발간등록번호 11-1543000-001029-01 콜레스테롤대사와경화성혈관질환퇴치를위한차즈기이용기술개발에관한연구 (Technical development with a Perilla frutescens Britton var. acuta Kudo targeting adverse cholesterol metabolism and atherosclerotic diseases) 한림대학교 농림축산식품부

요약문 Ⅰ. 제목 : 콜레스테롤대사와경화성혈관질환퇴치를위한차즈기이용기술개발에관한연구 Ⅱ. 연구성과목표대비실적 ( 단위 : 건수 ) 1 1 1 2 2 1 2 1 1 1 2 1 3 1 시제품 2 1 1 3 1 6 3 3 1 4 2 시제품완성 Ⅲ. 연구개발의목표 -선행연구로진행한꿀풀과의식물인차즈기 (Perilla frutescens Britton var. acuta Kudo) 를선도소재로하여콜레스테롤대사와관련경화성혈관질환에대한예방및치료를위한기능성식품소재로서의가능성을타진하고기전적인역할을규명하여건강기능성식품으로개발하고자함. -따라서본연구에서는 1) 콜레스테롤의유출기전을촉진하는차즈기의유효성분의기전적탐색, 2) 콜레스테롤유출과관련한활성물질에대한안정적인추출및분리법을확보하여유효성분의구조를규명, 3) 탐색된유효성분을바탕으로 in vitro와 in vivo에서연구를통한콜레스테롤생합성및조절기전의효능을규명하여, 차즈기소재의경화성혈관질환의예방과치료에대한효능극대화및건강기능식품소재로의활용가능성을평가 입증함. -궁극적으로는국산품종의차즈기품종개량및건강기능식품소재의개발및이를활용하여유통가능한차즈기추출물이첨가된일반식품개발및다양한상품화를

추진하고자함. Ⅳ. 연구개발내용및범위 1. 고콜레스테롤혈증으로인한경화성혈관질환개선을위한차즈기소재개발 ( 제 1 세부 - 한림대학교, 강영희 ) 1) 대식세포를이용한 in vitro 실험에서콜레스테롤이축적된거품세포에서콜레스테롤유출과관련한바이오마커인 ABCA1 활성과거품세포의형성지연및억제하는차즈기유효성분탐색 2) 유출된콜레스테롤이 apoa-1과결합하여 HDL으로의형성 전환에대한관련기전적인역할규명 3) 동맥경화증의대표적인동물모델인 apoe 유전자결여마우스를사용하여차즈기소재를이용한경화성혈관질환치료와예방에대한 in vivo 기전적인효능검증 2. 차즈기소재의콜레스테롤생합성및흡수저해활성평가 ( 제 2 세부 - 한림대학교, 이재용 ) 1) in vitro 실험으로차즈기소재의장내피세포에서콜레스테롤흡수및합성저해능확인과관련기전적인역할규명 2) 고콜레스테롤식이를제공한실험동물에서콜레스테롤수치의개선과간조직에서콜레스테롤합성효소인 HMG-CoA reductase와 ACAT의효소활성저해능확인과기전적인효능검증 3) 콜레스테롤개선효능을바탕으로건강기능식품소재로의개발가능성부여 3. 제품의표준화, 기준규격설정및안정성평가및차즈기소재의추출물및분획물의 유기화학적인분석및유효성분의구조규명 ( 협동세부 - 다하누, 이세원 ) 1) 원료의구성성분 Pattern 분석 ( 산화 LDL 로유도된거품세포의형성을감소시키는 Hexane 분획물의 Pattern 확인 ) 2) 차즈기의추출물로부터콜레스테롤의유출기전을촉진하는지표물질추적및분리 - 각세부과제들과긴밀히연계하여 active-principle 에의거한활성성분추적및분리 -HPLC, biotage, Silica gel 등의칼럼크로마토그래피로분리정제한후 NMR( 1 H, 13 C-NMR, COSY, DEPT, HMQC 및 HMBC) 을이용하여활성물질의정확한구조규명 3) 활성분획물 (Hexane) 의대량추출법확립 -RSM ( 반응표면분석 ) 을활용한최적추출조건확립 (Sonication, 침출, Reflux 추출조건의시간, 용매, 수율배합비율확인 ) - 각세부과제에시료제공 4) 제품의표준화연구

- 유통기한평가 - 관능평가 Ⅴ. 연구개발결과 1. 제 1 세부 : 고콜레스테롤혈증으로인한경화성혈관질환개선을위한차즈기소재개발 1) 선행연구로서의배암차즈기추출물의산화 LDL 유입및유출에대한효과와유출된콜레스테롤의 HDL로전환과정에서의과정확인 2) 중국산차즈기의 MeOH 추출물에서 hexane 분획물의효능을거품세포의형성및콜레스테롤유출정도를통해효능확인 3) 중국산차즈기의 MeOH 추출물에서 hexane 분획물의효능을콜레스테롤유출을유도하는다양한 transcription factor와연관성을통해확인 4) hexane 분획물에서콜레스테롤유출에효능을가지는단일유효성분인 α-asarone 스크리닝 5) 중국산차즈기의 MeOH 추출물에서 hexane 분획물의효능을소포체스트레스를통해확인 6) 중국산차즈기의 MeOH 추출물에서 hexane 분획물의효능을소포체스트레스로매개되는세포사멸억제효능확인 7) hexane 분획물에서분리한단일유효성분인 α-asarone의효능을소포체스트레스로매개되는세포사멸억제효능확인 8) hexane 분획물에서분리한단일유효성분인 α-asarone의효능을대식세포 autophagy를통해확인 9) 중국산차즈기의 hexane 분획물이외의 methyl chloride 분획물에서소포체스트레스에대한효능확인 10) 차즈기추출물과 α-asarone의 apoe KO mouse에서혈청지질성분의조절및 RCT 관련바이오마커를통한효능확인 2. 제 2 세부 : 차즈기소재의콜레스테롤생합성및흡수저해활성평가 1) 중국산차즈기 MeOH 추출물의장내피세포 (CaCo-2) 에서콜레스테롤흡수저해효능확인 2) 중국산차즈기추출물에서 ethyl acetate와 methyl chloride 분획물에서의콜레스테롤흡수저해효능확인 3) 중국산차즈기추출물에서 ethyl acetate 분획물에서 HMG-CoA reductase의활성억제효능확인 3. 협동세부 : 제품의표준화, 기준규격설정및안정성평가및차즈기소재의추출물및 분획물의유기화학적인분석및유효성분의구조규명 1) 차즈기의추출방법및 TLC 와 HPLC 로의유효성분분포확인

2) 차즈기추출물의 hexane 분획물에서 MS와 biotage를통한유효성분분리방법확인 3) 차즈기추출물의 ethyl acetate 분획물에서 NMR을이용한유효성분의분리및구조확인 4) 차즈기추출물의 water 분획물에서 MS와 Diaion HP-20을이용한분석방법확인 5) 차즈기추출물의 hexane 분획물에서 NMR을통한단일유효성분 (α-asarone) 분석및구조규명 6) 활성추출분획물의대량추출법을 sonication과침출, reflux, RSM을통해확립 7) 차즈기추출물의기능성분표준화와지표성분의설정 8) 차즈기의건강기능식품개발추진및제품화공정개발 9) 차즈기추출물의 methyl chloride 분획물에서소포체스트레스에효능을가지는유효성분분리를위한 NMR 작업표준화 10) 제품의안정성평가를가속시험으로확인및다양한제형으로제품화선호도확인 11) 관능평가의결과를토대로차즈기와수국차의혼합차제형으로의개발 Ⅵ. 연구성과및성과활용계획 1. 연구개발성과 1) 논문 Park et al., Sage weed (Salvia plebeia) extract antagonizes foam cell formation and promotes cholesterol efflux in murine macrophages, 2012, Int J Mol Med, 30(5): 1105-1112. Paek et al., Rapid identification of aldose reductase inhibitory compounds from Perilla frutescens, 2013, Biomed Res Int, 2013: 679463. Park et al., Purple perilla extracts allay ER stress in lipid-laden macrophages, 2014, PLoS One, 9(10): e110581. Park et al., Purple perilla extracts with α-asarone enhance cholesterol efflux from oxidized LDL-exposed macrophages, 2015, Int J Mol Med, 35(4):957-965. 2) 특허 출원번호 : 10-2013-0007899, 차즈기차, 이의제조방법, 차즈기차추출물을포함하는음료조성물, 및이의제조방법. 등록번호 : 10-1470993, 차즈기차, 이의제조방법, 차즈기차추출물을포함하는음료조성물, 및이의제조방법. 출원번호 : 10-2015-0077595, 차즈기추출물을포함하는콜레스테롤대사관련혈관질환개선용식품조성물및이의제조방법. 출원번호 : 10-2015-0129495, 차즈기추출물또는알파-아사론을함유하는죽상동맥경화증개선용식품조성물및치료용약학조성물

2. 현재진행중인연구성과 1) 논문 Antioxidant activity and optimization of condition for extraction of a HPLC method for the analysis of α-asarone from Perilla frutescens' 논문을최종교정중에있으며교정완료후 International Journal of Food Science and Technology 저널에게재예정 Dietary compound α-asarone alleviates ER stress-mediated apoptosis in 7β-hydroxycholesterol-challenged macrophages 투고 (Molecular Nutrition & Food Research) 되어 revision 중에있음. Cholesterol-lowering effect of polyphenols from Perilla Frutescens in hypercholesterolemia rat induced by high cholesterol diet 투고 (Food Research International) 되어심사중에있음. Ultrafiltration liquid chromatography for screening and isolating potential xanthine oxidase inhibitors from Perilla frutescens' 논문을작성중에있으며마무리단계에있어 2015년 12월내에투고할계획임. 'Free-radical scavenging properties and antioxidant activities of Perilla frutescens' 논문을 data 확보중에있으며데이터확보후논문을완성하여 2015년 12월내에투고할계획임. α-asarone prevents advanced atherosclerosis by promoting autophagy in oxysterol-laden macrophages 의 data 확보를마무리하여 2015년 12월내에투고할계획임. 2) 특허 항산화활성이우수한차즈기및수국잎의비율별제조방법과이를유효성분으로하는차즈기-수국티백및기능성음료제조방법 에대한특허를진행중에있으며수일내에특허출원을할계획임. 현재진행중인차즈기추출물의 MC fraction에대한효능의 data를수집하여 차즈기추출물의 MC 세부 fraction의혈관강화용기능성조성물 에대한내용으로 2015년 12월에출원할계획임. 혈중콜레스테롤감소활성이우수한차즈기유래천연물 출원준비중 3) 기술이전 차즈기차, 이의제조방법, 차즈기차추출물을포함하는음료조성물및이의제조방법 에대한

전용실시권기술이전계획 항산화활성이우수한차즈기및수국잎의비율별제조방법과이를유효성분으로하는 차즈기 - 수국티백및기능성음료제조방법 에대한전용실시권기술이전계획 3. 연구성과활용계획 1) 본과제에서획득한콜레스테롤대사조절과경화성혈관질환의퇴치에효능을가진 차즈기소재추출물및유효성분을이용하여농가소득상승가치의소재로써고소득 작물로서의활용을적극추진 2) 차즈기소재의경화성혈관질환예방과치료에대한검증된효능을홍보하여새로운 건강기능식품의원료로상품화를위한기술이전노력 3) 효능극대화의기술적인배경과과학적인효능을규명하여발표한특허및논문등의확보된지식재산권을이용하여건강기능식품의상품화 4) 사용된연구개발기술을기반으로다른천연물로부터의동맥경화성억제효능을갖는기능적소재를지속적으로개발하는데적극적으로활용 시제품

SUMMARY ( 영문요약문 ) This research project attempted to develop health-related functional foods by sounding and revealing possible mechanistic roles of the Labiatae Perilla frutescens Britton var. acuta Kudo as a functional food material in the prevention and treatment of cholesterol metabolism and vascular sclerosis-associated diseases based on previous research results. The research aim of the project was as follow: 1) mechanistic investigation of effective compounds of Perilla frutescens promoting cholestrol efflux, 2) consistent extraction and separation of active compounds influencing cholesterol efflux and close examination of chemical structures of effective compounds, and 3) evaluation and proof of the effectiveness in the prevention and treatment of sclerosis-associated vascular diseases and the application possibility as health-functional foods of Perilla frutescens by exploring cholesterol biosynthesis and regulatory mechanisms of active compounds of Perilla frutescens via in vitro and in vivo experiments. Ultimately, this project presented a fine target for developing general foods and a variety of commercial goods and products supplemented with edible perilla extracts by improving domestic variety and better food materials of perilla. This research project consisted of 3 separate detailed themes: 1)development of perilla meterials for the improvement of sclerosis-related vascular diseases due to hypercholesterolemia, 2) evaluation of inhibitory activity of cholesterol biosynthesis and absorption by perilla materilas, and 3) perilla product standardization, establishment of standard sizes, safety evaluation, organic chemical analysis of extracts and fractions of perilla materials and examination of chemical structure of its effective compounds. There were several research outcomes worked out. To date 4 SCI papers were published, 3 different patents applied (1 patent registered and 3 patents pending) and a pilot product produced. This project will publish 5 more SCI papers and 2 more patents within the year of 2015. Based on the good results from these papers and patents this project will provide various follow-up applications and expectations: 1) introduction of perilla extracts and effective compounds targeting cholesterol metabolism and preventing against sclerotic vascular diseases as large earnings-farm products, 2) technical transfer trial for the commercial goods of new functional food materials through advertising benefits of the perilla extracts and effective compounds targeting cholesterol metabolism and preventing against sclerotic vascular diseases, 3) manufacturing expedition of commercial products of health-functional foods by employing secured intellectual properties including publications and patents revealing scientific efficacy and technical background of perilla compounds, and 4) positive application of research technologies and skills used in this project in continuous developments of other functional natural materials inhibiting atherosclerosis.

Chapter. 1 Research overview and aim of product 12 Chapter. 2 The present state of technical development 14 Chapter. 3 The results of research product 20 Chapter. 4 The attainment of goals and contributiveness to related area 110 Chapter. 5 The products of research development and plan of product application 115 Chapter. 6 The overseas scientific technical information 118 Chapter. 7 The present state of research installation and machines 119 Chapter. 8 The fulfillment product of laboratory safety management 120 Chapter. 9 References 121 <Atteched> Report of patents research papers and market analysis

제 1 장연구개발과제의개요및성과목표 12 제 2 장국내외기술개발현황 14 제 3 장연구개발수행내용및결과 20 제 4 장목표달성도및관련분야에의기여도 110 제 5 장연구개발성과및성과활용계획 115 제 6 장연구개발과정에서수집한해외과학기술정보 118 제 7 장연구시설 장비현황 119 제 8 장연구실안전관리이행실적 120 제 9 장참고문헌 121 < 첨부 > 특허, 논문및시장분석보고서

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구분 대 대 대 대 대 대이상 년 - 14 -

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α α α α μ α α μ α α α γ γ γ γ μ γ γ - 27 -

α α α α α μ μ α α - 28 -

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α α β α μ β μ α α α α β μ α α - 34 -

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δ δ δ δ λ λ δ δ δ δ λ δ δ δ δ δ δ δ δ δ δ δ δ λ - 54 -

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α 제조공정 수율 (%) Lot1 Lot2 Lot3 차즈기열수추출물 (200g X 4L) ( 온도 100, 추출시간 2 시간 ) 10.13 11.51 10.91 제조공정 원물 (mg/g dry weight) Total phenol 함량 Lot1 Lot2 Lot3 131.26(mg/g) 차즈기파우치추출액 (5brix) 63.63 67.66 66.03-77 -

(200g X 4L) ( 온도 100, 추출시간 2시간열수추출 ) (mg/ml) 제조공정원물 (mg/g dry weight) 차즈기제품화티백 (1.5g) (100ml, 열수추출 ) ( 온도 100, 추출시간 3분 ) (mg/ml) Total phenol 함량 Lot1 Lot2 Lot3 131.26(mg/g) 193.89 196.24 190.27 α α 제조공정 α-asarone 함량 Lot1 Lot2 Lot3 원물 (mg/g dry weight) 8.03 추출물 (mg/ml) 19.47 19.74 20.20 농축물 (60brix) (mg/ml) 97.40 95.55 94.64 동결건조물 (mg/g extract) 47.84 44.70 46.24-78 -

α α - 79 -

α α Independent variable Symbol Coded level -2-1 0 1 2 Temperature( ) X1 50 60 70 80 90 Liquid to raw material ratio(mg:g) X2 33:1 43:1 53:1 63:1 73:1 Ethanol concentration(%) X3 0 10 20 30 40 No. X1 X2 X3 Total extraction TPC DPPH Yield(%) (mg/g) ( 억제율, %) 1 60(-1) 43:1(-1) 10(-1) 19.50 86.56 31.38 2 60(-1) 43:1(-1) 30(+1) 16.76 93.30 27.11 3 60(-1) 63:1(+1) 10(-1) 19.51 82.99 21.99 4 60(-1) 63:1(+1) 30(+1) 18.34 94.08 33.00 5 80(+1) 43:1(-1) 10(-1) 21.46 94.76 39.83 6 80(+1) 43:1(-1) 30(+1) 20.88 99.86 36.89 7 80(+1) 63:1(+1) 10(-1) 22.09 93.93 38.50 8 80(+1) 63:1(+1) 30(+1) 23.26 94.68 31.19 9 50(-2) 53:1(0) 20(0) 17.41 87.35 39.73 10 90(+2) 53:1(0) 20(0) 22.85 92.54 33.47 11 70(0) 33:1(-2) 20(0) 20.30 94.76 35.65 12 70(0) 73:1(+2) 20(0) 21.02 88.55 40.87 13 70(0) 53:1(0) 0(-2) 22.25 80.49 28.06 14 70(0) 53:1(0) 40(+2) 14.86 99.58 21.99 15 70(0) 53:1(0) 20(0) 17.46 98.96 49.32 16 70(0) 53:1(0) 20(0) 17.88 98.52 58.24 17 70(0) 53:1(0) 20(0) 17.55 106.60 66.12-80 -

R-Square Stationary point X1 (Temperature, ) Maximum Response X2 (sample-solvent ratio, mg/g) X3 (Ethanol concentration, %) 수율 0.8911 saddle point 87.06 31.68 21.34 DPPH 억제율 TPC (mg/g) 0.7684 saddle point 84.73 41.47 12.92 0.8013 maximum 78.77 19.80 31.99 Predict value Experimental value 수율 (%) 24.969 22.686 DPPH 억제율 (%) 38.13 78.11 TPC(mg/g) 99.21 131.26-81 -

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Fraction Concentration(mgmL -1 ) Inhibition (%) IC 50 (mgml -1 ) Total Hex. MC. EtOAc BuOH Water Allopurinol 0.2 42.79 0.05 11.86 0.01 0.00 0.2 24.31 0.05 10.01 0.01 0.00 0.2 18.23 0.05 3.96 0.01 0.00 0.2 100.58 0.05 45.07 0.01 8.78 0.2 41.13 0.05 17.78 0.01 2.15 0.2 2.20 0.05 0.00 0.01 0.72 0.05 76.42 0.01 57.46 - - - 0.04 - - 0.004 (Reference) - 83 -

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β μ μ μ α α 농도 (mg/ml) Final concentration (ug/ml) quercetin 750nm 차즈기 80% Methanol α-asarone 10 1176.471 2.257 2.164 5 588.2353 2.446 2.225 2.009 1 117.6471 2.314 0.74 1.073 0.5 58.8235 2.009 0.493 0.649 0.1 11.7647 0.522 0.151 0.121 0.05 5.8823 0.375 0.1 0.071 0.01 1.1764 0.109 0.046 0.044 α - 85 -

α control positive control (BHT 1mM) HEX 층 (10mg/ml) MC 층 (10mg/ml) EA 층 (10mg/ml) BuOH 층 (10mg/ml) Water 층 (10mg/ml) 0day 4.64 6.88 7.22 6.24 5.71 7.85 4.09 1day 4.79 2.47 3.48 8.64 7.03 9.34 7.02 3day 7.22 6.56 6.32 8.54 7.17 9.46 6.01 5day 7.41 6.87 6.63 8.83 8.44 9.62 7.12 7day 7.41 6.87 7.24 8.83 8.44 9.62 7.12 14day 7.77 3.25 8.58 8.67 8.31 9.64 4.39-86 -

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μ - 89 -

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α Sample (mg) cellulose brix 녹은캡슐의비율 (%) 200 50 8 43.08±1.87 200 75 8 42.39±1.20 200 100 8 33.38±2.22 400 50 8 50.35±1.23 400 75 8 46.29±0.89 400 100 8 40.88±0.54-102 -

성명 알레르기유무 ( 보유알레르기 ) 연령만세성별남 / 여 매우싫다 (1) 싫다 (2) 보통이다 (3) 좋다 (4) 매우좋다 (5) 매우싫다 (1) 싫다 (2) 보통이다 (3) 좋다 (4) 매우좋다 (5) 매우싫다 (1) 싫다 (2) 보통이다 (3) 좋다 (4) 매우좋다 (5) - 103 -

차즈기 : 수국 1차 2차 3차 평균 억제율 (%) 0:10 0.675 0.637 0.653 0.655±0.005 57.03946 1:9 0.989 0.979 0.968 0.979±0.028 34.36843 2:8 0.914 0.91 0.905 0.910±0.009 39.20149 3:7 0.863 0.875 0.848 0.862±0.011 42.54028 4:6 0.572 0.577 0.564 0.571±0.008 62.92318 5:5 0.782 0.781 0.788 0.784±0.014 48.02708 6:4 0.795 0.766 0.777 0.779±0.004 48.33061 7:3 0.775 0.771 0.773 0.773±0.009 48.77422 8:2 0.954 0.95 0.958 0.954±0.012 36.09619 9:1 1.15 1.151 1.151 1.151±0.016 22.3208 10:0 1.089 1.071 1.098 1.086±0.009 26.85034-104 -

- 105 -

⓵ ⓶ ⓷ ⓵ - 106 -

⓶ ⓷ ⓸ - 107 -

α - 108 -

고급형 상자 안에 대용량 티백 형식으로 들어있는 차즈기차 시제품을 제작하였다. 티백 당 중량은 10g으로 이루어져있으며 기존 가정에서 식수로 이용하는 보리차 대용의 제품이 될 수 있을 것으로 예상하였다. - 109 -

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β α - 112 -

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α α β - 114 -

1) 논문 Park et al., Sage weed (Salvia plebeia) extract antagonizes foam cell formation and promotes cholesterol efflux in murine macrophages, 2012, Int J Mol Med, 30(5): 1105-1112. Paek et al., Rapid identification of aldose reductase inhibitory compounds from Perilla frutescens, 2013, Biomed Res Int, 2013: 679463. Park et al., Purple perilla extracts allay ER stress in lipid-laden macrophages, 2014, PLoS One, 9(10): e110581. Park et al., Purple perilla extracts with α-asarone enhance cholesterol efflux from oxidized LDL-exposed macrophages, 2015, Int J Mol Med, 35(4):957-965. 2) 특허 출원번호 : 10-2013-0007899, 차즈기차, 이의제조방법, 차즈기차추출물을포함하는음료조성물, 및이의제조방법. 등록번호 : 10-1470993, 차즈기차, 이의제조방법, 차즈기차추출물을포함하는음료조성물, 및이의제조방법. 출원번호 : 10-2015-0077595, 차즈기추출물을포함하는콜레스테롤대사관련혈관질환개선용식품조성물및이의제조방법. 출원번호 : 10-2015-0129495, 차즈기추출물또는알파-아사론을함유하는죽상동맥경화증개선용식품조성물및치료용약학조성물 - 115 -

1) 논문 Antioxidant activity and optimization of condition for extraction of a HPLC method for the analysis of α-asarone from Perilla frutescens' 논문을최종교정중에있으며교정완료후 International Journal of Food Science and Technology 저널에게재예정 Dietary compound α-asarone alleviates ER stress-mediated apoptosis in 7β-hydroxycholesterol-challenged macrophages 투고 (Molecular Nutrition & Food Research) 되어 revision 중에있음. Cholesterol-lowering effect of polyphenols from Perilla Frutescens in hypercholesterolemia rat induced by high cholesterol diet 투고 (Food Research International) 되어심사중에있음. Ultrafiltration liquid chromatography for screening and isolating potential xanthine oxidase inhibitors from Perilla frutescens' 논문을작성중에있으며마무리단계에있어 - 116 -

2015년 12월내에투고할계획임. 'Free-radical scavenging properties and antioxidant activities of Perilla frutescens' 논문을 data 확보중에있으며데이터확보후논문을완성하여 2015년 12월내에투고할계획임. α-asarone prevents advanced atherosclerosis by promoting autophagy in oxysterol-laden macrophages 의 data 확보를마무리하여 2015년 12월내에투고할계획임. 2) 특허 항산화활성이우수한차즈기및수국잎의비율별제조방법과이를유효성분으로하는차즈기-수국티백및기능성음료제조방법 에대한특허를진행중에있으며수일내에특허출원을할계획임. 현재진행중인차즈기추출물의 MC fraction에대한효능의 data를수집하여 차즈기추출물의 MC 세부 fraction의혈관강화용기능성조성물 에대한내용으로 2015년 12월에출원할계획임. 혈중콜레스테롤감소활성이우수한차즈기유래천연물 출원준비중 3) 기술이전 차즈기차, 이의제조방법, 차즈기차추출물을포함하는음료조성물및이의제조방법 에대한전용실시권기술이전계획 항산화활성이우수한차즈기및수국잎의비율별제조방법과이를유효성분으로하는차즈기-수국티백및기능성음료제조방법 에대한전용실시권기술이전계획 3. 연구성과활용계획 1) 본과제에서획득한콜레스테롤대사조절과경화성혈관질환의퇴치에효능을가진 차즈기소재추출물및유효성분을이용하여농가소득상승가치의소재로써고소득 작물로서의활용을적극추진 2) 차즈기소재의경화성혈관질환예방과치료에대한검증된효능을홍보하여새로운 건강기능식품의원료로상품화를위한기술이전노력 3) 효능극대화의기술적인배경과과학적인효능을규명하여발표한특허및논문등의확보된지식재산권을이용하여건강기능식품의상품화 4) 사용된연구개발기술을기반으로다른천연물로부터의동맥경화성억제효능을갖는기능적소재를지속적으로개발하는데적극적으로활용 시제품 - 117 -

α - 118 -

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신청과제명 콜레스테롤대사와경화성혈관질환퇴치를위한차즈기이용기술개발 주관연구책임자강영희주관기관한림대학교 개발기술명 고콜레스테롤혈증개선치료제 관련기술최고보유국 현재기술수준우리나라연구신청팀 미국 죽상동맥경화증치료제미국 차즈기이용제품개발일본 비고 대상국가특허 검색기간검색범위 국내 국외 미국 일본 유럽 특허정보원 최근 년간제목및초록 개발기술명 기술 기술 검색건수 유효특허건수 핵심특허및관련성 특허명 울금및연잎조합추출물을유효성분으로함유하는고콜레스테롤혈증또는비만의개선및치료용조성물 자소엽추출물을포함하는뇌신경질환예방또는치료용의약조성물 - 122 -

보유국 대한민국 대한민국 등록년도 관련성 고콜레스테롤혈증을개선할수있는차즈기 자소업 추출물과유효성분을 유사점 차이점 울금및연잎조합추출물 고콜레스테롤혈증과연관된다양한질환중죽상동맥경화증이아니라비만을개선할수있는점 통한생리활성효능입증평가 차즈기추출물로혈관강화용이아닌뇌신경질환예방용의조성물로서연구를하였고 분리한유효성분이벤조나프토티오펜으로알파 아사론과다름 대상국가논문 검색기간검색범위 미국 일본 유럽 국회도서관 최근 년간제목 초록및키워드 개발기술명 기술 기술 핵심논문 및관련성 검색건수 유효논문건수 논문명 학술지명 저 자 게재년도 관련성 유사점 차이점 천연물유래추출물을사용한고콜레스테롤혈증으로인한죽상동맥경화증의완화효과를확인 차즈기추출물이아닌 의추출물을사용하였고 차즈기추출물을사용하여물질을분리및구조를규명하는방법으로 와 을사용함항산화효능을가지는분리물질을스크리닝함으로써 를분리함 - 123 -

토끼를사용하여효능을확인함 - 124 -

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주 의 1. 이보고서는농림축산식품부에서시행한고부가가치식품기 술개발사업의연구보고서입니다. 2. 이보고서내용을발표할때에는반드시농림축산식품부에 서시행한고부가가치식품기술개발사업의연구결과임을밝 혀야합니다. 3. 국가과학기술기밀유지에필요한내용은대외적으로발표또 는공개하여서는아니됩니다.