공개특허 (19) 대한민국특허청 (KR) (12) 공개특허공보 (A) (51) 국제특허분류 (Int. Cl.) A61K 31/222 ( ) A61P 31/18 ( ) A61P 35/02 ( ) A61P 35/

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1 (19) 대한민국특허청 (KR) (12) 공개특허공보 (A) (51) 국제특허분류 (Int. Cl.) A61K 31/222 ( ) A61P 31/18 ( ) A61P 35/02 ( ) A61P 35/00 ( ) (21) 출원번호 ( 분할 ) (22) 출원일자 ( 국제 ) 2008 년 01 월 30 일 심사청구일자 없음 (62) 원출원특허 원출원일자 ( 국제 ) 심사청구일자 2009 년 08 월 31 일 (85) 번역문제출일자 2012 년 05 월 30 일 (86) 국제출원번호 PCT/US2008/ (87) 국제공개번호 WO 2008/ 국제공개일자 (30) 우선권주장 2008 년 08 월 07 일 2008 년 01 월 30 일 60/898, 년 01 월 31 일미국 (US) (11) 공개번호 (43) 공개일자 2012 년 08 월 17 일 (71) 출원인 바이오석세스바이오텍컴퍼니 미국, 캘리포니아 90036, 로스앤젤레스, 노쓰맨스필드애비뉴 312 (72) 발명자 창, 리챠드, 엘. 미국, 뉴저지 07058, 파인브룩, 코너에비뉴 107 한, 젱타오 중국, 45000, 헤난, 정저우, 동밍로드 4 (74) 대리인 특허법인가산 전체청구항수 : 총 1 항 (54) 발명의명칭포르볼에스테르조성물과그의사용방법 (57) 요약 세포변형성질환의치료를위한포르볼에스테르또는포르볼에스테르의유도체를포함하는조성물및방법을제공한다. 세포변형성질환은 HIV 및 AIDS 와같은바이러스감염또는종양의진행과같은다양한수단에의해포유동물대상체내에서야기된다. 본발명의상기방법및조성물은데노보 HIV 감염의억제, 잠재적프로바이러스로부터바이러스발현으로의증가, HIV- 유도세포변형성효과의억제, HIV 수용체의저하조절, Th1 사이토카인발현의증가, Th2 사이토카인발현의감소, ERK 인산화반응의증가, 악성종양세포에서의세포사멸유도, 경감유도, 경감유지, 화학요법의약물로서, 뿐만아니라, 세포변형성질환의증상및이러한질환과수반되는기회적감염의감소에효과적이다. HAART 프로토콜에서사용된것들, HIV 에기인한기회적감염의치료에사용되는치료학적약물, 또는화학요법의약물과같은적어도하나의추가약물과결합하여포르볼에스테르또는유도체화합물을적용하여, 포유동물대상체내의세포변형성질환에대항하는더욱효과적인추가적인조성물및방법을제공한다

2 특허청구의범위청구항 1 하기화학식 I의화합물, 또는이의약학적으로허용가능한염, 이성질체, 광학이성질체 (enantiomer), 솔베이트 (solvate), 수화물 (hydrate) 또는다형체 (polymorph) 를포유동물대상체에투여하는것을포함하는, 포유동물대상체에서 HIV 감염을예방또는치료하는방법. 화학식 I ( 상기 R 1 및 R 2 는수소,,,, 및로이루어진군에서선택되고, R 3 는수소및에서선택되고, 상기화학식 I 의화합물은약학적유효량으로투여되고, 상기알킬 (alkyl) 기는 1 내지 15 의탄소원자를포함하고, 상기알케닐 (alkenyl) 기는 1 내지 7 의탄소원자를포함한다 ) 명세서 [0001] 기술분야본발명은대체로세포변형성질환 (cytopathic diseases) 에관한것이다. 더욱구체적으로, 본발명은포르볼에스테르를포함하는조성물과이를사용하여세포변형성컨디션 (condition) 또는이러한세포변형성컨디션을야기하는질환을치료하는방법에관한것이다. [0002] 배경기술포르볼 (phorbol) 은디테르핀 (diterpene) 의티글리안 (tigliane) 과의천연의, 식물유래의유기화합물 (compound) 이다. 이것은 1934년에, 원산지가동남아시아인대극과 (Euphorbiaceae family) 의광엽관목 (leafy shrub) 인크로톤티글리움 (Croton tiglium) 의종자에서유래된파두유 (croton oil) 의가수분해생성물에서최초로분리되었다. 다양한포르볼의에스테르는중요한생물학적특징을가지는데, 이는미토겐활성단백질키나아제 (Mitogen-Activated Protein Kinase; MAPK) 경로를포함하는세포신호전달경로의다운스트림 (downstream) 을조절하는활성단백질키나아제 (Protein Kinase C; PKC) 와디아크릴글리세롤 (diacylglycerol) 을모방 (mimic) 하는것으로보고된능력을포함한다. 또한, 포르볼에스테르는키메린 (chimaerins), Ras 활성물 (Ras activator) 인 RasGRP, 및소포시발단백질 (vesicle-priming protein) 인 Munc- 13에결합하는것으로여겨진다 (Brose N, Rosenmund C.,. JCell Sci; 115: (2002)). 또한, 몇몇의 - 2 -

3 포르볼에스테르는핵인자 - 카파 B (Nuclear Factor-kappa B; NF-κB) 를포함한다. 포르볼에스테르의가장 뛰어난생리학적특징은암프로모터 (tumor promoter) 의역할을하는것으로보고된능력이다. [0003] [0004] [0005] *12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트 (12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate; TPA) 는, 포르볼-12-미리스테이트-13-아세테이트 (phorbol-12-myristate-13-acetate; PMA) 라고도불리며, 포르볼에스테르이고, 다수의세포주 (cell line) 와초기세포 (primary cell) 에서대한분화 (differentiation) 및 / 또는세포사멸 (apoptosis) 의유도물질 (inducer) 로서발암 (carcinogenesis) 의모델로사용된다. TPA는화학치료 (chemotherapy) 에의해골수기능이저하된환자들에있어서, 백혈구와호중구 (neutrophil) 의순환을증가시키고 (Han Z. T. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. 95, (1998)), MT-4 세포에대한 HIV-세포변형성효과를억제하는 (Mekkawy S. et al., Phytochemistry 53, (2000)) 것으로보고되고있다. 그러나, 피부와접촉하였을때의가성반응 (caustic reaction) 및잠재적독성에대한우려등을포함하는다양한요인들때문에, HIV 또는 AIDS를치료, 관리, 또는예방하기위한효과적인도구로 TPA를제시하지못하고있다. 다양한형태의종양질환 (neoplastic disease) 과같은세포변형성질환과, HIV 및 AIDS와같은바이러스질환 (viral disease) 에대한최신치료법들은, 충분하지못한효과와견딜수없는부작용등의수많은장애를겪고있다. 많은환자들에게는, 단지약물치료를중단하는것으로그들의삶의질을손상시키는치명적인부작용이발생한다. 어떤환자들은, 순응성 (compliance) 이한정되어서, 치료계획이매우복잡하고불편하다. 또다른환자들은, 초기에우수한결과를경험하지만, 최적치료계획 (therapeutic regimen) 에완전히순응되었음에도불구하고병이재발하기도한다. 대부분의 HIV 케이스에서치료가실패하는것은 HIV의저항계통 (resistant strain) 이출현했기때문이다. 불충분한약물효능에의한불완전한바이러스억제, 복잡한약물치료계획에의한열악한순응성, 및그외의다른인자들이이러한문제를야기시킨다. 또한, HIV감염에대한임상잠복기 (clinical latency) 의긴기간동안, 정지성기억 CD4 T-세포 (quiescent memory CD4 T-cell) 의서브셋 (subset) 은통합되나전사적으로침묵하는 (transcriptionally silent) 프로바이러스 (provirus) 를숨겨준다. 이러한저장소 (reservoir) 는레트로바이러스치료 (retroviral therapy) 로부터잠복성 HIV를보호하고, 감염된환자내에서 HIV의박멸에대한실질적장벽역할을한다. 발명의내용 [0006] [0007] 해결하려는과제암치료는일반적으로수술, 화학치료, 호르몬치료, 및 / 또는방사선치료등과결합하여, 환자의신생세포 (neoplastic cell) 를제거한다. 그러나, 이러한접근은모두심한장애 (drawbacks) 및감염에대한감수성증가와같은추가위험성을내포한다. 예를들어, 수술의경우환자의건강상태에따라금지될수있다. 또한, 암주위의마진을명확하게결정하기가어려워서, 신생조직의일부가잔존하여병의재발가능성이증가할수있다. 최근의거의모든화학치료약물은독성이있고, 화학치료는심한메스꺼움, 골수기능저하, 및면역억제등을포함하는심각한부작용을유발한다. 또한, 암세포에특이적으로공격 (target) 하지못할수있어서, 암세포뿐만아니라건강한세포도죽일수있다. 또한, 최근치료법에저항성을가진재발성 / 난치성신생물 (relapsed/refractory neoplasm) 이빈번하게존재한다. 종양성질환 (neoplastic disease) 뿐만아니라 HIV 및 AIDS와같은바이러스성감염에의한것을포함하는세포변형성질환을겪는환자들을위해새롭고더욱효과적인치료가당연히필요하다. [0008] [0009] [0010] 과제의해결수단본발명의실시예들의요약본발명은세포변형성질환의치료에있어서, 포르볼에스테르를포함하는조성물과이를사용하는방법에관한것이다. 본발명의일실시예에서, 포르볼에스테르및포르볼에스테르의유도체는 HIV와같은세포변형성질환및 AIDS와같은연관성질환을치료하는데에사용된다. 본발명에따른조성물및방법은, 가능한모든방법을동원하여 HIV 및 AIDS와같은연관성질환의치료를달성한다. 몇몇실시예에서, 상기조성물및방법은포유동물대상체 (mammalian subject) 내에서의 HIV 수용체 (receptor) 의활성을변경 (modify) 할수있다. 또다른 - 3 -

4 실시예에서, 상기조성물및방법은 HIV- 감염대상체내의 HIV 저장소의개수를감소시킬수있다. 또다른 실시예에서, 잠복성프로 - 바이러스세포 (pro-viral cells) 내의 HIV 활성화를강화할수있다. 또다른실시 예에서, HIV- 세포변형성효과를억제할수도있다. [0011] [0012] [0013] 또다른실시예에서, 포르볼에스테르및포르볼에스테르유도체를포함하는조성물은, 포유동물대상체에대한 HIV 및 AID 증상의치료및관리에사용할수있다. 본발명의조성물및방법들이적용되는치료및관리에대한목적 (targeted) 증상은, 구강병변 (oral lesions), 피로감, 피부아구창 (skin thrush), 발열 (fever), 식욕저하 (poor appetite), 설사 (diarrhea), 아프타성궤양 (apthous ulcers), 흡수장애 (malabsorption), 혈소판감소증 (thrombocytopenia), 체중감소, 빈혈, 림프절증대 (lymph node enlargement), 및미코박테리움아비움콤플렉스 (mycobacterium avium complex), 살모넬라증 (salmonellosis), 매독 (syphilis), 신경매독 (neuroshyphilis), 결핵 (turberculosis; TB), 바실러리안지오마토시스 (bacillary angiomatosis), 아스페르질루스증 (aspergillosis), 칸디다증 (candidiasis), 콕시디오이데스진균증 (coccidioidomycosis), 리스테리아증 (listeriosis), 골반염증 (pelvic inflammatory disease), 버킷림프종 (Burkitt's lymphoma), 크립토코쿠스수막염 (cryptococcal meningitis), 히스포플라스마증 (histoplasmosis), 카포시육종 (Kaposi's sarcoma), 림프종 (lymphoma), 시스템성비-호지킨림프종 (non-hodgkin's lymphoma; NHL), 프라이머리 CNS 림프종 (primary CNS lymphoma), 크립토스포리디움증 (cryptosporidiosis), 이소스포라증 (isosporiasis), 미포자층증 (microsporidiosis), 뉴모시스티스카리니폐렴 (pneumocystis carinii pneumonia; PCP), 톡소플라즈마증 (toxoplasmosis), 사이토메갈로바이러스 (cytomegalovirus; CMV), 간염 (hepatitis), 헤르페스심플렉스 (herpes simplex), 헤르페스조스터 (herpes zoster), 인간파필로마바이러스 (human papiloma virus) (HPV, 곤지름 (genital warts), 자궁경부암 (cervical cancer)), 몰루스쿰콘타기오숨 (molluscum contagiosum), 구강백반 (oral hairy leukoplakia; OHL), 및진행성다발초점성백질뇌병증 (progressive multifocal leukoencephalopathy; PML) 과같은 2차컨디션에대한민감성및심각성등을포함하나, 이에한정되지는않는다. 또다른실시예에서, 포르볼에스테르및포르볼에스테르의유도체를포함하는조성물은종양성질환과같은세포변형성컨디션을치료하는데사용될수있다. 이러한종양 (neoplasms) 은악성또는양성일수있다. 몇몇실시예에서, 종양은고형또는비고형암일수있다. 또다른몇몇실시예에서, 종양은재발성일수있다. 또다른몇몇실시예에서, 종양은난치성일수있다. 예시적인종양은급성골수성백혈병 (acute myeloid leukemia; AML), 만성골수성백혈병 (chronic myeloid leukemia; CML), 만성골수성백혈병아세포기 (chronic myeloid leukemia blast crisis), 골수이형성증 (myelodysplasia), 및골수증식성증후군 (myeloproliferative syndrome) 을포함하는백혈병 (leukemia); 호지킨및비-호지킨림프종을포함하는림프종 ; 피하선암 (subcutaneous adenocarcinoma); 난소기형암종 (ovarian teratocarcinoma); 및전립선암 (prostate cancer) 을포함하되, 이에한정되지않는혈액종양 (hematologic malignancies)/ 골수질환 (bone marrow disorders) 을포함하며, 이에한정되지않는다. 상기방법및조성물을이용한치료를적용할수있는또다른종양성컨디션은여러가지타입의고형암을포함하는또다른암질환및컨디션을포함하며, 여기서성공적인치료및 / 또는완화 (remission) 는고형암의크기감소의측정, 및 / 또는조직학적암마크의존재또는발현레벨, 전이상태 (metastatic state) 또는잠재상태, 스테이지, 성장등을평가하는조직병리학적연구등의기존방법에따라결정될것이다. 또한, 본발명의조성물및방법은빈혈 (anemia); 만성피로 (chronic fatigue); 코, 잇몸, 및피부내 (under the skin) 의출혈과같은과도하거나빈번한출혈 (excessive or easy bleeding); 빈번한타박상 (easy bruising), 특히, 외관상원인이없는타박상 ; 숨가쁨 (shortness of breath); 점상출혈 (petechiae); 회귀열 (recurrent fever); 잇몸부음 (swollen gums); 상처의더딘치유 (slow healing of cuts); 골 (bone) 및관절 (joint) 불편감 ; 재발간염 (recurrent infections); 체중감소 ; 가려움증 (itching); 수면중식은땀 (night sweats); 림프절종창 (lymph node swelling); 발열 ; 복부통증및불편감 (abdominal pain and discomfort); 시력장애 (disturbances in vision); 기침 (coughing); 식욕저하 ; 흉부통증 (pain in the chest); 목넘김곤란 (difficulty swallowing); 얼굴, 목및상지부 (upper extremities) 의종창 ; 특히, 야간에, 잦은배뇨욕구 (a need to urinate frequently); 배뇨시작또는배뇨제지곤란 (difficulty starting urination or holding back urine); 약하거나중단된소변흐름 (weak or interrupted flow of urine); 배뇨시통증또는작열감 (painful or burning urination); 발기곤란 (difficulty in having an erection); 사정시통증 (painful ejaculation); 소변또는정액내혈액 (blood in urine or semen); 허리, 둔부, 또는상부대퇴부의잦은통증또는뻣뻣함 (frequenct pain or stiffness in lower back, hips, or upper thighs); 및허약 (weakness) 을포함하되, 이에한정되지않는종양성질환의증상을치료하는데사용될수있다

5 [0014] [0015] 또다른실시예에서, 본발명의포르볼에스테르및포르볼에스테르의유도체는세포신호경로 (cell signaling pathways) 를조절하는데사용될수있다. 이러한조절은다양한결과를포함할수있다. 예를들어, 몇몇실시예에서, 포르볼에스테르및포르볼에스테르의유도체를포함하는조성물의사용은포유동물대상체내의백혈구 (white blood cell) 수를증가시킬수있다. 또다른실시예에서, 포르볼에스테르및 / 또는포르볼에스테르유도체를포함하는조성물은포유동물대상체내의 Th1 사이토카인 (cytokines) 의분비를변경할수있다. 또다른실시예에서, 포르볼에스테르및 / 또는포르볼에스테르유도체를포함하는조성물은포유동물대상체내의인터루킨 2(interleukin 2; IL-2) 의분비를변경할수있다. 또다른실시예에서, 포르볼에스테르및 / 또는포르볼에스테르유도체를포함하는조성물은포유동물대상체내의인터페론 (interferon) 의분비를변경할수있다. 또다른실시예에서, 포르볼에스테르및 / 또는포르볼에스테르유도체를포함하는조성물은 ERK 인산화반응 (phosphorylation) 의비율을변경할수있다. 본발명은하기화학식 I의포르볼에스테르또는유도체조성물을포함하는조성물을사용한세포신호경로의조절및 / 또는세포변형성질환및세포변형성질환또는컨디션에대한증상의치료에대한신규하고대단히효과적인조성물및방법을제공함으로써, 상술한것들을달성할수있고, 추가적목적및이점을만족시킬수있다. [0016] [0017] 화학식 I [0018] ( 상기 R 1 및 R 2 는수소 ;, 상기알킬 (alkyl) 그룹은 1 내지 15 개의탄소원자를 포함 ;,, 및이들의 치환유도체일수있다.) [0019] 또다른실시예에서, R 1 및 R 2 중적어도하나는수소외의다른것이고, R 3 는수소또는 및이들의치환유도체이다. 또다른실시예에서, R 1 및 R 2 중어느하나는 이고, R 1 및 R 2 중다른하나는 이고, R 3 는 수소이다. [0020] [0021] 본발명에서, 상기화학식의상기알킬, 알케닐 (alkenyl), 페닐 (phnyl) 및벤질 (benzyl) 그룹은비치환된또는할로겐, 바람직하게는클로린 (chlorine), 플루오린 (fluorine) 또는브로민 (bromine); 니트로 (nitro); 아미노 (amino); 및 / 또는유사타입의라디칼 (radicals) 으로치환된것일수있다. 또다른실시예에서, 본발명은하기화학식 II의 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트 (TPA) 와같은예시적인포르볼에스테르조성물을사용한세포신호경로의조절및 / 또는세포변형성질환또는세포변형성질환과연관된컨디션의치료에대한신규하고대단히효과적인방법및조성물을제공함으로써, 이러한목적을달성할수있고, 추가적목적및이점들을만족시킬수있다

6 [0022] [0023] [0024] [0025] [0026] [0027] 화학식 II 본발명의유용한포르볼에스테르및포뮬레이션내에서관련된화합물및유도체및방법은, 상기화합물의또다른조제학적으로허용가능한 (acceptable) 활성염 (active salt), 뿐만아니라상기화합물의활성이성체 (active isomers), 광학이성질체 (enantiomers), 다형체 (polymorphs), 글리코실화된유도체 (glycosylated derivatives), 솔베이트 (solvates), 수산화물 (hydrates), 및 / 또는프로드러그 (prodrugs) 를포함할수있으며, 이에한정되지않는다. 본발명의방법및조성물내에서사용되기위한포르볼에스테르의예시적인형태는포르볼 13-부틸레이트 (butyrate); 포르볼 12-데카노에이트 (decanoate); 포르볼 13-데카노에이트 ; 포르볼 12,13-디아세테이트 (diacetate); 포르볼 13,20-디아세테이트 ; 포르볼 12,13-디벤조에이트 (dibenzoate); 포르볼 12,13-디부티레이트 ; 포르볼 12,13-디데카노에이트 ; 포르볼 12,13-디헥사노에이트 (dihexanoate); 포르볼 12,13-디프로피오네이트 (dipropionate); 포르볼 12-미리스테이트 (myristate); 포르볼 13-미리스테이트 ; 포르볼 12-미리스테이트-13-아세테이트 (TPA 또는 PMA으로도알려짐 ); 포르볼 12,13,20-트리아세테이트 ; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트 ; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트 20-아세테이트 ; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트 ; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트-20-아세테이트 ; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트 ; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트 20-아세테이트 ; 12-데옥시포르볼 13-테트라데카노에이트 ; 포르볼 12-티글리에이트 13-데카노에이트 ; 12-데옥시포르볼 13-아세테이트 ; 포르볼 12-아세테이트 ; 및포르볼 13-아세테이트를포함할수있으며, 이에한정되지않는다. 몇몇실시예에서, 본발명의조성물및방법은화학식 I의포르볼에스테르화합물을이용하여, HIV 및 AIDS 또는그외질환의증상및기회적감염 (opportunistic infections) 과같은 HIV 및 AIDS와연관된컨디션, 뿐만아니라종양성질환또는그외의질환의증상및종양성질환과연관된컨디션을포함하되, 이에한정되지않는세포변형성질환의증상을예방및 / 또는방지한다. 본발명의방법에의하여, 화학식 I 의포르볼에스테르, 특히 TPA로치료할수있는포유동물대상체는 HIV 및 AIDS를가지는대상체, 뿐만아니라 HIV 및 AIDS와연관된 2차또는기회적질환또는증상, 예를들어, 구강병변, 피로감, 피부아구창, 발열, 식욕저하, 설사, 아프타성궤양, 흡수장애, 혈소판감소증, 체중감소, 빈혈, 림프절증대, 미코박테리움아비움콤플렉스, 살로넬라증, 매독, 신경매독, 결핵 (TB), 바실러리안지오마토시스, 아스페르길루스증, 칸디다증, 콕시디오이데스진균증, 리스테리아증, 골반염증, 버킷림프종, 크립토코쿠스수막염, 히스포플라스마증, 카포시육종, 림프종, 시스템성비-호지킨림프종 (NHL), 프라이머리 CNS 림프종, 크립토스포리디움증, 이소스포라증, 미포자층증, 뉴모시스티스카리니폐렴 (PCP), 톡소플라즈마증, 사이토메갈로바이러스 (CMV), 간염, 헤르페스심플렉스, 헤르페스조스터, 인간파필로마바이러스 (HPV, 곤지름, 자궁경부암 ), 몰루스굼콘타기오숨, 구강백반 (OHL), 및진행성다발초점성백질뇌병증 (PML) 등을가지는대상체를포함하며, 이에한정되지않는다. 본발명의방법에의하여, 화학식 I 의포르볼에스테르, 특히 TPA로치료할수있는또다른포유동물대상체는고형및비-고형암과같은악성종양질환을포함하는종양성질환을겪는대상체를포함하며, 이에한정되지않는다. 비-고형암은, 급성골수성백혈병 (AML), 만성골수성백혈병 (CML), 만성골수성백혈병아세포시, 골수이형성증, 골수증식성증후군을포함하는백혈병을포함하되, 이에한정되지않는혈액종양 / 골수장애를포함할수있다. 고형암은호지킨및비-호지킨림프종, 피하선암, 난소기형암종, 및전립선암을포함하는림프종을포함할수있으며, 이에한정되지않는다. 화학식 I의포르볼에스테르, 특히 TPA 로치료할수있는대상체는이러한종양성질환의증상, 예를들어, 빈혈 ; 만성피로 ; 코, 잇몸, 및피부내의출혈과같은과도하거나빈번한출혈 ; 빈번한타박상, 특히, 외관상원인이없는타박상 ; 숨가쁨 ; 점상출혈 ; 회귀열 ; 잇몸부음 ; 상처의더딘치유 ; 골및관절불편감 ; 재발간염 ; 체중감소 ; 가려움증 ; 수면중식은땀 ; 림프절종창 ; 발열 ; 복부통증및불편감 ; 시력장애 ; 기침 ; 식욕저하 ; 흉부통증 ; 목넘김곤란 ; 얼굴, 목 - 6 -

7 및상지부의종창 ; 특히, 야간에, 잦은배뇨욕구 ; 배뇨시작또는배뇨제지곤란 ; 약하거나중단된요흐름 ; 배뇨시통증또는작열감 ; 발기곤란 ; 사정시통증 ; 소변또는정액내혈액 ; 허리, 둔부, 또는상부대퇴부의잦은통증또는뻣뻣함 ; 및허약등을포함하되, 이에한정되지않는증상을겪고있는대상체들을추가로포함할수있다. 몇몇실시예에서, 이러한암은재발된것이거나치료하기어려운것일수있다. [0028] [0029] [0030] 이들및또다른대상체는, 바이러스부하 (viral load) 의방지또는감소, HIV의잠복저장소의감소, 면역반응의증가, Th1 사이토카인분비의증가, HIV 및 AIDS와연관된컨디션및증상의방지또는감소, 신생세포의감소및 / 또는제거, 백혈구수의증가, 완화유도, 완화유지, 악성종양과연관된컨디션및증상의방지또는감소, 및 / 또는 ERK 인산화반응의증가에충분한화학식 I의포르볼에스테르의유효량을대상체에투여함으로써, 예방적으로및 / 또는치료적으로효과적으로치료된다. 치료적으로유용한본발명의방법및포뮬레이션은상술한바와같이, 상기화합물의어떠한활성의, 조제학적으로허용가능한염, 뿐만아니라활성이성체, 광학이성질체, 다형체, 솔베이트, 수산화물, 프로드러그, 및 / 또는이들의콤비네이션을포함하는다양한형태의화학식 I의포르볼에스테르를효과적으로사용할것이다. 화학식 II의 TPA 는후술할본원발명의예시적인실시예처럼적용될수있다. 본발명의또다른관점에서, 화학식 I의포르볼에스테르화합물과결합적으로 (combinatorially) 포뮬레이트되거나대등하게 (coordinately) 투여되어대상체에효과적인반응을생성하는하나이상의 2차또는부속활성약물 (secondary or adjunctive active agent(s)) 과결합하여화학식 I의포르볼에스테르유효량을적용하는결합포뮬레이션및방법들이제공된다. HIV 및 AIDS와같은바이러스세포변형성질환의치료에서, 예시적인결합포뮬레이션 (combinatorial fomulation) 및대등한치료방법 (coordinate treatment methods) 은화학식 I의포르볼에스테르화합물을하나이상의추가적인, 레트로바이러스의, HIV 또는 AIDS 치료를치료하는또는또다른알려진 2차또는부속치료약물과결합하여적용한다. 이러한결합포뮬레이션및대등한치료방법은, 예를들어, 다양한고활성항바이러스요법프로토콜 (highly active antiretroviral therapy protocols; HAART protocols) 에서유래되거나이에뒤따르는것일수있고, 또다른콤비네이션들중에두개의뉴클레오사이드유사역전사억제제 (nucleoside analogue reverse transcriptase inhibitor) 에하나이상의프로테아제억제제 (protease inhibitor) 또는비-뉴클레오사이드유사역전사억제제 (non-nucleoside analogue reverse transcriptase inhibitor) 를더한것과같은처방계획 (regimens) 을포함할수있으며, 이에한정되지않는다. 또다른결합포뮬레이션및대등한치료방법은, 예를들어, 기회적감염의치료뿐만아니라 HAART 프로토콜을위한화합물을포함할수있다. 본발명의실시예들에서, 예를들어, TPA와결합하여사용되는상기 2차또는부속치료약물은예를들어, TPA와결합하거나단독으로, 직접또는간접적인항바이러스효과 (antiviral effects) 를가질수있고, 예를들어, TPA와결합하여, 또다른유용한부속치료활성을나타낼수있고 (HIV 예방, HIV 치료, HIV 저장소활성화, Th1 사이토카인의활성증가등 ); 또는예를들어, TPA와결합하거나단독으로, HIV와연관된기회감염을치료하는데유용한부속치료활성을나타낼수있다. 이러한결합포뮬레이션및대등한치료방법에서유용한부속치료약물은, 예를들어, 사퀴나비르 (saquinavir), 인디나비르 (indinavir), 리토나비르 (ritonavir), 넬피나비르 (nelfinavir), 아타자나비르 (atazanavir), 다루나비르 (darunavir), 포삼프레나비르 (fosamprenavir), 티프라나비르 (tipranavir) 및암프레나비르 (amprenavir) 를포함하되, 이에한정되지않는프로테아제억제제 (protease inhibitors); 지도뷰딘 (zidovudine), 디다노신 (didanosine), 스타뷰딘 (stavudine), 라미뷰딘 (lamivudine), 잘시타빈 (zalcitabine), 엠트리시타빈 (emtricitabine), 테노포비르디소프록실퓨마레이트 (tenofovir disoproxil fumarate), AVX754 및아바카비르 (abacavir) 를포함하되, 이에한정되지않는뉴클레오사이드역전사억제제 ; 네바리핀 (nevaripine), 델라비르딘 (delavirdine), 칼라놀리드 A(calanolide A), TMC125 및에파비렌즈 (efavirenz) 를포함하되, 이에한정되지않는비-뉴클레오사이드역전사억제제 ; 에파비렌즈 / 엠트리시타빈 / 테노포비르디소프록실퓨마레이트, 라미뷰딘 / 지도뷰딘, 아바카비르 / 라미뷰딘, 아바카비르 / 라미뷰딘 / 지도뷰딘, 엠트리시타빈 / 테노포비르디소프록실퓨마레이트 (tenoforvir disoproxil fumarate), 술파메톡사졸 (sulfamethoxazole)/ 트리메토프림 (trimethoprim), 및로피나비르 (lopinavir )/ 리토나비르를포함하되, 이에한정되지않는콤비네이션약품 (combination drugs); 엔푸비르티드 (enfuvirtide), AMD070, BMS , 포지뷰딘티독실 (fozivudine tidoxil), GSK-873,140, PRO 140, PRO 542, 펩티드 T(Peptide T), SCH-D, TNX-355, 및 UK-427, 857를포함하되, 이에한정되지않는유입및융합억제제 (entry and fusion inhibitors); 아시클로비르 (acyclovir), 아데포비르디피복실 (adefovir dipivoxil), 알데스루킨 (aldesleukin), 암포테리신 b(amphotericin b), 아시스로마이신 (azithromycin), 칼슘하이드록실아파타이트 (calcium hydroxylapatite), 클라리스로마이신 (clarithromycin), 독소루비신 (doxorubicin), 드로나비놀 (dronabinol), 엔테카비르 (entecavir), 에포에틴알 - 7 -

8 파 (epoetin alfa), 에토포시드 (etoposide), 플루코나졸 (fluconazole), 간시클로비르 (ganciclovir), 이뮤노글로불린 (immunoglobulins), 인터페론알파-2, 이소니아지드 (isoniazid), 이트라코나졸 (itraconazole), 메게스트롤 (megestrol), 파클리탁셀 (paclitaxel), 페그인터페론알파-2(peginterferon alfa-2), 펜타미딘 (pentamidine), 폴리-1-락틱산 (poly-1-lactic acid), 리바비린 (ribavirin), 리파뷰틴 (rifabutin), 리팜핀 (rifampin), 소마트로핀 (somatropin), 테스토스테론 (testosterone), 트리메트렉세이트 (trimetrexate), 및발간시클로비르 (valganciclovir) 를포함하되, 이에한정되지않는 AIDS 및 HIV와연관된또다른컨디션및기회적감염을위한치료제 ; GS 9137, MK-0518를포함하되, 이에한정되지않는인터그라제억제제 (integrase inhibitors); BMS , C31G, 카르보폴 (carbopol) 974P, 카라지난 (carrageenan), 셀룰로오스술페이트 (cellulose sulfate), 시아노비린-N(cyanovirin-N), 덱스트란술페이트 (dextran sulfate), 히드록시에틸셀룰로오스 (hydroxyethyl cellulose), PRO 2000, SPL7013, 테노포비르, UC-781 및 IL-2를포함하되, 이에한정되지않는살균제 (microbicides) 등을포함한다. [0031] [0032] [0033] 종양성질환의상기치료에서예시적인결합포뮬레이션및대등한치료방법은화학식 I의포르볼에스테르화합물을하나이상의추가적인, 종양성질환을치료하는, 또는또다른알려진 2차또는부속치료약물과결합하여적용한다. 이러한실시예에서, 예를들어, TPA와결합하여사용되는상기 2차또는부속치료약물은, 예를들어 TPA와결합하거나단독으로직접또는간접적인화학요법효과를가질수있고, 예를들어 TPA와결합하여또다른유용한부속치료활성을나타낼수있고 ( 세포독성 (cytotoxic), 항-염증성 (antiinflammatory), NF-κB 억제, Th1 사이토카인의활성증가를포함하는세포사멸등 ); 또는예를들어, TPA와결합하거나단독으로, 종양또는이와연관된증상을치료하는데유용한부속치료활성을나타낼수있다. 이러한결합포뮬레이션과대등한치료방법에서유용한부속또는 2차치료약물은독소루비신, 비타민 D3, 시타라빈 (cytarabine), 시토신아라비노시드 (cytosine arabinoside), 다우노루비신 (daunorubicin), 시클로포스파미드 (cyclophosphamide), 겜투주맙오조가미신 (gemtuzumab ozogamicin), 이다루비신 (idarubicin), 메르캅토퓨린 (mercaptopurine), 미톡산트론 (mitoxantrone), 티오구아닌 (thioguanine), 알데스루킨, 아스파라기나제 (asparaginase), 카르보플라틴 (carboplatin), 에토포시드포스페이트, 플루다라빈 (fludarabine), 메토트렉세이트 (methotrexate), 에토포시드, 덱사메타손 (dexamethasone), 및클로린마그네슘트리살리실레이트 (choline magnesium trisalicylate) 를포함한다. 또한, 부속또는 2차치료는방사선치료, 호르몬치료및수술등에사용될수있으며, 이에한정되지않는다. 본원발명의상술한그리고추가적인목적, 특징, 관점및이점은후술할구체적인설명에나타날것이다. [0034] [0035] [0036] [0037] [0038] 발명을실시하기위한구체적인내용본발명의실시예들의상세한설명신규방법및조성물을포유동물대상체에서세포변형성질환및컨디션의치료및 / 또는예방에사용됨을증명한다. 다양한몇몇실시예에서, 상기방법및조성물은 HIV 및 AIDS와이와관련된컨디션, HIV 및 AIDS에의해유발된질환, 및 / 또는 HIV 또는 AIDS 감염에의해발생된질환을예방하거나치료하는데효과적이다. 또다른몇몇실예에서, 상기방법및조성물은종양성질환및이러한질환의증상을예방하거나치료하는데효과적이다. 이러한종양성질환은악성종양일수도있고, 그렇지않을수도있다. 몇몇실시예에서, 상기종양성질환은고형암또는비-고형암일수있다. 또다른몇몇실시예에서, 상기암은난치성또는재발성일수있다. 본발명이제공하는포뮬레이션및방법은상기화학식 I의포르볼에스테르또는유도체화합물을적용하되, 신규의 HIV 및 AIDS 치료화합물로, 본설명의모든활성조제학적으로허용가능한화합물뿐만아니라, 예견할수있고용이하게제공될수있는이러한화합물의다양한복합체 (complexes), 염, 솔베이트, 이성체, 광학이성질체, 다형체및프로드러그및이들의콤비네이션을포함한다. 또한, 본발명이제공하는포뮬레이션및방법은상기화학식 I의포르볼에스테르또는유도체화합물을적용하되, 종양성질환의치료에있어서, 본설명의모든활성조제학적으로허용가능한화합물뿐만아니라, 예견할수있고용이하게제공될수있는이러한화합물의다양한복합체, 염, 솔베이트, 이성체, 광학이성질체, 다형체및프로드러그및이들의콤비네이션을포함할수있다. 바이러스부하를감소시키는본발명이제공하는포뮬레이션및방법은, 상기화학식 I의포르볼에스테르또는유도체화합물을적용하되, 신규의바이러스부하감소약물로, 본설명의모든활성조제학적으로허용가능한화합물뿐만아니라, 예견할수있고용이하게제공될수있는이러한화합물의다양한복합체, 염, 솔베 - 8 -

9 이트, 이성체, 광학이성질체, 다형체및프로드러그및이들의콤비네이션을포함할수있다. [0039] [0040] [0041] [0042] [0043] [0044] [0045] [0046] [0047] 세포사멸을유발하는본발명이제공하는포뮬레이션및방법은, 상기화학식 I의포르볼에스테르또는유도체화합물을적용하되, 종양내세포사멸을유도하는화학요법약물로, 본설명의모든활성조제학적으로허용가능한화합물뿐만아니라, 예견할수있고용이하게제공될수있는이러한화합물의다양한복합체, 염, 솔베이트, 이성체, 광학이성질체, 다형체및프로드러그및이들의콤비네이션을포함할수있다. 완화를유발하는본발명이제공하는포뮬레이션및방법은, 상기화학식 I의포르볼에스테르또는유도체화합물을적용하되, 항-종양약물로, 본설명의모든활성조제학적으로허용가능한화합물뿐만아니라, 예견할수있고용이하게제공될수있는이러한화합물의다양한복합체, 염, 솔베이트, 이성체, 광학이성질체, 다형체및프로드러그및이들의콤비네이션을포함할수있다. 면역반응을증가시키는본발명이제공하는포뮬레이션및방법은, 상기화학식 I의포르볼에스테르또는유도체화합물을적용하되, 면역자극화합물로, 본설명의모든활성조제학적으로허용가능한화합물뿐만아니라, 예견할수있고용이하게제공될수있는이러한화합물의다양한복합체, 염, 솔베이트, 이성체, 광학이성질체, 다형체및프로드러그및이들의콤비네이션을포함할수있다. Th 1사이토카인을증가시키는본발명이제공하는포뮬레이션및방법은, 상기화학식 I의포르볼에스테르또는유도체화합물을적용하되, 신규 Th 1사이토카인증가약물로, 본설명의모든활성조제학적으로허용가능한화합물뿐만아니라, 예견할수있고용이하게제공될수있는이러한화합물의다양한복합체, 염, 솔베이트, 이성체, 광학이성질체, 다형체및프로드러그및이들의콤비네이션을포함할수있다. 인간대상체를포함하는광범위한포유동물대상체는, 본발명의포뮬레이션및방법을사용한치료에적용가능하다. 이러한대상체는종양성질환및 AIDS와같은바이러스세포변형성질환을포함하는세포변형성질환또는컨디션을겪는개체를포함할수있으며, 이에한정되지않는다. 치료대상이되는대상체는, 구강병변, 피로감, 피부아구창, 발열, 식욕저하, 설사, 아프타성궤양, 흡수장애, 혈소판감소증, 체중감소, 빈혈, 림프절증대, 및미코박테리움아비움콤플렉스, 살로넬라증, 매독, 신경매독, 결핵 (TB), 바실러리안지오마토시스, 아스페르길루스증, 칸디다증, 콕시디오이데스진균증, 리스테리아증, 골반염증, 버킷림프종, 크립토코쿠스수막염, 히스포플라스마증, 카포시육종, 림프종, 시스템성비-호지킨림프종 (NHL), 프라이머리 CNS 림프종, 크립토스포리디움증, 이소스포라증, 미포자층증, 뉴모시스티스카리니폐렴 (PCP), 톡소플라즈마증, 사이토메갈로바이러스 (CMV), 간염, 헤르페스심플렉스, 헤르페스조스터, 인간파필로마바이러스 (HPV, 곤지름, 자궁경부암 ), 몰루스굼콘타기오숨, 구강백반 (OHL), 및진행성다발초점성백질뇌병증 (PML) 등의 2차컨디션에대한민감성및심각성을나타내는 HIV+ 인간및또다른포유동물대상체를포함한다. 본발명의상기방법및조성물에서, 본발명에서개시된하나이상의화학식 I 의포르볼에스테르화합물은, HIV/AIDS 및 / 또는연관된장애를치료하는데효과적인약물로서유효하게포뮬레이트되거나투여될수있다. 몇몇실시예에서, TPA는조제학적포뮬레이션및치료방법에서, 하나이상의부속치료약물과결합하거나단독으로, 효과적인약물이라는것을예시적으로증명된다. 나아가, 본발명은천연또는합성화합물의형태로추가적인조제학적으로허용가능한포르볼에스테르화합물을제공하되, 본발명에개시된화합물의복합체, 유도체, 염, 솔베이트, 이성체, 광학이성질체, 다형체및프로드러그, 및이들의콤비네이션을포함하며, 이들은 HIV/AIDS 및연관된컨디션의치료에있어서, 본발명의상기방법및조성물내의치료약물로서효과적이다. 후천성면역결핍증 (Acquired immune deficiency syndrome 또는 acquired immunodeficiency syndrome; AIDS 또는Aids) 은, 인간면역결핍바이러스 (human immunodeficiency virus; HIV) 감염에의한면역시스템의손상으로인한증상및감염의집합이다. 면역시스템의손상은, 개체에기회적감염및종양에걸리기쉽도록한다. AIDS 및 HIV의치료가바이러스의진행및증상의혹독성 (severity) 을늦추도록할수있을지라도, 알려진치료법은없다. HIV는레트로바이러스 (retrovirus) 로, CD4+ T 세포, 대식세포 (macrophage) 및수지상세포 (dendritic cell) 등과같은인간면역시스템의구성요소를예비적으로감염시킨다. CD4+ T 세포가파괴되어이들의합계 (total count) 가혈액의 200 CD4+ T 세포 / μl아래로감소하거나, 총림프구 (lymphocytes) 의비율 (fraction) 로 CD4+ T-세포의백분율이 14% 보다작게내려가면, 세포면역 (cellular immunity) 을잃고, AIDS에이르게된다

10 [0048] T h 1 및 T h 2 사이토카인균형 (balance) 에서의변화는, HIV 감염과연관된면역조절장애 (immune dysregulation) 에기여할수있다고일반적으로알려져있다. T h 1 세포는세포독성 T 세포의증식을자극하는사이토카인을생산한다. T h 2 세포는건강한사람에있어서, 체액성면역반응 (humoral immune responses) 을활성화시키는역할을하는사이토카인을생산한다. HIV 감염에서 AIDS까지의진행은 T h 2 사이토카인 IL-4, IL-5 및 IL-10 레벨의증가와함께수반된 T h 1 사이토카인 IL-2, IL-12 및 IFN-γ 레벨의감소로특징지울수있다. (Clerci, Immunology Today, v. 14, No. 3, p , 1993; Becker, Virus Genes 28:1, 5-18 (2004)). 따라서, HIV 감염에대한저항성및 / 또는 AIDS 로의진행에대한저항성은 T h 1>T h 2 우세에종속적일수있다. [0049] [0050] [0051] [0052] [0053] [0054] [0055] CD4+ 메모리 T 세포의파편은 HIV에대한전사적으로불활성인프로바이러스에통합되어저장된다. 이러한잠복성저장소는활성화되어, 특이적항원또는사이토카인에의해활성화된후에, 활성감염바이러스를생산할수있다. 이러한 CD4 메모리 T 세포의반감기는적어도 44 개월로, HIV 박멸을매우어렵게하고, 말초혈액 (peripheral blood) 에서 HIV 레벨을검출할수없을지라도, 항레트로바이러스치료를연장하여지속하도록한다. 프로스트라틴 (prostratin), 12-데옥시포르볼 13-아세테이트, 비-종양촉진포르볼에스테르 (a non-tumor promoting phorbol ester) 는, 세포파괴 (killing) 및바이러스복제 (viral replication) 를유발하는 HIV 억제에대한어느정도효과가있다는것이알려졌다. 프로스트라틴은, 잠재적으로-감염된세포주에서는바이러스성발현이활성화되었지만, 만성적으로-감염된세포주에서는효과가매우적거나거의없었던것으로알려졌다. (Gulakowski, et al., Antiviral Research v. 33, (1997); Williams, et al., JBC v. 279, No. 40, P (2004)). 프로스트라틴은 TPA와같은종양-촉진포르볼에스테르와구별되는독특한생물학적활성을가지는단백질키나아제C 활성제 (protein kinase C activators) 의독특한 (distinct) 서브클래스 (subclass) 를대표한다. 또한, 본발명의방법에따른화학식 I의포르볼에스테르, 특히 TPA로치료할수있는포유동물대상체는, 급성골수성백혈병 (AML), 만성골수성백혈병 (CML), 만성골수성백혈병아세포기, 골수이형성증, 골수증식성증후군을포함하는백혈병과같은혈액종양 / 골수장애 ; 호지킨및비-호지킨림프종을포함하는림프종 ; 피하선암 ; 난소기형암종 ; 및전립선암을포함하는고형및비-고형암을포함하는종양성질환을가지는포유동물대상체를포함하며, 이에한정되지않는다. 몇몇실시예에서, 이러한암은재발성또는난치성일수있다. 본발명의상기방법및조성물에서, 본발명에서개시된하나이상의화학식 I의포르볼에스테르화합물은, 종양성질환을치료하는데효과적인약물로서유효하게포뮬레이트되거나투여될수있다. 몇몇실시예에서, TPA는하나이상의부속치료약물과결합하거나단독으로, 효과적인약물이라는것을예시적으로증명된다. 나아가, 본발명은천연또는합성화합물의형태로추가적인조제학적으로허용가능한포르볼에스테르화합물을제공하되, 본발명에개시된화합물의복합체, 유도체, 염, 솔베이트, 이성체, 광학이성질체, 다형체및프로드러그, 및이들의콤비네이션을포함하며, 이들은종양성질환및이러한질환의증상에대한치료에있어서, 본발명의상기방법및조성물내의치료약물로서효과적이다. 종양성질환은비정상적이고, 제어할수없는세포분열에의해유발된종양또는어떠한성장이며 ; 이것은림프계또는혈류를통해신체의다른부위로전이될수있다. 이러한성장은악성또는양성, 고형또는비고형일수있다. 몇몇실시예에서, 종양성질환은급성골수성백혈병과같은혈액종양 (hematological neoplasm)/ 골수질환일수있다. AML(acute myelogenous leukemia, acute myeloblastic leukemia, acute granulocytic leukemia, 및 acute nonlymphocytic leukemia라고도불림 ) 은급성백혈병중성인들에게가장일반적인타입이다. AML에서, 골수에의해생성된줄기세포 (stem cells) 는일반적으로골수아세포 (myeloblasts 또는 myeloid blasts) 라고불리는미숙백혈구로성장한다. AML을겪는개체에서, 이러한골수아세포는건강한백혈구로성숙하지않는다. 또한, AML을앓는개체의줄기세포는비정상적인적혈구또는혈소판으로성장한다. 정상적인혈구가부족하면, 감염, 빈혈, 및쉬운출혈의발생률이증가한다. 또한, 백혈병세포는혈액을중추신경계 ( 뇌및척수 ), 피부, 및잇몸을포함하는신체의다른부위의바깥으로배출시킬수있다. AML을가지는환자의평균연령은 64세를넘는다. 기준 (standard) 화학요법으로 AML 치료를받는 60세이상의환자들은 20% 보다작은완화율을보인다. 또한, 혈액질환 (hematologic disorder) 또는백혈병유발화학

11 요법 (leukemogenic chemotherapy)/ 방사선치료 (radiation therapy) 가선행된후에 AML 이진행된환자들도유 사하게열악한결과를보인다. [0056] 포르볼은디페르핀의키글리안과의천연의, 식물-유래의폴리시클릭알코올 (polycyclic alcohol) 이다. 이것은 1934년에, Croton tiglium의종자에서유래된파두유의가수분해생성물에서최초로분리되었다. 이것은대부분의극성유기용매와물에서잘용해된다. 포르볼의에스테르는하기의화학식 I의일반적인구조를가진다. [0057] [0058] 화학식 I [0059] 상기 R 1 및 R 2 는수소 ;, 상기알킬그룹은 1 내지 15 개의탄소원자를포함하고,,,, 및이들의치환 유도체로이루어진그룹에서선택되고, R 3 는수소, 또는이들의치환유도 체일수있다. [0060] " 저알킬 (lower alkyl)" 또는 " 저알케닐 (lower alkenyl)" 은 1-7 탄소원자를포함하는부분 (moieties) 을의미 할수있다. 상기화학식 I 의화합물에서, 상기알킬또는알케닐그룹은직쇄또는분쇄형 (straight or branched chain) 일수있다. 몇몇실시예에서, R 1 및 R 2 중어느하나또는모두는긴체인 (long chain) 탄소 부분이다 ( 예를들어, 화학식 I 은데카노에이트또는미리스테이트임 ). [0061] [0062] [0063] 상기화학식의상기알킬, 알케닐, 페닐및벤질그룹은비치환되거나할로겐, 바람직하게는, 클로린, 플루오린또는브로민 ; 니트로 ; 아미노및이와유사한타입의라디칼로치환된것일수있다. 포르볼에스테르의유기및합성형태는, croton tiglium과같은약초원천 (herbal sources) 으로부터의추출물또는조제품을포함하며, 이들은본발명의실시예들에서사용되는포르볼에스테르 ( 또는포르볼에스테르유사체, 연관화합물및 / 또는유도체 ) 를포함하는유용한조성물에해당된다. 본발명의실시예들에서사용되는유용한포르볼에스테르및 / 또는관련화합물은대체로화학식 I로표시되는구조를가질것이다. 뿐만아니라, 이러한화합물들과기능적으로동등한유사체, 복합체, 콘주게이트 (conjugates), 및유도체도본발명의범위내에서당업자에의의해인식될것이다. 더욱구체적인실시예에서, 상기화학식 I 에따른예시적인구조적변형을선택하여, HIV 및 AIDS 및 / 또는종양성질환을예방및 / 또는치료하기위한유용한후보화합물을제공할수있다. 이때, R 1 및 R 2 중적어도 하나는수소외의다른것이고, R 3 는수소, 및이들의치환유도체로이루어 진그룹에서선택된것이다. 또다른실시예에서, R 1 및 R 2 중어느하나는

12 이고 ; R 1 중 R 2 나머지하나는 이고, R 3 는 수소이다. [0064] HIV 및 AIDS 및 / 또는종양성질환, 특히 AML 과같은세포변형성질환을치료하는데유용한화학식 I 의포르 볼에스테르화합물의일실시예는, 하기화학식 II 로나타낸포르볼 12- 미리스테이트 -13- 아세테이트 (PMA 또 는 12-O- 테트라데카노일 (tetradecanoyl)- 포르볼 -13- 아세테이트 (TPA) 로도알려짐 ) 에서확인할수있다. [0065] [0066] [0067] [0068] [0069] [0070] 화학식 II 본발명의부가적인유용한포르볼에스테르및관련화합물및상기포뮬레이션내의유도체및방법은, 또다른조제학적으로허용가능한상기화합물들의활성염, 뿐만아니라상기화합물들의활성이성체, 광학이성질체, 다형체, 글리코실화된유도체, 솔베이트, 수산화물, 및 / 또는프로드러그를포함할수있으며, 이에한정되지않는다. 본발명의유용한포르볼에스테르및관련화합물및상기포뮬레이션내의유도체및방법의또다른예시적형태는포르볼 13-부티레이트 ; 포르볼 12-데카노에이트 ; 포르볼 13-데카노에이트 ; 포르볼 12,13-디아세테이트 ; 포르볼 13,20-디아세테이트 ; 포르볼 12,13-디벤조에이트 ; 포르볼 12,13-디부티레이트 ; 포르볼 12,13-디데카노에이트 ; 포르볼 12,13-디헥사노에이트 ; 포르볼 12,13-디프로피오네이트 ; 포르볼 12-미리스테이트 ; 포르볼 13-미리스테이트 ; 포르볼 12,13,20-트리아세테이트 ; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트 ; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트 20-아세테이트 ; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트 ; 12- 데옥시포르볼 13-이소부티레이트-20-아세테이트 ; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트 ; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트 20-아세테이트 ; 12-데옥시포르볼 13-테트라데카노에이트 ; 포르볼 12-티글리에이트 13-데카노에이트 ; 12-데옥시포르볼 13-아세테이트 ; 포르볼 12-아세테이트 ; 및포르볼 13-아세테이트를포함하되, 이에한정되지않는다. 본발명내에서세포변형성질환을치료하는조성물은, 화학식 I의포르볼에스테르화합물의항-AIDS 유효량을포함하는 HIV- 및 AIDS-치료조성물을포함하며, 이들은포유동물대상체내에서 HIV, AIDS, 및 / 또는기회적감염을포함하는 HIV-관련증상의치료및 / 또는예방에효과적이다. 활성화합물의 " 항-HIV", " 항- AIDS", 또는 "AIDS 치료 " 유효량은, 하나또는다수의단위투여량형태로, 치료적개입 (therapeutic intervention) 의특정기간에걸쳐, 대상체내의하나이상의 AIDS 증상이측정가능하게경감되는것및 / 또는대상체내의하나이상의 HIV 감염에관련된증상또는컨디션이경감되는것에치료학적으로효과적이다. 실시예내의본발명의상기조성물은, HIV 감염에취약한인간및또다른포유동물대상체의 AIDS의증상또는다른 HIV-관련컨디션을경감시키는치료방법에효과적이다. 또한, 본발명내에서세포변형성질환을치료하는조성물은, 화학식 I의포르볼에스테르또는유도체의항 -종양성유효량을포함하는화학요법의화합물을포함할수있으며, 이는포유동물대상체내에서암에의해유발된증상또는악성종양의유지및치료에효과적이다. 활성화합물의 " 화학요법의 ", " 항-종양 ( 항-종양 )", " 암치료 ", " 세포사멸유발 (apoptosis inducing)", " 완화유발 (remission inducing)", " 완화유지 (remission maintaining)" 유효량은, 하나또는다수의단위투여량형태로, 치료적개입의특정기간에걸쳐, 대상체내의하나이상의악성종양이측정가능하도록경감되는것및 / 또는대상체내의하나이상의악성종양에관련된증상또는컨디션이경감되는것에치료학적으로효과적이다. 실시예내의본발명의상기조성물은악성종양에취약한인간및또다른포유동물대상체의종양성질환관련컨디션의증상을경감시키는치료방법에효과적이다. 화학요법및 HIV 치료를포함하는세포변형성질환치료에대한, 본원발명의조성물은, 대체로화학식 I의

13 포르볼에스테르화합물의유효량또는단위복용량포함하며, 이는안정성, 전달 (delivery), 흡수, 반감기, 효능 (efficacy), 약물동력학 (pharmacokinetics), 및 / 또는약력학 (pharmacodynamics) 을향상시키거나, 부작용을감소시키거나, 조제학적이용에또다른이점을제공할수있는하나이상의조제학적으로허용가능한캐리어 (carriers), 첨가제 (excipients), 비히클 (vehicles), 유화제 (emulsifiers), 안정제 (stabilizers), 방부제 (preservatives), 버퍼 (buffers), 및 / 또는또다른첨가제 (additives) 로포뮬레이트될수있다. 화학식 I의포르볼에스테르화합물또는관련된또는유도체화합물의유효량 ( 예를들어, TPA또는 TPA의선택된조제학적으로허용가능한염, 이성체, 광학이성질체, 솔베이트, 다형체및 / 또는프로드러그의유효농도 / 양을포함하는단위복용량 ) 은, 임상적그리고환자-특이적인자에따라, 당업자에의해용이하게결정될수있다. 인간을포함하는포유동물대상체에투여하기위한활성화합물의적절한유효단위복용량은, 10 내지 1500μg, 20 내지 1000μg, 25 내지 750μg, 50 내지 500μg, 또는 150 내지 500μg의범위일수있다. 몇몇실시예에서, 화학식 I 의포르볼에스테르화합물또는관련된또는유도체화합물의세포변형성질환을치료하는유효복용량은, 더좁은범위, 예를들어, 10 내지 25μg, 30 내지 50μg, 75 내지 100μg, 100 내지 250 μg, 또는 250 내지 500 μg의범위내에서선택될수있다. 이러한그리고또다른유효단위복용량은한번의복용, 또는매일, 매주또는매달마다여러번의복용의형태로투여될수있다. 예를들어, 1 내지 5, 또는 2 내지 3을포함하는복용계획으로, 매일, 매주, 또는매달투여될수있다. 일실시예에서, 10 내지 30 μg, 30 내지 50 μg, 50 내지 100 μg, 100 내지 250 μg, 또는 250 내지 500 μg의복용량은, 하루에 1, 2, 3, 4, 또는 5 회투여될수있다. 더욱구체적인실시예에서, 50 내지 100μg, 100 내지 250μg, 250 내지 400 μg, 또는 400 내지 600μg의복용량은, 하루에한번또는두번투여될수있다. 또다른실시예에서, 50 내지 100μg, 100 내지 250μg, 250 내지 400 μg, 또는 400 내지 600μg의복용량은, 하루걸러서 (every other day) 투여될수있다. 또다른실시예에서, 복용량은체중에기초하여계산되고, 예를들어, 하루에약 0.5μg /sq.m 내지약 100 μg /sq.m, 하루에 1μg /sq.m 내지약 75μg /sq.m, 하루에 1μg /sq.m 내지약 50μg /sq.m, 하루에 2μg /sq.m 내지약 50μg /sq.m, 하루에 2μg /sq.m 내지약 30μg /sq.m, 또는하루에 3μg /sq.m 내지약 30μg /sq.m의양이투여될수있다. [0071] [0072] [0073] [0074] 화학식 I의포르볼에스테르화합물의세포변형성질환의치료유효량을포함하는본원발명의조성물의전달모드, 시간, 양 (AIDS 치료, HIV 예방, HIV 치료, HIV 저장고활성, Th1 사이토카인증가, ERK 인산화반응유발, 화학요법의, 항-종양, 암치료, 완화유발, 완화유지, 세포사멸유발유효량 ) 은, 몸무게, 나이, 성별, 및개인의컨디션과같은인자에종속되는개체근거 (individual basis), 세포변형성질환및 / 또는관련된증상의심각성, 상기투여가예방적인것인지아니면치료적인것인지, 및약물전달, 흡수, 반감기를포함하는약물동력학, 및효능에영향을주는것으로알려진또다른인자들에근거하여일반적으로조절될것이다. 본원발명의즉각의 (instant) 세포변형성질환치료 ( 또는, "AIDS 치료 ", "HIV 치료 ", "HIV 예방 ", "HIV 저장고활성 ", 또는 "Th1 사이토카인증가 ", "ERK 인산화반응유발 ", " 화학요법의 ", " 항-종양 ", " 암치료 ", " 완화유발 ", " 완화유지 ", " 세포사멸유발 ", " 완화유발 ", " 완화유지 ") 포뮬레이션을위한유효복용또는수회-복용치료계획을일반적으로선택하여, 대상체내에서 AIDS 또는암과같은종양성질환및관련된기회적질환을포함하는세포변형성질환의증상을실질적으로예방하거나경감시키는것, 및 / 또는대상체내에서 AIDS 또는암과같은종양성질환과연관된하나이상의증상을실질적으로예방하거나경감시키는것에필수적이고충분한최소복용계획에접근시킨다. 복용및투여프로토콜은며칠또는일주이상또는몇년의코스에걸친반복복용치료를종종포함할것이다. 또한, 유효치료계획은, 며칠, 몇주, 몇달또는몇년까지의코스에걸쳐지속되어하루또는하루에멀티-도즈 (multi-dose) 를투여하는예방복용량을포함할수있다. 다양한분석및모델시스템에용이하게적용하여, 세포변형성질환치료에대한치료학적효과를판단할수있다. 예를들어, HIV 또는 AIDS 치료에대한효과는, 당업자에게알려진다른효과판단방법중에서, 바이러스부하의감소, CD4 수의증가, CD3 수의증가, IL-2 및 IFN 생산의증가, IL-4 및 IL-10 생산의감소, 및 AIDS의증상의감소또는소멸로나타낼수있다. 본발명의조성물및방법의유효성은, 예를들어, HIV 항체, 바이러스부하, CD4 레벨, CD8 수, 및 CD3 수에대한혈액테스트를통해증명될수있다. CD4의정상적인레벨은, 일반적으로마이크로리터 (microliter) 당 600및 1200사이이거나, 림프구의 32 내지 68% 일수있다. 350 보다작은 CD4수를가지는개체는약회된면역시스템을가진다. 200 보다작은 CD4수를가지는개체는 AIDS에걸린것으로간주한다. 건강한개체의 CD8 레벨은일반적으로마이크로리터당 150에서 1000 사이이다. 건강한개체의 CD3 레벨은일반적으로마이크로리터당약 885 내지 2270사이이다. CD3, CD4 및 CD8 세포의레벨은, 예를들어유세포측정기 (flow cytometry)

14 를이용하여측정할수있다. 본원발명의조성물의유효량은, CD3, CD4 및 CD8 양성세포의레벨을적어도 10%, 20%, 30%, 50% 또는더큰감소까지, 75 내지 90%, 또는 95% 또는그이상까지증가시킬수있다. 또한, 유효량은개인의 CD3, CD4 및 CD8 프로파일 (profile) 을당단백질 (glycoprotein) 의각타입에대한최적카테고리로이동시킬수있다. [0075] 개체는베타 2 - 마이크로글로불린 (beta 2 -microglobulin; beta 2 -M) 테스트를이용하여평가할수있다. 베타 2 - 마 이크로글로불린은, 세포가죽을때혈액내로분비되는단백질이다. 베타 2 -M 혈액레벨의증가를이용하여, AIDS 의진행을측정할수있다. 본발명의조성물의유효량은베타 2 -M 의양이증가하는것을중지시키거나 감소시킬수있도록할것이다. [0076] [0077] [0078] [0079] [0080] [0081] 또한, 유효성은전혈구측정 (complete blood count; CBC) 을이용하여증명할수있다. CBC에서취득된측정치는백혈구수 (white bloode count; WBC), 적혈구수 (red blood count; RBC), 적혈구 (red cell) 분포폭, 헤마토크리트 (hematocrit), 및헤모글로빈의양을포함한다. CBC에서특정 AIDS-관련표시는낮은헤마토크리트, 혈소판수의급감, 및낮은레벨의호중구를포함한다. 본발명의조성물의유효량은, 전혈구수에서측정된레벨을 10%, 20%, 30%, 50% 또는더큰증가까지, 75 내지 90%, 또는 95% 또는그이상까지증가시킬것이다. 유효량은개인의혈단백질 (blood protein) 을단백질의각타입에대한최적카테고리로이동시킬것이다. 또한, 본원발명의조성물및방법의유효성은, 예를들어, 구강병변, 피로감, 피부아구창, 발열, 식욕저하, 설사, 아프타성궤양, 흡수장애, 혈소판감소증, 체중감소, 빈혈, 및림프절증대를포함하되, 이에한정되지않는 HIV 또는 AIDS의증상의감소로나타낼수있다. 또한, 본원발명의조성물및방법의유효성은, 미코박테리움아비움콤플렉스, 살로넬라증, 매독, 신경매독, 결핵 (TB), 바실러리안지오마토시스, 아스페르길루스증, 칸디다증, 콕시디오이데스진균증, 리스테리아증, 골반염증, 버킷림프종, 크립토코쿠스수막염, 히스포플라스마증, 카포시육종, 림프종, 시스템성비-호지킨림프종 (NHL), 프라이머리 CNS 림프종, 크립토스포리디움증, 이소스포라증, 미포자층증, 뉴모시스티스카리니폐렴 (PCP), 톡소플라즈마증, 사이토메갈로바이러스 (CMV), 간염, 헤르페스심플렉스, 헤르페스조스터, 인간파필로마바이러스 (HPV, 곤지름, 자궁경부암 ), 몰루스굼콘타기오숨, 구강백반 (OHL), 및진행성다발초점성백질뇌병증 (PML) 등의 2차또는기회적컨디션에대한민감성및심각성의감소로나타낼수있다. 나아가, 유효성은 HIV-감염대상체내에서탐지가능한 HIV의감소 ; 정상 T 세포수의유지 ; 또는정상 p24 항원레벨의유지등으로나타낼수있다. 또한, 종양성질환의치료에대한유효성은수많은방법들, 예를들어, ECOG 수행도 (ECOG Performance Scale), 카르노프스키수행도 (Karnofsky Performance Scale), 혈구의현미경조사, 골수천자 (bone marrow aspiration) 및생체검사 (biopsy), 세포유전분선 (cytogenetic analysis), 생체검사, 면역표현형분석 (immunophenotyping), 혈액의화학적분석 (blood chemistry studies), 전혈구분석, 림프절생체검사, 말초혈액도말 (peripheral blood smear), 종양또는레전 (lesion) 의시각적분석 (visual analysis), 또는당업자에게알려진악성종양및종양의진행에대한평가및 / 또는진단하는이외의또다른방법등에의해측정될수있으며, 이에한정되지않는다. 예를들어, 혈액종양 / 골수질환치료에있어서, 본발명의조성물및방법의유효성은, 예를들어, 절대호중구수 (absolute neutrophil count; ANC) 를이용하여평가할수있다. 정상적인 ANC는 1,500 내지 8,000/mm 3 사이이다. 혈액종양 / 골수질환을앓고있는개체는 1500/mm 3 보다낮은 ANC를빈번하게가지고, 심지어 500/mm 3 보다낮은레벨에이를수있다. 본발명의조성물및방법의유효량은, 개체의 ANC 를 10%, 20%, 30%, 50% 또는더큰증가까지, 75 내지 90%, 또는 95% 또는그이상까지증가시킬것이다. 유효량은 ANC 이 1500/mm 3 를넘도록증가시킬수있다. [0082] 또한, 혈액종양 / 골수질환치료에있어서, 본발명의조성물및방법의유효성은, 예를들어, 혈소판수를 이용하여평가할수있다. 혈소판수는정상적으로마이크로리터 ( 10-6 /Liter) 당 150,000 내지 450,000 혈소판사이이다. 혈액종양 / 골수질환을앓고있는개체는마이크로리터당 100,000 미만의혈소판수를가질수있다. 본발명의조성물및방법의유효량은, 개체의혈소판수를 10%, 20%, 30%, 50% 또는더큰증가까지, 75 내지 90%, 또는 95% 또는그이상까지증가시킬것이다. 유효량은혈소판레벨이마이크로리터당 100,000을넘도록증가시킬수있다

15 [0083] [0084] [0085] [0086] [0087] [0088] 혈액종양 / 골수질환치료에있어서, 본발명의조성물및방법의유효성은, 예를들어, 골수아세포의수를측정하여평가할수있다. 골수아세포는, 정삭적으로골수내에서세포의 5% 보다적게나타나나, 순환혈액 (circulating blood) 에서는존재하지않아야한다. 본발명의조성물및방법의유효량은골수아세포의수를 10%, 20%, 30%, 50% 또는그이상까지, 75 내지 90%, 또는 96% 또는그이상까지감소시킬것이다. 유효량은골수아세포를 5% 보다작도록감소시킬수있다. 또한, 혈액종양 / 골수질환치료에있어서, 본발명의조성물및방법의유효성은, 아우에르소체 (Auer rod s) 의존재에대한골수아세포를조사함으로써평가할수있다. 본발명의조성물의유효량은육안으로보이는아우에르소체의수를 10%, 20%, 30%, 50% 또는그이상까지, 75 내지 90%, 또는 96% 또는그이상까지감소시켜아우에르소체의완전한제거에이를때까지감소시킬것이다. 본발명의조성물및방법의유효성은, 빈혈 ; 만성피로 ; 코, 잇몸, 및피부내의출혈과같은과도하거나빈번한출혈 ; 빈번한타박상, 특히, 외관상원인이없는타박상 ; 숨가쁨 ; 점상출혈 ; 회귀열 ; 잇몸부음 ; 상처의더딘치유 ; 골및관절불편감 ; 재발간염 ; 체중감소 ; 가려움증 ; 수면중식은땀 ; 림프절종창 ; 발열 ; 복부통증및불편감 ; 시력장애 ; 기침 ; 식욕저하 ; 흉부통증 ; 목넘김곤란 ; 얼굴, 목및상지부의종창 ; 특히, 야간에, 잦은배뇨욕구 ; 배뇨시작또는배뇨제지곤란 ; 약하거나중단된요흐름 ; 배뇨시통증또는작열감 ; 발기곤란 ; 사정시통증 ; 소변또는정액내혈액 ; 허리, 둔부, 또는상부대퇴부의잦은통증또는뻣뻣함 ; 및허약등을포함하되, 이에한정되지않는종양성질환을앓는대상체의증상의감소로나타낼수있다. 본발명에개시된지시 (indicated) 컨디션각각에대하여, 대상체내의세포변형성질환, 또는관련된질환또는컨디션에의한또는연관된하나이상의증상에대하여, 플라시보-치료 (placebo-treated) 또는다른적절한대조대상체와비교하여테스트대상체는또는그이상까지의감소, 75 내지 90%, 또는 96% 또는그이상까지의감소를나타낼것이다. 본발명의또다른관점에서, 결합적인 (combinatorial) 세포변형성질환치료 (AIDS 치료, HIV 예방, HIV 치료, HIV 저장소활성화, Th1 사이토카인증가, ERK 인산화반응유발, 세포사멸유발, 화학요법의, 항-종양, 암치료, 완화유발, 완화유지 ) 포뮬레이션및대등한투여방법을제공하되, 이들은화학식 I의포르볼에스테르화합물의유효량과, 화학식 I의포르볼에스테르화합물과결합적으로포뮬레이트되거나대응하게투여되는하나이상의 2차또는부속적인약물에적용되어, 결합된, 복합-활성 (multi-active) 세포변형성질환을치료하는조성물또는대등한치료방법을수득한다. 본발명에서예시적인결합포뮬레이션및대등한치료방법은, 화학식 I의포르볼에스테르를선택된결합포뮬레이션또는대등한치료계획에서, 목적된 ( 또는연관된 ) 질환, 컨디션및 / 또는증상의치료또는예방에유용한하나이상의 2차항-AIDS 약물, 또는하나이상의부속치료약물과결합하여적용한다. 본원발명의대부분의결합포뮬레이션및대등한치료방법에대하여, 화학식 I의포르볼에스테르화합물또는관련또는유도체화합물을하나이상의 2차또는부속치료약물과결합되어포뮬레이트되거나대등하게투여하여, 대상체내에서 HIV/AIDS 및 / 또는기회적또는 2차질환또는컨디션의하나이상의증상을치료하는데결합적으로효과적이거나대등하게유용한결합포뮬레이션또는대등한치료방법을획득한다. 본발명에서예시적인결합포뮬레이션및대등한치료방법은, 화학식 I의포르볼에스테르화합물을, 예를들어, 사퀴나비르, 인디나비르, 리토나비르, 넬피나비르, 아타자나비르, 다루나비르, 포삼프레나비르, 티프라나비르및암프레나비르을포함하되, 이에한정되지않는프로테아제억제제 ; 지도뷰딘, 디다노신, 스타뷰딘, 라미뷰딘, 잘시타빈, 엠트리시타빈, 테노포비르디소프록실퓨마레이트, AVX754 및아바카비르를포함하되, 이에한정되지않는뉴클레오사이드역전사억제제 ; 네바리핀, 델라비르딘, 칼라놀리드 A, TMC125 및에파비렌즈를포함하되, 이에한정되지않는비-뉴클레오사이드역전사억제제 ; 에파비렌즈 / 엠트리시타빈 / 테노포비르디소프록실퓨마레이트, 라미뷰딘 / 지도뷰딘, 아바카비르 / 라미뷰딘, 아바카비르 / 라미뷰딘 / 지도뷰딘, 엠트리시타빈 / 테노포비르디소프록실퓨마레이트, 술파메톡사졸 / 트리메토프림, 및로피나비르 / 리토나비르를포함하되이에한정되지않는콤비네이션약품 ; 엔푸비르티드, AMD070, BMS , 포지뷰딘티독실, GSK-873,140, PRO 140, PRO 542, 펩티드 T, SCH-D, TNX-355, 및 UK-427, 857을포함하되, 이에한정되지않는유입및융합억제제 ; 아시클로비르, 아데포비르디피복실, 알데스루킨, 암포테리신 b, 아시스로마이신, 칼슘하이드록실아파타이트, 클라리스로마이신, 독소루비신, 드로나비놀, 엔테카비르, 에포에틴알파, 에토포시드, 플루코나졸, 간시클로비르, 이뮤노글로불린, 인터페론알파-2, 이소니아지드, 이트라코나졸, 메게스트롤, 파클리탁셀, 페그인터페론알파-2, 펜타미딘, 폴리-1-락틱산, 리바비린, 리파뷰틴, 리팜핀, 소마트로핀, 테스토스테론, 트리메트렉세이트, 및발간시클로비르를포함하되, 이에한정되지않는 AIDS 및 HIV와연관된또다른컨디션및

16 기회적감염을위한치료제 ; GS 9137, MK-0518를포함하되이에한정되지않는인터그라제억제제 ; BMS , C31G, 카르보폴 974P, 카라지난, 셀룰로오스술페이트, 시아노비린-N, 덱스트란술페이트, 히드록시에틸셀룰로오스, PRO 2000, SPL7013, 테노포비르, UC-781 및 IL-2를포함하되이에한정되지않는살균제중에서선택된하나이상의 2차또는부속치료약물과결합하여적용한다. [0089] [0090] [0091] [0092] 또다른예시적인결합포뮬레이션및대등한치료방법은, 화학식 I의포르볼에스테르를선택된결합포뮬레이션또는 coordinate 치료계획에서, 목적된 ( 또는연관된 ) 질환, 컨디션및 / 또는증상의치료또는예방에유용한하나이상의 2차항-종양약물, 또는하나이상의부속치료약물과결합하여적용할수있다. 본원발명의대부분의결합포뮬레이션및대등한치료방법에대하여, 화학식 I의포르볼에스테르화합물또는관련또는유도체화합물을하나이상의 2차또는부속치료약물과결합되어포뮬레이트되거나대등하게투여하여, 대상체내에서종양성질환및 2차질환또는컨디션의하나이상의증상을치료하는데결합적으로효과적이거나대등하게유용한결합포뮬레이션또는대등한치료방법을획득한다. 본발명에서예시적인결합포뮬레이션및대등한치료방법은, 화학식 I의포르볼에스테르화합물을, 예를들어, 화학요법의약물, 항-염증성약물, 독소루비신, 비타민 D3, 시타라빈, 시토신아라비노시드, 다우노루비신, 시클로포스파미드, 겜투주맙오조가미신, 이다루비신, 메르캅토퓨린, 미톡산트론, 티오구아닌, 알데스루킨, 아스파라기나제, 카르보플라틴, 에토포시드포스페이트, 플루다라빈, 메토트렉세이트, 에토포시드, 덱사메타손, 및클로린마그네슘트리살리실레이트중에서선택된하나이상의 2차또는부속치료약물과결합하여적용할수있다. 또한, 부속또는 2차치료는방사선치료, 호르몬치료및수술등을이용할수있으며, 이에한정되지않는다. 몇몇실시예에서, 본발명은세포변형성질환치료 (AIDS 치료, HIV 예방, HIV 치료, HIV 저장소활성화, Th1 사이토카인증가, ERK 인산화반응유발, 세포사멸유발, 화학요법의, 항-종양, 암치료, 완화유발, 완화유지 ) 포뮬레이션을제공하되, 이는세포변형성질환치료활성을가지는하나이상의부속적약물및포르볼에스테르를포함한다. 이러한결합포뮬레이션내에서, 세포변형성질환치료활성을가지는하나이상의부속적약물및화학식 I의포르볼에스테르는, 세포변형성질환치료 (AIDS 치료, HIV 예방, HIV 치료, HIV 저장소활성화, Th1 사이토카인증가, 세포사멸유발, ERK 인산화반응유발, 화학요법의, 항-종양, 암치료, 완화유발, 완화유지 ) 유효량내의결합포뮬레이션내에, 단독으로또는결합하여존재할것이다. 몇몇실시예에서, 화학식 I의포르볼에스테르화합물및비-포르볼에스테르약물은세포변형성질환치료량 ( 즉, 대상체내에서검출가능한증상완화를단독으로유도할단독복용량 (singular dosage)) 내에각각존재할것이다. 또는, 상기결합포뮬레이션은, 서브-치료의단독복용량에서화학식 I의포르볼에스테르화합물및비-포르볼에스테르약물중어느하나또는둘모두를포함할수있으며, 둘모두의약물을포함하는상기결합포뮬레이션은, 세포변형성질환또는컨디션증상의경감반응을나타내는데전체적으로 (collectively) 유효한두약물의결합복용량의특징을가진다. 따라서, 화학식 I의포르볼에스테르및비- 포르볼에스테르약물중어느하나또는둘모두는, 서브-치료복용량에서, 투여프로토콜로투여되거나, 포뮬레이션내에존재할수있다. 그러나, 포뮬레이션또는방법내에서전체적으로, 이들은대상체내에서세포변형성질환의증상에서탐지가능한감소를나타낸다. 예를들어, 몇몇실시예에서, 결합포뮬레이션은, 또다른콤비네이션중에서, 포르볼에스테르와결합된고활성항바이러스요법프로토콜 (HAART 프로토콜 ) 로부터의하나이상의화합물을포함할수있다. 또다른결합포뮬레이션은, 예를들어, 포르볼에스테르및 / 또는 AIDS의기회적감염치료에효과적인화합물뿐만아니라 HAART 프로토콜로부터의화합물을포함할수있다. 또다른몇몇실시예에서, 결합포뮬레이션은하나이상의추가적인화학요법의약물을포함할수있다. 본발명의동등한투여방법을실행하기위해, 화학식 I의포르볼에스테르화합물을, 본발명에서고려된하나이상의 2차또는부속치료약물로, 동등한치료프로토콜에서동시또는순차로투여할수있다. 따라서, 몇몇실시예에서, 화합물은상술한바와같이, 별개의포뮬레이션또는결합포뮬레이션을이용하여 ( 즉, 화학식 I의포르볼에스테르화합물또는관련된또는유도체화합물, 및비-포르볼에스테르치료약물을모두포함 ), 본발명에서고려된비-포르볼에스테르약물, 또는다른어떤 2차또는부속치료약물과함께동등하게투여된다. 이러한동등한 (coordinate) 투여는, 동시또는어떤순서든지 (in either order) 순차로수행될수있으며, 단하나또는둘모두 ( 또는전부 ) 의활성치료약물 (active therapeutic agents) 이이들의생물학적활성을개별적으로및 / 또는종합적으로발휘하는동안의기간를가질수있다. 본발명의일실시예에서, 이러한대등한치료방법은, 예를들어, 다양한고활성항바이러스요법프로토콜 (HAART 프로토콜 ) 로부터유래되거나이에뒤따르는것일수있고, 또다른콤비네이션중에서, 화학식 I의포르볼에스테르와함께두개의뉴클레오사이드유사역전사억제제에하나이상의프로테아제억제제또는비 -뉴클레오사이드유사역전사억제제를더하는등의계획을포함할수있으며, 이에한정되지않는다. 또다른대등한치료방법은, 예를들어, 포르볼에스테르및 / 또는기회적감염을위한치료제뿐만아니라프로토

17 콜로부터의화합물을포함할수있다. 이러한대등한치료방법모두의특징적인관점은, 화학식 I의포르볼에스테르화합물이적어도몇몇의활성을나타내는것이며, 이것은상보적인 (complementary) AIDS 증상감소와관련된좋은 (favorable) 임상적반응, 또는 2차또는부속치료약물에의해제공되는뚜렷한임상적반응을획득한다. 종종, 2차또는부속치료약물을포함하는화학식 I의포르볼에스테르화합물의상기대등한투여는, 대상체내에서, 화학식 I의포르볼에스테르화합물, 또는 2차또는부속치료약물의단독투여시나타난치료효과를넘어서는향상된치료또는예방결과를획득할것이다. 이러한능력은직접적효과, 뿐만아니라간접적효과모두에대하여예상된다. [0093] [0094] [0095] [0096] [0097] 몇몇실시예에서, 화학식 I의포르볼에스테르화합물은, 예를들어, 사퀴나비르, 인디나비르, 리토나비르, 넬피나비르, 아타자나비르, 다루나비르, 포삼프레나비르, 티프라나비르및암프레나비르를포함하되, 이에한정되지않는프로테아제억제제 ; 지도뷰딘, 디다노신, 스타뷰딘, 라미뷰딘, 잘시타빈, 엠트리시타빈, 테노포비르디소프록실퓨마레이트, AVX754 및아바카비르를포함하되, 이에한정되지않는뉴클레오사이드역전사억제제 ; 네바리핀, 델라비르딘, 칼라놀리드 A, TMC125 및에파비렌즈를포함하되, 이에한정되지않는비-뉴클레오사이드역전사억제제 ; 에파비렌즈 / 엠트리시타빈 / 테노포비르디소프록실퓨마레이트, 라미뷰딘 / 지도뷰딘, 아바카비르 / 라미뷰딘, 아바카비르 / 라미뷰딘 / 지도뷰딘, 엠트리시타빈 / 테노포비르디소프록실퓨마레이트, 술파메톡사졸 / 트리메토프림, 및로피나비르 / 리토나비르를포함하되, 이에한정되지않는콤비네이션약품 ; 엔푸비르티드, AMD070, BMS , 포지뷰딘티독실, GSK-873,140, PRO 140, PRO 542, 펩티드 T, SCH-D, TNX- 355, 및 UK-427, 857를포함하되, 이에한정되지않는유입및융합억제제 ; 아시클로비르, 아데포비르디피복실, 알데스루킨, 암포테리신 b, 아시스로마이신, 칼슘하이드록실아파타이트, 클라리스로마이신, 독소루비신, 드로나비놀, 엔테카비르, 에포에틴알파, 에토포시드, 플루코나졸, 간시클로비르, 이뮤노글로불린, 인터페론알파-2, 이소니아지드, 이트라코나졸, 메게스트롤, 파클리탁셀, 페그인터페론알파-2, 펜타미딘, 폴리- 1-락틱산, 리바비린, 리파뷰틴, 리팜핀, 소마트로핀, 테스토스테론, 트리메트렉세이트, 및발간시클로비르를포함하되, 이에한정되지않는 AIDS 및 HIV 에연관된또다른컨디션및기회적감염을위한치료제 ; GS 9137, MK-0518를포함하되, 이에한정되지않는인터그라제억제제 ; BMS , C31G, 카르보폴 974P, 카라지난, 셀룰로오스술페이트, 시아노비린-N, 덱스트란술페이트, 히드록시에틸셀룰로오스, PRO 2000, SPL7013, 테노포비르, UC-781 및 IL-2를포함하되, 이에한정되지않는살균제로부터선택된하나이상의 2차 HIV 치료약물, 또는또다른개시된또는부속치료약물과함께대등하게투여될것이다 ( 동시또는순차로, 결합된또는별개의포뮬레이션으로 ). 또다른실시예에서, 이러한대등한치료방법은예를들어, 다양한화학요법의프로토콜에서유래되거나이에뒤따르는것일수있다. 또다른대등한치료방법은예를들어, 종양성질환의부가적인증상을위한치료제및 / 또는포르볼에스테르를포함할수있다. 이러한대등한치료방법모두의특징적관점은, 화학식 I 의포르볼에스테르화합물이적어도몇몇의활성을나타내는것이며, 이것은상보적인종양성질환증상감소와관련된좋은임상적반응, 또는 2차또는부속치료약물에의해제공되는뚜렷한임상적반응을획득한다. 종종, 2차또는부속치료약물을포함하는화학식 I의포르볼에스테르화합물의상기대등한투여는, 대상체내에서, 화학식 I의포르볼에스테르화합물, 또는 2차또는부속치료약물의단독투여시나타난치료효과를넘어서는향상된치료또는예방결과를획득할것이다. 이러한능력은직접적효과, 뿐만아니라간접적효과모두에대하여예상된다. 몇몇실시예에서, 화학식 I의포르볼에스테르화합물은, 하나이상의 2차암치료약물, 또는또다른개시된또는부속치료약물, 예를들어, 독소루비신, 비타민 D3, 시타라빈, 시토신아라비노시드, 다우노루비신, 시클로포스파미드, 겜투주맙오조가미신, 이다루비신, 메르캅토퓨린, 미톡산트론, 티오구아닌, 알데스루킨, 아스파라기나제, 카르보플라틴, 에토포시드포스페이트, 플루다라빈, 메토트렉세이트, 에토포시드, 덱사메타손, 및클로린마그네슘트리살리실레이트와함께대등하게투여될것이다 ( 동시또는순차로, 결합된또는별개의포뮬레이션으로 ). 상술한바와같이, 본발명에서고려된다양한실시예들모두에서, 세포변형성질환치료방법및포뮬레이션은화학식 I의포르볼에스테르화합물을대상체화합물의조제학적으로허용가능한염, 솔베이트, 이성체, 광학이성질체, 다형체, 솔베이트, 수산화물, 및 / 또는프로드러그중어느하나또는이의조합을포함하는다양한형태의어떠한것으로도적용할수있다. 본발명의몇몇실시예에서, TPA는일예로서포뮬레이션및방법에적용된다. 본발명의조제학적조성물은이들의의도된치료또는예방의목적을달성하기위한어떠한방식으로투여될수있다. 본발명의조성물에대한투여의적절한경로는, 전통적인전달경로, 기구및정맥내

18 (intravenous), 근육내 (intramuscular), 복막내 (intraperitoneal), 척수내 (intraspinal), 경막내 (intrathecal), 뇌실내 (intracerebroventricular), 동맥내 (intraarterial), 피하 (subcutaneous) 및비강내 (intranasal) 경로등을포함하되, 이에한정되지않는주사가능한방법을포함하는방법을포함하며, 이에한정되지않는다. [0098] [0099] [0100] [0101] [0102] 또한, 본발명의상기조성물은적용되는투여의특정모드에적합한조제학적으로허용가능한캐리어를포함할수있다. 본발명의조성물의복용형태는상술한바와같이, 복용단위의조제에적합하도록조제학적혼합분야에서알려진첨가제를포함한다. 이러한첨가제는, 바인더 (binders), 필러 (fillers), 윤활제, 유화제, 현탁제 (suspending agents), 감미제 (sweeteners), 향료 (flavorings), 방부제, 버퍼, 습윤제 (wetting agents), 붕해제 (disintegrants), 발포제 (effervescent agents) 및또다른전통적인첨가제및첨가물을포함하며, 이에한정되지않는다. 경우에따라서, 본발명의조성물은저속분비 (slow release) 캐리어, 친수성 (hydrophilic) 등의, 저속분비폴리머 (polymer) 를사용하여분비형태를조절하며투여할수있다. 본발명에서, 예시적으로조절되는분비약물은, 약 100 cps 내지약 100,000 cps 범위의점도를가지는히드록시프로필메틸셀룰로오스 (hydroxypropyl methyl cellulose), 또는콜레스테롤 (cholesterol) 과같은또다른생체적합성매트릭스 (biocompatible matrices) 를포함하며, 이에한정되지않는다. 본발명의화학식 I의포르볼에스테르조성물몇몇은, 비경구적투여 (parenteral administration), 예를들어정맥내, 근육내, 피하또는복막내투여를위해설계될수있으며, 본발명의또다른고려된조성물들과같이, 포뮬레이션이포유동물대상체의혈액과등장성 (isotonic) 이되도록하는항-산화제 (anti-oxidants), 버퍼, 박테리오스타트 (bacteriostats) 및 / 또는용질 (solutes) 을선택적으로포함하는수성 (aqueous) 및비-수성멸균주사용액 (sterile injectable solutions); 및현탁제및 / 또는농화제 (thickening agents) 를포함할수있는수성및비-수성멸균서스펜션 (suspensions) 을포함할수있다. 상기포뮬레이션은단위-복용또는멀티-복용콘테이너 (container) 로나타낼수있다. 본발명의부가적인조성물및포뮬레이션은, 비경구적투여에따른확장된분비를위한폴리머를포함할수있다. 비경구적조제 (parenteral preparation) 는, 이러한투여에적합한액제 (solutions), 분산제 (dispersions) 또는에멀전 (emulsions) 일수있다. 또한, 상기대상약물 (subject agents) 은, 비경구적투여에따른확장된분비를위한폴리머와포뮬레이트될수있다. 조제학적으로허용가능한포뮬레이션및성분은, 일반적으로무균이거나쉽게멸균될수있고 (sterile or readily sterilizable), 생물학적으로활성이없으며 (biologically inert), 쉽게투여할수있다. 이러한폴리머물질은조제학적혼합분야에서당업자에게알려진것이다. 비경구적조제는, 일반적으로, 버퍼약물및방부제, 그리고주사가능한유체, 예를들어, 물, 생리적식염수 (physiological saline), 평형염액 (balanced salt solutions), 수성덱스트로스 (dextrose), 글리세롤 (glycerol) 또는이와유사한것등의조제학적으로, 생리학적으로허용가능한것을포함한다. 즉석의 (Extemporaneous) 주사용제, 에멀젼및서스펜션은, 앞서개시된바와같이, 멸균파우더 (sterile powders), 미립 (granules) 및정제 (tablets) 로부터조제할수있다. 바람직한단위복용포뮬레이션은, 활성성분의, 상술한바와같이, 하루복용량또는단위, 하루서브-복용량, 또는그의적절한분할을포함하는것이다. 더욱구체적인실시예에서, 본발명의조성물은, 마이크로캡슐 (microcapsules), 마이크로파티클 (microparticles), 또는마이크로스피어 (microspheres) 내에, 예를들어, 코아세르베이션기술 (coacervation techniques) 또는계면중합 (interfacial polymerization) 에의해조제된, 예를들어, 히드록시메틸셀룰로오스 (hydroxymethylcellulose) 또는겔라틴 (gelatin)-마이크로캡슐및폴리 ( 메틸메타실레이트 (methylmethacylate)) 마이크로캡슐, 각각에 ; 콜로이달약물전달시스템 (colloidal drug delivery systems) ( 예를들어, 리포좀 (liposomes), 알부민 (albumin) 마이크로스피어, 마이크로에멀젼, 나노-파티클및나노캡슐 ) 내에 ; 또는마크로에멀젼 (macroemulsions) 내에전달을위해캡슐화된화학식 I의포르볼에스테르화합물을포함할수있다. 상술한바와같이, 몇몇실시예에서, 본발명의조성물및방법은조제학적으로허용가능한염, 예를들어, 상술한화학식 I의포르볼에스테르화합물및 / 또는관련된또는유도체화합물의산부가 (acid addition) 또는염기염 (base salts) 을적용할수있다. 조제학적으로허용가능한첨가염 (addition salts) 의예는무기및유기산첨가염을포함한다. 적절한산첨가염은비-독성염, 예를들어, 히드로클로라이드 (hydrochloride), 히드로브로마이드 (hydrobromide), 히드로이오다이드 (hydroiodide), 술페이트 (sulphate), 수소술페이트, 니트레이트 (nitrate), 포스페이트 (phosphate), 및수소포스페이트염등을형성하는산으로부터형성된다. 추가적인조제학적으로허용가능한염은, 소듐염 (sodium salts), 포타슘염 (potassium salts),

19 세슘염 (cesium salts) 및그밖의것등의금속염 (metal salts); 칼슘염 (calcium salts), 마그네슘염 (magnesium salts) 및그밖의것등의알칼리토금속 (alkaline earth metals); 트리에틸아민염 (triethylamine salts), 피리딘염 (pyridine salts), 피콜린염 (picoline salts), 에탄올아민염 (ethanolamine salts), 트리에탄올아민염 (triethanolamine salts), 디시클로헥실아민염 (dicyclohexylamine salts), N,N'-디벤질에틸렐디아민염 (N,N'-dibenzylethylenediamine salts) 및그밖의것등의유기아민염 (organic amine salts); 아세테이트, 시트레이트 (citrate), 락테이트 (lactate), 수시네이트 (succinate), 타르트레이트 (tartrate), 말리에이트 (maleate), 퓨마레이트 (fumarate), 만델레이트 (mandelate), 아세테이트, 디클로아세테이트, 트리플루오로아세테이트 (trifluoroacetate), 옥살레이트 (oxalate), 및포르메이트염 (formate salts) 등의유기산염 (organic acid salts); 메탄술포네이트 (methanesulfonate), 벤젠술포네이트 (benzenesulfonate), 및 p-톨루엔술포네이트염 (p-toluenesulfonate salts) 등의술포네이트 (sulfonates); 및아르기네이트 (arginate), 아스파르기네이트 (asparginate), 클루타메이트 (glutamate), 타르트레이트 (tartrate), 및글루코네이트염 (gluconate salts) 등의아미노산염 (amino acid salts) 을포함하되, 이에한정되지않는다. 적절한염기염은, 예를들어알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 포타슘 (potassium), 소듐 (sodium), 아연 (zinc) 및디에탄올아민염 (diethanolamine salts) 을포함하는비-독성염을형성하는염기로부터형성된것이다. [0103] [0104] [0105] 또다른구체적인실시예에서, 본발명의방법및조성물은, 화학식 I의포르볼에스테르의프로드러그에적용될수있다. 프로드러그는생체내 (in vivo) 에서활성부모약물 (parent drug) 을분비하는어떠한공유결합으로연결된 (covalently bonded) 캐리어라고할수있다. 본발명에서유용한프로드러그의예는, 치환기로히드록시알킬또는아미노알킬을가지는에스테르또는아미드를포함하며, 이들은상술한바와같이, 수시닉안히드라이드 (succinic anhydride) 등의안히드라이트를가지는이러한화합물들의작용에의해제조될수있다. 본발명은화학식 I의포르볼에스테르를포함하는조성물및방법이상기화합물의생체내대사생성물 (metabolic product) 을이용하는것 ( 대상전구체 (precursor)) 화합물을투여한후에생체내에서생성된것, 또는대사생성물그자체의형태로직접투여한것 ) 을포함하는것으로이해되어야할것이다. 이러한물질은예를들어, 산화, 환원, 가수분해, 아미드화 (amidation), 에스테르화 (esterification) 및효소과정 (enzymatic processes) 에일차적으로기인하는그밖의투여화합물에서기인할수있다. 따라서, 본발명은, 그의대사생성물을획득하기에충분한시간동안포유동물대상체에화학식 I의포르볼에스테르화합물을접촉시키는과정을포함하는과정에의해생성된화합물을적용하는본발명의방법및조성물을포함한다. 이러한물질은, 일반적으로방사성동위원소표지 (radiolabelled) 를한본발명의화합물을준비하고, 그것을쥐 (rat), 마우스 (mouse), 기니아피그 (guinea pig), 원숭이, 또는인간등의동물에게검출가능한용량으로비경구투여하고, 물질대사 (metabolism) 가발생하기에충분한시간동안두고, 소변, 혈액또는다른생물학적샘플로부터전환생성물 (conversion products) 을분리함으로써, 확인된다. 본발명은, 포유동물대상체에서, 리스크레벨 (risk level), 존재, 혹독성, 또는치료징후 (treatment indicia) 를진단하기위한진단조성물, 또는백혈병과같은악성종양질환을포함하는종양성질환, 및 AIDS 또는관련질환또는컨디션을포함하되, 이에한정되지않는세포변형성질환을관리하는것을포함하는것으로이해될것이며, 표시된 ( 예를들어, 동위원소표시 (isotopically labeled), 형광표시 (fluorescent labeled), 또는전통적인방법을사용하여표시된화합물을검출할수있는또다른표시 ) 화학식 I의포르볼에스테르화합물을위험상태의포유동물대상체 ( 예를들어, 세포, 조직 (tissue), 장기 (organ), 또는개체 ) 에접촉시키거나, 하나이상의증상또는암및 / 또는 AIDS와함께나타내고, 그후에표시된화합물의존재, 위치, 물질대사, 및 / 또는결합상태 ( 예를들어, HIV 수용체 (receptor) 생리 (physiology)/ 물질대사또는악성종양의세포수용체생리 / 물질대사와관련된비표시된결합파트너에결합시키는검출 ) 를알려진분석의광범위한어레이및표시 / 검출방식들중어떤것을이용하여검출하는것을포함할수있다. 몇몇실시예에서, 화학식 I의포르볼에스테르화합물은, 서로다른원자질량또는원자번호를가지는원자에의해교체된하 나이상의원소를포함함으로써동위원소표시된다. 개시된화합물에통합될수있는동위원소의예로, 2 H, H, C, C, N, O, O, P, P, S, F, 및 Cl 등의수소, 탄소, 질소, 산소, 인 (phosphorous), 플루오린및클로린을포함할수있다. 그후, 동위원소-표시화합물은, 개체또는다른대상체에투여되고, 그후, 상술한바와같이, 검출하여, 전통적인테크닉에따라, 유용한진단및 / 또는치료상의관리데이터를획득한다

20 [0106] [0107] 실험예이하의실험들은 AIDS의증상을효과적으로감소시킬수있는 HIV 치료약물로서의포르볼에스테르및유도체화합물에대한신규하고효과적인 (powerful) 용도를증명한다. 예시적인임상학적시험들에서, HIV 및 AIDS에대한전통적인치료에반응이없었던개체들이 TPA를이용한치료에반응을보였다. TPA를이용한치료는 " 동정적 (compassionate)" 으로허가되었고, 몇몇환자들의회복은주치의 (attending physicians) 에따라생명-보호 (life-saving) 를고려하였다. 또한, 이하의실험들은종양성질환의치료에서포르볼에스테르및유도체화합물의유용성을나타낸다. 이러한발견은이하의실험예들에서추가로확장되며, 밝혀진다. [0108] [0109] [0110] 실험예 I S180 세포-주입마우스에서말초백혈구및헤모글로빈수에대한 TPA의효과 (Effect of TPA on the Peripheral White Blood Cells (WBC) and Hemoglobin (Hb) Counts in S180 Cell-Injected Mice): 사르코마 (Sarcoma 180; S180) 세포를켄-밍마우스 (Kwen-Ming mice) 내에주입했다. 셋째날에, 상기마우스에, TPA를, 50, 100 또는 200 μg /kg/day로 7일동안복강내 (i.p.) 투여하였다. 상기처리를완료한후둘째날에, 혈액샘플을 WBC 및 Hb 분석을위해상기처리된마우스의꼬리에서채취하였다. 상기처리된그룹 (7일 간, 50, 100, 또는 200 μg /kg/day) 의 WBC 수는각각 16.1±7.4, 18.7±3.0 및 20.7± /L; 대조군 (control group) 의 WBC 수는 13.6± /L이었다. 상기처리된그룹의 Hb는 136±11, 149±12 및 149± 10g/L이었고, 대조군의 Hb는 134±15g/L이었다. 이러한결과는 TPA의 i.p. 주입은, 대조마우스와비교하여 TPA 처리된마우스에서 Hb 레벨이큰영향을받지못한것에반해, 말초 WBC 수는마우스내에서용량-종속적방식으로감소될수있음을나타낸다. [0111] [0112] [0113] [0114] [0115] [0116] [0117] [0118] [0119] [0120] 실험예 II 용량범위결정조사 (Dose Ranging Study). TPA 적용에의한강력한국소자극성 (local irritation) 때문에, TPA를정맥내 (intravenous; i.v.) 주입으로투여하였다. 멸균주사기 (sterile syringe) 내의 TPA 용액을멸균염수 (sterile saline) 200 ml에주입하였고, i.v. 주입액으로충분히혼합하였다. 서로다른 TPA 용량으로임상주입된경우의독성및부작용 : (1) 1 mg/patient/week로 TPA 투여 : 용액내 TPA 1 mg을, 정맥내주입을위해멸균염수 200ml와충분히혼합하되, 16 μg /min의속도로 1 시간내에완료하였다. TPA 투여 1 시간후, 환자들은한기를느끼기시작하여약 30분동안지속되었고, 약 (light) 에서강 (heavy) 의발한을동반한발열, ( 환자의체온은 에도달했고, 3-5시간동안지속되었고, 이후정상으로회복됨 ) 이뒤따랐다. 상기증상들은환자에게클루코코르티코이드 (glucocorticoids) 를투여하여완화시킬수있었다. 상기용량의 TPA는소수의환자들의출혈을야기했고, 몇몇환자들에게는짧은시간동안호흡곤란을겪게했으며, 소변에서 Hb가검출되었다. 그러나, 이러한부작용은짧게지속되었고, 원상태로돌아갈수있었다. 심장 (cardiac), 간장 (hepatic), 신장 (renal) 및폐 (pulmonary) 기능이모두정상임을확인하였다. (2) 0.5 mg/patient 2/week로 TPA 투여 : ( 일주일에 2회복용 (two doses a week)) 용액내 TPA 0.5 mg을, 정맥내주입을위해염수 200ml와충분히혼합하되, 8 μg /min의속도로 1 시간내에완료하였다. TPA 투여후의반응은 1 mg TPA 복용의경우와유사했으나, 1mg 보다적은범위였다. 환자들은더낮은복용량으로더쉽게견뎠다. 때때로, Hb가환자의소변에서검출되었다. 호흡곤란은관찰되지않았다. 심장, 간장, 신장및폐기능은모두정상이었다. (3) 0.25 mg/patient 4/week로 TPA 투여 : 용액내 TPA 0.25 mg을, 정맥내주입을위해염수 200ml와충분히혼합하되, 4 μg /min의속도로 1 시간내에

21 완료하였다. 투여후에, 한기및발열등의증상이또한관찰되었으나, 더높은복용량들의경우보다훨씬적 은범위였다. Hb 는소변에서검출되지않았고, 호흡곤란을겪은환자는없었다. 심장, 간장, 신장및폐기 능은모두정상이었다. [0121] [0122] [0123] [0124] [0125] 실험예 III TPA로치료한 HIV+ 환자에대한첫번째임상조사 (First Clinical Study of HIV+ patients treated with TPA) 35세내지 52 세사이의 12 명의증상이있는환자 (symptomatic patients) ( 남성 5명및여성 7명 ) 모두는, 수혈을통해 1995년에 HIV에감염되었으며, HIV에대한기준치료에대하여재발한사람들로, 이들을 TPA로치료했다. 각각의환자에게체중으로조절된복용량의 TPA (75μg/sq m) 를멸균염수200 ml 내에정맥내주입 (i.v.) 으로한시간넘게투여하였다. 상기용량을치료의처음 3일동안하루에한번투여하였다. 이어서, 각각의환자에 4 째날내지 18째날 (days 4 to 18) 동안하루걸러상기복용량을투여하였고, 그후, 이와동일한프로토콜에따른두번째치료에앞서 6 개월의휴식기간 (rest period) 을가졌다. 혈액샘플을상기치료주기의 TPA 첫번째복용량및 4째날및 40째날 (days 4 and 40) 의투여에앞서채취하였다. 말초혈액에서의 CD3, CD4 및 CD8 레벨을단일클론항체 (monoclonal antibodies) (Becton Dickson Scientific Co., Franklin Lakes, NJ) 및유량세포측정기 (flow cytometer) (B.D. Bioscience, San Diego, CA) 를이용하여측정하였다. 표 1에도시된바와같이, CD3, CD4, 또는 CD8 레벨에서, 일관된변화및상관관계중어느것도관찰되지않았다.( 좌측부터 CD4, CD8, CD3의순서임 ) 표 1 [0126] 표 1(TABLE ONE) 12명의 HIV 환자에대한 CD 4 CD 8 CD 3 테스트결과 (CD 4 CD 8 CD 3 TEST RESULTS OF TWELVE HIV PATIENTS) 환자번호 테스트시간 CD 4 CD 8 CD 3 (PATIENT NO) (TEST TIME) 01-1 TPA 전 TPA 후 4일 TPA 후 42일 TPA 전 TPA 후 4일 105 < TPA 후 42일 TPA 전 TPA 후 4일 TPA 후 42일 TPA 전 TPA 후 4일 TPA 후 42일 TPA 전 TPA 후 4일 TPA 후 42일 TPA 전 TPA 후 4일 TPA 후 42일 TPA 전 TPA 후 4일 TPA 후 42일 TPA 전 TPA 후 4일 TPA 후 42일 TPA 전

22 09-2 TPA 후 663 < TPA 전 TPA 후 TPA 전 TPA 후 TPA 전 TPA 후 [0127] 아래의표 2 에도시된바와같이, HIV 의증가를가지는 5 명의환자들이가지는바이러스부하의변화에있어 서, 유사하게일관되지않은결과가나왔으며, 7 명의환자들에서는변화및감소가없었다. [0128] 표 2 표 2 (TABLE TWO) TPA 치료이전, 중간, 및이후의 12명의환자에대한혈액 HIV 수 (BLOOD HIV COUNT OF THE TWELVE PATIENTS BEFORE DURING and AFTER THE TPA TREATMENT) 환자번호테스트시간결과 01-1 TPA 전 3 일 01-2 최초 TPA 후 4 일 01-3 최초 TPA 후 15 일 01-4 최초 TPA 후 25 일 02-1 TPA 전 3 일 02-2 최초 TPA 후 4 일 02-3 최초 TPA 후 15 일 02-4 최초 TPA 후 25 일 03-1 TPA 전 3 일 03-2 최초 TPA 후 4 일 03-3 최초 TPA 후 15 일 03-4 최초 TPA 후 25 일 04-1 TPA 전 3 일 04-2 최초 TPA 후 4 일 04-3 최초 TPA 후 15 일 04-4 최초 TPA 후 25 일 05-1 TPA 전 3 일 05-2 최초 TPA 후 4 일 05-3 최초 TPA 후 15 일 05-4 최초 TPA 후 25 일 06-1 TPA 전 3 일 06-2 최초 TPA 후 4 일 (RESULTS) 로그값 (LOG (copies/ml) VALUE) 비고 (FOOT NOTE)

23 06-3 최초 TPA 후 15 일 06-4 최초 TPA 후 25 일 07-1 TPA 전 3 일 07-2 최초 TPA 후 4 일 07-3 최초 TPA 후 15 일 07-4 최초 TPA 후 25 일 08-1 TPA 전 3 일 08-2 최초 TPA 후 4 일 08-3 최초 TPA 후 15 일 08-4 최초 TPA 후 25 일 TPA 전 3일 검출불가능 09-2 TPA 후 25일 검출불가능 10-1 TPA 전 3일 두번째주기처리 (second cycle treatment) 로부터샘 플채취 10-2 TPA 후 25일 TPA 전 3 일 11-2 TPA 후 25 일 12-1 TPA 전 3 일 12-2 TPA 후 25 일 [0129] 바이러스레벨과 CD3, CD4 및 CD8 레벨사이의연관관계가부족함에도불구하고, 11 명의환자는치료후에 상당한개선을보였다. 8 명의환자는증상이없어졌고, 이들중 5 명은 6 개월내지 12 개월동안경감된상태에 있었다. 3 명의추가환자는증상이감소했다. [0130] [0131] [0132] [0133] [0134] [0135] 실험예 IV TPA로치료한 HIV+ 환자에대한두번째임상조사 (Second Clinical Study of HIV+ patients treated with TPA) 실험예 III에서 9명의환자는 TPA 2차치료를진행하였다. 이들 9명중 7명은상기두번째실험의초기에증상이있었다. 열번째환자 ( 환자 #2a) 를조사에추가하였으며, 이환자는증상이있었고, 이전에 TPA로치료한적이없었다. 각각의환자에게체중으로조절된복용량의 TPA (75μg/sq m) 를멸균염수200 ml 내에정맥내주입으로한시간넘게투여하였다. 상기용량을각각의환자에게하루에한번, 연속 10일간투여한후, 10일간의휴식기간을 3번의주기동안진행하여, 총 TPA 30복용량을투여하였다. 환자 5a, 6a, 및 8a는, TPA 치료를시작하기이전 1 개월및세번째주기후추가 1 개월시작에항-AIDS 약물복용을중지하였다. 환자 1-4a, 7a, 및 9a-10a는치료내내항-AIDS 약물복용을계속하였다. 혈액샘플을치료시작 3일전, TPA 주입의첫번째 10 일주기를마친후, 및마지막 TPA 주입후에채취하였고, CD3, CD4, CD8, WBC, RBC, HGB 및혈소판을측정하였다. 표 3에도시된바와같이, 모든환자에서 TPA의첫번째및세번째주입후, CD3가증가하였으며, 두명의환자 (5a & 10a) 를제외하고, 세번째주기이후에가장높은값을나타냈다. CD8 및 CD4이증가하는경향을보였다. 이러한결과는 TPA 치료를한면역시스템이강화되었음을의미한다. HIV 수에대한다양한결과를얻었다 ( 표 4). 몇몇환자들에서 HIV 측정값은, 다른환자들에서는다소증가한것에반해, 상기방법의검출의