대한엄상뱅리사회지 : 제 6 켠제 1 호, 1974 -.. 部韓國人의血中 L 輔 mu 7 율에對한調죠뿔 가폴럭中央醫魔 I 完臨많醫學장 { 究所 ( 指導李鍾펴敎授 ) 金昌均 金若洙 == A bstract == Measurement of Blood lactate among some Koreans Chang Kyun Kim, Yak 800 Kim, Clinical Research Instit μte and Depart ηlent 0/ Clinical Pathology, Catholic lvfedical Center, Seoul, Korea. (Direcìor: Prof. Chong Moo Lee M.D.) This study was carried out to obtain the technical knowledge about blood lactate level in 10() healthy Koreans and compared by age, sex, and other country s level. Huckabee modification of the Barker ahd SummerSO:1 chemical me 닌 10d was employed for the test. The results were as followíngs: 1) The blood lactate level was 10. 27gm/100ml and the ranges from 5.3 to 17.1mg/100ml for 100 healthy Koreans tested. This level was similar that of U.S. A. healthy populat 성 n which was reported 10.9mg/100ml. 2) The age-specific level of the meah blood lactate were 10. 673mg/100ml for 19 years of age group, 11. 235 mg/100ml for 20 to 29 years, 10.078mgαOOml for 30 to 39 years and 9.29Smg/100ml for the group older than 40 years respectivejy for the total populatlon examined. 3) The mεan blood lactate level by sex presented not significant difference (p>o. 05): 10. 702 mg/ 100ml among 52 males and 10. 58Smg/100 among 48 females. 4) The normal range of blood lactate levels obtained in different laboratories may vary with methodology and the technique Qf withdrawing and preserving the venous blood. We are advlsable to perform the analys:s with Ba r1ζer-summerson chemical method ín Korea. 1. 總論 原 g 깅을分析하거 1 되면서부터 phenformln(dbi) 治魔, ethanol 橫取, 白血病, glycogen storage 族愚, 非케돈 형 dia betíc acldosis 안경우에增加됨이알려지게되 Lactic acid 에對하여는 1925 年 cinausen, S.\V. 가어 런이들의 Lactic acidosis 에關한報告로부터시작하여 1932 년 Hartmann, A.F., Senn, M. J. E. 等은 metabolic acidosis 治續에利用하게되었고 1959 年에는 Cardiopase (LDH) 의存在下에 reduced nicotinamide adenine d in ucieotide (N AD H 2 ) 와作用하여形成되며이빼 lact ulmonary bypass 도論議되었다 1) 그후 1961 年에 Huckabee 等이臨皮的안觀點에서血中숭 Lt 혐의增加 - 38- 었다성, 10) Lact1c acid 는 glucose 의 anaerobic metabolism 의 終末塵物로서 pyru vic acid 가 Lactic acid dehydrogen ate 의灌度는 pyruvate 의 農度와組織의醒化狀態에
依하여變化가오는 - NADH2 와 NAD 의比의常數에 따라서結定 cl 띈다. o OH 11 LDH CH 3COOH + N ADH2 二 =:.': CH3CHOOH + NAD pyruvic lactic acid acid Lactate=Pyruvatex KJNADH 센 [NAD] 그러나實훈臨皮的 A 로는 NADH 2 약 NAD 의比의 關係의異狀오로因하여오는경우는 - 적고大部分 1 pyruvate 의禮度變化에依하여 lactate 의灌度카決 定되는껏이普通이다. Huckabee 는 lactate: pyruvate 의比가增加했을혜 의 lactate 를 excess lacta te 라고命名하고아래公式 에依하여計算하였다 3) Excess lactate= (Ln-Lo) - (Pn -Po) (Lo/Po) Ln:observed Lactate value Lo:Control Lactate value Pn:observed Pyruvate value. Po:Control Pyruvate value 測定方法에서는지금까지는二大別하여 -1. enzymatic method 2. Chemical method-. 왔으며各方法 의長 短點은물론있다. 化學的方法은다시 colorimetry, titration 及 gas chromatography 에의해測定 되어지며, 特히 1941 年 Barker and Summerson 法은 가장普遍的으로많이使用되는方法이며現在에는이 方法의變法들이使用되고있 A며, 가장活發하게方法論의論議가있였던 1960 年代의調좁에서드結果에 서는差異가없음을볼수가있다 1, 4, 5, 6, 9) 따라셔本 著者들은人體內代謝機能에關係가깊은!'1a ctic acld 에 對하여關 J 心을갖고우러나려 - 의 - 部健康人中에셔血 中뚱 u 補 r 편른퍼 lij 定하켜그結果를원 f 씀하는바이다. 2. 4 % copper sulfate:20 % copper sulfate 溶被을 r :5 로 m 釋한다. 3. Calcium hydroxide, powder.:c.p. grade 가좋다. 4. Sulfuric acid, concentrated: 시약용 1 級이면좋다. 5. P-hydroxydiphenyl reagent: 5%NaOH 溶被 10ml 에 P-hydroxydiphenyl 1.6g 을넣고약간의증유수를 넣고서서히熱을加하면셔, 흔들어주어完全히녹안 後 100ml 이되케한다. 갈색영에보판하여두면數個 J 月間安全하다. 6. Lactate standard, stock, 100mg% : 가. 106.6mg 의 lithium lactate 를 50m l. 의증유수에 녹안다. 나. 1N, H2S04 20m!. 을넣고 100ml 이되게중유수 로채운다. 7. Working standard: stock standards 를 1 : 5, 1 : 10> ~ 로輪 - 釋하여만든마. 그러면 20mg%, 10mg%7} 된다. Procedure: 1. O. 3N. barium hydroxide 와 5% zinc sulfate 블便 用하여 blood, standard 를除蛋白한뒤 filter 보다는 遠心分離를하여可能한限 contamination 을피하썩 준다. 2. 遠心分離管에증유수 8ml. filterate 1ml., 20% CUS04 1m!. 을넣고 parafilm을使用하여찰混和하 여준마. 3. 여기다 19m. 의 Calcium hydroxide 를넣어준뒤매 우 g뭘하게震擾한마. 만약이혜색갈이 bright blue. 가아니면 calcium hydroxide블더넣어준다. 4. 室溫에서 30 分間세워두는데간흑가다震覆器를使 用하여震覆하여준다. 30 分後에遠心分離하켜 5. 表面의 par t1 cles 를피하여 1m!. 의上 R 波을다른 1I 對象及方法 1974 年 5 月 28 日부터 6 月 30 日까지가를락醫젠大學附 屬聖母病院에서出國을위한身體檢겉 者中臨 / 멋及理, 化學的所見에서異狀이없는健康人 100 名을對象오 로 ( 男子 52 名, 女子 48 名 ) 하였우며可檢物은完全洗 練, 滅園띈注射器로靜服에서뽑은血波을 anti-glyco.. lysis 投劃을하는 sodium f1 uoride 가加하여진 tube 에 넣고찰흔들어서冷藏庫에 60 分間放置後에遠心分離 tube 에取한뒤 4% CUS04 0.05m l. 를加한뒤混和後 ice water bath 에넣어서차게만든狀態에서 6. 6m l. 의冷 H 2S0 4 를 tube 의관벽을따라셔서히넣 은후 VORTEXR 블使用하여셔서히混和하여준다. 7. 內溶波 1 흔들리지않게하여 boiling water 속에 5 分間담근뒤 8. 冷水어 } 넣고室溫以下후식한後 0.1m l. 의 P-hyd roxydiphenyl 을溶滾에直接떨어지게加한마음 VORTEXR 블使用하여彈하게混和한다. 하여上淸滾을取하여 SomogyÍ 法에依한蛋白除去後 9. 室溫에서 1 時間反應시키는데이때最少한 1 回以上 L modified Barker and Summerson 方法을利用하여 폐定하였다. Reagents: 1. 20% copper sulfate: 20gm 의 CuS045H 2 0 를 100m!. 의증유수에녹안다. 震覆하여준다. 10. Boiling water 에서 90 젠 동안여분의試藥을破壞 시키고色調를安定시킨다. 11. 冷水에식한뒤 spectrophotometer 의파창 570mμ 에서 optical density 를求한다. - 39-
} 해 O.D. 흘求하논時間은冷去 P 後늦어.x.. 1 時間內 에實施해야만한다. 本寶驗에서는皮 I 홈로부터의요염이 error 를일 요키는主된原困이됨요후반듯이注意하여야하며 lactic acid 結果에간섭하는 Glucose, 蛋白은 copper sulfate, calcium hydroxide 에依해만드시除去한後 씩 l 利 m 하여야만한다. ill. 調훌成積 1. 健康韓國人의血中좋 L 혐홉 { 直 : 全體調흉對象者 100 名의血中뚱 L 觸 f 直는 10.27 土 4.37 mg% 였으며이것을年離別로보면 19 歲群 10.673 :=1= 3.06, 20-29 歲 11. 235 :=1= 3. 447, 30-39 歲 10.078 :=1= 3.212 그러고 40 歲以上群은 9. 293 :=1=2. 928mg% 였다. 各群에 서年敵別差는볼수없었다. (t=1. 068, p>0.05) (Table. 1.) 2. 性別關係 男子의平均 f 直는 10.702mg% 였고女子의 zp: 均 f 直는 10. 588mg% 였우며두群의差는統計的안有意性 1 없었다. (t=o. 059, p>o. 05) 이것을年鐵別에依한것 을보면 20-29 歲의男子 11. 265mg%, 女子 11. 205mg %, 30-39 歲에서는男子 10, 346mg%, 女子 9.8mg%, 40 歲以上群에서는男子 8. 786mg%, 女子 9.8mg% 를 보였다. Table. 1. Blood Lactate Level by Sex and Age (units: mg/100ml) 요 Q 승 --------------- 19 Male I Mean+1 S.D. 20-29 40+ Total 30-39 Female I Mean+1 S.D Total * :t=o. 058, p>0.05 Mean :=l=l S.D. I =1. 068, p>0.05 3. 血中좋 L 鍵 f 直의範圍 全體的 ò 로 5. 3~17.1mg% 의間隔을보였고이것은 다시年敵別로 19 歲는 5.4--16. 6mg%, 20~29 歲 5.5~ 17.1mg%( 男子 5.5~17.1 平均 : 11. 3, 女子 6.1~16. 6 平均 :1 1. 35), 30-39 歲群에서는 5. 3~15. 3mg% ( 男子.5.5""'15.3 平均 :10.4, 女子 5. 3~14. 5 平均 :9.9), 40 歲以上群은 5. 3~14. O( 男子 5.3-14.0 平均 :9.65, 女 子 5. 5~12. 2 平均 :8.85) 였우며全體的우로 lower level 의平均順는 5.5mg% 였고, high level 의 2f' 均 f 直는 15. 18mg% 였다. (Table. 1) Table. 2. Comparisons of Blood Lactate level 섭 M M between some Koreans and U.S.A. (Units: mg/100ml) Authors C.K. Kim et all I et al m 낫나4라ι-1째껴-3i M -nu -% m - -낸ιi-0t& -mf -U -p 때-퍼서 --니- nj nj 1l 14 - - I Teaford, M.E. 22 10.9 :=1= 3.1 6.0-17.5-4-0-4. 外國 ~I 健康人과比較 Teaford, M.E. and Kaplan, A. 뜰이 1967 年報告 깐成積을브연供血휩의血中뚱 L 輝順는. 10.9::t 3.1mg % 였고, 그範圍는 6.0~17.5mg% 블보였다. 이것은 우러나리 - 의 10.27 :=1= 4. 37mg% 와 5. 3~17.1mg% 와는 結果에셔는統計的안有意 生이없었다. (t=0.133, p>0.05) (Table. 2) IV. 考察 1925 年 Clausen, S.V!. 에依한심한설사로因한脫 水록부터오는 circulatory collapse 와 hypovolemin 의 報告以後, 1961 年 Huckabee 等이血中추 L 續의增加 原因을分析하치시작하여約 9 年동안여기에對한많 은昭究가試圖되었다 1, 2, 4-9) VvTaters, ìv.c. 等 10) 이간추려報告한것에依하면 pyruvate, glucose, bicarbonate 等을먹은後, glycogen storage disease, hyperventilation, exercise, epinephrine, shock, acute hypoxemia, 심한負血, 白血病, 樓 民病, phenformin 治爆, ethanol 을먹었을혜, idiopàthic 等의경우에血中추 L 觸 f 直가增加한다. 血中뚱 L 續
增加原因은 pyruvic acid 가 L. D.H. 의存在아래 NAD H 2 와作用하여形成되며그灌度는 pyruvate 와 NAD H 2 와 NAD 比의關係異狀에依하여決定되는것 4 로알려져있마 3) 正常 f 直가血管의種類에짜라셔조금썩差가있어 動服血이靜服血보다조금낮으며, 靜服血도四陣運動 을하고난뒤에나, tourniquet 블꼭매어진狀態의것은알만적인靜 Wæ 血보다도높게나온마 1, 3, 1 1) 測定方法도 1941 年 Barker and Summerson 이考按한것이지 금까지도普遍的으로使用되어지며 1961 年以後에다른方法들파샤로比較빠究되어지고있다. - 般的으로測定方法은 enzymatic 方法파 chemical 方합이있는데前者는 L. D.H. 의存在아래 NAD 에依 해 lactic acid 가醒化하여 pyruvate 로되며이에의 NADH 2 를 Spectrophotometer 의吸光度에依해測定 하는것으로셔몇딪外線을利用하여야하기해문에함珠 한 spectrophotometer 가,Q:, 흉흉하며또反應過程에있어 셔 pyruvate 와 lactate 가平衝이되지않게하얘주기 위해서 alkaline medium 아래셔實施하얘주며이해 最適 ph 는 10.0 염이알려져있다 6) 또이方法에依 한測定은 u 바르고, 正確하게測定할수있는長點이 었다. 後者는 lactic acid 가 ceric sulfate t1- sulfuric acid 와같은 5 옳醒에依해醒化하여 aceticaldehyde 가 띈것을 colorimetry, titration 혹은 gas chromatography 等에依해分析測定하는것으로서, 이中 colorimetry 方품은지금도많이쓰이고있는方法이며各方法 들의比較試驗어 } 셔그結果의差異는없는것으로알 려져있고 1, 4, 5, 6, 9) 더욱많은陽究가제속됨으로써공 밝혀지러라期待된다. 本調훌 n 셔우러나라成人의 JÍIf. cþ 주 Lf뽑 f퍼는 ~ 10.27 mg%( 1. 142mEq/L) 를보였고, 年휩쉰別差는없었으역 단지 20-29 歲의女子群의 11. 205mg% (1. 24SmEq/L) 와 40 歲以上의 9. 8mg%(1. 089mEqjL) 와는統計的으로有意한差 (t=2.537, p<0.05) 블보염으로써젊은 年點 1 좀더높지않을까하는生覺은었으나앞으로 더욱많은歡의例를試驗해보아야하러리 - 思料되어 진다많別關係에서男子의平均뼈 [ 10. 702mg% (1. 19 meq/l) 와女子의平均 f 直 10.58(1. 17mEq/L)mg% 와 는統計的안有意 生이없었고 (t=0.059, p>0.05) 美 國의平均 ( 直 9) 와의比較에서도差블認知할수없었음 은역시이血中추 L 續은 { 生別, 年擬別, 人種別等어 l 差 異없이代謝機能에關係됨을알수가있다. 可檢物獲得時動服血파靜服血을分離하여하여야 되지만靜!l 血인경우에는 tourniquet 를오래동얀조 여얘지않도록注意 함은물론빠른勳作 로 glycolysis 블防止하여주어야한다. 測定方法애있어셔도 enzymatic method 가필速正 確하다고는하지만緊外線을利用한 spectrophotometer 가必要하게되며 gas chromatography 도器機가必 홈함 ~ 로우리의現實에는 modified Barker and Summerson 方法을臨皮에서使用함이좋으리라思料 된다. v. 結論 臨皮및理, 化學的所見에서異狀이없는健康人을 對象으로血中추 L 觸을測定하여우리나라成人의正常 f 直를觀察하고, '1 生 ~IJ, 年離別, 좋 L 輝의範圍그러고外 國의成 Ái 直와比較함과同時에測定 - 方法의差異點을 알아보기위하여 Barker and Summerson. modifid. 方法을利用하여아래와같은成積을얻었다. 1) 一部健康한韓國 Á 100 名中血中뚱L 構順는- 平均 10. 27mg% (1. 142mEq/L) 였고그範圍는 5. 3-17. 1mg % (0. 589-l. 9mEq/L) 였다. 2) 男子의平均順는 10. 702mg % (1. 19mEq/L), 女 子의平 j 성 f 直는 10. 588mg% (1. 177mEq/L) 로서 生別差 異는볼수없였다. (p>0.05) 3) 外國의平均 f 直 10. 9mg% (1. 21mEq/L) 와우러나 바의 10. 27mg% (1. 142mEq/L) 와논差異가밸루없었 다. (p>0.05) 4) 페定方法, 資料의選擇에따라試驗室마다약간 의差는있지얀우리나타의實情어 } 는 modified Barker and Summersol1 품이適 ; 쉽 - 갚것으로思料관다. 추 ; 論文 fp 成에도움을주신申훨 淑, 申鉉成先生넙 과 Alabama 大學 Birmingham medical center 의 Ellis,].P., 와 Cain, S.M. Ph.D. 께感謝드럽니다. REFERENCES 1) Oliva, P. B.: Lactic Acidosis. Amer. J. Med. 48 : 209, 1970. 2) Hukabee, \V.E.: Abη ormal restiηg blood lact α te. II. Lactic Acidosis. Amer. J. Med. 30: 840, 1961. 3) Hukabee, W.E.: Relatioη ships of pyrμψate and lactate during anaerobic metabolism. 1. Effects of iη11 떠 0η of pyrμνate or glucose and of hyperventilatioη. J. Cli. Lην est. 37: 244, 1958. 4) Marbach, E.P. vveil, M.H.: Rapid enzymatic measureme η t 01 blood lacatate and pyrμψate. Cliη. Chem. 13: 314, 1967. 5) Loomis, M.E.: Aη eη zyηzatic flμorometric η 'l ethod.for the determinatioη of lactic acid iη serum. J. Lab. & Clin. Med. 57 : 966, 1961. 6) Ellis, I.P., Cain, S.M., \Villiams, E.W.: RaPid, - 4 1-
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