Nucl Med Mol Imaging Vol. 43, No. 4, Aug 2009 양전자방출핵종 68 Ga 을이용한 NOTA 와 DOTA 의표지및시험관내특성연구 서울대학교의과대학핵의학교실정재민 김영주 이윤상 이동수 정준기 이명철 Radiolabeling of NOTA and DOTA with Positron Emitting 68 Ga and Investigation of In Vitro Properties Jae Min Jeong, Ph.D., Young Ju Kim, B.S., Yun-Sang Lee, Ph.D., Dong Soo Lee, M.D., June-Key Chung, M.D., and Myung Chul Lee, M.D. Department of Nuclear Medicine, Seoul National University College of Medicine, Seoul, Korea. Purpose: We established radiolabeling conditions of NOTA and DOTA with a generator-produced PET radionuclide 68 Ga and studied in vitro characteristics such as stability, serum protein binding, octanol/water distribution, and interference with other metal ions. Materials and Methods: Various concentrations of NOTA 3HCl and DOTA 4HCl were labeled with 1 ml 68 GaCl 3 (0.18~5.75 mci in 0.1 M HCl) in various ph. NOTA 3HCl (0.373 mm) was labeled with 68 GaCl 3 (0.183~0.232 mci/0.1 M HCl 1.0 ml) in the presense of CuCl 2, FeCl 2, InCl 3, FeCl 3, GaCl 3, MgCl 2 or CaCl 2 (0~6.07 mm) at room temperature. The labeling efficiencies of 68 Ga-NOTA and 68 Ga-DOTA were checked by ITLC-SG using acetone or saline as mobile phase. Stabilities, protein bindings, and octanol distribution coefficients of the labeled compounds also were investigated. Results: 68 Ga-NOTA and 68 Ga-DOTA were labeled optimally at ph 6.5 and ph 3.5, respectively, and the chelates were stable for 4 hr either in the reaction mixture at room temperature or in the human serum at 37 C. NOTA was labeled at room temperature while DOTA required heating for labeling. 68 Ga-NOTA labeling efficiency was reduced by CuCl 2, FeCl 2, InCl 2, FeCl 3 or GaCl 3, however, was not influenced by MgCl 2 or CaCl 2. The protein binding was low (2.04~3.32%). Log P value of 68 Ga-NOTA was -3.07 indicating high hydrophilicity. Conclusion: We found that NOTA is a better bifunctional chelating agent than DOTA for 68 Ga labeling. Although, 68 Ga-NOTA labeling is interfered by various metal ions, it shows high stability and low serum protein binding. (Nucl Med Mol Imaging 2009;43(4):330-336) Key Words: Ga-68, gallium, protein binding, bifunctional chelating agent, generator, NOTA, DOTA 서 최근임상 PET 이널리보급됨에따라제너레이터에서생산되는양전자방출핵종인 68 Ga의중요성이증가되었다. 1) 68 Ga은 68 Ge/ 68 Ga 제너레이터에서생산되는데반감기가 67.6 분이고화학적으로는주기율표상에서 3A족에속하 Received: 2009. 2. 17. Revised: 2009. 3. 10. Accepted: 2009. 3. 13. Address for reprints: Jae Min Jeong, Ph.D., Department of Nuclear Medicine, Seoul National University Hospital, 101 Daehangno Jongno-gu Seoul 110-744, Korea Tel: 82-2-2072-3805, Fax: 82-2-745-7690 E-mail: jmjng@snu.ac.kr 이연구과제는한국과학재단국가지정연구실사업 (R0A-2008-000- 20116-0) 및원자력연구개발사업 (2007-01238) 의지원을받았음. 론 는금속이다. 2-4) 작은펩타이드들에표지하면친수성을띠므로신장을통하여체외로빠르게배설되어 68 Ga이표지된방사성의약품은보다선명한표적의영상을획득하는데유용하다. 5,6) 최근에많이사용되는 68 Ge/ 68 Ga 제너레이터는 TiO 2 고정상을기본으로 0.1 N HCl 을흘려주어 68 Ga 3+ 의형태로용출된다. 용출되는 68 Ge breakthrough 는 0.005% 미만으로알려져있다. 최근에는펩타이드표지를위하여제너레이터에서용출된 68 Ga을편리하게농축하는방법이보고된바있다. 7) 68 Ga은사이클로트론에서생산되는 18 F, 11 C 등과같은다른양전자방출핵종과달리제너레이터에서생산되므로낮은비용으로생산할수있다는장점이있으며, 또한 68 Ge/ 68 Ga 제너레이터의모핵종인 68 Ge의긴반감기 (270.8 330
정재민외. NOTA 와 DOTA 의 68 Ga 표지 지않는시약은 Sigma-Aldrich 사 (U.S.A.) 의제품을사서사용하였다. Figure 1. These are chemical structures of bifunctional chelating agents- NOTA and DOTA. NOTA and DOTA contains 3 and 4 carboxyl residues, respectively. 일 ) 로인하여최소 1년또는그이상사용할수있다. 현재는 68 Ga을표지한방사성의약품으로는주로펩타이드를표지한화합물이많다. 예를들면 α vβ 3 integrin에특이적으로결합하는 RGD 펩타이드를 68 Ga로표지한예, 5) 신경내분비종에특이적으로결합하는소마토스타틴계열펩타이드에 68 Ga를표지한예, 6) 심근영상용지용성양이온에표지한예, 8) 혈액풀영상용인혈청알부민에표지한예등 9) 이있다. 펩타이드나단백질에 68 Ga을표지하려면양기능성킬레이트제를사용하여야한다. 갈륨과결합하는킬레이트제로는 1,4,7-triazacyclononane-1,4,7-triacetic acid (NOTA) 와 1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid (DOTA) 가가장유명하다 (Fig. 1). 이중특히 NOTA 는 9 각형구조를하고있고갈륨과킬레이트를만들경우 6 N 의질산에서도안정하다는보고가있다. 10) 이연구에서는우선 NOTA 와 DOTA 에 68 Ga을표지하는조건을찾아보았다. 그리고이렇게표지된화합물의안정성과단백질결합에대하여연구하고마지막으로표지시에영향을미치는각종금속이온의영향에대하여알아보았다. 대상및방법 1. 장비및시약 68 Ge/ 68 Ga 제너레이터는 Cyclotron Co. (Obninsk, Russia) 의 1.85 GBq 제품을사용하였다. 교반기와배양기 (VS-8480) 는비전과학 (Seoul, Korea) 제품을사용하였다. Radio-TLC 스캐너는 P10 가스를연결한 Bioscan 사의 AR-2000 (U.S.A.) 을사용하였다. 방사능측정은 Packard Canberra Co. 의 Cobra II 감마카운터 (U.S.A.) 를사용하였다. 용량측정기는 Capintec (U.S.A.) 제품을사용하였다. PD-10 칼럼은 GE Healthcare (U.S.A.) 제품을그리고 ITLC-SG 는 PALL Co. 의제품을사용하였다. 기타명기하 2. NOTA 와 DOTA 의 68 Ga 표지및안정성시험 NOTA 와 DOTA 를표지하기위한 68 Ga은 0.1 M HCl 을 1 ml씩 68 Ge/ 68 Ga- 제너레이터에흘려주고나오는분획을용량측정기로측정하여사용하였다. NOTA 3HCl (0.5 μg ~0.2 mg) 또는 DOTA 4HCl (0.5 μg~0.2 mg) 에 68 Ge/ 68 Ga- 제너레이터에서용출된 68 GaCl 3 6.66~272.8 MBq/0.1 M HCl 1.0 ml 을넣고섞어주었다. 이때 2 M Sodium acetate, 1 M NaOH 또는 1 M Na 2CO 3 을사용하여 ph를 1.0~13으로맞추고교반기로혼합한후실온또는 100 C에서반응하였다. 68 Ga-NOTA 및 68 Ga-DOTA 의방사화학적표지효율을확인하기위하여고정상으로 ITLC-SG 와이동상으로아세톤과생리식염수를사용하여크로마토그래피를시행하고결과를 Radio-TLC 스캐너로판독하였다. 표지된 68 Ga-NOTA 및 68 Ga-DOTA 를실온에그대로두었을때와 37 C 사람혈청과배양했을때의안정성을확인하였다. 사람혈청중에서의안정성은사람혈청 1.0 ml 에 68 Ga-NOTA 및 68 Ga-DOTA 를각각 8.88 MBq/50 μl씩을넣고섞은후 37 C 배양기에서 10분, 30분, 1시간, 2시간, 4 시간동안반응하면서위에서기술한것과같은 ITLC 를수행하였다. 3. 금속이온의공존시 68 Ga-NOTA 의표지효율영향 금속이온존재시금속이온의종류와농도에따른 68 Ga- NOTA 의표지효율에미치는영향을관찰하였다. NOT A 3HCl 0.2 mg에 7% NaHCO 3 0.2 ml을넣고 CuCl 2, FeCl 2, InCl 3, FeCl 3, GaCl 3, MgCl 2, CaCl 2 의전체농도가 0, 0.19, 0.38, 0.76, 1.52, 3.03, 6.07 mm 가함유된 68 GaCl 3 6.9 5~8.58 MBq/0.1 M HCl 1.0 ml 을넣고실온에서 20 분동안반응시켰다. 68 Ga-NOTA 의표지효율을확인하기위하여위에서기술한것과같이 ITLC 를수행하였다. 4. 단백질결합분율측정 68 Ga-NOTA와 68 Ga-DOTA 를사람혈청과배양하였을때단백질결합분율을확인하기위하여사람혈청 1.0 ml 에 68 Ga-NOTA 또는 68 Ga-DOTA 925 kbq/5 μl을넣고섞은후 37 배양기에서 10분과 60분동안반응하였다. 반응후 PD-10 컬럼에 0.5 ml 을넣은후 PBS (phosphate buffed saline) 를 0.5 ml씩흘려주면서각각의분획을 5 ml 테스트튜브에받은후감마카운터를사용하여방사 331
Jae Min Jeong, et al. Radiolabeling of NOTA and DOTA with Positron Emitting 68Ga and Investigation of In Vitro Properties 사능 )/( 전체 fraction 의방사능 ) 100% 로계산하였다. 5. Log P 68 Ga-NOTA 의지용성의정도를알아보기위하여 Log P 값을측정하였다. 1-Octanol 3 g과 0.1 M sodium phosphate buffer ph 7.4., 3 g이들어있는유리관튜브에 68 Ga-NOTA 0.5 MBq/20 μl를넣고교반기를사용하여 3 Figure 2. 68 Ga was eluted from 68 Ge/ 68 Ga Generator using 1 ml fractions of 0.1 M HCl. Most radioactivity was eluted in the 2nd and 3rd fractions. It was possible to obtain almost 90% of radioactivity in a 1 ml aliquot by adjustment of elution volume. 능을측정하였다. PD-10 컬럼은사용전에금속이온과단백질이컬럼내부에흡착되는것을방지하기위하여 1% BSA (bovine serum albumin)/0.1 M DTPA 1.0 ml을흘려준후 PBS 100 ml을흘려주어충분히세척해주었다. 취한각각의분획에서의단백질의존재유무를확인하기위하여여과지에반응액 2 μl씩점적한후 Coomassie blue 용액을사용하여단백질을염색함으로써유무를확인하였다. 단백질결합능 (%)=( 단백질이존재하는 fraction 의방 분동안강하게혼합하였다. 3000 rpm에서 5 분동안원심분리한후조심스럽게 octanol 층과 phosphate buffer 층을취한후각각을감마카운터를이용하여방사능을측정하였다. Log P 값은 log (octanol 층의방사능 (cpm)/0.1 M sodium phosphate buffer 층의방사능 (cpm) 으로계산하였다. 결과 68 Ge/ 68 Ga 제너레이터에 0.1 N HCl 을 1 ml씩흘려주면서나오는용액을 1 ml 씩연속적으로받아서방사능을측정하여본결과첫 1 ml 에는방사능이거의나오지않았고, 2 번분획에서 63.0% 3번분획에서 30.0% 의방사능이나옴을알수있었다 (Fig. 2). 68 Ga-NOTA와 68 Ga-DOTA 는 TLC 에서거의같은양상을보여주었다. 둘다 ITLC-SG/ 아세톤에서 R f=0.0이고, A C B D Figure 3. These are ITLC chromatograms of 68 Ga-NOTA (A and B) and 68Ga-DOTA (C and D). Mobile phases were acetone (A, C) and normal saline (B and D). 68 Ga-NOTA was labeled at room temperature and 68 Ga-DOTA was labeled in boiling water. 332
정재민외. NOTA 와 DOTA 의 68 Ga 표지 Figure 4. These are the labeling efficiency of 68 Ga-NOTA and 68 Ga-DOTA according to the change of ph. 68 Ga-NOTA was labeled at room temperature and 68 Ga-DOTA was labeled in boiling water. Figure 5. These are the labeling efficiency of 68 Ga-NOTA and 68 Ga-DOTA according to the concentration of chelating agents. 68 Ga-NOTA was labeled at room temperature and 68 Ga-DOTA was labeled in boiling water. A B Figure 6. The elution profiles of 68 Ga-NOTA (A) and 68 Ga-DOTA (B) from PD-10 column after incubation with human serum 0.5 ml fractions were collected. Protein-containing fractions were detected by Coomassie blue staining after dotting onto a filter paper and found to be fraction number 6~11. TLC-SG/ 생리식염수에서는 R f=1.0 이였다 (Fig. 3). 68 GaCl 3 는 ITLC-SG/ 아세톤과생리식염수모두에서 R f=0.0으로움직이지않았다. 68 Ga-NOTA와 68 Ga-DOTA 는실온에그대로두었을때와사람혈청과혼합하여 37C 에서배양하였을때모두 4 시간동안 99% 이상의안정성을보여주었다. ph를변화시켜가면서 NOTA 와 DOTA 를표지하였을때최적 ph 범위는 NOTA 의경우 3.5~7.5 였고 DOTA 의경우 2.0~3.5 였다 (Fig. 4). NOTA 의농도를낮게하였을경우최적 ph는 6.5 정도가되었다 (Fig. 4). NOTA 와 DOTA 가각각가장표지가잘되는 ph인 ph6.6 과 ph3.5 에서농도를변화시키면서표지하였을때 NOTA 가 DOTA 에비하여더낮은농도에서도표지가잘 되었고, 또한 DOTA 는끓여야표지가잘되었지만 NOTA 는실온에서도표지가잘되었다 (Fig. 5). 표지시에공존하는다른금속이온이 68 Ga-NOTA의방사화학적표지효율에미치는영향을관찰한결과, Mg 2+ 과 Ca 2+ 은거의영향을미치지않는다는것을알았다 (Table 1). Cu 2+ 이존재할경우가장표지가되지않았고그다음으로 In 3+, Ga 3+, Fe 3+, Fe 2+ 의순서였다. Fe의경우 +3가이온이 +2가이온에비하여더표지에영향을미치지만같은 +2가이온이라도 Mg 2+ 와 Ca 2+ 는전혀영향을미치지않는데 Cu 2+ 는매우큰영향을미친다는것을알수있었다 (Table 1). 68 Ga-NOTA와 68 Ga-DOTA 의사람혈청단백질과의결 333
Jae Min Jeong, et al. Radiolabeling of NOTA and DOTA with Positron Emitting 68Ga and Investigation of In Vitro Properties Table 1. Labeling Efficiency Change of 68 Ga-NOTA in the Presence of Various Metal Ions Concentration (mm) 0.000 0.190 0.380 0.760 1.519 3.038 6.076 FeCl 2 CuCl 2 InCl 3 FeCl 3 GaCl 3 MgCl 2 CaCl 2 99.7±0.1* 96.4±2.4 92.5±0.8 67.9±1.4 46.7±6.4 Values represent mean±sd (n=3) 99.4±0.4 94.5±6.4 31.5±12.9 6.0±1.7 0.8±0.3 0.1±0.1 99.4±0.2 99.4±0.1 98.6±0.5 67.3±1.5 27.8±0.5 10.0±2.8 4.4±0.1 99.4±0.2 99.0±0.5 98.5±0.8 87.7±2.6 59.0±7.1 38.8±0.6 18.9±4.5 98.8±0.8 96.7±1.0 68.2±6.8 34.0±5.2 14.8±1.1 9.2±2.0 99.5±0.2 99.7±0.1 99.7±0.1 99.4±0.3 Table 2. Protein Binding Percentages in Human Serum at 37 C 68 Ga-NOTA 68 Ga-DOTA 10 min 1 hr 2.08±0.01 2.04±0.15 Values represent mean%±sd (n=3) 2.67±0.04 3.32±0.24 합을측정하기위하여사람혈청과혼합한다음 PD-10 칼럼에걸어서 0.5 ml 씩 30 개의분획을취하였다 (Fig. 6). 각분획을 Coomassie blue 로염색하여본결과 6~11번째분획에서염색이된것으로보아이분획들에단백질이포함됨을알수있었다. 따라서단백질결합분획과결합하지않은분획의방사능을측정하여단백결합률을계산한결과 68 Ga-NOTA와 68 Ga-DOTA 의사람혈청에서의단백질결합률은 10 분후에각각 2.08% 와 2.04%, 1 시간후에각각 2.67% 와 3.32% 로낮음을알수있었다 (Table 2). 68 Ga-NOTA 의지용성의정도를관찰하기위하여 octanol distribution 실험을실시한결과 log P 값은 -3.07 로서수용성이높음을알수있었다. 고 68 Ga은 PET 용으로매우훌륭한양전자방출핵종으로서특히제너레이터에서생산할수있어서경제성이뛰어나고, 표지가매우간편하여앞으로급성장할잠재력을가지고있는핵종이다. 그러나아직연구가많이이루어지지않아적당한방사성의약품이별로많이개발되어있지않은상태이다. 68 Ge/ 68 Ga 제너레이터를 0.1 N HCl 로용출할경우거의대부분의방사능이 2~3 ml 분획에서나타난다 (Fig. 2). 따라서초기방사능이나타나지않는분획을버리고그다음분획을얻는방법을사용할경우, 여러번시행착오를거치면약 1 ml 정도의부피안에거의 90% 에해당하는방사능을용출해낼수있어각종방사성의약품을농축할 찰 필요없이편리하게표지할수있다. 결합하지않은 Ga 3+ 이온은 TLC 를할때아세톤이나생리식염수로전개를하면원점에서움직이지않는다. 이는콜로이드를형성하든지아니면 TLC 매질과결합하기때문으로추정된다. 그러나 NOTA 와 DOTA 와는수용성킬레이트를형성하므로아세톤에서는움직이지않지만생리식염수에의하여는매우쉽게움직여용매선단까지올라간다. 따라서이러한성질을이용하면 68 Ga로표지된방사성의약품의방사화학적순도를쉽게측정할수있다. 갈륨은 3A 족에속하는금속으로서각종킬레이트를잘형성한다. 따라서 68 Ga을펩타이드나단백질에표지할때는양기능성킬레이트제를먼저결합하여놓고여기에표지하는방법을사용하는것이가장간편하다. 68 Ga을표지하기위한양기능성킬레이트제로서가장먼저고려해볼수있는것들로 NOTA 와 DOTA 가있다. 이중 DOTA 는 111 In, 90 Y 등의표지에널리사용되는양기능성킬레이트제로서매우유명하지만 11) 67 Ga의경우는 NOTA 가더유리하다는보고가있다. 12) 68 Ga은 67 Ga과화학적으로는동일하므로 68 Ga을표지하기위한양기능성킬레이트제로는 NOTA 를사용하는것이 DOTA 를사용하는것보다더나을것이라는추정이가능하다. Ga 3+ 이온은크기가 In 3+ 또는 Y 3+ 같이핵의학에사용하는다른금속이온보다작기때문에 DOTA 에비하여크기가작은 NOTA 가더적당할것이라는유추도할수있다. 이연구에서는이두가지양기능성킬레이트제중실제로 NOTA 가더유리한지를보고자하는목적이있었다. 이연구의결과똑같이 23.3 μm 농도로 68 Ga을표지하였을때 NOTA 가훨씬더표지가잘되고, 또한 DOTA 는끓여야표지가잘되는데비하여 NOTA 는실온에서도표지가잘된다는것을알았다. 따라서 68 Ga의표지에는 NOTA 를양기능성킬레이트제로사용하는것이 DOTA 에비하여유리하다는결론을내릴수있었다. 이는 NOTA 를기반으로한양기능성킬레이트제를펩타이드나단백질에결합하 334
정재민외. NOTA 와 DOTA 의 68 Ga 표지 여 68 Ga를표지하면지금까지 18 F 또는 99m Tc과같은핵종으로표지하던각종펩타이드나단백질들을훨씬편리하게 PET 에도입할수있다는결론을내릴수있다. 그러한 펩타이드나단백질로유망한것으로 18 F-LSA, 13) MSA, 14) 18 F-RGD 등 15) 을들수있다. 99m Tc- 양기능성킬레이트제를결합한단백질이나펩타이드를표지할때중요한점은표지시에다른금속이온의존재이다. 비록 NOTA 나 DOTA 가 68 Ga과잘결합한다고하나그농도가매우낮기때문에다른금속이온이조금이라고존재하면표지효율을떨어뜨릴수가있기때문이다. 특히실험에사용하는증류수에금속이온이미량존재할경우가많고, 또한각종완충용액으로사용하는시약에도미량의금속이온이오염되어있을수있으며, 각종실험기구에서도용출될수있으므로금속이온의오염에는매우주의를기울여야한다. 이실험의결과알칼리토류에속하는 Mg 2+ 와 Ca 2+ 는 68 Ga의표지에전혀영향을미치지않으나 Cu 2+ 는매우큰영향을미치는것을알았다. 따라서 Cu의동위원소핵종 ( 60 Cu, 61 Cu, 62 Cu, 64 Cu, 67 Cu 등 ) 의표지에도 NOTA 가적당할것이틀림없다. 그리고증류수나시약중에가장오염의염려가큰 Fe 3+ 이온도상당히영향을미치므로실험을할때금속이온의오염에많은주의를기울여야하는것을알았다. 방사성의약품의체내동태에매우중요한영향을미치는인자중하나가혈장단백과의결합이다. 혈장단백결합률을측정하는방법은투석법, 침전법, 추출법등여러가지가있을수있지만대부분시간이오래걸리거나측정오차가매우크다. 여기서는겔여과법을사용하였는데다른방법에비하여시간이짧게걸리므로측정중에단백질과떨어질확률이낮아비교적정확한결과를얻을수있다는장점이있다. 이연구의결과 68 Ga-NOTA와 68 Ga-DOTA 둘다혈장단백의결합은매우낮은것으로밝혀졌다. 결론적으로 NOTA 와 DOTA 모두 68 Ga 표지에사용이가능한양기능성킬레이트제이지만 NOTA 가더바람직하다고볼수있다. 그러나 NOTA 의경우 3개의카르복실기중하나를단백질이나펩타이드에결합하면킬레이트형성이약화될수가있으므로벤질이소치오시아니드기와같은잔기를도입하여카르복실기를직접단백질이나펩타이드에결합하지않는방법을사용하는것이바람직하다. 요약 목적 : 68 Ge/ 68 Ga- 제너레이터에서생산되는 PET 용방사성동위원소인 68 Ga을 NOTA 와 DOTA 에표지하는조건을 확립하고이의안정성및단백질결합특성을연구하였고, 여러가지의금속이온공존시표지효율에미치는영향도관찰하였다. 대상및방법 : 여러가지농도의 NOTA 3HCl 과 DOTA 4HCl 에 68 Ge/ 68 Ga- 제너레이터에서 0.1 M HCl 로용출한 68 GaCl 3 6.66~272.8 MBq 1.0 ml와합치고초산나트륨또는탄산나트륨완충액을사용하여다양한 ph 조건에서반응하였다. 다양한금속이온 (CuCl 2, FeCl 2, InCl 3, FeCl 3, GaCl 3, MgCl 2, CaCl 2) 과 0.373 mm NOTA 를 68 Ga (6.77~8.58 MBq) 으로표지할때표지효율을관찰하였다. 68 Ga의표지효율은 ITLC-SG 고정상으로하고아세톤과생리식염수를이동상으로하여측정하였다. 최적의 ph 조건에서 68 Ga-NOTA와 68 Ga-DOTA 를표지한후 4 시간동안안정성을확인하고, 사람혈청에서의단백질결합능을평가하였으며, 지용성정도를측정하기위하여 octhanol distribution 실험을실시하여 log P값을구하였다. 결과 : 68 Ga- NOTA 와 68 Ga-DOTA 의최적표지 ph 조건은각각 ph 6.5 와 3.5였고, NOTA 는실온에서표지가잘되었으나 DOTA 는가열이필요하였다. MgCl 2 와 CaCl 2 의존재는 68 Ga- NOTA 의표지효율에영향을미치지않았으나 CuCl 2, FeCl 2, InCl 3, FeCl 3, GaCl 3 이존재할경우에는표지효율이감소하였다. 68 Ga-NOTA와 68 Ga-DOTA 는실온에그대로두거나사람혈청과 37 C 에두었을때 4 시간이상안정하였고, 사람혈청단백질결합능은 2.04~3.32% 로낮았으며, log P 값은 -3.07 로수용성을보였다. 결론 : 68 Ga의표지에는 NOTA 가 DOTA 에비하여이상적인양기능성킬레이트제로쓰일수있음을알았다. 또한 68 Ga-NOTA 는금속이온존재시표지효율이떨어질수있지만안정하고낮은단백질결합을보였다. References 1. Breeman WA, Verbruggen AM. The 68 Ge/ 68 Ga generator has high potential, but when can we use 68 Ga-labelled tracers in clinical routine? Eur J Nucl Med Mol Imaging 2007;34:978-81. 2. Ehrhardt GJ, Welch MJ. A new germanium-68/gallium-68 generator. J Nucl Med 1978;19:925-9. 3. Schuhmacher J, Maier-Borst W. A new 68 Ge/ 68 Ga radioisotope generator system for production of 68 Ga in diliute HCl. Int J Appl Radiat Isot 1981;32:31-6. 4. Zhernosekkov KP, Filosofov DV, Baum RP, Aschoff P, Bihl H, Razbash AA, et al. Processing of generator-produced 68 Ga for medical application. J Nucl Med 2007;48:1741-8. 5. Jeong JM, Hong MK, Chang YS, Lee Y-S, Kim YJ, Cheon GJ, et al. Preparation of a promising angiogenesis PET imaging agent: 68 Ga-labeled c(rgdyk)-isothiocyanatobenzyl-1,4,7-triazacyclononane- 1,4,7-triacetic acid and feasibility studies in mice. J Nucl Med 2008;49:830-6. 6. Rufini V, Calcagni ML, Baum RP. Imaging of neuroendocrine 335
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