(19) 대한민국특허청 (KR) (12) 공개특허공보 (A) (51) 국제특허분류 (Int. Cl.) A61M 11/00 (2006.01) A61K 31/573 (2006.01) A61K 31/58 (2006.01) A61K 31/59 (2006.01) A61K 31/593 (2006.01) A61K 47/06 (2006.01) A61K 9/00 (2006.01) A61K 9/12 (2006.01) A61M 35/00 (2006.01) (52) CPC 특허분류 A61M 11/00 (2013.01) A61K 31/573 (2013.01) (21) 출원번호 10-2016-7011188( 분할 ) (22) 출원일자 ( 국제 ) 2011 년 06 월 10 일 심사청구일자 없음 (62) 원출원특허 10-2013-7000678 원출원일자 ( 국제 ) 심사청구일자 2015 년 01 월 21 일 (85) 번역문제출일자 2016 년 04 월 27 일 (86) 국제출원번호 PCT/DK2011/000060 (87) 국제공개번호 WO 2011/154004 국제공개일자 (30) 우선권주장 2011 년 12 월 15 일 2011 년 06 월 10 일 61/353,893 2010 년 06 월 11 일미국 (US) (11) 공개번호 10-2016-0054614 (43) 공개일자 2016년05월16일 (71) 출원인 레오파마에이 / 에스 덴마크데카 -2750 발레룹인두스트리파르켄 55 (72) 발명자 린마리아네 덴마크데카 -2750 발레룹인두스트리파르켄 55 레오파마에이 / 에스내 라스무센그리트 덴마크데카 -2750 발레룹인두스트리파르켄 55 레오파마에이 / 에스내 ( 뒷면에계속 ) (74) 대리인 장훈 전체청구항수 : 총 24 항 (54) 발명의명칭비타민 D 유사체및코르티코스테로이드를포함하는약제학적분무조성물 (57) 요약 본발명은생물학적활성비타민 D 유도체또는유사체및코르티코스테로이드를포함하는국소분무조성물, 및피부질환및피부병태의치료에있어서의이의용도에관한것이다. 상기분사물은특히디메틸에테르, 디에틸에테르및메틸에틸에테르또는이들의혼합물로이루어진그룹으로부터선택되는추진제를포함하고추가로상기추진제중에가용화되거나현탁된약제학적으로허용되는지질담체를포함한다. - 1 -
(52) CPC 특허분류 A61K 31/58 (2013.01) A61K 31/59 (2013.01) A61K 31/593 (2013.01) A61K 47/06 (2013.01) A61K 9/0014 (2013.01) A61K 9/124 (2013.01) A61M 35/003 (2013.01) A61K 2300/00 (2013.01) A61M 2210/04 (2013.01) (72) 발명자 소네메테뤼달 덴마크데카 -2750 발레룹인두스트리파르켄 55 레오파마에이 / 에스내 한센옌스 덴마크데카 -2830 비룸아비고르스바이 174 페테르손카르스텐 덴마크데카 -2750 발레룹인두스트리파르켄 55 레오파마에이 / 에스내 - 2 -
명세서청구범위청구항 1 치료학적유효량의비타민 D 유도체또는유사체및치료학적유효량의코르티코스테로이드를포함하는, 분무가능한, 저장안정성의, 실질적으로무수인국소조성물을포함하는용기바디및스프레이형태로상기조성물을방출하기위한액츄에이터를포함하는밸브어셈블리를포함하는, 피부환부에국소조성물을분배하기에적합한가압용기로서, 상기비타민 D 유도체또는유사체및코르티코스테로이드는디메틸에테르, 디에틸에테르및메틸에틸에테르로이루어진그룹으로부터선택되는약제학적으로허용되는추진제, 또는디메틸에테르, 디에틸에테르및메틸에틸에테르로이루어진그룹으로부터선택되는제 1 추진제와 C 3-5 알칸, 하이드로플루오로알칸, 하이드로클로로알칸, 플루오로알칸및클로로플루오로알칸으로이루어진그룹으로부터선택되는제 2 추진제를포함하는추진제혼합물에용해되어있고, 상기조성물은상기추진제또는추진제혼합물에가용화되거나현탁된약제학적으로허용되는지질담체를추가로포함하는, 가압용기. 청구항 2 제1항에있어서, 상기조성물이저장되는용기바디 (1), 딥튜브 (2), 및밸브컵 (3), 밸브바디 (5) 및액츄에이터 (4) 를포함하는밸브어셈블리로이루어진, 용기. 청구항 3 제2항에있어서, 상기용기바디 (1) 가스테인레스스틸, 주석판및알루미늄또는알루미늄합금또는애노드화알루미늄으로이루어진그룹으로부터선택되는금속으로이루어진, 용기. 청구항 4 제3항에있어서, 상기용기바디 (1) 가알루미늄또는알루미늄합금으로이루어진, 용기. 청구항 5 제3항또는제4항에있어서, 상기금속용기바디 (1) 가화학적으로불활성코팅재료로코팅되는, 용기. 청구항 6 제5항에있어서, 상기코팅재료가폴리이미드-폴리아미드수지, 폴리아미드, 폴리이미드, 폴리프로필렌및폴리에틸렌으로이루어진그룹으로부터선택되는, 용기. 청구항 7 제6항에있어서, 상기코팅재료가폴리이미드-폴리아미드수지인, 용기. 청구항 8 제1항에있어서, 화학적으로불활성인개스킷또는밀봉재료를포함하는, 용기. 청구항 9 제8항에있어서, 상기조성물에포함된추진제또는추진제혼합물에대해불투과성인개스킷또는밀봉재료를포함하는, 용기. 청구항 10 제8항에있어서, 상기개스킷또는밀봉이플루오로엘라스토머, 불소화에틸렌-프로필렌코폴리머 (FEP), 플루오로고무 (FPM) 또는에틸렌-프로필렌디엔모노머고무 (EPDM) 로이루어진그룹으로부터선택되는재료로이루어 - 3 -
진, 용기. 청구항 11 제2항에있어서, 상기딥튜브 (2) 가폴리에틸렌또는폴리프로필렌으로이루어진, 용기. 청구항 12 제1항에있어서, 상기밸브어셈블리가크림핑함으로써용기바디 (1) 에부착된밸브컵 (3), 밸브스템 (51) 및용기로부터조성물을배출시키기위한활성화가억제된액츄에이터 (4) 에연결된스프링 (53) 을함유하는밸브바디 (5) 로이루어진, 용기. 청구항 13 제12항에있어서, 상기밸브스템 (51) 이폴리아미드또는아세탈 (POM) 로이루어진, 용기. 청구항 14 제12항에있어서, 상기밸브스템 (51) 이직경 0.05 내지 1mm의적어도하나의구멍을함유하는, 용기. 청구항 15 제12항에있어서, 상기액츄에이터 (4) 는직경 0.3 내지 1.5mm의말단오리피스 (41) 를갖는인서트 (44) 와함께제공되는, 용기. 청구항 16 제1항에있어서, 상기비타민 D 유사체가칼시포트리올또는칼시포트리올 1수화물인, 용기. 청구항 17 제1항에있어서, 상기코르티코스테로이드가베타메타손에스테르인, 용기. 청구항 18 제17항에있어서, 상기베타메타손에스테르가베타메타손디프로피오네이트또는베타메타손발러레이트인, 용기. 청구항 19 제1항에있어서, 상기추진제가디메틸에테르인, 용기. 청구항 20 제1항에있어서, 상기추진제혼합물의제 1 추진제가디메틸에테르인, 용기. 청구항 21 제20항에있어서, 상기추진제혼합물의제 2 추진제가 C 3-5 알칸인, 용기. 청구항 22 제21항에있어서, 상기 C 3-5 알칸이 n-프로판, 이소프로판, n-부탄또는이소부탄으로이루어진그룹으로부터선택되는, 용기. 청구항 23 제22항에있어서, 상기 C 3-5 알칸이 n-부탄및 / 또는이소부탄인, 용기. 청구항 24 제 20 항또는제 21 항에있어서, 상기 n- 부탄및 / 또는이소부탄대디메틸에테르의비가 6:1 내지 0:1 v/v 의범 - 4 -
위인, 용기. 발명의설명 [0001] 기술분야 본발명은생물학적활성비타민 D 유도체또는유사체및코르티코스테로이드를포함하는국소분무조성물, 및피부질환및피부병태의치료에있어서의이의용도에관한것이다. [0002] [0003] 배경기술건선은과다각화증으로부터초래된홍반성, 건성, 스케일링플라크 (scaling plaque) 를나타내는만성염증성피부질환이다. 플라크는팔꿈치, 무릎및두피에서가장흔하게발견되지만, 보다광범위한병변은신체의다른부위, 특히요천추영역에서나타날수있다. 경증내지중증건선의가장일반적인치료는활성성분으로서코르티코스테로이드를함유하는조성물의국소적용을포함한다. 효과적인반면, 코르티코스테로이드의적용은피부위축, 튼살, 여드름상발진, 입주위피부염, 피부진균및세균의과성장, 색소성피부의저색소침착및주사 (rosacea) 와같은다수의부작용의단점을갖는다. 그러나, 다년간이로운비-스테로이드성건선치료에는칼시포트리올이용액중에존재하는연고조성물 (LEO Pharma에의해 Daivonex 또는 Dovonex 연고로서시판됨 ) 또는크림조성물 (LEO Pharma에의해 Daivonex 또는 Dovonex 크림으로서시판됨 ) 로제형화된비타민 D 유사체화합물, 칼시포트리올을사용한국소치료가존재해왔다. 연고조성물의용매는피부로의활성성분의침투를향상시켜효능을개선시키는이점을갖지만, 피부자극제로서작용하는것으로도알려져있는프로필렌글리콜이다. 따라서, 국소조성물중의프로필렌글리콜의포함은환자에게접촉성피부염을빈번하게발생시키고 ( 한연구는 12.5% 의프로필렌글리콜에대한다수의자극반응을보고함, 참조예 : M. Hannuksela et al., Contact Dermatitis 1, 1975, pp. 112-116), 자극반응의수는프로필렌글리콜이고농도로사용되는경우에증가하는것 (J. Catanzaro and J. Graham Smith, J. Am. Acad. Dermatol. 24, 1991, pp. 90-95에검토된바와같음 ) 으로보고되어왔다. 특히, 프로필렌글리콜의존재로부터초래되는피부로의칼시포트리올의개선된침투로인하여, Daivonex 연고가건선성병변의치료에있어서 Daivonex 크림보다효율적이지만, 유의한비율의건선환자에서피부자극도야기하는것으로밝혀졌다. [0004] [0005] [0006] [0007] 보다최근에는상표명 Daivobet 연고하에건선치료용복합제품이 LEO Pharma에의해시판되고있다. 상기제품은, 칼시포트리올이폴리옥시프로필렌-15-스테아릴에테르에용해되고베타메타손디프로피오네이트가현탁액으로서존재하는연고조성물로제형화된칼시포트리올및베타메타손디프로피오네이트를활성성분으로서포함한다. 복합제품의효능이그자체의활성성분중어느하나의효능에대해현저하게우수한반면, 연고는환부의피부에의연장된문지름을요구하므로번거로운것으로여겨질수있고, 많은환자들, 특히광범위한건선병변을지닌환자들은분무조성물에의해제공되는바와같이보다용이한적용을선호할것이다. Daivobet 연고는칼시포트리올의화학적안정성에유해한것으로밝혀진 ( 참조예 : 국제특허출원공보제WO 00/64450호의실시예 2) 프로필렌글리콜과같은임의의침투증진제를함유하지않는다. 피부로의활성성분의침투가시판제품에비해개선된제형비히클을제공함으로써 2종의활성성분의병용물의생물학적효능을추가로개선시키는것이바람직한것으로여겨진다. 국제특허출원공보제WO 00/64450호에는활성성분들둘다가화학적으로안정한비히클을함유하는용매중에서제형화된비타민 D 유사체및코르티코스테로이드를포함하는약제학적조성물이기재되어있다. 상기조성물의바람직한실시형태는연고이고, 연고에비해향상된특성을갖는분무조성물의제공에대해서는언급되어있지않다. 미국특허출원공보제US 2005/0281749호에는 1종이상의오일로이루어진오일상에가용화된코르티코스테로이드및비타민 D 유도체를포함하는분무조성물이기재되어있다. 오일은식물성오일, 미네랄오일, 동물성오일, 합성오일또는실리콘오일로부터선택될수있다. 폐쇄 (occlusion) 를제공하는것이바람직할수있다는것은제안되어있지않고, 따라서반-고체및밀봉 (occlusive) 부형제를조성물에첨가하는것도제안되어있지않다. 조성물이향상된침투특성을나타내는지의여부에대한지표는존재하지않는다. 미국특허출원공보제US 2005/0281754호에는알콜상및오일상을포함하는비히클중에제형화된코르티코스 - 5 -
테로이드및비타민 D 유도체를포함하는분무조성물이기재되어있다. 알콜상은예를들면, 에탄올, 이소프로판올또는부탄올로이루어진다. 오일상은미네랄오일, 식물성오일또는합성오일로이루어질수있다. 조성물에반-고체및밀봉부형제를포함시키는것에대한제안은존재하지않고, 조성물이향상된침투특성을나타내는지의여부에대한지표도존재하지않는다. 발명의내용 [0008] [0009] [0010] [0011] [0012] [0013] 본발명의목적은, Daivobet 연고에비해우수한피부침투및생물학적활성특성을갖지만, 프로필렌글리콜과는다르게, 비타민 D 유도체또는유사체, 또는코르티코스테로이드중어느하나의화학적안정성에유해하지않은활성성분에대한용매를함유하는, 비타민 D 유도체또는유사체및코르티코스테로이드를활성성분으로서포함하는국소분무조성물을제공하는것이다. 사람피부, 특히외층, 각질층은미생물병원체및독성화합물의침투에대해효과적인차단층을제공한다. 피부의이러한특성이일반적으로유리하지만, 피부질환을앓고있는환자의피부에적용된활성성분의다량 ( 최상이아닌경우 ) 이그활성을발휘하는피부의바이어블층 (viable layer) 으로침투할수없는점에서약제의경피투여를복잡하게한다. 진피및표피로의활성성분의적당한침투를확보하기위해서, 전형적으로알콜형태의용매, 예를들면, 에탄올또는디올, 예를들면프로필렌글리콜의존재시, 활성성분을용해된상태로포함하는것이일반적으로바람직하다. 프로필렌글리콜은널리알려진침투증진제, 즉각질층에침투하여비히클중의치료학적활성성분등의저-분자성분을표피로 " 드로잉 " 할수있는물질이다. 프로필렌글리콜은그자체로유의한피부자극을발생시키고, 또한비히클중의저-분자성분및잠재적자극성분을 " 드로잉 " 하여프로필렌글리콜을포함하는종래비히클의전체적인자극성효과를초래할수있다. 이러한이유로, 염증성피부질환의치료를위해의도된조성물의용매로서의프로필렌글리콜의존재는염증성반응을악화시킬수있다. 본발명의다른목적은칼시포트리올등의비타민 D 화합물의안정성에유해한프로필렌글리콜등의종래침투증진제의부재시에 Daivobet 연고에비해향상된활성성분의침투및생물학적활성을갖는조성물을제공하는것이다. 본발명의추가의목적은비타민 D 유도체또는유사체및코르티코스테로이드둘다가유의하게열화 (degrad e) 되지않을조성물을제공하는것이다. 예를들면, 국제특허출원공보제WO 00/64450호에는비타민 D 화합물은산성환경에서또는제형비히클중의산반응성성분또는불순물의존재시에화학적으로불안정하다는것이잘알려져있다. 유사하게, 코르티코스테로이드는알칼리성환경에서또는제형비히클중의알칼리반응성성분또는불순물의존재시에화학적으로불안정하다는것이잘알려져있다. 상기성분둘다를포함하는조성물에있어서, 화학적불안정성문제는산또는알칼리중화제를각각첨가함으로써쉽게해결될수없다. 반대로, 어느활성성분에대해서건간에활성성분들의화학적안정성에유해한성분이포함되지않도록, 조성물에포함시키기위한부형제의선택에주의를기울여야한다. 상기열거된참조문헌에기재되어있는분무조성물과는다르게, 본발명의목적은유의한양의밀봉성의및반 -고체담체부형제를함유하는분무조성물을제공하는것이며, 이는공지되어있는오일성분무제형은적용시비-환부에퍼질가능성이있고, 한편반-고체성분은본발명의조성물을덜 " 흐르게 " 하여활성성분이피부환부에우선적으로적용될수있기때문이다. 따라서, 한양상에서본발명은, 치료학적유효량의비타민 D 유도체또는유사체및치료학적유효량의코르티코스테로이드를포함하는, 분무가능한, 저장안정성의, 실질적으로무수인국소조성물에관한것이고, 상기비타민 D 유도체또는유사체및코르티코스테로이드는디메틸에테르, 디에틸에테르및메틸에틸에테르로부터선택되는약제학적으로허용되는추진제, 또는디메틸에테르, 디에틸에테르및메틸에틸에테르로이루어진그룹으로부터선택되는제1 추진제와 C 3-5 알칸, 하이드로플루오로알칸, 하이드로클로로알칸, 플루오로알칸및 클로로플루오로알칸으로이루어진그룹으로부터선택되는제2 추진제를포함하는추진제혼합물에용해되어있고, 상기조성물은상기추진제또는추진제혼합물에가용화되거나현탁된약제학적으로허용되는지질담체를추가로포함하며, 상기지질담체는피부에적용시추진제의증발이적용부위에반-고체밀봉층 (occlusive layer) 을형성하는 1종이상의지질을포함한다. [0014] 본발명의조성물은놀랍게도, 종래침투증진제의부재시에도시판 Daivobet 연고에비해활성성분의향상된 침투를용이하게하는것으로밝혀졌다. 현재, 향상된침투는추진제또는추진제혼합물의적용및증발후 - 6 -
피부상의활성성분의과포화용액의형성의결과일수있는것으로생각된다 ( 참조예 : Reid et al., Pharm. Res. 25(11), 2008, pp. 2573-2580). 추가로, 추진제 ( 들 ) 자체가활성성분을피부로이끄는침투증진제로서작용할수있는것으로생각된다. 마지막으로, 적용부위에서의반-고체밀봉층의형성은활성성분의침투에기여할수있다. [0015] [0016] [0017] [0018] [0019] [0020] [0021] [0022] [0023] [0024] 다른양상에서, 본발명은피부질환또는피부병태의치료시에사용하기위한본원에기재된바와같은조성물에관한것이다. 본발명에따른조성물은, 전형적으로는용기본체 (container body) 및밸브어셈블리 (valve assembly) 를포함하는유형인, 에어로졸용기로부터분배될수있다. 용기본체는바람직하게는화학적불활성코팅재료로라이닝되어바디와조성물사이의상호작용으로인한조성물의분해를피할수있는, 예를들면금속바디를포함할수있다. 밸브어셈블리는밸브컵 ( 간혹마운팅컵으로지칭하는경우도있음 ), 밸브스템이제공된밸브바디또는하우징, 스프링, 딥튜브및액츄에이터 (actuator) 를포함할수있다. 내부개스킷이통상적으로밸브스템의구멍을밀봉하지만, 액츄에이터가작동되는경우, 밸브스템이이동하여구멍이덮히지않게된다. 일단노출되면, 용기본체의추진제에의해발휘된압력은조성물을구멍을통해딥튜브및밸브스템으로유동시키고액츄에이터를통해배출시킨다. 이해되는바와같이, 액츄에이터가방면되는경우, 밸브스프링은밸브스템을구멍이다시밀봉되는위치로되돌린다. 밸브스템및액츄에이터는각각 1개이상의구멍 ( 오리피스 ) 및채널을포함하고, 이의수, 크기및형태는특정조성물제형의물리적특성을고려하여밸브를통한유속및액츄에이터로부터나오는분사물의특성둘다를제어하도록결정한다. 분사패턴및유속은액츄에이터의출구오리피스에장착되는별도의인서트수단에의해제어될수있고, 이것은액츄에이터어셈블리에말단오리피스를제공한다. 출구에이르는인서트를통한채널은전형적으로액츄에이터의바디의채널보다직경이좁은부분을포함하여액츄에이터채널로부터인서트채널로나오는유체가스월링되어액적으로부서지도록한다. 조성물이전진하여보다일반적인회전운동보다는전진운동으로말단오리피스로부터배출되도록인서트를프로파일링, 예를들면스텝핑할수있다. 이것은균일하거나솔리드분무패턴을초래하여사용자가치료되는피부의부위에조성물을보다우수하게집중시킬수있게한다. 본발명에따른조성물의흡입은바람직하지않으므로, 유체채널, 오리피스, 인서트등의치수는배출시미세미스트의생성을피하도록선택되는것이바람직하다. 밸브어셈블리는액츄에이터의각각의액츄에이션으로분배되는조성물의계량된양만을허용하는계량밸브를포함할수있다. 저장, 안전및 / 또는위생의이유로, 액츄에이터는개별의또는이에내장된보호성후드또는오버캡과함께제공될수있다. 오버캡은말단오리피스가닫히는제1 위치로부터오리피스가노출되는제2 위치로이동될수있고 ; 제2 위치에서커버는분무영역을제한함으로써유도노즐로서도기능할수있다. 액츄에이터자체는단순버튼액츄에이터를포함할수있거나, 예를들면플립-탑또는트위스트-락을포함할수있다. 다른배열에있어서, 내장핑거액츄에이터를갖는오버캡이용기에확보되어아래의액츄에이터버튼을덮을수있다. 오버캡하측은예를들면, 오퍼레이터의손가락압력으로인한이동시액츄에이터버튼에접촉하여밸브를열기위한복수의돌기를포함할수있다. 대안으로, 또는이에추가로, 액츄에이터는밸브가의도적으로또는우연히작동되는것이방지되는제1 위치와제2 작동위치사이에서이동될수있다. 예를들면, 밸브어셈블리부분은, 한회전위치에서제품이분배되도록액츄에이터가작동될수있는하나의회전위치에서와같은밸브스템쯤에서회전가능할수있는한편다른회전위치에서는액츄에이터가용기상의돌기또는교대 (abutment) 와정렬되어액츄에이션이방지되도록액츄에이터주변을회전할수있다. 이러한 " 트위스트및분무 " 메커니즘은개구및밀봉위치의촉각또는가청지표를포함할수있다. 에어로솔용기의처음사용전에파괴되어야만하는파손-흔적탭 (tamper-evidence tab) 의포함이바람직하다. [0025] 도면의간단한설명 도 1a 및도 1b 는연속상 ( 도 1a) 및연속상과분산상의혼합물 ( 도 1b) 로의상이한비율의 DME 및부탄으로의 - 7 -
100% 디메틸에테르 (DME) 에서의칼시포트리올의용해도를나타내는그래프이다. 도 2a 및도 2b는연속상 ( 도 2a) 및연속상과분산상의혼합물 ( 도 2b) 로의상이한비율의 DME 및부탄으로의 100% 디메틸에테르 (DME) 에서의베타메타손디프로피오네이트 (BDP) 의용해도를나타내는그래프이다. 도 3은유사하게적용된 Daivobet 연고유래의칼시포트리올의침투에대해비교한, 본발명에따른조성물 E 유래의칼시포트리올 (MC 903) 의적용후 2, 6 및 21시간째의바이어블피부로의침투를나타내는그래프이다. 도 4는유사하게적용된 Daivobet 연고유래의 BDP의침투에대해비교한, 본발명에따른조성물 E 유래의 BDP의적용후 2, 6 및 21시간째의바이어블피부로의침투를나타내는그래프이다. 도 5는사람각질세포에있어서비타민 D 3 에의해카텔리시딘을암호화하는유전자의활성화의도식적표현이다. 카텔리시딘유전자활성화의메커니즘은재생된사람표피 ( 사람피부의표피층특성을형성하도록배양된사람각질세포 ) 를사용한생물학적검사에사용되고, 이는하기실시예 5에상세히설명된바와같이, 본발명의칼시포트리올-함유조성물이적용되어카텔리시딘이활성화된다. 도 6a는밸브컵 (3), 밸브바디 (5), 액츄에이터 (4) 및딥튜브 (2) 를포함하는밸브어셈블리가구비된용기본체 (1) 를포함하는, 본발명의가압분무조성물을위해의도된용기의단면을나타낸다. 이실시형태에서나타낸바와같이, 본발명의조성물은조성물상 (6) 및기상 (8) 을포함하는 2-상시스템일수있다. 도 6b는밸브컵 (3), 밸브바디 (5), 액츄에이터 (4) 및딥튜브 (2) 를포함하는밸브어셈블리가구비된용기본체 (1) 를포함하는, 본발명의가압분무조성물을위해의도된용기의단면을나타낸다. 이실시형태에서나타낸바와같이, 본발명의조성물은비히클상 (6), 추진제상 (7) 및기상 (8) 을포함하는 3-상시스템일수있다. 도 7은용기본체 (1) 및밸브컵 (3) 및개스킷 (32) 사이의밀봉 (31) 이제공된밸브컵 (3), 밸브스템 (51) 과말단오리피스 (41)[ 액츄에이터 (4) 가가압되는경우용기본체 (1) 내에존재하는조성물이이를통해방출된다 ] 를갖는인서트 (44) 가제공된액츄에이터 (4) 에연결된스프링 (53) 이제공된밸브바디 (5) 를포함하는, 용기본체 (1) 의바디상에장착되는밸브어셈블리의단면을나타낸다. 밸브스템 (51) 은, 액츄에이터가가압되는경우용기본체 (1) 내에존재하는조성물이유동할수있는구멍 (52) 을함유한다. 밸브바디에는딥튜브 (2) 가연결된테일피스 (55) 가추가로제공된다. 테일피스 (55) 에는조성물이딥튜브 (2) 로부터유동하도록하는구멍 (54) 이제공된다. [0026] [0027] 발명을실시하기위한구체적인내용 정의 용어 " 비타민 D 유도체 " 는비타민 D 3 의생물학적활성대사물 ( 예 : 칼시포트리올 ), 또는이러한대사물의전구체 ( 예 : 알파칼시돌 ) 를나타내는것으로의도된다. [0028] [0029] 용어 " 비타민 D 유사체 " 는측쇄변형및 / 또는골격자체의변형을갖는비타민 D 골격을포함하는합성화합물을나타내는것으로의도된다. 유사체는천연발생비타민 D 화합물의생물학적활성과필적할만한비타민 D 수용체에대한생물학적활성을나타낸다. " 칼시포트리올 " 은하기화학식의비타민 D 유사체이다. [0030] [0031] 칼시포트리올은 2 개의결정형태, 무수물및 1 수화물로존재하는것이밝혀졌다. 칼시포트리올 1 수화물및이 - 8 -
의제조는국제특허출원공보제 WO 94/15912 호에기재되어있다. [0032] [0033] [0034] [0035] [0036] [0037] [0038] [0039] [0040] [0041] [0042] [0043] [0044] [0045] 용어 " 저장안정성 " 또는 " 저장안정성의 " 는조성물이냉장시, 또는바람직하게는실온에서충분한시간, 예를들면적어도 12개월, 특히적어도 18개월, 및바람직하게는적어도 2년동안조성물의저장을허용하여조성물이상용화될수있도록하는화학적및물리적안정성특성을나타냄을나타내는것으로의도된다. 용어 " 화학적안정성 " 또는 " 화학적으로안정한 " 은 10% 이하, 바람직하게는 6% 이하의활성성분이제품의저장수명 (shelf-life), 전형적으로실온에서 2년에걸쳐분해됨을의미하는것으로의도된다. 실온에서의화학적안정성의근사값은, 조성물이 40 의가열컵보드에놓이는, 조성물을 40 에서의가속화된안정성연구에적용하고, 시료를 1, 2 및 3개월째에채취하여 HPLC에의해분해생성물의존재에대해시험함으로써얻어진다. 40 에서 3개월후물질의약 10% 미만이분해된경우, 이것은일반적으로실온에서 2년의저장수명에상응하는것으로여겨진다. 조성물에포함된활성성분이칼시포트리올인경우, " 화학적안정성 " 은일반적으로, 최종약제제품에서칼시포트리올이시간경과에따라 24-epi 칼시포트리올또는칼시포트리올의다른분해생성물로유의하게분해되지않음을나타낸다. 용어 " 물리학적안정성 " 또는 " 물리학적으로안정한 " 은활성성분이조성물의저장수명에걸쳐추진제또는비히클상으로부터침전되지않음을의미하는것으로의도된다. 용어 " 실질적으로무수 " 는연고조성물중의유리수 (free water) 의함량이조성물의약 2중량 %, 바람직하게는약 1중량 % 를초과하지않음을의미하는것으로의도된다. 용어 " 중간쇄트리글리세라이드 " 는 6 내지 12개의탄소원자의쇄길이를갖는지방산의트리글리세라이드에스테르를나타내기위해사용된다. 이러한중간쇄트리글리세라이드의현재선호되는예는예를들면, 상표명 Miglyol 812로시판되는카프릴릭 (C 8 ) 및카프릭 (C 10 ) 트리글리세라이드의혼합물이다. 용어 " 가용화도 " 는물질의완전한용해를유효화하는데요구되는양으로서나타낸, 용매또는용매혼합물의주어진물질을용해시키는능력을나타내는것으로의도된다. 용어 " 반-고체 " 는점탄성거동을나타내고비-뉴턴특성인, 즉낮은전단응력에서는유동하지않지만실온에서의높은전단률에서는가소성, 의가소성 (pseudoplastic) 또는틱소프로픽 (thixotropic) 유동거동을나타내는조성물또는부형제를나타내기위해사용된다. 반-고체조성물의전형적인예는연고및크림이다. 용어 " 밀봉 " 은경표피수분손실을감소시켜피부를수화하는데충분한수화차단층을형성하는피부표면상의지질층의공급을나타내는것으로의도된다. 용어 " 피부침투 " 는피부의상이한층, 즉각질층, 표피층및진피층으로의활성성분의확산을의미하는것으로의도된다. 용어 " 피부투과 " 는피부를통한체순환으로의활성성분, 또는하기실시예 4에보고된바와같은시험관내연구의경우에는실험에사용된 Franz 세포장치의수용체유체의플럭스를의미하도록의도된다. 용어 " 생물학적활성 " 은본발명의조성물을피부에적용하는경우의비타민 D 유도체또는유사체의활성을의미하도록의도된다. 조성물의생물학적활성은하기실시예5에상세하게설명되는바와같이, 배양된사람각질세포를포함하는재생된사람표피모델에서의카텔리시딘을암호화하는표적유전자의활성을측정하는시험관내검사로측정된다. 본발명의실시형태본발명의조성물에포함된비타민 D 유도체또는유사체는칼시포트리올, 칼시트리올, 타칼시톨, 막사칼시톨, 파리칼시톨및알파칼시돌로부터선택될수있다. 건선치료에효율적인것으로나타난바람직한비타민 D 유사체는칼시포트리올이다. 용매혼합물에의용해전, 칼시포트리올은무수물또는 1수화물, 바람직하게는 1수화물의형태로존재할수있다. 본발명의조성물에포함된코르티코스테로이드는암시노니드, 베타메타손, 부데소니드, 클로베타솔, 클로베타손, 코르티손, 데소니드, 데스옥시코르티손, 데스옥시메타손, 덱사메타손, 디플루코르톨론, 디플로라손, 플루코르티손, 플루메타손, 플루니솔리드, 플루코시노니드, 플루코시놀론, 플루오로메톨론, 플루프레드니솔론, 플루르안드레놀리드, 플루티카손, 할시노니드, 할로베타솔, 하이드로코르티손, 메프레드니손, 메틸프레드니손, 모메타손, 파라메타손, 프레드니카르베이트, 프레드니손, 프레드니솔론및트리암시놀론또는이들의약제학적으로허용되는에스테르또는아세토니드로이루어진그룹으로부터선택될수있다. 코르티코스테로이드는 - 9 -
베타메타손, 부데소니드, 클로베타솔, 클로베타손, 데스옥시메타손, 디플루코르톨론, 디플로라손, 플루오시노니드, 플루오시놀론, 할시노니드, 할로베타솔, 하이드로코르티손, 모메타손및트리암시놀론또는이들의약제학적으로허용되는에스테르로부터바람직하게선택될수있다. 코르티코스테로이드에스테르는예를들면, 베타메타손아세테이트, 베타메타손디프로피오네이트, 베타메타손발러레이트, 클로베타솔프로피오네이트, 덱사메타손아세테이트, 플루메타손피발레이트, 플루티카손프로피오네이트, 하이드로코르티손아세테이트, 하이드로코르티손부티레이트또는모메타손플루오에이트일수있다. 아세토니드는플루오시놀론아세토니드또는트리암시놀론아세토니드로부터선택될수있다. [0046] [0047] [0048] [0049] 본발명에따른조성물은하기용매부류중적어도하나로부터선택되는비-증발성유성보조-용매를추가로포함할수있다. (a) 하기화학식 I: [ 화학식 I] H(OCH 2 C(CH 3 )H) x OR 1 [0050] [0051] [0052] [0053] [0054] [0055] [0056] [0057] [0058] ( 여기에서, R 1 은직쇄또는분지쇄 C 1-20 알킬이고, x는 2 내지 60의정수이다 ) 의화합물 ; (b) 직쇄또는분지쇄 C 10-18 알칸산또는알켄산의이소프로필에스테르 ; (c) C 8-14 알칸산또는알켄산의프로필렌글리콜디에스테르 ; (d) 직쇄또는분지쇄 C 8-24 알칸올또는알켄올 ; (e) 중간쇄트리글리세라이드또는장쇄트리글리세라이드와같은고도로정제된식물성오일 ; 및 (f) N-알킬피롤리돈또는 N-알킬피페리돈. 유성보조-용매는, 추진제의증발시활성성분이피부상에서급속하게결정화되지않고피부로침투할수있는포화용액으로서피부상에존재하도록, 추진제또는추진제혼합물의증발시의조성물의가용화도를유지하기위해작용할수있다 ( 참조예 : Reid et al, Pharm. Res. 25 (11), 2008, pp. 2573-2580). 한실시형태에서, 본발명의조성물에포함된유성보조-용매는폴리옥시프로필렌-15-스테아릴에테르, 폴리옥시프로필렌-11-스테아릴에테르, 폴리옥시프로필렌-14-부틸에테르, 폴리옥시프로필렌-10-세틸에테르또는폴리옥시프로필렌-3-미리스틸에테르와같은일반화학식 I의화합물일수있다. 다른실시형태에서, 유성보조-용매는이소프로필미리스테이트, 이소프로필팔미테이트, 이소프로필이소스테아레이트, 이소프로필리놀레이트또는이소프로필모노올레에이트와같은직쇄또는분지쇄 C 10-18 알칸산또는 알켄산의이소프로필에스테르일수있다. [0059] 추가의실시형태에서, 유성보조 - 용매는프로필렌글리콜디펠라르고네이트와같은 C 8-14 알칸산의프로필렌글리 콜디에스테르일수있다. [0060] 다른추가의실시형태에서, 유성보조 - 용매는카프릴, 라우릴, 세틸, 스테아릴, 올레일, 리놀레일또는미리스 틸알콜과같은직쇄상 C 8-24 알칸올, 또는분지쇄상 C 8-24 알칸올, 바람직하게는 2- 옥틸도데칸올과같은 C 18-24 알 칸올일수있다. [0061] [0062] 다른추가의실시형태에서, 유성보조 - 용매는 N- 메틸피롤리돈과같은 N- 알킬피롤리돈이다. 본발명에이르는연구에서, 놀랍게도, 추진제로서부탄과같은순수한 C 3-5 알칸을사용하는것이활성성분을 충분히용해시키지않아, 시간경과에따른용액으로부터의비타민 D 유사체의침전및코르티코스테로이드의결정성장이관찰되었고, 즉, 조성물은조성물의저장수명동안물리적으로안정하지않았다는것이발견되었다. 놀랍게도, 추진제로서디메틸에테르그자체를사용하는경우또는디메틸에테르의일부를 C 3-5 알칸에첨가하여추진제혼합물을형성하는경우에도이러한문제가발생하지않는다는것이발견되었다. 따라서, 현재바람직한실시형태에서, 본발명의조성물은단독추진제또는추진제혼합물의제1 추진제로서디메틸에테르를포함한다. - 10 -
[0063] 본발명의조성물에있어서, 추진제혼합물의제 2 추진제는바람직하게는 C 3-5 알칸이고, n- 프로판, 이소프로판, n- 부탄또는이소부탄으로이루어진그룹으로부터선택되는것이바람직하다. 특히바람직한 C 3-5 알칸은 n- 부 탄및 / 또는이소부탄이다. [0064] 추진제혼합물에있어서, n- 부탄및 / 또는이소부탄대디메틸에테르의비율은바람직하게는 6:1 내지 0:1 v/v, 예를들면 5:1 내지 1:2, 4:1 내지 1:1, 4:2 내지 1:1, 4:2 내지 4:3 또는 4:3 내지 1:1 의범위내일수있다. [0065] [0066] [0067] [0068] [0069] [0070] [0071] [0072] [0073] 특정실시형태에서, 본발명의조성물은 (a) 약 0.00001 내지 0.05% w/w의비타민 D 유도체또는유사체, (b) 약 0.0005 내지 1% w/w의코르티코스테로이드, (c) 약 5 내지 55% w/w의지질담체, 및 (d) 약 45 내지 95% w/w의추진제또는추진제혼합물을포함한다. 보다구체적으로, 본발명의조성물은약 10 내지 50% w/w, 약 15 내지 45% w/w 또는약 20 내지 40% w/w의지질담체를포함할수있다. 보다구체적으로, 본발명의조성물은약 50 내지 90% w/w, 또는약 55 내지 70% w/w의추진제또는추진제혼합물을포함할수있다. 특정실시형태에서, 본발명의조성물은약 0.1 내지 10% w/w의상기정의된바와같은유성용매, 예를들면약 0.5 내지 3% w/w, 약 1 내지 2.5% w/w, 또는약 1.5 내지 2% w/w의유성용매를추가로포함할수있다. 지질담체는탄화수소또는 C 5 내지 C 60 범위의쇄길이를갖는탄화수소의혼합물일수있다. 흔히사용되는 연고담체는약 C 40-44 에서피크인상이한쇄길이의탄화수소들로이루어진페트롤라툼또는백색연질파라핀, 또는페트롤라툼과액체파라핀의혼합물 (C 28-40 에서피크인상이한쇄길이의탄화수소들로이루어짐 ) 이다. 백색연질파라핀은치료되는피부표면의폐쇄, 경피수분손실의감소, 및조성물중의활성성분의치료학적효과의증강을제공하지만, 적용후상당한소정시간동안지속되는유분감또는점착감을갖는경향이있다. 따라서, 쇄길이가다소짧은탄화수소로이루어진파라핀, 예를들면 C 14-16, C 18-22, C 20-22, C 20-26 에서피크인쇄길이를갖는탄화수소로이루어진파라핀또는이들의혼합물을사용하는것이바람직할수있다. 이러한파라핀은적용시유분감또는점착감이덜한점에서보다더화장용으로허용된다는것이밝혀졌다. 따라서, 본발명의조성물중의이러한파라핀의포함은환자의순응을향상시킬것으로기대된다. 페트롤라툼젤리라고칭하는이러한유형의적합한파라핀은 Sonneborn에의해제조되어상표명 Sonnecone, 예를들면 Sonnecone CM, Sonnecone DM1, Sonnecone DM2 및 Sonnecone HV 하에시판된다. 이들파라핀은본원에참조로서인용된국제특허출원공보제WO 2008/141078호에기재및특징이설명되어있다. 이들의바람직한화장품특성에추가로, 놀랍게도, 담체로서이들파라핀을함유하는조성물이종래파라핀을함유하는조성물보다더용인될수있는것으로밝혀졌다. ( 파라핀의탄화수소조성물은기체크로마토그래피에의해측정되었다 ). 또한, 지질담체는이소헥사데칸과같은이소파라핀일수있다. [0074] 본발명의조성물은지질담체에, 추진제의적용및증발후피부에반 - 고체밀봉층을형성하는특성을부여할 수있는친유성점도 - 증가성분을적합하게포함할수있다. 친유성점도 - 증가성분은적합하게는고분자량탄 화수소, 예를들면포화된 C 35-70 알칸의혼합물로이루어진미네랄왁스, 예를들면미세결정왁스와같은왁스 일수있다. 대안으로, 왁스는식물성또는동물성왁스, 예를들면, C 14-32 지방산및 C 14-32 지방성알콜의에스테르, 예를들면비즈왁스, 실리콘왁스또는수소화캐스터오일, 또는이들의혼합물일수있다. 점도-증가성분의양은전형적으로조성물중약 0.01 내지 5중량 % 범위내일수있다. 점도-증가성분이수소화캐스터오일인경우, 전형적으로는조성물중약 0.05 내지 1중량 %, 예를들면약 0.1 내지 0.5중량 % 범위내의양으로존재한다. [0075] 조성물은두꺼워진표피의건선플라크를연화시키는데작용하는유연제 (emollient) 를추가로포함할수있다. 본발명의조성물에포함되기에적합한유연제는휘발성실리콘오일일수있고, 그이유는실리콘의존재가피 부로의칼시포트리올의침투를보조하는것으로추가로밝혀졌기때문이다. 또한, 실리콘오일을포함하는조 - 11 -
성물은피부자극을덜초래하는것으로밝혀졌다. 본발명의조성물에포함되기에적합한실리콘오일은사이 클로메티콘및디메티콘으로부터선택될수있다. 본발명의조성물에포함된실리콘오일의양은전형적으로 0.3 내지 3% w/w, 예를들면약 0.5 내지 1.5% w/w 범위내이다. [0076] [0077] [0078] [0079] [0080] [0081] [0082] [0083] [0084] [0085] 또한, 본발명의조성물은피부제형에흔히사용되는다른성분, 예를들면항산화제 ( 예를들면, 알파-토코페롤 ), 보존제, 안료, 피부진정제, 피부치료제및피부컨디셔닝제, 예를들면요소, 글리세롤, 알란토인또는비스아볼롤을포함할수있다 ( 참조예 : CTFA Cosmetic Ingredients Handbook, 2 nd Ed., 1992). 바람직한실시형태에서, 조성물은멘톨, 유칼립톨또는니코틴아미드와같은항-자극제를포함할수있다. 현재바람직한항- 자극제는멘톨이고, 그이유는피부로의칼시포트리올의침투를증가시키는것으로도발견되었기때문이다 ( 도 1 참조 ). 멘톨은조성물중약 0.001 내지 1% w/w, 특히약 0.002 내지 0.003% w/w의양으로조성물내에포함될수있다. 본발명의조성물은, 치료를필요로하는환자에게본발명에따른조성물의유효량을국소투여함으로써, 건선, 지루양건선, 수장족저농포증, 피부염, 어린선, 주사및여드름, 및관련피부질환을치료하는데사용될수있다. 상기방법은상기조성물의치료학적으로충분한용량의 1일 1회또는 2회의국소투여를포함하는것이바람직하다. 이를달성하기위해서, 본발명에따른조성물이약 0.001 내지 0.5mg/g, 바람직하게는약 0.002 내지 0.25mg/g, 특히 0.005 내지 0.05mg/g의비타민 D 유도체또는유사체를함유하는것이바람직하다. 이들피부질환의유지치료, 즉증상의재발을지연시키기위한질환의가시적증상의소멸후의연속치료를위해본발명의조성물이유리하게사용될수있음이구상중이다. 추가의양상에서, 본발명은피부환부에국소조성물을분배하기에적합한가압용기에관한것이고, 상기용기는본발명에따른조성물및밸브어셈블리및스프레이형태로조성물을방출하기위한액츄에이터를포함한다. 도 6a 및도 6b에나타낸바와같이, 가압제품에적합한용기의예는본발명의조성물이저장되는용기본체 (1), 딥튜브 (2), 및밸브컵 (3), 밸브바디 (5) 및액츄에이터 (4) 를포함하는밸브어셈블리로이루어질수있다. 전형적으로, 용기본체 (1) 는금속, 유리, 세라믹, 폴리에스테르, 폴리에틸렌테레프탈레이트 (PET) 또는다른폴리머등의재료로이루어질수있다. 유리용기에는경질표면과충돌시형성될수있는유리파편을봉쇄하기위해, 예를들면, 폴리프로필렌으로된안전코팅이제공될수있다. 금속용기본체는보다우수하게충돌을견디고표면코팅처리가용이하므로현재바람직하다. 스테인레스스틸, 주석판및알루미늄 ( 즉, 알루미늄또는알루미늄합금, 애노드화알루미늄포함 ) 용기본체가이러한목적을위해특히적합한재료이고, 알루미늄은가볍고쉽게부서지지않으므로현재바람직하다. 금속용기는전형적으로불활성재료로라이닝되거나코팅되어조성물이금속과반응하는것을보호함으로써조성물의활성성분또는다른성분의임의의분해를방지하거나실질적으로제거한다. 불활성재료로는임의의적합한폴리머, 래커, 수지, 또는조성물과용기사이의임의의화학적상호작용을방지하기위해용기와조성물사이의차단층을생성하는다른코팅처리가포함된다. 불활성재료는비-금속성코팅인것이바람직하다. 금속용기를위한공지된코팅으로는아크릴, 페놀, 폴리에스테르, 에폭시및비닐수지가포함된다. 그러나, 비타민 D 유도체또는유사체를함유하는조성물은산성조건하에또는산성반응화합물의존재시화학적으로분해되는경향이있다. 또한, 코르티코스테로이드는알칼리성조건하에또는알칼리성반응화합물의존재시화학적으로분해되는것으로공지되어있다. 따라서, 본발명의조성물과함께사용하기위한용기코팅은, 바람직하게는그자체로산성또는알칼리성반응성을나타내지않고, 조성물의존재시, 산성또는알칼리성반응불순물이침출되지않도록선택되어야한다. 본발명에이르는연구에있어서, 예를들면, 특정에폭시페놀수지내부래커가활성성분중하나와적합하지않아칼시포트리올의허용불가능한화학적분해를야기한다는것이발견되었다. 이러한분해는산성그룹을포함하는콜로포늄이랙커중에존재하기때문일수도있다. 한편, 칼시포트리올의화학적안정성은폴리이미드- 폴리아미드수지가내부코팅으로서사용된경우에충분하였다. 폴리이미드-폴리아미드에추가로, 금속용기의내부를라이닝하기에적합한다른재료로는폴리아미드, 폴리이미드, 폴리프로필렌, 폴리에틸렌, 플루오로폴리머가포함되고, 퍼플루오로에틸렌프로필렌코폴리머 (FEP), 플루 - 12 -
오로고무 (FPM), 에틸렌-프로필렌디엔모노머고무 (EPDM), 폴리테트라플루오로에틸렌 (PTFE), 에틸렌테트라플루오로에틸렌코폴리머 (EFTE), 퍼플루오로알콕시알칸, 퍼플루오로알콕시알킬렌, 또는플루오로폴리머와비-플루오로탄소폴리머의블렌드가포함된다. 플루오로폴리머는예를들면, 폴리이미드-폴리아미드수지와조합으로사용할수있다. [0086] [0087] [0088] [0089] [0090] [0091] [0092] [0093] [0094] [0095] [0096] [0097] [0098] [0099] 용기코팅재료는단층으로또는추가의층적용전에각층을경화시키는다층으로적용될수있다. 또한, 조성물을금속용기로부터차단하는것에더하여, 하나를초과하는코팅의적용은용기벽에활성성분이부착되는것을방지함을도울수있다. 동일한이유로, 조성물과접촉하게되는용기의밸브성분도바람직하게는조성물의분해를야기하지않는재료로이루어지거나또는코팅된다. 예를들면, 밸브컵과같은금속밸브성분은애노드화은, 에폭시멜라민또는폴리프로필렌으로코팅될수있다. 용기로부터의누출, 특히추진제의누출을억제하는것에더하여, 용기내의개스킷또는밀봉에사용되는재료는바람직하게는화학적으로불활성이어야한다. 예를들면, 용기본체및밸브컵은, 적어도일부가노출되어조성물과접촉하는중간개스킷을사용하여함께크림핑될수있고, 따라서개스킷이불활성재료로이루어지지않은경우에는시간경과에따라조성물의분해가초래될수있다. 종래에어로졸용기밸브의개스킷에사용된재료의대규모시험은황-함유촉진제 ( 예를들면, 티아졸 ) 를이용한가황 (vulcanization) 에의해제조된폴리머재료가본발명의조성물을포함하도록의도된용기를위한개스킷재료로서적합하지않고, 이는황-함유잔기또는불순물과화학적분해로얻어진활성성분들중하나또는둘다의반응성때문일것이라는점을확립하였다. 유사하게, 본발명의조성물에포함된추진제에대해투과성인개스킷재료는본발명의목적을위한개스킷재료로서적합하지않다. 본발명에따른조성물과함께사용하기위한적합한개스킷또는밀봉재료로는플루오로엘라스토머 ( 예를들면, Viton V 600), 불소화에틸렌-프로필렌코폴리머 (FEP), 플루오로고무 (FPM, 예를들면, VI500) 또는에틸렌-프로필렌디엔모노머고무 (EPDM) 가포함된다. 딥튜브에적합한재료는예를들면, 폴리에틸렌및폴리프로필렌인것으로밝혀졌다. 밸브스템에적합한재료는예를들면, 폴리아미드및아세탈 (POM) 인것으로밝혀졌다. 도 6b에나타낸이러한실시형태에서, 조성물은비히클상 (6), 추진제상 (7), 및기상 (8) 을포함한다. 이러한실시형태에서, 분무용기는사용전에완전히흔들어비히클상 (6) 이추진제상 (7) 에균일하게현탁되어야할것이다. 도 7에나타낸바와같이, 밸브어셈블리는, 크림핑함으로써용기본체 (1) 에부착된전형적으로알루미늄과같은금속으로이루어진밸브컵 (3), 밸브스템 (51) 및용기로부터조성물을배출시키기위해활성화가억제된액츄에이터 (4) 에연결된스프링 (53) 을함유하는밸브바디 (5) 로이루어질수있다. 밸브스템 (51) 은액츄에이터 (4) 가가압되는경우에용기중에존재하는조성물이유동할수있는, 직경 0.05 내지 1mm의적어도하나의구멍 (52) 을함유한다. 밸브스템구멍 (52) 은바람직하게는용기를위아래또는측면등의상이한위치로사용가능하게하는볼과함께제공될수있다. 액츄에이터 (4) 는조성물이배출되는직경 0.3 내지 1.5mm의말단오리피스 (41) 를갖는인서트 (44) 와함께제공된다. 액츄에이터 (4) 는제품의균일한분무를확보하기에충분히작고, 또한용기로부터배출시조성물의액적이생물학적활성물질을함유하는액적이잘못하여흡입될수있는미세미스트를형성하지않음을확보하기에충분히큰크기의액적을갖는오리피스 (41) 로부터에어로졸분무가제공되도록설계되어야한다. 용기내의압력뿐만아니라인서트오리피스 (41) 및밸브스템구멍 ( 들 )(52) 의치수는일반적으로조성물이구멍 (4) 으로부터배출되는경우에형성되는스프레이콘의폭, 및그결과분무된조성물에의해덮일영역의크기를결정한다. 특정실시형태에서, 용기는조성물의용량을측정하기위한수단과함께제공될수있다. 본발명은본발명의청구범위를어떠한방식으로도한정하는것으로의도되지않는하기실시예들에의해추가로설명된다. 실시예 - 13 -
[0100] [0101] [0102] 실시예 1 상이한추진제혼합물중의칼시포트리올및 BDP의용해도시험밸브및액츄에이터가구비된 2 12 100ml 유리병을 67mg의 BDP, 13mg의칼시포트리올, 20g의비히클 ( 액체파라핀, 백색연질파라핀및 PPG-15-스테아릴에테르포함 ), 및표 1에나타낸바와같은다양한양의 DME 및부탄을함유하는조성물로채웠다. 상기조성물은백색연질파라핀중에존재하는장쇄알칸 ( 쇄중의탄소원자 50개이상 ) 으로이루어진것으로추정되는연속상및분산상을형성하였다. 분산상은방치시조성물의저부에침강하였다. 따라서, 조성물의상부는연속상만을함유하였고, 한편조성물의저부는연속상과분산상의혼합물로이루어졌다. 표 1 [0103] [0104] [0105] [0106] [0107] [0108] [0109] [0110] [0111] [0112] [0113] [0114] [0115] [0116] C1 내지 C9는병의연속상으로부터채취함 D1 내지 D9는병의연속상및분산상의혼합물로부터채취함시료채취전에, 병을그내용물이균일한것으로나타날때까지강하게진탕시킨후, 병을어두운곳에서하룻밤방치하여연속상과의혼합물로병의저부의분산상의침강을얻었다. 밸브에연결되어연속상또는혼합된연속상-분산상에도달된딥튜브를통해조성물의상부및저부로부터시료를채취하여어느한상의시료를갈색병에분무시켰다. 분산상이조성물의저부에침강된상태로남아있도록취급시병을진탕시키지않도록주의를기울였다. 분무된시료는추진제가증발할때까지 40 에서 5시간동안수욕에두었다. 이어서, 시료를실온에서 1시간동안냉각시켰다. 각시료에존재하는칼시포트리올및 BDP의양은하기작동조건하에 HPLC에의해측정하였다 : 컬럼 : Agilent Zorbas Eclipse Plus C18, 150 4.6mm, 3.5μm이동상 : 아세토니트릴 / 메탄올 /0.01M (NH 4 ) 2 HPO 4, ph 6.0, 24:45:30 (v/v/v) 유속 : 1.2ml/ 분검출 : 225 내지 320nM. 칼시포트리올에대해 264nm 및 BDP에대해 240nm에서산출. 컬럼오븐 : 30 자동시료채취기 : 20 구동시간 : 30분주사 : 80μl칼시포트리올에대한결과는도 1a 및도 1b에, BDP에대한결과는도 2a 및도 2b에나타낸다. 상기도면들로부터, 칼시포트리올및 BDP가둘다추진제및비히클상둘다에 DME에대한부탄의비율 4:3으로완전히용해된다는것이나타난다. 추가로, 칼시포트리올및 BDP는추진제로서의 100% DME에완전히용해된다. - 14 -
[0117] [0118] [0119] [0120] [0121] [0122] [0123] [0124] [0125] [0126] [0127] [0128] [0129] [0130] [0131] [0132] [0133] [0134] [0135] [0136] [0137] [0138] [0139] [0140] [0141] [0142] [0143] [0144] [0145] [0146] [0147] 조성물중의칼시포트리올및 BDP의물리적안정성은편광현미경에의해측정되었다. 그결과는조성물이 4개월동안방치되는경우칼시포트리올또는 BDP 중어느것도재결정화되지않음을나타낸다. 실시예 2 비히클조성물조성물 A 내지 E 조성물 A 내지조성물 E를제조하기위해, 백색연질파라핀을 80 에서용융시키고, 이어서 70 로냉각시키고, 이온도를유지시켰다. 칼시포트리올 1수화물을폴리옥시프로필렌-15-스테아릴에테르에용해시켜용액을형성하고, 이를용융된파라핀에교반하면서첨가하였다. BDP를액체파라핀에분산시키고, 이분산액을칼시포트리올-함유파라핀혼합물에교반하면서첨가한후, 혼합물을 30 미만으로냉각시켰다. 혼합물의일부 30g을폴리아미드-폴리이미드내부랙커가제공된알루미늄분무용기 (HOBA 8460) 로이동시킨후, 밸브컵을크림핑에의해용기본체에고정시켰다. 필요량의추진제혼합물을튜브를통해첨가한후, 칼시포트리올및 BDP의완전한용해를위해용기를 5분동안진탕시켰다. 조성물 A 성분 % w/w 칼시포트리올 1수화물 0.002 베타메타손디프로피오네이트 0.026 액체파라핀 1.22 α-토코페롤 0.001 PPG-15-스테아릴에테르 2.0 백색연질파라핀 37.5 디메틸에테르 31.7 부탄 27.5 조성물 B 성분 % w/w 칼시포트리올 1수화물 0.002 베타메타손디프로피오네이트 0.02 액체파라핀 0.9 α-토코페롤 0.001 PPG-15-스테아릴에테르 1.6 백색연질파라핀 28.9 디메틸에테르 36.7 부탄 31.9 조성물 C 성분 % w/w 칼시포트리올 1수화물 0.001 베타메타손디프로피오네이트 0.006 액체파라핀 0.3 PPG-15-스테아릴에테르 0.5-15 -
[0148] [0149] [0150] [0151] [0152] [0153] [0154] [0155] [0156] [0157] [0158] [0159] [0160] [0161] [0162] [0163] [0164] [0165] [0166] [0167] [0168] [0169] [0170] [0171] [0172] [0173] [0174] [0175] [0176] [0177] [0178] 백색연질파라핀 8.9 디메틸에테르 90.3 조성물 D 성분 % w/w 칼시포트리올 1수화물 0.002 베타메타손디프로피오네이트 0.030 액체파라핀 1.42 α-토코페롤 0.001 PPG-15-스테아릴에테르 2.4 백색연질파라핀 43.6 디메틸에테르 52.6 조성물 E 성분 % w/w 칼시포트리올 1수화물 0.002 베타메타손디프로피오네이트 0.026 액체파라핀 1.22 α-토코페롤 0.001 PPG-15-스테아릴에테르 2.0 백색연질파라핀 37.5 디메틸에테르 27.5 부탄 31.7 조성물 F 조성물 F를제조하기위해, 수소화캐스터오일을액체파라핀과함께 85 내지 90 에서용융시키고, 균질화시키면서약 60 로냉각시킨다. 이어서, 이혼합물을교반하면서 25 내지 30 로냉각시킨다. BDP를액체파라핀에현탁시키고, 상기균질화된혼합물에첨가한다. 칼시포트리올 1수화물을폴리프로필렌-15-스테아릴에테르에용해시키고, 다른성분의혼합물에첨가하고, 제형을균질화하여활성성분의균질한분포를확보하였다. 혼합물의일부 30g을폴리아미드-폴리이미드내부랙커가제공된알루미늄분무용기 (HOBA 8460) 로이동시킨후, 밸브컵을크림핑에의해용기본체에고정시켰다. 필요량의추진제혼합물을튜브를통해첨가한후, 칼시포트리올및 BDP의완전한용해를위해용기를 5분동안진탕시켰다. 조성물 F 성분 % w/w 칼시포트리올 1수화물 0.002 베타메타손디프로피오네이트 0.03 PPG-15-스테아릴에테르 6.6 수소화캐스터오일 0.8 액체파라핀 33.6 디메틸에테르 27.3-16 -
[0179] [0180] [0181] [0182] [0183] [0184] [0185] [0186] [0187] [0188] [0189] [0190] [0191] [0192] [0193] [0194] [0195] [0196] [0197] [0198] [0199] [0200] [0201] [0202] [0203] [0204] [0205] [0206] 부탄 31.7 조성물 G 및조성물 H 조성물 G를제조하기위해, N-메틸피롤리돈중의칼시포트리올 1수화물용액을중쇄트리글리세라이드및폴리옥시프로필렌-15-스테아릴에테르와혼합한다. Sonnecone DM1 및미세결정왁스를 80 내지 85 에서용융시키고, 액체파라핀중의 α-토코페롤용액을 80 에서용융될때까지교반하면서첨가하였다. 70 내지 75 로냉각시킨후, 칼시포트리올 1수화물을함유하는용매혼합물을교반하면서첨가한다. 약 40 로냉각시킨후, 메탄올을첨가하고, 얻어진혼합물을 30 미만으로냉각시키면서교반한다. 혼합물의일부 30g을폴리아미드-폴리이미드내부랙커가제공된알루미늄분무용기 (HOBA 8460) 로이동시킨후, 밸브컵을크림핑에의해용기본체에고정시켰다. 필요량의추진제혼합물을튜브를통해첨가한후, 칼시포트리올및 BDP의완전한용해를위해용기를 5분동안진탕시켰다. 조성물 G 성분 % w/w 칼시포트리올 1수화물 0.002 베타메타손디프로피오네이트 0.03 중쇄트리글리세라이드 2.5 N-메틸피롤리돈 1.0 PPG-15-스테아릴에테르 0.6 메탄올 0.0025 액체파라핀 2.1 α-토코페롤 0.0025 페트롤라툼젤리화이트 30.3 (Sonnecone DM1) 미세결정왁스 4.1 (Multiwax 180 MH) 디메틸에테르 27.3 부탄 31.7 조성물 H를제조하기위해, 백색연질파라핀을 80 내지 85 에서용융시키고, 이어서 70 내지 75 로냉각시키고, 용매혼합물을교반하면서첨가한다. 혼합물의일부 30g을폴리아미드-폴리이미드내부랙커가제공된알루미늄분무용기 (HOBA 8460) 로이동시킨후, 밸브컵을크림핑에의해용기본체에고정시켰다. 필요량의추진제혼합물을튜브를통해첨가한후, 칼시포트리올및 BDP의완전한용해를위해용기를 5분동안진탕시켰다. 조성물 H 성분 % w/w 칼시포트리올 1수화물 0.002 베타메타손디프로피오네이트 0.03 중쇄트리글리세라이드 2.5 N-메틸피롤리돈 1.0 PPG-15-스테아릴에테르 0.6 백색연질파라핀 36.5-17 -
[0207] [0208] [0209] [0210] 디메틸에테르 27.3 부탄 31.7 조성물 I 내지조성물 P 중쇄트리글리세라이드, 카프릴릭 / 카프릭글리세라이드및폴리옥실 40 수소화캐스터오일을혼합하고, 이혼합물을 50 에서 15분동안자석교반기로교반함으로써조성물 I를제조한다. 칼시포트리올 1수화물을 40 에서 15분동안자석교반기를이용하여상기혼합물에용해시킨다. 백색연질파라핀을 80 에서용융시킨다. 3-성분계면활성제-용매혼합물함유칼시포트리올 1수화물을용융된파라핀에첨가하고연고혼합물이균질해질때까지젓는다. 균질화된혼합물을교반하면서 30 로냉각시킨다. 카프릴릭 / 카프릭글리세라이드대신에보조-계면활성제로서글리세롤모노올레에이트 40을사용한것을제외하고는동일한방식으로조성물 J를제조한다. 혼합물의일부 30g을폴리아미드-폴리이미드내부랙커가제공된알루미늄분무용기 (HOBA 8460) 로이동시킨후, 밸브컵을크림핑에의해용기본체에고정시켰다. 필요량의추진제혼합물을튜브를통해첨가한후, 칼시포트리올및 BDP의완전한용해를위해용기를 5분동안진탕시켰다. [0211] [0212] 계면활성제, 보조 - 계면활성제및용매를하기표에나타낸바와같이적절하게치환하는것을제외하고는조성 물 I 와동일한방식으로조성물 K 내지조성물 P 를제조한다. [0213] [0214] [0215] [0216] 실시예 3 상이한조성물중의칼시포트리올및 BDP의화학적안정성상기실시예 2에기재된바와같이제조된조성물 E를 40 에서 3개월동안분무용기에저장하였다. 상기조성물의시료를저장 1, 2, 및 3개월째에각각채취하고, 칼시포트리올및 BDP뿐만아니라가능한분해생성물 ( 관련불순물 ) 의함량을 HPLC에의해측정하였다. 그결과를하기표에이론상초기값의백분율로나타낸다. - 18 -
[0217] [0218] [0219] [0220] [0221] [0222] [0223] 상기결과로부터 40 에서 3개월후의칼시포트리올의손실과측정된불순물의양사이의차이가존재함이나타난다. 이는칼시포트리올의겉보기손실은저장동안칼시포트리올의분해의결과가아니지만, 예를들면용기성분중하나이상, 가능하게는딥튜브또는내부랙커로의칼시포트리올의흡착등의다른원인이이유일수있음을제안한다. 따라서, 본발명자들은활성성분둘다는언급된조건하에서화학적으로안정한것으로결론짓고, 본조성물은 25 에서약 2년의저장수명을가질수있다고제안하였다. 실시예 4 침투연구본발명의조성물로부터의칼시포트리올의피부침투및투과를조사하기위해서, 피부확산실험을행하였다. 돼지귀유래의전체두께피부를연구에사용하였다. 귀를사용하기전에 -18 에서냉동시켰다. 실험전날, 귀를서서히해동하기위해서냉장고 (5±3 ) 에두었다. 실험당일, 수의용헤어트리머를이용하여털을제거하였다. 메스를이용하여피부의피하지방을제거하고, 2조각의피부를각귀로부터잘라내어 Franz 확산세포상에균형잡힌정렬로두었다. 3.14cm2의이용가능한확산면적및 8.6 내지 11.1ml 범위의수용체체적을갖는정적 (static) Franz-형확산세포를실질적으로문헌 [T.J. Franz, "The finite dose technique as a valid in vitro model for the study of percutaneous absorption in man", in Current Problems in Dermatology, 1978, J.W.H. Mall (Ed.), Karger, Basel, pp. 58-68] 에기재된방식으로사용하였다. 비체적을측정하고, 각세포에대해기록하였다. 자석바를각세포의수용체구획에두었다. 피부를적재한후, 피부의수화를위해생리식염수 (35 ) 를각수용체챔버에채웠다. 세포를 400rpm으로설정된자석교반기상에놓인열적으로제어된수욕에두었다. 수욕중의순환수는 35±1 로유지되어피부표면의온도는약 32 가되었다. 1시간후, 식염수를수용체매질, 4% 소혈청알부민을함유하는 0.04M 등장성포스페이트완충액, ph 7.4(35 ) 로대체하였다. 연구기간동안내내피부상태를유지, 즉, 수용체매질중의활성화합물의농도는매질중의화합물의용해도의 10% 미만이었다. 6개의반복시료 ( 즉, n=6) 에서각시험조성물의시험관내피부투과를시험하였다. 각시험조성물을 0시간째에피부막상에분무하였다. 유리스패튤라를이용하여피부표면에조성물을균일하게스프레딩하였다. [0224] 피부침투실험을 21 시간동안진행시켰다. 수집하였다 : 이어서, 시료를 2, 6 및 21 시간째에하기구획으로부터 [0225] [0226] [0227] [0228] D-Squame 테이프 ( 직경 22mm, CuDerm Corp., Dallas, Texas, USA) 를이용하여 10회의테이프스트립핑에의해각질층을수집하였다. 표준압력을이용하여각테이프스트립을 5초동안시험영역에적용하고부드러운연속움직임으로한번에시험영역으로부터제거한다. 각각의반복된스트립에대하여, 떼어내는방향을달리했다. 이어서, 바이어블표피및진피를유사한방식으로피부로부터시료채취하였다. 확산세포에잔존하는수용체유체의시료 (1ml) 를수집하고분석하였다. 시료중의칼시포트리올의농도를 LC 질량분광분석에의해측정하였다. 그결과는하기도 3 및도 4에나타내고, 이는각각적용후 2, 6 및 21시간째에바이어블피부 ( 진피및표피 ) 및수용체유체에서발견된칼시포트리올및 BDP의양을적용된용량중의 % 로나타낸다. 그결과는조성물 E 의적용이 Daivobet 연고에비하여칼시포트리올및 BDP 의피부침투를유의하게증가시킨다는것을나타낸다. [0229] [0230] [0231] 실시예 5 조성물의생물학적활성하기도 5에나타내는바와같이, 카텔리시딘은사람각질세포에서발현되는항미생물펩타이드이다. 카텔리시딘의발현은피부의감염또는피부차단층의파괴를강하게유도한다. 건선에있어서, 건선환자의병변피부에는카텔리시딘의수준이증가한다. 비타민 D 3 또는칼시포트리올과같은비타민 D 유사체에의해카텔리시딘 - 19 -
을암호화하는유전자의발현이비타민 D 수용체에의결합을통해유도될수있음이발견되었다 ( 참조예 : TT Wang et al, J. Immunol. 173(5), 2004, pp. 2909-2912; J Schauber et al., Immunology 118(4), 2006, pp. 509-519; Schauber and Gallo, J. Allergy Clin Immunol 122, 2008, pp. 261-266; M. Peric et al., PloS One 4(7), July 22, 2009, e6340). 이러한발견은, 카텔리시딘을암호화하는유전자의유도수준을측정함으로써, 시험된조성물로부터사람의각질세포중의칼시포트리올의흡수및생물학적활성이측정되는검사를개발하는데이용되어왔다. [0232] 상기검사에있어서, 상기실시예 2 에기재된바와같이제조된조성물 E 를 0.5 cm2폴리카보네이트필터상에서 12일동안배양한정상사람각질세포로이루어진재생사람표피 (SkinEthic Laboratories로부터시판, Nice, France) 에 3회반복하여국소분무하였다. 조직을 2일동안처리하고, 이어서폴리카보네이트필터로부터표피를분리하여액체질소에서순간-동결시켰다. RNA는종래절차에의해합성된세포및 cdna로부터추출하였다. 이어서, Applied Biosystems로부터의하기검사를이용하여정량실시간 PCR(qPCR) 을수행하였다 : CAMP Hs0018038_m1 및 GAPDH Hs99999905_m1. 카텔리시딘의발현수준은 GAPDH에대해정규화되고, 상대적정량은 Daivobet 연고와의비교에의해이루어졌다. [0233] [0234] 그결과는 Daibovet 를나타낸다. 실시예 6 연고를이용하여얻어진것에비해카텔리시딘의생물학적활성에있어서의 2.3 배의증가 [0235] [0236] [0237] 상이한내부랙커의존재시칼시포트리올 /BDP의화학적안정성실시예 2에기재된바와같이제조되고, 2개의상이한유형의내부랙커, 에폭시페놀기반랙커 (HOBA 7940/7407) 및폴리이미드-폴리아미드기반랙커 (HOBA 8460) 와각각제공되는알루미늄분무용기에놓인조성물 A의배치를 40 에서 1개월동안방치한후각배치의시료를유리에분무하고이들을실시예 3에기재된절차에의해 HPLC를행함으로써활성성분의화학적안정성에대해시험하였다. 그결과를하기표에나타낸다. [0238] [0239] [0240] [0241] [0242] [0243] [0244] EP: 에폭시페놀기반랙커 PI-PA: 폴리이미드-폴리아미드기반랙커표로부터, 에폭시페놀기반랙커가분무용기의내부랙커로서사용되는경우칼시포트리올이허용불가능하게분해되는한편, 폴리이미드-폴리아미드기반내부랙커의존재시화학적안정성이허용가능하다는것이나타난다. 베타메타손디프로피오네이트의화학적안정성은이들내부랙커의조성물에의해훨씬더적게영향을받는것으로나타난다. 표에나타낸칼시포트리올의분해는추진제혼합물의용매작용으로인해랙커로부터침출될수있는에폭시페놀기반 HOBA 7940/7407 중의하나이상의산성반응성분에의해야기된다고추정된다. 현재, 이러한성분은산성그룹을포함하므로콜로포늄인것으로추정된다. 실시예 7 상이한추진제혼합물에있어서의비타민 D 유사체및코르티코스테로이드의용해도시험밸브및액츄에이터가구비된 100ml 유리병을 API(10mg의칼시포트리올, 타칼시톨, 막사칼시톨, 30mg의클로베타솔프로피오네이트, 60mg의베타메타손 17-발러레이트, 하이드로코르티손 17-부티레이트, 120mg의하이드로코르티손발러레이트또는 800mg의하이드로코르티손 ) 및다양한양의 DME 및부탄 (46.7ml의부탄, 6.7ml의 DME - 20 -
및 40.0ml의부탄, 또는 23.3ml의 DME 및 23.3ml의부탄 ) 을함유하는조성물로채웠다. 시료채취전에, 병을그내용물이균일한것으로나타날때까지강하게진탕시킨후, 병을어두운곳에서하룻밤방치하여미용해된 API의침강을얻었다. 시료를신틸레이션유리에샘플을분무함으로써밸브에연결된딥튜브를통해조성물의상부로부터시료를채취하였다. 미용해된 API가조성물의저부에침강된상태로남아있도록취급시병을진탕시키지않도록주의를기울였다. 유리중의 API는추출용용매에용해되고, HPLC로주사하기전에필요에따라희석되었다. [0245] [0246] [0247] [0248] [0249] [0250] [0251] [0252] [0253] [0254] [0255] [0256] [0257] [0258] [0259] [0260] [0261] [0262] [0263] [0264] [0265] [0266] [0267] 각시료에존재하는칼시포트리올, 타카시톨, 막사칼시톨, 베타메타손 17-발러레이트및클로베타솔프로피오네이트의양은하기작동조건하에 HPLC에의해측정하였다 : 컬럼 :4.6 150mm, Waters Sunfire C18. 3.5μm컬럼이동상 : 아세토니트릴-메탄올- 물 (20:50:30) 유속 :1.2ml/ 분검출 :PDA 210nm 내지 350nm 베타메타손 17-발러레이트및클로베타솔프로피오네이트에대한산출은 240nm에서이루어진다. 비타민 D 유사체에대한산출은 260nm에서이루어진다. 컬럼오븐 :35 자동시료채취기 :20 구동시간 :40분주사 : 각 API에대한표준곡선에따라상이함보유시간 :6.2분( 클로베타솔프로피오네이트 ) 6.7분 ( 베타메타손 17-발러레이트 ) 10.5분 ( 막사칼시톨 ) 28.6분 ( 칼시트리올 ) 32.6분 ( 타카칼시톨 ) 각시료에존재하는하이드로코르티손, 하이드로코르티손-발러레이트및하이드로코르티손 17-부티레이트의양은하기작동조건하의 HPLC에의해측정되었다 : 컬럼 :Phenomenex Precolumn C18 4.0mm 2.0mm 또는등량 + 물 Sunfire C18 3.5μm, 100mm 4.6mm 또는등량이동상 : 용리액 A: 테트라하이드로푸란용리액 B: 물구배 : 시간 ( 분 ) 용리액 A(%) 용리액 B(%) 곡선 (Empower) [0268] [0269] [0270] 유속 :1.0ml/ 분 프리컬럼체적 : 루프의크기에상응함 - 21 -
[0271] [0272] [0273] [0274] [0275] [0276] [0277] [0278] [0279] [0280] [0281] [0282] 검출 :UV 254nm PDA-검출기 220 내지 320nm 주사 : 각 API에대한표준곡선에따라상이함컬럼오븐 :40 자동시료채취기 : 주위온도구동시간 : 하이드로코르티손에대한보유시간의최소 4배보유시간 :6.0분( 하이드로코르티손 ) 12.7분 ( 하이드로코르티손 17-발러레이트 ) 14.5분 ( 하이드로코르티손발러레이트 ) 그결과는비타민 D 유사체및코르티코스테로이드에대해각각표 a 및표 b에나타낸다. 표로부터, DME 양을증가시킴으로써비타민 D 유사체및코르티코스테로이드의용해도가증가한다는것이나타난다. [ 표 a] 주위온도에서의비타민 D 유사체의용해도. [0283] [0284] [0285] [0286] 값은동일한병으로부터의 2 개의측정값의평균값이다. [ 표 b] 주위온도에서의코르티코스테로이드의용해도. [0287] [0288] [0289] [0290] [0291] [0292] [0293] [0294] [0295] [0296] [0297] 값은동일한병으로부터의 2개의측정값의평균값이다. 실시예 8 상이한개스킷재료의존재시칼시포트리올 /BDP의화학적안정성각종개스킷재료와조성물의적합성을시험하기위해서, 실시예 2를참조하여폴리아미드-폴리이미드내부랙커를갖는알루미늄분무용기에조성물 E를채우고용기본체에크림핑된밸브컵으로밀봉하여시료를제조하였다. 각각의용기에, 10조각또는등량의개스킷시험재료를분무용기에첨가하고, 조성물에침지시켰다. 용기를 25 또는 40 에서저장하고, 1 및 3개월후 40, 및 3개월후 25 에서시험하였다. 저장후, 조성물을유리병에서분무시키고, 추진제를 2일동안증발시켰다. 조성물의비-휘발성부분은칼시포트리올, 베타메타손디프로피오네이트, 및이들의관련유기불순물에대해분석되었다. 칼시포트리올의양은액체추출후 HPLC에의해측정하고, 이어서 50 에서제어된이성질화시켰다. 메틸테스토스테론을내부표준으로서사용하였다. HPLC 분석에하기조건을사용하였다 : 컬럼 : LiChrospher RP-18, 125 4mm, 5μm이동상 : 아세토니트릴 / 메탄올 /0.01M (NH 4 ) 2 PO 4 (20:50:30) 유속 : 2.0ml/ 분검출 : UV-264nm - 22 -
[0298] [0299] [0300] [0301] [0302] [0303] [0304] [0305] [0306] [0307] [0308] [0309] [0310] [0311] [0312] [0313] [0314] [0315] [0316] [0317] [0318] [0319] [0320] [0321] 주사 : 50μl구동시간 : 약 9분칼시포트리올과관련된유기불순물을액체추출후하기조건을이용하여 HPLC에의해측정했다 : 컬럼 : YMC ODS-AM, 150 4.6mm, 3μm이동상 : 아세토니트릴 / 메탄올 /0.01M (NH 4 ) 2 PO 4 (20:50:30) 유속 : 1.0ml/ 분검출 : UV-264nm 주사 : 500μl구동시간 : 칼시포트리올의보유시간의 2배베타메타손디프로피오네이트의양은액체추출후내부표준으로서의베클로메타손디프로피오네이트및하기 HPLC 조건을이용하여 HPLC에의해측정하였다 : 컬럼 : SuperSpher RP-18, 75 4mm, 4μm이동상 : 아세토니트릴 / 물 (50:55) 유속 : 1.5ml/ 분검출 : UV-240nm 주사 : 20μl구동시간 : 약 9분베타메타손디프로피오네이트와관련된유기불순물은액체추출에의해추출하여하기조건을이용한 HPLC에의해분석하였다. 컬럼 : LiChrospher RP-18, 125 4mm, 5μm이동상 : 아세토니트릴 /0.05M (NH 4 ) 2 PO 4 ph 7(50:55) 유속 : 2.0ml/ 분검출 : UV-240nm 주사 : 20μl구동시간 : 약 20분그결과는하기표에나타낸다 : [0322] [0323] [0324] Buna 및 NPR 은니트릴고무이고, Viton 은플루오로엘라스토머이며, EPDM 은에틸렌 - 프로필렌디엔모노머고무이 다. 상기데이터는 2 종의개스킷유형, Buna 및 NPR 이칼시포트리올및베타메타손디프로피오네이트둘다의분해 - 23 -
를초래함을나타낸다. 이러한적합성시험에기초하여, 이들 2종의재료는시험된조성물과접촉하여사용하기에적합하지않다는고결론지었다. Viton 및 EPDM 개스킷은칼시포트리올및베타메타손디프로피오네이트의안정성에부정적인영향을갖지않았으므로, 이들은시험된조성물을위한개스킷재료로서유용한것으로생각된다. 도면 도면 1a 도면 1b - 24 -
도면 2a 도면 2b - 25 -
도면 3-26 -
도면 4-27 -
도면 5 도면 6a - 28 -
도면 6b 도면 7-29 -