臨床藥理學會誌第 15 卷第 2 號 2007 Kor J Clin Pharmacol Ther 2007;15(2):107-116 세팔렉신제제인케파신캡슐 TM 의팔렉신캡슐 TM 에대한생물학적동등성 가톨릭대학교의과대학 / 강남성모병원임상약리학과 =Abstract= 안병진, 채홍석, 한승훈, 홍은경, 임동석 Bioequivalence Study of Two Cephalexin Formulations, Kepacin TM Capsule and Falexin TM Capsule Byung-Jin Ahn, Hong-Seok Chae, SeungHoon Han, Eun-Kyung Hong, Dong-Seok Yim Department of Clinical Pharmacology and Therapeutics, The Catholic University of Korea, Kangnam St.Mary s Hospital, Seoul, Korea Backgound: Cephalexin is one of the first generation cephalosporins that has antibactericidal activity against gram-positive microorganisms. The purpose of the present study is to evaluate the bioequivalence of two cephalexin formulations (Kepacin capsule 500mg vs Falexin capsule 500mg), according to the guideline of the Korea Food and Drug Administration (KFDA) Methods: Twenty three healthy Korean male volunteers participated in this study. Under two way, crossover, Latin-square design (1-week wash-out period), a pharmacokinetic study and bioequivalence test was performed. After oral administration of cephalexin 500mg, blood samples were taken at predetermined time points and the concentrations of cephalexin were quantified using HPLC/UV method. WinNonlin V5.0 was utilized for calculation of the pharmacokinetic parameters including AUC t, C max. Results: There were no significant differences in demographic and pharmacokinetic characteristics between Kepacin TM and Falexin TM. ANOVA test found no significant sequence effects for AUC t and C max. The 90% confidence intervals of the mean difference of log (AUC t and C max) for Kepacin TM versus Falexin TM were log 0.94~log 1.03 and log 0.92~log 1.18, respectively. These values were within the bioequivalence range of log 0.8~log 1.25. Conclusion: Our study indicated that the pharmacokinetic profiles of cephalexin in Korean male subjects were not different from previous reports except low clearance. Kepacin TM was bioequivalent to Falexin TM with respect to the extent and rate of absorption. Key words: Bioequivalence, Cephalexin capsule. 서론세팔렉신 (Cephalexin) 은 1세대세팔로스포린계열의항균제로서그람양성구균의감염증에주로사용된다. 세팔렉신은경구투여량의 90% 정도가 흡수된후, 약 14% 의혈장단백결합률, 약 18 (L/h/70kg) 의전신청소율, 약 18 (L/70kg) 의분포용적, 약 0.9 시간의반감기를보이고흡수된약물의약 90% 가신장으로배설되며 500mg 경구투여시최고혈중농도는약 28 (ug/ml), 최고혈중 교신저자 : 임동석소속 : 가톨릭대학교의과대학약리학교실주소 : 서울특별시서초구반포동 505 전화번호 : (02) 590-1201, FAX: (02) 536-2485, e-mail: yimds@catholic.ac.kr 107
안병진외 : 세팔렉신제제인케파신캡슐 TM 의팔렉신캡슐 TM 에대한생물학적동등성 농도도달시간은약 1.4시간인것으로알려져있다 1),2). 식품의약품안전청고시제 2005-31호생물학적동등성시험기준에의하면 생물학적동등성시험 이라함은생물학적동등성입증을위한생체내시험으로서주성분이전신순환혈에흡수되어약효를나타내는의약품에대하여동일주성분을함유한동일투여경로의두제제가생체이용률에있어서통계학적으로동등하다는것을입증하기위해실시하는시험을말한다. 이때비교평가항목은검체가혈액인경우, 1회투약시는투약시간부터최종혈장농도정량시간 t 까지의혈중농도-시간곡선하면적 (AUC t), 최고혈중농도 (C max) 로하며반복투약시는정상상태의투여간격 τ중의혈중농도-시간곡선하면적 (AUC τ) 및정상상태의최고혈중농도 (Css, max) 로하며. 최고혈중농도도달시간 (T max) 및비교용출시험에의한용출양상은참고평가항목으로하는것으로되어있다. 생물학적동등성에대한평가는 T max 를제외한대조약과시험약의비교평가항목치를로그변환하여통계처리하였을때, 로그변환한평균치차의 90% 신뢰구간이 log 0.8에서 log 1.25 이내인경우생물학적으로동등한것으로판단하게된다. 다만, 다음을모두만족하는경우에는동등으로판정하게되는데, (1) 대조약과시험약의비교평가항목치의로그변환한평균치의차가 log 0.9에서 log 1.11이내인경우 (2) 의약품동등성시험관리규정 ( 식품의약품안전청고시 ) 에따라비교용출시험을실시할때규정된모든조건하에서동등한경우. 다만, 경구용제제 ( 서방성제제제외 ) 및장용성제제는대조약의평균용출률이규정된시간내에 85% 에도달하지않는경우는적용할수없으며서방성제제는대조약의평균용출률이 30%, 50%, 80% 부근인적당한시점에서의시험약의평균용출률이대조약평균용출률의 ±10% 이내인경우 (3) 총피험자수가 20명 (1군당 10명 ) 이상인경우이다. 통계처리시분산분석에의 한검정은원칙적으로 α( 유의수준 )=0.05 에서실시하도록규정하고있다 3). 본시험에서는경구용세팔렉신제제인동화약품공업주식회사의팔렉신캡슐 500mg을대조약으로하고 유한양행의케파신캡슐 500mg을시험약으로하여세팔렉신의한국인정상성인에서의약동학적특성을알아보고시험약과대조약간의생물학적동등성을평가해보고자하였다. 연구대상및방법 1. 연구대상피험자세팔렉신의기존약동학적연구에서약동학적파라미터의총변이가약 30% 로보고되어있고개체내변이가총변이의 60-80% 를차지하는것이경험적으로알려져있으므로개체내변이를약 22% 정도로가정하였을때유의수준 0.05, 검정력 80% 에서두제제간로그변환치의차이를 90% 신뢰수준으로검정하기위한피험자수는각군당약 10명이된다. 여기에식품의약품안전청고시제 2005-31호생물학적동등성시험기준제13조및제 19조 2항을고려하고, 중도탈락자 ( 탈락율 20%) 를감안하여피험자예수를양군에각각 12명으로, 총 24명을대상으로하였다. 피험자선정기준으로는 (1) 건강진단시연령이만19세 ~55세인남성이고 (2) 선천성또는만성질환이없고내과적인진찰결과 ( 필요한경우뇌파, 심전도, 흉부및위내시경또는위장방사선검사 ) 병적증상또는소견이없으며 (3) 담당의사가의약품의특성에따라설정및실시한혈액병리검사, 혈액화학검사, 뇨검사등임상병리검사결과피험자로적합하다고판정된건강한성인으로하였다. 대상자제외기준으로는 (1) 시험개시전 1개월이내바르비탈류약물등의약물대사효소유도및억제약물의복용이나과도한음주를하였거나 (2) 시험개시전 10일이 108
B. J. Ahn et al.: Bioequivalence study of Cephalexin 내시험에지장을줄우려가있는약물복용을한경우 (3) 담당의사가생물학적동등성시험에적합하지않다고판단한경우 (4) 약의성분에과민반응의병력이있는환자 (5) 간담도계, 신장그리고순환기계에장애가있거나약의흡수를지연시킬만한가능성이있는소화기계의질환을가지고있는사람으로하였다 3). 모집대상피험자 24명중실제시험에참여한피험자는총23명이었다. 피험자들의인구학적특성은두군에서차이가없었다. (Table1.) 본시험에참여한지원자에대하여임상시험을위한설명서를배부하고그내용을충분히설명하였으며피험자의자유의사에의한서면동의서를받았다. 본임상시험에대해가톨릭대학교강남성모병원임상시험심사위원회의심의를통과하였다. 2. 연구수행본시험은총 23명의피험자를두군 (A군, B군 ) 으로무작위배정하여 2시기 * 2순서형태의라틴방격법 ( Latin-square method ) 형태의교차시험설계 (crossover design) 하에수행되었다. 제1기제A군에는대조약인동화약품공업주식회사의팔렉신캡슐을, 제B군에는시험약인유한양행에서제조한케파신캡슐을동일투약일에투약하고, 투약량은각제제모두 1 캡슐 (cephalexin 500 mg ) 을 1회경구투약하였다. 시험당일피험자들의상완정맥부위에 heparin-locked catheter를설치하고 blank 혈액으로각각 7mL씩을채혈하였다. 채혈시채혈세트안에남아있는헤파린처리생리식염수를완전히제거하기위해매번약 1mL의혈액을빼내어버리고약 7mL의혈액을채취하였고, 다시 catheter 안에잔류하는혈액의응고를방지하기위하여주사용헤파린을넣은주사용생리식염수를주입하였다. 실수로인한채혈시간의변동을사전에방지하기위해시험전에채혈자및피험자들에게채혈기록지를배부하였다. 피험자전원은시험약케파신캡슐 500mg( 유한양행 ) 혹은대조약팔렉신캡슐 500mg( 동화약품공업주식회사 ) 1캡슐을물 240mL과함께복용하였으며시험담당자가확인하였다, 피험자간투약시간의차이는채혈시간을고려하여 2분간격으로하였다. 약물의혈중소실반감기 ( 약 1 시간 ) 및식품의약품안전청고시제2005-31호 18조 3항에따라, 채혈시간은반감기의 3배이상인 10시간동안실시하였고, 채혈횟수는세팔렉신의최고혈중농도도달시간이약 1.4-2.0 시간으로보고되어있고채혈횟수는원칙적으로 12회이상으로하며, 최고혈중농도도달전에적어도 2회이상채혈하도록되어있는생물학적동등성기준을고려하여약물투약직전과투약후 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10시간의총 12시점에서실시하였다. 채혈된혈액은 3000 rpm에서 Table 1. Demographic data from study subjects Group A (RT) B (TR) Total P-value No. (number) 11 12 23 - Age (years) 23.6±1.86 26.2±7.16 25.0±5.37 0.733 Sex (male) 11 12 23 - Height (cm) 172.9±5.07 173.8±3.90 173.3±4.40 0.669 Weight (Kg) 69.5±9.70 66.7±6.85 68.0±8.26 0.670 * mean±sd ; Wilcoxon rank sum test 109
안병진외 : 세팔렉신제제인케파신캡슐 TM 의팔렉신캡슐 TM 에대한생물학적동등성 10분간원심분리한후혈장을취하여혈장분리관에옮겨담고분석시까지영하 70도에서보관하였다. 식사에의한영향을배제하기의하여투약전 10시간이상절식한상태에서투약후 4시간까지는금식상태를유지시켰으며, 투약후 4시간째채혈을마친후동일한점심식사를섭취하였다. 시험전과정을통하여피험자개개인의상태를관찰하여기록하였으며, 채혈이끝난후에는담당의사에의해혈압, 맥박, 기타이상유무를확인하였으며피험자전원에게서이상이없음을확인하였다. 제1기마지막채혈이끝난후제2기시험을완료할때까지음주나약물복용을일체금지하도록주지시킨후귀가시켰다. 휴약기간 7일 ( 반감기의 5배이상 ) 이후제2기투약및시험은시험약과대조약의투여만반대로하고제1기투약및시험과동일하게실시하였으며, 피험자관리방법도제 1기시험중피험자관리에따라같은방법으로진행하였다. 피험자들의혈액채취는일반인들의출입이통제된격리된방에서실시하였고, 사용하는기구는완전멸균된 1회용으로하였다. 3. 혈장세팔렉신농도분석혈장에서세팔렉신농도를측정하기위해 2002 년성분별생물학적동등성시험표준지침의조건을본기관연구실의조건에맞게변경하여사용하고, 특이성, 직선성, 정확성, 정밀성, 감도 ( 정량한계 ), 안정성등에대한분석방법타당성검증 (validation) 을완료한후검체분석에이용하였다. 전처리된혈장시료는 HPLC/UV 방법으로정량하였다. 장치로는액체크로마토그래프를, 검출기로는 UV absorbance detector (260nm) 를, 컬럼은 Luna C18 (4.6 250mm) 을, 데이터처리장치로는 computerized integrator 를사용하였으며이동상으로는 methanol 과 0.025M KH 2PO 4(pH 2.1) 혼합용액 (30:70. V/V) 을사용하고 column oven 30 C에서유속 1mL/min 으로정량하였다. 세팔렉신표준품을 methanol 에녹여 1mg/mL 농도의표준용액을만든후 -20 C에냉동보관하였다. 계대희석된표준용액을공혈장에 spiking하여혈장중세팔렉신의농도가 0.5 100μg /ml 농도가되도록표준시료를만들고. 각각의표준시료 300μl에내부표준물질세파졸린 (cefazolin) (60μg/mL, 이동상 ) 100 μl를가한후섞었다. 여기에 60% perchloricoric acid 50μl를가하고 30초동안 vortexing 하여제단백한다음 12000 rpm, 4 에서 10분간원심분리하였다.. 상층액 100μl를취하여이동상 100μl와혼합후 HPLC에주입하고. 여기에서얻은내부표준물질의피이크면적에대한세팔렉신의피이크면적비를약물농도의역수 (1/X) 로 weight 를주어검량선을작성하였다. 하루에실험을 5번시행하여일내재현성을구하고 5일간실험을행하여일간재현성을구하였다. 피험자로부터각시간별로채취하여 - 70 에보관했던혈장시료를실온에방치하여녹인후 30초간진탕한다음이혈장 300μl를취하여시험관에옮기고여기에내부표준물질로세파졸린 (60 μg /ml, 이동상 ) 100 μl를가한후검량선작성방법과동일한방법으로전처리한후 HPLC에주입하였다. 이후얻어진크로마토그램으로부터내부표준물질의피이크면적에대한세팔렉신의피이크면적비를구하여미리작성한검량선으로부터혈장중세팔렉신의농도를구하였다. 4. 약동학적파라미터및생물학적동등성통계분석생물학적동등성시험기준 ( 식품의약품안전청고시제2005-31호, 2005. 6. 7.) 에따라시험약과대조약간의생물학적동등성평가를위한비교항목은투약시간부터최종혈중농도정량시간 t 까지의혈중농도-시간곡선하면적 (AUC t) 및최고혈중농도 110
B. J. Ahn et al.: Bioequivalence study of Cephalexin Time-Concentration Profile Concentration(ug/ml) 30 25 20 15 10 5 R T 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Time(hr) Figure 1. Mean plasma concentration- time profile of cephalexin after a single oral administration of 500mg capsule (R: Falexin TM capsule T: Kepacin TM capsule) (C max) 로하였으며, 최고혈중농도도달시간 (T max) 은참고값으로하였다. 약동학적파라미터계산및통계분석은 WinNonlin V5.0을이용하여구하였으며, T max 를제외한대조약과시험약의 AUC t, C max 는로그변환하여분석하였다. 통계처리에사용된분산분석 (ANOVA) 에서는 AUC t, C max 에대하여약제효과, 시기효과, 군 ( 순서 ) 효과, 군내피험자간변동을 F-test로검정하고제형효과에대한 90% 신뢰구간에대하여생물학적동등성여부가평가되었다. 평가의신뢰성을확보하기위해생물학적동등성평가프로그램인 K-BE test 2002 판을사용하여재차확인하였다 3,4). 결과 1. 약동학적파라미터평가시험약 ( 케파신캡슐500mg) 과대조약 ( 팔렉신캡슐 500mg) 의약동학적파라미터들과평균혈장농도추이는유사한양상을보여주었다. (Figure 1). AUC t (ug*hr/ml: Mean±SD) 는대조약 44.36±7.75, 시험약 44.05±9.19 이었고, C max (ug/ml: Mean± SD) 는대조약 21.00±6.37, 시험약 21.58±5.88 이었으며, T max (hr: Mean±SD) 는대조약 1.26±0.54, 시험약 1.15±0.41 이었다. 그외에 CL/F (L/hr: Mean±SD) 는대조약 11.36±2.12, 시험약 11.52± 2.17, Vd/F (L: Mean±SD) 는대조약 16.30±3.49, 시험약 15.66±2.55, t 1/2 (hour: Mean±SD) 은대조약 1.00±0.17, 시험약 0.96±0.13, MRT (hour: Mean± SD) 는대조약 1.94±0.34, 시험약 1.85±0.32 로시험약과대조약두제제간에유사한양상을보여주었다 (Table2.) 시험약과대조약에대한각피험자의 log(auct) 와 log(c max) 프로파일을살펴보았을때 log(auc t) 의경우두제제의분포는유사하였으며각각평균값을중심으로비교적고르게분포함을확인할수있었다. Log(C max) 의경우는대조 111
안병진외 : 세팔렉신제제인케파신캡슐 TM 의팔렉신캡슐 TM 에대한생물학적동등성 Table 2. Pharmacokinetic parameters after a single oral administration of cephalexin 500mg capsule Falexin TM Kepacin TM Mean SD Mean SD AUC t (ug*hr/ml) 44.36 7.75 44.05 9.19 C max (ug/ml) 21.00 6.37 21.58 5.88 T max (hr) 1.26 0.54 1.15 0.41 CL/F (L/hr) 11.36 2.12 11.52 2.17 Vd/F (L) 16.30 3.49 15.66 2.55 MRT (hr) 1.94 0.34 1.85 0.32 t 1/2 (hr) 1.00 0.17 0.96 0.13 약의분산에비해시험약의분산이작음을확인할수있었다. (Figure 2.) 2. 생물학적동등성평가 AUC t 와 C max 의생물학적동등성검정에앞서확인된분산분석결과약제효과, 시기효과, 군 ( 순서 ) 효과는 α( 유의수준 )=0.05 에서통계학적으로의 미가없었다. (Table 3.) 생물학적동등성평가를위해시험약과대조약의로그변환한 AUC t 와 C max 의평균의차이에대한점추정치및평균의차이에대한 90% 신뢰구간을구하였으며, 이신뢰구간이 0.2231 (=log 0.8) 에서 +0.2231 (=log 1.25) 사이에포함되는지확인하였을때 AUC t ( 시험군 대조군 ) 의경우평균의차이의점추정치 (point estimate) 는 0.0128, 평균차이의 90% 신뢰구간은 0.059~0.0333 이었으며, C max( 시험군 대조군 ) 의경우평균의차이의점추정치 (point estimate) 는 0.0393, 평균차이의 90% 신뢰구간은 0.0831~0.1618 로나타나생물학적동등성기준을만족하였다. 시험약과대조약의기하평균 (geometric mean) 의비 (ratio: 시험약 / 대조약 ) 및 90% 신뢰구간은 AUC t 에서는 0.987 및 0.9427~1.0339, C max 에서는 1.04 및 0.9203~1.1756 으로 0.8~1.25 구간에존재하였다. (Table 4.) 3. 안전성평가총 23명의피험자가시험을완료하였으며문진, 자발적보고등으로확인된유해사례는없었다. 또 Log( AUC t ) Log( C max ) 4.4 4 4.2 3.5 4 3.8 3 3.6 2.5 3.4 2 3.2 3 1.5 R Formulation T R Formulation T Figure 2. Subject profiles plots in log(auc t) and log(c max) 112
B. J. Ahn et al.: Bioequivalence study of Cephalexin Table 3. ANOVA test results for AUC t and C max of Cephalexin AUC t Source DF SS MS F value F table P- value Formulation 1 0.0019 0.0019 0.230 4.325 0.6368 Period 1 0.0101 0.0101 1.219 4.325 0.2821 Sequence 1 0.0141 0.0141 0.211 4.325 0.6509 Subject(sequence) 21 1.4031 0.0668 8.093 2.084 <0.0001 Error 21 0.1734 0.0083 Total 45 1.6021 CMAX Source DF SS MS F value F table P-value Formulation 1 0.0178 0.0178 0.306 4.325 0.5862 Period 1 0.0115 0.0115 0.198 4.325 0.6612 Sequence 1 0.0292 0.0292 0.224 4.325 0.6407 Subject(sequence) 21 2.7379 0.1304 2.244 2.084 0.0354 Error 21 1.2200 0.0581 Total 45 4.0176 Table 4. Bioequivalence test results between Falexin TM and Kepacin TM R T T - R T/ R ratio Mean SD Mean SD Point Est. * (90% CI) * Point Est. (90% CI) LogAUC t (ug*hr/ml) 3.78 0.18 3.77 0.20-0.0128 (- 0.0590~0.0333) 0.987 (0.9427~1.0339) LogC max (ug/ml) 3.00 0.33 3.04 0.27 0.0393 (- 0.0831~0.1618) 1.040 (0.9203~1.1756) R; Falexin TM as reference drug, T; Kepacin TM as test drug, Point Est*; Point estimate of the mean difference of log(auc t) and log(c max), 90%CI * ; 90% Confidence Interval of the mean difference of log(auc t) and log(c max), Point Est ; Point estimate of geometric mean ratio, 90%CI ; 90% Confidence Interval of geometric mean ratio 한생체징후및신체검진에서도투약전과비교하여변화를보이지않았다. 4. 약물농도분석평가 Inter-batch에사용된 human blank plasma에서세팔렉신및내부표준물질의 retention time과일치하는간섭 peak는없었으며, 세팔렉신과세파졸린의머무름시간은각 9.6, 11.1 분이었다. Calibration curve의 intra-batch 상관계수 (r) 는 0.998에서 0.999 사이에있었으며, Inter-batch 상관계수 (r) 는모두 0.999이었다. 1.5, 15 및 80 ug/ml 3가지농도의세팔렉신혈장표준액을처리하여분석하였을때정량한계는크로마토그램상에서신호대잡음비 (S/N ratio) 를 5이상으로하고정밀성이 20% 이하이고정확성이 80~120% 인조건을만족하는농도로하여 0.5ug/mL 로정하였다. 이때본분석방법의정밀성 CV % 는일내정밀성이 2.42% (1.5ug/mL) 113
안병진외 : 세팔렉신제제인케파신캡슐 TM 의팔렉신캡슐 TM 에대한생물학적동등성 이하이며, 일내정확성은 91.12~97.43%, 일간정밀성은 7.2% (1.5ug/mL) 이하이며, 일간정확성은 96.7~98.4% 이었다. 정량한계에서의일내정확성은 98.5%, 일내정밀성은 2.6%, 일간정확성은 101.3%, 일간정밀성은 6.4% 으로유효하였다. 고찰세팔렉신은경구투여시유효한제1세대세팔로스포린계열의항균제로서세균의세포벽합성을저해하여효과를나타낸다. 유효균종은용혈성연쇄구균, 폐렴구균, 황색포도구균기타포도구균, 프로테우스미라빌리스, 임균, 대장균, 클레브시엘라속이며이들세균과관련된감염증의치료에사용하도록허가되어있다. 세팔렉신은산에안정하고경구투여후신속하게흡수된다. 서양인의경우세팔렉신 250 mg, 500 mg, 1 g을투여하였을때 1 시간후각각약 9, 18, 32 μg/ml의최고혈중농도 (C max) 가나타나며약 15% 정도가혈장단백과결합하고체내에광범위하게분포하지만뇌척수액에는들어가지않으며거의대사되지않고약 80% 정도가약 6 시간후에뇨중미변화체로배설된다고알려져있다. 일본인의경우건강한성인에서 250 mg, 500 mg 을식후 1 회경구투여시 C max 는 5.5±0.8 μg/ml, 10.3±2.9 μg/ml, 최고혈중농도도달시간 (T max) 은 2.0±0.4 hr, 2.9±0.6 hr, 혈중약물농도-곡선하면적 (AUC 0-6) 은 14.94±3.69 μ g hr/ml, 29.11±8.53 μg hr/ml, 소실반감기 (t½) 는 1.24±0.74 hr, 1.05±0.34 hr로보고되고있다. 현재까지알려진한국인을대상으로한세팔렉신의경구투여후의약물동태학적변수들은일본인의결과보다는오히려서양인의결과와유사한것으로보고되어있는데세팔렉신 500mg 캡슐을식전경구투여한본연구의경우 C max (ug/ml: Mean±SD) 는대조약 21.00±6.37, 시험약 21.58±5.88 으로 T max (hour: Mean±SD) 는대조약 1.26±0.54, 시험 약 1.15±0.41 으로서문헌마다차이가있기는하지만상기서양인의결과와유사한양상을보여주었다. AUC t 의경우는마지막채혈시간이동일하지않고또한 Cephalexin 의투여용량이 250mg, 1000mg 등으로상이한연구들인경우직접비교할수는없었다. 전신청소율의경우는 70kg 성인에서약 18 (L/hr) 로알려져있으나본연구에서는약 11.7 (L/hr) 로서작게측정되었다 5,6,7). 세팔렉신의경우미변화체로소변을통해배설되므로소변의데이터가세팔렉신의생체이용률을잘반영할수있으므로소변을이용한생물학적동등성시험의결과가또한보고되어있다 8). HPLC/UV 방법을이용한세팔렉신의농도분석방법은기존의문헌등에서잘확립되어있으며본연구에서도기존의문헌및분석실표준운영지침에따라농도분석을하였으며유효한일내및일간재현성을보여주었다 5). 현식품의약품안전청의규정상생물학적동등성평가는시험약과대조약의로그변환한 AUC t 와 C max 평균의차이에대한 90% 신뢰구간이 log 0.8 에서 log 1.25 사이에존재하는지가우선평가대상이며, 이기준을만족하지못하는경우 AUC t 와 C max 평균의차이에대한점추정치와비교용출시험의결과, 피험자의수를고려하여동등성여부를판단하도록하고있다. 본연구에서는 90% 신뢰구간이 log 0.8 에서 log 1.25 사이에존재하여두제제는생물학적으로동등한것으로판단할수있었다. 생물학적동등성시험시 AUC t 와 C max 는로그변환하여사용하도록되어있는데로그변환의임상적근거로는로그단위 (log scale) 에서시험약과대조약의 AUC t 및 C max 평균치의차이는원래단위 (original scale) 에서의시험약과대조약기하평균치의비 (ratio) 로서표현되기때문이며, 약동학적근거로는 AUC t 및 C max 가원래단위에서는피험자효과의함수로서간주되는청소율및분포용적이곱의형태 (multiplicative form) 로포함되므로 114
B. J. Ahn et al.: Bioequivalence study of Cephalexin 선형모형을적용할수없는데로그변환을하게되면피험자효과가덧셈형태를취해선형모형을사용할수있게되기때문이다. 또한 AUC, C max 와같은약동학적파라미터들은음수값을가질수없어우편위된분포를보이고이를로그변환하면정규분포를보이는것으로알려져있다 9,10). 라틴방격형태의교차시험에서는생물학적동등성평가를위한신뢰구간을구하기전에분산분석을통해시기효과, 군 ( 순서 ) 효과, 제형효과등을분석하게된다. ( 유의수준 = 0.05) 시기효과는다양한영향으로인해흔히발견되므로, 시기효과유무가생물학적동등성평가에반드시영향을주지는않는것으로알려져있다. 이분산분석에서구한평균제곱오차 (Mean Square Error) 를사용하여생물학적동등성평가를위한신뢰구간추정에표준오차항목에이용하게된다. 그러나교차시험에대한분산분석에서피험자는군 ( 순서 ) 에이미내포되어 (nested) 있다. 이경우군 ( 순서 ) 효과는군 ( 순서 ) 내피험자간변동을오차항으로하여순서군에따라변동이있는지검정하게된다. 또한 2 * 2 라틴방격형태의교차시험설계에서잔류효과의관점에서균형된실험디자인을사용한경우혹은반감기가아주길지않은임상시험약물인경우에는충분한휴약기를줄수있기때문에이월효과 (carryover effect) 는존재하지않는것으로가정하고제형효과에대한분석을진행하게된다 11,12). 현재의평균생물학적동등성평가에서는비교하고자하는두제제의분산을고려하지않고오로지두제제의평균의차이만을고려하게되는데집단생물학적동등성혹은개인생물학적동등성의경우연구방법이나통계분석에논란의여지가있으나각제제의분산을고려하게됨으로보다합리적인평가가될것이다. 본연구처럼 2 * 2 교차시험디자인에서는개인생물학적동등성을평가할수는없으나각제제의분산의차이와평균의차이를구할수있으므로집적통계량 (aggregate statistics) 을이용하여집단생물학적동등성평가를추가로시도해볼수있겠다. 생물학적동등성평가를위한통계분석도구로는 KBE TEST, WinNonlin, SAS등이있는데본연구에서는 1차적으로 WinNonlin을이용하여분석하였고 2차보조도구로 KBE TEST를사용하여확인하였고같은결과를얻었다. 본연구에서는결측치가발생하지않아이에대한추가적인고려는없었다. 본시험을통해시험약인케파신캡슐 500mg은대조약인팔렉신캡슐 500mg과생물학적으로동등하다고평가할수있었다. 참고문헌 1. Katzung, B. G. (2004). Basic & clinical pharmacology. New York, Lange Medical Books/McGraw Hill. 2. Goodman, L. S., Gilman, A., et al. (2006). Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics. New York, McGraw- Hill. 3. 식품의약품안전청고시제 2005-31 호, 생물학적동등성시험기준, 2005. 4. Y. J. Lee, J. H. C, S. H. Song, C. H. Seo, D. S. Kim, I. S. Park, K. H. Choi, H. K. Na, S. J. Chung, M. H. Lee, C. K. Shim. "Development of K-BEtest, a Computer Program for the Analysis of Bioequivalence." J Kor Pharm Sci 1998; 28(4): 223-229(Korean). 5. 식품의약품안전청예규제 91 호, 성분별생물학적동등성시험표준지침, 2003. 6. Pfeffer, M, Jackson, A, et al. "Comparative human oral clinical pharmacology of cefadroxil, cephalexin, and cephradine." Antimicrob Agents Chemother, 1997; 11(2): 331-8. 7. Lode, H, Stahlmann, R, et al. "Comparative pharmacokinetics of cephalexin, cefaclor, cefadroxil, and CGP 9000." Antimicrob Agents Chemother, 1979; 16(1): 1-6. 115
안병진외 : 세팔렉신제제인케파신캡슐 TM 의팔렉신캡슐 TM 에대한생물학적동등성 8. Suleiman, M. S, Najib, N. M, et al. "A bioequivalence study of six brands of cephalexin." J Clin Pharm Ther, 1988; 13(1): 65-72. 9. Food and Drug Administration. Guidance for industry. Statistical approaches to establishing bioequivalence.cder.fda:rockville,md, 2001 10. Patterson, S. D. and Jones, B. Bioequivalence and statistics in clinical pharmacology. Boca Raton, Chapman & Hall/CRC. 2006 11. Walker, G. A. Common statistical methods for clinical research with SAS examples. Cary, NC, SAS Institute Inc. 2005 12. Chow, S. C. Encyclopedia of biopharmaceutical statistics. New York, Marcel Dekker. 2003 116