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pissn 1229-1153 / eissn 2465-9223 J. Food Hyg. Saf. Vol. 32, No. 6, pp. 542~549 (2017) https://doi.org/10.13103/jfhs.2017.32.6.542 Journal of Food Hygiene and Safety Available online at http://www.foodhygiene.or.kr 가막만해역패류의세균학적 독물학적안전성평가 하광수 * 신순범 1 이가정 2 정상현 1 오은경 1 이희정 김동욱 김연계 국립수산과학원식품위생가공과, 1 남해수산연구소양식산업과, 2 남동해수산연구소 Evaluation of the Bacteriological and Toxicological Safety for the Shellfish Growing Area in the Kamakman Area, Korea Kwang-Soo Ha*, Soon-Bum Shin 1, Ka-Jeong Lee 2, Sang-Hyeon Jeong 1, Eun-Gyoung Oh 1, Hee-Jung Lee, Dong-Wook Kim, and Yeon-Kye Kim Food Safety and Processing Research Division, National Institute Fisheries Science, Busan, Korea 1 South Sea Fisheries Research Institute, National Institute Fisheries Science, Yeosu, Korea 2 Southeast Sea Fisheries Research Institute, National Institute Fisheries Science, Tongyeong, Korea (Received September 18, 2017/Revised October 5, 2017/Accepted October 12, 2017) ABSTRACT - To evaluate bacteriological and toxicological safety, the hygienic indicator bacterium and paralytic and diarrhetic shellfish toxins in the shellfish produced in the Kamakman Area from 2012 to 2016 were investigated. Fecal coliforms and E. coli of all 194 oyster samples tested did not exceed 230 MPN/100 g. The geometric mean of the fecal coliform analyzed with the oyster samples of harvesting period was 19.6 MPN/100 g, which was more stable than the non-harvesting period (26.5 MPN/100 g). For the toxicological evaluation of the Kamakman Area, 77 oyster samples and 350 mussel samples as an indicator were analyzed. Paralytic shellfish toxins were detected very low in the range of 40~46 µg/100 g in 13 mussel samples during late April and early June, but not in oyster samples. Diarrhetic shellfish toxin was detected in 2 of 180 samples, but it was found to be below the regulation value (0.16 mg OA equ./kg). Based on the bacteriological studies, it was confirmed that the shellfish produced in Kamakman area meets the standard of shellfish hygiene of the Food Sanitation Act and meets the Grade A of the shellfish production area of EU. As the results of the paralytic and diarrhetic shellfish toxin evaluation, it was confirmed that the Kamakman Area is also toxicologically safe for shellfish production. Key words : Kamakman, Fecal Coliform, E. coli, Shellfish Poisoning 가막만해역은전라남도여수시의도심, 화양면, 화정면및돌산읍으로둘러싸여있는타원형의반폐쇄성내만으로육상으로부터영양염의유입과먹이생물의번식이원활하여, 전남지역의대표적인패류생산해역으로알려져있다 1). 패류는주로해안과인접한지역에서서식하므로, 도심주거지역, 가축사육지, 야생동물서식지, 선박계류장등에서발생하는분변에오염되기쉽고 2-3), 여과섭이활동을통해영양을섭취함으로체내에축척된세균, 바이러스, 및패류독소등의병원소로작용하며, 각종질병의매개체로인식되어왔다 4-5). 패류는오염물질을쉽게축적할 *Correspondence to: Kwang-Soo Ha, Food Safety and Processing Research Division, National Institute Fisheries Science, Busan, 46083, Korea Tel: 82-51-720-2642, Fax: 82-51-720-2619 E-mail: ksha@korea.kr 뿐만아니라패각을제외한장기관및연체부전체를가식부로이용한다는점에서패류의안전한섭취를위해서는서식하고있는해역에대한위생적인관리가매우중요하다 6). 따라서패류의위생안전성확보를위하여패류생산해역의위생관리는대단히중요하며, 미국, 유럽연합등선진국에서는패류생산해역의위생상태에따라등급을부여하여관리하고있다. 패류생산해역의관리등급은해수와패류의위생지표세균을근거로결정된다. 미국은해수의분변계대장균함량으로패류생산해역을허가해역, 조건부허가해역, 제한해역, 조건부제한해역, 금지해역으로분류하며, EU는패류의대장균함량을분석하여 A, B, C 등급으로나누어해역을관리하고있다. 그리고뉴질랜드와일본은해수및패류의위생상태에따라해역등급을결정하여관리하고있다 7-8). 인체에급성치사독성을나타내는마비성패류독소는패 542

Evaluation of the Safety for the Kamakman Area 543 류생산해역의 위생안전성 확보를 위해반드시 관리되어야 하는 항목이다. 마비성패류독소에 의한 최초의 중독사고 는 1790년 러시아의 알래스카 탐험대가 담치를 섭취하고 100여명이 사망한 사건이 기록된 후로, 최근에는 전 세계 적으로 발생되고 있는 것으로 보고되고 있다9). 설사성패 류독소는 1960년대 네덜란드에서 최초의 식중독 보고가 있었다. 그 후 일본, 스페인, 프랑스, 스웨덴 등의 유럽지 역에서 수 만건이 넘는 중독사고가 보고되고 있다10). 이처 럼 패류생산해역에 대한 안전성 평가를 위해서는 패류 섭 취로 인한 식중독 발생의 주요 원인이 되고 있는 독물학 적 안전성이 반드시 확보되어야 한다. 지금까지 가막만해역의 위생학적 안전성을 평가한 연구 는 해수에 대한 수질평가와 강우 후 해수 및 굴의 세균학 적 변화에 대한 연구뿐이며, 생산되고 있는 패류를 직접 분 석하여 해역의 위생학적 안전성을 평가한 연구는 없었다11-12). 본 연구는 2012년부터 2016년까지 가막만해역에서 주로 생산되는 패류인 굴의 위생지표세균 분석을 통하여, 동 해 역이 패류 생산해역으로 적합한 위생상태인지 평가하였다. 또한 패류의 마비성패류독 및 설사성패류독 함량을 분석 하여 독물학적 안전성이 유지되고 있는지 확인하였다. Materials and Methods 양식이 활발하다. 2012년부터 2016년까지 가막만해역에 대한 세균학적 안전성평가를 위하여 가막도(O-3), 평사리 (O-4), 안포리(O-5), 세포리(O-6), 금봉리(O-7)에 굴 조사지 점 5개소를 선정하여 조사하였다. 또한 독물학적 안전성 평가를 위해 굴 조사지점 2개소(O-6, O-7) 뿐만 아니라 경 호동(M-1), 소호동(M-2) 및 평사리(M-4), 금봉리(M-5)에 마비성패류독의 지표종인 지중해담치 조사지점 4개소에 대한 패류독소 분석을 실시하였으며, 조사지점의 위치를 Fig. 1에 나타내었다. 위생지표세균 분석 시료 중 분변계대장균, 일반세균수 분석은 Recommended Procedures for the Examination of Seawater and Shellfish 의 방법13)에 따라 시험하였다. 분변계대장균은 최확수법 (Most Probable Number, MPN)으로 시험하였으며, 결과는 100 g 당 MPN으로 나타내었고, 세균수는 g당 Colony Forming Unit (CFU)로 나타내었다. 패류의 대장균 분석은 ISO/TS 16649-3의 방법14)에 따라 분석하였다. 마비성패류독소 분석 가막만해역에서 생산된 굴 및 지중해담치의 마비성패류 독(Paralytic Shellfish Poisoning, PSP) 함량을 측정하기 위 하여 APHA 방법에 준하여 분석하였다. 패각의 외부 및 내부의 이물질을 수도수로 세척한 후, 물기를 제거한 패 류육을 균질화하고, 시료 100 g에 0.1 N HCl 동량을 첨가 하였다. 시료의 ph 2.0~4.0 범위가 되도록 조정하여 100 C 에서 5분간 가열한 후, 냉각하고 다시 ph를 조정하여 200 ml로 정량하였다. 원심분리한 상등액을 시료로 하여 mouse의 복강에 1 ml씩 주입하고 사망시간을 확인하여 sommer s Table에 따라 독력을 계산하였다. 13) 조사지점 및 기간 선정 가막만해역은 수출용 패류생산해역으로 지정되어 관리 되고 있다. 지정해역 경계선 내부에 위치한 해역에서는 굴 (Crassostrea gigas)이 생산되고 있으며, 여수시 도심이 위 치한 북부해역에는 주로 지중해담치(Mytilus galloprovincialis) Fig. 1. Sampling stations in the Kamakman area., Oyster;, Oyster and Mussel;, Mussel. o 설사성패류독소 분석 설사성패류독소(Diarrhetic Shellfish Poisoning, DSP) 분 석에 사용된 okadaic acid (OA), dinophysistoxin-1 (DTX1), dinophysistoxin-2 (DTX-2) 표준품은 Canada의 National Research Council (NRC, Halifax, Canada)에서 구입하였고, 탈각한 시료는 90% MeOH로 추출하여 원심분리 후, 0.22 µm syringe filter로 여과하여 분석하였다. Acetonitrile과 methanol 등 용매는 Merck (Darmstadt, Germany)의 HPLC grade를 사용하였고, formic acid, ammonium formate, 등 은 Sigma (St. Louis, MO, USA)의 mass spectormetry grade를 사용하였다. 이동상은 formic acid와 ammonium formate가 각각 50 mm 및 2 mm이 되도록 만든 수용액 A 용액과 동일 농도의 formic acid와 ammonium formate가 함유된 95% acetonitrile B용액을 사용하였다. 두 용액의 비율을 80:20으로 시작하여 1.5분에 걸쳐 B 용액을 20% 에서 80%까지 올린 후, 3.5분간 유지하여 독성분을 용출한

544 Kwang-Soo Ha et al. Table 1. LC-MS/MS parameters for detection of diarrhetic shellfish poisoning toxins Toxin Parent ion (m/z) Fragment ion (m/z) Mode 후, 다시 20% 로낮추어 1.5분간 column의평형화시간을갖도록하였고, 유속은 250 µl/min의조건으로하였다. 설사성패류독소분리를위해 ACQUITY UPLC H-Class (Waters, Milford, MA, USA) 를사용하였고, mass spectrometer는 Xevo TQ-S (Waters, Milford, MA, USA) 를사용하였다. 분석용 column은 ACQUITY UPLC BEH C18 (2.1 100 mm, 1.7 µm) 를사용하였으며, mass의분석조건은 capillary voltage는 3.5 kv, cone voltage는 40 V, source temp는 150 o C, desolvation temp는 350 o C로분석하였다. 시료검출은 MRM (Multiple reaction monitoring) 법으로하였으며, 각성분분석을위한기기의 parameter는 Table 1 에나타내었다. Results and Discussion Collision energy (ev) OA 803.20 254.91 ES- 1) 45 DTX1 817.30 255.00 ES- 45 DTX2 803.20 254.91 ES- 45 1) Electrospray negative ion 세균학적안전성평가가막만해역내에위치한굴조사지점 5개소 (O-3~O-7) 에서분석한분변계대장균, 대장균및세균수의검출범위, 기하평균치, 90 th percentile 값등을 Table 2에나타내었다. 2012년 1월부터 2016년 12월까지매월 1회씩패류에대한조사를실시하였으나, 굴수확을마친어장에서는시료를채취할수없어총 42회, 194점의굴시료에서세균함량을분석하였다. 검출된분변계대장균및대장균수의범위는각각 < 18~230 및 < 18~220 MPN/100 g 이었다. 대장균수의기하학적평균치의범위는 20.1~25.1 MPN/100 g 로낮게나타났다. 식품공전 15) 의생식용굴에대한기준규격은대장균 230 MPN/100 g을초과하지않도록설정되어있다. 따라서가막만해역에서 2012년부터 2016년까지생산된굴은국내식품위생법의기준을만족하는것으로확인되었다. 또한유럽연합의해역평가기준인 Commission Regulation (EU) 2015/2285 7) 에따르면생산된패류를즉시생식할수있는 A 등급해역은조사기간동안 80% 의시료가 230 E. coli MPN/100 g을초과하지않아야하며, 초과한 20% 의시료중에서 700 E. coli MPN/100 g을넘는시료가없어야한다. 따라서유럽연합의기준에따른평가에서도가막만해역은 A 등급의패류생산해역으로분류되었다. 미국은해수의위생상태를평가하여패류생산해역을허가해역, 조 건부허가해역, 금지해역등으로분류하며, Kwon 등 11) 도 1998년부터 2008년까지가막만해역해수에대한세균학적평가를수행하였으며, 가막만해역이미국의허가해역수질기준에적합함을확인하였다. 또한식품공전에서소비자가그대로섭취할수있도록유통판매를목적으로위생처리하여용기포장에넣은동물성냉동수산물의경우, 세균수기준을 100,000 CFU/g으로설정하고있다. 가막만해역에서생산된굴의세균수는 3,600 CFU/g 이하로매우안전한수준이었다. 경남지역에위치한한산 거제만해역과자란만 사량도해역의육상오염원의영향및굴에대한위생학적안전성을평가한 Mok 16-17) 의연구결과에서도분변계대장균및대장균의검출범위가 230 MPN/100 g을초과하지않는것으로나타났다. 또한분변계대장균의기하학적평균치는각각 23.7~26.7 및 19.3~25.0 MPN/100 g으로가막만해역 (20.1~ 25.1 MPN/100 g) 과비슷한수준이었다. 경남과전남해역에위치한대표적인굴생산해역의위생학적안정성은국내및외국의기준에부합한것으로확인되었다. 수확시기에따른위생학적성상굴수확시기는일반적으로 10월부터다음해 5월까지지속되며, 비수확기는 6월부터 9월까지의하절기를포함한다. 수확시기에따른굴의위생상태를비교한결과를 Table 3에나타내었다. 수확기및비수확기에검출된분변계대장균의범위는각각 < 18~130 및 < 18~230 MPN/100 g으로비수확기의분변계대장균수가더높게검출되었고, 기하학적평균치도 19.6 및 26.5 MPN/100 g로다소높았다. 대장균과세균수검출결과도비수확기의오염정도가높게나타났다. 이러한이유는패류생산해역의해수에대한위생학적평가연구 18-19) 에서비수확시기가우리나라하절기를포함하고있으며, 강우의빈도가높고, 강우량이증가함에따라자란만 사량도해역과창선해역에서각각염분이낮게나타나고, 육상의오염물질유입이증가하면서패류의위생상태가악화되는것으로보고하고있다. 자란만 사량도해역의경우월별염분농도가 26.62~34.65 psu 범위였으며, 대량강우가발생한 7월에 26.62 psu로가장낮게나타났고, 육상인근에위치한시료뿐만아니라해역중앙에서채취한해수시료에서도분변계대장균의함량이높게검출되었다. 창선해역해수의월별염분농도는 30.22~ 33.70 psu 범위였으며, 장마와태풍등강우량이많은 7~10 월에낮은염분을나타내었고, 해수의분변계대장균이 43 MPN/100 ml을초과한시료는 9월에 17개시료로가장많았다. 강우가패류의세균학적수질에미치는영향강우량과강우후경과시간이패류생산해역의세균학적수질변화에미치는영향을파악하기위하여, 조사 3 일전

Table 2. Results of the bacteriological examinations of oyster in Kamakman from 2012 to 2016 Fecal coliform MPN/100 g E.coli MPN/100 g Plate count CFU/g No. of Station > 230 >230 > 50000 samples Range GM 90 Range GM 90 Range GM 90 1) th2) No. % No. % No. % O-3 < 18~130 32.7 19.3 0 0.0 < 18~110 21.7 38.1 0 0.0 10~2,600 83.8 302.4 0 0.0 40 O-4 < 18~230 50.3 22.8 0 0.0 < 18~170 20.8 34.2 0 0.0 15~1,900 91.8 295.6 0 0.0 42 O-5 < 18~170 40.1 20.2 0 0.0 < 18~220 25.1 56.2 0 0.0 30~3,600 105.4 420.5 0 0.0 35 O-6 < 18~45 24.1 18.1 0 0.0 < 18~50 20.1 26.4 0 0.0 20~1,900 107.8 346.7 0 0.0 36 O-7 < 18~170 59.4 24.8 0 0.0 < 18~170 22.5 42.7 0 0.0 5.0~2,000 133.7 580.9 0 0.0 41 Total < 18~230 41.3 21.0 0 0.0 < 18~220 22.0 39.5 0 0.0 5.0~3,600 104.5 389.2 0 0.0 194 1)Geometric Mean. 2)The estimated 90 percentile. th Table 3. Results of the bacteriological examinations of oyster during harvesting and non-harvest season in Kamakman from 2012 to 2016 Fecal coliform MPN/100 g E.coli MPN/100 g Plate count CFU/g No. of Station > 230 >230 > 50000 samples Range GM 90 Range GM 90 Range GM 90 1) th 2) No. % No. % No. % (Harvest season) O-3 < 18~20 17.4 18.6 0 0.0 < 18~110 20.2 30.2 0 0.0 10~2,600 69.4 235.6 0 0.0 31 O-4 < 18~130 22 44.2 0 0.0 < 18~70 19.9 26.6 0 0.0 15~370 80.3 225.5 0 0.0 33 O-5 < 18~20 17.9 19.7 0 0.0 < 18~80 22.2 38.1 0 0.0 30~800 89.4 245.0 0 0.0 26 O-6 < 18~45 17.7 22.6 0 0.0 < 18~50 19.8 25.1 0 0.0 20~450 91.1 212.3 0 0.0 27 O-7 < 18~110 23.0 48.0 0 0.0 < 18~70 20.7 29.8 0 0.0 5.0~740 101.7 349.4 0 0.0 31 Total < 18~130 19.6 30.6 0 0.0 < 18~110 20.6 30.0 0 0.0 5.0~2,600 86.4 253.6 0 0.0 148 (Non-harvest season) O-3 < 18~130 27.8 76.6 0 0.0 < 18~110 27.6 67.5 0 0.0 10~900 160.1 530.1 0 0.0 9 O-4 < 18~230 25.9 78.3 0 0.0 < 18~170 24.7 62.3 0 0.0 15~1,900 149.4 657.3 0 0.0 9 O-5 < 18~170 28.4 104 0 0.0 < 18~220 35.6 124 0 0.0 30~3,600 170.0 1380.9 0 0.0 9 O-6 < 18~45 19.3 30.0 0 0.0 < 18~45 21.3 31.4 0 0.0 20~1,900 195.6 1206.4 0 0.0 9 O-7 < 18~170 31 105 0 0.0 < 18~170 29.4 88.1 0 0.0 5.0~2,000 312.8 1651.1 0 0.0 10 Total < 18~230 26.5 78.8 0 0.0 < 18~220 27.7 74.6 0 0.0 5.0~3,600 197.6 1085.2 0 0.0 46 Geometric Mean. 1) 2)The estimated 90 percentile. th Evaluation of the Safety for the Kamakman Area 545

546 Kwang-Soo Ha et al. Table 4. Effect of rainfall and time on the bacteriological quality of oyster in Kamakman from 2012 to 2016 Sampling date 13.03.18 15.11.09 15.12.14 16.09.19 Rainfall date Rainfall amount (mm) 13.03.17 40.6 13.03.18 18.0 15.11.06 15.11.07 15.11.08 15.11.09 15.12.11 15.12.12 15.12.13 15.12.14 16.09.16 16.09.17 16.09.18 16.09.19 2.3 30.0 4.5 0.2 11.5 - - 0.8 1.5 180.9 1.8 - Station MPN/100 ml CFU/g Fecal coliform E.coli Plate counter O-3 < 18 < 20 90 O-4 < 18 < 20 250 O-5 20 20 200 O-7 40 20 150 O-3 20 20 60 O-4 < 18 < 20 80 O-5 20 80 160 O-6 < 18 < 20 55 O-7 20 20 260 O-3 20 < 20 55 O-4 45 20 60 O-5 < 18 < 20 45 O-6 < 18 20 55 O-7 110 70 100 O-3 78 80 900 O-4 230 170 1,900 O-5 170 80 1,700 O-6 45 45 1,900 O-7 130 130 1,000 Table 5. Results of mouse bioassay for PSP in shellfish in Kamakman region from 2012 to 2016 Sample station Oyster Toxicity (µg/100 g) 2012 2013 2014 2016 5/9 5/14 4/22 4/24 4/29 5/13 5/26 6/9 5/16 5/23 5/30 O-6 ND 1) ND - - - - - - ND - - O-7-2) - - - - - - - ND - - M-1 46 42 ND ND 44 44 ND ND ND 40 40 M-2 44 45 43 45 42 ND ND 43 ND ND ND Mussel M-4 ND ND ND - - ND - ND ND - - M-5 ND ND ND - - ND - ND 41 - - 1) Not detected or all three mice were not dead within 1hrs, after injection of 0.1 N HCl extract. 2) Sample shellfish were not available to collect. 부터조사당일까지강우가있었던경우를대상으로강우가해역에미치는수질변화를 Table 4에나타내었다. 조사기간동안해역에미치는영향이적을것으로판단되는 10 mm 이하의강우가있거나, 두지점이상에서분변계대장균및대장균이검출되지않은경우에는패류의위생학적안전성에영향을미치지않는것으로판단하여분석에서제외하였다. 강우영향에대한평가결과, 조사 3일전부터 12.3, 37.0 및 58.6 mm의강우가내린후실시한세번의조사에서분변계대장균군, 대장균및세균수는모두유의적인차이를나타내지않았다. 하지만 2016년 9월 184.2 mm의강우후에실시한조사에서는전체지점에서대장균이검출되었고, 범위는 45~170 MPN/100 g으로높게나타나, 조사이틀전에내린 180.9 mm의강우로인한 육상의오염물질이해수를통해패류의체내에농축되어위생상태에영향을미친것으로판단된다. Park 12) 은강우가가막만해역해수의세균학적수질에큰영향을미치며강우후 24~48시간경과후, 평소의수질로회복되어간다고보고하였다. 또한 Yoo 19) 는창선해역의경우, 조사 4 일전부터 2일전까지 47.5 mm의강우후에해수는조류소통으로외해수와의교환을통해빠른시간에수질을회복하였지만, 체내에세균을축적한패류는대장균값이 490 MPN/100 g으로나타나해수보다는강우영향이오래지속됨을보고하였다. 강진만해역에대한패류의위생학적성상에대한연구 20) 에서피조개총 54 개시료중 2007 년 9 월과 2009 년 7 월에발생한강우의영향으로 2 개시료에서분변계대장균의

Evaluation of the Safety for the Kamakman Area 547 Fig. 2. The standard curve for okadaic acid (OA), dinophysistoxin-1 (DTX1) and dinophysistoxin-2 (DTX2). 기준치를초과하였다고보고하였다. 또한창선해역의지중해담치에대한위생학적평가 19) 에서도 2007년 9월및 2008년 8월의강우영향으로인해대장균기준치를초과한것으로보고하였다. 이처럼패류생산해역의위생학적안전성에가장큰영향을미치는요소는강우로판단된다. 우리나라에서패류수출을목적으로외국의위생기준에맞추어해역을관리하고있는수출용패류생산지정해역의경우, 해역별강우량에따른패류채취금지일을설정하여운영하고있다. 국내유통을목적으로패류를생산하고있는해역도강우에대한영향을평가하여, 패류채취금지기간을설정하고관리할수있는기초연구가확대되어야한다. 독물학적안전성평가 2012년부터 2016년까지가막만해역굴조사지점 (O-6, O- 7) 및지중해담치조사지점 (M-1, M-2, M-4, M-5) 에서각각 77점및 350점의패류시료에대한마비성패류독소검출결과를요약하여 Table 5에나타내었다. 총 427개시료중 13개시료에서식품위생법에서설정하고있는마비성패류독소기준치인 80 µg/100 g 미만의소량이검출되었다. 마비성패류독소는지중해담치에서 4월말에서 6월초사이에검출되었으며 40~46 µg/100 g 범위로낮게나타났다. 굴에서는마비성패류독소는검출되지않았으며, 주로 10 월에서다음해 3월경에채취를완료하므로패류독소검출시기에분석된시료수가충분하지는않았다. 하지만 Mok 9) 은수산생물종류별마비성패류독소축적에관한연구에서패류독소발생해역에시험생물을시설하여동일한시기에분석한결과, 지중해담치 (159 µg/100 g) 와가리비 (95 µg/100 g) 는패류독소기준치를초과하였으나, 바지락 (71 µg/100 g) 과굴 (58 µg/100 g) 은기준치이하검출되어지중해담치가패류생산해역의마비성패류독소안전성확인을위한지표종으로유용하다는사실을확인하였다. 설사성패류독소는굴 1개지점 (O-7) 및지중해담치 2개지점 (M-1, M-5) 에서총 180점에대한 OA, DTX-1, DTX- 2 독소함량을분석하였다. 각독소성분의결정계수 (r 2 ) 는 0.99 이상으로높은직선성을나타내었으며, 각성분은 OA (3.4 min), DTX-1 (4.0 min), DTX-2 (3.5 min) 에검출되었다 (Fig. 2 & 3). LC-MS-MS로분석한설사성패류독소각성분의정량한계는 10 µg/kg으로확인되었으며, 2016년 6 Fig. 3. Chromatograms of the standard solution (100 µg/kg) of okadaic acid (OA), dinophysistoxin-1 (DTX1) and dinophysistoxin-2 (DTX2). 월가막만경호동 (M-1) 및금봉리 (O-5) 에서각각 19 및 22 µg/kg의 okadaic acid가검출되었다. 또한경호동시료에서는 DTX-1도 2µg/kg으로정량한계이하로매우낮게나타났다. 하지만우리나라식품위생법에서설정한설사성패류독소기준치인 OA와 DTX-1 합이 160 µg/kg 이하에미치지않는소량이었다. 그리고 DTX-2는모든시료에서검출되지않았다. 이상의결과, 가막만해역에서생산되는굴은세균학적, 독물학적으로우리나라와 EU 등의패류생산해역기준에도적합한위생상태를유지하고있음을확인하였다. Acknowledgement 이논문은국립수산과학원의수산과학연구사업중 수출패류생산해역및수산물위생조사 R2017057) 의지원으로수행된연구결과입니다. 국문요약 본연구는 2012 년부터 2016 년까지전남가막만해역에서

548 Kwang-Soo Ha et al. 생산되는패류에대하여위생지표세균, 마비성및설사성패류독소를분석하여세균학적, 독물학적안전성을평가하고자하였다. 총 194점의굴시료에서분변계대장균과대장균을분석한결과모두 230 MPN/100 g을초과하지않았다. 굴수확시기동안분석한분변계대장균의기하학적평균치는 19.6 MPN/100 g으로비수확시기 (26.5 MPN/ 100 g) 보다안정적인것으로나타났다. 가막만해역의독물학적평가를위해굴 77개시료와패류독소지표종인지중해담치 350개시료에대한분석을실시하였다. 마비성패류독소는 4월말부터 6월초사이에지중해담치 13개시료에서 40~46 µg/100 g 범위로매우낮게검출되었으며, 굴시료에서는전혀검출되지않았다. 설사성패류독소는총 180개시료중 2개시료에서검출되었으나, 기준치에미치지못하는것으로확인되었다. 따라서가막만해역에서생산되는패류의세균학적안전성을평가한결과, 식품위생법의패류위생기준에적합하였고, EU의패류생산해역 A등급기준에부합하는것으로확인되었다. 또한마비성및설사성패류독소는기준치보다매우낮은수준으로검출되어독물학적안전성이확보된패류생산해역으로평가되었다. References 1. Lee, K.H., Cho, K.D.: Distribution of the temperature and salinity in Kamak Bay. Bull. Kor. Fish. Soc., 23, 25-39 (1990). 2. Hunter, C., Perkins, J., Tranter, J., Gunn, J.: Agricultural land-use effects on the indicator bacterial quality of an upland stream in the Derbyshire Peak District in the UK. Water Res., 33, 3577-3586 (1999). 3. Mallin, M.A., Ensign, S.H., McIver, M.R.: Shank GC and Fowler PK. Demographic, landscape, and meteorological factors controlling the microbial pollution of coastal waters. Hydrobiologia, 460, 185-193 (2001). 4. Hold, G.L., Smith, E.A., Rappe, M.S., Maas, E.W., Moore, E.R.B., Stroempl, C., Stephen, J.R., Prosser, J.L., Brikbeck, T.H., Gallacher, S.: Characterisation of bacterial communities associated with toxic and non-toxic dinoflagellates: Alexandrium spp. and Scrippsiella trochoidea. Fems. Microbiology Ecology, 37, 161-173 (2001) 5. Rippey, S.R.: Infectious diseases associated with molluscan shellfish consumption. Clin. Microbiol. Rev., 7, 419-425 (1994). 6. Ha, K.S., Shim, K.B., Yoo, H.D., Kim, J.H., Lee, T.S.: Evaluation of the bacteriological safety for the shellfish growing area in Hansan-Geojeman, Korea. Kor. J. Fish. Aquat. Sci., 42, 449-455 (2009). 7. European Commission: Commission Regulation (EU) 2015/ 2285 amending Annex II to Regulation (EC) No 854/2004 of the European Parliament and of the Council laying down specific rules for the organisation of official controls on products of animal origin intended for human consumption as regards certain requirements for live bivalve molluscs, echinoderms, tunicates and marine gastropods and Annex I to Regulation (EC) No 2073/2005 on microbiological criteria for foodstuffs. Official J. Eur. Union (2015). 8. U.S. Food and Drug Administration: National Shellfish Sanitation Program, Guide for the control of molluscan shellfish 2015 Revision. http://www.fda.gov/food/guidance Regulation/FderalStateFoodPrograms/ucm2006754.htm (2015). 9. Mok, J.S., Oh, E.G., Son, K.T., Lee, T.S., Lee, K.J., Song, K.C., Kim, J.H.: Accumulation and depuration of paralytic shellfish poisoning in marine organisms. Kor. J. Fish Aquat. Sci., 45(5), 466 (2012). 10. Lee, T.S., Mok, J.S., Ha, K.S., Lee, K.J., Kim, P.H., Kim, Y.K.: Analysis of marine biotoxins for Korean shellfish sanitation program performance. National Institute of Fisheries Science., 57 (2017). 11. Kwon, J.Y., Park, K.B.W., Song, K.C., Oh, E.G., Lee, H.J., Jo, M.R., Kim, J.H., Son, K.T.: Variation of the bacteriological seawater quality in the Kamak Bay. Kor. J. Fish. Aquat. Sci., 45(5), 460-464 (2012). 12. Park, J.H.: Bacteriological quality study of sea water and oyster in association with rainfall in Kamakman. M.S. Thesis. National Fish. Univ. of Pusan. 13-25 (1990). 13. APHA (American Public Health Association): Recommended Procedures for the Examination of Sea Water and Shellfish. 4th ed. American Public Health Association, Inc. Washington, D.C. 1-105 (1970). 14. International organization for standardization: Microbiology of the food chain-horizontal method for the enumeration of beta-glucuronidase positive Escherichia coli- Part 3: Detection and most probable number technique using 5-bromo-4- chloro-3-indol-β-d-glucuronide. 16649-3. http://www.fda.gov /Food/Guidance Regulation/FderalStateFoodPrograms/ucm 2006754.htm (2015) 15. Ministry of Food and Drug Safety.: General test method in Food Code. http://www.foodsafetykorea.go.kr/foodcode/01_ 01.jsp (2017) 16. Mok, J.S., Lee, T.S., Kim, P.H., Lee, H.J., Ha, K.S., Shim, K.B., Lee, K.J.: Bacteriological quality evaluation of seawater and oysters from the Hansan-Geojeman in Korea, 2011-2013: impact of inland pollution sources. SpringerPlus, 5:1412, 6-15 (2016). 17. Mok, J.S., Lee, K.J., Kim, P.H., Lee, T.S., Lee, H.J., Jung, Y.J., Kim, J.H.: Bacteriological quality evaluation of seawater and oysters from the Jaranman-Saryangdo area, a designated shellfish growing area in Korea: impact of inland pollution sources. Marine pollution bulletin, 108, 147-154 (2016). 18. Shim, K.B., Ha, K.S., Yoo, H.D., Kim, J.H., Lee, T.S.: Evaluation of the bacteriological safety for the shellfish growing area in Jaranman-Saryangdo area, Korea. Kor. J. Fish. Aquat. Sci., 42, 442-448 (2009). 19. Yoo, H.D., Ha, K.S., Shim, K.B., Kang, J.Y., Lee, T.S., Kim, J.H.: Microbiological quality of the shellfish-growing waters

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