Table of Contents I. Rhubarb 1. What is Rhubarb? 2. Main Chemicals and Activities 3. Efficacy of II. Clinical Tests 1. Anti-Inflammation Test 2. Free Radical Scavenging Test 3. Anti-Fungal Activity Test-푸른곰팡이 4. Anti-Microbe Activity Test-대장균 5. Anti-Bacterial Activity Test- 이질균 6. Anti-Microbe Activity Test- 기타균주 III. Product Specification
I. Rhubarb 1. What is Rhubarb? 2. Main Chemicals and Activities 3. Efficacy of
1. What is Rhubarb? 종류및학명 대황은원산지가중국서장, 청해지방으로중국산의당대황과우리나라에분포하는조선대황 ( 토대황 ) 등이있다. 당대황은일명금문계대황으로도불리우는데뿌리의자른면에밤색, 노란색, 흰색의무늬가있다하여그렇게불리운다. 여기에는장군풀, 금문대황 (R. palmatum L.), 마제대황 (R. officinaie Baillon.) 이있고중국의서북부와운남지방의산지대에소자란다. 토대황계에는재배하고있는화대황 (R. undulatum L.), 라폰티쿰 ((R. raponticum L.), 토대황 (R. collinianum Baillon.) 등이있다. 토대황계는낮은지대에자라며금문이없고라폰티진을비롯한스틸벤화합물이있다. 일반적으로이야기하는대황은금문대황을이야기한다. 대황의민간이용사례대황은사하 ( 瀉下 ) 작용, 항균작용, 항종양, 지사작용이있어, 민간에서는건위, 설사멎이, 설사약 ( 만성변비, 습관성변비 ), 염증, 소화불량등에자주사용하였다. 사하 ( 瀉下 ) 작용이있어서장위 ( 腸胃 ) 를세척하고대사를촉진시키므로열성 ( 熱性 ) 변비와복부창만에손으로부르면단단한것이촉지되는증상에유효하다. 이질초기에설사가빈번하고후중 ( 後重 ) 이있을때술을넣고달여서복용한다. 화 ( 火 ) 를내리는작용이있어서화사 ( 火師 ) 가상염 ( 上炎 ) 하여나타난두통, 눈의충혈, 인후통, 잇몸이붓고아프면서입안과혀가헐어발진이생기고변비가있는증상에쓴다. 혈열 ( 血熱 ) 로인한코피, 토혈, 각혈에활용되며, 열독 ( 熱毒 ) 으로인하여종기와등창이생기고변비를수반하는데유효하며, 맹장염에도신속한효과를나타낸다. 혈액순환을개선시키고어혈 ( 瘀血 ) 을제거하므로부인의월경폐색, 오한발열, 산후에어혈이제거되지않았을때및징가 ( 징痂 ), 타박상등에활용된다. 수분을제거하고, 이뇨작용도함께나타나므로장관 ( 腸管 ) 에수분이정제되어나타난부종및복부창만에이용된다. 또대황의뿌리는적리균, 장티프스균, 대장균에대한억균작용이있다.
1. What is Rhubarb? 약리유효성분들은대장에서결장의긴장력을증가시키고연동작용을가속화하는동시에소장에서영양물질의흡수에장애가되지않게한다. 사하작용, 해열. 체온강하작용, 담즙분비촉진작용이있고모세혈관의투과성을내리므로혈액응고시간을단축시킨다. 광범위한항균작용이있어서포도상구균, 임균, 디프테리아균, 장티프스균, 이질균등의발육을억제한다. 그밖에도이뇨작용과간기능보호작용이나타난다. 주요성분및함량, 효능안트라퀴논 (Anthraquinone) 유도체 3~7%( 뿌리 ) 함유탄닌류 (Tannins) Chrysophanic acid : Anthraquinone 유도체피부상주균에매우효과적으로작용피부가려움이나피부질환에이용피부또는두발의 Conditioning 증진에효과적임
2. Main Chemicals & Activities Chemicals Aloe emodin Calcium Chrysophanic acid Chrysophanol Cinnamic acid Emodin Gallic acid Hyperin Magnesium Quercitrin Rhein Others Activities on Skin Antibacterial, Antisalmonella, Antiseptic, Antistaphylococcic, Antiviral, Fungicide Antiallergic Fungicide, Antiviral, Antiaggregant Antibacterial, Antiseptic Antibacterial, Antiinflammatory, Fungicide, Cancer prevent Antiaggregant, Antibacterial, Antiinflammatory, Immunostimulant, Antiallergenic, Antibacterial, Antiinflammatory, Antioxidant, Antistaphylococcic, mmunomodulator Antibacterial, Antiinflammatory, Antioxidant, Antiviral Antiaggregant, Antiinflammatory Antiinflammatory, Antibacterial, Antioxidant Antibacterial, Antiviral, Fungicide Glucose, Iron, Manganese, Physcion, Potassium, Tannins, Zinc Phytochemical Database, USDA - ARS - NGRL, Beltsville Agricultural Research Center, Beltsville, Maryland
3. Efficacy of Anti-Inflammation Anti-Allergy Anti-Itching Free Radical Scavenging Anti-Acne Chrysophanic acid Anti-Dandruff Anti-Atopy
II. Clinical Tests 1. Anti-Inflammation Test 2. Free Radical Scavenging Test 3. Anti-Fungal Activity Test-푸른곰팡이 4. Anti-Microbe Activity Test-대장균 5. Anti-Bacterial Activity Test- 이질균 6. Anti-Microbe Activity Test- 기타균주
1. Inflammation Test 염증이란외부유해환경, 유기체및기계적손상으로부터숙주를보호하기위한자발적이고생리적인반응이다. 염증은감염된조직내의단핵구및다형핵백혈구수의급속한상승과관련이있다. 염증세포들은잠재적침입물질로부터의침입을방지하기위하여감영된숙주에 proteases, protaglandins, cytokines, ROIs 및여타매개물질들을방출한다. 이러한매개물질들의작용들이숙주의결합조직내의세포및비세포물질에손상을주게된다. 백혈구활동을증가시키는이러한매개물질들의방출은아라키돈산반응을통한효소작용에의해진행되는데여기에는시클로옥시게나아게작용에의한 prostaglandin 생성과리포옥시게나아게작용에의한 leucotrienes 의생성의두가지과정이있다. 따라서항염효과는 lipoxygenase 억제를측정하여판단할수있는것이다. 실험방법 Lipoxygenase 와 Linolenic acid 혼합물에대황추출물를첨가하고 TBARS 방법을사용하여 535nm 에서흡광도를측정하였다. 실험결과 대황추출물의양 Inhibition (%) 1.0 38.2 3.0 62.5 5.0 88.3 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 1.0 3.0 5.0 Inhibition(%) 대황추출물의양
2. Free Radical Scavenging Test 실험방법프리라디칼소거활성실험법은 Funita et al 의방법을개선한것으로써안정한 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl Radical(DPPH) 을사용하였다. DPPH 용액에대황추출물을첨가하고섞은다음실온에서일정기간방치후흡광도의세기를측정한다. 프리라디칼소거활성 (SC 50 ) 의크기는프리라디칼의 50% 를소거하는데요구되는대황추출물의양 ( ml ) 으로나타냈다. 실험결과 Free Radical Scavenging Yield(FRS%) 와 SC 50 * SC 50 : 1.23 100 90 80 70 대황추출물의양 FRS(%) 60 50 0.5 27.2 40 1.0 47.1 30 3.0 79.9 20 10 5.0 90.8 0 0.5 1.0 3.0 5.0 시료양 (ml) FRS(%)
3. Anti-Fungal Activity Test - 푸른곰팡이 항균력실험방법 배지 : PDA 배지 사용균주 : 푸른곰팡이 (Penicillium spp.) 방법 : 1) PDA broth에 Bacto agar1.5g을넣어조제멸균된배지를petri dish에반정도부어굳힌다. 2) 균이혼합된배지가굳기전에 1) 에부어굳힌다. 3) 대황추출물을농도별로하여멸균 disc를반정도잠기도록적시어흡수시킨다. 4) 배지위에 disc를올려놓고가볍게누른다. 5) 기체발생봉투와함께혐기배양기에넣어 37 에서 36시간배양한다.
3. Anti-Fungal Activity Test - 푸른곰팡이 실험결과 감자한천배지 (PDA) 에푸른곰팡이를접종한후 36 시간동안배양시 GNC-011 의 1mg/mL 이상의농도에서항곰팡이능 (anti-fungal activity) 확인. Control 1ug/mL 10ug/mL 10mg/mL 1mg/mL 0.1mg/mL Reservation of fresh fruit 10mg/mL 1mg/mL Control 감귤표면에 GNC-011 을스프레이로도포하고감귤에상처를낸후푸른곰팡이를접종하여 3 일이경과하였을때의항곰팡이력사진.
4. Anti-Microbe Activity Test - 대장균 Control ( 비첨가시 ) 대장균등미생물추정시험 농도증가시가스및유기산발생억제 ( 첨가시 ) 대장균확정시험
5. Anti-Bacterial Activity Test Shigella sonnei( 병원성이질균 ) 0.25 0.20 China 1 China 2 Korea +CON(Ampicillin) +CON(Tetracyclin) -CON(EtOH) OD 600 nm 0.15 0.10 0.05 * China 1 & 2 = 중국산대황 0.00 1e-5 1e-4 1e-3 1e-2 1e-1 1e+0 1e+1 1e+2 1e+3 * Korea = 한국산대황 Concentration (μg/ml)
6. Anti-Microbe Activity Test - 기타균주 항균력실험방법 1) Broth 에 Bacto agar 1.5g 을넣어조제멸균된배지를 Petri dish 에반정도부어굳힌다. 2) 균이혼합된배지가굳기전에 1) 에부어굳힌다. 3) 대황추출물 (powder) 을농도별로하여멸균 disc 를반정도잠기도록적시어흡수시킨다. 4) 배지위에 disc 를올려놓고가볍게누른다. 5) 37 에서 36 시간배양한다. * 혐기성균주인경우 : 기체발생봉투와함께혐기배양기에넣어 37 에서 36 시간배양한다. 균주명 학명 성장억제환 (mm) 대장균 Escherichia coli K-12, MG1655 18 황색포도상구균 Staphylococcus aureus 20 장구균 Enterococcus faecalis 17 세라티아균 Serratia marcescens 15 녹농균 Pseudomonas aeruginosa 12 바실러스균 Bacillus subtilis 20 살모넬라균 Salmonella typhimurium 19 폐렴간균 Streptococcus pneumoniae 15
III. Product Specification Analytical Test INCI Name Description Odour Specifications Water / Butylene Glycol / Alcohol / Rheum Palmatum Root Extract Brown liquid Typical Refractive Index(20 ) 1.345 ~ 1.385 p.h 4.0 ~ 6.0 Specific Gravity(d20/20) 0.997 ~ 1.037 Identification 1) Saccharides 2) Triterpenoid 3) Tannin Heavy Metals Arsenic Microbes 적자색적갈색암녹색 10ppm 2ppm 100 cfu/ ml 1) 시료약 0.5ml 에 5% α- 나프톨알코올시액 23 방울을넣고섞는다. 황산 2ml 에이액을조심스럽게가하여흔들지말고방치하면접계면은적자색을나타낸다. 2) 시료약 10ml 을수욕상에서감압농축한다. 잔류물에클로로포름 5ml 을가하여흔들어섞은후상층액 0.5ml 에무수초산 0.5ml 을가하여흔들어섞은후황산 0.5ml 을유리관표면에천천히가하면접계면은적갈색을나타낸다. 3) 시료약 2ml 에 2.5% 염화제이철 (FeCl3) 시액 1~2 방울떨어뜨려방치할때, 암녹색을나타내거나침전된다.