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2 제 52 회종합학술대회개요 대회명 ( 사 ) 대한임상병리사협회제52회전국임상병리사종합학술대회 -국민과함께하는임상병리사- 일자 2014 년 5 월 30 일 ( 금 ) 09:00 31 일 ( 토 ) 18:00 장소경남창원시의창구원이대로 362 창원컨벤션센터 ( 창원시의창구대원동 123) 주최 ( 사 ) 대한임상병리사협회 / 대한임상검사과학회 주관 경상남도임상병리사회 참가비 구분 사전등록현장등록비고 회원비회원회원비회원 등록비 40,000 원 80,000 원 50,000 원 100,000 원 사전등록기간 2014 년 3 월 19 일 5 월 18 일 이수평점 4 점 초록, 포스터원고접수 5 월 10 일마감 초록접수방법 i

3 대회장안내 창원컨벤션센터 (CECO) TEL: FAX: 주소 : 경상남도창원시의창구원이대로362( 대원동 ) 교통편소개 ( 창원중앙역, 창원역, 창원버스터미널에서학회셔틀버스운행 ) 고속도로를통해오시는길 1) 남해고속도로하행 ( 서울방면 ): 동마산IC 마산, 창원방면우회전 시청방향우회전 창원육교진입 도계광장우회전 중앙중삼거리우회전 CECO 2) 남해고속도로상행 ( 부산방면 ): 창원터널 창원대로홈플러스사거리우회전 명곡로타리우회전 CECO 공항에서오시는길 리무진버스이용 : 40분소요 (20분간격운영 ) 기차역에서오시는길 (KTX) 창원역 : 10~15분소요 ( 시내버스 :102,103,,109,113,703,710,757) 창원중앙역 : 5~10분소요 ( 시내버스 : 220,221) 시외버스터미널에서오시는길 창원종합버스터미널 : 5~10분소요 ( 시내버스 :103) CECO 경유시내버스 : 102,103,109,113,155,212,221,506,751 ii

4 대회장 안내도 iii

5 제 52 회종합학술대회일정표 날짜항목시간장소 등록접수 09:00~20:00 컨벤션홀로비 ( 컨벤션 3 층 ) 학생포럼발표 (10 개대학 ) 10:00~12: 호 ~602 호 (6 층 ) 학생포럼 점심식사 12:30~13:30 제 2 전시장 (3 층 ) 시상식및폐회 13:30~14: 호 ~602 호 (6 층 ) 학술대회개회식및초청강연참가 14:20~17:40 컨벤션 1, 2, 3 홀 ( 컨벤션 3 층 ) 중식 12:00~14:00 제 2 전시실 ( 컨벤션 3 층 ) 테이프컷팅식 14:40~14:50 제 1 전시실앞로비 ( 컨벤션 3 층 ) 5/30( 금 ) 초청공연 ( 식전행사 ) 14:20~14:50 컨벤션 1, 2, 3홀 ( 컨벤션 3층 ) 개회식 15:00~15:30 개회식 컨벤션 1, 2, 3홀 ( 컨벤션 3층 ) 시상식 15:30~15:50 초청강연 15:50~17:40 컨벤션 3 층 국제심포지엄 - 한국, 일본, 대만, 싱가폴 ( 연자 8 명발표 ) 15:50~17: 호 +602 호 ( 컨벤션 6 층 ) 한 일교류공로자회의 16:00~17:00 VIP실 ( 컨벤션 3층 ) 포스터발표 ( 각분과별로진행 ) 18:00~19:00 제 1 전시장 대회장만찬및경품추첨 19:00~20:00 제 2 전시장 등록접수 09:00~16:00 컨벤션홀로비 ( 컨벤션 3층 ) 분과학회학술발표 분과학회진행 09:30~12: 호 +302 호 ( 컨벤션 3 층 ) 중식 12:30~14:00 컨벤션 1 홀 ( 컨벤션 3 층 ) 분과학회진행 14:00~16: 호 +302 호 ( 컨벤션 3 층 ) 5/31( 토 ) 전문교육미생물전문임상병리사 09:00~13:00 컨벤션 3 홀 ( 컨벤션 3 층 ) 중소병원특별세션 중소병원검사 14:30~16:30 검사실인증평가 14:30~16:30 컨벤션 2 홀, 3 홀 ( 컨벤션 3 층 ) 폐회식 학생포럼대상발표포스터학술상시상 경품추첨및폐회식 16:30~17:30 컨벤션 1 홀 ( 컨벤션 3 층 ) iv

6 대회사 전국의임상병리사여러분반갑습니다. 그리고검사의학학술함양이라는공통된목표를가지고이번대회에참석하여주신일본, 대만, 싱가폴대표단여러분환영합니다. 우리경남임상병리사회가 2014년제 52회전국임상병리사종합학술대회를 22 년만에개최하게되어기쁘고영광스럽게생각합니다. 학회장소인경남창원은우리나라최초의계획도시로기계산업의요람이자쾌적한환경을자랑하는도시입니다. 2010년에는인근지역인마산, 진해와통합하여국토동남권의중추적인역할을수행하는도시로주변에먹을거리, 볼거리가도처에산재해있습니다. 행사기간학회참여와더불어여유로운마음으로관광도즐기고가시기바랍니다. 이번종합학회는과거의대회보다발전적인변화를주고자합니다. 해외의발전적인학술교류와토론을위해한국, 일본, 대만, 싱가폴등아시아 4개국이참여하는국제심포지엄을처음으로개최합니다. 또한 국민과함께하는임상병리사 라는슬로건아래그동안학회가임상병리사들만의행사에서벗어나학술대회기간시민들에게검사의학을홍보하는무료검사, 헌혈행사, 언론홍보등도시행하고자합니다. 그리고그동안의종합학회가금요일에참여할수있는회원만의학회라는이미지를불식시키고주말에근무하는회원들도참여할수있도록토요일오후늦게까지학회를진행합니다. 토요일오후에는중소병원회원들의주제에맞는강좌를선정하여중소병원특별세션을운영하는등회원들의다양한요구에부응하고자합니다. 이러한종합학회운영은전에볼수없었던새로운변화입니다. 모쪼록이번학회를통하여발전하고있는검사의학학술교류는물론국내유수의업체와미국업체등이전시하고있는첨단의료검사장비도견학하는유익한시간이되길바랍니다. 이번종합학회가매년이어질종합학회발전의시금석이되길기원합니다. 참여하신모든회원님과외국대표단및참가자여러분께다시한번감사의인사를드립니다. 감사합니다 년 5 월 제52회전국임상병리사종합학술대회대회장경남임상병리사회장안찬 v

7 축사 세계적인명품계획도시창원에서제52회전국임상병리사종합학술대회를개최하게되어영광스럽게생각합니다. 이번학술대회주제는 국민과함께하는임상병리사 입니다. 우리는보건의료분야에서국민보건과밀접하게연관되어있는만큼, 이번학술대회를통해임상병리사의역할과위상을알림으로써임상병리사직역에대한인지도를향상하겠다는의지를반영하였습니다. 이를위해대국민헌혈캠페인, 국제콜로퀴움, 분과학회별특강, 중소병의원심포지엄등기존과는차별화된프로그램이마련되었습니다. 이같이긍정적이고혁신적인변화는지난 1년동안애써주신경상남도임상병리사회안찬회장님을비롯한조직위원회는물론, 창원시장님과시관계자분들의전폭적인지지와그동안의노고덕분에가능했습니다. 감사드립니다. 또한학술대회개최를축하하고전세계임상검사분야의고견을나누기위해먼길을마다하지않고기꺼이참석하여주신일본, 대만, 싱가포르참가자여러분들께도감사의인사를전합니다. 회원여러분들께서도선진국가의사례를통해임상병리학의새로운비전과전문성신장을고민해보시는의미있는시간을가지시길바랍니다. 우리협회는최근감염관리전담인력법률안수정, KOLAS 인정제도, 의료기사면허재신고등많은현안에직면해있습니다. 우리임상병리사들의현재와미래가직결되는사안들인만큼, 회원여러분들의많은성원과지지가절실한상황입니다. 오는 2017년에는 AAMLS 아시아학회가한국에서개최됩니다. 이는한국임상병리사들의훌륭한역량을널리알리는기회가될것입니다. 성공적인개최를위해서는관심과참여가반드시필요합니다. 2014년이시작할때, 우리협회는회원여러분들께성장의 기회 를약속드렸습니다. 본협회는진출분야와전문성보장을위해가장최전방에서최선의노력을하고있습니다. 앞으로도협회의목적, 철학을잊지않고회원여러분들의비상을돕겠습니다. 이자리에참석하신모든분들의가정에건강과행복이늘가득하길바랍니다. 감사합니다. 2014년 5월 30일대한임상병리사협회회장양만길 vi

8 제 52 회종합학술대회초록집 ~31 목차 초청강연 임상병리검사실문서관리 3 주세익 ( 서울대학교병원진단검사의학과 ) 화이부동 ( 和而不同 ) 의사회 4 이원로 ( 인제대학교총장 ) 구연발표 [ 혈액검사학 ] 일반혈액검사의측정오류해결 7 최미옥 ( 울산대학교의과대학서울아산병원 ) [ 미생물검사학 ] 항산균염색및판독 8 황유연, 송동준, 허희재, 이남용 ( 삼성서울병원진단검사의학과 ) 결핵균검사실의안전관리 9 윤남섭 ( 서울아산병원진단검사의학과 ) [ 임상화학검사학 ] 정도관리기초통계와의사결정 10 남현수 ( 가톨릭대학교의정부성모병원 ) [ 면역검사학 ] 검사반응의측정 (measurement) 과보고 (reporting) 11 임승택, 오흥범 ( 서울아산병원진단검사의학과 ) [ 생리학검사학 ] 심전도재미붙이기 12 최소라 ( 삼성서울병원심전도실 ) [ 임상검사정보학 ] 울산지역병, 의원임상병리사의검사신뢰증대를위한정도관리사업시행에관한결과분석 13 김승용, 김왕희, 문홍식 ( 울산동강병원진단검사의학과 ) vii

9 [ 수혈검사학 ] 수혈적합성검사 14 최범열 ( 대전보건대학교임상병리과 ) KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM The Status of ISO Accreditation in Taiwan R.O.C 17 Tsung I Lin MS (Director, Department of General Clinical Laboratories, Kaohsiung Veterans General Hospital, Taiwan) ISO/TC 212: An Update 18 Eddie Han San ANG (SAMT, Singapore) Japanese BLS at present and in the future 19 Hironori Katayama 1, Kyoko Komtsu 2, Yoshifumi Miyajima 2 ( 1 Department of pathology, Nippon Medical school Tama-Nagayama Hospital, Japanese, 2 Japanese Foundation for Cancer Research Clinical pathology center chief technologists, Japanese) From MT Education System to ASCPi Certificate in Taiwan 20 Yih-Hsin Chang (Department of Biotechnology and Laboratory Science in Medicine National Yang-Ming University, Taiwan, Republic of China) Point-of-care detection of dengue using carbon nanotube-based labels 21 Adrian YEO 1, TAN Eng Lee 2, Annabel ANG 1 ( 1 School of Chemical & Life Sciences, Singapore Polytechnic, Singapore, 2 Centre for Biomedical & Life Sciences, Singapore Polytechnic, Singapore) Reverse blot hybridization assay Sepsis-ID test for simultaneous identification of pathogens and antimicrobial resistance genes of meca, vana and vanb from blood culture bottles 22 Soon Deok Park (Wonju Severance Christian Hospital, Dept Laboratory Medicine, Korea) Biological Agents and Toxins Act (BATA): Development and Enforcement of Biosafety and Biosecurity in Singapore 23 Tin Tun (School of Biological Sciences, Nanyang Technological University, Singapore) The Role of Medical Technologists in Infection Control-Taiwan Experience 24 Wu 1, Tsu-Lan MS 2 ( 1 Director, Dept. of Medical Laboratories, Administrative Center, Chang Gung Foundation, Taiwan, 2 Professor, Dept. Medical Biotechnology and Laboratory Science, College of Medicine, Chang Gung University, Taiwan) Development of a Rapid Biosensor for Viral Infection 25 Yu Jia LIM (School of Chemical & Life Sciences, Singapore Polytechnic, Singapore) 포스터발표 [ 혈액검사학 ] HG-01 정상인의호중구에서천식폐세척액에의한세포유주운동효과 29 Ji-Sook Lee, Na Rae Lee, Seung Yeop Baek, Eun Jeong Kim, In Sik Kim HG-02 Sysmex XE2100D 와 Sysmex XN series 에서 CBC 측정결과의상관성평가 29 김민경, 최현정, 고원석, 이재일, 안동희 viii

10 HG-03 DxH800 에서 Unghosted Cells (UGC) 을이용한 Target cells 의정량적측정 30 고광상, 박종문, 차경호, 김용구, 한경자 HG-04 심한백혈구감소증검체의백혈구감별계산 : 유효한다양한방법의비교 30 김정옥, 고광상, 박종문, 차경호, 김용구, 한경자 HG-05 Sysmex XE-5000 장비에서 IPF 검사를위한검체보관검증시험 31 권미희, 김미혜, 김주현, 이상은, 한정훈 HG-06 열대열말라리아환자의증례보고 31 문영미, 김진순, 유소영, 양진영 HG-07 새로운 Myeloperoxidase 염색시약의도입과활용경험 32 홍석호, 김소윤, 송정길, 임언주, 권형범, 이희련, 전경란, 이정녀 HG-08 인듐화합물노출근로자의백혈구수치변화 32 원용림, 최윤정, 김기웅 HG-09 검사시간지연에따른세포생존율과림프구아형비율의변화 33 노정원 HG-10 말초혈액염색체검사에서진단된 Mosaic Double Aneuploidy 중 Trisomy 8-Turner syndrome 의증례 33 양정희, 탁은영, 지옥자, 김은지 HG-11 급성골수성백혈병에서 FLT3 internal tandem duplication 정량검사법개발과임상적유용성평가 34 이건동, 김정은, 이상윤, 김정록, 유재빈, 최지선, 차경호, 김용구, 김명신 HG-12 Pallister Killian Syndrome 의증례보고 34 한재이, 이현정, 최수현, 송지원, 정유진, 장미선 HG-13 산전진단된 Double aneuploidy 35 송지원, 이현정, 최수현, 한재이, 장미선 HG-14 CML 에서확인된 complex variant Philadelphia chromosome 3 례 35 최수현, 이현정, 송지원, 한재이, 장미선 HG-15 Direct Sequencing 법을이용한선천성난청검사 (GJB2) 의희귀증례보고 36 이종민, 이연주, 김선아, 석윤미 HG 쌍의부부에서관찰되는혈액염색체이상의유형과빈도분석 36 김정수, 정은영, 서한익, 조진희 HG-17 산전염색체수이상선별을위한 QF-PCR 검사와염색체핵형분석결과의비교 37 민주영, 조상희, 서한익, 조진희 HG-18 염색체검사에서확인된 inv(y) 증례보고및문헌고찰 37 이선순, 이은희, 서한익, 조진희 HG-19 A case of an adult with Cytogenetic variant, ins(17;15)(q21;q15q22) in an APL 38 Mi-sun Jang, Cha-ja See, Hyun-jung Lee, Sun-kyung Jung HG-20 산전염색체검사에서확인된 WHS (Wolf-Hirschhorn Syndrome) 2 례 38 이현정, 한재이, 최수현, 송지원, 장미선 HG-21 혈액검체의양이혈구검사에미치는영향 39 이수연, 김은선, 김도영, 박수지, 이진희, 강효찬 ix

11 HG-22 대장암에서의현미부수체불안정성의검출 39 유재송, 강은주, 한성희 [ 미생물검사학 ] CM-01 질량분석기를이용한소변검체의직접동정 43 박강균, 신상현, 장지영, 김영식, 박연준 CM-02 C. difficile 분리용감별배지교환에따른분리율추이비교 43 김창현, 김혁, 최채호, 김주현, 최성란, 황성호, 이협우 CM-03 Clostridium difficile 동정을위한 VITEK 2 ANC Card 와 API Rapid 32A 의비교 44 박해근, 조윤정, 이내영, 박현정, 김선재, 문혜민, 신현근, 신정환 CM-04 유도객담검사를통한기관지확장증환자에서의미생물동정 44 Jae Sun Park, Won Park, Min Su Kim, Hyun Seok Lee, Chi Han Kim, Jong Taek Kim, Ji-Hun Lim, Seon Ho Lee, Sung-Ryul Kim, Joseph Jeong CM-05 9 년간혈액배양에서분리된 coagulase 음성포도알균에대한분석 45 김정규, 김현희, 최진언, 정민경, 이명옥, 조정애, 최은주, 강봉주, 신종희 CM-06 Vancomycin 내성장구균검출을위한검사법의유용성평가 45 조정애, 김현희, 최진언, 정민경, 이명옥, 김정규, 강봉주, 신종희 CM-07 대변에서장구균의 vancomycin 내성검출을위한배양과중합효소연쇄반응법의비교 46 김의량, 차민주, 이지영, 박창은, 서동환, 강봉주, 송경용, 원은정, 기승정, 신종희 CM-08 SYBR Green Real-Time PCR 방법에의한 Vancomycin 내성장알균검출 46 양병선 CM-09 그람음성간균및그람양성구균배양양성율과계절변화의관계 47 이승훈, 김은숙, 정재은, 조훈, 심효은 CM-10 Metallo-β-lactamase (MBL) 양성인경우 Extended-Spectrum β-lactamase (ESBL) 검출법 47 신상현, 송창은, 박상미, 박강균, 박연준 CM-11 ERIC-PCR 을이용한 ESBL 생성 Klebsiella pneumoniae 유전형 48 육근돌, 양병선 CM-12 Extended-spectrum β-lactamase 생성 Klebsiella pneumoniae 와 Escherichia coli 에존재하는 integrons 48 성지연, 박지은, 신혜지, 정은유, 오지은 CM-13 다제내성균 MRSA 의통계 49 허지연, 나범석, 서한익, 오귀영, 함초롱 CM-14 기관지폐세척액에서분리된 Pasteurella multocida 1 예 49 김현희, 최진언, 정민경, 이명옥, 조정애, 김정규, 강봉주, 신종희 CM-15 환자객담에서분리된 Segniliparus rugosus 50 이재진 CM-16 혈액배양에서분리된 Mycobacterium abscessus 1 예 50 김동선, 정명일, 구수진, 이상미, 함정일, 박인순, 황상현, 이도훈 CM-17 결핵균균삭 (Cord formation) 형성과 1 차약제와의연관성비교 51 정태원, 송동준, 김현영, 허희재, 이남용 x

12 CM-18 Xpert MTB/RIF (GeneXpert System, cepheid, USA) 검사법의유용성평가 51 강영진, 정태원, 주호중, 황유연, 송동준, 이남용 CM-19 Real-time PCR 과 HPLC 법을이용한비결핵항산균의동정 52 Jae Sun Park, Won Park, Ho Chan Lee, Tae Sul Yun, Joon Ho Bang, Young Sang Kim, Ji-Hun Lim, Seon Ho Lee, Sung-Ryul Kim, Joseph Jeong CM-20 결핵균과비결핵항산균의양성건수와비율 52 허지연, 황정희, 서한익, 오귀영, 함초롱 CM-21 최근 6 년간단일종합병원의임상검체에서분리된진균의분포 53 서충원, 유영빈, 김영권, 마판곤 CM-22 Ureaplasma 종의 Fluoroquinolone 내성과관련된유전자의돌연변이양상 53 조은정, 황유연, 김성현, 박제섭, 김영권 CM-23 호흡기바이러스검출용두가지시약 (Multiplex Real-Time PCR 법 ) 의검출능비교 54 박광준, 정철원, 이동욱, 이정녀, 전경란, 배혜정 CM-24 호흡기바이러스별양성률추이관찰 54 김동수, 문영현, 조아라 CM-25 식약청기준에맞춘무균검사시험법에대한고찰 55 주호중, 강영진, 정태원, 황유연, 송동준, 이남용 CM-26 Human gut microbiome 연구를위한고품질 stool gdna 제작을위한시료보관방법 55 유제권, 황영은, 하기원, 손보경, 김윤태, 김영진 CM-27 Characterization of integrons in Enterobacteriaceae isolates from chicken cecums in Korea 56 Ji Youn Sung, BongChul Kim, Ji-Eun Oh [ 임상화학검사학 ] CC-01 제 5 기국민건강영양조사결과를이용한폐경전후여성의대사증후군유병률 59 신경아, 김혜영, 이혜자 CC-02 건강검진에서 Serum Protein Electrophoresis 검사의필요성 59 권훼영 CC-03 Erythropoietin 검사의 RIA & CLIA 검사방법간비교 60 김혜림, 오영주, 이상곤 CC-04 소아청소년의성별과연령에따른 serum creatinine 농도의분포 60 권세영, 나영악 CC-05 검체용기가혈청 / 혈장포도당측정에미치는영향 61 강종원, 류재두 CC-06 DABS 유도체반응과 HPLC-UV 를이용한혈당의마이크로분석 61 이지희, 김보경, 김정선 CC-07 Tacrolimus 정량검사비특이적반응 1 예보고 62 김한나, 이정중, 김남주, 최혜순, 조봉래, 이범기, 양지은, 양광현, 이영혜, 박성미, 신미화, 차경호, 채효진 CC-08 외상환자에서혈당과알레르기와의상관성 62 이정수, 현성희, 이지숙, 김인식 xi

13 CC-09 자동화매독검사 Mediace TPLA 중화시험과 FTA-ABS IgG 일치율분석및중화시험의유용성확인 63 이동희, 최진실, 박은경, 김민진 CC-10 ICA (Immunochromatography) 방법를이용한 Urine 마약류검사에서의 cut-off 검증 63 강성호, 오영주, 이상곤 CC-11 연령에따른혈청 AMH 농도분포 64 이은영, 서한익, 김윤주, 오귀영 CC-12 LC/MS/MS 를이용한 Diisocyanates 의대사물질분석 64 백진이, 황주환, 신재훈, 이종성, 최병순 CC-13 소변중크레아티닌검사의검체안정성평가 65 최윤정, 이미영 CC-14 JW 중외메디칼 ( 주 ) 자동화임상화학시약의평가 65 이범기, 유해인, 조봉래, 이정중, 차경호, 채효진, 김용구 CC-15 M- 단백정량에따른 Immunofixation Electrophoresis 검사와 Immuno Electrophoresis 검사의상관성비교 66 김수경, 조재후, 이규남, 이기쁨, 김민진 CC-16 소아청소년의연령에따른 Alkaline phosphatase 의활성치검토 66 권세영, 나영악 CC-17 Rheumatoid factor 의연령별양성률분석 67 전소영, 이호균, 최승호, 이동희, 김민진 CC-18 CA(Gen2.) 시약업그레이드에따른검사수행능평가 67 김보라, 오영주, 이상곤 CC-19 요일반검사에포함되는 RBC, WBC 의 Urisys 2400 과 UF 1000i 의비교평가 68 박지수, 신지현, 최삼규, 지현영 CC-20 만성폐쇄성폐질환에이환된탄광부이직근로자에서호기응축액중의 malondialdehyde 와 3-nitrotyrosine 68 이종성, 신재훈, 황주환, 백진이, 최병순 CC-21 TOSHIBA-200FR 을이용한혈청크레아티닌시약평가 69 한지선, 한승원, 송윤경, 박인순, 이도훈 CC-22 ABGA 현장검사의관리체계확립을위한개선활동 69 강미정, 손유나, 김혜미, 김경호, 이지원, 조광래, 정기자, 박진미, 이희련, 전경란, 이정녀 CC-23 일반화학검사항목의여러장비간결과동등성분석 70 함태욱, 서한익, 김윤주, 오귀영 CC-24 Immunoglobulin D 검사에대한 SPA PLUS 장비의유용성평가 70 양지은, 이정중, 최혜순, 김남주, 조봉래, 이범기, 김한나, 양광현, 이영혜, 차경호, 채효진 CC-25 Carry over 평가방법비교 71 목영훈, 오해성, 한소정, 이동희, 김민진 CC-26 TLA 시스템의검체운송방식중 Holder 와 Rack 방식의 TAT 와업무효율성비교 71 오영주, 송준하 CC-27 신속하고안정적인방법을기반으로한암모니아측정 72 Chang-Eun Park, Sang-Su Kim xii

14 CC-28 Clinical and cytogenetic features of de novo Wolf-Hirschhorn (4p-) syndrome and partial trisomy 7p confirmed by array comparative genomic hybridization 72 Yoonmi Suk, Yoonjung Kim, Yong-Kyun Kim, Soyeon Seo, Hyun Young Chi, Young Sook Cho [ 면역검사학 ] IS-01 Anti-HBs 정량검사방법에따른결과차이비교 75 김윤경, 강지영, 이정식, 김용하, 최종현 IS-02 HBsAg Chemiluminescence 검사에서 SST (Serum separation tube) 사용에대한고찰 75 공주연, 이소리, 허윤자, 최삼규, 서소연 IS-03 HBsAg Chemiluminescence 법의위양성에대한고찰 76 공주연, 김신영, 최삼규, 서소연 IS-04 B 형간염바이러스의약제내성돌연변이에관한임상적해석비교 76 Ho Eun Chang, Kyoung Un Park, Junghan Song IS-05 ASCA 항체측정방법의비교평가 77 손은희, 임승택, 박금보래, 오흥범 IS-06 Cytomegalovirus IgM 측정을위한 VIDAS, Immulite2000 XPi 장비수행능비교평가 77 강민경, 최애란, 유승효, 차경호, 이혜영, 오은지 IS-07 홍역항체양성률에대해조사 78 정혜경, 김봉희, 서한익 IS 년 ~2013 년간홍역검사지역별양성율에대한조사 78 박혜진, 이안나 IS-09 장기이식교차시험에서공여자특이 IgM 항체에의한세포독성교차시험과유세포분석교차시험결과의불일치예 79 유승효, 강민경, 강미숙, 최애란, 차경호, 이혜영, 오은지 IS-10 HLA(SBT) 검사에서 POP6 를 POP7 polymer 로변경시적절한 condition 소개 79 이민정, 이건동, 이상윤, 김정록, 유재빈, 차경호, 김명신, 김용구 IS-11 HPV 고위험군검출을위한 Cobas HPV Test 와 Hybrid Capture II assay 비교 80 이교희, 박병민, 윤옥진, 이도훈, 황상현 IS-12 매독진단을위한 RPR, Syphilis-reagin, TPLA, IMMULITE2000 Syphilis Screen, FTA-ABS Ig 검사결과비교분석 80 최애란, 유승효, 강민경, 차경호, 오은지, 김용구 IS-13 임신분기에따른갑상선기능평가의의의 81 이정희, 공주연, 서소연 IS-14 만성스트레스노출시부신스트레스호르몬변화에따른스트레스반응도예측 81 임미정, 박영선, 강희용, 최종현 IS-15 검진센터수진자로부터 ADMA assay 경험 82 조희수, 임미정, 강희용, 최종현 IS-16 광물분진노출이직근로자에서혈청중 Adiponectin 농도분석 82 이유림, 신재훈, 황주환, 백진이, 이종성, 최병순 xiii

15 IS-17 계절에따른 25-hydroxyvitamin D (25OH Vit.D) 의농도변화 83 김민혜, 김봉희, 서한익 IS-18 광물분진노출이직근로자에서혈청중 CC-16 농도분석 83 신재훈, 황주환, 백진이, 이종성, 최병순 IS-19 집먼진진드기항원에의한호산구의세포고사와사이토카인분비의변화 84 In Sik Kim, Bo Kyeong Kang, A Min Kim, Sun Hwa Park, Eun Ji Lee, Jung Seok Kim, Eun Jeong Kim, Seung Yeop Baek IS-20 최근 2 년간 Clostridium difficile 의분리배양과독소검출의일치율분석 84 김보경, 이동영, 이승훈, 심효은 IS-21 만성 B 형간염과당뇨병표지자와의관계 85 김인식, 이정화, 현성희, 박갑태, 안태호 [ 조직ㆍ세포검사학 ] HP-01 Improvement of Quality Control in Immunohistochemistry Using Multi-tissue Microarray 89 Jin Suk An, Su Jin Shin, Eun Chung Kang, Jae Yo Rho, Hyo Jin Kim, Kyung Chul Moon HP-02 갑상샘세침흡인검사에서 SurePath TM 액상세포검사보존액이분자진단에미치는영향 89 오서영, 한정연, 소라, 임은영, 성미희, 신민식 [ 핵의학검사학 ] NM 년도중앙회순회보충보수교육설문서결과분석 93 박종오, 최병호, 안병락, 이현아, 신경희, 김상원, 신동호, 양만길 NM-02 인슐린비의존성당뇨병환자에서자가항체양성률에대한상관성고찰 93 임지현, 전수현, 공주연 [ 생리학검사학 ] PL-01 실습용 system 의제작및평가 97 김대진, 이창희, 이민우, 최정수, 김기원, 박올림, 김성욱 PL-02 Carotid Sonography 97 Soon-Hee Jung PL-03 심실상성빈맥에서발살바요법의유효성 98 강순옥, 남궁은지 PL-04 경계성고혈압환자에서심박수회복및심박수변동부전 98 신경아, 김혜영, 이혜자 PL 대이상남성들의폐기능검사결과에따른혈청 CEA 및 CRP 와의연관성 99 박정진, 이명신, 이진영 [ 임상검사정보학 ] LM-01 응급검사처방율감소활동 103 임종명, 김선인, 송주령, 최은희, 강소영, 이우인 LM-02 유전분자검사실문서간소화작업 103 이동욱, 정철원, 정현도, 이정녀, 전경란, 배혜정 xiv

16 [ 수혈검사학 ] BB-01 혈액형자동화장비인 PK7200 과수기법으로검사한혈액형일치도평가 107 최현정, 김민경, 고원석, 이재일, 안동희 BB-02 DIAGAST 사의 Qwalys 2 up 의 ABO, RH 검사의유용성평가 107 박홍철, 허윤진, 최삼규, 지현영 BB-03 DIAGAST 사의 Qwalys 2 up 의 Ab screen 검사의유용성평가 108 박홍철, 박명대, 최삼규, 지현영 학생포럼 [ 경동대학교 ] 다양한과내활동을통해만족도높고현실적으로도움이되는대학생활 111 김경태, 김도헌, 김수연, 노지호, 박예지, 배민정, 손하늘, 신재훈, 장민정, 최제춘지도교수 : 김효정 [ 경복대학교 ] 임상병리과의료봉사프로그램개발을통한발전적인대학생활의방향성제시 112 황진실, 김나현, 박혜미, 전광우, 이호국, 신주희, 박도희, 정선영, 이선주, 오현진지도교수 : 김대은 [ 경운대학교 ] 창의적이고능동적인전공동아리체험활동 113 남기준, 박수진, 김민서, 김승현, 김다솔, 전해민, 전신영, 성지현, 이혜진, 김보연지도교수 : 강지혁 [ 경운대학교 ] 우리같이알고나아가야할때 114 김충일, 박주강, 오광택, 이지현, 서수연, 정지아, 박가희, 박민정, 김영경, 윤은영지도교수 : 이은령 [ 경운대학교 ] 한울사이에피어나는너와나 115 신종민, 권미란, 김혜진, 손지혜, 이수혜, 전자영, 김성웅, 고은경, 이원진, 이소의지도교수 : 김혜정, 김마리 [ 광양보건대학교 ] 임상병리학과학생으로서즐겁고발전적인대학생활 116 김인경, 류가경, 박건비, 송윤인, 이정윤, 이슬기, 정서린지도교수 : 박미숙, 김진각 [ 광주보건대학교 ] 대학생활의그린라이트를켜라 117 홍은택, 정희근, 공유진, 김정은, 정지승, 임민규, 김수현, 김형직, 김경주, 박영시지도교수 : 이정치 xv

17 [ 김해대학교 ] 우리들의행복한시간 118 김민섭, 공수레, 김동우, 김소희, 박성경, 박아름, 이상희, 이수진, 이종권, 정소라지도교수 : 김미경 [ 나사렛대학교 ] 임상병리학과학생들의에이스한대학생활 119 최나은, 강정우, 김민지, 김수현, 김주은, 김지혜, 이지슬, 최태훈, 홍지수, 강다혜지도교수 : 강지언 [ 남서울대학교 ] 임상병리학과에서줄기세포가되기위한노력 120 정은찬, 김경희, 김서연, 김수빈, 방우영, 윤다혜, 임주석, 장민희, 조수연, 허수경지도교수 : 박창은 [ 대경대학교 ] 임상병리학과학생들의즐겁고발전적인대학생활 121 박민희, 김미숙, 김세용지도교수 : 김극준 [ 대구보건대학교 ] 임상병리과학생으로서즐겁고발전적인대학생활 (Happy Med-Tech Students) 122 김신영, 이정숙, 김수지, 구진서, 김도원, 이유정, 마정미, 박민정, 김민정, 김은혜지도교수 : 박철인, 박종석 [ 대전보건대학교 ] 임상병리과학생으로즐겁고발전적인대학생활 123 태혜령, 백지영, 마효진, 이슬, 박은영, 남수현, 김지홍지도교수 : 육근돌 [ 동강대학교 ] 임상병리 Story 124 박예슬, 박재하, 이다슬, 이슬, 이지수, 최선아지도교수 : 박상묵 [ 동서대학교 ] 우리는 fun fun 한학생 125 경소영, 김유미, 남태현, 송새롬, 김채은, 문소현, 서혜진, 이나영지도교수 : 원란 [ 동의과학대학교 ] Just Give It a Shot! ( 내일을향해쏴라!) 126 강동완, 강선영, 김민정, 민소영, 배성한, 윤성일, 이연경, 강희수, 이소정, 정우진지도교수 : 강효찬 xvi

18 [ 마산대학교 ] 우리는지금청춘이다 (Challenge of youth) 127 이경모, 김정아, 김희정, 문혜진, 손병구, 윤신혜, 이경민, 장재은, 정태성, 주현선지도교수 : 김성미, 김정남 [ 부산가톨릭대학교 ] 도란도란 128 이선빈, 조재환지도교수 : 최석철, 장경수 [ 서라벌대학교 ] 임상병리과학생의즐겁고발전적인대학생활 129 황은진, 권다인, 문보경, 이철희, 박지혜, 유영하, 황원희, 허은정, 우지영, 이수연지도교수 : 이원준 [ 서영대학교 ] 과학수사 검시관 스무살의젊음을노래하다 130 정명문, 최고운, 박청기, 양선미, 임보경, 강민지, 한수민지도교수 : 조영국 [ 신성대학교 ] 임상병리학과학생으로서즐겁고발전적인대학생활 131 김태훈, 김은비, 김채현, 김현경, 윤슬아, 이서영, 이송진, 임정훈, 장예림, 정소영지도교수 : 김혜영 [ 원광보건대학교 ] 임상병리과학생으로서즐겁고발전적인대학생활에대해 132 정아람지도교수 : 이지숙 [ 을지대학교 ] 신입생의눈으로본즐거운대학생활 (Joyful campus life seeing as freshman s eyes) 133 이영현, 안성수, 김수현, 이민지, 이주애, 장한슬, 차민영, 이영현, 이옥주지도교수 : 김지연 [ 진주보건대학교 ] 임상병리과학생의즐겁고발전적인대학생활 134 박민호, 이도명, 최유종, 정유경, 양선용, 김민재, 강진우지도교수 : 양병선 [ 혜천대학교 ] 교수님 HITACHI 가뭐예요? 병원에서는다쓰던데 김응경, 이지은, 명수빈, 정다영, 박은경, 박정은, 임희정, 유지원, 오수진, 백시현지도교수 : 임형선 xvii

19 [ Kobe Tokiwa University ] My Dream: Contributing Globally as a Medical Technologist 136 Miki Iwai [ Sanyo Women s College ] It wishes health of people in all parts of the world 137 Miyuki Tanaka xviii

20 2014 년제 52 회종합학술대회 초청강연

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22 초청강연 임상병리검사실문서관리 서울대학교병원진단검사의학과 주세익 모든사회구성조직은기록에의하여유지된다고할수있다. 특히의료분야의기록은그중에서도생명을다룬다는점에서중요성이남다르다고할수있을것이다. 임상병리검사실은검사업무의종류에관계없이다음과같이정리할수있다. 1) 업무의절차를정의하고, 2) 절차에따라업무를수행하며, 3) 그업무수행과정과결과를기록, 보고하며, 4) 이를정리하고보관한다. 따라서검사업무는행정업무이든지분석업무이든지간에문서들, 즉절차를기술한것, 과정과결과를기술한것, 정리보관한것을기술한문서로정의하고증명하는과정이라고표현할수있다. 검사업무를관리한다는것은한마디로문서를관리하는것이다. 문서는업무정의서, 기록서식, 그리고수행결과기록지로구분할수있다. 업무정의서는업무규정 ( 법령 ), 지침 ( 시행령 ), 표준절차 ( 시행지침 ) 로나눌수있으며, 규정은정책과기준을제시하고, 지침은그정책과기준에따른전체적인업무흐름을흐름을담아내며, 표준절차는각각의단위업무에대한상세한절차를기술한것을말한다. 기록서식은각표준절차에따른결과를기록하기용이하도록준비된양식형태를, 그리고수행결과기록지는이양식에결과를기록하여확인한문서를말한다. 문서관리란이문서들을정리하고보관하며사용자가접근하는방법을관리하는것이다. 문서작성방법으로는전자기록의형태를이용할수도, 전통적인종이기록의형태를이용할수도, 혹은두가지방법을모두사용할수도있을것이다. 문서정리방법은순차적정리방법과주제별정리방법으로구별할수있다. 순차적정리방법은발생되는순서대로번호를부여하고이를문서목록에순차적으로기록하여후에검색이용이하도록하는방법이다. 주제별정리방법은업무의종류를정의하는것이중요하다. 어떤업무는여러가지의업무가혼재되어있거나분류하기어려운업무들이발생하기때문이다. 따라서문서록록의첫번째시트에는주제의정의가기록괴어있어야하며분류가어려운문건을임의분류를할때마다. 이를주제정의에추가해놓아야한다. 문서의접근성은꼼꼼하게기술된문서목록으로부터얻어질수있다. 문서관리의또다른관점은문서의유지와보관이다. 문서의유지란기록된문서가변형, 즉내용의변경, 파손, 삭제등이발생하지않도록하는시스템을구축하는것이다. 이를위해문서교정권한에대한심도있는정책이필요하다. 문서의보관은전자문서시스템인경우는문제가없으나종이문서시스템인경우는문서정리에서부터문서보안, 문서폐기까지의모든과정에대한정책이수립되어있어야한다. 문서관리의정도는없다. 문서는모든구성원이작성하고정리하고보관하는것이기때문에각자는자신이관리하는문서가무엇인지어떻게정리할것인지결정해야하며, 그것이부서전체의문서관리시스템에서적절한지등을검토하여야한다. 문서관리는업무의변화에따라주기적으로점검되고, 평가되어변화되어야한다. 선진검사실이란잘관리된문서시스템을운영하는검사실이다. 3

23 초청강연 화이부동 ( 和而不同 ) 의사회 인제대학교총장 이원로 4

24 2014 년제 52 회종합학술대회 구연발표

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26 구연발표혈액검사학 일반혈액검사의측정오류해결 울산대학교의과대학서울아산병원 최미옥 일반혈액검사 (Complete Blood Cell Count:CBC) 는가장기본적인혈액학적검사로악성혈액질환의진단및추적관찰에이르기까지다양한임상적응증을가지고시행되는혈액검사중의하나이다. CBC검사를통하여혈액내에존재하는백혈구, 적혈구, 혈소판의양적, 질적인정보를다양한파라미터로분석하게된다. 현재대부분의검사실에서는검사건수의증가에따른검사소요시간관리및검사의정확도를높이기위해자동혈액분석기를사용하고있다. 자동혈액분석기는전기저항법과광산란법을기본원리로하여측정하며결과는수치와히스토그램으로나타내며비정상적인소견은각검사실마다정해진요건에따라 flag sign을수기법으로확인하고있다. 자동혈액분석기는정상검체의경우신속하고정확한검사를시행할수있으나비정상결과값이나채혈또는그밖의이유로검체에문제가발생할경우장비측정값을그대로보고하여환자에게불필요한처치를시행할수가있다. 이에저자는자동혈액분석기의측정된 CBC 이상결과의원인을분석하고각상황에따른해결방안을제시하고자하였다. 백혈구의측정오류의원인으로는유핵적혈구, 혈소판응집, 거대혈소판, 미용해적혈구가있으며수기도말을통한검경을시행하거나장비의측정알고리즘을분석하여해결한다. 적혈구측정정오류는주로적혈구평균혈색소농도인 Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (MCHC) 의결과가비정상적으로높은값을보이는경우검체의육안판독을통해응고나용혈여부를관찰하여재검체를요구하여검사를시행한다. 그러나검체가 lipemic, icteric, 한냉응집소가있는경우재채혈하여도동일한문제가발생될수있으므로원검체를이용하여최대한정확한결과를보고해야한다. 주로 plasma exchange 나 37 항온하여검체를자동혈액분석기에재측정하게된다. 이외에도 MCHC 결과값이높은경우자동혈액분석기의적혈구측정부분의장비오류를점검하기위한방법으로도활용되고있다. 혈소판측정오류는 EDTA 의존성위혈소판감소증, 거대혈소판, 깨진적혈구가있는경우실제보다낮거나높은값을보이게되고특히실제보다낮은값을보이는 EDTA 의존성위혈소판감소증의경우혈소판수혈과같은불필요처치를시행하게된다. 이경우 EDTA 항응고제가아닌 citrate 항응고제가든채혈관을이용하는방법등이주로이용되고있다. 형태학적인이상을보이는경우에는수기도말을시행하여혈소판및적혈구의형태를확인한다. 검사항목의측정오류에대해검사실에따라포로토콜을정해원인을해결하고있으나결과오류방지를위한전산시스템활용하는방법으로이상치, 변화치검색을시행하고이상결과의팝업생성, 주의환자등록과같은추가적인방법을병행한다면검사자의업무효율성이향상되면서좀더정확한 CBC검사를시행할수있으리라사료된다. 7

27 구연발표미생물검사학 항산균염색및판독 삼성서울병원진단검사의학과미생물검사실 황유연 1, * ㆍ송동준 1 ㆍ허희재 2 ㆍ이남용 2 서론항산균염색은높은지질함유량 (60%) 으로인해 fuchsin이나 auramine O와같은 arylmethane 염료에염색되면강한산에도잘탈색되지않는항산성균의특성을이용하여항산성균을선택적으로염색하는것이다. 항산균염색은간단하고경제적인방법으로전염력이높은결핵환자를신속하게진단하고격리및치료하여의료관련감염을조기에차단할수있는장점이있다. 그러나민감도가낮고검체의양, 종류, 염색방법, 검사자의역량과기술등에영향을많이받는다. 본론검체는 screw cap 용기에받아안전하게운반하며직접도말보다는원침하여농축도말하는방법이양성률을높이는데효과적이다. 항산균염색은 Carbolfuchsin 염색법 (Ziehl-Neelsen 염색, Kinyoun 염색 ) 과형광염색법 (auramine-rhodamine 염색 ) 이대표적인방법으로, 최근에는형광염색으로선별검사를하고 Ziehl-Neelsen 염색으로최종확인하여결과를보고하는곳이늘고있다. 형광염색은저배율 ( 배) 에서관찰하므로단시간에넓은시야를관찰할수있는장점이있으나, 위양성을보일수있으므로형광염색에서양성인경우 Carbofuchsin 염색으로다시확인하는것이좋다. 결핵균은나선형의균삭 (cord formation) 을형성하는경우가많으며비결핵항산균은다형성으로긴섬유상이나구균형태등으로나타난다. 항산균염색에서결핵균과비결핵항산균의구분은불가능하며치료중인환자에서죽은결핵균으로인해양성소견을보일수있다. 또한결핵균이외의 Nocardia, Rhodococcus 등의항산성균에인해위양성을보일수있다. 결론항산균염색검사는시간이오래걸리는배양검사와검사비용이높은분자검사에비해빠르고경제적으로결핵균을검출하여결핵환자의조기검출및치료판정에도움을준다. 그러나민감도는 22~80% 로다양하게보고되며, 검체의양, 종류, 염색법, 검사자의경험과기술, 검사의량등에영향을받으므로민감도가높은액체및고체배양검사와동시에시행되어야한다. 또한검사의표준화를통해인력의변동에대비하고지속적인교육을통해검사자의역량을함양시켜야한다. 검사자는임상병리사로서의사명감과책임감을가져야하며, 의료기관은검사자에대한동기부여와적절한검사량, 안전하고쾌적한검사환경을만들기위해노력해야한다. 8

28 구연발표미생물검사학 결핵균검사실의안전관리 서울아산병원진단검사의학과 윤남섭 배경 (Background) 국내의료종사자의직업성감염병 (Hanyang Medical Reviews Vol. 31 No. 3, 2011, 강정옥 ) 자료에의하면, 한국산업안전보건공단이 1998년부터 2004년까지 7년간보상했던의료종사자의직업성감염병은결핵이 71% 로가장높았고, 바이러스성간염이 14% 이며, 직종별로는간호사가 74%, 의사 12%, 의료기사 8% 순이었다. 결핵관련부서에서근무하는간호사는일반인구대비결핵감염유병율이 5.1배높았다고조사되었다. 이는결핵감염이공기를매개로전파되기때문에환자접촉과정에서표준주의를준수한다하여도예방이쉽지않다는것을의미한다. 특히, 의료기관의결핵균검사실은결핵균을분리하기위하여객담검체를전처리하는과정에서에어졸이발생할수있고, 결핵균을동정하기위하여배양된결핵균집락을직접다루거나약제내성검사에많은량의결핵균집락을다룬다는점에서의료기관의어느환경보다도위험한공간이다. 이에, 결핵균검사실에근무하는임상병리사의결핵균감염을예방하기위하여검사실의안전한작업환경과주의지침을고찰하고자하였다. 방법 (Methods) 결핵균검사실의안전관리지침은한국산업안전관리공단, 국립보건연구원, WHO, CDC 등의자료를조사하였다. 결과 (Results) WHO 결핵검사실안전관리지침에따르면결핵균검사실은결핵균염색검사만을시행하는경우 Low risk level TB Laboratory, 검체전처리와원심을통해농축하여결핵균을배양하는경우 Moderate risk level TB Laboratory, 배양된균으로동정하거나약제내성검사를시행하는경우 High risk level TB Laboratory 으로구분하여검사과정에서에어졸이발생하는위험정도에따라검사실을분류하였다. 이는에어졸발생위험도에따라검사실시설, 장비, 개인보호구착용등을더까다롭게준수해야함을규정하고있다. 일반적인권고사항으로검사실은전실과조작실이분리된구조로만들어져야하고, 음압시설이전실에서조작실방향으로흐르도록공기역학적구조가되어야한다. 생물학적안전상자는 BSC Class II B1,B2 type으로 hard-duct로강제배기하여건물밖으로배출하도록해야한다. 원심분리기는이중뚜껑의안전장치가있어야하며, 검사과정에서사용하는루프, 파이펫등의모든기구는 1회용으로사용하고이때, 에어졸이발생하지않도록검사조작마다세심한주의를기울여천천히작업하는것이중요하다. 작업자는표준주의를준수하고 N95마스크, 가운, 모자, 장갑, 덧신을착용하며, 사용한보호용구는조작실에서벗고나와야한다. 작업자는검사과정을충분히숙지하고있는지교육하고훈련되어야하고결핵균검사실에서발생한폐기물은멸균기까지의동선을최소화하여운반한후멸균후폐기하여야한다. 고찰 (Discussion) 결핵균은병독성이매우강하고공기매개에의해감염이발생하므로결핵균검사실의안전관리는검사를시행하는모든과정에서에어졸발생을최소화하려는작업과정을준수하는것이매우중요하다. 이러한에어졸발생을최소화하기위하여검사실에대한시설관리 (Hardware), 작업자안전관리 (Humanware), 검사과정관리 (Software) 등위험도를검토하는문항리스트를만들어수행능을평가 (risk assessment) 해야한다. 공기역학적시설, 검사실내장비의성능검증, 검사업무량, 검사과정의적합성, 폐기물처리, 감염물질유출시처리절차, 직원검사수행능, 작업자의잠복결핵을진단하는의학적추적검사등에대한종합적평가를시행함으로써검사실안전을위해개선방향성을검토하고필요한조치를이행할수있을것으로사료된다. 9

29 구연발표임상화학검사학 정도관리기초통계와의사결정 가톨릭대학교의정부성모병원 남현수 통계란무엇인가?: 불확실한미래 ( 상황 ) 에대해의사결정에필요한정보를제공하기위해자료를수집, 분류, 분석하며이를바탕으로의사결정기준을제시하는학문정도관리란?: 신뢰성있는결과값을만들고자하는모든행동 Process 정도관리에통계가필요한이유?: 신뢰성있는결과값인지판단하기위한의사결정도구자료의분포형태 ( 측정치의성격 ) 이산형 (discrete) 자료 : 이항분포, 포아송분포양성 / 음성, 결점수, 오류수와같이셀수있는자연수의값만취할수있다. 예 ) 20개의자료중 2개연속형 (continuous) 자료 : 정규분포, 비정규분포길이, 질량, 무게, 강도등과같이측정하여얻어지는값으로소수점이하의값을취할수있다. 예 ) Reference Interval 정규분포 (Normal distribution) 자연세상에서일어나는수많은일을설명하는보편적인개념통계학에서사용하는각종확률분포중에서도가장중요하게다루는분포물리학실험용으로무작위표본추출을통해도출시킨확률밀도곡선에극한값을적용시켜만든것을형태로정립한것. 확률변수에대응되는확률의관계를함수로나타낸것을확률밀도함수라고함. 확률밀도함수는항상 + 값을갖으며, 전체의합은항상 1이다. 집중화경향 ( 중심값 ) 최빈값 (Mode) 최빈값은자료의분포에서빈도수가가장많이발생한관측값중앙값 (Median) 수치로된자료를크기순서대로나열할때가운데위치하는관측값 1) 자료가홀수개일때 : 가운데자료 2) 자료가짝수개일때 : ( 가운데두자료의합 )/2 산술평균관측치의총합을관측치의개수로나눈값모집단의평균, 표본의평균평균 (Mean)- 자료의합 / 자료의수자료 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10의평균 : ( ) / 10 = 55/10 = 5.5 자료 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 400 의평균 : 445/10 = 44.5 이상점 (Outliers) 에민감하게값이반응한다. 중앙값 (Median) 크기순서대로나열된자료의가운데위치자료 N개의자료수 : N개의자료수 / 위치의자료가운데위치에값이 2개 : 두값의합 /2 자료 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 의중앙값 (5+6)/2 = 5.5 이상점 (Outliers) 에민감하게값이반응하지않다. 표준편차 (S.D, Standard Deviation) 각자료가중심위치와차이가나는정도를나타낸값 자료가서로다른정도, 자료가몰려있는 ( 흩어져있는 ) 정도변도, 변이 (Variation) 분산의양의제곱근 ( 자료값-평균 )^2 의합 / 자유도 = 분산통계학에서는절대값대신제곱을사용 10,11,12 의평균 11 분산 (-1^2 + 0^2 + 1^2) / (3-1) = 2/2=1 6,11,16 의평균 11 분산 (-5^2 + 0^2 + 5^2) / (3-1) = 50/2=25 제곱값에의해실제자료가떨어진정도보다더크게반영분산의제곱근 : 표준편차 10,11,12의표준편차 :1 6,11,16의표준편차 :5 표준편차는자료들이서로떨어져있는거리를원자료의단위로표현중심극한정리정규분포는반복적으로발생하는무수한사건 사고들을정립하여설명할때중요하게이용되는데, 이는어떤분포든지무한정으로반복하면정규분포에가까워지기때문이다. N수가충분하다면독립인확률변수들의평균의분포의표준화가표준정규분포에수렴한다. 이를중심극한정리 (Central Limit Theorem) 라부른다. 자료 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 400의평균 : 445/10 = 44.5 자료 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9,...9, 400의평균 : (1075)/135 = 참고치설정및검증건강인의 Data 경향성을분석하여 Mean ± 2SD(1.96 SD) / 95% 구간 (2.5 ~ 97.5%) / 95% 확률을가진이항분포내에서의자료분포 CLSI C28-A3 2. 정밀도 (Precision) CV(%) 를이용한반복측정값의일관성평가 CLSI EP5-A2 3. 직선성 (Linearity) 시약측정범위내에서의직선성유지여부판단 (AMR) CLSI EP6-A 4. 상관성평가두검사법간의상관성을시각화된그래프와상관계수를통해평가하는방식 CLSI EP9-A2 내부 / 외부평가용통계내부정도관리연속변수에해당하는수치로보고되는결과값을평균과표준편차, 편차등을이용하여오차분석실시정밀도와일부정확도평가 Westguard Quality Control, Bias, Total Allowable Error 외부정도관리외부평가기관또는표준물질을이용하여 Lab 간의오차분석실시정확도평가 Standard deviation index(sdi), Variance index Scores(VIS), Bias, Total Allowable Error 10

30 구연발표면역검사학 검사반응의측정 (measurement) 과보고 (reporting) 서울아산병원진단검사의학과 임승택ㆍ오흥범 정성, 정량측정진단검사의분류는검사기법에따라화학검사, 면역혈청검사, 분자생물검사, 혈액검사, 임상미생물검사, 기타특수검사등으로나눌수있으며, 검사의분석정량화정도에따라서는정성검사, 반정량검사, 정량검사로구분할수있다. 정성적측정은측정함수 (measuring function) 가없이검사장비에서 signal 값만을읽고기준에따른 cutoff를적용하여양성과음성의결과를산출하는것이다. 반정량적측정은연속희석한검체의정성적분석인음성, 양성으로판정하므로정성적측정의정량적보고에해당한다고할수있다. 정량적측정은분석결과의실수값 (Real-value) 를보고하지만검사결과에서실수값을얻을수있다고하여정량화측정이라할수없고, calibrator 농도와해당 calibrator에대한검사시스템반응값 (signal) 의관계를나타내는 calibration 함수가있어야한다. 검출한계 (limit of detection, LoB, LoD) 상당한확신을가지고어떤물질이검출된다고말할수있는최소농도로상당한확신은흔히통계의제 1종오류와 2종오류의범위를모두만족하는경우로정의한다. AMR (analytic measurement range) 측정가능범위는검체의희석이나농축과정없이측정하여얻을수있는타당성있는결과범위를말한다. 정량적측정 (quantitative measuring) 과정성적보고 (qualitative reporting) 정량적측정이란 calibration curve를통해결과를실수값으로산출하는경우를말한다. 그런데경우에따라서측정은정량적으로했더라도보고는정성적으로할수있다. 이를 CAP(College of American Pathologists) 에서는 quantitative measurement, qualitative reporting 이라한다. 어떠한검사종목에대해 정량적측정, 정성적보고 를해야하는지는임상적요구와검사의성능 ( 예 : precision, bias 등 ) 이그요구를만족하는가에좌우된다. CAP에서는 truly quantitative measurements ( 정량검사 ) 에대해서만 calibration, calibration verification, AMR validation의정기적시행을요구하고있다. 11

31 구연발표생리학검사학 심전도재미붙이기 삼성서울병원심전도실 최소라 12

32 구연발표임상검사정보학 울산지역병, 의원임상병리사의검사신뢰증대를위한정도관리사업시행에관한결과분석 1 동강병원진단검사의학과, 2 대한임상병리사협회울산광역시회정도관리위원회 김승용 1 ㆍ김왕희 2 ㆍ문홍식 2 배경울산지역은지역특성상산업체공단과밀접한근로자건강검진및일반검진, 특수검진, 채용검진, 종합검진등을다수의병, 의원에서검사를실시하고있다. 기업의검진은계약으로이루어지고지정병원은상황에따라수시로변경됨을보여주고있는데이때검사의신뢰성에대한문제를제시하는경우가있어이에대한검사결과의신뢰성확보를위한일환으로울산시회에서는울산지역병, 의원임상병리사들을대상으로정도관리사업참여를위한교육및검사시행기관등을조사하였고사업목적및검사항목, 결과등을지역보수교육에서발표함으로서관심과호응을유도하여참여기관을확대하고특히외부정도관리사업에참여하고있지않은병, 의원을대상으로결과를분석해줌으로결과에대한신뢰를높이는데기여하고자정도관리사업을실시하게되었다. 정도관리사업은 2012 년, 2013 년걸쳐일반화학검사를실시하였고결과에대한질적향상및문제점등을분석하여개선함으로검사의질을향상시킴과동시에지역사회에서의임상병리사협회의활동목적과중소병, 의원임상병리사들이느끼는협회의지원에대한불만을해소하고자그목적을두고울산광역시회의지원을받아사업을진행하게되었다. 방법 1. 대상 : 울산지역병, 의원대상으로년 1 회실시하였고 2012 년과 2013 년 2 년에걸쳐일반화학검사를중점적으로시행하였다. 현재신청접수된 35 개기관을대상으로실시하였고검체는울산광역시회의지원을받아구입및협찬을받아검사를실시하게되었다. 2. 검체및검사종목 : 일반화학물질은 Bio-Rad(Lyphocheck, Assayed chemistry) 사의제품을사용, 2012 년은일반화학 28 개종목으로구성되어평가를실시하였고, 2013 년은일반화학 30 개종목 (D-bilirubin, Phosphorus 추가 ) 으로검사를실시하였다. 검사종목은전해질, 단백, 지방, 효소검사등 30 개종목이다. 결과울산지역 35 개기관을대상으로참여의사에따라검체우송을실시하였고결과분석은평균, 변이계수, 표준편차등으로결과를분석하였고장비및시약별로분류하려하였으나기관별로수가적고다양하여기관별참고치기준으로구분하여결과를분석통보하였다. 회신율은 2012 년 22/35 개기관으로 63%, 2013 년 28/30 개기관으로 94% 로나타났으며 2012 년대비 2013 년에는 2 개기관이불참, 8 개기관이추가로신청하여총 28 개기관이참여, 검사항목별로는 30 개검사종목중 30~28 종목의결과를통보해온기관수는 6 개기관, 27~25 종목 2 개기관, 24~21 종목 6 개기관, 20~16 종목 5 개기관, 15~11 종목 7 개기관, 10 종목이하 2 개기관으로나타났다 년통계를보면 28 개기관이모두참여한종목을보면 AST, ALT, GGT, Cholesterol, creatinine 검사이고 27 개기관이참여한종목은 Glucose, Triglycerides 로서주로근로자검진및지역의료보험공단검진항목에구분되어지는검사에대한참여도가높았으며가장낮은참여종목은 Magnesium, Osmolality 검사로서 5 개기관과, 2 개기관이참여하였다. 결과를보면다수의기관이참여한검사종목중안정된결과를보여주는항목으로는 Protein, Albumin, Cholesterol, Glucose 등으로나타났으며불안정한결과를보여주는종목으로는 ALP 등으로나타났다. 검사결과에있어주의를요하는종목으로는 AST, ALT, Triglycerides, GGT, HDL-Cholesterol 등으로나타났다. 이러한종목들의결과값은참고치설정에서의문제나검사에있어범위를벗어나는결과로구분할수있고이러한부분들을찾아내어개선하고자하는것이이사업을추진하는주된목적이라할수있을것이다. 고찰검사결과에있어장비, 시약별로의분석은참여기관별로다양한분포를보여별도의통계를내지는않았지만기관별참고치기준으로한결과를분석함으로서지역내중소병, 의원간검사결과의변동폭을줄이고자하였다. 결과값에있어참고치간변동폭이큰기관들은개별통지하여참고치설정을재검토할것을권유하였고검사결과상결과값의차이를보이는종목에대해서는 Calibration 을다시실시하여검사결과를확인토록하여울산지역에서의임상병리사들의검사결과에대한신뢰도를향상시킴과동시에정도관리미참여기관들의관심과참여를이끌어냄으로중소병, 의원급의정도관리에대한이해를높이고결과에대한확신을가지는데기여할것이라생각된다. 이는지역내협회의중요성뿐만아니라중앙회에서도관심을가지고접근할필요가있으며인증심사전반에관한교육과지속적인관리가필요할것으로본다. 13

33 구연발표수혈검사학 수혈적합성검사 대전보건대학교임상병리과 최범열 수혈검사란? 한번실수 = 한생명 을생각할수도있으며, 그중요성을인정하여 1996년보건복지부에서 수혈착오방지지침 이제정되었고, 2010년엔질병관리본부에서수혈학회와공동으로 수혈가이드라인 이지정되었으며, 식약처에혈액감시팀이생겨서혈액관리업무전반을심사평가를하고있다. 현대의학의발전으로수혈도날로증가하고, 다민족에따른수혈관련부적합도증가하고있는실정인바, 그업무의중심에있는임상병리사들의전문성이더욱절실하며, 의료기관에근무하는병리사라면누구도피할수없는일반화된업무의한분야로수혈적합성검사와관련하여우리나라혈액은행현황을알아보고, 1) 수혈용검체의접수및확인의중요성 2) ABO & RhD형검사관련주의및방법 3) 비예기항체스크린, 동정검사에서주의및방법 4) 혈액성분제제별교차시험에서검사법및주의, 한계 등을살펴보고, 전반적수혈적합성검사의이론적배경을이해하고, 숙련된검사로서안전한수혈이될수있도록이바지하는데도움이되었으면하며, 나아가서는자신을보호하는길이라사료한다. 14

34 2014 년제 52 회종합학술대회 KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM

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36 KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM The Status of ISO Accreditation in Taiwan R.O.C Director, Department of General Clinical Laboratories, Kaohsiung Veterans General Hospital, Taiwan Tsung I Lin MS The Taiwan Accreditation Foundation (TAF) is the only accreditation body in Taiwan recognized by Government for the accreditation of conformity assessment against international standards including ISO TAF(previously called CNLA) inaugurated the accreditation services on medical laboratory as early as December 2000; TAF is the first accreditation body to do so in Asia. TAF offers third-party impartial, independent and transparent assessment services in Taiwan for more than 13 years. ISO is a prime standard of laboratory management and laboratory management is the fulfillment of lab director s mind and soul. The integration generates the excellence in a rather speedy way. ISO is one of the fastest growing international quality standards in the world and in Taiwan, at present, 258 laboratories in Taiwan have been accredited against ISO 15189, including 39 laboratories from 22 tertiary care medical centers. Not as CLSI in the States, ISO accreditation is not required by The National Health Insurance Administration as a requirement for the payments of lab services in Taiwan. In reality, ISO is not a one unified solution for all lab practices it still needs some fortification standards in certain fields. For instance, ISO may serve as the affiliated standard of Safety, likewise, ISO as of Risk Management, ISO as of POCT and ISO as of Risk Management for IVD Manufactures. ISO is not applicable to routine medical laboratories but offer some useful guidelines for a quality oriented lab. To err is human but never been granted as a reasonable excuse in lab practice. To reduce bias, PT programs are very useful. PT programs of TSLM (Taiwan Society of Laboratory Medicine) and CAP are the two most popular PT programs around Taiwan for the on site inspection against TAF-CNLA-R05 requirement. Building a safer lab system is pretty much the same as to construct the roof of a building it still needs many QI (quality improvements) as the pillars to support the roof on top. In practice, ISO is not an end in itself it is merely a tool towards an utmost end. With an aim to interpret ISO into good laboratory practice, we suggest that: 1. Always embrace a policy of patient-centered lab services rather than just follow SOPs, remember that patient only accept the impeccable procedures. 2. Before you adopt a quality procedure, please consider its feasibility first, about 2~3% of quality procedures are unnecessary procedures that never being followed without any risk, hence, always lean the processes, eradicate the dumb procedures. 3. A one-size-fits all approach is not appropriate for quality plans in clinical laboratories, consider the risk and the effectiveness first. 4. Every step of a certain procedure has some degree of variation and variation has an additive effect all the way to a certain entanglement. 5. Anything may happen unless timely adjustment is implemented, even in an accredited lab. 6. An integrated information system can guarantee an integrated lab services in a unified system. 7. Lab personnel often neglected the effort to improve test accuracy, the prioritization and traceability of standard /calibrator based on quality improvement is required. 8. The review of auto-verification filter rules periodically is required, and need to have a risk warning information system in use. 9. For advisory services (ISO 15189: 4.7), try to attend clinical rounds of interest for bedside patient management to upgrade your quality of lab services. In conclusion, ISO disciplines are the minimal requirement of an accredited lab on acceptable basis, it is not an award of merit, hence strive for perfection is highly encouraged. The aim of laboratory accreditation is to change the philosophy, viewpoints and maneuvers of the lab in order to reengineer and create a lab culture that expertise can be translate into utmost quality accordingly. 17

37 KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM ISO/TC 212: An Update SAMT, Singapore Eddie Han San ANG ISO (International Organization for Standardization) is the world s largest developer of voluntary International Standards. ISO is a network of national standards bodies which make up the ISO membership and they represent ISO in their country. The General Assemble is the ultimate authority for ISO work and meets once a year for its strategic objectives. ISO standards are developed by groups of experts, within technical committees (TCs), by the people that need them, through a consensus process. The Standards in Action include but not limited to are on Health, Sustainable development, Food, Water, Cars, Climate change, Energy efficiency and renewable and Services. The ISO/TC th Plenary Meeting, under the auspices of SPRING Singapore, was held at Swissotel Merchant Court, Singapore from 19 to 21 November The event was an annual plenary meeting for the Committee in which meetings of Working Groups were also held in conjunction. The purpose of the annual plenary meeting is the approval of proposals and recommendations from the Working Groups which includes reports, recommendations in respect to current documents and new work items. Several key points were discussed including the revision of ISO22870:2006, liaison activities, structure of ISO/Tc 212 and the request from CEN/TC 140. Other issues on the progress of standards development work such as laboratory biorisk management, multiplex molecular analysis, nucleic acid based in vitro diagnostics and clinical performance studies were also proposed and recommended. 18

38 KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM Japanese BLS at present and in the future 1 Department of pathology, Nippon Medical school Tama-Nagayama Hospital, Japanese, 2 Japanese Foundation for Cancer Research Clinical pathology center chief technologists, Japanese Hironori Katayama 1, Kyoko Komtsu 2, Yoshifumi Miyajima 2 The license of biomedical laboratory scientists (BLS) in Japan is qualified by the government. To graduate from a four-years-course college or a three-years-course semi-college which with proper programs are required for eligible candidates which is recognized by the Ministry of Education, and three-year special school which is recognized by the Ministry of Health, Labor and Welfare. At present, among fifty thousand BLS, college graduates sum up 20 %, are in Japan. Although not so big number of Japanese BLS have PhD title today, the ratio has been increasing recently. Besides, for the last few years and never before, medical technologists have become college professors and associate professors. The title of medical technologist is governmentally qualified while special skills are qualified not by government but each reliable academic association. Japanese Association of Medical Technologists (JAMT) also give a variety of seminars as a post graduate education, and qualified as a specialist for several field, such as hematology, urine testing, electrocardiogram, pathology, and try to add more. According to carry on negotiations continuously by JAMT president, we add new item for our laboratory testing such as gustatory testing, adviser of the Laboratory test, endoscopy testing, and so forth. Further educational reform such as six-year program might be considered. BLSs should take care of not only improving our skills, but also create laboratory quality management system (QMS). JAMT supply certification for laboratory itself and guarantee the laboratory data. I would like to summarize recent JAMT businesses and future prospect. 19

39 KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM From MT Education System to ASCPi Certificate in Taiwan Department of Biotechnology and Laboratory Science in Medicine National Yang-Ming University, Taiwan, Republic of China Yih-Hsin Chang Taiwan is one of the countries that provide the most advanced training and education system for cultivating medical technologist (MT) professions. The undergraduate Biomedical Laboratory Science programs in Taiwan consist of 14 institutes with about 1,100 students enrolled each year. Among the 14 institutes, 13 have Master programs, and 3 provide PhD training programs. University graduates must pass the national certification exam to obtain MT license required for clinical practice. Through this completed and advanced training system, Taiwan has nurtured many excellent MT professions who play crucial roles in providing high quality and advanced medical services in clinical practice as well as in biotechnology related disciplines. In addition to cultivating domestic MT talents for providing excellent clinical services and biomedical research, we also eagerly equip ourselves with an international view to keep up with the rapid developing and challenging world in this global village with such a rapid-growing development of biotechnology. Accordingly, Taiwan has become one of the members in Asia Association of Medical Laboratory Scientists and ASCPi. By sharing experiences among MT professionals and friends from different countries, we can absorb and integrate the advantages in the implementation of differential systems, benefit and inspire each other as well as broaden our view and mind to pursuit a better development in MT professionals together. 20

40 KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM Point-of-care detection of dengue using carbon nanotube-based labels 1 School of Chemical & Life Sciences, Singapore Polytechnic, Singapore, 2 Centre for Biomedical & Life Sciences, Singapore Polytechnic, Singapore Adrian YEO 1, TAN Eng Lee 2, Annabel ANG 1 Dengue virus infections can result in clinical manifestations that range from asymptomatic infection to dengue fever and the severe disease dengue hemorrhagic fever/dengue shock syndrome. Dramatic increase in the burden of dengue world-wise has given rise to much interest in developing improved diagnostics for dengue infections. More specifically, there is a need for specific, inexpensive diagnostic tests that can be used for clinical management, surveillance and outbreak investigations and would permit early intervention to treat patients and prevent or control epidemics. Recent developments in rapid detection technologies offer the promise of improved diagnostics for case management and the early detection of dengue outbreaks. We describe a novel dengue viral nucleic-acid based detection system using carbon nanotube labeling construct as label which is amenable as a point-of-care diagnostic tool and which obviates the need for pre-assay processing and instrumentation. 21

41 KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM Reverse blot hybridization assay Sepsis-ID test for simultaneous identification of pathogens and antimicrobial resistance genes of meca, vana and vanb from blood culture bottles Wonju Severance Christian Hospital, Dept Laboratory Medicine, Korea Soon Deok Park The rapid and accurate identification of pathogens in blood with sepsis is crucial for prompt initiation of appropriate therapy to decrease related morbidity and mortality rates. The aim of this study was to evaluate diagnostic performance of newly designed Reverse blot hybridization assay Sepsis-Identification test (REBA Sepsis-ID test) for rapid diagnosis of bacteremia and for detection of antimicrobial resistance genes. The 45 reference strains and 118 clinical isolates from various specimens for optimization of the REBA Sepsis-ID test were used. To evaluate the REBA Sepsis-ID test, a total of 1,400 consecutive blood culture bottles were selected from March to July By continuous monitoring blood culture system (CMBCS), a total of 300 positive and 1,100 negative blood culture bottles from patients with a delta neutrophil index (DNI) of > 2.7% were included in the study. The positive and negative bottles were tested by the conventional PCR-REBA and real-time PCR-REBA, respectively. All 45 reference strains and 118 clinical isolates showed strong specific hybridization signals at the positions of the corresponding probes derived from their respective sequences. Of the blood culture positive bottles, 67.0% (201/300) were positive for Gram positive bacteria (GPB), 24.3% (73/300) for Gram negative bacteria (GNB), 4.7% (14/300) for Candida species, and 4.0% (12/300) for polymicrobials. The agreement rates between conventional identification test and REBA Sepsis-ID test for GPB, GNB, fungi, and polymicrobials were 94.5% (190/201), 97.3% (71/73), 100% (14/14) and 91.7% (11/12), respectively. Among the 92 methicillin-resistant Staphylococcus isolates, the detection rate of meca gene was 97.8% (90/92). The vana gene was detected in one blood culture sample from which vancomycin-resistant Enterococcus was isolated. When the cycle threshold for real-time PCR was defined as 30.0, 2.4% (26/1,100) of blood culture negative samples tested were positive by real-time PCR. The results of 26 samples showed discordance by conventional test, real-time PCR-REBA, and 16S rrna sequence analysis. The REBA Sepsis-ID test could be useful to simultaneously and rapidly detect causative agents and antimicrobial resistance genes, such as meca and vana or vanb, in blood culture positive samples. The application of REBA Sepsis-ID test with culture methods in clinical microbiology laboratories would reduce the time for detection of pathogens responsible for sepsis, presumably resulting in reduction of patient mortality rates. 22

42 KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM Biological Agents and Toxins Act (BATA): Development and Enforcement of Biosafety and Biosecurity in Singapore School of Biological Sciences, Nanyang Technological University, Singapore Tin Tun Biosafety and Biosecurity are very important issues in the present climate where emerging infectious diseases and threats of bioterrorism and biological attacks are of global concern. Biological safety requires the strengthening of the regulatory requirements and operational and safety programs. Singapore s first-ever law on the use of biological agents and toxins has come into force. The law clearly defines facility requirements for handling of them; develops the comprehensive system of control; prevents bioterrorism by controlling the use of high-risk hazardous agents; and, establishes a strong national biosafety culture. Singapore has made significant progress in the development and enforcement of biosafety and biosecurity measures. This progress certainly facilitates the safe expansion of our emerging biomedical industry and research development in life sciences. For the benefit of other facilities and future users, we report the impacts and contents of the new act in a simple and understandable presentation. 23

43 KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM The Role of Medical Technologists in Infection Control-Taiwan Experience 1 Director, Dept. of Medical Laboratories, Administrative Center, Chang Gung Foundation, Taiwan, 2 Professor, Dept. Medical Biotechnology and Laboratory Science, College of Medicine, Chang Gung University, Taiwan Wu 1, Tsu-Lan MS 2 For an effective hospital infection control system, the involvement and cooperation of personnel from different fields, including clinical, laboratory, and administration, is essential. Medical technologists, therefore, play an important role in this regard. According to the hospital accreditation system conducted by the Center of Disease Control in Taiwan, since 2008, the inclusion of at least one full-time medical technologist in the Infection Control Team has become a requisition for hospitals with more than 300 beds. Routine surveillance for infection control may include patients and their direct or indirect environment. Medical technologists, or laboratory-based infection control practitioners, therefore are expected to aid the infection control surveillance by providing their professional laboratory expertise. Their major duty may include monitoring the quality of sterilization and disinfection on medical devices or surgical instruments, other patient-care items that may contact a patient s sterile tissue, mucous membranes, or non-intact skin, and all sorts of intra-venous injection fluids. To reduce infection acquisition or transmission, some non-critical items that may not need to be strictly sterile but have to meet the respective maximal limitation of microbial loads may also be included for laboratory surveillance. These may include dialysis fluids, potable water from cooling towers, food or drinks for patients and visitors, sewage water, etc. Continuous epidemiological analysis of frequent nosocomial pathogens and multidrug resistant microorganisms also is important. When unfortunately an outbreak of infections occurs, medical technologists are also able to assist in the investigation by using environmental samplings and microbial cultures to identify the potential infection reservoirs and the route of infection transmission. With the competent laboratory skills, medical technologists play a vital role in infection control by cooperating with clinical infection control personnel to achieve an efficient control of healthcare-associated infection. 24

44 KAMT INTERNATIONAL SYMPOSIUM Development of a Rapid Biosensor for Viral Infection School of Chemical & Life Sciences, Singapore Polytechnic, Singapore Yu Jia LIM A simple, rapid and sensitive Graphene Oxide (GO) based fluorescence assay was developed in response to the need of cheap and quick detection for viral infection that requires early clinical management. GO was suitable for biosensing applications in rapid diagnostic kits due to its water solubility, broad-spectrum fluorescence quenching ability and its affinity to only single-stranded but not double-stranded nucleic acids. GO was successfully synthesised using the modified Hummer's method and characterised using Atomic Force Microscopy and Fourier Transform-Infrared Spectroscopy. It was found to have critical fluorescence quenching abilities for differentiating viruses. Hand, Foot and Mouth Disease (HFMD) causing viruses, Enterovirus71 (EV71), Coxsackie A 16 (CA16), Echovirus 6 (Echo 6) and Coxsackie B2 (CB2) were used as the initial model of study, with the detection of clinically critical EV71 as the main objective. 25

45 포스터발표안내 포스터발표시간 : :00-19:00 포스터발표는각분과별로진행됩니다포스터발표자는반드시지정장소, 지정시간에서참석하셔야포스터우수상심사대상에해당됨을유의하시기바랍니다

46 2014 년제 52 회종합학술대회 포스터 - 혈액검사학

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48 혈액검사학 HG-01 정상인의호중구에서천식폐세척액에의한세포유주운동효과 1 Department of Clinical Laboratory Science, Wonkwang Health Science University, Iksan , 2 Department of Biomedical Laboratory Science, School of Medicine, Eulji University, Daejeon , 3 Department of Senior Healthcare, BK21 plus program Ji-Sook Lee 1, *, Na Rae Lee 2, Seung Yeop Baek 2,3, Eun Jeong Kim 2,3, In Sik Kim 2,3 Background: Human neutrophils play an essential role in the innate immune response and are involved in the pathogenesis of the severe and corticosteroid-resistant asthma. Asthma is characterized by an infiltration of inflammatory cells into the lung and by a cytokine release. The aim of this study is to investigate the effects of a bronchoalveolar lavage fluid (BALF) on the chemotaxis and apoptosis of neutrophils which were isolated from healthy subjects. Method: The BALF of subjects with asthma induces the blood neutrophil chemotaxis in the opposite of that in normal subjects. The IL-8, IL-6, and monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) levels in BALF were higher in subjects with asthma than in normal subjects. Results: The BALF of normal and asthmatic subjects has no effect on neutrophil apoptosis of BALF. MCP-1 delays the constitutive apoptosis of normal blood neutrophils, but has no effect in normal BALF neutrophils. Conclusion: These results may indicate that inflammatory factors secreted by the lung tissue of patients with asthma trigger the neutrophil chemotaxis and also induce the neutrophil dysregulation. HG-02 Sysmex XE2100D 와 Sysmex XN series 에서 CBC 측정결과의상관성평가 씨젠의료재단혈액학팀 김민경ㆍ최현정ㆍ고원석ㆍ이재일ㆍ안동희 배경 (Background): 일반혈액검사 (Complete blood cell count, CBC) 는수술전기본검사에서부터악성혈액질환의진단및추적관찰에이르기까지다양한임상적응증을가지고, 가장흔하게시행되는혈액검사중하나이다. 이검사를통해혈액내존재하는세가지종류의세포, 즉적혈구, 백혈구, 혈소판에대한정보를다양한지표 (parameter) 를사용해파악할수있다. 본원에서는현재 CBC 검사를위하여 Sysmex XE2100D(Sysmex, Japan) 장비를사용하고있으나장비도입후 5 년경과로인한장비노후로인하여신규장비도입을고려하였다. 본연구에서는 Sysmex XE2100D 의차세대장비인 Sysmex XN series 를사용하기위해두장비간의상관성평가 (comparison study) 를실시하였다. 방법 (Methods): 2013 년 5 월본원에의뢰된환자검체 207 개를이용하여 WBC, RBC, Hemoglobin, Hematocrit, platelet, differential count(neutrophil, lymphocyte, monocyte, eosinophil, basophil) 5 종을포함하여총 10 종목에대하여 CLSI 가이드라인 EP9-A2 에서제시한방법에따라평가하였다. 결과 (Results): Sysmex XE2100D 와 XN series 의두장비간의상관성평가결과 WBC, RBC, hemoglobin, hematocrit, platelet, neutrophil, lymphocyte, monocyte, eosinophil, basophil 은 r 값이각각 , , , , , , , , , 였으며, mean difference% 는각각 3.5%, 0.9%, -0.1%, 2.3%, 1.0%, 0.3%, -1.0%, 0.5%, 0.0%, 0.3% 였다. 결론 (Conclusions): 새로개발된 XN series 기기와기존장비인 XE2100D 기기와의평가결과상관성은우수하였으나 XN series 의시간당검체처리속도가 100 검체 /hr 로기존장비인 XE2100D 의 150 검체 /hr 에서 67% 수준으로감소되어단시간내많은검체를처리해야할때는제한점이될수있을것으로사료된다. 29

49 혈액검사학 HG-03 DxH800 에서 Unghosted Cells (UGC) 을이용한 Target cells 의정량적측정 가톨릭대학교서울성모병원진단검사의학과 고광상ㆍ박종문ㆍ차경호ㆍ김용구ㆍ한경자 * BACKGROUND: In Retic channel of DxH 800(Beckman Coulter), the RBC resistant to hemoglobin clearing are counted as unghosted cells (UGC). This study aims to evaluate that UGC is a surrogate marker for both the detection and counting of target cells. METHODS: Total 1,181 samples including 22 from iron deficiency anemia (IDA), 95 from jaundice, 2 from sickle cell anemia, 3 from thalassemia, 1 cord blood and 269 from normal controls were analyzed. Slides were prepared from all samples except normal control and the target cells were counted for correlation analysis of target cell counts to UGC. RESULTS: The normal control samples showed 0.01(0~0.01)% UGC, and the reference range was set as 0.02%. The IDA samples showed 0.015(0.01~0.03)% UGC and 0.05(0~0.2)% target cell counts. The jaundice samples showed 0.98(0.1~5.36)% UGC count, and 1.4(0.1~7.0)% target cell counts. The 2 sickle cell anemia samples showed 0.41% and 3.74% UGC count and 0.4% and 11.5% target cell counts. A cord blood sample showed 0.01% UGC and 0% target cells. The 3 thalassemia samples showed 0.01%, 1.99% and 7.82% UGC count and 0%, 1.4% and 15.5% target cell counts. The samples showing poikilocytosis other than target cells showed normal UGC count ( 0.02%). The positive predictive value (PPV) of UGC was 58.2% (124/213) and the negative predictive value (NPV) was 96.8% (674/696). The UGC counts were well correlated to the manual target cell counts (r=0.944, P=0.000). CONCLUSION: This study demonstrates for the first time in the literature that a hematological parameter obtained automatically every time a reticulocyte counting is performed can be used to both screen for the presence of target cells, and reliably quantify them. HG-04 심한백혈구감소증검체의백혈구감별계산 : 유효한다양한방법의비교 가톨릭대학교서울성모병원진단검사의학과 김정옥 * ㆍ고광상ㆍ박종문ㆍ차경호ㆍ김용구ㆍ한경자 Introduction: WBC 감별계산에혈액자동분석기가수기법보다우수한결과를보이는것으로알려져있으나, 비정상적인세포가존재할경우아직은현미경판독을통한수기법이참고법이다. Chemotherapy, radiotherapy, transplantation의증가로인해심한백혈구감소증검체수가현저히늘고있는추세며, 또한 WBC의형태변형도흔해서수기법이더욱어렵게되고, 낮은재현성을나타낸다. 최근 Hematoflow ( 또는 CytoDiff) 방법이라는새로운감별계산법이소개되었다 (Beckman Coulter, Miami, FL, USA). 이방법은 auto-gating program과 5-color / 6-antibodies를이용한유세포분석법으로서혈액자동분석법이나일부수기법으로도보고되지않는 blasts, immature granulocytes ((IG), lymphocyte subsets을포함한 17개의백혈구집단을보고한다. 본연구의목적은심한백혈구감소증검체에본 Hematoflow법을적용하여, 그유용성을평가하고자하였다. Materials and Methods: 백혈구수가 /μL의범위를보인 EDTA-blood 175검체를대상으로임상병리사와수석전공의가 10~200개의세포를감별계산하여비교분석및수기법에소요되는평균분석시간을측정하였다. Hematoflow 감별계산은 CytoDiff 시약으로염색후유세포분석기 (FC500, Beckman Coulter) 로약 10,000개의 cell을분석하였다. 결과는자동분석되었으며, 각 test 의평균분석시간을측정하였다혈액자동분석기는 DxH 800 (Beckman Coulter) 과 XE-2100(Sysmex) 을이용해분석하였다. Results: Hematoflow를통한분석은안정적이고, 자동화분석기와도상관관계가높았으며, 분석과작업에소요된총시간은수기법보다짧았다. hematoflow 4% 미만의 blast를포함하는모든경우에서수기법-no blast 를나타냈으나 hematoflow 4% 이상의 blast를포함하는경우 38% 에서수기법도 blast가존재했다. Analysis time and gate adjustment 수기법은슬라이드관찰에검체당 183.7초가소요되어 20개의 sample을측정하는데필요한평균시간은 61분, 슬라이드제작등의시간을포함한총시간은 115분이었다. Hematoflow 방법에서평균분석시간 (10,000 event) 은반응및판독시간포함약 90분, 실제노동시간은 15분이었다. The reproducibility of Hematoflow counts 반복측정시 Neutrophil count의상관계수는 0.99와 f-test variance ratio 0.98, Lymphocyte 는상관계수 0.99, f-test variance ratio 0.96, Monocyte는상관계수 0.95, f-test variance ratio 0.67이었다. scatter diagram plot은 neutrophil과 lymphocyte, monocyte모두일치하였다. Conclusion: 심한백혈구감소증검체에서 Hematoflow를이용한백혈구감별계산은재현성이우수하고, 간단하여덜노동집약적이었다. 호중구, 림프구및단구는수기법과높은 (r>0.8) 상관관계를나타냈다. Hematoflow는 blast에대한정보를주기도하는데 4% 이상의 blast가있으면수기로검토를권장한다. 결론적으로이 Hematoflow방법은심한백혈구감소증검체의백혈구감별계산에유용하다고판단하였다. 30

50 혈액검사학 HG-05 Sysmex XE-5000 장비에서 IPF 검사를위한검체보관검증시험 고려대학교의료원구로병원진단검사의학과 권미희ㆍ김미혜ㆍ김주현ㆍ이상은ㆍ한정훈 배경 (Background): 혈소판감소증원인구별과혈소판회복능력을나타내는지표의하나인망상혈소판은유세포분석기로만분석되어많은시간과고가의비용이요구되었다. 반면 Sysmex XE-5000 에서는간단하고신속하게망상혈소판을나타내는지표인 IPF (Immature Platelet fraction) 검사를시행할수있다. IPF 검사는전체혈소판에대한미성숙한혈소판의비율을나타내고골수로부터방출된신생의미성숙한혈소판을의미한다. 본원에서는 Sysmex XE-5000 장비를보조장비로사용하며정기근무시간요청한 IPF 검사를시행하고있던중장비 off 후요청하는 IPF 검사를위해 IPF 검체보관기준을 Sysmex 코리아에의뢰한결과특별한기준이없다는답변을받아자체적으로기준을확인할필요가있어검사비교하였다. 방법 (Methods): 2014 년 2 월 25 일부터 4 월 21 일까지 IPF 검사를시행후 24 시간동안실온과냉장에각각보관하여재검사를시행하였다. 결과 (Results): 당일검사결과 (Y) 대비실온및냉장보관후평균값 %bias 는각각 -98%, -108% 차이가발생하였다. 고찰 (Discussion): 장비 off 후접수되는 IPF 검체의검사를위해장비회사에문의한결과특별한규정이없고혈소판관련검사라보관후검사시행시결과에영향을미칠거라사료되어비교검사를실시하였다. 비교검사전특별한기준이없어자체허용기준으로 20%bias 이하면보관하여검사를시행하려했으나위와같이실온과냉장보관후결과평균 %bias 가각각 -98%, -108% 로나와 IPF 검사는보관없이당일검사시행을원칙으로결정하였다. HG-06 열대열말라리아환자의증례보고 가톨릭대학교여의도성모병원혈액 UNIT 문영미ㆍ김진순ㆍ유소영ㆍ양진영 * 배경 : 말라리아는 Plasmodium 속원충이적혈구와간세포내기생함으로써발병하는급성열성감염증이며, 말라리아원충이인체의적혈구내에기생하면서적혈구가파괴되어주기적인열발작, 빈혈, 비종대등의증상을나타낸다. Plasmodium 속원충가운데 Plasmodium vivax ( 삼일열원충 ), P. falciparum ( 열대열원충 ), P. malariae ( 사일열원충 ), P. ovale ( 난형열원충 ) 4종의원충만이사람에서질병을야기하는것으로알려져있다. 열대열말라리아는열대아프리카지역과남아시아에주로분포하며, 발열, 두통, 구토, 설사등의증세와함께빈혈, 급성신부전, 범발성혈관내응고증후군, 뇌형말라리아등의합병증이발생할수있고열대열말라리아에걸린환자의약 1% 가사망에이르므로조기진단과치료가중요하다. 본원에서아프리카여행후발열을주소로내원한환자가열대열말라리아감염증으로진단되어증례보고하고자한다. 증례 : 18세여자환자가아프리카여행 12일후열, 설사, 근육통, 어지럼증으로타병원에방문하였으나치료받지않고본원응급실에여행 16일후내원하였다. 여행전말라리아예방적화학요법을시행하지않은상태로 10일동안스와질란드, 모잠비크, 남아프리카공화국을여행하였다고한다. 말라리아항원검사 (Immunochromatography Assay rapid, SD, 한국 ), CBC(XE-2100, Sysmex, 일본 ), 응고검사 (CA-7000, Sysmex, 일본 ), 화학검사 (Hitachi-7600, 일본 ) 를하였다. 도말슬라이드를 Wright-Giemsa 염색 (SP-1000i, Sysmex, 일본 ) 을하여후층도말검사를통해말라리아를선별하고, 박층도말검사로고배율 ( 1000) 에서 300개이상의영역을관찰하여말라리아원충의종류를감별하였으며, 단위용적당원충수 ( 수 /μl) 는 [( 도말원충수 /100 WBCs) 백혈구수 ] 식에의해계산하였다. 말라리아항원검사에서는대조선 (C) 과검사선1(Pf), 검사선2(Pan) 위치에모두 band가관찰되어 P. falciparum 양성또는다른말라리아속과동시감염으로판정되었다. 말초혈액 CBC는 WBC 8,100/μL, Hb 11.7g/dL, platelet 16,000/μL으로 severe thrombocytopenia 소견을보였으며, 응고검사에서는 PT 15.3초 (10~14), aptt 48.3초 (23~35) 로연장되었고화학검사는 AST 148 IU/L(7~36), ALT 114 IU/L(5~40), bilirubin 5.62 mg/dl(0.2~1.4), LDH 1,044 IU/L(200~400), CRP mg/l(0.1~5) 로상승하였고, BUN 59.1 mg/dl(8~23), creatinine 2.51 mg/dl(0.5~1.2) 이었다. 박층도말검사에서는적혈구크기는정상이며윤상체 (ring form) 가작고, 윤상체에 double chromatin dot 가보이는형태가많았으며, 한적혈구내에여러개의윤상체 (2~5개) 가관찰되었다. 생식모세포 (gametocyte) 는반월형 (crescentic form) 또는바나나형으로나타나는특징이있으나이환자의검체에서는관찰되지않았다. 도말검경결과최종적으로 P. falciparum 으로진단하였다. 원충의수는내원시 1-2개 /HPF, 40,500/μL 였으며내원 1일후에는 100개 /HPF, 내원 2일후에는 53개 /HPF 였다. 항말라리아약제 mefloquine 875mg, atovaquone 1250mg, proguanil 500mg, quinine dihydrochloride 1200mg을투여하였으나뇌합병증과다장기부전으로내원 48시간후사망하였다. 결론 : 열대열말라리아는발열외신부전, 간기능저하, 뇌형말라리아등의치명적인합병증으로인한사망률이높기때문에빠른진단과원충의수를신속히감소시키는것이매우중요하다. 본증례의환자는말라리아항원검사와도말검경을통해열대열말라리아로확진되었다. 아프리카지역을여행한후발열, 설사, 어지럼증등이있을때는열대열말라리아의가능성을염두에두고검사를진행해보아야한다. 31

51 혈액검사학 HG-07 새로운 Myeloperoxidase 염색시약의도입과활용경험 인제대학교해운대백병원진단검사의학과 홍석호 1, * ㆍ김소윤 1 ㆍ송정길 1 ㆍ임언주 1 ㆍ권형범 1 이희련 1 ㆍ전경란 2 ㆍ이정녀 2 배경 : MPO 염색은 PAS 염색과더불어 AML, ALL 의형태학적구분에있어중요한지표가되지만, Benzidine 의시약독성, 시약조제과정의어려움, 낮은염색성공률등조작이까다로워, 상품화된 MPO 염색시약 (New PO-K Stain Kit, Muto Chemical, Japan) 을도입하였다. 그러나동봉된시약지침서의내용이미비하여보다효율적인염색과정확립을위해기존시약과새시약을실험하고비교분석하였다. 방법 : New PO-K Stain Kit 의성분조성은 2,7-Diaminofluorene, p-nitrophenyl, Sodium nitroprusside 의혼합기질로이루어져있으며, 부활제분말, 반응액, H 2O 2 의혼합으로활성이시작된다. 권장사용시간은조제후 30 분이내이며, 조제된 Kit 1 vial 당권장작업량은슬라이드 2 매염색이다. 이에시약활성에관여하는반응액과 H2O2 의첨가단계조절, 검경시야상에서인공산물이나타나지않는적절한혼합방법, 시약조제후변성을억제하는적정보관온도등을실험하였으며, 기존 CML 진단된환자의무염색골수도말표본및호중구비율이 90% 이상을보이는환자의무염색말초혈액도말표본을이용하여염색성을평가하였다. 결과 : 시약의활성이시작되는반응액, 부활제, H 2O 2 혼합한후, 4 냉장보관시에는시약변성을보였으나, -70 에보관하였을때염색성의변화가없었다. H 2O 2 의첨가량은 20 ul 가적절하였으며, 시약 1 vial (5 cc) 당 2 회로제한되어있던권장사용량 2.5 cc 를반으로더나누어, 1.3 cc 로염색처리를했을시에도염색성은동일하였다. 적정혼합시간은 Roller mixer 10 분이었으며, 상품화된대조염색용 Giemsa 시약대신자가제조 Giemsa 염색시약사용하였을때, 인산완충처리과정에서높은시약민감도로인해, 일률적인염색성을보이지않았다. 고찰 : New-POK Stain Kit 의도입으로, Benzidine 대신 Diaminfluorene 으로발색을하여독성시약사용을배제하였고, 기존시약대비작업시간및염색절차에있어절반가량의단축을보였다. 또한자가조제 Giemsa 시약대비, 상품화된 Giemsa 시약의염색우수성및수세용이성을확인하였으며, 냉동보관된조제시약의염색양호가능성을확인하여, 시약조제및염색지침을확립하였다. HG-08 인듐화합물노출근로자의백혈구수치변화 한국산업안전보건공단산업안전보건연구원 원용림ㆍ최윤정ㆍ김기웅 배경 : 인듐은휴대전화, TV 를비롯한디지털기기에서디스플레이패널의핵심소재로사용되는금속이다. 과거인듐은인체에무해한금속으로여겨졌으나인듐노출로인한폐질환자와사망자발생을계기로일부국가에서그유해성에대한연구가진행되고있다. 우리나라는디스플레이패널세계시장점유율 1 위로세계디스플레이패널의약 50% 를공급하고있는세계제 1 의인듐소비국가이다. 하지만인듐노출에의한건강영향연구는미비한상황이며폐질환예방체계및검진기준또한마련되지못한실정이다. 따라서본연구를통해국내인듐취급근로자를대상으로백혈구수치변화를확인하고검진기준마련을위한기초자료를제공하고자하였다. 방법 : 국내에서인듐을취급하는디스플레이제조관련공장의남성근로자 156 명을대상으로하였다. 혈청인듐은 ICP-MS (bruker), KL-6 는 ELISA (EIDIA), 백혈구분별계수는자동혈구계수기 (sysmex XE-2100) 를이용하여분석하였다. 자료분석은 version 18.0 SPSS Statistics 프로그램을이용하였고통계적유의수준은 p <0.05 로하였다. 결과 : 혈청인듐의일본참고치 3 μg/l 초과자에서 neutrophil, lymphocyte, monocyte, eosinophil 이의미있는변화를보였으며인듐농도의증가에따라 neutrophil 의증가경향과 lymphocyte 의감소경향이뚜렷하였다 (p for trend<0.05). KL-6 의일본참고치 500 U/mL 초과자에서는 neutrophil, lymphocyte, monocyte 의변화가의미있었으며 KL-6 의농도증가에따라 neutrophil 은증가하였으나, lymphocyte, monocyte, eosinophil 은뚜렷한감소경향을보였다 (p for trend<0.05). 혈청인듐또는 KL-6 를독립변수로, 백혈구분별계수결과및백분율을독립변수로회귀분석을실시한결과혈청인듐은영향력이낮았으나 KL-6 는 neutrophil 의증가와 lymphocyte, monocyte 의감소에영향을주는것으로분석되었다. 결론 : 백혈구총수치와분별계수결과는모두정상범위이나일본의참고치를초과한그룹에서 neutrophils 의증가, lymphocyte 와 monocyte 의의미있는감소가확인되었다. 이는연구대상자에서 neutrophil 을증가시킬수있는감염, 스테로이드약물치료등이없었으며혈청인듐농도및간질성폐질환의마커인 KL-6 의농도변화에따라의미있는변화를보였으므로직업적인듐노출로인한백혈구수치의변화라고판단된다. 고농도의인듐노출에서도변화의폭이작아진단지표로활용가치는낮으나특발성폐섬유증, 폐석면증등의질환에서 neutrophil 이증가하였다는보고가있으므로인듐에의한간질성폐질환예방을염두에둔진단항목개발과인듐에의한폐질환발생기전파악등의후속연구진행이요구된다. 32

52 혈액검사학 HG-09 검사시간지연에따른세포생존율과림프구아형비율의변화 이원의료재단 노정원 배경 (Background): 유세포분석법은다양한항원을동시에측정할수있고특정한표현형을갖는세포의빈도와혈액단위부피당절대수를신속하게제공할수있기때문에림프구아형의분석에매우효율적인방법이다. 또한후천성면역결핍의추적관찰, 자가면역질환, 장기또는골수이식후거부반응예측등에유용하게이용되나검체안정시간이짧아채혈후 24 시간이내에검사하도록되어있다. 그러나수탁기관의특성상채혈후 24 시간이내검사하기어려운경우도있어검체채혈후검사시간지연에따른세포생존율과림프구아형비율의변화를비교해보고자한다. 방법 (Methods): 건강한성인 5 명의혈액을채취하여채혈당일부터 5 일차까지의변화를비교하였다. 검사항목은 WBC/Lymphocyte 생존율과림프구아형 5 종 (Total Tcell, Helper Tcell, Suppressor Tcell, Bcell,NK cell) 으로하였다. 검사장비는 Beckman coulter Cytomics FC500, 검사시약은 Beckmam Coulter 7AAD, CD3/4, CD3/8, CD3/19, CD3/16+56 를사용하였다. 결과 (Results): WBC/Lymhpocyte 생존율은평균채혈당일 99.2%/ 99.8%, 2 일차 94.5%/99.1%, 3 일차 66.0%/97.8%, 4 일차 56.8%/93.8%, 5 일차 54.9%/86.6% 였다. 2 일차까지 90% 이상이던 WBC/Lymphocyte 생존율이 3 일차부터검체 1;55.3%/98.5%, 검체 2;66.0%/98.0%, 검체 3;70.3%/97.9%, 검체 4;72.3%/97.8%, 검체 5;66.0%/97.0% 로눈에띄게감소하였다. 그에비해림프구아형 5 종의비율은큰차이를보이지않았다. 고찰 (Discussion): 유세포분석법을이용한림프구아형검사는채혈후 24 시간이내검사하도록되어있지만채혈후 2 일차까지의림프구의세포생존율은비교적안정하였다. 또한검체채혈후검사시간이다소지연되어도림프구아형비율자체의변화는크게없었다. 그러나실험대상군이건강한성인으로실제환자나노약자의경우결과값을예측할수없으므로가능한채혈후 24 시간이내검사를시행하고부득이검사시간이 2 일이상지연되어검사할경우세포생존율검사를함께시행하여보고하는것을권장한다. HG-10 말초혈액염색체검사에서진단된 Mosaic Double Aneuploidy 중 Trisomy 8-Turner syndrome 의증례 삼성서울병원진단검사의학과 양정희ㆍ탁은영ㆍ지옥자ㆍ김은지 배경 : Chromosome aneuploidy 는상동염색체, 성염색체모두에서나타날수있는염색체이상중하나이다. 8 번염색체의 trisomy 가 mosaic 으로나타나는 Warkany syndrome 은 25,000~50,000 명중 1 명꼴로발생한다고알려져있다. Trisomy 8 은주로지능저하, 두개골기형, 작은키등을보이고, 약 20% 의환자에서는심장기형등의증상을동반하며, 나이가들수록 trisomy 8 을가진세포의비율이줄어든다. 상동염색체와성염색체를둘다포함하는 double aneuploidy 는 trisomy 21 이나 trisomy 18 과관련된 Down-Klinefelter, Down-Turner, Edward-Klinefelter, Edward-Turner 등이주로보고되고있으나, 본증례와같은 Trisomy 8-Turner syndrome 은매우드문것으로알려져있어소개하고자한다. 증례 : 환자는 28 세여자로대동맥박리가있어서외과적수술을위해본원에내원하였으며, 키는 140cm, 익상경, 외반사, 불규칙한생리등의증상이선천적으로있어서 Turner 증후군을의심하여말초혈액을통한염색체검사가의뢰되었다. Trisomy 8 에서주로나타나는지능저하나두개골기형등의증상은없었고, 왼쪽신장기형의가족력이있었다. 말초혈액 G-banding 염색체검사상 mos 45,X[17]/47,XX,+8[33] 의결과를보임에따라, FISH 검사법으로 CEP X/Y 와 MYC 을섞어서동일한세포에시행했다. 그결과 monosomy X 는 20%, XX 는 80% 의세포에서나타났으며, trisomy 8 은오직 XX 를가진세포에서만나타났다. 고찰 : Trisomy 8 에대해서는 1971 년처음보고되었는데, 자연유산의약 0.7% 에서발견되었고, mosaic 의경우에만출생이가능한것으로보고되고있다. 본증례를살펴보면, 환자의신체적징후가 Turner 에의한것인지 trisomy 8 에의한증상인지는명확하게구분할수없었다. 따라서, 말초혈액염색체분석시 aneuploidy 가의심될때에는다양한가능성을가지고충분한수의세포를분석하는것이정확한진단에큰도움이될것이다. 또한 skin fibroblast 를검체로염색체분석이시행될경우 mosaicism 을검출할수있는확률이훨씬높은것으로알려져있으므로, 검체선택에있어서도신중을기해야할것으로판단된다. 성인이되어생존하고있는 Mosaic trisomy 8-Turner 증후군은매우드물고, 그중에서도이환자는대동맥박리를가진첫번째증례로그학술적의미가크다고할수있다. 33

53 혈액검사학 HG-11 급성골수성백혈병에서 FLT3 internal tandem duplication 정량검사법개발과임상적유용성평가 가톨릭대학교서울성모병원진단검사의학과분자유전 unit 이건동ㆍ김정은ㆍ이상윤ㆍ김정록ㆍ유재빈ㆍ최지선차경호ㆍ김용구ㆍ김명신 배경 (Background): 급성골수성백혈병 (acute myeloide leukemia, AML) 에서유전자변이를검사하는것은진단뿐만아니라잔류병소의검출, 재발유무, 생존율과같은예후를예측하는지표로사용되고있다. 이중 FLT3 (fims-like tyrosine kinase) 유전자변이는 AML 에서가장흔히나타나는변이로진단시에 FLT3 internal tandem duplication (FLT3-ITD) 이존재하면예후가불량하며재발율과생존율에영향을미치는것으로보고되어왔다. 특히최근에는 FLT3-ITD 유무보다변이의정량 (quantification) 적차이가환자의치료성적및예후와더욱밀접한관련성이있는것으로보고되고있다. 그러나 FLT3-ITD 의정량분석은유전자변이의위치와크기가다양하기때문에실시간정량 PCR (real-time quantitative PCR) 로시행되기어려운점이있다. 본연구에서저자들은 fragment analysis 방법을이용한 FLT3-ITD 정량검사법을새로이개발하였고이를다양한방법으로검증, 평가하고임상적의의를알아보고자하였다. 방법 (Methods): FLT3-ITD 정량분석은형광표지자를붙인 FLT3 시발체 (primer) 를제작하여 PCR 을한후 AB 3130 Genetic Analyzer (Applide Biosystems, USA) 를이용하여 capillary electrophoresis 를수행하는 fragment analysis 법을사용하였다. 최종결과는 GeneMapper v4.1(applide Biosystems) 소프트웨어를이용하여정량적으로측정하였다. FLT3-ITD 의정량계산은 FLT3-ITD 변이형 (mutant) 을전체 FLT3 ( 야생형 (wild type) 과변이형 (mutant) 의합 ) 로나눈백분율로계산하였다 {mutant peak 높이또는면적 / (wild type peak 높이또는면적 + mutant peak 높이또는면적 ) x 100}. 개발된검사방법의특이도를알아보기위해정상골수공여자 50 검체를분석하였고검출민감도및재현성, 직선성을보기위해 TOPO TA cloning kit (Invitrogen, USA) 로 FLT3 유전자를클로닝하여 wild type 과 mutant 의 plasmid DNA 를각각추출하고이를이용하여 FLT3 mutant allele 의함유량을 100% 에서 0% 까지되도록혼합희석한시료를제작하여비교분석하였다 년 4 월부터 2014 년 3 월까지가톨릭대학교서울성모병원진단검사의학과에 FLT3 유전자변이검사가의뢰된 4235 건중 PCR 검사로 FLT3-ITD 양성이나온 182 개의검체를대상으로새로개발된 FLT3-ITD 정량검사법의임상적의미를평가하였다. 결과 (Results): FLT3-ITD 정량검사법으로정상검체를분석한결과 50 검체모두에서음성결과를보여본검사법이 mutant 만을특이적으로증폭할수있음을확인하였고 wild type 과 mutant 의각각의최소검출 DNA copy 수는 10 copy 였다. Wild type 과 mutant 의혼합희석실험을통해측정한검출최저농도는기존 PCR 방법에서 10%, 본 FLT3-ITD 정량검사법에서는 3% 로 PCR 방법에비해높은민감도를보였다. 직선성평가에서는 r 값이 로나타났고, 정량백분율계산시 peak 의높이를사용한값과 peak 의면적을사용한값을비교한결과 y=1.0297x(y: 높이,x: 면적 ) 로높은상관성을보였다. 기존 PCR 결과에서양성이었던 182 건모두 FLT3-ITD 정량검사법으로도 mutant 가검출되었으며 ( 중앙값 32.3%, %), 이들중 AML 초기진단시 FLT3-ITD 검사가의뢰된환자 75 명 ( 남자 41, 여자 34, 연령분포 세, 연령중앙값 49 세 ) 을조사한결과 mutant 비율은중앙값 35.2% ( %) 였다. AML 의진단기준에따른아형별 mutant 비율은 AML with NPM1 mutation (24 명 /40.6%), AML with PML/RARA (11 명 /32.3%), M1 (9 명 /30.4%), M4 (8 명 /38.7%), M2(7 명 /26.0%), AML with myelodysplasia-related change (4 명 /24.4%), M5(4 명 /41.9%), AML with DEK/NUP214 (4 명 /30.6%), AML with RUNX1/RUNX1T1 (3 명 /45.6%), M7(1 명 /49.0%) 였다. 고찰 (Discussion): 본연구에서저자들이고안한 fragment analysis 를이용한 FLT3-ITD 정량검사법은실시간정량 PCR 법에비하여비용이저렴하고, FLT3-ITD 와같이다양한양상을보이는변이를비교적손쉽게효과적으로정량값을측정할수있는것으로나타났다. 또한기존의 PCR 결과에비해민감도, 특이도가우수하고더예민한방법으로판단되어, 앞으로 AML 환자에게 FLT3-ITD 의정량값을보고하는데검사실에서의활용도가높을것으로생각한다. 추후연구에서는 FLT3-ITD 변이의정량값에따른생존율과재발율에미치는영향, 그리고다른유전자변이들이함께존재할때예후의변화등추가적인임상적의의에대한분석이필요할것으로사료된다. HG-12 Pallister Killian Syndrome 의증례보고 ( 재 ) 씨젠의료재단분자진단센터 한재이 * ㆍ이현정ㆍ최수현ㆍ송지원ㆍ정유진ㆍ장미선 배경 : Pallister Killian Syndrome (PKS) 은 12 번염색체단완의 i(12p) 를가지는염색체이상으로대부분정상핵형과함께모자이시즘형태로나타난다. I(12p) 는주로피부에서검출되며드물게융모막융모, 양수세포, 말초혈액에서검출된다. PKS 의주요임상증상으로는근력저하, 간질발작, 지적장애, 발육지체, 색소침착, 청력저하, 심혈관계이상, 편평한후두부, 전두부돌출, 양안격리증, 납작한코, 부분탈모로인한안면기형등이있다. 저자들은양수를이용한산전염색체검사와말초혈액에서 PKS 를경험하였기에이를보고하고자한다. 증례 : 첫번째증례는 35 세로고령임신을이유로양수염색체검사가의뢰되어, 47,00,i(12)(p10)[5]/,46,00[83] 로확인되었고, 두번째증례는 5 개월된여아로 dysmorphic feature 를이유로말초혈액염색체검사를시행하여 47,XX,+i(12)(p10)[2]/46,XX[28] 의핵형을확인하였는데, 단지 2 개의중기분열세포에서만 i(12p) 가관찰되어추가로 12 번염색체만을 100 개의세포에서 Scoring 하였으나 i(12p) 를더이상발견하지는못하였다. 그러나, 이후 Array CGH 검사를통해 12 번염색체단완 (12p13.33 p 11.1) 부위에서 Mb 의중복이확인되어 PKS 임을확진할수있었다. 결론 : Pallister Killian Syndrome 은모자이시즘으로나타나므로이질환을의심하여염색체검사가의뢰되는경우에는, 20 개의중기세포보다훨씬더많은중기세포를관찰해야한다. 일반적으로말초혈액에서는검출하기어려우므로말초혈액보다는피부조직으로검사하는것이더추천되어진다. I(12p) 가발생하는기전과그부모의기원에대해서는거의알려진바가없으며, 검체에따라검출빈도의차이가있는것으로보고되고있다. 특히대부분의경우모자이시즘으로검출되므로산전검사에이용되는융모막융모, 양수검체로부터의염색체검사는보다신중한분석이필요할것으로사료된다. 34

54 혈액검사학 HG-13 산전진단된 Double aneuploidy ( 재 ) 씨젠의료재단분자진단센터 송지원 * ㆍ이현정ㆍ최수현ㆍ한재이ㆍ장미선 배경 : Double aneuploidy( 중복홀배수체 ) 란한개체에서두가지이상의염색체수적이상이동시에나타나는것을말한다. 이는매우드문형태로산모의나이가많을수록빈도가증가한다고보고되며, 대부분의경우임신초기에자연유산되는것으로알려져있다. Double aneuploidy 는상염색체간또는상염색체ㅡ성염색체간, 상염색체의 Trisomy 와성염색체의수적이상의형태로나타나는데, 그중상염색체 Trisomy 와성염색체의수적이상이가장많이보고되고있다. 이에저자들은양수검체를이용한산전염색체검사에서관찰된 Double aneuploidy 의세가지사례에대해보고하고자한다. 증례 : 2010 년 3 월부터 2013 년 6 월까지의뢰된 Amniotic fluid 검체로 Bio-AMF2 media 를이용하여 In-situ method 로 7 일간배양한후 Harvest 과정을거쳐중기분열세포를분석하였다. 1) 34 세의 Down Syndrome 위험군 1:64 로의뢰된환자로 46,X,+21[18]/47,XX,+21[10] 2) 39 세의 Choroid Plexus Cyst, Old age 로의뢰된환자로 48,XXX,+18, 3) 41 세의 Old age 로의뢰된환자로 47,XXX[42]/48,XXX,+18[11] 이들사례모두성염색체와상염색체간의수적이상으로나타났다. 결론 : Double aneuploidy 이상이일어나는정확한원인은알려지지않았지만, 감수분열단계에서 2 개이상의염색체에동시에비분리현상을일으키거나, 비분리현상에대한개개인의유전적요인때문이거나, 하나의염색체불균형이다른염색체의비분리현상의발생을증가시키기때문이라는보고들이있다. 또한, 비정상적인방추사와방추사부착점, 자매염색분체부착단백질, 감수분열의운동단백질등의이상이나이가많은고령임신에서 Double aneuploidy 의위험성을증가시킨다고알려져있다. HG-14 CML 에서확인된 complex variant Philadelphia chromosome 3 례 씨젠의료재단분자진단센터 최수현 * ㆍ이현정ㆍ송지원ㆍ한재이ㆍ장미선 배경 : 만성골수성백혈병 (Chronic Myeloid Leukemia,CML) 의 95% 이상에서는전형적인염색체이상형태인 t(9;22) 의필라델피아염색체가관찰된다. 그러나약 5-10% 에서는변형필라델피아염색체 (variant Philadelphia chromosome) 전좌가관찰되는것으로알려져있다. 이러한만성골수성백혈병의경우 Philadelphia 염색체양성이면예후가좋은반면에, 급성백혈병에서는 Philadelphia 염색체가양성이면좋지않은예후로알려져있다. 변형필라델피아염색체도다른염색체와재배열이발생하는경우불량한예후로보고되고있어본검사실에서확인된 complex variant Philadelphia chromosome 3 례를보고하고자한다. 증례 : 3 증례모두골수천자액으로배양후염색체분석을시행하였고, 첫번째증례의경우 FISH 분석까지진행하여확인하였다. 1. M/41, R/O CML 46,XY,t(8;9;22)(q22;q34;q11.2)[17] Nuc ish (ABL1x3,BCRx3)(ABL1 con BCRx1)[125/243]/ (ABLx3,BCRx2)(ABL1 con BCRx1)[69/243] 2. M/55, R/O CML 46,XY,t(6;9;22)(q23;q34;q11.2)[20] 3. F/71, R/O CML 46.XX,t(1;6;9;22)(q25;q25;q34;q11.2)[20] 결론 : 염색체분석에있어서중기분열세포를관찰하는 G- 분염법만으로는 t(9;22) 의전형적인형태만관찰될수있다. 변형필라델피아염색체를가진세포는생체외에서분열능이떨어져중기세포에서는관찰되지못하고, 분열능이증가되어있는전형적인필라델피아염색체만관찰되어보고될가능성이크다. 또한, 전형적인형태가아닌 masked 전좌 (insertion), 또는 complex variant 일경우, t(9;22) 가존재하고있음을놓칠수있으므로 CML 이의심되는환자에서 t(9;22) 의염색체형태가관찰되지않을경우에는 G 분염법과 FISH 검사를통하여 BCR/ABL 재배열여부를확인할필요가있으며, 변형필라델피아가관찰되는경우에는보다주의깊은추적관찰이필요하다. 35

55 혈액검사학 HG-15 Direct Sequencing 법을이용한선천성난청검사 (GJB2) 의희귀증례보고 삼광의료재단 이종민ㆍ이연주ㆍ김선아ㆍ석윤미 HG 쌍의부부에서관찰되는혈액염색체이상의유형과빈도분석 이원의료재단세포유전학실 김정수ㆍ정은영ㆍ서한익ㆍ조진희 배경 : 선천성난청은신생아 1000 명당 1 명의빈도로나타나며, 약 70% 가비증후군성유전성난청의범주에속한다. GJB2 유전자돌연변이는비증후군성유전성난청의주요원인으로알려져있으며, 인종에따라상염색체열성유전성난청에서 20~50% 로발견됨이확인되었다. 한국인비증후군성유전성난청환자를대상으로한연구에서 GJB2 돌연변이보인자의빈도는약 25%, 두개의열성돌연변이를지닌환자의빈도는약 11% 로보고되었다. 하지만, 인종별로 GJB2 유전자돌연변이의스펙트럼은판이하게다르므로, GJB2 유전자검사시이에대한고려가반드시필요하다. 이에따라, 본검사실에서는한국인에게서드물게보고된 GJB2 c.134g>a 돌연변이와함께 c.408c>a 돌연변이가동시에검출된증례 2 예를보고하고자한다. 증례 : GJB2 유전자돌연변이검사를위해신생아혈액여지를전처리한후 QIamp DNA Mini Kit (Qiagene, Germany) 를이용하여 DNA 추출을시행하였고, 추출된 DNA 를자체개발한 primer 를사용하여 polymerase chain reaction (PCR) 로증폭하였다. 증폭된 PCR 산물을정제하고, 염기서열검사 (direct sequencing) 를시행한후, 3730 DNA Analyzer (Applied Biosystems, USA) 를이용하여유전자변이여부를확인하였다. 분석결과, 증례 1 에서는 heterozygous c.134 G>A (p.gly45glu) 와동시에 heterozygous c.408c>a (p.tyr136*) 가검출되었고, 증례 2 에서는 homozygous c.134g>a (p.gly45glu) 와동시에 homozygous c.408 C>A (p.tyr136*) 가검출되었다. 고찰 : p.gly45glu 돌연변이는동양인에서주로보고되며, 한국인에서는드물지만, 일본인의감각신경성난청환자에서약 2.5% 의빈도로보고되었다. 일본인을대상으로한연구에서 p.gly45glu 가발견된모든대립유전자에서 p.tyr136* 를함께지니고있음이밝혀져 p.gly45glu 와 p.tyr136* 사이에완전연관불균형 (complete linkage disequillibrium) 이성립한다는가설이제시되었다. p.gly45glu 와 p.tyr136* 는상염색체열성유전의형태로난청의원인이되지만, 최근한연구에서는 p.gly45glu 와 p.tyr136* 가동시에존재할경우에는 p.tyr136* 의보호작용에의해치명적인질병이발생하지않지만, p.tyr136* 이없이주돌연변이인 p.gly45glu 만존재할경우, 치명적질병인 keratitis-ichthyosis-deafness (KID) 가발생한다는것을입증하였다. 앞으로의추가적인연구를통해한국인에서의 GJB2 p.gly45glu 돌연변이및 p.tyr136* 돌연변이의발병기전을밝히는것이요구된다. 또한, 난청환자및가계를대상으로 GJB2 유전자돌연변이검사를함으로써정확한돌연변이양상을파악하고, 한국인 GJB2 유전자의주요돌연변이스펙트럼을확립하는데도움이되리라기대한다. 배경 (Background): 습관성유산이란연속적으로발생하는 2 ~ 3 회이상의유산으로약 1% 의여성에서발생한다고알려져있으며, 불임은피임을시행하지않은부부가정상적인부부관계에도불구하고 1 년이내에임신에도달하지못한경우로정의할수있다. 본기관에서는 2013 년 1 월부터 2014 년 4 월까지습관성유산, 불임등을주소로의뢰된부부의말초혈액검체를대상으로하여염색체이상유형과빈도를분석해보고자한다. 방법 (Methods): 분석대상은총 371 쌍 (742 예 ) 의말초혈액검체를대상으로하였다. 검사방법은말초혈액검체를배양액에서 72 시간배양후세포수확하였으며, 수확한세포를고정한후 G- 분염법을실시하여 20 개이상의중기세포를분석하였다. 결과 (Results): 습관성유산, 불임등을주소로의뢰된부부총 371 쌍 (742 예 ) 의염색체검사결과, 정상핵형은 703 예 (94.7%) 였으며, 비정상핵형은 39 예 (5.3%) 에서확인되었다. 비정상핵형의유형은수적이상이 7 예 (1%), 구조적이상이 32 예 (4.3%) 였고구조적이상의유형과빈도는상호전좌 23 예 (3.1%), 역위 8 예 (1.1%), 파생염색체 1 예 (0.1%) 순으로나타났다. 또한성별에따른비정상핵형의유형과빈도를살펴보았을때, 남자에서비정상핵형은 10 예 (2.7%) 에서확인되었고, 수적이상이 2 예 (0.5%), 구조적이상이 8 예 (2.2%) 였다. 여자에서비정상핵형은 29 예 (7.8%) 에서확인되었으며, 수적이상이 5 예 (1.3%), 구조적이상이 24 예 (6.5%) 였다. 남자에서수적이상을보인 2 예는모두 47,XXY 였으며, 여자에서수적이상을보인 5 예중 3 예는 45,X 의핵형을보였다. 고찰 (Discussion): 습관성유산, 불임등을보인부부에서염색체이상의빈도는 5.3% 로나타났다. 염색체이상의빈도는여자가 29 예 (7.8%), 남자가 10 예 (2.7%) 로여자에서약 3 배정도높았다. 염색체이상의유형은남녀모두에서구조적이상이수적이상보다높게나타났고, 구조적이상중에서는상호전좌의빈도가 23 예 (3.1%) 로가장높았다. 수적이상은남자에서는모두 klinefelter syndrome 이었으며, 여자는 turner syndrome 이차지하는비율이높았다. 이에본기관에서분석된 371 쌍부부 742 예의혈액염색체검사에서관찰되는유형과발생빈도분석이타기관및환자유전상담에있어서참고자료로활용될수있을것으로생각된다. 36

56 혈액검사학 HG-17 산전염색체수이상선별을위한 QF-PCR 검사와염색체핵형분석결과의비교 이원의료재단세포유전학실 민주영ㆍ조상희ㆍ서한익ㆍ조진희 HG-18 염색체검사에서확인된 inv(y) 증례보고및문헌고찰 이원의료재단세포유전학실 이선순ㆍ이은희ㆍ서한익ㆍ조진희 배경 (Background): Quantitative-fluorescent polymerase chain reaction(qf-pcr) 검사는각염색체마다특이적으로존재하는 DNA 의반복부위인 short tandem repeat 에형광을붙여 PCR 법으로증폭시킨후 DNA 자동염기서열분석기를이용하여그양상을관찰하여염색체이상을분석하는방법으로세포배양법을이용한염색체핵형분석검사보다신속하게염색체의수적이상을진단할수있는장점이있다. 이에본기관에서는 QF-PCR 검사결과와염색체핵형분석결과를비교하여 QF-PCR 검사의유용성에대해알아보고자한다. 방법 (Methods): 2013 년 1 월부터 2014 년 4 월까지 QF-PCR 검사가의뢰된양수 460 예를대상으로하였다. QF-PCR 검사는 QIAamp DNA minikit(qiagen,germany) 로 DNA 를추출한후 13,18,21,X,Y 염색체에위치한 STR 표지자로구성된 Elucigene kit (Gen-Probe, Abingdon, UK) 를사용하여검사를실시하였다. 염색체핵형분석검사는양수검체를배양액에서 7~10 일배양후세포를수확하고, 수확한세포를고정한후 G- 분염법을실시하여 20 개이상의중기세포를분석하였다. 결과 (Results): 총 460 예중 253 예에서 21 번표지자에대해 QF-PCR 분석을시행하였고, 나머지 207 예에서는 21 번표지자외에 13, 18, X/Y 표지자를추가로분석하였다. 21 번표지자에대해서만 QF-PCR 검사를시행한 253 예중 trisomy 21 은 9 예 (3.5%) 에서확인되었고, 이들의염색체핵형분석결과는 trisomy 21 이 8 예, der(21) 이 1 예였다. 21 번표지자의 QF-PCR 검사결과정상인 244 예중 240 예는정상염색체소견을보였으며, trisomy 18 이 2 예, der(15;21) 과 deletion 이각각 1 예에서확인되었다. 13, 18, 21, X/Y 표지자에대해 QF-PCR 검사를시행한 207 예에서는 trisomy 13 이 1 예, trisomy 18 이 4 예, trisomy 21 이 8 예에서확인되었고염색체핵형분석결과와도모두일치하였다. 이외에 D13S634 표지자의미세수준의중복 (submicroscopic duplication) 이 3.9%(8/207) 에서확인되었는데, 이는기존한국인을대상으로한연구에서보고된빈도 (1.4 또는 1.6%) 보다조금높게나타났다. 배경 (Background): Y 염색체의흔한구조적이상은장완의이염색질 (heterochromatin) 부위의비후나결실이며, 중복 (duplication), 전위 (translocation), 역위 (inversion) 등은드문것으로알려져있다. Y 염색체의완간역위는 1000 명당 1 명의빈도로발생하며정상적변이로알려져있지만, 성결정유전자부위 (SRY) 의구조적이상의결과로정자형성장애나외성기이상등을나타낼수있으므로정확한절단점 (break point) 을찾는것이중요하다. 이에 G- 분염법과함께 C- 분염법을시행하여 inv(y) 를확인한예가있어문헌고찰과함께보고하는바이다. 증례 (Case): 환자는산전기형아선별검사에서다운증후군고위험군의임상소견으로양수염색체검사를의뢰하였다. 양수검체는 BIO-AMF-2 배양액에서 7~10 일간배양후세포를수확하였으며, 수확한세포를고정한후 G- 분염법을실시하여 20 개이상의중기세포를분석하였다. 핵형분석결과 Y 염색체의역위가관찰되었다. 정확한절단점의확인을위해 C- 분염법를추가적으로실시하여 Y 염색체의이염색질의위치와절단점을확인하고 46,X,inv(Y)(p11.2q11.23) 로보고하였다. 이후태아의아버지혈액염색체검사에서동일한 Y 염색체역위소견이있어가족성으로발생한경우임을확인하였다. 고찰 (Discussion): Y 염색체의완간역위는다양한절단점에서발생할수있다. 기존문헌에서보고된 10 예에서단완의절단점은모두 Yp11.2 에위치하였고, 장완의절단점은 4 가지유형으로나눌수있었다. 본증례에서도단완의 Yp11.2 에절단점이위치하였으며장완의절단점은 Yq11.23 으로분석하였으나 Y-specific FISH probe 를이용한추가적은연구는시행하지못하였다. 본증례와기존문헌을토대로 inv(y) 에서단완의절단점의 hot spot 은 SRY 유전자보다근위부에위치하는 gene-poor region 임을알수있었으며, 장완의절단점은다양하므로 C- 분염법이나 FISH 검사등을추가로시행하여정확한절단점을확인하는것이필요하겠다. 고찰 (Discussion): QF-PCR 검사는염색체핵형분석결과와의일치율이높고적은양의세포로도검사가가능하여임상검사실에서염색체의수적이상을진단하는데유용하다. 그러나특정염색체의수적이상만분석이가능하며, 분석한표지자외의염색체의수적이상이나구조적이상을동반한경우에는세포배양법을이용한핵형분석과불일치하는결과를보일수있으므로주의를요한다. 37

57 혈액검사학 HG-19 A case of an adult with Cytogenetic variant, ins(17;15)(q21;q15q22) in an APL Seegene Medical Foundation (SMF) Mi-sun Jang, Cha-ja See, Hyun-jung Lee, Sun-kyung Jung Background: Acute promyelocytic leukemia (APL) is usually diagnosed on the bone marrow morphology and confirmed by the presence of the t(15;17). T(15;17) is reported in 92% of APL cases, with 2% having simple or more complex variants, another 4% with insertions of RARA into PML or PML into RARA, and the rest with RARA fused to partner genes other than PML, or, in 1%, with no RARA rearrangement. We present a case of APL in an adult, microscopically visible insertion, ins(17;15)(q21;q15q22). This was identified by classical cytogenetic analysis and confirmed with molecular cytogenetic analysis by fluorescence in situ hybridization (FISH). Case: A 58-year-old woman was referred for APL. Chromosome analysis of unstimulated bone marrow cells from the patient was performed at presentation. Harvest of 24-hour culture was carried out using standard cytogenetic techniques. Twenty-seven trypsin-giemsa banded metaphase cells were analysed: 46,XX,ins(17;15)(q21;q15q22)[12]46,XX[15] FISH was carried out using the Prader-Willi/Angelman Region Probe LSI D15S10 SpectrumOrange/CEP 15 (D15Z1) SpectrumAqua/PML SpectrumGreen Probe and LSI PML/RARA Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe (Vysis). The PML gene on chromosome 15 was observed in chromosome 17 and the PML-RARA gene rearrangement (yellow signal due to a fusion of the red and green signals) was observed in interphase and metaphase cells. FISH confirmed the insertion of the 15q segment, including the PML gene, into the long arm of chromosome 17 with consequent PML-RARA gene fusion: nuc ish (PMLx3, RARAx2) (PML con RARAx1). ish ins (17;15) (q21;q15q22) (PML+, RARA+; PML+) Conclusion: The variant ins (17;15) is rare type in APL, its incidence is lower, several signal types in detection of FISH were observed and the combination chemotherapy for this patient showed more obvious efficacy. Rapid and reliable test to confirm the diagnosis of APL is very importance, and FISH study is available for rare cases of insertions resulting in the PML/RARA fusion. HG-20 산전염색체검사에서확인된 WHS (Wolf-Hirschhorn Syndrome) 2 례 분자진단센터, Seegene Medical Foundation (SMF) 이현정ㆍ한재이ㆍ최수현ㆍ송지원ㆍ장미선 배경 : 울프허쉬호른증후군 (Wolf-Hirschhorn Syndrome, 4p deletion) 이란 4 번염색체단완의부분적인결실혹은전좌에의해유발되는유전질환으로, 결실된범위가상당히다양하기때문에증상또한거의정상에서매우심한경우까지광범위하게나타난다. WHS 증후군환자의 85~90% 에서는자연발생적 (de novo) 으로발생하며, 악 10~15% 는전좌형보인자인부모로부터유전되어발생한다. 재발율은매우낮지만부모가전좌형보인자인경우에는다음임신시발생할가능성이많으므로유전상담이필요하다. 발생빈도는출생아 30,000 명 ~50,000 명중 1 명이며, 임상증상은특이한얼굴외형과소두증, 정신지연, 저신장, 근육긴장저하, 경련, 선천성심장병, 생식기이상, 청력소실, 신장기형등이있으며환아의 2/3 정도가생후첫 1 년이내분만시저산소증, 선천성기형 ( 심장이나신장의기형, 폐저형성, 횡격막탈장 ) 이나하부호흡기감염증으로사망한다. 저자들은산전염색체검사에서 4p deletion 을검출하고 FISH 법으로확인하였기에이를보고하고자한다. 증례 : 년 12 월 Fetal clunched finger 로의뢰된양수검체 년 12 월 Edward SD 1:100 으로의뢰된양수검체 Bio-AMF 2 배지를사용하여배양하였고, colcemide 처리후 Hypo sol.(0.6% Sod.citrate), Fixative(Methanol:Acetic acid= 2:1) 처리후 Trypsin-Giemsa stain 하여중기세포를관찰하였다. 핵형분석결과 1. 46,00,del(4)(p15.2) 2. 46,00,del(4)(p16.1).ish del(4)(p16.3)(whs-) 결론 : 일반적으로 Wolf-Hirschhorn 증후군은세포유전학적검사 ( 양수, 말초혈액염색체검사 ) 를통해 4 번염색체단완결실이나구조적이상을확인한다. 그러나 Wolf-Hirschhorn 증후군의일부는 4 번염색체단완의미세한결실을가지고있기때문에염색체검사로는검출이어려워 FISH 검사로 4p16.3 의미세결실을확인할수있다. 본증례의 2 번째 case 의경우도결실부위가짧아 WHS 증후군이의심되었지만 FISH 검사로확인한후에최종보고하였다. 그러므로산전염색체검사에서미세결실이의심된다면 FISH 검사로확인하는등더욱신중한분석이요구된다. 38

58 혈액검사학 HG-21 혈액검체의양이혈구검사에미치는영향 동의과학대학교 이수연ㆍ김은선ㆍ김도영ㆍ박수지ㆍ이진희ㆍ강효찬 * HG-22 대장암에서의현미부수체불안정성의검출 서울의과학연구소 유재송ㆍ강은주ㆍ한성희 배경 : 채혈은진단검사에있어서가장기초분야로정확한검사를위해서정량적채혈이필요하다. 본실험에서는진공채혈관을사용하지않는외래채혈및병동채혈시흔히범할수있는검체량부적합이혈구계수에미치는영향에대해알아보고자한다. 재료및방법 : 채혈대상은건강한성인여성 20 명을대상으로하였으며생리중인여성은제외되었다. CBC 검사에사용하는 Greiner K3-EDTA(Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany) 검체용기를사용하여정확히 3mL 를분주하였을때와 3mL 이하또는그이상을분주하였을때혈구계수결과를자동혈구분석기 (Sysmex XS-1000i, Japan) 를사용하여검사하였고, 채혈량은 1mL, 2mL, 3mL, 4mL, 5mL 로구분하였다. 결과 : 백혈구의경우정량인 3 ml 채혈시세포수는 6.45± /ul 개, 1 ml 채혈시세포수는 6.59± /ul, 2 ml 채혈시세포수는 6.60± /ul, 4 ml 채혈시세포수는 6.53± /ul, 5 ml 채혈시세포수는 7.41± /ul 의결과를보였다. 극소량에해당하는 1 ml 의경우정량 (3 ml) 과비교하면 0.14 (140 개 /ul) 정도의세포수차이를보였으나, 5 ml 과정량 (3 ml) 을비교하였을때는 1.0 (1,000 개 /ul) 정도의큰차이를보였다. 적혈구의경우정량인 3 ml 채혈시세포수는 4.38± /ul, 1 ml 채혈시 4.60± /ul, 2 ml 채혈시세포수 4.46± /ul, 4 ml 채혈시세포수 4.37± /ul, 5 ml 채혈시세포수 4.52± /ul 의결과를보였다. 극소량인 1 ml 의경우정량 (3 ml) 과비교하면 0.22 (22,000 개 /ul) 정도의차이를보였고, 5 ml 의경우정량 (3 ml) 과비교하면 0.14 (14,000 개 /ul) 의차이를보였다. 결론 : 본실험에서는대상군이건강한성인여성을대상으로하여실험을하였고또한혈구수가비슷한그룹을분석한결과로혈구계수에있어서검체량의차이가세포수산정에미치는영향을보여주는결과로채혈시정확한양의혈액을분주할것이요구된다. 특히진공관채혈을할경우이러한검체량의변화로인한검사결과오차를줄일수있을뿐아니라정확한세포수를산정할수있다고사료되며일반주사기로채혈을해야할경우되도록지정된정확한양의혈액을분주해야할필요성이있다. 배경 (Background): 현미부수체 (microsatellite) 는 1-6개정도의짧은염기서열이반복되는 DNA의일부를지칭한다. 현미부수체불안정성 (microsatellite instability) 은이러한반복되는염기의삽입또는상실로인하여정상세포와비교하여암세포에서반복되는염기의길이변화가초래된상태를말한다. HNPCC에서동반되어발생하는대장암은약 90% 에서 MSI를보이는것으로알려져있으며, 산발성대장암의경우 10~20% 에서 MSI가관찰된다. 본연구는 NCI 에서권장하는 5개의 Bethesda loci 이외에 Quasi loci의 NR-21, NR-24, MONO-27 loci를추가적으로검사하여검사의정확도를더욱더높이는데있다. 방법 (Methods): 대장암환자의 normal slide 와 cancer slide 샘플에서 genomic DNA 를추출한후 5 개의 Bethesda loci 와 3 개의 Quasi loci 를 multiplex PCR 방법으로증폭후 ABI3130xl 자동염기서열분석기를사용하여 fragment analysis 방법으로 normal 과 cancer 조직을비교분석하여현미부수체불안정성을확인하였다. 결과 (Results): 전체 20 쌍의대장암환자의 slide 샘플에서 DNA 추출후 BAT26, D5S346, BAT25, D17S250, D2S123 5 개의 Bethesda loci 에대해서비교분석한후추가적으로 NR-21, NR-24, MONO-27 3 개의 Quasi loci 에대해서비교분석하였다. 전체 20 쌍의대장암환자의 slide 샘플에서 Bethesda loci 와 Quasi loci 모두현미부수체불안정성을보이지않았다. 고찰 (Discussion): 문헌에따르면 Bethesda panel 의 3 개의 dinucleotide repeats 인 D5S346, D17S250, D2S123 loci 가현미부수체불안정성을확인하는데적합하지않으며, 모두 mononucleotide repeats 로사용할것을권고하고있다 [1]. Bethesda loci 에서현미부수체불안정성을확인하지못한총 20 쌍의대장암환자를대상으로 Quasi loci 검사를추가적으로검사하여현미부수체불안정성을확인할수있는지를보려하였으나, 모두현미부수체불안정성을보이지않아 Quasi loci 가현미부수체불안정성확인에더욱더적합한지는확인하지못했다. 39

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60 2014 년제 52 회종합학술대회 포스터 - 미생물검사학

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62 미생물검사학 CM-01 질량분석기를이용한소변검체의직접동정 1 서울성모병원진단검사의학팀, 2 서울성모병원진단검사의학과 박강균 1, * ㆍ신상현 1 ㆍ장지영 2 ㆍ김영식 2 ㆍ박연준 2 Objectives: We evaluated the performances and technical practicability of the Vitek MS MALDI-TOF system (biomerieux) in identifying the urinary tract pathogens directly from urine specimens, since it can significantly shorten the time required for bacterial identification and will help in choosing the appropriate antibiotics. Methods: Urine specimens submitted to the microbiology laboratory between July and September 2013 for Gram stain and bacterial culture were included in this study. Bacterial identification was performed with conventional method using Vitek 2 system. For urine samples showing single morphotype on Gram stain were processed both by culture and MALDI-TOF. For MALDI-TOF analysis, urine (3 ml) was centrifuged at 2,000 g for 30 s to remove leukocytes. The supernatant was centrifuged at 14,100 g for 10 min to collect bacteria. The pellet was washed once with deionized water. To the pellet, 1.5 ml of basic solution was added and incubated at 37 o C for 10 min. After centrifugation at 14,100 g for 10 min, it was washed twice with DW and after removal of supernatant, the pellet (8-10 ul) was applied to the MALDI plate in duplicate and were dried on a slide warmer (56 o C) for 10 min. Then, 1 ul of matrix solution was added to each well. For cases of yeasts, formic acid (product no , biomerieux) was applied before the addition of matrix solution. Results: Of the 2,370 urine specimens submitted to the microbiology laboratory, 251 samples showed single morphotype on Gram stain and among them 202 urine specimens were available for MALDI-TOF (Table 1). Of the 202 specimens, growth of colonies were observed in 189 samples and 145 samples led to significant growth of one colony morphology in culture. One-hundred and ten (75.9%) of them with colony counts of >=10 5 CFU/ml. They were 71 enteric GNB, 5 glucose-non-fermenting GNB, 9 GPC, and 25 yeasts and 70 (98.6%), 3 (60.0%), 4 (44.4%), and 5 (20.0%) isolates of them were correctly identified by MALDI-TOF, respectively. Thirty-one (21.4%, 11 GNB, 7GPC, 12 yeasts and one GPB) of them led to colony counts between 10 4 and 10 5 CFU/ml, and among them, 7 GNB, 1 GPC and 1 yeast was correctly identified. Four (2.8%) samples gave colony counts between 10 3 and 10 4 CFU/ml and none of them were correctly identified. Thirteen samples were negative in culture and MALDI-TOF did not find any significant protein profile in any of these cases. Conclusion: For enteric Gram-negative bacilli, which is the major urinary tract pathogen, Vitek MALDI-TOF MS was excellent in identifying when it was present in >=10 5 CFU/ml and also good when it was present in between 10 4 and 10 5 CFU/ml. However, improvement is needed for GPC and yeasts. CM-02 C. difficile 분리용감별배지교환에따른분리율추이비교 고려대학교구로병원진단검사의학과 김창현ㆍ김혁ㆍ최채호ㆍ김주현ㆍ최성란ㆍ황성호ㆍ이협우 배경 (Background): C. difficile 은혐기성, 그람양성, 아포생성막대균으로서항생제관련설사와위막성대장염의주요원인균이며, 입원환자에서발생하는설사의가장흔한원인균이다. 대부분 C. difficile 감염은항생제사용, 고령, 장기간의입원, 환자의면역저하상태등의위험인자와관계가있으나입원력이나항생제사용력이없는환자에서도발견되고있다. 진단의표준법은세포독성시험혹은 toxigenic culture 인데두방법모두검사시간이길고, 술기가복잡한단점이있다. 또한 C. difficile 배양은국내의경우배양률이낮은편이기때문에 CDI 의정확하고빠른검사법이필요하다. 최근 Chromogenic enzyme 성분을이용한 C. difficile 감별배지가소개되었다. 이에본연구에서는감별배지를 CCFA (cefotoxin-cycloserine fructose agar) 에서 CDIF 로바꾸어배양을실시한결과를공유하고자한다. 방법 (Methods): 2011 년 8 월부터 2013 년 7 월까지고대구로병원미생물검사실에의뢰된 C. difficile 배양검체 4,762 개를대상으로하였다. 배지교환시점인 2012 년 8 월기준으로전, 후 1 년간의분리율을비교하였다. 동정은혐기배양 48 시간후에집락의전형적인색과형태 (CCFA 에서황색또는회백색의불규칙한모양의집락, CDIF 에서검정또는회색의별모양의집락 ), 특징적인냄새, 그람염색결과를보고확인하였고, 최종적으로 rapid ID 32A (Identification system for anaerobes, Biomerieux SA, France) 를이용하였다. 결과 (Results): 2011 년 8 월부터 2012 년 7 월까지 CCFA 배지를사용한 C. difficile 분리율은 2.1~9.4% 로평균 6.0% 였고, 2012 년 8 월부터 2013 년 7 월까지 CDIF 배지를사용한 C. difficile 분리율은 8.7~23.5% 로평균 15.5% 였다. 비교결과감별배지교환으로인한분리율이 2.6 배증가함을확인하였다. 고찰 (Discussion): CDI 의진단을위한여러가지검사가소개되었으나아직도많은제한점이있다. 감별배지를이용한배양법은민감도는높으나독소를생성하지않는균주로인해특이도가낮고검사소요시간이길다는것이단점이다. 하지만균주의분류와항생제내성의확인, 새로운균주의발생또는집단감염의추이관찰, 조직세포독소분석법에서음성이나, 임상적으로 CDI 가강력히의심될경우, 새로운 C.difficile 검사법을평가할때그리고민감도가낮은효소면역법의보완에도여전히배양이필요하다. 본연구에서 CCFA 에서 CDIF 로감별배지를교환하므로인해분리률이 2.6 배높아지는결과를나타냈다. 이는 CDIF 에서집락의색과모양을보았을때 C. difficile 집락이전형적인검정또는회색의테두리가불규칙한모양으로나타나감별이쉬운장점이있기때문으로생각된다. 결론적으로 CCFA 와 CDIF 배지에서 C. difficile 배양분리율를비교했을때, CDI 진단을위한배양에 CDIF 가더유용한감별배지로기존의 CCFA 감별배지를대치할수있는배지로판단되었다. 43

63 미생물검사학 CM-03 Clostridium difficile 동정을위한 VITEK 2 ANC Card 와 API Rapid 32A 의비교 인제대학교의과대학부산백병원진단검사의학과 박해근 * ㆍ조윤정ㆍ이내영ㆍ박현정ㆍ김선재ㆍ문혜민신현근ㆍ신정환 배경 (Background): Clostridium difficile 은병원성설사의약 15~20% 를차지하며항균제연관성설사의가장흔한원인중하나이다. C. difficile 에의한항균제연관성설사의경우대부분대변검체에서직접독소를검출하여진단하고있다. 하지만, 최근항원검사법및분자진단법등다양한검사법들이소개되어있어이들방법의평가를위해서는표준검사법인배양을통해확인할필요가있다. 본연구에서는세균동정에일상적으로사용되는방법인 VITEK 2 의 ANC Card 와 API Rapid 32A 가 C. difficile 을정확하게동정하는가를 MALDI-TOF 와비교하여평가하고자하였다. 방법 (Methods): 1. 대상 : 2013 년 8 월부터 12 월까지 C. difficile Toxin A & B 검사가의뢰된검체중검사후남은검체를이용하였다. 동정은 CCFA 선택배지에접종하여증식한세균중그람염색, 산소내성검사, 특징적인냄새, 집락의형태등이 C. difficile 로의심되는 69 개의균주를대상으로하였다. 2. 검사방법 : VITEK 2 (biomerieux) 의 ANC Card 와 API (biomerieux ) Rapid 32A 를이용하여동정하였고이를 MALDI-TOF (Bruker Dlatonics, Germany) 의결과와비교하였다. 결과 (Results): 1. VITEK 2 동정결과 : 동정을실시한 69 주의균주중 50 건은 C. difficile 로동정되었고 18 건은 Clostridium spp. 로동정되었으나 1 건은동정하지못하였다. 2. API Rapid 32A 동정결과 : 동정을실시한 69 주의균주중 50 건은 C. difficile 이었고 19 건은동정하지못하였다. 3. C. difficile 로동정된 50 건은 VITEK 2 와 API Rapid 32A 그리고 MALDI-TOF 에서그결과가 100% 일치하였다. 4. Clostridium spp. 로동정된 19 건은 VITEK 2 와 MALDI-TOF C. perfrnigens 와 C. ramosum 2 균주만결과가일치하였고나머지균들은결과가다양하게나타났다. API Rapid 32A 에서는모두동정되지않았다. 5. VITEK 2 에서 C. subterminate 로동정된 8 건은 MALDI-TOF 에서는 C. orbiscindens 로동정되었다. 6. VITEK 2 와 API Rapid 32A 에서동정되지못한 1 건은 MALDI-TOF 에서는 C. orbiscindens 로동정되었다. CM-04 유도객담검사를통한기관지확장증환자에서의미생물동정 Departments of Laboratory Medicine, Ulsan University Hospital, University of Ulsan College of Medicine, Ulsan, Korea Jae Sun Park, Won Park, Min Su Kim, Hyun Seok Lee, Chi Han Kim, Jong Taek Kim, Ji-Hun Lim, Seon Ho Lee, Sung-Ryul Kim, Joseph Jeong Background: Bronchiectasis (BE) refers to abnormal bronchial dilatation cause by a vicious cycle of transmural infection and inflammation. Diagnosis should lead to investigation and treatment of possible causes and associated conditions. This retrospective study was done to investigate the potential pathogenic microorganisms (PPMs) that cause in patients with BE, though the use of sputum specimens. Method: We retrospectively analyzed the data from 111 adult patients, who had undergone chest computed tomography (CT), sputum gram stain/culture, and BE detected by chest CT, were included in this study. Sputum adequacy was determined by using Murray-Washington classification. Results: The mean (±SD) age of patients was 60.9 (±14.0). The number of PPMs was 167 (67%) in the total 248 isolated organisms. The most frequent PPMs were P. aeruginosa (23.4%), K. pneumoniae (10.5%), and S. aureus (8.4%). The proportion of adequate sputum was 25.5% in the total sputum specimens. The patients with adequate sputum were 41 (37%) and the patients with inadequate sputum were 70 (63%). The proportion of P. aeruginosa was higher in adequate sputum compared to that of inadequate sputum (44% vs. 19%, p=0.004). The BE score was also higher in P. aeruginosa (+) patients compared to that of P. aeruginosa (-) patients (10.8 vs. 7.6, p=0.001). Conclusion: Although the proportion of adequate sputum in the total sputum was low, PPMs were isolated in most patients with BE. It is likely that P. aeruginosa was isolated in adequate sputum and adequate sputum patients had higher BE score. 결론 (Conclusion): 1. 배양된균주 69 건중 C. difficile 50 균주는 MALDI- TOF 결과와비교하였을때 VITEK 2 (ANC) 와 API kit (rapid 32A) 모두에서 100% 일치율을보였다. 2. Clostridium spp. 19 균주는 C. perfrnigens 와 C. ramosum 2 건 44

64 미생물검사학 CM-05 9 년간혈액배양에서분리된 coagulase 음성포도알균에대한분석 전남대학교병원진단검사의학과 김정규 * ㆍ김현희ㆍ최진언ㆍ정민경ㆍ이명옥ㆍ조정애최은주ㆍ강봉주ㆍ신종희 CM-06 Vancomycin 내성장구균검출을위한검사법의유용성평가 전남대학교병원진단검사의학과미생물검사실 조정애 * ㆍ김현희ㆍ최진언ㆍ정민경ㆍ이명옥ㆍ김정규강봉주ㆍ신종희 배경 (Background): Coagulase 음성포도알균 (CoNS) 는기회감염균으로피부와점막에흔히존재하여오염균으로알려져왔지만면역기능저하환자나인조장치를삽입한환자등에서패혈증을유발할수도있다. 특히카테터삽입환자, 면역억제환자, 신생아에서사망율증가와입원기간연장을일으키는병원감염균혈증의중요한원인균으로그빈도가증가하고있다. 이에본연구는 9 년동안혈액배양에서 CoNS 의분리율을알아보고균종별양상을분석하였다. 방법 (Methods): 2004 년 1 월부터 2012 년 12 월까지전남대학병원미생물검사실에혈액배양이의뢰되어자동혈액배양기 BacT/Alert 3D (BioMe-rieux, France) 와, BACTECTMFX (Beckton Dickinson, USA) 에서분리된호기성그람양성알균중 coagulase test 검사하여응집이없는 2788 건을대상으로하였다. 분석은자동화장비인 MicroScan (Pos Combo panel Type 28, Siemens, USA) 과 Vitek Ⅱ (GP, BioMe-rieux, France) 를이용하여동정하였다. 결과 (Results): 9 년간미생물검사실에의뢰된혈액배양총검체수는 248,612 건이었고배양결과양성균주는 31,237 균주로혈액배양총양성률은 12.6% 였고오염을제외한참양성률은 13,314 건 (9.2%) 이었다. 그중 CoNS 양성건수는 2,788 건으로 12.1% 의양성율를보였다. CoNS 의연도별추이를살펴보면 2004 년부터 8.4% 10.1% 10.7% 11.5% 9.2% 10.6% 17.2% 14.2% 13.0% 로나타났다. 균종별로는 S. epidermidis 61.1% (1,703 주 ), S. hominis 15.1% (422 주 ), S. capitis 8.5% (237 주 ), S. heamolyticus 5.5% (152 주 ), S. auricularis 1.2% (33 주 ), S. warneri 1.0% (28 주 ) 순이었다. 고찰 (Discussion): CoNS 는혈액배양에서가장많이분리되는균으로점차증가하는추세를보였다. 균종별로는 S. epidermidis 가월등히많았고 CoNS 의분리시감염균인지또는오염균인지구별하는것이필요하며특히연속분리되는경우동일균종이연속분리되는지의확인이필요하리라생각된다. 배경 (Background): VRE 의신속하고정확한검출은병원내감염전파의예방과관리에매우중요하다. 이에본연구는 VRE 감시배양을위해의뢰된대변검체를평판배지배양법 (Enterococcosel agar) 과액체배지 (Enterococcosel broth), 색소생산성고체선택배지 (ChromID VRE) 를이용하여유용성을평가해보았다. 방법 (Methods): 2014 년 1 월부터 2 월까지미생물검사실로의뢰된대변검체총 208 건을대상으로하여실시하였다. 먼저평판배지배양법인반코마이신 6 μg / ml가첨가된자가제조배지 Enterococcosel agar (Beckton Dickinson, USA) 는접종후검게변한집락을혈액한천배지에계대배양하였고두번째방법으로는액체배지 (Enterococcosel broth) 에서검게변한집락을 ChromID VRE (Beckton Dickinson, USA) 배지에접종, 세번째검출법으로는검체를 ChromID VRE (Beckton Dickinson, USA) 색소생산성고체배지에직접접종하였다. Vitek 2 GP 카드와 AST-600 카드 (biomérieux, France) 를사용하여동정과항균제감수성검사후결과를비교, 분석해보았다. 결과 (Results): 208 검체중평판배지와 ChromID VRE 고체배지에검체를직접접종한배양법에서는 42 건 (20.2%) 의 E. faecium 과 2 건 (1.0%) 의 E. gallinarum 이분리되어동일한결과를보였다. 액체배지배양법에서는 42 건 (20.2%) 의 E. faecium 과 2 건 (1.0%) 의 E. gallinarum 이분리되었으며분리된 E. faecium 중 1 검체 (0.5%) 에서는 E. faecium 과 E. faecalis 가함께동정되었다. 항균제감수성결과는 E. faecium 과 E. gallinarum 모두 vancomycin, teicoplanin MIC 가 32 μg / ml이상 (VanA) 으로고도내성를나타냈으며, 동시에분리된 E. faecalis 만 vancomycin 32 μg / ml이상, teicoplanin MIC 1 μg / ml로 VanB 가나왔다. ChromID VRE 를이용한배지에서는 E. faecium 은보라색, E. faecalis 는녹색, E. gallinarum 는무색의색소를보였다. 각검사방법에따른소요시간을비교해보면고식적인평판배지와액체배지배양법은 3 일, ChromID VRE 는 2 일이내에결과를알수있었다.VRE 가반복적으로동정되었던환자가많아다소높은양성률을나타내었다. 고찰 (Discussion): VRE 의신속한검출을위해서액체배지에증균시켜 ChromID VRE 에접종하면그람음성막대균이나효모균등에의한오염이억제되므로다른방법보다우수하고두균종이섞였을때쉽고정확하게구분할수있었다. 45

65 미생물검사학 CM-07 대변에서장구균의 vancomycin 내성검출을위한배양과중합효소연쇄반응법의비교 전남대학교병원진단검사의학과 김의량 * ㆍ차민주ㆍ이지영ㆍ박창은ㆍ서동환ㆍ강봉주송경용ㆍ원은정ㆍ기승정ㆍ신종희 배경 (Background): 장알균은최근획득내성을지닌고도내성이증가하여병원내원내감염을예방하기위한지속적인관리및대책이필요하다. 이에 VRE 감시배양을위해의뢰된대변검체를배양법과다중 PCR 법으로시행한후각방법에대해분석하였다. 방법 (Methods): 2010 년 1 월부터 2013 년 12 월까지 4 년동안본검사실에의뢰된 15,232 건의검체중 VRE 감시배양을위해자가제조한액체배지 (6 μl /ml 의 vancomycin 이들어있는 enterococcosel broth) 에접종하여배양후검게변한 177 건의배지를대상으로하였다. 배양법으로는검게변한액체배지의균액을혈액한천배지에접종배양후 Vitek II GP card (biomérieux, France) 로동정하고, 내성여부는 AST-P600 card (biomérieux, France) 및 E-test 를이용하였다. 다중중합효소연쇄반응법으로는 CFX96 (Bio-RAD) 장비를통해 2010 년부터 2011 년까지는 SeeplexR VRE ACE Detection Kit (Seegene) 를, 2012 년부터 2013 년까지 Anyplex VanR real time Detection kit (Seegene) 를사용하여동정하였다. 연간자료를기준으로동일한환자의동일균주의연속분리결과는한균주로간주하였다. 결과 (Results): 총 177 검체를배양법으로최종동정한결과 171 검체 (96.6%) 에서는 E. faecium 이동정되었고, 4 검체 (2.3%) 는 E. faecalis, 2 검체 (1.1%) 에서 E. avium 이동정되었다. 각균주에대한항균제감수성검사결과모든균주에서 vancomycin 에대한최소억제농도는 256 μg /ml 이상이었으며, 디스크법으로확인한결과 6 mm 의억제대를보이는고도내성이었다. Teicoplanin 에대하여 16 μg /ml 이상 24 μg /ml 이하의최소억제농도를보이는균주는 E. faecium 59 주 (34.5%) 와 E. aviums 1 주 (50%) 이었다. 한편, E. faecium 13 균주 (7.6%) 는 Teicoplanin 에대한 8 μg /ml 이하최소억제농도를보였다. 중합효소연쇄반응법을이용한 177 검체중 2010~2011 년까지의 69 검체중음성을보인 5 검체를제외하고모두 (n=64, 92.8%) vana 를보였고, 2012 년이후 108 건중 100 검체 (92.6%) 에서는 vana 를, 나머지 E. faecium 8 주 (7.4%) 에서는 vana 와 vanc 를동시에나타냈다.(Table 1, 2) CM-08 SYBR Green Real-Time PCR 방법에의한 Vancomycin 내성장알균검출 진주보건대학교임상병리과 양병선 배경 : Enterococci 는정상인의장관내존재하나심내막염, 균혈증, 비뇨기계감염과신생아균혈증환자에게병원내감염의원인균으로증가추세에있다. 임상에서 Enterococcus faecalis 와 E. faecium 이가장많이분리되는종이다 년이래 vancomycin-resistant enterococci (VRE) 는병원내감염을일으키는중요한원인균이다. VRE 는다양한항생제에내성을보이고특히 glycopeptide 계에내성을보인다. VRE 내성유전자는 vana, vanb, vand, vane 와 vang 등이있다. 표현형에의한 VRE 검출은시간이많이소요되고, 저농도 glycopeptide 내성세균검출이어렵다. 본연구에서는임상에서분리된장알균을대상으로단순하고빠르게검출하는 SYBR Green real-time PCR 실시하여검출하였다. 방법 : 임상검체에서분리된 vancomycin resistant enterococci 23 균주를대상으로하였다. 표준균주로는 E. faecium ATCC (vana), E. faecalis ATCC (vanb) 균주를사용하였다. CLSI 가이드라인에의한항생제감수성검사를실시하고중탕가열법으로 DNA 을추출후 coventional PCR 과 SYBR Green real-time PCR 실시하였다. 결과 : 항생제감수성결과 vancomycin 과 teichoplanin 에 23 균주모두가내성을보였으나 conventional 및 SYBR Green real-time PCR 실시결과 22 균주가양성으로나타났다. 결론 : VRE 균주는병원내감염을일으키고중환자실또는혈액종양병동등에서토착화되어가고있는실정이다. VRE 분리에서동정까지시간이많이소용되어현재 DNA 을기초한검출방법이많이사용되고있다. VRE 검출에 SYBR Green real-time PCR 방법은비용이적게들고정확하고신속하게검출할수있어 VRE 신속검출및감시배양에유용할것으로사료된다. 고찰 (Discussion): 고도내성을가진 VRE 가 E. faecium 외다양한종에서분리됨을알수있었고 vana 유전자형에 VanB 표현형을가진 VRE 가일부존재하여추이에대한지속적인분석이필요할것으로생각된다. 또한다중 PCR 법은고비용의단점이있지만검사결과의확인이빠르고내성유전자형의정확한확인으로신속한감염관리를대처할수있는방법으로유용하리라생각된다. 46

66 미생물검사학 CM-09 그람음성간균및그람양성구균배양양성율과계절변화의관계 ( 재 ) 씨젠의료재단미생물팀 이승훈 * ㆍ김은숙ㆍ정재은ㆍ조훈ㆍ심효은 배경 : 우리나라는지리적으로중위도온대성기후대에위치하여사계절이비교적뚜렷하게나타난다. 이러한기후나기온의조건에의해지역사회에서발생하는의료관련감염발생율이차이가있는것으로알려져있다. 또한배양검사에서균의성장성과검출을고려했을때, 온도와습도는중요한환경인자로작용하고있다. 이에본원미생물팀에서는계절변화에따른세균의배양양성율을조사하고자하였다. 재료및방법 : 2013 년 1 월부터 12 월까지본원에일반배양검사로의뢰된임상검체를대상으로그람음성간균및그람음성구균의배양양성율을분석하였다. 그람음성간균을 E. colacae, E. coli, A. baumannii, P. aeruginosa, K. pneumoniae 로지정하였고, 그람양성구균은 E. faecalis 와 MRSA 을지정하였다. 각계절별 (3 개월 ) 평균배양양성건수를조사하여 2013 년월평균배양양성건수와비교하였다. 계절별기온변화는기상청국내기후통계분석자료를참고하였다. 결과 : 2013 년계절별평균기온은봄 22.6, 여름 25.1, 가을 14. 6, 겨울 0.03 이었다. 지정한균종들의 2013 년월평균배양양성건수와각계절별양성건수를비교한결과, E. cloacae, E. coli, K. pneumoniae, E. faecalis 는여름에각각 35.3%. 18.0%, 11.5%, 20.1% 의증가를보였으며, 기온이떨어지는겨울에는각각 -35.0%, -15.0%, -10.6%, -15.7% 의감소를나타냈다. A. baumannii 와 MRSA 는봄에 13.0%, 7.7% 의증가하였으며, 가을철에 -12.5%, -9.1% 로다른계절보다높은감소율을보였다. 이와대조적으로 P. aeruginosa 는가을에 10.3% 의증가율을나타냈고, 봄에 -11.2% 의감소율을보였다. 결론 : E. coli 등과같은장내세균은계절과기온의영향을받는특징을잘나타내고있으며, 주로소변검체에서분리가되고있다. 이는여름철에기온이상승하면서자연환경의세균이증식하기가쉬워지고감염을증가시키는것으로예상된다. 또한 A. baumannii 등과같은포도당비발효성그람음성간균은호흡기검체에서분리되는경우가 56.1% 로관찰되었다. 폐질환을일으킬수있는균종들이봄이나가을과같은환절기에증가하는것으로나타났다. MRSA 는계절의변화와는무관하였다. 세균의배양양성율을지역과기관별로세부적으로조사하면, 감염관리활동하는데있어서유용한자료로활용할수있을것이다. CM-10 Metallo-β-lactamase (MBL) 양성인경우 Extended-Spectrum β-lactamase (ESBL) 검출법 1 서울성모병원진단검사의학팀, 2 가톨릭대학교의과대학진단검사의학교실 신상현 1 ㆍ송창은 1 ㆍ박상미 1 ㆍ박강균 1 ㆍ박연준 2 배경 : 최근 CLSI 와 EUCAST 는기준변경으로 Extended-Spectrum β -Lactamase (ESBL) 생성이나 carbapenemase 생성여부와관계없이 oxyimino-β-lactam 제나 carbapenem 제에대하여감수성시험결과대로보고하고, ESBL 과 carbapenemase 검출시험은역학또는감염관리목적으로만시행할것을권고하고있다. 그러나 ESBL 생성또는 carbapenemase 생성 Enterobacteriaceae 에의한감염임에도불구하고 MIC 가낮은 cephalosporins 제나 carbapenem 제로치료하는것이효과가있다는것에논란의여지가있다. 따라서 ESBL 과 carbapenemase 생성유무에대한정확한검사는적절한치료제선택에중요한정보가될수있다고생각한다. 그러나 Metallo-β -lactamase (MBL) 과 ESBL 유전자를획득한 Carbapenem-Resistant Enterobacteriaceae (CRE) 이경우 MBL 이 β-lactamase inhibitor 에억제되지않기때문에 ESBL 검출에어려움이있다. 이에본미생물검사실에서는 MBL 이 EDTA 에억제된다는특성을이용하여 EDTA 첨가 ESBL 검사법을소개하고자한다. 방법 : 1. 대상검체 : Metallo-β-lactamase (MBL) 양성 E. coli 1 균주 2. 재료 : Clavulanic acid (1000 μg /ml), EDTA (0.5 M) 3. 접종 : (1) McFarland 0.5 균부유액을 Mueller Hinton agar 에고루접종한후 Ceftazidime (30 μg ), Cefotaxime (30 μg ), Cefepime (30 μg ) 디스크각 2 개씩을두줄로순서대로디스크를놓는다. (2) 모든디스크에 EDTA 10 μl씩첨가하고, 두번째줄에는 clavulanic acid 10 μl씩첨가한후 35 에서 16~18 시간배양한다. 결과 : VITEK2 를이용한균동정및감수성결과에서 carbapenem 내성, ESBL 음성의결과를보인 E. coli 는 3 세대 cephalosporins 뿐만아니라 4 세대 cephalosporins 인 Cefepime 에서도높은내성의결과 (>=32) 를보였다. 일반적으로이루어진 clavulanic acid, boronic acid 첨가 ESBL 확인검사에서도 ESBL 음성이었으나, EDTA 첨가 ESBL 확인검사에서 ESBL 양성결과를얻었다. Carbapenem 내성인 E. coli 는중합효소연쇄반응 (PCR) 검사를통하여 MBL 중 NDM-1 과 ESBL 유전자로는 CTX-M-1 group 을가지고있는것으로판명되었다. 결론 : 최근증가하고있는 CRE 생성균이 MBL 를획득한경우 ESBL 위음성의결과를보일수있다. 이에본원에서는자동화장비에서 Carbapenem 내성, ESBL 음성인경우 EDTA 첨가 ESBL 확인검사를통하여 MBL 에의한 ESBL 위음성결과를배제할수있었다. 이러한검사실의정확한 ESBL 검출시험결과는임상에적절한치료제선택에도움을주어치료실패를줄이는데기여할것이라생각한다. 47

67 미생물검사학 CM-11 ERIC-PCR 을이용한 ESBL 생성 Klebsiella pneumoniae 유전형 1 대전보건대학교임상병리과, 2 진주보건대학교임상병리과 육근돌 1 ㆍ양병선 2 배경 : Extended-spectrum-β-lactamase (ESBL) 는주로장내세균속에서생성되면특히플라스미드등을통한내성의확산이문제가되고있다. ESBL 의종류도다양하며, 지역마다유전형이다르다본연구에서는대전, 충남, 충북지역의대학병원에서분리되는대장균에서 ESBL 을분리한후항균제감수성검사실시와각각임상분리균주간의유전적유연관계를밝힐수있는 ERIC PCR 를실시하여 ESBL 생성세균의분자역학을조사하고자하였다. 방법 : 대전, 충남, 충북지역의대학병원진단검사의학과미생물검사실에서분리된 K. pneumoniae 중에서 ESBL 로 VITEK 장비에서추정하는 46 균주를대상으로항균제감수성검사를시행하였으며, ESBL 생성은 double disk synergy (DDS) 시험으로확인하였다. Enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC) PCR 로유전형을분류하였다. 결과 : VITEK 에서 ESBL 균주로가능성을추정한대장균 46 균주중에서 cefotaxime 와 cefotaxime/clavulanic 에서는 43 균주 (93.5%) 가양성을보였고 3 균주는이시험에서음성을보여주었다. ESBL 생성 K. pneumoniae 는 ERIC-PCR 에서 4 개의 cluster 을형성하였다. 대전지역에서분리한균주는 cluster3 을형성하였으며, 충남지역에서분리한균주는 cluster1 과 cluster 3 을, 그리고충북지역에서분리한균주는 cluster2, cluster4 을형성하였다. 결론 : 병원내감염예방및역학조사에분자유전학적방법을많이사용하는데 ERIC 염기서열은많은세균에서발견되고비유전적이며, 잘보존되고, 광범위하게분포된염기서열이다. ESBL 생성 K. pneumoniae 46 균주에대해 ERIC-PCR 을시행하였는데 0.1 kb 에서 1 kb 까지의 band 가 3-7 개까지관찰되었고, band 형태에따라 4 가지형으로구분하였다. 대전지역 3 형, 충남지역 1 형및 3 형, 충북지역 2 형및 4 형으로나뉘어분리원에따라유전형이다양하였다. CM-12 Extended-spectrum β-lactamase 생성 Klebsiella pneumoniae 와 Escherichia coli 에존재하는 integrons 극동대학교임상병리학과 성지연 * ㆍ박지은ㆍ신혜지ㆍ정은유ㆍ오지은 배경 : Integron 은그안에많은항균제내성유전자카세트들을종합적으로축적할수있고 integron 에위치한내성유전자들은발현되거나전파되기가쉬워 integron 을가지고있는감염균들은항균제에더욱강한내성을보이게된다. 이러한 integron 을포함하고있는장내세균은많은경우다제내성을보이게되고이러한다제내성장내세균의출현및확산은이세균에의한감염증치료에많은어려움을가중시킬수있으므로임상적으로중요한문제가된다. 본연구에서는충청지역의대학병원에서분리된 extended spectrum β -lactamase (ESBL) 생성 K. neumoniae 와 E. coli 를대상으로 integron 의존재여부를조사하여내성세균의확산방지책을마련하는데필요한기초자료를제공하고자하였다. 재료및방법 : 2011 년 11 월부터 2013 년 12 월까지의충청지역의대학병원진단검사의학과에서분리된 ESBL producing K. pneumoniae 와 E. coli 를대상으로하였다. 각항균제에대한감수성은디스크확산법으로확인하였고다중 PCR 방법을이용하여 integron 을검출하였다. 검출된 class 1 integron 내에존재하는유전자카세트의유전형을분석하기위해 5 보존영역과 3 보존영역의분절을시발체로 PCR 을수행하였으며, primer walking 방법으로 integron 의전체염기서열을분석하였다. 결과 : E. coli 와 K. pneumoniae 균주에서총 6 종류의서로다른 class 1 integron 이확인되었다. Class 1 integron 에는 aminoglycosides 내성에관련된유전자인 aad A 유전자카세트와 trimethoprim 내성에관여하는 dfr 유전자카세트가주로포함되어있었다. 결론 : 충청지역의대학병원에서분리된 ESBL 생성 K. pneumoniae 와 E. coli 에확산되어있는 class 1 integron 에는 aminoglycosides 및 trimethoprim 내성에관련된유전자들이포함되어있었다. 이는 β-lactamam 항균제에이미내성을갖는균주들이 class 1 integron 을획득함으로써 aminoglycoside 및 trimethoprim 등의항균제에도내성을갖게될수있음을의미한다. 결국 class 1 integron 은많은항균제에대해내성을나타내는다제내성균이출현하는데중요한역할을하고있으므로다제내성균의확산을막기위해서는앞으로 integron 의확산에대한지속적인감시가필요할것으로사료된다. 48

68 미생물검사학 CM-13 다제내성균 MRSA 의통계 이원의료재단 허지연ㆍ나범석ㆍ서한익ㆍ오귀영ㆍ함초롱 CM-14 기관지폐세척액에서분리된 Pasteurella multocida 1 예 전남대학교병원진단검사의학과 배경 (Background): Staphylococcus aureus 는그람양성구균으로이중페니실린항생제인 Methicillin 에내성을보이는균을 MRSA (Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus) 라부른다. MRSA 는 meca 유전자를가지고있으며, 모든 β-lactam 항균제가거의결합하지않으면서세포벽을합성할수있는새로운 penicillin 부착단백질인 PBPZa 를생성하여모든 β-lactam 항균제에내성을나타내게한다. 병원의규모와특성에따라달라지지만 3 차병원이나종합병원으로갈수록분리율이높아지고있으며면역력이저하된환자들에게특히치명적으로국내종합병원의경우높은분리율을보이고있다. 이에본원에서는최근 3 년간 MRSA 감염의통계를조사하고자하였다. 재료및방법 (Materials and Methods): 2011 년 1 월부터 2013 년 12 월까지본원에세균배양동정검사와항생제감수성검사가의뢰된 799,442 건을대상으로 VITEK2 (Biomerieux,USA) 시스템을이용하여 Staphylococcus aureus 를동정하였고, 동정된균을대상으로 VITEK2 AST panel 을이용한 broth microdilution 법으로항생제감수성검사를실시하여 MRSA 를분리하였다. MRSA 의판정기준은 2014 CLSI M-100-S24 를참고하였다. 결과 (Results): Staphylococcus aureus 동정건수는 2011 년 3.90% (9039/231437), 2012 년 3.66%(10021/273780), 2013 년 3.61% (10635/294225) 를보였다. 검체별 Staphylococcus aureus 로동정된건수는 Sputum 42.17%(4295/10186), Other 19.05%(1940/10186), Open pus 18.96%(1931/10186), Blood 7.49%(763/10186), Urine 4.58%(467/10186) 순이었다. (Table 1) 이중 MRSA 발생건수는 2011 년 18.48%(1670/9039), 2012 년 38.44%(3852/10021), 2013 년 43.86%(4664/10635) 이었다 (Fig 1). 결론 (Conclusions): 2011 년부터 2013 년까지 Staphylococcus aureus 로동정된건수는 2011 년보다 2012 년, 2013 년에는다소감소하였으나, MRSA 분리건수는 2011 년 18.48%, 2012 년 38.44% 로현저히높아졌고 2014 년에도 43.86% 로증가된결과를보였다. 다제내성균인 MRSA 는의료관련감염의중요한감염병으로다제내성균의문제를해결하기위하여다제내성균보균자들을신속하고민감하게검출하여항균제를관리하고감염된환자를관리즉, 손씻기나호흡기감염등을주의하며사용한기구및환경관리등을통한보다적극적이고체계적인감염관리가필요하다. 김현희 * ㆍ최진언ㆍ정민경ㆍ이명옥ㆍ조정애ㆍ김정규강봉주ㆍ신종희 배경 : Pasteurella 는가축, 야생동물및조류의호흡기와장내의상재균으로그람음성알균같은혹은짧은막대균으로패혈증, 장내감염, 호흡기감염을일으킨다. 이에저자는사람의감염은대부분상처감염으로만성폐쇄성질환환자의 BAL 검체에서 Pasteurella multocida 가분리된 1 예를소개하고자한다. 증례 : 환자는양돈업을하는 57 세남자로만성폐쇄성폐질환있어본원호흡기내과외래내원하였고, 과거력상완치판정을받은폐결핵이있었다. Chest CT 상 NTM 혹은종양성병변으로추정되는소견보여 BAL 시행하였다. BAL 시행당일혈액검사는시행되지않았다. 1 회시행한 BAL 정량검사에서 10 5 CFU/ml 이상으로혈액한천배지와 chocolate 배지에서점상의투명하고표면이평활하고거친불규칙한집락이관찰되었다. 이균은그람염색상그람음성인알균같아보이는막대균이었다. 생화학검사상 catalase, oxidase, indole 양성이었고 TSIA 의사면과고층은산성이었으며운동성은음성이었다. VITEK II GN card (biomérieux, Marcy l'étoile, France) 동정검사에서 Pasteurella canis 98%, MicroScan Neg Combo Type 42 Panel (Siemens, West Sacramento, CA, USA) 동정검사에서는 Acinetobacter lwoffi 의결과를보여 16s rrna sequencing 으로 Pasteurella multocida 임을확인하였다. 항균제감수성시험에서 ampicillin 와 ceftriaxone, SXT 에감수성을보였다. 환자는 P. multocida 로인한기관지폐렴의심되어 gemifloxacin 항균제투여로증상이호전되었다. 고찰 : Pasteurella 는인체감염이흔하지않지만동물접촉이있는경우나무균검체이거나호흡기감염에서분리된경우에는동정이필요하며, 정확한동정에는 16s rrna sequencing 의역할이중요할것으로생각된다. 49

69 미생물검사학 CM-15 환자객담에서분리된 Segniliparus rugosus 서울대학교병원진단검사의학과 이재진 * 배경 (Background): 임상에서항산균도말검사를시행하여양성으로나오는경우과거에는결핵균, 나병균, 비결핵성항산균을포함하는 Mycobacterim 속 (genus) 로주로감별진단하였으나 2005 년항산균도말검사상강한양성소견을보이는신속증식 Mycobacterim (rapidly growing mycobacterium) 과유사한특성을보이는 Segniliparus 속이동정되었다. 이후미국이나오스트리아에서낭포성섬유증을가진환자가보고되고한국에서비낭포성섬유증기관지확장증을가진환자사례가보고된적이있다. 이에저자는전형적인비결핵성항산균과유사하고항산균도말검사상양성소견을보이는강한 mycolic acid 를함유세균인 Segniliparus rugosus 가동정된증례를경험하여이에보고하고자한다. 증례 (Case): 환자는 82 세의여자환자로폐결핵과비결핵성항산균으로동정보고된후추후 16S rrna 염기서열결정법 (sequencing) 검사를추가실시하여새로운 mycolic acid 함유세균중하나인 Segniliparus rugosus 로동정되었고, 본원질량분석기인 Bruker Maldi-Tof 로 library 등록후반복분석하였고다른유도객담검체에서도같은결과가나왔다. 고찰 (Discussion): Segniliparus 속은최근에밝혀진항상균도말양성인 mycolic acid 함유세균으로낭포성섬유증환자에서의기회감염균으로보고되었고그임상적특성에대해서는알려진것이없는균종이다. 이종은집락자체는주름지고거친형태를보이며항산균염색에있어강하게염색되는특징이있다. 앞으로항산균도말검사상양성인균에대해서는검사상비결핵성항산균이의심되거나이의동정검사상균종이정확히구분되지않는경우, Seniliparus 종의가능성을고려하여이의감별을위해 16S rrna 염기서열결정법을시행해야한다. 본연구를통하여 Segniliparus rugosus 를동정할수있는 MALDI-TOF 데이터베이스를만들었다. CM-16 혈액배양에서분리된 Mycobacterium abscessus 1 예 국립암센터진단검사의학과 김동선ㆍ정명일ㆍ구수진ㆍ이상미ㆍ함정일ㆍ박인순황상현ㆍ이도훈 * 배경 : Mycobacterium abscessus 는비결핵항산균 (nontuberculous mycobacteria, NTM) 의일종으로빠른발육균 ( 신속발육균, rapid grower) 에해당하며기관지확장증 (bronchiectasis) 등이있는노인여자환자에게만성폐감염을흔히일으킨다 (MCM 2007, p.591). 이경우그원인균은 80% 이상이 Mycobacterium abscessus 인것으로알려져있다. 저자들은 Acute megakaryoblastic leukemia 로입원중인환자의혈액배양검사에서분리된비결핵항산균을 16s rrna sequencing 검사로동정한 1 예를소개하고자한다. 증례 : Acute megakaryoblastic leukemia 로원내에입원중인환자의혈액배양 (central 3 쌍, peripheral 2 쌍 ) 에서양성반응이나와 stain & culture 를시행하였고 stain 결과는 Gram(+) rod 가보였다. 배양한배지에서는 2 일후작은 colony 가자라서동정을위해 BBL Crystal GP 와 Vitek 2 에검사를진행하였고동정결과는 BBL Crystal GP 에서는 Corynebacterium species, Vitek 2 에서는 Corynebacterium jeikeium(86%) 로나와서정확한결과가의심되어 16s rrna sequencing 검사를시행하였다. 16s rrna sequencing 검사결과 Mycobacterium species 가나왔으며 NTM ID PCR 결과 Mycobacterium abscessus 로동정되어임상에결과를보고하였다. 결론 : Mycobacterium abscessus 는비결핵항산균으로서혈액배양을통해동정된경우는드물며 Gram(+) rod 에해당하는균주들의경우대부분이약제감수성검사를시행하지않는등제한된정보만으로정확한동정을하기는쉽지않다. 또한본원에서도혈액배양에의한 NTM 분리사례는찾아보기힘들고검사오더가 AFB stain 으로주어지지않는이상, 검사의진행방향을 NTM 쪽으로정하기가어려운상황이라고보여진다. 상기내용과사례가앞으로의미생물동정결과를신속히판정하는데있어서본원뿐만아니라타검사실에게도중요한경험이될것으로사료된다. 50

70 미생물검사학 CM-17 결핵균균삭 (Cord formation) 형성과 1 차약제와의연관성비교 삼성서울병원미생물검사실 정태원ㆍ송동준ㆍ김현영ㆍ허희재ㆍ이남용 CM-18 Xpert MTB/RIF (GeneXpert System, cepheid, USA) 검사법의유용성평가 1 삼성서울병원 강영진 1 ㆍ정태원 1 ㆍ주호중 1 ㆍ황유연 1 ㆍ송동준 1 ㆍ이남용 2 배경 (Background): 액체배지 (mycobacteria growth indicator tube[mgit]; Becton Dickinson) 를이용한결핵배양검사에서균삭형성 (Cord formation) 의확인은결핵균 (M. tuberculosis; MTB) 의빠른동정에도움을주며, MTB 의독성 (virulence) 과연관된것으로알려져있다. 본연구에서는결핵균동정및 1 차약제검사추가처방의뢰중약제복용이력이없는환자에대해서균삭형성이나타나는일관성을파악하게되었고, 이에배양된결핵균을대상으로균삭형성이되는경우와무형성을구분하고치료와관련된 1 차약제의연관성을확인하고자하였다. 방법 (Methods): 2013 년 1 월부터 12 월까지삼성서울병원결핵배양을위해의뢰된검사 AFB stain & Culture 검체중액체배지 (Middle brook 7H9) 에서 Multiplex-PCR( 영동제약, MTB ID kit-v3) 로확인된검체총 911 건중균삭형성된균과미형성균을구분하고결핵 1 차약제내성검사결과 (Isonizid[INH], Rifampicin[RFP] - 결핵연구원 [KIT]; 절대농도법 ) 를비교하였다. 결과 (Results): 결핵균검출된검체 910 건중균삭형성이된경우는 303 건으로 33.3% 였다. 균삭형성검체에서의 INH 내성은 22.4% (68/303) 로균삭무형성검체에서의 INH 내성 11.0% (67/607) 에비해통계학적으로유의하게높았으며 (p<0.001), 균삭형성검체에서의 RFP 내성도 10.9% (33/303) 로균삭무형성검체의 RFP 내성 5.4% (33/607) 에비해통계학적으로유의하게높았다 (p=0.003). 고찰 (Discussion): 액체배지를사용한결핵배양시나타날수있는균삭형성유무에따른감수성검사만으로결핵균의내성확률을판단하기는어렵지만, 결핵균의내성가능성및치료방향에관하여참고할수있는자료로서는의미가있다고볼수있다. 배경 (Background): 우리나라결핵신환신고수는 2003 년 31,000 명이하에서 2012 년 39,545 명으로증가하고인구 10 만명당 100 명으로 OECD 국가중 1 위로결핵은여전히집중관리가필요한감염질환이다. 결핵진단검사는항산균염색검사, 항산균배양검사, 분자검사, X-ray, CT 등매우다양하다. 분자검사의하나인 Xpert MTB/RIF 는민감도와특이도가매우높으며빠른시간내에결핵을감별할수있고결핵치료에필요한 Rifampicin(RIF) 의 genotype 을검사할수있는것이장점으로최근보험급여고시로검사를시행하는곳이늘고있다. 기존의검사와비교 XpertMTB/RIF 검사의유용성을평가하고자한다. 방법 (Method): 2013 년 1 월부터 2014 년 3 월까지동일한검체로삼성서울병원에서실시한 Xpert MTB/RIF assay (GeneXpert, Cephid, USA), AFB culture (BACTECMGIT 960 System, BD, USA), MTB-PCR (Taqman48-Realtime PCR, Roche, USA) 검사를대상으로양성율을각각상호비교분석하였다. 또한 MTB/RIF assay 의 RIF 약제검사결과와결핵연구원의 RIF 약제검사 (KIT, 절대농도법 ) 결과를상호비교분석하였다. 결과 (Results): 전체 229 건의검사결과중검사별양성 ( 양성률 ) 은 Xpert MTB/RIF 98 건 (42.8%), AFB culture 95 건 (41.5%), MTB PCR 79 건 (34.5%) 이었으며, 세가지검사중한가지검사에서만양성을보인경우는 XpertMTB/RIF 단독양성 6 건 (2.6%), AFB culture 단독양성 7 건 (3.1%), MTB PCR 단독양성 0 건 (0%) 이었다. Xpert MTB/RIF 에서만단독양성을보이고 AFB culture 에서검출되지않은 6 건 (AFB stain 검사에서만 3 건검출 ) 의원인을분석한결과배지가오염된경우가 2 건, NTM 이배양된경우가 1 건, 균이자라지않은경우가 3 건이었다. 또한 RIF 내성유전형결과는감수성 226 건, 내성 3 건으로결핵연구원의 RIF 내성검사결과와 100% 일치하였다. 고찰 (Discussion): Xpert MTB/RIF assay 가 AFB culture 검사및 MTB-PCR 검사의양성율보다각각 1.3%, 8.3% 높게나타났다. Xpert MTB/RIF assay 는현재대부분의존하고있는검사법인배양법의해결과제인배지오염, 다른균의간섭에의한위음성및 AFB stain 에서만검출되는경우에유용할것이다. 또한결과보고시간을평균 12 일에서 2 시간으로단축하여배양법의단점을보완함으로써신속, 정확하게폐결핵을진단하고결핵의전파를예방할수있을것이다. 또한 RIF 약제검사결과를비교한결과 100% 일치율확인하였다. 따라서 MDR-TB 의조기치료가가능할것으로예상되며또한약제변경을방지함으로써약제남용을예방할수있을것으로사료된다. 51

71 미생물검사학 CM-19 Real-time PCR 과 HPLC 법을이용한비결핵항산균의동정 Departments of Laboratory Medicine, Ulsan University Hospital, University of Ulsan College of Medicine, Ulsan, Korea Jae Sun Park, Won Park, Ho Chan Lee, Tae Sul Yun, Joon Ho Bang, Young Sang Kim, Ji-Hun Lim, Seon Ho Lee, Sung-Ryul Kim, Joseph Jeong Background: Between January and December 2011, we evaluated high-performance liquid chromatography (HPLC) and real-time PCR in order to identify non-tuberculous mycobacteria (NTM) in 133 clinical specimens at the Department of Laboratory Medicine in Ulsan, Korea. Method: We retrospectively analyzed the data from 133 specimens which were culture-positive for NTM and in which we performed HPLC and Advansure TB/NTM real-time PCR (LG Life Sciences, Seoul, Korea). Results: The HPLC method discriminated 130 strains of mycobacteria from culture (97.7%), at the species level. Regarding the species distribution, there were 48 M. kansasii (36.1%), 39 M. intracellulare (29.3%), 17 M. avium (12.8%), 16 M. abscessus (12.0%), six M. fortuitum (4.5%), two M. szulgai (1.5%), two M. gordonae (1.5%), and three unclassified NTM (2.3%). Real-time PCR assay identified 60 NTM-positive specimens (45.1%), 65 negative specimens (48.9%), and eight Mycobacterium tuberculosis (TB)-positive specimens (6.0%). Conclusion: The real-time PCR method is advantageous because of its rapid identification of NTM, however, it has relatively low sensitivity using direct specimens. The HPLC methods are useful as they discriminate at the species level, although time-consuming and require specific equipment and technical expertise. Therefore, using both methods will be helpful for a rapid and accurate identification of mycobacteria in the clinical laboratories that are properly equipped with HPLC instruments. CM-20 결핵균과비결핵항산균의양성건수와비율 이원의료재단 허지연ㆍ황정희ㆍ서한익ㆍ오귀영ㆍ함초롱 배경 : 결핵은결핵군균 (Mycobacterium tuberculosis complex, MTC) 에의해발생하고호흡기로전파되는감염성질환이다. 결핵유병률은성공적인결핵관리와경제성장으로점차감소하였으나, 아직많은수의결핵환자가발생하고있다.(2012 년기준, 명신고, 질병관리본부 ) 반면비결핵항산균 (Nontuberculosis mycobacteria, NTM) 은환경에흔하게존재하는세균으로병원성이약하나, 면역력이저하된사람에게기회감염을일으키며병원감염의원인균이기도하다. 국내의경우, 결핵유병률이낮아지면서상대적으로 NTM 의비율이높아지고있다. 이에본원에의뢰된결핵균배양검사에서동정된결핵 (MTB) 및비결핵항산균 (NTM) 의양성건수와비율을보고자하였다. 재료및방법 : 2011 년부터 2013 년까지본원으로의뢰된결핵균배양검사를액체배지, 고체배지, 혹은액체배지와고체배지가동시에의뢰된경우로나누어후향적으로검토하였다. 고체배지는 3% Ogawa 배지를사용하였고, 액체배지는 Middlebrook 7H9 배지를사용하여 BACTEC MGIT 960(BD) 으로배양하였다. 배양된검체의결핵균과비결핵항산균의감별은 real-time PCR(Real-Q MTB&NTM kit,biosewoom) 법으로동정하였다. 결과 : 결핵균배양검사의배양양성률은 2011 년 6.47%(2055/31746), 2012 년 7.37%(2818/38254), 2013 년 6.69%(2846/42546) 를보였다 ( 평균 6.86%, Fig 1). 결핵균과비결핵항산균의양성비율은 2011 년결핵 5.24%(1662/31746), 비결핵항산균 1.24%(393/31746), 2012 년결핵 5.57%(2131/38254), 비결핵항산균 1.80%(687/38254), 2013 년결핵 4.79%(2038/42546), 비결핵항산균 1.90%(808/42546) 이었다 (Table 1). 3 년간고체배지만의뢰된경우에서의평균결핵의양성률은 5.37%, 비결핵항산균 1.15% 이고액체와고체배지가동시에의뢰된경우액체배지평균결핵의양성률은 6.15%, 비결핵항산균 3.53% 였고, 고체배지평균결핵의양성률은 3.59%, 비결핵항산균 1.21% 로나타났다. 결론 : 결핵균배양검사의검사의뢰건수는매년증가하였고, 배양양성률과결핵균, 비결핵항산균의양성비율은다소차이는있지만비슷한경향을보였다. 액체배지는고체배지에비해오염율은높았지만검출율이높았다. 결핵및비결핵항산균감염의진단에있어서신속하고정확한배양이필수적이며이를위해액체배지와고체배지를병용하여사용하면검사소요시간이단축되며, 결핵균의검출율도높여결핵균의신속한검출및정확한동정이가능하게되어결핵환자의조기진단과치료가가능할것이다. 52

72 미생물검사학 CM-21 최근 6 년간단일종합병원의임상검체에서분리된진균의분포 1 서남대학교임상병리학과, 2 건양대학교임상병리학과, 3 대구보건대학교임상병리과 서충원 1, * ㆍ유영빈 2 ㆍ김영권 2 ㆍ마판곤 3 배경 : 최근전세계적으로진균감염으로인해건강한성인의경우강한면역력을가지고있지만, 어린이와노인층, 후천성면역결핍증, 장기이식환자, 화학요법제투여및면역억제제의장기간사용환자등면역력이약하거나약화된집단이가장취약한계층으로알려져있다. 본연구는최근 6 년간 ( ) 의다양한임상검체에서진균의분리빈도와임상검체에서진균의종류에따른연도별분리빈도, 검체에따른분리빈도, 진균의종류에따른검체별분리빈도와환자의일반적인특징인성별에따른분리빈도, 연령에따른분리빈도의연관성을파악하여이와관련된환자관리에정보를제공하기위함이다. 방법 : 본연구는 2006 년 1 월 1 일부터 2011 년 12 월 31 일까지 6 년간경상남도단일종합병원진단검사의학과미생물검사실로의뢰된검체 163,530 건을대상으로하였고배양에서양성으로판정된진균 5,378 주 (3.3%) 에대하여후향적으로분석하였다. 검체의동정은 API 20 C kit 나, VITEK 2 자동분석기로시행하였다. 결과 : 진균의종류에따른연도별분리빈도는전체 5,378 주중에 C. albican 는 2,255 주 (41.9%) 로가장많은분리빈도를보였다 년에 203 주, 2011 년에 515 주로분리되었고, 2006 년보다는두배이상의증가를보였다. 검체에따른분리빈도는소변이 2,410 주 (44.8%) 로가장많았으며, 다음으로기타가 982 주 (18.3%) 로분리되었다. 성별에따른균주의분리빈도는남자가 2,816 명 (52.4%), 여자가 2,562 명 (47.6%) 이었고, 연령에따른분리빈도를분석한결과 C. albican 는 2,138 명중 세가 610 명, 세가 510 명순서로많이분리되었고, Candida tropicalis 는 853 명중 세가 274 명, 세가 209 명의순서로많이분리되었다. 고찰 : 본연구에서는진균중 C. albican 의분리비율이높았고, 이는다른연구에서의결과와비슷하였다. 성별에따른진균의분리는남성이높았다. 고령층 (60 세이상 ) 이전체진균증환자의 60.2% 를차지하여고령층의감염증빈도가높게나타났으며, 이는고령에따른면역기능의저하에의한것으로판단된다. 단일병원에서진균분포를분석하는것보다전국적인조사나역학적인특성을연구한다면더좋은연구가될것이다. CM-22 Ureaplasma 종의 Fluoroquinolone 내성과관련된유전자의돌연변이양상 1 삼성서울병원, 2 연세대학교, 3 건양대학교 조은정 1 ㆍ황유연 1 ㆍ김성현 2 ㆍ박제섭 3 ㆍ김영권 3, * 배경 : 국내 3 차병원에서비뇨생식기계검체로부터분리된 Ureaplasma 종의항생제감수성분석결과에서다수의 fluoroquinolone 계열약제에내성또는중등도내성이관찰되었다. 따라서 Ureaplasma 종의 fluoroquinolone 약제에대한내성도를측정하고이와관련된 DNA gyrase 와 topoisomerase Ⅳ 를각각코딩하고있는유전자인 gyra, gyrb, parc, 그리고 pare 유전자의돌연변이양상을조사하여항생제내성과특정유전자의돌연변이와의관계를규명하고자하였다. 재료및방법 : 2012 년 1 월부터 12 월까지임상검체에서분리된 Ureaplasma 종의항생제감수성결과를확인하였다 년 12 월부터 2013 년 5 월까지 Ureaplasma 종으로동정된임상분리균주를 ofloxacin 과 ciprofloxacin 에대한감수성결과를기준으로구분하여 quinolone resistance-determining region 부위의돌연변이를분석하였다. 대조균주로표준균주인 U. urealyticum serovar 8 strain ATCC 과 U. parvum serovar 3 strain ATCC 의 QRDR 부위의염기서열을이용하였다. 결과 : 총 382 개의 Ureaplasma 균주중 fluoroquinolone 계항생제인 ofloxacin 과 ciprofloxacin 의내성률은각각 20.18% 와 64.62% 였으며, 중등도내성은 45.91% 와 28.07% 로나타났다. 최소억제농도가 OFL 4 과 CIP 2 인균주의 QRDR 부위의염기서열분석에서 gyrb 유전자의 A1442G, parc 유전자의 C248T, G259A, pare 유전자의 C1336T 를, OFL 4 또는 CIP 2 인균주에서는 parc 유전자의 C248T, G244A, T447:, pare 유전자의 G1343A 돌연변이가확인되었다. 두가지약제모두감수성인균주에서는 gyra, gyrb, parc 유전자의 DNA 염기서열돌연변이가확인되지않았으며, pare 유전자 1473 부위의 T 가 C 로치환된변이가관찰되었으나이는침묵변이였다. 본연구에서새롭게 GyrB 의 N481S 과 ParC 의 F149L, D150M, D151I, S152V 그리고 ParE 의 P446S, R448K 의아미노산변환을발견하였다. 결론 : OFL 4 과 CIP 2 인 14 균주중 13 균주에서, OFL 4 또는 CIP 2 인 15 균주중 8 균주에서아미노산변환을관찰할수있었고대부분이 parc gene 에서발생한것으로보아 parc 의돌연변이가 fluoroquinolone 내성과밀접한관련이있음을추정할수있었다. 항생제내성과관련된유전자들의돌연변이양상조사는항생제모니터링및새로운항생제발굴에필수적이다. 53

73 미생물검사학 CM-23 호흡기바이러스검출용두가지시약 (Multiplex Real-Time PCR 법 ) 의검출능비교 인제대학교해운대백병원진단검사의학과 박광준ㆍ정철원ㆍ이동욱ㆍ이정녀ㆍ전경란ㆍ배혜정 * 배경 : 호흡기감염의다양한 pathogenic virus 들을효율적이면서도신속하게진단할수있는 one-step multiplex real-time PCR 법이최근개발되어공급되고있다. 본연구는시판되고있는동일한검사원리의두가지시약을대상으로호흡기바이러스의검출능을비교해보았다. 재료및방법 : 2013 년 11 월부터 2014 년 4 월까지본검사실에의뢰된임상검체가운데양성 134 건을대상으로하였다. 핵산은 QIAsymphony SP (Qiagen, Hilden, Germany) 장비를이용하여추출하였다. 평가시약은 AdvanSure RV real-time RT-PCR(LG Life Science, 이하 시약 A ) 와 Genedia PowerChek 호흡기바이러스 real-time PCR kit ( 녹십자 MS, 이하 시약 B ) 이었다. 두시약은임상검체에서 14 종의호흡기바이러스, 즉 Adeno virus, Boca virus, Corona virus 3 종 (229E, OC43, NL63), Influenza virus 2 종 (A, B), Metapneumo virus, Parainfluenza virus 3 종 (1, 2, 3), Respiratory syncytial virus 2 종 (A, B), Rhino virus (A,B,C 모두검출하지만구분되지는않음 ) 를검출할수있는시약이었다. 추출된핵산을동일하게나눈뒤, 각회사의지침대로시약 A 는 SLAN-96P (AdvanSure, Shanghai, China) 장비를, 시약 B 는 AB7500 (Applied Biosystems, Foster, USA) 장비를각각사용하여 real-time RT PCR 을실시하고바이러스검출을비교하였다. 결과 : 134 건의양성검체가운데 14 종호흡기바이러스전체결과가일치한경우는 99 건으로검출에대한두시약의일치도는약 74% 이었다. Boca virus, Corona virus 와 Metapneumo virus 의검출은시약 A 가, Parainfluenza virus 검출은시약 B 가상대적으로더높은민감도를나타내었다. 시약 A 는 5 개 tube 로구성되나 Internal control (RNaseP) 은 1 개 tube 에만사용하였고, 시약 B 는 6 개 tube 로구성되고 Internal control (Human GAPDH) 을 6 개 tube 모두에사용하였다. 시약 A 경우 target primer 는 tube 에미리제조되어있었지만 enzyme 와 buffer 는사용시따로분주한뒤검체의핵산을넣어야했고, 시약 B 는모두조제된 mixture tube 로준비되어있어핵산만분주하도록되어있었다. 결론 : 각호흡기바이러스에관한표준물질이없으므로두시약에대한절대평가 ( 민감도, 특이도계산 ) 는불가능하다. 각바이러스검출에관한평가에서두회사시약의일치도는달랐다. 이는각시약마다검출민감도가다르기때문인것으로추정되며, 본연구로서는어느한쪽이우세하다고결론내릴수없었다. 병원에서는이와같은시약의차이점을잘인지하여검사에사용할시약을결정해야할것이다. 또한비교평가에사용한검체의수가적다는한계가있어추후보다많은검체로추가평가가필요할것이다. CM-24 호흡기바이러스별양성률추이관찰 서울의과학연구소 김동수 1, * ㆍ문영현 2 ㆍ조아라 3 배경 (Background): 호흡기바이러스에의한질환은매우흔하게발병하는질환으로, 영 / 유아, 노인, 심장질환, 폐질환, 면역기능의장애를가진사람들에게는심각한합병증을유발할수있습니다. 호흡기바이러스감염의신속한진단은의료진과감염관리를담당하는사람들이적절한조치를취하고병원균의확산을막는데에중요한역할을합니다. 또한원인바이러스를정확히진단하는것은초기항생제효과가없는바이러스성감기와항생제가필요한세균성감기를구분하여처방함으로써, 항생제오남용을줄일수있고그에따른항생제내성률증가를억제할수있는장점이있습니다. 호흡기바이러스에의한호흡기감염은대개비슷한증상을나타내기때문에임상적진단에의해바이러스의타입을구분하기는어렵습니다. 그러므로, 각바이러스타입을구분하여검출하는것이매우중요합니다. 이에저자는호흡기바이러스 PCR 검사를통한바이러스타입을구분하고바이러스별양성추이를고찰하여임상적진단에도움을주고자합니다. 방법 (Methods): *SCL 로 2013 년 11 월 년 4 월에검사를의뢰한 2,338 검체 1. 자동화추출장비인 Magnetic bead 를이용한 TANBead Smart Lab Assist 32 (LG, Korea) 을이용하여검체로부터 RNA 추출 2. 추출된 RNA 를가지고 AdvanSure TM SLAN-96P (LG, Korea) 에장착하여 AdvanSure TM Real-Time PCR 진행 (LG, Korea) 3. Real-Time PCR 검사결과를프로그램으로결과분석 결과 (Results): 2013 년 11 월 년 4 월에검사를의뢰한 2,338 검체중양성률은 Metapneumovirus 는 26.5%, Rhinovirus A/B/C 는 17.6%, Adenovirus PCR 는 12.7%, RSV B PCR 은 9.6%, Influenza B PCR 는 6.5%, Parainfluenza 1 PCR 는 5.9%, Influenza A PCR 는 5.2%, Bocavirus 는 4.5%, Parainfluenza 3 PCR 눈 3.2%, Coronavirus OC43 는 1.2%, Coronavirus NL63 는 1.0%, RSV A PCR 는 0.7%, Parainfluenza 2 PCR 는 0.3% 의순이었다. 특히 Metapneumovirus 의양성률이지속적인증가를보였다. 고찰 (Discussion): 저자들이고찰한호흡기바이러스양성률추이관찰에서지속적인양성률의증가를보이는 Metapneumovirus 는최근질병관리본부에서보고하는인플루엔자및호흡기바이러스주간발생정보와유사한양상을보이고있다. 호흡기바이러스의바이러스타입을구분하고바이러스별양성추이를지속적으로고찰하는것은원인바이러스의정확한진단을할수있으며초기치료에있어항생제남용을막을수있어호흡기감염에있어임상적진단에도움을줄것이라판단됩니다. 54

74 미생물검사학 CM-25 식약청기준에맞춘무균검사시험법에대한고찰 삼성서울병원미생물검사실 주호중ㆍ강영진ㆍ정태원ㆍ황유연ㆍ송동준ㆍ이남용 배경 (Background): 무균시험이란무균이요구되는원료또는제제등에서오염미생물의위해요인등이검출되지않음을검증하는검사로, 검사시에쓰이는재료와환경모두무균적인상태에서이루어져야하는검사다. 실제로본원에의뢰되는무균시험검사의검체종류는인체에서유래되는것이아니라오염미생물의위해요인등의철저한검증이필요한인체의약품이나방사선치료제제등 ( 임상시험중 ) 에서실시되고의뢰된무균시험에대하여는미생물학적인방법에의거, 환자의검체와동일한방법으로검사를시행해왔다. 그러나무균시험은검체의 source 부터가다르며, 매뉴얼의기준도모호함이있어, 무균검사에대한좀더정확한지침과감염관리학적인방법의기준을마련하는것이필요하다고판단되어서, 무균검사에대한조사중식약청에서배포한자료가있었고, 그자료와관련법령, 참고문헌등을참고하여무균검사에대한정확한기준과지침을재점검하였고, 마련된매뉴얼을기준으로검사및환경, 결과판독, 보고방법등을변경실시하여무균검사의신뢰성을높이고자하였다. 증례 (Case): 2011 년총의뢰된건수는 1049 건, 2012 년 1470 건의뢰 ( 전년대비 40.1% 증가 ), 2013 년 1693 건이의뢰 ( 전년대비 15.2% 증가 ) 되어무균검사가매년증가추세를보임. 무균검사에대한정확한기준제시와새로운근거를통해무균검사의새지침을마련하여그에맞도록변경실행하였다. 결과 (Results): 병원에서실시되는미생물검사는환자의검체에서미생물을배양검출하여그균의동정과균에따른항생제감수성검사의결과보고를통해환자의항생제치료에중요한역할을하고있다. 하지만무균시험은검사실에서시행하고있는미생물검사방법과는달리검사대상의근원부터가다르고, 배양된미생물균동정및항생제감수성검사결과보다는오염미생물위해요인들의검증을확인하는검사로또다른의미를가지고있다. 실제로주요무균검사대상인인체의약품이나방사선치료제제등의경우임상시험센터또는제약회사등에서무균검사를실시하고있지만, 병원미생물검사실에서도식약청에서제시한기준에맞는환경및검사의여건을준비한다면, 기존약전이나제약회사에서만시행해오던무균검사를병원미생물검사실에서도수탁의뢰를받아서무균검사를실시할수있게되는것이다. 실제로삼성서울병원미생물검사실에서는 Samsung LAB 을통해외부수탁의뢰된무균검사를실시하던중식약청에서제시한기준에맞추어환경및기준을보완변경하게되었고, 변경전과후의검사수가등이검사건당 30.77% 의상승을가져올수있었다. 이와같은결과는병원미생물검사실의역할이환자치료뿐만아니라임상시험중인제제등에서도중요한역할을하는동시에대외적인신뢰를인정받았다고생각된다. CM-26 Human gut microbiome 연구를위한고품질 stool gdna 제작을위한시료보관방법 ( 재 ) 서울의과학연구소 유제권ㆍ황영은ㆍ하기원ㆍ손보경ㆍ김윤태ㆍ김영진 배경 (Background): 현재인간의건강과질병에관여하는장내미생물군집을밝혀내기위한 human gut microbiome( 장내미생물군집 ) 연구가수행되고있다. 예전에는배양가능한미생물연구에국한되어있었으나차세대염기서열분석 (next generation sequencing, NGS) 기술의발전으로 16SrRNA 의염기서열분석이미생물군집분석의주된방법으로사용되고있다. 이분석을시행하기위해서는일차적으로 stool 에서고품질의 genomic DNA isolation 을필요로하는데본실험에서는 stool 의채취후시료보관온도및시간경과에따른 gdna 의 quality 비교하였다. 방법 (Methods): 동일인에게채취한 stool 을 3 개로나누어일반용기에담고실온, 냉장, 냉동으로보관한다. 보관된 stool 0.25 g 을사용하여동일한조건으로각각 2 건씩제작하고, 보관시간에따라 0 hr, 24 hrs, 48 hrs, 72 hrs 간격으로총 20 건을제작하였다 ( 단, control 은 0 hr 로한다 ). 제작된 stool gdna 의 quality 를확인하기위하여 stool gdna purity (DNA yield, ratio 260/280, ratio 260/230), gel QC, 16s rrna PCR QC 를하여확인하였다. 결과 (Results): 고품질 stool gdna 제작 QC 기준은 purity (yield 1.5 ug 이상, ratio (260/280) 1.8 이상, ratio (260/230) 1.5 이상 ), gel QC positive, 16s rrna PCR QC positive 를모두만족해야한다. 보관온도에서는 gel QC, 16s r RNA PCR QC 기준을모든조건에서만족하였으나, purity 결과는실온보관 24 hrs 경과후부터 ratio (260/280, 260/230) 가감소하기시작하였고, 48 hrs, 72 hrs 경과후각각 1.8, 1.5 미만으로고품질 stool gdna 제작 QC 기준에부적합하였다. 보관시간에서는 gel QC, 16s r RNA PCR QC 기준을모든조건에서만족하였고, purity 결과는 24 hrs 까지모든항목이 QC 기준에적합하였다. 그러나 48 hrs, 72 hrs 에서 yield, ratio 260/280 은 QC 기준에적합하지만 ratio 260/230 이 1.5 미만으로적합하지않았다. 고찰 (Discussion): Human gut microbiome 연구분석방법인 NGS 를시행하기위해서는고품질의 stool gdna 가필요하다. 본실험에서는고품질의 stool gdna 제작을위한시료보관방법관하여실험을하였다. 실험결과보관온도는냉장, 냉동보관이적합한결과를보였고, 보관시간은시료채취후 0 hr, 24 hrs 가장적합한결과를보였다. 48 hrs, 72 hrs 이후에는 purity ratio (260/230) 이 QC 기준에부적합하였다. 하지만 QC 결과가부적합하였다고하여 NGS 분석이불가능한것은아니지만 quality 에만족하기위한 gdna purification 과정을시행함으로써추가적인시간과비용이발생한다. 그러므로연구자들에게고품질의 stool gdna 를제공하기위해서는시료의보관온도와보관시간이중요하다고사료된다. 55

75 미생물검사학 CM-27 Characterization of integrons in Enterobacteriaceae isolates from chicken cecums in Korea Far East University, Department of Biomedical Laboratory Science, Korea Ji Youn Sung, BongChul Kim, Ji-Eun Oh Background: Antimicrobial agents for feed additives or therapeutics are strongly associated with the prevalence of antimicrobial resistance in commensal Enterobacteriaceae. In our present study, integrons in Enterobacteriaceae isolates and correlation between integron gene cassettes and antimicrobial resistance were investigated obtained from chicken cecums in Korea. Materials and methods: A total of 90 Enterobacteriaceae were isolated from chickens grown at Gyeongsang and Chungcheong province. Antimicrobial susceptibility tests were performed by disk diffusion method. PCR and DNA sequencing were also performed to characterize the gene cassette arrays of integrons. Results: A total of 5 different species composed of Escherichia coli (n=72), Proteus mirabilis (n=7), Proteus penneri (n=4), Cronobacter spp. (n=4) and Shigella dysenteriae (n=3) were obtained and 46 (51.1%) carried integrase genes. Class 1 integrons were carried seven different gene cassette arrays, encoding resistance to aminoglycosides (aada1, aada2 and aada5), trimethoprim (dfra1, dfra12, dfra17 and dfra32), lincosamides (linf) and erythromycin (erea). In addition, presence of class 1 integron was significantly related to high resistance rate of antimicrobial agents, such as spectinomycin and trimethoprim. Conclusions: In conclusion, diverse class 1 integrons are widely distributed in Enterobacteriaceae isolates from chickens and directly contributed to the resistance to diverse antimicrobial agents in Korea. 56

76 2014 년제 52 회종합학술대회 포스터 - 임상화학검사학

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78 임상화학검사학 CC-01 제 5 기국민건강영양조사결과를이용한폐경전후여성의대사증후군유병률 1 신성대학교 신경아 * ㆍ김혜영ㆍ이혜자 1 CC-02 건강검진에서 Serum Protein Electrophoresis 검사의필요성 양산부산대학교병원 권훼영 배경 : 여성은폐경이후난소부전으로인한에스트로겐감소로체지방분포의변화에따른내장비만및복부비만을유발하며, 체지방의재분포에의한복부지방의축적은대사증후군과밀접한관련성을나타낸다. 폐경으로인해혈중지질대사변화는동맥경화, 혈당및인슐린증가와같은대사적, 내분비적변화를동반하며, 이와함께심혈관질환과대사증후군발생빈도는폐경이전보다현저한증가를보인다. 본연구에서는최근제 5 기국민건강영양조사자료를토대로대사증후군에대한가장최근의진단기준인세계당뇨협회기준을적용하여폐경유무에따른대사증후군유병률과대사증후군위험요인의차이를비교해보고자하였다. 방법 : 질병관리본부에서실시한제 5 기 2010~2012 년도국민건강영양조사 (Korea National Health & Nutrition Examination Survey; KNHANES) 3 차년도원시자료를이용하여진행되었다. 전체대상자 8,057 명의조사자료에서건강설문조사및검진조사에모두참여한여성 3,537 명을본연구에서분석하였다. 대사증후군진단기준은세계당뇨병협회에서제시한기준에따라대사증후군을정의하였다. 통계분석은 SPSS 12.0 을이용하였으며, chi-squared test, independent t-test, multiple regression analysis 를실시하였으며, 통계적유의수준은 P<0.05 로설정하였다. 결과 : 대사증후군유병률은폐경전여성은 17.3% 인데반해폐경후여성의경우 54.3% 로나타났다. 폐경후여성에서체질량지수, 허리둘레, 혈압, 공복혈당, 총콜레스테롤, 저밀도콜레스테롤및중성지방, 페리틴이높게나타났으며, 고밀도콜레스테롤, 철결합능은낮게나타났다. 다중회귀분석결과폐경에영향을미치는대사증후군위험요인은허리둘레, 공복혈당, 고밀도콜레스테롤로나타났다. 결론 : 폐경후여성들은복부비만과이로인한혈중지질의증가, 혈압상승으로인해고지혈증, 고혈압, 당뇨병등의퇴행성질환에대한위험도가높게나타났다. 폐경후여성의대사증후군유병률은 54.3% 로폐경전여성의 17.3% 보다 3 배이상높게나타났으며, 폐경에영향을미치는대사증후군위험은허리둘레, 공복혈당, 고밀도콜레스테롤로나타났다. 그러므로폐경기여성에서비만과혈중지질관리가요구된다. 배경 (Background): 혈청내의단백질에대한전기영동검사는 Protein 의변동이예상되는질환에서성분의변화특히 albumin 저하혹은 immunoglobulin 의변동을알기위하여검사한다. 일반적인병태의 screening 적의의가있어, 본검사실에서는건강검진항목에 Serum Protein Electrophoresis(sPEP) 검사를시행하고있다. 양산부산대학교병원진단검사의학과에서검사한건강증진센터검진자의 spep 결과를분석하여검사의필요성을보고하고자한다. 재료및방법 (Materials and Methods): 지난 2 년간양산부산대학교진단검사의학과에서시행한전체 spep 검사는총 1214 건그중건강증진센터검진자를대상으로시행한건수는 724 건이다. 검사는 Sebia Capillary II(France) 장비와 Capillarys protein(e) 6kit 시약이사용되었다. 결과 (Results): 건강증진센터검진자의결과를정리해보면다음과같다. 건증결과총 724 건중정상결과를보이는 573 건은전체의 79% 를차지하며, 그외나머지에해당하는비정상결과는 polyclonal gammpathy, hypogammaglobulinemia, monoclonal gammpathy, decreased or increased alpha fraction, increased beta2 fraction 5 가지로구분되어진다. 이중 polyclonal gammpathy 가 15% 로가장높은비율을차지하며, 여러요인으로인해발생할수있는 alpha fraction 의증가또는감소는두번째로높은비율인 3% 에해당된다. 그외에도형질세포 (plasma cell) 증식에의해발생하는질환인 monoclonal gammpathy, hypogammaglobulinemia, beta2 fraction 의증가도건강증진센터의검사결과에서각 1% 씩차지했다. 결론 (Conclusions): 정상인을대상으로시행하는건강검진에서 spep 을시행함으로써 21% 에해당하는비정상결과를확인할수있었으며, 급만성염증이나, 신증후군, 만성간질환에서보일수있는 alpha fracion 의증감소나 beta fraction 의증가도포함되어있다. Monoclonal gammpathy 에해당되는다발성골수종 (multiple myeloma) 같은질환도최근우리나라에서점차발생빈도가증가하고있는추세이므로전체 1%(7 건 ) 정도로건수는많진않지만, 해당 case 를확인하는것에도도움이될것으로판단된다. 59

79 임상화학검사학 CC-03 Erythropoietin 검사의 RIA & CLIA 검사방법간비교 녹십자의료재단 김혜림ㆍ오영주 * ㆍ이상곤 CC-04 소아청소년의성별과연령에따른 serum creatinine 농도의분포 대구보건대학교임상병리과 권세영 * ㆍ나영악 배경 : Erythropoietin (EPO) 은주로신장에서생산되는저분자량의당단백호르몬으로적혈구계조혈작용에관여한다. EPO 는골수에서적혈구계조혈을촉진하는가장중요한진성적혈구증가증환자에서 EPO 농도는증가하지않는인자로, 적혈구전구세포의표면에주로발현되어있는특이수용체와결합하여작용을나타내며, 적혈구전구세포의분화와증식을촉진시키는동시에세포자멸 (apoptosis) 를억제하고말초혈액의적혈구수를조절하는역할을한다. 신장의 EPO sensor 에서는혈액내이용가능한산소농도를감지하여 EPO 의생산, 분비및 EPO 수용체의발현정도를적절히조절한다. 재생불량빈혈, 용혈빈혈, 철결핍성빈혈과같은경우에는적혈구용적률이감소하여산소농도가낮으므로혈액내 EPO 농도가증가하고, 말기신질환으로인한빈혈환자에서는신장의 EPO 생산능력저하등의원인으로 EPO 농도가감소한다. 이와같이혈중 EPO 측정은적혈구증가증과빈혈환자의감별진단에유용하고, 그외순적혈구무형성 (pure red cell aplasia) 의진단, 암환자에서 recombinant human erythropoietin 치료의효과, 판정과용량조절등임상적유용성이점차증가하고있다. Erythropoietin 검사방법이 RIA Method 일경우검사소요시간이길어검사결과를보고하는데지연되며또한수작업으로인한검사로문제점이발생될수있어자동화 System 인 CLIA 방법을이용하여비교하여보았다. 재료및방법 : RIA 검사법과 CLIA 검사법을동일하게 22 검체를이용하여측정하였으며, DIASORIN 시약을이용한 RIA (Radioimmunoassay) 방법으로시행한후, Immulite 2000/DPC 장비를이용한 CLIA (Chemiluminescence Immumoassay) 방법으로시행하였다. 두방법간의비교를위해 EP EvaluatorTM 프로그램을이용하여분석하였다. 결과 : 준비한검체 22 개를기준으로 RIA 검사방법과 CLIA 검사방법간상관관계분석결과 Corr. Coef. (R) , Slope 0.865, Intercept 이며, Bias% 는 % 로관찰되었다. 결론 : Erythropoietin 검사의 RIA & CLIA 검사방법의비교결과, Corr. Coef. (R) , Slope 0.865, Intercept , Bias 로낮은상관관계를보였다. 그러나 RIA 와 CLIA 의방법간의차이가큼을고려하여 Bias 방향에따라참고치적용범위로일치한새로운참고치를적용하였고, 검사시간의단축및업무효율향상이라는장점이부각된 Immulite/DPC (CLIA) 로전환하였다. 배경 (Background): 혈청 creatinine 은근육내에존재하는 creatin 의탈수에의해생성되어혈중에출현하며사구체에서여과된후재흡수되지않고요중으로배설된다. 배설량은주로근육의크레아틴총량에비례해서성인에서는체중 kg 당거의일정하고식사또는요량등의영향을거의받지않으며, 사구체여과율 (GFR) 과밀접한상관이있어서신기능의지표로널리사용되고있다. 혈청중의정상치는 1 mg/dl 내외이며남녀성별차이가있음은이미알려져있으나, 소아청소년에서혈청중의 creatinine 농도는성별뿐만아니라연령에따라서그분포가차이가남에도불구하고그에대한자료는부족하다. 이에본연구에서는 10 세이상 20 세미만소아청소년의연령과성별에따른혈청 creatinine 농도를살펴봄으로써참고치설정을위한기초자료를제시하고자하였다. 재료및방법 (Materials and Methods): 제 5 기국민건강영양조사 (2011 년 1 월 ~ 12 월 ) 에서검진을시행한 10 세이상 20 세미만대상자중소변검사에서이상소견을보인대상자를제외하고건강한소아청소년 488 명 ( 남 278 명, 여 210 명 ) 을대상으로분석을시행하였다. 혈청 creatinine 은 CREA (Roche, USA) 시약을사용하여 Hitachi 7600 (Hitachi high-technologies Co., Tokyo, Japan) 자동화학분석기를이용하여측정하였다. 연령과성별에따른혈청 creatinine 의농도를살펴보기위해연령별평균, 최소값, 최대값및성별간의차이를검증하였다. 자료에대한통계분석은 SPSS 17.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA) 을사용하였으며, 결과해석시 p<0.05 인경우유의하다고판정하였다. 결과 (Results): 전반적으로혈청 creatinine 농도는남녀모두연령이증가함에따라점차증가하였으며, 남자의경우평균 0.74 mg/dl, 여자의경우 0.64 mg/dl 로성별에따른차이를보였다 (p<0.05) (Fig 1). 연령별로살펴보면 10 세의경우남자평균 0.58 mg/dl (min 0.33 mg/dl, max 0.74 mg/dl), 여자평균 0.57 mg/dl (min 0.45 mg/dl, max 0.71 mg/dl) 로나타나 10~13 세까지남녀평균차이는보이지않았다. 14 세의경우남자평균 0.81 mg/dl (min 0.57 mg/dl, max 1.14 mg/dl), 여자평균 0.65 mg/dl (min 0.46 mg/dl, max 0.92 mg/dl) 로나타나 14 세이후부터는유의한차이를보였다 (p<0.05). Tukey HSD 에의한다중비교결과평균의차이를보이지않아동일집단으로간주할수있는연령군은남자의경우 세, 세, 세, 여자의경우 세, 13 세 -19 세로나타났다 (Fig 2). 결론 (Conclusions): 본연구에서소아청소년 (10 세이상 20 세미만 ) 의혈청 creatinine 농도의참고치설정을위한기초자료를제시하고자연령과성별에따른농도의분포를살펴보았다. 소아청소년의경우혈청 creatinine 농도는연령에따라남녀에서각각그분포가다르게나타나므로성인과달리연령군별로따로설정되어야함을알수있었다. 60

80 임상화학검사학 CC-05 검체용기가혈청 / 혈장포도당측정에미치는영향 1 부산성모병원진단검사의학과, 2 마산대학교 강종원 1 ㆍ류재두 2 CC-06 DABS 유도체반응과 HPLC-UV 를이용한혈당의마이크로분석 동서대학교임상병리학과 & 대학원에너지 / 생명공학과 이지희ㆍ김보경ㆍ김정선 * 배경 : 혈장포도당측정과정중전혈로방치하면시간경과에따라해당작용으로위음성의결과를초래한다. 그러므로해당억제제인 NaF 가용기를사용하는것이추천되지만대부분검사실에서는 SST 를사용하고있다. 이러한관점에서 SST 와 NaF 및 plain 용기의시간경과에따른혈청 / 혈장포도당농도의변화를연구하였다. 방법 : 34 명의실험군로부터 SST, NaF 및 plain 용기에채혈하고지침에따라 30 분이내에원심분리후혈청 / 혈장분리없이뚜껑을닫고 4 에서검체를보관하면서 0, 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 24, 48 시간에반복검사를실시하였다. 측정장비는 ADVIA-1650 CHEMISTRY SYSTEM (SIEMENS, USA) 로, 방법은 glucose hexokinase (SIEMENS, USA) 법으로측정하였다. NaF 용기에채혈한경우 NaF 의희석에의해약 4.7% 음의오차가발생할수있다고보고를참고하여결과비교는 SST 검체를기준으로하였다. 결과 : 최초 SST 검체의경우 74~191 mg/dl 의분포를보였다. 이를기준으로 plain 검체는평균값이 0.47% 낮은결과를보였고, NaF 검체는 1.32% 높은결과를보였으나유의한차이는아니었다. plain 검체는 8 시간이경과후평균 5.52% 감소하며, 이는허용 Total Error[ 본원포도당에대한 CVt (Technical Coefficent Variation) 인 1.85% 의 2 배로계산 ] 인 3.70% 를초과한다. 이후지속적으로감소하여 48 시간에평균 33.44% 감소하였다. NaF 검체는 6 시간까지안정된결과를보이고 24 시간에평균 0.59% 감소, 48 시간에는감소되지않았다. SST 검체의경우원심분리후 4 시간까지는약간증가 (0.53%), 이후 48 시간까지평균 0.60% 의감소를보였다. 또한 SST 검체와 NaF 검체의변동양상은비슷하였다. 고찰 : plain 검체의혈청포도당농도는 8 시간경과후유의한수준의감소를보여임상적판단에오류를일으킬수있을것으로보인다. 검사지연시 NaF 용기를사용하여채혈하는것이추천되지만본연구결과 SST 에채혈하여도 30 분이내에원심분리하고냉장보관한다면 48 시간까지도그감소폭이 0.6% 이내로매우낮음을확인할수있었다. 대부분혈청으로포도당뿐아니라다른생화학검사를동시에시행하는것이보편적이다. 그러므로포도당검사를바로실시하지못하는경우라하더라도 SST 를사용하는것이검체의채취량과사용용기수를줄일수있어보다유리할것이다. Objectives: A more direct and accurate method for simultaneous blood sugar testing has been developed and validated using DABS-hydrazide derivatization and solid phase extraction followed by HPLC-UV analyses. Materials & Methods: Monosaccharide standards in distilled water were each placed in microtubes after which the solvents were removed by vacuum centrifugation. To each of the dried monosaccharide was added DABS-hydrazide and 10% TCA. The mixture was reacted for 2 hours at 50 in a drying oven. Prior to HPLC analysis, solid phase extraction was performed using silica sep-pak, C18 sep-pak or CN sep-pak. The final standards were analyzed by HPLC-UV at 438nm from which the calibration curve was constructed. Galactose, glucose and mannose were spiked into FBS and inter and intraday validation was performed. Results & Conclusion: A new method using DABS-hydrazide was developed for the simultaneous analyses of glucose, galactose and mannose from blood samples. The conditions for the DABS-hydrazide synthesis as well as the purification steps after the hydrazones were formed have been optimized in this study using solid phase extraction. Silica sep-pak was useful for the purification compared to other solid phases while the HPLC analyses using a CN column was optimized using 5% acetonitrile in citrate buffer as mobile phase with UV detection; the resolution among galactose, glucose and mannose was over 1. Interday and intraday validation with the standard solutions of sugar as well as the FBS samples showed encouraging results in terms of RSDs. However further improvement is necessary to obtain better accuracy values. The significance of this study is in showing that the glucose derivatized to their DABS-hydrazone could be analyzable from blood samples and can be distinguished from galactose, mannose or fructose. With further studies this method could be applied to the quantitative analysis of sugar in human serum in the clinical laboratory. 61

81 임상화학검사학 CC-07 Tacrolimus 정량검사비특이적반응 1 예보고 가톨릭대학교서울성모병원진단검사의학과 김한나 * ㆍ이정중ㆍ김남주ㆍ최혜순ㆍ조봉래ㆍ이범기양지은ㆍ양광현ㆍ이영혜ㆍ박성미ㆍ신미화ㆍ차경호ㆍ채효진 배경 (Background): Tacrolimus 는방선균에의해서만들어지는 macrolide 계면역억제제로 Cyclosporine A 와더불어간이식이나신장이식에서사용되는면역억제제로써본원에서는장기이식센터에서이식환자에게주로사용되는면역억제제로 Tacrolimus 정량검사를시행하고있으며 ACMIA 법을이용한 DIMENSION RXL MAX 와 LC-MS/MS 법을이용한 Quattro Primer XE 장비를사용하여두가지방법으로임상에서처방을받아검사를시행하고있다 년 3 월에의뢰된장기이식환자에서 Tacrolimus 복용후 12 시간뒤농도측정이의뢰되었던 ACMIA 법을이용한 Tacrolimus 정량검사에서 AMR 상한치를넘는높은결과가나와서 LC-MS/MS 법으로검증시참고치범위로나온사례가있어서이를보고하고자한다. 증례 (Case): 상기환자는 Liver cirrhosis 를주소로 2014 년 2 월 18 일소화기내과처음내원한 43 세남자로 2014 년 3 월 11 일생체장기제공자간이식을받은후면역억제제로 Tacrolimus 를사용하였고 Tacrobell capsule 2 mg 을복용한후 12 시간이지난뒤 Tacrolimus 정량검사가의뢰되었다. 결과분석에는 DIMENSION RXL MAX (SIMENS, Germany) 장비를이용하여검사결과 41.4ng/ml 로높게나와서동일장비로재검하였으며 ( 재검결과 : 41.6 ng/ml) 표준방법인 Quattro Primer XE (Waters, USA) 로검증한결과 5.2 ng/ml 로보고되어상기환자에대하여 2 주간의뢰된 Tacrolimus 정량검사를 DIMENSION RXL MAX 와 Quattro Primer XE 를이용하여결과를비교분석하였다. DIMENSION RXL MAX 장비를이용한결과에서는 41.4 ng/ml, 35.6 ng/ml, 43.2 ng/ml, 37.0 ng/ml, 37.3 ng/ml, 36.2 ng/ml, 33.3 ng/ml, 36.7 ng/ml, 35.2 ng/ml, 35.5 ng/ml, 31.6 ng/ml, 29.3 ng/ml, 27.9 ng/ml, 27.0 ng/ml, 30.2 ng/ml 로 AMR 또는참고치이상으로높았고, Quattro Primer XE 장비를이용한결과는에서는 5.2 ng/ml, 5.8 ng/ml, 6.0 ng/ml, 5.0 ng/ml, 5.6 ng/ml, 5.3 ng/ml, 6.4 ng/ml, 14.3 ng/ml, 12.7 ng/ml 11.3 ng/ml, 8.8 ng/ml, 7.5 ng/ml, 6.1 ng/ml, 7.9 ng/ml, 12.0 ng/ml 로참고치이내로낮았다. 결론 (Conclusions): Tacrolimus 의약물농도는환자의상태에따라일정수준의약물농도를유지해야하며혈중약물농도는처방약물의양이나실제약물복용여부에따라달라질수있으며, 약물농도에영향을미치는그외의요인으로는환자나이, 이식종류, 기존건강상태및다른약물과병용투여등이다. 약물농도에영향을미칠수있는병용약제로는칼슘채널차단제, Cyclosporine 과 Voriconazole 등이있으며 cimetidine, ketoconazole, methylprednisolone 같은물질은 Tacrolimus 수치를높이고, rifampin, phenytoin, phenobarbital, carbamazepine 같은물질은 Tacrolimus 수치를낮추는것으로알려져있다. 또한환자검체는면역억제제에반응하는비특이성항체를포함할수있기때문에검사결과가위양성또는위음성으로나올수있으며 ACMIA 법을이용한 DIMENSION RXL MAX 장비를이용한검사법은 β-galactosidase 에대한항체의간섭을최소화하도록만들어졌으나, 드물게결과에서위양성또는위음성이나타날수있다. 본환자의경우 ACMIA 법으로측정된결과가 20 ng/ml 이상으로나온 15 검체에대해서 LC-MS/MS 법으로확인한결과에서모두참고치이내의결과가확인되었다. 상기증례의경우처럼면역학적분석법에서임상증상과맞지않은높은농도의결과를보일경우에는간섭물질에의한비특이적인반응을고려하여표준방법인질량분석법으로측정하는등의검증과정이필요하며해당환자의약물농도측정의뢰시간섭요인을배제할수있는질량분석법을권고함으로써보다정확한결과를보고하는데도움이되리라사료된다. CC-08 외상환자에서혈당과알레르기와의상관성 1 을지대학교의과대학임상병리학과, 2 을지대학교대학원시니어헬스케어학과, 3 원광보건대학교임상병리과 이정수 1,2 ㆍ현성희 1,2 ㆍ이지숙 3 ㆍ김인식 1,2, * 배경 : 알레르기질환은알레르겐에의한노출후 IgE 의과도한분비로인하여발생한다. 알레르기질환의원인은꽃가루, 땅콩, 계란, 약물로는에탐부톨, 리팜피신, morphazinamide, 항생제세프트라이악손등이있으며, 아낙팔락시스를일으켜사망할수도있다. 당뇨병은은 1 형과 2 형으로분류되며, 알레르기질환과당뇨병과의관계연구는미흡한실정이다. Cephalosporin 은페니실린분해효소에의해분해되지않으므로내성이발현되지않아국내항생제시장의 48.6% 를차지하고, 가장널리사용되는항생제이다. 방법 : 2013 년 1 월 1 일부터 4 월 30 일까지서울송파구 N 병원응급센터에내원하여골절이나절단, 심한외상으로수술을받고 8 일이상입원한환자 164 명을대상으로하였다. 응급센터처치, 생화학적검사, 알레르기환자문진및치료중약물알레르기환자분류, 혈당 120mg/ 이이상당뇨환자분류, 자료의통계분석은 Windows SPSS Program (ver. 20, Chicago, IL, USA) 을이용하였다. 결과 : 연구대상자 164 명의일반적특성및생화학적검사평균연령은남성이 35.8±13 세이었고, 여성이 45.54±14 세로여성의나이가많았다. 알레르기유무에따른당뇨환자의상대위험도가 으로알레르기가있는환자의당뇨병위험을유의하게증가시킨다고할수있다. Cephalosporin 과수술후혈당과의상관계수는 Cephalosporin r=1**,*, (p<0.007) 로유의한상관관계를나타내었고, 수술후혈당의 r=-0.660, (p<0.000) 로통계적으로유의한상관관계를나타냈다. 알레르기유무와혈당의차이는수술 1 주후검사에서는알레르기반응있는남성의평균혈당이 178.4±22.5 mg/dl, 여성이 178.6±20.1 mg/dl 로남녀모두높았다. 알레르기가없는남성환자의평균혈당이 85.8±10.1 mg/dl, 여성이 80.2±10 mg/dl 로알레르기가있는환자가높았다. 질환유무와알레르기유무와의상관계수는각각 r=0.176*, (p<0.027) 로통계적으로유의한상관관계를나타냈다. Cephalosporin 주사전후생화학검사비교검사는모두검정통계량은 z=-2.587, (p<0.010) 로유의하였다. 고찰 : 연구대상인원이 164 명으로적었고, 정형외과미세접합전문병원에서수술받은사람으로전체인구집단의대표할수없고, 당뇨검사의기본이며, 중요한당화혈색소의검사를하지못했다는점, 알레르기환자의알레르기반응유무는피부반응검사나혈청면역글로블린 (IgE) 검사를시행하지못한부분, 환자에게문진과치료중약물알레르기반응에국한된점은보완이필요하다고생각한다. 그러나외상환자에서알레르기가당뇨병발생률을유의하게높였고, 광범위항생제 Cephalosporin 이혈당수치를유의하게낮추는역할을했다. 외상환자치료에서당뇨병을높이는요인인알레르기를철저히예방하는지표가될수있다고판단된다. 62

82 임상화학검사학 CC-09 자동화매독검사 Mediace TPLA 중화시험과 FTA-ABS IgG 일치율분석및중화시험의유용성확인 ( 재 ) 씨젠의료재단 이동희ㆍ최진실ㆍ박은경ㆍ김민진 Background: 최근에는 Treponemal test 로생화학자동분석기를이용한 TPLA (Treponemal Pallidium Latex agglutination) 검사법이널리사용되고있다. 자동분석기를이용한 TPLA 검사는정량적측정법으로검사자간의주관적결과차이를보이지않은장점을가진반면, 라텍스에대한비특이적항체의존재때문에위양성결과를보이기도한다. 이에본연구소는 TPLA 검사의위양성결과를줄이기위해 TPLA 결과가 Reactive 100 T.U. 이하인검체는 TPLA 중화검사를시행하고있었다. 중화검사를시행한검체를대상으로 FTA-ABS IgG 검사를시행하여중화검사에대한 FTA-ABS IgG 와의일치율을확인하고 TPLA 중화검사에대한임상적인유용성을확인하고자하였다. Methods: 2012 년 9 월부터 2014 년 3 월까지씨젠의료재단에 TPLA 를의뢰한검체중 TPLA 결과가 Reactive 100 T.U. 이하인 411 건을대상으로중화시험과 FTA-ABS IgG 검사를시행하였다. TPLA 중화검사는 (TPLA 결과 -TPLA 중화시험결과 )/TPLA 결과식을이용하여중화율이 50% 이하인경우에 Negative 로판정하였다. 중화시험결과와 FTA-ABS IgG 와불일치한결과는추가로 RPR 검사와 FTA-ABS IgM 검사를시행하였다. Mediace RPR (Sekisui, Japan), Mediace TPLA (Sekisui, Japan) 시약과중화시약을이용하여 Cobas8000 C702 (Roche, Germany) 로측정하였고, FTA-ABS 검사는 IFA Anti-Treponemal Pallidium IgG (Seimedx,USA) 시약을사용하였다. Results: 중화시험과 FTA-ABS IgG 검사와의일치율은 411 예중 393 예가일치하여 95.6% 로나타났다. 중화시험과 FTA-ABS IgG 와불일치를나타낸 18 예는중화시험은양성이지만 FTA-ABS IgG Non-Reactive 결과가 16 예였고, 2 예에서는중화시험은음성이지만 FTA-ABS IgG 결과에서양성으로나타났다. 불일치를나타낸 18 예의 FTA-ABS IgM 결과는모두 Non-Reactive 를나타냈고, RPR 은 FTA-ABS IgG 에서 Reactive 를나타낸 1 예서만 Reactive 를보이고모두 Non-Reactive 를나타냈다. 불일치를나타낸 18 예의중화전 TPLA 의결과는모두 30 T.U. 이하의결과를나타내는것을확인할수있었다. Conclusion: 생화학자동분석기를이용한 TPLA 검사는자동화가가능하여최근수기검사를대체하여검사할수있는장점이있으나라텍스에검사에대한위양성반응이있기때문에 TPLA 중화시험이필요하지만 TPLA 결과가 Reactive 30 T.U. 이하의낮은결과에서는중화결과가 FTA-ABS IgG 결과와일치하지않으므로 30 T.U. 이하의결과에서는중화시험보다는 FTA-ABS IgG 결과와기타관련검사및임상결과를바탕으로종합적인결과해석이필요하다고사료된다. CC-10 ICA (Immunochromatography) 방법를이용한 Urine 마약류검사에서의 cut-off 검증 녹십자의료재단 강성호ㆍ오영주 * ㆍ이상곤 배경 : 뇨에서마약약물을검출하기위한실험은우선많은수의검체중양성의반응과음성만을구별할수있는선별검사와양성으로반응된검체를정확히확진할수있는정밀검사로나눌수있다. 면역분석법을이용하여약물복용여부를판정하는데쓰이는휴대용키트로측정할수있는약물은다음과같고결과를 10 분이내에판독할수있다. (Amphetamine, Cannabinoide, Cocaine, Ecstasy (MDMA), Heroin, Methamphetamine, Morphine, Opiates 등 ). 선별검사는대부분정성검사방법인 ICA 방법을많이이용하며, 양성및음성을신뢰성있게구분해야하므로검증통해 cut-off 의정확성을확인해야한다. 이에본원에서는 GLSI EP12-A2 Guide line 을참조하여 cut-off 검증을실시하고있으며, 간단하게방법을소개하고자한다. 재료및방법 : Cut-off 물질은 CO, CO 보다 25% 낮은농도는 CO-25%, CO 보다 25% 높은농도는 CO+25% 로표기하고, CO 농도가적절한지시험한후 CO-25%, CO+25% 농도를검증한다. 사용물질은상품회된 Stat-Skree-N, Stat-Skreen-H (Biochemical) 를사용한다. CO 적절유무확인은예를들어 40 회중 14~26 회 (35~65%) 양성이면적절하다고판단하고 40 회중 13 회이하, 27 회이상양성이면부적절하다고판단한다. CO+25% 의경우반복횟수모두양성 CO-25% 경우반복횟수모두음성이어야한다. 실험순서는 3 가지농도의검체를준비하고각농도를 10 회씩반복측정한다. 측정은플라스틱피펫으로 3-4 방울의뇨를샘플 (s) 에분주후 2-5 분후결과를판독한다. 비교띠 (C) 와실험띠 (T) 모두에자색띠가나타나면음성이고비교띠 (C) 에만띠가나타나면양성으로판단한다. 그러나이결과는예비실험의일종이므로꼭정밀시험이필요하다. 결과 : Methamphetamine (MET), Cocaine (COC), Ecstasy (MDMA), Morphine (MOP), Cannabinoide (THC), Amphetamine (AMP) 의 Cutoff 농도 (ng/ml) 는각각 1000, 300, 500, 300, 50, 1000 으로 10 회씩측정결과, 양성 % 는 MET/COC/MDMA 50%, MOP/THC 60%, AMP 40% 로 CO 가 35~65% 기준에적합하였고, Cutoff 보다 25% 낮은농도 (CO-25%) 는양성수 0% (0 개 ), Cutoff 보다 25% 높은농도 (CO+25%) 에서는양성수 100% (10 개 ) 로측정되었다. 결론 : 불법약물검출을위한선별검사는양성및음성인시료를신뢰성이높게구별하여야하기때문에 cut-off 검증이필요하다. 또한높은감도로다수의시료를신속히처리할수있어야하고, 검사비용이저렴하여야한다. 이런여러조건으로인해 ICA 법이불법약물의선별에가장널리이용되고있다. 본원에서는 SD 사의 One-Step kit 를이용하여, 뇨검체로검사를시행하고있다. 그러나, 면역시험법의항체는특이성이낮아교차반응을일으킬수있으므로양성인시료는반드시다른화학적원리를갖은분석법에의해확인되어야한다. 확인실험에는감도가높으며특이성이있는 GC, HPLC, GC-MS 등이사용하여신뢰성있는기관에서시행확인하여야한다. 63

83 임상화학검사학 CC-11 연령에따른혈청 AMH 농도분포 이원의료재단 이은영ㆍ서한익ㆍ김윤주ㆍ오귀영 배경 (Background): Anti-mullerian hormone (AMH) 는성분화단계에서남성태아의고환에서분비되어 mullerian duct 를퇴화시키는물질로, 여성에서는태령 36 주경부터난포의과립막세포에서분비된다. AMH 는생리주기의영향을받지않고, 연령에따라감소하는양상을보이기때문에다른여성호르몬과함께난소기능의지표로이용되고있으나, 아직정상참고치가정해져있지는않다. 이에우리검사실에의뢰된 AMH 결과를토대로연령에따른 AMH 분포를알아보고결과판정의참고자료로이용하려고한다. 방법 (Methods): 2013 년 9 월 30 일부터 2014 년 4 월 15 일까지이원의료재단에혈청 AMH 검사가의뢰된검체 3812 건의 AMH 농도를분석하였다. 혈청 AMH 검사는 AMH Gen II (Beckman Coulter, Chaska, MN, USA) 시약을사용하여효소면역법으로측정하였다. 결과 (Results): 혈청 AMH 검사가의뢰된환자의평균나이는 ±4.3 세, AMH 의중위수는 3.93 ng/ml, 평균값은 4.96±4.55 ng/ml 였다. 의뢰된환자들의 AMH 농도는정규분포가아닌양의왜도분포를보였다 (Fig.1). 혈청 AMH 농도는나이가증가함에따라음의상관관계를보였다 (AMH= Age, R2=0.24, p <0.001)(Fig.2). 연령에따른혈청 AMH 농도는다음과같다. 나이 / 건수 / 평균농도 (ng/ml)/ 중위수 (ng/ml) : 25 세미만 /103/8.55/7.63, 25/28/8.58/7.54, 26/43/9.38/8.63, 27/55/9.48/8.04, 28/111/8.29/7.62, 29/166/7.48/6.67, 30/221/7.21/6.77, 31/282/6.46/5.5, 32/331/6.0/5.13, 33/369/5.75/4.86, 34/344/5.73/4.78, 35/243/5.14/4.27, 36/249/4.44/3.61, 37/187/3.89/2.91, 38/159/3.49/2.54, 39/150/3.5/2.92, 40/119/2.48/1.73, 41/115/1.78/0.97, 42/104/2.22/1.55, 43/98/1.49/0.52, 44/77/0.98/0.41, 45/60/0.92/0.15, 46/52/0.39/0.1, 47/38/0.23/0.1, 48/24/0.29/0.1, 49 세이상 /84/0.14/0.1 고찰 (Discussion): 우리검사실에의뢰된혈청 AMH 농도를분석한결과, 다른보고에서와마찬가지로혈청 AMH 농도는나이가증가할수록감소하는양상이었다. 특히 35 세이후에는중위수감소폭이증가하였다. 혈청 AMH 농도는양의왜도분포를보이므로, 결과판정시연령별평균값보다는중위수를참고하는것이바람직할것으로생각된다. 또한본연구에서는기존의연구보다다양한연령대의결과를정리하였으므로가임기전후여성의 AMH 결과판정에도움이될것으로생각된다. CC-12 LC/MS/MS 를이용한 Diisocyanates 의대사물질분석 근로복지공단직업성폐질환연구소 백진이ㆍ황주환ㆍ신재훈ㆍ이종성 * ㆍ최병순 배경 (Background): Diisocyanate 는두개의 R-NCO 의작용기를가지는유기화합물로써반응성이매우크며차량시트, 소파, 침대, 단열재, 접착제등다양한분야에사용된다. 그러나다양한활용성에비해직업성천식을일으키는대표적인원인물질로알려져있으며, 공기중노출뿐만아니라피부노출도호흡기계의감작을일으키는것으로보고되어있다. 따라서 Diisocyanate 의노출평가를위해서는호흡기계와피부등을통한흡수등모든노출경로를반영해야한다. 이를위한대표적인노출평가방법에는대사물질을이용한생물학적노출지표검사가있다. 따라서본연구에서는 LC/MS/MS 를이용하여 Isocyanate 의생체내대사물질인 Diamine 을정량분석하고자하였다. 방법 (Methods): 1,6-HDA (hexamethylene diamine), 2,4-TDA (toluene diamine), 2,6-TDA (toluene diamine), 4,4-MDA (methylene diamine) 를분석하였다. Diamines 표준물질과소변에내부표준물질을첨가후, 100 o C 에서 16 시간가수분해하고, Amine 을 PFPA (pentafluoropropionic acid anhydride) 로유도체화하였다. 소변은 Diisocyanate 에노출되지않은일반인의소변을분석하였다. 4 가지 Diamines 는 triart C18 column 으로분리하였고, ESI-MS/MS 로분석후, 크로마토그램의넓이로농도를환산하였다. 결과 (Results): 표준물질의 chromatogram 에서는내부표준물질과 4 가지 Diamines 가동시에검출되는데 Diisocyanate 에노출되지않은사람의소변에서는내부표준물질이외의 Diamine 은검출되지않았다. chromatogram 에서나온 peak 의넓이로농도를환산하여 calibration 곡선을그린결과, 추세선의 R-square 값이 이상을보였다. 2,6-TDA, 1,6-HDA, 2,4-TDA, 4,4-MDA 의 LOD 와 LOQ (ng/ml) 값은각 0.198/0.662, 0.926/3.087, 0.230/0.768, 0.208/0.694 이였다. 고찰 (Discussion): LC/MS/MS 를이용하여소변중미량의 Diamines 에대하여재현성있는분석이가능하였다. 3 번의반복실험결과내부표준물질로보정을한경우 (CV=0.31~19.39%) 보정을하지않은경우 (CV=1.37~45.78%) 보다재현성이높았다. 내부표준물질로보정을한결과 LOD 와 LOQ 가보정을하지않았을때보다낮은값을보였다. 따라서작업환경중의 Diisocyanate 노출평가를위한생체노출지표로서소변중 Diamines 의활용가능성을확인할수있었다. 64

84 임상화학검사학 CC-13 소변중크레아티닌검사의검체안정성평가 산업안전보건연구원 최윤정ㆍ이미영 CC-14 JW 중외메디칼 ( 주 ) 자동화임상화학시약의평가 가톨릭대학교서울성모병원 1 진단검사의학과, 2 진단검사개발평가센터 배경 : 소변중크레아티닌농도는신장기능평가, 소변시료유효성확인및농도보정등에활용된다. 산업안전보건연구원에서는시료채취후바로검사할수없을경우소변시료의보존기간은검사항목에따라약간씩차이가있지만일반적으로 4 o C 이하냉장보관하고, 분석시간이 5 일이상인경우에는 -20 o C 이하냉동보관하도록권고하고있다. 이에따라검사지연시소변중크레아티닌농도를비교하여검체안정성에대해평가해보고자하였다. 재료및방법 : 무작위로채취하여 -80 o C 에서냉동보관중인소변시료 (spot urine) 를 4 o C 에서하루동안해동하여즉시분석한결과와 1, 3, 5, 7, 10 일간냉장보관 (4 o C) 후분석한결과를비교하였다. 보관일자별로 70 개의시료를비교분석하였으며기기는 Jaffe 반응을이용한 COBAS INTEGRA 400 plus(roche) 를사용하였다. 데이터분석은 SPSS 18.0 통계프로그램을사용하였으며유의수준은 0.05 미만으로하였다. 결과 : 냉장보간기간과크레아티닌변화량의분포를확인한결과, 냉장보관일수가증가함에따라크레아티닌수치도상승하다가 5 일째최고치를보이고, 그이후에는큰변화가없는것으로나타났다. Pearson 상관계수 (p<0.001) 로양적으로유의한상관관계를보였으나선형관계 (r=0.637, r 2 =0.406, p<0.001) 보다는 3 차곡선모형 (r=0.717, r 2 =0.515, p<0.001) 에조금더적합한것으로나타났다. 결론 : 냉장보관에따른소변중크레아티닌수치의상승은외인성색소원이증가하여비특이적인 Jaffe 반응에간섭효과를일으키기때문인것으로생각된다. 국내대부분의검사실에서크레아티닌분석에 Jaffe 법을이용하고있으므로시료채취후최대 2 일이내에분석하기를권고한다. 이범기 1 ㆍ유해인 2 ㆍ조봉래 1 ㆍ이정중 1 ㆍ차경호 1 채효진 1 ㆍ김용구 1,2 배경 (Background): 본연구에서는국내에서개발한 JW 중외메디칼 ( 주 ) 자동화임상화학시약 ( 중외메디칼, 한국 ) 의 AST, ALT, GGT, ALP, LDH, 아밀라아제, CPK, 총빌리루빈, 직접빌리루빈, 총단백질, 알부민, 혈액요소질소, 크레아티닌, 요산, 글루코오즈, 총콜레스테롤, triglyceride, 칼슘, 무기인, 마그네슘시약의정밀도, 상관성, 직선성에관한분석적성능을평가하였다. 방법 (Methods): 정밀도평가를위해서 CLSI EP5-A 에따라 JW 정도관리물질 2 농도와상품화된정도관리물질 2 농도 (Bio-Rad Laboratories, USA) 그리고혼합혈청 1 농도를 20 일에걸쳐오전과오후매검사마다 2 회반복측정하였다. 직선성은 CLSI EP6-A 에따라상품화된직선성평가물질 (Validate, maine standards, USA) 을사용하여 5 가지단계의농도의물질을각각 4 회반복측정한뒤직선성을평가하였다. 상관성평가는 CLSI EP9-A2 에따라시행하였으며서울성모병원에의뢰된환자의잔여검체를이용하여각항목당 120 개이상의검체를선별하였다. 본원의 Hitachi 7600 장비와 Sekisui, Wako, 신양화학의시약으로측정된값을기준으로하여 JW 중외메디칼자동화임상화학시약시약으로측정한값간의상관성을평가하였다. 결과 (Results): JW 중외메디칼자동화임상화학시약은 % 의총정밀도를보였다. 모든검사항목들은임상적으로기대되는농도구간에서직선성이확인되었다. 대부분의분석물질에대해평가대상검사법인 JW 중외메디칼자동화임상화학시약은 1 개이상의의사결정농도에서비교검사법과비교성이있었다. 고찰 (Discussion): Hitachi 에장착된 JW 중외메디칼자동화임상화학시약은임상검사실에서사용되기에적절한정도의분석성능을보였다. 65

85 임상화학검사학 CC-15 M- 단백정량에따른 Immunofixation Electrophoresis 검사와 Immuno Electrophoresis 검사의상관성비교 ( 재 ) 씨젠의료재단 김수경ㆍ조재후ㆍ이규남ㆍ이기쁨ㆍ김민진 배경 : 혈청전기영동검사에서 M- 단백의검출은 Plasma cell myeloma, Waldenstrom s macroglobulinemia, Lymphoproliferative disease, Primary systemic amyloidosis, Light-chain deposition disease, 기타 MGUS 등, 질환의선별검사로매우유용하다. 이 M- 단백의확인검사로면역전기영동 (Immunofixation Electrophoresis; IFE) 과면역고정전기영동 (Immuno Electophoresis; IEP) 이일반적으로시행되고있으며두가지검사의민감도와판독상용이함을평가하고자하였다. 본원에서는단백전기영동상에서 M- 단백의정량 (g/dl) 에따른두검사간의해석의차이를알아보고자하였다. 재료및방법 : 2014 년 1 월부터 4 월간씨젠의료재단으로의뢰된검체중 monoclonal gammopathy 로진단받은환자혈청 20 검체를연구에사용하였다. 수행장비로는 Cobas 8000 C702 (Roche, Germany), SEBIA Hydrasys (Sebia, Lysse, France) 를사용하였고, 총단백측정은 Roche TP Gen2, 단백전기영동은 Hydragel 15 Protein kit (Sebia, Franc), 면역고정전기영동은 Hydragel 4 IF/Acid Violet kit (Sebia, Franc), 면역전기영동은 Titan GEL Immunoelectrophoresis (Helena, UK) 를사용하였다. 총단백측정과단백전기영동을통한 M- 단백의정량 (g/dl) 을통해두가지 (1.0 g/dl 이상 10 건, 1.0 g/dl 이하 10 건 ) 로분류하였고, 각각의면역고정전기영동, 면역전기영동양상을비교하여민감도와판독상용이함을비교하였다. 결과 : 단백전기영동상 M-peak(%) 를총단백정량에따라 g/dl 로환산하여 M- 단백정량이 1 g/dl, 10 검체와 > 1 g/dl 10 검체의 IFE 와 IEP 결과를비교하였다. IFE 와 IEP 동일소견으로는총 19 건으로 IgG Kappa 10 건, IgG Lambda 3 건, IgA Kappa 1 건, IgA Lambda 3 건, Free Lambda 2 건이었다. IEP 와 IFE 판독상상이한결과를보이는검체는 1 검체로 IEP Negative, IFE IgG Lambda 의결과를보였다. IEP/IFE 에서동일한소견을보였지만 IEP 에서약하게침강대가형성되어판독상유의해야하는검체는총 4 검체 (2, 9, 16, 18 번 ) 로 M- 단백정량이 1.0g/dL 이하인검체에서침강대가약하게형성되는소견을보였다. 결론 : 단백전기영동에서 M- 단백정량이 1.0 g/dl 이상인검체들에선 IFE 와 IEP 상판독소견이동일하였다. M- 단백정량이 1 g/dl 이하인검체특히 0.3 g/dl 정도일때 IEP 는약하게형성된침강대로판독상혼동을주거나혹은음성결과를보였다. 또한 0.3 g/dl 이하인검체들에서 IFE 가 IEP 보다민감도및판독이용이함을확인할수있었다. 따라서단백전기영동검사로 M- 단백이검출된검체에서 IFE, IEP 추가검사를시행하고자할때에는 M- 단백정량이 0.3 g/dl 이하에서 IEP 보다 IFE 가더유용할것으로사료된다. CC-16 소아청소년의연령에따른 Alkaline phosphatase 의활성치검토 대구보건대학교임상병리과 권세영 * ㆍ나영악 배경 (Background): Alkaline phosphatase (ALP) 는 ph 9~10.5 에서최적활성을나타내며인산모노에스터 (phosphomonoester) 의가수분해를촉매하는효소로서거의모든조직에서광범위하게존재하며콩팥, 소장, 뼈, 태반, 간등에서활성이높은것으로알려져있다. Robinson 이성장기에있는소아의뼈에서처음발견하였고, Kay 가뼈질환에서혈청 ALP 의활성이높아지는것을연구하여뼈질환의진단에이용하였으며, 현재 ALP 의활성은주로뼈질환과간담도질환에적용되고있다. 혈청 ALP 의생리적변동이성장기소아에높고성인의 3~4 배까지상승하는것으로알려져있으며소아청소년의연령에따른 ALP 의활성변동이크게나타남에도불구하고연령에따른참고치에대한자료는미흡하다. 이에본연구에서는 10 세이상 20 세미만소아청소년의연령과성별에따른혈청 ALP 의활성치를살펴봄으로써참고치설정을위한기초자료를제시하고자하였다. 재료및방법 (Materials and Methods): 2011 년 1 월부터 12 월까지시행된국민건강영양조사에서검진을시행한 10 세이상 20 세미만대상자중간, 뼈, 신장질환검사에서이상소견을보인대상자를제외하고건강한소아청소년 847 명 ( 남 443 명, 여 404 명 ) 을대상으로분석을시행하였다. 혈청 Alkaline phosphatase 는 Pureauto S ALP (Sekisui, Japan) 시약을사용하여 Hitachi 7600 (Hitachi high-technologies Co., Tokyo, Japan) 자동화학분석기를이용하여측정하였다. 연령과성별에따른혈청 ALP 의활성치를살펴보기위해연령별백분위수를구하였고, 성별간의차이를검증하였다. 자료에대한통계분석은 SPSS 17.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA) 을사용하였으며, 결과해석시유의수준은 p<0.05 로하였다. 결과 (Results): 전체남아의평균은 671 IU/L, 여아의평균은 473 IU/L 로성별에따른차이를보였다 (p<0.05). 남아의경우혈청 ALP 의평균치는 세에서 1,007 IU/L 로가장높았으며, 그다음 세에 962 IU/L 로높게나타났다. 여아의경우평균치는 세에서 894 IU/L 로가장높았으며, 그다음 세에 878 IU/L 로높게나타났다 세, 세를제외한모든연령군에서성별에따른차이를보였다 (p<0.05). 성인의혈청 ALP 수준으로감소하는시기는남아의경우 17 세이후였으며, 여아의경우 세에평균 340 IU/L 였으며, 이후꾸준히감소하였다. 결론 (Conclusions): 본연구에서 10 세이상 20 세미만소아청소년의혈청 ALP 의참고치설정을위한기초자료를제시하고자연령과성별에따른활성치를살펴보았다. 혈청 ALP 의활성은성별 연령별변화양상이다르므로성인의활성치와달리연령또는연령군별로따로설정되어야함을알수있었으며본연구에서포함되지않은 10 세이하소아청소년의자료를보완하여전체소아청소년의데이터를구축하면추후임상에서유용하게활용될것이다. 66

86 임상화학검사학 CC-17 Rheumatoid factor 의연령별양성률분석 ( 재 ) 씨젠의료재단 전소영ㆍ이호균ㆍ최승호ㆍ이동희ㆍ김민진 Background: Rheumatoid factor (RF) 는 IgG 의 Fc portion 에대한항체로 Rheumatoid arthritis (RA) 진단에널리이용되고있는대표적인검사이다. IgM RF 가가장흔하고 IgA RF, IgG RF, IgE RF 도보고되었다. RF 는류마티스관절염환자의약 80% 에서양성반응을나타내지만, 건강인의약 2-5% 에서도양성반응이나타날수있으며, 그밖에홍반성낭창, 간염, 간경화증, 매독등과같은질환에서도비특이적으로위양성을나타낸다고보고되었다. 본연구에서는 RF 가의뢰된검체를대상으로남자와여자를구분하여연령대별 RF 양성률을확인해보고자하였다. Methods: 씨젠의료재단에 2012 년 10 월부터 2013 년 3 월까지 RF 를의뢰한 45,825 예를대상으로하였으며남자는 16,587 예, 여자는 29,238 예였다. 사용장비는 Cobas8000 C702 (Roche, Germany) 로측정하였고시약은 RF-Ⅱ (Roche, Germany) 를사용하였다. 정상범위는 14 IU/ml 미만으로 14 IU/mL 이상을양성으로판정하였다. Results: RF 양성률은남자는 12.1%(2015/16,587), 여자는 16.9%(4934/29,238) 의양성률을보였다. 연령대별양성률은남녀각각 0 세에서 10 세는 5.7%(19/331), 6.7%(70/973), 11 세에서 20 세는 1.3%(11/832), 6.0%(49/817), 21 세에서 30 세는 3.6%(50/1372), 10.1%(154/1528), 31 세에서 40 세는 9.8%(294/2992), 16.9%(571/3378), 41 세에서 50 세는 11.8%(453/3823), 17.4%(1110/6366), 51 세에서 60 세는 14.7%(558/3803), 16.2%(1408/8675), 61 세에서 70 세는 18.6%(369/1986), 21.2%(853/4020), 71 세에서 80 세는 17.6%(208/1183), 20.7%(555/2675), 80 세이상에서 20.0%(53/265), 20.3%(164/806) 를보였다. Conclusion: RF 의양성률은남자보다여자가더높았고, 연령대가높아질수록양성률도높아짐을확인할수있었다. RF 는소아와청소년층에서는낮은양성률을보이나 30 세이후부터 10% 이상으로양성률이증가하며, 60 대부터는 20% 에가까운양성률을보였다. RF 결과가양성이라고 RA 로진단할수는없지만혈청 RF 가 RA 진단에도움을주기때문에노령인구의자가면역질환진단시에는다른질환과의감별을위해주기적인검사가필요할것으로생각된다. 또한노령인구에서면역체계의이상의빈도가높기때문에비교적낮은역가의혈청류마티스인자가보일수있기때문에결과해석에도주의가필요할것으로사료된다. CC-18 CA(Gen2.) 시약업그레이드에따른검사수행능평가 녹십자의료재단 김보라ㆍ오영주 * ㆍ이상곤 배경 : 칼슘은체내에서가장많은미네랄성분으로, 99% 가뼈내에주로수산인회석의형태로존재하며나머지칼슘은여러조직과세포외액사이에분포되어생명유지과정에필수적인역할을한다. 이외부수적으로혈액응고, 신경근전달, 골격근과심근의흥분성, 효소작용, 세포막유지와투과성을보전하는기능이있다. 혈청칼슘수치와체내함유량은부갑상선호르몬 (PTH), 칼시토닌, 비타민 D 에의해조절되는것으로알려져있다. 이러한조절자의불균형은혈청과체내의칼슘수치를변화시킨다. 혈청 PTH 나비타민 D 의증가는보통과칼슘혈증과관계가있다. 혈청칼슘수치의증가는다발성골수종이나다른신생물질환에서나타난다. 저칼슘혈증은부갑상선저하증, 지방변증, 신증, 췌장염에서나타난다. 이처럼 Ca 은진단에서중요한항목이니만큼시약의업그레이드에따른비교검사를통해어떤차이를보이는지여러평가 (Precision, Linearity, Comparison, Reference Range verification 등 ) 를통해확인해보았다. 재료및방법 : 분석장비로는 Roche Modular D 를사용하였고기존시약 Ca 과업그레이드된시약인 CA2 로비교분석하였다. Precision 을위해 5 일동안매일정도관리물질 (Level 1, Level2) 을사용하여분석후 SD 와 CV 를도출하였고, Comparison 을위해 AMR 전범위의다양한수치의검체 20 개를가지고기존의시약과 upgrade 된시약으로측정하여 comparison 을실시하였다. 또한건강하다고판단되는남녀검체를 20 개를준비하여 Reference Range verification 을시행했다. 이와함께높은농도와낮은농도의검체 2 개로정해진순서대로측정하여 Carryover 를확인하였다. 결과 : 평가한검사내정밀도 (Within run & Total)SD, CV % 가제조사제공 CV 보다다소높지만 5% 내로 medical acceptable 하다고판단하였다. Comparison 에서는 CA2 의 slope 0.998, Intercept 0.02 를보여주었다. 또한참고치검증에서는허용기준이 Outside 가 10% 이내일경우적합하다고판단하는데 0% 로나와적합함을확인하였다. CA2 는 TEa 를 10.0% 로적용했을때 0.10~19.30 mg/dl 의측정범위에서는 linear 한것으로판단되며, SEa 를 3.3% 로적용했을때 maximum deviation 은 100% 를기준으로했을때 3.1% 로 linear 한것으로판단되었다. 결론 : CA2 시약업그레이드로인한 Precision, Linearity, Comparison, Reference Range verification 등여러검증자료를검토한결과, 임상검사용으로적절할것으로판단되어 CA2 시약으로전환을실시하였다. 업그레이드된시약은 matrix effect 가줄어들었고, 무엇보다 calibration 주기가연장되어경제성및효율성이증가될것으로판단된다. 67

87 임상화학검사학 CC-19 요일반검사에포함되는 RBC, WBC 의 Urisys 2400 과 UF 1000i 의비교평가 삼광의료재단 박지수ㆍ신지현ㆍ최삼규ㆍ지현영 배경 (Background): 소변은신장에서혈액을거른뒤나오는노폐물로서여러대사산물이포함되어있다. 이를검사함으로써요로계의이상뿐만아니라전신적인내분비 / 대사질환에대한정보도알수있다. 또한소변은다른검체에비하여비침습적으로환자에게부담이가지않게채취할수있기때문에요검사는의료현장에서매우중요한역할을한다. 본원에서는현재사용하고있는 Roche 사의 Urisys 2400 장비와 Sysmex 사의 UF-1000i 장비에서의일치율에대해알아보고자하였다. 방법 (Methods): 2014 년 1 월 1 일부터 2014 년 1 월 31 일까지의뢰된요 10 종검사와요침사검사 건을대상으로실시하였고, Urisys 2400 과 UF-1000i 를사용하여 WBC 와 RBC 의일치율을분석하였다. 결과 (Results): Urisys 2400 과 UF-1000i 에서변동이없는구간의일치율은 RBC 85.2%, WBC 76.2% 를보였으며 1grade 이내의일치율은 RBC 94.5%, WBC 90.4% 를나타내었다. 고찰 (Discussion): UF-1000i 와 Urisys2400 두장비간의 RBC, WBC 의 1grade 이내의일치율은모두 90% 이상으로우수하였지만,dipstick 을이용한잠혈반응검사는 pseudoperoxidase 반응을이용하여 hemoglobin 을검출하는것이므로 free hemoglobin, myoglobin 등다른 oxydizing agent 에의해위양성이나타날수있고, 백혈구는저삼투성뇨나알칼리뇨에서쉽게용해되어위양성을나타내거나에스테라제효소가없는림프구는위음성을나타낼수있어오차가생겼다고사료된다. 현미경적요침사검경이동반되면보다정확한분석이이루어질것이라고생각된다. CC-20 만성폐쇄성폐질환에이환된탄광부이직근로자에서호기응축액중의 malondialdehyde 와 3-nitrotyrosine 근로복지공단직업성페질환연구소 이종성ㆍ신재훈ㆍ황주환ㆍ백진이ㆍ최병순 Objectives: Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is an important cause of occupational mortality in miners exposed to coal mine dust. The inflammatory mediators involved in COPD have not been defined but it is now apparent that inflammatory mediators such as reactive oxygen and nitrogen species. Methods: To investigate the relevance of exhaled biomarkers of oxidative and nitrosative stress in subjects with COPD, we determined the levels of hydrogen peroxide, malondialdehyde (MDA), and 3-nitrotyrosine (3-NT) in exhaled breath condensate (EBC) in 90 retired elderly coal miners (53 non-copd and 37 COPD subjects). Results: Mean levels of EBC MDA (4.64 nm vs nm, p = 0.005) and 3-NT (3.51 nm vs nm, p = 0.039) were significantly higher in subjects with COPD. Median level of MDA did show statistical difference among the COPD severities (p=0.017), the area under the ROC curve for MDA (0. 67) for discrimination of COPD indicated the biomarker. Optimal cutoff values of EBC MDA were 5.34 nm (sensitivity 64.9%; specificity 64.2%). The results suggest that high levels of MDA and 3-NT in EBC are associated with COPD in retired elderly miners. Conclusion: These results showed that the elevated levels of EBC MDA and EBC 3-NT of COPD patients are biomarkers of oxidative or nitrosative stress in retired elderly coal miners. 68

88 임상화학검사학 CC-21 TOSHIBA-200FR 을이용한혈청크레아티닌시약평가 국립암센터진단검사의학과 한지선ㆍ한승원ㆍ송윤경ㆍ박인순ㆍ이도훈 배경 : 사구체여과율은신기능의평가및만성신질환의경과관찰에가장유용한지표이다. MDRD 공식을통한 egfr 의산출에있어정확한크레아티닌수치는매우중요하다. 본원에서도 2013 년중반부터 egfr 보고를시행하고있고, 이에따라좀더정확한크레아티닌수치를보고하기위해표준물질을이용한시약평가를통하여우수한시약을선정하고자하였다. 방법 : 현재사용중인 Randox 시약을포함하여 enzyme 시약 2 종류 Jaffe 시약 5 종류총 7 종류의시약을 TOSHIBA 200FR 장비를이용하여평가하였다. 각시약의제조사별 calibrator 를사용하여 calibration 을시행하였고 precision, linearity, correlation, accuracy, LOD, carry over 를평가하였다. Accuracy 는표준물질 (NIST SRM 967a) 2 level 을검사하였고각시약의결과를비교하였다. 결과 : Linearity, correlation, LOD, carry over 는평가한시약모두본원허용기준에적합하였다. Accuracy 평가는각시약별로표준물질을 3 일간중복검사하여측정된평균값을표준물질농도값과비교하였다. 저농도 (0.85 mg/dl) 물질은 A 사 enzyme 시약과같은제조사 Jaffe 시약이 0.84 mg/dl 로가장유사한결과를보였고, 고농도 (3.88 mg/dl) 물질은 D 사시약이 3.88 mg/dl 로가장좋은결과를보였다. 결론 : A 사의 Jaffe 법, B 사의 enzyme 법시약의평가결과가우수하였는데 enzyme 법시약은고가여서시약선정에서제외하였고, A 사 Jaffe 법시약을선정하였다. 선정된시약으로검사한결과와기존시약으로검사한결과에차이가관찰되어참고치검증을시행하였다. 참고치검증은건강검진환자의검체를이용하였고, 시약회사에서제공하는참고치와대한신장학회에발표된논문을기초로하여참고치를재설정하였다. 본평가를통하여임상에좀더정확한크레아티닌결과를제공함으로써신질환의조기발견에도움을줄것으로기대한다. CC-22 ABGA 현장검사의관리체계확립을위한개선활동 인제대학교해운대백병원진단검사의학과 강미정ㆍ손유나ㆍ김혜미ㆍ김경호ㆍ이지원ㆍ조광래정기자ㆍ박진미ㆍ이희련ㆍ전경란ㆍ이정녀 배경 : ABGA 현장검사는결과를임상에즉시적용할수있는장점이있으나, 현장검사자의검사관련인식부족과장비관리미비로인한오류발생, 미처방검사로인한검사누락발생등의단점이있다. 특히, 본원 2012 년한해검사처방누락율은전체실행건수의약 7.8% 를차지하였다. 이에현장검사자에의한오류및검사처방누락건을감소시키고, 정도관리체계를확립하고자한다. 방법 : ABGA 장비가설치되어있는응급실, 중환자실 3 개병동, 회복실의실무자를대상으로현장검사전반에대한설문조사를실시하고, 처방및검사시행관련정보를수집하여검사누락에대한실태파악을하였다. 설문조사및실태조사결과에따라개선활동을시행하였다. 결과 : 조사결과잘못된검사방법과처방누락에대한잘못된인식이가진실무자들이많았다. 이에홍보및강좌를통한교육, 전산작업의개선, 정도관리점검시스템구축, 병동장비간및중앙검사실간비교를통한검사신뢰도확보, 현장검사위원회를통한개선등원인별개선활동을시행하였다. 그결과검사처방누락율이 2012 년 7.8% 에서 2013 년 4.1% 로감소하였다. 특히설문조사와교육을실시한 4 월, 9 월의일시적감소효과가뚜렷하여설문조사만으로도홍보효과가있음을확인하였다. 병동장비간및중앙검사실간비교결과는 Bias ±10% 이하, R 로양호하였다. 고찰 : 실태파악을바탕으로현장에서요구하는교육을실시함으로써높은집중율과효율성을보였으며, 검사처방누락율을감소시킴으로써검사실경영효율향상에기여할수있었다. 검사처방누락율의감소외본활동의결과를향후설문조사재조사를등을통해평가할예정이다. 69

89 임상화학검사학 CC-23 일반화학검사항목의여러장비간결과동등성분석 이원의료재단 함태욱ㆍ서한익ㆍ김윤주ㆍ오귀영 배경 (Background): 신속하고정확한검사결과를얻기위해서검사실에서는여러대의검사장비를갖추고검사업무를수행하고있다. 특히우리검사실에서는대량의검체에대한검사업무를수행하기위해동일한검사항목을여러대의검사장비로검사하고있다. 이때, 검사실에서안정적이고일정한검사결과를보고하기위해서는각검사장비간동등한결과를얻는것이중요하다. 따라서본연구에서는동일한일반화학검사항목의장비간결과동등성을검증한결과를소개하고자한다. 방법 (Methods): 일반화학검사항목중알부민, AST, 크레아티닌, 총콜레스테롤의장비간결과의동등성을검증하기위해, 7 개농도의 CAP (College of American Pathologists) 의직선성평가물질을자동임상화학검사장비인 Cobas C702 (Roche, Germany) 10 대에각각검사하였다. 장비별측정값과 10 개의장비에서측정한농도값의중위수와의차이를구하고, 농도값의차이와총허용오차 (total allowable error) 의비율 (error index) 을구하였다. error index 가 ±1.0 을벗어나면, 장비간결과의동등성이없다고평가하였다. 총허용오차는 CAP 의칼리브레이션검증오차허용범위와생물학적변이를고려하여설정하였다. 데이터분석은 EP evaluator (Data Innovations, Burlington, VT, USA) 를이용하였다. 결과 (Results): 알부민은 1.37~7.85 g/dl 7 개의농도를측정하였고, 총허용오차를 0.2 g/dl 또는 5% 로설정하였을때 -0.56~0.48 의 error index 를보였다. AST 는 10.0~907.5 U/L 의물질을측정하였고, 총허용오차를 5 U/L 또는 10% 로설정하였을때 -0.40~0.40 의 error index 를보였다. 크레아티닌은 0.26~26.86 mg/dl 의물질을측정하였고, 총허용범위는 0.1 mg/dl 또는 7.5% 설정하였을때 -0.68~0.42 의 error index 보였다. 총콜레스테롤은 33.5~590.5 mg/dl 의물질을측정하였고, 총허용오차를 3 mg/dl 또는 4.5% 설정하였을때 -0.67~0.87 의 error index 를보였다. 고찰 (Discussion): 장비간결과의동등성을비교한결과, error index 가모두허용범위이내로결과의동등성이있다고평가되었다. 본연구에서는장비간결과동등성검증에흔히사용하는환자검체가아닌, CAP 직선성평가물질을이용하였는데, 그농도가측정가능범위에고루분포하기때문에드문결과의환자검체준비에따른노력을절감할수있었다. 또통계분석에사용한 EP evaluator 는장비별, 농도별 error index 를그래프로표시해주어복잡한통계에대한이해없이도검사실에서주기적으로동등성검증을하는데유용하였다. CC-24 Immunoglobulin D 검사에대한 SPA PLUS 장비의유용성평가 가톨릭대학교서울성모병원진단검사의학과 양지은 * ㆍ이정중ㆍ최혜순ㆍ김남주ㆍ조봉래ㆍ이범기김한나ㆍ양광현ㆍ이영혜ㆍ차경호ㆍ채효진 배경 (Background): Immunoglobulin D 는다발성골수종환자에서고농도의혈청 Immunoglobulin D 가발견되며고면역글로불린혈증 D 증후군 (Hyperimmunoglobulineamia D syndrome, HIDS) 과복부, 관절, 피부에서의증상을동반하는상염색체열성질환 (autosomal recessive disorder) 인재발성발열발작 (recurrent febrile attack) 에서그수치가높아지는것으로밝혀졌다. 현재본원에서는 Immunoglobulin D 검사에사용중인 BNⅡ (SIMENS, Germany) 장비의노후화로인해대체장비로 SPA PLUS (The Binding site, Japan) 장비에대한유용성에대하여평가를하고자하였다. 재료및방법 (Materials and Methods): ~ 일까지 BN Ⅱ 장비에 Immunoglobulin D 처방의뢰되었던 40 검체와 Control 물질, 측정가능범위하한치근방의 5 검체등을 SPA PLUS (The Binding site, Japan) 장비와 BNⅡ (SIMENS, Germany) 장비를이용하여 Human IgD latex reagent Kit (The Binding site, UK) 를사용하여비교분석하였다. Precision test 는 Reagent Kit 내 Control Level1 & Level2 물질을 Within-Run 5 회와 Between-Run 5 일동안오전 / 오후각 2 회측정, Correlation Test 는 Serum 40 검체를 BNⅡ 장비와비교분석하였고, Linearity Test 는고농도의 Serum 을저농도의 Serum 으로희석하여검증하였다. Accuracy Test 는사용한평가에사용한시약과는다른 Lot 의 Calibrator STD5 & STD6 를사용하여각 3 회반복하여측정하였고 Carryover test 는기본희석배율의검사가능범위내의저농도와고농도의 Serum 을고농도 Serum 부터 4 회 (H1~H4), 저농도 Serum 을 4 회 (L1~L4) 측정하였으며, LOQ test 는측정가능범위하한치근방의 Serum 을 5 회측정하였다. 결과 (Results): 본원에서시행한 The Binding site 사의 SPA PLUS 검사장비평가결과는다음과같다. Precision test 에서는 Within-Run CV 가 Level1 1.3%, Level2 1.1%, Between-Run CV 가 Level1 4.2%, Level2 2.5% 로기준 10% 이내의양호한수준을보였다. BNⅡ 장비와의 Correlation Test 는 R 2 =0.999 로판정기준인 R 2 =0.975 보다양호한결과를보였다. Linearity Test 는 R 2 =0.998 로우수한직선성을보였으며 Accuracy Test 는 Recovery 가 STD5 98.8%, STD6 98.9% 로허용가능한 bias 이내의결과를보였다. Carryover test 는 0.13% 로기준인 1% 미만으로양호하였다. LOQ test 또한 0.66 mg/dl 근처에서 CV 7.1% 로기준인 20% 미만으로우수하였다. 결론 (Conclusions): 본원에서는다발성골수종환자의치료및예후관찰의지표중의하나인 Immunoglobulin D 검사를시행하고있는데장비의유용성평가결과 The Binding site 사의 SPA PLUS 장비와 SIMENS 사의 BNⅡ 장비의상관성이 R 2 =0.999 로우수하였으며, 검사기기에서 Antigen excess 에의한 Prozone effect 를 Detection 할수있는 Flag Sign 을주어, 단계별희석을통한정확한결과를보고할수있는만큼 SPA PLUS 장비가기존의 BNⅡ 장비를대체하고보다정확한결과를보고하는데유용하리라사료된다. 70

90 임상화학검사학 CC-25 Carry over 평가방법비교 ( 재 ) 씨젠의료재단 목영훈ㆍ오해성ㆍ한소정ㆍ이동희ㆍ김민진 CC-26 TLA 시스템의검체운송방식중 Holder 와 Rack 방식의 TAT 와업무효율성비교 녹십자의료재단 배경 (Background): Carry over 는연속되는검체반응시스템에서앞서수행된검체의양이바로뒤에검사하는검체의결과치에영향을미치는것이다. 따라서자동화장비에부속된 Auto pipette system 에서 disposable tip 을사용하지않는경우에는주기적으로농도를알고있는고농도검체검사후저농도검체를검사하여검사장비 Carry over 평가를권장하고있다. Carry over 영향을평가하는방법으로고농도검체 4 회, 저농도검체 4 회씩연속측정하여평가하는 kaplan s clinical chemistry, 에서소개하는방법과측정장비의성능예비평가를위한가이드라인으로최소 5 일간고농도, 중간농도, 저농도검체혼합배치하여연속측정하는 CLSI EP10-A3 (Preliminary Evaluation of Quantitative Clinical labolatory measurement procedure) 에따라 carry over 영향을평가하는방법이있다. 방법 (Methods): Carry over 평가방법간비교를위하여본원에서비교적고농도의검체가많이발생하는 Triglyceride, AST, ALT, Cholesterol, Microalbumin (Urine) 검사항목에대하여 2 가지방법으로검사를시행하였다. 시약은 TRIGL (Roche, Germnay), AST (Roche. Germany), ALT (Roche. Germany), ChOL2 (Roche. Germany), ALBT2 (Roche. Germany) 를사용하였고, Cobas 8000 C702 (Roche, Germany) 로분석하여검사장비의 Carry over 를평가하였다. kaplan s clinical chemistry; 5 가지검사항목에대하여각각고농도환자검체 1 개와저농도환자검체 1 개를준비하여고농도검체를 4 회연속하여측정하고시차를두지않고저농도검체를 4 회연속측정하여 Carry over(%)={low1-(low3+low4)/2}/[{(high3+high2)/2}-{(low3+low4)/2}] *100 계산식으로평가하였다. CLSI EP10-A3; 5 가지검사항목에대하여각각고농도환자검체와저농도환자검체는위의평가방법과동일한검체를사용하였고중간농도는각검사항목에대하여고농도와저농도의중간값의환자검체를준비하였다. 각검사항목에대하여 Mid High Low Mid Mid Low Low High High mid 순으로 5 일간측정하여 Carry over(%) 를평가하였다. 통계처리프로그램은 Statis Pro (Ver 1.13) 을사용하여분석하였다. 결과 (Results): 5 개검사항목의 carry over 영향을평가한결과 kaplan s clinical chemistry 의방법으로검사항목별 Carry over(%) 는 Triglyceride : 0.1%, Cholesterol : -0.1%, AST : -0.1%, ALT : -0.3%, Microalbumin : 0.0% 였고 EP10-A3 의방법으로의 Carry over(%) 는 Triglyceride : 0.9%, Cholesterol : 1.0%, AST : 0.1%, ALT : 0.4%, Microalbumin : 0.2% 로 2 개방법에서모두검사실내 Carry over 허용기준 1.0% 이하의결과를보였다. 고찰 (Discussion): Carry over 의가장큰변수는고농도검체측정이후저농도검체측정시검사장비의 Sample Probe 또는 Reaction Cell 의세척과정으로세척과정의불량으로 Sample Probe 또는 Reaction Cell 의오염되어고농도검체가다음검체에영향을주게될경우측정환자결과에큰영향을미치기때문에정확한환자결과를제공을위해서는주기적인 Carry over 영향에대한평가가필요하다. Carry over 영향을 2 가지의방법으로평가한결과 EP10-A3 의방법에서 5 일간평균 Carry over(%) 는 1.0% 이하였으나 3~5 일차측정결과에서 1.0% 이상의결과를보이는항목들이있었다. Carry over 평가방법으로 kaplan s clinical chemistry 방법과 CLSI guideline EP10-A3 2 가지방법중선택하여사용할수있겠으나 5 일이상다른측정조건에서분석함에있어 CLSI EP10-A3 의방법이좀더정확한 Carry over 를평가해볼수있는방법이라고사료된다. 오영주 * ㆍ송준하 배경 : TLA (Total Laboratory Automation) 시스템의검체운송방식에는크게로봇을이용하거나, Holder 또는 Rack 을이용하는방법이있다. 로봇을사용할경우처리능력이적기때문에효율성을증가시키기위해서는설치비용이증가한다. 이에비해 Holder 또는 Rack 방식은저렴한비용대비처리능력은효율적이므로 Holder 나 Rack 방식을주로이용한다. 본원에서는대량의검체를정해진시간내에분석해야하고증가되는건수에유기적으로대응해야하는등, 여러상황을고려하여 2011 년검체운송방식을 ADVIA LabCell (Siemens, USA) 시스템의 Holder 방식에서 ALOKA (ALOKA, Japan) 시스템의 Rack 방식으로전환하였다. Holder 방식은검체의운송개수가 1 개인반면 Rack 방식은 5 개의검체가동시에운송되는시스템으로, 검사실의문제점인 TLA 시스템운송방식의속도에맞추어상대적으로빠른처리속도를제공하는분석장비의속도마저느려져전체적인 TAT (Turnaround time ) 를증가시키는단점을개선할수있다. 이에두검체운송방식의효율성을비교하기위해 TAT 와인당처리건수를비교해확인하였다. 재료및방법 : 검체운송방식을변경한 2011 년을기점으로 Holder 과 Rack 방식을사용한각각 2 년간의 TAT 와인당처리건수를비교하였다. Holder 방식은 2009 년부터 2010 년까지, Rack 방식은 2012 년부터 2013 년까지로 TAT 는혈청검사 85 항목을기준으로동일하게적용하여산출하였고, 인당처리건수는각각비교년도의신속검사수행인력수와처리되는건수로산출하였다. 결과 : Holder 방식을사용한 2009 년과 2010 년의 TAT 는 2009 년 96.75%, 2010 년 95.88% 를, Rack 방식을사용한 2012 년과 2013 년의 TAT 는 2012 년 99.25%, 2013 년 99.28% 를보였다. 인당처리건수는 2009 년일인당 863,106 건, 2010 년 1,085,433 건을, 2012 년 1,261,931 건, 2013 년 1,357,331 건을처리하였다. Holder 방식에서는 2009 년대비 2010 년인당처리건수가 25.8% 증가된반면 TAT 는 0.87% 가저하되었다. Rack 방식에서는 2012 년대비 2013 년도인당처리건수는 7.6% 증가에도불구하고 0.03% 로소폭향상되었다. Holder 과 Rack 방식사용년도평균비교시 TAT 는 Holder 방식 96.32%, Rack 방식 99.27% 로 2.95% 향상되었고, 인당처리건수평균비교시 Holder 방식 974,269 건, Rack 방식 1,309,631 건으로 34.4% 증가되었다. 결론 : 검사실에서는임상의요구나 TAT, 업무효율성등현재상황을고려하여검체운송방식을채택해야한다. 각운송방식은각각의장단점이있으며, 대량의검체를정해진시간내에분석해야하는경우다수의검체를운송할수있는 Rack 방식은 TAT 및인당처리효율을높이는데효과적일수있다. 또한, TLA 시스템의효율성을증가시키기위해서는 TLA 시스템및검사실의분석장비의사양도필히고려해야한다. 즉, 검체운송방식은 TLA 시스템의구축시감안해야할중요한포인트의하나이며, TLA 시스템의품질에영향을줄수있다고생각된다. 71

91 임상화학검사학 CC-27 신속하고안정적인방법을기반으로한암모니아측정 1 Department of Biomedical Laboratory Science, Molecular Diagnostics Research Institute, Namseoul University, Cheonan , 2 Hubiotech Co. LTD, Seoul Chang-Eun Park 1, *, Sang-Su Kim 2 Objectives: Ammonia is a key metabolite derived from amino acid metabolism and breakdown of nitrogenous substances in the gut and present hypotheses suggest that it is of central importance in the pathogenesis of hepatic encephalopathy. Most investigators who have studied ammonia metabolism in liver disease have measured the concentration of ammonia in whole blood and plasma. Also, several cation exchange techniques have been developed that measure the ammonia concentration of plasma. Methods: There are several theoretical advantages to the use of plasma which compensate for the additional step of separating plasma from blood. First, the ammonia concentration remains constant longer and increases more slowly in plasma than in whole blood. Second, the increments in ammonia concentration of whole blood. To compare and correlate the ammonia concentrations of whole blood, plasma in a variety of clinical situations. Results: All determinations were performed in duplicate using the blood ammonia method. Correlation between whole blood and plasma ammonia concentration. The ammonia concentrations of whole blood and plasma showed a highly significant linear correlation. Conclusion: We evaluated a fast, reliable micromethod, based on the blood ammonia FDC-100 in combination with the dilution with fresh whole blood. We conclude that the dilution of patient's blood with fresh whole blood extends the measuring range of ammonia on the FDC-100 analyzer. The plasma ammonia concentration paralleled the blood ammonia concentration over a wide range of values in normal subjects and in patients. the plasma ammonia concentration can be used reliably as an index of the ammonia concentration of whole blood, study of the variables that affect this relationship may provide further information. CC-28 Clinical and cytogenetic features of de novo Wolf-Hirschhorn (4p-) syndrome and partial trisomy 7p confirmed by array comparative genomic hybridization 1 Samkwang Medical Laboratories, Seoul, Korea Yoonmi Suk 1, Yoonjung Kim 1, Yong-Kyun Kim 1, Soyeon Seo 1, Hyun Young Chi 1, Young Sook Cho 1 Introduction: Wolf-Hirschhorn syndrome (WHS) is a well known genetic condition caused by a partial deletion of the short arm of chromosome 4. Although the critical region for determining the phenotype is at 4p16.3, the great variability in the extent of the 4p deletion and the possible contribution of additional genetic rearrangements lead to a wide spectrum of clinical manifestations. Investigation of the additional chromosomal abnormalities is important to gain a better understanding of karyotype phenotype correlations. Here, we report perinatal diagnosis and molecular cytogenetic characterization of a newborn infant with WHS and partial trisomy of 7p. Case Report: The patient was a female neonate with facial dysmorphia including ocular hypertelorism, micrognathia, both preauricular pit, low set ears, and short and stubby fingers. Her birth weight was 2.44 kg (10th-25th percentile) and birth height was 49 cm (50th-75th percentile). Fetal agenesis of the corpus callosum was suspected by cranial ultrasonography. Laboratory analysis showed that she had acute renal failure; serum blood urea nitrogen (BUN) and creatinine were 38.3 mg/dl and 3.2 mg/dl, respectively. Chromosomes analysis by G-banding revealed 46,XX,add(4)(p16.3) karyotype. To delineate the origin of additional genomic gain in chromosome 4, array comparative genomic hybridization (CGH) was performed using a 135k Roche NimbleGen CGX-3 135k (Roche-NimbleGen, Madison WI, U.S.A.). The analysis and interpretation of array data was performed using software program Genoglyphix (Signature Genomics, USA) The array result showed a 1.34 Mb sized loss on chromosome 4p 4p16.3 and a Mb sized gain on chromosome 7p (7p22.3àp14.3). Therefore, the final karyotype of the patient was defined as 46,XX,der(4)t(4;7)(p16.3;p14.3). The parental karyotypes were normal. By day 10 of life, BUN and creatinine levels progressively returned to normal without gross abnormality of both kidneys in trans abdominal ultrasonography. Discussion: The cases of 7p partial trisomy reported in the literature reveals a well-defined pattern of musculoskeletal, cardiovascular, neurological, genital, and ocular abnormalities in decreasing order of frequency. The clinical findings included psychomotor retardation, large anterior fontanelle, hypertelorism and low-set ears. In this case, we describe for the first time, as far as we know, the clinical and cytogenetic analysis of a patient with concomitant occurrence of partial of Hirschhorn (4p-) syndrome and partial trisomy 7p. This report suggests that the array CGH would be a valuable diagnostic tool for identifying the origin of small additional genetic materials. 72

92 2014 년제 52 회종합학술대회 포스터 - 면역검사학

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94 면역검사학 IS-01 Anti-HBs 정량검사방법에따른결과차이비교 ( 재 ) 씨젠의료재단 김윤경ㆍ강지영ㆍ이정식ㆍ김용하ㆍ최종현 배경 : B 형간염바이러스예방접종에따른항체형성은방어적항체 (protective antibody) 로서 HBV 감염을예방하는데매우중요하며 Anti-HBs 정량검사는예방접종후항체형성여부를확인하는데사용되어왔다. 또한 Anti-HBs 정량검사는병원이나검진센터에서수술전환자상태확인또는건강검진등의목적으로많은환자에서시행되고있기에우리나라대부분의검사실면역혈청검사중가장많이의뢰되는검사항목중하나이다. 양성기준은 10.0 miu/ml 로비교적명확하고정량적인검사방법이보편화되어사용되고있지만 Anti-HBs 검사는사용하는각제조사별검사시약에코팅된항원의종류, 검사원리, 간염백신종류등의차이로인해정량적분석수치에차이가있는것으로알려져있다. 따라서본원에서는각제조사별 Anti-HBs 결과를비교분석을통하여결과차이를비교해보고자한다. 방법 : 분석검체로는 2014 년 1 월에씨젠의료재단에 Anti-HBs 항목으로의뢰되어 ECLIA 법으로양성판정받은 ( miu/ml) 총 60 건의검체를사용하였고검사수행장비로는각제조사별 Cobas 8000 e602 (Roche, Germany), Architect i4000 (Abbott, USA) 를사용하였다. Anti-HBs 의측정은혈청으로부터 HBsAg 의 subtype ad 와 ay 의정제된항원의혼합물을사용하는 ECLIA (electrochemiluminescence Immunoassay, 전기화학적발광면역분석법 ) 과 Chemiflex 라고하는 flexible assay protocol 과 Anti-HBs 의양성검체중 ECLIA 로 miu/ml 로측정된검체를 CMIA 법으로도측정하여일치율및항체가를비교하였다. 결과 : ECLIA 법으로양성판정받은검체중 44 건의검체가 CMIA 법에서양성으로측정되어검사상 73.33% 의일치율을보였고 16 건 (26.66% ) 은 10 miu/ml 이하값으로측정되어불일치를보였다. 불일치를보인경우는대부분 30mIU/mL 미만의저농도항체가에서주로불일치를보였다. 불일치는총 60 건중 16 건으로 miu/ml 의값이총 10 건으로 62% 를차지하였고 miu/ml 값이 4 건, 50 miu/ml 이상값이 2 건으로나타났다. 고찰 : 본연구결과를토대로각제조사별검사방법 (ECLIA, CMIA 법 ) 이 Anti-HBs 검사의민감도및안정성이향상되었으나각제조사검사시약간의항원제조방법의차이나표준물질과검사의원리차이, B 형간염바이러스백신의다양성등으로인해 Anti-HBs 항체가의불일치가발생하는것으로보여지고검사장비, 시약의변경시각제조사별 Anti-HBs 항체가에대한검증이필요하고항체가의차이가존재하므로결과해석시유의해야할것으로사료된다. IS-02 HBsAg Chemiluminescence 검사에서 SST (Serum separation tube) 사용에대한고찰 삼광의료재단 공주연ㆍ이소리ㆍ허윤자ㆍ최삼규ㆍ서소연 배경 : HBsAg 을측정하는 Chemiluminescence 는민감도와특이도가높고자동화기기를사용하기때문에결과 Quality 는물론효율적인검사업무, 검사과정중여러가지오류를감소할수있어많은검사실에서사용하고있다. 그러나수년전부터위양성문제가대두되고있고여러가지원인중 SST (Serum separ- ration tube ) 의 Cell clot 성분인 Surfactant 가있다. Tube 와시약제조사에서는화학발광법을이용하는면역검사의경우 SST 보다 Plain tube 나 PPT (Plasma preparation tube), EDTA Plasma 를권장하고있으나많은검사실에서는생화학검사와함께검사해야하는현실적인문제가있으므로 SST 를이용하여검사하고있다. 이에 SST 가화학발광법에미치는영향을연구해보고자한다. 방법 : 2014 년 1 월부터 4 월까지 CMIA 법 (Abott Architect) 으로의뢰된 건중위양성으로판명된검체 163 검체에서 EDTA Plasma sampling 이가능한 66 건에대하여동시에 CMIA 법으로검사하였고 SST serum 의위양성물질을제거하기위해 Aliquot 하여 3000 rpm 에서 10 분간원심분리후 CMIA 법으로재측정하여통계처리하였다. * 위양성판정 : HBeAg/HBeAb/HBcIgG 가모두음성인검체치료된과거감염 HBV 환자는위양성집계에서제외됨 결과 : 위양성검체 66 건중 EDTA Plasma 로검사하여음성으로전이된률은 90.90% 였고 (60 건이음성으로전이됨 ) Aliquot 하여재원심분리후검사하여음성으로전이된률은 27.27% 였다. (18 건이음성으로전이됨 ) 결론 : EDTA Plasma 의음성전이율이 % 로 SST 의위양성물질이화학발광법반응시영향을주고있음을알수있다. 또한재원심분리한검체의음성전이율이 27.27% 로위양성물질이완전히제거가되지않고 serum 과균질화되었을가능성이있음을보여주고있다. 이에화학발광법을사용하는검사실에서는제조사의권장사항에따라 PPT, EDTA Plasma, Plain tube 를사용할수있도록하며 SST 의위양성사례가보고되고있으므로임상진단시유의해야한다. 75

95 면역검사학 IS-03 HBsAg Chemiluminescence 법의위양성에대한고찰 삼광의료재단 공주연ㆍ김신영ㆍ최삼규ㆍ서소연 배경 : HBsAg 는 B 형간염바이러스표면항원으로 B 형간염진단에유용한지표이다. HBsAg 진단을위한검사법이개발됨에따라초기 HA (Hemagglutination) 법에서 ICA (Immono chromatographic assay) 를거쳐최근에는 chemiluminescence 를이용한 immuno assay 가사용되고있다. 기존에사용하던 HA 법이나 ICA 법보다민감도와특이도가향상되었고자동화기기를이용하기때문에사무적오류및검사과정중에발생하는오류를줄일수있어 B 형간염진단에유용하다. 그러나수년전부터위양성문제가대두되고있고이에따라임상진단에혼란을초래하고있어통상적으로많이사용되고있는 ECLIA (Roche) 법과 CMIA (Abott) 법의위양성률과상관관계에대한연구를통해화학발광법의위양성을고찰해보고자한다. 방법 : 2013 년 1 월부터 6 월까지 ECLIA 법으로의뢰된 건중 index 이하결과가보고된검체와 2013 년 11 월부터 2014 년 4 월까지 CMIA 법으로의뢰된 건중 index 이하결과가보고된검체를대상으로 HBeAg/ HBeAb/ HBcIgG 검사를진행하여모두음성인경우를위양성으로구분하고 Index 별로통계처리하였다. ECLIA 법으로의뢰되어위양성으로분류된 210 검체중 126 검체를이용하여동시에 CMIA 법으로 HBsAg 검사하여상관관계를비교하였으며 CMIA 법으로의뢰되어위양성으로분류된 256 검체중 196 검체를이용하여동시에 ECLIA 법으로 HBsAg 검사하여상관관계를비교하였다. * 치료된과거감염 HBV 는위양성집계에서제외함 결과 : ECLIA 법총 건중 210 건으로 0.58 % 가위양성이었고 index 이하가 128 건 이하가 63 건, 이하가 19 건이었다. CMIA 법총 건중 256 건으로 0.23 % 가위양성이었고 index 이하가 109 건 이하가 117 건, 이하가 30 건이었다. ECLIA 법위양성 126 검체중음성으로전이된건수는 116 건으로 % 였으며 CMIA 법위양성 196 검체중음성으로전이된건수는 175 건으로 89.28% 였다. 결론 : HBsAg 결과판정에있어두방법모두위양성률 1% 미만으로허용할만한위양성률이지만우리나라의 HBV 환자수를고려하였을때유의한수치라고사료된다. 판정시위양성률을고려하고방법간비교를한다면큰혼동없이진단할수있을것이다. IS-04 B 형간염바이러스의약제내성돌연변이에관한임상적해석비교 Department of Laboratory Medicine, Seoul National University Bundang Hospital Ho Eun Chang, Kyoung Un Park, Junghan Song Background: Molecular diagnosis has become a major tool for antiviral therapy for Hepatitis B virus (HBV). Since reverse transcriptase (RT) domain of HBV has been used to the molecular target for antiviral nucleoside analogues, monitoring of the prevalence of mutations in RT domain is important. To facilitate the interpretation of observed mutation patterns, several databases has been used. Therefore, we compared the drug resistance interpretation results in different systems. Methods: Forty three HBV RT domain results were analyzed for 5 drugs (lamivudine; 3TC, Adefovir; ADV, Entecavir; ETV, Tenofovir; TDF, Telbivudine; LdT) by 3 database systems; Genafor, Genafor HIV-GRADE and Evivar database systems. HBV RT domain results obtained by sanger sequencing with laboratory developed primers (for Genafor, Genafor HIV-GRADE) and HBV sequencing (pol) kit (Abbott Molecular, Abbott Park, IL) (for Evivar) using 313xl genetic analyzer (Applied Biosystems Inc., Foster City, CA). Results: All 5 drug interpretation matched results among three database systems were 12/43 (27.9%), mismatched results were 31/43 (72.1%). L180M+M204I (23.6%) and L180M+M204V (27.9%) mutation results showed high incidence. L180M+M204I revealed the matched result among three database systems. 180M+M204V showed different result in Genafor database systems due to the interpretation for Telbivudine. M204I, A181V, A181T, M204V, A194V and 180M mutations showed the different interpretations among three database systems. S202G, T184S, T184S, V207I, N236T and V173L mutations showed the same interpretations among three database systems. Conclusion: Overall findings support discrepancies in the drug resistance interpretation systems despite same sequence that because each system has own interpretation algorithms. Thus choosing therapeutic strategies can be affected HBV mutation reports, drug resistance interpretation reports should be more careful, in case of mutations that different interpretations showed among three database systems, especially. 76

96 면역검사학 IS-05 ASCA 항체측정방법의비교평가 서울아산병원 손은희ㆍ임승택ㆍ박금보래ㆍ오흥범 * IS-06 Cytomegalovirus IgM 측정을위한 VIDAS, Immulite2000 XPi 장비수행능비교평가 1 가톨릭대학교서울성모병원진단검사의학팀, 2 가톨릭대학교 배경 : 크론병 (Crohn's disease) 은만성난치성염증장질환으로, 크론병의진단에대한표준진단법이없는관계로, 기타장질환과의감별에어려움을겪는경우가많다. ASCA 항체 (anti-saccharomyces cerevisiae antibody) 는크론병환자의 35-50% 에서양성을나타내므로감별이쉽지않은염증성장질환에서크론병의진단에도움을주고있다. ASCA 항체는민감도는낮기때문에선별검사로는적합하지않고, 건강인을대상으로한경우 95% 이상의특이도를보이고, 크론병과다른염증성장질환을대상으로한경우는 85% 가량의특이도를보이기때문에크론병의감별진단에큰도움이된다. 본연구에서는 ELISA 방법으로 ASCA 항체를측정할수있는서로다른두종류의시약에서 ASCA 항체검사결과를비교평가하고자하였다. 방법 : ASCA 항체검사가의뢰된총 100 검체에대해 INOVA ASCA IgG/IgA (QUANTA Lite, INOVA Diagnostics, San Diego, CA) 와 EliA ASCA IgG/IgA (ASCA assay, Phadia, Freiberg, Germany) 를이용하여 ASCA 항체를측정하였다. 결과 : EliA 와 INOVA 의비교에서 ASCA IgA 의경우동시양성 34 검체, 동시음성 55 검체로 89.0% (89/100) 의일치율을보였으며, 7 검체는 INOVA 단독양성, 4 검체는 EliA 단독양성결과를보였다. 그러나, ASCA IgG 의비교에서는동시양성 33 검체, 동시음성 41 검체로일치율이 74.0% 까지감소하였으며, 24 검체에서 INOVA 단독양성결과를보여, INOVA ASCA IgG 의양성율이유의하게높은결과를나타내고있었다. ASCA IgG 에서불일치결과를보인 26 검체에대해임상상은크론병 14 명, 궤양성대장염 9 명, 기타염증성장질환 2 명, 정상 1 명으로나타났다. 결론 : ASCA IgA 와 IgG 의검사방법간비교에서 EliA 와 INOVA 의결과간에 ASCA IgG 의경우 INOVA 에서유의하게높은양성결과를나타내고있었으며, 임상상과비교했을때궤양성대장염에서의양성률이기존보고에비해높아감별진단에혼돈을줄수있을것으로사료되었다. 다만, INOVA 단독양성을보이는 24 검체중 14 명이크론병환자로진단되어 INOVA 가 EliA 에비해진단민감도가높은것을확인할수있었으나,INOVA 의양성률이다소높은것을예상해볼수있다. 추후검사실에서는 ASCA 항체검사를시행할때검사방법에따라결과에차이가날수있음을고려하여검사결과의해석에유의해야할것이다. 의과대학진단검사의학과 강민경 1 ㆍ최애란 1 ㆍ유승효 1 ㆍ차경호 1 ㆍ이혜영 2 ㆍ오은지 2 배경 (Background): Cytomegalovirus (CMV) 는모든연령대에서발견되는바이러스로서성적접촉, 감염된체액에직접노출됐을경우, 수혈, 장기이식을통해감염된다. 감염대부분이무증상이나, 신생아, 종양, 장기이식, 에이즈감염환자등면역결핍환자에서는심각한감염으로진행할수있어조기검출과정확한진단이필요하다. CMV 활성감염시 CMV IgM 항체가검출되므로, 체내의 CMV IgM 농도측정은감염상태평가를위한유용한지표이다. 본연구에서는 VIDAS, Immulite2000 XPi 장비를이용하여혈청내 CMV IgM 농도를측정하고두검사법의수행능을비교평가하였다. 방법 (Methods): 2013 년 12 월에서울성모병원에서혈청 CMV IgM 검사가의뢰되어 VIDAS 로시행한임상검체 50 개를이용하였으며, CMV IgM 양성 6 검체가포함되었다. Immulite2000 XPi CMV IgM 검사를시행후, 두검사시약의제조사에서제시한양성판정기준에따라정성결과의일치율을분석하였다. 두검사방법에의한 CMV IgM 농도의상관성분석을위해 50 개임상검체의결과값 (Index) 을이용하여회귀식과상관계수를구하였다. 검사실운영효율성을평가하기위하여각장비의특성을조사하였다. 결과 (Results): 두검사방법의일치율은 96.0%(48/50) 였고, 양성일치율은 83.3%, 음성일치율은 97.8% 였다. 50 개의혈청검체를이용하여측정한 CMV IgM 에대한회귀방정식은 y=1.371x 이었고, 피어슨상관계수 (r) 는 0.9 로우수한상관성을보였다. 두가지키트설명서를비교한결과처음결과를얻기까지의소요시간은 CMV IgM 의경우 VIDAS 63 분, Immulite2000 XPi 90 분이였다. VIDAS 는크기가작아작은공간에서도설치운용이가능하며모든시약이분주완료된형태로구성이되어있어사용이편리하며, Immulite2000 XPi 는시간당 200 검사를수행하는빠른검사결과처리가가능하며, 소량의검체로도검사가가능하게되어있다. 고찰 (Discussion): VIDAS 와 Immulite2000 XPi 의수행능을비교평가한결과유의한차이를보이지않았으나, 정성적결과에차이를보이는검체가있었으므로, 검사시약에따른간섭등결과차이를고려하여야하며, 검사실의운영목적에따라두가지검사법이모두유용하게사용할수있을것으로판단된다. 77

97 면역검사학 IS-07 홍역항체양성률에대해조사 이원의료재단 정혜경ㆍ김봉희ㆍ서한익 소개 : Measles Virus 는홍역을일으키는원인균이다. 홍역은제 2 군법정전염병으로호흡기질환이며주로소아에게감염되며감염력이매우높은질환이다증상은기침결막염, 발열, 발진과함께감기와비슷하다. 현재단순홍역감염의예후는좋지만급성홍역감염시발생하는뇌척수염과같은중추신경계합병증은높은치사율을보인다. 이에최근일년동안본원에의뢰된검체를대상으로혈청특이항체의연령별, 계절별, 지역별항체양성률을파악하고자한다. 물질및방법 : 2013 년 4 월부터 2014 년 4 월까지본원으로의뢰된 Measles IgG 975 건 IgM 493 건을대상으로효소분석시약 (NOBATEC,Germany) 으로실시 결과 : 의뢰된 Measles 항체검사중 Measles IgG 는 975 건중 823 건이양성으로 84.4% Measles IgM 은 493 건중 52 건이양성으로 10.5% 를보였다. Measles IgM 은다시연령별로는 0-9 세 38 건,10-19 세 4 건 20 세이상 10 건을보였다계절별, 지역별차이는일시적으로유행하는형태로유행시기, 지역에한해서양성률이높았다. 결론 : Measles IgG 의양성률이높은것은생후 개월과 4-6 세에예방접종으로인한것으로보이며 Measles IgM 은 0-9 세에서홍역위험에노출되기쉬운 1 차접종이전인 12 개월미만의영아와 2 차접종을기다리는 4-6 세가포함되어있기때문으로보인다 Measles IgM 이양성인경우홍역의심환자발생으로보건소에신고하고, 질병관리본부에검사를의뢰해서혈청뿐만아니라인후도말소변등검채를시기별로채취하여바이러스분리및유전자진단검사를실시한다이런과정을통하여의심환자추가발생을최소화하는것이중요하게생각된다. IS 년 ~2013 년간홍역검사지역별양성율에대한조사 서울의과학연구소 박혜진ㆍ이안나 배경 (Background): 홍역은전세계적으로유행하는급성바이러스질환으로 meales virus 에의해전염되는특징적인발진을동반하는호흡기감염질환이며, 우리나라에서는제 2 군법정전염병으로분류된다. 전염성이매우강하며, 주로비말로전파되고발열, 콧물, 결막염, 홍반성반점, 구진이복합적으로나타나는특징이있다. 이러한홍역은발생시지체없이관할보건소에신고토록하는전수감시대상감염병으로 2008 년부터 2013 년까지최근 6 년간의뢰된검사대상으로지역별양성율을비교해보았다. 방법 (Methods): 본원에의뢰된 measles IgM 검사에대해총 5,968 건대상으로지역별양성추이를비교분석하였다 년 1 월부터 2013 년 2 월까지의뢰된 4,814 건은 ELISA 법 (Euroimmun, Anti-Measles IgM) 으로, 2013 년 3 월부터 2013 년 12 월까지의뢰된 1,154 건은 ELISA 법 (SIEMENS, Enzygnost Anti-Measles IgM) 으로분석하였다. 결과 (Results): 2008 년부터 2013 년까지홍역의년도별검출현황을보면특히 2011 년에는 22.3%, 2012 년에는 25.8% 으로높은양성율을보였으며, 그이외년도에서는 3.9%~9.1% 의양성율을보였다. 의뢰건수가년간 100 건이상인지역은서울, 대구, 경기, 전북으로 0.89%~28.69% 으로다양한양상율을보였다. 78

98 면역검사학 IS-09 장기이식교차시험에서공여자특이 IgM 항체에의한세포독성교차시험과유세포분석교차시험결과의불일치예 1 가톨릭대학교서울성모병원진단검사의학팀, 2 가톨릭대학교의과대학진단검사의학과 유승효 1 ㆍ강민경 1 ㆍ강미숙 1 ㆍ최애란 1 ㆍ차경호 1 이혜영 2 ㆍ오은지 2 배경 : 장기이식시에실시하는 HLA 교차시험은수혜자의혈액내에공여자특이항체의존재를확인하는방법으로이식후초급성거부반응예방을위해시행한다. 전통적 HLA 교차시험방법으로는보체의존성림프구독성 (complement dependent cytotoxicity, CDC) 방법이사용되나, 민감도를높이고공여자특이 IgG 항체를검출을위해유세포분석교차시험 (flow cytometry, FCXM) 도이용된다. 본증례는 HLA 교차시험에서 CDC 양성, FCXM 이음성으로두검사결과에불일치를보이고, panel reactive antibody (PRA) class II 양성을보여공여자특이 IgG 와 IgM 항체의감별이필요하였던 1 예에서 DDT 처리후공여자특이 IgM 항체에의한교차시험불일치를확인하였다. 증례 : 49 세여자환자에서알코올성간경화로모자간간이식을위해이식전교차시험을시행하였다. 교차시험결과 T-CDC : 양성, T-CDC-AHG : 양성, B-CDC : 양성이었고, T-FCXM 와 B-FCXM 는모두음성이었다. HLA 특이항원을이용한 Luminex PRA 검사는 HLA class I 항체음성, class II 항체양성 (11/12) 이었다. CDC 와 FCXM 의불일치의원인과공여자특이 HLA class II IgG 항체에의한교차시험유무를확인하기위해, 환자의혈청을 DTT (dithiothreitol) 처리하여교차시험을시행하였다. DTT 처리후시행한 T-CDC, T-CDC-AHG, B-CDC 모두음성으로전환되었으므로, 공여자특이 IgM 항체에의한 CDC 양성, FCXM 음성을확인할수있었으며, PRA 양성을보였던 HLA class II IgG 항체는공여자특이항체가아니었음을확인하였다. 환자는간이식후 3 개월째특별한합병증없이경과관찰중이고, 이식후시행한 Luminex PRA-single antigen 검사에서공여자특이 HLA 항체는모두음성이었다. 결론 : 이식후거부반응예측을위해서는공여자특이 IgG 항체검출이중요하므로, 주로자가항체인공여자특이 IgM 항체에의한교차시험양성과감별이필요하다. 따라서, CDC 교차시험에서양성을보이는경우, anti-human IgG 항체를검출하는 FCXM 나 PRA 검사결과와비교하거나, DTT 처리등을통해 IgM 항체에의한교차시험양성유무를확인하여, 환자가이식에서제외되거나지연되지않도록하여야할것이다. IS-10 HLA(SBT) 검사에서 POP6 를 POP7 polymer 로변경시적절한 condition 소개 가톨릭대학교서울성모병원진단검사의학과분자유전부 이민정ㆍ이건동ㆍ이상윤ㆍ김정록ㆍ유재빈ㆍ차경호김명신ㆍ김용구 배경 (Background): 국내에서 HLA-SBT (sequence based typing) 검사는일반적으로조혈모이식을위한 HLA (human leukocyte antigen) 유전자형검사에이용되고있고 Atria Genetics allele SEQR (abbott, USA) 을가장많이사용하고있는걸로조사되어있다. 하지만사용장비나장비에장착되는 polymer 의종류는잘알려져있지않다. 본원에서는그동안 AB 3130xl Genetic Analyzer 장비와 POP 6 polymer 를사용하여 HLA-SBT 검사를시행하여왔는데 polymer 와장비의효율적사용을위해 pop7 polymer 를검사간상호호환가능한지평가해보았다. 저자들은그과정에서최적의검사결과를얻기위해 running 조건을어떻게변경해야하는지를경험하게되어소개하고자한다. 방법 (Methods): POP6 polymer (Applide Biosystems, USA) 를사용하여 AB 3130xl Genetic Analyzer (Applide Biosystems, USA) 에전기영동하였던 A-locus 10 명, B- locus 8 명, C- locus 4 명 DR-locus 6 명의 sequencing PCR 산물과새롭게 sequencing PCR 한 sequencing PCR 산물을 Run Module (rapidseq36_pop7_ default) 일부를변경하여 POP7 polymer (Applide Biosystems, USA) 가장착된 3130xl 장비에전기영동하였다. 변경된일부조건은 Injection Voltage (IV), Injection Time (IT), Run Time (RT) 이었다. 첫번째는동일한장비와 polymer 를사용하는다른기관의조건에맞추어 IT 를 18 에서 10 으로, RT 를 2780 에서 1800 으로변경하였고. 두번째는 RT 만 1800 에서 2100 으로변경하였으며세번째는 IV 를 1.2 에서 1.0 로, IT 를 10 에서 3 으로, RT 를 2100 에서다시 1800 으로최종변경하였다. 최종변경된전기영동조건으로실험한 data 는 SBTengineR(Abbott Molecular, USA) 을통해판독되었고이전 POP6 실험결과와비교평가하였으며장비수리가완료되기까지 4 주간최종변경된조건으로실험한결과를분석하였다. 결과 (Results): 첫번째조건으로실험한결과는 sequencing peak 에 baseline noise peak 가혼합되어판독이용이하지않았고 B,C locus 의염기서열 forward 앞부분과 reverse 의앞부분이조금씩잘려져있었다. 두번째 Run Time 을연장했던실험결과는 A locus data 가프로그램에서전혀분석되지않았고최종변경된 IV 와 IT 를줄인세번째실험결과는 B,C locus 의염기서열일부가잘려져있었지만 baseline peak 가사라져판독이가능하였으며두 polymer 의최종판독결과는모두동일한것으로나타났다. 하지만 POP7 사용은기존 POP6 사용판독시보다더많은 position 의 base 를수정해야만하였고특히 DR-locus 에서 reverse 의뒷부분 peak 이늘어져서특정 allele 을결정하는 344, 345 번째 base 를주의깊게판독해야하는등기존보다더많은판독시간이필요하였다. 고찰 (Discussion): 이번실험으로 HLA-SBT 검사는 POP6 polymer 를사용해서검사하는것이최적의결과를얻을수있음을알게되었고장비고장등검사실에응급상황이발생할경우 POP7 polymer 가장착된장비에서도전기영동조건을일부변경한다면판독에주의를요하기는하나동일한결과를얻을수있음도알게되었지만향후최적화를위한추가적인보완이필요하다. 그리고이번사례를통해 POP7 polymer 만을사용해서 HLA-SBT 를검사했던검사실에서는 Data 의상태에따라 polymer 의변경도고려해볼수있을것으로사료된다. 79

99 면역검사학 IS-11 HPV 고위험군검출을위한 Cobas HPV Test 와 Hybrid Capture II assay 비교 국립암센터부속병원진단검사의학과 이교희ㆍ박병민ㆍ윤옥진ㆍ이도훈ㆍ황상현 * 배경 : 현재많은검사실에서 HPV 감염여부를보기위한방법으로 Hybrid Capture II assay (HC-II) 를사용하고있다. 하지만, HC-II 는고위험군감염여부에는의미가있으나고위험군에서중요한 16, 18 형을알수없고, 위양성율이높은단점이있다. 이에본검사실에서는 Real-Time PCR 법을이용한 Cobas HPV Test 와 HC-II 결과를비교분석하여보았다. 방법 : 2013 년 7 월부터 9 월사이에의뢰된 HPV 검사중 HC-II 에서양성 (n=70) 과음성 (n=30) 결과를보인총 100 건을대상으로 Cobas HPV Test 를시행하였다. Cobas 용검체는 Schalasta 의비교평가 protocol 을참고하여 HC-II 에서 denaturation 하기전 400ul 를 DNAPAP Media 1000ul 에희석 ( 약 3.5 배 ) 한뒤, secondary tube 에분주하여검사하였다. 각 Test 에는 Cobas 4800 system (Roche, USA) 과 Hybrid Capture II high-risk HPV Test (Qiagen, USA) 를사용하였고, 비교결과불일치를보이는경우 Linear Array HPV genotyping PCR 검사를실시하였다. 결과 : HC-II 에서양성인검체 70 건중 54 건 (77%) 이양성, 16 건 (23%) 이음성을보였고, 음성인검체 30 건중에서는 30 건 (100%) 모두음성결과를보여전체적인일치율은 84% 로나타났다. HC-II 에서양성, Cobas HPV Test 에서음성결과를보인 16 건을 Linear Array HPV genotyping PCR 검사를한결과에서는음성 4 건, 저위험군 7 건, 저위험군과고위험군중복 4 건, 고위험군 1 건을확인하였고, 이결과를적용한전체적인일치율은 95% ( 양성 92%, 음성 100%) 로상승하였다. 결론 : 본비교결과는 Reference 가되었던 Schalasta 의실험결과 ( 전체일치율 92.9%) 와유사함을보였고, Cobas 용검체가 3 배이상희석되었음에도불구하고두검사간의일치율이높은수준임을알수있었다. Cobas HPV Test 는 HC-II 에비해검사과정이간편하고자궁경부암으로진행될수있는 genotype 16, 18 을검출하는 channel 이각각있어 HPV 고위험군검사에유용하게사용할수있을것으로사료된다. IS-12 매독진단을위한 RPR, Syphilis-reagin, TPLA, IMMULITE2000 Syphilis Screen, FTA-ABS Ig 검사결과비교분석 1 가톨릭대학교서울성모병원진단검사의학과 최애란 1 ㆍ유승효 1 ㆍ강민경 1 ㆍ차경호 1 ㆍ오은지 2 ㆍ김용구 2 배경 : 매독은 Treponema pallidum에의한전신성감염질환으로서피부, 심혈관, 신경등의장기를침범하고, 다양한임상양상을보인다. 매독검사중비매독균검사인 VDRL와 RPR 검사는바이러스감염증이나임파종, 결핵, 결체조직질환, 임신등에서위양성결과가나타날수있으므로, 선별검사로이용될경우양성결과는매독균특이검사로확인이필요하다. 매독균특이검사인 TPLA, FTA-ABS 검사는치료후에도양성이지속되지만, 예민도와특이도가높아매독의선별또는확진검사로이용되고있다. 매독검사법으로는응집반응 (RPR), 비탁법 (TPLA, syphilis reasin), 면역분석법 (EIA, CLIA), 면역형광법 (FTA-ABS) 등이이용되며, 최근에는자동화검사시약이도입되어병원검사실에서널리사용되고있다. 본연구에서는매독검사를위해의뢰된검체를대상으로 2가지의비매독균검사 (RPR, Syphilis-reagin) 와 3가지의매독균특이검사 (TPLA, FTA-ABS, CLIA) 를모두시행하고, 검사결과를비교분석하였다. 방법 : 2011년 1월부터 2013년 5월까지본원검사실에매독진단을위해의뢰된혈청 145 검체를대상으로, 5가지의매독검사를모두시행하였다. 145 검체중 111 검체는 FTA-ABS IgM 검사를시행하였다. 의뢰되지않은검사법은잔여혈청을이용하여추가검사하였다. 수기법비매독균응집검사 (RPR) 는 ASI사의 RPR CARD TEST 시약을사용하였고, 매독균면역형광검사 (FTA-ABS) 는 Zeus사의 FTA-ABS IFA 시약을사용하였다. HITACHI7600 화학자동화비매독균비탁법검사 (Syphilis-reagin) 와매독균특이라텍스응집검사 (TPLA) 를시행하였고, IMMUlITE2000 면역자동화장비에서 Syphilis Screen 시약을이용하여매독균특이화학발광면역분석 (CLIA) 검사를시행하였다. 모두제조사의지침에따라검사와결과를판독하였으며, FTA-ABS test는암시야검경에서약한양성이나오는경우재검을실시하였다. 결과 : 총 145개의검사중 5가지방법으로시행한결과가모두양성인 52검체, 모두음성인 59검체를포함하여 76.6% 에서 5가지검사방법의결과가모두일치하였다. 각검사의양성검출율은 RPR 44.1 %, Syphilis-reagin 51%, TPLA 51%, FTA-ABS 49%, CLIA 51% 로서 RPR을제외한나머지검사법의양성검출율은비슷했다. 비매독균검사인 RPR과 Syphilis-reagin 검사간의양성일치율은 40%, 음성일치율은 44.8% 로서두방법의전체일치율은 84.8 % 였다. 매독균특이검사에서모두음성을보인 66검체중 RPR 검사에서 2예, Syphilis-reagin 검사에서 7예위양성을보였다. 매독균특이검사인 TPLA, FTA-ABS, CLIA 검사결과모두양성인검체는 68 (46.9%), 모두음성인검체는 66 (45.5%) 로서 3가지매독특이검사간전체일치율은 92.4% 였다. 매독균특이검사방법간불일치를보인 11검체중 6검체는 TPLA 검사법의위양성 (4검체) 위음성 (2검체) 로판명되었고, 1검체는 FTA-ABS 방법의위음성이었다. 3가지매독균특이검사결과의일치율은 93.8% (TPLA vs. FTA-ABS), 94.5% (TPLA vs. CLIA), 96.6% (FTA-ABS vs. CLIA) 로서 FTA-ABS와 CLIA의일치율이가장높았다. FTA-ABS 검사에대한각검사의민감도는 84.5%(RPR), 87.3% (Syphilis-reagin), 95.8% (TPLA), 98.6% (CLIA) 였으며, 각검사의특이도는 94.6% (RPR), 87.8% (Syphilis-reagin), 91.9% (TPLA), 94.6% (CLIA) 였다. FTA-ABS 검사에대한민감도와특이도가모두높은검사는 CLIA (Immulite2000 Syphilis Screen) 였다. FTA-ABS IgM 양성인 7검체는 1검체에서 FTA-ABS IgG 음성을보였고, 그외는 5가지검사에서모두양성결과를보였다. 결론 : 임상검사실에서매독진단을위해이용되는검사인 RPR, Syphilis-reagin, TPLA, FTA-ABS, CLIA (Immulite2000 Syphilis Screen) 검사의결과는검사방법에따라차이가있었고, FTA-ABS 검사결과에대한예민도와특이도는 CLIA (Immulite2000 Syphilis Screen ) 검사결과가가장높았다. 이는검출항원과검사성능 ( 민감도, 특이도 ) 의차이에의한것으로생각되므로, 정확한매독진단을위해서는임상경과에근거하여, 다양한검사결과의종합적인해석과판단이필요할것이다. 80

100 면역검사학 IS-13 임신분기에따른갑상선기능평가의의의 삼광의료재단 이정희 1 ㆍ공주연 2 ㆍ서소연 2 배경 : 임신은갑상선기능에많은영향을미친다. 사람융모생식선자극호르몬 (human chorionic gonadotropin, hcg) 은임신초기에증가하면서갑상선을자극하는효과를가지게되어임신분기별로갑상선수치의변화를가져다준다고한다. 이에임신분기별 TSH (thyroid-stimulating hormone) 와 T3 (Triiodothyronine), FT4 (free thyroxine) 를측정하여평균값과중앙값을알아보고자한다. 재료및방법 : 2014 년 1 월부터 4 월까지본원에의뢰된 1652 명임신여성의 TSH, FT4, T3 의검사결과를분석해보았다. TSH, FT4, T3 검사의검사방법은 ECLIA 법이며 roche 사의 E170 장비, 전용시약을이용하여검사했다. 결과 : 임신분기에따른결과는임신 1 기일때 TSH 의 Median 은 1.05, T3 는 1.52, FT4 는 1.21 이였고, 임신 2 기일때 TSH 는 1.54, T3 는 1.51, FT4 는 1.08 이였다. 마지막으로임신 3 기일때 TSH 는 1.61, T3 는 1.50, FT4 는 1.06 를나타냈다. TSH 는임신분기에따라증가하고 T3, FT4 는다소낮아지거나유의한결과를보였다. 결론 : 임신부의갑상선기능을평가하는데가장예민한것은 TSH 이다. 결과를통해임신분기별평균값과중앙값이성인참고치와현저히차이가있다는것을알수있다. 임산부에서 TSH 의정상치는각각다르게적용해야한다. 최근미국갑상선학회에서발표한권고안에따르면임신분기에따라참고치를다르게권장하고있다. 이에연구를통하여임신분기별정상값과나아가더세분화하여각임신개월에따른혹은주수에따른정상값을정하고그에따라갑상선질환을조기에발견하고치료함으로산모와태아의예후향상에도움을주어야하겠다. IS-14 만성스트레스노출시부신스트레스호르몬변화에따른스트레스반응도예측 ( 재 ) 씨젠의료재단 임미정 1 ㆍ박영선 2 ㆍ강희용 3 ㆍ최종현 3, * 배경 (Background): cortisol 과 DHEA (dehydroepiandrosterone) 는 adreno-corticotropic hormone (ACTH) stimulation 에대한반응으로생성되는 adrenal stress hormones 로탄수화물, 단백질, 지질대사에영향을주며, 갑상선기능조절과 stress 에대한저항성을증가시키는역할을한다. 그러므로스트레스가많은생활방식은 cortisol 를증가시켜면역반응에영향을미치게되고이와더불어여성호르몬과남성호르몬의전구체인 DHEA 의수치를함께측정함으로써만성피로도를평가하는데유용한자료로사용할수있다. stress hormones 인 cortisol 및 DHEA 의양을측정하여생물학적사이클을모니터링함과동시에 adrenal adaption 에대한해당 phase 를결정함으로써현재스트레스반응정도를예측하고그에따른적절한영양보충등의처치를하기위한정보를제공하고자하였다. 방법 (Methods): 만성적으로 stress 에노출된사람들을대상으로 2013 년 2 월부터 2014 년 4 월까지본원에의뢰된 269 건을대상으로적정시간대별로채취한타액을이용하였으며시약은 SALIMETRICS 사 (UK) 의 SALIVARY cortisol EIA kit 와 SALIVARY DHEA EIA kit 를사용하여 cortisol 은일중변동으로인하여일내총 4 회로구분하여시간대별검체의 cortisol 수치를분석하였고, DHEA 는이중 2 회검체의측정값의평균값을적용하여분석하였다. 결과 (Results): 전체 246 건중 female 118 건, male 128 건으로 cortisol 과 DHEA 모두 normal 수치를보이는 normal stage 가 195 건으로대부분을차지하였고, cortisol 에서 normal, DHEA 에서 low 수치를보이는 A4 stage 가 39 건, cortisol 에서 low DHEA 에서 normal 수치를보이는 A5 stage 가 8 건, cortisol 에서 normal DHEA 에서 normal 수치를보이는 A2 stage 가 3 건, cortisol 과 DHEA 모두 low 를보이는 C1 stage 가 1 건의순으로나타났다. 고찰 (Discussion): 일반적으로 stress 에노출되면정상적반응으로서두호르몬은모두상승하게되고이후 HPA axis 의 negative feedback 작용으로두호르몬은감소하여정상치에도달하게되지만만성적으로 stress 에노출시두호르몬의수치에대한불균형이나타나이에따른해석이어려울수도있다. 따라서 adrenal stress hormone 검사는만성질환의원인인만성피로, 우울증, 체력저하가심한증상등의원인을파악하고그에따른진단및처지에많은정보를제공할수있을것으로사료된다. 81

101 면역검사학 IS-15 검진센터수진자로부터 ADMA assay 경험 ( 재 ) 씨젠의료재단특수면역학팀 조희수ㆍ임미정ㆍ강희용ㆍ최종현 * Background: Arginine 은세포내에서 nitric oxide (NO) cycle, urea cycle 등다양한 pathway 에관여하는중요한 amino acid 로 nitric oxide synthase (NOS) 에의해 NO 를형성시킨다. NO 는체내에서주로 endothelial relaxation, inflammatory signaling, neurotransmission 등의역할을한다. Asymmetric dimethylarginine (ADMA) 은 arginine 에두개의 methyl 기가붙은형태로 methionine-dependent protein arginine N-methyltransferase (PRMT) 에의해형성되고 NOS inhibitor 로작용하기때문에 NO 의형성을방해한다. 이러한이유로최근체내 ADMA 측정은심혈관염증에대한표지자로사용되고있으며정상적으로는신장을통해소변으로배출될뿐아니라 vitamin A, C 의보충이 normal ADMA removal 에관여하는것으로알려져있다. Methods: 2012 년 8 월부터 2014 년 4 월까지검진센터에내원한수진자중 ADMA assay 를의뢰한 37 명을대상으로검사를시행하였다. 검체는수진자의혈장을채취후 ADMA assay kit (Diagnostika, US) 를사용하여 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) 법으로 ADMA, arginine, arginine/adma ratio 세가지를측정하였고이에따라 high ADMA, low or normal arginine 패턴을 high ADMA 로, low ADMA, low arginine 을 arginine deficiency 로판단하였고그외의패턴은정상으로간주하였다. Results: 총 37 명중 high ADMA, low or normal arginine 패턴을나타내는 high ADMA 는 8 건 (21.6%) 이었고, low ADMA, low arginine 패턴을나타내는 arginine deficiency 는 4 건 (10.8%) 이었으며정상패턴은 67.6% 로대부분을차지하였다. (Fig 1) ADMA Synthesis, Clearance and Regulation of NOS Conclusion: 체내 ADMA 수치및 arginine 수치는참고치내로유지하는것이중요하다. 본연구에서참고치내로유지가필요한수진자는전체의 32.4% 를차지하였고이러한결과로 ADMA assay 는 ADMA 및 arginine 수치유지에중요한역할을정보를제공할것으로예상되며또한 ADMA 제거를위한 vitamin 선택에도움이될것으로기대된다. IS-16 광물분진노출이직근로자에서혈청중 Adiponectin 농도분석 근로복지공단직업성폐질환연구소 이유림ㆍ신재훈 * ㆍ황주환ㆍ백진이ㆍ이종성ㆍ최병순 배경 : 만성폐쇄성폐질환 (COPD) 의주요특징인진행성기류제한으로인해소기도는구조개형과좁아짐이나타나고, 폐실질 (parenchyma) 의파괴에따른폐기종이발병한다. 이러한형태의병리학적변화는폐에서만성적이면서비정상적인염증반응에기인하며 COPD 가진행될수록악화된다. 염증반응에있어서 adiponectin 의일차적인기능은 TNF-α, IL-6, ICAM-1, VCAM-1 및 NF-κB 등전염증성매개인자를억제하고, IL-10 및 IL-1 수용체 (receptor) 길항제 (antagonist) 등항염증성매개인자의기능을증진시키는등항염증성작용을하지만, 천식, COPD 및관절염등염증성질환에대한또다른연구에서는이와는반대로 adiponectin 이염증반응을증가시키고, 혈중농도가상승한다고보고되고있다. 이번연구에서는석탄등광물분진노출이직근로자들을대상으로혈청중 Adiponectin 농도와폐기능검사결과를비교 분석하여 COPD 의생물학적표지자로서의유용성을평가하고자하였다. 방법 : 연구대상은과거석탄등광물분진작업장에서근무경험이있는남자이직근로자 142 명을대상으로혈액채취, 개인별면담설문조사를실시하였다. 폐기능검사결과는근로복지공단진폐심사자료를이용하여 GOLD 에서제시한기류제한중증도분류에따라 COPD 유무와중증도를분류하였다. 혈청중 Adiponectin 농도분석은효소면역분석법 (ELISA) 을이용하여분석하였다. 결과 : 연구대상자들의 COPD 의유무에따른혈청중 Adiponectin 평균농도는유의한차이를보이지않았지만 COPD 의기류제한중증도분류에따른비교에서는 Adiponectin 의평균농도가유의하였으며 (p=0.043), GOLD 2 기또는 3 기에서 7.78 ug/ml 로서정상군의 4.99 ug/ml 에비해유의하게높았다 (p=0.047). 결론 : 본연구에서는혈청중 Adiponectin 농도가 COPD 에따른평균농도의유의한차이는없었지만, COPD 의기류제한중증도에따라정상군에비해 GOLD 2 기또는 3 기군에서증가하는것으로나타나 COPD 의중증도분류를위한생물학적표지자로서의유용한지표로평가되었다. 추후연구에서는혈액보다는폐의염증상태를정확히반영할수있는기관지세척액, 폐조직및호기응축액에서의농도평가가필요할것으로사료된다. 82

102 면역검사학 IS-17 계절에따른 25-hydroxyvitamin D (25OH Vit.D) 의농도변화 이원의료재단진단검사의학과 김민혜ㆍ김봉희ㆍ서한익 IS-18 광물분진노출이직근로자에서혈청중 CC-16 농도분석 1 근로복지공단직업성폐질환연구소 신재훈 1, * ㆍ황주환 1 ㆍ백진이 1 ㆍ이종성 1 ㆍ최병순 1 배경 : 최근 Vitamin D 의충분한농도유지는골다공증뿐만아니라암, 자가면역질환, 심혈관계질환등만성질환에대한예방효과가있다는것이증명되면서중요성이대두되고있다. 25OH Vitamin D 는전구물질 7-Dehydrocholesterol 의자외선조사에의해생성되어간에서 25 OH Vitamin D 로전환된다. 자외선조사에의해생성되는특성상 25OH Vitamin D 의농도는위도, 태양광노출시간, 계절, 피부색등에따라차이를보인다. 이에최근 10 개월간전국에서의뢰된검체를대상으로계절에따른 25 OH Vitamin D 농도변화를알아보고자한다. 재료 & 방법 : 2013 년 7 월부터 2014 년 4 월까지전국에서본원에의뢰된 25OH Vitamin D 검체 166,473 건을대상으로 ADVIA Centaur Vitamin D Total (VitD) 시약으로기기 ADVIA Centaur XP 를이용한 CIA 검사법으로측정된농도값을참고치 - 결핍 <10 ng="" ml="" 10-30="" ="">100 ng/ml 으로나누어여름철 (7,8 월 ) 과겨울철 (1,2 월 ) 비타민 D 농도분포를알아보았다. 결과 : 2013 년 7 월부터 2014 년 4 월까지전체농도값은총건수 166,473 건중 10 미만이 21,825 건으로 13.11%, 미만이 130,523 건으로 78.40%, 미만이 14,104 건으로 8.47% 100 이상이 0.01% 로나타났다. 여름철 (7,8 월 ) 에는총 31,740 건중 10 미만이 1,292 건으로 4.07%, 미만이 27,400 건으로 86.33%, 미만이 3,045 건으로 9.59%, 100 이상이 3 건으로 0.01% 로나타났고겨울철 (12,1 월 ) 에는총 32,663 건중 10 미만이 6,549 건으로 20.05%, 미만이 23,772 건으로 72.78%, 미만이 2,340 건으로 7.16%, 100 이상이 2 건으로 0.01% 로나타났다. 결론 : 전체농도값의분포도를보아대부분이 Vit.D 부족상태인걸알수있다. 그러나 10 미만의결핍상태의분포를보면여름철에는 4.07% 였지만겨울철에는 20.05% 로크게늘어났고, 미만의부족상태의분포는여름철에는 86.33% 겨울철에는 72.78% 로여름철이더높은걸알수있다. 현대인들은자외선차단제사용, 사무실생활등으로햇빛노출의기회가적기때문에 Vit.D 부족현상이더욱심한것으로보인다. 식품에들어있는 Vit.D 충분한섭취도중요하지만적당한햇빛노출로 Vit.D 농도를유지하는것이중요하리라생각된다. 서론및배경 : 많은진폐증및만성폐쇄성폐질환자들에서염증반응은폐조직에만국한되지않고, 만성기류제한이심장기능과폐에서가스교환기능에영향을미쳐복잡하고다양한전신염증반응이나타난다. 이러한전신염증반응들은폐에서비정상적인만성염증반응으로인해과도하게생성된염증성사이토카인들과 clara cell secretory protein (CC)-16, surfactant protein (SP)-D 등의급성염증단백들이전신으로유출되어증가함에따라발현된다고보고되고있다. 이번연구에서는석탄등광물분진노출이직근로자들을대상으로혈청중 CC-16 및 SP-D 농도와연구대상자의일반적특성, 흉부방사선촬영및폐기능검사결과등과비교 분석하여진폐증의생물학적표지자로서의유용성을평가하고자하였다. 연구대상및방법 : 연구대상자는과거석탄등광물분진작업장에서근무경험이있는남자이직근로자 142 명을대상으로하였으며, 혈액채취, 개인별면담설문조사를실시하였다. 흉부방사선촬영및폐기능검사결과는근로복지공단진폐심사자료를이용하였다. 혈청중 CC-16 과 SP-D 농도분석은효소면역분석법 (ELISA) 을이용하여분석하였다. 결과 : 혈청중 CC-16 의평균농도는 70 세이상군에서 ng/ml 로서 70 세미만군의 ng/ml 에비해유의하게높았고 (p <0.001), 흡연여부에따라서도현재흡연군의평균농도가 ng/ml 로서비흡연군의 ng/ml 에비해유의하게낮았다 (p=0.007). 진폐증에따른비교에서는진폐증군에서 CC-16 의평균농도가 ng/ml 로서정상군의 ng/ml 에비해유의하게낮았으며 (p=0.007), 정상및진폐소음영군에대한평균비교에서도 CC-16 의평균농도가진폐병형이증가할수록감소하였으며 (p=0.006), Ⅱ 및 Ⅲ 형에서 ng/ml 로서정상군의 ng/ml 에비해유의하게낮았다 (p=0.005). 고찰 : 본연구에서는혈청중 CC-16 의농도가연령이증가할수록증가하고, 흡연군및진폐증자에서감소하는것으로나타나진폐증진단을위한생물학적표지자로서의활용가능성과전신염증반응을평가할수있는유용한지표로평가되었다. 추후연구에서는혈액보다는폐의염증상태를정확히반영할수있는기관지세척액 (bronchoalveolar lavage fluid (BALF), 폐조직 (lung lysate) 및호기응축액 (exhaled breath condensate, EBC) 에서의농도평가가필요하였다. 83

103 면역검사학 IS-19 집먼진진드기항원에의한호산구의세포고사와사이토카인분비의변화 1 Department of Biomedical Laboratory Science, School of Medicine, Eulji University, Daejeon , Republic of Korea, 2 Department of Senior Healthcare, BK21 plus program, Graduated School, Eulji University, Daejeon , Republic of Korea In Sik Kim 1,2, *, Bo Kyeong Kang 1, A Min Kim 1, Sun Hwa Park 1, Eun Ji Lee 1, Jung Seok Kim 1, Eun Jeong Kim 2, Seung Yeop Baek 2 Asthma is an allergic inflammation and house dust mite (HDM) is a major allergen to induce asthma pathogenesis. Regulation of eosinophil apoptosis is an essential immune process and its dysregulation is implicated in asthma. In the present study, we examined the effects of HDM on spontaneous apoptosis of asthmatic eosinophils and on cytokine secretion in eosinophils of normal subjects including non-atopic and atopic normal. Extract of Dermatophagoides pteronissinus (DP) inhibited eosinophil apoptosis in a time-dependent manner. DP increased the secretion of G-CSF, GM-SCF, and IL-4, which is involved in suppression of eosinophil apoptosis, but IL-5 expression was not altered after DP stimulation. DP also elevated the release of IL-6, IL-8, tumor necrosis factor-α (TNF-α) and CCL2, which are anti-apoptotic or survival factors. The secretion of G-CSF, GM-CSF, IL-6, IL-8, and TNF-α due to DP is higher in atopic normal than that in non-atopic normal. In conclusion, DP increases the survival of eosinophils and its mechanism may be associated with cytokine release. These findings may enable elucidation of asthma pathogenesis induced by HDM. IS-20 최근 2 년간 Clostridium difficile 의분리배양과독소검출의일치율분석 ( 재 ) 씨젠의료재단핵의학팀 & 미생물학팀 김보경ㆍ이동영ㆍ이승훈ㆍ심효은 배경 (Background): Clostridium difficile (C.difficile) 은정상인의약 3%, 입원환자의약 10% 의장에상주하며, 항생제유발설사 (antibiotic-associated diarrhea) 의가장흔한원인균으로알려져있다. 감염을일으키는 C.difficile 은 endotoxin (toxin A) 과 cytotoxin (toxin B) 이라는 2 종류의독소를생성하며, 환자의설사변에서는 C.difficile 과함께 toxin 이검출된다. 보통분변중 C.difficile 을분리배양하거나 C.difficile 독소를검출하는데, 특히분변중독소검출은진단적의의가크며. C.difficile 의독소를검출하는방법으로항독소항체를이용하는 r-biopharm 사의 EIA 법이있다. 저자는최근 2 년간 ( 재 ) 씨젠의료재단에의뢰된 C.difficile 분리배양과 C.difficile 독소를검출하는 EIA 법간의일치율을분석하여 EIA 법의정확도를보고자하였다. 방법 (Methods): 2012 년 3 월부터 2014 년 3 월까지 ( 재 ) 씨젠의료재단에최근 2 년간 C.difficile 의분리배양과 C.difficile toxin A&B 가동시에의뢰된환자총 427 명의환자를대상으로하였고, EIA 법은 RIDASCREEN (r-biopharm, Germany) 의시약으로 GEMINI 장비 (Stratec biomedical AG, Germany) 를이용하여검사하였다. 결과 (Results): 분석한결과총 427 검체중 C.difficile toxin 음성, C.difficile 분리배양음성은 312 건 (73.1%), C.difficile toxin 음성, C.difficile 분리배양양성은 7 건 (1.6%), C.difficile toxin 양성, C.difficile 분리배양양성은 44 건 (10.3%), C.difficile toxin 양성, C.difficile 분리배양음성은 64 건 (15.0%) 로약 83.4% 의높은정확도를보였다. (Table 1. 참조 ) 고찰 (Discussion): C. difficile toxin A&B EIA 검사의특이도는 98% 로좋으나민감도가보고에따라 79-80% 로낮아서문제이며, C.difficile 분리배양은독소검사에비하여민감도가높지만국내의경우신선배지를이용한적합한배양이이루어지지않아서배양율이낮은편이다. EIA 법이민감도가뛰어나고간편하며많은검체를신속하게검사할수있는장점이있지만설사변의독소검출은가양성반응, 가음성반응을보이는경우가있기때문에가능하면 C.difficile 분리배양과 EIA 법을이용한독소검출을병행하는것이바람직할것으로사료된다. 84

104 면역검사학 IS-21 만성 B 형간염과당뇨병표지자와의관계 1 을지대학교의과대학임상병리학과, 2 을지대학교대학교 BK21 프로그램시니어헬스케어학과 김인식 1,2, * ㆍ이정화 1 ㆍ현성희 1 ㆍ박갑태 1 ㆍ안태호 1 Hepatitis B virus (HBV) infection has recently been shown to be associated with diabetes mellitus. The objective of this study was to investigate the relationship between chronic hepatitis B and diabetes mellitus indicators. We evaluated anthropometry, metabolic syndrome risk factors, fasting glucose, HbA1c and C-peptide of normal and HBV subjects. The partial correlation and average comparison analysis were used to assess the independent association between chronic hepatitis B and diabetes mellitus indicators. Average comparison of normal and HBV subjects showed significantly fasting glucose*, HbA1c*, C-peptide*, alanine transaminase (ALT)* and aspartate transaminase (AST)*. We may suggest that HBV infection is related to diabetes mellitus indicators such as fasting glucose, HbA1c and C-peptide. (*p<0.0001) 85

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106 2014 년제 52 회종합학술대회 포스터 - 조직ㆍ세포검사학

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108 조직ㆍ세포검사학 HP-01 Improvement of Quality Control in Immunohistochemistry Using Multi-tissue Microarray Department of pathology, Laboratory of molecular pathology and immunohistochemistry, Seoul National University Hospital, Seoul, Republic of Korea Jin Suk An, Su Jin Shin, Eun Chung Kang, Jae Yo Rho, Hyo Jin Kim, Kyung Chul Moon Background: Immunohistochemistry (IHC) is routinely used in daily surgical pathology. For reliability of the IHC results, it is necessary to perform valid quality controls. An internal positive control in IHC is essential to ensure that the Immunohistochemical staining is working properly. To improve the interpretation of IHC staining results, we established an optimal positive control tissue. In addition, we established a tissue microarray, which serves as a positive control microarray for better quality control of IHC. Materials and methods: We collected the formalin-fixed paraffin-embedded tissue blocks from various organs including tonsil, breast, brain, lung, stomach, small and large intestine, etc. We performed immunohistochemistry for 198 antibodies on both normal and cancer tissue and investigate the best optimal positive control tissue. A tissue microarray was constructed by harvesting 400 μm tissue cores from paraffin wax embedded samples available in a routine pathology department. The punches originating from non-tumorous and tumorous tissue were placed on host paraffin wax blocks. The microarray contained 24 different normal tissue samples and 48 tumor tissue samples, with a wide antigen profile and a dimension of 3 3 mm. Results: We performed Immunohistochemical staining of each antibody in various normal and tumor tissues repeatedly. As a result, we established optimal positive control tissue for 130 antibodies which were frequently used in routine practice. Using the positive control of each antibody, the interpretation of IHC result was improved. Moreover, the interpretation of IHC staining of more than 70 different antigens in routine IHC was available using the one multi-tissue microarray technique. Quality control of immunohistochemistry was more reliable and easier to perform regularly. HP-02 갑상샘세침흡인검사에서 SurePath TM 액상세포검사보존액이분자진단에미치는영향 1 건국대학교병원병리과, 2 서울대학교병원병리과 오서영 1, * ㆍ한정연 2 ㆍ소라 1 ㆍ임은영 1 ㆍ성미희 1 ㆍ신민식 1 배경 : 갑상선세침흡인검사에서결정되지않은세포 10%~30% 는진단을구체화하는분자적인보조진단과고식적도말검사의단점보완이필요하다. 최근갑상선세침흡인검사에서고식적도말검사의단점들을극복하기위해 SurePath TM 액상세포검사가활발히이용되고있다. 하지만 SurePath TM 액상세포검사에사용되는보존용액성분이분자진단에미치는영향에대해서는연구되어진바가없다. 본연구에서는 SurePath TM 액상세포검사에사용되는보존용액이 BRAF 돌연변이검사에미치는영향을염기서열분석법으로확인하였다. 재료및방법 : 갑상선세침흡인세포 16 례와 BRAF 변이형세포주와 BRAF 야생형세포주를계단희석하여고식적도말법, 보존액 (Red solution 또는 Clear solution) 사용액상세포검사법을시행후 50 개세포를채취하여후기검사 (delayed test) 와 PCR 증폭크기에따른 PCR 과 pyrosequencing 방법으로 BRAF 돌연변이검사를시행하였다. 결과 : 후기검사 (delayed test) 에서유전자증폭을확인한결과, 고식적도말검사에서는 1-2 년이지난후모든검체에서유전자증폭에성공하였고액상세포검사에서는검체채취당시에는유전자증폭에성공했으나, 1 년이상의시간이경과한후에는 PCR 을통한유전자증폭이이루어지지않고돌연변이검사또한불안정하였다. PCR 증폭크기에따른연구에서는액상보존액에서시발체의표적부위를 227bp 크기에서는 3 례에서증폭실패가있었고불안정하였으나 164bp 또는 72bp 크기로유전자증폭시안정적이게증폭이이루어졌다. 세포주연구에서돌연변이를비교한결과에서는 6 개월경과후부터염기서열분석이불안정하였다. 결론 : 액상세포검사의일종인 SurePath TM 액상세포검사는형태학적진단을위해서는고식적도말검사를대체하는방법으로충분히고려될만하다고생각된다. 그러나액상세포검사보존액에함유되어있는포르말린성분이 DNA 손상을일으켜 BRAF 유전자변이검사를시행함에있어장기간의 DNA 보존에문제가있음을확인하였다. Conclusion: The regular use of an institution adapted multi-tissue microarray would be useful for internal positive control and it improves the evaluation of staining results in IHC. 89

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110 2014 년제 52 회종합학술대회 포스터 - 핵의학검사학

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112 핵의학검사학 NM 년도중앙회순회보충보수교육설문서결과분석 1 삼성서울병원, 2 아주대학교병원, 3 용인세브란스병원, 4 고려대학교안산병원, 5 고려대학교안암병원, 6 한전병원, 7 경서메디칼, 8 서울대학교병원의생명연구원 박종오 1 ㆍ최병호 2 ㆍ안병락 3 ㆍ이현아 4 ㆍ신경희 5 김상원 6 ㆍ신동호 7 ㆍ양만길 8, * 배경 (Background): 임상병리사의면허는 2015 년에재신고를실시하기로예정되어있다. 이에따른보수교육평점관리의중요성이강조되고있다. 중앙회에서는 2013 년도에보수교육평점 8 점을이수하지못한회원들을위하여추가적으로평점이수기회를제공하고자중앙회순회보충보수교육을실시하였다. 보수교육종료후설문서를통해향후교육계획과중앙회운영에회원의의견을반영하고자하였다. 재료및방법 (Materials and Methods): 검사실관리및내 외부정도관리를주제로 2014 년 1 월서울을시작으로 2 월대구까지총 6 회실시하였고 690 명의회원이 4 평점을이수하였다. 설문서의교육만족도측정부문에서는교육내용 (6 개항목 ), 교육방법 (5 개항목 ), 교육결과적용 (3 개항목 ), 교육전반 (1 개항목 ) 에대하여나쁨 (0) 에서좋음 (5) 의 6 단계로평가하였다. 설문자의근무환경, 근무시애로사항, 종합학술대회중소병의원세션운영시간및주제, 기타의견등주관식으로자유롭게기술하도록하였다. 결과 (Results): 설문서는교육이수자 72.3% 가 (499 명 ) 제출하였고병상규모가 300 병상이하에서근무하는회원, 동료임상병리사가 10 명이하인규모에서근무하는회원, 근속년수가 10 년이하회원은 70.6%, 70.2%, 70.2% 로각각나타났다. 교육만족도는교육내용, 교육방법, 교육결과적용, 교육전반에대하여 89.1%, 84.6%, 83.8%, 88.4% 로각각나타났고교육내용중가장도움이되는부분은내 외부정도관리, 검사실및장비관리가 36.5%, 23.5% 를각각보였다. 근무시애로사항으로는부족한인력, 적은연봉, 과도한업무, 내 외부정도관리수행의어려움, 검진기관평가수검준비과정의어려움, 열악한근무환경등이다. 또한종합학술대회중소병의원섹션운영시간으로 63.8% 의회원들이토요일오후를선호하였다. 기타의견으로는보수교육관련사항 ( 시간확대, 현실적인교육내용, 일정관리, 생리기능파트확대, 사이버교육확대등 ), 중앙회차원의검진기관평가교육및표준지침서발간, 중소병의원의검사장비관련기기지원, 요양병원인증관련, 협회와소통, 중앙회차원의임상병리사처우와근무환경개선건의등으로나타났다. 결론 (Conclusions): 이번중앙회순회보충보수교육을기획하는단계에서여러가지근무여건으로학술대회와보수교육에참가하기어려운중소병의원회원이다수일것으로예상하였다. 이에주제를검사실관리및내 외부정도관리로하고특히검진기관평가를중심으로교육을진행하였다. 교육만족도에서본것처럼주제의선정과교육은적절한것으로나타났다. 또한종합학술대회중소병의원세션의운영시간을 5 월 31 일 ( 토 ) 오후로확정한것은회원들의의사를적용한이번설문평가의성과라고할수있다. 그러나설문평가에서나타났듯이보수교육에대한다양한의견을수용하여적극적인개선작업이필요하며, 또한여러가지어려움을겪고있는회원들을위한권익증진과자존감증진을위한장기적인프로그램이필요한것으로나타났다. NM-02 인슐린비의존성당뇨병환자에서자가항체양성률에대한상관성고찰 삼광의료재단 임지현ㆍ전수현ㆍ공주연 배경 (Background): 인슐린의존성당뇨병 (IDDM) 의유발원인으로 ICA (Islet Cell Autoantibodies), IAA (insulin auto antibody), 항 GAD 항체등과같은자가항체가알려져왔다. 그생성기전에대해서명확히밝혀진바는없지만췌장 β 세포의파괴로인한인슐린부족에의해발병하는 IDDM 환자의진단및발병을예측할수있는면역학적표지자로이용되어왔다. 하지만항 GAD 항체는인슐린분비능과관계없이비교적오랜기간지속적인양성률을보이는것으로보고되어인슐린비의존성당뇨병 (NIDDM) 에서자가면역기전항체의양성률을조사해보았다. 재료및방법 (Materials and Methods): 2011 년부터 2013 년까지본원에의뢰된당뇨병환자중 ICA 의결과가음성인환자 323 명을대상으로항 GAD 항체와 IAA 의양성률을조사하였다. ICA 는 IFA 법을이용한상품화된제품 SCIMEDX 로검사하였고, 항 GAD 항체와 IAA 는 RIA 법으로각각 IRMA Anti-GAD (BECKMAN COULTER), AIA-100 (Biosource) 제품으로검사하였다. 양성판정은 reference value 에따라서항 GAD 항체는 1.00 U/mL 이상, IAA 는 7.00 % 이상으로정의하였다. *IFA 법으로검사한 ICA 의특이도는 94%, 민감도는 85% 이다. 결과 (Results): 인슐린비의존성당뇨병으로분류된환자 323 명중항 GAD 항체의양성률은 22.9%(74 명 ), IAA 의양성률은 27.24%(88 명 ) 으로성별에따른유의한차이는보이지않고, 연령에따른차이는나타났다. 만 40 세미만의환자 277 명중 25.27%(70 명 ) 가, 40 세이상의환자 46 명중 8.69%(4 명 ) 가양성으로어린나이일수록항 GAD 항체양성률이높았다. IAA 역시 40 세미만에서 29.6%(82 명 ), 40 세이상에서 15.21%(7 명 ) 로어린나이에서의양성률이높게나왔다. 항 GAD 항체와 IAA 둘다양성인환자는전체 323 명중 18.8%(61 명 ) 으로조사되었다. 결론 (Conclusions): 인슐린의존성당뇨병의면역학적병인인항 GAD 항체와 IAA 의양성률이인슐린비의존성당뇨병에서도적지않게발생되고있다. 인슐린비의존성당뇨병의경우에도일부에서췌장베타세포에대한자가항체가존재하며유병기간이경과함에따라베타세포의기능저하로인해인슐린분비가감소하면서혈당조절이어려워지고이것이인슐린의존성당뇨병으로의진행될것을미리예측하기위해항 GAD 항체와 IAA 의검사가보편화되어야할것으로생각되며특히 40 세미만의환자일경우항 GAD 항체와 IAA 의검사를일반화하여지속적이고주의깊은추적관찰이필요할것으로생각된다. 93

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116 생리학검사학 PL-01 실습용 system 의제작및평가 PL-02 Carotid Sonography 1 고려대학교, 2 서울대학교병원, 3 양산부산대학교병원 김대진 1,3 ㆍ이창희 2 ㆍ이민우 1,2 ㆍ최정수 1 ㆍ김기원 2 ㆍ박올림 3 ㆍ김성욱 * Department of Clinical Pathology, Jinju Health Colleage, Jinju, Korea Soon-Hee Jung Backgrounds & Purposes: 뇌파검사에서가장중요한부분은국제적활용도가높은 system 에부합하게전극을정확히부착시키는것이다. 이를위하여여러학교에서직접적인실습을진행하고있지만, 각대학임상병리 ( 학 ) 과에구비되어있는뇌파장비는 1 대에불과한실정이다. 따라서주어진수업시간안에전학생들이 system 에맞게전극을부착해보는것은불가능하며, 몇명의학생들만실습에참여하거나전극들중일부만부착해볼수밖에없는한계가있다. Methods: 연습용 system 제작 system 이그려져있는잭박스를대신하여, 휴대가간편하고무게가가벼운간이용잭박스를제시한다. 2. 간이용잭박스에 system 을그려각위치에전극 cup 부분의반대편을몰딩한다. 전극을몰딩할때전극선의색깔을좌우대칭이되도록맞추어헷갈리지않게도와주도록한다. 3. 간이용잭박스의 nasion 부분에실습시고정이가능하도록연결고리를만든다. Background: Carotid sonography is the most important imaging procedure for diagnosing disease of the carotid and vertebral arteries and rapidly applicable, readily availble, And cost effective. carotid sonography has traditionally been used to evalate the presence of obstructive atheroscleosis in the setting of symptomatic erebrovascular disease or asymptomatic carotid bruit. Methods: Carotid sonography with TOSHIBA Model UISH19C recording and observation multiple studies have shown that the carotid artery intima-media hickness(imt), Doppler spectral wave form, color doppler analysis of a very high-grade stenosis, Complete stenosis carotid artery, Plague. Conclusion: This Article is to reiview general principles, technical performance and interpretation of carotid sonography. 실습학생평가 1. 뇌파검사의전극부착법을숙지하지않고있는학생을대상으로 system 을기초로하여전극을부착하는방법에대해서알려준다. 2. 본연구자들이제작한 연습용 system 을 2 인당 1 개씩사용하여검사자와환자의역할로나누어전극을붙여보도록한다. 3. 검사자와환자의역할을바꾸어전극을붙여보도록한다. Results: 고려대학교보건과학대학임상병리학과학생들로총 10 명이모집되었고, 남자 4 명, 여자 6 명으로구분되었다. 모집된학생들에게전극부착법을알려주는데 20 분정도의시간이소요되었으며, 10 명의학생들이전극을 system 의형식으로모두부착하는데걸리는시간은평균 41.8 분이소요되었다. 남자평균 41.3 분, 여자평균 42.2 분으로뚜렷한성별간의차이는확인할수없었다. Conclusions: 연습용 system 은실제뇌파를볼수없다는단점이있지만, 뇌파장비를다량구비하지않아도학생들이뇌파검사에서가장중요한전극부착을전반적으로실습할수있다는장점이있다. 위실험을토대로 system 을설명하며부착하는법을알려주고, 2 인 1 개조로뇌파검사부착실습을진행하는데도현재주어진실습시간 (2 시간 ) 은충분하리라생각되며, 뇌파검사를시행하는병원에서도신규직원을대상으로연습이가능할수있다. 97

117 생리학검사학 PL-03 심실상성빈맥에서발살바요법의유효성 단국대학교병원, 심전도실 강순옥 1, * ㆍ남궁은지 2 배경 : 미주신경자극법은방실결절의전도를억제하여심박수를조절할수있으며심실상성빈맥을진단하고치료할수있는비약물적요법으로서증상발생초기에시행될경우동율동으로의전환에효과적이다. 최근에는아데노신과칼슘통로길항제등심실상성부정맥을조절할수있는좋은약제들이있으나아직까지미주신경자극법은첫번째치료로추천되어지고있다. 대표적인미주신경자극법은발살바법 (Valsalva maneuver), 목동맥팽대마사지 (carotid sinus massage), 찬물얼굴침수 (cold water facialmersion), 안구압박 (eyeball compression) 등이있다. 이중에서발살바법은기도내압을약 40mmHg 정도로높인상태로흡기를한후복압을올려서발생하는복부와하지의울혈이있은후호흡근의이완과호기의시작으로심박출량이증가하면서압수용체를자극하여심박동수를떨어뜨리는작용을하는비교적쉽고안전한방법이다. 증례 : 평소에가슴두근거림을호소하는환자가심전도검사를받으러왔다. 검사를시작하자마자심실상성빈맥이일어났고, 환자는대화도가능하고안정되었다. 환자를응급실로보내는동안에빈맥이멈출수도있고또한심실상성빈맥은시작되는부분과종료되는부분이중요한데이환자같은경우응급실로가면서빈맥이멈출수도있는상황이다. 그러면환자의심실상성빈맥이어떤종류인지에대한확진이어려울수있으므로심전도실에서비교적안전하고쉬운발살바요법을시켜보았더니빈맥이종료되어심실상성빈맥의종류를진단해내는데결정적인역할을한증례가있어보고하고자한다. 결과 : 사지유도와흉부유도를모두연결한후심전도검사를시행하다가심실상성빈맥이시작됨을알아내고어느정도빈맥이유지되고역행성 P 파를보이는심실상성빈맥임을알았다. 빈맥이지속성으로나타나는데도환자는혈역학적으로안정적이었다. 평소느끼던증상이맞다는것을확인하고환자의아랫배를검사자의손으로꾹누르면서 자, 힘을주어보세요 라고말씀드리면서아랫배를꾹눌러드렸더니곧바로빈맥이멈추는것을확인할수있었다. 그후심전도장비의 review 화면에서빈맥이시작되는지점과빈맥이유지되는지점, 빈맥이종료되는지점을지정하여출력하였다. PL-04 경계성고혈압환자에서심박수회복및심박수변동부전 1 신성대학교임상병리과 신경아 * ㆍ김혜영ㆍ이혜자 1 배경 : 고혈압은교감신경의과활성과부교감신경의활성저하를포함한자율신경계기능장애를동반하며, 자율신경계기능장애를반영하는지표로는심박수회복 (heart rate recovery: HRR) 과심박수변동부전지수 (chronotropic incompetence index: CI) 를들수있다. 미국고혈압합동위원회제 7 차보고서 (Joint National Committee-VII: JNC-VII) 에서는정상혈압과고혈압사이에경계성고혈압을제시하고있다. 경계성고혈압이정상혈압에비해고혈압으로발전할위험이높음에도불구하고심박수회복및심박수변동부전과같은자율신경계기능을평가한연구는부족하다. 본연구는경계성고혈압환자에서운동에따른심박수회복및심박수변동부전에대해평가하고자하였다. 방법 : JNC-VII 차보고기준에따라수축기혈압 140 mmhg 또는이완기혈압 90 mmhg 인경우고혈압군, 수축기혈압 120~139 mmhg 또는이완기혈압 80~89 mmhg 인경우경계성고혈압군, 수축기혈압 < 120 mmhg 이고이완기혈압 < 80 mmhg 인경우정상혈압군으로분류하였다. 경계성고혈압군 147 명, 고혈압군 147 명, 정상혈압군 211 명의심박수회복과심박수변동부전을측정하였다. 결과 : 심박수회복은정상혈압군보다경계성고혈압군에서유의하게낮았으나 (37.27±11.93 vs 34.17±11.03, p<0.05), 고혈압군과경계성고혈압군간에는유의한차이가없었다. 심박수변동부전은정상혈압군과경계성고혈압군보다고혈압군이유의하게높은빈도를보였다 (p<0.05). 중다회귀분석결과연령 (p<0.001), 허리둘레 (p<0.001), HDL 콜레스테롤 (p<0.001), 안정시심박수 (p<0.001), 최대심박수 (p=0.049), 최대수축기혈압 (p=0.007) 은심박수회복에유의하게영향을미치는요인으로나타났다. 결론 : 경계성고혈압군은정상혈압군보다느린심박수회복을보였으며, 이는자율신경계기능저하가고혈압전단계인경계성고혈압단계에서도나타나는것을입증하는결과이다. 98

118 생리학검사학 PL 대이상남성들의폐기능검사결과에따른혈청 CEA 및 CRP 와의연관성 삼성서울병원 박정진ㆍ이명신ㆍ이진영 * 배경 (Background): 폐기능검사는호흡기질환을진단하는검사방법으로, 폐활량의감소를보이는제한성환기장애, 기도폐쇄에의해 1 초간내쉬는호흡속도가떨어져나타나는폐쇄성환기장애, 제한성과폐쇄성환기장애가동시에나타나는혼합성환기장애로구분된다. CEA (Carcinoembryonic antigen) 는다양한종류의종양이나태아조직에많이농축되어있는세포표면당단백질로서선암의표지자로쓰이며만성기관지염, 폐기종, 흡연자에게서증가할수있다. 또한 CRP (C - reactive protein) 는급성기반응물질로감염, 염증및혈청지질과함께심장동맥질환의위험도를예측하는데이용되며 COPD ( 만성폐쇄성질환 ) 환자에게서도증가하는물질이다. 본연구에서는 50 대이상남성들의폐기능에따른혈청 CEA 및 CRP 값의상관관계를알아보고자한다. 방법 (Method): 2012 년 4 월 1 일부터 2013 년 4 월 1 일까지삼성서울병원건강의학센터를방문한 50 대이상의남성 12,858 명을대상으로하였다. 이중 spirometer (VMAX 20) 를이용하여노력성폐활량 (FVC), 1 초간노력성폐활량 (FEV1), 노력성폐활량중 1 초간노력성폐활량의비 (FEV1/FVC) 를측정하였다. 흡연유무는자가기입한설문지를참고하였고, 혈청 CEA 와 CRP 는 ADVIA CENTAUR XP 와 Roche modular DDP 장비를이용하여측정하였다. 결과 (Result): 폐기능정상군에비해폐기능비정상군에서흡연자의비율이높았고, 혈청 CEA 및 CRP 수치가유의하게상승하였다. 폐기능정상군, 제한성환기장애군, 폐쇄성환기장애군등세군으로구분하였을때도정상군에서제한성환기장애군, 폐쇄성환기장애군으로갈수록흡연자의비율이높았고, 혈청 CEA 및 CRP 수치가유의하게상승하였다. 고찰 (Discussion): 이번연구를통해혈청 CEA 및 CRP 가폐기능이상여부를판단하는지표로서의가능성을확인할수있었다. 그러나건강한 50 대이상남성만을고려하고여성과 50 대미만남성은배제한점, 흡연기간과개개인의질병유무와폐쇄성환기장애의정도에따른변수를배제한점에서추가적인자료수집및조사가필요한것으로사료된다. 99

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120 2014 년제 52 회종합학술대회 포스터 - 임상검사정보학

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122 임상검사정보학 LM-01 응급검사처방율감소활동 강동경희대학교병원 LM-02 유전분자검사실문서간소화작업 인제대학교해운대백병원진단검사의학과 임종명ㆍ김선인ㆍ송주령ㆍ최은희ㆍ강소영ㆍ이우인 * 이동욱ㆍ정철원ㆍ정현도ㆍ이정녀ㆍ전경란ㆍ배혜정 * 배경 : 본원은진단검사의학과에의뢰되는응급검사처방이많아전체검사에서응급검사비율이 50% 이상을차지하며, 특히오전에병동응급검사로인하여응급실, 중환자실등응급환자의검사와오전당일진료전검사의결과보고가지연되고있는실정이다. 또한한환자의처방에서응급 (PST) 과일반검사 (SST8) 가있을경우각각의검사용기를써야하므로검사용기의추가비용이발생한다. 이에병동응급검사를줄여응급및진료전검사의검사소요시간 (TAT) 을단축하고검사용기비용도줄이고자한다. 방법 : 진단검사의학과에의뢰된병동검체를대상으로하여응급검사건수와의뢰시간, 일반화학 / 면역검사의건수를조사하였다 년 9 월부터 2013 년 3 월까지조사한자료 ( 개선전 ) 를토대로응급검사감소개선활동을시작하여 2013 년 7 월부터 2013 년 10 월까지자료 ( 개선후 ) 를조사하였다. 응급검사는 PST tube, 일반화학 / 면역검사는 SST 8 ml tube 를사용하였다. 결과 : 응급검사감소개선활동전인 2012 년 9 월의응급검사율은 64% 로개선활동후 2013 년 5 월 38.3%, 6 월 37%, 7 월 40.1%, 8 월 38.9%, 9 월 39.5% 로나타났다. 시간대별응급검사 / 일반검사비율이높은의뢰시간은오전 5 시에서 8 시사이로나타났으며 5 시 ~6 시 ( 개선전 90.5% 개선후 30.9%), 6 시 ~7 시 (65.7% 18.2%), 7 시 ~8 시 (50.2% 28.9%) 로나타났다. 본원응급검사 TAT 기준인 1 시간내에보고되는 TAT 충족율도개선전 98.8% 에서개선후 99.3% 까지높아졌다. 또한응급검사가감소함에따라응급화학검사용 PST 용기는개선전 10,573 개 (2012 년 9 월 ) 에서개선후 8,367 개 (2013 년 9 월 ) 로감소하였고, 일반검사용인 SST 의활용도도개선전 816 개에서 2013 년 4 월부터 2013 년 9 월까지평균 950 개이상으로증가하였다. 고찰 : 응급검사감소활동은응급검사율을감소시켰으며응급검사가집중되는오전 5 시 ~8 시사이에응급검사가정규검사로전환되어응급검사 TAT 충족율도개선되는것으로나타났다. 또한응급화학검사용기인 PST 사용의감소로용기비용절감과추가채혈없이 SST 용기한개로화학 / 면역검사를하여채혈량감소및용기사용절감효과를가져왔다. 이에지속적으로병동응급검사비율을모니터링하여응급및진료전검사의 TAT 단축으로환자만족도증가와검사용기절약으로비용절감효과도있을것으로생각된다. 배경 : 진단검사의학검사실은의료기관인증심사, 우수검사실신임인증및한국유전자검사평가원현장실사등다양한인증심사에서해당병원진료의질을나타내는척도로써정기적으로평가를받고있다. 이에검사실은행정관련및실무관련문서의작성및관리에많은시간과노력을투자하고있으며, 그업무량은점점증가하고있다. 본원의유전분자검사실또한 2010 년개원이래병상규모의확대에따라검사종목및건수가지속적으로증가하고, 이에따른다양한문서작업과관리에비정상적으로많은시간과노력이소모되고있어, 보다효율적인업무를위하여문서간소화작업을진행하였다. 재료및방법 : 2012 년 1 월부터 12 월까지유전분자검사실의문서현황을파악하기위하여문서의종류, 발생주기, 발생용량 ( 페이지수 ) 를조사하였다. 조사한문서들을 7 가지의카테고리 ( 외부정도관리서류, 내부정도관리서류, 정기서류 ( 월서류 ), 수시서류, 지침서, 비품및장비서류, 운영및행정서류 ) 로대분류하고다시인증요구도및실무필요성강도에따라재분류하였다. 또한 4 개타병원의문서시스템을조사하여본원의시스템과비교하였다. 결과 : 1 년간발생한서류는총 1259 장으로외부정도관리서류 (Proficiency test 포함 )20 장, 내부정도관리서류 (Worklist 포함 )972 장, 정기서류 ( 월서류 )192 장, 수시서류 75 장이었다. 모든서류가인증심사및실무에서요구되는문서였기때문에종목을없앨수는없었다. 따라서유사한서류를통합하여문서의부피를감소시키는방향으로작업을진행하였다. 또한문서는서술형을피하고간략한표위주로일목요연하게정리하도록 template 을개발하여적용하였다. 출력해서보관하던기록지가운데종이문서보관이필수가아닌항목은 LIS (Laboratory Infomation System) 프로그램에서직접전자문서로전환하여컴퓨터내에보관하도록하고, 전자문서화가가능한부분은전산개발을의뢰하였다. 1 년간발생하는총 1259 장의서류들을여러가지기준으로재정비한결과 578 장을줄여서 45.9% 의서류감소효과를이루었다. 결론 : 본원의유전분자검사실은우수검사실인증분야가운데 4 개부분 ( 분자유전, 세포유전, 조직적합, 유세포 ) 를수행하고있어문서통합작업의한계가있음에도불구하고가능한방법들을능동적으로찾아서적용한결과업무효율이증가되었으며, 45% 이상의문서용량감소효과및문서의체계화라는결과를얻을수있었다. 이러한유전분자검사실의작업성과는검사실전체의사업으로확대되었으며, 현재이를토대로진단검사의학과전체의문서관리시스템개발을진행중이다. 103

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124 2014 년제 52 회종합학술대회 포스터 - 수혈검사학

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126 수혈검사학 BB-01 혈액형자동화장비인 PK7200 과수기법으로검사한혈액형일치도평가 씨젠의료재단혈액학팀 최현정ㆍ김민경ㆍ고원석ㆍ이재일ㆍ안동희 BB-02 DIAGAST 사의 Qwalys 2 up 의 ABO, RH 검사의유용성평가 삼광의료재단 박홍철 1, * ㆍ허윤진 2 ㆍ최삼규 3 ㆍ지현영 4 배경 (Background): 수혈의학에서가장기본이며중요한검사인혈액형검사는슬라이드법과튜브법으로시행되며, 수기법으로검사를시행할경우시간과노력의소모가크며사무적오차등이발생할위험성을가지고있었다. 자동화장비를사용할경우대용량검사를빠른시간내에처리할수있고, 객관적판독이가능하며사무적오차등을예방할수있다. 본연구에서는수기법과자동화장비인 PK7200 (Olympus, Japan) 으로검사한 ABO, Rh 결과의일치도를조사하기위하여시행하였다. 방법 (Methods): 2013 년 3 월 ~12 월까지본원에접수된총 160 건의검체를분기별로 40 건씩수기법과 PK7200 으로 ABO, Rh 검사를시행하여그결과를비교분석하였다. 검사진행시충분한양의검체를이용하였고, 시약으로는자가제조한 cell 과항혈청인 Anti-A, Anti-B, Anti-D 를이용하여혈구형검사와혈청형검사를동시에진행하였다. PK7200 에는자가제조한 1.8% cell suspension 과항혈청을각각장비의채널에맞게 50 배와 200 배로희석한희석혈청을사용하였다. 결과 (Results): 수기법과 PK7200 의결과를비교한결과 100% 일치율을보였다. 수기법에서응집역가가낮은검체의경우 PK7200 으로검사시응집역가의지표를나타내는 SPC value 에서도비슷한경향을보였다. 결론 (Conclusions): 적은수의검사가진행되는소규모검사실에서는 2 분내판독이가능한수기법이적합하나, 수기법으로검사될시발생할수있는검사오류및사무적오차등의위험도를낮추기위해두명이이중검사를해야하는번거로움이있다. 이에비해자동화장비의검사는많은양의검사를단시간이내에쉽게진행가능하며, 인터페이스를통해결과를전송함으로사무적오차를방지하여보다정확한결과를보고할수있어대규모검사실에유리하다. 자동화장비사용시장비의 trouble shooting 을잘인지하고장비문제에따른대비를잘하여사용한다면수기법보다질높은결과를제공할수있을것이다. 배경 (Background): 면역혈액학은 1901 년 Karl Landsteiner 가적혈구에있는항원과혈장에있는항체에근거하여 ABO 계통이발견된이후부터본격적인발전이시작되어많은과학적사실들이밝혀지므로써발전하여현재수혈검사의기본으로서많은검사실에서널리검사되는검사중에하나이다. 기본적인검사이면서많은검사건수로인하여 Manual 검사로인한시간적제약과여러 Clerical error 에노출되어있다. 그래서본원에서는혈액은행자동화장비인 Qwalys 2 up 으로 ABO 와 Rh 의유용성을평가해보았다. 방법 (Methods): ABO 혈구형및 Rh D 혈액형검사는슬라이드법과 ABO 혈청형검사는 tube 법으로 manual 로확인된 379 건으로검사를 Qwalys 2 up 과의정확도비교를하였고 Q.C (Hema CQI) 로 5 일간의 Between-run precision 으로정밀도를측정하였고 Carry over 를실시하였다. 결과 (Results): ABO 및 Rh D 혈액형을검사한결과 ABO 혈액형은 A 형 131 검체, B 형 92 검체, O 형 85 검체, AB 형은 71 검체로 379 건모두수기법과일치하였고혈구형과혈청형의불일치는없었다. 반응강도는 O 형은 Anti-A, Anti-B 모두음성이였고 A 형은 Anti-A 에서 130 건에서 4+, 1 건에서 3+ B 형에서는 Anti-B 에 90 건이 4+, 2 건이 3+, AB 형에서는 Anti- A 70 건이 4+, Anti-B 에 1 건이 3+ 이며 Rh 에서는 376 건이양성이였으며 375 건이 4+, 1 건이 3+ 이며 3 건은음성이였다. 또한 Between-run precision 과 Carry over 모두양호한결과를보였다. 고찰 (Discussion): 혈액형자동화장비는여러가지면에서매력이있음은분명하다. 여러가지 Clerical error 및인력적인절감의장점이있고 EDTA 검체한개로 ABO Front type 검사및 Back type 과 Rh 의검사까지편리하게검사할수있으며 Raw data 를 Plate 사진으로남겨언제든지확인할수있는장점이있다. 하지만아직까지는작은 Throughtput (ABO, RH- 시간당 100 건내외 ) 과검체를원심해서장착을해야하는단점이있다. 이에 Manual 검사와자동화장비를효율성있게구사하여혈액형검사의 TAT 를단축하는데많은도움을줄수있을것이라생각된다. 107

127 수혈검사학 BB-03 DIAGAST 사의 Qwalys 2 up 의 Ab screen 검사의유용성평가 삼광의료재단 박홍철 1, * ㆍ박명대 2 ㆍ최삼규 3 ㆍ지현영 4 배경 (Background): 통상수혈전검사에는 ABO 검사, Rh 검사, 항체선별검사와교차시험이있다. ABO 수혈부적합일경우예외없이급성수혈부작용이일어나게되며그증상은경미한용혈부터파종성혈관내응고증까지다양하며환자의사망에이르기까지한다. Ab screen 의검사목적은 anti-a 또는 anti-b 와같은규칙항체이외의적혈구항체즉비예기항체를검출하기위해서이다. 대부분의비예기항체들은수혈이나임신등을통하여다른항원에노출되어생기는면역항체들이다. 비예기항체는자신이가지고있지않은항원에대한항체가생긴것으로자신에게는문제가되지않지만다른혈액을수혈받았을때즉, 생성된항체에대응하는항원을수혈받았을때가문제가되기때문에항체선별검사의중요성이크다하겠다. 방법 (Methods): 총 235 건중 Grifols 사의 serascan 으로 213 건의음성과 22 건의양성으로확인된검체와 Qwalys 2 up 과의비교를하였고 QC (sera CQI) 로 5 일간의 Between run precision 과 Carry over 를실시하였다. 결과 (Results): Grifols 사의 serascan 으로양성으로확인된 22 건중 Qwalys 2 up 에서 18 건에서 4+, 3 건에서 3+, 1 건에서 1+ 의양성을보였고 213 건의음성검체중에 2 건의각각 1+,2+ 의약한양성을보여동정을하였지만동정이되지않아위양성이있음을확인하였다. 고찰 (Discussion): 서양인들은 Ab screen 양성을보이는빈도가 1~3% 라고보고되고있지만한국인에서는이보다훨씬낮아서수혈예정자의 0.4~1.2% 정도이며임상적으로의의가있는 37 에서반응하는온난항체의경우 0.3% 라알려져있다. 한국인에서의비예기항체양성률과그빈도를아는것은수혈부작용의예방과신속하고안전한수혈을위해꼭필요하다. Qwalys 2 up 는기존적혈구응집반응을이용한자동화장비와는달리적혈구자성화 (EMT,Erythrocyte-magnetized technology) 기술을도입하여기존장비의원심분리과정이생략되어기존장비보다신속한검사를하여 TAT 단축을기대할수있을것으로생각된다. 108

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