을사용하여얻은표준검량선으로부터총플라보노이드함량을계산하였다. DPPH radical 소거능 DPPH radical 소거능( 전자공여능) 은 1,1-di-phenyl-2-picrylhdrazyl (DPPH) 에대한전자 공여효과로시료의환원력을측정한다. 일정농도의시료액 1ml에 M DPPH용액 3ml를 가하여혼합한다음 30분간반응시킨후 525 nm 에서흡광도를측정하며, 전자공여능은시료첨 가구와시료무첨가구의흡광도의감소율(%) 로나타내었다. 환원력측정 Oyaizu 의방법에따라시료에인산완충액(200mM, ph6.6) 및 1% 의 potassium ferricyanide 각 1ml를차례로가한다음 50 의수욕상에서 20 분간반응시킨다. 여기에 10% TCA용액 1ml 가하여 13,500 g에서 15분간원심분리한후얻은상층액 1ml에증류수 1ml와 ferric chloride 1ml를혼합한후 700nm 에서흡광도를측정한다. 대조구로써 BHT와비교하여 흡광도의값으로나타내었다. ABTs radical 소거능 ABTs 라디칼소거능측정은 7mM ABTs 용액에 potassium persulfate를 2.4mM이되도 록용해시킨다음암실에서 12~16 시간동안반응시켰다. 이를 414nm에서흡광도가 1.5가되도 록증류수로조정한후 3ml를취하여시료액 1ml를가한후실온에서 10분간반응시켜 414nm 에서흡광도를측정하였으며, 시료첨가구와무첨가구의흡광도비로소거능을나타내었다.

17 NO 소거능 Nitric oxide 소거능은구아바시료액 0.5ml에 10mM sodium nitroprusside 용액 0.5ml를 가하여상온에서 150 분간반응시켰다. 여기에 1ml의 Griess reagent를가한후 542nm에서흡광 도를측정하였다. Griess reagent는 2% sulfanilamide를함유하는 4% 인산용액과 0.2% naphthylethyl- enediamide용액을사용직전에 1:1(v/v) 로혼합하여사용하였으며, Nitric oxide 소거능은 1-( 시료첨가구의흡광도/ 무첨가구의흡광도) 100 으로나타내었다. 아질산염소거능의측정 시료에 1mM 아질산나트륨용액 1ml 를가한후, 0.1N HCl 완충액및 0.2M 구연산완충 용액으로각각반응용액을 ph2.5로조정한다음반응용액의총부피를 10ml로하여 37 에서 1 시간반응시킨다. 이반응액을취하여 2% 초산용액, 30% 초산용액으로조제한 Griess 시약을 혼합하여분광광도계로 520nm 에서흡광도를측정하여잔존하는아질산량을산출하였다. 항아토피항균활성측정 개발신물질의항아토피항균활성측정에사용되는균주( 피부진균류, 곰팡이류등) 는한 국미생물보존센터(KCCM) 에서분양받아실험에사용한다. 피부진균류및곰팡이류에대한최 소저해농도(MIC) 측정은액체배지에 2배수씩연속적으로희석한시료를가하여최종균수가 cell/ml가되도록조절하여 37 에서 24 시간배양하며, 균의증식여부는배양액의혼탁 정도를판단한후배양액 100μl씩고체배지에도말하여 37 에서 24시간배양한후육안으로 균의집락형성여부를확인하여최소저해농도(MIC, minimum inhibitory concentration) 로결정 한다. 또한일반세균에대한항균효과는 Brain Heart Infusion(BHI, Difco. MA., USA) 배지를 사용하여 37 에서 24시간전배양후다시상기배지에접종하여 600nm에서흡광도를 0.5로 조절한후 disc 확산법으로측정하였다. 라. 고로쇠수액크림의보습력 Test 고로쇠수액크림의보습력 Test는연구원들이실험실에서직접고로쇠수액크림을농 도별(%) 로제조하여한국국제대학교식품과학과학생 10명을대상으로고로쇠수액크림을손 등부위에바르게한후 BIA 피부유/ 수분측정기를이용하여시간간격으로비교분석한다. 정확한실험을위해일정한장소와시간을정하고실내온도와실내상대습도등을일정하게 유지한후실험한다. 실험전양손을깨끗이씻은후물기를완전히제거하고 5분후측정한 다. 대조군크림을도포하기전한번측정하고대조군크림을일정량취하여손등에도포한

18 즉시한번측정한다. 도포후스톱워치를이용해 5분이지난후측정하고 10분후한번더측 정한다. 이때오른손왼손피부조직이다른사람이있을수있으므로모든피시험자의오른손 을측정하였다.

19 제 3 장사업성과 구분내용 기술적성과 고로쇠로부터항아토피기능성신물질추출, 분리기술개발 항아토피식품소재, 화장품소재, 의약품소재로서의활용가치증대 천연물소재의수입대체효과증대 천연물소재의 in vitro / in vivo 항아토피활성검증기반기술구축 개발신물질의산업화, 마케팅을위한과학적근거제시가능 경제 산업적성과 고로쇠를함양지역특화품목, 향토산업으로집중육성을통한 농가소득증대(30 억이상) 함양군물레방아브랜드를활용을통한고로쇠개발제품의 명품화, 지역관광상품화추진 개발제품의고부가가치화 농가소득증대에크게기여 고로쇠재배농가및수액채취농가확대및고부가가치창출 지역경제활성화에기여 개발제품의산업화를통한일자리창출 국가경쟁력제고 재배및채취농가확대를통한일자리창출 국가지원 고로쇠수액전시유통센터 활성화를통한인력채용(5 명) 연구개발및생산인력확대( 년간 2~3 명), 유통 수출전문가참여 활용방안 ( 사업화방안) 항아토피 고부가가치화창출 제품화기술및제품의효능검증기술접목을통한고로쇠수액의 식품소재, 화장품소재, 의약품소재로서적극활용 농임업의블루오션으로입지구축 농가소득증대 지역경제활성화 함양군지역특화품목육성정책과연계한지역관광상품화전략추진 ( 함양군관광상품화 : 고로쇠체험마을, 고로소전시홍보관등) 함양군지역관광상품으로집중육성 FTA 대비, 임산물의고부가가치기능성상품화 일본, 미국수출

pictum subsp 1680 298.57 1.78 함양지리산고로쇠수액과동결건조분말 1-2.

20 제 4 장결론 1. 고로쇠수액의수율및일반특성 1-1. 고로쇠수액의동결건조수율 함양지리산고로쇠수액 1680ml에서얻어진동결건조분말의양이 g로 1.78% 의수 율을나타내었다. Table 1. Yield of Acer mono Max. by freeze drying Samples Solution(ml) Spray dryer powder (g) Yield (%) Acer pictum subsp 함양지리산고로쇠수액과동결건조분말 1-2. 일반특성 함양지리산고로쇠수액의일반특성을측정한결과고형분(Brix) 함량은 2.0%, 수소이온농도 (ph) 는6.28, 산도는 로나타났다. Table 2. General characteristics of Acer mono Max. Samples Brix ph Acidity Acer pictum subsp

2. 총페놀함량및플라보노이드함량 페놀화합물의항산화활성은수산기를통한수소공여작용으로라디칼들과쉽게공명으로 안정화될수있는구조를가지고있어항산화작용을가지는것으로보고되고있으며, Ito 등 은플라보노이드가 superoxide에의해서야기되는비효소적인 collagen 분해를억제하고 xanthine oxidase 를억제한다고보고한바있다.

21 2. 총페놀함량및플라보노이드함량 페놀화합물의항산화활성은수산기를통한수소공여작용으로라디칼들과쉽게공명으로 안정화될수있는구조를가지고있어항산화작용을가지는것으로보고되고있으며, Ito 등 은플라보노이드가 superoxide에의해서야기되는비효소적인 collagen 분해를억제하고 xanthine oxidase 를억제한다고보고한바있다. 함양지리산고로쇠수액의총페놀및플라보 노이드함량을측정한결과총페놀함량은 0.22mg/100ml, 플라보노이드함량은 0.31mg/100ml 로서비교 적낮은함량을나타내었으며, 이러한결과는항산화활성및항당뇨활성측정에좋은지표가될수있 을것으로사료되었다. Fig. 1. Total phenolic compounds and flavonoid contents of Acer mono Max. 3. 함양지리산고로쇠수액의항산화활성 3-1. DPPH radical 소거능 고로쇠수액시료의항산화능을조사하기위하여 1,1-di-phenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH) 에대한전자공여효과를측정하였다. 일정농도의시료액 1ml에 DPPH용액 3ml

22 를가하여혼합한다음 30분간반응시킨후 525 nm 에서흡광도를측정하였으며, 전자공여능은 시료첨가구와시료무첨가구의흡광도의감소율(%) 로나타내었다. 고로쇠수액의 DPPH radical 소거능을측정한결과 5,000ppm 농도에서 6.93% 의낮은활성을보였지 만농도가진해질수록활성이높아져 50,000ppm 농도에서 34.78% 의가장높은활성을보였다. 하지만 50% 미만의항산화능을나타내었고 100,000ppm 농도에서는 6.49% 로유의적인감소를보였다. Fig. 2. DPPH radical scavenging activities of Acer mono Max 환원력 (Reducing power) 항산화반응은 reductone이제공하는수소원자가 free radical 사슬을분쇄함으로써시작 되는데, 환원력은반응조건에첨가되는시료의농도에따라달라지며, 대부분이시료첨가량의 증가에따라환원력이상승하는경향을나타내고있다. 고로쇠수액의환원력을측정한결과모든 농도에서 1 미만의유의적인환원력을보였으며, 평균 0.12 의낮은환원력을나타내었다. Table 3. Reducing power of Acer mono Max. Samples Sample concentration( μl/ ml) (OD value) 5,000 10,000 20,000 25,000 50, ,000 Acer pictum subsp

23 3-3. ABTs radical 소거능 ABTs 라디칼소거능은 7 mm ABTs 용액에 potassium persulfate를 2.4 mm이되도록 용해시킨다음암실에서 12~16 시간동안반응시키고, 이를 414 nm에서흡광도가 1.5가되도록 증류수로조정한후 3 ml를취하여시료액 1 ml를가한후실온에서 10분간반응시켜 414 nm 에서흡광도를측정한결과, 시료의농도가높을수록전반적으로높은소거능을나타내었다. 고로쇠수액의 ABTs radical 소거능을측정한결과 10,000ppm 농도까지는 10% 미만으로소거능이낮게 나타났으나, 수액의농도를 20,000ppm 이상으로높일경우에는농도에따라유의적으로높은소거능을 보였다 NO 소거능 Fig. 3. ABTs radical scavenging activities of Acer mono Max. 고로쇠시료액 0.5 ml에 10 mm sodium nitroprusside 용액 0.5 ml를가하여상온에서 150 분간반응시킨후, 여기에 1 ml의 Griess reagent를가한다음 542 nm에서흡광도를측정하 였다. Griess reagent는 2% sulfanilamide를함유하는 4% 인산용액과 0.2% naphthylethyl- enediamide용액을사용직전에 1:1(v/v) 로혼합하여사용하였으며, Nitric oxide 소거능은 1- ( 시료첨가구의흡광도/ 무첨가구의흡광도) 100 으로나타내었다. 고로쇠수액의 NO 소거능측정결과 5,000ppm 농도에서 0.62% 의활성을보였으며, 10,000ppm 농도에 서부터활성이급격하게증가하여 50,000ppm 농도에서가장높은 29.22% 의활성을보였다. 그러나전반 적으로 50% 미만의소거활성을보였다.

24 Fig. 4. Nitric oxide radical scavenging activities of Acer mono Max 아질산염(NO 2 ) 소거능 아질산염의소거능은아질산염이환원성물질에의하여 nitric oxide로전환되기때문에 관찰할수있는데, ascorbic acid, cysteine, hydroquinone 및 nicotinamide adenine dinucleotide, phenolic compounds 등이주로대표적인환원성물질로서작용하는것으로알려져있다. 아 질산염소거작용측정은 1mM NaNO 2 용액 1ml에각시료 1ml를가하고 0.1 N HCl과 0.2 M 구연산완충액으로 ph 2.5로보정한다음완충액을가하여총부피를 10 ml로하였다. 이용액 을 37 에서 1시간반응시킨후각반응액 1ml를취하여 2% 초산용액 3ml와 30% 초산용액으 로용해한 Griess reagent (1% sulfanilic acid : 1% naphthylamine = 1:1) 0.4ml를순차적으로 가하여진탕혼합하고실온에서 15분간방치한후 520 nm 에서흡광도를측정하였다. 고로쇠수액의아질산염 (NO 2 ) 소거능은농도가높을수록높은활성을보였으나, 20,000ppm 이하의농 도에서는활성이너무낮게나타났으며, 특히 100,000ppm 농도에서 15.88% 로가장높은활성을보였다. 그러나전반적으로 50% 미만의소거능을나타내었다.

25 Fig. 5. Nitrite scavenging ability of Acer mono Max. 4. 함양지리산고로쇠수액의항균활성 아토피관련균주에대해고로쇠수액의항아토피실험은각시료농도를달리하여 60μl씩 disc paper에천천히흡수시킨후균의특성에따라 28 ~37 의인큐베이터에서배양한후 생육억제환(Clear zone) 을측정하여항아토피항균활성을평가하였다. 이때대조군으로는각 시료의용매를사용하여비교분석하였다. Disc 확산법으로평판배지에잘분리된독립 colony 를백금이로떼어세균류는 NA(Nutrient Agar) medium과 LB(Lactose Broth Agar) medium를 이용하여 disc paper 를이용한항균실험을측정하였다. 이때 disc간의간격은 24mm 이상떨어 져야하며 plate의가장자리에서 15mm 이상떨어지게놓는다. disc를놓은후 micro pipette을 사용하여일정농도를함유하는제품시료를 disc에주입한다음 15분이내에 37 배양기에서 18~24 시간배양한후생육저지환(clear zone) 의지름을측정하여 mm 단위로기록하였다. 사용균주에대한최소저해농도(MIC) 측정은액체배지에 2배수씩연속적으로희석한시료를 가하여최종균수가 cell/ ml가되도록조절하여 37 에서 24 시간배양하며, 균의증식여부 는배양액의혼탁정도를판단한후배양액 100μl씩고체배지에도말하여 37 에서 24시간배 양한후육안으로균의집락형성여부를확인하여최소저해농도 (MIC, minimum inhibitory concentration) 로결정하였다.

26 고로쇠수액및개발소재의아토피유발균주에대한항미생물활성테스트 Escherichia coli Staphylococcus aureus Fig. 5. Photgraphy of antimicrobial ability of Acer mono Max. 5. 개발제품( 항아토피크림) 의보습효과 5-1. 기계구입경로 인터넷쇼핑몰 : 에스디엠코스메틱/ 나도미인 ( 기계정보 기계명 : BIA(Bioelectric Impedance Analysis) Skin Analyzer (BIA 피부유/ 수분측정기) / 회사 : 에스디엠코스메틱

27 5-3. 실험재료 피부유/ 수분측정기, 대조군크림, 고로쇠수액크림 5-4. 실험방법 1 실내온도와실내상대습도등을일정하게유지시킨다. 2 한사람의손등에각각같은양의시료를도포한다. 3 시간별로피부유/ 수분함량을측정한다. 4 결과를표로비교하여고찰한다. 개발제품( 고로쇠수액크림) 의보습력측정과정

5-5. 고로쇠수액크림제조방법및성분 상 A B C D 원료명( 성분명) 함량 (%) 비고 Jojoba oil 00 Skin Conditioning Agent Evening Primrose oil 00 Skin Conditioning Agent Emulsifying Wax 00 Bulking Agent Monta Wax 00 Bulking Agent D.

Skin Conditioning Agent lavender 00 aroma constituent tea tree 00 aroma constituent gum tree 00 aroma constituent Chamomile 00 aroma constituent E 고로쇠수액동결건조분말 00 Skin Conditioning Agent [ 제조방법] 1.

28 5-5. 고로쇠수액크림제조방법및성분 상 A B C D 원료명( 성분명) 함량 (%) 비고 Jojoba oil 00 Skin Conditioning Agent Evening Primrose oil 00 Skin Conditioning Agent Emulsifying Wax 00 Bulking Agent Monta Wax 00 Bulking Agent D.W 00 Solvent Glycerin 00 Humectant Hyaluronic acid 00 Skin Conditioning Agent Ceramide 00 Skin Conditioning Agent Lipidure 00 Skin Conditioning Agent elastin 00 Skin Conditioning Agent collagen 00 Skin Conditioning Agent lavender 00 aroma constituent tea tree 00 aroma constituent gum tree 00 aroma constituent Chamomile 00 aroma constituent E 고로쇠수액동결건조분말 00 Skin Conditioning Agent [ 제조방법] 1. 용기에 A상의성분을계량하여 70 로가온하여용해한다. 2. 용기에 B상의성분을계량한후 E상의성분을첨가하여 70 로가온하여용해한다. 3. A, B상의성분이 70 가되면 A상에 B 상을투입하여유화한다. 4. 핸드블랜드를이용해 3 분정도교반혼합한다 가되면 C 상의성분을넣고주걱으로교반혼합한다 가되면 D 상의성분을넣어마무리한후소독한용기에담는다.

29 5-6. 개발제품( 함양지리산고로쇠수액크림) 고로쇠수액동결건조분말 1% 고로쇠수액동결건조분말 2% 고로쇠수액동결건조분말 3% 고로쇠수액동결건조분말 5% 고로쇠수액동결건조분말 10% 대조군 고로쇠수액동결건조분말농도별(%) 보습크림 고로쇠수액동결건조분말농도별(%) 보습크림 고로쇠수액동결건조분말농도별(%) 보습크림

30 5-7. 개발제품( 고로쇠수액크림) 의보습효과 가. 고로쇠수액및동결건조분말의고형분함량 고로쇠수액의고형분함량과고로쇠수액의동결건조분말을농도별(%) 로증류수(D.W) 에녹인고형분함량을측정한결과고로쇠수액의고형분함량은고로쇠수액의동결건조분 말의 1% ~ 3% 사이로나타났다. Table 4. Concentration of Acer mono Max. and freeze drying powder of Acer mono Max. Samples Brix Acer pictum subsp 2.0 Acer pictum subsp freeze drying powder 1% + D.W 0.9 Acer pictum subsp freeze drying powder 3% + D.W 2.9 Acer pictum subsp freeze drying powder 5% + D.W 4.5 Acer pictum subsp freeze dryingr powder 10% + D.W 8.7

31 나. 고로쇠수액의보습력 고로쇠수액과고로쇠수액의동결건조분말을농도별로증류수에녹인용액의보습력을 측정한결과고로쇠수액보다고로쇠수액의동결건조분말을농도별로증류수에녹인용액이 보습력에더좋은효과가있는것을확인할수있었다. Table 5. Moisturizing effect of Acer mono Max. (minute) before after 5 10 moi. oily rou. moi. oily rou. moi. oily rou. moi. oily rou. APC100 1) C+APC C+APC C+APC C+APC C+APC ) APC100 : Acer pictumsubsp 100% C + APC0 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 0% C + APC1 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 1% C + APC3 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 3% C + APC5 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 5% C + APC10 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 10%. *moisture : -5~5, oily : -5~5, rough : -5~5. *rough : higher numbers are tender.

32 다. 개발제품( 고로쇠수액크림) 의보습력 BIA 피부유/ 수분측정기를이용하여고로쇠수액크림의보습력을측정한결과보습은 수분, 유분, 거칠기로나타낼수있다. 이번실험에서는보습의세가지조건중수분이나거칠기보다는유분이시간이지날수록 높은수치를유지하는것을확인할수있었다. 모든피부는크림( 대조군크림, 고로쇠수액의동결건조분말을첨가한크림) 을바르고난직 후에는수분, 유분, 거칠기가상승했으나 5분경과후측정한결과수분과거칠기는바르기전 상태에가까워졌고유분은오히려바른직후보다높은수치를나타내었다. 중ㆍ지성피부에는고로쇠수액의동결건조분말이 10% 첨가된크림이바른후 5분경과후 까지수분과거칠기가유지되었고, 건조피부에서는 10 분경과후에도수분, 유분, 거칠기가높 은수치인것을확인할수있는데, 특히고로쇠수액의동결건조분말이 5% 와 10% 로첨가된 크림에서유분의수치가높게나타났다. Oily skin hydration test to Acer pictumsubsp cream Table 6. Moisturizing effect of Acer mono Max. creamby oily skin (minute) before after 5 10 moi. oily rou. moi. oily rou. moi. oily rou. moi. oily rou. C+APC0 1) C+APC C+APC C+APC C+APC C+APC ) C + APC0 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 0% C + APC1 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 1% C + APC2 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 2% C + APC3 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 3% C + APC5 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 5% C + APC10 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 10%. *moisture : -5~5, oily : -5~5, rough : -5~5. *rough : higher numbers are tender.

33 Table 7. Moisturizing effect of Acer mono Max. creamby Dry skin (minute) before after 5 10 moi. oily rou. moi. oily rou. moi. oily rou. moi. oily rou. C+APC0 1) C+APC C+APC C+APC C+APC C+APC ) C + APC0 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 0% C + APC1 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 1% C + APC2 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 2% C + APC3 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 3% C + APC5 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 5% C + APC10 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 10%. *moisture : -5~5, oily : -5~5, rough : -5~5. *rough : higher numbers are tender. Table 8. Moisturizing effect of Acer mono Max. cream by Normal skin (minute) before after 5 10 moi. oily rou. moi. oily rou. moi. oily rou. moi. oily rou. C+APC0 1) C+APC C+APC C+APC C+APC C+APC ) C + APC0 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 0% C + APC1 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 1% C + APC2 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 2% C + APC3 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 3% C + APC5 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 5% C + APC10 : Control cream + Acer pictumsubsp freeze dryingr powder 10%. *moisture : -5~5, oily : -5~5, rough : -5~5. *rough : higher numbers are tender.

34 6. 고로쇠수액크림의시제품제작및상품화 6-1. 미백기능성항아토피로션제조방법및성분 상 A B 원료명( 성분명) 함량 (%) 비고 정제수 00 Solvent Glycerine 00 Humectant Butylene Glycol 00 Emulsion stabilizer Albutin 00 Whitening Agent Carbomer 00 Viscosity Agent Adenosine 00 Antiageing Agent Olive oil 00 Skin Conditioning Agent Tocopheryl Acetate 00 Skin Conditioning Agent Stearyl Alcohol 00 Emulsion stabilizer Glyceryl Stearate 00 Emulsifying Agent PEG-75 Stearate 00 Emulsifying Agent Ceteth Emulsifying Agent Steareth Emulsifying Agent Salicylic acid 00 Antiseptic Agent Dimethicone 00 Viscosity Control Dimethicone / vinyl dimethicone crosspolymer 00 Viscosity Control Cyclopentasiloxane 00 Skin Conditioning Agent Cyclohexasiloxane 00 Skin Conditioning Agent Conjugated linoleic acids(cla) 00 Lipolysis Agent C Triethanolamine 00 Bulking Agent 고로쇠 00 Skin Conditioning Agent D E F 구아바잎추출물 00 Skin Conditioning Agent Hyaluronic acid 00 Skin Conditioning Agent Methyl Paraben 00 Preservative Phenoxyethanol 00 Preservative lavender oil 00 aroma constituent Chamaecyparis obtusa ( 편백) oil 00 aroma constituent Lemon peel oil 00 aroma constituent [ 제조방법] 1. A상의성분을계량하여가마에투입하고 70 로가온하여용해한다. 2. B상의원료를보조가마에서용해하여 A 상에투입하여유화한다. 3. C상의원료를 A 상에투입한다. 4. D, E 상을순차적으로투입하여교반혼합한다 가되면 F 상의성분을투입하여교반혼합한다 까지냉각한후여과하여배출한다. (150 메쉬여과포사용)

35 6-2. 개발제품사진 - 고로쇠수액과구아바잎추출물을이용한 미백기능성항아토피로션 - 제품명 : JK STORY Moisturizer Lotion < 제품 Design > < JK STORY Moisturizer Lotion >

36 - 고로쇠수액과구아바잎추출물을이용한 기능성음료 - 제품명 : 1. 지리산산양삼고로쇠 2. 지리산고로쇠칡즙 < 지리산산양삼고로쇠 > < 지리산고로쇠칡즙 >

Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No μ μ

Journal of Life Science 2011 Vol. 21. No. 8. 1120~1126 ISSN : 1225-9918 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2011.21.8.1120 μ μ μ α β Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No. 8 1121 μ μ 1122 생명과학회지 2011,