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준현 미
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1 J Korean Soc Food Sci Nutr 33(5), 778~784(2004) 한국식품영양과학회지 인삼잎과줄기혼합추출물의영양성분, Ginsenoside 함량및기본적안전성평가 한종현 1 박성진 2 안종남 3 위재준 4 김기영 1 박성혜 1 1 원광대학교한의학전문대학원한약자원개발학과, 2 한림성심대학바이오식품과 3 축산기술연구소축산물이용과, 4 한국인삼연초연구원 Nutritional Composition, Ginsenoside Content and Fundermental Safety Evaluation with Leaf and Stem Extract of Panax ginseng Jong Hyun Han 1, Sung Jin Park 2, Chong Nam Ahn 3, Jae Joon Wee 4, Ki Young Kim 1 and Sung Hye Park 1 1 Dept. of Herbal Resources, Professional Graduate School of Oriental Medicine, Wonkwang University, Iksan , Korea 2 Dept. of Bio-food, Hallym College, Chuncheon , Korea 3 National Livestock Research Institute, Suwon , Korea 4 Division of Ginseng Research, KT&G Central Research Institute, Daejon , Korea Abstract This study was conducted to investigate the application possibility of leaf and stem extract (LSE) from the mixture of leaf and stem of Panax ginseng. This study measured the general nutritional composition, amino acid, minerals contents and fatty acid composition of LSE. We conducted analysis of the ginsenoside content by HPLC and the cell cytotoxicity tests in normal liver and kidney cells. The approximate composition of LSE was 2.51% of carbohydrate, 0.53% of crude ash, 0.20% of crude fat and 0.15% of crude protein, respectively. LSE contained mg/100 g of K ion and high contents of acidic amino acids such as glutamic acid and aspartic acid. In addition to this, it contained all essential amino acids. The major compositions of fatty acids were 39.99% of palmitic acid, 14.96% of linoleic acid, 13.31% of docosatetranoic acid and 12.91% of linolenic acid. The total ginsenoside was 0.82 mg/ml, and ratio of PD/PT was Negative effects were not found from the results of the cell toxicity respection. These results imply that leaf and stem of Panax ginseng could be used as possible food resources and functional food material and feed stuff. Key words: leaf and stem extract, Panax ginseng, ginsenoside, feed stuff, food resources 서론고려인삼 (Panax ginseng C.A. Meyer) 은오가피나무과 ( 五加科, Araliaceae) 인삼속에속하는다년생초본류로서동양에서는수천년간민간과한방의학에서신비의영약으로널리사용되어왔던우리나라의대표적인특산물이다 (1). 인삼의약효성분에대한과학적연구는 Brekhman(2) 이인삼의주요성분이 saponin(ginsenosides) 으로발표한이래로 Shibata 등 (3), Hörhammer 등 (4), Han(5), Sanada 등 (6) 에의하여인삼사포닌의화학구조가 dammarane계 triterpene인 aglycone에당류가결합된배당체임이규명되었다. 현재까지인삼사포닌의약리효능으로중추신경계에대한작용 (7), 뇌기능에대한작용 (8), 항암작용 (9), 면역기능조절작용 (10), 항당뇨작용 (11), 간기능강화작용 (12), 심혈관장 애개선작용 (13), 혈압조절작용 (14), 갱년기장애개선작용 (15), 항스트레스 (16,17), 항피로작용 (18), 항노화 (19) 및항산화작용 (20,21) 등이알려지면서그수요가점차증가되고있다. 최근에는소비자층의기호추세에부합하는여러가지타입의인삼단일제제및생약복합제제가개발되고있다 (22). 그러나인삼은그세대기간이 4~6년으로길며 6년을재배하여야 1뿌리당 100~150 g(fresh weight) 의수삼이수확되고연작이불가능하며재배가능면적이점차줄어들고있는실정이므로앞으로의원료공급에지장을초래할가능성이높다 (23). 따라서인삼의조직 세포배양및모낭근배양을통한 ginsenoside를생산하고자하는연구가활발해지고있어 (23) 좋은결과가기대되나, 한편으로는인삼의잎이나줄기에도인삼근과어느정도비슷한성분이있다고추측할수도있어인삼부산물에도관심을가질필요도있다고 Corresponding author. psh0528kr@hanmail.net Phone: , Fax:

2 인삼잎과줄기혼합추출물의영양성분, Ginsenoside 함량및기본적안전성평가 779 사료된다. 그러나인삼생산과정에서부산물로나오는인삼의잎과줄기등에관한연구는대부분이잎과줄기각각에대한 ginsenoside 및영양성분분석에관한보고 (24-26) 들이다. 최근들어인삼잎을이용한차의개발에관한연구 (27) 가보고되고있고식품학적인관점에서인삼부산물들을이용하고자하는관심이증대되고있어향후부산물의성분뿐아니라활용방안에관한광범위한연구가기대된다. 인삼의성분중인삼사포닌의함량과 ginsenoside 패턴은품종, 산지, 재배년수, 생육환경에따라상이하며인삼의동체부위보다피부, 미삼부위에서비교적높고특히광합성과밀접한관계를갖는인삼잎에도조사포닌함량이 10~13% 정도로매우높고그조성도인삼근과유사한것으로보고되었다 (27,28). 최근 Zhang 등 (29) 은 F 1, F 2, F 3 이외에인삼잎의미량사포닌으로 3β, 6α, 12β-trihydroxy-dammar-20(22),24-diene- 6-α-L-rhaminopyranosyl-(1 2)-β-D-glucopyranoside 를분리, 규명하여 ginsenoside F 4 로명명하였으며계속해서새로운 23-oxygenated dammarane 사포닌을분리하여 ginsenoside La로명명하였다 (30). 한편인삼잎성분도유효성과약리효능에대한연구 (3, 27-30) 가시도되면서인삼잎의효과적인활용에많은관심이모아지게되었다. 인삼의부위별 saponin 함량비교에서인삼잎은임삼근보다약 4~5배, 줄기보다는 9배이상높고그구성 ginsenoside 도인삼근과유사한사실이확인됨에따라 (27-30) 새로운자원으로서인삼잎의이용가치가새롭게평가되고있다. 이와같이인삼잎은사포닌성분등의약적자원으로서가치를가지고있음에도유용하게활용되지못하고거의폐기되는실정이다. 이에본연구자들은인삼잎과줄기를혼합하여추출한인삼잎, 줄기혼합추출물을동물의사료로이용하거나또는현대인들이저렴하고손쉽게사용할수있는기능성식품또는건강식품으로개발할수있는지여부를판단하고자인삼잎, 줄기혼합추출물에대해영양성분, ginsenoside 함량을측정하였고세포독성실험을통해기본적인안전성을평가하였다. 재료및방법인삼잎, 줄기혼합추출물의제조 4~5년근의인삼 ( 강화도 ) 을수확하고잎이달린줄기를비닐하우스에서건조하였다. 건조된인삼잎과줄기를 3 : 2의중량으로섞어이의 5배 (v/w) 중량의물을증탕기 (Mammoth Ⅳ, Sewon Engineering, Korea) 에넣고 98 o C에서 14시간추출하였다. 이때 20분마다저어서내용물이잘섞이게해주면서첨가된수분의양이 ⅓정도로농축될때까지끓여준다. 완성된추출액은냉각하여여과하고밀폐용기에담아 4 o C에서보관하였다가시료로사용하였다. 인삼잎, 줄기혼합추출물의영양성분분석일반성분, 무기질및아미노산함량은다음의방법에따라 3회반복실험하였다. 일반성분 : 수분, 조단백질, 조지방, 조회분및식이섬유소함량을식품공전 (31) 의방법에의해분석하였다. 즉, 수분함량은 105 o C 상압가열건조법, 조단백질은 Semi-micro kjeldahl법 (kjeltec 1030 Auto Analyzer, Tecator, Sweden), 조지방함량은 Soxhlet 추출법 (IS-31-GWB15, Ilsin, Korea), 식이섬유함량은 H 2SO 4-NaOH 분해법 (Fiberatec system M 1020 Hot Extract, Tecxator, Sweden), 조회분은직접회화법으로측정하였다. 당질은총 100에서수분, 조단백질, 조지방, 조회분및식이섬유소를뺀값으로계산하여구하였다. 무기질함량 : 무기질함량은습식법 (31) 으로전처리하여 Inductively Coupled Plasma Emission Spectrophotometer (Plasmacan, Labtest, Ausrtalia) 를이용하여각각의파장에서측정하여함량을계산하였다. 아미노산함량 : Hwang 등 (32) 의방법과같이일정량정밀히달아 50 ml cap tube에넣고 6 N-HCI 용액을 20 ml 가하여녹인후밀봉하여 110 o C에서 24시간가수분해시켰다. 이를 50 ml 원심분리관에옮기고용기를 0.01 N-HCI 용액으로잘씻어원심분리관에합치고여기에 2 N-NaOH용액 2 ml를넣고중화한후 5,000 rpm에서 30분간원심분리하였다. 상층액을따로취하여 60 o C의수욕상에서질소가스를통과시키면서농축하고잔류물을 0.02 N-HCI 20 ml에녹이고이를 0.45 μl filter로여과한후시험용액으로하였다. 정량은아미노산혼합표준용액과시험용액을아미노산분석기에주입하여 chromatogram의 peak 면적으로계산하였으며아미노산분석기 (Pharmacia Biotech, Cambridge, England) 의분석조건은 buffer flow rate 0.25 ml/min, column pressure 80~130 kg/cm 3, column temperature 53 o C, analysis cycle time은 70분이었다. 지방산조성 : 지방산조성은 Folch 등의방법 (33) 에따라 0.5 N-NaOH/MeOH 로추출한후 Morrison 과 Simth의방법 (34) 에의해 BF 3-methanol 로 methylation 하여 Gas Chromatograhy(Hewlett Packand 6890, Denver, USA) 에주입하여함량을분석하였다. 각지방산함량은자동면적적분기에서 area%(percent of total fatty acid) 로구했으며각지방산의동정은동일한조건하에서 standard fatty acid ester 등 (Nu check Co., GLC 87A) 에대해분석하여얻은 retention time과비교하여이루어졌다. 이때 detector는 FID, column 은 HP-FFAP를사용하였다. 인삼잎, 줄기혼합추출물의 ginsenoside 함량분석인산잎, 줄기추출물 200 ml를 Diaion HP-20(Mitsubishi Chemical Co., Japan) 컬럼 (bed volume 1200 ml) 에통과시키고증류수 400 ml로컬럼을세척하였다. 컬럼에흡착된사포닌을 100% 메탄올 400 ml로용출시키고농축한다음 20% 메탄올 100 ml에용해하였다. 이중 10 ml를 C 18(YMC*

3 780 한종현 박성진 안종남 위재준 김기영 박성혜 GEL ODS-A, 75 um, YMC Co., Japan) 컬럼 (bed volume 20 ml) 에통과시키고 20% 메탄올 100 ml로컬럼을세척하였다. 컬럼에흡착된사포닌을 90% 메탄올 100 ml로용출시키고농축한다음 100% 메탄올 25 ml에용해하였다 (35). HPLC system으로서펌프는미국 Waters사의모델 510 을, 검출기는미국 Alltech사의모델 ELSD 2000을사용하였다. 컬럼은 Lichrosorb NH 2( cm, 5 μm, Merck Co.) 를, 이동상으로용매 A는 acetonitrile/water/isoprogyl alcohol (80:5:15), 용매 B는 acetonitrile/water/isopropyl alcohol(80: 20:15) 을사용하였다. 용매 A와 B의혼합비율은초기에 A:B 가 70:30 이었고 20분간 0:100으로상승시켜 35분간유지시켰다. 시료의주입량은 20 μl이었고용매의유속은분당 1 ml 이었다 (35). 인삼잎, 줄기혼합추출물의세포독성실험인삼부산물의활용에있어안전성평가를위해정상세포즉 kidney cell(vero 76) 과 liver cell(nctc) 을이용하여 MTT [3-(4,5-dimethyliazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bramide] 와 NR(Neutral Red) assay를실시하였다. MTT assay : 한국세포주은행 (KCLB) 에서분양받은 liver cell(nctc clone 1469) 과 kidney cell(vero) 을 cell/well, cell/well로조정한후 96 well plate 에분주하여 37 o C, 5% CO 2 incubator에서 24시간동안배양하였다. 배양상등액을제거한후에준비된시료 (10 μl, 20 μl, 50 μl, 100 μl/200 μl medium) 와에멀젼시료 (DMSO 에 1차 dilution시켜서 μl, μl, μl/200 μl medium) 를처리하고 24시간동안배양하였다. 그런다음상등액을제거하고 50 μl의 MTT 용액 (5 mg/ml) 에넣고 4시간후에 MTT 용액을제거한후 DMSO를 100 μl 가하여실온에서 5~10분동안 shaking 시킨후에 540 nm에서 ELISA reader(power Wave X, Bio-Tek Instruments, Inc, USA) 로흡광도를측정하였다 (36). NR assay : 한국세포주은행 (KCLB) 에서분양받은 liver cell(nctc clone 1469) 과 kidney cell(vero) 을 96 well plate에 cell/well, cell/well 로조정된세포를분주하고 37 o C, 5% CO 2 incubator에서 24시간동안배양하였다. 배양상등액을제거한후에준비된시료 (10 μl, 20 μl, 50 μl, 100 μl/200 μl medium) 와에멀젼시료 (DMSO 에 1차 dilution시켜서 μl, μl, μl/200 μl medium) 를처리하고 24시간동안배양하였다. 그런다음상등액을제거하고 NR 용액 (4 mg/ml) 200 μl를가하여 3시간동안배양하였으며, NR 용액을제거하고 1% acetic acid, 50% ethanol을 200 μl를가하여실온에서 5~10분동안 shaking 시킨후에 540 nm에서 ELISA reader(power Wave X, Bio-Tek Instruments, Inc, USA) 로흡광도를측정하였다 (36). 결과및고찰인삼잎, 줄기혼합추출물의영양성분 Table 1에는인삼잎과줄기를추출한액의일반영양성분, 무기질, 아미노산등의함량을, Table 2에는지방산조성을나타내었다. 인삼의영양성분에관한내용은 Kim(37), Sekiya 와 Okuda (38) 및 Yokozawa 등 (39) 의보고에의하면인삼은 79% 가탄수화물이며조단백 10~11%, 조섬유 7~8%, 조지방 1~ 2%, 조회분 3~4% 이고조사포닌은 4~5% 수준이었다. 또한 Lee(40) 는인삼의수분함량이 10.1%, 조단백질 15.2%, 조지방 1.3%, 조회분 8.0% 및탄수화물 65.4%( 당 57.4%, 조섬유소 8.0%) 이라고보고하였다. 인삼의영양성분은종류나재배지및환경에따라다소차이가있겠으나구성영양소의 Table 1. Nutritional compositions of the leaf and stem extract Nutrient Ingredient Content Ingredient Content General nutrition (%) Minerals 1) (mg/100 g) Amino acid 2) (mg/100 g) Moisture Crude ash Crude protein Na Ca Mg Cu Mn Aspartic acid Lysine Histidine Serine Glycine Cysteine Methionine Leucine Phenylalanine 1,2) The contents were calculated by wet basis % Carbohydrate Crude fat K P Fe Zn Glutamic acid Arginine Threonine Proline Alanine Valine Isoleucine Tyrosine Tryptophan

4 인삼잎과줄기혼합추출물의영양성분, Ginsenoside 함량및기본적안전성평가 781 함량비율은같은양상으로볼수있겠다. 한편인삼의무기질함량에관한연구는 Lee 등 (41) 이보고한한국산인삼과홍삼의무기질성분비교에의하면한국산인삼은칼슘 (3787 ppm), 칼륨 (17650 ppm), 나트륨 (285.6 ppm), 철분 (142.9 ppm), 망간 (43.91 ppm) 으로제시되어있고인삼의아미노산의조성을일부분석한결과 (42) 와지질성분을분석 비교한논문 (43,44) 들도보고되어있으나인삼부산물에관한자료는전무하다. 인삼의잎과줄기의일반성분은 Lee(40) 의결과에의하면수분이각각 10.9%, 10.3%, 조단백질이 14.8%, 9.3%, 조지방이 3.7%, 2.0%, 조회분이 13.7%, 8.9% 및당류가각각 54.9%, 59.5%, 조섬유함량이각각 13.7%, 8.9% 로나타나있다. 본연구에서사용한인삼잎과줄기의혼합추출물은수분 96.61%, 당질 2.51%, 조회분 0.53%, 조지방 0.20% 및조단백질 0.15% 로구성되어있었다. 또한무기질중에서는칼륨 ( mg%), 칼슘 (60.80 mg%), 마그네슘 (24.21 mg%), 나트륨 (19.23mg%), 인 (14.36 mg%) 및소량의철분, 구리, 망간, 아연등이함유되어있었다 (Table 1). 아미노산의경우 glutamic acid가 mg% 로그함량이가장높았고 alanine>glycine>aspartic acid>proline 순으로많이함유되어있었다. 인삼잎과줄기의혼합추출물의지방산조성은 Table 2에서나타낸바와같이불포화지방산함량이포화지방산보다높은것으로나타났다. Ko와 Chung(45) 은인삼의지방산조성을보고하였는데 Table 2. Fatty acid compositions of the leaf and stem extract Fatty acid Content 1) C12:0 C14:0 C15:0 C15:1 C16:0 C16:1 C18:0 C18:1 C18:2 (ω6) C18:3 (ω6) C18:3 (ω3) C20:2 (ω6) C20:4 (ω6) C20:3 (ω3) C20:5 (ω3) C22:4 (ω6) C22:6 (ω3) SFA 2) MUFA 3) PUFA 4) UFA 5) ) Value are expressed as the area percentage of total fatty acid. 2) SFA: Saturated fatty acid. 3) MUFA: Monounsaturated fatty acid. 4) PUFA: Polyunsaturated fatty acid. 5) UFA: Unsaturated fatty acid. linoleic acid가 42.62% 로가장높고 palmitic acid, oleic acid, stearic acid 및 linolenic acid 순이었다고보고한바있다. 인삼줄기에는 caproic acid, capronic acid, capric acid, lauric acid, myristic acid 및 palmitic acid 등의지방산이함유되어있었고 (44), 지방산함량은 palmitic acid, linoleic acid, behenic acid 순으로높다고하였다 (25). 한편 Park 등 (24) 은인삼잎에는 26.09% 의 linoleic acid, 22.94% 의 linolenic acid, 20.48% 의 palmitic acid와그외소량의 palmitoleic acid, oleic acid, pentadecanoic acid, stearic acid 등이함유되어있었다고보고하였다. 또한 Choi 등 (25) 은 palmitic acid, linoleic acid, linolenic acid, oleic acid, pentadecanoic acid 순으로그함량이높다고보고한바있다. 본연구에서는잎과줄기를함께섞어추출한추출물이므로앞의연구들과비교하기는어려우나 palmitic acid 함량이 39.99% 로가장높았고 linoleic acid함량이 14.96%, docosatetranoic acid함량이 13.31%, linolenic acid함량이 12.19% 이었다. 총포화지방산 (SFA) 이 43.48%, 단일불포화지방산 (MUFA) 이 1.39% 및다가불포화지방산 (PUFA) 이 55.13% 이었다. 본연구결과는선행연구 (24,25) 들과유사한경향으로인삼과같이인삼잎, 줄기혼합추출물도불포화지방산함량이높음을알수있었다. 잎과줄기를섞어서건조한후물을넣고추출한액에대한일반성분분석결과가없어절대적인함량의비교는어려우나인삼을제외한잎또는줄기를각각분석한선행연구 (25,36-45) 의결과들과비교시비슷한성분함량을가지고있었다고판단된다. 효능을지닌약재의부산물로서미약하나마약리효능을발휘할수있을것으로생각된다. 부산물의활용관점에서동물의사료로사용을권장할수있으리라생각되며영양성분뿐아니라약리효능을발휘할수있는 ginsenosides의분석결과와기타 polyphenol 등의함량분석을토대로향후생리활성능력을조사하여차종류로의이용뿐아니라다각도의활용가능성을모색할필요가있을것이다. 인삼잎, 줄기혼합추출물의 ginsenoside 함량인삼중배당체이외성분의상승작용이나잠재적활성을무시하는것은아니지만최근에와서고려인삼의 dammarane glycoside에대해서많은연구가집중되고있고그들의약리학적인활성이밝혀지고있다 (18-22). 인삼성분에대한연구는지금까지주로주근 ( 主根 ) 과미근 ( 尾根 ) 에대하여이루어져왔고지상부에대해서는보고가거의없는실정이다. 특히전북지방의일부재배지역의白蔘採取團에서수확시기에는아직인삼잎이고사하지않아이것을그늘에말려두었다가가축의약용으로이용하는사례가있으므로 (46) 인삼잎과줄기에대해그약효가알려지고있는 dammarane계사포닌의함량을조사하여인삼채취후부산물로나오는인삼잎과줄기를이용한제제나제품등을개발할수있는기초자료를얻고자인삼잎과줄기의추출물에대해 ginsenoside

5 782 한종현 박성진 안종남 위재준 김기영 박성혜 함량을조사하였다. Table 3에는인삼잎과줄기를혼합하여추출한액의 ginsenoside 함량을정리하였다. 사포닌은 aglycone의골격에따라 triterpenoid계사포닌과 steroid계사포닌으로크게분류되며고려인삼의사포닌은 triterpenoid계 dammarane계사포닌으로약성이매우온화하고과량투여에의한독성이없을뿐만아니라용혈작용이거의없는것으로밝혀져있다 (27). 고려인삼의사포닌은비당부분의구조에따라 panaxadiol(pd) 계, panaxatriol (PT) 계및 oleanane계사포닌으로분류되는데, 이중 PD와 PT는인삼특유의사포닌이다. PD계의 ginsenoside는 Ra 1, Ra 2, Ra 3, Rb 1, Rb 2, Rb 3, Rc, Rd, Rs, Rg 3, Rg 5, Rh 1, Rh 2 등이있고, PT계에는 Re, R f, Rg 1, Rg 2 의 ginsenoside가있다 (46). 본결과에서는 ginsenoside Rg 2 의함량이가장높았으며 (0.04 mg/ml), Rh(h 1+h 2), Rg 3 가각각 0.14 mg/ml, 0.12 mg/ml 함유되어있었고 Rg 1, Rd, Rb 2, Rb 1, Rf 및 Rc 순으로그함량이높았다. Panaxadiol(PD) 사포닌이 0.33 mg/ml, panaxatriol(pt) 사포닌이 0.49 mg/ml 함유되어있었고총 ginsenoide의양 (PD+PT) 은 0.82 mg/ml이었다. Chang 의연구 (27) 에서인삼잎을이용해서만든차의제조방법에따라 ginsenoside함량이최저 6.86%(dry basis) 에서최고 7.50% 로제시되어있고세포배양및모상근배양을통한 ginsenosides의생산과정에서는 (23) 그함량이평균 5.05 mg/g(dry weight) 로분석되었다. 3년근과 4년근인삼잎의에탄올추출물중 panaxodiol (PD) 의함량은각각 0.51%, 0.57% 이었고 panaxatriol(pt) 의함량은각각 1.48%, 1.57% 이었다 (46). 또한 3년과 4년근줄기의 PD 함량은각각 0.08, 0.08%, PT 함량은각각 0.19% 이었고잎에서 PD/PT의비율은 3년근이 0.35, 4년근이 0.36 이었고 3년근및 4년근줄기의 PD/PT 비율은각각 0.446, 0.40이었다 (46). 본연구에서총 ginsenoside 함량은 0.82 mg Table 3. Ginsenosides content of the leaf and stem extract (mg/ml) Ginsenosides Panaxadiol type Ginsenoside - Rb 1 - Rb 2 - Rc - Rd - Rg 3 - Rh 1+Rh 2 Panaxatriol type Ginsenoside PD Ginsenoside PT Ginsenoside Total Ginsenoside PD/PT PD: panaxadiol, PT: panaxatriol. - Rf - Rg 1 - Rg 2 Content 이고 PD 계열은 0.33 mg/ml, PT 계열은 0.49 mg/ml였고 PD/PT 비율은 0.68이었다. 여러가지 ginsenoside 의약리효능이보고되어있으나 (30) 본연구의인삼부산물의 ginsenoside 함량이약리효능을발휘하는지의여부는동물실험등을통해확실한효능확인을필요로한다. 보고된인삼의 ginsenoside 함량과비교시에는매우미비한양의 ginsenoside 를함유하고있었으나오히려극소량의함량이식품으로의활용을위해서는더욱바람직한측면도있을것으로생각된다. 인삼의복용형태는일반적으로전제 ( 煎劑 ), 엑스제및산제 ( 散劑 ) 로서제품형태에따라 capsules, tablets, drinks 등으로구분된다. 인삼은나라에따라식품으로또는의약품으로분류되어사용되고있으며 (47), 특히식품의경우에는복용량에대한기준이설정되어있지않다. 이처럼인삼은식품과의약품으로혼용되고있기때문에과연얼마를복용해야되느냐가항상관심의대상이된다. 한의학적으로무독하고장기복용이가능한上藥으로사용되어왔으므로투여용량영역이좁은합성치료약물의경우와는다르기때문에인삼의복용량에대한검토가다소등한시되어왔다. 특히인삼은단순한전통약물로서동양권뿐만아니라서구권에서도그소비가증가추세에있어서양의학적관점에서인삼의사용과복용에대한이해가요망되고있다. 앞으로인삼의적정투여용량설정과관련하여인체실험을통한활성성분의 pharmacokinetics와생체내 bioavailability에대한연구가이루어져야겠으나본연구에서사용한인삼부산물의성분과약리효능을지닌 ginsenoides 함량을고려하여이들을동물의사료나건강식품또는기능성식품의원료로사용할수있는가능성도있다고생각된다. 앞으로본연구자들은임상실험을통해기능성평가에관한연구를지속하고자하며본결과가인삼부산물인잎과줄기를이용한제품의개발및기능성평가에있어서도참고적인자료가되기를기대한다. 인삼잎, 줄기혼합추출물이정상세포의세포독성에미치는영향 MTT와 NR assay(table 4) 와 sirius red로염색하여관찰한결과정상적인간과신장세포에서 cytotoxicity를관찰할수없었다 (data not shown). 즉인삼잎, 줄기혼합추출물은세포성장과분화비율을증진시키고간과신장세포의미토콘드리아와라이소좀에는어떠한 negative effect를나타내지않았다. 따라서인삼의잎과줄기혼합추출물은정상세포의성장에큰영향을미치지않았고 cell viability 가 control보다높게나타나오히려정상세포의성장에유익한효과가있을것이라고볼수있겠다. 이결과를기초로향후세포성장에미치는영향을좀더자세히조사해보면인삼잎, 줄기혼합추출물의또다른효능을확인해볼수있으리라생각된다.

6 인삼잎과줄기혼합추출물의영양성분, Ginsenoside 함량및기본적안전성평가 783 Table 4. Cell growth and viability of the leaf and stem ex tract 1) Concentration Control 10 μl/200 ml medium 20 μl/200 ml medium 50 μl/200 ml medium 100 μl/200 ml medium MTT 2) NR 3) Vero NCTC Vero NCTC ) Ratio of cell existence (%). 2) MTT: 3-(4,5-dimethyliazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bramide. 3) NR: Neutral red assay. 요 인삼을재배한후널리이용되지못하고있는잎, 줄기등인삼부산물의활용방안을모색하고자연구를수행하였다. 이에따라인삼잎과줄기를혼합하여추출한추출물을대상으로일반영양성분함량, 무기질함량, 아미노산및지방산조성을분석하고세포독성에미치는영향을조사하여다음과같은결과를얻었다. 인삼잎, 줄기혼합추출물의수분함량은 96.61%, 탄수화물 2.51%, 조회분 0.53%, 조지방 0.20% 및조단백질이 0.15% 이었다. 무기질중칼륨함량이 mg/100 g으로가장높았고그외칼슘, 마그네슘, 나트륨, 인및철분, 망간, 아연, 구리도함유되어있었다. Glutamic acid 와 aspartic acid 등산성아미노산함량이높게나타났고필수아미노산이모두함유되어있었다. 또한불포화지방산함량은 56.52% 이었고 palmitic acid 함량이 39.99% 로가장높았고, linoleic acid 14.96%, docosatetranoic acid 13.31%, linolenic acid 12.19% 의순이었다. 인삼의총 ginenoside 함량은 0.82 mg/ml이었고 PD/PT 함유비율은 0.68이었다. 정상적인간과신장세포의생존율에는 negative effect를나타내지않았고미토콘드리아와라이소좀수준에서세포독성을나타내지않았다. 인삼잎, 줄기혼합추출물의약리효능을나타내는 gensenoside의함량이 0.82 mg/ml로서비교적소량함유되어있으나인삼부산물의활용차원에서동물의사료나기능성식품재료로의사용은가능할것으로생각된다. 향후동물실험및임상실험을이용한기능성평가를통해확실하고구체적인활용방안의모색이요구되어진다. 문 1. 홍문화 한국인삼사. 삼화인쇄주식회사, 서울. p Brekhman II Panax ginseng. Gosudarst Isdat et Med Lit, Leningrad. p Shibata S, Fujita M, Itokawa H, Tanaka O The structure of panaxadiol, a sapogenin of ginseng. Tetrahedron Lett 10: Hörhammer L, Wagner H, Lay B Zur Kenntnis der Inhaltstoffe von radix Panax ginseng C.A. Meyer. Pharm Ztg 106: 약 헌 5. Han BH Current status of Korean ginseng research. Korean J Pharmacog 3: Sanada S, Kondo N, Shoji J, Tanaka O, Shibata S Studies on the saponins of ginseng (I). Chem Pharm Bull 22: Benishin GC Actions of ginsenoside Rb 1 on choline uptake in central cholinegic nerve endings. Neurochem Int 21: Saito H, Nishiyama N Effect of ginseng and its saponins on experimental amnesis in mice and on cell cultures of neurons. 5th Int'l Ginseng Symp of Korean Ginseng Society. Seoul, Korea. 9. Kikuchi Y, Sasa H, Kita T, Hirata J, Tode T Inhibition of human ovarian cancer cell proliferation in vitro by ginsenoside-rb 2 and adjuvant effects of cisplatin in vivo. Anticancer Drug 2: Singh VK, Agarwal SS, Gupta BM Immuno modulatory activity of Panax ginseng extract. 4th Int'l Ginseng Sym of Korean Ginseng Society. Seoul, Korea. 11. Huo Y, Chen Y The effect of Panax ginseng extrat on insulin and corticosteroid receptors. J Traditional Chinese Medicine 8: Oura H, Hiai S Physical chemistry of ginseng. Metabolism Disease 10: Kim HY, Chen X, Gills CN Ginsenoides protect pulmonary vascular endothelium against free radical induced injury. Biochem Biophys 189: Kang SY, Kim ND The antihypertensive effect of red ginseng saponin and the endothelium-derived vascular relaxation. Korean J Ginseng Sci 18: Ogita S, Samugawa K Clinical effectiveness of Korea ginseng on patients with climateric disturbance. The Ginseng Review 18: Saito H, Bao TT Effect of red ginseng on mice exposed to various stress. 4th Int'l Ginseng Sym of Korean Ginseng Society. Seoul, Korea. 17. Kim ND, Han BH, Lee EB, Kong JY, Kim MH, Jin CB Studies of ginseng on the antistress effects. Korean J Pharmacog 10: Brekhman II Ancient ginseng and pharmacology. Symp of Institute of Gerontology. Lugano, Switzerland. 19. Choi JH, Oh SK Studies on the anti-aging action of Korea ginseng. Korean J Food & Nutr 12: Mei B, Wang YE, Wu JX, Chen WZ Protective effects of ginsenosides on oxygen free radical induced damages of cultured vascular endothelial cells in vitro. Yao Hsueh Hsuuh Pao 29: Jung NP, Jin SH Studies on the physiological and biochemical effects of Korea ginseng. Korea J Ginseng Sci 20: Kim JH, Chang EJ, Oh HI Effects of media and growth regulators on the growth and saponin production of ginseng root. J Ginseng Res 25: Yang DC, Choi HY, Kim YH, Yun KY, Yang DC Growth and ginsenoides production of hairy root via light energy. Korean J Ginseng Sci 20: Park H, Park HS, Hong JU Effect of high temperature and growth light intensity on fatty acid composition of Panax ginseng leaf. J Korean Agricultural Chemical Society 29: Choi KJ, Kim MW, Kim DH Fatty acid compositions of the various parts of ginseng plant. Korean J Food & Nutr 12: Kim HJ, Jo JS, Nan SH, Park SH, Mhee KC Free sugar distribution in ginseng plant and change of it's con-

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Journal of Life Science 2011 Vol. 21. No. 8. 1120~1126 ISSN : 1225-9918 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2011.21.8.1120 μ μ μ α β Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No. 8 1121 μ μ 1122 생명과학회지 2011,