Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society Vol. 18, No. 1 pp. 194-201, 2017 https://doi.org/10.5762/kais.2017.18.1.194 ISSN 1975-4701 / eissn 2288-4688 김기현 1, 김광식 1, 김두완 1, 사수진 2, 김영화 1* 1 농촌진흥청국립축산과학원, 2 농촌진흥청기술협력국 Evaluation of valid time for analysis of complete blood cell in pig blood using the Hemavet 950FS Ki-Hyun Kim 1, Kwang-Sik Kim 1, Doo-Wan Kim 1, Soo-Jin Sa 2, Young-Hwa Kim 1* 1 National Institute of Animal Science, Rural Development Administration 2 Technology Cooperation Bureau, Rural Development Administration 요약본연구는자동혈구분석기 Hemavet 950FS를이용한돼지혈액내혈구분석의유효성을검증하고, 정확한분석을위한유효시간을결정하기위하여실시하였다. 분석시료는체중 60 kg (±3.5) 의 Duroc 종 34두로부터채취하였으며, 이들중에서분석치가정상범위를벗어나거나용혈이발견된시료는연구에서제외하고최종적으로 10개의시료를본연구에이용하였다. 임의의하나의시료에대해 10회연속분석을통하여일내변동을조사한결과, leukocytes계혈구들중에서백혈구, 호중구, 림프구에서는낮은일내변동으로분석의유효성이인정되었으나, 단핵구, 호산구, 호염구에있어서는큰변동을나타내었다. 이와반면에 erythrocytes 및 thrombocytes계혈구들의모든지표들은안정적인일내변동이관찰되었다. 채혈후시간경과에따른혈구변화를분석한결과 leukocytes계혈구및 thrombocytes 계혈구는시간경과에따라검출농도가유의적으로감소되는것으로관찰되었다. 반면, erythrocytes계혈구들은채혈후 120시간까지는안정적으로분석이가능한것으로나타났다. 본연구의결과를종합하면, Hemavet 950FS는돼지의혈액내에서단핵구, 호산구, 호염구를제외하고일반혈구분석에유용한것으로판단된다. 또한, leukocytes 및 thrombocytes 계혈구들에대한정확한분석을위해서는채혈후 4시간이내에분석이이루어져야하며, erythrocytes계혈구들은채혈후 120시간까지는안정적으로검출이가능한것으로사료된다. Abstract This study was conducted to determine the valid time for accurate detection of complete blood cell count (CBC) in pig blood using an automatic blood corpuscle analyzer (Hemavet 950FS). Blood samples were collected from 34 pigs (Duroc) with a 60 kg (±3.5) body weight. Ten specimens with CBC parameters in normal range and with no hemolysis were selected among 34 samples and used in this study. Regarding leukocytes parameters, white blood cell (WBC), neutrophil (NE), and lymphocyte (LY) counts showed a low daily variation (coefficient of variation, CV), whereas monocyte (MO), eosinophil (EO), and basophil (BA) CVs were significantly high (19.7, 56.9, and 53.3%, respectively). On the other hand, all parameters of erythrocytes and thrombocytes showed stable daily variation. All parameters of leukocytes and thrombocytes were significantly reduced as storage time passed (P<0.01 or 0.001), except for lymphocytes (P=0.535). However, no significant differences were observed in parameters of erythrocytes from blood up to 120 hours. From above results, we assert that Hemavet 950FS is useful in analyzing CBC, except for MO, EO, and BA. For accurate detection of leukocyte and thrombocyte parameters, analysis should be performed within 4 hours after blood collection when using Hemavet 950FS. On the other hand, parameters of erythrocytes could be stably detected for at least 120 hours after blood collection. Keywords : Blood corpuscle analyzer, Erythrocytes, Leukocytes, Pig, Thrombocytes 본논문은농촌진흥청공동연구사업의지원에의해이루어진것임. * Corresponding Author : Young-Hwa Kim (National Institute of Animal Science) Tel: +82-41-580-3446 email: yhkms@korea.kr Received September 1, 2016 Accepted January 6, 2017 Revised September 9, 2016 Published January 31, 2017 194
1. 서론동물체내에서혈액은혈관을통해온몸을돌면서산소와영양소등을공급하고, 노폐물을운반하여신장을통해배설될수있도록하며, 그외에내분비기관에서분비되는호르몬의운반, 외부의병원체에대한방어및체온조절등다양한기능을담당한다. 또한, 혈액내에는혈구와각종체대대사물질들이함유되어있기때문에인간의건강진단차원에서개인의건강상태를판정하는중요한지표가되고있으며 [1,2], 이와같은이유로혈액은가축에있어서도생리학적, 면역학적, 영양학적상태, 질병등을조사하는데가장널리사용되는생체시료이다 [3,4]. 실험동물로써돼지를사용하는경우에있어서혈액학적및생화학적데이터의기초평가로써혈구분석의필요성이최근에더욱강조되고있는실정이다 [5]. 돼지혈액의경우, 축사현장에서시료를채취해야하는현실적인제약과분석실까지이동하는데에소요되는시간적인문제때문에채혈직후시료를분석하는것은사실상불가능하다. 연구소유래시료부터농장유래시료에이르기까지시료에따라분석이개시되는데까지소요되는시간은적게는수분이내에서많게는 2일정도까지소요되는경우가빈번히발생한다. 혈액내의혈구에대한지표들로써는백혈구 (leukocytes) 계혈구, 적혈구 (erythrocytes) 계혈구및혈소판 (thrombocytes) 계혈구에대한항목들로분류된다. 이들혈구는동물의품종, 나이, 성별, 배란, 임신, 발정등의생리적인상태뿐만아니라식이, 시료채취시간, 환경온도, 스트레스등외인적인요소에의해서도영향을받는것으로알려져있다 [6-10]. 이들혈구의경우채혈후저장기간에따라서도영향을받는데, 채혈후의시간경과에따라서막의온전성이감소되며, 용혈과미극립자등이형성되어혈중농도가변하게된다 [11-15]. 이러한변화는채혈후혈액보관온도에따라서도다르게관찰되는데, 이와같은원인들에의해채혈후시간경과에따른분석결과의오차가발생하며, 정확성과신뢰도가저하된다. 따라서혈액시료채취후시간경과에따른혈구분석결과의변이를탐색하여정확한검출이가능한최소시간을설정할필요성이있다. 최근에는혈액내의혈구를분석하기위한다양한자동혈구분석기들이개발보급되어있는데, 각장비들만 의분석방법과검출한계, 정확도의차이때문에같은시료라도장비들사이에동일한결과가도출되지않는다 [16]. 자동혈구분석기 Hemavet 950FS (Drew scientific, Oxford, UK) 는동물전용의소형벤치타입분석기로소, 돼지, 말, 개, 고양이, 마우스등다양한동물에서혈구를전자동으로분석하는장비이다. Hemavet 950FS는혈구를하나씩분리해주는 focused-flow system과전기적전위차에의해혈구를다섯부분으로구분한다. 즉, 각혈구는다른전기적에너지차이를가지고있는데, Hemavet 950FS는이전기적에너지차이에기초하여각혈구가두개의전극과개구부를통과할때저항값의변화를감지는원리를이용하여분석한다. 또한, 혈구간의간섭을피하기위하여전용 lysis reagent를이용하여적혈구를용해한후에백혈구의수치를계산하며, 헤모글로빈은분광광도법에의해측정한다. 본연구는자동혈구분석기 Hemavet 950FS를이용한돼지의혈액내혈구분석의유효성을검증하고, 더나아가채혈후시간경과에따른혈구변화를추적하여정확한분석에필요한최소소요시간을설정하기위하여실시하였다. 2. 재료및방법 2.1 공시재료본연구에이용된혈액시료는체중 60 kg (± 3.5) 의육성돈 (Duroc) 34두로부터경정맥을통한채혈을실시하여채취하였다. 채취된혈액은 K 3-EDTA (tripotassium ethylenediamine-tetraacetate) 가처리된튜브에옮긴후분석전까지얼음에보관하였다. 채혈후최초분석시까지소요된시간은 1시간이내였다. 34개의시료에대한 1차분석후혈전혹은용혈발생및기준범위 (Table 1, 2) 를크게벗어난시료는분석에서제외시켰으며, 최종적으로 10개의시료가본연구에이용되었다. 2.2 분석항목분석은일반혈액검사 (complete blood cell count, CBC) 항목으로 leukocytes계혈구인백혈구 (white blood cell, WBC), 호중구 (neutrophil, NE), 림프구 (lymphocyte, LY), 단핵구 (monocyte, MO), 호산구 (eosinophil, EO), 호염구 (basophil, BA) 의 6종과 erythrocytes계혈구인적혈구 195
한국산학기술학회논문지제 18 권제 1 호, 2017 (red blood cell, RBC), 헤모글로빈 (hemoglobin, Hb), 적혈구용적율 (hematocrit, HCT), 평균적혈구용적 (mean corpuscular volume, MCV), 평균적혈구혈색소량 (mean corpuscular hemoglobin, MCH), 평균적혈구헤모글로빈농도 (mean corpuscular hemoglobin concentration, MCHC), 적혈구크기분포 (red cell distribution width, RDW) 의 7종, thrombocytes계혈구인혈소판 (platelet, PLT) 및평균혈소판용적 (mean corpuscular volume, MPV) 의 2종을자동혈구분석기 Hemavet 950FS (Drew scientific, Oxford, UK) 를이용하여분석하였다. 2.3 분석방법혈액시료는채혈후 1.5 ml micro-tube에각각 1 ml 씩분주하여분석전까지 4 냉장고에보관하였다. 분석장비의일내변동을조사하기위하여공시재료로선발된 10개의시료중임의로 1개의시료를선발하여연속적으로 10회분석을실시하였으며, 분석된결과를이용하여변동계수 (coefficient of variation, CV) 를산출하였다. 혈구분석의유효시간평가를위하여선발된혈액시료 10개에대하여채혈직후, 2시간, 4시간, 8시간, 24시간, 48시간, 72시간, 120시간에각각의항목에대한분석을실시하였다. 분석된결과를이용하여시간경과에따른변동계수 CV를산출하였다. 또한, 최초채혈직후분석된결과치를 100으로환산하여이후분석된값들에대한변화를백분율로환산하여변동수준을계산하였다. 2.4 통계분석본연구에서분석된모든결과는통계프로그램 SPSS version 17.0을이용하여분석하였다. 혈구분석의유효시간평가를위한분석에서시간경과에따른분석치사이의통계적유의성은일원배치분산분석 (one-way analysis of variance, ANOVA) 을통하여분석하였다. 유의수준 0.05 이하통계적유의성이인정되었을때, Duncan [17] 의다중검정을통하여시간별유의차를나타내었다. 3. 결과및고찰 3.1 일내변동자동혈구분석기 Hemavet 950FS의일내변동을조사하기위하여임의의하나의혈액시료에대한 10회반복 분석결과를 Table 1 (leukocytes와 thrombocytes) 과 Table 2 (erythrocytes) 에나타내었다. 각각의데이터로부터산출된변동계수 (CV) 를함께나타내었다. 총백혈구 (WBC) 는호중구 (NE), 림프구 (LY), 단핵구 (MO), 호산구 (EO), 및호염구 (BA) 의합으로나타내어진다 (Table 1). Leukocytes계의일내변동을조사한결과총백혈구 (WBC) 는 4.3% 로관찰되었으며, 호중구 (NE) 와림프구 (LY) 도각각 7.0과 4.6% 로일내변동이낮은수준으로관찰되었다. 이와반대로단핵구 (MO), 호산구 (EO), 호염구 (BA) 의일내변동은각각 19.7, 56.9와 53.3% 로매우높은수준으로관찰되었다. 단핵구 (MO) 의경우에는분석회차마다음의기울기 (-0.023; r 2, 0.397) 로감소하는추세가관찰되었으며, 호산구 (EO) 와호염구 (BA) 의경우에는각각기울기가 0.053 (r 2 =0.599) 과 0.006 (r 2 =0.703) 으로변화의경향이증가하는추세로나타났다. 이들세혈구의일내변동이크게나타난것은이들의혈중농도가매우낮은수준으로 Hemavet 950FS의검출하한이하로존재했을가능성을고려할수있다. Putwain 등 [18] 의연구에서도본연구에서이용한자동혈구분석장비 (Hemavet 950FS) 와동일한장비를이용하여 canine blood에서혈구를분석한결과, 총백혈구와호중구림프구의변동계수는 5% 미만이었지만, 단핵구의변동계수가 47.96%, 호산구와호염구에서각각 20.69, 32.94% 로관찰되어본연구와일치하는결과를보고하였다. 이와같은결과로미루어볼때, Hemavet 950FS를이용한혈중단핵구, 호산구, 호염구의정량적분석은부적합한것으로사료된다. 다만, 이들단핵구, 호산구, 호염구의유의적인차이에도불구하고총백혈구의수준이유의하게변하지않은것은, 이들세혈구의비율이총백혈구의 5% 내외수준으로이들의혈중농도의변화는전체백혈구수치에영향을미치기에는불충분했기때문인것으로사료된다. 한편, 혈중혈소판농도와평균혈소판용적에있어서일내변동은 4.4% 와 1.8% 로낮은수준으로관찰되어 thrombocytes계의지표들은안정적인분석결과를나타내었다. Table 2에서는 erythrocytes계혈구의지표들에대한일내변동을나타내었다. 헤모글로빈과적혈구용적율의일내변동은 4.4% 로동일한수준으로관찰되었으며, 적혈구의일내변동은 2.13%, 그이외의지표들에서는 2% 이하로관찰되어 erythrocytes계지표들은 Hemavet 950FS 를이용하여안정적으로검출이가능한것으로판단되었다. 196
Table 1. Results and coefficient of variation from one sample run on ten occasions for leukocytes and thrombocytes parameters Items 1) Leukocytes ( 10 3 /ul) Thrombocytes WBC NE LY MO EO BA PLT ( 10 3 /ul) MPV (fl) Normal Range 11.0-22.0 3.1-11.2 4.3-13.6 0.2-2.2 0.1-2.4 0.0-0.4 325-715 5.0-20.0 1 20.08 9.03 10.20 0.53 0.31 0.01 338 12.1 2 18.72 8.54 9.18 0.73 0.25 0.02 320 11.8 3 17.22 7.79 8.64 0.62 0.13 0.03 318 11.7 4 18.14 8.01 9.25 0.67 0.18 0.02 296 11.7 5 18.76 8.22 9.65 0.65 0.19 0.04 324 12.1 6 18.16 7.71 9.72 0.47 0.22 0.03 322 11.9 7 18.66 7.89 9.56 0.61 0.52 0.07 318 11.7 8 17.60 7.22 9.14 0.60 0.60 0.05 327 12.2 9 17.82 7.24 9.41 0.40 0.71 0.07 350 11.8 10 18.52 7.65 9.86 0.41 0.55 0.05 314 12.2 CV, % 4.30 7.03 4.62 19.70 56.86 53.31 4.43 1.76 1) WBC, white blood cell; NE, netrophil; LY, lymphocyte; MO, monocyte; EO, eosinophil; BA, basophil; PLT, platelet; MPV, mean platelet volume; CV, coefficient of variation Table 2. Results and coefficient of variation from one sample run on ten occasions for erythrocytes parameters Items 1) RBC ( 10 6 /ul) Hb (g/dl) HCT (%) MCV (fl) MCH (pg) MCHC (g/dl) Normal Range 5.00-8.00 10.0-16.0 32.0-50.0 50.0-68.0 17.0-21.0 30.0-34.0 12.0-27.0 1 7.99 13.6 49.8 55.2 15.1 27.3 19.4 2 7.84 12.5 44.4 56.6 15.9 28.2 19 3 7.67 11.9 43.7 57 15.5 27.2 18.8 4 7.77 12.1 44.1 56.7 15.6 27.4 18.6 5 7.88 12.2 45.0 57.1 15.5 27.1 19.1 6 7.97 12 45.6 57.2 15.1 26.3 18.4 7 7.85 12 44.4 56.6 15.3 27.0 18.6 8 7.53 11.6 42.4 56.3 15.4 27.4 18.6 9 7.59 12.1 43.7 57.6 15.9 27.7 18.7 10 8.00 12.3 45.4 56.7 15.4 27.1 18.9 CV, % 2.13 4.40 4.40 1.14 1.80 1.80 1.57 1) RBC, red blood cell; Hb, hemoglobin, HCT, hematocrit, MCV, mean corpuscular hemoglobin; MCH, mean corpuscular hemoglobin; MCHC, mean corpuscular hemoglobin concentration; RDW, red cell distribution width; CV, coefficient of variation RDW (%) 3.2 혈구분석유효시간 Table 3과 Fig. 1에서는시간경과에따른혈중 leukocytes와 thrombocytes계혈구의변화를나타내었다. Leukocytes계혈구에있어서는림프구를제외한나머지항목 ( 총백혈구, 호중구, 단핵구, 호산구, 호염구 ) 에서유의한차이를가지며시간경과에따라변화하는것으로관찰되었다. 호중구의경우채혈직후분석결과에대비하여시간경과에따라감소하는것으로나타났으며, 유의한변화는채혈후 24시간부터관찰되기시작하였 다. 채혈직후부터 120시간까지의변동계수는 25.6% 였으며, 채혈직후대비 120시간후의분석치는약 44% 수준까지떨어지는것으로관찰되었다 (Table 3, P < 0.001). 한편, 호중구의변화를채혈직후대비백분율로환산하였을경우에는유의한변화가채혈후 4시간에관찰되었다 (Fig. 1, P < 0.05). 림프구의시간경과에따른혈중농도의변화는변동계수 5.46% 수준으로낮은변동으로관찰되었고, 채혈후시간경과에따라다소감소하는경향이나타났으나통계적으로유의한차이는관찰되 197
한국산학기술학회논문지제 18 권제 1 호, 2017 Table 3. Changes of leukocytes and thrombocytes parameters in blood by time passed Items 1) 0 2 4 8 24 48 72 120 CV, % SEM P value Leukocytes WBC ( 10 3 /ul) 15.8 a 15.9 a 15.2 ab 15.3 ab 14.3 abc 14.0 abc 13.3 bc 11.9 c 9.6 0.31 0.007 NE 5.17 a 4.87 a 4.51 ab 4.27 ab 3.73 bc 3.47 bc 2.86 cd 2.28 d 25.6 0.16 < 0.001 LY 9.87 9.91 9.63 9.62 9.20 8.59 9.26 8.66 5.5 0.19 0.535 MO 0.51 ab 0.39 bc 0.34 c 0.34 c 0.32 c 0.60 a 0.37 bc 0.47 abc 24.1 0.38 < 0.001 EO 0.24 d 0.40 cd 0.60 bc 0.84 ab 0.75 ab 0.99 a 0.58 bc 0.34 cd 43.7 0.51 < 0.001 BA 0.06 d 0.09 d 0.12 cd 0.19 bc 0.24 b 0.33 a 0.21 b 0.11 cd 53.1 0.14 < 0.001 Thrombocytes PLT, 10 3 /ul 211 b 236 ab 239 ab 277 a 153 c 96.00 d 88.67 d 69.56 d 46.6 10.04 < 0.001 MPV, fl 8.91 a 8.63 a 8.97 a 8.72 ab 9.12 a 7.97 b 6.70 c 6.42 c 13.0 0.15 < 0.001 Data are mean. 1) WBC, white blood cell; NE, neutrophil; LY, lymphocyte; MO, monocyte; EO, eosinophil; BA, basophil; PLT, platelets; MPV, mean platelet volume; SEM, standard error mean a-d Means without same superscript significantly differ (P<0.05) Fig. 1. Mean (±SD) change percent observed in complete blood cell count result on storage of blood at 4. WBC, white blood cell; NE, neutrophil; LY, lymphocyte; MO, monocyte; PLT, platelets; MPV, mean platelet volume; The x-axis presents the time after collection of blood (hour). The y-axis presents the change of percent from value on time 0. 지않았다. 다만, 채혈직후에비하여혈중림프구수준의변화를백분율로분석한결과에서는채혈후 48시간부터유의하게낮아지는것으로나타났다 (Fig. 1, P < 0.05). 호중구의유의적인감소에따라총백혈구의수치도시간경과에따라유의하게감소되었으며, 채혈직후대비채혈 120시간후에는약 75% 수준으로감소되는 것으로나타났다 (Table 3, P = 0.007). 총백혈구에대한변화를백분율로환산하여비교한결과채혈후 24시간부터유의하게감소되는것으로분석되었다 (Fig. 1, P < 0.05). 단핵구와호산구, 호염구의경우에는시간경과에따라일정한경향없이분석시마다큰차이를나타내며불규칙한변화가관찰되었다. 특히, 호염구의경우최소 0.06 10 3 /ul에서최대 0.33 10 3 /ul까지변화가관찰되어수치가대 5.5배까지차이가발생하는것으로나타났다. 이는위의일내변동에서언급되었듯이, 이들단핵구, 호산구, 호염구에대한 Hemavat 950FS의검출능력의한계로나타난결과로보인다. Thrombocytes계의지표에서혈소판의경우 4시간까지는채혈직후에비하여통계적으로유의한차이는아니지만증가하는경향으로나타났으며, 채혈후 8시간에는유의하게높은수치를나타내었다. 이후 24시간부터 120시간까지는통계적유의성을가지며선형으로감소되는경향으로관찰되었다 (P < 0.001). 평균혈소판용적또한채혈후 24시간이내까지는유의한변동이없었으나, 48시간이후부터유의한수준으로감소되었다 (P < 0.001). 위와같은연구결과로비추어봤을때, Hemavet 950FS를이용하여돼지의혈중 leukocytes계혈구및 thrombocytes계혈구에대한유효한분석을위해서는채혈후 4시간이내에이루어져야하는것으로사료된다. Erythrocytes계지표들에대한유효분석시간검증에서평균적혈구헤모글로빈농도 (P = 0.007) 이외의모든지표들은시간경과에따른유의한차이를나타내지않았다 (Table 4). 198
Table 4. Changes of erythrocytes parameters in blood by time passed Items 1) 0 2 4 8 24 48 72 120 CV, % SEM P value RBC, 10 6 /ul 8.24 8.09 8.07 8.05 8.07 8.07 7.86 7.95 1.37 0.07 0.967 Hb, g/dl 12.76 12.65 12.86 12.96 12.86 13.31 12.93 13.12 1.60 0.08 0.628 HCT, % 40.93 40.41 40.95 40.18 39.83 41.37 38.85 39.82 2.00 0.34 0.703 MCV, fl 49.73 50.04 50.82 49.95 49.41 51.57 49.45 50.21 1.46 0.28 0.556 MCH, pg 15.52 15.68 15.95 16.12 15.96 16.55 16.59 16.69 2.71 0.14 0.272 MCHC, g/dl 31.22 b 31.34 b 31.43 b 32.28 ab 32.30 ab 32.20 ab 33.52 a 32.19 ab 2.33 0.16 0.007 RDW, % 20.74 20.85 20.80 20.84 20.87 20.72 20.95 20.94 0.40 0.10 0.999 Data are mean. 1) RBC, red blood cell; Hb, hemoglobin, HCT, hematocrit, MCV, mean corpuscular hemoglobin; MCH, mean corpuscular hemoglobin; MCHC, mean corpuscular hemoglobin concentration; RDW, red cell distribution width; SEM, standard error mean a-d Means without same superscript significantly differ (P<0.05) 따라서본논문에서는별도의백분율변화에대한결과는나타내지않았다. Erythrocytes계지표들중평균적혈구헤모글로빈농도만이시간이경과함에따라유일하게유의한수준으로증가하는것으로관찰되었는데 (P = 0.007), 변동수준은 2.33% 로낮았으며채혈직후대비 120시간후분석치의환산백분율은 103.1% 이내로낮은수준이었다 (data non-shown). 위와같은결과는 Hemavet 950FS를이용한돼지의혈중 erythrocytes계의분석은채혈후 120시간까지유효한것으로사료된다. Hemavet 950FS는본래수의분야에서동물의혈액학적진단을위한장비로써, 동물의종류에따라전용 control 지시제를사용하여 reference 값을설정하고정상범위내에서혈구를진단할수있다. 특히, 인간과돼지를포함하는포유동물의혈중혈구는비슷한조성을가지므로 [19] 이장비를활용하여돼지뿐만아니라소, 닭, 쥐, 사슴등다양한가축및실험동물의혈구분석이가능하며, 인간의혈액분석을위한전용지시제를사용할경우인간의혈액에서도유효한혈구분석이가능하다. 다만, 앞선설명에서와같이혈중혈구조성은다양한내 외인성요인에의하여변하게되므로 [6-10], 본연구에서얻어진분석유효성및유효시간에대한결과가인간을포함한다른모든축종에서동일하게적용된다고판단할수없다. 따라서앞으로의연구에서동물의종류에따른혈구분석유효성과유효시간을검토할필요가있다. 4. 결론 Hemavet 950FS의돼지혈구에대한일내변동을조사한결과, leukocytes계혈구중총백혈구, 호중구, 림프구의경우낮은수준의일내변동이관찰되어이들항목에대한분석유효성이인정되었으나, 단핵구, 호산구, 호염구에서는높은수준의변동이관찰되어이들항목에대해서는부적합한것으로판단된다. 반면 erythrocytes 계혈구의지표들에서는매우낮은수준의변동으로안정적인검출이가능한것으로판단되었다. Thrombocytes 인혈소판및평균혈소판용적또한일내변동이낮은수준으로관찰되어분석장비의유효성이인정되었다. 한편, 유효시간평가에대한연구결과 leukocytes계혈구와 thrombocytes계혈구는채혈후 4시간이내가적합한것으로나타났으며, erythrocytes계혈구는채혈후 120시간까지는안정적인분석이가능한것으로판단된다. 감사의글본논문은농촌진흥청공동연구사업 ( 과제번호 : PJ00997102) 의지원에의해이루어진것임. 본연구는 2016년도농촌진흥청국립축산과학원박사후연수과정지원사업에의해이루어진것임. 199
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김광식 (Kwang-Sik Kim) [ 정회원 ] 동물영양, 가축사양 2016 년 2 월 : 충북대학교축산학과 ( 농학석사 ) 2012 년 10 월 ~ 현재 : 농촌진흥청국립축산과학원농업연구사 김영화 (Young-Hwa Kim) [ 정회원 ] 동물영양, 가축사양 1997 년 2 월 : 전남대학교대학원축산학과 ( 농학석사 ) 2002 년 2 월 : 경상대학교대학원축산학과 ( 농학박사 ) 1987 년 5 월 ~ 1991 년 12 월 : 영천군농촌지도소농촌지도사 1992 년 1 월 ~ 현재 : 국립축산과학원농업연구사 김두완 (Du-Wan Kim) [ 정회원 ] 1998 년 2 월 : 전남대학교농과대학축산학과 ( 축산학학사 ) 2016 년 2 월 : 전북대학교축산학과 ( 식육가공석사 ) 2010 년 4 월 ~ 현재 : 국립축산과학원양돈과농업연구사 가축사양, 식육 사수진 (Soo-Jin Sa) [ 정회원 ] 2002 년 2 월 : 강원대학교축산학과 ( 농학석사 ) 2006 년 2 월 : 강원대학교축산학과 ( 농학박사 ) 2007 년 2 월 ~ 2009 년 1 월 : Nottingham University, 박사후연구원 2009 년 2 월 ~ 현재 : 농촌진흥청농업연구사 동물번식학, 생명공학 201