大韓本草學會誌제 3 권제 1 호 (215 년 1 월 ) Kor. J. Herbology 215;3(1):51-57 ISSN 1229-1765(Print), ISSN 2288-7199(Online) http://dx.doi.org/1.6116/kjh.215.3.1.51. 대금음자가미와梨추출물배합제제가알코올로유발된간손상에미치는영향 윤대환 #, 김왕인 #, 나창수 * 동신대학교한의과대학 Effects of combination pear extract with Daekumeumjagami medication on hepatic injury induced by alcohol in mice Dae-hwan Youn #, Wang-in Kim #, Chang-su Na * Dept. of Acupoint & Meridian, Oriental Medical School, Dongshin University ABSTRACT Objectives : The effect of pear extract with Daekumeumjagami and vitamin C medication(pdv) on alcohol metabolism and hepatic injury was assessed following hepatic injury induced by alcohol in mice. Methods : The model of alcoholic hepatic injury was established by orally administration with 3 g/kg 25% alcohol in mice. PDV was orally administrated once a day for 5 days. Mice were randomly divided into 5 groups : normal group, control group, and PDV groups (PDV-A, PDV-B and PDV-C). The activities of aspartate amino transferase (AST) and alanine amino transferase (ALT) and alcohol dehydrogenase (ADH) in serum, superoxide dismutase (SOD) and catalase in liver were determined after alcohol exposure. Results : Compared with control group, treatment with PDV-B and PDV-C significantly elevated activities of ADH. Moreover, the index of hepatic injury in serum was significantly decreased by treatment with PDV-B and PDV-C in ALT activity and PDV-C in AST activity. Additionally, enhanced catalase activities in liver was found in PDV-C treated mice after exposure to alcohol. Also, WBC in blood was significantly lower by treatment with PDV-B and PDV-C. Conclusions : This study suggests that PDV treatment could enhance alcohol metabolism, and prevent hepatic injury after alcoholic hepatic injury and that this effect is likely related to its modulation on the alcohol metabolizing and antioxidant enzymes. Key words : Pear extract, Daegeumeumjagami, Alcoholic hepatic injury, ADH, aminotransferase, Antioxidants 서론 1) 간은우리몸에서가장큰기관중의하나로탄수화물, 단백질및지질대사의중추적인역할한다. 또한독성물질해독및알부민, 혈액응고성분을포함한다양한혈청단백질의생성, 담즙의생성및배설등여러기능을하는것으로알려져있다 1). 그러나간은내외요인으로인해그대사기능을상실하면여러가지간질환이발생하게된다. 특히음주, 고지방식, 감염, 중독등은간세포의변성및괴사, 지방축적, 간 효소의누출등의간손상을유도한다 2). 술은세계적으로널리음용되고있는음료이만지속적인음주는간경화증, 간암등알코올성간질환을유발할수있다 3). 음주를오랫동안지속하게되면간의 SOD, catalase 등항산화효소활성도가감소되고 4), 글루타치온이나비타민 C 등항산화물질이감소하게된다 5). 對金飮子는 太平惠民和劑局方 6) 에처음나오는처방으로 " 益氣, 健脾進食, 和胃祛痰, 自然營衛調暢 " 의효능으로酒傷을치료하는처방으로활용되고있으며, 東醫寶鑑 7) 에서 *Corresponding author : Changsu Na. Dept. of Acupoint & Meridian, Oriental Medical School, Dongshin University Tel : +82-61-33-3522 E-mail : nakugi@hanmail.net / csna@dsu.ac.kr #These two authors contributed equally to this work. #First author : Daehwan Youn. Dept. of Acupoint & Meridian, Oriental Medical School, Dongshin University Tel : +82-61-33-3527 E-mail : yhuman22@hanmail.net Wangin Kim. Dept. of Acupoint & Meridian, Oriental Medical School, Dongshin University Tel : +82-1-2623-11 E-mail : wangto9@hanmail.net Received:31 December 214 Revised:2 February 215 Accepted:2 February 215
52 大韓本草學會誌 Vol. 3 No. 1, 215 는酒食傷을치료하고, 和胃消痰한다고하였다. 대금음자에대한최근의보고로는황등8) 은대금음자가염증성장점막의치료작용이있다고하였고, 김등 9) 은알코올성간손상에유효한효과를보고한바있다. 또한이등 1) 과김등 11) 은대금음자약침이해마의신경세포생성을촉진함을보고하였다. 梨는장미과에속하는낙엽교목의과실로甘, 微酸, 寒, 無毒하고, 潤肺養心, 消痰降火, 解毒淸熱의효능을지니고있어서酒毒, 咳嗽, 心煩등을치료하는데활용되었다 12). 梨에관한최근연구로는나등 13,14) 은梨의淸心작용이있음에근거하여梨추출물을고혈압모델에적용한바유의한강압효과와혈류개선효과를보고한바있다. 또한김등 15) 은梨가消渴에활용되었음에근거하여당뇨모델에적용하여유의한회복효과를보고하였고, 김등 16,17) 은梨와한약재를배합하여항비만효과가있음을보고하였다. 梨의활용에서痰으로인한咳嗽에는梨汁을내어여기에生薑汁과蜂蜜을넣어달여서복용하는방법을사용하기도하였다 18,19). 이와같이전통적으로한의학에서는梨를약용으로사용함에있어서梨에한약재를첨가하여각종질병에활용하였음을알수있다. 이에본연구에서는梨추출물과대금음자가미배합제제가酒傷에미치는영향을관찰하고, 대금음자가미의비율에따른효과와작용을알아보고자하였다. 이를위해알코올로간손상유발후대금음자가미의비율에따른梨추출물배합제제투여후간손상과관련한각지표인혈청 AST, ALT, ADH와간조직내 SOD, catalase 및혈액학적관찰을시행한결과, 다음과같은지견을보였기에보고하는바이다. 재료및방법 1. 실험재료 1) 동물실험동물은대한바이오링크로부터구입한 3-32 g, 7주령의수컷 ICR계 mouse로, 사육실에도착한후 1주일간실험실환경을온도는 21±5, 습도는 6±1 % 로조절하여적응시킨후이용하였다. 물과사료 ( 삼양유지, 한국 ) 는실험동물이자유로이섭취하도록하였다. 2) 재료梨추출물시료의준비는나주산신고배 18 box(1 box=2 kg ) 를세척하였고, 이를분쇄기를이용하여분쇄한후압착기를이용하여추출하였다. 잔사는여별하였으며, 추출액을수조에넣고 9 에서 3시간숙성시켰다. 이어서여과기를거쳐잔사는여별한후청정한추출물약 2 리터 ( 수율, 65%) 를얻었다. 대금음자의처방구성은동의보감처방과가미내용에근거하여구성하였고갈화를추가하였으며, 각약물은동신대학교부속한방병원구입한약재를사용하였다. 1첩분량의약물내용은진피 12 g, 후박 4 g, 창출 4 g, 감초 4 g, 적복령 4 g, 사인 4 g, 신곡 4 g, 생강 4 g, 갈화 8 g으로총 48g이었다. 비타민C는특급시약 (Sigma, USA) 을사용하였으며, 비타민C의용량은성인 1일권장량 8 mg을기준으로하였다. 2. 실험방법 1) Alcohol 유발및군분류 Alcohol 유발은 Cohen 등 2) 의방법을응용하여 25% Alcohol 을실험동물의체중kg당 3 g씩동일한오전시각에 5일간구강투여하였다. 군분리는다음과같이구분하였다. Alcohol 유발하지않고무처치한군을정상군 (Normal) 으로하였다. Alcohol 유발시킨후무처치한군을대조군 (Control) 으로하였다. 梨추출물 1L와대금음자가미 1첩분량의 2%(9.6 g), 비타민C 1일권장량의 2%(16 mg ) 으로구성한군을 PDV-A 군으로하였다. 梨추출물 1L와대금음자가미 1 첩분량의 5%(24 g), 비타민C 1일권장량의 5%(4 mg ) 으로구성한군을 PDV-B 군으로하였다. 梨추출물 1L와대금음자가미 1첩분량의 1%(48 g), 비타민C 1일권장량의 1%(8 mg ) 으로구성한군을 PDV-C군으로하였다. 각군은 6마리씩배분하였다. 각비율별로梨추출물에대금음자가미와비타민C를추가하여넣어 9 수조에서 3시간동안숙성시킨후시료로사용하였다 (Table 1). Table 1. The distribution of group and content of administration Groups Normal Control PDV-A PDV-B PDV-C Administration No treatment, no alcohol No treatment following alcohol After drink alcohol for 5 days and treated mice with combination formulation A (pear extract 1ml, Daegeumeumjagami 9.6 g and vitamin C 16 mg) After drink alcohol for 5 days and treated mice with combination formulation B (pear extract 1 ml, Daegeumeumjagami 24 g and vitamin C 4 mg) After drink alcohol for 5 days and treated mice with combination formulation C (pear extract 1ml, Daegeumeumjagami 48 g and vitamin C 8 mg) 2) 시료투여 Alcohol 유발후각실험군들에게준비된각시료를 6.25 ml / kg씩 5일간구강투여하였으며, 이의양은 125 ml /6kg의 3회분량인 375 ml /6kg을기준으로하였다. 3) 채혈및혈청분리대조군및각실험군들의실험동물들을구강투여후 6일째에심장채혈하여혈액약 1. ml을얻었으며, 이를고속원심분리기 (Centricon T-42K, Italy) 에서 3,5 rpm으로 2분간원심분리를시행하여측정에사용할혈청을분리하였다. 4) 혈액검사및혈청분석채혈에의하여얻어진혈액중 1 μl를 EDTA-bottle에넣은후곧바로혈구측정기 (K-8, Sysmax, Japan) 에주입하여백혈구 (WBC), 적혈구 (RBC), hemoglobin(hgb), hematocrit (HCT) 등을각각측정하였다. 분리된혈청은측정하기전까지는 -2 에보관하였다. AST는 GOT-SL Kit(ELITech, France) 와 photometer(51, Robert Riele GmbH & Co.Germany) 를이용하여 34 nm 파장에서측정하였고, ALT는 GPT-SL Kit(ELITech, France) 와 photometer(51, Robert Riele GmbH & Co. Germany) 를이용하여 34 nm 파장에서측정하였다. ADH는 NAD-ADH Multi Assay
대금음자가미와梨추출물배합제제가알코올로유발된간손상에미치는영향 53 Vial(Sigma) 에 Glycine Buffer Reagent(Sigma)16 ml을혼합해 NAD-ADH Solution 3 ml을준비해혈청 1 μl를넣고 Photometer(51, Robert Riele GmbH & Co.Germany) 를이용하여 34 nm 파장에서측정하였다. AST(U/L) 14 12 1 8 6 4 ## ** 5) 간조직의 SOD 및 Catalase 활성측정 SOD의활성을측정하기위하여, 실험동물로부터간조직을분리하여 -7 에보관하였다. Homogenizer(JANKE & KUNKEL, ULTRA-TURRAX T25, Germany) 를이용하여조직 1 mg에 sucrose buffer(.25m sucrose, 1 mm Tris, 1mM EDTA, PH7.4) 9 μl를넣고 4 에서균질화한다음, 1, g에서 15분간 4 에서원심분리한후상층액을분리하였다. 상층액을 SOD Assay Kit-WST(Dojindo Molecular Technologies, Japan) 를사용해 Microplate spectrophotometer(bio RAD, Japan) 를이용해 45 nm에서측정하였다. Catalase 활성도를측정하기위하여, 실험동물로부터간조직을분리하여 -7 에보관하였다. Homogenizer(JANKE & KUNKEL, ULTRA-TURRAX T25, Germany) 를이용하여조직25 mg을.25 M sucrose 1 ml을넣고 2,3 rpm에서 1분간 4 에서원심분리시킨후상층액을분리하였다. 그리고이어서 9,rpm 에서 1분간 4 에서원심분리시키고 pellet을기질인 1mM H 2O 2 와 5 mm 인산칼슘완충액 (ph 7.2) 에담근후, 최종반응액이 3. ml이되게하였다. Spectrophotometer(Kontron, Italy) 를사용해 25 에서 3초간반응시키면서 24 nm파장에서 3초간에 1 mg의단백이반응하여환원시킨 H 2O 2 을측정하였다. 3. 통계처리실험성적은평균값과표준오차 (mean±standard Error) 로표시하였고, 각시료군간의통계적분석은 SPSS 14. ver. for windows을사용하였다. 각군간의통계학적분석은 One-Way ANOVA test를시행하였고사후검정은 LSD test로분석하였다. 실험의분석에서유의수준은 p<.5로설정하여검정하였다. 결과 1. AST에미치는영향알코올유발간손상에대하여대금음자가미와梨추출물배합투여가 AST 변화에미치는영향을관찰한결과, 정상군 64. ± 5.8 U/L, 대조군 11.4 ± 8.8 U/L, PDV-A 군 18.5 ± 14.9 U/L, PDV-B군 72.2 ± 14.3 U/L, PDV-C군 53.3 ± 9.2 U/L를각각나타내었다. 대조군에비하여 PDV-C 군에서유의한감소를나타내었다 (Fig. 1). 2 Nor Con PDV -A PDV -B PDV -C Fig. 1. Effect of PDV-A, PDV-B, PDV-C on AST in alcoholic ## P<.1, compared with normal group. ** P<.1 compared with control group. 2. ALT 에미치는영향 알코올유발간손상에대하여대금음자가미와梨추출물배합투여가 ALT 변화에미치는영향을관찰한결과, 정상군 22. ± 1.3 U/L, 대조군 6.2 ± 11.8 U/L, PDV-A군 36.8 ± 5.8 U/L, PDV-B 군 27. ± 2.6 U/L, PDV-C군 22.3 ± 6.7 U/L를각각나타내었다. 대조군에비하여 PDV-B군과 PDV-C군에서유의한감소를나타내었다 (Fig. 2). ALT(U/L) 8 7 6 5 4 3 2 1 # * * Nor Con PDV -A PDV -B PDV -C Fig. 2. Effect of PDV-A, PDV-B, PDV-C on ALT in alcoholic mice induced by ethanol adminstration. # P<.5, compared with normal group. * P<.5 compared with control group. 3. ADH 에미치는영향 알코올유발간손상에대하여대금음자가미와梨추출물배합투여가 ADH 변화에미치는영향을관찰한결과, 정상군 422.9 ± 27.3 mg / dl, 대조군 235.7 ± 5.5 mg / dl, PDV-A 군 265.6 ± 13.2 mg / dl, PDV-B군 331. ± 26.4 mg / dl, PDV-C 군 437.7 ± 15.2 mg / dl를각각나타내었다. 대조군에비하여 PDV-B군과 PDV-C군은유의한증가를보였다 (Fig. 3). ADH(mg/dl) 5 4 3 2 1 ## Nor Con PDV -A PDV -B PDV -C * ** Fig. 3. Effect of PDV-A, PDV-B, PDV-C on ADH in alcoholic ## P<.1, compared with normal group. * P<.5, ** P<.1 compared with control group.
54 大韓本草學會誌 Vol. 3 No. 1, 215 4. SOD에미치는영향알코올유발간손상에대하여대금음자가미와梨추출물배합투여가 SOD 변화에미치는영향을관찰한결과, 정상군 95.9 ± 3. U/mg, 대조군 1.8 ± 1.3 U/mg, 대조군 1.8 ± 1.3 U/mg, PDV-A군 97.4 ± 1.8 U/mg, PDV-B 군 98.6 ± 1.6 U/mg, PDV-C군 1.7 ± 1.1 U/mg를각각나타내었다. 대조군에비하여각실험군은유의한차이를나타내지않았다 (Fig. 4). SOD (U/mg) 12 1 8 6 4 ±.4 g/ dl, PDV-A군 15.4 ±.3 g/ dl, PDV-B군 15.1 ±.2 g/ dl, PDV-C 군 15.3 ±.3 g/ dl를각각나타내었다. HCT의경우정상군 49.4 ± 2.3 %, 대조군 46.1 ± 1. %, PDV-A 군 46.3 ± 1.1 %, PDV-B 군 46.1 ±.8 %, PDV-C 군 46.8 ±.8 % 를각각나타내었다. 대조군에비하여 RBC, HGB, HCT 의경우모두유의한차이를나타내지않았다 (Table 2). Table 2. Effect of PDV-A, PDV-B, PDV-C on WBC, RBC, HGB and HCT in alcoholic mice induced by ethanol adminstration Groups WBC (1 3 / μl ) RBC (1 6 / μl ) HGB (g/ dl ) HCT (%) Nor 1.8±.4 9.5±.2 15.4±.4 49.4±2.3 Con 4.6±.8 # 9.2±.4 15.1±.4 46.1±1. PDV-A 3.±.7 9.±.3 15.4±.3 46.3±1.1 PDV-B 2.1±.1 * 8.6±.1 15.1±.2 46.1±.8 PDV-C 2.±.5 * 8.7±.3 15.3±.3 46.8±.8 2 Nor Con PDV-A PDV-B PDV-C # P<.5, compared with normal group. * P<.5, compared with control group. Fig. 4. Effect of PDV-A, PDV-B, PDV-C on SOD in alcoholic 5. Catalase 에미치는영향 알코올유발간손상에대하여대금음자가미와梨추출물배합투여가 Catalase 변화에미치는영향을관찰한결과, 정상군 12.7 ±.9 U/mg, 대조군 9.7 ±.7 U/mg, PDV-A군 11.3 ±.8 U/mg, PDV-B 군 12.6 ± 1.9 U/mg, PDV-C 군 15. ± 1.3 U/mg을각각나타내었다. 대조군에비하여 PDV-C군에서유의한증가를나타내었다 (Fig. 5). Catalase (U/mg) 18 16 14 12 1 8 6 4 2 # Nor Con PDV-A PDV-B PDV-C Fig. 5. Effect of PDV-A, PDV-B, PDV-C on Catalase in alcoholic # P<.5, compared with normal group. * P<.5 compared with control group. 6. WBC, RBC, HGB, HCT 에미치는영향 알코올유발간손상에대하여대금음자가미와梨추출물배합투여가 WBC, RBC, HGB, HCT에미치는영향을관찰하였다. WBC의경우정상군 1.8 ±.4 1 3 / μl, 대조군 4.6 ±.8 1 3 / μl, PDV-A군 3. ±.7 1 3 / μl, PDV-B군 2.1 ±.1 1 3 / μl, PDV-C군 2. ±.5 1 3 / μl를각각나타내었으며, 대조군에비하여 PDV-B 군과 PDV-C 군에서유의한감소를나타내었다. RBC의경우정상군 9.5 ±.2 1 6 / μl, 대조군 9.2 ±.4 1 6 / μl, PDV-A군 9. ±.3 1 6 / μl, PDV-B군 8.6 ±.1 1 6 / μl, PDV-C 군 8.7 ±.3 1 6 / μl를각각나타내었다. HGB의경우정상군 15.4 ±.4 g/ dl, 대조군 15.1 * 고찰 한의학에서술은水穀의精微로만들어진것으로甘辛苦淡, 大熱한성미가있으며, 溫飮하면和中하고, 적게마시면和血行氣한다고하여적당량의음주는건강에도움이될수있다. 그러나過飮하면傷神耗血하고生痰, 濕熱을일으키며여러병을일으킬수있다고하였다. 한의학에서음주로인해발생되는질환을酒傷이라하고, 酒傷과관련된간질환은주로酒疸, 酒積, 酒癖, 酒瘕등의증후에서관찰하고있다 21). 알코올성간진환은알코올섭취로인해생성된지질과산화물인 malondealdehyde(mda) 에의한산화적손상이주요요인으로알려져있다 22). 또한알코올의섭취및그로인한염증반응은체내에서활성산소로과량전환시켜체내에서독성을발현시켜여러만성병을야기할수있다. 따라서인체에서는이러한산화적반응에대항하기위하여여러형태의항산화방어적기전이작동하고있다 23). 알코올섭취에의해간세포의유리기생성증가나항산화력감소는알코올성간질환유발과매우밀접한연관이있는것으로알려져있다. 산화적세포손상을방지할수있는항산화비타민, 글루타치온등항산화물질이알코올성간손상방어제로적용되고있다 24,25). 한약재등천연물에함유된물질은일반적으로독성반응에의한부작용이화학합성물질에비해적기때문에기능성식품및약제개발소재로한약재에대한관심이증가되고있다 26,27). 특히알코올성간손상에대한천연물연구로는지구자 28), 녹차 29) 등을이용한연구들이보고되고있다. 대금음자는 太平惠民和劑局方 6) 에처음나오는처방으로酒傷을치료하는처방으로활용되고있고약재구성으로는진피, 창출, 후박, 감초이며, 東醫寶鑑 7) 에서는酒食傷을치료하고, 和胃消痰한다고하였다. 약재구성으로는진피, 창출, 후박, 감초에적복령, 사인, 신곡을가미할수있다고하였다. 본연구에서는갈화를추가하여대금음자가미처방을구성하였다. 梨추출물에사용된梨는장미과에속하는낙엽교목의과실
대금음자가미와梨추출물배합제제가알코올로유발된간손상에미치는영향 55 로梨子, 快果라고도불리우며, 潤肺養心, 消痰降火, 淸熱解毒, 利大小便의효능 12) 이있어서호흡기계질환및대사성질환에활용되었다. 최근비만에유효한효과를보고한바있고 16,17), 또한당뇨에유효한효과 15) 가있어서대사계에유효한효과가발휘됨을보고하고있다. 항산화작용으로산화된비타민E는비타민C의도움으로환원되어재사용이가능하며, 즉비타민C는비타민E의항산화력을증강시키는것이며, 항산화제는라디칼에의한직접적산화반응또는라디칼연쇄반응을억제하는기능을가지며, 효소계와비효소계등항산화방어시스템을가지고있다 3). 이에본연구에서는梨추출물에대금음자가미의비율별배합이간손상에미치는영향을알아보고자알코올로유발된간손상생쥐의간기능, ADH, SOD, catalase 및혈액학적변화를관찰한바다음과같은결과를얻었다. 간기능에미치는영향을알아보기위하여혈청중 AST, ALT를관찰하였다. 혈청 aminotransferase 인 AST와 ALT 는오랫동안간질환진단에활용되어왔고, 다른질환과의감별등에널리이용되고있으며, 간장애, 심근경색, 간염, 지방간, 간경변증, 근질환, 간종양등에서증가된다 31,32). 梨추출물과대금음자가미를배합한제제가간손상생쥐의 aminotransferase 활성에미치는영향을관찰한결과, 대조군에비하여 AST의경우梨추출물과대금음자가미 48 g을배합한 PDV-C 군에서유의한감소를나타내었다. 또한 ALT 의경우대조군에비하여梨추출물과대금음자가미 24 g을배합한 PDV-B군과대금음자가미 48 g을배합한 PDV-C군에서유의한감소를나타내었다. 간세포손상은수송기능및세포막투과성에변화를초래하여결국세포로부터효소들을혈액으로방출시키며, 이에 AST와 ALT의순환계로의방출정도는간조직및세포의손상상태를파악할수있음을의미한다 33). 본연구에서 AST와 ALT가감소한것으로보아梨추출물과대금음자가미배합투여는간손상보호활성을촉진하는것으로사료된다. 본연구에서梨추출물은일정농도로하고대금음자가미를 9.6 g, 24 g, 48 g으로배합량을설정하여, 세가지배합량에따른변화를관찰하였다. AST와 ALT 수치의감소는대금음자가미의배합량에비례하여더욱효과적인결과를나타내었다. 즉, 대금음자가미의배합량에따라효과가상승된것으로보아, 간기능효과를높이기위해서는梨추출물에대금음자가미 48 g을배합하는것이가장효과가큰것으로사료된다. 알코올은 3분내에위에서 25% 흡수되고, 공복시에는 2 시간안에소장으로운반되어 9% 이상흡수되며, 흡수된알코올은주로간에서대사된다. 흡수된알코올은저장되지않고체내에서대사되며, 알코올이대사되는주된경로로는 alcohol dehydrogenase(adh) 에의해서 NAD+ 가 NADH로환원되면서 acetaldehyde 가되는과정이다 34). 梨추출물과대금음자가미를배합한제제가간손상생쥐의 ADH 활성에미치는영향을관찰한결과, 대조군에비하여梨추출물과대금음자가미 24 g을배합한 PDV-B 군과대금음자가미 48 g을배합한 PDV-C군에서유의한증가를나타내었다. 이는간기능 ALT와같은결과로서梨추출물에대금음자가미를 24 g 이상배합한제제에서유의한효과를발휘하는것으로사료된다. Superoxide dismutase(sod) 는반응성이높으며독성을 유발하는라디칼인 superoxide anion radical 을과산화수소수로 dismutation 시키는역할을담당하는효과적인항산화효소이다 35). 본연구에서梨추출물과대금음자가미를배합한제제가 SOD에미치는영향을관찰한결과, 대조군에비하여각실험군모두비슷한경향을보여주어梨추출물과대금음자가미배합제제는 SOD계를통한항산화작용은낮은것으로나타났다. 이는정등 36) 은 SOD 유사활성은소수의식물에서만나타난다고보고한바와같이梨추출물과대금음자가미에포함된약재가 SOD 계열에미치는작용이미미한것으로사료된다. Catalase 는과산화수소가분해되어물과산소가만들어지는반응을촉매하는효소이며간속에많이존재하는데, 해독작용즉몸에해로운물질을빠르게없애주는작용을하는효소들중의하나이다 37). 본연구에서梨추출물과대금음자가미를배합한제제가간손상생쥐의 catalase 에미치는영향을관찰한결과, 대조군에비하여 PDV-C군에서유의한증가를나타내었다. 이것으로보아梨추출물에대금음자가미함유량이높은 48 g 배합제제가활성산소를제거하는항산화작용이더효과적인것으로사료된다. 梨추출물과대금음자가미를배합한제제가혈액내변화에미치는영향을관찰한결과, 대조군에비하여 WBC의경우 PDV-B 군과 PDV-C 군에서유의한감소를나타낸바, leukocytes 계에유효하게작용하여염증성인상태가감소된것으로사료된다. 이에반하여 RBC, HGB, HCT의경우대조군과비슷한수준을나타낸것으로보아 erythrocytes 계의혈액학적소견에영향을미치는않는것으로사료된다. 본연구에서알코올로유발된간손상에대하여梨추출물과대금음자가미배합제제를투여한군은투여하지않은대조군에비하여혈청내 AST, ALT 수치의유의한감소를관찰할수있었다. 또한 ADH 활성의증가및간조직내 catalase 활성의유의성있는증가와혈액내 WBC의유의한감소를확인할수있었다. 따라서梨추출물과대금음자가미배합제제는알코올성간손상보호활성을촉진시켜간기능을회복시키는효과가있음을알수있었고, 활성산소를제거하는항산화효소를증가시켜간보호효과가있음을확인할수있었다. 이것으로보아임상에서간효소수치가증가하는간질환및산화스트레스로인한질병을치료할때梨추출물과대금음자가미배합제제를사용하여간기능을회복시킴과동시에항산화효과를높일수있을것으로사료된다. 향후, 본연구에서배추출물과대금음자가미를배합하였고, 또한비타민 C를포함시켰는데, 대금음자가미와비타민 C를분리하여각각배추출물과배합한경우의비교연구가필요할것으로사료된다. 결론 본연구에서는梨추출물과대금음자가미배합제제가酒傷에미치는영향을관찰하고, 대금음자가미의비율에따른효과를알아보기위하여알코올로간손상유발후대금음자가미의비율에따른梨추출물배합제제투여후간손상과관련한
56 大韓本草學會誌 Vol. 3 No. 1, 215 각지표인혈청 AST, ALT, ADH와간조직내 SOD, catalase 및혈액학적관찰을시행하여다음과같은결과를얻었다. 1. AST는대조군에비하여 PDV-C 군에서유의한감소를나타내었다. 2. ALT는대조군에비하여 PDV-B 군과 PDV-C 군에서유의한감소를나타내었다. 3. ADH는대조군에비하여 PDV-B군과 PDV-C군에서유의한증가를나타내었다. 4. Catalase 는대조군에비하여 PDV-C 군에서유의한감소를나타내었으며, SOD는대조군에비하여유의한차이가없었다. 5. WBC는대조군에비하여 PDV-B 군과 PDV-C 군에서유의한감소를나타내었다. 이상의결과로보아梨추출물과대금음자가미배합제제는알코올대사를향상시키고, 알코올로인한간손상방지효과가발휘되는것으로사료된다. References 1. Go MS. Clinical Application of Biochemical Liver Function Test. Dongguk J Med. 28 ; 15(2) : 48-59. 2. Kim JJ, Kim BW, Woo HZ, Kim DH, Cho SH. Eastern liver internal medicine. Seoul : Jipmoondang Press. 1986 : 27-36. 3. Willner IR, Reuben A. Alcohol and the liver. Curr Opin Gastroenterol. 25 ; 21(3) : 323-3. 4. Lee JS. Supplementation of Pueraria radix water extract on changes of antioxidant enzymes and lipid profile in ethanol-treated rats. Clin Chim Acta. 24 ; 347(1-2) : 121-8. 5. Nordmann R. Alcohol and antioxidant systems. Alcohol Alcohol. 1994 ; 29(5) : 513-22. 6. Weizhong. Taipinghuiminhejijufang. Beijing : Zhongguo Zhongyiyao Press. 1996 : 48-9. 7. Huhjoon. Donguibogam. Seoul : Yeogang Press. 23 : 168. 8. Hwang TH, Cho JH, Yim SW. The effects of Daigeumeumja against the mucosal injury of small intestine by ethanol and stress in mice. J Kor Oriental Intern Med. 23 ; 24(4) : 735-46. 9. Kim YC, Woo HJ, Kim BW. An experimental research of the efficacy of Gamidaegumeumja. Kyunghee Univ Oriental Med J. 1993 ; 16 : 7-29. 1. Lee TH, Lee EY. Effect of Daekumeumja herbacupuncture on c-fos expression in hippocampus of alcohol intoxicated rats. J Kor Acupuncture Moxibustion Soc. 26 ; 23(3) : 37-45. 11. Kim HJ, Kim EH, Lee EY. Effect of Daekumeumja herb-acupuncture on alcohol-induced suppressed cell proliferation and expression of nitric oxide synthase in hippocampus of rats. J Kor Acupuncture Moxibustion Soc. 26 ; 23(5) : 187-98. 12. Chenguiqian. Bencaogangmutongshi. Beijing : Xueyuan Press. 1992 : 1449-5. 13. Na CS, Youn DH, Choi DH, Jeong JG, Eun JB, Kim JS. The effect of pear pectin & phenolic compounds on regional cerebral blood flow, mean arterial blood pressure, heart rate and cardiac contractile force in hypertensive rat induced by 2K1C. Kor J Herbology. 23 ; 18(2) : 11-8. 14. Na CS, Youn DH, Choi DH, Kim JS. Jo CH, Eun JB. The effect of pear pectin on blood pressure, plasma renin, ANP and cardiac hypertrophy in hypertensive rat induced by 2K1C. J Kor Soc Food Sci Nutr. 23 ; 32(5) : 7-5. 15. Kim JS, Na CS. Effect of Rehmanniae radix and pear phenolic compound on the STZ-treated mice for induction of diabetes. J Kor Soc Food Sci Nutr. 24 ; 33(1) : 66-71. 16. Kim WI, Youn DH, Kim HK, Na CS. Effects of pear extracts containing herbal medicine (Lycii Fructus, Coicis Semen, Alimatis Rhizoma, and Astragali Radix) on body weight, lipid metabolism, and immune responses of rats fed with high fat diets (I). Kor J Herbology. 212 ; 27(3) : 7-13. 17. Kim WI, Youn DH, Kim HK, Na CS. Effect of pear extracts containing herbal medicine(lycii Fructus, Coicis Semen, Alimatis Rhizoma and Astragali Radix) on body weight, lipid metabolism and immune responses in rats fed high fat diets (Ⅱ). Kor J Herbology. 212 ; 27(5) : 1-1. 18. Kim CM, Shin MG, An DG, Lee KS. Complete translation chinese medicine dictionary. Seoul : Jengdam Press. 1998 : 1482-6. 19. Jeong DH. Physiological Function of Food. Seoul : Sunjin Publishers. 1998 : 19-12. 2. Cohen G, MacNAMEE D, Dembiec D. Elevation in blood acetaldehyde by pargyline during ethanol administration. Biochem Pharmacol. 1975 ; 24(2) : 313-6. 21. Lee WC. Liver internal medicine. Seoul : Oriental Medicine Research Press. 1997 : 197, 598-611. 22. Palinski W, Witztum JL. Immune responses to oxidative neoepitopes on LDL and phospholipids modulate the development of atherosclerosis. J Intern Med. 2 ; 247(3) : 371-8. 23. Willcox JK, Ash SL, Catignani GL. Antioxidants
대금음자가미와梨추출물배합제제가알코올로유발된간손상에미치는영향 57 and prevention of chronic disease. Crit Rev Food Sci Nutr. 24 ; 44(4) : 275-95. 24. Wu D, Cederbaum AI. Oxidative stress and alcoholic liver disease. Semin Liver Dis. 29 ; 29(2) : 141-54. 25. McDonough KH. Antioxidant nutrients and alcohol. Toxicology. 23 15 ; 189(1-2) : 89-97. 26. Corns CM. Herbal remedies and clinical biochemistry. Ann Clin Biochem. 23 ; 4(Pt 5) : 489-57. 27. Tapsell LC, Hemphill I, Cobiac L, Patch CS, Sullivan DR, Fenech M, Roodenrys S, Keogh JB, Clifton PM, Williams PG, Fazio VA, Inge KE. Health benefits of herbs and spices: the past, the present, the future. Med J Aust. 26 ; 185(4 Suppl) : S4-24. 28. Kim YS, Park JY, Kwon YB, Lim DW, Song MK, Choi HY, Kim HC. Hepatoprotective effects of Hovenia dulcis extract on acute and chronic liver injuries induced by alcohol and carbon tetrachloride. Kor J Herbology. 213 ; 28(4) : 25-32. 29. Jin DC, Jeong SW, Park PS. Effects of green tea extract on acute ethanol-induced hepatotoxicity in rats. J Korean Soc Food Sci Nutr. 21 ; 39(3) : 343-9. 3. Berger TM, Polidori MC, Dabbagh A, Evans PJ, Halliwell B, Morrow JD, Roberts LJ 2nd, Frei B. Antioxidant activity of vitamin C in iron-overloaded human plasma. J Biol Chem. 1997 ; 272(25) : 15656-6. 31. Molander DW, Wroblesk F, La Due JS. Serum glutamic oxalacetic transaminase as an index of hepatocellular integrity. J Lab Clin Med. 1955 ; 46(6) : 831-9. 32. Lee GN, Lee JS. Clinical Pathology Files. Seoul : Medical Culture Publishers. 1993 : 122, 151-2, 256, 278-81. 33. Zimmerman HJ, Seeff LB. Enzymes in hepatic disease In : Goodly EE (Ed), Diagnostic Enzymology. Philadelphia : Lea and Febiger Publisher. 197 : 1-38. 34. Lieber CS. Metabolism of alcohol. Clin Liver Dis. 25 ; 9(1) : 1-35. 35. Shim SI, Chung JW, Lee JM, Hwang KT, Sone J, Hong BS, Cho HY, Jun WJ. Hepatoprotective effects of black rice on superoxide anion radicals in HepG2 cells. Food Sci Biotechnol. 26 ; 15(6) : 993-6. 36. Jung SJ, Lee JH, Song HN, Seong NS, Lee SE, Baek NI. Screening for Antioxidant Activity of Plant Medicinal Extracts. J Korean Soc Appl Biol Chem. 24 ; 47(1) : 135-4. 37. Baudrimont I, Ahouandjivo R, Creppy EE. Prevention of lipid peroxidation induced by ochratoxin A in Vero cells in culture by several agents. Chem Biol Interact. 1997 ; 14(1) : 29-4.