임상병리검사과학회지 : 35 권제 호, 9-3, 2003 노인당뇨환자혀부위의효모균에대한조사 가톨릭피부과진균의학연구소 대구보건대학임상병리과 방용준 김쌍용 신두만 Yeasts Distributions on Tongues of Elderly Diabetic Bang, Young Jun., Kim, Ssang Young., Shin, Du Man Institute of Medical Mycology Catholic Skin Clinic, Daegu, Korea Department of Clinical Pathology, Daegu Health College The increased incidence of candial infections have been associated with the increase in the number of patients at risk. Yeast islolates from the tongues of elderly diabetic patients were compared to those of non diabetics. Yeasts were isolated from the tongues of 90 diabetics and 32 non diabetics using the tongue swab and smear technique. The yeasts were identified by germ tube and API 20C systems. The frequency of yeast isolates was much higher in diabetics compared to that of non diabetics. 78.9% of diabetic patients compared to 3.3% in non diabetics. Of the 7 yeast isolates from the diabetic patients identified by the API 20C system, 58 were Candida albicans., 6 were Candida tropicalis, 2 were Rhodotorula rubra, 2 were Trichosporon beigelii, was Candida parapsilosis, was Candida kefyr, and was Candida guilliermondii. Of the 0 yeast isolates from non diabetic patients identified by the API 20C system, 8 were Candida albicans, was Candida parapsilosis, and was Rhodotorula rubra. Key Words: Tongues, Yeasts, Elderly diabetic patients )I. 서 론 우리나라 60세이상의당뇨환자는약 20% 이며경제발전은국민식생활을고칼로리음식섭취로변화시켰고복잡해진사회구조는일상생활에서스트레스를많이받게하는등당뇨병을유발할수있는요인들이많아진환경에살고있다 ( 신등, 996). 효모균은자연계와주변환경에널리분포하고있으며 교신저자 : 방용준, ( 우 )702-200 대구광역시북구읍내동 40 번지가톨릭피부과진균의학연구소 Tel : 053-320-208 E-mail : 건강한사람의피부나구강에서도정상균총으로숙주와균형을유지하여감염증상을일으키지않고존재한다. 최근에장기이식후면역억제제의투여로나타나는숙주의면역결핍상태또는당뇨병등내분비학적요인으로 (Rurangirwa 등, 989) 인해숙주의방어능력이약해지는사례가늘어남에따라이들비병원성인균도감염을일으키고있다 (Ray, 980). 구강내감염증을일으키는원인균은인체의마찰과습윤된피부와점막에상재균으로존재하며상피세포의구조적이상이나영양실조, 독성물의생성, 혈청인자나세포성면역등의방어기전의이상이동반되었을때균의감염이용이하게일어난다. 그외당뇨병쿠싱증후군이나 9
갑상선및부갑상선기능저하등의내분비이상이나다핵세포와대식세포의탁식, 살균작용의장애가있을때기회감염을일으킨다 ( 피부과학, 200). 저자는면역적으로약한 60세이상노인당뇨환자의혀부위에효모균의분포를알아보기위하여본조사를실시하였다. 통계분석은 SPSS 이용하였으며 x 2 -test를이용하여검정하였다. III. 결과. 직접도말검사에대한배양성적 II. 재료및방법. 대상 200년 5월부터 7월까지 3개월간대구가톨릭병원당뇨센터에내원한 60세이상의당뇨환자 90명을무작위로선정하여대상자로하였으며같은기간가톨릭피부과에내원한사람중정상혈당치를보인건강인 32명을대상으로하였다 (Table ). 2. 방법환자군과대조군의혀부위를멸균된설압자를이용하여채취하여슬라이드도말과 PDAT (potato dextrose 20g, corn meal agar 20g, peptone 2g, Tween 80 6ml, 증류수,000ml) 평판배지에접종하여 25 에서 4일간배양하였으며직접도말검사는그람염색한후현미경,000배율에서관찰하여균사와포자의유무를관찰하였다. 효모균의동정은육안적으로효모양으로자란집락중효모균의종류에따라한개의집락을채취하여 Sabouraud dextrose agar에계대배양한후발아관시험, corn meal agar에접종하여위성균사와후막생성시험을실시한후 API 20C system에서최종적으로동정하였다. Table. Age and sex distribution of diabetic and control patients Diabetic Control Age M F Total M F Total 60-64 9 27 46 4 8 2 65-69 9 5 24 4 6 0 70-74 4 3 7 3 4 7 75-80 0 3 3 2 3 Total 32 58 90 2 20 32 직접도말검사와집락의수를보면환자군에서직접도말검사음성에서는배양음성이 9명이었으며, ~25개집락수는 3명이었고, 집락수 25개이상은없었다. 포자만관찰된 3명중집락수 ~25개인것이 5명, 26~50 개인것이 3명, 50개이상인것이 3명이었다 (Table 2). 포자와균사가함께관찰된경우는배양음성은없었고, ~25개집락이 2명, 26~50개집락이 5명, 50개이상의집락이 명이었다 (Table 2). 배양양성률은환자군 90명중 7명 (78.9%) 이효모군이배양되어대조군보다구강내효모균의분리빈도가유의하게높았다.(P<0.05) 나이별양성률은 60~64세 46명중 53명 (76.%), 65~70세 24명중 9명 (79.2%), 7~74세 7명중 4명 (82.3%), 75~80세에서는 3명전부효모균이분리되었다 (Table 3). Table 2. Positive rates of direct examination and isolation of colonies from tongue No. of colony Direct examination Diabetic Control 0-25 25-50 50< 0-25 25-50 50< Negative 9 3 0 0 22 6 2 0 Spore 0 5 6 0 2 0 0 0 Spore and hyphae 0 2 5 0 0 0 0 Table 3. Comparison of direct examination and culture Diabetes (N: 90) Control (N: 32) No. % No. % Direct examination 2 23.3* 2 6.3 Culture 7 78.9* 0 3.3 * Compared with control P<0.05. 0
Table 4. Identified species in Diabetes and control Species Diabetes Control C. albicans C. tropicalis C. parapsilosis C. Kefyr C. guillermondii R. rubra T. beigelli No growth 58 6 2 2 9 8 22 Total 90 32 C. candida, R. Rhodotorula, T. Trichosporon 대조군의배양양성률은전체 32명중 0명 (3.3%) 이었으며 60~64세가 2명중 3명, 65~70세 0명중 4명, 7~ 74세 7명중 2명, 75~80세는 3명중 명에서효모균이분리되었다 (Table 3). 2. 효모균의종류및분리빈도 환자군에서배양된 7 균주중 Candida. albicans 58 주, C. tropicalis 6주, C. parapsilosis 주, C. kefyr 주, C. guilliermondii 주, Rhodotorula rubra 2주, Trichosporon beigelii 2주가배양되었다 (Table 4). 대조군에서배양된 0균주는 C. albicans 8주, C. parapsilosis, Rhodotorula rubra가각각 주분리되었다. 양군에서 C. albicans균주가 64.5% 와 25% 로가장많이분리되었다 (Table 4). IV. 고 찰 사람의구강이나장관내에존재하는효모균은정상인에서도 30~50% 가분리되며당뇨병같은만성적질환이나악성종양, 면역억제제투여등에서는증가된다 (Demis 와 Mcquire, 984). 당뇨병환자에서구강내효모균의증가는말초조직의혈류량감소와조직의산소농도저하로면역반응의장애와타액속의높은당농도가그원인으로언급되고있다 (Willis 등, 2000). Weinstein 등 (959) 이당뇨환자의타액에서정상인보다효모균이많이검출된것을보고한후많은연구자들이구강내효모균이증가함을증명하였다. Aly 등 (992) 은구강내효모균등의유발하는인자로의치, 혈당치의부적절한조절, 연령등이구강내효모균을증가시키는인자로보고하였고 Willis 등 (999) 은연령, 혈당치가구강내효모균증에영향을미치지않으며흡연, 의치사용이감염증을증가하는주요인자라하였다. 본연구에서당뇨환자 90명중혀부위직접도말검사양성환자는 2명으로 22.3% 의분리빈도를보였으며건강인혀에서는 6.3% 의양성률을나타내었다. Takuro 등 (997) 은 60세이상건강인고령자 6명중 2명 (7.5%) 의양성률과는비슷한분리빈도를보였다. 혀부위의배양양성률에대한보고는 Takuro 등 (995) 이전연령층의당뇨환자에서 33.3% 60세이상건강한사람에서는 54.5% 의배양양성률을보고하였다. 본조사에서는 60세이상당뇨환자에서는 78.9%, 대조군에서 3.3% 로분리되어환자군에서더높은배양률을보였다 (P<0.05). 또한 Takuro 등 (995) 의전연령층의당뇨환자분리빈도보다높은양성률을보였으며대조군에서는 3.3% 배양양성률을보여 Takuro 등 (995) 의 54.4% 의양성률보다낮게분리되었다. 구강내에서정상균총으로검출되는효모균은 C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. krusei, C. guilliermondii, C. glabrate, Rhodotorula, Trichosporon beigelii 등이있다 (Rippon, 988). 구강에서효모균배양률에대한보고는 Marples와 Somerville(968) 은 244명대상자중 C. albicans는 4.% 를분리하였으며, Somerville(966) 는 40명에대하여연령별, 신체부위별정상균총연구에서 C. albicans는미숙아의잇몸에서 24%, 어린이의잇몸에서 3%, 노인의잇몸에서 45% 를분리하였다. 본연구에서분리된균종은 C. albicans 5주, C. tropicalis 6주, Rhodotarula rubra, Trichosporon beigelli가 2주, C. parapsilcsis, C. kefyr 주, C. guilliermondii가각각 주로 C. albicans가가장많이분리되었다. 구강에서칸디다균주중에서병원성이강한 C. albicans가가장많이분리되는이유로 Willis 등 (2000) 은분비하는산성단백분해효소로구강내점막의상피세포
에대한 C. albicans의부착력이가장높기때문이며그외균사형성을촉진하는인자로 35 이상온도, 다당질성분, ph와관련있다고하였다. 당뇨병환자의구강내칸디다균의분리는보고자에따라차이가있어 Peter 등 (966) 은당뇨환자와정상인사이의 C. albicans의분리빈도는차이가없다고하였으며이등 (2002) 은 C. albicans가 80% 로정상인보다높게분리되었다고하였다. 혀부위에대한분리빈도는 Takuro 등 (995) 이내인성질환환자조사에서당뇨환자의 C. albicans 분리빈도는 33.3% 가분리되었다고하였다. 본조사에서노인층당뇨환자혀부위의 C. albicans분리는 64.5% 의분리빈도를나타내었다. 건강인 60세이상에서는 3.3% 로 Takuro 등 (997) 의 54.0% 보다는낮았고 C. albicans가 8주로가장많이분리되었다. 환자군와대조군에배양된 Rhodotorula는오염균으로서음식물및자연계와객담, 소변또는정상피부에존재하고흔하게배양되는균이며 Leeber와 Scher(969) 는숙주의면역이저하된상태에서장시간의도관삽입이나정맥주사용용액제, 수혈용혈액재제를통해체내로침범하여신경조직, 신장, 폐에치명적인감염을일으킬수있다고하였다. 이상의결과로볼때고령층당뇨환자의혀에서는효모균이건강한사람보다높게분포되어있어직접도말검사에서포자및균사가관찰되고배양검사에서균이분리될때병원균인지상재균인지감별할필요가있다고생각된다. V. 결론 저자들은노인층당뇨병환자를대상으로혀부위의효모균의분포를알아보기위하여 60세이상당뇨환자와건강인의혀부위를설압자로검체를채취하여직접검경및배양한결과다음과같은결론을얻었다.. 직접검경양성률은노인당뇨환자 90명중 2명 (23.3%) 이균사또는포자가관찰되었으며연령별양성률의차이는없었다. 대조군에서는전체 32명중 2명 (6.3%) 이직접검경에서균요소가관찰되어당뇨환자가 건강인보다분리비가높았다. 2. 배양양성률은환자군 90명중 7명 (78.9%) 이효모군이배양되었으며, 대조군의배양양성률은전체 32명중 0명 (3.3%) 으로환자군이높은배양양성률을보였다. 연령별배양양성률은환자군에서는연령이증가할수록배양률이높았다. 3. 환자군에서배양된 7균주중 C. albicans 58주, C. tropicalis 6주순으로많이분리되었으며대조군에서도 C. albicans가가장많이분리되었다. 참고문헌. Aly FZ, Blackwell CC, Mackenzie DA, Weir DM, Clake BF. Factors influencing oral carriage of yeasts among individuals with diabetes mellitus. Epidemiol Infect 09:507-58, 992 2. Demis DJ, Mcquire J. Clinical dermatology, th revision, p7-26, Harper and Row Pub, 984 3. Leeber DA, Scher I. Rhodotorula fungemia presenting as "endotoxic" shock. Arch Intern Med 23:78-8, 969 4. Marples MJ, Somerville DA. The oral and cutaneous distribution of Candida albicans and other yeasts in Rarotonga, Cook Islands Transac. Royal Soc Trop Med & Hyg, 62:256, 968(cited from ref.) 5. Peters RB, Bahn RN, Barens G. Candida albicans in the oral cavities of diabetics. J Dent Res 45:77-777, 966 6. Ray TL. Fungal infections in the immunocompromised host. Med Clin N Amer 64:955-968, 980 7. Rippon JW. Medical mycology. 3rd ed., p532-67, Philadelphia: WB Saunder Co, 988 8. Rurangirwa A, Pierard-Franchimont C, Pierard GE. Growth of Candida albicans on the stratum corneum of diabetic and non-diabetic patients. Mycoses 33:253-255, 989 9. Somerville DA. The normal flora of the skin in different age groups, thesis presented for PH. D. degree, University of Dtago, New Zealand, 966(cited from 2
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