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太陰調胃湯加減方 dbdb 마우스 肝에 대한 아디포사이토카인 및 발현에 미치는 영향 SREBPs 와 섞어서 하고 마커 또한 하여 전기 영동을 하였다 전기영동을 한 후에 에 를 쪼여서 각 를 확인하였다 이 를 프로그램을 이용해 수치화하 여 분석하였다 肝 조직 동결 절편 분리한 조직은 로 시간 동안 고정 시킨 후 에 세척한 후 물기를 제거하고 동결조직 포매제인 STAR 1 loading loading agar gel cdna UV cdna 6) 4% PFA 2 PBS solution Optical cutting temperature(oct) compound(sakura 에 고정시켜 동결조직 을 만들었다 간조직은 두께로 으로 잘랐으며 조직 절편을 슬라이드에 신속 히 붙인 후 실온에서 시간가량 건조 후 에서 슬라이드를 보관하였다 염색 ℓ 를 에 넣고 실온에서 진탕하여 포화용액을 만 든 후 오븐에 보관하며 염색직전에 포화용액과 증류수를 비율로 섞은 용액을 여과지 로 여과하 여 사용하였다 실험직전 조직을 붙인 슬라이드는 실온에서 시간가량 건조 후 슬라이드를 물에 세척하고 에 분간 구었고 여과한 에 슬라이드를 넣고 분간 염색 후 에 넣고 분간 탈색하였다 다시 슬라이드를 흐르는 물에 분간 세척하고 에 초간 염색하고 다시 물에 세척하였 다 염색 후 로 봉합하고 현미경으로 관찰하고 촬영하였다 통계처리 실험결과 통계처리는 프로그램을 사용하였으 며 모든 측정값은 으로 표시하였고 분석에 대한 유 성은 로 검증하였으며 에서 유 성이 있는 것으로 인정하였다 USA) block microtome 30 1-70 7) Oil-red-O 3 g Oil red O(Sigma USA) powder % Isopropanol solution Fig 1 Effects of Taeeumjowuitanggagam-bang(TJV) on the Body Weight in Obesity Mice for Weeks The results are expressed as MeanSEM Normal: 4 db+ mice admistered with diet Control: 4 dbdb mice admistered with diet and normal saline TJV 200: 5 dbdb mice admistered with diet and TJV 200 mgkg : 6 dbdb mice admistered with diet and TJV 500 mgkg 2 60 6:4 (Whatman England) 1 10 70% isopropanol gpd Oil red O 70% isopropanol 15 3 5 solution(sigma USA) 2 혈장 생화학분석 결과 1) Total cholesterol 총 콜레스테롤 농도는 정상은 대조 은 은 으로 에서 총 콜레스테롤이 다소 감소하였으나 유성은 없었다 은 23050 723 44467 24 TJV 200 3350 8224 443 608 (p=03432) (p=0807) (Fig 2) hematoxylin 30 Faramount Aqueous Mounting Medium(Dako Japan) 8) SPSS 140 Mean SEM Student's t-test p-value<005 Fig 2 The Concentration Variation of Total Cholesterol in Serum Table 1 The Sequence of Primers used for RT-PCR Gene SREBP-1C IL-6 The results are expressed as MeanSEM Normal: 4 db+ mice admistered with diet Control: 4 dbdb mice admistered with diet and normal saline TJV 200: 5 dbdb mice admistered with diet and TJV 200 mgkg : 6 dbdb mice admistered with diet and mgkg Sequence Forward 5 -GAGGGGCCATCCACAGTCTTC-3 Reverse 5 -CATCACCATCTTCCAGGAGCG-3 Forward 5 -GGAGATGCAGGTCTTCTTGGT-3 Reverse 5 -TCCTGATACTGGTCGTAGGTGAA-3 Forward 5 -CAAGAGACTTCCATCCAGTTGC-3 Reverse 5 -TTGCCGAGTAGATCTCAAAGTGAC-3 Forward 5 -ATGTGCTGGAGACCCCTGTGT-3 Reverse 5 -TCAGCATTCAGGGCTAACAT-3 결 과 실험동물 체중 변화 정상은 에서 시작하여 주차에서는 대 조은 에서 시작하여 주차에서는 은 에서 시작하여 주차에서는 은 에서 시작하여 주차에서는 으로 총 주 동안 실험 기간 동안 유성 있는 체중 변화는 볼 수 없었다 1 208 g 346 g 315 g 325 g 263 16 g 448 21 g TJV 200 400 15 g 422 52 g (p>005) (Fig 1) The results are expressed as MeanSEM Normal: 4 db+ mice admistered with diet Control: 4 dbdb mice admistered with diet and normal saline TJV 200: 5 dbdb mice admistered with diet and TJV 200 mgkg : 6 dbdb mice admistered with diet and mgkg Fig 3 The Concentration Variation of Triglyceride in Serum - 1 -

백종우 정미경 고성규 전찬용 박종형 최유경 이었다 와 모 두에서 농도 존적으로 발현이 유성 있게 감소함 을 보여주고 있다 이로 인해 지방합성이 저하된다고 사료된다 2) Triglyceride 중성지방 농도는 정상은 대조은 은 은 으로 에서 다소 감소하였으나 유성은 없었다 36100 6250 44333 1457 500 TJV 200 38050 6403 457 71 (p=0163) 241 32(p=0008) SREBP-1a SREBP-1c (p=0238) TJV (Fig 6) (Fig 3) 발현 분석 결과 본 실험에서는 에 따른 효과로 인해 아디포사이토카인 α 과 발현정도에 영향을 주는 지를 방법으로 알아보았다 3 TJV (TNF- IL-6) SREBPs reverse transcription-pcr 1) 발현 수치는 정상 대조 으로 대조과 달리 과 발현 수준이 유성 있게 감소함을 확인 1516 185 TJV 15138 20 200 14568 178(p=0362) 1423 517(p=0042) 에서 α 할 수 있었다 TNF- IL-6 TJV 200 TJV 500 (Fig 4) Fig 5 Effect of TJV on L-6 Expression in Liver The levels of IL-6 were determined by RT-PCR The results are expressed as MeansSEM *: Statistically significant decrease of IL-6 compared with the control group(p<005) Normal: 4 db+ mice admistered with diet Control: 4 dbdb mice admistered with diet and normal saline TJV 200: 5 dbdb mice admistered with diet and TJV 200 mgkg : 6 dbdb mice admistered with diet and mgkg A SREBP-1a levels were determined by RT-PCR The results are expressed as MeansSEM *: Statistically significant decrease of compared with the control group(p<005) Normal: 4 db+ mice admistered with diet Control: 4 dbdb mice admistered with diet and normal saline TJV200 : 5 dbdb mice admistered with diet and TJV 200 mgkg TJV500 : 6 dbdb mice admistered with diet and mgkg Fig 4 Effect of TJV on Expression in Liver 2) IL-6 발현 수치를 관찰한 결과 정상 대조 이었다 에서 감소는 유성이 없었으나 에서 유성 있는 감소를 확인하였으므로 농 도 존적으로 발현이 감소함을 볼 수 있었다 IL-6 14568 431 153 704 TJV 200 1333 8(p=0042) 1467 226(p=0362) TJV 200 3) SREBPs 발현 수치는 대조 이었다 대조 SREPBs 077 542 471 20 에서는 정상 에서는 정상 SREPB-1a 30 116 TJV 200 8218 530(p=0005) B (Fig 5) SREBP-1c 8720 276(p=0006) SREPB-1c 84 16 TJV 200 613 173(p=0048) - 2 -

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