Polymer(Korea), Vol. 39, No. 5, pp. 739-745 (2015) http://dx.doi.org/10.7317/pk.2015.39.5.739 ISSN 0379-153X(Print) ISSN 2234-8077(Online) 다양한친수성고분자를이용한삼중층정제의니페디핀서방화및특성분석 이천중 # 하현정 # 김수영 박진영 장나금 송정은 강길선 전북대학교 BIN 융합공학과, 고분자나노공학과, 고분자융합소재연구소 (2015 년 2 월 13 일접수, 2015 년 3 월 25 일수정, 2015 년 4 월 10 일채택 ) Sustained Release Formulation and Characterization of Nifedipine Three-layered Tablet Using Various Polymers Cheon Jung Lee #, Hyun Jung Ha #, Su Young Kim, Jin Young Park, Na Keum Jang, Jeong Eun Song, and Gilson Khang Dept. of BIN Fusion Technology, Polymer Fusion Research Center & Dept. of PolymerNano Science Technology, Chonbuk National Unviersity, 567 Baekje-daero, Jeonju 561-756, Korea (Received February 13, 2015; Revised March 25, 2015; Accepted April 10, 2015) 초록 : 니페디핀은고혈압치료제로쓰이는약물로난용성이기때문에용출률의개선이필요한약물이다. 또한반감기가 1.5~2 시간정도로짧기때문에약물방출을서방화시킬필요성이있다. 본연구에서는니페디핀의약물방출을조절하기위하여다중층정제를통한 24 시간방출제어를목표로하였다. 다중층정제는윗층과아래층그리고가운데층의세층으로이루어지며윗층과아래층은 gel-forming 고분자를이용하여방출조절을시도하였다. 가운데층은니페디핀의용출률향상을위해니페디핀과폴리비닐프롤리돈 K30 의고체분산체를제조하여사용하였다. 고체분산체분석을위한 SEM, XRD 그리고 DSC 분석을실시하였으며, 인공장액 (ph 6.8) 에서생체외용출거동을 24 시간동안실시하였다. 실험결과, 여러종류의친수성고분자종류중하이드록시프로필메틸셀룰로스 K15M 을사용한니페디핀삼중층제형이가장좋은서방형패턴과용출률을확인할수있었다. 이를통해니페디핀의서방화가능성을확인할수있었다. Abstract: Nifedipine is mainly used for treatment of antianginal (especially in Prinzmetal s angina) and antihypertensive. However, it is needed to improve the dissolution rate because it is poorly water-soluble drug. Nifedipine needs the sustained release formulation due to its short half-life of 1.5~2 h. Therefore, the purpose of this study is to control the burst release of nifedipine through the multi-layer as three layers formulation for 24 h. Upper and bottom layers consisted of gel-forming polymers as release controlling agent, and the middle layer was prepared by nifedipin-pvp K30 solid dispersion. The prepared solid dispersion was analyzed by SEM, XRD and DSC. The prepared multi-layer tablet was characterized by swelling assays. The release behavior of nifedipine from the multi-layer tablet was confirmed through in vitro assay (ph 6.8). It was confirmed that the nifedipine three-layered tablet using hydroxypropylmethyl cellulose (HPMC) K15M showed the best of sustained pattern and dissolution behavior. Keywords: sustained release, multi-layer formulation, nifedipine, PVP K30, hydroxypropylmethyl cellulose (HPMC). 서 경구용서방성방출제어제제는보통 12 시간에서 24 시간동안약효를나타내도록설계되어있다. 이시간동안, 제형이유지되면서약물이서서히방출되며, 혈중농도의항상성을유지하도록한다. 또한체내에서배설및대사등소실인 론 # These authors contributed equally to this works. To whom correspondence should be addressed. E-mail: gskhang@chonbuk.ac.kr 2015 The Polymer Society of Korea. All rights reserved. 자에의해소실되는약물의농도를보충하도록약물을계속위장관을통하여일정하게흡수시킨다. 따라서 12 시간에서 24 시간동안약효를일정하게유지할수있어서급격한농도상승에대한부작용이발생하지않아, 1 환자의복용편의성을만족시키는제형이다. 이제제는매트릭스체계및캡슐형제제로분류되고고분자의성질에따라불용성및용해성형태로분류된다. 2 본연구에서사용한약물인니페디핀은고혈압강하제이며심근과혈관근막의세포를통한칼슘이온의유입만을선택적으로차단하는칼슘길항제로서관상동맥성심장질환의초기 739
740 이천중 하현정 김수영 박진영 장나금 송정은 강길선 Figure 1. Schematic diagram of tablets using various water soluble polymers. 및장기치료에사용된다. 특히, 관부전증, 협심증, 심근경색증후군및휴식시의협심증등에유용하다. 3,4 그러나이약물은난용성질산염을가지고있는결정성약물로서물에대한용해도가 0.0056 g/l 정도의낮은용해도를가지며빛에민감한감광성약물이라는단점을가진다. 또한 1.5~2 시간의짧은반감기덕분에약효시간도길지않아잦은복용이필요하여서방화와동시에용출률의향상또한필요한실정이다. 5,6 이러한이유로본연구에서는삼중층을제조하였다. Figure 1 에나타낸것과같이가운데층은니페디핀고체분산체층그리고위아래층은 gel-forming 층으로이루어졌다. 가운데층은니페디핀약물을수용성고분자인폴리비닐피롤리돈 (PVP) K30 을이용하여분무건조방법을통해고체분산체로가운데층을제조하였으며, 윗층과아래층은하이드록시프로필메틸셀룰로오스 (HPMC), 폴리에틸렌옥사이드 (PEO) 그리고하이드록시에틸셀룰로오스 (HPC) 인다양한친수성고분자를이용하여물리적으로혼합후에가운데층인고체분산체를사이에두고위아래각층을쌓아직접분말압축법으로삼중층정제를제조하여용출률향상을꾀하였다. 7-9 제조된고체분산체는주사전자현미경 (SEM) 을통한형태학적분석, X 선회절분석법 (XRD), 시차주사열량측정법 (DSC) 그리고적외선분광법 (FTIR) 을통해결정학적분석을실시하였으며, 10 삼중층정제는인공장액 (ph 6.8) 에서생체외방출거동을실시하였다. 실 시약및재료. 실험에사용한약물인염산니페디핀은 Hwan In Pharm. Co., Ltd.( 한국 ) 에서구입하였고, 고분자인 PVP K30 은 Showa( 일본 ) 에서락토스, Kolidon VA 64, PEO 8000K, PEO 4000K, Carbopol 은 Sigma-Aldrich( 미국 ) 에서하이드록시프로필메틴셀룰로오스 K100M, HPMC K15M, L- HPC 는 Hwan In Pharm. Co., Ltd.( 한국 ) 에서구입하여사용하였다. 또한활택제로사용한마그네슘스티아레이트는 Junsei Chem. Co.( 일본 ) 에서구입하여사용하였다. 그외사용한모든시약은 HPLC 등급을사용하였다. 중간층고체분산체제조. 실험에사용한난용성약물인염산니페디핀과 PVP K30 을이용하여 Table 1 과같은비율로메탄올에함께녹인후 Table 2 의분무건조조건으로고체분산체를제조하였다. 11,12 제조된모든고체분산체는사용하기전까지데시게이터안에보관하였다. 험 Table 1. Formulation of Nifedipine Solid Dispersion as Middle Layer (mg) Solid dispersion (SD) Nifedipine 11 PVP K30 55 Total 66 Table 2. Condition of Spray-drying for Solid Dispersion Parameter Setting Inlet temperature 160 o C Outlet temperature 90±5 o C Atomizing 10 kpa Flow rate 0.30 m 3 /min Pump speed 3 ml/min Table 3. Formulation of Release Controlling Layers as Upper and Bottom Layers for Nifedipine Sustained Release Tablets (mg) 1 2 3 4 5 6 7 Kollidon VA64 100 HPMC K100M 100 HPMC K15M 100 PEO 8000K 100 PEO 4000K 100 Carbopol 100 L-HPC 100 Lactose 62 Croscamellose calcium 5 Mg. stearate 1 Total 168 삼중층정제의제조. Kollidon VA64, PEO 8000K, PEO 4000K, Carbopol, 하이드록시프로필메틴셀룰로오스 K100M, HPMC K15M, L-HPC 와같은친수성고분자는서방성삼중층정제를위한윗층과아랫층에사용되어졌다 (Table 3). Table 2 와같은비율로중간층을제조한뒤 Figure 1 과같이각층을쌓아직접분말압축법으로삼중층정제를제조하였고, Figure 2 에는외관을나타내었다. 13 정제는혼합물을 5 mm 몰드에넣고가압프레스 (MH-50Y CAP 50 톤, 일본 ) 를이용해 100 kg/cm 2 의힘을가하여 20 초를유지시켜얻었다. 최종적으로제조된염산니페디핀정제는사용하기전까지데시케이터에보관하였다. 중간층고체분산체의형태학적분석. 염산니페디핀원약 폴리머, 제 39 권제 5 호, 2015 년
다양한친수성고분자를이용한삼중층정제의니페디핀서방화및특성분석 741 Figure 2. Multi-layer tablet formulation. 물및여러수용성고분자, 그리고제조된고체분산체의입자상태및표면을관찰하기위해서주사전자현미경 (Bio LV- SEM, S-3000N, Hitachi Co, 일본 ) 을사용하여분석하였다. SEM 관찰을위해시료를탄소테이프위에샘플을고정시키고아르곤가스하에서백금-팔라듐코팅을 200초동안실시하였다. 코팅된시료는 15.0 kv에서관찰하였다. 14,15 중간층고체분산체의특성분석. 염산니페디핀원약물및 PVP K30, 그리고제조된고체분산체의결정학적특성을확인하기위하여 XRD(MAX 2500 X-ray diffractometer, 일본 ), DSC(TA5000/DSC2950, TA Instrument, USA), FTIR(GX, Perkin Elmer, Waltham, Massachusetts, USA) 을사용하여분석하였다. XRD 분석시시작각과종료각은각각 5 o 에서 50 o 로하였으며, step size는 0.02 o 로설정하였다. X선회절은 0.3 mm의투명한유리기판에일정량의시료를충분히적층시켜배향이발생하지않도록하였으며, 30 ma, 40 kv 조건으로측정하고 DSC 분석은 10 o C/min의승온속도로 0~250 o C의범위에서온도를증가시키면서결정성을확인하였다. 마지막으로 FTIR은 4000~650 cm -1 범위에서분석을실시하였다. 중간층고체분산체의약물함량측정. 고체분산체의약물함량을측정하기위하여메탄올 20 ml에니페디핀 10 mg을녹인용액과같은양의메탄올에고체분산체 60 mg( 고체분산체의비율-약물 : 고분자 =1:5) 을녹인용액을 1mL씩취하여 0.45 µm의 PTFE 필터로여과한후 HPLC를이용하여측정하였으며다음과같은수식을사용하여약물함량을측정하였다. 실제고체분산체의약물함류량포접률 (%) = 100 (1) 고체분산체제조시약물량사용량 중간층고체분산체의생체외용출거동. 고체분산체의용출시험은고체분산체와순수니페디핀을각각캡슐에넣어대한약전제 9 개정용출시험제 2 법인패들법으로실시하였다. 용출액은인공위액 (ph 1.2) 으로대한약전 ( 제 9 개정용출실험법제 1 액 - 인공위약 ) 에따라제조하였으며용출기는 DTS-8(Lab House, 한국 ) 을사용하였고, 속도는 50 rpm, 용출액의온도는 37±0.5 o C 로설정하였다. 16 용출액의양은 900 ml 로설정하였으며시료는 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90, 120 분에걸쳐각시간별로시료를 1mL 씩취한후인공장액 ( 대한약전제 9 개정붕해시험법제 2 액, ph 6.8) 1 ml 씩충진하였다. 취한시료는 0.45 µm 의 PTFE 필터로여과한후 HPLC 를이용하여측정하였다. 삼중층생체외용출거동. 제조된정제의용출시험은대한약전제 9 개정용출시험제 1 법인회전검체통법으로실시하였다. 용출액은인공위액 (ph 1.2) 과인공장액 (ph 6.8) 으로대한약전 ( 제 9 개정용출실험법제 1 액 - 인공위액, 제 2 액 - 인공장액 ) 에따라제조하였으며, 용출기는 DTS-8(Lab House, 한국 ) 을사용하였고, 속도는 100 rpm, 용출액의온도는 37± 0.5 o C 로설정하였다. 용출액의양은 900 ml 로설정하였으며실험시간은인공위액용출시험의경우 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90, 120 분에걸쳐진행하였고, 인공장액용출시험은 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90 분, 2, 4, 6, 9, 12, 18, 24 시간에걸쳐진행하여각시간별로시료를 1mL 씩취한후인공장액을 1mL 씩충진하였다. 취한시료는 0.45 µm 의 PTFE 필터로여과한후 HPLC 를이용하여측정하였다. 여러정제의약물방출거동을측정하기위한 HPLC 분석기는 NS-4000 HPLC system(futecs, 한국 ) 과 NS-6000 autosampler(futecs, 한국 ) 를사용하여분석하였다. 컬럼은 5µm C 18 컬럼 (250 4.6 mm) Bischoff Chromatography( 미국 ) 사제품을이용하였으며, 유속은 1.0 ml/min, 시료주입량은 100 µl 로설정하여분석하였다. UV 파장은 254 nm 에서분석하였으며, 사용한이동상은인산으로 ph 2.5 를조정한 KH 2 PO 4 수용액과아세토니트릴을 6:4(v/v%) 의비율로혼합하여사용하였다. 제조된이동상은교반후사용하기전에초음파분쇄기로가스를제거하여사용하였다. 결과및토론 중간층고체분산체의특성분석. 니페디핀의물에대한용해도는 0.0056 g/l 로매우낮기때문에용해도를개선시킬필요성이있다. 이때문에용해도를개선하기위한방법으로고체분산체방법을이용하였다. 고체분산체는니페디핀과 PVP K30 을 1:5 의비율로혼합하여분무건조기를이용하여제조하였으며고체분산체의약물함량측정결과 90.38% 의포접률을보였다. 중간층고체분산체의형태학적분석. 고체분산체의형태학적분석을위하여 SEM 촬영을실시하였으며결과를 Figure 3 에나타내었다. 니페디핀의경우약 30 µm 정도크기에각진형태의결정성모양을갖는것이확인되었고, PVP K30 의경우약 50 µm 정도의크기에무정형을띠는표면이매끄러운구형형태의모양을보였다. 그리고니페디핀과 PVP K30 의고체분산체를살펴보면약 5µm 정도의크기로 API 와 PVP 에비해확연한표면적차이를보였으며형태는 Figure 3 과같이찌그러져있는모양의구형을띠고있음을확인할수있었으나약물의결정성모양이거의보이지않는것을 Polymer(Korea), Vol. 39, No. 5, 2015
742 이천중 하현정 김수영 박진영 장나금 송정은 강길선 볼 수 있다. 고체분산체의 이러한 특징은 고체분산체를 제조 할 때 고온, 고압의 조건 하에서 분무 건조를 통해 제조되었 기 때문으로 사료되는데 용액 상태로 존재하던 약물과 고분 자의 혼합용액을 분무건조기를 통해 용매를 증발시키는 과정 에서 용기를 고온으로 유지하고 고압 분무형식으로 용액을 뿌려주기 때문에 고압 분무되는 용액은 외부의 고온에 노출 되자마자 순식간에 용매가 증발하며 고체분산체 분말만이 남 게 되는데 이 때문에 용액 속 약물이 결정을 이루기 전에 매 우 빠르게 용매가 증발하게 되고 이 결과 무정형을 가지는 고체분산체가 만들어지게 된다. 또한 고압으로 분무해주는 방 식 때문에 분무되는 용액의 표면적이 매우 작고 이 결과 고 체분산체는 매우 작은 표면적을 가진다.17-19 이러한 형태적 차이는 용출률에 큰 영향을 주는 것으로 사 료된다. 중간층 고체분산체의 화학 및 결정성 분석. 니페디핀과 PVP K30 그리고 고체분산체의 특성 분석을 위해서 XRD와 DSC 그리고 FTIR 분석을 실시하였으며 그 결과를 Figures 4~6에 각각 나타내었다. 먼저 Figure 4에 나타낸 XRD 분석 의 결과를 살펴보면 니페디핀의 경우 고유의 결정성 회절 피 크가 나타나는 것을 볼 수 있었으며 PVP K30 경우 무정형 의 결정성 피크를 나타내는 것을 볼 수 있었다. 니페디핀과 PVP K30 고체분산체의 경우 PVP K30의 회 절 피크와 유사한 회절 피크만이 나타났으며 니페디핀의 고 유 결정성 피크는 나타나지 않았다. 다음으로 Figure 5에 나타낸 DSC 분석 결과의 경우 니페 디핀의 흡열피크가 180 oc 부근에서 나타났으며 PVP K30의 경우 95 oc 부근에서 흡열피크가 나타남을 확인할 수 있었다. 니페디핀과 PVP K30의 고체분산체의 경우 앞선 XRD 분석 결과와 마찬가지로 95 oc 부근에서 흡열피크를 보이며 PVP K30과 유사한 분석결과를 나타내었다. 마지막으로 Figure 6 의 FTIR 결과를 보면 니페디핀의 경우 3400~3200 cm-1에서 N-H 결합을 보이며 니페디핀 고유의 IR 피크를 나타내었으 며 PVP K30의 경우 PVP의 고유의 IR 피크를 나타내는 것 을 볼 수 있었다. 니페디핀과 PVP K30 고체분산체의 경우 니페디핀에서 나타났던 N-H 결합의 IR 피크가 사라졌음을 확인할 수 있었는데 이는 고체분산체 제조 중에 약물과 고분 자 사이에 염이 생성되어 수소결합을 이루었기 때문이라 사 료된다.20 Figure 3. SEM image of (a) nifedipine; (b) PVP K30; (c) nifedipinepvp K30 solid dispersion. Figure 4. XRD spectra of (a) nifedipine; (b) PVP K30; (c) nifedipine-pvp K30 solid dispersion. 폴리머, 제39권 제5호, 2015년
다양한친수성고분자를이용한삼중층정제의니페디핀서방화및특성분석 743 Figure 5. DSC spectra of (a) nifedipine; (b) PVP K30; (c) nifedipine- PVP K30 solid dispersion. Figure 6. FTIR spectra of (a) nifedipine; (b) PVP K30; (c) nifedipine- PVP K30 solid dispersion. 이러한결과로살펴보면분무건조를통한니페디핀과 PVP 의고체분산체제조로인해약물의결정성은사라지고고체분산체가무정형을띠는것을알수있었고, 각분석그래프결과를보면고체분산체의피크가 PVP K30 의피크와거의일치하는것으로보아 PVP K30 이약물을감싸고있는형태를가지는것으로판단되며또한, 약물과고분자를같은용매에녹여하나의용액으로만들어분무건조를통해고체분산체로제조했기때문으로사료된다. 21,22 약물이용해시결정성을띠는경우보다무정형의형태를가지고있을때더욱높은용해도를보이는데이는약물이결정형을가질때보다무정형을가질때용해시에너지적으로불안정적이어서반응성이증가하게된다. 따라서위의결정학적분석결과를살펴볼때기존원약물보다큰용출률을기대할수있을것으로보여진다. Figure 7. Release behavior of nifedipine-pvp K30 solid dispersion and neat API. 중간층고체분산체의생체외용출거동. 니페디핀 -PVP K30 의고체분산체의용출률향상결과를확인하기위하여인공위액 (ph 1.2) 에서생체외용출거동을실시하였다. 그결과 Figure 7 에나타난바와같이확연한용출률차이를보여주었다. 순수니페디핀의경우 2 시간동안의용출실험에서최종용출률약 12% 의매우낮은용출률을보여주었으며니페디핀 -PVP K30 의고체분산체의경우용출시작 1 시간만에약 97% 의용출률을보였고최종적으로 100% 의용출률을나타내었다. 이러한용출률차이는니페디핀과 PVP K30 의고체분산체를만드는과정에서약물의결정성이사라지고약물을둘러싸고있던수용성고분자인 PVP K30 의영향으로앞선고체분산체의특성분석에서나타난결과에서예상되었던바와같은높은용출률향상을보여주었다. 삼중층생체외용출거동. 생체외용출거동은용출시험제 1 법을통해진행하였으며인공위액 (ph 1.2) 에서 2 시간, 인공장액 (ph 6.8) 에서 24 시간동안용출시험을실시하였고그결과를각각 Figures 8 과 9 에그래프로나타내었다. 먼저인공위액에서 2 시간동안의용출시험결과 Figure 8 과같이정제들의경우대체적으로빠른용출을보이며높은최종용출률을대부분 30% 미만의최종용출률을보이며위액의낮은 ph 에서도방출이제어되는것을보여주었다. 그러나대부분의정제들이약 10% 이상의초기방출을보이는것을볼수있었다. 23 이것은정제의모양에따른영향으로정제의모양을보게되면약물층인가운데층을방출제어층인윗층과아래층사이에끼워놓은모양 (Figure 2) 으로가운데층의바깥부분이외부에노출되어있다. 이러한이유때문에정제가체액과만나위아래층이팽창하면서가운데층의노출부위를완전히감싸기전에먼저노출된가운데층의바깥부위에서약물이먼저방출된것으로사료된다. Polymer(Korea), Vol. 39, No. 5, 2015
744 이천중 하현정 김수영 박진영 장나금 송정은 강길선 Figure 8. Release behavior of nifedipine multi-layer tablets for batch 1~7 and API (ph 1.2, 2 h). Figure 9 에나타낸인공장액에서 24 시간동안의용출시험결과를살펴보면 Kollidon VA64 정제의경우, 용출시작 1 시간만에거의 100% 의용출률을달성했으며다음으로 L-HPC 정제가 4 시간, PEO 4000K 정제가 6 시간만에 100% 용출률에도달하였다. 이결과 Kollidon VA64 와 L-HPC 그리고 PEO 4000K 정제는 24 시간서방정제로서는부적합함을보여주었다. 앞선 3 가지고분자정제와다르게나머지고분자정제들은 Figure 9 와같이확연한서방성특성을보여주었는데각정제의 24 시간동안의최종용출률이 HPMC K100M, HPMC K15M, PEO 8000K, Carbopol 각각 65, 98, 61, 69% 로나타났다. 처음용출시작시점부터 24 시간의용출실험이끝날때까지서서히증가되는약물방출을보여주었다. 24 시간동안방출률이 60% 대에머문 HPMCK 100M, PEO 8000K, Carbopol 의경우방출이아직진행되고있는것으로사료되어진다. HPMC K15M 정제의경우 24 시간동안지속적인서방형방출의패턴을보여주면서최종용출률 98% 로 7 개의삼중층정제중에 24 시간서방성방출정제라는이번실험에가장부합하는결과를보여주었다. Figure 9. Release behavior of nifedipine multi-layer tablets for batch 1~7 and API (ph 6.8, 24 h). 결 본연구는매우짧은반감기를가지는니페디핀의복용편의성과약물전달의효율을높이기위하여니페디핀의 24 시간서방화를위한목적으로실험을진행하였다. 이를위하여가운데층에니페디핀고체분산체층을제조하고, 바깥층을서방성고분자로만든삼중층제형을설계하였으며니페디핀의난용성을개선하기위해가운데층은니페디핀과 PVP K30 을분무건조법을통해고체분산체를제조하여사용하였다. 니페디핀과 PVP K30 의고체분산체의경우형태학적, 결정학적, 구조학적분석을통해분석한결과표면적이확연하게증가하였으며니페디핀의결정성은사라지고 PVP K30 에약물이포접되어있음을확인할수있었고이결과 3 배이상의용출률향상을보였다. 이러한중간층고체분산체와위아래층의여러수용성고분자를이용한삼중층제형의비교분석결과 HPMC K15M 의제형에서서방성방출패턴을확인하였으며 24 시간동안 98% 의최종용출률로니페디핀의 24 시간서방정제화에서가장좋은결과를보여주었다. 이러한실험결과를통해니페디핀 론 폴리머, 제 39 권제 5 호, 2015 년
다양한친수성고분자를이용한삼중층정제의니페디핀서방화및특성분석 745 의서방화삼중층제형에대한가능성을발견할수있었고니페디핀뿐만아니라여러약물에적용할수있을것이라사료된다. 감사의글 : 본연구는한국연구재단 BK21 플러스사업, 바이오 의료기술개발 (2012M3A9C6050204) 과기술사업화지원사업 (814005-03-1-HD020) 에의해수행되었습니다. 참고문헌 1. L. Ho, R. Muller, K. C. Gordon, P. Kleinebudde, M. Pepper, T. Rades, Y. Shen, P. F. Taday, and J. A. Zeitler, Eur. J. Pharm. Sci., 71, 117 (2009). 2. M. Ashraf, V. L. Iuorno, D. Coffin-Beach, C. A. Evans, and L. L. Augsburger, Pharm. Res., 11, 733 (1994). 3. J. Huang, R. J. Wigent, C. M. Bentzley, and J. B. Schwartz, Int. J. Pharm., 319, 44 (2006). 4. H. Suzuki and H. Sunada, Chem. Pharm. Bull., 45, 1688 (1997). 5. W. Z. Yusof, Singapore Medical J., 29, 498 (1988). 6. M. H. L. Li, G. Khang, and J. Gao, Inter. J. Pharm. Sci., 3, 65 (2013). 7. T. T. Tran, P. H. Tran, and B. J. Lee, Eur. J. Pharm. Sci., 72, 83 (2009). 8. T. Ohara, S. Kitamura, T. Kitagawa, and K. Terada, Int. J. Pharm., 302, 95 (2005). 9. R. H. Dave, A. D. Patel, E. Donahue, and H. H. Patel, Drug Dev. Ind. Pharm., 38, 930 (2012). 10. Y. Woo and K. Na, Inter. J. Tissue Regen., 3, 63 (2012). 11. T. Mizoe, S. Beppu, T. Ozeki, and H. Okada, J. Contr. Rel., 120, 205 (2007). 12. J. D. Ormes, D. Zhang, A. M. Chen, S. Hou, D. Krueger, T. Nelson, and A. Templeton, Pharm. Dev. Technol., 18, 121 (2013). 13. S. Rujivipat and R. Bodmeier, Eur. J. Pharm. Sci., 76, 486 (2010). 14. A. Paudel and G. Van den Mooter, Pharm. Res., 29, 251 (2012). 15. P. Gupta, V. K. Kakumanu, and A. K. Bansal, Pharm. Res., 21, 1762 (2004). 16. J. H. Lee, J. W. Bae, and C. R. Shim, Inter. J. Tissue Regen., 3, 83 (2012). 17. T. Mizoe, S. Beppu, T. Ozeki, and H. Okada, J. Contr. Rel., 120, 205 (2007). 18. G. Bertrand, P. Roy, C. Filiatre, and C. Coddet, Chem. Eng. Sci., 60, 95 (2005). 19. M. Shibata, K. Otsubo, M. Ohara, R. Omae, T. Niwa, and K. Danjo, Yakugaku Zasshi, 132, 1317 (2012). 20. D. H. Yang and H. J. Chun, Inter. J. Tissue Regen., 4, 41 (2013). 21. J. Chen, L. Qiu, M. Hu, Y. Jin, and J. Han, Drug Dev. Ind. Pharm., 34, 588 (2008). 22. N. Ahuja, O. P. Katare, and B. Singh, Eur. J. Pharm. Sci., 65, 26 (2007). 23. S. Lu, W. F. Ramirez, and K. S. Anseth, J. Pharm. Sci., 89, 45 (2000). Polymer(Korea), Vol. 39, No. 5, 2015