<30302EBFB5B9AE5FB8F1C2F72E687770>

Similar documents
남민지.hwp

한수지 52(2), , 2019 Note Korean J Fish Aquat Sci 52(2), ,2019 국내유통김 (Porphyra sp.) 의미생물오염도평가 노보영 황선혜 1 조용선 1 * 한국식품연구원식품표준센터, 1 한국식품연구원식품분석

fm

03-서연옥.hwp

012임수진

서론 34 2

09-감마선(dh)

- 1 -

09È«¼®¿µ 5~152s

THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE Nov.; 26(11),

hwp



Development of culture technic for practical cultivation under structure in Gastrodia elate Blume

Analysis of objective and error source of ski technical championship Jin Su Seok 1, Seoung ki Kang 1 *, Jae Hyung Lee 1, & Won Il Son 2 1 yong in Univ

달생산이 초산모 분만시간에 미치는 영향 Ⅰ. 서 론 Ⅱ. 연구대상 및 방법 達 은 23) 의 丹 溪 에 최초로 기 재된 처방으로, 에 복용하면 한 다하여 난산의 예방과 및, 등에 널리 활용되어 왔다. 達 은 이 毒 하고 는 甘 苦 하여 氣, 氣 寬,, 結 의 효능이 있

22(3)-07.fm

DBPIA-NURIMEDIA

878 Yu Kim, Dongjae Kim 지막 용량수준까지도 멈춤 규칙이 만족되지 않아 시행이 종료되지 않는 경우에는 MTD의 추정이 불가 능하다는 단점이 있다. 최근 이 SM방법의 단점을 보완하기 위해 O Quigley 등 (1990)이 제안한 CRM(Continu

Lumbar spine

142 Journal of Agriculture & Life Science 46(4) Zn, Ni and As) and pesticide residues as chemical hazards were detected, but their levels were lower t

03-ÀÌÁ¦Çö

27 2, 1-16, * **,,,,. KS,,,., PC,.,,.,,. :,,, : 2009/08/12 : 2009/09/03 : 2009/09/30 * ** ( :

인문사회과학기술융합학회

( )Kju269.hwp

Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 라이프스타일은 개인 생활에 있어 심리적 문화적 사회적 모든 측면의 생활방식과 차이 전체를 말한다. 이러한 라이프스 타일은 사람의 내재된 가치관이나 욕구, 행동 변화를 파악하여 소비행동과 심리를 추측할 수 있고, 개인의


Journal of Educational Innovation Research 2018, Vol. 28, No. 4, pp DOI: * A Research Trend

untitled

.,. (2007) 36, 16 6 Enterobacter sakazakii 15 Bacillus cereus.,.,,,,.,.,, microwave,. UV-C DNA 253.7nm,. ( 1, 2). FDA,, - U V V - UV UV-C UV- UV- UV-C

DBPIA-NURIMEDIA

03이경미(237~248)ok

THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE. vol. 29, no. 10, Oct ,,. 0.5 %.., cm mm FR4 (ε r =4.4)

fm


01( )_정기열.hwp

03-2ƯÁý -14š

한수지 51(5), , 2018 Original Article Korean J Fish Aquat Sci 51(5), ,2018 단순가공어류수산물제조공정중의식품학적위해요소분석 정민철 강민균 장유미 이도하 박슬기 신일식 1 김영목 * 부경대학교식품

14.531~539(08-037).fm

00내지1번2번

DBPIA-NURIMEDIA

???? 1

43-2(6) fm


°Ç°�°úÁúº´6-2È£

DBPIA-NURIMEDIA

-, BSF BSF. - BSF BSF ( ),,. BSF -,,,. - BSF, BSF -, rrna, BSF.

02.fm

학술원논문집 ( 자연과학편 ) 제 50 집 2 호 (2011) 콩의식품적의의및생산수급과식용콩의자급향상 李弘䄷 * 李英豪 ** 李錫河 *** * Significance of Soybean as Food and Strategies for Self Suffici

유해중금속안정동위원소의 분석정밀 / 정확도향상연구 (I) 환경기반연구부환경측정분석센터,,,,,,,, 2012

02Á¶ÇýÁø

자기공명영상장치(MRI) 자장세기에 따른 MRI 품질관리 영상검사의 개별항목점수 실태조사 A B Fig. 1. High-contrast spatial resolution in phantom test. A. Slice 1 with three sets of hole arr


534 강경태ㆍ김민주ㆍ박선영ㆍ최종덕ㆍ허민수ㆍ김진수., Choi et al. (1998), Jeong et al. (2004), Ha et al. (2005), Lee (2006), Baker (2016), Vugia et al. (2013) 2003.,,,,. HACC

미생물분류는형태적특징, 생리 생화학적성질과상태, 화학분류학적성질과상태등을이용하여구분하는것이일반적이지만, 이와같은방법을이용하면많은시간을필요로한다. 또한분류가힘든경우나, 정확하지못한결과를얻는경우도있다. 최근미생물분류에도분자생물학적인방법을이용하여, 미생물이가지고있는 DNA를

DBPIA-NURIMEDIA

Journal of Educational Innovation Research 2018, Vol. 28, No. 1, pp DOI: * A Analysis of

목차 ⅰ ⅲ ⅳ Abstract v Ⅰ Ⅱ Ⅲ i

untitled


부속

DBPIA-NURIMEDIA

Journal of Educational Innovation Research 2019, Vol. 29, No. 1, pp DOI: : * Research Subject

PDFCoTemp.HWP

Abstract Background : Most hospitalized children will experience physical pain as well as psychological distress. Painful procedure can increase anxie

Can032.hwp

A 617

γ

보도자료 년 5 월 16 일 ( 목 ) 조간부터보도하여주시기바랍니다. 문의 : 에너지환경표준과최철우과장, 류지영연구사 ( ) 화장품에도국제표준이...? - 화장품도이젠표준선점으로세계시장선도를 - [ 붙임 1

00º½Çмú-¾Õ

DBPIA-NURIMEDIA

Journal of Educational Innovation Research 2017, Vol. 27, No. 3, pp DOI: (NCS) Method of Con

°Ç°�°úÁúº´5-44È£ÃÖÁ¾

식물병연구 Note Open Access Res. Plant Dis. 23(3) : (2017) Analysis of the Cause of the Twig Blight on Mu

학습영역의 Taxonomy에 기초한 CD-ROM Title의 효과분석

Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 및 자아존중감과 스트레스와도 밀접한 관계가 있고, 만족 정도 에 따라 전반적인 생활에도 영향을 미치므로 신체는 갈수록 개 인적, 사회적 차원에서 중요해지고 있다(안희진, 2010). 따라서 외모만족도는 개인의 신체는 타


<31372DB9DABAB4C8A32E687770>

µµÅ¥¸àÆ®1

¨ë Áö¸®ÇÐȸÁö-¼Û°æ¾ðOK

생식용굴가공공장의위생안전성 2,,., Jeong et al. (2004), Yu et al. (206) Bang et al. (2008) norovirus norovirus, Manatawee et al. (20) ice-bath, Xiao et al. (20) mod

04_이근원_21~27.hwp

04김호걸(39~50)ok

목 차 회사현황 1. 회사개요 2. 회사연혁 3. 회사업무영역/업무현황 4. 등록면허보유현황 5. 상훈현황 6. 기술자보유현황 7. 시스템보유현황 주요기술자별 약력 1. 대표이사 2. 임원짂 조직 및 용도별 수행실적 1. 조직 2. 용도별 수행실적

DBPIA-NURIMEDIA

Journal of Educational Innovation Research 2017, Vol. 27, No. 2, pp DOI: : Researc


歯1.PDF

< C6AFC1FD28C3E0B1B8292E687770>

농림축산식품부장관귀하 본보고서를 미생물을활용한친환경작물보호제및비료의제형화와현장적용매뉴 얼개발 ( 개발기간 : ~ ) 과제의최종보고서로제출합니다 주관연구기관명 : 고려바이오주식회사 ( 대표자 ) 김영권 (

THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE Feb.; 29(2), IS

Journal of Educational Innovation Research 2018, Vol. 28, No. 4, pp DOI: 3 * The Effect of H

DBPIA-NURIMEDIA

Æ÷Àå½Ã¼³94š

Rheu-suppl hwp

내지-수정.indd

<313120B9DABFB5B1B82E687770>

Journal of Educational Innovation Research 2018, Vol. 28, No. 3, pp DOI: * Strenghening the Cap

<C7D1B1B9B1B3C0B0B0B3B9DFBFF85FC7D1B1B9B1B3C0B05F3430B1C733C8A35FC5EBC7D5BABB28C3D6C1BE292DC7A5C1F6C6F7C7D42E687770>

PJTROHMPCJPS.hwp

Transcription:

ISSN 0367-6315 (Print) / ISSN 2288-2162 (Online) Korean J. Soil Sci. Fert. 47(6), 437-442 (2014) http://dx.doi.org/10.7745/kjssf.2014.47.6.437 Article Microbial Contamination Levels of Strawberries at Domestic Farms of South Korea Won-Il Kim*, A-Ra Jo, Se-Ri Kim, Song Hee Ryu, Ki-Woong Nam 1, Yohan Yoon 2, Deok-Hoon Yoon 1, So-Yong Oh 1, Myeong Hyeon Nam 3, Jae-Gee Ryu, and Hwang-Yong Kim Microbial Safety Team, Department of Crop Life Safety, National Academy of Agricultural Science, RDA, Wanju-gun, 565-851, Republic of Korea 1 Research Institute of International Agriculture, Technology and Information, Hankyong National University, Ansung, 456-749, Republic of Korea 2 Department of Food & Nutrition, College of Human Ecology, Sookmyung Women s University, Seoul, 140-742, Republic of Korea 3 Nonsan Strawberry Experiment Station, Chungnam ARES, Nonsan, 320-862, Republic of Korea (Received: November 21 2014, Revised: December 24 2014, Accepted: December 25 2014) Foodborne illness due to the consumption of contaminated raw strawberries is a continuing food safety concern. This study investigated and evaluated contamination levels of bacteria on strawberries at farms stage to evaluate potential hazards associated with fresh strawberries. A total of 315 samples, 105 samples from 5 sampling sites (A to E) of 21 farms and 210 samples from 1 sampling site of 6 farms, was collected every month for four months and analyzed to enumerate aerobic bacterial counts, Coliforms/E. coli, Bacillus cereus and Staphylococcus aureus. In addition, the prevalence study of five pathogens (S. aureus, E. coli, E. coli O157:H7, Salmonella spp. and Listeria monocytogenes) was performed on each sample. Aerobic bacterial counts ranged from 0.48 to 6.36 Log CFU/g, with the highest bacterial cell counts recorded for D and E sites. Coliforms were detected in 71 samples (22.5%) with a minimum of 0.48 cfu/g and a maximum of more than 4 Log CFU/g. B. cereus was detected in 98 samples (31.1%) among total samples analyzed. S. aureus was detected in 2 samples with a minimum of 0.48 Log CFU/g and a maximum of 1.38 Log CFU/g. E. coli, E. coli O157:H7, Salmonella spp. and L. monocytogenes were not isolated from any of the samples. The microbial contamination levels of strawberries determined in this study may be used as the fundamental data for microbiological risk assessment. Key words: Strawberry, Microbiological quality, Food-borne pathogen Contamination levels of indicator bacteria in strawberries with sampling months. Sampling time sampling farms sample units : Total aerobic bacteria Mean ± S.D. b : Coliforms Mean ± S.D. : B. cereus <2 a 2-3 3-4 4-5 >5 <1 1-2 2-3 >3 <1 1-2 2-3 >3 Mean ± S.D. Feb. 6 60 3.3 20.0 48.3 25.0 3.3 1.90-5.07 3.57 ± 0.759A 95.0 3.3 1.6 0.0 ND c -2.46 0.17 ± 0.475A 95.0 3.3 1.6 0.0 ND-2.46 0.17 ± 0.607B Mar. 6 60 15.0 21.6 38.3 18.3 6.6 1.48-5.18 3.26 ± 0.994A 71.65.0 16.66.6 ND-4.78 0.74±1.284B 71.6 5.0 16.6 6.6 ND-4.78 0.74±0.468B Apr. 6 30 10.0 26.6 43.3 13.3 6.6 1.95-5.37 3.31 ± 0.885A 83.36.6 10.00.0 ND-2.49 0.34±0.787A 83.3 6.6 10.0 0.0 ND-2.49 0.34±0.448B May 6 60 23.3 25.0 16.6 21.6 13.3 1.48-5.82 3.30 ± 1.359A 85.05.0 5.0 5.0 ND-3.28 0.36±0.850A 85.0 5.0 5.0 5.0 ND-3.28 0.36±0.337A a The unit of number is Log CFU/g. b Standard deviation. c Not detected. 1) *Corresponding author : Phone: +82632383396, Fax: +82632383840, E-mail: kimwi@korea.kr Acknowledgement: This study was carried out with the support of the Cooperative Research Program for Agricultural Science and Technology Development (Project No. PJ009404), Rural Development Administration, Republic of Korea.

438 Microbial Contamination Levels of Strawberries at Domestic Farms of South Korea Introduction 국민들의생활수준향상및건강에대한관심이고조되면서별도의조리과정없이섭취하는신선농산물의소비량이계속해서증가하고있다 (Burnett and Beuchat, 2001; Tian et al., 2012). 그중에서딸기는주요신선섭취농산물로써국내생산액이 2012 년기준 11,888 억원으로우리나라전체채소생산액 (101,537 억원 ) 의약 11.7% 를차지하는중요한농가의소득원이다 ( 농촌진흥청, 2013). 2000년대국내딸기생산량은평균약 20 만톤으로 80 년대에비해서는약 2.9 배, 90 년대에비해서는약 1.4 배증가하였다 ( 통계청, 2010). 딸기는국내에서대부분생식용으로이용되고있으며, 일부는잼, 아이스크림, 주스등의가공식품원료로도이용되고있다 (Lee et al., 2012). 한편, 국외에서는 Salmonella spp., Listeria monocytogenes, Escherichia coli O157 과같은식중독을일으키는병원성미생물이오염된과채류섭취에따른식중독사고가가정, 외식업체등에서발생하여많은인명및재산피해를가져와 (CDC, 2007), 소비자들이신선농산물의안전성에대한우려를표하고있기도하다. 국내에서는딸기가원인이된식중독사고발생사례가보고된바없으나, 미국의경우 E. coli O157:H7 등과같은인체병원성미생물이오염된신선딸기섭취에의한식중독사고가보고된바있다 (The Marler Clark Network, 2013). 각종인체병원성미생물들은생산과정에서오염된토양, 관개용수, 야생동물, 곤충등에의해매개될수있고, 수확, 수확후처리, 가공, 포장등의처리과정중에서도비위생적인작업자, 작업환경등에의해교차오염이일어날수있다 (Koseki and Isobe, 2005). 일반적으로농장에서바로섭취하는과일, 채소가안전한것으로여겨지지만 (Ackers et al., 1998; Beuchat, 1996; De Roever, 1998; Mead et al., 1999), 생산단계에있는그것에도인체병원성미생물이존재할가능성이있다. Salmonella spp., E. coli O157:H7 등의인체병원성미생물들이농산물에오염된이후에는농산물품질유지등의이유로완전히제거하기가어려우므로 (Beuchat and Scouten, 2002), 병원성미생물이오염되기전에사전예방적으로관리해야만한다. 국내의딸기의생물학적위해요소에관한연구현황으로는수확단계딸기의생물학적위해요소분석 (Shim et al., 2013), 재배단계딸기의각종위해요소분석 (Lee et al., 2012), 유통단계딸기의생물학적위해요소분석 (Yu et al., 2009), 재배방식에따른딸기의생물학적위해요소분석 (Yu et al., 2013) 등이수행되었으나, 딸기시료수집지및분석시기가한지역또는특정한시기로국한되어있어서국내의전반적인생물학적위해요소오염특성을나타내기에는한계가있다. 따라서본연구는국내주요생산단계딸기생산지를대상으로딸기의위생지표세균및유해미생물오염도를조사하였고딸기의주 요수확시기별로오염도의변화양상조사를통해국내생산단계딸기의전반적인위생지표세균및유해미생물오염특성을규명하고자한다. Materials and Methods 주산지의딸기시료수집경남소재 2지역 (9호농가 ), 경북소재 1지역 (4호농가 ), 전북소재 1지역 (4호농가 ), 전남소재 1지역 (4호농가 ) 으로총 5개지역 (21 호농가 ) 에서딸기 (Fragaria ananassa Duch.) 시료를수집하였다. 딸기는완숙되어출하가가능한과실을대상으로무작위로채취하였고, 3개의과실을 1점의시료로정하여 1호농가당 5점, 총 105 점의시료를수집하였다. 시료를수집할때에는교차오염을방지하고미생물밀도변화를최소화하기위하여멸균된장갑을착용하여폴리에틸렌재질의봉투에시료를채취한후, 즉시냉장박스에보관 이송하여빠른시간내에분석하였다. 시기별딸기시료수집충남소재 1개지역내 6호의농가에서 2, 3, 4, 5월에각월별 1회씩딸기시료를수집하였다. 위와같은방법으로시료를채취하여총 210 점을수집 분석하였다. 위생지표세균오염도조사위생지표세균인일반호기성세균과대장균군 / 대장균의오염도를정량적으로분석하였다. 딸기시료를 stomacher bag 에넣고 1:3 (w/v) 의비율로 0.1% peptone water 를더해 Pulsifier PUL 100E (Microgen, UK) 로 15초동안균질화하였다. 일반호기성세균수측정을위해 Pulsifier 로균질화한희석용액 1 ml 을취해건조배지 (Aerobic Count Plant, 3M, Minn, USA) 에분주한후 30 C 배양기에서 48 시간동안배양하여나타난 colony 의수를계수하였다. 대장균군 / 대장균 (Coliforms/E. coli) 의밀도측정을위해희석용액 1 ml 을취해건조배지 (Coliforms/E. coli Count Plate, 3M, USA) 에분주한후 37 C 배양기에서 24 시간동안배양하여대장균군및대장균으로의심되는 colony 의수를계수하였다. 유해미생물오염도조사수집한딸기시료에대해 Bacillus cereus 와 Staphylococcus aureus 의오염도를정량적으로분석하였다. B. cereus 오염도조사를위해균질화한희석용액을 0.25 ml 씩 4개의 Mannitol Egg Yolk Polymyxin Agar (MYP, OXOID, UK) 에각각분주하여도말하였다. 30 C 배양기에서 24 시간동안배양한후 B. cereus 로의심되는 colony 의수를세었다. 보다정확한세균동정을위해시료당 5개의의심되는 colony 를 MYP 에계대배양한후 Nutrient Agar (NA, BD, USA) 배지를이용해순수분리하였다. 분리된균

Won-Il Kim, A-Ra Jo, Se-Ri Kim, Song Hee Ryu, Ki-Woong Nam, Yohan Yoon, Deok-Hoon Yoon, So-Yong Oh, Myeong Hyeon Nam, Jae-Gee Ryu, and Hwang-Yong Kim 439 주는 B. cereus Detection Kit (JS-BC050, Jinsung Uni-tech, Korea) 을이용한 groel, ces, cry1 유전자유무를판별해서 B. cereus 진위를검정하였다. 검정방법은각균주의 chromosomal DNA 를 boiling 방법으로추출하여 template DNA 를얻었다. Micro-tube 에 master mixture ( 멸균수 14.875, buffer 2.5, dntp 0.5, cry1 forward primer 1, cry1 reverse primer 1, groel forward primer 1, groel reverse primer 1, ces forward primer 1, ces reverse primer 1, Taq polymerase 0.125 ul) 24 ul 와 template DNA 1 ul 를분주한후중합효소연쇄반응장비 (C1000 TM Thermal Cycler, Biorad, USA) 를이용하여특이염기서열을증폭하였다 (Kim et al., 2012). 반응조건은 1. 95 C 에서 2분, 2. 95 C 에서 20 초, 3. 61 C 에서 20 초, 4. 72 C 에서 20 초, 5. 72 C 에서 2분으로하였고 2 번에서 4번과정은 30 cycle 로설정하였다. 반응후증폭산물의전기영동을통하여 target gene 인 cry1 (138bp), groel (250bp), ces (405bp) 의 band 유무를판별하였다. 판별된 B. cereus 수를최초에측정하였던추정 colony 의수에대입해최종세균수를산정하였다. S. aureus 오염도조사를위해균질화한희석용액을 0.25 ml 씩 4개의 Baird-Parker (BP, OXOID, UK) 에각각분주하여도말한후 37 C 의배양기에서 48 시간동안배양하였다. S. aureus 로의심되는 colony 를 Nutrient Agar 에순수분리한후 VITEK 2 (BIOMERIEUX, France) 를이용해분석 동정하여 S. aureus 진위를판별하였다. S. aureus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Escherichia coli O157:H7, Salmonella spp. 의오염도를정성적으로분석하였다. 각세균의선택적증균배지인 Baird- Parker (BP, OXOID, UK), Fraser Listeria (OXOID, UK), E. coli (EC, OXOID, UK), modified E. coli (mec, OXOID, UK), Rappaport-Vassiliadis R-10 (RV, OXOID, UK) 를사용하였다. 딸기시료를 stomacher bag 에넣고 1:3 (w/v) 비율로각각의증균용액을더해 37 C 배양기에서 24 시간동안증균배양하였다. 증균용액을각세균의선택배지인 BP, Oxford agar, Eosin-Methylene Blue agar (EMB, OXOID, UK), Sorbitol Macconkey agar (SMA, OXOID, UK), Xylose lysine deoxycholate agar (XLD, OXOID, UK) 에멸균된백금이를사용하여분리 배양하였으며각세균의생장에적절한온도의배양기에서배양하였다. 배양한후, 각선택배지별로병원균으로의심되는균주를육안으로선별하고의심되는 colony를 NA 배지에순수분리하였다. 분리한균주는정확한동정을위해 VITEK 2 (BIOMERIEUX, France) 를이용해최종동정하였다. 통계적분석딸기의지역별, 시기별위생지표세균및유해미생물오염도조사로부터얻은결과값에대해일원배치분산분석 (one-way ANOVA) 법으로시기별오염도차이를비교하였고, 분산분석결과가유의한수준일경우 (p < 0.05), LSD 법으로다중검정을실시하였다. 위의분석은 SAS 9.2 소프트웨어 (SAS Institute Inc., USA) 를이용하여실시하였다. Results and Discussion 딸기의위생지표세균및유해미생물오염도, 위생지표세균 ( 일반호기성세균, Coliforms) 일반호기성세균의밀도를식품의생산, 가공및유통상의위생조건및잠재적식품부패등을판정할수있는지표로유용하게사용될수있으며, 대장균군 (Coliforms) 은식품위생상분변오염의지표로사용되고있다 ( 강성태등, 2004). 본연구에서는국내딸기의전반적인위생지표세균오염도를파악하기위해총 5지역 (21 개농가 ) 에서수집한생산단계딸기의일반호기성세균, Coliforms 의오염도를분석하였다 (Table 1). 대상지역및농가의딸기의일반호기성세균오염도는평균 3.37 Log CFU/g, 0.48 6.36 Log CFU/g 범위, 대장균군의오염도는평균 0.41 Log CFU/g, N.D. (Not detected) 2.48 Log CFU/g 범위인것으로나타났다. 시료수집지역별딸기 Table 1. Contamination levels of indicator bacteria in strawberries with sampling sites. Sampling sites farms/site sample units samples in the : Total aerobic bacteria Mean ± S.D. b indicated interval : Coliforms Mean ± S.D. <2 a 2-3 3-4 4-5 5-6 >6 <1 1-2 >2 A 5 25 60 20 4 16 0 0 0.48-4.82 1.99 ± 1.372A 88 12 0 ND c -1.95 0.31 ± 0.613A B 4 20 55 20 10 15 0 0 0.48-4.72 2.09 ±1.344A 100 0 0 ND-0.48 0.02±0.107A C 4 20 55 30 15 0 0 0 1.48-3.65 2.09 ±0.704A 100 0 0 ND-0.48 0.05±0.147A D 4 20 5 5 35 50 5 0 1.95-5.00 3.91 ±0.720B 85 10 5 ND-2.48 0.33±0.709A E 4 20 5 35 10 15 30 5 1.48-6.36 3.91 ±1.363B 85 5 10 ND-2.38 0.31±0.717A a The unit of number is Log CFU/g. b Standard deviation. c Not detected.

440 Microbial Contamination Levels of Strawberries at Domestic Farms of South Korea 의위생지표세균오염도는통계적으로같거나유의한차이가있는것으로나타났는데 (Table 1), 이러한차이는시료수집시기의차이에따른미생물증식요건에영향을미치는환경조건 ( 기온, 습도등 ) 차이, 토양재배, 수경재배등해당지역및농가별딸기재배유형의차이에따른토양으로부터미생물오염정도차이, 작물의생육단계차이에따른토양으로부터과실의이격거리, 생육환경 ( 기온, 습도등 ), 재배환경의생물학적위해요소오염도 ( 토양, 관개용수등 ), 작업자위생상태등여러가지요인이영향을미치는것으로판단된다. 유등 (Yu et al., 2009) 은백화점과대형할인매장에서수집한딸기시료에서일반호기성세균의밀도가각평균 5.25, 4.97 Log CFU/g, 대장균군의밀도가각평균 3.98, 3.91 Log CFU/g 로나타난것으로보고하였다. 본연구의생산단계딸기의위생지표세균의평균밀도와비교해봤을때비교적높은밀도로나타난것인데이것은분석시료의 background microflora 의밀도차이, 수확및수확후처리과정중교차오염발생혹은유통과정중미생물밀도변화등에의한것으로추측된다. 심등 (Shim et al., 2013) 은딸기의재배환경 ( 토양, 물 ), 작업자 ( 손, 장갑, 작업복 ), 수확도구 ( 수확상자 ) 의일반호기성세균및대장균군의밀도를조사하였고, 이러한환경에존재하는미생물들이딸기의수확및수확후처리과정중과실에직접닿아교차오염이될가능성이있음을시사하였다. 재배환경에존재하는미생물이농작물로이행될가능성은존재하며, 특히오염된관개수를통한유해미생물의작물로의이동성은여러연구자에의해밝혀진바있다 (Tyrrel et al., 2006; Mitra et al., 2009; Steele and Odumeru, 2004). 그리고농산물은재배단계중노출된환경뿐아니라수확단계에서도작업자, 수확바구니등과접촉되어유해미생물의교차오염이일어날가능성이있고, 수확된이후에도세척, 절단, 저장등의여러단계를거치는동안유해미생물의교차오염과증식이발생할수있는것으로알려져있다 (Wachtel and Charkowski, 2002; Kroupitski et al., 2009; Ukuku and Sapers, 2007; Gagliardi et al., 2003). 유등 (Yu et al., 2013) 이보고한생산단계딸기의부위별위생지표세균오염도분석에서는딸기과실에서일반호기성세균이 2.3-6.8 Log CFU/g, 대장균군이 2.1-4.5 Log CFU/g 범위로나타나본연구의일반호기성세균의오염도범위와유사한것으로나타났다. 다만, 대장균군의평균및오염도범위는다소차이가나는데이는딸기의재배방식 ( 수경, 토경 ) 및재배형태 ( 일반, 무농약, 유기농 ) 의차이에따른것으로판단된다. 본연구에서도수경재배법에비해토경재배법으로생산된딸기에서일반호기성세균, 대장균군, B. cereus 의오염도가상대적으로높게나타났는데 (data not shown), 이는생산단계주요오염원인토양과밀접한관계가있는것으로판단된다. 위생지표세균을비롯하여병원성미생물등의교차오염을예방 하기위해서는딸기재배, 수확, 수확후처리등의과정에있어서농자재, 작업장, 작업복및작업도구, 작업자의위생관리가중요하다. 유해미생물딸기는과육이연약하여수확후처리과정에서도세척과같은별도의과정이없고, 일반적으로생것으로섭취하는경우가많다. 국외의경우에는 S. enterica, E. coli O157:H7 와같은병원성미생물에오염된딸기섭취에의한식중독사고가보고된바있다 (Calder et al., 2003; CDC, 2013). 또한이집트에서생산단계딸기과실에서 Salmonella spp. 는 28%, E. coli 는 72% 의비교적높은빈도로검출되었다고보고된바있다 (Uyttendaele et al., 2014). 지금까지국내에서는딸기섭취에따른식중독사고발생이보고된적이없고, 생산단계및판매단계딸기에서위와같은유해미생물이검출된사례는없다. 본연구에서는국내생산단계딸기의유해미생물오염도조사를수행하였고, B. cereus 를제외한 S. aureus, E. coli, E. coli O157:H7, Salmonella spp., L. monocytogenes은검출되지않았다 (data not shown). B. cereus 는총 105 점시료중 73 점 (69.5%) 의시료에서검출되었고, 정량적으로 1점을제외하고는모두 2 Log CFU/g 이하의비교적낮은오염도를나타냈다 (data not shown). B. cereus 의경우에는구토형또는설사형독소를생성하여인체에해를일으키는데, 일반적으로매개식품내에 5-8 Log CFU/g 으로존재할때생장활성이있는것으로알려져있다 ( 식품의약품안전처, 2010). 본연구결과에서는병원성미생물의오염도에있어우려할만한결과는나타나지않았다. 하지만병원성미생물은그오염경로가다양하고, 딸기는가열등 kill-step 이없이신선섭취하는경우가대부분이므로생산단계에서부터철저한위생관리를통해안전성을확보해야만한다. 시기별딸기의위생지표세균및유해미생물오염도시기별딸기의위생지표세균및유해미생물오염도변화를조사하기위하여시료수집시기를딸기과실의주요수확기인 2월에서 5월까지로하였고, 딸기재배력및위생관리의편차를줄이기위해 4개농가의동일한필지에서시료를수집 분석하였다. 위생지표세균중일반호기성세균의경우에는 2, 3, 4, 5월에각각 1.90-5.07, 1.48-5.18, 1.95-5.37, 1.48-5.82 Log CFU/g 범위로나타났고, 평균값은각각 3.57, 3.26, 3.31, 3.30 Log CFU/g 로써시기에따른일반호기성세균의오염도는유의한변화는없는것으로나타났다 (Table 2). 대장균군의경우에도 3월의오염도를제외하고나머지시기는유의한차이는없었으며 3월은다른시기에비해비교적오염도가높은것으로나타났다. B. cereus 의경우 5월이다른시기에비해오염도가낮게나타났는데, 이는작물이성장함에따라토양과딸기과실의간

Won-Il Kim, A-Ra Jo, Se-Ri Kim, Song Hee Ryu, Ki-Woong Nam, Yohan Yoon, Deok-Hoon Yoon, So-Yong Oh, Myeong Hyeon Nam, Jae-Gee Ryu, and Hwang-Yong Kim 441 Table 2. Contamination levels of indicator bacteria in strawberries with sampling months. Sampling time sampling farms sample units : Total aerobic bacteria Mean ± S.D. b : Coliforms Mean ± S.D. : B. cereus <2 a 2-3 3-4 4-5 >5 <1 1-2 2-3 >3 <1 1-2 2-3 >3 Mean ±S.D. Feb. 6 60 3.3 20.0 48.3 25.0 3.3 1.90-5.07 3.57 ± 0.759A 95.0 3.3 1.6 0.0 ND c -2.46 0.17 ± 0.475A 95.0 3.3 1.6 0.0 ND-2.46 0.17 ± 0.607B Mar. 6 60 15.0 21.6 38.3 18.3 6.6 1.48-5.18 3.26±0.994A 71.6 5.0 16.6 6.6 ND-4.78 0.74±1.284B 71.6 5.0 16.6 6.6 ND-4.78 0.74±0.468B Apr. 6 30 10.0 26.6 43.3 13.3 6.6 1.95-5.37 3.31±0.885A 83.3 6.6 10.0 0.0 ND-2.49 0.34±0.787A 83.3 6.6 10.0 0.0 ND-2.49 0.34±0.448B May 6 60 23.3 25.0 16.6 21.6 13.3 1.48-5.82 3.30±1.359A 85.0 5.0 5.0 5.0 ND-3.28 0.36±0.850A 85.0 5.0 5.0 5.0 ND-3.28 0.36±0.337A a The unit of number is Log CFU/g. b Standard deviation. c Not detected. 격이늘어나 B. cereus 의주요오염원인토양으로부터의교차오염가능성이줄어들기때문인것으로판단된다. 간접적인사례로본연구의시료수집대상농가중토경재배 (19 호농가 ) 시료와수경재배 (8호농가 ) 시료의일반호기성세균, 대장균군, B. cereus 의오염도를비교해보았을때, 토양재배는각평균 3.17, 0.29, 0.20 Log CFU/g, 수경재배는각평균 2.47, 0.25, 0.15 Log CFU/g 로써수경재배에비해토경재배농가의시료에서오염도가상대적으로높게나타난것을확인할수있었다 (data not shown). 토양은관개, 범람, 부적절한퇴비시용등여러경로를통해병원성미생물에오염될수있다고알려져있으며 (Santamaria and Toranzos, 2003), 유사한작물의사례로써 Barak 과 Liang (Barak and Liang, 2008) 은 Salmonella enterica 와같은인체병원균을토양에인위적으로접종하였을때 6주이상생존이가능하여이것이토마토식물체의과실, 잎, 줄기등의지상부로오염되어장기간생존이가능하다는것을보고하였다. 본연구에서는시기별로수집한딸기에서 S. aureus, E. coli, E. coli O157:H7, Salmonella spp., L. monocytogenes 모두불검출로나타났다. 생산단계딸기의안전성향상을위해서는관개, 범람, 야생동물출입등을통한외부로부터의토양오염을방지하고충분히부숙된퇴비를사용하며비닐필름등을이용한멀칭과같은토양피복을통해흙이과실로묻지않도록관리하는것이필요하다. Conclusion 본연구는생산단계딸기를국내 5개지역소재의 21 호농가에서총 105 점의시료를수집하여위생지표세균및유해미생물의오염도를분석하였다. 또한주산지 1개지역의 6호농가를대상으로시기별 (2, 3, 4, 5월 ) 로총 210 점의시료에대해위생지표세균및유해미생물의오염도를조사하였다. 생산단계딸기의위생지표세균중일반호기성세균은 0.48 6.36 Log CFU/g 범위로나타났고, Coliforms 는 ND 4.78 Log CFU/g 범위로써 105 점시료중 53 점 (50.4%) 에서검출되었다. B. cereus 의경우에는 105 점의시료중 73 점 (69.5%) 에서검출되었고 1점을제외하고는모두 2 Log CFU/g 이하인것으로나타났다. 시기별조사에서는 3월의대장균군의밀도가다른시기에비해유의하게높았고, 5월의 B. cereus 가다른시기에비해유의하게낮은것으로나타났다. 본연구에서수행한 S. aureus, E. coli, E. coli O157:H7, Salmonella spp., L. monocytogenes 오염도조사에서는이들모두불검출로나타났다. 본연구는국내생산단계딸기의위생지표세균및유해미생물오염도를조사를통해지역별또는농가별로위생지표세균오염도가유의한차이가있는것을확인하였고, 시기별유해미생물조사결과를통하여토양으로부터의이격거리가 B. cereus 의오염도에상관성이있음을간접적으로시사하였다. 본연구결과는생산단계농산물안전성향상및국내딸기의미생물위해성평가 (Microbiological Risk Assessment) 의기초자료로활용될수있을것으로기대한다. References Tian, J. Q., Bae, Y. M., Choi, N. Y., Kang, D. H., Heu, S. and Lee, S. Y. 2012. Survival and growth of foodborne pathogens in minimally processed vegetables at 4 and 15 C. J. Food Sci., 77(1):M48-M50. RDA(Rural Development Administration). 2013. Strawberry, pp. 20. Statistics Korea. Korean Statistical Information Service (http:// kosis.kr). Lee, C. Y., Lee, W. G., Song, J. E., Kim, K. Y., Shim, W. B., Yoon, Y. H., Kim, Y. S. and Chung, D. H. 2012. Hazard analysis for the cultivation stage of strawberry farms for securing preliminary data to establish the Good Agricultural Practices. J. Agric. Life Sci., 46(3):97-108. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). 2007. Morbidity and mortality weekly report (MMWR). 56(35):909-911.

442 Microbial Contamination Levels of Strawberries at Domestic Farms of South Korea The Marler Clark Network: Foodborne illness outbreak database. http://outbreakdatabase. com. Koseki, S. and Isobe, S. 2005. Prediction of pathogen growth on iceberg lettuce under real temperature history during distribution from farm to table. Int. J. Fd. Microbiol., 104:239-248. Ackers, M. L., Mahon, B. E., Leahy, E., Goode, B. Damrow, T., Hayes, P. S., Bibb, W. F., Rice, D. H., Barrett, T. J., Hutwagner, L., Griffin, P. M. and Slutsker, L. 1998. An outbreak of Escherichia coli O157:H7 infections associated with leaf lettuce consumption. J. Infect. Dis., 177:1588-1593. Beuchat, L. R. 1996. Listeria monocytogenes: incidence on vegetables. Food Control, 7, 223-228. De Roever, C. 1998. Microbiological safety evaluations and recommendations on fresh produce. Food Control, 9:321-347. Mead, P. S., Slutsker, L. Dietz, V., McCaig, L. F., Bresee, J. S., Shapiro, C., Griffin, P. M. and Tauxe, R. V. 1999. Food-related illness and death in the United States. Emerg. Infect. Dis., 5:607-625. Beuchat, L. R. and Scouten, A. J. 2002. Combined effects of water activity, temperature and chemical treatments on the survival of Salmonella and Escherichia coli O157:H7 on alfalfa seeds. J. Appl. Microbiol, 92:382-395. Shim, W. B., Kim, K. Y., Yoon, Y. H., Kim, J. E., Shim, S. I., Kim, Y. S. and Chung, D. H. 2013. Microbiological hazard analysis for strawberry farms at the harvest stage to establish Good Agricultural Practices (GAP) model based on principle of HACCP. Korean J. Food Sci. Technol., 45(1):104-110. Lee, C. Y., Lee, W. G., Song, J. E., Kim, K. Y., Shim, W. B., Yoon, Y. H., Kim, Y. S. and Chung, D. H. 2012. Hazard analysis for the cultivation stage of strawberry farms for securing preliminary data to establish the Good Agricultural Practices. J. Agriculture & Life Science, 46(3):97-108. Yu, Y. M., Youn, Y. N., Hua, Q. J., Cha, G. H. and Lee, Y. H. 2009. Biological hazard analysis of paprikas, strawberries and tomatoes in the markets. J. Fd Hyg. Safety., 24:174-181. Yu, Y. M., Kim, J. W., Choi, I. W., Youn, Y. N. and Lee, Y. H. 2013. Bacterial contamination levels in strawberry parts according to their cultivation methods. Korean J Food Preserv, 20(3): 323-329. Kim, W. I., Jung, H. M., Kim, S. R., Park, K. H., Kim, B. S., Yun, J. C. and Ryu, K. Y. 2012. Investigation of microbial contamination levels of leafy greens and its distributing conditions at different time - Focused on perilla leaf and lettuce -. J. Fd Hyg. Safety, 27(3):277-284. Kang, S.T. and Yun, J.Y. 2004. Food Microbiology. pp. 414-430. Tyrrel, S.F., Knox, J.W. and Weatherhead, E.K. 2006. Microbiological water quality requirements for salad irrigation in the United Kingdom. J. Food Prot., 69(8):2029-2035. Mitra, R., Cuesta-Alonso, E., Wayadande, A., Talley, J., Gilliland, S. and Fletcher, J. 2009. Effect of route of introduction and host cultivar on the colonization, internalization, and movement of the human pathogen Escherichia coli O157:H7 in spinach. J. Food Prot., 72:1521-1530. Steele, M. and Odumeru, J. 2004. Irrigation water as source of foodborne paghogens on fruit and vegetables. J Food Prot., 67(12):2839-2849. Wachtel, M. R. and Charkowski, A. O. 2002. Cross-contamination of lettuce with Escherichia coli O157:H7. J Food Prot., 65:465-470. Kroupitski, Y., Pinto, R., Brandl, M. T., Belausov, E. and Sela, S. 2009. Interactions of Salmonella enterica with lettuce leaves. J. Appl Microbiol, 106:1876-1885. Ukuku, D. O. and Sapers, G. M. 2007. Effect of time before storage and storage temperature on survival of Salmonella inoculated on fresh-cut melons. Food Microbiol, 24:288-295. Gagliardi, J. V., Millner, P. D., Lester, G. and Ingram, D. 2003. On-farm and postharvest processing sources of bacterial contamination to melon rinds. J. Food Prot., 66:82-87. Calder, L., Simmons, G., Thornley, C., Taylor, P., Pritchard, K., Greening, G. and Bishop, J. 2003. An Outbreak of Hepatitis A Associated with Consumption of Raw Blueberries. Epidemiol. Infect. 131(1):745-751. CDC (Centers for Disease Control and Prevention). Foodborne outbreak online database (FOOD). Data retrieved from http:// wwwn.cdc.gov/foodborneoutbreaks/default.aspx. Uyttendaele, M., Moneim, A. A., Ceuppens, S. and Tahan, F. E. 2014. Microbiological safety of strawberries and lettuce for domestic consumption in Egypt. J. Food Process Technol., 5:308. doi: 10.4172/2157-7110.1000308. Ministry of Food and Drug Safety. 2010. Bacillus cereus (Risk Profile). pp. 3-4. Santamaría, J. and Toranzos, G. A. 2003. Enteric pathogens and soil: a short review. Int. Microbiol., 6:5-9. Barak, J. D. and Liang, A. S. 2008. Role of soil, crop debris, and a plant pathogen in Salmonella enteric contamination of tomato plants. PLoS One, 3(2):e1667.