대한세포병리학회지제 17 권제 1 호 The Korean Journal of Cytopathology 17 (1) : 18-26 2006 ISSN 1017-0391 요세포검사의최근검사기법 울산대학교의과대학서울아산병원병리과 공경엽 = Abstract = New Techniques for the Detection of the Malignant Cells in Urine Cytology Gyungyub Gong, M.D. Department of Pathology, Asan Medical Center, University of Ulsan College of Medicine, Seoul, Korea Transitional cell carcinoma of the urinary bladder is common in the genitourinary tract. The gold standard for the diagnosis of bladder cancer has been cystoscopy, along with urine cytology. Cystoscopy is an invasive and relatively expensive technique. By comparison, urine cytology is easy to perform and specific for a diagnosis of bladder cancer, although less sensitive, especially in low-grade tumors. For this reason, there has been a need for superior noninvasive technology to increase our confidence in being able to detect bladder cancer. There are many reports of the various urinary tests that are available to facilitate the diagnosis. In this article, I reviewed the literature on urinary markers and tests that may be clinically useful, including fluorescence in situ hybridization, ucyt+/immunocyte, the BTA test, the NMP 22TM, the FDP test, the telomerase activity test, the HA and HAse tests, and flow cytometry. Most of these tests have a higher sensitivity and specificity than cytology. However, urine cytology has the highest specificity, especially in individuals with a high-grade tumor. We conclude that no urinary markers or tests can replace the role of cystoscopy along with cytology in the diagnosis of transitional cell carcinoma of the bladder. However, some markers could be used adjunctively to increase the diagnostic accuracy during screening or during the postoperative follow-up examination of patients with bladder cancer. Key words: Urine, Cytology, Urinary bladder, Neoplasm, New marker and test 논문접수 : 2006년 2월 1일게재승인 : 2006년 2월 17일 책임저자 : 공경엽주소 : (138-760) 서울시송파구풍납동 388-1, 울산의대서울아산병원병리과전화 : 82-2-3010-4554 팩스 : 82-2-472-7898 E-mail address : gygong@amc.seoul.kr
공경엽 : 요세포검사의최근검사기법 19 서론 방광의요로상피암종은비뇨기계악성종양중흔히접할수있는암의하나로우리나라에서발생률이 5위이며남성에있어서는여성보다그발생률이 3~4 배높다. 1 전통적인진단방법은요세포검사와함께방광경검사를시행하는것이다. 요세포검사가신요로계암을진단하는데사용되기시작한것은비교적최근의일이며 1945년 Papanicolaou 등이 88명의환자를대상으로하여방광암진단을위해요침전물을사용한보고가있으며, 이당시 correct positive 의진단율을 88.8% 로보고하였다. 2 요세포검사는검체를얻기가용이하며반복해서시행할수있고특이성 (92 ~100%) 이높은장점이있는반면, 민감성 (23~61%) 이낮은단점이있다. 특히저등급요로상피암종인경우에는민감도가심각할정도로낮은데, 불행인지다행인지방광암의약 80% 는표재층에국한되어있으며저등급이많다. 이에대한이유로는저등급암종을진단하는세포소견이분명하게나누어지지않고주관적인의견에따라달라질수있어주로병리의사의경험에의존하는경향이많기때문이다. 또한저등급암종세포의형태학적변화는대단히미묘해서숙달된병리의사도이를분별해내는것이쉬운일은아니다. 이에비해방광경검사는다른내시경검사와마찬가지로병변을육안으로직접관찰할수있으며, 필요한경우조직검사까지시행할수있는장점이있지만비용이비싸며, 방법이침습적이어서환자에게고통을주며방광염이있을경우진단이어렵다. 게다가방광경검사가암을 100% 찾아낼수있는것도아니며, 방광암종은등급에관계없이 1/3~1/2에서재발을잘하므로지속적인추적관찰이필요한데방광경검사를매번시행하는것은결코용이한일이아니다. 따라서방법이침습적이지않아환자에게불편함을주지않고검사결과를믿을만한신뢰성있는검사법이필요하다. 암선별진단에사용되는검사법의결과에대한신뢰성에있어서, 임상의사의입장에서의희망사항을크게두가지로나누어볼수있다. 첫째, 검사결과가암의존재를확실히배제해줄수있는가하는것이다. 즉민감도와음성예측도가높아서위음성을얼마나줄일수있냐는것이다. 둘째, 방광경을통해서보았을때눈에보이든안보이든지암의존재를확실히진단해줄수있느냐는것이다. 즉특이도와양성 예측도가높아서위양성이없어야한다는점이다. 이런조건을 100% 충족시켜줄수있는검사법은현재로서는없다. 따라서방광경검사처럼침습적이지않고행하기쉬우며민감도와특이도가동시에높은검사법의개발이필요하다. 이전부터이에대한필요성이제기되어많은연구가있어왔으며, 많은검사법에대한보고들이있다. 3 새로운검사법은크게형태학적소견과연계되어서하는방법과그렇지않은방법으로둘로나누어볼수있으며, 형태와무관한검사법에는요속에분비되어있는항원에대한항체를이용한단백질관련검사법, 미세부수체 (microsatellite) 분석법, DNA 배수성을분석하는법, 단백체 (proteomics) 분석법등여러방법들이보고되고있다. 형태학적인소견과연계해서사용할수있는검사법은 FISH, ucyt+/immunocyte, morphometry 등이있다. 본장에서는각검사법들의장점과한계점들을기술해보고자한다. 우선요속에분비되어있는항원을검사하는방법중 bladder tumor antigen (BTA) 관련검사법이있는데기저막성분을인지하는 original BTA 검사법, human complement related H factor를측정하는 BTA stat 및 BTA TRACK assay가있다. 4-6 이의민감도및특이도는보고자에따라다양한데 57~83% 및 50~72% 이다. 이중 BTA stat 검사법은 FDA 승인을받은검사법이다. 다음으로핵바탕질단백 (nuclear matrix protein) 과관련된검사법인데 NMP-22 test이다. 7 NMP22는핵분열장치로세포증식때염색질의분포가적절하게되도록도와주는기능이있다. 두항체를사용하여효소연계면역측정법 (enzyme- linked immunoassay, ELISA) 을이용하여이성분을측정하는검사법이다. 민감도및특이도는각각 68~88% 및 65~91% 이며이역시 FDA 승인을얻은검사법이다. 위에서언급한두검사는비교적방법이용이하기는하지만형태학적인소견과연관해서관찰하기는어려운점이있다. 최근개발된방법중형태학적소견과함께이용할수있는방법이있는데 ucyt+/immuno Cyte 이다. 8 이는요를여과막에걸러서검체를만든후형광물질이부착된세종류의항체를이용하여면역형광염색을시행한후양성인세포를찾아내는것인데, 현미경관찰시양성인세포의형태학적관찰도동시에할수있다는장점이있다. 민감도는 53~100% 이고특이도는 64~ 95% 로보고되고있다. Fluorescence in situ hybridization ( 형광제자리보합법, FISH) 은형광물질이부착되
20 대한세포병리학회지 / 제 17 권 / 제 1 호 / 2006 어있는 DNA 탐색자 (probe) 를이용해세포에서유전자의숫자적변화나치환 (translocation) 같은변화가있는지를쉽게알수있는방법으로민감도와특이도가높은검사법이다. 9,10 그외 fibrin-fibrinogen degradation product 측정법, 11 끝분절효소 (telomerase) 활성도측정법, 12 hyaluronic acid/ hyaluronidase 측정법, 13,14 microsatellite 검사법 15 등여러다양한검사가있다. 검사방법의종류가다양하다는말은우리의원하는이상적인표지자 ( dream marker ) 는없다는의미이기도하다. 하지만, 보고된문헌들을검토해보면보고자에따라각검사들을어떻게시행하여어떤식으로이용하는지에따라환자및의사가도움을얻을수있는정도의차이가상당히큰것을알수있다. 따라서여러검사법들에대한방법, 임상적인의의등을분석해보고, 우리가요로상피암종을진단할때유용하게쓸수있는방법들에대해알아보고자한다. 본 론 형광제자리보합법 (Fluorescence in situ hybridization, FISH) FISH는형광물질이부착되어있는 DNA 탐색자를이용해유전자의획득, 소실등숫자적변화, 치환같은변화가있는지를쉽게알수있는검사법으로과거에는혈액암의진단및분류에많이이용되어왔다. 최근들어전처리기법이좋아짐에따라사이기 (interphase) FISH 의사용이혈액암과고형암진단에이용되고있다. 16 방광암에도유전자의변화에대한연구가활발히이루어져정상요로상피세포에서암으로이행될때의유전자변화가이미잘알려져있다. 17 일차적으로 9p21의소실, 이차적으로 3p, 7, 5q, 15p의획득다음으로 11p, 6q, 13q, 18q의획득이관련이있는것으로알려져있어처음이기법이연구되기시작할때는 9개의탐색자를써서시작을하여, 18 여러실험을거친후에가장민감도가높은 4개의탐색자를하나의단위로묶어키드로만들어시판되고있는데이것이 UroVysion (Vysis/Abbott, Downers Grove, IL, U.S.A.) 이다. 9,10 이검사는 3, 7, 17번염색체의중심절 (centromere) 과 9번염색체의 9p21 영역을표적으로하는 4개의다색탐색자 (multicolor probe) 를사용하며 2개이상의염색체의변화가있는세포가 5 개이상관찰될때를 양성 이라고보고한다. 보고자에따라차이가있기는하지만 Halling 등에의하면민감도 81%, 특이도 98% 로대단히높다. 19 민감도및특이도가높아결과는우수하나검사비용이고가이며형광현미경등특수장비가필요한것이단점이라할수있다. FISH 이외에도비교유전체제자리보합법 (comparative genomic hybridization, CGH), 분자클로닝 (molecular cloning) 및 microarray 기법등다양한방법이염색체및유전자변화를관찰하는데이용되고있다. ucyt+/ Immunocyte ucyt+/immunocyte (Diagnocure Inc., Saint-Foy Quebec, Canada) 1997년 Fradet 등이개발하여보고한검사법으로면역형광염색을이용한검사법이다. 8 이검사법에는 3개의항체가이용되는데그중하나는 CEA의 high molecular weight form으로단항성항체 (monocloncal antibody, 19A211) 이며 Texas red로부착되어있고나머지두항체는세포질의점액성분을표적으로하는항체이며 (M344 및 LDQ 10) 이항체들은형광이부착되어있다. 이중 M344는 300kd의 sialoglycoprotein으로특히저등급암종에발현이높아, 병기 Ta-T1 방광암의 71% 에서발현되고, 19A211은 Ta-T1 종양의 90% 정도발현하는것으로보고되었다. 20 검사법은비교적간단하며, 50ml 정도의요이면충분하며여과막 (Milipore filter) 에요를걸러서세포성분을모은다음위에서기술한세항체를이용하여면역형광염색을시행하면된다. 현재상품화되어있는키트는세항체를묶어서하나의용액으로만들어두었으므로한번의항원항체반응만시행하면된다. 형태학적소견을관찰하면서볼수있는장점이있어병리의사로서는편한마음으로접근할수있는검사법이지만, FISH처럼형광현미경이필요하며, Texas-red와 FITC (green) 를동시에관찰할수있는이중필터 (dual filter) 가구비되어야용이하게관찰할수있다. 세포를전부관찰하여붉은색이든녹색이든지염색된세포를 1개이상관찰하면양성으로판별을한다. 이때양성염색유형이세포질에미세한과립모양으로염색된것만취해야위양성판단의오류를피할수있다. 검사성적은보고자에따라다양한데, 21-23 민감도 90% (53~100%) 특이도 74% (64~95%) 로민감도가높은반면특이도가낮은것이이검사법의단점이며
공경엽 : 요세포검사의최근검사기법 21 이는통상적인세포검사를병행하면어는정도보정이가능하다. 50~75% 이다. 27 민감도와특이도가낮은것은아니나그렇다고만족할만한수준도아닌것같다. 방광암항원검사법 (Bladder Tumor Antigen Test, BTA Test) 핵바탕질단백검사법 (Nuclear Matric Protein Test, NMP 22) 최초에보고된 original BTA test (C. R. BARD Inc., Redmond, WA, U.S.A.) 는방광암의기저막복합체성분의일부를인지하는검사법으로인체 IgG 가이용되는 latex agglutination 기법이이용되었다. 4 이성분은 16-165kd 크기의 polypeptide이다. 결과는검사띠 (test strip) 의색깔변화로알수있었다. 그러나 original BTA test의민감도는 34~70% 정도이고특이도도낮았으며신세포암종과전립샘암종을가진환자의 86.4% 에서도양성으로나오며, 그외방광염및전립샘비대증등다른양성질환에서도높은양성율이나오는등그특이성에문제점이제기되었다. 24 따라서그이후에는 original 검사법보다 BTA stat test 5 와 BTA TRAK test (Blow Diagnostic Sciences, Redmond, WA, U.S.A.) 6 를주로사용하는데이들은 human complement factor H related protein (hcfhrp) 을측정하는검사법이다. hcfhrp는종양세포들이 complement에의해주도되는면역계를피해갈수있도록도와주는성분이며이들의존재는암세포의생존을유도한다. BTA stat test는정성적인검사법으로 immunochromatographic test인반면, BTA TRAK test 는정량적인검사법으로 ELISA 검사법이다. BTA stat test는두종류의단항성항체를사용하여 5분정도면결과를알수있을정도로빠르고간단하여외래에서도손쉽게할수있다. 상품화된요시험지 (dip stick) 방식의검사법으로서일정시간이경과한후색깔의변화를읽으면된다. 민감도는 57~83% 이고, 저등급요로상피암종의민감도는약 50% 이지만, 고등급은이보다낮아 29~ 83% 이다. 25 특이도는 68~72% 로보고되고있다. 전림샘비대증 (88%), 염증성병터 (70%), 등에높은양성율을나타낸다. 26 BTA TRAK test는 sandwich immunoassay 로항체가입혀져있는 96 well에요를넣은후일정시간항원항체반응을일으킨후세척하고발색제를넣어 450nm의파장에서판독하면된다. Stat test 보다는시간이더걸리지만정량분석까지가능하다는장점이있고, 민감도도전등급의종양에서기존의세포검사결과보다는높아서 62~77% (54% GRADE1-78% Grade 3) 이지만이검사역시특이도는 NMP는핵의구조를견고하게유지하는구조물로서 DNA 복제, RNA 전사및유전자의발현에관여한다. 28 특정한장기또는특정한암과관련이있는 NMP에대한보고가되었으며, 방광암과도관련이있는 NMP가보고되었는데이를기반으로 NMP 22 test (Mattritech Inc., Newton, MA, U.S.A.) 가개발되었다. NMP-22는세포분열시에염색질의적절한재분포가이루어지도록조정하는역할을하는데방광암의요속에정상보다약 25배정도 NMP22가많이분비되는것으로알려져있다. 7 원래검사방법은두개의단항성항체를사용한 ELISA 검사법으로정량분석법이다. 민감도는 68.5~88.5% 로높게보고되고있으며, 특이도는 65.2~91.3% 정도이며이역시전립샘비대증등양성병변및다른암에도비교적높게보고되고있어변별력에있어서는 BTA와마찬가지로한계점이있다. 29.30 최근 BTA stat test와유사한신속한검사법이개발되었는데, bladder check test (Matritech) 이며이는 stat test와마찬가지로정성적인검사방법이며방법또한이와유사하고신속하여 30분정도면결과를알수있다. 이역시외래에서직접시행해볼수있는쉬운검사로서민감도는 68~88% 이고특이도는 65 ~91% 이다. Fibrin-fibrinogen degradation product, FDP McCabe 등이 1984년 FDP가방광암과연관이있으며 FDP test (Accu Dx, Intracel Corp., Rockville, MD, U.S.A.) 로측정이가능하다는보고를하였다. 11 이검사법의원리는종양세포가혈관내피성장인자 (vascular endothelial growth factor) 를많이분비하여미세혈관계의투과력이증가하고혈장단백중하나인섬유소원이빠져나가고이것이혈관바깥에서섬유소로전환되고다시 plasmin에의해분해되어섬유소-섬유소원분해산물을만드는데요속에분비되어있는이산물을정성적으로측정하는것이다. 처음에검사법이보고될당시의방법은면역분석법이었으나검사시간등여러단점을보완하여 hemagglutination immuno-
22 대한세포병리학회지 / 제 17 권 / 제 1 호 / 2006 inhibition method, latex agglutination, ELISA 방법을거쳐신속한정성법으로까지발전되었다. 민감도는 82% (27~100%) 이고특이도는약 80% 이다. 31,32 Hyaluronic acid-hyaluronidase test Hyaluronic acid (HA) 는 nonsulfated glycosaminoglycan 으로조직의바탕질및체액의한성분이다. HA는조직의통합성및수분항상성에주요한성분이며 hyaluronidase (HAse) 는 HA를분해시키는효소이다. HA는방광암에 5~7배증가되어 HAse는고등급의방광암에만 4~7배증가되어있는것으로알려져있다. 13,14 이것은면역분석법으로서 HA test의민감도는 83% 이고, 특이도는 90%, HAse test의민감도는 81.5%, 특이도는 83.8% 이다. 13 HA test는방광암을찾는데주로이용되고 HAse test는방광암의등급을평가하는데유용하다. 끝분절효소검사법 (Telomerase test) 끝분절효소는염색체의끝부분에존재하는짧은 DNA 연쇄 (sequence) 이며염색체불안정성 (chromosomal instability) 및세포사에관여한다. 33 세포분열이일어남에따라끝분절의길이가짧아지는데, 결국끝분절길이가짧아져없어지면세포는죽게되는것이다. 끝분절효소는끝분절의유지에필요한효소이며인간에서는생식세포에가장풍부하게존재하며암세포에서도끝분절효소의활성이왕성한데이끝분절효소활성도를 PCR 기법을이용해측정하는것으로 Telomereric Repeat Action Protocol (TRAP) 검사법이다. 12 민감도는 70~86% 이고특이도는 60~90% 이다. 34-36 전립샘비대증및염증성병터에도 23.3% 정도양성이나올수있다. 36 미세부수체분석법 (Microsatellite analysis) 미세부수체는대단히다양한 DNA 반복구조로인간의유전체에서흔히관찰된다. Loss of heterozygosity (LOH) 나 microsatellite instability (MSI) 같은암생성과관련이있는변화를인지할수있는미세부수체표지자가있다. 그중방광암에서는염색체 4p, 8p, 9p, 9q, 11p 및 17p에서자주 LOH가관찰된다. Mao 등이 1996년 13 MS 분석법을이용하여 20명의환자 /25개검체를대상으로 13개의미세부수체표지자를사용하여 MA를통해환자의 95% 를진단하였으며이때함께시행한요세포검사의진단율은 50% 밖에되지않았다. 물론환자대상수가적어서의의가약간희석될수도있지만분자병리와요의접목이라는점에서괄목할만한보고이었다. 이후계속연구가이어져제2 상임상시험이보고되기도하였으며 37 민감도 83~ 95%, 특이도 100% 로결과가우수하였다. 단여러개의미세부수체 DNA 표지자를사용해야하며이미잘알려져있고흔히사용되는 PCR 기법을이용하기는하지만검사방법도간단치않아임상적용이용이하지만은않다. 따라서저렴한자동화기계의개발과표지자비용이같이저렴해진다면가장강력한검사법이라할수있겠다. Table 1. Summary of FDA approved techniques Urinary markers Test materials Marker identified Test type Testing place Time taken Sensitivity Specificity FISH Bladder washing Chromosomal alteration-loss or deletion In situ hybridization Lab. Hrs 69-87% 85-97% ucyt+ Urine CEA and mucin IF Lab. Hrs 53-100% 64-95% BTA Urine H factor of complement NMP 22 Urine Nuclear mitotic apparatus Accu-dx Urine Fibrin degradation product Modified from Dey P 3 Immunoassay ELISA Point of care (Stat) and lab Point of care and lab. Few mins. and hrs. Stat 57-83% TRAK 62-77% BTA Stat 68-72% TRAK 50-75% Mins and hrs 68.5-88.8% 65.2-91.3% Immunoassay Point of care Hrs 68% 86.2%
공경엽 : 요세포검사의최근검사기법 23 세포주기조절인자 (Cell cycle regulator) 정상적으로세포주기조절단백은세포의증식과진행에관여하며잘통제되어있다. 그러나암세포에서는이의통제가풀어져무제한세포증식이초래된다. 방광암의생성및증식에관여하는세포주기조절단백및유전자들이많이있다. 24 그중대표적인것이 p53 종양억제유전자인데진행형방광암종과상피내암종에서 p53의변화를볼수있다. 38 p53 단백발현은면역화학염색을통해서관찰할수있으며, p53의변이는 PCR을통해서확인할수있다. 요에서의 p53 민감도는 23.5% 로낮고특이도는 75% 이다. 그외에도 prb, p15, p21 및 cyclin-dependant kinases 등에대한연구도이루어지고있다. Cytokeratins Cytokeratins (CK) 은중간미세섬유 (intermediate filament) 로세포의골격을유지하는단백성분이다. 상피세포유형에따라발현되는 CK의종류가다르다. 이성질은암이생기거나전이가되어도유지되는편이다. 이행상피암종은전기영동의결과를보면 CK 7, 8, 18, 19 및 20을갖고있으며, CK 13, 17의발현양은다양하며, CK 4, 5, 6, 10, 14 및 16은소량표현한다. CK 중 CK20은우산세포를제외한정상요로상피세포에서는발현이안되나저등급의암세포에서는발현이잘된다는보고가있다. 39 민감도는 91% 이고특이도는 67~100% 이다. 40 CK 18도방광암진단에도움을줄수있는 CK이다. 41 Nisman 등은방광암진단에 CYFRA 21-1 assay를이용해용해성 CK 19를측정하여보고하였다. 42 민감도는 79.3%, 특이도 88.6% 이었다. 혈액형연관항원 (Blood group-related antigens) 정상인구 70~80% 의요로상피에서 ABO (H) 및 Lewis blood group-related (Lex) antigens 및 Thomas- Friedenreich-related antigen (T-antigen) 이관찰된다. 발암과정은아마도이러한항원들의발현에이상이생긴것이라고보고되었다. 43 ABO 항원발현의소실과비역행분화암과의상관성, Lex 항원및 T 항원발현과이행상피암종의연관성이알려지기시작하였다. 이이론에근거를두고종양과연관이있는 p-12 같은 혈액형연관항원에대한항체가개발되어이를면역화학염색을이용하여측정할수있게되었다. 44 민감도는 85~89% 이고특이도는 51% 로대단히낮다. 24 흐름세포측정기 (Flow cytometry), 영상분석기 (Image cytometry) 및 Quanticyt 흐름세포측정기는 1980~90년대충실성종괴에서의 DNA 분포유형을분석하여배수성과증식분획을관찰하는데많이사용되었다. 이후요에서도새로운침전기법이개발되어흐름세포측정기의사용이보고되어왔는데고등급방광암종과상피내암종에서는흐름세포측정기검사에서비배수성이많은것으로보고되고있다. 24 이와는대조적으로저등급은대부분이이배수성이다. 따라서요에서방광암을찾아내는역할보다는저등급과고등급암을감별하는데더의의가있는검사라할수있다. 또한정확한결과를얻기위해서는많은양의암세포가필요하고고가의장비를사용함에도불구하고검사의정확성이낮고복잡하여때문에방광암을찾아내고재발을추적관찰하는검사로는제한점이많은방법이라할수있다. 영상분석기는세포및세포성분의분류를좀더객관적으로분석하기위해고안된방법으로 Feulgen 염색을통해요로상피에서 DNA 배수성을분석할수있으며동시에세포형태의관찰도가능한데, 핵 : 세포질비등의지표에따라정상세포와구분하는데흐름세포측정기처럼저등급암종보다고등급암종을찾아내는능력이더뛰어나다. 물론보고된결과에따르면기존세포검사보다는낫다고는하지만 45 제한점이있는검사라최근들어서는그사용빈도가감소되고있다. Quanticyt system은광학현미경상에잡히는이미지와 DNA 양을분석하여방광암의위험성을결정하는기법이다. 46 앞서기술한흐름세포측정기와영상분석기를합쳐놓은것으로보면된다. 민감도는 59~ 69% 이고특이도는 70% 정도이다. 이역시많은양의검체가필요하며검체처리과정도복잡하고영상분석체계도필요하므로상용화되기에는한계점이많다. 새로운단백체연구법 (Novel Proteomic approach) 단백연구에전통적으로 2D gel-protein map이많이이용되어왔다. 최근들어단백연구에획기적인발달
24 대한세포병리학회지 / 제 17 권 / 제 1 호 / 2006 이이루어져단백분석에질량분석기 (mass spectrometry) 가이용되기시작하였다. 이기법은 2-D gel에비해민감도도높고속도도빠르며재현성또한우수한기법이다. 최근기법인 ProteinChip/SELDI technology (surface enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry) 를이용하여새로운방광암생물학적표지자를찾고자하는연구가보고되었다. 47 이연구를통해 5개의새로운요로상피암종의생물학적표지자와 7개의단백군집을찾아냈는데, 이영역은 3.3~133kd에이른다. 개개의생물학적표지자의민감도는 43~70% 이고특이도는 70~86% 이며생물학적표지자와단백군집을조합하였을때는민감도가 87% 이고특이도가 66% 이었다. 특히저등급암종의인지에민감도가 78% 로높았다. 비교적좋은결과가나왔으나이방법을임상적으로사용하기에는방법의용이성, 경제적측면다한계가있다. 따라서발견된생물학적표지자를잘개발하여상품화하는것이좀더현실적이라생각되는데후속연구보고는아직없는실정이다. 기타표지자 (Other biomarkers) c-erb 및 c-ras 같은종양유전자, Ki-67, PCNA (proliferation cell nuclear antigen) 같은증식항원, 성장인자, 또한 cadherins 및 integrin 등의세포부착인자등에대한연구도이루어지고있다, 또한방광암과연관이있는항원으로알려진것에는 BL2-10D1 antigen, T43 및 T138 antigen, 48693/12 antigen 등이보고되고있으나임상적으로이용하기에는좀더많은검증과정이필요하다. 결론 방광암진단시요세포검사의한계점인낮은민감도를보완할수있는여러가지검사법을검토하였다. 그러나세포검사를시행하지않고이를대체할검사법은없다는것이결론이다. 하지만세포검사는제한점이있으므로이들검사의보조적인도움을받으면방광암의선별진단이나술후추적관찰시방광암진단율을높이는데기여할수있을것이다. 위에서기술한검사법중검증과정이끝나 FDA 인가를받은검사법은 NMP22, BTA test FDP test, Immunocyte FISH 이며 Table 1에이들검증된검사법들의장단점을정리하였다. 이들을잘분석한후각병원의실정에맞는검사법의도입이방광암진단에도움을줄수있으리라생각한다. 참고문헌 1. Annual Report of Cancer Registry Program in Republic of Korea. Ministry of Health and Welfare, Republic of Korea, 2002. 2. Papanicolaou GN. Marchall VF. Urine sediment smears: A diagnostic procedure in cancers of the urinary tract. Science 1945;101:519-21. 3. Dey P. Urinary markers of bladder carcinoma. Clin Chim Acta 2004;340:57-65. 4. Sarosdy MF. The use of the BTA Test in the detection of persistent or recurrent transitional-cell cancer of the bladder. World J Urol 1997;15:103-6. 5. Sarosdy MF, Hudson MA, Ellis WJ, et al. Improved detection of recurrent bladder cancer using the Bard BTA stat Test. Urology 1997;50:349-53. 6. Ellis WJ, Blumenstein BA, Ishak LM, Enfield DL. Clinical evaluation of the BTA TRAK assay and comparison to voided urine cytology and the Bard BTA test in patients with recurrent bladder tumors. The Multi Center Study Group. Urology 1997;50:882-7. 7. Keesee SK, Briggman JV, Thill G, Wu YJ. Utilization of nuclear matrix proteins for cancer diagnosis. Crit Rev Eukaryot Gene Expr 1996;6:189-214. 8. Fradet Y, Lockhard C. Performance characteristics of a new monoclonal antibody test for bladder cancer: ImmunoCyt trade mark. Can J Urol 1997;4:400-5. 9. Bubendorf L, Grilli B, Sauter G, Mihatsch MJ, Gasser TC, Dalquen P. Multiprobe FISH for enhanced detection of bladder cancer in voided urine specimens and bladder washings. Am J Clin Pathol 2001;116:79-86. 10. Halling KC. Vysis UroVysion for the detection of urothelial carcinoma. Expert Rev Mol Diagn 2003;3:507-19. 11. McCabe RP, Lamm DL, Haspel MV, et al. A diagnostic-prognostic test for bladder cancer using a monoclonal antibody-based enzyme-linked immunoassay for detection of urinary fibrin (ogen) degradation products. Cancer Res 1984;44:5886-93. 12. Dalbagni G, Han W, Zhang ZF, et al. Evaluation of the telomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay for telomerase as a diagnostic modality in recurrent bladder cancer. Clin Cancer Res 1997;3:1593-8.
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