Korean J. Microbiol. Biotechnol. (2014), 42(2), 145 151 pissn 1598-642X eissn 2234-7305 Korean Journal of Microbiology and Biotechnology 참가시나무추출물의항균활성및크림안정성평가 구현아, 김해수, 박수남 * 서울과학기술대학교정밀화학과나노바이오화장품연구실, 화장품종합기술연구소 Received: February 5, 2014 / Revised: March 12, 2014 / Accepted: March 12, 2014 Antibacterial Activity and Cream Stability of Quercus salicina Blume Extract Hyun A Gu, Hae Soo Kim, and Soo Nam Park* Department of Fine Chemistry, Nanobiocosmetic Laboratory, and Cosmetic R&D Center, Seoul National University of Science and Technology, Seoul 139-743, Republic of Korea The antibacterial effect of Quercus salicina Blume extract was investigated and then the stability of a cream containing it best performing fraction, the ethyl acetate fraction, was evaluated. The antibacterial effect was evaluated on the skin microorganisms Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Propionibacterium acnes, Escherichia coli, and Pseudomonas aeruginosa. Among the Q. salicina Blume extract fractions, the ethyl acetate fraction demonstrated the lowest minimum inhibitory concentration against S. aureus (1,200 µg/ml), B. subtilis (2,500 µg/ml), P. acnes (1,200 µg/ml) and P. aeruginosa (312 µg/ml). Therefore, a cream containing 0.25% ethyl acetate fraction of Q. salicina Blume extract was prepared and evaluated for stability. The ph, viscosity, and absorbance of the cream were measured under various temperatures (4, 20, 37, 45 o C) and sun light during a 12 week period. The changes in viscosity, absorbance and ph of the cream did not change significantly during the term of the experiment when compared with a placebo cream. In addition, any change in color or odor of the cream was not observed during the 12 weeks. These results indicate that the ethyl acetate fraction of Q. salicina Blume extract has a high antibacterial effect and is stable as a cream. There is therefore some potential for its use in cosmetic materials. Keywords: Quercus salicina Blume, antibacterial activity, stability, cosmetic 서 론 피부는자외선, 미생물, 공해와같은다양한환경적요인에항상노출되어있다. 특히, 자외선은피부에활성산소종 (reactive oxygen species) 을발생시키며피부의항산화방어막인효소적항산화제와비효소적항산화제를파괴시킨다. 결과적으로산화적스트레스에의한세포손상이야기되어피부노화가가속화된다 [1,8,9,15]. 또한, 피부에존재하는피부상재균은피부질환을발생시키고화장품을오염시키는등의악영향을초래한다고보고되었다 [8]. Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Propionibacterium acnes, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa 등이대표적인피부상재균이다. 이중혐기성 *Corresponding author Tel: +82-2-970-6451, Fax: +82-2-972-9585 E-mail: snpark@seoultech.ac.kr 2014, The Korean Society for Microbiology and Biotechnology 피부상재균인 P. acnes는모낭내에상주하며, 지질분해효소인 lipase를분비하여피지의주성분인중성지방을유리지방산으로분해하고염증부위를더욱확장시켜여드름을유발한다고알려져있다 [6]. 또한, 호기성피부상재균은염증의일차적원인은아니지만, 염증발생부위를더욱확장시켜, 여드름이악화되는데영향을주는것으로밝혀져있다 [4]. 따라서, 화장품분야에서는이를막기위해 paraben 류의방부제가사용되고있다. 그러나최근 paraben류의안전성문제가제기되면서이를대체할수있는천연방부제연구가활발히진행되고있다 [2]. 참가시나무 (Quercus salicina Blume) 는참나무과에속하는상록의작은교목으로일본과우리나라제주도, 울릉도및남쪽섬에분포한다. Quercus 종은민간에서설사, 피부염, 출혈치료등에사용되고있으며이중참가시나무는이뇨제, 항염제, 결석치료제로사용되어왔다. 참가시나무의주요성분으로는 tannin, methyl galate, quercetin, galic acid, ellagic acid 등이보고되어있다 [7, 14, 15].
146 Gu et al. 본논문에앞서저자들은참가시나무항산화, 활성성분분석에대하여이미보고한바있다 [12]. 보고된논문에서참가시나무에틸아세테이트분획 (9.28 μg/ml) 과아글리콘분획 (8.25 μg/ml) 의 free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) 소거활성 (FSC 50 ) 은비교물질로사용된 (+)-αtocopherol(8.98 μg/ml) 과비슷한활성을보여주었다. 참가시나무추출물은라디칼소거활성외에도총항산화능및활성산소에대항한세포보호활성이매우높게나타났고미백활성에도효과를나타냈다. 따라서본논문에서는참가시나무추출물의항균활성및참가시나무추출물을함유한크림안정성을평가하여화장품소재로서참가시나무추출물의활용가능성을확인하고자하였다. 재료및방법 기기및시약 UV-visible spectrophotometer는 Varian (Australia) 사의 Cary 50, ph meter는 Istek (Korea), 점도측정은 Brookfield (DV-E viscometer, USA) 사의기계를사용하였다. 시료를보관한항온조는 Jisico (Korea) 사의 JHP01B를사용하였으며, 참가시나무추출및크림제조에사용한증류수는 Barnstead, US/NANO PURE (USA) 에통과시킨것을사용하였다. ph 표준용액은 Dae Jung Chemical & Metals사제품을사용하였고, 에탄올 (EtOH), 에틸아세테이트 (EtOAc) 등각종용매는특급시약을사용하였다. 실험에사용한건조된참가시나무는 2010년 9월경동시장에서구입하여사용하였다. 참가시나무추출물제조건조된참가시나무 100 g 을잘게자른후 50% 에탄올 2L 를이용하여하루동안침적시킨후여과하였다. 이여액을감압건조하여파우더를얻고이를실험에사용하였다. 또한 50% 에탄올추출물은감압농축한후헥산을이용하여엽록소등의비극성성분을제거하였고, 이후에틸아세테이트로분획후감압 농축하여파우더를얻었다. 에틸아세테이트분획에서얻은파우더일부는산가수분해반응을통하여당제거후아글리콘파우더를얻어실험에사용하였다 [19]. 항균활성측정에사용한균주와배지및배양조건사용균주 : 본실험에사용된균주는피부상재균인, Gram (+) 균주 3종, Gram ( ) 균주 2종으로총 5종이다. 혐기성 Gram (+) 으로여드름의원인균인 P. acnes (ATCC6919), 호기성 Gram (+) 으로 S. aureus (ATCC6538), B. subtilis (ATCC19659), 호기성 Gram ( ) 으로 E. coli (ATCC23736), P. aeruginosa (ATCC29336) 를한국미생물보존센터 (KCCM) 에서분양받아사용하였다. 배지및배양조건 : P. acnes의배양배지는 reinforced clostridial(rc) 배지 (Merck, Germany) 를사용하였으며 anaerobic jar에서 gaspack system (Merck Anaerocult Gaspack system, Germany) 을사용하였고밀봉상태로 37 o C에서 72시간동안혐기성배양하였다. 호기성 Gram (+) 균주인 S. aureus, B. subtilis와 Gram ( ) 균주인 E. coli, P. aeruginosa는 Mueller-Hinton 배지 (Merck, Germany) 를사용하였으며균을접종한후 37 o C 항온조에서 24시간배양하였다. Disc diffusion assay에의한항균활성측정각추출물의항균활성은각균주를대상으로 disc diffusion assay로측정하였다. 배양된균주는 1 10 7 CFU/ ml으로조절한후본실험에사용하였다. 평판배지에배양된각균주를멸균면봉을이용하여 100 μl씩도말하여준비하였고, 시료를 disc 당 0.63, 1.25, 2.50 mg이되도록 paper disc ( 지름 8 mm, Roshikaisha. Ltd., Tokyo, Japan) 에천천히흡수시킨뒤, 건조과정을거쳐용매를휘발시켰다. 각각의시료가흡수된 paper disc를도말한평판배지위에밀착시킨상태로배양한후 disc 주변에생성된저해환 (clear zone, mm) 을측정하여항균활성을비교하였다. 최소저해농도 (minimum inhibitory concentration, MIC) 측정 Paper disc 실험을통해서강력한항균력을나타낸참가시나무추출물에대한정확한최소저해농도 (minimum inhibitory concentration, MIC) 를조사하기위하여 agardilution method를사용하여수행되었다 [2]. 각각의균주는 1 10 7 CFU/ml로조절한후본실험에사용하였다. 참가시나무분획물과대조군으로써화장품에방부제로사용되는 methyl paraben을 DMSO를사용하여 2배희석법을이용하여농도를희석하였다. 그후에샘플을 1 ml씩함유한배지 10 ml를 petri dish에주입하였고, 시험균을평판배지위에 100 μl씩도말하여배양하였다. 육안으로관찰하였을때, 각각의균들이증식되지않는농도를 MIC로결정하였다. 참가시나무추출물함유크림의제조안정성평가에사용된참가시나무추출물은높은항산화및항균활성을나타낸에틸아세테이트분획을사용하였다 [12]. 참가시나무추출물은 stock solution (ethanol : 1,3- butylene glycol (1 : 4)) 용액에 25% 가되도록만들고처방에는이용액이 1.0% 가되도록가하여최종참가시나무추
Antibacterial Activity and Cream Stability of Quercus salicina Blume Extract 147 출물 0.25% 를함유 ( 고형분기준 ) 한크림을제조하여시험군으로사용하였다. 비교군 (control) 은참가시나무추출물없이동일양의 stock solution 만을 1.0% 첨가하여크림을제조하였다. 용액을태양광선하에서 4 주간보관하였다. 변색및변취관찰 : 여러조건하에있는참가시나무추출물함유크림및함유하지않은크림은 4 주간변색및변취여부를육안으로관찰하였다. 참가시나무추출물함유크림의안정성평가실험 2월-4월에거쳐 12주동안다양한온도 (4, 20, 37, 45 o C) 와태양광선하에서참가시나무추출물을함유한크림의물리 화학적특성을 (ph, 점도, 흡광도, 분리침전형성 ) 파악하였고변취및변색을관찰함으로써안정성을종합적으로평가하였다. 초기부터 8주까지는 2주간격, 8주에서 12주까지는 4주간격으로크림의점도와크림속참가시나무추출물의 ph, 흡광도를측정하였다. ph 측정법 : ph 측정은온도별저장및태양광선노출하에있는참가시나무추출물함유크림을매회 1g을취하여증류수로 15 ml 채운후 sonicator로 1시간동안추출시킨후 ph를측정하였다. 측정시온도는 25 ± 1 o C로유지하였다. 점도측정법 : 실험에사용된크림은유동성점성액체이므로일정한가속도로회전하는 spindle에움직이는크림의점성저항 torque 값을측정하여확인하였다 (Brookfield). 온도별로저장되어있는크림은항온조에서꺼낸뒤 3시간후에측정하였다. 본실험에서사용한 spindle의종류와회전수는 spindle D, 94 rpm이며각실험은 15초간격으로 5 번측정후평균과편차값을구하였다. 흡광도측정법 : 에탄올에용해시킨참가시나무추출물은 270 nm 에서최대흡수스펙트럼을나타낸다 (Fig. 2). 크림은매회 1g 을취하여에탄올 5 ml 을첨가하고 sonicator 로 1 시간동안추출하였다. 추출한크림속참가시나무추출물은여과후흡광도를측정하였다. 또한크림속에서와에탄올용액속에서의참가시나무추출물의흡광도변화를비교하기위해 0.25% 참가시나무추출물이함유된에탄올 통계처리모든실험은 3 회반복하였고, 통계분석은 5% 유의수준에서 student s t-test 를행하였다. 결과및고찰 참가시나무추출물의항균활성 Disc diffusion assay에의한항균활성 : 참가시나무추출물에대한항균활성은 S. aureus, B. subtilis, P. acnes 와같은 3종의 Gram (+) 세균과 E. coli, P. aeruginosa와같은 2종의 Gram ( ) 세균으로구성된 5종의피부상재균을 disc 확산법으로확인하였다 (Table 1). 참가시나무추출물의세가지분획은공통적으로 Gram ( ) 세균인 E. coli에서는항균활성이떨어지는반면에 P. aeruginosa균에서는가장높은항균활성을나타내었다. 그러나 Gram (+) 세균인 S. aureus, B. subtilis, P. acnes에서는각기다른항균활성을나타내었다. 참가시나무추출물의세가지분획중 50% 에탄올추출물은고농도인 1.25 mg/disc, 2.50 mg/disc 에서만높은항균활성을나타내었고아글리콘분획은 P. acnes 균에는항균활성이없지만 S. aureus, B. subtilis 균에서는낮은농도인 0.63 mg/disc에서도항균활성을보였다. 전체적으로에틸아세테이트분획이세가지균모두에서높은항균활성을나타내었으며이는화장품에방부제로사용되고있는 methyl paraben보다높은것을확인하였다. 최소저해농도 (MIC): Disc diffusion assay의결과를바탕으로참가시나무추출물의높은항균활성을나타내었던 Table 1. Antibacterial activities of Q. salicina Blume extract against various bacteria. Size of clear zone (diameter, mm) Control conc. (mg/disc) Fraction conc. (mg/disc) Bacterial strains Methyl paraben Extract Ethyl acetate Aglycone DMSO 0.63 1.25 2.5 0.63 1.25 2.5 0.63 1.25 2.5 0.63 1.25 2.5 Gram positive bacteria P. acnes - a - - 6-2.5 4 1 2 4 - - - S. aureus - - - 4-4.3 7.3 4.3 7 10.2 0.7 3.3 6.3 B. subtilius - - - 3 1.1 1.7 2.5 3.5 4.8 6 0.6 1.8 3.2 Gram negative bacteria E. coli - 2 6 10 - - - - - 4.3 - - 1 P. aeruginosa - 2 6.3 10 4.3 7 8.5 9 11.8 13.3 3.3 5.7 7.7 a NO inhibition.
148 Gu et al. Table 2. Minimum inhibitory concentration (MIC) of Q. salicina Blume extract against various bacteria. MIC (mg/ml) Strain Control DMSO Methyl paraben Extract Ethyl acetate Aglycone P. acne - a 2,500 2,500 2,500 - S. aureus - 1,250 12,500 1,250 1,250 B. subtilius - 2,500 6,250 1,250 625 P. aeruginosa - 2,500 78 312 312 a NO inhibition. Fig. 1. Changes of viscosity under various conditions for 12 weeks. (A) 4 o C, (B) 25 o C, (C) 37 o C, (D) 45 o C, (E) under sun. Gram (+) 세균인 P. acnes, S. aureus, B. subtilis 와 Gram ( ) 세균인 P. aeruginosa 총 4 가지균주를바탕으로최소저해농도를측정하였다 (Table 2). 비교군인 methyl paraben 의최소저해농도가 Gram (+) 인 S. aureus (1,250 μg/ml), P. acne (2,500 μg/ml), B. subtilis (2,500 μg/ml) 이었고 Gram ( ) 인 P. aeruginosa (2,500 μg/ml) 이었다.
Antibacterial Activity and Cream Stability of Quercus salicina Blume Extract 149 참가시나무에틸아세테이트분획은 Gram (+) 세균에서최소저해농도는 S. aureus (1,250 μg/ml), P. acne (2,500 μg/ml), B. subtilis (1,250 μg/ml) 이었고, 특히 Gram ( ) 세균인 P. aeruginosa (312 μg/ml) 에서비교군인 methyl paraben (2,500 μg/ml) 보다 8배높은최소저해농도를나타내었다. 실험결과참가시나무에틸아세테이트분획이높은항균활성을나타내었고 2,500 μg/ml이네가지균모두에대한최소저해농도임을확인하였다. 참가시나무추출물함유크림의안정성평가 ph 변화 : 참가시나무추출물의항균활성측정결과세가지분획물중에틸아세테이트분획이가장효능이좋은것을확인하였다. 따라서최소저해농도측정결과참가시나무에틸아세테이트분획물이 2,500 μg/ml 에서 4 가지균모두에대한항균활성을보였음으로 0.25% 참가시나무추출물을함유한크림을제조하여안정성을평가하였다. 제조한크림은 12 주동안다양한온도 (4, 20, 37, 45 o C) 조건과태양광아래에서 ph 변화를비교하였다 (Table 3). 대조군의초기 ph 는 7.06 였고 4, 20, 37, 45 o C, 태양광선아래에서 12 주후에각각 6.21, 6.69, 6.77, 5.97, 6.16 로변화했다. 실험군은초기 ph 7.06 에서 12 주후에 5.87, 6.25, 6.18, 5.8, 5.88 로변화했다. 실험결과공통적으로실험군과대조군모두 4, 45 o C, 태양광선아래에서 ph 가좀더감소한것을알수있었다. 그러나참가시나무를함유한실험군제형과대조군제형의 ph 변화는큰차가없는것으로보아참가시나무추출물이크림의 ph 변화에크게기여하지않는것으로판단된다. 또한, ph 변화는피부의산성도 (ph 4.5-6.5) 인약산성범위임으로피부에유해하지않는것으로판단된다 [13]. 점도변화 : 0.25% 참가시나무추출물함유크림과함유하지않은크림의점도를측정하였다 (Fig. 1). 0 주차에대조군크림제형과실험군크림제형은각각 5660 cp 와 5040 cp 로실험군제형에서더낮은값을나타냈지만큰차이는없었다. 12 주동안점도변화에서도실험군과대조군 이비슷한변화양상을나타내었다. 온도에따른점도변화를각각살펴보았을경우 45 o C 에서점도가크게감소한것을확인할수있었다. 이는열에너지에의해크림의점도가감소한것으로판단된다. 결론적으로대조군크림과참가시나무추출물함유크림둘다모든조건에서비슷한경향으로변화가일어났음으로참가시나무추출물은크림제형에서점도변화에는큰영향을끼치지않는것을확인할수있었다. 흡광도변화 : 태양광선하에서참가시나무에틸아세테이트분획의흡광도변화를확인하기위해 0.25% 참가시나무에틸아세테이트분획을에탄올에녹인후 4 주간보관하였다 (Fig. 2). 그결과, 최대흡수파장 (270 nm) 에서 0 주차에 0.924 로높은흡광도를나타내었지만 4 주후 0.301 로흡광도가 0 주에비해 67.42% (0.623) 감소하였다. 이는에탄올에있는참가시나무추출물이태양광선을직접적으로흡수하기때문에참가시나무추출물성분이파괴되어흡광도가크게감소한것으로보인다 [5]. 다음으로크림속참가시나무에틸아세테이트분획의흡광도변화를확인하였다. 0.25% 참가시나무추출물함유크림과함유하지않은크림을에탄올로추출한후 12 주동안흡광도를측정하였다 (Fig. 3). 12 주차에대조군과실험군의평균흡광도는 0.133, 0.199 로 0 주차 (0.317, 0.605) 에비해 61.51%, 67.05% 정도감소하였다. 0 주차는크림속참가시나무추출물로인해흡광도차이가큰것으로판단되며 12 주차에서는비슷한결과값을나타내었다. 태양광선하에서방치한크림속참가시나무추출물의흡광도와에탄올속참가시나무추출물의흡광도를비교하였다. 0 주차에각각의흡광도는 0.605, 0.924 으로크림속참가시나무추출물의흡광도가낮았으나 4 주후흡광도변화를비교한결과크림속참가시나무추출물 Table 3. ph Changes of cream stored at various temperatures and under the sun for 12 weeks. 0 week (ph) 12 week (changes of ph) Placebo cream Experimental cream 4 o C 7.06-0.85 ± 0.03-0.92 ± 0.03 25 o C 7.06-0.37 ± 0.07-0.53 ± 0.04 37 o C 7.06-0.29 ± 0.04 0.61 ± 0.05 45 o C 7.06-1.09 ± 0.04-0.99 ± 0.05 Under sun 7.06-0.90 ± 0.07-0.91 ± 0.03 Fig. 2. A change in absorbance of ethyl acetate fraction from Q. salicina Blume for 4 weeks.
150 Gu et al. 관찰되지않았으며크리밍이나응집과같은물리적인변화도관찰할수없었다. 결과적으로참가시나무에틸아세테이트분획은항산화및항균활성이높으며이를함유한크림은다양한온도와태양광선하에서안정함을확인하였다. Acknowledgments This study was supported by a grant of the Korean Health Technology R & D Project, Ministry of Health & Welfare, Republic of Korea (Grant No. HN10C0001). Fig. 3. Changes in absorbance of sample and control cream at 270 nm. Each value represents the mean ± S.D (n = 6). 의흡광도는 33.17%(0.404) 정도감소하였고이는에탄올용액속참가시나무추출물의흡광도변화 (67.42%) 보다 2 배정도적었다. 결론적으로크림속참가시나무추출물은태양광선으로부터보호되어흡광도의감소폭을줄였으며 12 주후참가시나무추출물함유크림은대조군과도큰차이가없는것으로보아참가시나무추출물이크림의흡광도변화에큰영향을주지않은것을알수있었다. 변색및변취 : 0.25% 참가시나무추출물함유크림과대조군크림을비교했을경우, 37, 45 o C 의고온에서참가시나무추출물함유크림의색이약간진해지는현상이관찰되었고냄새에어떠한큰변화는없었다. 크리밍, 응집, 층분리와같은이상현상도관찰되지않았다. 요 약 본연구에서는참가시나무추출물의항균활성을측정후참가시나무추출물함유크림을제조하여안정성을평가하였다. 항균활성은피부상재균인 Gram (+) 균 S. aureus, B. subtilis, P. acnes와 Gram ( ) 균 E. coli, P. aeruginosa로실험하였다. 참가시나무추출물의세가지분획은공통적으로 Gram ( ) 세균인 E. coli에서는항균활성이낮으며 Gram ( ) 균 P. aeruginosa에서모두높은항균활성을나타내었다. 특히참가시나무에틸아세테이트분획은 S. aureus, B. subtilis, P. acnes, P. aeruginosa균에서 1,200 μg/ml, 2,500 μg/ml, 1,200 μg/ml, 312 μg/ml으로낮은최소저해농도를가졌다. 따라서참가시나무에틸아세테이트분획 0.25% 함유한크림을제조한후크림안정성을평가하였다. 크림은 4개의서로다른온도 (4, 20, 37, 45 o C) 와태양광선하에서 12주동안보관한후점도, ph 및흡광도를측정하였다. 추출물함유크림과대조군크림의점도와흡광도는위에언급된여러가지온도하에서유의적인차이를나타내지는않았다. ph는피부의약산성도범위 (ph 4.5-6.5) 값을가졌다. 12주동안크림의변색이나변취는 References 1. Allen RG, Tresini M. 2000. Oxidative stress and gene regulation. Free Radic. Biol. Med. 28: 463-499. 2. Chae KY, Kim JE, Park SN. 2012. Antibacterial activity of Hippophae rhamnoides leaf extract and the stability of a cream with the extract. Korean J. Microbiol. Biotechnol. 40: 250-260. 3. Han SB, Gu HA, Kim SJ, Kim HJ, Kwon SS, Kim HS, et al. 2013. Comparative study on antioxidative activity of Glycyrrhiza uralensis and glycyrrhiza glabra extracts by country of origin J. Soc. Cosmet. Scientists Korea 39: 1-8. 4. Han SM, Lee KG, Yeo JH, Kim WT, Park KK. 2009. Antimicrobial property of honeybee (Apis mellifera L.) venom against Propionibacterium acnes and aerobic skin flora. Korean J. Pharmacogn. 40: 173-177. 5. Jeon SM, Ahn JY, Park SN. 2007. A study on the stability test for the cream containing Suaeda asparagoides extract. J. Soc. Cosmet. Scientists Korea 33: 231-238. 6. Kim HJ. 2011. Antimicrobial effects of extracts of Teraxacum officinale H. on acne strains. MS. Thesis. Kyonggi University. Korea. 7. Kim JI, Kim HH, Kin SU, Lee KT, Ham IH, Whang WK. 2008. Antioxidative compounds from Quercus salicina Blume Stem, Arch. Pharm. Res. 31: 274-278. 8. Kim JH, Kim MJ, Choi SK, Bae SH, An SK, Yoon YM. 2011. Antioxidant and antimicrobial effects of lemon and eucalyptus essential oils against skin floras. J. Soc. Cosmet. Scientists Korea 37: 303-308. 9. Kim SY, Won DH, Lim MS, Park SN. 2010. Cellular protective effect and component analysis of Euphorbia humifusa extracts. Korean J. Pharmacogn. 41: 264-269. 10. Kohen R. 1999. Skin antioxidants: their role in aging and in oxidative stress - new approaches for their evaluation. Biomed. Pharmacother. 53: 181-192. 11. Lee, HJ, Lim GN, Park MA, Park SN. 2011. Antibacterial and antioxidative activity of Lespedeza cuneata G. Don extracts. Korean J. Microbiol. Biotechnol. 39: 63-69. 12. Lee HJ, Park SN. 2011. Antioxidative effect and active component analysis of Quercus salicina Blume extracts J. Soc. Cosmet. Scientists Korea 37: 143-152. 13. Moon SJ. 2005. Influence of the improvement on acne skin
Antibacterial Activity and Cream Stability of Quercus salicina Blume Extract 151 with the essential oils, clinical demonstration with lavender, teatree, chamomile roman oil on treatment of skin. MS Thesis, Choong Ang University, Seoul, p 43. 14. Jung MS, Kang KA, Zhang R, Chae SW, Yoo BS, Yang YT, et al. 2006. Protective activity against ionizing radiation of antioxidative plants indigenous to Korea. Nat. Prod. Sci. 12: 1-7. 15. Sokmen M, Angelova M, Krumova E, Pashova S, Ivancheva S, et al. 2005. In vitro antioxidant activity of polyphenol extracts with antiviral properties from Geranium sanguineum L. Life Sci. 76: 2981-2993. 16. Park SN. 1997. Skin aging and antioxidant. J. Soc. Cosmet. Scientists Korea 23: 75-132. 17. Park SN. 1999. Effects of natural products on skin cells action and suppression of reactive oxygen species. J. Soc. Cosmet. Scientists Korea 25: 77-127. 18. Won DH, Gu HA, Kim HJ, Han SB, Park JH, Park SN. 2013. Antibacterial and antioxidative activities of Epimedium koreanum Nakai extracts. Korean J. Microbiol. Biotechnol. 41: 284-291. 19. Yang HG, Kim HJ, Kim HS, Park SN. 2012. Antibacterial and antioxidative activities of Artemisia princeps Pampanini extracts. Korean J. Microbiol. Biotechnol. 40: 250-260.