Korean Journal of Ichthyology, Vol. 28, No. 1, 1-8, March 2016 ISSN: (Print), (Online) Received: February 29, 2016 Revised: March

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1 Koren Journl of Ihthyology, Vol. 28, No. 1, 1-8, Mrh 216 ISSN: (Print), (Online) Reeive: Ferury 29, 216 Revise: Mrh 15, 216 Aepte: Mrh 18, 216 저수온스트레스에따른능성어 (Epinephelus septemfsitus) 혈액의생리생화학적반응 박종연 박재민 1 홍창기 2 김경민 2 조재권 * 국립수산과학원양식관리과, 1 경상북도토속어류산업화센터, 2 남해수산연구소해역산업과 Physiologil n Biohemil Response of Bloo on Low Temperture Stress in Sevenn Grouper, Epinephelus septemfsitus y Jong Youn Prk, Je Min Prk 1, Chng Gi Hong 2, Kyong Min Kim 2 n Je Kwon Cho* (Aquulture Mngement Division, Aquulture Reserh Institute, NIFS, Busn 4683, Kore; 1 Gyeongsnguk-Do Ntive Fish Business Center, Uiseong 37366, Kore; 2 Southwest Se Fisheries Reserh Institute, NIFS, Yeosu 8978, Kore) ABSTRACT This stuy ws onute to investigte the physiologil responses of sevenn grouper, Epinephelus septemfsitus t low temperture onition in winter seson. Wter temperture ws roppe from 12 C to 5 C y two ifferent intervl (intervl I: - 1 C/24 h n intervl II: - 1 C/8 h). The experimentl fishes were expose for 9 ys t eh wter temperture onition, n were oserve survivl rte. The loo smple ws ollete from fishes for nlysis of ortisol, gluose, totl protein (TP), n eletrolytes (N +, Cl -, K + ). Mortlity of fish ws not oserve until 5 C. The mortlity (12 iniviuls) egn fter 17 h n ll fish were eth fter 174 h in intervl I se, wheres the mortlity (9 iniviuls) egn fter 72 h n ll fish were eth fter 76 h in intervl II se. Little ifferent ws oserve in the physiologil responses, ut tren ws similr etween two intervls. The physiologil metolism of plsm ortisol n gluose were inrese rpily, n swimming ility n respirtion response ws fster t 7 C. This result mens tht the ritil temperture of sevenn grouper ws 7 C t low wter temperture onition. Key wors: Physiologil tivity, sevenn grouper, low temperture stress, survivl, ortisol, gluose 서 수온은어류의체내대사활동을결정하는가장중요한환경 조절인자로어체의면역능력, 섭이, 성장및생존에큰영향 을미치므로특정해역에서식하는어류개체군의분포, 번식 과더불어생산량에영향을미치는중요한변수로알려져있다 (Brton n Iwm, 1991; Jeon et l., 1995; Fry, 1997). 개방된환경에서식하는어류의경우급격한수온변화에능동적으로대처할수있는기회를가질수있지만, 인위적으로폐쇄된수계에서양식되고있는어류는이동이제한되어있기때문에심한수온충격에노출될경우체내항상성상실에따른 론 * Corresponing uthor: Je Kwon Cho Tel: , Fx: , E-mil: jkho123@kore.kr 생리적장애로급격한스트레스를받고, 성장저하는물론대량폐사로경제적인손실이발생한다 (Hur n Hii, 27; Kng et l., 27). 수온변화에따른어류의생리학적스트레스반응지표로는혈액학적인자들이이용되고있다 (Am, 199; Sntos n Pheo, 1996; Ctli et l., 1998). 이중가장대표적으로사용되고있는지표인자는혈장코티졸 (plsm ortisol) 과글루코스 (plsm gluose) 로, Cortisol은어류가급격한환경변화에노출되었을때발생하는 1차반응으로생성되는호르몬이며 (Speker et l., 1989; Perry n Rei, 1993), GLU는 Cortisol 의작용으로인해분비량이증가하는 2차반응에의한것이다 (Dvis n Prker, 199; Brton n Iwm, 1991). 그외에체내항상성유지를위한에너지생성과관련된혈중 TP (totl protein), 간기능성대사효소인 ALT (lnine minotrnsferse), 1

2 2 박종연 박재민 홍창기 김경민 조재권 AST (sprtte minotrnsferse) 및전해질 (N +, K +, Cl - ) 도혈중스트레스지표로이용되고있는것으로알려져있다 (Dvis n Prker, 199). 능성어, Epinephelus septemfsitus는우리나라남해안과제주도, 중국및일본연안에서식하고있는어류로, 주로중화권을중심으로고가로판매되고있어산업적으로중요한양식대상종으로알려져있다 (Song et l., 28; Kim et l., 212). 최근우리나라에서도능성어대량종묘생산기술이확립됨에따라부가가치가높아지는어종중하나이다. 바리과에관한연구로는능성어의번식생물학적연구 (Kim et l., 1997), 초기생활사 (Prk et l., 214), 골격형태발달 (Prk et l., 215), 난발생및수온과염분의영향 (Cho et l., 215), 배란유도 (Hong et l., 215), 붉바리의성숙과성전환 (Lee et l., 1998), 자바리의난발생 (Yng et l., 27), 홍바리의정자미세구조 (Kim et l., 212) 등의연구가수행되었지만, 실제양성조건에관한연구는없다. 능성어는아열대성어류로겨울철에해상가두리에서실제양식에필요한생물특성에대한양성수온범위에관한연구가매우중요하다. 또한최근우리나라에서능성어대량종묘생산기술이확립됨에따라겨울철월동양식을위한적지선정이시급한실정이다. 본연구에서는최근고부가가치의양식산업종으로부각되고있는능성어를대상으로, 겨울철해상가두리양식장에서안정적인월동양식과폐사의원인규명을위한생리생화학적인반응을조사하여저수온스트레스에대한생리학적지표설정의기초자료로활용하기위하여수행하였다. 재료및방법 1. 실험어실험에사용된능성어는전라남도여수시거문도에위치한해상가두리 (5 5 5 m) 에서 212년 7월에인공수정하여사육된미성어로평균전장 19.4±.6 m, 평균중량 174.6± 1.8 g이었다. 생존율실험및시료분석용으로사용한개체는각각 2마리, 5마리로수온하강실험간격별로 14마리이며, 2반복을하여총 24마리를실험에사용하였다. 실험어는여수연안자연수온이 12 C로하강한시점인 11월 28일을기준으로실험개시전까지해수열원히트펌프 (Co. Il-Jin, E-Plus, Kore) 를사용하여 12 C로유지하며순치시킨후사용하였다. - 1 C/8 hr) 으로구분하였고두실험구모두 12 C를대조구로 4 C까지하강시켰다. 염분농도는 32.4~33.1 ( 평균 32.8±.12 ), 용존산소량 (DO) 은 7.5~9.2 ppm을유지하였다. 각실험구는수온조절장치를이용하여수온을일정하게유지하여유수식 (1일 5회전 ) 으로 9일간절식하며실험하였다. 총 8개의 1톤용량수조 (Poly propylen, φ 1. m H 1.2 m) 에서생존율실험 4개수조와시료분석용 4개수조를준비하여 2반복실험을실행하였다. 각수온실험구별실험어는 5마리 2반복 (n= 1/group) 으로무작위추출하여혈액성상분석에이용하였다. 3. 생존율사육수온이 1 C 하강하는시점에서죽은개체를파악하여이로부터누적생존율을구하였다. 실험어의폐사확인은실험어가수조저면에유영능력을상실하여어체가측편된상태에서 1분이상아가미의호흡활동을중지한개체를선택하여조사하였다. 4. 생리생화학적분석수온이 1 C씩하강하는시점에헤파린처리한주사기 (l ml) 를사용하여마취없이 1분이내에실험어의미부동맥으로부터혈액을채취하였다. 채혈된실험어는별도의회복수조에수용하여, 다음샘플시점에반복채혈되는것을피했다. 채취한혈액은원심분리 (12, rpm, 5분 ) 하여혈장을추출하였으며, lnine minotrnsferse (ALT), sprtte minotrnsferse (AST), gluose (GLU), totl protein (TP) 및 Cortisol 분석시까지 - 7 C에서보관하였다. 분석항목에따라분석용 kit 슬라이드를사용하여자동생화학분석기 (FUJI DRI-CHEM 35i Co. Fujifilm, Jpn) 로측정하였고, 혈장 ortisol은 ortisol EIA kit (Oxfor, USA) 를사용하여효소면역분석 (enzyme immunossy, ELA) 으로측정하였으며, inter-ssy oeffiients of vrition (CV) 및 intr-ssy CV는각각 12.8% 및 9.5% 이었다. 5. 통계분석본실험에서얻어진혈액생리생화학적검사등자료에대한통계학적분석은 SPSS 통계프로그램 (ver. 17.) 을사용하여 one wy-anova test를통한 Dunn s multiple rnge test 로평균간의유의성을검정하였다 (P<.5). 2. 실험환경및방법 결 과 저수온에따른생존율및스트레스수온하강은 24시간간격으로 1 C씩하강시키는장기하강조건 (, -1 C/24 hr) 과 8시간간격으로 1 C씩하강시키는단기하강조건 (I, 1. 생존율 에서는, 실험시작후사육수온이 6. C 가유지된 144

3 저수온노출에따른능성어의스트레스반응 Wter temp. () Wter temp. (I) 2 Survivl rte () Survivl rte (I) Elpse time (hr) Fig. 1. Survivl rte of sevenn grouper in (-1 C/24 hr) n I (-1 C/8 hr) erese temperturl onitions. 시간까지생존율에변화가관찰되지않았다. 사육수온이 5 C 로하강한후 2 시간경과시 (17 시간 ) 생존율은 6.8% 를나타 냈고, 5 시간경과시 (173 시간 ) 에는 3.2% 가생존하였으며 6 시 간경과후 (174 시간 ) 에는실험어가전량이폐사하였다. Exp Survivl rte (%) AST (u/l) ALT (u/l) C 11 C 1 C 9 C 8 C 7 C 6 C 5 C I I II 에서는실험시작후 5. C 로하강시킨후 (72 시간 ) 생존율 은 56.6% 를나타냈고, 2 시간경과시 (74 시간 ) 부터생존율이 4.3% 로급격히감소하였으며 4 시간경과후 (76 시간 ) 에실험 어가전량폐사하였다 (Fig. 1) C 11 C 1 C 9 C 8 C 7 C 6 C 5 C 2. AST 및 ALT 활성저수온에스트레스의정도를확인하기위하여간기능성대사효소인 AST (sprtte trnsminoferse) 와 ALT (lnine trnsminoferse) 의활성을조사한결과 AST의농도는 12 C 대조구는 4.64±1.67 u/l를나타내었지만, 의경우 42.72±14.55~64.2±14.24 u/l, I의경우 47.44±29.5 ~67.35±1.5 u/l로실험구별통계적인차이는없었다. ALT 의농도의 12 C 대조구는 7.49±1.15 u/l를나타내었지만, Exp. I 경우 7.51±2.15~9.39±1.61 u/l, I의경우 7.34±1.13 ~11.61±4.85 u/l로시험구별통계적인차이는없었다 (Fig. 2). 3. 혈장코티졸, 글루코스및총단백질코티졸의 12 C 대조구는 78.64±1.5 ng/ml로나타났으며, 의경우 11 C부터상승하기시작하여 7 C에 ± ng/ml으로가장높은값을나타났으며, 5 C에 13.88± 5.79 ng/ml로감소하는경향이나타났다. 대조구와비교하여 11 C부터실험종료인 5 C까지유의적으로높은값을나타내었다. I의경우 11 C부터상승하여 6 C에 ±5.73 Fig. 2. Chnges of AST n ALT in plsm of ulture sevenn grouper in ( -1 C/24 hr) n I ( -1 C/8 hr) erese temperturl onitions. ng/ml 으로가장높은값을나타났으며, 5 C 에 ±6.55 ng/ml 로감소하였지만대조구보다유의적으로높은값을나 타내었다. 특히 8 시간간격으로하강시킨 I 은 24 시간간 격으로하강시킨 보다유의적으로더높은값을나타내 었다 (P<.5). 혈장글루코스의 12 C 대조구는 63.97±9.97 mg/l 의범위로나타났고, 의경우 11 C 부터상승하기 시작하여 5 C 에 ±2.75 mg/l 로가장높은값을나타 내었으며, I 의경우도상승하기시작하여 7 C 에 13.33± mg/l 로가장높은값을나타내었으며, 5 C 에 ± 9.48 mg/l 로대조구보다유의하게높은값을나타내었다. I 의경우 의실험보다유의적으로높은값을나타 내었다 (P<.5). 반면총단백질의대조구농도는 5.25±.36 mg/ml 였으나, 의경우 11 C 부터감소하여 5 C 에 3.7 ±1.76 mg/ml 으로대조구보다유의하게낮은값을나타내었 으며, I 의경우 6 C 에 2.55±1.36 mg/ml 로가장낮은값 을나타내었으며, 5 C 에 3.9±1.95 mg/ml 대조구보다유의 하게낮은값을나타내었다 (Fig. 3, P<.5).

4 4 박종연 박재민 홍창기 김경민 조재권 TP (g/l) GLU (mg/l) Cortisol (ng/ml) I 12 C 11 C 1 C 9 C 8 C 7 C 6 C 5 C I 12 C 11 C 1 C 9 C 8 C 7 C 6 C 5 C e e I Cl - (meq/l) K + (meq/l) N + (meq/l) I 12 C 11 C 1 C 9 C 8 C 7 C 6 C 5 C I 12 C 11 C 1 C 9 C 8 C 7 C 6 C 5 C I C 11 C 1 C 9 C 8 C 7 C 6 C 5 C C 11 C 1 C 9 C 8 C 7 C 6 C 5 C Fig. 3. Chnges of Cortisol, GLU n TP in plsm of ulture sevenn grouper in (-1 C/24 hr) n I (-1 C/8 hr) erese temperturl onitions. Fig. 4. Chnges of N +, K +, Cl - in plsm of ulture sevenn grouper in ( -1 C/24 hr) n I ( -1 C/8 hr) erese temperturl onitions. 4. 혈장의 N +, K + 및 Cl - 저수온스트레스에의한 N + 의 12 C 대조구농도는 ±14.79 meq/l 를나타내었지만 의경우그룹간의통 계적인차이는없었고, I의경우 11 C에 177.2±8.38 meq/l로감소하였지만 1 C부터증가하는경향을보이며 5 C에 ±4.61 meq/l로유의적으로높은값을나타내었다 (P<.5). K + 의 12 C 대조구농도는 2.38±.36 meq/l로

5 저수온노출에따른능성어의스트레스반응 5 모든실험에서대조구 11 C부터실험종료인 5 C까지대조구와비교하여유의적으로높은값을나타내었다 (P<.5). 반면 12 C 대조구의 Cl - 의농도는 ±6.82 meq/l를나타내었지만, 의경우 183.9±13.95~191.99±23.3 meq/l, I의경우 ±8.35~197.48±12.68 meq/l로그룹간의통계적인차이는없었다 (Fig. 4, P>.5). 고찰 일반적으로환경요인중에서수온은어류와같은변온동물에게다양한영향을미치는데, 환경변화에따라받는스트레스를어느정도극복하지만, 임계수준을넘어서면어류의생리활성이떨어져건강도를약화시킬수있다 (Brton n Iwm, 1991). 최근우리나라남해연안해역의평균수온은동해나서해보다높은범위를나타내고있으나겨울철저수온기에는최저 5~6 C까지하강하는특성을보여이동이불가능한가두리와같은폐쇄된환경에서양성되는양식어류는수온스트레스를입는경우가빈번히발생하고있다. 이러한저수온스트레스는면역력약화, 섭이율저하, 성장지연, 영양상태악화가일어나고, 체내대사생리가변하게되며심하면폐사에이르기도한다 (Prk et l., 211). 특히연안해역가두리에서능성어를월동시킬경우겨울철급변하는해양환경으로인한대량폐사등의문제점을안고있다. 따라서능성어가급격한저수온조건에노출되었을때생존가능한임계하한수온이나환경변화에대한체내생리적반응에관한연구가절실하게요구된다. 본연구에서는최근고부가가치의양식생물로주목받고있는능성어를대상으로저수온스트레스로인한생리적반응을조사하였다. 저수온내성을위한생존율을보면 구간의경우사육수온 5 C로하강한후 17시간째 12마리의폐사를시작으로 174시간째에전개체폐사하였다. 반면 I 구간의경우 5 C로하강한후 72시간째 9마리의폐사를시작으로 74시간째생존율 4.3% 를나타내었으며 76시간째전개체가폐사하였다. 이는두실험모두수온하강간격조건별로 5 C 에이르자전량폐사하는것으로보아, 저수온스트레스로인한생리적한계와임계수온은 5 C로추정된다. 또한 구간이 I 구간보다생존율이약간높게나타나수온하강시간이길수록생리적순응력이높아생존율이높아지는것으로추정된다. 능성어를대조구 (12 C) 로부터수온하강시어류는수온별로이상행동을보였다. So et l. (28) 은수온하강시무지개송어가 1 C까지유영능력이빨라지다가 5 C로감소했을경우운동성이둔화된다고밝혀졌다. 본연구에서능성어는수온이 8 C로하강된후부터유영속도가점차느려졌고, 7 C에서 는유영능력과몸체의중심을잃었고, 어체가수조바닥에측편된상태가지속되었으며아가미개폐운동이점차빨라졌다. 또한체표에무늬가뚜렷하지않았으며점액분비가많아지는것이관찰되었다. 이런반응은넙치, Prlihtys oliveus에서비슷한현상이나타났으며 (Hur et l., 27), 어류가스트레스를받았을때나타나는 1차적인경고반응현상으로볼수있다 (Shrek n Moyle, 199). 일반적으로어류는급격한환경변환에적응하기위해혈중카테콜아민과코르티코스테로이드의빠른교환이발생하여혈중으로빠르게방출되면코티졸농도가상승하므로, 코티졸은주로스트레스지표로이용된다 (Mzeu et l., 1977; Mommsen et l., 1999). 일반적인수온스트레스조건에서는수온과함께비례적으로코티졸이상승한다고알려져있고어류가저수온기로가는가을과초겨울에혈중함량이급격하게증가하는것으로보고된바있다 (Dvis et l., 199; Prihr et l., 1996; Prihr et l., 1997). 가숭어, Chelon hemtoheilus는수온하강시대조구인 1 C의코티졸농도가 48.5±4.8 ng/ml 이었다가.5 C에 218.±4.6 ng/ml으로상승하는것으로나타났다 (Kng et l., 27). 본연구에서는코티졸농도가수온하강전 78.64±1.5 ng/ml였으나 5 C로수온을하강시킨 에서는 13.88±5.79 ng/ml, I에서는 ±6.55 ng/ml로높게나타났다. 이러한결과는 5 C 저수온에서스트레스노출직후급격한생리적순응력을상실한것으로추정되며, 수온내성의한계를넘었기때문에전량폐사가나타난것이라추정된다. 또한 5 C로수온하강시긴후코티졸의농도는 I 실험구가 보다 1.3배정도높았다. Pikering n Pottinger (1989) 의연구에서코티졸농도는회복시간은 6 시간이내이며, 어종에따라증가속도와시간이다르다고보고하였다. 본연구에서도능성어의수온스트레스에따른코티졸농도는수온하강간격에따라회복시간과환경에적응하는시간의차이가나는것으로추정된다. Weemeyer et l. (199) 에따르면일반적으로안정시또는스트레스를받지않는어류의코티졸농도는 3~4 ng/ml로알려져있지만, 본연구에서대조구코티졸농도는 78.64±1.5 ng/ml로높게나타났다. 이러한안정시코티졸의농도는어종, 크기, 수온, 영양상태, 시간등많은환경적요인과발달단계에따라달라진다고알려져있다 (Brton n Iwm, 1991). 또한스트레스반응은유발요인의종류및강도에따라다른데, 감성돔, Anthopgrus shlegelii의경우담수로이동하였을때코티졸농도가약 3 ng/ml (Chng et l., 27) 였던반면수온을상승시켰을때약 16 ng/ml (Choi et l., 26) 로나타났다고보고하였다. 어류는신경내분비계의당신생합성을촉진시키고, 불안정한생리상태를극복하기위해항상성유지에필요한에너지원인글루코스 (GLU) 를필요로한다. 일반적으로안정적인글루코

6 6 박종연 박재민 홍창기 김경민 조재권 스의농도는어종마다차이가있는데, 활동성이강한감성돔, 잉어, 대구및연어과어류와같은어종은 54~18 mg/1 ml (West et l., 1994; Blso et l., 21; Min et l., 26) 로알려져있고, 활동성이거의없는 rok perh (Sorpen porus L.) (Silkin n Silkin, 25) 및넙치 (Prlihthys oliveus) (Hur et l., 27) 의경우 2 mg/1 ml 이하로보고되어글루코스농도는어종의행동습성에따라구분되는것으로여겨진다. 본연구의글루코스농도는 63.97±9.97 mg/1 ml로나타나유영능력과행동관점으로볼때활동성이있는어종으로보여지며, 이들뇌의대사요구량충족에필요하기때문이다 (Silkin n Silkin, 25). 일반적으로혈장글루코스와코티졸의농도는혈중에서동반상승한다고알려져있으며 (Brton n Iwm, 1991; Noln et l., 1999), 이러한연구는숭어, Mugil ephlus (Chng n Hur, 1999), pejerrey Oontesthes onriensis (Tsuzuki et l., 21) 등의경골어류에서보고되었다. 저수온스트레스에의한글루코스증가는감성돔 (Min et l., 213), 틸라피아 Oreohromis nilotius (Hssn et l., 213) 등여러어종에서나타나고있으며, 본연구도이러한경향으로저수온스트레스는 은 ±2.75 mg/l, I 은 ±9.48 mg/l로글루코스상승을유도하였다. 본연구에서는 I이 보다수온하강간격이짧았고이로인해코티졸농도는 I가약 1.3배높았으며, 글루코스농도도 I가약.7배높게나타났다. 글루코스의증가율이코티졸농도보다낮은원인은스트레스유발요인노출에대하여글루코스는상승이경미하다고보고되고있고 (Dvis n MEntire, 29), 코티졸에의해글루코스신생합성이일어나기전에글루코스가항상성유지를위한에너지원을급격히사용하였거나빠른시간이내에회복되었기때문이다. 총단백질은어류의건강진단이나영양상태, 질병진단에이용되고있으며정상적인경골어류의경우약 4~7 g/l 농도범위로알려져있다 (Turner, 1937; Ozki, 1978; Yngisw n Hshimoto, 1984). 본연구에서도대조구 12 C의농도는 5.25±.36 g/l로비슷한결과가나타났지만, 5 C로수온을하강시킨 은 3.7±1.76 g/l, I는 3.9±1.95 g/l 로감소하는경향을보였다. TP 농도는계절 (Nkgw et l., 1977; Siiqui, 1977, ), 수질환경 (Byrne et l., 1989), 스트레스 (MLey n Brown, 1979) 등에따라서차이가나며, Ishiok (198) 의연구에서도감소하는경향이보여본연구와비슷한결과가나타났다. 어체혈액의 AST와 ALT는아미노전이효소로간, 비장등의세포에분포하고, 어체에수온변화, 저산소, 중금속에의한스트레스를받으면혈중의활성이높아지게된다 (Pn et l., 23). 본연구의 과 I에서는대조구와비교해통계적차이가나타나지않았다. 이는수온하강이간세포손상을미치지않았거나, 저수온에의한어체의유영능력감소및 수온충격에의한마취효과로추정된다. 전해질은어류가스트레스를받으면삼투압조절의혼란에의해어체로부터배출되어농도변화를초래한다 (Noln et l., 1999; Choi et l., 27). 본연구에서 은 K + 및 Cl - 에는영향을미치지않았으나 N + 의농도를상승시켰고, I는 N + 및 K + 의농도를상승시켜저수온스트레스는수온하강간격이짧은 Exp. II 구간이 보다큰것으로나타났다. 따라서능성어저수온스트레스에서는시간간격별로수온하강시킨 과 I는미미한차이는있으나비슷한경향이나타났으며, 7 C에혈장코티졸과글루코스가급격하고상승하고, 유영능력과아가미개폐운동이빨라지는것으로보아어류의저수온내성의한계수온으로추정된다. 따라서본연구결과는능성어의대사생리에안정적이면서겨울철사육이가능한최적사육수온은 7 C로판단되며, 그이하의수온이되면폐사의우려가큰것으로나타났다. 요약 본연구는능성어 (Epinephelus septemfsitus) 의겨울철저수온으로발생하는폐사원인규명을위한생리생화학적인반응을조사하기위하여수온 12 C를대조구로 (-1 C/24 h), I ( - 1 C/8 h) 의실험구를정하여 9일간에걸쳐생존율, 코티졸, 글루코스, 총단백질및전해질농도를측정하였다. 생존율은 실험구의경우사육수온 5 C로하강한후 17시간째 12마리의폐사를시작으로 174시간째에전개체폐사하였다. 반면 I 실험구의경우 5 C로하강한후 72 시간째 9 마리의폐사를시작으로 76시간째전개체가폐사하였다. 생리적반응은 과 I의미비한차이는있으나비슷한경향이나타났으며, 혈장코티졸과글루코스의대사생리가 7 C에급격하고상승하고, 유영능력과아가미개폐운동이빨라졌다. 이상의결과로능성어의저수온내성의임계수온은 7 C로추정된다. 사사 본연구는국립수산과학원 해수순환여과양식시스템기술개발 과제 (R21621) 의연구비지원에의해수행되었습니다. Referenes Am, S.M Biologil initors of stress in fish. Amerin

7 저수온노출에따른능성어의스트레스반응 7 Fish. So. Bethes MD., pp Brton, B.A. n G.K. Iwm Physiologil hnge in fish from stress in quulture with emphsis on the response n effets of ortiosterois. Annu, Rev. Fish. Dis., 1: Blso, J., I. Mrimon, I. Vipln n J. Fernnez-Borrs. 21. Fte of plsm gluose in tissues of rown trout in vivo: effets of fsting n gluose loing. Fish. Physiol. Biohem., 24: Byrne, P., D. Spere n H.W. Ferguson Effets of tioni etergent on the gills n loo hemisty of rinow trout (Slmo girneri). Dis. Aqut. Org., 6: Ctli, E., P. Di Mro, A. Mnih n S. Ctuell Serum prmeters of Ariti sturgeon Aipenser nrii (Pises: Aipenseriformes): effets of temperture n stress. Comprtive Biohemistry n Physiology, 121: Chng, Y.J. n J.W. Hur Physiologil responses of greymullet (Mugil ephlus) n Nile tilpi (Oreohromis nilotius) y rpi hnges in slinity of rering wter. J. Koren Fish. So., 32: (in Koren) Chng, Y.J., B.H. Min n C.Y. Choi. 27. Blk porgy (Anthopgrus shlegeli) proltin DNA sequene: mrna expression n loo physiologil responses uring freshwter limtion. Comp. Biohem. Physiol. B. Biohem. Mol. Biol., 147: Choi, C.Y., B.H. Min, N.N. Kim, S.H. Cho n Y.J. Chng. 26. Expression of HSP9, HSP7 mrna n hnge of plsm ortisol n gluose uring wter temperture rising in freshwter pte lk porgy, Anthopgrus shlegeli. J. Aqu., 19: (in Koren) Choi, C.Y., B.H. Min, P.G. Jo n Y.J. Chng. 27. Moleulr loning of PEPCK n stress response of lk porgy (Anthopgrus shlegeli) to inrese temperture in freshwter n sewter. Gen. Comp. Enorinol., 152: Cho, J.K., C.G. Hong, J.Y. Prk, M.H. Son, C.G. Prk n J.M. Prk Effet of wter temperture slinity on the egg evelopment n lrvee of sevenn grouper, Epinephelus septemfsitus. Koren J. Ihthyol., 27: (in Koren) Dvis, K.B. n N.C. Prker Physiologil stress in stripe ss: effet of limtion temperture. Aquulture, 91: Dvis, K.B. n M. MEntire. 29. Comprison of the ortisol n gluose stress response to ute onfinement mong white ss, Morone hrysops, stripe ss, Morone sxtilis, n sunshin ss, Morone hrysops Morone sxtilis. J. The Worl Aquult. So., 4: Fry, F.E.J The effet of environmentl ftors on the physiology of fish. In: Hor, W.S. n D.J. Rnll (es.), Fish Physiology, VOL.9, Aemi Press, New York, pp Hssn, B., M. El-Slhi, A. Khlif, H. Assem, H. Assem, A. Al- Bsomy n M. El-Sye Environmentl isotoniity improves ol tolerne of Nile tilpi, Oreohromis nilotius, in Egypt. Egyptin J. Aquti., 39: Hong, C.C., J.K. Cho, J.Y. Prk, M.H. Son, J.M. Prk, K.H. Hn n H.W. Kng Ovultion inution effet of sevenn grouper, Epinephelus septemfsitus y treting hormones. JFMSE J., 27: Hur, J.W., I.S. Prk n Y.J. Chng. 27. Physiologil response of the olive flouner, Prlihthys oliveus, to series stress uring the trnsporttion proess. Ihtyol. Res., 54: Hur, J.W. n H.R. Hii. 27. Physiologil response n hemtologil hrteristis of golfish (Crssius urtus) to wter termperture shok. Koren J. Ihthyol., 19: (in Koren) Ishiok, H Stress retions in the mrine fish. I. Stress retions inue y temperture hnge. Bull. Jp. Si. Fish., 46: Jeon, J.K., P.K. Kim, Y.J. Prk n H.T. Huh Stuy of serum onstituents in severl speies of ulture fish. J. Kor. Fish. So., 28: (in Koren) Kng, D.Y., H.W. Kng, G.H. Kim, K.C. Jo n H.C. Kim. 27. Effet of ol shok on the physiologil responses of the ulture mullet, Mugil hemtoheilus in winter. J. Kor. Fish. So., 4: (in Koren) Kim, B.H., K.M. Kim, Y.D. Lee, C.B. Song n S. Rho Reproutive iology of the sevenn grouper, Epinephelus septemfsitus I. The effet of HCG on ovultion inution. J. Aquult., 1: (in Koren) Kim, S.H., C.H. Lee, Y.B. Song, H.S. Ju, H.B. Kim n Y.D. Lee Ultrstruture of lktip grouper, Epinephelus fsitus spermtozo. Koren J. Mirosopy., 42: (in Koren) Lee, C.K., S.B. Hur, T.S. Ko n S. Prk Mturtion, sex rtio n sex-reversl of re spotte grouper, Epinephelus kr. J. Aquulture, 11: (in Koren) Mzeu, M., F. Mzeu n E.M. Dinlson Primry n seonry effets of stress in fish: some new t with generl review. Trns. Ame. Fish. So., 16: MLey, D.J. n D.A. Brown Stress n hroni effets of untrete n trete lehe keft pulpmill effuent on the iohemistry n stmin of juvenile oho slmon (Onorhynhus kisuth). J. Fish. Res or Cn., 36: Min, B.H., G.A. Noh, M.H. Jeong, D.Y. Kng, C.Y. Choi, I.C. Bng n Y.J. Chng. 26. Effets of orl ministrtion of thyroi hormone on physiologil tivity n growth of lk porgy rere in freshwter or sewter. J. Aquulture, 19: (in Koren) Min, B.H., M.S. Prk, J.I. Myeong n H.K. Hwng Physiologil stress responses in lk serem Anthopgrus shlegelii sujete to ute hypoxi. Kor. J. Fish. Aqut. Si., 46: (in Koren) Mommsen, T.P., M.M. Vijyn n T.W. Moon Cortisol in teleosts: ynmi, mehnisms of tion, n metoli regultion. Rev. Fish. Biol. Fish, 9: Nkgw, H., M. Kym n K. Ikut Eletrophoreti eviene of sesonl vrition of rp plsm lumin. J. F. Fish. Anim. Hus. Hiroshim Univ., 16:

8 8 박종연 박재민 홍창기 김경민 조재권 Noln, D.T., R.L.J.M. Op t Vel, P.H.M. Blm n S.E. Wenelr Bong Amient slinity moultes the response of the tilpi, Oreohromis mossmius (Peters) to net onfinement. Aquulture, 177: Ozki, H Physiology of fish, Vol. 1, Bloo. Cirultion. Miori-shoo. Tokyo, 326 p. Prihr, M.S., A.K. Duey, T. Jveri n P. Prksh Chngs in lipi peroxition, superoxie ismutse tivity, sori i n phospholipi ontent in liver of freshwter tfish Heteropneustes fossilis expose to elevte temperture. J. Therm. Biol., 21: Prihr, M.S., T. Jveri, T. Hemnni, A.K. Duey n P. Prksh Responses of superoxie ismutse, glutthione peroxise n reue glutthione ntioxint efenses in gills of the freshwter tfish (Heteropneustes fossilis) to shortterm elevte temperture. J. Therm. Biol., 22: Pn, C.H., Y.H. Chien n B. Hunter. 23. The resistne to mmoni stress of Peneus monoon Friius juvenile fe iets supplemente with stxnthin. J. Exp. Mr. Biol. Eol., 297: Prk, C.J., B.H. Min, K.S. Kim, J.W. Lee, J.H. Lee, J.K. Noh, H.C. Kim, J.W. Prk n J.I. Myeong Physiologil responses on low wter-temperture stress of pifi lone, Hliotis isus hnni. Kore J. Mlol., 27: (in Koren) Prk, J.M., J.K. Cho, K.H. Hn, N.R. Kim, H.K. Hwng, K.M. Kim, J.I. Myeong n M.H. Son Erly life history of the sevenn grouper, Epinephelus septemfsitus from Kore. Dev. Repro., 18: (in Koren) Prk, J.Y., C.G. Hong, J.K. Cho, M.H. Son, K.H. Hn n J.M. Prk Erly osteologil evelopment of the lrve n juveniles in sevenn grouper, Epinephelus septemfsitus (Pises: Serrnie). Koren J. Ihthyol., 27: (in Koren) Perry, S.F. n S.D. Rei β-renergi signl trnsution in fish; intertive effets of teholmines n ortisol. Fish. Physiol. Biohem., 11: Pikering, A.D. n T.G. Pottinger Stress responses n isese resistne in slmoni fish: Effets of hroni elevtion of plsm ortisol. Fish Physiol Biohem., 7: Sntos, M.A. n M. Pheo Anguill nguill L. Stress iomrkers reovery in len wter n seonrytrete pulp mill effluent. Eotoxiology n Environmentl Sfety, 35: Shrek, C.B. n P.B. Moyle Methos for fish iology. Amerin. Fish. Soiety. Bethes. Mryln. pp Siiqui, N Sesonl, size n omprtive stuy of plsm proteins of four irrething freshwter fishes. Pro. Inin A. Si. Set. B., 85: Siiqui, N Chnges in loo plsm minerl onentrtion with feeing spwning n size of ir-rething tfish (Clri trhus). Zool. Jhr., 81: Silkin, Y.A. n E.N. Silkin. 25. Effet of hypoxi on physiologil-iohemil loo prmeters in some mrine fish. J. Evolut. Biohem. Physiol., 41: So, S.Y., J.W. Her n J.Y. Lee. 28. Vrition of oxygen onsumption, operulum movement numer n hemogloin y wter temperture hnge in rinow trout Onorhynhus mykiss. Koren J. Ihthyol., 2: (in Koren) Song, Y.B., H.J. Bek, H.B. Kim, S. Kiyoshi, S.J. Kim n Y.D. Lee. 28. Inution of mturtion n ovultion with HCG tretment in the sevenn grouper Epinephelus septemfsitus. J. Aquulture, 21: (in Koren) Speker, C.B., C.S. Brfor, M.S. Fitzptrik n R. Ptino Regultion of the interrenl of fishes: Non-lssil ontrol mehnism. Fish Physiol. Biohem., 7: Tsuzuki, M.Y., K. Ogw, C.A. Strussmnn, M. Mit n F. Tkshim. 21. Physiologil responses uring stress n susequent reovery t ifferent slinities in ult pejerrey Oontesthes onriensis. Aquulture, 2: Turner, A.H Serum protein mesurements in the lower vertertes. II. In mrine teleosts n elsmornhs. Biol. Bull., 73: Weemeyer, G.A., B.A. Brton n D.J. MLey Stress n limtion. In: Shrek, C.B. n P.B. Moyle (es.), Methos for fish iology. Amerin. Fish. Soiety. Bethes. MD., West, T.G., C.J. Bruner n P.W. Hohhk Musle gluose utiliztion uring sustine swimming in the rp (Cyprinus rpio). Am. J. Physiol., 267: Yngisw, T. n K. Hshimoto, Plsm lumins in elsmornhs. Nissuishi., 5: 183. Yng, M.H., Y.U. Choi, M.M. Jung, H.D. Ku, B.S. Oh, T.S. Moon, C.H. Lee, K.M. Kim n S.J. Hn. 27. Temperture effet in egg evelopment n hthing of longtooth grouper, Epinephelus runeus. Dev. Repro., 11: (in Koren)

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