04.fm

pissn 9-53 / eissn 465-93 J. Food Hyg. Saf. Vol. 3, No. 4, pp. 67~74 (07) https://doi.org/0.303/jfhs.07.3.4.67 Journal of Food Hygiene and Safety Available online at http://www.foodhygiene.or.kr 식 약공용농산물의아플라톡신오염실태조사 김성단 * 김애경 이현경 이새람 이희진 류회진 이정미 유인실 정권 서울시보건환경연구원 A Monitoring of Aflatoxins in Commercial Herbs for Food and Medicine Sung-dan Kim*, Ae-kyung Kim, Hyun-kyung Lee, Sae-ram Lee, Hee-jin Lee, Hoe-jin Ryu, Jung-mi Lee, In-sil Yu, and Kweon Jung Seoul Metropolitan Government Research Institute of Public Health and Environment, Seoul, Korea (Received May, 07/Revised May 8, 07/Accepted June 0, 07) ABSTRACT - This paper deals with the natural occurrence of total aflatoxins (B, and G ) in commercial herbs for food and medicine. To monitor aflatoxins in commercial herbs for food and medicine not included in the specifications of Food Code, a total of 6 samples of 6 different herbs (Bombycis Corpuslycyrrhizae Radix et Rhizoma, Menthae Herba, Nelumbinis Semen, Polygalae Radix, Zizyphi Semen) were collected from Yangnyeong market in Seoul, Korea. The samples were treated by the immunoaffinity column clean-up method and quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) with on-line post column photochemical derivatization (PHRED) and fluorescence detection (FLD). The analytical method for aflatoxins was validated by accuracy, precision and detection limits. The method showed recovery values in the 86.9~4.0% range and the values of percent coefficient of variaton (CV%) in the 0.9~9.8% range. The limits of detection (LOD) and quantitation (LOQ) in herb were ranged from 0.00 to 0.363 µg/kg and from 0.059 to.0 µg/kg, respectively. Of 6 samples analyzed, 6 semens (the original form of Nelumbinis Semen and Zizyphi Semen, the powder of Nelumbinis Semen and Zizyphi Semen) were aflatoxin positive. Aflatoxins B or B were detected in all positive samples, and the presence of aflatoxins G and G were not detected. The amount of total aflatoxins (B, and G ) in the powder and original form of Nelumbinis Semen and Zizyphi Semen were observed around ND~.8 µg/kg, which is not regulated presently in Korea. The 56 samples presented levels below the limits of detection and quantitation. Key words : Herbs, Aflatoxins, HPLC, PHRED 미국의시장조사전문업체인 Global Industry Analysts (GIA), Inc. 의 0년보고서에따르면, 세계보완대체의학시장은 05년에는,4억달러이상으로전망하여 00 년 853억달러에비해 33.8% 증가하는것으로예측하였다. 국내한의약제품산업시장현황 ( 생산액기준 ) 또한 008년 조 7,4억원에서 03년 3조,8억원규모로국내한방제품산업시장의크기가급격히증가하고있다 ). 한편한약재의종류는모두 60종 ( 국내공정서 : 대한약전 65품목, 대한약전외한약 ( 생약 ) 규격집 437품목 ) 이상이있다. 국산한약재생산현황은약용과식품용등으로혼재되어사용되는약용작물의특성상현재농림축산식품 *Correspondence to: Sung-dan Kim, Seoul Metropolitan Government Research Institute of Public Health and Environment, 5, Yangnyeongjungang-ro, Dongdaemun-gu, Seoul 0569, Korea Tel:8--968-5098, Fax:8--964-874 E-mail: joyfulksd@seoul.go.kr 부의약용작물생산실적을근거로하여간접적으로파악하게된다. 약용작물이모두한약재로활용된다고할수는없으며식품으로분류되는경우도많은데, 이것은 03 년한약재 ( 약용작물 ) 의생산액이한약재규격품생산액,84억원에비해 9.배많은 조 6,864억원이었던자료로도확인할수있다. -) 약사법 ( 법률제4084호, 06.3..) 제47조의의약품등의판매질서에따르면의약품의품목허가를받은자, 수입자또는의약품도매상은의약품의소매행위를할수없도록규정하고있다. 따라서소비자가한약재를구입 복용하는경로는한의원, 한방병원, 한약방, 한약국등한방의료기관을통해처방을받아규격품한약을구입하거나시장이나건강원 / 탕제원등을통해비규격품한약을구입하는경우, 그외건강기능성식품이나, 차 / 음료수 / 주류, 일반식품의형태로한약재를복용하게된다 3). 그러므로소비자가한의원, 한방병원, 한약방, 한약국등 67

68 Sung-dan Kim et al. 에서구입하게되는규격품한약재는약사법에의한대한약전및대한약전외한약 ( 생약 ) 규격집에따라품질관리되고있으며, 시장이나건강원 / 탕제원등을통해구입하게되는비규격품한약재는식 약공용농산물로서식품위생법에의한식품공전에따라품질관리되고있다. 한편우리나라에서유통되고있는규격품한약재는 008 년 생약의곰팡이독소허용기준및시험방법 에따라감초등 9품목에대하여곰팡이독소중아플라톡신 B 을 0 μg/kg 이하로기준을신설한이후, 009년 생약등의잔류 오염물질기준및시험방법 에의해괄루인등 0 품목을추가하였다. 이후 0년현재곰팡이독소적용대상품목이감초등 9품목이던것을백강잠을추가하여총 0품목에대해검사를실시하도록함과아울러, 아플라톡신 B 0 μg/kg 이하로관리하던곰팡이독소기준을아플라톡신 B 외에총아플라톡신 (B 의합 ) 5 μg/kg 이하의기준을추가하여검사를실시하도록하였다. 그러나소비자가시장이나건강원 / 탕제원등에서구입하게되는비규격품한약재인식 약공용농산물은식품위생법에의한 식품의기준및규격 에의해설정된총아플라톡신 (B 의합 ) 과푸모니신등총 7 종의곰팡이독소기준에서, 식 약공용농산물 6종 ( 식품의약품안전처고시제06-43호, 별표 및 ) 중육두구만총아플라톡신 (B 의합 ) 의기준이설 정되어있다. 즉동일한품목이라도사용목적에따라관련법령이달라각기다른품질규격, 유해물질관리기준, 수입검사기준등의품질및안전관리체계가적용되고있어한약재공급자들뿐아니라수요자인소비자의혼란을가중시키고있다. 또한엄격한약사법의적용을받는한약재와비교하여농산물로분리 관리되는식 약공용농산물이의약품용으로둔갑되어유통되는사례가발생하고있어한약재전반의안전에대한소비자의불신과우려를높이는결과를초래하고있다 4). 자연계에존재하는곰팡이이차대사체산물중인체및동물에유해한작용을하는저분자유기화합물을곰팡이독소 (mycotoxin) 라하며현재 350여종의진균류에서 400 종류이상의곰팡이독소가동정되고있으며, 실제,000 개이상의독성대사체가알려지고있다 5). 이중식품및그원료에서문제가되는것은곰팡이에따라크게 Aspergillus속 (aflatoxins, cyclopiazonic acid, ochratoxin, sterigmatocystin 생성 ), Penicillium속 (ochratoxin, patulin 생성 ) 및 Fusarium속 (deoxynivalenol, fumonisins, zearalenone 생성 ) 곰팡이독소등으로구분할수있다 6). 이가운데 aflatoxin 은 Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus, Aspergillus nominus와같은곰팡이들이그들의제 차대사산물로생성하는독성물질을말하며 Aspergillus의 A와 flavus의 FLA, 독이라는뜻의 toxin을조합하여만들어진단어이다. 7) Aflatoxin은주로고온 (5~30 C), 다습 (80~85%) 한열대 o 나아열대지방에서잘생성되며수확에서건조까지저장기간이길고, 환기가불충분할수록잘생성된다. 특히, 농산물중에서는쌀, 보리, 밀등의곡류와땅콩, 피스타치오, 호두와같은견과류, 옥수수등과같이탄수화물함량이높은기질에서잘생성되는것으로알려져있다 8-9). Aflatoxin은 aflatoxin B, M, M 등이대표적이고현재까지약 0종의이성체가알려져있으며이들은무색에서연노랑색의결정체로자외선하에서나타내는형광의색에따라 B (blue) 군 (green) 군으로구분된다 0-). 그중에서도가장많이발현되는아플라톡신 B 은가장강력한독성을나타내며, 상대적인독성은 B ) >M > G >M >B >G 의순이다. 아플라톡신의독성은동물 3) 실험결과강한간장장애, 장관출혈, 신장출혈등을일으킨다. 세계보건기구 (WHO; World Health Organization) 4) 에따르면아플라톡신의일일섭취량과간암발생자수와의역학조사를통해높은상관관계를확인할수있었고, 또한간암을비롯해간세포암종 (hepatocellularcarcinoma), 급성간염 (acutehepatitis), 그리고라이증후군 (Reye's syndrome) 등의질병과도연관이있는것으로알려져있다. 5) 최근국내에서한약재의아플라톡신분석법및모니터링에관한연구가활발히진행되고있는가운데, 소비 6-0) 자들의요구에의해분말등다양한형태로유통되고있는식 약공용농산물에대한연구는제한적으로진행되고있다. 그러나농산물로취급되는약용작물인식 약공용농산물은육두구를제외하고는곰팡이독소에대한 식품의기준및규격 이없으며, 고온 다습, 환기불량등의열악한보관환경에서분말등다양한형태로장기간저장 유통될때곰팡이독소에대해더욱취약할수있어소비자들의우려는더욱높아지고있다. 따라서본연구에서는유통중인원형및분말형태의식 약공용농산물에대해아플라톡신의오염도를조사함으로써, 소비자들이유통식 약공용농산물선택시고려할수있는자료를제공하고안전한유통체계를구축하는데기여하고자한다. Materials and Methods 재료 06년 6~월서울약령시에서원형또는분말형태로유통판매되는식 약공용농산물총 6건을구입하였다. Table 과같이분석에사용된식 약공용농산물은총아플라톡신허용기준이설정된한약재 (0품목) 와식 약공용농산물 (6품목) 에동시에포함된품목으로감초 (Glycyrrhizae Radix et Rhizoma) 0건, 박하 (Menthae Herba) 건, 백강잠 (Bombycis Corpus) 7건, 산조인 (Zizyphi Semen)

A Monitoring of Aflatoxins in Commercial Herbs for Food and Medicine 69 Table. List of commercial herbs for food and medicine for the monitoring of aflatoxins Table. Operating conditions of HPLC-FLD for the analysis of total aflatoxins Classification by used part Main material Original form (N) Powder (N) Radix Polygalae Radix 0 Glycyrrhizae Radix Radix et Rhizoma 4 6 et Rhizoma Herba Menthae Herba 7 5 Semen Nelumbinis Semen Zizyphi Semen Animal Bombycis Corpus 3 4 Total 7 5 6 3 38 4 6 Parameter Instrument Detector Column Mobile phase (v/v/v) Column temperature Flow rate Injection volume Value Waters 695 Separations Module Waters 475 Multi λ Florescence Detector (Ex: 365 nm, Em: 435 nm) SunFir C8 (3.5 μm, 4.6 mm 50 mm) Methanol: Acetonitrile: Water = 7.3:8.:54.5 30 o C ml/min 0 μl 8 건, 연자육 (Nelumbinis Semen) 3 건, 원지 (Polygalae Radix) 건을대상으로아플라톡신오염도를조사하였다. 시약및기구아플라톡신분석을위한표준품은아플라톡신 Mix kit- M (B ) (Supelcoellefonte, PA, USA) 을사용 하였으며, 추출및기기분석의이동상조제에사용한 methanol과 acetonitrile은 HPLC grade (Merck, Darmstadt, Germany) 를사용하였다. 시료의여과를위해 Whatman No. 4, 유리섬유여과지 (Wathman GF/A) (WathmanTM, Maidtone, Kent, UK) 를사용하였고, 정제용칼럼으로는 Afla Test WB (Vicam, Milford, MA, USA) 면역친화성칼럼 (Immunoaffinity column) 을사용하였다. 시료는분쇄기 (DA338, DAESUNG ARTLONyeonggi, Korea) 를사용하여균질화하였으며, Sonicator (CPX8800Hranson, Danbury, CO, USA) 를이용하여용매추출하였다. 시료의전처리및기기분석균질화한시료 5.0 g을정밀하게달아희석시킨 70% 메탄올 00 ml를넣고 30분간초음파추출한다음여과한다. 여액에 70% 메탄올을넣어정확하게 00 ml로하고, 다시이액 0 ml를정확하게취하여물로 80 ml가되게희석하여유리섬유여과지로여과하여추출액으로한다. 추출액 40 ml를정확하게취하여아플라톡신용면역친화성 컬럼을통과시키고, 물 0 ml를 3mL/ 분의유속으로 회통과시켜나온유출액은버린다. 면역친화성칼럼에 5-0 초간약한진공을통과시켜건조시켜, 0.5 ml의메탄올을넣어중력에의해용출액이나오도록한다. 분간방치한다음유속은 5mL/ 분을넘지않도록하면서, 0.5 ml의메탄올을 회통과시켜용출액을모두합하여 ml가되게하여시험용액으로사용하였다 ). 전처리된시험용액중아플라톡신 (B ) 은 HPLC-FLD (High Performance Liquid Chromatography- Fluorescence Detector) 를이용하여정성및정량분석하였다. 기기분석조건은 Table 와같이 Waters (Milford, MA, USA) 의 Waters 695 Separations Module과 Waters 475 Multi λ Florescence Detector를연결한 HPLC System에후칼럼유도체화장치인광화학반응장치 PHRED (AURA industries, New York, NY, USA) 를연결하여사용하였다. 검출한계및정량한계검량선은아플라톡신 Mix kit-m (B ) 를혼합표준원액으로하여메탄올로희석하여 B.5~40 μg/l, B 0.375~ μg/l.~38.4 μg/l 0.363~.6 μg/l로조제한후, HPLC-FLD로아플라톡신 (B ) 을측 정하여검량선을작성하였다. 검출한계 (Limit of Detection, LOD) 와정량한계 (Limit of Quantitation, LOQ) 는반응의표준편차 (the standard deviation of the response, σ) 와검량선기울기 (the slope of the calibration curve, S) 에근거하여 ICH Q (R) (International Conference on Harmonization of Technical Requirements for registration of Pharmaceuticals for Human Use, Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology) 방법에따라구하였 ) 다. 이때반응의표준편차 (σ) 는아플라톡신 (B ) 이검출되지않은연자육 (Nelumbinis Semen) 분말을공시료 (blank sample) 로사용하여분석시료와동일하게전처리하고 HPLC-FLD를이용하여측정한값을이용하였다. LOD = 3.3(σ/S) () LOQ = 0(σ/S) () 정확도및정밀도시험법을검증하기위하여아플라톡신 (B ) 이 검출되지않은연자육에최종농도가 B.4~9.4 μg/l 0.7~5.8 μg/l.5~9.6 μg/l 0.9~6.8 μg/l가되도록

70 Sung-dan Kim et al. Table 3. LOD, LOQ, recovery, and precision for the aflatoxins analyzed Aflatoxins B B G Spike level (μg/l) Recovery (%) Precision (CV%).4 0.8 7.0 4.9 00.4.9 9.7 95. 3.9 9.4 99. 9.8 0.7 86.9 4.0.5 90.4..9 98.5 8. 5.8 05.6 4.0.5 95..5 4.9 00.6. 9.8 97.8 4.6 9.6 98.5 9.5 0.9 4.0 9.3.7 3.0 6. G 3.4 98.6 0.9 6.8 03.0 5.0 ) LOD : Limit of Detection ) LOQ : Limit of Qantitation 아플라톡신 (B ) 혼합표준용액을첨가하여분 석시료와동일하게전처리하고 HPLC-FLD를이용하여측정한뒤회수율및변동계수 (Coefficient of Variation, %) 를구하여분석법을검증하고분석결과의신뢰성을확인한결과는 Table 3과같다. 수분함량식품공전의제 9. 일반시험법. 식품성분시험법. 3) 일반성분시험법.. 수분... 건조감량법가. 상압가열건조법에따라수분함량을측정하였다. Results and Discussion LOD ) (μg/kg) LOQ ) (μg/kg) 0.086 0.6 0.00 0.059 0.363.0 0.6 0.38 검출한계및정량한계아플라톡신 (B ) 분석을위하여아플라톡신 Mix kit-m (B ) 을 methanol로희석하여조제한 후 HPLC-FLD로아플라톡신 (B ) 을 5회반복 측정하여검량선을작성한결과, 아플라톡신 B 각각 0.998 이상의정의상관관계 (r ) 를보였다. Table 3과 같이아플라톡신의검출한계 (LOD) 는 B 0.086 μg/kg 0.00 μg/kg 0.363 g/kg 0.6 μg/kg이었고, 정량한계 (LOQ) 는 B 0.6 μg/kg 0.059 μg/kg.0 g/kg 0.38 μg/kg로, Park 등의아플라톡신 B 0) 의검출 한계및정량한계결과와유사하였으며, 아플라톡신 G 은 0배가까이차이가있었다. 이러한차이는 Park 등 0) 의 아플라톡신의검출한계및정량한계는 signal/noise 비율을이용하였으나, 본연구에서는반응의표준편차 (σ) 와검량선기울기 (S) 에근거한방법에따라아플라톡신이검출 ) 되지않은연자육분말을공시료로하여반응의표준편차를사용하여매트릭스효과 (matrix effect) 가나타났기때문이라고생각한다. 정확도및정밀도실험방법의유효성을검증하기위하여회수율에따른정확성및정밀도를살펴본결과는 Table 3과같다. 정확도를확인하기위하여아플라톡신 (B ) 이검출되 지않은연자육에아플라톡신표준품을 methanol로희석하여혼합된아플라톡신 (B ) 표준용액을첨가 하여분석시료와동일하게전처리하고 HPLC-FLD를이용하여측정하였으며, 각각의실험은 3회반복하여실시하였다. 그결과회수율은각각의첨가농도에서 B 95.~ 0.8% 86.9~05.6% 95.~00.6% 98.6~4.0% 로높은회수율을나타내었다. 또한정밀도를파악하기위하여변동계수 (Coefficient of Variation, %) 를구한결과, 각각의첨가농도에서 B.9~9.8%.~8.%.~ 9.5% 0.9~9.3% 로본실험방법은식 약공용농산물의아플라톡신 (B ) 의분석에적합한것으로나 타났다. 이와같은결과는 B 의경우 Kim 등의 9) 결과와비슷한수준이었으며 의회수율이낮았던 Kim 등 9) 의결과와는달리본연구결과에서는아플라톡신 B, B 0) 가비슷한수준으로다소높게나와 Park 등 의결과와같은양상을나타내었다. 아플라톡신잔류량 06년 6~월서울약령시에서원형또는분말형태로유통판매되는식 약공용농산물총 6건을구입하여, 후칼럼유도체화장치인광화학반응장치를연결한후 HPLC-FLD를이용하여아플라톡신 (B ) 을정성 및정량분석하여아플라톡신오염도를조사한결과는 Table 4와같다. 식 약공용농산물중사용부위에따른아플라톡신오염의특성을살펴본결과, 식물의종자 (Semen) 인경우만아플라톡신이검출되었고, 식물의뿌리 (Radix), 뿌리및뿌리줄기 (Radix et Rhizoma), 잎 (Herba) 의경우와동물성인백강잠 (Bombycis Corpus) 은아플라톡신이검출되지않았다. 종자 (Semen) 는전체 건을대상으로아플라톡신을검사한결과 6건에서아플라톡신이검출되어 8.6% 의검출률을나타내었다. 종자 (Semen) 중식 약공용농산물원형은전체 건을대상으로아플라톡신을검사한결과 3 건에서아플라톡신이검출되었으며, 원형을분말화하여판매되고있는식 약공용농산물의경우는 9건을대상으로아플라톡신을검사한결과 3건에서아플라톡신이검출

A Monitoring of Aflatoxins in Commercial Herbs for Food and Medicine 7 Table 4. Incidence and level of aflatoxin contamination in commercial herbs for food and medicine Positive samples/total Concentration Range (μg/kg) samples (N ) ) Original form Powder Classification by used part Main material Original form Powder AFB ) AFB 3) total aflatoxins (B and G ) AFB AFB Total aflatoxins (B and G ) Radix Polygalae Radix 0/ 0/0 ND 4) ND ND ND ND ND Radix et Rhizoma Glycyrrhizae Radix et Rhizoma 0/4 0/6 ND ND ND ND ND ND Herba Menthae Herba 0/7 0/5 ND ND ND ND ND ND Semen Nelumbinis Semen /7 /6 Zizyphi Semen /5 /3.869 6.6.786.570 4.655 9.8.3 9.345 ND.45.3.797 Animal Bombycis Corpus 0/3 0/4 ND ND ND ND ND ND Total 3/38 3/4 ) N : Number of samples ) AFB = Aflatoxin B 3) AFB = Aflatoxin B 4) ND = Not Detected..869.786 4.655 9.345.45.797 되었다. 이와같은결과는유통생약의아플라톡신모니터링을실시한결과모두종자생약에서아플라톡신이검출된 Park 등의결과와일치하였다. 0) 식 약공용농산물의품목별아플라톡신검출건수를살펴본결과, 원지 (Polygalae Radix), 감초 (Glycyrrhizae Radix et Rhizoma), 박하 (Menthae Herba), 연자육, 산조인 (Zizyphi Semen), 백강잠 (Bombycis Corpus) 중연자육, 산조인에서만아플라톡신이검출되었다. 연자육은한약재규격품의경우연꽃 Nelumbo nucifera Gaertner ( 수련과 Nymphaeaceae) 의잘익은씨로서그대로또는연심을제거한것을약으로사용하고, 산조인은산조 ( 酸棗 ) Zizyphus jujuba Miller var. spinosa Hu ex H. F. Chou ( 갈매나무과 Rhamnaceae) 의잘익은씨를약으로사용한다. 연자육중원형그대로판매되는경우는 7건을검사한결과 건에서아플라톡신 B 가검출되었고, 분말로판매되는 6건을 검사한결과 건에서아플라톡신 B 이검출되었다. 산조인중원형은 5건을검사한결과 건에서아플라톡신 B, B 가검출되었으며, 분말은 3건을검사한결과 건에서아플라톡신 B 가검출되었다. 아플라톡신은여러곰팡이 독소중에서발암성이가장큰것으로알려져있으며, 아플라톡신동족체들중아플라톡신 B 이가장큰독성을갖고있는것으로보고되고있다. 동물실험및역학조사의결과를토대로하여 WHO산하국제암연구기구 (IARC; International Agency for Research on Cancer) 의분류에의해 AFB 은 Group ( 인체발암물질 ) 으로정하고있다. 아 4) 플라톡신 B 에의한발암기전은확실치는않지만생체내의간장 cytochrome p-450 효소에의해대사되어반응 성이높은 AFB -8,9-epoxide로변형된후, 염색체내디옥시리보핵산과비가역적으로공유결합을하는 AFB -DNA adducts를형성하는데, 이들이돌연변이유발성및발암성을지닌것으로알려져있다 3). 아플라톡신 (B ) 중식 약공용농산물에서 검출된아플라톡신의종류를살펴본결과, 아플라톡신에오염된연자육및산조인에서는아플라톡신 (B ) 중아플라톡신 B 만검출되었다. 아플라톡신이검출된 연자육 4건중원형 건에서만 B 가동시에검출되었고, 원형 건및분말 건모두는아플라톡신 B 만검출되었다. 아플라톡신에오염된산조인 건즉, 원형 건및분말 건에서는아플라톡신 B 동시에검출되었다. 이 와같은결과는산조인및연자육에서아플라톡신 B, G 의검출률이각각 45.5~48.8%, 4.4~3.8%,.7~ 9.3%, 7.3~3.7% 였다는 Lee 등의결과와는다소차 8) 이가있었다. 아플라톡신이검출된식 약공용농산물중연자육과산조인은아플라톡신 (B ) 에대한기준이설정 되어있지않다. 식 약공용농산물은식품의약품안전처고시 ( 제06-43호, 06.5.3.) 에따라 [ 별표] 식품에사용할수있는원료 의목록과 [ 별표] 식품에제한적으로사용할수있는원료 의목록에수록되어있다. 식물성은납, 비소등개별중금속허용기준이 대한민국약전 ( 식품의약품안전처고시 ) 또는 대한민국약전외한약 ( 생약 ) 규격집 ( 식품의약품안전처고시 ) 에따르게되어있으며, 동물성의경우는 대한민국약전외한약( 생약 ) 규격집 ( 식품의약품안전처고시 ) 에적합하도록규정하고있

7 Sung-dan Kim et al. 다. 따라서식 약공용농산물중식물성원료의경우는곰팡이독소기준중총아플라톡신 (B 의합 ) 에해당하는것은육두구만기준을 5.0 μg/kg 이하 ( 단, B 은 0.0 이하이어야한다 ) 로관리하고있는상황이다. 그러나한약재의경우현재총 0품목에대한곰팡이독소기준을총아플라톡신 ( 아플라톡신 B 의합 ) 5.0 μg/kg 이하 ( 단 은 0.0 μg/kg 이하 ) 로설정하여관리하고있다. 아플라톡신이검출된식 약공용농산물중연자육의아플라톡신검출량을살펴보면, 연자육원형은총아플라톡신 (B 의합 ) 이 ND~4.655 μg/kg, 아플라톡 신 B 이 ND~.869 μg/kg 검출되었고, 분말형태로유통되는연자육은총아플라톡신 (B 의합 ) 이 ND~.3 μg/kg, 아플라톡신 B 이 ND~.3 μg/kg 검출되었다. 현재연자육에대한총아플라톡신에대한설정된기준이없어유통차단을할수없지만, 육두구와같은수준의곰팡이독소기준 ( 총아플라톡신 (B 의합 ) 5.0 μg/kg 이하 ( 단 은 0.0 이하이어야한다 )) 로설정된다면연자육원형 건에서아플라톡신 B 의검출량 (.869 μg/kg) 이기준을초과하므로유통을차단할필요가있다. 또한산조인의아플라톡신검출량은원형은총아플라톡신 (B 의합 ) 이 ND~9.8 μg/kg, 아플라톡신 B 이 ND~6.6 μg/kg 검출되었고, 분말형태의산조인은총아플라톡신 (B 의합 ) 이 ND~.797 μg/kg, 아플라톡신 B 이 ND~9.345 μg/kg 검출되었다. 분말형태의산조인가루 건에서검출된아플라톡신의양또한곰팡이독소기준이설정된다면총아플라톡신 (B, G 의합 ) 과아플라톡신 B 의기준을초과하게되므로유통차단이필요한수준이었다. 또한종자 (Semen) 인연자육및산조인의생산국가를살펴본결과는 Fig. 과같이한국, 중국, 미얀마그리고베트남이었으며, 그중아플라톡신이검출된연자육및산조인의생산국가는미얀마와베트남이었다. 베트남에서수입된종자 0건중 4건에서아플라톡신이검출되었으며, 베트남에서수입된종자는모두연자육이었다. 또한미얀마에서수입된종자 (Semen) 7건중 건에서아플라톡신이검출되었으며, 미얀마에서수입된종자는모두산조인이었다. 그러므로최근건강에대한관심이높아져생약의수요가증가함에따라값이싸고비교적규제와감시가용이한수입생약이국내유통의 70~80% 를차지하고있으며 0), 수입되는생약의생산국가또한다양해지고있는시점에서수입생약에대한품질관리를강화하여야할것으로생각한다. 따라서 대한민국약전 ( 식품의약품안전처고시 ) 또는 대한민국약전외한약( 생약 ) 규격집 ( 식품의약품안전처고시 ) 에곰팡이독소에대한기준이설정되어있는한약재 0 Fig.. Comparison of positive samples according to the place of origin in Semens. Fig.. Correlation of aflatoxin contamination with water content of commercial herbs for food and medicine. 품목과동일한식 약공용농산물도곰팡이독소기준을설정하거나, 식 약공용농산물은식품의약품안전처고시 ( 제06-43호, 06.5.3.) 에따라 [ 별표] 식품에사용할수있는원료 의목록과 [ 별표] 식품에제한적으로사용할수있는원료 의목록에서 식물성은납, 비소등개별중금속허용기준이 대한민국약전 ( 식품의약품안전처고시 ) 또는 대한민국약전외한약( 생약 ) 규격집 ( 식품의약품안전처고시 ) 에따른다 라는규정에중금속뿐만아니라곰팡이독소또한포함하는것이필요하다고생각한다. 그결과안전한식 약공용농산물을유통시켜질병예방및치료를목적으로식 약공용농산물을섭취하는소비자를보호할수있을것으로생각한다. 수분함량과아플라톡신잔류량과의상관관계상압가열건조법에따라식 약공용농산물 6건의수분함량을측정한결과평균 6.7%(0.3~.05%) 이었다. Fig. 와같이식 약공용농산물의수분함량과아플라톡신잔류량과의상관관계 (r ) 를측정한결과 0.0085로상관성 이없는것으로나타났다. Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus 및 Aspergillus nominus에의해생성되는아플라톡신은농산물의생육기

A Monitoring of Aflatoxins in Commercial Herbs for Food and Medicine 73 간뿐만아니라저장 유통중에도습도및온도가높은환경하에서장기간저장되었을때더욱잘생성되는것으로알려져있는데, 특히수분 6% 이상, 상대습도 80-85% 이상, 온도 5-35 C인고온다습한지역에서자라기 o 에최적의조건을갖추고있다 8,5-7). 한편최근연구에따르면열대및아열대지방을중심으로생산되는일부생약에서아플라톡신오염사례가보고된바있어건조와저장이불량하면아플라톡신에더욱노출이잘된다는것을시사한바와같이약용작물에서의일반적인독소 8-9) 오염의원인으로수확후의비위생적인관리가주원인으로제시되고있다. 본연구에서도수분함량과아플라톡신잔류량과의상관성이없는것으로나타난점으로볼때식 약공용농산물의비위생적인관리가습도보다는아플라톡신잔류량에더많은영향을끼치는것으로추정할수있었다. 따라서고온다습한지역에서의세척, 건조, 포장의 GAP (Good Agricultural Practice) 준수가중점관리지점의관리에서매우중요하므로, 질병치료및예방을위한장기간 30-3) 섭취할가능성이있는식 약공용농산물또한품질및유통관리방법을보완하여야할것이다. 국문요약 06년 6~월서울약령시에서원형또는분말형태로유통판매되는식 약공용농산물총 6건을구입하여, 후칼럼유도체화장치인광화학반응장치를연결한 HPLC- FLD를이용하여아플라톡신 (B ) 을정성및정 량분석함으로써오염도를조사하였다. 아플라톡신의검출한계는 B 0.086 μg/kg 0.00 μg/kg 0.363 g/kg 0.6 μg/kg이었고, 정량한계는 B 0.6 μg/kg 0.059 μg/ kg.0 g/kg 0.38 μg/kg였다. 회수율은 B 95.~ 0.8% 86.9~05.6% 95.~00.6% 98.6~4.0% 이었으며, 변동계수 (Coefficient of Variation, %) 는 B.9~ 9.8%.~8.%.~9.5% 0.9~9.3% 였다. 사용부위에따른아플라톡신오염의특성을살펴본결과종자 (Semen) 만아플라톡신이검출되었으며, 건중 6건 ( 원형 3건, 분말 3건 ) 에서아플라톡신이검출되었다. 품목별아플라톡신검출건수를살펴본결과, 연자육중원형은 7 건을검사한결과 건에서아플라톡신 B 가검출되었 고, 분말은 6건중 건에서아플라톡신 B 이검출되었다. 산조인원형은 5건중 건에서아플라톡신 B 가검출 되었으며, 분말은 3건중 건에서아플라톡신 B 가검출되었다. 아플라톡신검출량을살펴보면, 연자육원형은총아플라톡신 (B 의합 ) 이 ND~4.655 μg/kg(b ND~.869 μg/kg) 검출되었고, 분말은총아플라톡신이 ND~.3 μg/kg(b 이 ND~.3 μg/kg) 검출되었다. 산조인원형의아플라톡신검출량은총아플라톡신이 ND~9.8 μg/kg(b 이 ND~6.6 μg/kg) 검출되었고, 분말은총아플라톡신이 ND~.797 μg/kg(b 이 ND~9.345 μg/kg) 검출되었다. 따라서이러한곰팡이독소검출현황을토대로식 약공용농산물에대한곰팡이독소기준을설정하여식 약공용농산물의안전한유통을관리할필요가있다. Reference. Korea Health Industry Development Institute: Health industry white paper 04. hanhakmunwha, pp. 436-446 (05).. Korea Institute for Health and Social Affairs: Pre-planning study for the risk assessment of herbal medicines. pp. 8 (04). 3. Nielsen Company Korea: Survey method research on intake of chinese medicine by Korean. pp. 30 (009). 4. Song V.K.: Control system of herbal medicine in shared use for food and medicine purpose. The report of Korea Food & Drug Administration (006). 5. Brase, S., Encinas, A., Keck, J., Nising, C.F.: Chemistry and biology of mycotoxins and related fungal metabolites. Chem. Rev., 09, 3903-3990 (009). 6. Binder, E.M., Tan, L.M., Chin, L.J., Handl, J., Richard, J.: Worldwide occurrence of mycotoxins in commodities, feed and feed ingredients. Anim. Feed Sci. Technol., 37, 65-8 (007). 7. Rustom, I.Y.S.: Aflatoxin in food and feed: occurrence, legislation and inactivation by physical methods. Food Chem., 59, 57-67 (997). 8. Gourama, H. and Bullerman, L.B.: Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus; Aflatoxigenic fungi of concern in foods and feeds-a review. J. Food Prot., 58, 395-404 (995). 9. International Agency for Research on Cancer (IARC): Monographs on the evaluation of carcinogenic risk to humans. Some naturally occurring substances, food items and constituents, hetrocyclic aromatic amines and mycotoxins. International Agency for Research on Cancer. World Health Organization, Lyon, France, 5, 45-395 (993). 0. Taber, H.H. and Schroeder, H.W.: Aflatoxin producing potential of isolates of the Aspergillus flavus-oryzae group from peanuts (Arachis hypogaea). Appl. Microbiol., 5, 40-44 (967).. Sweeney, M.J. and Dobson, A.D.W.: Mycotoxin production by Aspergillus, Fusarium and Penicillium species. Int. J. Food Microbiol., 43, 4-58 (998).. Smith, J.E. and Moss, M.O.: Mycotoxins, formation, analysis and significance. John Wiley & Sons Ltd., pp. 33-37 (985). 3. Eaton, D.L., Ramsdell, H.S., Neal.E.roopman, J.D.: Biotranformation of aflatoxins: In the toxicology of aflatoxins human health, veterinary, and agricultural significance. Academic Press, pp. 45-7 (993). 4. Groopman, J.D., Wogan.N., Roebuck.D., Kensler, T.W.: Molecular biomarkers for aflatoxins and their applica-

74 Sung-dan Kim et al. tion to human cancer prevention. Cancer Res, 54 (7 Supplement), 907s-9s (994). 5. World Health Organization (WHO): Mycotoxins: Environmental health criteria. Available from: http://www. inchem.org/ documents/ehc/ehc/ehc0.htm. Accessed Jan., (07). 6. Park S.K., Jang J.I., Ha K.T., Kim S.D., Kim O.H., Choi Y.H., Seung H.J., Kim S.J., Lee K.A., Jo H.B., Choi B.H., Kim M.Y.: A survey of the presence of aflatoxins in herb medicines. J. Food Hyg. Saf., 4, 69-73 (009). 7. Lee S.D., Kim Y.S., Yoon Y.T., Park A.S., Shin Y., Kim H.S., Kim Y.K., Choi B.H.: Monitoring of Aflatoxins in Herb Medicines. Korean J. Medicinal Crop Sci., 8, 338-344 (00). 8. Lee S.D., Kim Y.S., Kim N.H., Jung H.J., Jung S.J., Kim H.S., Kim K.S., Han K.Y.: A study on aflatoxins analysis in the herb medicines. J. Food Hyg. Saf., 6, 44-434 (0). 9. Kim Y.H., Kang H.S., Oh S.W., Lee H.J., Kim M.G., Chung S.Y., Choi S.H.ang S.J., Han K.J., Lee J.W., Kim Y.S., Kim H.Y.: Monitoring of aflatoxins in medicinal herbs. Korean J. Food Sci. Technol., 4, 7-3 (00). 0. Park S.Y., Moon H.J., Cho S.Y., Lee J.G., Lee H.M., Song J.Y., Cho O.S., Cho D.H..: Monitoring of aflatoxins on commercial herbal medicines. J. Food Hyg. Saf., 6, 35-3 (0).. Korea Food & Drug Administration (KFDA): The Korean Pharmacopoeia. KFDA Notification, Korea, No. 0-9 (0). International Conference on Harmonization of Technical Requirements for registration of Pharmaceuticals for Human Use (ICH). Validation of analytical procedures: Text and methodology Q (R). Available from: http://www.ich.org/ fileadmin/public_web_site /ICH_Products/Guidelines/Quality/Q_R/Step4/Q_R Guideline.pdf. Accessed Dec., (06). 3. Korea Food & Drug Administration (KFDA): Korea Food Code -Testing Method I-. Korea Food and Drug Administration, Seoul, Korea, pp. 3 (05). 4. International Agency for Research on Cancer (IARC): Evaluation of carcinogenic risks to humans. IARC Monographs (003). 5. Pozzi, C.R., Correa.ambale, W., Paula, C.R., Chacon- Reche, N.O., Meirelles, M.C.: Postharvest and stored corn in Brazil: mycoflora interaction, abiotic factors and mycotoxin occurrence. Food Addit. Contam.,, 33-39 (995). 6. Turner, P.C., Sylla, A.ong, Y.Y., Diallo, M.S., Sutcliffe, A.E., Hall, A.J.: Reduction in exposure to carcinogenic aflatoxins by postharvest intervention measures in west Africa: a community-based intervention study. The Lancet, 365, 950-956 (005). 7. Wild, C.P.: Aflatoxin exposure in developing countries: the critical interface of agriculture and health. Food Nutr. Bull., 8, S37-380 (007). 8. Ip, S.P. and Che, C.T.: Determination of aflatoxins in Chinese medicinal herbs by high-performance liquid chromatography using immunoaffinity column cleanup Improvement of recovery. J. Chromatogr. A, 35, 4-44 (006). 9. Katerere, D.R., Stockenstrom, S., Thembo, K.M., Rheeder, J.P., Shephard.S., Vismer, H.F.: A preliminary survey of mycological and fumonisin and aflatoxin contamination of African traditional herbal medicines sold in South Africa. Hum. Exp. Toxicol., 7, 793-798 (008). 30. Reddy, S.V., Mayi, D.K., Reddy, M.U., Thirumala-Devi, K., Reddy, D.V.: Aflatoxins B in different grades of chillies (Capsicum annum L.) in India as determined by indirect competitive-elisa. Food Addit. Contam., 8, 553-558 (00). 3. Trucksess, M.W. and Scott, P.M.: Mycotoxins in botanicals and dried fruits: a review. Food Addit. Contam. Part A, 5, 8-9 (008).