대한임상병리사회지 : 제 23 권 1 호 199] 온난자가항체동정및수혈 1 예 한양대학교부속병원임상병리파 이종숙, 박희정, 구미숙, 홍인표 1. 서론 G, anti-complement) 사용. 수혈을위한검사에서교차시험이부적합하면그 원인을가리기전에는혈액불출이어렵다. 이에저 자들은부적합교차시험의여러요인중에서수혈 부작용에특히관계가있고, 항체동정이잘되지않 아수혈에지장이있는 Ig G 항체인온난적혈구자 가항체의동정방법및의의를증예와함께고찰하 고자한다. II. 즘예및방법 4) 불규칙항체션별및동정검사 상품화된 (Search cyte, Dade 사제품 ) 으로항체 선별검사 (antibody screening) 를하고, 상품화된 (Data-cyte, Dade 사제품 ) 으로항체동정검사 (antibody identification) 를했다. 11 개의서로다른적혈구항원조합을가진 O 형 적혈구로식염수실온법, 37 C 알부민법, 37 C 항글 로부런법을혈청과용출액 (eluate) 에각각적용검 사하였다. 1. 증예 검체는 1991 년 2 월본원에입원했던 A Rh 의 31 세여자환자로자가면역성용혈성빈혈환자였다. 수혈을위한항체선별검사에서의결과가양성이어 서발견이되었고항체동정을하였다. 5) Rh subtyping Anti-D, C, E, c, e(organon Teknika 사제품 ) 6) 흡수 (Absorption test) CD Absorption test @ Aut 이 ogous absorption test 5l 2. 방법 1) ABO & Rho typing Front typing 파 back typing 을 tube 법으로하였 고, Rho typing 은온난자기항체인경우 IgG 항체 로강하게응집된적혈구이므로 high protein 을포 함한항혈청으로반응시켰을경우자연적으로응집 이일어날수있으므로 negative control 을세웠다. 7) 용출 (Elution test : Ether elution) 적혈구의 IgG 항체는 digitonin acid or xylene, ether 같은유기용매를이용한방법으로잘검출된 다 ( 만약보체에만감작되었다면 eluate 에증명되지 않는다 ). 8) 희석 (Titration test) Rh 특이성과관련된것만알수있다 5) 2) Auto control 환자의적혈구를생리적식염수로세척하여 2-5% 혈구부유액을만들어환자혈청파혼합해식염수 질용, 알부민 37 C, 항글로부런검사에각각 15 분 incubation 후원침, 응집유무를관찰하였다. 3) Direct & indirect Coombs test 다가항글로부런혈청 (poly specific antihuman globulin sera) 와단일항인글로부런혈청 (anti-ig 9) 교차시험 (Cross matching test) 실용식염수법, 37c 알부민, 항글로부런검사법 111. 결과 ABO & Rho typing 은실온식염수법에서의불 일치 (discrepancy) 는없었고, 자가대조 (auto cont. ) 는표 1 과같은양상을보였다. Search cyte o cell 에양성, 자가대조혈구에양성이고, 최근 3-194-
Table 1. Result Cell RT Alb.3TC AHG s- 1 2 S-II 十 2 pt.auto 3 Table 2. 자가대조 (Autocontrol) Reagent Autolog. Red cell Red cell Interpretation Alloantibody 十 * Autoantibody 순 * Autoantibody or Auto Ab. Allo Ab Pt. autocontrol * May, be interpreted as alloantibody in recently transfused patients due to circulating donor red cells 개월간수혈경력이없었던것으로미루어자가항체 의존재를의심하게되었다 ( 표 2). 항글로부런검사 에서는직정항글로부런검사에서 3, 간접항글로 부련검사에서 2 를보였다 (Anti-IgG C3d :, Anti-IgG: 十, Anti-C3d: -). 항체선별및동정 검사에서는동정되지않았으나, 희석하지않은환자 혈청의반응강도가특이하게차이가있어동정에 참고가되었다 ( 표 3). Eluate 는모든 panel cell 에 3 의강한응집의같은반응을보여동정을할수 없었고, IgG 항체가있는온난자가항체의존재만확 인되었다. 온난자가항체의 3% 만이형특이성을 나타내고온난자가항체의 7% 가 Rh 특이성에관 련된것과 5), 희석하지않은혈청의반응강도의차 이로미루어서 Rh 와상관관계가있는자가항체로 보고, 혈청을 titration 검사한결과상관관계가있 음을증명하였고, 환자혈구를 Rh subtyping 하였 다. 그결과 phenotype 이 R1 R2 (CcDEe) 로모든 Rh antiserum 파반응함을알수있었다. 동정결파 희석하지않은환자혈청의 panel cell 과의반응강 도차이점으로 ( 표 3) 미루어 E, c 항원의존재가능 성을확인하기위해교차시험용공혈자혈구중 E, c Ag 이있는혈구를 AGT 에서환자혈청파교차시 험한결과 2 반응을보였던것이 R1(CDe) 혈구와 의반응에서 w 의결과를보여서주된자가항체 가 Anti E, c 로추측할수있었다. 나머지 W 항 원을확인하기위해 C, D, e 항원에대한흡수를하였 다. 환자혈청에 R1(CDe) 혈구를 3 회세척하여동량 가하고, 3TC water bath 에 lhr, 흡수후 3 회세척하 여 panel cell 7, 8, 9 와반응시켜항글로부런검사를 하니흡수전의 w 반응이소멸되었다. Rh null cells 같은희귀한표현형의적혈구가없는 관계로 Anti D, C, e, E, c 같은표면상윤곽이확실한 Rh 특이성을밝히지는못했으나 Rh 와상관관계가 있는특이성을가진것을알수있었다. 무작위교 차시험 1 test 중에서 5 test가 2 응집의부적합으로 pheno type이모두 R1 (CDe) 이아닌 E, c Ag이 있었던것은우리나라 Rh pheno type 중 E Ag: 56.8%, c Ag: 49.7% 와비슷한결파를보였다. IV. 고찰 수혈을위한검사에서혈액형검사나교차시험의 결과가적합하지않는원인이되는적혈구항체는 적혈구동종 (Allo Ab) 항체와적혈구자가항체 (Auto Ab) 로나눈다. 수혈자혈청에동종항체가존재하면해당항원이 없는혈액을골라수혈하면되지만자가항체가존 재하변적합한혈액을구하기도어렵고, 자가항체 로인해동정되지않는동종항체에의해수혈부작 용이야기될수있다. 적혈구자가항체는자신의적 혈구표면에존재하는항원파반응하는항체 1) 로반 응온도범위에따라한냉자가항체와옹난자가항 체로나누고, 용혈여부에의해유해자가항체와무 해자가항체로나눈다. 생체내에서용혈을일으키지않는무해자가항체 라도교차시험에서방해가되므로임상적으로중요 하다 7) 적혈구자가항체에대한불일치나부적합성 의빈도에대한확실한문헌보고는부족한실정이 고특이성이확인된비율도적다. 형특이성의대부 분은 Rh-Hr 식혈액형항원에대한것이고그밖에 항 K, 항 ]ka, 함 I 등의예가다소보고되었다. 우 리나라에도 Rh-Hr 식혈액형에의한것. 즉항 E, 항 c, 항 e, 항 C에대한것이대부분이고그밖에항 1, 항 Vw, 항 ]kb에의한예가보고되었다. 동 정건수가많은외국의경우형특이성자가항체의 출현수를표 4 에표시하였다. 그결과항 e 가가장 많이나타나고있다. 그원인은 Rh-Hr 식혈액형항 원에있어백인은 e 항원의양성율이 98% 로가장높 기때문으로사료된다 6) 온난자가항체는 3Tc 에서 가장잘작용하고 serum 에접촉되지않은상태로매 -195-
ιagmgqlg니 i> eig Z α 연 휠 - 上 성 :E 회 ic 깅 g - 팩 - ~ 겸 gi3 호 ~ 톨움 공 석 ι 염 훌훌후 * 후펙 F 후를맡후후추 럭 * * * * * * -4: * '" 를톨 * * g; o C 잉 -.. =3. 업늄 :... ιg 냥.----j 후 十 ]- [-... e l (y') ""'" ln ι r- c ζ1 ~ 녁 :: 녁에 느. & 셔 o 를 :l q.-3:-41 十 o o 十 ~ &: o ι 다 '> o () ι 十 -giu--ii o 十 aζb. o ι 옵..!o:: ; 깅 o ι J o 엌 l 十 i., 그 o o o i 업 (_) o i 업十 o 十 αi c.. 흐 톨 훌 cn 十 L-i 력.8 며 - mliia 얘,Naι{.m αz 응 ~ 특잉 @-aalf α 十 o o z 十 릅 o o o > o o ι 훌 o... z i ezi Z <1.1 예 ιj 다 j o ι ( 그 a.. {) - ιgi- -196-
우조금존재하고체내에서척혈구에의해지속적으 로홉착된다. 자가항체는적혈구의모든특수항원 자리에정령되었을때 serum 에서없어지려는정향 이있고체내에서더이상발견할수없다. Table 4. 자가항체의형특이성에의한출현수 보고자검사수 Sanger (1953) 함 e Weiner (1953) 1 항 e Dausset (1958) 항 K Van Loghen 항 c et al (l954) Fluckiger (1955) 13 특이성항체비특이성 특이성예 ( 수 ) 항 D 3 항 c.e 3 항 JKa 1 항 K 1 항 D.C Kissmeyer- 항 D.E Nielsin (1957) Hollander 12 89 항 D 2 항 c 함 e 항 e 36 항 D 24 (1957) 항 c 12 Dausset(l959) 항 K 항 C 8 항 E 8 항 C.e 항체 Dacie (1962) 33 항 e 6 23 항 e.c 3 lndirect Coombs test 는약한양성이거나음성, DAT 는강한양성이다. 온난자가항체는주로 IgG 이 고. IgG 와보체가함께검출되는정우가가장많 5 7 다 4) 좀더맨감한반응은 enzyme-treated red cell 검사에서 serum 의 9% 가양성반옹을나타낸다 5) 온난자가항체는특발성자가면역성용혈성빈혈, 전 신성흥반성낭창등의자가면역성질환, 만성임파 구성백혈병, 임파종에나타나는데대부분자가연 역성용혈성빈혈환자이다 2, 3, 7) 이러한환자의수혈 에있어자가항체와공존하는동종항체가있을경 우자가항체에가리워져발견되지않아수혈부작용 을일으킬수있으므로. autologous absorption 한 후동종항체의유무를검사해보아야한다. 혈청학 적으로완전한혈액을구하기가어려우므로 8) 신중히 고려하여임상적판단에의해가부를결정해야하고 가능하면하지않는것이좋으나수혈이반드시필요 하면많은 unit 의혈액과, 동종항체가존재하면그 해당하는항원성이없는혈액으로교차시협하여가 장적함한수헐올해야한다. v. 걸론 온난자가항체를가진자가면역성용혈성빈혈환 자의항체동정과정파수혈에관해잘펴보고. Rh 특이성을밝히지는못했으나 Rh 상관관계가있는 온난자가항체를실예를들어고찰해보았다. 옹난 자가항체는실온에서반응을거의하지않고 3iC 알부민과 AGT 에서잘반응하므로자가면역성질환 을가진용난자가항체를수반하는자가면역성용혈 성빈혈. LE 환자의수혈에있어항체선별검사및 3ic 알부민교차시험이필요하다는결론올얻었으 며, 항체동정이되지않은경우수혈이불가피하연 많은 unit 의혈액과교차시험하여가장척함한수혈 올해야한다. 실예률든환자는 autoimmune hemolytic anemia 로부득이수혈이필요하였고. autologous absorption 하여동종항체가없옴이증명되었 다. 희석하지않은혈청의반응강도가특이한웅접 강도를보여서특수검사한결과복합항체중에서주 된항체가 Anti-E & c 로밝혀져무작위로여러 unit 를검사하는대신 RIRl (CDe) cell 로교차시험하여 적합혈액올선택하는데도움이되었고별문제없이 수혈할수있었다. -197-
A Case of Blood Transfusion and Antibody Identification due to Warm Autoantibody Lee, J.S., Park, H.J., Ku, M.S., Hong, I.P. Department of Clinical Pathology. Han Yang University Hospital, Seoul Korea ABSTRACT Autoantibody react on antigen existing on the surface of RBC, itself. Particularly, we considered warm autoantibody. The specificity of autoantibodies associated with warm autoimmune homolytic anemia is compl,~x. so blood transfusion is very difficult. The authors experienced a case of autoimmune hemolytic anemia that caused by Rh-related antibody. No autoantibody specificity was clear out. But we could prove that the patient's serum have Rh -related specificity with a difference of intencity of serum reaction. Special test proved major antibody are an ti-e & c. Blood transfusion was unavailable. We were. helped that selected compatible blood with crossmatching of R 1 Rt cell in stead of many crossmatching. So we have reported warm autoantibody identification methods and signifirance of transfusion with brief review of literatures. REFERENCES 1. Mollison PL : Blood transfusion in clinical medicine, 7th ed, Blackwell Sci Pub, London, p. 44, 1983. 2. Swisher SN : Acquired hemolytic disease. Postg Med, 378, 1966. 3. Lee GR, Boggs DR, Bithell TC, Foerster J, AthensJW, LukensJN : Clinical hematology, 8th ed, Lea and Febiger, Philadelphia, P. 926, 1981. 4. Dade JV : Antoimmune hemolytic anemia, Arcl Intern Med, 135 : 1293, 1975. 5. Technical manual, loth ed. American Associated of Blood Banks, Virginia, pp.583-587, p.325, p.32, 199. 6. ~*~ {]~~1 :~ 11~.9.'1 il7]. Jl.*A}, p. 1. 7. {] ~» 4f, {] ~ 4f, ~.2..~, o] AJ~ : ~ ojl.g_'5~ 1l -T- 'F - -~ ~ iil.~l-al ~..._ _ ~~ 3{1 ~ ~ T Al-7li5Jx-l]oJl ~~ Jl.~, 1:1i~~ Jl'&: :j?;j 21: 2, p. 26, 1986. 8. Peta LD, Garratty G : Acquired immune hemolytic anemias, New York, Churchill Livingstone, 198. -198-