(19) 대한민국특허청 (KR) (12) 등록특허공보 (B1) (51) 국제특허분류 (Int. Cl.) A23L 1/212 (2006.01) A23L 1/29 (2006.01) A23L 1/30 (2006.01) (21) 출원번호 10-2012-0103165 (22) 출원일자 2012 년 09 월 18 일 심사청구일자 (56) 선행기술조사문헌 KR100962587 B1* KR1020030015964 A* KR100886873 B1 KR100864954 B1 2012 년 09 월 18 일 * 는심사관에의하여인용된문헌 (45) 공고일자 2012년12월13일 (11) 등록번호 10-1211937 (24) 등록일자 2012년12월07일 (73) 특허권자 주식회사들레네 서울특별시송파구오금로 87,720( 방이동, 잠실리시온오피스텔 ) (72) 발명자 하숙 서울특별시송파구오금로 32 길 14 삼성아파트 10 7 동 1901 호 오태경 서울특별시송파구오금로 32 길 14 삼성아파트 10 7 동 1901 호 (74) 대리인 최규환 전체청구항수 : 총 3 항심사관 : 최윤상 (54) 발명의명칭 101 가지산야초추출액을이용한항염효과를갖는기능성산야초발효물 (57) 요약 본발명은 101 가지산야초를이용하여제조되는것을특징으로하는산야초발효물의제조방법, 상기방법으로제조된산야초발효물및산야초발효물을이용하여제조된가공식품에관한것으로, 본발명의방법으로제조된산야초발효물은산야초특유의풋내가나지않아기호성이증진되고, 항염증효과등의기능성을지님으로써기존의산야초를이용한발효물과는차별화된산야초발효물을제공할수있다. 대표도 - 도 1-1 -
특허청구의범위청구항 1 (a) 황기 (Astragalus membranaceus Bunge var. membranaceus), 당귀 (Angelica gigas NAKAI), 사철쑥 (Artemisia capillaris), 더덕 (Codonopsis lanceolata (S. et Z.) Trautv), 도라지 (Platycodon grandiflorum (JACQ) A. DC), 달래 (Allium monanthum), 냉이 (Capsella burapastoris), 칡 (Pueraria thunbergiana Benth), 솔잎 (Pinus densiflora Siebold & Zucc), 민들레 (Taraxacum mongolicum), 찔레나무 (Rosa multiflora Thunberg), 쑥 (Artemisia princeps Pamp), 뽕잎 (Fatoua villosa (Thunberg) Nakais), 다래나무 (Actinidia arguta (Siebold & Zucc.) Planch. ex Miq), 생강나무 (Lindera obtusiloba Blume var. obtusiloba), 한삼덩굴 (Humulus japonicus Sieboid & Zucc), 곰취 (Ligularia fischeri (LEDEB.) TURCZ), 망초 (Erigeron canadensis L.), 쇠뜨기 (Equisetum arvense L), 쇠비름 (Portulaca oleracea L), 엉겅퀴 (Cirsium japonicum var. maackii (Maxim.) Matsum.), 국화 (Dendranthema Grandiflorum Kitamura), 참느릅나무 (Ulmus parvifolia Jacq), 닭의장풀 (Commelina communis L), 산초나무 (Zanthoxylum schinifolium S. et Z), 갈대 (Phragmites australis (Cav.) Trin), 두충나무 (Eucommia ulmoides Oliv), 여뀌 (Persicaria hydropiper (L.) SPACH), 화살나무 (Euonymus alatus (Thunb.) Siebold), 미나리 (Oenanthe javanica (Blume) DC), 돌나물 (Sedum sarmentosum Bunge), 고들빼기 (Crepidiastrum sonchifolium Max), 엄나무 (Kalopanax septemlobus Koidz), 잣나무 (Pinus koraiensis Siebold & Zucc), 씀바귀 (Ixeris dentata (Thunb.) Nakai), 참취 (Aster scaber Thunb), 오리나무 (Alnus japonica (Thunb.) Steud), 머위 (Petasites japonicus (Siebold & Zucc.) Maxim), 익모초 (Leonurus sibiricus L), 칼퀴나물 (Vicia amoena FISCH), 짚신나물 (Agrimonia pilosa Ledeb), 참나리 (Lilium lancifolium), 고사리 (Pteridium aquilinum var.latiusculum (DESV) UNDERW), 두릅 (Aralia elata (Miq.) Seem), 박하 (Mentha arvensis var. piperascens), 구절초 (Chrysanthemum zawadskii subsp. latilobum (Maxim.) Kitag), 꿀풀 (Prunella vulgaris var. lilacina Nakai), 마타리 (Patrinia scabiosaefolia), 잔대 (Adenophora triphylla var. japonjca Hara), 오이풀 (Sanguisorba officinalis L), 둥굴레 (Polyginatum odoratum Ohwi), 산돌배 (Pyrus ussuriensis Maxim. var. ussuriensis), 서양산사자 (Crataegus oxyacantha L), 오미자 (Schisandra chinensis (Turcz.) Baill), 다래 (Actinidia arguta Planchon), 오디 (Morus alba L), 머루 (Vitis amurensis var. coignetiae (PULLIAT) NAKAI), 이질풀 (Geranium nepalense subsp. thunbergii (S. et Z.) HARA), 차풀 (Chamaecrista nomame Honda), 우산나물 (Syneilesis palmata), 싸리나무 (Lespedeza bicolor Turcz), 가죽나무 (Ailanthus altissima (Mill.) Swingle for. altissima), 방아풀 (Isodon japonicus), 제비꽃 (Viola mandshurica W.Becker), 수리취 (Synurus deltoides (AITON) NAKAI), 좁쌀풀 (Lysimachia vulgaris var. davurica (Ledeb.) R. Kunth), 헛개나무 (Hovenia dulcis Thunb), 마디풀 (Hovenia dulcis Thunb), 진득찰 (Siegesbeckia glabrescens MAKINO), 속단 (Phlomis umbrosa TURCZ), 느티나무 (Zelkova serrata MAKINO), 왕고들빼기 (Lactuca indica), 삽주 (Atractylodes ovata (Thunb.) DC.), 향유 (Elsholtzia splendens Nakai), 며느리배꼽 (Persicaria perfoliata (L.) H.Gross), 소엽 (microphyll), 칡꽃, 약모밀 (Houttuynia cordata Thunb), 연잎 (lotus leaf), 산쑥 (Artemisia montana Pampan), 진달래꽃 (Rhododendron mucronulatum Turcz), 원추리 (Hemerocallis fulva (L.) L), 당근 (Dacus carota), 연근 (Nelumbo nucifera GAERTN), 참소리쟁이 (Rumex japonicus Houtt), 으아리 (Clematis terniflora var. mandshurica (Rupr.) Ohwi), 돼지감자 (Helianthus tuberosus), 케일 (Brassica oleracea L. var. acephala (DC.) Alef), 쑥부쟁이 (Aster yomena (Kitam.) Honda), 측백나무 (Thuja orientalis L), 인동 (Lonicera japonica), 쑥갓 (Chrysanthemum coronarium L), 쇠무릎 (Achyranthes japonica (MIQ) NAKAI), 찔레꽃 (Rosa multiflora Thunb. var. multiflora), 삼백초 (Saururus chinensis BAILL), 블루베리 (Vaccinium corymbosum L), 고비 (Osmunda japonica Thunb), 피나무 (Tilia amurensis Rupr), 수영 (Rumex acetosa L.), 산딸기 (Rubus crataegifolius Bunge) 및산수유 (Cornus officinalis S. et Z) 의 101가지산야초에비피도박테리움 (Bifidobacterium), 스트렙토코커스 (Streptococcus), 엔테로코커스 (Enterococcus), 프로피오니움 (Propionium) 및류코노스톡 (Leuconostoc) 으로이루어진군으로부터선택되는하나이상의생균제또는사카로마이세스엘립소이더스 (Saccharomyces ellipsoideus), 사카로마이세스포르모센시스 (Saccharomyces formosensis), 사카로마이세스카를스베르겐시스 (Saccharomyces carlsbergensis), 사카로마이세스맨드슈리커스 (Saccharomyces mandshuricus) 및사카로마이세스코린너스 (Saccharomyces coreanus) 의사카로미세스속 (Saccharomyces sp.) 중에서선택되는하나이상의효모와로즈마리 (Rosemary), 라벤더 (Lavender), 세이지 (Sage), 타임 (Thyme), 페퍼민트 (Peppermint), 오레가노 (Oregano), 레몬밤 (Lemonbalm), 레몬버베나 (Lemon Verbena), 안젤리카 (Angelica), 바질 (Basil Sweet), 보리지 (Borage), 코리안더 - 2 -
(Coriander), 데이지 (Daisy), 딜 (Dill), 휀넬 (Fennel), 제라늄 (Geranium), 헬리오트러프 (Heliotrope), 히솝 (Hyssop), 아이리스 (Iris), 아이비 (Ivy), 쟈스민 (Jasmine), 마조람 (Marjoram), 매도우스위트 (Meadowsweet), 민트 (Mint), 머그워트 (Mugwort), 머스타드시드 (Mustard Seed), 펜시 (Pansy), 로즈 (Rose), 루 (Rue), 서던우드 (Southernwood), 발레리안 (Valerian), 버베인 (Vervain), 웜우드 (Wormwood), 앰버그리스 (Ambergris), 아미리스 (Amyris), 아니스스타 (Anise-Star), 아보카도 (Avocado), 베이 (Bay), 벤조인 (Benzoin), 버거못 (Bergamot), 버취 (Birch), 까유풋 (Cajuput), 캠퍼 (Camphor), 캐러웨이 (Caraway), 카더먼 (Cardamon), 캐시어 (Cassia), 캐스터리움 (Castoreum), 세다우드 (Cedarwood), 셀러리 (Celery), 시나몬 (Cinnamon), 씨트로넬라 (Citronella), 씨빗 (Civet), 클로우버버드 (Clove Bud), 쿠민 (Cumin), 싸이프레스 (Cypress), 엘레미 (Elemi), 유컬립터스 (Eucalyptus), 펜넬 (Fennel), 프랭킨센스 (Frankincense), 갈바늄 (Galbanum), 그레이프프루트 (Grapefruit), 과이악우드 (Guaiacwood), 히솝 (Hyssop), 이머텔 (Immotelle), 아이리스 (Iris), 호호바 (Jojoba), 쥬니퍼 (Juniper), 라빈딘 (Lavandin), 라벤다스파이크 (Lavenda Spike), 레몬 (Lemon), 레몬그라스 (Lemongrass), 라임 (Lime), 린던브로섬 (Linden Blossom), 리치아쿠베바 (Litsea Cubeba), 맨더린 (Mandarine), 마저럼스웨트 (Marjoram Sweat), 머르 (Myrrh), 머틀 (Myrtle), 네롤리 (Neroli), 니아올리 (Niaouli), 너트멕 (Nutmeg), 오렌지 (Orange), 오렌지발삼 (Orange Balsams), 파츌리 (Pachouli), 팔마로자 (Palmarosa), 페티그렌 (Petigrain), 피멘토 (Pimento), 파인니들 (Pine Needle), 로즈 (Rose), 로즈우드 (Rosewood), 샌들우드 (Sandalwood), 산톨리나 (Santolna), 스피아민트 (Spearmint), 스위트아몬드 (Sweet Almond), 타게티스 (Tagetes), 탠저린 (Tangerine), 타라곤 (Tarragon), 티트리 (Tea Tree), 테러빈스 (Terebinth), 통카콩 (Tonca Bean), 버비너 (Verbena), 베티버 (Vetivert), 바이올렛 (Violet), 맥아 (Wheatgerm), 얘로우 (Yarrow) 및일랑일랑 (Ylang Ylang) 으로이루어진군으로부터선택되는하나이상의허브식물및설탕을혼합하여혼합물을제조하는단계 ; 및 (b) 상기혼합물을 40~50 에서 12~16일동안 1차발효하고, 20~30 에서 25~35일동안 2차발효한후, 0~10 에서 1~6년간 3차발효및숙성시킨후여과하는단계를포함하여제조되는것을특징으로하는항염효과를갖는산야초발효물의제조방법. 청구항 2 삭제청구항 3 삭제청구항 4 삭제청구항 5 제1항의방법에의해제조된항염효과를갖는산야초발효물. 청구항 6 제5항의산야초발효물을이용하여제조된가공식품. 명세서 [0001] 기술분야 본발명은 101 가지산야초를이용하여항염효과를갖게제조되는것을특징으로하는산야초발효물의제조방 법, 상기방법으로제조된산야초발효물및산야초발효물을이용하여제조된가공식품에관한것이다. [0002] [0003] 배경기술 TNF는단핵세포및대식세포를포함하여, 다양한형태의세포에의하여생성되는일종의단백질이다. 최소한 2 개의 TNF, 특히 TNF 알파및 TNF 베타 ( 림포톡신 (lymphotoxin)) 가종전에기술되어왔다. 이들공지의 TNF는염증성반응에내포된수많은상이한표적세포에중요한병리학적효과를갖고있다. 단백질은섬유아세포및활막세포들이잠복성콜라게나제 (collagenase) 및프로스타글라딘 E2(Prostagladin E2) 를분 - 3 -
비하게하며, 성골세포가골흡수를이행하게한다. [0004] [0005] [0006] [0007] [0008] [0009] [0010] [0011] 이들단백질은중성친화성을위한내피세포의표면접착성을증가시킨다. 이들은또한내피세포가혈액응고활성을분비하도록하여응혈괴를융해하는능력을감소시킨다. 또한이들은효소리포단백질리파제의발현을억제하여저장된리피드로부터지방세포의활성을멀어지게한다. TNF는간세포로하여금 " 급성기반응체 "("acute phase reactauts") 로알려진일종의단백질을합성시키게하며, 그들은시상하부 (hypothalamus) 에발열인자로작용한다. 이들활성을통하여, TNF는스트레스, 감염및상해에대한유기체의반응에있어서중요한역할을하는것으로알려졌다 (Lancet, 1988.2. 27, 483p P. J. Selby 등 ; J. Clin. Invest. 82:1321(1988) H. F. Starnes, Jr. 등 ; 세포 (Cell) 50:553(1987) A. Oliff 등 ; 및 Lancet, 1987.2.14, 355p A. Waage 등 ). 그러나이와같은정상적인유용한작용에도불구하고, TNF의작용은유해한것으로밝혀지게되었다. 예를들면, 동물에주사된 TNF-α는패혈증성쇼크의증상을일으키며, 박테리아또는세균세포벽의주사에따라내인성 TNF량이증가하는것이관측되었다. TNF는또한장관괴사 (bowel necrosis) 및급성폐장장해를일으키며, 근육단백질의물질분해대사를자극한다. 또한, 관절에콜라게나제의양을증가시키고백혈구및림파구의주화 (chemotaxix) 및이동을지시하는 TNF의능력은또한, 이질병에서의연골의열화및활액막조직의식의원인이될수있다. 따라서, TNF는류마티즘성관절염에있어서, 급성및만성단계의면역병리학양쪽의매개물질로서의역할을할수있다. TNF는또한내피세포의변화를통한일부응혈질환의원인이될수있다. 또한, 과잉의 TNF 생성이 AIDS 환자에게서검출되어, 이와같은질병및백혈병에서보이는일부발열성반응및악태증의원인이될수있다. TNF가유해한작용을하는상기및기타환경하에, 확실한임상용 TNF 작용억제제가있다. 조직적으로복용하면, TNF 억제제는패혈증성쇼크및악태증의치료에유용하다. 국부적으로적용하면, 상기 TNF 억제제는염증이생긴관절및기타염증부위의조직파괴를방지하는역할을한다. 사실상, 상기 TNF 억제제는인터루킨- I(IL-1) 억제와함께복용하면더욱효과적이다. 패혈증과같은다발성염증에의하여발생된내독소는대식세포, 림프구들을자극하게되고이들자극을받은면역세포는 TNF-a, IL-1, IL-6 및 IFN-r등의다양한사이토카인의분비와 inos 및 COX-2 효소활성증가가중요한역할을한다. 분비된사이토카인은호중구및단핵세포를자극하게되며, 이들의세포내에존재하는 NADPH dependent 산화효소계를작동시켜유리산소기 (oxygen free radical) 를생성하여장기에손상을일으키며 (Babier & Peters, 1981; Cross, 1987; Klebanoff et al., 1986), 사이토카인과염증매개효소에의해자극을받은다핵구는점도가증가하여혈관내벽에잘붙게되고, 울혈이일어나게되며산화제의생성을가속화시켜장기손상을악화시킨다 (Mandell, 1988). 다량으로발생한유리산소대사물질은체내에서염증을조장하고대식세포의식작용을저해하며세포내 DNA의변형등을일으키게되어, 세포막의손상을일으키며투과성을증가시켜세포의기능을상실하게된다. 따라서근본적인염증치료및억제를위해서는발병인자와활성산소종간의상호기전연구와효과적인억제효능물질에대한연구가필요한실정이다. 이러한복합적인반응을하는동안, 히스타민, 5-히드록시트립타민, 브래디키닌, 로이코트리엔및프로스타글란딘과같은화학적매개물질들이국소적으로유리된다. 식세포가이영역으로이동하고, 세포의라이소좀막이파괴되어서분해효소를방출한다. 이러한모든작용은염증반응의원인이될수있다. 항염증제, 진통제및해열제는흔히화학적으로관련이없는다른군들의화합물들이나, 특정치료작용및부작용을공유한다. 천연및합성코르티코스테로이드제제는혈압상승, 염및물의정체, 신장손상, 칼륨및칼슘분비의증가를비롯한수많은부작용을일으킨다. 스테로이드계물질의부작용을극복하기위해비스테로이드계항염증성작용물질 (NSAID) 들이개발되어왔다. 이들중가장광범위하게사용되는것이살리실산염이다. 아세틸살리실산또는아스피린은가장널리사용되는진통-해열및항염증성물질이다. 하지만다량투여시부작용을나타낸다고보고되어있다. 예를들면, 호흡촉진현상, 순환계붕괴, 상복부통증, 구토, 위장출혈, 간손상, 혈소판저해등다양한부작용이알려져있다. 따라서많은종류의항염증성물질이사용되고있음에도불구하고, 부작용이없고우수한항염효능을보유한물질의필요성이여전히요구되고있다. 국내에서자생하고있는식물자원중에서식, 약용식물은약 120과 350속으로이중에서산채류는 320여종으로지역적으로도전국에걸쳐고루분포하고있다. 녹황색채소류를비롯한각종산야초류들은각종비타민류, 무기물류, 색소류및각종특수성분등의중요한영양소를풍부하게함유하고있어건강의유지, 개선및질병예방에크게기여하고있다. 그러나대부분의식물자원은다량의수분을함유하고있어저장성이취약하기때문에 - 4 -
저장성과기능성향상을위한식품가공이필요하다. [0012] [0013] 발효식품은식품저장성이우수하여보존성과위생상안전성이확보되는경제적인식품이다. 식품을발효함으로써고분자물질이저분자물질로분해되어소화흡수율을높이고, 새로운풍미생성으로기호성이증대될뿐만아니라생리활성을갖는성분이생성되어, 최근에는발효식품에서 3차기능효과가있는유용한물질탐색및발효대사의연구가활발하게진행되고있다. 한국등록특허제0864954호에는장기저장을위한산야초가공방법이개시되어있고, 한국등록특허제0886873호에는유산균에발효된기능성산야초추출액의제조방법이개시되어있으나, 본발명의 101가지산야초를이용한산야초발효물의제조방법과는상이하다. 발명의내용 [0014] 해결하려는과제본발명은상기와같은요구에의해안출된것으로서, 본발명의목적은한국산야초의특유성과우수한약효성에착안하여, 천연영양성분과천연항생물질을함유하고있는 101가지산야초를이용하여산야초발효물을제조함으로써, 부작용이없이항염증효과를나타내고, 각종병에대한면역력을증가시키며신진대사를활발하게작용시킬뿐만아니라기호도가향상되어누구나손쉽게섭취할수있는산야초발효물을제공하는데있다. [0015] [0016] [0017] 과제의해결수단상기과제를해결하기위해, 본발명은 101가지산야초를이용하여항염효과를갖게제조되는것을특징으로하는산야초발효물의제조방법을제공한다. 또한, 본발명은상기방법으로제조된산야초발효물을제공한다. 또한, 본발명은상기산야초발효물을이용하여제조된가공식품을제공한다. [0018] 발명의효과본발명의 101가지산야초를이용하여제조된산야초발효물은식물로부터얻어진물질을함유하기때문에부작용을일으키지않고, 101가지산야초의영양성분과천연항생물질이풍부하게함유되어있어, 신진대사를촉진시켜불순물배출의효과, 체지방개선효과, 활성산소분해효과등으로현대병에시달리는환자들에게는건강회복식품으로, 건강한사람들에게는건강보조식품으로이용할수있어국민건강을증진시킬수있다. 또한, 항염증효과도우수하여염증성질환을예방하기위한건강식품등에도유용하게사용할수있다. 또한, 산야초특유의쓴맛이감소하여기호도가증진된산야초발효물을제공할수있다. [0019] 도면의간단한설명 도 1 은 THP-1 세포에서각각의처리군에따른 GAPDH, IL-1β 및 TNF-α 의발현양을나타낸것이다. GAPDH: 각시료에사용된 RNA 양에대한내부대조군 (internal control) No LPS: LPS를처리하지않은군, LPS 5 ug: LPS 5 ug/ml 처리, Sample 1/50: 산야초발효물 1/50 희석처리, Sample 1/500: 산야초발효물 1/500 희석처리, LPS 5 ug+sample 1/50: LPS 5 ug/ml와산야초발효물 1/50 희석액을동시에처리, LPS 5 ug+sample 1/500: LPS 5 ug/ml와산야초발효물 1/500 희석액을동시에처리. 도 2는처리군에따른 IL-1β의발현양을비교한것이다. 데이터는 GAPDH로정규화 (normalized) 된정량값으로, 음성대조군인 No LPS 처리군의값에대한상대적인비교로나타낸것이다. 도 3은처리군에따른 TNF-α의발현양을비교한것이다. 데이터는 GAPDH로정규화 (normalized) 된정량값으로, 음성대조군인 No LPS 처리군의값에대한상대적인비교로나타낸것이다. [0020] [0021] 발명을실시하기위한구체적인내용본발명의목적을달성하기위하여, 본발명은 (a) 황기 (Astragalus membranaceus Bunge var. membranaceus), 당귀 (Angelica gigas NAKAI), 사철쑥 (Artemisia capillaris), 더덕 (Codonopsis lanceolata (S. et Z.) Trautv), 도라지 (Platycodon grandiflorum - 5 -
(JACQ) A. DC), 달래 (Allium monanthum), 냉이 (Capsella burapastoris), 칡 (Pueraria thunbergiana Benth), 솔잎 (Pinus densiflora Siebold & Zucc), 민들레 (Taraxacum mongolicum), 찔레나무 (Rosa multiflora Thunberg), 쑥 (Artemisia princeps Pamp), 뽕잎 (Fatoua villosa (Thunberg) Nakais), 다래나무 (Actinidia arguta (Siebold & Zucc.) Planch. ex Miq), 생강나무 (Lindera obtusiloba Blume var. obtusiloba), 한삼덩굴 (Humulus japonicus Sieboid & Zucc), 곰취 (Ligularia fischeri (LEDEB.) TURCZ), 망초 (Erigeron canadensis L.), 쇠뜨기 (Equisetum arvense L), 쇠비름 (Portulaca oleracea L), 엉겅퀴 (Cirsium japonicum var. maackii (Maxim.) Matsum.), 국화 (Dendranthema Grandiflorum Kitamura), 참느릅나무 (Ulmus parvifolia Jacq), 닭의장풀 (Commelina communis L), 산초나무 (Zanthoxylum schinifolium S. et Z), 갈대 (Phragmites australis (Cav.) Trin), 두충나무 (Eucommia ulmoides Oliv), 여뀌 (Persicaria hydropiper (L.) SPACH), 화살나무 (Euonymus alatus (Thunb.) Siebold), 미나리 (Oenanthe javanica (Blume) DC), 돌나물 (Sedum sarmentosum Bunge), 고들빼기 (Crepidiastrum sonchifolium Max), 엄나무 (Kalopanax septemlobus Koidz), 잣나무 (Pinus koraiensis Siebold & Zucc), 씀바귀 (Ixeris dentata (Thunb.) Nakai), 참취 (Aster scaber Thunb), 오리나무 (Alnus japonica (Thunb.) Steud), 머위 (Petasites japonicus (Siebold & Zucc.) Maxim), 익모초 (Leonurus sibiricus L), 칼퀴나물 (Vicia amoena FISCH), 짚신나물 (Agrimonia pilosa Ledeb), 참나리 (Lilium lancifolium), 고사리 (Pteridium aquilinum var.latiusculum (DESV) UNDERW), 두릅 (Aralia elata (Miq.) Seem), 박하 (Mentha arvensis var. piperascens), 구절초 (Chrysanthemum zawadskii subsp. latilobum (Maxim.) Kitag), 꿀풀 (Prunella vulgaris var. lilacina Nakai), 마타리 (Patrinia scabiosaefolia), 잔대 (Adenophora triphylla var. japonjca Hara), 오이풀 (Sanguisorba officinalis L), 둥굴레 (Polyginatum odoratum Ohwi), 산돌배 (Pyrus ussuriensis Maxim. var. ussuriensis), 서양산사자 (Crataegus oxyacantha L), 오미자 (Schisandra chinensis (Turcz.) Baill), 다래 (Actinidia arguta Planchon), 오디 (Morus alba L), 머루 (Vitis amurensis var. coignetiae (PULLIAT) NAKAI), 이질풀 (Geranium nepalense subsp. thunbergii (S. et Z.) HARA), 차풀 (Chamaecrista nomame Honda), 우산나물 (Syneilesis palmata), 싸리나무 (Lespedeza bicolor Turcz), 가죽나무 (Ailanthus altissima (Mill.) Swingle for. altissima), 방아풀 (Isodon japonicus), 제비꽃 (Viola mandshurica W.Becker), 수리취 (Synurus deltoides (AITON) NAKAI), 좁쌀풀 (Lysimachia vulgaris var. davurica (Ledeb.) R. Kunth), 헛개나무 (Hovenia dulcis Thunb), 마디풀 (Hovenia dulcis Thunb), 진득찰 (Siegesbeckia glabrescens MAKINO), 속단 (Phlomis umbrosa TURCZ), 느티나무 (Zelkova serrata MAKINO), 왕고들빼기 (Lactuca indica), 삽주 (Atractylodes ovata (Thunb.) DC.), 향유 (Elsholtzia splendens Nakai), 며느리배꼽 (Persicaria perfoliata (L.) H.Gross), 소엽 (microphyll), 칡꽃, 약모밀 (Houttuynia cordata Thunb), 연잎 (lotus leaf), 산쑥 (Artemisia montana Pampan), 진달래꽃 (Rhododendron mucronulatum Turcz), 원추리 (Hemerocallis fulva (L.) L), 당근 (Dacus carota), 연근 (Nelumbo nucifera GAERTN), 참소리쟁이 (Rumex japonicus Houtt), 으아리 (Clematis terniflora var. mandshurica (Rupr.) Ohwi), 돼지감자 (Helianthus tuberosus), 케일 (Brassica oleracea L. var. acephala (DC.) Alef), 쑥부쟁이 (Aster yomena (Kitam.) Honda), 측백나무 (Thuja orientalis L), 인동 (Lonicera japonica), 쑥갓 (Chrysanthemum coronarium L), 쇠무릎 (Achyranthes japonica (MIQ) NAKAI), 찔레꽃 (Rosa multiflora Thunb. var. multiflora), 삼백초 (Saururus chinensis BAILL), 블루베리 (Vaccinium corymbosum L), 고비 (Osmunda japonica Thunb), 피나무 (Tilia amurensis Rupr), 수영 (Rumex acetosa L.), 산딸기 (Rubus crataegifolius Bunge) 및산수유 (Cornus officinalis S. et Z) 의 101가지산야초와설탕을혼합하여혼합물을제조하는단계 ; 및 [0022] [0023] (b) 상기혼합물을 40~50 에서 12~16일동안 1차발효하고, 20~30 에서 25~35일동안 2차발효한후, 0~10 에서 1~6년간 3차발효및숙성시킨후여과하는단계를포함하여항염효과를갖게제조되는것을특징으로하는산야초발효물의제조방법을제공한다. 본발명의산야초발효물의제조방법에서, 상기산야초는해발 700 m 이상의강원도의산속에자리잡은주변이산에둘러싸여있어공기의흐름이좋고청정한지하수가흘러음이온을풍부하게포함하고있는토양이있는지역으로서, 주변의농가와떨어져있어농약과화학비료의오염으로부터자유로운곳에서자라난원료를채취하여사용하였다. 그리고봄, 여름, 가을연간 3회에거쳐사용되는산야초의특성에맞추어가장생명력이있는상태에서재료를엄선하였다. 어린순을사용하는산야초는봄에채취되어사용되고, 힘찬힘을상징하는잎과줄기를사용하는산야초는여름에, 열매를사용하는원료는양분을가장많이머금고있는가을에채취하였다. 상기와같은청정지역에서채취된산야초를청정지하수를이용하여세척하고적당한크기로절단하여준비하였다. 산야초에따라효소와성장에너지를많이포함하고있는부분을그대로사용하였다. 예를들어, 뿌리를사용하는산야초의경우, 잎은제거하여발효를시키지만, 이경우에도잎의밑부분의성장점이있는부분은제거하지않는다. 엑기스를추출하는것만을생각하면수분이많은원료를사용할경우양을늘릴수있어 - 6 -
효율면에서는좋지만, 산야초발효물은일반주스와는달라서어디까지나식물의향기나유효성분을엑기스로 추출하고, 천연미생물을이용해서발효시키는것이기때문에원료의선택과채취, 담금, 발효단계에서최대한 의효과를낼수있도록하였다. [0024] [0025] [0026] [0027] [0028] 또한, 본발명의산야초발효물의제조방법에서, 상기 (b) 단계는바람직하게는혼합물을 40~50 에서 14일동안 1차발효하고, 20~30 에서 30일동안 2차발효한후, 10 에서 1년간 3차발효및숙성시킨후여과할수있다. 상기산야초의어떤원료는한종류만발효시키기도하고, 어떤원료는서로의성질과약성을보완, 상승시킬수있도록함께발효시킬수있다. 또한, 산야초추출물의발효과정에서설탕인백당또는흑당을사용하고있으나, 완성된발효액에는백당또는흑당성분이존재하지않는다. 이는발효미생물이가지는효소의작용에의해단당류인포도당과과당으로, 때로는올리고당류로분자가변환되기때문이다. 따라서, 본발명에서백당또는흑당은감미료로서사용되는것이아니라삼투압작용에의하여식물에서엑기스를끌어내는것과동시에, 독특한향기와함께눈으로보이지않는식물의생명력을받아내는모체로서의역할을하게된다. 또한, 백당또는흑당은식물의고유의향기성분을흡착하여안정화시키는역할을하고, 물분자를흡수하기쉬운구조를가지고있어발효숙성과정에서산야초의향기와특성을최대한으로이끌어낼수있다. 또한, 상기발효는우리조상들이사용하여온항아리, 즉옹기에서실시하는것이바람직한데, 옹기는우리식생활에서발효식품을발효하고저장하는용기로조상대대로애용되어왔으며우리민족의정서와품성에잘부합하는것이다. 예부터쌀이나보리, 씨앗등도옹기에넣어두면다음해까지신선하게보관할수있었다. 이는옹기를가마안에넣고구울때, 나무가타면서생기는탄소알갱이가옹기의안과밖을휘감으면서방부성물질을형성하기때문이다. 이러한옹기의특성을잘알고우리조상들은물을담가놓아정수의기능을하게도하고, 간장, 된장등의발효식품을저장할때잡균의생성을막는방부작용의용도로이용해왔다. 한국의옹기는미세다공성구조를가짐으로써높은수분및기체투과성을가지고, 옹기벽면에고정화된미생물및효소등은발효와숙성과정에서유용미생물군의정착및발효환경조성에긍정적인기능을하는것으로알려져있다. 바로이러한특성을이용하여산야초발효물의담금과발효과정을옹기에서진행하는것이다. 담금및발효에사용되는옹기는발효물을매년발효시켰던유용미생물군즉, 유산균과효모가옹기내벽의다공성구조에고정화되어있어발효의중요한근원이된다. 담금및발효단계를마치고옹기의뚜껑을열면잔설과같이백당또는흑당이남아있는데, 이상태가추출이잘된증거이다. 산야초발효물의 3차발효는발효탱크에서 10 이하의일정한온도로일년동안유지하게되는데, 이때발효탱크안에서는다양한미생물이생성과도태를되풀이해간다. 처음에나타나는것은유산균으로, 당질을영양원으로하여대사물질을생산하면서번식하다가, 지나치게늘어나면발효과정에서생성된유기산에의하여살기어려운환경으로변해결과적으로사멸한다. 유산균이사멸한뒤다른유용한세균들도생성과번식을하면서최종적으로는효모균류가우점을하게된다. 이렇게하여최종적으로모든미생물은사멸하지만, 각각미생물에의한발효대사산물은산야초발효물안에남아있게된다. 따라서, 제조된산야초발효물의대부분은원료로서사용된백당또는흑당이환원된포도당과과당및수분이지만, 101종의자생산야초고유의생리활성물질과발효과정에서생성된각종유기산과아미노산및미생물에서유래한발효대사산물이풍부하게포함되어있다. 또한, 산야초는그성분적특징으로칼륨등의이온이많아서최종발효물은인체의체액과같은이온밸런스를유지하고있으며, 산야초및미생물에서유래된각종효소들에의하여고유의생리활성물질들이분자변환된형태로다양하게존재하게된다. 또한, 본발명의산야초발효물의제조방법에서, 상기산야초발효물제조시생균제또는효모를추가로첨가하여산야초를발효시킬수있는데, 상기생균제는비피도박테리움 (Bifidobacterium), 락토바실러스 (Lactobacillus), 스트렙토코커스 (Streptococcus), 엔테로코커스 (Enterococcus), 프로피오니움 (Propionium), 류코노스톡 (Leuconostoc) 및바실러스 (Bacillus) 로이루어진군으로부터선택된하나이상의인간장내비병원성생균제일수있으며, 더욱구체적으로는비피도박테리움비피덤 (Bifidobacterium bifidum), 비피도박테리움브레베 (Bifidobacterium breve), 비피도박테리움인판티스 (Bifidobacterium infantis), 비피도박테리움롱검 (Bifidobacterium longum), 락토바실러스애시도필러스 (Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스불가리쿠스 (Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스카세이 (Lactobacillus casei), 락토바실러스델브루에키 (Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스플란타럼 (Lactobacillus plantarum), 스트렙토코커스써모필러스 (Streptococcus thermophilus), 엔테로코커스파에칼리스 (Enterococcus faecalis), 엔테로코커스파에시움 (Enterococcus faecium), 류코노스톡시트로보룸 (Leuconostoc citrovorum), 프로피오니박테리움쉐르마니 (Propionibacterium shermanii), 바실러스서브틸리스 (Bacillus subtilis) 및바실러스리케니포미스 (Bacillus - 7 -
licheniformis) 로이루어진군으로부터선택된하나이상의인간장내비병원성생균제일수있으나, 이에제한되지않는다. 또한, 상기효모는키모트립신 (Chymotrypsin) 이나트립신 (Trypsin) 을분비하는사카로마이세스세레비지애 (Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스엘립소이더스 (Saccharomyces ellipsoideus), 사카로마이세스포르모센시스 (Saccharomyces formosensis), 사카로마이세스카를스베르겐시스 (Saccharomyces carlsbergensis), 사카로마이세스맨드슈리커스 (Saccharomyces mandshuricus) 및사카로마이세스코린너스 (Saccharomyces coreanus) 의사카로미세스속 (Saccharomyces sp.) 중에서선택되는한종이상을혼합한효모를 200~600 mg /l범위로주입할수있으나, 이에제한되지않는다. 또한, 상기생균제또는효모종류외에도균총의불균형개선및정장효과를나타내는프레보텔라오리스 (Prevotella oris), 유박테리움 A- 44(Eubacterium sp. A-44), 비피도박테리움콜레리움 (Bifidobacterium cholerium) 및퓨코박테리움 K-60( Fucobacterium K-60) 으로부터선택되는하나이상의장내세균을추가로포함할수있으나, 이에제한되지않는다. [0029] [0030] [0031] 또한, 본발명의산야초발효물의제조방법에서, 상기산야초발효물제조시향이나는산야초발효물을제조하기위해, 로즈마리 (Rosemary), 라벤더 (Lavender), 세이지 (Sage), 타임 (Thyme), 페퍼민트 (Peppermint), 오레가노 (Oregano), 레몬밤 (Lemonbalm), 레몬버베나 (Lemon Verbena), 안젤리카 (Angelica), 바질 (Basil Sweet), 보리지 (Borage), 캐모마일 (Chamomile), 코리안더 (Coriander), 데이지 (Daisy), 딜 (Dill), 휀넬 (Fennel), 제라늄 (Geranium), 헬리오트러프 (Heliotrope), 히솝 (Hyssop), 아이리스 (Iris), 아이비 (Ivy), 쟈스민 (Jasmine), 마조람 (Marjoram), 매도우스위트 (Meadowsweet), 민트 (Mint), 머그워트 (Mugwort), 머스타드시드 (Mustard Seed), 펜시 (Pansy), 파슬리 (Parsley), 로즈 (Rose), 루 (Rue), 서던우드 (Southernwood), 발레리안 (Valerian), 버베인 (Vervain), 웜우드 (Wormwood), 앰버그리스 (Ambergris), 아미리스 (Amyris), 아니스스타 (Anise-Star), 아보카도 (Avocado), 베이 (Bay), 벤조인 (Benzoin), 버거못 (Bergamot), 버취 (Birch), 까유풋 (Cajuput), 캐모마일 (Camomile), 캠퍼 (Camphor), 캐러웨이 (Caraway), 카더먼 (Cardamon), 캐시어 (Cassia), 캐스터리움 (Castoreum), 세다우드 (Cedarwood), 셀러리 (Celery), 시나몬 (Cinnamon), 씨트로넬라 (Citronella), 씨빗 (Civet), 클로우버버드 (Clove Bud), 쿠민 (Cumin), 싸이프레스 (Cypress), 엘레미 (Elemi), 유컬립터스 (Eucalyptus), 펜넬 (Fennel), 프랭킨센스 (Frankincense), 갈바늄 (Galbanum), 그레이프프루트 (Grapefruit), 과이악우드 (Guaiacwood), 히솝 (Hyssop), 이머텔 (Immotelle), 아이리스 (Iris), 호호바 (Jojoba), 쥬니퍼 (Juniper), 라빈딘 (Lavandin), 라벤다스파이크 (Lavenda Spike), 레몬 (Lemon), 레몬그라스 (Lemongrass), 라임 (Lime), 린던브로섬 (Linden Blossom), 리치아쿠베바 (Litsea Cubeba), 맨더린 (Mandarine), 마저럼스웨트 (Marjoram Sweat), 머르 (Myrrh), 머틀 (Myrtle), 네롤리 (Neroli), 니아올리 (Niaouli), 너트멕 (Nutmeg), 오렌지 (Orange), 오렌지발삼 (Orange Balsams), 파츌리 (Pachouli), 팔마로자 (Palmarosa), 파슬리 (Parsely), 페티그렌 (Petigrain), 피멘토 (Pimento), 파인니들 (Pine Needle), 로즈 (Rose), 로즈우드 (Rosewood), 샌들우드 (Sandalwood), 산톨리나 (Santolna), 스피아민트 (Spearmint), 스위트아몬드 (Sweet Almond), 타게티스 (Tagetes), 탠저린 (Tangerine), 타라곤 (Tarragon), 티트리 (Tea Tree), 테러빈스 (Terebinth), 통카콩 (Tonca Bean), 버비너 (Verbena), 베티버 (Vetivert), 바이올렛 (Violet), 맥아 (Wheatgerm), 얘로우 (Yarrow) 및일랑일랑 (Ylang Ylang) 으로이루어진허브식물로부터선택되는 1종이상을혼합하여사용할수있으나, 이에제한되지않는다. 본발명은또한, 상기방법으로제조된산야초발효물을제공한다. 본발명의방법으로제조된산야초발효물은항염효과를가지는것을특징으로한다. 본발명은또한, 상기산야초발효물을이용하여제조된가공식품을제공한다. 상기가공식품의종류로는육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타면류, 껌류, 아이스크림류를포함한낙농제품, 각종스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜음료및비타민복합제등이있으며, 통상적인의미에서의식품을모두포함한다. [0032] 이하, 본발명의실시예에의해상세히설명한다. 단, 하기실시예는본발명을예시하는것일뿐, 본발명의 내용이하기실시예에한정되는것은아니다. [0033] [0034] 제조예 1: 101 가지산야초를이용한산야초발효물 황기 ( 뿌리 ) 1.3 kg, 당귀 ( 잎, 뿌리 ) 1.3 kg, 사철쑥 ( 인진쑥 ) 1 kg, 더덕 1 kg, 도라지 1 kg, 달래 1 kg, 냉이 1 kg, 칡 ( 뿌리 ) 1 kg, 솔잎 1 kg, 민들레 ( 어린잎, 뿌리 ) 1 kg, 찔레나무 ( 순 ) 1 kg, 쑥 1 kg, 뽕잎 1 kg, 다래 - 8 -
나무 ( 어린순, 줄기 ) 1 kg, 생강나무 ( 어린잎 ) 1 kg, 한삼덩굴 ( 어린잎 ) 0.5 kg, 곰취 0.5 kg, 망초 ( 어린잎 ) 0.5 kg, 쇠뜨기 ( 잎 ) 0.5 kg, 쇠비름 ( 어린잎, 어린줄기 ) 0.5 kg, 엉겅퀴 ( 어린잎, 어린순 ) 0.5 kg, 국화 ( 전초, 꽃 ) 0.5 kg, 참느릅나무 ( 잎 ) 0.5 kg, 닭의장풀 ( 전초 ) 0.5 kg, 산초나무 ( 잎, 열매 ) 0.5 kg, 갈대 ( 어린순 ) 0.5 kg, 두충나무 ( 잎 ) 0.5 kg, 여뀌 ( 어린잎 ) 0.5 kg, 화살나무 ( 잎 ) 0.5 kg, 미나리 0.5 kg, 돌나물 0.5 kg, 고들빼기 0.5 kg, 엄나무 ( 어린잎 ) 0.5 kg, 잣나무 ( 잎 ) 0.5 kg, 씀바귀 ( 뿌리, 어린순 ) 0.5 kg, 참취 0.5 kg, 오리나무 ( 잎 ) 0.5 kg, 머위 0.5 kg, 익모초 ( 지상부 ) 0.5 kg, 갈퀴나물 ( 어린순 ) 0.5 kg, 짚신나물 ( 어린잎 ) 0.5 kg, 참나리 ( 비늘줄기 ) 0.5 kg, 고사리 ( 잎 ) 0.5 kg, 두릅 ( 어린순 ) 0.3 kg, 박하 ( 잎 ) 0.3 kg, 구절초 ( 전초 ) 0.3 kg, 꿀풀 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 마타리 ( 어린순 ) 0.3 kg, 잔대 ( 어린순 ) 0.3 kg, 오이풀 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 둥굴레 ( 지상부, 뿌리 ) 0.3 kg, 산돌배 ( 열매 ) 0.3 kg, 서양산사자 ( 열매 ) 0.3 kg, 오미자 0.3 kg, 다래 ( 열매 ) 0.3 kg, 오디 0.3 kg, 머루 0.3 kg, 이질풀 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 차풀 ( 전초 ) 0.3 kg, 우산나물 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 싸리나무 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 가죽나무 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 방아풀 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 제비꽃 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 수리취 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 좁쌀풀 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 헛개나무 ( 잎, 줄기 ) 0.3 kg, 마디풀 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 진득찰 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 속단 ( 어린잎, 뿌리 ) 0.3 kg, 느티나무 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 왕고들빼기 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 삽주 ( 어린순 ) 0.3 kg, 향유 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 며느리배꼽 ( 어린순 ) 0.3 kg, 소엽 ( 잎 ) 0.3 kg, 칡꽃 0.3 kg, 약모밀 0.3 kg, 연잎 0.3 kg, 산쑥 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 진달래꽃 0.3 kg, 원추리 ( 잎, 꽃봉오리 ) 0.3 kg, 당근 0.3 kg, 연근 0.3 kg, 참소리쟁이 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 으아리 ( 어린잎 ) 0.3 kg, 돼지감자 0.3 kg, 케일 0.3 kg, 쑥부쟁이 0.3 kg, 측백나무 ( 잎 ) 0.3 kg, 인동 ( 꽃, 잎, 줄기 ) 0.3 kg, 쑥갓 0.3 kg, 쇠무릎 ( 잎 ) 0.3 kg, 찔레꽃 0.3 kg, 삼백초 0.3 kg, 블루베리 0.3 kg, 고비 ( 잎 ) 0.3 kg, 피나무 ( 잎 ) 0.3 kg, 수영 ( 잎 ) 0.3 kg, 산딸기 ( 열매, 잎 ) 0.3 kg 및산수유 ( 열매 ) 0.3 kg의 101가지산야초를혼합한혼합물 47 kg과흑당 53 kg을옹기에넣어혼합하여뚜껑을덮고 45 에서 14일동안 1차발효하고, 25 에서산소를공급하면서한달동안 2차발효한후, 10 이하에서산소를차단 ( 혐기성조건 ) 한후 1년간 3 차발효및숙성시킨후여과하여산야초발효물을제조하였다. [0035] [0036] [0037] 실시예 1: 산야초발효물의항염효과 Monocyte 세포주인 THP1 세포를 6-웰플레이트의각웰에 1 10 6 이되도록 RPMI 1640 + 10% FBS + 1% A-A의배지에접종하여 24시간배양후대조군으로아무것도처리하지않은것 (No treatment) 과양성대조군으로 LPS(lipopolyssccharide) 5 ug/ml 처리, 산야초발효물을각각초기농도기준으로 1/50, 1/500으로희석하여처리한실험군그리고 LPS 5 ug/ml과산야초발효물을각각초기농도기준으로 1/50, 1/500 희석하여동시에처리한실험군을 12시간동안더배양하여세포들을수확하고 Trizol을통해 RNA를추출하였다. 추출된 RNA 1 ug 씩을역전사효소와 Random hexamer를이용하여 42 에서 RT(reverse transcription) 을수행하여 cdna를얻었다. 상기 cdna의일부를덜어 IL-1β, TNF-α 그리고 GAPDH에대한특이적프라이머세트를이용하여 PCR을수행하였다. 얻어진 RT-PCR 산물을아가로스겔 (agarose gel) 에서전기영동하여최종산물의발현량을확인하고이미지 (image) 를스캔하여각밴드 (band) 의양을정량화한뒤비교하였다. RT-PCR 최종산물의예상사이즈 (size) 는하기표 1과같다. RT Mixture condition: Total RNA 1 ug + RNase Free H20 + 5X RT Buffer + dntp Mixture + RNase inhibitor + Random primer + ReverTra Ace(Total vol: 20 ul) [0038] 표 1 RT-PCR 최종산물의예상사이즈 (size) Cell line THP-1 Cytokine target Size sequence cdna Gene GAPDH 156 bp 246 bp IL-1β 203 bp 1439 bp TNF-α 180 bp 668 bp [0039] RT-PCR 수행결과, 모든처리군에서성공적으로최종산물을얻을수있었다 ( 도 1). IL-1β 의발현양을농도계 (densitometry) 로측정한뒤 GAPDH 의발현양으로정규화 (normalization) 한결과, 양성대조군인 LPS 5 ug/ml 처 리시염증성사이토카인 (cytokine) 인 IL-1β 의양은음성대조군인 LPS 를처리하지않은군 (No LPS) 대비두배 - 9 -
가까이크게늘어나서 LPS가염증성사이토카인인 IL-1β의발현을유도한것이확인되었지만, 산야초발효물만 1/50, 1/500 각각희석하여처리한군에서는 IL-1β의발현을약간감소시킨다는것을확인하였다 ( 도 1 및 2). 그리고 LPS와산야초발효물 1/50 희석액을동시에처리한실험군에서는 IL-1β의발현양이양성대조군대비 80% 이상급감함으로써산야초발효물이 IL-1β의발현을억제하는효과가있다는것을확인할수있었다 ( 도 2). [0040] TNF-α 발현양의경우에는 LPS 와산야초발효물 1/50 및 1/500 희석액을동시에처리한군에서모두발현이 95% 이상급격히감소하여항염효과를보였으며, 양성대조군인 LPS 처리군과음성대조군 (No LPS) 은 TNF-α 발현양이 큰차이를나타내지않았다 ( 도 3). [0041] [0042] 실시예 2: 관능검사상기제조예 1의방법으로제조된산야초발효물의관능검사결과는하기표 2와같다. 30대의남녀직장인 30 명을대상으로 5점평점법에의해산야초발효물에대한색, 향, 맛및기호도를테스트하였는데, 산야초발효물 20 g에물 100 ml를넣고희석한것을가지고관능검사에사용하였다 : 1: 나쁘다, 2: 조금나쁘다, 3: 보통이다, 4: 조금좋다, 5: 좋다. [0043] 표 2 관능검사 색 향 맛 전체적인기호도 제조예 1 4.04 4.08 4.32 4.22 [0044] 상기표 2 에서알수있는바와같이, 색, 향및맛에대한기호도에서본발명의산야초발효물이 4 점이상의 높은점수를나타내었고, 전체적인기호도에서도 4.22 의높은점수를얻어산야초특유의쓴맛이감소하여전체 적인기호도가높음을확인할수있었다. [0045] [0046] [0047] 제제예 1: 식품의제조 1-1. 밀가루식품의제조본발명의제조예 1의산야초발효물 0.5~5.0 중량부를밀가루에첨가하고, 이혼합물을이용하여빵, 케이크, 쿠키, 크래커및면류를제조하였다. [0048] [0049] 1-2. 스프및육즙 (gravies) 의제조 본발명의제조예 1 의산야초발효물 0.1~5.0 중량부를스프및육즙에첨가하여건강증진용육가공제품, 면 류의수프및육즙을제조하였다. [0050] [0051] 1-3. 그라운드비프 (ground beef) 의제조 본발명의제조예 1 의산야초발효물 10 중량부를그라운드비프에첨가하여건강증진용그라운드비프를제조 하였다. [0052] [0053] 1-4. 유제품 (dairy products) 의제조 본발명의제조예 1 의산야초발효물 5~10 중량부를우유에첨가하고, 상기우유를이용하여버터및아이스크 림과같은다양한유제품을제조하였다. [0054] 1-5. 선식의제조 - 10 -
[0055] [0056] 현미, 보리, 찹쌀, 율무를공지의방법으로알파화시켜건조시킨것을배전한후분쇄기로입도 60 메쉬의분말로제조하였다. 검정콩, 검정깨, 들깨도공지의방법으로쪄서건조시킨것을배전한후분쇄기로입도 60 메쉬의분말로제조하였다. 본발명의제조예 1의산야초발효물을진공농축기에서감압농축하고, 분무, 열풍건조기로건조하여얻은건조물을분쇄기로입도 60 메쉬로분쇄하여건조분말을얻었다. 상기에서제조한곡물류, 종실류및제조예 1의산야초발효물을하기의비율로배합하여제조하였다. 곡물류 ( 현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부 ), 종실류 ( 들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부 ), 제조예 1의산야초발효물 (3 중량부 ), 영지 (0.5 중량부 ), 지황 (0.5 중량부 ) [0057] [0058] [0059] 제제예 2: 음료의제조 2-1. 건강음료의제조액상과당 (0.5%), 올리고당 (2%), 설탕 (2%), 식염 (0.5%), 물 (75%) 과같은부재료와본발명의제조예 1의산야초발효물 5 g을균질하게배합하여순간살균한후이를유리병, 패트병등소포장용기에포장하여제조하였다. [0060] [0061] 2-2. 야채주스의제조 본발명의제조예 1 의산야초발효물 5 g 을토마토또는당근주스 1,000 ml에가하여야채주스를제조하였다. [0062] [0063] 2-3. 과일주스의제조 본발명의제조예 1 의산야초발효물 1 g 을사과또는포도주스 1,000 ml에가하여과일주스를제조하였다. 도면 도면 1 도면 2-11 -
도면 3-12 -