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1 RESEARCH ARTICLE Kor. J. Aesthet. Cosmetol., Vol. 10 No. 3, , August 2012 Fisetin 의항산화활성및미용기능식품소재로서의가능성고찰 김의수 1, 장해동 1, 김교남 2 * 1 한남대학교식품영양학과, 2 경남대학교식품생명학과 Anti-oxidative Function of Fisetin and Its Potential as an Anti-oxidant Nutri-cosmetics Eui-Su Kim 1, Hae-Dong Jang 1, Gyo-Nam Kim 2 * 1 Department of Food and Nutrition, Hannam University 2 Department of Food Science and Biotechnology, Kyungnam University Abstract The term of nutri-cosmetics refers to nutritional supplements which can support the function and the structure of the skin. The fisetin is a flavonol which belongs to the flavonoid group of polyphenols. Although the anti-carcinogenic property of fisetin have been widely studied, anti-oxidative function of fisetin in HaCaT keratinocytes is unknown. In this study, we examined the in vitro chemical and cellular anti-oxidant activities of fisetin in HaCaT keratinocytes and we further discussed its potential as an anti-oxidant nutricosmetics. We employed scavenging assay for the 1,1-diphenyl-2,5-picrylhydrazyl (DPPH) radicals and cellular anti-oxidant activity of fisetin was investigated in -treated HaCaT keratinocytes as judged by the 2 7 -dichlorofluorescein-diacetate (DCFH-DA)-based assay. The fisetin effectively scavenged DPPH radicals (IC μm) when compared to the scavenging activities of L-ascorbic acid (IC μm) acid and trolox (IC μm), well-known anti-oxidants. In addition, the fisetin significantly ameliorates -induced oxidative stress in HaCaT keratinocytes in dose-dependent manner. The fisetin showed more strong cellular anti-oxidant activity than those of L-ascorbic acid and trolox in -treated HaCaT keratinocytes. In agreement with result of the cellular anti-oxidant activity, we observed markedly suppressed -induced oxidative stress by the pretreatment of 100 μm fisetin under the fluorescence microscopy analysis. These results provide the scientific evidences for the development of skin targeted nutri-cosmetics which has anti-oxidant function. Keywords: Fisetin, Nutri-cosmetics, Anti-oxidant, HaCaT keratinocytes, Oxidative stress 노화과정이란시간에따라세포의기능이저하되는과정으 로세포내항상성은노화과정과밀접한관련을가지고있다 ( 이선영등, 2011). 또한노화는생물체내외의여러요인으로부터 *Corresponding author: Gyo-Nam Kim, Department of Food Science and Biotechnology, Kyungnam University, 11 (Woryeong-dong) Woryeongbuk 16-gil, Masanhappo-gu, Changwon-si, Gyeongsangnam-do , South Korea Tel.: , Fax: gnkim@kyungnam.ac.kr Received May 3, 2012; Revised June 27, 2012; Accepted June 29, 2012; Published August 30, 2012 초래되는산화적스트레스를억제하는능력을상실하게한다. 생체내에서에너지생산을위한산화과정중에상당량의활성산소들이생성된다. 이들활성산소는정상적인상태에서생체내제거기작에의해대부분소거되지만, 순간적으로활성산소가다량으로발생되거나만성적으로활성산소가발생되어항산화방어시스템의균형이깨지면피부질환을비롯한각종질병의원인이된다고알려져있다 (Lim et al., 2009; 정은영등, 2010; 윤미영등, 2009). 여러연구자들에의해산화적스트레스는지질과산화, 콜라겐과엘라스틴의사슬절단및멜라닌생성을촉진시킴으로써피부의탄력을감소시키고주름및기미 주근깨등의각종피부질환을유발하여피부노화를가속화시키는것으로보고되었다. 따라서피부노화를지연시키고억제하기위해서는생체내뿐만아니라피부에서과잉의활성 515

2 Kor. J. Aesthet. Cosmetol., Vol. 10 No. 3, , August 2012 산소를억제하고효율적으로제거할수있는항산화방어시스템이필요하다 ( 이선영등, 2011; 김형우등, 2009). 최근피부의건강과아름다움을위한소비자들의다양한제품의수요가급증하였다. 특히피부는영양과밀접한관련이있다는인식변화에따라이제는바르는화장품에서벗어나특정영양소성분을이용한먹는화장품, 즉피부미용식품 (nutri-cosmetics, beauty foods) 의개발이가속화되고있다. 대표적인항산화피부미용식품소재로는 L-ascorbic acid와 tocopherol이있다. 이들비타민의항산화활성은이미잘알려져있으며피부의콜라겐합성및탄력유지에도중요한역할을한다고알려져있다 ( 조윤희, 2005). 최근웰빙과더불어천연피부미용식품및유기농피부미용식품에대한관심이높아지고있다. 그러므로식물및식품유래추출물이나이들의생리활성물질에대한과학적인검증과안정성연구가요구되어진다. Benz-γ-pyrone의구조를갖는페놀화합물플라보노이드 (flavonoids) 는식물계에널리분포하며플라보놀 (flavonols), 플라본 (flavones), 안토시아니딘 (anthocyanidins), 이소플라본 (isoflavones), 그리고네오플라보노이드 (neoflavonoids) 등의하위그룹을포함하는색소성분이다. 녹차의카테친 (catechins), 양파의쿼세틴 (quercetin), 두류의제니스테인 (genistein) 은비교적잘알려진천연물유래플라보노이드이며화장품소재로의개발로도광범위하게이어지고있다. 자연계에존재하는다양한플라보노이드는생물체내세포신호전달, 유전자및단백질의발현, 세포분화등에관여하여노화, 암, 그리고심혈관계질환을예방할수있다는연구결과들이다수보고되었다 (Robert J et al., 2001: Kelly EH et al., 2002; Yao K et al., 2008). 이러한플라보노이드중플라보놀그룹에속하는 3,3,4,7-tetrahydroxy flavone (fisetin) 은 (Figure 1) 딸기, 사과, 감, 양파, 포도, 그리고오이등과같은과일이나채소에많이함유된성분이다 (Arai Y et al., 2000). 최근에는옻나무추출물로부터얻은 fisetin이전지방세포 (preadipocytes) 에서지방세포 (adipocytes) 로분화되는과정인 adipogenesis를억제하고 UVB에의한세포사멸을감소시킨다는보고 ( 김세건등, 2010; 김돈영등, 2005; 정세진등, 2007) 를비롯하여항산화, 항염, 및항암효과를포함하는다양한생리활성이보고되었다 (Maher P, 2006: Higa S et al., 2003). 그럼에도불구하고 fisetin을피부및미용분야에적용한연구는아직미흡한실정이다. 특히 HaCaT keratinocytes를포함한인간유래세포주에서 fisetin의항산화활성을평가하고항산화피부미용식품소재로서의가능성에대한보고는전무하다. 따라서본연구에서는플라보노이드일종인 fisetin의항산화활성을평가하고항산화피부미용식품소재로서의가능성을탐색하였다. 항산화활성은 DPPH 라디컬소거법과인간유래 HaCaT keratinocytes 모델에서 에의해유도된산화적 스트레스를얼마나효율적으로제거할수있는지를 DCFH- DA 실험법과형광현미경이미지분석을통해확인하였으며, 각각의실험에서는항산화피부미용식품소재로잘알려진 L-ascorbic acid와 trolox ( 비타민 E 수용성유도체 ) 가양성대조군으로사용되었다. 1. 실험재료실험에사용한인간유래 HaCaT keratinocytes는 CLS (Cell Lines Service, Eppelheim, Germany) 에서구입하여사용하였다. Ethanol과 methanol은 ( 주 ) 삼전에서구입하였으며, Dulbecco s modified Eagle s medium (DMEM), fetal bovine serum (FBS), Hank s balanced salt solution (HBSS), streptomycin, penicillin은 Gibco BRL. (Carlsbad, USA) 에서구입하여사용하였다. DCFH-DA,, DPPH, 3-(4,5-diemthylthiazol-2-yl-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), L-ascorbic acid, trolox는 Sigma (St. Louis, USA) 에서구입하여사용하였다. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) reader 및형광분석기 (fluorescence reader) 는 Tecan (Salzburg, Austria) 을, 형광현미경 (fluorescence microscopy) 은 Olympus Optical (Tokyo, Japan) 의기기를사용하였다. 2. DPPH 라디컬소거능분석 DPPH 라디컬소거법은항산화물질의전자및수소공여능을측정하는항산화측정법으로주로 phenolic 구조와 aromatic amine 화합물에많이이용된다. DPPH 라디컬소거능은 Chen 등의방법을일부변형하여측정하였다 (Chen HM et al., 1998). Ethanol에용해시킨 200 μm의 DPPH 용액 1.95 ml에농도별 fisetin 50 μl를넣어잘혼합한뒤, 30 min 동안상온에서반응시켜 ELISA reader (Tecan) 를사용하여 490 nm에서흡광도를측정하였다. 대조군은 fisetin 대신 50 μl의 dimethyl sulfoxide (DMSO) 를첨가하였으며 DPPH 라디컬소거능은아래의방법으로계산하였다. 실험결과는 DPPH 라디컬을 50% 저해하는농도인 IC 50 값으로표현하였다. DPPH 라디컬소거능 (%) = (1-A/B) 100 A: Fisetin 처리군의흡광도 B: 대조군의흡광도 3. HaCaT 세포의배양 HaCaT keratinocytes는불활성화된 10%(v/v) FBS, 100 μ g/ml streptomycin, 그리고 100 U/ml의 penicillin을포함한 516

3 Fisetin 의항산화활성 의 HBSS로 1회세포를씻어주었다. 그후 DMEM 배지를제거하고형광의간섭을받지않는 HBSS로교체해주었다. 600 μm의 용액을가하고 30 min 동안배양한후 40 μm의 Figure 1. Chemical structure of fisetin. DCFH-DA를처리해준후 30 min 추가배양하였다 ( 는총 1시간 ). 형광분석기 (Tecan) 를이용하여 excitation 485 nm, emission 535 nm에서형광의강도를측정하여 fisetin의세포내항산화활성을정량분석하였다. DMEM 배지로 37 의온도, 5% C 환경에서배양하였다. HaCaT keratinocytes는 1주에약 3-4회 1:2 비율로계대배양하였다. 4. MTT 실험을통한세포독성테스트 MTT assay를통하여 HaCaT keratinocytes에대한 fisetin의세포독성을분석하였다. MTT assay는탈수소효소 (dehydrogenase) 에의하여노란색의수용성기질인 MTT tetrazolium을청자색을띄는비수용성의 MTT formazan으로환원시키는미토콘드리아의활성을측정함으로써 fisetin의세포독성을분석할수있다. HaCaT keratinocytes는 12-well culture plate에전배양하여준비하였으며, 준비된 fisetin은언급된농도별로 HaCaT keratinocytes에 24 h 처리한후 5 mg/ml의 MTT 용액을 1 h 처리하였다. 그후 DMEM 배지를제거하고처리된 HaCaT keratinocytes를 1 ml의 phosphate buffered saline (PBS, ph 7.4) 로씻어주었다. 수용액에용해되지않는 MTT formazan을 400 μl의 dimethyl sulfoxide(dmso) 를가하여녹여준다음 ELISA reader (Tecan) 를이용하여 570 nm에서흡광도를측정하였다. 5. DCFH-DA를이용한 fisetin의세포내항산화활성분석 로유도시킨산화적스트레스에대한 fisetin의세포내항산화활성을 DCFH-DA를이용하여분석하였다. DCFH- DA를이용한세포내항산화활성분석은 Lautraite 등의방법을일부변형하여사용하였다 (Lautraite et al., 2003). DCFH-DA는세포막을통해세포로유입되면세포질에존재하는 esterase에의해 DCFH로가수분해되는데세포내활성산소가존재하게되면쉽게 DCF로산화되어 excitation 파장 485 nm, emission 파장 535 nm에서그린색의강한형광을나타낸다. Fisetin을 HaCaT keratinocytes에처리한뒤 로산화적스트레스를유발하면세포내항산화활성정도에따라차이적인 DCF 형광강도를나타내므로이를이용하여 fisetin의세포내항산화활성을분석할수있다. HaCaT 세포를 cells/well의수로 24 h 전배양하고 fisetin을 30 min 동안처리하였다. 배지를제거한후 50 μl 6. 현광현미경분석을통한세포내항산화활성분석 Fisetin의세포내항산화활성은형관현미경분석을통해다시확인하였다. 활성산소에의해산화된 DCF는형광현미경상에서그린색의강한형광강도를나타내기때문에, 형광강도의증가는세포내활성산소의증가를나타낸다. HaCaT 세포를 cells/well의수로 12-well culture plate에 24 h 전배양하고 fisetin을 30 min 동안처리하였다. 배지를제거한후 50 μl의 HBSS로 1회세포를씻어주었다. 그후 DMEM 배지를제거하고형광의간섭을받지않는 HBSS 로교체해주었다. 600 μm의 용액을가하고 30 min 동안배양한후 40 μm의 DCFH-DA를처리해준후 30 min 추가배양하였다. Fisetin의세포내항산화활성은형광현미경 (Olympus Optical) 을통해이미지화하였다. 7. 통계분석모든데이터는평균 ± 표준편차로표현하였으며, 데이터의통계처리는 Statistical Package for Social Science (SPSS, Chicago, USA) 을이용하여분석하였다. 신뢰수준 p<.05에서평균값들에대한유의성을검증하였다. 각항목은일원배치분산분석 (one-way ANOVA) 을시행하여 F값을구하고, Duncan s test를이용하여각구간의유의성차이를검증하였다. 1. Fisetin의 DPPH 라디컬소거능 DPPH 라디컬소거법은항산화기능성을분석하는데있어널리이용되는방법이다. Fisetin의 DPPH 라디컬소거능은 Table 1에나타냈다. L-Ascorbic acid와 trolox는잘알려진항산화제로써본실험의양성대조군으로사용되었다. DPPH 라디컬을 50% 저해하는농도인 fisetin의 IC 50 은 54 μm이었으며, L-ascorbic acid와 trolox는각각 87 μm 그리고 74 μm 이었다. DPPH 라디컬소거능은 fisetin > trolox > L-ascorbic acid 순으로높은것으로나타났다. 세포실험을제외한 in vitro 항산화분석법은크게 3가지의라디컬소거기전에기인한것으 517

4 Kor. J. Aesthet. Cosmetol., Vol. 10 No. 3, , August 2012 Table 1. Scavenging activity of fisetin on DPPH radicals Test sample IC a) 50 ( M) Fisetin L-Ascorbic acid Trolox a c b Data are mean with standard deviation (n=9) obtained from three individual experiments. Different letters within a column indicate significant differences (p<.05) by Duncan s test. a) IC 50 denotes the half maximal inhibitory concentration which is antioxidant concentration causing 50% reduction of the DPPH radicals. Cell Viability (% of Control) NS Fisetin Concentration (µm) 로, 항산화제의라디컬소거기전을유추할수있다. 대표적인것이전자공여능을통해라디컬을소거하는기전이며, DPPH 라디컬소거법이여기에속한다. 둘째는수소공여능을통해라디컬을소거하는방법이며 2,2 -Azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH) 를사용하는 oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assay가여기에속한다. 마지막으로셋째는전자및수소공여능두가지모두를통해라디컬을소거하는기전이있다 (Huang et al., 2005). 본실험결과를통해 fisetin의전자공여능이 DPPH 라디컬소거활성에기여하는것을알수있었으며다양한식물추출물및플라보노이드류의전자공여능이그들의항산화활성에기여할수있다는우리의이전연구결과에부합한다 (Kim et al., 2011; Oh et al., 2010). 2. HaCaT keratinocytes에대한 fisetin의세포독성 HaCaT keratinocytes에대한 fisetin의세포독성은 MTT 실험법을통해평가하였다. Fisetin을 10, 50, 100 그리고 200 μ M의농도로 24시간동안처리한결과, 아무것도처리하지않은대조군대비 94.6%, 93.4%, 87.6%, 99.2% 의세포생존률을각각나타냈으며유의적인차이는없었다 (Figure 2). 몇몇연구자들이암세포모델에서 fisetin을처리한경우세포사멸을유도한다고보고하였다. Chen 등은 μm의 fisetin을 24 h 처리하였을때간암세포주인 SK-HEP-1의유의적인세포사멸을보고하였으며 (Chen YC et al., 2002) Khan 등은 μm의 fisetin을 48 h 처리하였을때전립선암세포주 LNCaP에서세포사멸을관찰하였다 (Khan N et al., 2008). 하지만본실험에서정상세포주인 HaCaT keratinocytes에 fisetin을농도별로 24 h 처리하였을때대조군대비유의적이세포독성을나타내지않았다. Ahmad 등은녹차의대표적인플라보노이드인 epigallocatechin-3-gallate (EGCG) 가암세포주와정상세포주에서전사인자인 nuclear factor κb의발현을다르게조절함으로써암세포선택적인세포사멸을나타낸다고보고하였다 (Ahmad N et al., 2000). 본실험결과는 fisetin이 Figure 2. Effect of fisetin treatment on viability of HaCaT keratinocytes. HaCaT keratinocytes were subjected to MTT assay for determining cell viability after 24 h treatment with fisetin. Percentage viability of HaCaT keratinocytes exposed to 10, 50, 100, and 200 μm of fisetin. NS) Not significant 암세포주와정상세포주에서세포사멸과관련한전사인자나유전자및단백질발현을다르게조절할수있음을보여주는결과라생각된다. 추후세포모델에따른 fisetin의역할에대한심도있는연구가추가로요구된다. 3. 로산화적스트레스가유도된 HaCaT keratinocytes 에서 fisetin 의세포내항산화활성분석 비록 fisetin 이 in vitro DPPH 라디컬소거법에서농도의존 적인항산화활성을나타냈지만인간유래피부세포모델에서 fisetin이항산화활성을나타내는지에대해확인하였다. 최근세포내활성산소를측정하는방법으로써여러연구자들에의해 DCFH-DA법이널리이용되고있다. 동물세포의세포막투과성을가진 DCFH-DA가세포질로유입되게되면세포질에존재하는 esterase에의해 DCFH-DA는 DCFH로가수분해되고, 활성산소가존재하게되면형광을띄지않던 DCFH는활성산소에의해빠르게산화되어강한그린색의형광을띄는 DCF로전환된다. 그러므로형광현미경및형광분석기를통해 DCF의형광강도를측정하면정성및정량분석이가능하다. 본실험에서우리는 HaCaT keratinocytes에 600 μm의 로 HaCaT keratinocytes에산화적스트레스를유도하였다. 본실험에서는 fisetin을먼저 30분간처리한후 를 30분간처리하여산화적스트레스를유도하였다. 그이유는 fisetin에의한산화적스트레스예방효과의가능성에대해분석하고자한의도이며또한 fisetin과 가 medium 환경에서직접적으로반응할수있는가능성을배제시키기위함이다. 로산화적스트레스를유도한결과대조군 (100%) 대비 40.5% 의활성산소가증가하였다 (Figure 3). 반면 30 min 동안 518

Fisetin 의항산화활성 DCF fluorescence intensity (% of Control) 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 Control Fisetin 0 μm 600 μm Fisetin 100 μm (600 µm) - + + + + + + Fisetin (µm) L-Ascorbic acid (100 µm)

Cellular anti-oxidant activity was evaluated in 10, 50 and 100 μm fisetin-pretreated HaCaT keratinocytes in the absence or presence of 600 μm.

5 Fisetin 의항산화활성 DCF fluorescence intensity (% of Control) Control Fisetin 0 μm 600 μm Fisetin 100 μm (600 µm) Fisetin (µm) L-Ascorbic acid (100 µm) Trolox (100 µm) Figure 3. Cellular anti-oxidant activity of fisetin in - induced oxidative stress in HaCaT keratinocytes. Cellular anti-oxidant activity was evaluated in 10, 50 and 100 μm fisetin-pretreated HaCaT keratinocytes in the absence or presence of 600 μm. Data are mean with standard deviation (n=9) obtained from three individual experiments. Different letters indicate significant differences (p<.05) by Duncan s test. fisetin을 10, 50 그리고 100 μm의농도로처리한뒤 600 μm 의 를처리하여산화적스트레스를유도한결과 fisetin은농도의존적으로 로유도된산화적스트레스를억제하였다 (Figure 3). 비록 10 μm의 fisetin 처리에서는유의적인차이는없었지만 50 그리고 100 μm의 fisetin 처리는 HaCaT 세포내산화적스트레스를유의적으로억제하였으며, 특히 100 μm 의 fisetin을처리한 HaCaT keratinocytes는대조군 (102.9%) 수준으로 로유도된산화적스트레스가억제된것을알수있었다 (Figure 3). 본실험에서 fisetin은항산화소재로잘알려진 L-ascorbic acid와 trolox에비하여더강한세포내항산화활성을나타냈다. 이는 fisetin의항산화소재로서의가능성을확인할수있는결과로사료된다. 4. 로산화적스트레스가유도된 HaCaT keratinocytes 에서 fisetin 의세포내항산화활성분석 형광현미경이미지분석을통해다시 fisetin 의 HaCaT keratinocytes에서의항산화활성을확인하였다. 활성산소에의해증가된 DCF는형광현미경에서그린색의형광을나타낸다. 즉, 증가된그린색의 DCF는 HaCaT keratinocytes에발생한산화적스트레스수준과비례함을의미한다. 600 μm의 로 HaCaT keratinocytes에산화적스트레스를유도한결과대조군과비교해활성산소수준이크게증가된것을확인할수있었으며 100 μm의 fisetin 처리는 Figure 3의결과와유 Figure 4. Fluorescence microscopy analysis for observation of reactive oxygen species (ROS). Fluorescence microscopy analysis was performed with DCFH- DA stained HaCaT keratinocytes after treatment with 100 μm fisetin in the absence or presence of 600 μm. 사하게대조군수준으로 로유도된산화적스트레스를억제한것을알수있었다 (Figure 4). 이미지분석에서가장강한 DCF 형광강도를나타낸부분을다시확대하여분석한결과는아래쪽에위치하였다 (Figure 4). 최근소비자들은각종매체로부터다양한정보를습득하고피부와미용에대한관심이높아짐에따라이제는단순히외적으로만영양을공급받는아우터뉴트리션 (outer nutrition) 을넘어서서체내영양밸런스를유지하는이너뉴트리션 (inner nutrition) 이조화된제품을요구하고있다 ( 이상준등, 2005). 이러한소비자의니즈에부응하여태평양과앤프라니는각각비비 (V=B) 프로그램과페어웰링클라인을출시하였으며미용기능식품시장또한크게성장하고있다 ( 김설미등, 2009). 그러므로미용기능식품소재에대한과학적인기능성연구와체계적인기전확립이요구된다. 본연구에서는플라보노이드에속하는 fisetin의항산화미용기능식품소재로서의가능성을알아보기위하여 DPPH 라디컬소거활성과더나아가인간유래 HaCaT keratinocytes 에서 fisetin의세포독성을평가하였다. 또한 로 HaCaT keratinocytes에산화적스트레스를유도한뒤 fisetin의세포내항산화활성을분석하고 fisetin의항산화피부미용소재로서의가능성을고찰하였다. 본연구의결과를요약하자면다음과같다. (i) Fisetin은전자공여능을바탕으로하여유의적 519

6 Kor. J. Aesthet. Cosmetol., Vol. 10 No. 3, , August 2012 인 DPPH 라디컬소거활성을나타냈다. (ii) 인간유래 HaCaT keratinocytes에서 fisetin은세포독성을나타내지않았다. (iii) 로산화적스트레스를유도한 HaCaT keratinocytes 모델에서 fisetin은유의적으로세포내산화적스트레스를감소시켰으며, 같은농도에서항산화소재로잘알려진 L-ascorbic acid와 trolox 보다더강한세포내항산화활성을나타냈다. 이상의연구결과는항산화미용기능식품소재로서 fisetin의가능성을보여주었으며, 추후 HaCaT keratinocytes내에서어떠한신호전달체계를통해항산화활성을나타내는지에대한추가적인분자생물학적기전연구가필요할것으로사료된다. 감사의글이연구결과물은 2012학년도경남대학교학술연구장려금지원에의한것임. 김돈영, 황은희, 박종군. NIH3T3 세포에서 UVB에의한세포고사에미치는옻추출물과 fisetin의효과. 생명과학회지, 15: , 김설미, 김은화. 안면피부관리와항산화비타민섭취의피부건강상태변화. 대한피부미용학회지, 7: , 김세건, 류동영, 김도국, 고다형, 김윤경, 이영미, 정현주. 3T3-L1 세포에대한옻나무추출물의지방축적억제효과. 생약학회지, 41: 21-25, 김형우, 김병주, 임세현, 김현영, 이숙영, 조수인, 김영균. 포공영추출물의항산화효과및피부각질세포보호효과. 대한본초학회지, 24: , 박수남. 플라보노이드 (flavonoid): 활성산소종에의한산화방어제. 화학세계, 47: 46-47, 윤미영, 방민정, 진정화, 정광조. 샌달우드오일의항산화및항염증에관한효과. 대한피부미용학회지, 7: , 이상준, 김완기. 미용식품의국내외시장동향. 식품과학과산업, 38: 2-7, 이선영, 김현주, 최신욱. 이질풀추출물의항산화효능에관한연구. 대한화장품학회지, 37: 61-66, 정세진, 김돈영, 한설희, 신상민, 차재영, 박노복, 이정섭, 박종군. NIH3T3 세포에서 UVB에의한세포고사와 DNA 단사절단에미치는 fisetin의효과. 생명과학회지, 17: 64-69, 정은영, 이시경. 제주도토착우뭇가사리의항산화활성및 HaCaT 세포재생효과. 대한피부미용학회지, 8: 1-9, 조윤희. 피부, 영양그리고건강기능식품. 식품과학과산업, 38: 8-15, 차재영, 조영수. 감귤류플라보노이드의생리기능활성. 한국농화학회지, 44: , Ahmad N, Gupta S, Mukhtar H. Green tea polyphenol epigallocatechin-3-gallate differentially modulates nuclear factor κb in cancer cells versus normal cells. Arch. Biochem. Biophys., 376: , Arai Y, Watanabe S, Kimira M, Shimoi K, Mochizuki R, Kinae N. Dietary intakes of flavonols, flavones and isoflavones by Japanese women and the inverse correlation between quercetin intake and plasma LDL cholesterol concentration. J. Nutr., 130: , Chen HM, Muramoto K, Yamauchi F, Fujimoto K, Nokihara K. Antioxidative properties of histidinecontaining peptides designed from peptiede fragments found in the digests of a soybean protein. J. Agric. Food Chem., 46: 49-53, Chen YC, Shen SC, Lee WR, Lin HY, Ko CH, Shih CM, Yang LL. Wogonin and fisetin induction of apoptosis through activation of caspase 3 cascade and alternative expression of p21 protein in hepatocellular carcinoma cells SK-HEP-1. Arch. Toxicol., 76: , Higa S, Hirano T, Kotani M, Matsumoto M, Fujita A, Suemura M, Kawase I, Tanake T. Fisetin, a flavonol, inhibits TH2-type cytokine production by activated human basophils. J. Allergy Clin. Immun., 111: , Huang D, Ou B, Prior RL. The chemistry behind antioxidant capacity assays. J. Agric. Food Chem., 53: , Kelly EH, Anthony RT, Dennis JB. Flavonoid antioxidants: chemistry, metabolism and structureactivity relationships. J. Nutr. Biochem., 13: , Khan N, Afaq F, Syed DN, Mukhtar H. Fisetin, a novel dietary flavonoid, causes apoptosis and cell cycle arrest in human prostate cancer LNCaP cells. Carcinogenesis, 29: , Kim GN, Jang HD. Flavonol content in the water extract of the mulberry (Morus alba L.) leaf and their 520

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Journal of Life Science 2011 Vol. 21. No. 8. 1120~1126 ISSN : 1225-9918 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2011.21.8.1120 μ μ μ α β Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No. 8 1121 μ μ 1122 생명과학회지 2011,