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원이시중유통떡류의안전성을조사한결과 [5] 대장균과 Bacillus cereus가검출되는등위생상태가취약한것으로나타났다. HACCP(Hazard Analysis Critical Control Point) 시스템이란식품의원 부자재입고 / 보관, 전처리, 제조 가공, 보관, 출하의전과정에서식품에위해요소가오염되거나증식또는혼입되는것을방지하기위하여각과정을중점적으로관리하는시스템을말한다. 국내외에서 HACCP 시스템을식품에적용하기시작하였고, 현재우리나라의경우빙과류를포함한어육가공품중어묵류, 냉동수산식품중어류, 연체류, 조미가공품, 냉동식품중피자류, 만두류, 면류 ( 국수, 냉면당면, 유탕면류 ), 빙과류, 비가열음료 ( 녹즙 ), 레토르트식품등에대하여 2006년부터연차적으로 HACCP를의무적용하고있다 [6]. 현재까지는기후변화에따른떡류의미생물학적위해관리를위한권역별모니터링 [7], 떡류의제조공정별미생물학적오염도평가 [8] 와 HACCP 시스템을적용한대형떡류제조업체의제조공정상미생물학적위해도를분석하여떡류제조공장의미생물학적안전성확보에기여하며, 나아가소규모제조업체의품질관리기준설정및위생수준향상을위한기초연구가있다 [9-10]. 따라서본연구는서울지역의소규모떡생산공장의 HACCP시스템구축을위하여작업공정도작성, 원료및공정별미생물학적위해분석, 한계기준설정과제품의안전을확보할수있는개선방향을설정하여떡에대한자주적 HACCP 시스템구축을위한미생물학적위해분석자료로활용하고자한다. 2. 재료및방법 2.1 재료및시료채취방법 2.1.1 재료구입본연구에사용된떡과시료들은 2012년 9월 12일~ 2013년 2월 13일까지서울시용산구서계동소재에있는 KB 업체에서구입하였다. 2.2 떡류의제조공정도작성거피고물, 동부고물, 녹두고물, 대추 밤채고물과붉은팥고물을이용한콩설기, 가래떡, 감자송편, 증편, 콩찰떡및두텁떡의제조공정은 Fig. 1과같다. HACCP 시스템은식품제조 가공과관련된미생물학적위해요소를원료의입고부터제품의출하까지모든공정단계들을파악하여공정흐름도를작성하고각공정별주요가공조건의내용을기재하여야한다 [11]. 2.3 미생물수측정떡의주원료인멥쌀, 찹쌀그리고울타리콩과제조시설의표면오염도측정및작업자에대한일반세균수 (Standard plate count) 와 Coliform group, Escherichia coil O157:H7,, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Clostridium perfrigens등의미생물수는식품공전일반실험법미생물시험법 [12] 에준하여측정하였다. 2.4 고물및떡의증자전, 후미생물의변화고물류및떡의미생물학적위해요소를제거하거나감소시킬수있는증자전, 후의병원성미생물을확인하기위하여살모넬라, 황색포도상구균, 장염비브리오균, 리스테리아모노사이토제네스, 대장균, 여시니아엔테로콜리티카, 바실러스세레우스 (1g당), 클로스트리디움퍼프리젠스 (1g당) 을시험하였다. 미생물검사는식품공전 [12] 미생물시험법에준하여시험하였다. 2.5 공중낙하균 ( 일반세균수, 대장균, 진균수 ) 측정 1ml의 0.9% 생리식염수를각각의일반세균수와대장균군, Yeast & Mold plate count 건조필름배지 (3M Microbiology Products, St, Paul, MN, USA) 에분주하고각작업실에 15분간방치하여접종한후일반세균수는 35±1 에서 48시간배양한후생성된붉은집락수를계산하고, 그평균집락수에희석배수를곱하여일반세균수로하였으며, 대장균군수는의측정은대장균군측정용 3M 배지에 35±1 에서 24±2시간배양한후생성된붉은집락중주위에기포를형성하고있는집락수를계산하고그평균집락수에희석배수를곱하여대장균군수를산출하였다. 진균수 (Yeast & Mold plate count) 는 25 에서 7일간배양한후실모양의전형적인진균특징을갖는집락수를계산하고그평균집락수에희석배수를곱하여진균수 (CFU/plate) 로하였다. 2.6 제조설비및기구의표면오염도분석제조설비및기구의표면오염도를검사하기위하여성형기, 작업판, 제분기, 칼과도마를 Swab법으로채취하여일반세균수, 대장균과 Staphylococcus aureus 검사를실시하였다. 2.7 작업자의위생상태종업원의손바닥의일정면적 (100 cm2 ) 을일정량 (1~5mL) 의멸균인산완충희석액으로적신멸균거즈와 5793

한국산학기술학회논문지제 14 권제 11 호, 2013 Raw materials Subsidiary materials Water Packaging materials Raw materials of PE(polyester), Agricultural Waterworks powder cardboard box Storage Storage Storage Storage Weighing Washing Maceration Grinding Sieving Mixing Put rice in a caldron Steaming CCP1 Temperature : 97±2, Time : 30±2min Cooling In packaging Detectors of metal CCP2 Fe, SUS more than 2mm non-detection Out packaging Storage/Delivery [Fig. 1] Diagram for processes of rice cakes. 면봉등으로채취하여일반세균수, 대장균과 Staphylococcus aureus 검사를실시하였다. 3. 결과및고찰 3.1 떡류의제조공정도작성 일반적인떡제조업체의제조공정을참고로하여공정도를작성하였으며, 떡의원료농산물 ( 맵쌀, 찹쌀, 팥등 ), 부재료, 용수와포장재료에입고, 보관, 계량, 세척, 불림, 분쇄, 체선별, 혼합, 시루작업, 증자, 내포장, 금속검출, 외포장, 보관및출하공정에대하여 Fig. 1과같이작성하였다. CCP-1B는증자공정으로서온도는 97±2, 시간 : 30±2분에품온은 95 이상으로위해미생물을감소시키는동시에전분을호화시키는공정이다. CCP-2P는금속검출공정으로떡제품의금속이물 (Fe 2mmφ, SUS 2mmφ 이상 ) 를검출할수있는공정이었다. 이는유산균을함유한녹즙의 HACCP시스템적용을위한미생물학적위해도평가 [13], 식초절임무의 HACCP 시스템적용을위한미생물학적위해분석 [14] 에관한연구에서와같이위해미생물과금속성이물을제거할수있는공정이 CCP로결정되었으며, 이를통해서생물학적위해요소와물리적위해요소를제거또는감소시킬수있는공정이다. 5794

3.2 농산물의병원성미생물평가 떡의주원료인멥쌀, 찹쌀그리고울타리콩은밭에서재배되어탈곡과도정을거처과피를제거한후공장에입고된다. 입고된원료농산물의미생물분석결과는 Table 1과같다. Aerobic Plate Count, Coliform, Salmonella spp., E. coli O157:H7, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Clostridium perfringens을시험한결과멥쌀, 찹쌀그리고울타리콩에서 Aerobic Plate Count 균수가 3.10 10 3 CFU/g, 1.10 10 3 CFU/g 과 1.40 10 3 CFU/g 검출되었으며, 나머지병원성미생물은모두검출되지않았다. 따라서원료로사용되는멥쌀과찹쌀그리고울타리콩은미생물학적으로는비교적안전하였으며, 떡류의제조공정별미생물학적오염도평가에관한연구에서원재료의미생물학적오염도분석결과 [8] 와유사한결과를보였다. 또한세척전명일엽, 케일, 돌미나리그리고당근에대한 Coliform group 을실험한결과 [15] 에서도 7.50 10, 6.60 10, 5.33 10 그리고 5.47 CFU/mL 가검출된것과비하면미생물학적으로는안전한결과를나타냈다. [Table 1] Microbial contamination levels of raw materials for rice cake products Aerobic Plate Count (CFU/g) 3.1 10 3 Rice Glutinous rice Hedge bean E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens Aerobic Plate Count (CFU/g) 1.1 10 3 E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens Aerobic Plate Count (CFU/g) 1.4 10 3 E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens 3.3 고물의증자전, 후미생물의변화 고물류의미생물학적위해요소를제거하거나감소시 킬수있는증자전, 후의병원성미생물을확인하기위하여거피고물, 동부고물, 녹두고물, 대추 밤채고물그리고붉은팥고물에대한 Aerobic Plate Count, Coliform,, E. coli O157:H7, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Clostridium perfringens을시험한결과는 Table 2, 3, 4, 5와 6과같다. 증자전거피고물, 동부고물, 녹두고물, 대추 밤채고물그리고붉은팥고물에대한 Aerobic Plate Count 실험결과는 8.97 10 4, 8.80 10 3, 1.77 10 4, 7.77 10 4 와 9.03 10 4 검출되었으며, Coliform은 9.03 10, 4.33 10, 4.67 10, 1.03 10와붉은팥고물에서는검출되지않았으며, 증자후모든고물에서모든미생물이검출되지않아고물에의한미생물학적위해는발견되지않았다. [Table 2] Microbial contamination levels of guppy Aerobic Plate Count (CFU/g) 8.97 10 4 guppy guppy 9.03 10 E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens Aerobic Plate Count (CFU/g) E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens [Table 3] Microbial contamination levels of cow pea Aerobic Plate Count (CFU/g) 8.80 10 3 cow pea cow pea 4.33 10 E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens Aerobic Plate Count (CFU/g) E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens 5795

한국산학기술학회논문지제 14 권제 11 호, 2013 [Table 4] Microbial contamination levels of mung beans Aerobic Plate Count (CFU/g) 1.77 10 4 mung beans mung beans 4.67 10 E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens Aerobic Plate Count (CFU/g) E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens [Table 5] Microbial contamination levels of jujube and shredded chestnut Aerobic Plate Count (CFU/g) 7.77 10 4 jujube and shredded chestnut jujube and shredded chestnut 1.03 10 E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens Aerobic Plate Count (CFU/g) E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens 3.4 떡의증자전, 후미생물의변화 떡의미생물학적위해요소를제거하거나감소시킬수 있는증자전, 후의병원성미생물을확인하기위하여 Aerobic Plate Count, Coliform,, E. coli O157:H7, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Clostridium perfringens을시험한결과는 Table 7과같다. 증자공정은 CCP-1B로서증자온도는 97±2 에서증자시간은 30±2분이상으로위해미생물을감소시키는중요한공정으로콩설기, 가래떡, 감자송편, 증편, 콩찰떡그리고두턱떡의증자전 Aerobic Plate Count는 3.37 10 6, 6.37 10 5, 5.03 10 4, 5.50 10 4, 6.37 10 3 그리고 3.07 10 5 검출되었으며, Coliform은 3.10 10 2, 2.10 10 2, 1.33 10, 7.67 10, 2.57 10 2 로나타났다. 증자후 Aerobic Plate Count는 4.0 10, 8.0 10, 4.0 10, 3.33 10 검출되었으며, 콩찰떡과두텁떡은 <10로나타났다. 그리고 Coliform과다른실험균들은모든떡에서검출되지않았다. 이는떡류의제조공정별미생물학적오염도평가의연구결과 [8] 과보다더위생적인결과를얻어다. 이는증자공정의온도와시간이병원성미생물을사멸시키는데적당한조건을갖춘것으로사료된다. [Table 6] Microbial contamination levels of red adzuki bean Aerobic Plate Count (CFU/g) 9.03 10 4 red adzuki bean red adzuki bean E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens Aerobic Plate Count (CFU/g) E. coli O157:H7 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Listeria monocytogenes Clostridium perfringens [Table 7] Aerial bacteria evaluation in working area at the factory Sample Standard plate count(cfu/plat) Coliform group(cfu/plat) Yeast and Fungal(CFU/plat) Mill room 28 1) 5 Steam room 3 Packing room 2 2 Outside packing room 1 17 Packaging material warehouse 87 12 Corridor 0 8 주 : 1) : not detected. Unit: CFU 5796

3.5 공중낙하균 ( 일반세균수, 대장균, 진균수 ) 측정떡공장작업장내의공기중의미생물을관리하기는대단히어렵다. 그이유는스팀이나물을많이사용하는제조가공특성과제품의종류에따라각특성이다르기때문이다. 제분실, 스팀실, 포장실, 외포장실, 포장자재창고, 복도에대한공중낙하균을측정한결과는 Table 7과같다. 시판떡류생산에서 HACCP Plan 개발을위한연구 [16] 에서작업장내의환경분석결과전처리실과작업테이블의총균수가 480 CFU/Plate 그리고 22 CFU/Plate 검출되어전처리실의공중낙하균수가매우높았고, 작업장별시험결과내포장실, 조미액가공실, 세척실, 보관실의미생물수는 10 CFU/Plate, 2 CFU/Plate, 60 CFU/Plate 그리고 20 CFU/Plate 가검출되었다 [14]. 유산균을함유한녹즙의 HACCP 시스템적용을위한미생물학적위해도평가에관한연구 [15] 의세척실공중낙하균시험결과에서 34.67 CFU/Plate 검출되고, 시판떡류생산시설 [16] 에서물을많이사용하는세척실이가장높게검출되었다. 이는제분실과포장자재창고에서일반세균수가 28 CFU/Plate, 87 CFU/Plate로높게검출된것과일치하였다. 하지만스팀실, 포장실과외포장실은 0 CFU/Plate, 2 CFU/Plate, 1 CFU/Plate 가장적은공중낙하균수가검 출되었다. 효모곰팡이의측정결과외포장실, 포장자재창고, 복도, 제분실, 스팀실과포장실순서로 17 CFU/Plate, 12 CFU/Plate, 8CFU/Plate, 5 CFU/Plate, 3 CFU/Plate, 2CFU/Plate 검출되었다. 따라서제분실과포장자재창고의위생관리가더필요하다는결론을얻었다. 3.6 제조설비와기구의표면오염도제조설비및기구의표면오염도를검사하기위하여성형기, 작업판, 제분기, 칼과도마의일반세균수, 대장균과황색포도상구균검사결과는 Table 8과같다. 모든시료에서대장균군과황색포도상구균은검출되지않았고, 일반세균검사결과작업판과칼에서가장많은 2.1 10 2 CFU/Cm 2, 1.2 10 2 CFU/Cm 2 검출되었고, 성형기, 제분기와도마에대한결과 1.0 10 CFU/Cm 2 이하로검출되었다. Kwon[15] 의유산균을함유한녹즙의 HACCP에관한연구에서제조시설의식중독균을검사한결과대장균군이세척과절단기에서 4.67 CFU/Cm 2, 1.67 CFU/Cm 2 검출되었고 Bacillus Cereus가 2.67 CFU/Cm 2 검출된것과는다소차이가있었다. 따라서미생물이가장적게검출되어야할작업판과칼에서가장많은일반세균이검출되었다는것은일정한주기로설비를세척및소독을실시해야한다는결론을얻었다. [Table 8] Microbiological evaluation of utensil and equipment used in product flow at the manufactory Sample Standard plate count(cfu/cm 2 ) Coliform group(cfu/cm 2 ) Staphylococcus aureus Extruder 1.0 10 1) Work board 2.1 10 2 Mill 7.6 10 2 Knife 1.2 10 2 Cutting board 주 : 1) :not detected. (<CFU/5min) [Table 9] Microbiological evaluation of employee employee Standard plate count(cfu/cm 2 ) Coliform group(cfu/cm 2 ) Staphylococcus aureus Worker 1 (Befor washing) Worker 1 washing) Worker 2 (Befor washing) Worker 2 washing) 4.1 10 2 1) <10 4.8 10 2 3.0 10 주 : 1) :not detected. (<CFU/5min) 5797

한국산학기술학회논문지제 14 권제 11 호, 2013 3.7 작업자의위생상태종업원의위생상태를분석하기위한실험결과는 Table 9와같다. 작업자 1과작업자 2는세척전에일반세균수 410 CFU/Cm 2, 480 CFU/Cm 2 대장균군은검출되지않았으며, 작업자 1, 2의손세척후에는 10 CFU/Cm 2 이하로감소하였다. 시판떡류생산시설의종사자위생상태검사에서도 3.0~3.2 10 2 CFU/Cm 2 검출되어다소많은대장균군이검출되었다 [17]. 대장균군이검출되었다는것은분변으로부터간접적으로오염되었다는것으로종사자들의지속적인개인위생관리가필요하다. 미생물에대한주기적인검사와손세척및소독에관한지속적인교육 훈련이필요하다. References [1] KFDA, 2. Rice-cake or Bread, Korea Food Standards Codex(Ⅰ), pp. 50-51, KFDA, 2012. [2] Kim, M.R., The status of Korea rice industry and the rice processing industry, Food Ind. Nutr., 16, pp. 22-26, 2011. [3] Koh, B.K., Development of the method to extend shelf life of Backsulgie with enzyme treatment, Korean J. Soc. Food Sci., 15, pp. 533-538, 1999. [4] Oh, M.H., Shin, H.C., Park, J.D., Lee, H.Y., Kim, K.S. and Kum, J.S., Effect of added trehalose and enzyme on the qualities of Backsulgie, J. Korea Soc. Food Sci. Nutr., 39, pp. 992-998, 2010. DOI: http://dx.doi.org/10.3746/jkfn.2010.39.7.992 [5] KCA, Reprot of result on the circulation in maarket of rice cake safety, 2010. [6] KFDA. Development of General Model for Hazrds Analysis at a Manufacturing Process, pp. 14-15, KFDA, 2009. [7] Choi, S.Y., Jeong, S.H., Jeong, M.S., Park, K.H., Jeong, Y.G., Cho, J.I., Lee, S.H., Hwang, I.G., Bahk, G.J., Oh, D.H., Chun, H.S. and Ha. S.D., A Monitoring for the Management of Microbiological Hazard in Rice-cake by Climate Change, J. Fd Hyg. Safety, 27(3), pp. 301-305, 2012. DOI: http://dx.doi.org/10.13103/jfhs.2012.27.3.301 [8] Jeong, S.H., Choi, S.Y., Cho, J.I., Lee, S.H., Hwang, I.G., Na, H.J., Oh, D.H., Bahk, G.J. and Ha, S.D., Microbiological Contamination Levels in the Processing of Korea Rice Cakes, J. Fd Hyg. Safety. 27(2), pp. 161-168, 2012. DOI: http://dx.doi.org/10.13103/jfhs.2012.27.2.161 [9] Yim, K.Y. and Kim, S. H., A survey on the utilization of Korean Rice-cakes and evaluation about their commercial products by housewives, Korean J. Food Cul., 3, pp. 163-175, 1988. [10] Hyo Soon Lee, The development of the HACCP Plan in korean rice cake manufacturing facilities, doctorate thesis of Dankook University, 2006 [11] KFDA,: No. 2011-24 of the KFDA, 2011. [12] KFDA, Microbe experimental methods, Korea Food Standards Codex(Ⅱ), pp. 141-193, KFDA, 2011. [13] Kwon, S.C., Microbiological Evaluation for HACCP System Application of Green Vegetable Juice Containing Lactic Acid Bacteria, Journal of the Korea Academia-Industrial Cooperation Scociety,. 12(11), pp. 4924-4931, 2011. DOI: http://dx.doi.org/10.5762/kais.2011.12.11.4924 [14] Kwon, S.C., Microbiological Hazard Analysis for HACCP System Application to Vinegard Pickle Radishes, J. Fd Hyg. Safety, 28(1), pp. 69-74, 2013. DOI: http://dx.doi.org/10.13103/jfhs.2013.28.1.069 [15] Kwon, S.C., Microbiological Evaluation for HACCP System Application of Green Vegetable Juice Containing Lactic Acid Bacteria, Journal of the Korea Academia-Industrial Cooperation Scociety,. 12(11), pp. 4924-4931, 2011. DOI: http://dx.doi.org/10.5762/kais.2011.12.11.4924 [16] Lee, H.S. and Jang, M.S., The Development of the HACCP Plan in Korean Rice Cake Manufacturing Facilities, Korean J. Food Cookery Sci., 24(5), pp. 652-664, 2008. [17] Han, M.W. Park, K.J. Jeong, S.W. and Youn, K.S., Effects of Pediocin Treatment on the Microbial Quality of Wet Noodles during Storage, Korean J. Food Preserv. June., 14(3), pp. 328-331, 2007. 이웅수 (Ung-Soo Lee) [ 정회원 ] 1978 년 8 월 : 충북대학교약학과 ( 약학석사 ) 1987 년 3 월 : 일본동경이과대학대학원약학과 ( 약학박사 ) 1979 년 6 월 ~ 현재 : 한국교통대학교식품공학과교수 < 관심분야 > 식품미생물, HACCP, 식품위생, 건강식품 5798

권상철 (Sang-Chul Kwon) [ 정회원 ] 1999 년 2 월 : 성균관대학교생명자원과학과 ( 농학석사 ) 2002 년 2 월 : 성균관대학교식품생명공학과 ( 이학박사 ) 1995 년 10 월 ~ 2011 년 2 월 : 참선진종합식품 (R&D 부장 ) 2011 년 3 월 ~ 2013 년 2 월 : 한국식품산업협회식품안전지원단 2013 년 3 월 ~ 현재 : 한국교통대학교식품공학과조교수 < 관심분야 > 발효공학, HACCP, 식품위생, 식품미생물, 식품가공 5799