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1 특강 1 RhD 혈액형과검사법 아주대의대진단검사의학과임영애교수 2014 년대한수혈검사학회추계학술대회 - 1 -

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3 대한수혈검사학회특강 1-3 -

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19 특강 2 인증심사 삼성서울병원류광현박사 2014 년대한수혈검사학회추계학술대회

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21 대한수혈검사학회특강

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33 구연 1~5 구연발표 2014 년대한수혈검사학회추계학술대회

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35 대한수혈검사학회구연

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43 대한수혈검사학회구연 2 최근 5 년간수술전혈액예치를위한자가수혈분석 삼성서울병원진단검사의학과김은영 최광모 서지영 김은지 배경 (Backg round): 자가수혈이란여러가지방법을통하여자신의혈액을보관하여출혈이예상되는수술이나시술시보관되어진혈액을환자본인이수혈받는것이다. 환자본인의혈액을수혈받기때문에타인의혈액을수혈받는것보다여러가지장점이있다. 첫번째는바이러스간염과후천성면역결핍증등의수혈전파성질환에대한위험성이없고, 두번째는동종수혈로인한용혈성, 발열성및과민성수혈부작용을예방할수있으며, 세번째는희귀한혈액형을가진사람의경우적합한동종혈액을찾기가어려울수있는데이러한경우자가수혈을이용하기도한다. 자가수혈은수술전혈액예치, 수술중혈액희석, 수술중혈액회수및수술후혈액회수의네가지방법으로분류되며, 이중혈액은행에서접할수있는수술전혈액예치를분석하였다. 방법 (Methods): 2009 년 1 월 1 일에서 2013 년 12 월 31 일까지삼성서울병원헌혈실에서수술전혈액예치를위해자가수혈한 224 명을대상으로하였다. 결과 (Results): 최근 5 년동안 224 명의환자가수술전혈액예치를위해자가수혈을하였다. 성별은여자가 112 명이고남자가 112 명이었으며, 연령은 7 세에서 76 세까지로평균나이는 41 세였다. 224 명의환자는각각 1unit 내지는 4 unit 혈액을예치하였으며, 대부분 (74.5%) 구강외과환자였다. 자가수혈기간중환자들의혈색소치는 151 명에서는변화가없었고, 54 명에서 1~3 g/ dl미만으로감소하였다. 그리고예치된혈액에대한사용은자신의혈액만을사용한경우가 151 명 (67.4%) 이였고, 동종혈액을함께사용한경우는 39 명 (17.4%) 이었으며, 예치된혈액을전혀사용하지않고폐기된예가 34 명 (15.2%) 에서나타났다. 자가수혈자의혈청학적검사소견은 HBsAg 에서양성을보인 3 명이외에는모두음성이었다 년부터 2013 년까지자가헌혈자수와폐기율이모두감소하였다. 고찰 (Discussion): 분석결과자가수혈환자대부분이구강외과수술환자였다. 해마다자가수혈자가감소한이유는본원치과규모가대폭축소되면서구강외과수술환자가줄어들고정형외과, 이비인후과등에서의뢰가감소한것으로사료된다. 자가수혈자의정확한선별로폐기율도감소하였다. 수혈이예상되는수술이나시술에서혈액예치단위를표준화하여성별과나이에상관없이자가수혈이가능한기준에해당되면, 자가수혈을통해동종수혈을줄여수혈로인한부작용을최소화해야된다. 수혈부작용을최소화하기위해서는임상각과에자가수혈에관한지속적인교육과홍보를통하여자가수혈의유용성을정확히알리고이용하도록유도하여야한다

44 대한수혈검사학회구연 3 수혈과관련된부서에서요구하는혈액은행문답풀이 25 題서울대학교병원진단검사의학과 1 서울대의대진단검사의학과 2 강지상 1 곽영국 1 한규섭 2 배경 (Background): 진단검사의학과내에서특히혈액은행검사실은국내인증, 병원심사평가, 수혈관리위원회그리고 CAP Survey 에이르기까지병원내에서가장핵심부서로자리매김되고있다. 또한환자의생명과직접관련되어혈액관련많은직종의선생님들과전화및업무의혼선으로수혈사고의위험에항상노출되어있다. 이러한문제점을해결하고안전하고효과적인수혈및검사가이루어질수있도록혈액은행관련부서와의 Q&A 를통하여수혈의위험예방및위험요소를완화하기위하여관련된지식공유를목적으로한다. 방법 (Methods): 진단검사의학과교육팀및혈액은행검사실을주축으로 2014 년 4 월처음활동계획및전략회의를수립하여그해 5 월부터 7 월까지두달간혈액은행관련매뉴얼및전문서적웹사이트통한최신정보를학습한후 8 월에혈액은행검사실과관련된연계부서의전공의. 전임의. 담당간호사에게혈액은행에대해서궁금한점을설문조사하여가장많은질문수 25 문항에대해문답풀이자료및동영상을제작하였다. 결과 (Results): 혈액은행, 헌혈실과관련된부서에서크게 5 가지항목의주제로정리하였으며, 먼저수혈과관련한주제로서는혈액선택문제 ( 이형 BMT, 이형장기이식 ), 응급수혈및대량수혈시및수술전특이혈액요청문제에대한순으로요구도가많았으며, 검사관련주제로는이형 isoaglutinin, 특이혈액형검사방법및혈액선택, 현재사용하고있는 ABO 검사방법및 Cross-Matching 에대해서혈액제제및보관에관련주제로서는혈액의방사선조사및반납및폐기절차그리고헌혈실관련주제로서는헌혈자격기준및자가및지정수혈, 그리고치료적백혈구성분채집술인 Leukapheresis 순으로많았다. 마지막기타관련주제로서는 3 개병원 ( 소아. 암, 본원 ) 혈액은행검사실위치및혈액및검사수가및수혈부작용발생시대처방법에대한문의가많았으며이모든항목에대해각각답안을제시하였다. 고찰 (Discussion): 수혈혈액은환자의생명을살릴수있는세상에서가장따뜻한선물이며, 세상을밝히는등불이라고한다. 이런역할을하는헌혈실및혈액은행은신속정확한검사및적절한혈액보관관리도중요하지만연관된부서와의협력도중요하다고판단된다. 이를반영하듯최근의 CAP Surveys 및검사실및병원심사평가에서는혈액은행만의자체인증뿐만아니라수혈과관련된타부서와의협조및연계를요구하고있다. 이에혈액은행검사실과의관련부서와의 Q&A 를통해서그해결책을제시하고자한다

45 대한수혈검사학회구연 4 ABO 부적합생체간이식에서의동종응집소역가서울아산병원진단검사의학과 1 울산대의대진단검사의학과 2 서숙원 1 양회주 1 박현준 1 권석운 2 Background: 동종응집소역가는 ABO 부적합골수이식또는장기이식에서의경과관찰및예후평가, ABO 혈액형의아형판정에유용하게이용되는검사이다. 최근 ABO 부적합생체간이식에서혈장교환술과항 -CD20 단클론성항체 (rituximab) 의투여로동종응집소역가를감소시켜수술의성공률을높이고있다. 이에본원에서는 ABO 부적합생체간이식에있어서동종응집소역가의유용성을알아보고자하였다 Methods: 2012 년 3 월부터 2013 년 2 월까지본원에서 ABO 부적합생체간이식을받은 69 명의환자를대상으로하였으며, 이식전후혈장교환술시행시동종응집소역가를측정한후성별, 나이, 혈액형, 혈장교환술횟수를분석하였다. 동종응집소역가는 Tube 법을사용하였고, 두쌍의시험관에생리식염수 100 ul 를분주한후환자혈청 100 ul 를시험관에분주하고계단희석하여 3% A 형또는 B 형혈구부유액 (Affirmagen, Ortho Clinical Diagnostics, USA) 100 ul 를넣은후실온에서혼합한다음 3,400 rpm 에서 15 초간원심분리한후응집여부를판독하여최고희석배수를역가로하였다. Total(IgG+IgM) 동종응집소역가는다른한쌍의시험관을 37 에서 30 분간항온후생리식염수로 3 회세척하여항글로불린시약 (Merck, Milipore, UK) 을첨가한후 3,400 rpm 에서 15 초간원심침전한후응집여부를판독하여최고희석배수로하였다. Results: 본원의 ABO 부적합생체간이식수술전동종응집소역가기준은 1:8 이며, 68 명의환자가 1:8 결과를충족하였다. 환자들의평균이식생존율은 97.1% 이고, 이식생존일의평균일수는 474 일이였고, 평균혈장교환술횟수는 4.1 ± 1.7 이였다. 98.6% 인 68 명의환자들이이식거부반응없이생존하였다. 항체매개성거부반응 (Antibody-Mediated Rejection) 보인환자의혈액형은 O 형이었으며, 이식전후높은수치의동종응집소역가를보였다. Conclusions: ABO 부적합생체간이식은장기공여자가부족한현실에서새로운대안이되고있다. ABO 부적합생체간이식을성공하기위해서는항 -CD20 단클론성항체 (rituximab) 및혈장교환술을시행하여동종응집소역가를줄이는것이중요하다. ABO 부적합생체간이식에서의동종응집소역가는항체매개성거부반응 (Antibody-Mediated Rejection) 의중요한지표로사용되며수술의성공률에기여하리라사료된다

46 대한수혈검사학회구연 5 혈액은행자동화장비도입을위한 IH-1000 평가 세브란스병원진단검사의학과이은경 김화영 이상연 배경 : 혈액은행에서의수혈전검사는 ABO, RhD 혈액형검사, 비예기항체선별검사및교차시험등이있다. 그중 ABO, RhD 혈액형검사와비예기항체선별검사는가장중요하고필수적인검사이다. 특히 ABO 혈액형검사는사소한실수로도 Acute hemolytic transfusion reaction 및치명적인결과를초래할수있다. Human error 에서비롯되는오류를최대한줄이고검사의효율을높이며검사방법의표준화하여결과의신뢰도를높이기위해자동화장비의도입이필요하다. 세브란스병원은 2008 년부터원주응집법 (column agglutination technique, CAT) 을이용한 Ortho 사의 AutoVue Innova 장비를사용하여검사를하고있다 년 4 월암전문병원의개원으로혈액은행이이원화되어 Bio-Rad 사의 IH-1000 을도입하게되어평가를실시하였다. 방법 : ~ 까지본원혈액은행에의뢰된 ABO RhD 혈액형검사검체중 466 검체와냉동보관되어있던비예기항체선별검사양성이면서항체동정검사를시행한 101 검체를포함한 287 검체로 Ortho 사의 AutoVue Innova 장비의결과와비교하였다. 결과 : ABO, RhD 혈액형검사는두장비모두같은결과를보여일치율이 100% 였고비예기항체선별검사 287 건중 AutoVue Innova 에서양성이었던 101 건은 IH-1000 에서양성 74, 음성 27 건이었다. 음성이었던 186 건은 IH-1000 에서도모두음성을나타내어선별검사의일치율은 90.6% 였다. 불일치를보였던 27 건의동정항체는 Un ID 5 건, anti-fy b 2 건, anti-m 8 건, anti-le a 11 건, anti-le b 1 건이었다. 고찰 : 두자동화장비는 ABO RhD 혈액형검사는일치도 100% 였고항체선별검사에서는 90.6% 로좋은일치율을보였다. 불일치를보였던경우는 Lewis, MNS, Duffy 혈액형에서 AutoVue Innova 가더민감한결과를보였음을알수있었다. Lewis, MNS 혈액형의경우드물게 IgG Type 으로용혈성수혈반응을일으킬수있으나임상적인문제를거의일으키지않는다. 그러나 Duffy 혈액형은급성및지연성용혈성수혈반응, 태아신생아용혈성질환 (HDN) 등을잘일으키고다른혈액형에비해 Duffy 항원검사의재현성이낮음이보고하고있어추후재평가를시행하여야할것으로생각된다

47 포스터 1~17 포스터발표 2014 년대한수혈검사학회추계학술대회

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49 대한수혈검사학회포스터 1 항-f(ce) 항체와항-Cs a 항체검출 1례서울아산병원진단검사의학과 1 울산대의대진단검사의학과 2 박수정 1 조은정 1 양회주 1 박현준 1 권석운 2 배경 (Background): Cs a 항원은 1965년 Giles 등에의해유사한특이성을지니는항체를가진세명의환자들 (Copeland, Stirling, and Wainright) 의혈청에서처음보고되었으며, 첫두명의환자들의이름을따서 Cost로명명되었다. Cs a 항원은인종간에차이가있지만약 90% 이상의빈도를보이는항원이며, 항- Cs a 는 37 o C에서반응하는 IgG 항체이고, 보체와결합하지않는다. 또한, 항-Cs a 항체는적혈구와의반응성이다양하고, 임상적으로중요한항체가동시에존재할경우동정검사결과해석에어려움을줄수있다. 본원에서는간문부담도암으로입원한환자에서항-f(ce) 항체와항-Cs a 항체가검출된사례가있어이를보고하고자한다 방법 (Methods): 항체선별검사 (Bio-Rad, ID-DiaCell-I II, Switzerland) 및항체동정검사 (Bio-Rad, ID-DiaPanel, Switzland) 는미세원주응집법 (Bio-Rad, LISS Coombs card, Switzerland) 을이용하였고, Rh 표현형검사는 5 종류의 Rh 단클론항체시약 (anti-d/c/e/c/e Mono-Type, Medion diagnostics, Dudingen, Switzerland) 을이용하였다. 증례및결과 (Case & Results): 간문부담도암을진단받은 65 세된여자환자로발열과복통으로응급실에내원하였다. 내원당시혈색소는 9.0g/dL 였다. 입원시시행한비예기항체선별검사는약양성 (+/-) 으로항체동정검사를시행하였으나, 본원에서보유한동정혈구로는항체동정을할수없었고자가대조검사상 1+ w 반응강도의온난자가항체가검출되었다. 이후스위스의 Bio-RAD 사에항체동정을의뢰한결과, 항 -f(ce) 항체로판명되었다. 또한동정혈구와의반응성이검사마다다양한양상을보이고, 간접항글로불린검사에서약양성, 효소법에서음성을보여고역가, 저결합활성항체 (High-titer, low-avidity, HTLA) 의특성을보이는항 -Cs a 항체가동정되었다. 동환자는농축적혈구 13 단위를수혈받았으며, 수혈에따른용혈성수혈부작용은없었다 결론 (Conclusion): f(ce) 항원은 Rh blood group system 에속하는 c 와 e 의복합항원으로서대립유전자의위치에따라항원이결정되며, c 와 e 항원이 cis 형태로존재하는경우 f 항원이발현된다고알려져있다. Cs a 항원은 Cost blood group collection 에속하는항원이며, 항 -Cs a 항체는동종항체와동시에존재할경우항체동정검사결과해석에어려움을줄수있다. 항 -f 항체는임상적으로용혈성수혈부작용과신생아용혈성질환을유발할수있다. 그러나항 - Cs a 항체는적혈구를파괴할가능성이적어임상적인중요성은적지만, 개인간에항원의발현정도가다양하고, 동정혈구와다양한반응성을보이기때문에동정검사해석시고역가, 저결합활성항체의가능성을고려해야할것으로생각된다. 또한한국인을대상으로하는 f 항원및 Cs a 항원과항체에대한추가적인연구와항 -f 항체검출을위해항체선별검사에 ce 양성혈구가포함되는것이필요할것으로생각된다

50 대한수혈검사학회포스터 2 빈혈환자에서 auto-agglutination 에의한 ABO 불일치경험 1 예분당제생병원진단검사의학과 1 대전보건대학임상병리과 2 김대중 1 김원식 2 최범열 2 배경 (Background): ABO 혈액형은수혈의학에서가장중요하며, 수혈자의 ABO 혈액형은필히혈구형검사와혈청형검사를동시에실시하여결정하여야한다. 혈구형검사와혈청형검사의불일치 (ABO discrepancy) 는여러가지원인으로나타날수있으며, 그원인을추적하는방법으로환자의병력과임상증상을확인하는것을기본으로혈구측의항원검사에서로다른항혈청과의반응, 렉틴과의반응, 흡착해리검사, 타액검사등이있으며, 혈청측의규칙항체외비예기항체검사, 자가항체유무, 가계조사등이필요할때도있다. 여기에서는심한빈혈환자에서강력한자가응집반응 (auto-agglutination) 으로 ABO 불일치를보인 1 예를소개하고자한다. 증례 (Case): 여성 (63 세 ) 만성 C 형간염이력의환자로서극심한빈혈을동반한환자의혈액형검사에서통상검사로혈구형은 Ortho 사 monoclonal Anti-A, Anti-B 혈청에의한슬라이드법에서 AB 형, 혈청형은자가제조 A 및 B cells 을사용하여 O 형으로 ABO discrepancy 를보여, 추가검사로검체혈구를생리식염수로세척하여다시혈구형도시험관법으로혈청형은 O cells, 및자가대조등을추가하여시험관법으로시행하였으며, 기타환자의병력등과일반혈액학적검사도확인하여참조하였다. 결과 (Results): 일차검사에전혈슬라이드법에서 Anti-A, Anti-B 시약으로각각 1~2+, Anti-D 에서 3+ 정도로반응하여 AB 형 Rh-D 양성, 혈청형검사는시험관법으로 A 및 B cells 에서각각 4+ 로 O 형으로나타나 ABO discrepancy 를보였다. 추가검사로자가대조 1~2+, O cells 음성, 혈액학적검사에서 Hb 6.7 mg/dl 로극심한빈혈환자임을확인, 강력한자가항체를의심, 검체혈구를생리식염수로세척하여혈구형재검사결과 O 형으로나타났다. 고찰 (Discussion): 후천성용혈성빈혈환자, 이형폐염환자, 전신성홍반난창증환자등환자병력에따라강력한 auto-agglutination 으로 ABO discrepancy 를보일수있음을감안하여, 자가대조가유용하였으며, 혈구형검체도전혈보다는생리식염수로세척된혈구부유액을사용함으로서 ABO discrepancy 원인을해소하여중요한 ABO 혈액형을명확히할수있다고사료된다

51 대한수혈검사학회포스터 3 태아수혈로치료한 Anti-M 에의한태아신생아용혈성질환서울아산병원진단검사의학과 1 울산대의대진단검사의학과 2 김효진 1 양회주 1 박현준 1 권석운 2 배경 (Background): 태아수종은태아기에피부, 복강내, 흉강내, 심낭내, 태반, 양막강중두곳이상에장액성액체가비정상적으로축적되는질환을말하며, 크게면역성태아수종과, 비면역성태아수종으로나뉜다. 면역성태아수종의경우산모의 IgG 항체가태반을넘어가태아의적혈구가감작되어파괴되는태아신생아용혈성질환에의해발생할수있으며, 임상상이다양하지만용혈이심한경우태아사망에까지이를수있어정확한진단과태아수혈등을통해적절히치료하는것이중요하다. 본증례에서는 37 에서반응하는항 -M 항체 (anti-m) 을지닌산모의태아에게나타난빈혈을교정하기위해본원에서태아수혈을시행하여태아수종이호전된사례를보고하고자한다. 방법 (Methods): 산모의항체선별검사 (Bio-Rad, ID-DiaCell I & II, Switzerland) 및항체동정검사 (Bio-Rad, ID-DiaPanel, Switzerland) 는미세원주응집법 (Bio-Rad, LISS Coombs card, Switzerland) 을이용하여진행하였다. Cord blood 의혈액형검사를위해단클론항체인 anti-a, anti-b, anti-d (Millipore, U.K.) 를이용하여혈구형검사를시행하였으며, 자가제조한혈구인 A cell, B cell 을이용하여혈청형검사를시행하였다. 태아수혈은 3 일이내에채혈한신선혈이면서 M 항원음성인 O 형적혈구 4 단위를이용하여 4 회에걸쳐시행했고, 시술전후태아의혈색소수치변화를추적관찰하였다. 결과 (Results): 30 세 B(+) 산모의주산기 22 주태아에게서태아수종이의심되어원인을조사하던중산모의항체선별검사에서 I cell 4+, II cell 4+ 양성결과를보였고, 항체동정검사에서 37 에서반응하는 anti-m 이동정되었다 (Fig. 1). Cord blood 의혈액형검사는산모와동일한 B(+) 였으며 (Table 1), 항체선별검사에서 I cell +/-, II cell +/- 를보임으로써동종항체에의한면역원성태아수종이의심되었다. 이에 3 일이내신선혈로 M 항원이없는 O(-) 혈액 1 단위와, cord blood 의혈액형검사가 B(+) 임을확인한이후에는 O(+) 혈액 3 단위로 4 회에걸쳐태아수혈을시행함으로써태아빈혈이교정되는것을확인할수있었다 (Fig. 2). 분만한신생아의혈색소수치는 14.3 g/dl 이었다. 출생후시행한 ABO 혈액형검사에서혈구형검사는 O 형적혈구수혈로인해 anti-b 에대한반응강도가약화된결과를보였고, 혈청형검사에서는산모로부터받은 anti-m 에의한응집반응이관찰되었다 고찰 (Discusion): MN 항원에대한항체들은보통자연발생적으로생기며체온에서반응하지않는한임상적인문제를일으키는일은드물다. 자연발생적항체들이대부분 IgM 인반면 anti-m 은 IgG 인경우가많고, 37 에서반응하는 anti-m 은태아신생아용혈성질환을유발할수있다. 본증례의경우태아수종의원인으로 anti-m 이항체동정검사에서검출되었다. 이에태아의빈혈치료를목적으로태아수혈요청시한국인에게서표현형의빈도가 24% 인 M 항원이음성이며 3 일이내에채혈된신선한혈액을신속하게준비하여공급함으로써태아빈혈을성공적으로교정하였고, 이로인하여태아수종이호전되어정상적인분만을가능하게하였기에보고하는바이다

52 대한수혈검사학회포스터 4 항혈청 (D) 검사에서발견한 Partial D 1 예보고한양대학교병원진단검사의학과 1 한양대의대진단검사의학과 2 이종숙 1 김민규 1 김덕언 2 배경 : 우리나라에서는 1990 년대부터 Rh (D) 항원검사가단클론성항혈청으로바뀌었고, 그이후육안으로판독하는응집반응이이전보다강해짐으로인하여약 -D (Weak-D) 형중일부의검체가 Rh (D) 양성으로판독될것이우려되는상황이다. 항 -D 응집반응의강도가낮은경우공혈자는 Rh 양성으로판정되므로문제가없지만, 수혈자인경우약 -D 형이아닌 Rh (D) 양성으로판정될수있으므로 partial D 인경우임신이나수혈에의해자기자신의혈구와는반응하지않는동종항체인항 -D 를생산하는경우가있다. 시험관법에서음성이고간접쿰스법에서양성인경우를약 -D 형으로보고하고있으나, 약 -D 검사를위한간접쿰스법이전의시험관법에서양성인약 -D(partial D) 를경험하였기에이를보고하고자한다. 방법 : Rh(D) 혈액형은슬라이드법, 실온시험관법, 약 -D 검사 (Ortho diagnostics, USA) 를시행하였고, 추가로두종류의타제조사 (Bioscotte, Diagast) 를비교하였다. partial D 의가능성을확인하기위해질병관리본부혈액안전위탁사업세부과제 특정항원음성희귀혈액제제등록체계구축 에관한연구의일환으로확인이필요할때외부검사를해주는분당서울대학교병원진단검사의학과에검사를의뢰하여약 -D test( 항혈청 8 종류 ), NEO test, partial D test, RhD genotyping, Rh subgrouping, Rh Ag 검사를시행하였다. 결과 : 환자는 52 세인러시아여자로건강검진을주소로본원외래에내원하여 ABO & Rh(D) 검사를의뢰하였고, ABO 혈액형은 B 형, Rh(D) 혈액형은항 -D 시약 (Ortho diagnostics, USA) 슬라이드법에서음성, 실온시험관법에서양성 (1+) 이었으며추가로시행한두종류의타제조사 (Bioscotte, Diagast) 항 -D 혈청의슬라이드법에서음성, 시험관법에서양성 (2+, 3+) 의응집을보였는데, 응집강도의차이는시약 clone 의조성차이로구분되며 bio clone (polyclonal+ 단클론 ) 시약만이단클론만으로조합된시약보다응급강도의차이가있었다. partial D 의가능성을확인하기위해분당서울대학교병원진단검사의학과에검사를의뢰한결과, 환자의 Rh(D) 혈액형은시약에따라반응에차이가있는 partial D(unclassified variant) 로확인되었다. 고찰 : D 양성자에서항 -D 가생성된경우 partial D 의가능성을생각해볼수있지만, 항 -D 를가지지않은 partial D 의대부분은소실되지않은 clone 에대한단클론성항체를이용한항 -D 시약으로검사한혈청학적인검사법만으로는이를찾아내기가용이하지않다. 본증례는약 -D 형검사를위한간접쿰스법이전의시험관법에서양성이므로 Rh 양성으로오인할수있었으나, 슬라이드법에서음성이고타사의항혈청과비교하여 (1+ ~ 3+) partial D 를고려해보고이를확인하였다. 이와는상반되게 epitope 의결여된상태에따라일부시약에서는약 -D 검사까지시행해도 D 음성으로보고되는 partial D (categoly Ⅵ) 도있으므로유럽지침은두가지의항 -D 시약으로검사하는것을권고하고있다. 이에시험관법에서응집반응의강도가낮을때 (2+ 이하 ), 공혈자검체는양성으로보고하지만수혈자검체에서는 Rh 양성으로보고하기이전에슬라이드법으로검사해서음성인경우 clone 이다른두종류이상의항 -D 시약을이용하여검사해보고 partial D 의가능성을고려해보아야할것으로사료된다

53 대한수혈검사학회포스터 5 Ceftizoxime 에의한용혈성빈혈 : 증례보고서울아산병원진단검사의학과 1 울산대의대진단검사의학과 2 박태화 1 양회주 1 박현준 1 김형석 1 권석운 2 배경 (Background): 약제에의한면역용혈성빈혈은드물게보고되어왔다. 주로항생제에의해발생하는것으로알려져있으며, 약제훕착기전과면역복합체기전, 단백의비면역흡착기전을통해용혈성빈혈을일으키는것으로알려져있다. 약제와항체가면역복합체 (immune complex) 를형성하면, 이것이적혈구에비특이적으로결합하여보체를활성화하고용혈을유발할수있다. 본검사에서환자혈청과약물을함께넣은시험관에서응집을나타내면면역복합체가약제에의한용혈성빈혈의원인임을확인하고자한다. 방법 (Methods): 면역복합체검사는 Phosphate-buffered saline(pbs) 에약물을 1mg/ml 되도록용해시킨후상층액을취하여 1N NaOH 나 1N HCl 로 ph 가 7.0 되도록조정하고, 5 개의시험관에환자혈청 0.2ml, 약물용액 0.2ml, AB 형혈청 0.2ml, PBS 0.2ml 각각혼합한후, 10 개의시험관에상기혼합물을 3 방울씩 2 조로넣는다. 1 조시험관 5 개에는효소처리된 5% O 형적혈구 1 방울씩넣고, 2 조시험관에는효소처리되지않은 5% O 형적혈구를넣는다. 각시험관을잘흔들어주며 37 에 1 시간항온후 3,400rpm 15 초간원심침전하여응집여부를관찰하였다. 약제에대한항체검사는 Barbital-buffered saline(bbs) 10ml,1ml 의세척 O 형적혈구, 300mg Ceftizoxime 을넣고 37 에서 2 시간항온한다. 검사할혈청 3 방울과 5% 약제처리한적혈구를혼합해실온에서 15 분간항온한후 3,400rpm 15 초간원심침전하여응집여부를관찰하였다. 결과 (Results): Ceftizoxime 사용후발생한혈관내용혈로혈장교환술을시행한환자이다. 직접항글로불린검사에서 4+w, 단특이성항 -IgG 에서 ±, 항 -C3d 에서 4+ 보였다 (Table 1). 환자혈청과약물이포함된면역복합체검사에서대조군으로사용된 AB 형혈청검사는모두음성을보였다. 효소처리된적혈구와반응은 37 에서 2+, 효소처리되지않은적혈구에서는 37 에서 4+ 보였다. 그러나약물을첨가하지않은환자혈청에서는음성을보였다. 환자의혈청을이용한약제항체검사에서는약제처리한혈구와약제미처리한혈구모두 Tube 법과 Card 법에서음성을보였다 고찰 (Discussion): 면역복합체기전은약제가혈장단백과결합하여생성된항체가약제혈장단백과면역복합체를형성한후, 적혈구에부착하여보체를활성화시키는것으로 quinidine, phenacetin, tetracyclin 등이있다. 혈관내용혈이흔하며직접항글로불린검사상결합된보체에의하여양성반응을보이게된다. 약제에의한직접항글로불린검사양성반응은대부분의검사실에서투약정보및내용을확인할수없어검사자에게혼선을초래할수있으므로환자의수혈내역및질환등의결과를참고하여검사해야한다

54 대한수혈검사학회포스터 6 비예기항체선별검사용혈구변경으로인한 Anti-Di a 세브란스병원진단검사의학과김미 이경애 검출 배경 : 혈액은행에서의수혈전검사는 ABO, RhD 혈액형검사, 비예기항체선별검사및교차시험등이있다. 그중비예기항체선별검사는지연성용혈성수혈부작용과신생아동종면역성질환등을일으킬수있는비예기항체를선별하는검사로의료기관의혈액은행은대부분상품화된선별검사용혈구를사용하고있다. 상품화된혈구들은임상적으로의미있는항원을포함하고있으나서구인에서는거의발견되지않고아시아계에서비교적많이발견되는 Di a, Mi a 등의항원들이항상포함되지않기때문에특히한국인을비롯한몽고계아시아인에높은빈도로나타나는 Anti- Di a 을검출할수없어서 Anti- Di a 로인한수혈부작용의가능성이높다. 이러한이유로본원에서는 Di a 항원이포함된비예기항체선별혈구로변경하여항체선별의민감도를높여안전한수혈을하고자하였다. 방법 : ~ 까지본원혈액은행에비예기항체선별검사의뢰된검체중임의로선택한 116 건을 Ortho 사의 AutoVue 장비를이용하여전용시약인 Selectogen (2cell) 과 Di a 항원이포함된 Surgiscreen (3cell) 로비교하였다. Anti- Di a 로의심되는검체는세브란스암병원혈액은행에있는 IH-1000(Bio-Rad) 장비에사용되는 ID-Diacell I II, Di a cell 을이용하여재검사하였고 Immucor 사의 Anti- Di a 로 Di a 항원음성을확인하였다. 또진단검사의학과의혈액형 O 형인직원 12 명을대상으로 Di a 항원검사를실시하여 1 명의 Di a 항원양성혈구를얻어 Anti- Di a 를확인하였다. 결과 : 검사가능하였던비예기항체선별검사 116 건중 Selectogen 혈구에서 106 건은 Negative, 10 건은 Positive, Surgiscreen 혈구에서 104 건은 Negative, 12 건은 Positive 의결과를보였다. Selectogen 혈구에서 Negative 이면서 Surgiscreen 혈구에서 Positive 인 2 건은 Bio-Rad 사의 Di a cell 에서도 Positive 를보였고 Anti- Di a 시약으로항원 confirm 한결과 Negative 를나타냈다. Anti- Di a 양성이의심되는 2 건의검체는본원의 Di a 항원양성인직원의혈구와검사를실시한결과양성이었고추가적으로실시한교차시험의 Saline, 37 albumin 단계에서 Negative, AHG 단계에서 Positive 로나타났다. 고찰 : 한국인에서의 Di a 항원양성율은 6.4~14.5% ( 수혈의학 4 판 ) 로보고되고있는데본원은 Di a 항원이포함되어있는혈구를사용하여비예기항체선별검사를실시한결과비교검사가가능하였던검체 116 건중 2 건의 Anti-Di a 가검출되었으며현재까지 5 건이검출되어양성율은 0.1% 였다. 현재국내에서시판되고있는비예기항체선별혈구에는 Di a 항원이포함되어있지않아비예기항체선별검사에서음성인경우 AABB 에서권장하는 immediately spin 만실시하고출고할경우수혈부작용의위험이있다. Anti- Di a 는교차시험시 Saline, 37 알부민단계에서 Negative 로나타나기때문에 37 항글로불린방법으로교차시험을하여출고하여야한다. 그러나 Di a 항원이포함되어있는혈구를사용하여선별검사를할경우 Anti- Di a 의검출이가능하여선별검사의민감도가높아져더욱안전한혈액을공급할수있으며 immediately spin cross matching 만실시하여혈액이출고될수있으므로안전한혈액을혈액은행에서의업무간소화와함께빠르게출고함으로임상의의혈액은행에대한만족도가높아질수있다

55 대한수혈검사학회포스터 7 검사법에따른비예기항체선별검사의양성률비교 건국대학교병원진단검사의학과김영래 배경 (Background): 비예기항체선별검사는수혈후발생할수있는용혈성수혈부작용을예방할수있는중요검사이다. 따라서현재많은병원에서안전한수혈과불필요한교차시험을줄이기위한목적으로비예기항체선별검사를실시하고있다. 하지만선별검사진행시시약및방법상에따른양성도의차이가있음을발견하고이에저자는 DG gel system 과 AutoVue 장비를이용하여본원에서실시한 Ab -screening 의환자결과 104,935 건을대상으로양성율의차이를비교분석해보았다. 방법 (Methods): 2012 년부터본원에의뢰된총 104,935 환자중 61,403 건의환자결과는 DG gel system 을이용하여검사진행하였고, 건의검사는 AutoVue system 을이용하여결과판독하였다. 그결과를토대로후향적으로조사하였으며, 동일검체로검사진행시방법간결과값의차이가발생한 14 건은동정검사를시행해보았다 결과 (Results): DG gel system 을사용하여진행한총 61,403 건의선별검사에서는총 419 건의양성을나타내어검사건수에대한 0.68% 의양성율을보였다. AutoVue system 을사용하여진행한총 43,532 건의선별검사에서는총 457 건의양성을나타내어검사건수에대한 1.04% 의양성율을보였다. 이중 Positive(trace) 를제외한양성율비교시 DG gel 의경우는 356 건으로 0.57% 의양성율을나타내었고, AutoVue 의경우 392 건으로 0.90% 의양성율을보였다. DG gel 과 AutoVue 의불일치사례 14 건을동정해본결과 Cold 계열 1 건, 동정안되는경우 4 건, Anti-Lewis 경우 9 건으로조사되었으며, 이불일치 14 건모두 AutoVue 에서양성이었고, DG gel system 에서음성인경우였다. 고찰 (Discussion): 본결과에서선별혈구및검사방법상에따른양성율의차이가나타남을볼수있다특히, 14 건의동정결과 DG gel 의경우는 anti-lewis 를일부검체에서검출하지못하는문제를보였으며, AutoVue 의경우위양성의문제가있음을알수있다. 따라서, 수술및출산전비예기항체선별검사만선행되기보다선별검사양성판정시동정검사를시행하여비예기항체의 ID 를검출해놓는것도필수진행과정이되어야할것이다. 또한환자의과거비예기항체유무기록도수혈시중요한참고사항이될것이라생각한다

56 대한수혈검사학회포스터 8 혈액은행자동화장비 Galileo Neo 와 Qwalys3 의비교평가 삼성서울병원진단검사의학과김동주 배경 : 진단검사의학과는전분야에걸쳐자동화시스템을도입하는추세이고, 삼성서울병원은개원부터검사실자동화시스템을국내최초로도입운영함으로써검사의효율성과정확도향상및오류발생률감소에획기적인전기를마련하였다. 그러나혈액은행검사는그동안의값싼시약과풍부한노동력에비해상대적으로고가의장비와자동화기술개발, 현실적인수가반영의어려움등으로자동화가덜된분야였다. 본연구는원내에새로도입한자동화장비인 Galileo Neo(IMMUCOR, USA) 와 Qwalys3(DIAGAST, France) 의두장비간의비교를통하여수혈전검사를위한장비의유용성을평가하는데목적이있다. 방법 : ABO/Rh grouping 검사는 2014 년 6 월 26 일부터두달간삼성서울병원진단검사의학과에서시행되었던건진 CBC 검체 335 건, Ab screen 검사는기존에수기법으로검사되었던양성검체 37 건을대상으로 CLSI guideline I/LA33-P 기준에따라비교평가하였다. 수기법의 ABO/Rh grouping 검사는 tube 법과 plate 법으로, Ab screen 검사는 colum agglutinin 법으로시행하였다. Galileo 의 ABO/Rh grouping 검사는 hem agglutination ( 혈구응집반응 ) 이용한 microplate 법으로, Ab screen 검사는 solid-phase red cell adherence(sprca) 법으로, Qwalys3 장비의 ABO/Rh grouping 과 Ab screen 검사는 EMT(erythrocytes magnetised technology) 법으로시행하였다. 결과 : 두장비모두 precision (within-run, between-run) 평가는응집강도, 목표값모두만족하였다. Carrry over 평가는 positive sample 4 번측정후 negative sample 4 번측정하였으며, blood bank 장비의 carry over 허용범위는규정이없으므로, carryover acceptable range(negative 검체에서 positive 발생률 ) 를 zero(0%) 로하였고측정결과두장비모두 0% 로만족하였다. comparison 평가에서는 ABO/Rh grouping 검사는 355 건중 Galileo 장비에서는 15 건 (4.5%), Qwalys3 장비에서는 12 건 (3.6%) 이불일치를보였다. 이는조혈모세포이식, 골수이식, 아형등의환자의특이성으로인해장비에서판독이불가하거나혈액형을판정해주지않은경우였다. Ab screen 검사는양성검체 37 건검사중위음성을보인결과는 IgM 계열한랭항체 4 건과 IgG 계열의온난항체 6 건, 자가항체 1 건이었다. Interference substance 평가에서 lipemic 하고 hemolysis 된검체는 plasma typing 에서반응강도가약해졌으며, high bilirubin 검체는결과에큰영향을주지않았다. 고찰 : 두자동화장비는평가기준에모두만족하였으며 ABO/Rh grouping 검사에서불일치한결과를보인경우는기존수기법모다두장비가더민감하게반응하여약한응집반응을보였기때문이었다. Ab screen 검사에서위음성을보인 IgG 계열의온난항체결과는 colum agglutinin 법에서 ± 나 1+ 로반응강도가약했던경우였으며, 검사한계의보완을위해기존의 colum agglutinin 법과병행하여야할것으로사료된다. 수기법으로시행될때발생할수있는결과판독, 입력오류등의실수를최소화하여보다신속하고정확한결과확인이가능하며혈액은행업무량감소와많은검체를동시에처리하여업무효율의증가를가져올수있을것으로사료된다

57 대한수혈검사학회포스터 9 항글로불린법에서검출되지않고효소법에서추가동정된 Rh 계항체의빈도서울대학교병원진단검사의학과 1 서울대학교의과대학진단검사의학과 2 윤미숙 1 곽영국 1 한규섭 2 배경 (Background): 비예기항체의검출은안전한수혈을위해적합한혈액을선별하는데매우중요한부분으로검출되는항체의종류및빈도는검사에사용하는시약및검사방법에영향을받게된다. 최근에는미세원주응집법이보편화되어 Rh 계항체의검출률이높아졌다. 또한효소법도미세원주응집법으로유용하게시행되어저역가로존재하는 Rh 계항체의검출을용이하게하므로항글로불린법과병행하는것이추천된다. 하지만대부분의검사실의경우검사비용의문제로임상적으로의의가있는온난항체의동정이용이한 LISS/Coombs gel test 만을단독으로사용하는경우가많은데이에저자들은효소법을병행하여추가로동정된 Rh 계항체의빈도를분석하고자하였다. 방법 (Method): 2012 년 1 월부터 2013 년 12 월까지 2 년간외부병원의수탁의뢰및본원에서의뢰된총 2541 건의비예기항체동정검사에서일차적으로항글로불린검사는 Data-CyteR Plus(Medion Grifols Diagnostics AG, Switzerland), ResolveR Panel A(Ortho Clinical Diagnostics, Raritan, NJ, USA) 를이용한시험관법또는미세원주응집법인 LISS/Coombs gel test(diapanel, Bio-Rad, Switerzland) 로시행하였다. 추가로효소법은 NaCl/Enzyme gel test(diapanel p, Bio-Rad, Switzerland) 를진행하였다. 결과 (Result): 총 2541 건의비예기항체동정검사에서음성인 332 건을제외하면양성이 2209 건이고 Rh 계항체는 936 건으로 42.3% 이었으며그중항글로불린법에서는검출되지않고효소법에서추가로확인된건수가 296 건으로동정된 Rh 계항체의 31.6% 이었다. 단일항체는 anti-e 487 건중 82 건 (16.8%), anti-c 11 건중 4 건 (36.3%), anti-e 6 건중 1 건 (16.6%) anti-d 128 건중 58 건 (45.3%) 이, 복합항체는 anti-e+c 215 건중 anti-c 또는 anti-e+c 가 121 건 (56.2%), anti-c+e 77 건중 anti-e 가 30 건 (38.9%) 이추가로확인되었다. 고찰 (Disscussion): 저역가로존재하는비예기항체는수혈전검사에서검출되지않더라도그항체에반응하는항원양성적혈구가수혈되면예상치못한용혈반응을일으키거나기왕반응에의한역가상승으로심한용혈성수혈부작용을일으킬수있으므로매우유의해야한다. 한국인의 Rh 항원분포가 CDe 38.0%, CcDEe 34.2%, cde 8.8%, CcDe 10.3% ( 수혈의학 4 판. 한규섭외 2 명 ) 로보고되고있다. 또한본실험의분석결과를통해검출되는비예기항체중에서 Rh 계의항체의빈도가높고, anti-e+c, anti-c+e 의 2 가지복합항체에서저역가항체의공존이각각 56.2%, 38.9% 로비예기항체검사를항글로불린법까지만시행한다면보다안전한수혈을위해수혈용혈액의선택에있어서 anti-e 만동정된경우에 E 항원음성, c 항원음성혈액을, anti-c 만동정된경우에 C 항원음성, e 항원음성혈액을수혈하는정책을적용하는것이바람직할것으로사료되며최근혈액원에서 BISS 를통해제공되고있는적혈구의 Rh subtype 선별검사결과를이용하는것도큰도움이될것으로사료된다

58 대한수혈검사학회포스터 10 신속한혈소판준비를위한프로세스변경사례서울성모병원진단검사의학과 1 가톨릭의대진단검사의학과 2 이병규 1 권순미 1 박규호 1 김지선 1 송영선 1 차경호 1 김용구 2 배경 (Background): 서울성모병원의 CMC nu 전산프로그램은일반혈액준비화면과특수혈액준비화면으로나뉘어져있으며다량의신청으로인해백혈구여과제거성분채집혈소판 (LRSDP) 은특수혈액준비화면에서준비할수있게구성이되어있다. 특히혈액내과환자가다수인본원의특성상농축혈소판 (PC) 이아닌백혈구여과제거성분채집혈소판을수혈하는경우가많이존재하며공급이충분치않은경우수혈을받지못하는경우가발생할수가있어이런경우불가피하게농축혈소판을준비할수밖에없다. 이러한이유로매번유선상으로병동에연락을해야하는상황이발생하여혈액준비업무에부하가발생하므로이를개선하고자프로세스를개발하게되었다. 방법 (Method): 현재본원에서사용하는 CMC nu 전산프로그램의특수혈액준비화면에간호부전송을수행할수있는새로운화면을개발하고이화면에서는의뢰부서에서요청한환자별백혈구여과제거성분채집혈소판의신청상태가보여지게구성하였다. 이중당일준비가가능한특수혈액은응급 (Emergency) 체크박스를선택하면일반혈액준비화면으로옮겨지며당일준비가불가능한경우에는간호부전송체크박스를선택하고전송하면의뢰간호부서전산프로그램의특수혈액미불출리스트에환자의정보가보여지게된다. 오후 4:00 경에담당간호사가확인을하고담당환자의성명이보여지면당일준비가불가능한경우이므로예비용이아닌그날꼭수혈이필요한지를주치의와상의하여백혈구여과제거성분채집혈소판이아닌농축혈소판으로혈액을변경하여신청하게되며혈액은행에서는이것을확인한후혈액원에신청을하도록프로세스를개선하였다. 결과 (Result): 요구되는백혈구여과제거성분채집혈소판에비해공급이부족한경우에요청부서에유선연락없이 CMC nu 전산프로그램으로확인이가능하게되었으며필요한경우에농축혈소판으로신청하여신속한혈액수혈이가능하도록개선되었다. 또한, 간호부전송으로준비가불가능한혈액의경우에는혈액은행의확인필요없이간호부에서반환이가능하게되어추후혈액은행에서취소해주는과정이없어지게되었다. 고찰 (Discussion): 백혈구여과제거성분채집혈소판의공급부족이이전에비해줄어들었고혈액원에서는의료기관에서의공급요청을대체로공급해주는수준까지왔으나긴연휴나특정혈액형의혈액요구가일시적으로많아지는경우에는아직도공급부족이현존하는것도사실이다. 이를대비하고자백혈구여과제거성분채집혈소판준비가가능한지를병동에서실시간으로파악할수있고, 수혈부서에서는유선연락을하지않아도되는개선된프로세스는보다신속한혈소판수혈을가능하게하므로한시가급한혈소판수혈이필요한환우에게도움이되리라사료된다

59 대한수혈검사학회포스터 11 혈액형자동판정장비 PK7300 을이용한 Rh 표현형의검출 한마음혈액원유장훈 안현기 김민정 김종원 정희숙 황유성 배경 (Background): Rh 혈액형은임상적으로 ABO 혈액형다음으로중요한혈액형이다. 현재까지 57 개의 Rh 혈액형항원이알려져있으며이중면역원성이강하고임상적으로가장중요한항원은 D 항원이며, C, c, E, e 항원은수혈자에서문제가되는비예기항체의주요원인으로알려져있다. 국내에서는전체헌혈자에대하여 D 항원검사를필수적으로시행하고있으며, C, c, E, e 항원에대해서는이러한항원에이미감작되어있는환자에게해당항원이없는혈액을수혈하기위해선택적으로검사를시행하고있었으나, 이항원들에대한병원들의적합혈요청이점점증가함에따라본혈액원에서는전체헌혈자에대해 Rh 표현형검사를시행할수있는지평가를진행하였다. 방법 (Methods): 평가시약은 DIAGAST Anti-C, Anti-c, Anti-E, Anti-e 이었으며평가장비는혈액형자동판정장비 PK7300 (Beckman Coulter) 을사용하였다. 우선적합한시약희석배수를결정하기위해각시약을 10 배에서 100 배까지 10 배단위로희석한후총 100 건의헌혈자무작위검체에대해장비검사를시행하여그결과를수기검사결과와비교하였다. 이를통해결정된시약희석배수를 PK7300 에적용하여매일 30 건씩 30 일동안총 900 건에대해검사를시행하고, 최종적으로수기검사결과와비교하여본검사의민감도와특이도를산출하였다. 결과 (Results): PK7300 에대한시약의희석배수시험에서수기검사결과와 100% 일치하는최대희석배수를선정하였고그결과, Anti-C, Anti-c, Anti-E 는 100 배희석이, Anti-e 는 40 배희석이적합한것으로결정하였다. 결정된희석배수를적용하여총 900 건의검체에대해검사를시행한결과, 특이도는 Anti-C, Anti-c, Anti-E, Anti-e 시약에서각각 93.3%, 99.2%, 99.1%, 98.9% 를보였고, 민감도는 99.7%, 92.0%, 100%, 99.5% 를나타내었다. 고찰 (Conclusions): 혈액형자동판정장비를이용한 Rh 표현형검사의평가결과, Anti-E, ANTI-e 시약은선정된희석배수에서특이도와민감도모두우수한편이었으나, Anti-C 시약은상대적으로특이도가낮고 Anti-c 시약은민감도가낮게나타났다. Anti-C 시약의경우 C 항원양성빈도가높고 ( 본원적합혈검사통계기준 77.4%) 적합혈요청시에도위양성결과를보인혈액은애초에대상에서제외될것이므로선별검사로이용하는데에는무리가없을것으로사료되었다. 그러나기관에따라서는적합혈에대한수기검사재확인이누락된채불출되는경우도전혀배제할수없으므로, 위음성결과를보인 c 항원음성혈액이적합혈에선정될위험성이있는 Anti-c 시약은선별검사에적용하기어려울것으로판단되어, 최종적으로본원에서는 C, E, e 항원에대한헌혈자선별검사를시행하고있다. 이러한 Rh 표현형선별검사의시행은본원에서는적합혈검사시간을단축시키고, 공급병원의만족도는증가시킬것으로기대된다

60 대한수혈검사학회포스터 12 자동혈액형판정장비에서 B 아형혈액형을검출하기위한 Anti-B 시약비교평가 한마음혈액원김근옥 유장훈 안현기 김민정 김종원 정희숙 황유성 배경 (Background): ABO 혈액형검사는헌혈자선별검사의필수항목으로서, 본혈액원에서는정확한혈액형검사를위해전체헌혈혈액에대해자동혈액형판정장비로검사를시행한후혈구형과혈청형의불일치가있거나반응강도가낮게나타나는혈액에대해서수기검사를시행하여 ABO 아형을검출하고있다. 특히 weak B 표현형을보이는 B weak 또는 AB weak 아형혈액은혈청에 anti-b 가존재하는경우도많아, 자동혈액형판정장비혈구형검사에서 anti-b 시약에대한응집이음성을나타내면 O 또는 A 형으로자동판정되었다가수기검사를통해서야아형임을검출할수있다. 이에본원에서는두가지 anti-b 시약이자동혈액형판정장비혈구형검사에서 weak B 혈액형을얼마나민감하게검출할수있는지비교평가를시행하였다. 방법 (Methods): A 형 180 건, B 형 129 건, O 형 148 건, AB 형 55 건등총 512 건의헌혈자검체를대상으로, BIOSCOT Anti-B(Merck Millipore) 시약과 BioClone Anti-B(Ortho Clinical Diagnotics) 시약을 5 배, 90 배희석하여자동혈액형판정장비 PK7300(Beckman Coulter) 에비교검사를실시하여검사결과의일치도를구하였다. 추가로 B 형적혈구 3 례, AB 형적혈구 3 례에대한응집역가시험을시행하여 256 배이상응집을보이는지확인하고, AB weak 아형혈액형 6 례에대한검사를시행하여두시약의결과를비교하였다. 결과 (Results): 총 512 건의헌혈자검체에대한두가지시약의비교검사결과모든혈액형에서동일한결과를보여 100% 일치도를나타냈다. B 형적혈구 3 례와 AB 형적혈구 3 례에대한응집역가시험에서도두시약모두 1:256 이상의응집반응을보여적합하였으며, 응집강도는 BIOSCOT Anti-B 시약에서더강하게나타났다. AB weak 아형혈액형 6 례에대한검사에서는 BIOSCOT Anti-B 시약의경우자동혈액형판정장비에서 5 배, 90 배희석모두응집을보이지않았고, BioClone Anti-B 시약의경우 90 배희석에서는모두응집을보이지않았으나 5 배희석에서 3 건의응집반응과 1 건의미결정반응을보였다. 동일한검체에대해두시약모두수기검사에서는 100% 응집을보여혈구형 AB 형을확인할수있었다. 결론 (Conclusions): BIOSCOT Anti-B 시약과 BioClone Anti-B 시약에대한비교평가결과, 특이도와응집역가는두시약모두적합하였으며자동혈액형판정장비로 weak B 혈액형을검출하는데에는 BioClone 시약이더민감한것을알수있었다. 혈액형검사의특성상오랜기간검체를모아서평가에이용하기어려워, 평가에이용된 AB weak 아형혈액형이단지 6 례에불과하고 B weak 혈액형이포함되지않은점은추후연구를통해보완이필요하다고사료된다. 다만, 이번평가결과를근거로본원에서는 BioClone Anti-B 시약을자동혈액형판정장비에적용해검사를시행하고있으며, 헌혈현장에서시행하는혈액형현장검사에는응집역가시험시응집강도가더높게나온 BIOSCOT 시약을사용하여판독자들의편의를높이고있다

61 대한수혈검사학회포스터 13 헌혈자비예기항체동정검사시 NaCl/Enzyme gel test 의유용성 대한적십자사남부혈액검사센터김민지 김상봉 김온정 김성숙 이대동 박수진 배경 (Background): 대한적십자사남부혈액검사센터는 2013 년 10 월 17 일부터 IH-1000 자동화장비 (Bio-Rad, Cressier, Switzland) 를사용하여 LISS/Coombs gel test 로가온단계의임상적의의가있는비예기항체들을검출하고있다. 선별된양성검체에대해서는항체동정검사를시행하였는데, 이단계에서명확한항체가동정되지않는경우가다수발생하였다. 이에따라기존에실시하고있는 LISS/Coombs gel test 에서항체가동정되지않는경우에 NaCl/Enzyme gel test 를추가하여헌혈자비예기항체양성군에서 NaCl/Enzyme gel test 추가에따른동정률변화및임상적의의를관찰하고자하였다. 방법 (Methods): IH-1000 자동화장비에 ID-Diacell Pool (Bio-Rad, Cressier, Switzland) 과 LISS/Coombs card (Bio-Rad, Cressier, Switzland) 를장착하여헌혈자검체에대해선별초회검사를실시하였다. 선별초회양성검체에대해같은시약을사용하여수기검사로선별재검사를시행하였고, 이단계에서도양성결과가나온경우 ID-Diapanel (Bio-Rad, Cressier, Switzland) 과 LISS/Coombs card 를이용한동정검사를실시하였다. 응집결과는음성, ±, 1+, 2+, 3+, 4+, DP (double population) 로구분하였고시약제조사에서제공하는판정용표를이용하여판정하였다. 명확한항체로동정이되지않은경우에한하여 ID-Diapanel P (Bio-rad, Cressier, Switzland) 와 NaCl/Enzyme card (Bio-rad, Cressier, Switzland) 를이용한 NaCl/Enzyme gel test 를추가시행하였다. 결과 (Results): 2014 년 4 월 30 일부터 5 월 16 일까지비예기항체선별초회검사가의뢰된 27,765 건중에서 IH-1000 장비에서양성으로판정되어수기재검사를시행한경우는 178 건 (0.64%) 이었고, 이단계에서다시양성으로판정된 87 건 (0.31%) 에대해동정검사를실시하였다. 동정검사에서 72 건이정확한항체가동정되지않았고, 이에 NaCl/Enzyme gel test 를추가시행하여 11 건 (15.3%) 에서 LISS/Coombs gel test 에서동정되지않았던항체가새로동정되었다. 가장많은빈도로검출된항체는 anti-p 1 6 예이고, 다음으로복합항체 anti-p 1 + anti-le a 3 예, 그다음으로 anti-le a 2 예가동정되었다. 고찰 (Discussion): 통상비예기항체의검출빈도는검사방법, 대상자에따라결과에큰차이를보이는것으로알려져있다. 본연구는헌혈자군을대상으로한것으로동정검사에 LISS/Coombs gel test 만사용시항체동정률은 17.2% 로매우낮았으나명확한항체가동정되지않는경우에한하여 NaCl/Enzyme gel test 를시행한결과, 동정률은 29.9% 로높아졌다. 따라서 LISS/Coombs gel test 를이용한선별검사에서양성이나동정단계에서명확한항체가동정되지않는경우에 NaCl/Enzyme gel test 를추가하는것이비예기항체의동정률을높이는데유용한것으로생각된다. 다만, NaCl/Enzyme gel test 에서추가로동정된비예기항체의임상적의의는검사시행기간이짧아단순비교가어려웠다. 헌혈자선별검사로서동정검사는의미가없을수있으나, 37 에서양성반응을보이는헌혈자군의비예기항체분포에대한기초자료가될수있을것으로사료된다

62 대한수혈검사학회포스터 14 외래환자의동선최소화를위한외래수혈프로세스변경서울성모병원진단검사의학과 1 가톨릭의대진단검사의학과 2 이병규 1 신동필 1 김미경 1 김주성 1 송영선 1 김용구 2 배경 (Background): 서울성모병원으로이전하기전강남성모병원에서는진료후수혈처방을받은환자의경우외래채혈실에다시방문하여보관검체를채혈하고그검체를가지고환자가혈액은행에제출하면서수혈혈액의준비되는시간을확인하고가는 process 를가지고있었다. 환자가직접검체를이송하면서파손, 분실등의위험이존재하였으며채혈실 - 진료실 - 채혈실 - 혈액은행 - 주사실로옮겨가는긴동선을가질수밖에없었다. 이러한상황에서울성모병원으로이전하면서채혈실은 1 층, 3 층에, 혈액은행을포함하는검사실은 4 층에위치하면서이로인하여환자의동선은더길어질수밖에없게되었다. 이에혈액은행에서는환자의동선을최소화하기위하여외래환자의수혈프로세스를변경하게되었다. 방법 (Method): 현재본원에서사용하는 CMC nu 전산프로그램에외래환자수혈처방조회라는새로운화면창을개발하였다. 이화면은혈액은행, 외래채혈실, 주사실에서확인이가능하며환자가채혈실에서일반검사채혈을시행하면서교차시험용보관검체를같이채혈하여보관하게된다. 이후진료를마친환자는채혈실에방문하여수혈여부를말하면외래환자수혈처방조회창의외래확인란체크박스를선택한다. 이때실시간으로혈액은행에서확인하여채혈실에서이송직원에의해옮겨진교차시험용보관검체를확인하고외래환자수혈처방프로세스에의한혈액준비과정을거치게된다. 이화면에현재혈액준비의상태가미수납 - 접수 - 혈액준비 - 매칭검사 - 불출대기로실시간나타나게된다. 결과 (Result): 새롭게만들어진프로세스를통하여환자가검체를직접이송하는불편및외래환자수혈처방확인전산화로환자의동선이외래채혈실 - 진료실 - 외래채혈실 - 주사실로기존과달리 1 단계감소하였다. 또한혈액은행에서실시간으로외래환자수혈처방을확인하면서혈액을준비할수있게되었다. 그리고이화면을주사실과공유하면서현재혈액의준비상태를실시간확인이가능하여유선상으로확인전화를하는번거로움이사라지게되었다. 고찰 (Discussion): 재원하고있는환자와달리수혈을필요로하는외래환자는보다더신속한수혈준비가필요하다고본다. 이를위한외래환자의동선을최소화하고수혈혈액의준비시간을단축시키려는노력은혈액은행이환자에게안전한수혈을준비하는것못지않게중요하다고사료된다

63 대한수혈검사학회포스터 15 효소면역측정법을이용한인체 T 림프영양성바이러스항체시약의평가 한마음혈액원이석창 최정훈 복해용 이전회 임대영 정희숙 황유성 배경 (Background): 인체 T 림프영양성바이러스 (human T-lymphotropic virus, HTLV) 는 human retrovirus 중가장먼저분리된바이러스로, T 세포백혈병을비롯해여러가지질병을유발하는것으로알려져있다. 대표적으로 HTLV-I 과 HTLV-II 가이에속하며, 어머니에서유아로, 성접촉을통해서또는감염된주사기를공동으로사용하거나감염된혈액제제의수혈등비경구적경로를통해서전파될수있다. 따라서미국, 일본, 영국, 프랑스등에서는일찍이헌혈혈액에대해 HTLV 선별검사를도입하였다. 우리나라에서도혈액의안전성확보를위해 2009 년 4 월 15 일부터 HTLV 항체검사를시행했으며, 현재혈장성분헌혈자를제외한모든헌혈자를대상으로실시하고있다. 본혈액원에서도효소면역측정법 (Enzyme immunoassay, EIA) 을이용하여 HTLV-I/II 항체검사를시행하고있다. 본연구는두가지 HTLV-I/II 항체 EIA 시약에대한평가를시행하여선별검사로서의유용성을알아보고자하였다. 방법 (Methods): 평가시약은제네디아에취티엘브이 I/II 항체엘리자 ( 녹십자 MS) 와 Murex HTLV I+II (Diasorin) 이며평가장비는본원에서사용하는 Elite 면역자동분석기 (Bio-Rad) 을이용하였다. 헌혈자무작위검체 1054 건과이미확진검사양성으로판정된헌혈자검체 23 건을대상으로특이도와민감도를평가하였고, 다른항체와의교차반응유무를평가하기위해 HCV, HIV, Malaria 항체가양성결과를보인검체각 10 건씩에대해서도검사를시행하였다. 또한이미 S/CO (signal/cut-off ratio) 를알고있는검체들을음성, 저농도, 고농도의세농도군으로 pooling 하고그검체를하루 2 회씩중복검체로검사하여 5 일간총 20 번측정하여정밀도를평가하고, 총평가기간동안정도관리물질결과에서도변이계수 (coefficient of variance, CV) 를도출하였다. 결과 (Results): 두시약모두특이도와민감도는 100% 를나타냈고, 총 30 건에대한교차반응시험에서도음성을나타내어다른항체와의교차반응을나타나지않았다. 세농도군의 pooling 검체에시행한정밀도평가에서, 제네디아는음성, 저농도, 고농도검체에서각각 total CV 가 29.7%, 14.83, 7.6% 로나타났으며, Murex 는 8.9%, 4.5%, 6.6% 이었다. 총평가기간동안음성, 양성, 약양성정도관리물질의 total CV 는제네디아가 31.1%, 6.3%, 17.5% 이었으며, Murex 는 4.7%, 4.4%, 3.6% 로나타났다. 고찰 (Discussion): 이번평가를통해제네디아와 Murex 두시약모두특이도와민감도가우수하며헌혈자에시행하는항체검사항목들과교차반응이없음을알수있었다. 따라서두시약모두헌혈자혈액에대한선별검사시약으로적합한것으로사료된다. 다만제네디아시약의경우정밀도평가에서음성검체와음성정도관리물질의 total CV 가 30% 내외로다소좋지않은결과를보였으나, EIA 정성검사라는특성을고려할때실제검사적용시문제가되지는않을것으로사료된다

64 대한수혈검사학회포스터 16 헌혈자선별검사용 C 형간염바이러스항체검사시약평가 한마음혈액원최정훈 이석창 이전회 복해용 임대영 정희숙 황유성 배경 (Background): C 형간염바이러스 (Hepatitis C virus, HCV) 는 flaviviridae family 에속하는 RNA 바이러스로서혈액을매개로전파된다. 지속적인 HCV 감염은만성간염을유발하고, 간경변이나간암으로진행할수있다. 국내의경우 1991 년부터모든헌혈혈액에대해효소면역검사법 (Enzyme immunoassay, EIA) 을이용한 HCV 항체검사를실시하여혈액안전성을확보하기시작했다. 또한, 2005 년 2 월부터 HCV 항체검사와함께핵산증폭검사를실시함으로써혈액안전성이더욱강화되었다. 본혈액원에서는더욱안전한혈액을공급하기위해지속적으로새로운헌혈자선별검사용시약의성능을평가하고있으며, 그일환으로두제조사의 HCV 항체검사시약을대상으로비교평가를시행하였다. 방법 (Methods): 평가시약은 Genedia HCV ELISA 3.0( 녹십자 MS) 와 Monolisa Anti-HCV PLUS Version 2(Bio-Rad) 이며평가장비는본원에서사용하는 Elite 면역자동분석기 (Bio-Rad) 을이용하였다. 헌혈자무작위검체 1031 건과이미확진검사양성으로판정된헌혈자검체 6 건을대상으로특이도와민감도를평가하였고, 다른항체와의교차반응유무를평가하기위해 HIV, Malaria, HTLV 항체가양성결과를보인검체각 10 건씩에대해서도검사를시행하였다. 또한이미 S/CO (signal/cut-off ratio) 를알고있는검체들을음성, 저농도, 고농도의세농도군으로 pooling 하고그검체를하루 2 회씩중복검체로검사하여 5 일간총 20 번측정하여정밀도를평가하고, 총평가기간동안정도관리물질결과에서도변이계수 (coefficient of variance, CV) 를도출하였다. 결과 (Results): 두시약모두 1031 건의헌혈자무작위검체에서각각 1 건씩양성반응을보여 99.9% 의특이도를보였으며, 6 건의양성검체에대해서는모두양성결과로민감도 100% 를나타냈다. 총 30 건에대한교차반응시험에서도음성을나타내어다른항체와의교차반응을나타나지않았다. 세농도군의 pooling 검체에시행한정밀도평가에서, Genedia 는음성, 저농도, 고농도검체에서각각 total CV 가 21.5%, 10.8, 13.2% 로나타났으며, Monolisa 는 9.5%, 5.2%, 5.5% 이었다. 총평가기간동안음성, 양성, 약양성정도관리물질의 total CV 는 Genedia 가 9.6%, 8.1%, 14.8% 이었으며, Monolisa 는 14.0%, 5.5%, 6.7% 로나타났다. 결론 (Conclusions): 이번평가를통해 Genedia 와 Monolisa 두시약모두특이도와민감도가우수하며헌혈자에시행하는항체검사항목들과교차반응이없음을알수있었다. 따라서두시약모두헌혈자혈액에대한선별검사시약으로적합한것으로사료된다. 다만 Genedia 시약의경우정밀도평가에서음성검체의 total CV 가 21.5% 로다소큰결과를보였으나, EIA 정성검사라는특성을고려할때실제검사적용시문제가되지는않을것으로사료된다

65 대한수혈검사학회포스터 17 최종제대혈제제 Volume 을위한 Auto-Volume Expressor 장비의 QC(quality control) 메디포스트 생명공학연구소홍은경 최기훈 홍혜경 배경 : 조혈모세포이식에사용되는최종제대혈은적혈구를분리제거한 LRP(Leukocyterich plasma) 를 Auto-volume Expressor(A-V Ex, ThermoGenesis) 장비를사용하여혈장을제거한후 20.0 ml CLRP(concentrated leukocyte-rich plasma) 에 5.0 ml동결보존제 (Dimethyl sulfoxide;dmso, Dextran 40) 를더하여최종 25.0 ml로영하 196 액화질소보관용기에냉동보관한다 ml CLRP 는 A-V Expressor 장비에따라 volume 이결정되므로정확한양을얻기위해서위장비의 QC(quality control) 가매우중요하다. 방법 : 위장비의기존 QC 방법은 90.0 ml PBS 를이용하여 set volume 값이 20.0 ml가되도록조정한다. 이렇게조정된장비로 2013 년 01 월 01 일부터 2013 년 03 월 31 일까지메디포스트 제대혈은행에보관을의뢰한 3,689 건제대혈검체의 CLRP 를분리한후최종제대혈의양을분석한결과 LRP 101g 이상검체군에서최종보관량 25.0 ml기준시오차가발생하였다. 이오차범위를줄이기위해다음분석을진행하였다. 동일방법으로 QC 를진행하되 PBS 의양을 ml로늘려서새로운 A-V Expressor 장비의 set volume 값이 20.0 ml가되도록조정하고 2014 년 04 월 01 일부터 2014 년 07 월 31 일까지보관의뢰된제대혈 4,465 건중 LRP 101g 이상검체만 ml PBS 로조정한장비로 CLRP 를분리하여최종제대혈의양을분석하고 PBS 양에따른위장비의측정오차를비교하였다. 결과 : PBS 90.0 ml사용시에 LRP 101g 이상 (179 건 ) 의최종제대혈양은평균 25.7 ml (±0.86) 로분석되었고, PBS ml사용시에 LRP 101g 이상검체 (159 건 ) 의최종제대혈양은평균 25.0 ml (±0.72) 로각각분석되었다. 고찰 : 분석결과 90.0 ml PBS 사용시 +0.7 ml의오차를보인반면, 140 ml PBS 를사용하여조정된장비로분리된최종제대혈검체는 25.0 ml (±0.72) 로보다정확하고정밀한결과값을나타내었다. A-V Expressor 장비의 QC 에서 PBS 양을다르게적용한장비를준비하여분리된 LRP 의무게를구분하여장비를사용하여주는것이최종제대혈제제의정확한 volume 을위하여필요하다고생각된다