J Koren So Food Si Nutr 한국식품영양과학회지 (9), 5~() http://dx.doi.org/.76/jkfn...9.5 사람면역세포를활용한생식원료및제품의체질맞춤형면역활성탐색 오성윤 정미자 최재호 오덕환 강원대학교식품생명공학과 광주대학교식품영양학과 Sreening of Personlized Immunostimultory tivities of Sengsik Mterils nd Produts Using Humn Primry Immune ell Seong-Yoon Oh, Mi J hung, Je-Ho hoi, nd Deog-Hwn Oh Deprtment of Food Siene nd iotehnology, Kngwon Ntionl University Deprtment of Food Siene & Nutrition, Gwngju University STRT Ssng onstitutionl mediine is Koren trditionl mediine in whih individuls re lssified into four onstitutionl types, Teyngin, Teumin, Soyngin, nd Soeumin. To develop new funtionl Sengsik produts, we investigted the immunostimultory tivities of rw mterils of Sengsik (milled rie, rley, Jo's ters, soyen, dzuki en, millet, eggplnts, rdish, rrot, Lentinus edodes, grius isporus, nd uriulri uriul-jude) nd Sengsik produts (Mix ~6) in primry immune ells (lymphoytes nd mrophges) isolted from lood of Teumin, Soyngin, nd Soeumin types. Inresed ell prolifertion s well s NO nd TNF-α protein prodution y immune ells treted with extrts of mterils of Sengsik nd Sengsik produts were mesured s immunostimultory prmeters. We hose milled rie, dzuki en, rdish, nd Lentinus edodes to study the immunostimultory tivity of Teumin, rley, soyen, eggplnts, nd grius isporus to study the immunostimultory tivity of Soyngin, s well s Jo's ters, dzuki en, rrot, nd uriulri uriul-jude to study the immunostimultory tivity of Soeumin. The mixtures (Mix ~6) were mde with different kinds nd rtios of Sengsik mterils sed on the immunostimultory tivities of Sengsik mterils. The immunostimultory tivity of Teumin ws highest in Mix (rie 6%, dzuki en %, rdish %, nd Lentinus edodes %) extrt-treted immune ells mong ll six mixtures. The immunostimultory tivity of Soyngin responded est to Mix (rley 6%, soyen %, eggplnts %, nd grius isporus %) mong the six extrts (Mix ~6). The inresed immunostimultory tivity of Mix 6 (Jo's ters 6%, dzuki en %, rrot %, nd uriulri uriul-jude %)-treted immune ells ws higher thn the other five extrts (Mix ~5). ordingly, Mix, Mix, nd Mix 6 my e useful s mixtures for Sengsik produts hving personlized immunostimultory tivities. Key words: immunostimultory tivity, immune ells, orientl mediine, primry ells, Sengsik 서 생식 (Sengsik) 은곡류, 두류, 과채류, 버섯류, 해조류등의원료를사용하여가열처리하지않은상태에서저온건조해분말화하여일정한비율로혼합한제품이다. 생식은식품에열을직접가하지않아식품이가지고있는영양소및건강기능성을그대로보존가능한장점을가지고있고물등과혼합하여쉽게섭취할수있는간편성을가지고있다 (). 따라서생식은바쁜현대인들의건강을지키기위한건강기능성을가진식사대용식으로개발되고있다 (). Reeived My ; epted June orresponding uthor: Deog-Hwn Oh, Deprtment of Food Siene nd iotehnology, Kngwon Ntionl University, hunheon, Gngwon -7, Kore E-mil: deoghw@kngwon..kr, Phone: +8--5-657 론 쌀 (Oryz stiv L.) 중에겨층을완전히도정한백미 (white rie) 는총폴리페놀화합물의함량이높고이들폴리페놀화합물은항산화물질로 free rdil을안정화시킬수있는 phenoli ring이존재함으로써뛰어난항산화력을나타내었으며 (,), DPPH rdil 소거작용이있었다 (). 보리 (Hordeum vulgre L.) 는우리식생활에서쌀다음으로중요한기본식량으로써식이섬유가풍부하여혈중콜레스테롤수치저하, 비만에의한성인병예방등의효과및보리추출물의항산화효과가알려져있다 (,5). 율무 (oix lhrym-joi L.) 는다른곡류에비해다양한영양소가풍부하고지질대사를개선하는효과가있으며 (6) 자양강장제, 이뇨제, 건위제, 진통제, 소염제및폐결핵, 관절통등에도효력이있는것으로알려져있다 (7). 대두 (Glyine mx Merr.) 는항암작용, 항고혈압활성, 혈중콜레스테롤저하, 항산화작용등여러생리활성을갖
6 오성윤 정미자 최재호 오덕환 는성분들을다양하게함유하여기능성식품의좋은소재로활용될수있다 (8-). 팥 (Vign ngulris vr. nipponensis) 은우리나라에서콩다음으로중요한두류작물이다. 팥은비타민 이풍부하고쌀의제한아미노산인라이신함량이높아쌀에혼반할경우단백질의질을향상시키고각기병예방및피로회복효과가있다 (). 조 (millet) 의품종중하나인차조 (wxy foxtil millet) 는쌀과함께밥으로이용하거나선식, 생식등의원료로일부소비되고있다 (). 가지 (Solnum melongen Linne) 는우리나라식단의부식으로이용되고있고비타민과무기질이풍부하고식이섬유가풍부하다 (). 장운동촉진, 변비예방, 항균, 항종양, 항돌연변이, 피부보호효과및항암작용을가지는것으로보고되고있다 (-7). 무 (Rphnus stivus L.) 는우리나라에서김치의재료로사용하고있으며기담, 혈담, 천식및늑간신경통등에효과가있는것으로알려져있다 (8). 당근 (Duus rot vr. stiv) 은 β-rotene과 α-rotene, lutein과같은 rotenoid 성분을다량보유하고있는중요한채소이다 (9). 국내에서식용및약용되고있는버섯들에대한약리효과를알아보면, 표고버섯 (Lentinus edodes) 은항산화력, 항균및항암, 혈당강하, 고혈압, 콜레스테롤저하, 항비만효과등이알려져있고 (-5), 양송이버섯 (grius isporus) 은항돌연변이효과 (6), 장내유산균증식효과등이알려져있다 (7). 목이버섯 (uriulri uriul-jude) 은지질과산화및간손상억제효과 (8), 항돌연변이효과 (9) 등이알려져있다. 본연구에서는환자들을사상체질로분류하여체질에맞게질병을치료해야한다는사상의학에근거하여지원자들을태음인, 소양인그리고소음인으로분류하였다. 그들의혈액에서분리한사상체질면역세포모델을이용하여먼저생식원료 ( 쌀, 보리, 율무, 가지, 무, 당근, 표고, 양송이, 목이 ) 의면역활성을알아보았고, 생식원료의면역활성결과를활용하여최상의면역활성을가진체질맞춤형생식제품을개발하고자하였다. 재료및방법실험재료본실험에사용한생식원료인쌀 ( 백미 ), 보리, 율무, ( 노란 ) 콩, 팥, 차조, 가지, 무, 당근, 표고버섯, 양송이버섯, 목이 버섯은춘천시내대형마트 (hunheon, Kore) 에서구입하였거나체질식전문업체 ( 주 ) 쓰리앤포바이오 (Wonju, Kore) 에서구입하여실험에사용하였다. 체질맞춤형생식의최적배합비개발본실험에사용한배합비는 Tle 과같다. 즉배합비 (Mix ) 은쌀 7%, 팥 %, 무 5% 그리고표고 5%, 배합비 (Mix ) 는쌀 6%, 팥 %, 무 % 그리고표고 %, 배합비 (Mix ) 은보리 7%, 콩 %, 가지 5% 그리고양송이 5%, 배합비 (Mix ) 는보리 6%, 콩 %, 가지 % 그리고양송이 %, 배합비 5(Mix 5) 는율무 7%, 팥 %, 당근 5% 그리고목이 5%, 배합비 6(Mix 6) 은율무 6%, 팥 %, 당근 % 그리고목이 % 였다. 생식원료및생식제품추출물의조제생식원료및생식제품 g을 7% 에탄올 L에넣고 5 수욕조상에서 시간동안진탕추출을 회반복한후추출액을감압여과장치로여과하였다. 여액을회전식진공농축기 (EYEL, Tokyo, Jpn) 를사용하여농축한후동결건조하여 냉장고에보관하면서실험에사용하였다. 위의방법으로제조된생식원료추출물을 dimethyl sulfoxide(dmso; Sigm-ldrih o., St. Louis, MO, US) 에녹인후 RPMI 6(Gio-RL, Grnd Islnd, NY, US) 배지에첨가하여 5 μg/ml 농도로제조한후.5 μm Millipore memrne filters(srtorius, Goettingen, Germny) 로여과하여실험에사용하였다. 체질분류및혈액채취본연구의연구대상은강원대학교식품생명공학전공재학생들중질병이없고건강한지원자들중 hoi 등 () 이개발한체질감별법을통해정확한체질이판별된태음인 (Teumin), 소양인 (Soyngin) 그리고소음인 (Soeumin) 각각 6명씩선발하였다. 선발된지원자들 ( 나이 : 5세 ) 에게실험전본연구목적에대하여설명한후개별적으로서면동의를받았다. 각지원자들로부터혈액채취는강원대학교부속병원임상병리과전문가의지원을받아혈액 5 ml씩 회채취한후신속히아이스박스에넣어서 분이내실험실로운반하여본실험에사용하였다. Tle. The omposition of mixtures Mixtures omposition (%) Mixture (Mix ) Mixture (Mix ) Mixture (Mix ) Mixture (Mix ) Mixture 5 (Mix 5) Mixture 6 (Mix 6) Milled rie 7, dzuki en, rdish 5, Lentinus edodes 5 Milled rie 6, dzuki en, rdish, Lentinus edodes rley 7, soyen, eggplnts 5, grius isporus 5 rley 6, soyen, eggplnts, grius isporus Jo's ters 7, dzuki en, rrot 5, uriulri uriul-jude 5 Jo's ters 6, dzuki en, rrot, uriulri uriul-jude
생식의체질맞춤형면역활성 7 면역세포 (lymphoyte, monoyte) 분리 hoi 등 () 의방법에따라혈액 5 ml를두개의 5 ml onil tue에나눈후동량의 Duleo's phosphte uffered sline(dps; mrex io Siene Verviers Sprl, Verviers, elgium) 을 5 ml씩넣어잘섞이도록혼합하였다. 이혼합액을다시 개의 5 ml-onil tue에반으로나눈후혈액과 DPS 혼합층이 fioll 층위로뜰수있도록 fioll-pque(mershm iosienes, Uppsl, Sweden) 를 onil tue 아래로조심스럽게넣어준후원심분리 (5 g, 5 min) 하였다. 원심분리후혈액에서 fioll 층위쪽의면역세포층을얻어 DPS로 회세척과원심분리를반복하여순수한면역세포를얻었다. RPMI 6 배지로두번더세척하여남아있는 DPS를완전히제거하였다. % fetl ovine serum(fs; Sigm-ldrih o.) 이첨가된 RPMI 6 배지로부유시켜 ell ulture dish에분주한다음 7 와 5% O 조건하에서약 시간동안배양하였다. 시간배양후부유된림프구 (lymphoyte) 를분리하여 RPMI 6 배지로 회세척하여모아배양하였다. 부착된 monoyte는대식세포 (mrophge) 로활성화시키는 Grnuloyte-mrophge olony stimulting ftor(gm- SF; Sigm-ldrih o.) μl를첨가하여배양하였다. 림프구는시료의세포증식능변화를보기위해사용하였고, 부착된 monoyte를대식세포로활성화시켜시료처리후 NO 생성능과 TNF-α 분비능변화를알아보기위해사용하였다. 림프구의세포증식능측정림프구세포증식능을측정하기위해 5 ell/ml 농도의세포를 96-well plte에 μl씩분주한후시료 (5 μg/ml) μl와 LPS( μg/ml) 를첨가하여다시 시간배양하였다. 대조군은 세포 mitogen인 LPS만처리하였다. hoi 등 () 의방법에따라배양후 MTT[-(,5-dimethylthizol--yl)-,5-diphenyl tetrzolium romide, Sigm-ldrih o.] 용액을 DPS에 5 mg/ml의농도로희석하여 μl씩각 well에첨가하여 시간동안재배양하였다. 재배양후. N Hl에용해시킨 % SDS를 μl 넣어주고암실에서 시간동안배양하였다. 배양이끝난 96-well plte를 ELIS reder(elx88 iotek Instruments, Vinooski, VT, US) 로 57 nm에서흡광도를측정하였다. 대식세포의 nitri oxide(no) 활성및 tumor nerosis ftor-α(tnf-α) 생성능측정대식세포로부터생성되는 NO의양을측정하기위해서 96-well plte에대식세포를 6 ells/ml를 μl씩각 well에분주하고 시간동안전배양을하여비부착세포를완전히제거하였다. 5 μg/ml의농도의시료 (5 μg/ ml) 를각 well에 μl씩더하였고, 동시에대식세포를활성화시키는 LPS를 μg/ml 넣고 7, 5.% O 조건에서 시간동안배양하였다. 대조군은대식세포를활성화시키는 LPS만처리하였다. 시료의 NO 생성저해활성은 Nitrite ssy() 를사용하여측정하였다. 즉배양된세포에배지 μl와 Griess regent 시약 μl를혼합하여 57 nm에서 ELIS reder(iotek Instruments) 를사용하여측정하였다. 배양한후에생성된 NO는 Griess법으로측정하였다. TNF-α능은상업적 humn TNF-α ELIS kit(mershm iosienes, Glttrugg, Switzerlnd) 을사용하여 mershm iosienes 사에서제공한제품사용설명서에따라측정하였다. 즉 TNF-α ELIS kit에서제공하는희석용액 5 μl를 96-well plte에분주한후배양액시료또는제공된표준용액을각각 5 μl씩첨가하고실온에서 시간반응시켰다. 반응액을제거한후 wshing uffer로세척하였다. 측정하고자하는항체를 plte에각각넣고 시간동안반응시킨후세척한다음 enzyme working regent를넣어 분간반응시켰다. 다시세척한후 sustrte solution으로실온에서발색시킨다음 stop solution을넣어발색반응을정지시키고 5 nm에서흡광도를측정하였다. 통계분석실험결과의통계처리는 SPSS ver.(spss In., higo, IL, US) 을이용하여평균값을분산분석 (onewy NOV test) 후 Dunn의다중검정법으로 P<.5 수준에서유의적차이를검정하였다. 결과및고찰쌀, 보리및율무추출물의면역활성태음인 (Teumin), 소양인 (Soyngin) 그리고소음인 (Soeumin) 혈액에서분리한면역세포에쌀 ( 백미 ; milled rie), 보리 (rley) 및율무 (Jo's ters) 추출물을처리하였을때면역활성에미치는영향력은 Fig. 과같다. 태음인과소음인혈액에서분리한림프구에쌀, 보리그리고율무추출물을처리했을때보리와율무추출물보다쌀추출물처리에의해더효과적으로림프구증식율이증가하였으나, 소양인에서분리한림프구에서는보리추출물이쌀과율무추출물처리군보다더높은림프구증식율을나타내었다 (Fig. ). NO 생성과 TNF-α의단백질생성량도세포생존율과유사한경향을나타났으나소음인에서분리한대식세포의경우쌀과율무추출물처리군은 NO 생성량이비슷한수준으로증가하였고보리추출물보다높았다. 그리고 TNF-α의단백질생성량은태음인에서분리한대식세포에쌀과율무추출물을처리한군은비슷하게증가하였으나보리추출물처리군보다높았다. 소음인의혈액으로부터분리한대식세포는 가지추출물들중율무추출물처리에의
8 오성윤 정미자 최재호 오덕환 Teumin Soyngin Soeumin ontrol rley Teumin Soyngin Soeumin ontrol rley Teumin Soyngin Soeumin ontrol rley Milled rie Jo's ters Milled rie Jo's ters Milled rie Jo's ters Fig.. Effets of 7% ethnol extrts from milled rie, rley, nd Jo's ters on ell prolifertion, NO nd TNF-α protein of lymphoytes or mrophges isolted from the lood of Teumin, Soyngin, nd Soeumin volunteers. The inrese of immunostimultory tivities in the treted ells ws lulted s the rtio of the orresponding men vlue of the ontrol ells. Vlues re men±stndrd devition (n=6~9). Men vlues with different letters (-) on the rs in the sme onstitution re signifintly different (P<.5) ording to Dunn's multiple rnge test. 보고 () 는 98년동무이제마선생이도입한사상의학과비슷한맥락에있다. 사상의학은한국고유의전통체질의학으로사람의체질은어떤약물이나외부자극에의하여개개인마다차이가있으므로질병의치료는각개인의특성에맞추어해석해야한다는개념을지니고있다 (). 사상의학에서는사람들은각개인의체격, 얼굴형태, 성격, 정서및약물에대한반응성등의차이에의해 가지체질즉태양인, 태음인, 소음인, 소양인으로분류하며이들각체질마다약에대한효과가다르기때문에체질마다처방하는약을다르게하였고 (), 체질에맞는약을섭취하였을때체질이맞지않는사람이섭취했을때보다면역활성이증가하여질병이예방되거나치료가되는것으로알려져있다 (). 따라서체질에따른체질맞춤형건강기능성식품개발은최상의건강기능성효과를얻을수있는식품개발형태가될수있을것으로판단되어본연구에서는사상의학개념을도입하였다. 그리고태음인, 소양인및소음인지원자의혈액에서얻은면역세포모델이체질특이성을그대로가지고있다는연구보고들 (,) 에의해본연구에서도태음인, 소양인및소음인지원자의혈액에서얻은세포모델을사용하였다. 본연구에서사상체질중에서태양인을제외한태음인, 소양인그리고소음인그룹뿐인것은태양인은한국인의전체인구의..% 로낮은분포를보여주고있고 (), 본연구지원자들중정확한태양인체질을가진지원자는없었으므로본연구에서태양인은제외되었다. 면역세포가자극되면자신을방어하기위하여전염증성사이토카인 (pro-inflmmtory ytokines; IL-6, TNF-α 등 ) 및전염증성매개체 (pro-inflmmtory meditors; inos, NO 등 ) 등을분비하고이들물질들은면역반응과정동안활성화된림프구와대식세포사이의신호전달에대한중요한역할을한다 (). 따라서천연소재의면역활성을알아보기위해면역세포 ( 림프구, 대식세포등 ) 의세포생존율증가, TNF-α 단백질분비증가, NO 생성량증가등의지표를사용하고있다 (). hoi와 Oh() 의보고에의하면쌀 ( 백미 ) 은태음인과소음인의면역세포증식율을다른곡류와비교하여유의적으로증가시켰고보리는소양인의면역세포증식율을다른곡류와비교하여더높게증가시켰는데이와같은결과들은본연구결과와일치하였다. 해가장높은 TNF-α의단백질생성량을나타내었다. 태음인은세가지곡류추출물들과비교하여쌀추출물처리에의해면역활성이가장높게증가하였고, 소음인은세포생존율결과를제외하고율무추출물에의해면역활성이가장높게증가하였으며, 소양인은보리추출물처리에의해면역활성이가장높게증가하였다. 따라서쌀은태음인의면역활성에좋은곡류이고율무는소음인그리고보리는소양인에게좋은곡류인것으로생각된다. 면역활성의개인적차이가고려되어야한다는최근연구 콩, 팥및차조추출물의면역활성태음인, 소양인그리고소음인혈액에서분리한면역세포에콩 ( 노란콩 ; soyen), 팥 (dzuki en) 및차조 (millet) 추출물처리에의한면역활성에미치는영향력을알아본결과, 태음인과소음인의혈액에서분리한림프구에서팥과차조추출물처리가콩추출물보다세포생존율이더증가하였으나콩과팥추출물은통계학적유의적차이는나타나지않았다 (Fig. ). 콩추출물처리는소양인의세포생존율이태음인과소음인보다높았다 (Fig. ). 태음인, 소양인그리
생식의체질맞춤형면역활성 9 d ontrol dzuki en Teumin Soyngin Soeumin ontrol dzuki en Soyen Millet Soyen Millet 여보면, 태음인과소음인의면역활성을위해서는 가지추출물들중팥과차조섭취가좋고, 소양인에게좋은음식은콩이라는것을알수있었다. Purev 등 () 과 hoi와 Oh() 의연구보고에의하면식품의종류에따라개인적면역활성의차이와체질별면역활성의차이가있다고하였는데본연구결과와유사하였다. 콩을주원료로한발효식품인간장에서분리한다당은 Ig 함량과 IL-6 증가에의해장관면역증진효과가있는것으로보고되었고 (5), Lee 등 (6) 은된장의면역반응으로위장관도에서 T-림프구의강한면역반응과공장과결장에서 NO 생성에관련하는 NOS의변화를알아보았다. d Teumin Soyngin Soeumin Teumin Soyngin Soeumin ontrol dzuki en Soyen Millet Fig.. Effets of 7% ethnol extrts from soyen, dzuki en, nd millet on ell prolifertion, NO nd TNF-α protein of lymphoytes or mrophges isolted from the lood of Teumin, Soyngin, nd Soeumin volunteers. The inrese of immunostimultory tivities in the treted ells ws lulted s the rtio of the orresponding men vlue of the ontrol ells. Vlues re men±stndrd devition (n=6~9). Men vlues with different letters (-d) on the rs in the sme onstitution re signifintly different (P<.5) ording to Dunn's multiple rnge test. 고소음인의혈액에서분리된대식세포에콩, 팥그리고차조추출물처리에의한 NO 생성량과 TNF-α 단백질생성량변화는세포생존율의변화와유사한경향을나타내었다 (Fig., ). 태음인과소음인의혈액에서분리한면역세포는팥추출물과차조추출물그리고소양인의혈액에서분리한면역세포는콩추출물이다른추출물보다세포생존율, NO 생성량그리고 TNF-α 단백질생성량이높았다. 세포증식율, NO 생성율증가및 TNF-α 단백질수준증가율결과를종합하 가지, 무및당근추출물의면역활성 Fig. 은태음인, 소양인그리고소음인혈액에서분리한면역세포 ( 림프구, 대식세포 ) 에가지 (eggplnts), 무 (rdish) 및당근 (rrot) 추출물처리에의한면역활성에미치는영향력을나타낸것이다. 태음인과소음인의혈액에서분리된림프구에무와당근추출물을처리하면가지추출물처리보다더높은세포증식율을나타내었고, 소양인은가지와무추출물이당근추출물보다림프구증식율을더증가시켰다 (Fig. ). 가지, 무그리고당근추출물을태음인, 소양인그리고소음인의혈액에서분리된대식세포에처리하여 NO 생성량과 TNF-α 단백질생성량을알아본결과세포증식율과유사한경향을나타내었다 (Fig., ). 즉태음인과소음인은무와당근추출물을처리한군이가지추출물처리군보다더효과적으로 NO와 TNF-α 단백질생성량을증가시켰고, 소양인의혈액에서분리된대식세포에가지와무추출물을각각처리한군은당근추출물처리군보다 NO와 TNF-α 단백질생성량이높았다. 따라서가지는태음인과소음인보다는소양인에게좋은음식이고당근은태음인과소음인같은음인에게좋은음식이며, 무는체질과상관없이모든사람들에게좋은음식인것으로생각된다. 마늘과흑마늘연구에서마늘과흑마늘은림프구의세포증식율증가및대식세포의 NO와 TNF-α 단백질생성량을증가에의해면역활성을증가시켰다 (). 또한마늘은체질에영향을나타내지만흑마늘은체질과관계없이모든사람들에게유익한음식이라보고한연구결과 () 는본연구에서체질에영향을주는음식과체질에상관없이모든체질에유익한음식이있다는결과와유사하였다. 표고, 양송이및목이버섯추출물의면역활성태음인, 소양인그리고소음인혈액에서분리한면역세포 ( 림프구, 대식세포 ) 에표고버섯 (Lentinus edodes), 양송이버섯 (grius isporus) 및목이버섯 (uriulri uriul-jude) 추출물처리에의한면역활성에미치는영향력을알아본결과 (Fig. ), 표고버섯과목이버섯추출물은태음인과소음인의혈액에서분리한림프구의세포증식율을소양인의그것보다높게증가시켰으나, 소양인의림프구의
오성윤 정미자 최재호 오덕환 ontrol Rdish Eggplnts rrot ontrol grius isporus Lentinus edodes uriulri uriul-jude Teumin Soyngin Soeumin Teumin Soyngin Soeumin 5 ontrol Rdish Eggplnts rrot 5 ontrol grius isporus Lentinus edodes uriulri uriul-jude Teumin Soyngin Soeumin Teumin Soyngin Soeumin 5 ontrol Rdish Eggplnts rrot ontrol grius isporus Lentinus edodes uriulri uriul-jude Teumin Soyngin Soeumin Fig.. Effets of 7% ethnol extrts from eggplnts, rdish, nd rrot on ell prolifertion, NO nd TNF-α protein of lymphoytes or mrophges isolted from the lood of Teumin, Soyngin, nd Soeumin volunteers. The inrese of immunostimultory tivities in the treted ells ws lulted s the rtio of the orresponding men vlue of the ontrol ells. Vlues re men±stndrd devition (n=6~9). Men vlues with different letters (-) on the rs in the sme onstitution re signifintly different (P<.5) ording to Dunn's multiple rnge test. Teumin Soyngin Soeumin Fig.. Effets of 7% ethnol extrts from Lentinus edodes, grius edodes, grius isporus, uriulri uriul-jude on ell prolifertion, NO nd TNF-α protein of lymphoytes or mrophges isolted from the lood of Teumin, Soyngin, nd Soeumin volunteers. The inrese of immunostimultory tivities in the treted ells ws lulted s the rtio of the orresponding men vlue of the ontrol ells. Vlues re men± stndrd devition (n=6~9). Men vlues with different letters (-) on the rs in the sme onstitution re signifintly different (P<.5) ording to Dunn's multiple rnge test. 세포증식율은양송이버섯추출물처리에의해가장높게증가하였다 (Fig. ). NO 생성량및 TNF-α 단백질생성량증가를알아보기위해서는이들추출물을태음인, 소양인그리고소음인의혈액에서분리된대식세포에처리한결과세포생존율과유사한경향을나타내었다 (Fig., ). 표고버섯과목이버섯추출물처리군은세포증식율, NO 생성량및 TNF-α 단백질생성량이소양인에서분리된면역세포에서보다태음인과소음인에서분리한면역세포에서더높이증가되었고, 소양인의면역세포에양송이버섯추출 물을처리했을때다른체질에서분리된면역세포에처리한것보다더높았다 (Fig. ). 따라서표고버섯과목이버섯은태음인과소음인에게좋은음식이고양송이버섯은소양인에게좋은음식인것으로생각된다. 차가버섯으로부터분리된분획물의장관면역활성및대식세포활성을알아본결과중성당과소량의산성당을포함한다당류가면역활성을나타내는것으로보고되었다 (7). 따라서표고, 양송이및목이버섯추출물에함유된다당류의종류들이체질의면역차이에관여할수있을것이라추정된다.
생식의체질맞춤형면역활성 생식제품개발을위한혼합원료의면역활성 생식원료의연구결과를바탕으로생식제품개발을위한혼합원료를제조하였고이들혼합원료의면역활성을알아보았다. 즉태음인, 소양인그리고소음인혈액에서분리한면역세포 ( 림프구, 대식세포 ) 에배합비 6(Mix 6) 추출물을처리하여세포증식율, NO 생성량및 TNF-α 단백질생성량을알아본결과는 Fig. 5와같다. 태음인의혈액에서분리된림프구와대식세포에배합비 6의추출물을각각처리한결과배합비 과 의추출물이다른추출물보다더높은림프구증식율을나타내었다. ontrol Mix Mix Mix Mix Mix 5 Mix 6 Teumin Soyngin Soeumin d ontrol Mix Mix Mix Mix Mix 5 Mix 6 Teumin Soyngin Soeumin ontrol Mix Mix Mix Mix Mix 5 Mix 6 대식세포에서분비된 NO 생성량과 TNF-α 생성량도배합비 과 의추출물처리군이다른처리군보다높았다. 배합비 과 를처리한소양인의혈액에서분리된림프구와대식세포는다른처리군보다림프구증식율이높았고, 대식세포의 NO 생성량과 TNF-α 단백질생성량도다른처리군보다배합비 과 추출물처리군에서높았다. 소음인의혈액에서분리한림프구와대식세포에배합비 6의추출물을각각처리한결과배합비 5와 6이다른처리군보다림프구증식율, 대식세포의 NO 생성량과 TNFα 단백질생성량이증가하였고, 특히배합비 6 추출물처리는세포증식율, NO 생성량과 TNF-α 단백질생성량모두다른처리군보다유의적으로증가하였다. 따라서태음인의면역력증진을위해서는배합비 (Mix : 쌀 7%, 팥 %, 무 5%, 표고 5%) 과배합비 (Mix ; 쌀 6%, 팥 %, 무 %, 표고 %) 가적당하고특히무와표고버섯의비율이높은배합비 가배합비 보다태음인의면역증진에더좋은배합비로판단된다. 소양인의면역력증진을위해서는배합비 (Mix : 보리 7%, 콩 %, 가지 5%, 양송이 5%) 과배합비 (Mix : 보리 6%, 콩 %, 가지 %, 양송이 %) 가적당하고특히가지와양송이버섯비율이높은배합비 가배합비 보다소양인의면역증진에더좋은배합비로판단된다. 소음인의면역력증진을위해서는배합비 5(Mix 5: 율무 7%, 팥 %, 당근 5%, 목이 5%) 와배합비 6(Mix 6: 율무 6%, 팥 %, 당근 %, 목이 %) 이적당하고특히당근과목이버섯비율이높은배합비 6이배합비 5보다소음인의면역증진에더좋은배합비로판단된다. Seo 등 (8) 의연구에서고지방식이로유도된비만마우스에게옥수수수염, 팥싹, 표고버섯및청고추혼합물을섭취시켰을때몸무게감소와지방세포크기가감소되었으므로이들혼합물섭취가항비만효과를나타낸다고보고하였다. Seo 등 (8) 연구결과와본연구결과에서최적배합비에의한혼합물섭취가다양한영양소제공, 건강기능성효과상승, 맛의상승효과등다양한장점을제공할수있으므로생식개발을위한혼합비연구는생식의상업화를위해반드시필요한연구라는것을알수있었다. 요약 Teumin Soyngin Soeumin Fig. 5. Effets of 7% ethnol extrts from Mixture ~6 (Mix ~6) on ell prolifertion, NO nd TNF-α protein of lymphoytes or mrophges isolted from the lood of Teumin, Soyngin, nd Soeumin volunteers. The inrese of immunostimultory tivities in the treted ells ws lulted s the rtio of the orresponding men vlue of the ontrol ells. Vlues re men±stndrd devition (n=6~9). Men vlues with different letters (-) on the rs in the sme onstitution re signifintly different (P<.5) ording to Dunn's multiple rnge test. Mix ~6: See the Tle. 사상의학은한국고유의전통한의학으로 가지체질즉태양인, 태음인, 소음인, 소양인으로분류한다. 새로운기능성생식제품을개발하기위하여태음인 (Teumin), 소양인 (Soyngin) 그리고소음인 (Soeumin) 의혈액으로부터분리한면역세포 ( 림프구와대식세포 ) 를이용하여생식원료 ( 쌀, 보리, 율무, 콩, 팥, 차조, 가지, 무, 당근, 표고버섯, 양송이버섯, 목이버섯 ) 와생식제품의면역활성을연구하였다. 생식원료와생식제품추출물들을처리한면역세포에서세포증식율, NO와 TNF-α의증가를면역활성의지표로사용하였
오성윤 정미자 최재호 오덕환 다. 쌀 (milled rie), 팥 (dzuki en), 무 (rdish) 그리고표고버섯 (Lentinus edodes) 을태음인을위한생식원료로선택하였고, 보리 (rley), 콩 (soyen), 가지 (eggplnts) 그리고양송이버섯 (grius isporus) 을소양인을위한생식원료로선택하였으며, 율무 (Jo's ters), 팥 (dzuki en), 당근 (rrot) 그리고목이버섯 (uriulri uriul-jude) 을소음인을위한생식원료로선택하였다. 이러한결과를근거하여생식제품개발을위하여생식원료의종류와배합비율을달리하여배합비 6(Mix 6) 을개발하였다. 태음인의면역활성은배합비, 배합비, 배합비, 배합비, 배합비 5 또는배합비 6 추출물을처리한면역세포중에서배합비 (Mix ; 쌀 6%, 팥 %, 무 %, 표고 %) 추출물을처리한면역세포에서가장높았다. 소양인의면역활성은 6개의배합비 (Mix 6) 추출물중에서배합비 (Mix : 보리 6%, 콩 %, 가지 %, 양송이 %) 처리에의해최고로높았다. 배합비 6(Mix 6: 율무 6%, 팥 %, 당근 %, 목이 %) 를처리한면역세포의면역활성증가는다른 5개의추출물들 (Mix 5) 보다높았다. 따라서배합비, 그리고 6은체질맞춤형면역활성생식제품을위한혼합물로사용할수있을것이다. REFERENES. Kim GH, Prk G, Kim HN, Prk JH, Prk MS, Prk JY, Song K, Oh DH.. Effet of miroil inhiition nd hnge of hromtiity on the rw mterils of Sengsik treted with slightly idi eletrolyzed wter during storge. J Koren So Food Si Nutr : 8-8.. Kim DJ, Oh SK, Yoon MR, hun R, hoi IS, Lee DH, Lee JS, Yu KW, Kim YK.. The hnge in iologil tivities of rown rie nd germinted rown rie. J Koren So Food Si Nutr : 78-789.. Kim SY, Seo Y, Prk EJ.. The impt of ooking on the ntioxidtive nd ntigenotoxi effets of rie. J Koren So Food Si Nutr : 7-77.. Klr S, Jood S.. Effet of dietry rley β-glun on holesterol nd lipoprotein frtions in rts. J erel Si : -5. 5. Lee YH, Lee J, Im EJ, Jun W, ho HY. 9. Modultion of ethnol-indued P5 enzyme tivity nd ntioxidnt in mie y Hordeum vulgre extrt. J Koren So Food Si Nutr 8: 7-5. 6. Prk YJ, Lee YS. 988. Effet of oix on plsm holesterol nd lipid metolism in rts. Koren J Nutr : 88-98. 7. Lee JE, Suh MH, Lee HG, Yng.. hrteristis of Jo's ter gruel y vrious mixing rtio, prtile size nd soking time of Jo's ter nd rie flour. Koren J So Food ookery Si 8: 9-99. 8. Sethell KD, rown NM, Lydeking-Olsen E.. Thelinil importne of the metolite equol- lue to the effetiveness of soy nd its isoflvones. J Nutr : 577-58. 9. Messin MJ, Persky V, Sethell KD, rnes S. 99. Soy intke nd ner risk: review of the in vitro nd in vivo dt. Nutr ner : -.. Ruiz-Lrre M, Mohn R, Pgng G, Miller NJ, olwell GP, Rie-Evns. 997. ntioxidnt tivity of phytoestrogeni isoflvones. Free Rdi Res 6: 6-7.. Song S, Ko JY, Kim JI, Lee JS, Jung TW, Kim KY, Kwk DY, Oh IS, Woo KS.. hnges in pysiohemil hrteristis nd ntioxidnt tivity of dzuki en nd dzuki en te depending on the vriety nd rosting time. Koren J Food Si Tehnol 5: 7-.. hung KM.. Physiohemil properties of millet strh vrieties. Koren J Food Si Tehnol : 5-8.. Yoo TJ. 976. Food rte. Pkmyus, Seoul, Kore. p - 6.. Yoshikw K, Ingki K, Tershit T, Shishym J, Kuo S, Shnkel DM. 996. ntimutgeni tivity of extrts from Jpnese eggplnt. Muttion Res 7: 65-7. 5. Smru Y. 989. ntirinogeni effets of green or yellow vegetle. Jpn Food Si : 76-8. 6. Jo YN, Jeong HR, Jeong JH, Heo HJ.. The skin proteting effets of ethnoli extrts of eggplnt peels. Koren J Food Si Tehnol : 9-99. 7. Ohgki H, Tkym S, Sugimur T. 99. rinogeniities of heteroyli mines in ooked food. Muttion Res 59: 99-. 8. Lee SH, Hwng IG, Lee YR, Joung EM, Jeong HS, Lee H. 9. Physiohemil hrteristis nd ntioxidnt tivity of heted rdish (Rphnus stivus L.) extrts. J Koren So Food Si Nutr 8: 9-95. 9. Yoo JK, Lee JH, ho HY, Kim JG.. hnge of ntioxidnt tivities in rrots (Duus rot vr. stiv) with enzyme tretment. J Koren So Food Si Nutr : 6-67.. Surenjv U, Zhng L, Xu X, Zhng X, Zeng F. 6. Effets of moleulr struture on ntitumor tivities of ( )-βd-gluns from different Lentinus edodes. rohydr Polym 6: 97-.. Yng K, Kim DH, Jeong S, Ds S, hoi YS, Shin JS, Lee S, Song H.. Hypoglyemi effet of Lentinus edodes exo-polymer produed from sumerged myelil ulture. iosi iotehnol iohem 66: 97-9.. Kir Y, Ymguhi M, Kimur S. 987. Effet of shiitke (Lentinus edodes) nd mitke (Grifol frondos) mushrooms on lood pressure nd plsm lipids of spontneously hypertensive rts. J Nutr Si Vitminol : -6.. Ng ML, Yp T.. Inhiition of humn olon rinom development y lentinn from shiitke mushrooms (Lentinus edodes). J ltern omplement Med 8: 58-589.. Kim H, You J, Jo Y, Lee Y, Prk I, Prk J, Jung M, Kim YS, Kim S.. Inhiitory effets of Lentinus edodes nd rie with Lentinus edodes myelium on dietes nd oesity. J Koren So Food Si Nutr : 75-8. 5. Lee MR, Oh DS, Wee J, Yun S, Jng S, Sung K.. nti-oesity effets of Lentinus esodes on oese mie indued y high ft diet. J Koren So Food Si Nutr : 9-99. 6. Oh HS, Hm SS. 99. ntimutgeni effets of enzymti rowning retion produts of polyphenol ompounds y polyphenoloxidse derived from mushroom (grius isporus). Koren J Food Si Tehnol : -6. 7. Hn MJ, e E, Rhee YK, Kim DH. 996. Effet of mushrooms on the growth of intestinl lti id teri. Koren J Food Si Tehnol 8: 97-95. 8. hng JS, Kim HJ, e JT, Prk SH, Lee SE, Kim OM, Lee KR. 998. Inhiition effets of uriulri uriuljude methnol extrt on lipid peroxidtion nd liver dmge in enzo()pyrene-treted mie. J Koren So Food Si Nutr 7: 7-77. 9. Hm SS, Kim DH, hoi KP, Lee DS. 997. ntigenotoxi effets of methyl lohol extrts from uriulri mesen-
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