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희진 호
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1 J Korean Soc Food Sci Nutr 한국식품영양과학회지 43(6), 829~835(2014) 곤드레또는참취를함유한빵의뇌신경보호효과 권기한 임희경 정미자 광주대학교식품영양학과 Neuroprotective Effects of Bread Containing Cirsium setidens or Aster scaber Ki Han Kwon, Heekyung Lim, and Mi Ja Chung Dept. of Food Science & Nutrition, Gwangju University, Gwangju , Korea ABSTRACT This study investigated the neuroprotective effects of bread containing extract from Cirsium setidens (CS) or Aster scaber (AS) against H 2O 2-induced death of human brain neuroblastoma SK-N-SH cells. Treatment with bread containing extract from CS (CSB) or AS (ASB) reduced H 2O 2 cytotoxicity in SK-N-SH cells, the intracellular ROS level, and the phospho-p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) level. In the sensory evaluation, wild vegetable flavor scores of CSB were higher than those of ASB and bread containing 0% CS or AS (NB). In terms of appearance, color, flavor, softness, and overall acceptability, CSB and ASB showed higher scores than NB, but no differences were observed between CSB and ASB. These results indicate that CSB and ASB have potent health benefits in terms of neuroprotection against oxidative stress mediated through antioxidant activity and inhibition of p38 phosphorylation in brain neural cells. Thus, CS and AS could be considered as a health functional material. Key words: antioxidant activity, brain, neuroprotective effects, oxidative stress, SK-N-SH cells 서 대표적인뇌질환으로알츠하이머병 (Alzheimer's disease), 파킨슨병 (Parkinson's diease), 뇌졸중 (stroke) 등과같은뇌신경질환은자유라디칼과같은활성산소종이중요한역할을한다고보고되어져있다. 이들뇌질환은뇌세포내에서산화적스트레스에의해생성되는각종활성산소종이신경세포군을손상시키는것이주요한병인에해당한다 (1,2). 특히뇌조직은자유라디칼공격에대해서민감한것으로알려져있는데, 이러한이유는뇌신경세포에는방어메카니즘이충분하지못하며산화되기쉬운다가불포화지방산 (long chain unsaturated fatty acids) 이고농도로존재하고, 라디칼형성시촉매로이용되는금속이온 (Fe 2+, Cu 2+ ) 이존재하기때문이다 (3). 따라서이들신경질환을효과적으로예방또는치료할수있는약물을개발하기위한노력의일환으로항산화작용을나타내는물질에대한연구가활발하게진행되고있다. 많은종류의항산화물질은국소또는전체뇌허혈동물모델에서효과를발현하는것으로보고되어있고 (4), 또한 α-토코페롤은심한기억력손상을수반한알츠하이머병환자의질병의진행속도를완화시키는것으로알려졌다. 또한파킨슨병치료도활성산소종소거작용을나타내므로치료효과를나타내는약들이사용되고있다 (5). 그러나현 Received 5 February 2014; Accepted 17 March 2014 Corresponding author. mijachung@gwangju.ac.kr, Phone: 론 재알츠하이머병, 파킨슨병등과같은뇌질환을완전히치료할수있는방법은없으므로예방이가장중요하다. 본연구에서는다양한식물을대상으로항산화물질을연구하던중참취 (Aster scaber) 와곤드레 ( 고려엉겅퀴, Cirsium setidens) 에서항산화작용및뇌신경세포보호효과를나타내는물질을확인하게되었다. 참취는우리나라전국각지의산야지에흔히자생하며, 일상식생활에많이애용되는산채류중의하나이다. 참취는해수, 이뇨, 보익, 방광염, 두통, 현기증등에효과가있는것으로알려져있고 (6), 생리활성에관한연구로는유전독성억제효과 (7), 지방대사와항산화에미치는영향 (8), 고지혈증예방효과 (9,) 등이보고되어져있다. 곤드레는초롱꽃목국화과의여러해살이풀로 5~6월에식재료로사용하기위해채취하고 7~월에꽃이피고열매는 11월에익는다. 한국특산종으로전국에분포한다고알려진산채이며, 지혈, 토혈, 비혈및고혈압의치료에이용되어왔다 (11,12). 곤드레는맛이담백하고부드럽고독특한향이특징이며, 예부터구황식물로많이먹었다. 곤드레는어린순을데쳐서나물, 장아찌, 튀김으로먹거나생으로쌈을싸서먹는것, 나물밥으로만들어먹는것등다양한방법으로조리할수있다. 본연구에서는참취및곤드레를이용한다양한건강식품개발하기위하여아침대용으로섭취가능한모닝빵제조에참취또는곤드레주정추출물을일정량첨가하여알츠하이머병, 파킨슨병등과같은뇌질환을예방할수있는건강기

2 8 권기한 임희경 정미자 능성모닝빵을제조하고자하였다. 재료및방법추출물의제조강원도양양에서재배된참취 (Aster scaber) 와곤드레 ( 고려엉겅퀴, Cirsium setidens) 를구입하여건조후분쇄하였다. 분말시료중량의 배인 70% 주정을첨가하여실온에서 8시간동안 3회추출하였다. 여과하여얻은액상은감압농축기를사용하여추출용매를제거한후진공동결건조기를이용하여동결건조하였다. 동결건조된분말형태의곤드레추출물 (CS) 과참취추출물 (AS) 은 -20 C의냉동고에보관하면서빵을제조할때사용하였다. CS가함유한곤드레모닝빵, AS가함유한참취모닝빵그리고추출물을함유하지않은일반모닝빵은동결건조하여분말화한후시료중량 배의 70% 주정을첨가하여실온에서 8시간씩 3회추출하였다. 추출액을여과한후감압농축기를사용하여추출용매를제거한뒤동결건조하여곤드레모닝빵추출물 (CSB), 참취모닝빵추출물 (ASB) 그리고일반모닝빵추출물 (NB) 을얻었고, -20 C의냉동고에보관하면서실험에사용하였다. 시료의제조본실험에사용된모닝빵은밀가루 0% 기준으로분말상태의참취추출물및곤드레추출물을각각 1% 씩첨가하였고, 제빵의반죽배합비는 Table 1과같다. Table 1의배합비에따라전재료를믹싱 ( 저속 5분, 고속 5분 ) 하여혼합한후, 온도 C, 상대습도 80% 의조건에서 분동안 1차발효한다음분할하여 ( 플로아타임 분, 실온 25 C) 성형하였다. 그다음 C, 상대습도 80% 조건에서 2차발효시켰고, 2차발효가끝난반죽은 190 C에서구웠다. 냉각후포장하여본연구에사용하였다. DPPH 라디칼소거활성측정 DPPH 라디칼소거능은일정농도의시료 (1.8 ml) 와 1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl(dpph)(1.5-4 M, 1.2 ml) 용액을잘혼합한다음 37 C에서 분간반응시킨후 517 nm에서흡광도를측정하였다. DPPH 라디칼소거활성은대조구에대한시료첨가구의흡광도를비교하여 [1-( 시료의흡광도 / 대조구의흡광도 )] 0에의하여 % 로나타내었다. 세포배양및처리사람의신경모세포종 SK-N-SH를 % 비활성화우태아혈청 (fetal bovine serum) 과 1% 페니실린-스트렙토마이신용액 (penicillin/streptomycin) 을넣은 Eagle's Minimum Essential Medium(EMEM; ATCC, Manassas, VA, USA) 배양액으로 5% CO 2 가공급되는배양기에서 37 C 조건으로배양하였다. 충분한세포를얻기위해배양용플라스크 (T75 cm 2 ) 에서세포를배양하고, 2~3일에한번씩배지를 80% 교체하여충분히자랐을때 trypsin-edta(ethylene diamine tetraacetic acid) 용액 (1 ) 을사용하여부착된세포를떼어낸후성장배지에세포수를 1 4 cells/well과 2 4 cells/ well로조정하여 96-well plates에세포를깔아주고 24시간동안배양하여 MTT assay와세포내 ROS를검출하기위하여사용하였다. 1~2일후일반모닝빵추출물 (NB), 곤드레추출물이함유된곤드레모닝빵추출물 (CSB) 그리고참취추출물이함유된참취모닝빵추출물 (ASB) 을우태아혈청과항생제를첨가하지않은성장배지로희석하여 24시간단독처리하여시료의세포독성을알아보았다. 산화적스트레스에대항하는시료의뇌신경세포보호효과를알아보기위해 NB, CSB 그리고 ASB 각각을 500 μm H 2O 2 와 분간 SK-N-SH 세포에동시에처리하였다. 무처리군과 500 μm H 2O 2 처리군은대조군및양성대조군으로사용하였다. Table 1. Formulas of bread added with extract from Cirsium setidens or Aster scaber (Unit: g) Ingredients NB CSB ASB Wheat flour Salt Sugar Yeast Egg Water Olive oil CS AS 1, , , Total 1,820 1,820 1,820 AS: extract from Aster scaber, CS: extract from Cirsium setidens. NB: extract from normal bread, ASB: extract from bread added with AS, CSB: extract from bread added with CS. 세포내활성산소종 (reactive oxygen species, ROS) 측정 SK-N-SH 세포내에서산화적스트레스 (oxidative stress) 의유무및시료가뇌신경세포내 ROS를소거할수있는지를확인하기위해서 2,7-dichlorofluorescein diacetate (DCF-DA) 를 prove로이용한 SK-N-SH 세포내생성된 ROS 양을측정하였다. mm DCF-DA를만들어 µm 농도가되도록 PBS로희석시켰다. 세포에배지를제거한후 µm DCF-DA 용액을세포에더한후 37 C에서 45분간배양하였다. DCF-DA 용액을제거한후 PBS로남아있는 DCF-DA를완전히제거한후 PBS를더하여 5분간배양시켰다. 세포내형광광도의변화를형광광도계 (BioTek, Winooski, VT, USA) 를이용하여 488 nm(excitation) 와 525 nm(emission) 에서측정하였다 (13).

3 곤드레및참취빵의뇌신경보호 831 세포생존율측정 배양이끝난 SK-N-SH 세포의생존율은 Chung 등 (14) 이사용한 MTT[3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)-2,5-dipheyl terazolium bromid] 환원방법을이용하여측정하였다. 즉각 well MTT 용액 (5 mg/ml) 을성장배지의 분의 1로가해주고다시 37 C에서 4시간더배양하여 MTT를환원시켜생성된 formazon이배지에따라나가지않도록배지를조심스럽게제거하였다. 남아있는배지를완전히제거하기위해실온에서 분간방치한후 DMSO를이용하여용해시킨시료를 570 nm에서흡광도를측정하였다. 흡광도측정시공시료는 DMSO로하였고세포의생존율은아래와같이계산하였다. 세포생존율 (%)= 시료처리군의흡광도 0 대조군의흡광도 세포내 p38 MAPK 인산화측정 SK-N-SH 세포내 p38 MAPK의인산화를알아보기위해시료를처리한세포에서단백질을분리하여 p38 MAPK 의인산화정도를 MAPK(Thr180/Tyr182) Sandwich ELISA Kit(Cell Signaling Technology, Beverly, MA, USA) 를사용하여 enzyme-linked immunoabsorbent assay(elisa) 를제조사의방법에따라수행하였다. 관능검사빵의관능검사는식품영양학을전공하고있는대학생 50 명을선정하여본실험의목적과평가방법에대한교육후 5점척도법으로실시하였다. 관능검사설문조사에서일반모닝빵을대조군으로하여참취모닝빵그리고곤드레모닝빵을비교하여평가하는방식으로이루어졌다. 제품의특성강도 [ 쓴맛 (bitterness), 산채향 (wild vegetable flavor), 떫은맛 (astringency), 이취 (off-flavor)] 와소비자기호도평가항목 [ 외관 (appearance), 색상 (color), 향미 (flavor), 부드러움 (softness), 종합적인기호도 (overall acceptability)] 으로나누었고제품의특성강도항목은아주심하면 5점, 전혀없다는 1점으로나타낸다. 소비자기호도평가항목은대단히좋아한다는 5점, 좋지도싫지도않다는 3점그리고대단히싫어한다는 1점으로나타낸다. 관능검사에참여한지원자들은설문지에나이와성별등을기록하고빵 15 g을입안에넣고 20초간씹어구강표피를골고루자극한후뱉어내고, 한시료의평가를마칠때마다물로입을세척하고 분경과된후다음시료를평가한다. 통계처리본실험결과들은평균 (mean)± 표준편차 (standard deviation, SD) 로표시하였고실험군간평균의차이는 oneway ANOVA로유의성을확인한후 Duncan's multiple range test를이용하여사후검정하였으며 P<0.05 수준에서유의성의여부를검증하였다. 모든통계분석은 SPSS CS 1% CS or AS 0% AS 1% Fig. 1. The pictures of the surface of bread added with extract from Cirsium setidens (CS) or Aster scaber (AS). (Statistical Package for the Social Science) version 12.0 프로그램 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) 을이용하여분석하였다. 결과및고찰 개발한모닝빵참취 70% 주정추출물과곤드레 70% 주정추출물을사용하여제조한빵의단면사진은 Fig. 1에표시하였고, 개발된빵의 70% 주정추출물의동결건조분말을모든실험에사용하였다. DPPH 라디칼소거작용 DPPH 라디칼은보라색의비교적안정적자유라디칼로서항산화활성이있는물질에의해환원되면변색이되므로시료의항산화효능을확인하기위하여사용하였다 (13). 곤드레모닝빵 70% 주정추출물 (CSB) 과참취모닝빵 70% 주정추출물 (ASB) 의항산화효과를알아보기위해 CSB, ASB 그리고일반모닝빵추출물 (NB) 의 DPPH 라디칼소거작용을알아보았다 (Fig. 2). CSB와 ASB는농도의존적으로 DPPH 라디칼소거작용을나타내었고, 둘다 NB보다높은 DPPH 라디칼소거작용을나타내었다 (Fig. 2). CSB보다는 ASB가더높은 DPPH 라디칼소거작용활성을가지고있었다. Jeon 등 (15) 의보고에서는참취 70% 에탄올추출물은농도의존적으로 DPPH 라디칼소거능을나타내었고, 0.5 mg/ml와 1 mg/ml 농도에서각각 89.3% 와 96.3% DPPH 라디칼소거능을보여주었다. 본실험에서는참취 70% 주정추출물을함유하고있는 ASB는같은농도 (0.5 mg/ml와 1 mg/ml) 에서는 36.7% 와 64.3% DPPH 라디칼소거작용을나타내었고, ASB 2 mg/ml 농도에서는 93% DPPH 라디칼소거작용을나타내었다. 따라서곤드레모닝빵과참취모닝빵은곤드레및참취가가지고있는항산화효과를그대로가지고있다는것을확인할수있었다. Yoon 등 (16) 은강력한항산화물질인안토시아닌과플라

4 832 권기한 임희경 정미자 l l l Fig. 2. DPPH radical scavenger activity of bread containing extract from Cirsium setidens (CSB) or Aster scaber (ASB). Control used bread without extract from Cirsium setidens or Aster scaber (NB). Values are mean±standard deviation (n=6). a-l Mean values with different letters above the bars are significantly different (P<0.05) according to Duncan's multiple range test. 보노이드를함유하고있는아로니아분말을첨가한식빵추출물의 DPPH 라디칼소거작용을알아보았고, Yoon 등 (17) 역시안토시아닌을함유하고있는버찌분말이첨가된식빵추출물의 DPPH 라디칼소거작용을알아본결과아로니아분말및버찌분말의항산화활성은식빵제조후에도남아있는것으로보고하여본연구와유사한경향을나타내었다. 세포생존율 CSB, ASB 그리고 NB를각각사람의신경모세포종 SK- N-SH 세포에 24시간동안처리한결과 mg/ml까지세포독성이나타나지않았다 (Fig. 3A). 따라서계속되는연구에서는 mg/ml 농도를사용하였다. CSB와 ASB를 500 μm H 2O 2 동시에처리했을때 500 μm H 2O 2 단독처리군과비교하여 mg/ml 농도에서 농도의존적으로세포생존율이증가하였으나 2 그리고 5 mg/ml CSB와 ASB 처리는 1 mg/ml CSB와 ASB 처리군과유사하거나오히려낮은세포생존율을나타내었다. 500 μm H 2O 2 단독처리군의세포생존율은 44.8% 였으나, 500 μm H 2O 2 와 1 mg/ml CSB 또는 ASB 처리에의해세포생존율은 56.1% 와 55.8% 증가하였다. 즉 1 mg/ml CSB 또는 ASB 처리에의해 25.2% 와 24.6% 세포생존율이증가하였다 (Fig. 3B). 이와같은결과는곤드레빵과참취빵섭취가산화적스트레스로부터뇌신경세포를보호할수있다는것을알수있었다. 또한뇌질환예방및개선효과를얻기위해많은양의곤드레및참취빵섭취보다는적당량의빵섭취가효과적이라는것을알수있었다. 인간신경뇌세포모델에서산화적스트레스에대항하여세포생존율을증가시키는물질들을찾고자하는연구들은 A Cell viability (%) NS Control CSB 0.1 CSB 0.5 CSB 1 CSB 2 CSB 5 ASB 0.1 ASB 0.5 ASB 1 ASB 2 ASB 5 NB 0.1 NB 0.5 NB 1 NB 2 NB 5 mg/ml B Cell viability (%). 1 a b b 60 bcde bcd bcd bc efgh efg cdef cdef i 50 i h fgh gh 40 C H2O2(H) 0.1 CSB+H 0.5 CSB+H 1 CSB+H 2 CSB+H 5 CSB+H 0.1 ASB+H 0.5 ASB+H 1 ASB+H 2 ASB+H 5 ASB+H 0.1 NB+H 0.5 NB+H 1 NB+H 2 NB+H 5 mg/ml NB+H h Fig. 3. Effect of cell viability of bread containing extract from Cirsium setidens (CSB) or Aster scaber (ASB) (A) and the protective effect of bread containing CSB or ASB on H 2O 2-induced cell death of SK-N-SH cells (B). Control used bread without extract from Cirsium setidens or Aster scaber (NB). The results are expressed as the mean±sd (n=6~12). a-i Mean values with different letters above the bars are significantly different (P<0.05) according to Duncan's multiple range test. NS: not significantly (P<0.05) by Duncan's multiple range test.

5 곤드레및참취빵의뇌신경보호 833 알츠하이머병, 파킨슨병등과같은뇌질환예방및개선을위한건강기능성식품및신약개발을위한소재발굴을위한연구의일환으로진행되어져오고있다 (2,18). Kang 등 (19) 은인지기능활성을가진생약복합물을이용하여빵을제조하였으나그빵이인지기능활성을그대로가지고있는지에대한연구는하지않았다. Lee 등 (20) 은맥문동물추출물을첨가한바게트빵을당뇨유발흰쥐에섭취시킨결과혈당개선효과가있다고보고하였고, Kim과 Cho(21) 는흰쥐에게실크펩티드첨가빵을급여시켰을때혈청콜레스테롤을감소시키고 HDL-콜레스테롤을증가시켜지질개선효과가있다고보고하였다. 따라서이들연구들 (20,21) 은질병개선효과를가진천연소재를함유한빵이소재가가진기능성을그대로가지고있다는것을보고하였다. 곤드레및참취추출물들은뇌질환효과를가지고있었고 (data not shown), 본연구결과곤드레및참취추출물을함유한빵이참취와곤드레가가진뇌질환개선기능성을그대로가지고있었으므로본연구결과는 Lee 등 (20) 그리고 Kim과 Cho(21) 의연구결과들과유사한경향을나타내었다. 세포내활성산소종 (ROS) 소거능본연구에서사람의신경모세포종 SK-N-SH 세포에 500 μm H 2O 2 를처리하였을때생성된활성산소종은대조군 (control: 0%) 과비교하여약 312% 증가하였고, mg/ml CSB와 ASB를 500 μm H 2O 2 와동시에처리하였을때농도의존적으로세포내활성산소종수준이감소하는것을확인하였으나 2 그리고 5 mg/ml CSB와 ASB 농도에서는 1 mg/ml CSB 또는 ASB 처리군과유사한 ROS 소거활성을나타내었다. CSB와 ASB 1 mg/ml 처리했을때활성산소종이각각 197% 와 204% 로 H 2O 2 단독처리에비해약 36.9% 와 34.6% 감소하였다 (Fig. 4). 따라서 H 2O 2 처리에의해발생하는세포내활성산소종의증가를 CSB와 ASB 가감소시키므로곤드레추출물이함유된곤드레모닝빵과참취추출물이함유된참취모닝빵섭취는뇌신경세포보호효과를나타낼것으로사료되고적당량의섭취가가장효과적이라는것을알수있었다. 항산화활성을가진천연소재를첨가한빵들이소재가가지고있는항산화효과를그대로가지고있다고보고된많은연구들 (16,17) 과본연구결과는유사한경향을나타내었다. Kim 등 (2) 은검정콩껍질에서분리된안토시아닌을사람의신경모세포종 SK-N-SH 세포에처리하면산화적스트레스에의해생성되는 ROS 생성을억제시켰고, 세포내 ROS 감소는산화적스트레스에의한뇌신경세포사멸을억제함으로써뇌질환개선효과가있을것이라보고하였다. 따라서본연구에서는 CSB와 ASB 처리에의해산화적스트레스을억제함으로써뇌신경세포를보호하는것으로생각된다. 뇌신경세포내 H 2O 2 에의해유도된 p38 MAPK 단백질활성화에대한곤드레빵추출물의영향곤드레빵추출물의항산화활성에대한분자생물학적기전연구를위하여산화적스트레스조건하에뇌신경세포사멸과관련하여활성화되는것으로알려져있는 p38의인산화를측정하였다 (22). SK-N-SH 세포에 500 μm H 2O 2 처리에의해 phosphop38(p-p38) MAPK(mitogen-activated protein kinase) 의단백질수준이현저하게증가하였고, 500 μm H 2O 2 와 0.5, 1 또는 2 mg/ml CSB를동시에처리했을때 500 μm H 2O 2 의단독처리군과비교하여 p-p38 MAPK 단백질수준이농도의존적으로현저하게감소하였다 (Fig. 5). 5 mg/ml CSB 처리는산화적스트레스에의해증가된 p-p38 MAPK 단백질수준억제효과가 1 mg/ml CSB 처리군과유사하였고, mg/ml NB 처리는 p-p38 MAPK 단백질수준변화에영향을미치지않았다 (Fig. 5). 다양한스트레스에의해세포내부생리학적변화로이어지기까지는여러단백질의연쇄적인상호작용이필요하다. 이를세포신호전달경로라고하는데 p38이속하는 MAPK 경로가대표적이다 (22). p38이속해있는그룹인 MAPK 신호전달계는산화적스트레스에의한인산화연쇄반응에의해활성화되어뇌신경세포를사멸하므로뇌질환유발에원인이되는것으로알려져있다 (2,23,24). 따라서 p38 인산화에의해활성화되는것을막을수있다면뇌신경세포사멸을 Intracellular ROS (% of control) a bc b 0 bc de ef ef 250 ef f ef de ef bc bc cd bc g 0 50 C H2O2(H) 0.1 CSB+H 0.5 CSB+H 1 CSB+H 2 CSB+H 5 CSB+H 0.1 ASB+H 0.5 ASB+H 1 ASB+H 2 ASB+H 5 ASB+H 0.1 NB+H 0.5 NB+H 1 NB+H 2 NB+H 5 mg/ml NB+H Fig. 4. The protective effect of bread containing extract from Cirsium setidens (CSB) or Aster scaber (ASB) on H 2O 2-induced intracellular ROS formation in SK-N-SH cells. Control used bread without extract from Cirsium setidens or Aster scaber (NB). The results are expressed as the mean±sd (n=5). a-g Mean values with different letters above the bars are significantly different (P<0.05) according to Duncan's multiple range test.

6 834 권기한 임희경 정미자 Phospho-p38 MAPK protein. (Fold increase of control) C e H2O2(H) a bcd 0.5 CSB+H 1 CSB+H cd 2 CSB+H d 5 CSB+H cd 0.5 NB+H ab 1 NB+H abc abc abc 2 NB+H 5 mg/ml NB+H Fig. 5. Effect of bread containing extract from Cirsium setidens (CSB) or Aster scaber (ASB) on H 2O 2-induced phosphorylation of p38 MAPK protein in SK-N-SH cells. The results are expressed as the mean±sd (n=5). a-e Mean values with different letters above the bars are significantly different (P<0.05) according to Duncan's multiple range test. 억제할수있을것이다. Kim 등 (2) 은안토시아닌이산화적스트레스에의해증가된 p-p38 MAPK 단백질수준을감소시키므로뇌신경세포사멸을억제하였고이는안토시아닌이뇌질환예방및개선을위해사용할수있는천연소재일가능성을제시한과학적결과라고하였다. 본연구에서도곤드레빵섭취는산화적스트레스에의해증가된 p38의인산화를억제함으로써뇌신경세포를보호하여뇌질환예방효과를나타낼것이라고추정할수있었다. 함유빵보다높았다. 외관, 색상, 향미그리고부드러움은 CS 함유빵과 AS 함유빵간에통계학적인차이가없었으나추출물이첨가되지않은빵보다유의적으로높은점수가나타났다. 종합적인기호도는추출물을첨가하지않는빵보다 CS 함유빵과 AS 함유빵이높은점수를얻었고, CS 함유빵과 AS 함유빵의종합적인기호도점수는비슷하였다. 요약 관능검사곤드레모닝빵및참취모닝빵의관능검사결과는 Table 2와같다. 쓴맛은 CS 1% 또는 AS 1% 를함유한빵이이들추출물들을함유하지않은일반모닝빵 (CS 또는 AS 0%) 보다쓴맛은높았고, CS 첨가한빵과 AS 첨가한빵과의차이는없었다. 산채향은 AS 함유빵보다 CS 함유빵이더강하였고, 떫은맛은 AS 함유빵이 CS 함유빵보다더심했다. 이취는 CS 함유빵과이들추출물을함유하지않은빵이통계학적으로유의적차이가없었으나 AS 함유빵은 CS Table 2. Sensory evaluation of bread containing extract from Cirsium setidens (CS) or Aster scaber (AS) Bread containing extract from CS or AS CS 1% AS 1% CS or AS 0% Bitterness Wild vegetable flavor Astringency Off-flavor 1.8±0.2 b1) 3.7±0.5 c 1.7±0.1 b 1.8±0.2 a 1.8±0.2 b 3.2±0.5 b 1.9±0.2 c 2.0±0.3 b The above items: score 1 (none) 5 (extreme) Appearance Color Flavor Softness Overall acceptability 3.9±0.5 b 4.1±0.6 b 3.8±0.5 b 3.8±0.5 b 4.1±0.6 b 3.9±0.6 b 4.1±0.7 b 3.6±0.5 b 3.8±0.5 b 4.0±0.6 b 1.5±0.1 a 1.1±0.1 a 1.5±0.1 a 1.7±0.1 a 3.5±0.5 a 3.5±0.5 a 3.0±0.4 a 3.2±0.4 a 3.1±0.4 a The above items: score 1 (very dislike) 5 (very like) Values are mean±standard deviation (n=50). 1) Means with different superscripts in the same row are significantly different (P<0.05) according to Duncan's multiple range test. 본연구는 H 2O 2 에의해유도된사람뇌신경모세포종 SK- N-SH의사멸에대항하여곤드레및참취추출물 (CS와 AS) 을함유한빵의뇌신경세포보호작용에대한것이다. 곤드레추출물을함유한곤드레빵추출물 (CSB) 또는참취추출물을함유한참취빵추출물 (ASB) 을 SK-N-SH에처리하면 H 2O 2 에의해유발된세포독성이추출물처리에의해감소되었고세포내활성산소종과 p-p38 수준이감소하였다. 관능검사에서 CS를함유한곤드레빵, AS를함유한참취빵그리고 CS 또는 AS를함유하지않은일반빵을비교한결과, 외관, 색상, 향미, 부드러움그리고종합적인기호도에대해 CSB와 ASB는 NB보다높은점수를받았으나 CSB와 ASB 와는차이가없었다. 이결과들은뇌신경세포에서항산화효과와 p38 인산화억제에의해산화적스트레스에대항하여뇌신경보호효과를나타내는 CSB와 ASB의건강유익성을보여주었다. 따라서 CS와 AS는건강기능성소재로활용될수있을것이다. 감사의글 이논문은 2013년도정부 ( 교육과학기술부 ) 의재원으로한국연구재단의지원을받아수행된기초연구사업 (No. NRF- 2013R1A1A4A013550) 이다. REFERENCES 1. Smith MA, Richey Harris PL, Sayre LM, Beckman JS, Perry G Widespread peroxynitrite-mediated damage in Alzheimer's disease. J Neurosci 17:

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Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No μ μ

Journal of Life Science 2011 Vol. 21. No. 8. 1120~1126 ISSN : 1225-9918 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2011.21.8.1120 μ μ μ α β Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No. 8 1121 μ μ 1122 생명과학회지 2011,