흰쥐의악골에동종이식된 태아치아싹의장기간발육 연세대학교대학원 치의학과 고동현
흰쥐의악골에동종이식된 태아치아싹의장기간발육 지도교수최병재 이논문을석사학위논문으로제출함 2004년 12월일 연세대학교대학원 치의학과 고동현
고동현의석사학위논문을인준함 심사위원 심사위원 심사위원 인 인 인 연세대학교대학원 2004년 12월일
감사의글 논문이완성되기까지격려를아까지않으시며실험설 계를처음부터끝까지지도해주신최병재교수님께감사 를드리며, 자상하게지도및격려해주신정한성교수님 과애정어린관심과조언을아끼지않으신김성오교수님 께감사드립니다. 아울러관심있게지켜봐주신이제호 교수님과최형준교수님, 손흥규교수님, 이종갑교수님께 감사드리며, 실험의기술적인부분을도와주신 Jinglei Cai 선생님과조성원선생님에게도깊은감사를드립니다. 논문작성과실험을도와주신소아치과의국원모두에 게감사드리며, 님에게도감사드립니다. 특히실험을언제나함께한정회훈선생 끝으로헌신적인사랑으로논문의완성을지켜봐주신 사랑하는부모님께감사드리며, 항상곁에서힘이되며 든든한후원자가되어준사랑하는아내정아에게감사의 뜻을전합니다. 무엇보다도믿음으로논문의시작과끝을인도하여주 신하느님께영광을돌립니다. 저자씀
차 례 그림차례...iii 국문요약...v Ⅰ. 서론...1 Ⅱ. 실험재료및방법...4 1. 실험재료...4 2. 실험방법...4 가. 이식조직...4 나. 이식술식...5 다. 방사선학적평가...6 라. 조직학적평가...6 Ⅲ. 결과...7 1. 발치와에치아싹을이식하지않은조직소견...7 2. 발치와에치아싹을이식한실험군의조직소견..7 가. 발치와에치아싹을이식하고 2개월후조 직소견...7 나. 발치와에치아싹을이식하고 6개월후조 직소견...8 Ⅳ. 고찰...10 Ⅴ. 결론...15 - i -
참고문헌...16 사진부도설명...20 사진부도...22 영문요약...24 - ii -
그림차례 Fig. 1. Schematic illustration of tooth germ dissection...5 Fig. 2. Coronal section of extracted socket area of rat after 2 months tooth extraction...22 Fig. 3. Occlusal view finding of transplanted rat after 2 months...22 Fig. 4. Tooth-like structure of 2 months transplanted rat...22 Fig. 5. Occlusal view finding of transplanted rat after 6 months...22 Fig. 6. Coronal view finding of transplanted rat after 6 months...22 Fig. 7. Tooth-like structure of 6 months transplanted rat s extraction socket...22 Fig. 8. Tooth-like structure of 6 months transplanted rat...23 Fig. 9. Dentinal tubule pattern of 6 months transplanted rat...23 Fig. 10. Cementum and dentin formation pattern after 6 months...23 Fig. 11. Periodontal ligament fiber formation after 6 - iii -
-ivmonths...23 Fig. 12 Keratino-cyst like cell formation after 6 months...23 Fig. 13. Hair-like structure observed after 6 months...23
국문요약 흰쥐의악골에동종이식된태아치아싹의장기간발육 치아우식증이나치주질환으로치아를상실한경우여러가지방법으로치 료할수있고임플란트와치아이식에대한관심이많아지고있다. 이중에서 치아이식에대한성공률을높이기위해서치아형성과발달과정에대한많 은연구가이루어지고있다. 치아싹이식은생체내와생체외에서연구되고있고, 생체내이식은쥐와 생쥐, 고양이, 개등여러동물에서시행되고있다. 이러한생체내이식은대 부분구강외에서시행되고있으며구강내이식에대한연구는드물다. 본연구는악골내에이식된치아싹이발육되고석회화되는지관찰하기위 하여성숙한흰쥐의상악제 1구치를발치하고그발치와에임신 13.5일된 태아쥐에서모상기의하악제 1구치의치아싹을이식한후희생시켜방사선 학적그리고조직학적으로관찰하여다음과같은결과를얻었다. 1. 2개월과 6개월동안악골내에이식된치아싹은석회화된치아조직이형 성되었고치아조직에서상아질과백악질, 치수조직이관찰되었으며법랑질 공간주변은상피로둘러싸여있었다. 2. 이식된시간이경과함에따라치아형성이진전되었으나치아조직은크기 가작았고형태학적으로완전하지못하였다. 3. 6 개월동안구강상피하방에위치한치아조직은상피로둘러싸여있었고 주위에치주인대및결합조직이관찰되었다. -v-
본실험에서흰쥐의악골에이식된동종의치아싹은시간이경과함에따 라발육하였고석회화되었으나진행속도가늦었고형태학적으로작고완전 하지못하였다. 그러므로정상적인치아조직과형태로발육시키기위해서는 수여부조직의혈류공급및이식된치아싹의성숙정도, 이식하는방법등을 고려하여더많은연구가필요할것으로생각된다 핵심이되는말 : 악골, 치아싹, 이식, 발치와 -vi-
흰쥐의악골에동종이식된태아치아싹의장기간발육 < 지도교수최병재 > 연세대학교대학원치의학과 고동현 Ⅰ. 서론 치아우식증이나치주질환등으로치아가상실된경우수복하는방법으로 보철수복및임플란트가임상적으로널리사용되고있다. 그러나자연치가 아닌인공치로수복하는방법은기능과편의성등에서한계가있으므로치아 이식및재식에대한관심이늘어나고있다. 치아이식이란치아를한위치에서다른위치로옮기는술식이다 (Hoek, 1959). 치아이식을할경우건강한치아를유지할수있는장점이있으며, 이에대한연구가진행되고있다. 성공적인치아이식을위해서생체내에서 태아의치아싹을이식하는방법과생체외에서치아싹을배양하는것을통해치아형성과발육에대한많은연구가진행중이나아직치아이식의성공에필요한치아의발육에대한이해는부족한실정이다 (Koch, 1967; Fleming, 1952). 치아이식은이식대상에따라자가치아이식과동종치아이식, 이종치 - 1 -
아이식으로분류할수있다. 자가치아이식은같은개체내에서치아를한 부위에서다른부위로이식하는것이고, 동종치아이식은같은종내에서 치아를한개체에서다른개체로이식하는것이며, 이종치아이식은한종 으로부터다른종으로치아를이식하는것이다(Kerr, 1986). 이러한각개체 간의치아이식연구를통해치아발생및석회화에대한연구가이루어져왔 고치아발생과정에대하여알수있었다. 척추동물에서치아는상피와간엽의상호작용으로발생이시작되며, 조직 학적분화와형태발생, 광화과정을통해치아가완성된다. Sicher와 Bhaskar(1972) 는초기치아발생단계를뇌상기와모상기, 종상기, 치관기의네 단계로나누어설명하였다. 치아발생초기에는외배엽에서발생한구강상피 가치판과치유두를형성한고, 치유두가형성되면중배엽에서유래한간엽세 포가치아기를형성한다. 치아싹이식실험을통해치아는외배엽과중배엽 기원으로이루어진조직이며조직간의상호작용을통해치아발생을시작한다 는것이밝혀졌다 (Mina, 1987; Thesleff, 2002). 태아에서발생중인치아싹을분리한후동종이식하여발생을관찰하는 연구에서는, 치아싹이식을위해서생쥐와쥐, 햄스터, 기니피그, 토끼, 고양 이, 개, 원숭이, 햄스터, 도룡뇽등이사용되었다. 이중쥐의치아는형태학적 그리고생리학적으로사람의치아와유사하며조직학적으로사람과비슷하다 고하였다(Pinzon, 1965). 치아싹이식을위한공간으로복강벽과근육, 비강, 난소, 장골의골수강, 피하및겨드랑이공간, 복강, 두뇌의측방뇌실및반구, 전방안구등이사용되었다 (Hoffman, 1960; Weinreb, 1967; Ten Cate, 1996). 또한신피막하공간, 이낭, 포유류지방패드공간도이식부위로사용되었다 (Ishizeki, 1987). 이러한대부분의치아싹이식실험은이소성이식에대한연 - 2 -
구였다. Hewage(1990) 는이소성치아이식시에는치주인대의성숙이부족하 며치주인대형성과관련되어치아맹출이이루어지지않는다고하였고, 치주 인대형성에대한연구에는이소성이식이적합하지않다고하였다. 또한이 소성이식은발육중인치아싹에정상적인환경을제공해줄수가없는반면동소성이식은발육중인치아싹과유사한환경을제공한다고하였다 (Carlile, 1997). 발육중인치아싹을시험관에서배양하는것은치아발달을연구하는데좋 은모델을제공할수있다(Prime, 1980). 그러나이러한연구를통해서초기 치아싹의조직학적분화는될수있으나치아싹의석회화, 치관부성장이부 족하여치아싹의지속적인발달을관찰하는것에는한계가있었다 (Riviere, 1983; Vries, 1986). 본연구의목적은태아에서발생중인치아싹을악골내에이식후발육하 고석회화하는양상을관찰하여, 이소성부위가아닌발치와에이식시치아 싹의성장가능성을살펴보기위함이며이전연구와달리발치와에치아싹을 이식하여방사선학적그리고조직학적관찰을통해치아형성및석회화과정 을살펴보았다. - 3 -
II. 실험재료및방법 1. 실험재료 실험동물로사용한 Sprague-Dawley 계흰쥐는 ( 주) 샘타코 Bio Korea에 서출생하였으며무감염상태였다. 수여동물은체중 400g의 12마리수컷흰 쥐를사용하였으며, 연세대학교치과대학동물사육실에서온도 22±1, 습도 55% 에서사육하였다. 이식조직인치아싹은임신한흰쥐에서얻었으며, 교배 날을임신 0일로정하여임신 13.5 일의쥐를희생하여사용하였다. 2. 실험방법 가. 이식조직 임신 13.5일의태아쥐의하악에서제 1구치의치아싹을이식조직으로사용 하였다. 치아싹은무균상태에서현미경을사용하여 phosphate-buffer solution 에서 microneedle 을사용하여절제하였다. 절제된치아싹은 Millipore (Millipore corporation, Mass., U.S.A.) 를사용하여금속망에올리고 배지 (DMEM, Bio Whittaker, USA, 12-640F) + 20% FBS(fetal bovine serum, GIBCO, USA, 16000-044) 를첨가한배지에서보관하 였다. - 4 -
Fig. 1. Schematic illustration of tooth germ dissection 나. 이식술식 11 주가량사육된젊은흰쥐를수여체로사용하여이식술식을위해서마 취액을복강으로 1.5ml 주입하였다(0.375ml/100g). 마취액의비율은케타민 : 럼푼 : 식염수 = 17 : 3 : 20 로혼합하여사용하였다( 케타민, ketamine hydrochloride, 유한양행 50mg/ml ; 럼푼, xylazine hydrochloride, 바이엘코리 아 23.32mg/ml). 충분히마취가된것을확인후흰쥐를눕힌후에구강을기구로개구하 고잔존치근이남지않도록상악좌측제 1 구치를발치한후, 방사선사진 을촬영하여잔존치근유무를확인하였다. 발치와에치아싹을넣기용이하게 하기위해서저속핸드피스를식염수와함께사용하여치근간골을제거하였다. 4 에보관한하악제1구치치아싹을삽입하고 5-0 mersilk를사용하여발치와를봉합하였다. - 5 -
실험군은사육 2, 6 개월후에희생한뒤, 상악골을분리하여방사선학적 그리고조직학적소견을관찰하였으며, 대조군은발치를시행후치아싹을이 식하지않고 2 개월후에희생하여살펴보았다. 다. 방사선학적평가 이식후 2, 6 개월후에흰쥐를희생하여상악골을절제한후, 절제한상악 골의교합면과측면의방사선촬영을시행하였다 (Yoshida X-707, 70kV, 7mA, 0.15s, Dental Intraoral E-Speed Film, Kodak). 라. 조직학적평가 절제된상악골을 10% neural buffered formalin 에고정하였다. 그후 EDTA (Ethylene Diamine Tetra Acetic Acid) 용액에 2-3일간탈회하였으며 탈수후에파라핀으로포매하고 10 μm 간격으로연속적인슬라이드표본을 제작하였다(Microtom, Germany). 표본에 Harris' hematoxylin-eosin 염색법 을시행하여현미경(Olympus, Japan) 상에서관찰하였다. - 6 -
Ⅲ. 결과 1. 발치와에치아싹을이식하지않은조직소견 흰쥐의상악좌측제1구치를발치하고2개월후에희생하여상악골을방 사선사진으로관찰하였을때발치와와인접한제 2 구치가보였다. 조직학적 인관찰에서는발치와에골조직이형성되어있었으며상방은결합조직으로 채워져있었다 (Fig. 2). 2. 발치와에치아를이식한실험군의관찰 전체실험군 11마리중 4 마리에서치아의석회화가진행되었다. 2개월후 희생한쥐중 2 마리, 6개월후희생한쥐중 2마리에서치아형성의소견이 관찰되었다. 방사선학적과조직학적으로치아형성에대하여관찰을하였다. 가. 발치와에치아싹을이식하고 2개월후조직소견 방사선학적소견에서는 2개월후희생한흰쥐의발치와에특이할만할방 사선불투과성양상을나타내지않았다(Fig. 3). 조직학적소견에서는치아조 직이제 1 구치의발치와에서관찰되었다. 발치와에상아질이형성된것이관 찰되며상아질주변으로상피및결합조직이둘러싸고있는양상이었다. 전 체적인외형은치아의형태를가지지않는불규칙한형태를가지고있었다 - 7 -
(Fig. 4). 나. 발치와에치아싹을이식하고 6개월후조직소견 방사선학적소견에서는 6개월후희생한흰쥐의발치와에방사선불투과 성양상이관찰되었다. 교합면에서본방사선사진에서는치아의구개측에방 사선불투과성양상이관찰되었다. 인접치아와비교해볼때약 1/4가량되는 정도되는크기였다(Fig. 5.). 측면에서살펴본방사선사진에서는악골의상방 에방사선불투과성의소견을보였다(Fig. 6). 방사선불투과성의정도는이 웃한제2 구치와비슷한정도이었으며, 발치와하방으로방사선투과성이보 이는부위도있었다. 조직학적소견에서는발치와의상피하방및인접제 2구치측면으로치아 에해당하는조직이관찰되었다(Fig. 7, 8). 전체적인외형을관찰하였을때 치관부가형성되었고상아질상방으로탈회된법랑질공간을관찰할수있었 다. 그러나치관의좌측에서는상아질이분리된소견이관찰되며이는표본 제작과정에서발생하였다(Fig. 8). 백악질및치주인대가관찰되는것으로보 아치아지지조직이형성되었음을알수있었다. 치아상피가법랑질공간상방으로형성된것이관찰되며치아상피가상방 에있는구강상피와연결된상피성도관의양상도관찰되었다. 치아주변으로 법랑질공간과이웃한부위이외에서도상피세포들이관찰되었고치아주변은 결합조직으로둘러싸여있었다. 상아질은상아세관으로구성되어있었으며, 상아세관은평행하게배열되어 있었다(Fig. 9). 상아질내면으로는광화가덜이루어진, 옅게염색된상아전 - 8 -
질이있는소견도관찰할수있었다. 백악질은조직학적으로골과유사하였 고입방형이거나방추형의백악모세포를포함한세포성백악질이관찰되었으 며혈관조직은없었다. 백악질은치근중앙부로함몰되어들어가있는모습 이었다 (Fig. 10). 치주인대가형성된소견도관찰되었는데섬유모세포와방향성을가진샤아피섬유가관찰되었고백악질과골조직사이에위치하고있었다 (Fig. 11). 석회화조직주변으로는케라틴을포함하고있는낭종형태의조직이관찰되었고(Fig. 12), 상피하방으로모발과유사한구조도관찰되었다(Fig. 13). - 9 -
Ⅳ. 고찰 치아이식및배양을통해치아의생성및발생과정이연구되고있다. 치 아발생은상피와간엽, 즉외배엽과중배엽의상호작용으로시작한다. 구강 상피가치판을형성하고상호작용으로치유두를형성한다(Kollar, 1970). 초기 치아형성과정은치유두가형성되면간엽세포가치아기를형성하며치아발생 이시작된다 (Thesleff, 1997; Mina, 1987). 쥐의치아발생에있어서상피와간엽의관계는임신 9-10일까지구강상 피에서치아형성을할수있다. 발생초기의제 1아가미궁상피세포는치아 발생능력을가지고있고치아기원이아닌간엽세포와만나치아발생을시 작하며그이후에는치아발생능력이떨어진다(Kollar, 1980). 간엽세포는임 신 11 일까지치아발생을시작하지않다가그이후에치아발생을시작하며, 12 일경부터치유두를형성하는능력이있다(Lumsden, 1979; Richman, 1986). 흰쥐의치아발생을살펴보면하악제 1구치의치아싹은임신 11일경에 4-5층의비후해진상피증식이나타나기시작하고 12일경에는상피가증식 이되어서치판을형성을하며가장자리가외배엽성간엽과연결된다. 13일경 말단부의비후가나타나며 14일경에는치아싹의분화가일어나는시기로내 치상피와외치상피의전방부에서분화를시작한다 (Kollar, 1972; Barrett, 1981). 임신 15 일경에는성상세망이나타나며종상기가시작된다. 출생직전 즉임신 19일치아싹은발달된종상기로서법랑모세포가신장되어있으나아 직법랑질, 상아질의발생이시작되지않는시기이다(Hoffman, 1960; Klein, 1971). - 10 -
이런전체적인치아싹의발육동안임신 13.5일의치아싹은뇌상기에서모 상기로이환되는시기로치아의치관이형성되는시기이다. 이때치아싹은 내치상피가접히는부위에서일차법랑결절이형성되며다양한신호전달물질 이발현되어치아발육이진행된다. 치아싹을생체내및생체외로이식하여치아형성및발육을살펴보는실 험은여러차례진행되었다. 생체외에서치아싹을배양하는경우초기치아 조직의분화는용이하였으나치근형성및진전된치아형성을유도하기는어 려웠다. 치아싹을이소성위치인전방안구및비장, 신장등에이식하는실험에서 는치아형성이빠르게진행되었다. 그러나이러한실험들은치아의발생환경 인악골에이식하지않았으므로치아의정상적인환경과다르며, 치아의기 능을수행할수없는위치이므로한계가있었다 (Carlile, 1998). 이번연구에서는치아를동소성위치, 즉발치와에치아싹을이식하여발 육과정및치아형성에있어조절요소를찾고자하였다. 이번실험은같은종의치아싹을다른개체로이식한동종치아이식이며 면역학적고려를해야한다. 치아이식시면역반응은비특이적또는지연형 거부반응이일어난다고하였으며, 치아조직의점진적인흡수가일어난다고 하였다(Kerr, 1986). 그러나 Cserepfalvi(1959) 는면역반응은치아이식에있어 서중요하지않다고하였으며, 이번실험에사용된임신 13.5일의치아싹은 태아의줄기세포에포함되는것으로면역반응이크지않다고알려져있다. 이번실험결과를살펴보면경조직인발치와에이식하였지만치아형성을 개시하였다. 이는골과결합조직, 상피로둘러싸인발치와에혈류공급이제한 된상태에서치아발생이된것으로의미가있다. - 11 -
형태학적인측면에서정상적인구치의형태를이루지못하였고크기는정 상적인치아보다작았다. 이에대해서치아싹이식의성공은조직삼출액의 투과가아니라이식된조직에전달되는혈관을통한풍부한혈류및산소와 관련이있다고 Isizeki(1987) 등이말하였다. 치아주변특히치관부주위로상피세포가관찰되었다. 이는치아싹에서유 래된치아상피로서점막의구강상피와는기원이다른조직이다. 다만정상적 으로발생하고있는치아상피에비해서상피세포수가많은데, 그이유는치 아싹을태아로부터절제시구강상피와함께절제될수있기때문으로여겨진 다. 치아싹의크기는 20-80μm 로서완전한절제가힘들고, 완전히절제할경 우치아싹이손상될가능성이높기때문에대개협설면에여분을남기고절 제한다 (Lumsden, 1979). 상아질과백악질은조직학적으로정상적으로발달하였으며, 이는백악질형 성이잘배열된상아질기질과관련되어있기때문인것같다 (Ishizeki, 1987). 다만형태적인측면에서불규칙하게형성된양상을보였다. 치아의위치는구강상피의직하방에위치하였으며, 구강상피와치아상피가 만나는상피성도관의양상이관찰되었다. 이는치아가구강내로맹출하기전 의상태로볼수있다. 다만치근의성장이부족하기때문에정상적으로맹 출하였다고볼수없으며이식시의치아싹의위치에따라서이러한결과가나타날수도있다. 상피하방으로케라틴성낭및모발과유사한구조물이관찰되었는데이것은치아싹절제시치아싹뿐만아니라피부상피까지도포함되었기때문인것 같다. 이에대해서는치아싹을절제시좀더조심스런절제가필요할것으로 보인다. - 12 -
전체적으로치아형성은이루어졌으나흰쥐구치부의특징적인치아형태를 나타내지는못했다. 그이유로는치아싹의이식시기와관련지어설명할수 있다. 이식하는치아싹은초기모상기의치아싹으로일차법랑결절이나타나 는시기이며교두의외형을형성하는이차법랑결절이발생되지않는시기이 다. 이로인해 7개의교두를가지는흰쥐구치의형태가나타나지않았을수 있다. 좀더완전한치아형태를얻기위해서는치아싹을보다늦은시기, 즉임 신 19 일가량의태아치아싹를이식하는것을고려해볼수있다. Granholm(1984) 은이시기가발달된종상기로서아직석회화가시작되지는 않았으나치아의외형형성및조직학적분화는어느정도이루어져있는시 기라고하였다. 또한이시기는치아싹이결합조직과잘구분되며주변의치 조골과도잘구별되는시기라고하였다. 혈류및산소공급측면도고려해보아야한다. 신장과비장, 전방안구등 에는치아의발생이빠르게이루어졌는데이부위들의공통점은모두혈류공 급이풍부한장기라는점이다. 반면발치와는결합조직및치밀골로이루어 져있으며제한된혈류를가지고있다. 발치와에와동을형성하여치밀골을 어느정도제거하면, 치아싹이식의성공률을높일수있을것으로사료된다. 신경분포도고려해야한다. 치아형성에있어서신경의분포가치아형태및 위치에중요한역할을하게된다(Flemming, 1952). 그러나 Lumsden(1986) 의 실험에서밝혀냈듯이신경절을제거한치아싹에서도치아가발생하는것을 고려한다면치아발생이일단시작되면신경조직의존재는크게중요하지않 다는것을알수있다. 이번실험은동종간에치아를이식하였기때문에면역학적관점에서살펴 - 13 -
보아야한다. 치아싹이식의적합성은이식후의상아질과치수조직의형성, calciotraumatic line 및원형세포침윤이없는것을특징으로하고있다(Kerr, 1986). 이번이식에서는상아질및치수세포가형성되어존재하고있었으며, 원형세포들이침윤되지않았으므로면역학적거부반응은없었다고할수있 다. 치아를발치와에이식하는기간을살펴보면장(2003) 의실험에서는치아싹 을이식한후에 4주및 8 주동안치아조직이형성되는소견을얻었다. 다만 형태학적으로발달이늦었으며악궁으로맹출하는소견을보이지않았다. 이 번연구에서는형성된치아조직이상피하방에위치함으로서맹출가능성을 보여주었고 4주및 8주후의치아조직보다는좀더치아에가까운형태를가졌 지만, 흰쥐의구치부의특징적인형태를나타내지않았으며조직학적인각 치아구조의분화및성장측면에서는큰차이가없었다. 흰쥐의제 1구치치 아형성의개시는임신 11일경에시작하며맹출은출생후 18일경에시작하 는것을고려할때(Pinzon, 1965), 흰쥐의치아싹을이식후장기간관찰하면 정상적인치아성장과발달에비교하여느린성장임을알수있었다. 본실험방법을통하여치아를계속적으로발생시키는요소를찾아볼수 있다. 이번실험을통해서치아싹을정상형태로발생시키는데중요한요소로 치아싹으로원활한혈류공급과, 치아싹이식의시기의조절을통해치아형태 및성장을개선시킬수있으리라생각된다. - 14 -
Ⅴ. 결론 본연구에서는태아에서발생중인치아싹을악골내에이식후발육하고 석회화되는양상을알아보았으며이소성부위가아닌원래악골내치아위치 에이식함으로써성장가능성을살펴보았고, 발치와에치아를이식함으로써 방사선학적및조직학적으로치아발육및석회화과정을살펴보아다음과같 은결과를얻었다. 1. 2개월과 6개월동안악골내에이식된치아싹은석회화된치아조직이형 성되었고, 치아조직에서상아질과백악질, 치주인대가관찰되었으며법랑질 공간주변은상피로둘러싸여있었다. 2. 이식하는기간에따라치아형성이진전되었으나치아조직은크기가작았 고형태학적으로불완전하였다. 3. 구강상피하방에위치한치아조직은상피세포로둘러싸여있었고주위에 치주인대및결합조직이관찰되었다. 본실험에서흰쥐의악골에이식된동종의치아싹은석회화되었고시간이 경과함에따라발육하였으나, 진행속도가느렸으며형태학적으로작고완전 하지못하였다. 그러므로정상적인치아조직과형태를갖도록발육시키기위 해서는수여부조직의혈류공급및이식된치아싹의성숙정도, 치아싹을이 식하는방법등을고려하여보다많은연구가필요할것으로생각된다. - 15 -
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사진부도설명 Fig. 1. Schematic illustration of tooth germ dissection Fig. 2. Coronal section of extracted socket area of rat after 2 months tooth extraction (X100) E : extraction site Fig. 3. Occlusal view finding of transplanted rat after 2 months E : extraction site Fig. 4. Tooth-like structure of 2 months transplanted rat (X100) T : Newly formed tooth structure Fig. 5. Occlusal view finding of transplanted rat after 6 months Arrow : Newly formed radiographic area Fig. 6. Coronal view finding of transplanted rat after 6 months Arrow : Newly formed radiographic area Fig. 7. Tooth-like structure of 6 months transplanted rat s extraction socket (X50) T : Newly formed tooth structure, 2nd : 2nd molar Fig. 8. Tooth-like structure of 6 months transplanted rat (X100) OE:oralepithelium,DE:dentalepithelium,ES:enamelspace,D: dentin, C: cementum, P: pulp Fig. 9. Dentinal tubule pattern of 6 months transplanted rat (X400) DT : dentinal tubule, P : pulp Fig. 10. Cementum and dentin formation pattern after 6 months transplanted rat (X400) - 20 -
D: dentin, C: cementum Fig. 11. Periodontal ligament fiber formation after 6 months (X200) PD : periodontal ligament, C : cementum, D: dentin Fig. 12. Keratino-cyst like cell formation after 6 months(x200) K : keratino cyst like cell Fig. 13. Hair like structure observed after 6 months (X100) H:hairlikestucture - 21 -
사진부도 Fig. 3 Fig. 3 Fig. 4 Fig. 5 Fig. 6 Fig. 7-22 -
Fig. 9 Fig. 10 Fig. 11 Fig. 12 Fig. 13 Fig. 14-23 -
Abstract The long-term growth of homogeneous embryo tooth germ transplanted into the maxilla of a rat Dong Hyun Ko Department of dentistry The Graduated school, Yonsei University (directed by Professor Byung Jai Choi) In case of missing tooth caused by dental caries or periodontal disease, it can be restored by various methods, and there has been much interest in implant and tooth transplantation. The success of tooth transplantation is going to be attained through the knowledge of growth, development and calcification of tooth. Tooth transplantation has been experimented in vivo and in vitro. Many animals such as rats, mice, cats and dogs are used for tooth transplantation experiment in vivo. In most experiments, tooth was transplanted into the extraoral site, but rare into the intraoral site. In this study, the first molar of a matured white rat was extracted and the cap stage tooth germ of a 13.5 Embryonic day embryo rat was transplanted into the extracted socket. The purpose of this study was to - 24 -
observe the capacity of formation and mineralization of tooth germ. The rats were killed and observed. The radiographical and histological results are as followings. 1. Tooth germ transplanted for 2 and 6 months are developing calcified tooth material such as dentin, cementum, pulp tissue, and epithelium around enamel space in the maxilla was seen. 2. Tooth formation was progressed as transplantation period, but the size of newly formed tooth was small and the shape of tooth was incomplete. 3. The epithelium around enamel space was located beneath the oral epithelium and contained connective tissue and periodontal ligament. From this study, I could conclude that tooth germ transplanted in maxilla of rat was calcified and developed as time goes by, but the rate of the development of transplanted tooth germ was slower than normal tooth germ and the anatomical shape was incomplete. Further study is needed about transplantation of tooth germ in matured stage and improvement of blood supply on transplanted site should be considered. Key words: maxilla, tooth germ, transplantation, alveolar socket - 25 -