57(3) 04.fm

약학회지제 57 권제 3 호 205~212 (2013) Yakhak Hoeji Vol. 57, No. 3 종설 이토프리드염산염정과티로프라미드염산염정의용출시험법개발 김정현 이종화 최란 최연희 이종철 안지혜 이광문 심영훈 강신정 사홍기 * 최후균 ** 김인규 # 식품의약품안전평가원, * 이화여자대학교약학대학, ** 조선대학교약학대학 (Received March 19, 2013; Revised June 13, 2013; Accepted June 13, 2013) Development of Dissolution Test for Itopride Hydrochloride Tablets and Tiropramide Hydrochloride Tablets Jung Hyun Kim, Jong Hwa Lee, Lan Choi, Yeon Hee Choi, Jong Chul Lee, Ji Hye An, Gwang Moon Lee, Young Hoon Shim, Shin-Jung Kang, Hong-Kee Sah*, Hoo-Kyun Choi** and In-Kyu Kim # National Institute of Food and Drug Safety Evaluation (NIFDS-MFDS), Chungbuk 363-700, Korea *College of Pharmacy, Ewha Womans University, Seoul 120-750, Korea **College of Pharmacy, Chosun University, Gwangju 501-759, Korea Abstract Dissolution test has been performed to control drug quality and to predict in vivo drug release profile of solid dosage forms, so there's a drift towards setting dissolution test instead of disintegration test. However, some solid dosage forms in Korea Pharmaceutical Codex (KPC) are not established the dissolution test yet, so these monographs are necessary to set the specification of dissolution test. In this study, we developed the specification and test method of dissolution test for itopride and tiropramide which are not established the dissolution test yet. According to the Manual for Guideline Application for Validation of Analytical Procedures and Guidelines on Specification of Dissolution test for Oral dosage form of Korean Pharmacopoeia (KP), we validated and established each development method. Based on the preliminary dissolution profile, we set the dissolution condition(paddle apparatus, ph 1.2 media, 50 rpm). For this condition, we performed the main dissolution test to determine the specification (45 min, 85%). Finally, we validated each analytical method by specificity, linearity, accuracy and precision. These developed methods will be included the next supplement of KPC and also contributed to the quality control of medicines. Keywords dissolution test, itopride hydrochloride, tiropramide hydrochloride 용출시험은제제학적인면에서처방및제조공정등의변동을관리하기위한유효한판단기준이되며생물학적비동등성을방지할수있는수단으로활용될수있어, 보다나은품질관리를위해붕해시험보다용출시험을설정하는것이전세계적인추세이다. 식품의약품안전청고시수재의약품중에는용출시험이아니라붕해시험이설정된의약품이다수포함되어있어용출규격설정이필요한실정이다. 본연구에서는 대한민국약전외의약품기준 수재의약품중용출규격이설정되지않은이토프리드염산염정과신규수재예정인티로프라미드염산염정의용출규격을설정하고자하였다. 용출시험분석을위한액체크로마토 # 본논문에관한문의는저자에게로 ( 전화 ) 053-589-2701 ( 팩스 ) 053-592-2709 (E-mail) ikkim@korea.kr 그래프법을 의약품등분석법의밸리데이션에대한지침 1) 에따라확립하고, 경구용의약품의용출규격설정지침 2) 에따라용출시험을실시하였다. 이토프리드염산염정및티로프라미드염산염정각각예비시험결과를바탕으로용출조건을패들법, 용출액은 ph 1.2, 회전속도는 50 rpm으로선정하였고이에따라본시험을진행하여용출규격을용출시험개시후 45분, 80% 이상으로설정하였다. 또한밸리데이션을통해특이성, 직선성, 정확성, 정밀성을검증하여분석법의타당성을확보하였으며, 실험실간교차시험을통해용출규격의타당성을검증하였다. 또한국내유통의약품을시험약으로하여확립된시험법에적용해보았다. 본연구를통해용출시험이미설정된제제의용출규격을설정하여국내유통의약품의품질관리수준을향상시켜경구용고형제제의품질관리선진화에기여할것으로기대된다. 205

206 김정현 이종화 최란 최연희 이종철 안지혜 이광문 심영훈 강신정 사홍기 최후균 김인규 실험방법 시약및기기이토프리드염산염표준품은대희화학 ( 주 ), 티로프라미드염산염표준품 ( 주 ) 삼오제약에서분양받아사용하였으며, 액체크로마토그래프용 acetonitrile은 B&J(Columbia, USA) 사로부터, acetic acid 는 Merck(Darmstadt, Germany) 로부터, sodium acetate, sodium hydroxide, potassium dihydrogen phosphate, sodium chloride, hydrochloric acid, potassium phosphate monobasic 및 phosphoric acid은 Wako(Osaka, Japan) 에서구입하여사용하였다. 용출시험기는 VARIAN(North Carolina, USA) VK7020S를사용하였고, 액체크로마토그래프는 Waters(Massachusetts, USA) US/Alliance 2695 Separations Module, 2996 Photodiode Array Detector로분석하였다. 검체선정국내허가및유통현황을조사하여이토프리드염산염정과티로프라미드염산염정각각의시험약을선정하였다 (Table I). 이토프리드염산염 (itopride hydrochloride, N-[[4-(2-Dimethylaminoethoxy)phenyl]methyl]-3,4-dimethoxybenzamide), C 20 H 26 N 2 O 4 HCl, MW 394.90) 은도파민 D 2 수용체길항작용과아세틸콜린에스터라제저해작용의협력을통해소화관운동을항진시키는효과를나타낸다. 또한화학수용체발통대 (Chemoreceptor Trigger Zone; CTZ) 의도파민 D 2 수용체길항작용에의해오심, 구토를억제하는효과를나타내기능성소화불량으로인한소화기증상 ( 복부팽만감, 상복부통, 식욕부진, 흉통, 오심, 구토 ) 에사용한다 3-5) (Fig. 1(a)). 티로프라미드염산염 (tiropramide hydrochloride, Table I List of Itopride and Tiropramide Item Product name Dosage forms Labeled amount Itopride A Tablets 050 mg/tablet Tiropramide hydrochloride tablets B C D Tablets 100 mg/tablet Nα-benzoyl-O-[2-(diethylamino)ethyl]-N,N-dipropyltyrosinamide, C 28 H 41 N 3 O 3 HCl, MW 504.04) 은평활근세포내아데닐사이클라제효소를활성화시켜 c-amp의양을증가시켜근육세포내의칼슘저장소에과잉의칼슘이온을저장하여각종평활근의과도한수축을정상화시키는효과를나타낸다. 6) 간담도산통, 여러원인에의한복부산통, 신장 요관의산통에서의급성경련성동통과위장관이상운동증, 담석증, 담낭염, 수술후유착에서의복부경련및동통에사용한다 7) (Fig. 1(b)). 예비시험 A 및 B 제품검체 6개를가지고 대한약전 일반정보 경구용의약품의용출규격설정지침 2) 에따라예비시험을실시하였다. 4가지용출액 (ph 1.2, ph 4.0, ph 6.8 및물 ) 을시험액으로하여 대한약전 일반시험법중용출시험법제2법 ( 패들법 ) 에따라시험하였다 (Table II). 액체크로마토그래프법분석조건확립 대한약전외의약품기준 에수재된이토프리드염산염정과티로프라미드염산염정의정량법은자외가시부흡광도측정법이나 Table II Condition of preliminary dissolution test for itopride and tiropramide hydrochloride tablets Apparatus Dissolution medium Medium volume Sampling time Temperature Rotation speed KP general tests, dissolution test apparatus II (Paddle) ph 1.2, ph 4.0, ph 6.8, Water 900 ml 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90, 120 min 37±0.5 o C 50 rpm Table III HPLC conditions for itopride Detector UV 257 nm Column C18 (250 4.6 mm, 5 µm) Temperature 25 o C Buffer : Acetonitrile (80 : 20) Mobile Phase * Buffer : Dissolve 13.6 g of potassium phosphate monobasic in 1,000 ml of water Injection volume 10 µl Flow rate 1 ml/min Fig. 1 (a) Structure of itopride hydrochloride, (b) Structure of tiropramide hydrochloride. Table IV HPLC conditions for tiropramide Detector UV 230 nm Column C18 (150 4.6 mm, 5 µm) Temperature 25 o C Buffer (ph 2.5) : Acetonitrile (65 : 35) Mobile Phase * Buffer : Dissolve 6.8 g of potassium phosphate monobasic in 1,000 ml of water adjust ph 2.5 Injection volume 10 µl Flow rate 1 ml/min J. Pharm. Soc. Korea

이토프리드염산염정및티로프라미드염산염정의용출시험법개발 207 본연구에서는용출시험분석법을액체크로마토그래프법으로확립하여 (Table III, IV) 8,9) 특이성, 직선성, 정확성, 정밀성, 정량한계를포함한밸리데이션을통해분석법의타당성을검증하였다. 이토프리드염산염정 특이성은표준액및검액을 Table III 조건에따라분석하여얻은크로마토그램및포토다이오드어레이 (PDA) 를이용하여주성분피크의간섭여부를확인하였다. 직선성은이토프리드염산염표준품을시험액 (ph 1.2) 에녹여각각약 5.6, 19.4, 33.3, 47.2, 61,1 µg/ml 해당액을표준액 I, II, III, IV 및 V로하여분석법의전조작을 3회수행하여각각직선식을구하고각직선식의결정계수 (R 2 ) 로부터직선성을평가하였다. 정확성은이토프리드염산염표준품 11.1 mg을정밀히취하여시험액 (ph 1.2) 에녹여정확하게 20 ml로한것을표준원액 (555 µg/ml) 로하고, 시험약 A 1 정을시험액 (ph 1.2) 900 ml에녹인액을제제희석액으로하였다. 표준원액및제제희석액을취하여시험액 (ph 1.2) 을넣어각각 33.3, 44.4, 55.5 µg/ml 해당액을정확성시험용액 I, II 및 III로하여분석법의전조작을 3 회반복측정한결과로부터회수율 (%) 을구하여정확성을평가하였다. 정밀성은이토프리드염산염표준품 11.1 mg을정밀히취하여시험액 (ph 1.2) 에녹여정확하게 20 ml로한것을표준원액 (555 µg/ml) 로하고, 표준원액 2ml를취하여시험액 (ph 1.2) 을가하여 20 ml로한적을정밀성시험용액으로하여분석법의전조작을 6회반복측정한결과로부터상대표준편차 (%) 를계산하여정밀성을평가하였다. 정량한계는반응의표준편차와검량선의기울기에근거하는방법으로구하였다. 티로프라미드염산염정 특이성은표준액및검액을 Table IV 조건에따라분석하여얻은크로마토그램및포토다이오드어레이 (PDA) 를이용하여주성분피크의간섭여부를확인하였다. 직선성은티로프라미드염산염표준품을시험액 (ph 1.2) 에녹여각각약 6.7 33.3, 61.1, 88,8 116.6 µg/ml 해당액을표준액 I, II, III, IV 및 V로하여분석법의전조작을 3회수행하여각각직선식을구하고각직선식의결정계수 (R 2 ) 로부터직선성을평가하였다. 정확성은티로프라미드염산염표준품 22.2 mg 을정밀히취하여시험액 (ph 1.2) 에녹여정확하게 20 ml로한것을표준원액 (1110 µg/ml) 로하고, 시험약 1정을시험액 (ph 1.2) 900 ml에녹인액을제제희석액으로하였다. 표준원액및제제희석액을취하여시험액 (ph 1.2) 을넣어각각 66.6, 88.8, 111.0 µg/ml 해당액을정확성시험용액 I, II 및 III로하여분석법의전조작을 3회반복측정한결과로부터회수율 (%) 을구하여정확성을평가하였다. 정밀성은티로프라미드염산염표준품 22.2 mg을정밀히취하여시험액 (ph 1.2) 에녹여정확하게 10 ml 로한것을표준원액 (1110 µg/ml) 로하고, 표준원액 2ml를취하여시험액 (ph 1.2) 을가하여 20 ml로한것을정밀성시험용액으로하여분석법의전조작을 6회반복측정한결과로부터 Table V Condition of dissolution test for itopride hydrochloride tablets and tiropramide Apparatus KP general tests, dissolution test apparatus II (Paddle) Dissolution medium ph 1.2 Medium volume 900 ml Sampling time 5, 10, 15, 30, 45, 60 min Temperature 37±0.5 o C Rotation speed 50 rpm 상대표준편차 (%) 를계산하여정밀성을평가하였다. 정량한계는반응의표준편차와검량선의기울기에근거하는방법으로구하였다. 용출본시험및실험실간교차시험예비시험결과를바탕으로설정한용출시험액및용출조건 (Table V) 으로이토프리드염산염정은시험약 A에대하여, 티로프라미드염산염정은시험약 B에대하여한품목당검체 3 로트, 각 12정을가지고본시험 (Lab A) 및교차시험 (Lab B) 을실시하였다. 추가시험약용출시험본시험결과및실험실간교차시험결과를바탕으로설정된용출규격에따라티로프라미드염산염정시험약 C 및 D에대하여한품목당 1 로트검체 6정을가지고용출시험을실시하였다. 실험결과및고찰 예비시험예비시험결과 4가지용출액 (ph 1.2, ph 4.0, ph 6.8 및물 ) 에서이토프리드염산염정및티로프라미드염산염정모두 30분이내에 85% 이상의용출률을나타내었으며 (Fig. 2, 3) 상대적으로용출률의편차가적은 ph 1.2를시험액으로선정하였다. 액체크로마토그래프법분석조건확립이토프리드염산염정 용출시험분석법밸리데이션결과포토다이오드어레이 (PDA) 를이용하여주성분피크의단일성여부를확인하였다 (Fig. 4, 5). 이토프리드염산염은 5.6~61.1 µg/ml의범위에서결정계수 (r) 0.999 이상을나타내었고 (Table VI), 정확성 시험용액 I, II 및 III로하여분석법의전조작을 3 회반복측정한결과로부터평균회수율 98.9 %, 표준편차 0.2% 의결과를나타내었다 (Table VII). 정밀성시험용액으로분석법의전조작을 6회반복측정한결과로부터구한상대표준편차는 0.1% 였고 (Table VIII), 검량선의기울기와표준편차를통해구한정량한계는 0.1 µg/ ml이며, 밸리데이션결과개발한시험법이타당함을확인하였다 (Table IX). Vol. 57, No. 3, 2013

208 김정현 이종화 최란 최연희 이종철 안지혜 이광문 심영훈 강신정 사홍기 최후균 김인규 Fig. 3 Preliminary dissolution profiles of tiropramide hydrochloride tablets B. Fig. 2 (a) Preliminary dissolution profiles of itopride hydrochloride tablets A, (b) enlargement of 0~40 minutes dissolution profiles in Fig. 2(a). 티로프라미드염산염정 용출시험분석법밸리데이션결과포토다이오드어레이 (PDA) 를이용하여주성분피크의단일성여부를확인하였다 (Fig. 6, 7). 티로프라미드염산염은 6.7~116.6 µg/ ml의범위에서결정계수 (r) 0.999 이상을나타내었고 (Table X), 정확성시험용액 I, II 및 III로하여분석법의전조작을 3회반복측정한결과로부터평균회수율 99.1%, 표준편차 0.2% 의결과를나타내었다 (Table XI). 정밀성시험용액으로분석법의전조작을 6회반복측정한결과로부터구한상대표준편차는 0.1% 였 Fig. 4 Chromatogram and PDA scan of itopride hydrochloride standard solution. Fig. 5 Chromatogram and PDA scan of itopride hydrochloride sample solution. J. Pharm. Soc. Korea

이토프리드염산염정및티로프라미드염산염정의용출시험법개발 209 Table VI Linearity of HPLC analytical condition for itopride solution Peak area 1-I 05.6 0102.22169 1-II 19.4 0360.04474 1-III 33.3 0616.54651 1-IV 47.2 0875.04303 1-V 61.1 1136.38806 2-I 05.6 0102.00827 2-II 19.4 0360.06177 2-III 33.3 0616.92816 2IV 47.2 0870.50848 2-V 61.1 1137.55127 3-I 05.6 0101.96616 3-II 19.4 0360.01077 3-III 33.3 0616.72174 3-IV 47.2 0872.54602 3-V 61.1 1137.09729 Mean of slope 18.3 Mean of intercept -2.1 SD of slope 0.0 SD of intercept 0.1 Regression direct wire y=18.3 x-2.0 y=18.3x-2.2 y=18.3x-2.2 y=18.3 x+(-2.1±0.1) (y: peak area, x: concentration) 고 (Table XII), 검량선의기울기와표준편차를통해구한정량한계는 1.1 µg/ml이며, 밸리데이션결과개발한분석법이타당함을확인하였다 (Table XIII). s Table VII Accuracy of HPLC analytical condition for itopride solution Peak area Actual concentration Recovery (%) 1-I 0616.01471 33.8 99.1 1II 34.2 0615.09076 33.8 98.9 1-III 0615.32159 33.8 98.9 2-I 0822.29852 45.1 99.1 2-II 45.5 0822.90356 45.1 99.2 2-III 0823.84821 45.2 99.3 3-I 1024.57141 56.2 98.7 3-II 56.9 1023.85376 56.1 98.7 3-III 1023.55078 56.1 98.6 Total mean value (%) 98.9 Total standard deviation (%) 0.2 Number of sample 9 95% confidence interval 98.7~99.1 용출본시험및실험실간교차시험이토프리드염산염정 시험약 A를대상으로시험액을 ph 1.2 900 ml로하여용출본시험을한결과, 45분후평균용출률은 99.8±1.0% 이고실험실 B의교차시험결과 45분후평균용출률은 100.5±1.2% 로나타났다 (Fig. 8, Table XIV). 티로프라미드염산염정 시험약 B를대상으로시험액을 ph Table VIII Precision of HPLC analytical condition for itopride 55.5 Number of measurement Actual concentration Average recovery (%) 1 56.8 100.7 2 56.7 100.5 3 56.7 100.6 4 56.7 100.5 5 56.7 100.5 6 56.7 100.6 mean 56.7 100.6 deviation Relative standard deviation 0.1 0.1 Fig. 6 Chromatogram and PDA scan of tiropramide hydrochloride standard solution. Vol. 57, No. 3, 2013

210 김정현 이종화 최란 최연희 이종철 안지혜 이광문 심영훈 강신정 사홍기 최후균 김인규 Fig. 7 Chromatogram and PDA scan of tiropramide hydrochloride sample solution. Table IX Validation of analytical method for dissolution of itopride Dissolution Characteristics Results medium ph 1.2 Table X Linearity of HPLC analytical condition for tiropramide solution The analyt chromatographic Specificity peak is not attributable to more than one components Linearity Accuracy (n=9) 98.9±0.2% Precision (n=6) RSD=0.1% Limits of quantitation 0.1 µg/ml Peak area 1-I 006.7 136455 1-II 033.3 784429 1-III 061.1 1435072 1-IV 089.8 2080962 1-V 116.6 2718028 2-I 006.7 134698 2-II 033.3 782873 2-III 061.1 1430273 2-IV 089.8 2079692 2-V 116.6 2711668 3-I 006.7 132292 3-II 033.3 782119 3-III 061.1 1434977 3-IV 089.8 2075469 3-V 116.6 2722553 Mean of slope 23396.5 Mean of intercept -8635.9 SD of slope 42.3 SD of intercept 2430.3 Regression direct wire y=23390.2 x-6693.5 y=23357.8 x-7853.1 y=23441.6 x-11361.2 y=(23396.5±42.3)x+ (-8636.9±2430.3) (y: peak area, x: concentration) 1.2 900 ml로하여용출본시험을한결과, 45분후평균용출률은 102.1±1.6% 이고, 실험실 B의교차시험결과 45분후평균용출률은 91.9±5.0% 로나타났다 (Fig. 9, Table XV). Table XI Accuracy of HPLC analytical condition for tiropramide solution 추가시험약용출시험현재유통되고있는티로프라미드염산염정중시험약 B를제외한다름품목을구매하여시험약 C 및 D로하여본시험을통한예상용출규격에근거하여용출시험을진행하였다. 티로프라미드염산염정시험약 C 및 D의경우 45분에서 6개검체의평균용출률은각각 105.5±4.1% 및 99.6±2.6% 로예상용출규격에적합한결과를나타내었다. 결 Peak Area 이토프리드염산염정및티로프라미드염산염정의용출시험기준및시험방법설정을위해각각시험약을선정하여 경구용의약품의용출규격설정지침 2) 에따라각용출액 (ph 1.2, ph 4.0, ph 6.8 및물 ) 에서예비시험을수행하였다. 1 로트 6개의검체로예비시험을수행한결과용출액을 ph 1.2로, 회전속도는 50 rpm으로설정하였고, 이에따라 3 로트각 12개의검체 론 Actual concentration Recovery (%) 1-I 1528189 065.7 99.1 1-II 066.3 1523090 065.5 98.7 1-III 1528880 065.7 99.1 2-I 2044958 087.8 99.3 2-II 088.4 2041374 087.6 99.1 2-III 2044914 087.8 99.3 3-I 2550262 109.4 99.0 3-II 110.5 2550382 109.4 99.0 3-III 2551463 109.4 99.0 Total mean value (%) 99.1 Total standard deviation (%) 0.2 Number of sample 9 95% confidence interval 98.9~99.3 J. Pharm. Soc. Korea

이토프리드염산염정및티로프라미드염산염정의용출시험법개발 211 Table XII Precision of HPLC analytical condition for tiropramide 111.0 Number of measurement Actual concentration Average recovery (%) 1 111.2 100.2 2 111.2 100.2 3 111.2 100.2 4 111.4 100.3 5 111.2 100.2 6 111.3 100.3 mean 111.3 100.2 deviation Relative standard deviation 0.1 0.1 Table XIII Validation of analytical method for dissolution of tiropramide Dissolution Characteristics Results medium ph 1.2 The analyt chromatographic Specificity peak is not attributable to more than one components Linearity Accuracy (n=9) 99.1±0.2% Precision (n=6) RSD=0.1% Limits of quantitation 1.1 µg/ml Fig. 9 Dissolution profile of tiropramide. Fig. 8 Dissolution profile of itopride. 로본시험을수행한결과용출규격을설정할수있는자료를확보하였다. 또한용출액중의이토프리드염산염및티로프라미드 염산염의분석을위해액체크로마토그래프법을확립하여, 의약품등분석법의밸리데이션에대한지침 1) 에따라특이성, 직선성, 정확성, 정밀성을검증하여설정한분석법의타당성을확보하였다. 본시험및실험실간교차시험결과 경구용의약품의용출규격설정지침 2) 에따라이토프리드염산염정및티로프라미드염산염정의규격은용출시험개시후 45분에서 80% 이상으로설정함이타당하다고사료된다. 또한이토프리드염산염정의유통품목에대한모니터링을실시하여예상용출규격에적합함을확인하였다. 본연구에서도출된결과를바탕으로 대한약전외의약품기준 개정 ( 안 ) 으로제안되어국내유통의약품의품질을향상시키는데기여할것으로기대한다. Table XIV Dissolution results of itopride between Lab A and Lab B Average dissolved (%) (average±sd) 5min 10min 15min 30min 45min 60min Itopride hydrochloride tablet Lab A 31.2±6.4 70.3±9.6 91.1±7.3 099.5±1.3 099.8±1.0 099.9±0.8 Lab B 0.34±8.4 69.8±9.2 91.1±7.1 100.3±1.2 100.5±1.2 100.4±1.3 Table XV Dissolution results of tiropramide between Lab A and Lab B Average dissolved (%) (average±sd) 5min 10min 15min 30min 45min 60min Tiropramide hydrochloride tablet Lab A 10.5±4.0 33.5±7.4 54.4±8.9 92.2±6.4 102.1±1.6 102.7±1.2 Lab B 10.2±2.9 28.1±7.8 44.3±11. 78.8±11. 91.9±5. 097.2±1.9 Vol. 57, No. 3, 2013

212 김정현 이종화 최란 최연희 이종철 안지혜 이광문 심영훈 강신정 사홍기 최후균 김인규 감사의말씀 본연구는식품의약품안전청자체연구개발사업 (12171의약안 218) 으로수행하였습니다. 참고문헌 1) 대한민국약전 9개정 : 의약품등분석법의밸리데이션에대한지침 (2007). 2) 대한민국약전 9개정 : 경구용의약품의용출규격설정지침 (2007). 3) Iwanaga, Y., Miyashita, N., Morikkawa, K., Mizumoto, A., Kondo, Y. and Itoh, Z. : A novel water-soluble dopamine-2 antagonist with anticholinesterase activity in gastrointestinal motor activity: comparison with domperidone and neostigmine. Gastroenterology 99, 401 (1990). 4) Sakaguchi, J., Nishino, H., Ogawa, N., Iwanaga, Y., Yasuda, S., Kato, H. and Ito, Y. : Synthesis, gastrointestinal prokinetic activity and structure-activity relationships of novel N-[[2- (dialkylamino)-ethoxy]benzamide derivatives. Chem. Pharm. Bull. (Tokyo) 40, 202 (1992). 5) Iwanaga, Y., Kimura, T., Miyashita, N., Morikawa, K., Nagata, O., Itoh, Z. and Kondo, Y. : Characterization of acetylcholinesterase inhibition by itopride. Jpn. J. Pharmacol. 66, 317 (1994). 6) Vidal, Y., Plana, R. R., Cifarelli, A. and Setnikar, I. : Mechanism of smooth muscle relaxation by tiropramide. J. Pharm. Pharmacol. 33, 19 (1981). 7) Setnikar, I., Cereda, R., Pacini, M. A., Ravel, L. and Mackovec, F. : Pharmacological characterization of the smooth muscle antispasmodic agent tiropramide. Arzeim-Forsch/Drug. Res. 39, 1114 (1989). 8) Pillai, S. and Singhvi, I. : Quantitative estimation of itopride hydrochloride and rebeprazole sodium from capsule formulation. Indian J. Pharm. Sci. 70, 658 (2008). 9) Imran, K., Punnamchand, L. and Natvarlal, S. M. : A simple sample preparation with HPLC-UV method for estimation of tiropramide from plasma : Application to bioequivalence study. J. Pharm. and Bio. Anal. 43, 1135 (2007). J. Pharm. Soc. Korea