Journal of Korean Academy of Oral Health 2017 March 41(1): Original Article 매실추출물의구강내치아우식증유발세균에대한항균효과

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숙희 시
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1 Journal of Korean Academy of Oral Health 2017 March 41(1): Original Article 매실추출물의구강내치아우식증유발세균에대한항균효과 이정선 1, 정기호 2 1 전남대학교대학원보건학협동과정, 2 연세대학교치과대학예방치과학교실 Antimicrobial effect of Prunus mume extracts against cariogenic bacteria Jung-Sun Lee 1, Ki-Ho Chung 2 1 Department of Public Health, Graduate School, Chonnam National University, Gwangju, 2 Department of Preventive Dentistry and Public Oral Health, Yonsei University College of Dentistry, Seoul, Korea Received: February 20, 2017 Revised: March 22, 2017 Accepted: March 23, 2017 Corresponding Author: Ki-Ho Chung Department of Preventive Dentistry and Public Oral Health, Yonsei University, Sinchon-dong, Seodaemun-gu, Seoul 03722, Korea Tel: Fax: yspd8050@naver.com Objectives: This study was conducted to determine whether Prunus mume extracts have an antimicrobial effect against Streptococcus mutans (S. mutans) and Streptococcus sobrinus (S. sobrinus). Methods: The study used crushed and dried Prunus mume, to which 80% methanol was added to obtain extracts. The extracts then underwent a demarcation process, sequentially using hexane, chloroform, and ethyl acetate, all of which have different polarities, followed by a reduction in pressure. The disc diffusion method was then used to measure the clear zone diameter to identify the antimicrobial effect of Prunus mume extracts using the different solvents. The methanol extracts that presented antimicrobial activity against S. mutans and S. sobrinus were then selected, and their optical densities (3, 6, 9, 12, and 24 h after cultivation) were measured to identify growth retardation effects based on extract concentration (0.01, 0.1, 1, and 5 mg/ml). Results: A clear zone was observed in methanol and ethyl acetate for S. mutans when the antimicrobial effect of Prunus mume extracts of each solvent against oral microorganisms was measured via the disc diffusion method. A clear zone was observed in hexane, chloroform, methanol, and ethyl acetate, when the extracts were tested for antimicrobial activity against S. sobrinus. The extract concentration of 1 mg/ ml retarded growth with a statistical significance (P<0.05) from 6 h onwards, as determined when the optical density was measured hourly and the growth curves of S. mutans and S. sobrinus were plotted. Conclusions: Prunus mume extracts retarded the growth of S. mutans and S. sobrinus with increase in time and concentration. Therefore, Prunus mume extracts hold the potential to be used for developing an oral antimicrobial agent to control dental caries. Key Words: Antimicrobial effect, Prunus mume, Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus 서론 치아우식증은구강질환의가장대표적인질환으로치태내세균, 음식물, 타액의상호작용에의해유발되는다인성질환이며, 치아파괴를동반한감염성질환 (progressively infectious disease) 이다 1). 구강내의다양한미생물중에서 streptococcus mutans와 streptococcus sobrinus 등과같은 mutans streptococci가치아우식증의주요원인균으로여겨진다 2). Mutans streptococci는여러종류의 glucosyltransferase ( 이하 GTase) 를이용하여자당으로부터 extracellular glucan을형성하여치아표면에부착함으로써, 치면세균막을형성하고산을만들어내어치아우식증을유발시킨다 3). Copyright 2017 by Journal of Korean Academy of Oral Health This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License ( which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited. JKAOH is available at pissn X / eissn

2 66 J Korean Acad Oral Health 2017;41:65-70 치아우식증을예방하기위해치면세균막을제거하는방법으 로는물리적방법과화학적방법이있다. 화학적방법으로는클로르헥시딘 (Chlorhexidine) 등의합성화합물들이대표적인데, 항균효과가뛰어난대신치아착색, 치석형성, 세균의균락화촉진, 구강점막의 Desquamation과같은부작용이나타날수있다 4). 따라서부작용없이미생물의성장과치면세균막형성을억제시킬수있는천연물에서추출한항균물질에대한관심이높아지고있다. 천연물과관련하여 Kim 등 5) 은호장근메탄올추출물이치아우식관련세균의성장을억제하였고, S. mutans (serotype c) 가만들어내는 GTase활성과 S. mutans (serotype c) 의부착을억제한다고보고하였다. Kang 등 6) 은오배자의주요화합물인 methyl gallate와 galliic acid는 S. mutans의성장을억제함으로서치면세균막의형성을예방할수있다고보고하였다. 또한 Chung 등 7) 은 flavonoids가 narigenin, phloretin 및 taxifolin등을함유하고있는복합물질로서수종의치아우식원인균에대한항세균효과를나타낸다고하였으며, Saeki 8) 는해조류에서추출한물질인 funoran 이치아우식원인균에대하여뛰어난항세균효과를갖는다고보고하였다. 매실 (Prunus mume) 은장미나무과의앵두나무속에속하는핵과류이며 9), 수확시기와가공방법에따라이름과용도가다르며오매 ( 烏梅 ) 는 6월중순에서 7월초순에딴미숙한청매의껍질과씨를벗겨짚불연기에그을린후햇빛에말려검게만들며다양한생리활성을나타낸다. 혈관계질환의치료와모세혈관강화, 항염증효과에도움을주며항산화효능을발휘한다고보고된다 10). Lee 등 11) 은매실착즙액이식중독균인 Salamonella enteritidis, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli의순으로생육억제효과를강하게보였다고하였다. Kim 등 12) 은오미자와매실추출물이구강내진균감염을일으키는원인균인 C. albicans에대하여강한항균력이있다고보고하였으나, 매실추출물이치아우식증의원인균으로알려진 S. mutans와 S. sobrinus에대한항균효과가있는지에대한연구는미비한실정이다. 따라서본연구에서는치아우식증의원인균으로알려진 S. mutans 및 S. sobrinus에매실추출물을적용한후, 매실추출물의용매별항균활성과농도에따른성장곡선을평가하여치아우식활성에미치는영향을알아보고자한다. 연구대상및방법 1. 연구대상실험에사용된매실은국내산순천오매이며한우리약초에서구입하여사용하였다. 건조된오매 300 g을분쇄하여 80% methanol 1,000 ml을첨가하여 12시간동안진탕하여추출한후여과지 (Whatman filter paper #2, USA) 로여과하여여과액을진공농축기 (Centrifugal vacuum concentrator, Ecospin 3180C, HANIL, KOREA) 를사용하여감압농축하였다. 80% methanol 매실추출물을극성이다른 hexane, chloroform 및 ethyl acetate의순으로 분획한후여과하여감압농축하였다. 농축된추출물은 20 o C로냉동보관하여실험에사용하였다. 2. 연구방법 2.1. 사용균주및배양실험에사용된균주는전남대학교의과대학미생물학교실에보관중인 Streptococcus mutans Ingbritt, Streptococcus sobrinus B13로동결건조로보관중인세균을 M17 broth (M17, Difco, USA) 에 10% lactose를첨가한액체배지에접종한후 37 o C의배양기에서 24시간동안배양하여실험에사용하였다 원판확산법을이용한용매별매실추출물의항균활성측정 배양된 S. mutans 와 S. sobrinus 를각각 100 ml 씩 M17 고체 배지에접종하고삼각유리막대를사용하여도말하였다. 멸균된 paper disc ( 8 mm Advantec, Japan) 위에각분획물을 dimethyl sulfoxide (DMSO, Sigma, USA) 에용해하여 50 ml씩점적하고건조한후균주가도말된 M17 고체배지위에올려놓았다. 37 o C의배양기에서 24시간동안배양한후 paper disc 주위의투명환직경 (mm) 을측정하였으며, 모든실험은 3번반복하여시행하였다 추출물의농도에따른 S. mutans와 S. sobrinus의성장곡선측정 80% methanol 추출물을 M17 액체배지에용해하여 0.01, 0.1, 1, 5 mg/ml의농도가되도록 M17 액체배지에희석한후 CFU/ml로희석된균을접종하였다. 37 o C의배양기에서배양하면서배양직후, 3, 6, 9, 12, 24시간이되는때에 ELISA reader (Molecular Devices, USA) 를이용하여 600 nm에서흡광도를측정하였다. 대조군은순수한 M17 액체배지에균을접종한후실험군과동일한방법으로배양하면서측정하였다. 모든실험은 3번반복하여시행하였으며, 성장저해율 (%) 은다음식을이용하여계산하였다. 성장저해율 (%)= 대조군의흡광도 추출물함유군의흡광도 100 대조군의흡광도 2.4. 자료분석원판확산법에의한세균증식억제대직경은평균과표준편차로산출하였다. 추출물의농도에따른성장곡선을시간별로비교하기위하여 Repeated measures ANOVA 를사용하였으며, 사후검정으로 tukey test를시행하였다. 통계분석은 SPSS (Statistical Packages for Social Science SPSS Inc., Chicago, IL, USA) 통계프로그램을사용하였다.

3 67 이정선 정기호 매실추출물의구강내치아우식증유발세균에대한항균효과 연구성적 1. 용매별매실추출물의항균활성매실추출물의용매에따른 S. mutans 와 S. sobrinus 의항균활 성을원판확산법으로측정한결과, S. mutans 는 methanol, ethyl acetate에서투명환이 13.67±0.29 mm, 12.83±1.04 mm로나타났다. S. sobrinus는 hexane, chloroform, methanol, ethyl acetate에서 20.50±1.32 mm, 14.83±1.89 mm, 13.67±1.26 mm, 11.50±0.87 mm의순으로투명환이나타났다 (Table 1). 2. 추출물의농도에따른 S. mutans와 S. sobrinus의성장억제효과매실추출물의농도에따른 S. mutans와 S. sobrinus의성장억제효과를측정하기위해 M17 액체배지에 0.01, 0.1, 1, 5 mg/ml 의농도가되도록희석한후 S. mutans와 S. sobrinus를접종하여 37 o C 배양기에서배양하면서시간별로 sampling 하여 600 nm에서흡광도를측정한결과, 추출물의농도에따라성장억제효과는통계적으로유의한차이가있었다 (P<0.05). 매실추출물을첨가하지않고 S. mutans만접종한대조군에서 24시간후흡광도가 0.58였고, 0.01, 0.1, 1, 5 mg/ml의매실추출물농도에서는각각 0.50, 0.59, 0.41, 0.10으로대조군의흡광도값에비해실험군의흡광도값이감소하였으며농도가높아질수록성장을억제하는효과가증가함을알수있었다. S. mutans만접종한대조군과비교하여매실추출물을첨가하 여배양한실험군에서는 3시간이전까지농도에따른차이를보이지않다가 6시간부터농도의증가에따라성장이억제됨을알수있었다 (Fig. 1). 매실추출물을첨가하지않고 S. sobrinus만접종한대조군에서 24시간후흡광도가 0.75였고, 0.01, 0.1, 1, 5 mg/ml의매실추출물농도에서는각각 0.74, 0.73, 0.59, 0.24의값을나타내었으며농도가높아질수록성장을억제하는효과가증가함을알수있었다. S. sobrinus만접종한대조군과비교하여매실추출물을첨가하여배양한실험군에서는 3시간이전까지농도에따른차이를보이지않다가 6시간부터는농도의증가에따라성장이억제됨을알수있었다 (Fig. 2). 매실추출물을첨가하지않고균만접종한대조군과비교하여매실추출물을첨가하여배양한 S. mutans와 S. sobrinus의성장억제율을측정한결과, 시간의변화와농도의증가에따라통계적으로유의하게변화했다 (P<0.05). 성장억제에서효과가높은 1 mg/ml과 5 mg/ml의성장억제율을살펴보면 S. mutans는추출물 1 mg/ml의농도에서 9시간에 44.44% 의성장억제율을나타내었고 12시간에 69.73% 의높은성장억제율을나타내었다. 5 mg/ml 의농도에서는 12시간에 70.41% 를 24시간부터는 83.33% 의높은성장억제율을나타냈다. S. sobrinus는 1 mg/ml의농도에서 9시간에 35.71% 의성장억제율을나타내었고 12시간에 70.52% 의높은성장억제율을나타내었으며, 5 mg/ml의농도에서는 12시간에 74.57% 의높은성장억제율을나타냈다. Table 1. Antimicrobial activity of Prunus mume extract with different solvents Strains Inhibition zone (mm) Methanol Hexane Chloroform Ethyl acetate DMSO S. mutans 13.67± ± S. sobrinus 13.67± ± ± ± Values represent the mean±sd of triplicate. - : no growth inhibition. O.D mg 0.01 mg 0.1 mg 1mg 5mg O.D mg 0.01 mg 0.1 mg 1mg 5mg Time (hour) Time (hour) Fig. 1. Growth curves of S. mutans cultured at different concentration of Prunus mume. Fig. 2. Growth curves of S. sobrinus cultured at different concentration of Prunus mume.

4 68 J Korean Acad Oral Health 2017;41:65-70 고안 치아우식증은구강내에상주하는세균의발효작용에의하여생기는젖산으로인해치아의경조직이탈회되어유발되며 13), 치태내세균이표면에부착하는것에서시작된다. 그러므로치아표면에 S. mutans의부착과불용성 glucan을생성하는 GTase를억제하는것이중요하다 14). 최근에는인체에부작용이나타날수있는합성항균제를대신하여안전하게사용할수있는천연항균물질과생약추출물을이용한연구가활발히진행되고있다. Jo 등 15) 은들깨와쑥헥산추출물에서구강병원인균에대한항균효과및 KB 세포증식억제효과가우수다고보고하였으며, Choi 등 16) 은귤피추출물이 S. mutans의성장을억제하는항균효과를가지며 GTase 활성이확연히감소한다고보고하였다. Yu 등 17) 은독활메탄올추출물이 S. mutans의성장을억제하며유기산의생성과 S-HA에대한부착억제와비수용성글루칸합성을억제하는데효과가있다고보고하였으며, Percival 등 18) 은코코아폴리페놀이 S. mutans와 Streptococcus sanguis의성장을억제하고치태의형성을감소시키며, S. mutans에의한산생성을억제하는데효과가있음을보고하였다. 매실은수확시기와가공방법에따라이름과용도가다르며오매 ( 烏梅 ) 는 6월중순에서 7월초순에딴미숙한청매의껍질과씨를벗겨짚불연기에그을린후햇빛에말려검게만들며다양한생리활성을나타낸다. Seo 등 19) 은오매의 butanol 추출물이 Salmonella typhimurium에대해높은항균활성을보이며성장을억제한다고보고하였으며, in vitro에서오매추출물이위암세포주 (SNU-16) 와대장암세포주 (SNU-C2A) 의형태학적변화를유발시키고증식을억제시켰다고보고하였다 20). Lactobacillus plantarum을이용하여발효공정을적용한오매추출물이세포독성을나타내지않으면서항산화및피부미백, 항염증효과를가진다고보고하였다 21). Ko 등 22) 은오매에는지방세포의분화를억제하는물질과인슐린민감성을향상시키는물질이함유하고있으므로비만을동반한당뇨병및인슐린저항성의치료와예방에중요한역할을할것이라보고하였다. 이에본연구에서는다양한효능이검증되었고항균활성이보고된국내산순천오매로만든매실추출물이치아우식증의원인균으로알려진 S. mutans 및 S. sobrinus의성장억제에미치는영향을알아보고자하였다. 매실추출물의 S. mutans 및 S. sobrinus 의성장억제효과는항미생물제재에대한감수성측정방법중흔히사용되는원판확산법을시행하였다. 생약및약용식물의항균활성은추출용매에따라다르게나타나는데 Lee 등 23) 은정향 (Clove) 메탄올추출물과물추출물이석유에테르추출물에비해강한항균효과를나타낸것은메탄올추출물에는 eugenol성분들이추출되었고물추출물에서는수용성페놀성분들이추출되어강한항균력을나타낸것으로보고하였다. Ha 등 24) 은매실박을메탄올로추출하여항균력을조사한결과항균활성이높고, 항균 spectrum이광범위하며, 높은온도및넓은범위의 ph에안정하다고보고하였다. 이를바탕으로본연구에서 는 80% methanol을추출용매로사용하여추출물의효과를확인하였으며, 각기다른용매로분획한분획추출물에서는항균효과가다르게나타나는데 25), 이러한용매별항균효과를확인하고자매실을극성이다른용매로추출하여원판확산법을이용하여측정하였다. 매실추출물의추출용매에따른 S. mutans와 S. sobrinus의항균활성을측정한결과, S. mutans는 methanol, ethyl acetate를사용하였을때항균활성이우수하였으나, hexane과 chloroform에서는항균활성이나타나지않았다. S. sobrinus는 hexane, chloroform, methanol, ethyl acetate의순으로항균활성이우수했다. 따라서, 본연구에서치아우식증의주요원인균인 S. mutans와 S. sobrinus에대해동시에항균활성을가지는우수한매실추출용매는 methanol로나타났다. 이러한연구결과는매실박을메탄올로추출하여항균력을조사한결과항균활성이높다고보고한 Ha 등 24) 의연구결과와일치한다. 이러한이유로는메탄올추출물에서추출된 eugenol 성분들이강한항균력을나타내기때문으로보인다 23). 매실추출물의농도에따른시간별 S. mutans와 S. sobrinus 의성장억제효과를측정한결과, 0.001, 0.1 mg/ml 그룹에서는아무추출물도처치하지않은대조군과비교해서별다른성장억제효과를보이지않았다. 하지만 1, 5 mg/ml에서최초 3시간까지는차이를보이지않다가, 6시간이후에는대조군에비해감소하는양상을나타냈으며시간의변화에따라더욱급격한감소를나타내었다. 특히 5 mg/ml의매실추출물농도에서 S. mutans는 S. sobrinus와비교해서도성장이거의일어나지않았다. 이는해당농도에서매실추출물이 S. mutans에더효과적으로사용될수있음을의미한다. Ha 등 24) 은매실박메탄올추출물이 500 ug/ml 이상에서뚜렷한항균활성을보인다고했고, Seneviratne 등 26) 은매실추출물의구강내세균에대한최소성장억제농도 (minimum inhibitory concentration, MIC) 와최소살균농도 (minimum bactericidal concentration, MBC) 이 mg/ml로보고했는데, 이는본연구에서 S. mutans와 S. sobrinus에성장억제효과를보였던 1, 5 mg/ml 매실농도가적절함을알수있다. 매화나무의열매인매실은알칼리성식품으로 citric acid, malic acid, succinic acid등의유기산이함유되어있으며, Ca, Na, Mg, P 등의무기질을비롯하여 terpenoid류의 sitosterol과 oleanolic acid이함유되어있고 27), flavonoid인 naringenin 등 28) 이분리되었다. 이중 citric acid, tartaric acid, oxalic acid 등은 S. mutans에대해서항균효과를보였고 26), citric acid가강한항균작용을하여살균효과및타액분비촉진을한다고알려져있다 29). 하지만다른성분들이구강내세균들에대해항균효과를가지는지에대해서는추가적인연구가필요하다. 전통적인식물추출물은이미민간에서다양한목적으로수천년전부터사용되어왔기때문에상대적으로인체에대한안전성이검증되었다고볼수있다. 구강내세균에대해서항균효과를가진다고알려진매실추출물의경우도마찬가지이며, 이는매실추출물이구강각화세포에대해서부작용을일으키지않는다는연구

5 69 이정선 정기호 매실추출물의구강내치아우식증유발세균에대한항균효과 결과를통해확인할수있다 26). 따라서매실추출물을치아우식증이나치주질환을예방하기위해구강양치액이나항균제의주요항균성분으로안정적으로사용할수있다. 본연구는치아우식증의원인균인 S. mutans와 S. sobrinus의성장억제효과를다양한방법으로확인하였으나조추출물을이용한실험이기때문에어떠한성분이세균의성장억제에영향을미쳤는지구체적으로확인할수없는제한점이있다. 그러므로추출물에함유되어있는성분별로구강내세균에대한항균효과를확인하는추후연구가필요하다고생각된다. 또한추출용매에따른 S. mutans와 S. sobrinus의항균활성에차이가있고용매에따라추출되는물질이다르므로용매에따른효능을연구해볼필요가있다. 새로운항생물질의경우 in vitro에서항균력을보여도 in vivo에서항균력을갖는것은 30% 정도이다 30). 실제구강내에서사용되었을때타액과연하작용등으로항균효과가그대로재현된다고볼수없기때문에향후 in vivo 실험이필요할것으로생각된다. 결론 본연구는매실추출물이치아우식증의원인균인 S. mutans와 S. sobrinus에대한항균효과가있는지를알아보고자시행하였다. 추출물의용매별항균력은원판확산법을이용하여투명환의직경을측정하여평가하였으며, S. mutans와 S. sobrinus에항균활성이나타난 methanol 추출물을선택하여추출물의농도 (0.01, 0.1, 1, 5 mg/ml) 에따른시간별 ( 배양직후, 3, 6, 9, 12, 24 시간 ) 성장억제효과를흡광도로측정하여다음과같은결과를얻었다. 1. 원판확산법을이용하여매실추출물의용매에따른 S. mutans와 S. sobrinus의항균력을측정한결과, S. mutans는 methanol, ethyl acetate에서투명환이나타났으며 S. sobrinus는 hexane, chloroform, methanol, ethyl acetate의순으로투명환의크기가증가하였다. 2. 추출물의농도에따른성장곡선을측정하기위하여시간별로흡광도를측정한결과, 추출물의농도에따른성장억제효과는통계적으로유의한차이가있었다 (P<0.05). S. mutans는최종 24 시간까지배양한결과대조군에서는흡광도가 0.58이였고 0.01, 0.1, 1, 5 mg/ml의농도에서는각각 0.50, 0.59, 0.41, 0.10의값을나타내었다. S. sobrinus는최종 24시간까지배양한결과대조군에서는흡광도가 0.75였고 0.01, 0.1, 1, 5 mg/ml의추출물에서각각 0.74, 0.73, 0.59, 0.24의값을나타내었다. 추출물의농도가 1, 5 mg/ml인경우성장을억제하였으며시간의변화에따라더욱급격한감소를나타내었다. 이상의결과, 매실추출물은시간의변화와농도의증가에따라 S. mutans와 S. sobrinus의성장을억제하고항균효과를가지는것으로나타났다. 이는현재까지알려진매실의효과이외에구강내미생물을억제시킨다는새로운발견이라는점에의의가있으며, 특히치약이나구강양치액에첨가하여치아우식증을예방하는제제로서이용가능성이있다고생각된다. References 1. Hamada S, Koga T, Ooshima T. Virulence factors of Streptococcus mutans and dental caries prevention. J Dent Res 1984;63: Loesche WJ. Role of Streptococcus mutans in human dental decay. Microbiol Rev 1986;50: Hamada S, Koga T, Ooshima T. Virulence factors of Streotococcus mutans and dental caries prevention. J Dent Res 1984;63: Scheie AA. Modes of action currently known chemical antiplaque agents other than chlorhexdine. J Dent Res 1989;68(spec iss): Kim SK, Song JH, Kim JB, Chang KW, Jeon JG. In vitro anticariogenic activity of Polygoni Radix. J Korean Acad Oral Health 2005;29: Kang MS, Oh JS, Kang IC, Hong SJ, Choi CH. Inhibitory effect of methyl gallate and gallic acid on oral bacteria. J Microbiol 2008;46: Chung DI, Ro JS, Chang KW. Antibacterial effect of some flavonoids against cariogenic bacteria. J Korean Acad Oral Health 1996;20: Saeki Y, Kato T, Naito Y, Takazoe I, Okuda K. Inhibitory effects of funoran on the adherence and colonization of mutans streptococci. Caries Res 1994;30: Kang MY, Jeong YH, Eun JB. Physical and chemical characteristics of flesh and pomace of japanese apricots (Prunus mume Sieb. Zucc). Korean J. Food Sci. Technol. 1999;31: Havsteen B. Flavonoids, a class of natural products of high pharmacological potency. Biochem Pharmaco 1983;32: Lee HA, Nam ES, Park SI. Antimicrobial activity of maesil (Prunus mume) juice against selected pathogenic microorganisms. J Korean Soc Food Sci Nutr 2003;16: Kim YS, Park YS, Lim MH. Antimicrobial activity of Prunus mume and schizandra chinenis H-20 extracts and their effects on quality of functional kochujang. Korean J. Food Sci. Technol. 2003;35: You JS. Studies on antimicrobial activities of Kuwanon G isolated from the root bark of Morus alba L. against Streptococcus mutans [Doctoral dissertation]. Samcheok:Kangwon National University;2001. [Korean]. 14. Katsura H, Tsukiyama RI, Suzuki A, Kobayashi M. In vitro antimicrobial activities of bakuchiol against oral microorganisms. Antimicrob Agents Chemother 2001;45: Jo MJ, Min KJ. Anti-microbial activities against oral microbes and growth-inhibitory effect on oral tumor cell of extracts of perilla and mugwort. J Environ Health Sci 2007;33: Choi BR, Kang JK, Kang KH. Antibacterial effects of extracts from citrus Peels. Journal of Digital Convergence 2012;10: Yu HH, Seo SJ, Kim YH, Lee HY, Gum GC, Na JC, et al. Effects of methanol extract of aralia continentalis on the growth, acid production, adhesion, and insoluble glucan synthesis of Streptococcus mutans. Korean J Oriental Physiology & Pathology 2005;19: Percival RS, Devine DA, Duggal MS, Chartron S, Marsh PD. The effect of cocoa polyphenols on the growth, metabolism, and biofilm formation by Streptococcus mutans and Streptococcus sanguis. Eur J Oral Sci 2006;114: Seo MH, Bae JH. Effect of butanol extracts from Prunus mume on the growth of salmonella typhimurium. J Nutr Health 2002;35: Jung JH. Inhibitory effect of Prunus mume extracts on the growth of gastric and colon cancer cell lines [master s thesis]. Daegu:Keimyung University;2000. [Korean]. 21. Bae YK, Choe TB. Antioxidant and cell activity using extracts of mume fructus. Korean J. Medicinal Crop Sci 2011;19:

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-, BSF BSF. - BSF BSF ( ),,. BSF -,,,. - BSF, BSF -, rrna, BSF.

1. 2010 6 1, 2 4 Ⅰ,Ⅱ 2013,, -,. - Human Cell.. -,., Biosand Filter(BSF) - BSF Main Filtering (Biofilm) BSF, BSF ( ),. -, BSF BSF. - BSF BSF ( ),,. BSF -,,,. - BSF,. -. -. -. - 2. BSF -, rrna, BSF. 2. -