사상체질의학회지

사상체질학회지 J. o f S a s a n g C o n s t. M e d V o l. 1 5. N o 1. 2 0 0 3 十 二 味 寬 中 홉과 물 業 횟 附 子 理 中 홉의 I f 휩홉 保 훌훌 作 用 에대만 입걱 이경성.. 김형순. 배영춘. 이상민.. 김경요. 원경숙.. I A b s t r a c t I S t u d y i n t h e H e p a t o p r o t e c t i v e E f f e c t o f S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g a n d O s u y u b u j a i j u n g - t a n g L e e K y u n e o n g '. K i m H y o u n o o n '. B a e Y o u n g - c h u n '. L e e S a n g - m i n t. K i m K y u n g - y o '. W o n K y u n g - s o o k ' ' D e p t, o f S a s a n g c o s t i t u t i o n a l M e d i c i n e, C o l l e g e o f O r i e n t a l M e d i c i n e, W o n k w a n g U n i v, D e p t. o f N u c l e a r M e d i c i n e, C o l l e g e o f M e d i c i n e, K e i m y u n g U n i v. O s u y u b u j a i j u n g - t a n g ( O B 1 ) a n d S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g ( S G 끼 h a s b e e n d e v e l o p e d a s p r e s c r i p t i o n s f o r t h e S o y e w n i n c o n s t i r u t i o n. T h e h e p a t O p r o t e c t i v e e f f e c t o f t h e w a t e r e x t r a c r o f O s u y u b u j 에 u n g - t a n g ( O B 1 ) a n d S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g ( S G 끼 w a s i n v e s t i g a t e d a g a i n s t c a r b o n r e t r a c h l o r i d e ( C d 4 ) - i n d u c e d h e p a r i c d 없 n a g e. A s i n g l e i n t r a - p e r i t o n e a l i n j e c t i o n o f C d 4 p r o d u c e d l i v e r d a m a g e i n r a t s a s m a n i f e s t e d b y t h e s i g n i f i c a n t r i s e o f a s p a r t a t e 없 r u n o t r 없 1 S f e r a s e ( A S 1 ), a l a n i n e a m i n o t r a n s f e r a s e ( A L 1 ), a n d a l k a l i n e p h o s p h a t a s e ( A L P ) i n s e r u m a s c o m p a r e d t o t h o s e o f u n t r e a t e d n o r m a l g r o u p. P r e t r e a t m e n t s o f r a t s w i t h O s u y u b u j a i j u n g - t a n g ( O B 1 ) a n d S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g ( S G 1 ) 5 0 0 m g / k g f o r 7 d a y s ) w e r e s i g n i f i c a n t l y r e d u c e d A S T, A L T, a n d A L P l e v e l s c o m p a r e d w i t h C d 4 - t r e a t e d c o n t r o l g r o u p. T r e a t m e n t o f r a t s w i r h C d 4 l e d t o s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e i n l i p i d p e r o x i d a t i o n a n d s i g n i f i c a n t l y d e c r e a s e i n c y t o c h r o m e P 4 5 0 a n d P 4 5 0 r e d u c t a s e. T h e o r a l a d m i n i s t r a t i o n o f O s u y u b u j a i j u n g - t a n g ( O B 1 ) a n d S i p y i m i g u a n j u n g - r a n g ( S G 1 ) w a t e r e x t r a c t s i g n i f i c a n t l y i n h i b i t e d t h e a c c u m u l a t i o n o f m i c r o s o m a l t h i o b a r b i t u r i c a c i d r e a c t i v e s u b s t a n c e ( T B A R S ) a n d i n c r e a s e d t h e c y t o c h r o m e P 4 5 0 a n d P 4 5 0 r e d u c t a s e a c t i V I t y. A l l t h e s e b i o c h e m i c a l a l t e r a t i o n s r e s u l t i n g f r o m C d 4 왜 m i n i s t r a 디 o n w e r e i n h i b i t e d b y 바 e p r e t r e a t m e n t w i t h O s u y ψ U J 따 j u n g - t a n g ( O B 1 ) 와 d S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g ( S G I ) e x t r a c t. 까 l e s e r e s u l t S s u g g e s t t 뼈 t O s u y u b u j a i j u n g - t a n g ( O B ' I ) a n d S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g ( S G T ) w a r e r e x t r a c t c a n I x : u s e f u l a s a h e p a r o p r α e c t i v e a g e n A n d t h e e f f e c t o f N O m o d u l a t i o n b y N O s y n t h e s i s o r p r e c u r s o r s, a n d O s u y u b u j a i j u n g - t a n g ( O B 끼 a n d S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g ( S G 1 ) w a r e r e x r r a a w a s r e s e a r c h e d o n c h r o n i c l i v e r d a m a g e i n d u c e d b y C d 4 a d m i n i s t r a t i o n. I t w a s o b s e r v e d t h a t e n d o g e n o u s N O p r o t e c t e d t h e l i v e r f r o m l i p i d p e r m 이 d a t i o n, f i b r o s i s, a n d d a m a g e. O s u y u b u j a i j u n g - t a n g ( O B 1 ) a n d S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g ( S G 1 ) w a t e r e x t r a c t s h o w e d t h e h e p a r o p r o t e a i v e e f f e c t o n t h e c h r o n i c l i v e r c i r r h o s i s m o d e l a n d r e l a r i o n s h i p w i t h N O m o d u l a r i o n. K e y w o r d : H e p a t O p r o t e a i v e E f f e c t, S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g, O s u y u b u j a i j u n g - a n g 원광대학교 한의과대학 사상체질과 계명대학교 의과대학 핵의학과 " 교신저자. 이경성 주소 ) 서울시 강북구 미아 5 동 4 6 5-3 8 홍의한의원 전화 ) 0 2-9 8 2-1 0 7 5 E - m 꾀 ) h o n J / : i k 4 ( a ) h i r e l, n e r - 9 0 -

I - + 二 '! t o ' j [ 中 훌과 용중햇 附 子 f 몇 中 훌의 I f f / M i l l 용 t F F I I 에 대한 연구 - I. 績 을 & 률빼 韓. 醫 學 에서 府 의 주요 생리기능인 陳 빼 作 用 은 承 發 과 透 뼈의 의미로 A 體 氣 機 의 순환에 영향을 미치는 기본적인 기능을 하는 장기로 牌 뿜의 소화작용과 정지활동을 유지하는 기본 이 된다. 아울러 간은 장혈작용으로 정상적 생리기능에 중요한 역할을 수행한다 少 陰 A 十 二 味 寬 中 場 은 원지상의 東 醫 四 象 2 ) 新 編 에 나오는 처방으로 임상활용에 있어서 少 陰 A 의 P i : i 寫 짧 亂 體 痛 뽑 積 聚 氣 眼 食 眼 뼈 坐 痛 등을 치료한다 2-4 ) 少 陰 A 吳 菜 英 附 子 理 中 場 은 이제마의 東 醫 壽 世 保 元 新 定 少 陰 A 病 應 用 要 約 二 十 四 方 에 수록되어 있으며. 少 陰 A 의 陰 實 證. 즉 四 股 가 遊 冷 하거나 온 몽이 차며 만성 대장염. f :찢 寒. 陰 f 품 證. 太 陰 5 ) 證. 少 陰 病 의 危 境 할 때 쓴다 현대적 의미의 간은 신체에서 여러 가지 약 물이나 이물질들 ( x e n o b i o t i c s ) 의 해독에 중 요한 기능을 수행하는 장기이다. 섭취, 흡입. 피부. 또는 주사 등을 통해 체내에 흡수된 다양한 약물 및 이물질들 ( c a r c i n o g e n. 1 ) e n v i r o n m e n t a l p o l l u t a n t. i n s e c t i c i d e 등 ) 은 간에서 생체변 환되어 독성이 적거나 무독한 물질로 전환된 다. 이러한 변화를 촉매하는 일련의 효소계가 간에 다량 존재한다. 대부분의 이물질들은 간 m i c r o s o m e 의 p h a s e I과 p h a s e I I 두가지 효소군에 의해서 대사가 이루어진다. P h a s e 효소들은 화합물에 작용기를 첨가함으로써 독성을 증가시키는 역할을 하며. p h a s e I I 효소들은 화합물의 작용기에 아미노산이나 펠 티드를 결합시키므로 무독화시키고 체외로 쉽 게 배설될 수 있도록 하는 역할을 한다 6 ) 우 리나라의 간 질환 발생율은 외국에 비해 상당 히 높은 편이며, 현대 의학의 발전에도 불구 하고 간 질환은 특효약이나 효과적인 치료법 이 제시되지 않아 치료에 어려움을 겪고 있는 분야 중의 하나이다. 최근 간 질환에 대한 관심의 고조와 더불어 천연자원으로부터 간 기능 향상 및 간 질환 치료제의 개발을 위한 연구가 시도되어 왔으며. 이들 중 g l y c y r r h i z i n. g o m i s i n 및 s i l y m a r i n 등은 현재 급 만성 간 질환 치료제로 이용되 고 있다. 최근 간 기능 향상 및 간 기능 보호 작용을 나타내는 것으로 보고된 것은 A r t e m i s i a a b s i n t h i u m 및 A m b r o s i a m a r i t i m a 추출물. H y m e n a e a m a r t i a n a 로부터 추출한 f l a v o n o i d 인 a s t i l b i n 7 ). 그리고 P i c r o r h i z a k u r r o o a 로부터 분리한 p i c r o l i v 8 ) 등이 있다. 국내에 서는 담자균류인 영지 ( G a n o d e r m a l u c i d u m ) 자실체로부터 추출한 G 0 0 9 도 간세포 보호효 과가 있다고 보고되었다 9 ) 또한 한의학에서 자 양 및 강장제로 널리 사용되는 갈화 ( P u e r a r i a l o b a t a ) 추출물은 알코올 해독에 효과가 있 으며 1 0 ) 구기자 ( L y c i i f r u c t u s ) 도 간세포 독 성을 현저히 완화시키며, 물분획물의 주요 성 분인 비테인이 사염화탄소로 인하여 저하된 대사능력을 회복시킴으로서 간 보호효과가 있 는 것으로 보고되었다 1 1 ) 본 연구에서는 少 陰 A 憂 病 病 證 論 에서 포 괄적인 치료 목적으로 입상에서 폭넓게 사용 되는 처방인 十 二 味 寬 中 場 과 吳 茶 횟 附 子 理 中 楊 이 사염화탄소로 유발한 급만성 간독에 미 치는 효과를 관찰하였다. 또한 두 처방의 만성 적 간손상에 대한 보호작용과 그 작용 기전의 일부를 관찰하기 위하여 사염화탄소의 장기 투 여로 유발한 간손상의 보호효과와 N O 합성 에 미치는 영향을 조사해 보고하는 바이다. 1. 材 料 n. 實 驗 材 料 및 方 法 1 ) 實 驗 動 物 및 사육조건 급성 독성 실험을 위하여 실험동물은 생후 6 주 경과한 1 8 0-2 0 0 g 의 S p r a g u e - D a w l e y ( S D ) 계 흰쥐 수컷을 사용하고 만성적 간기능 손상모델 을 위하여는 8 0 g 의 W i s t a r 흰쥐 수컷 만을 선별하여 사용하였다. 동물사육실의 조건은 c o n v e n t i o n a l s y s t e m 으로 온도 2 3 : t 1 ' C. 습도 5 5 : t 5 %. 배기 1 0-1 8 회 / h r. 형광등 - 9 1

l M 8 - o o n O n 6 n 6 t q t q t 4 t n 1 t q - 사싱체질의학회지 제 1 5 권 제 1 호 2 0 0 3 - 명암 1 2 h r c y c l e. 조도 3 0 0-5 0 0 L u x 의 사육환경에서 r a t 용 폴리카보네이트 사육상 자 ( 2 4 0 W x 4 0 0 L x 1 8 0 H m m ) 에 2 마리씩 넣어 사육하였다. 실험동물의 사료는 신촌사 료 ( 주 ) 제품의 고형사료를 사용하였으며 깔짚 은 ( 주 ) 삼육 제풍의 버드나무송으로 만든 것 을 사용하였다. 음수는 멸균된 수돗물을 자유 롭게 섭취하도록 하였다. 2 ) 藥 材 실험에 사용된 韓 藥 材 는 시중에서 구입한 후 정선하여 사용하였으며. 처방은 r 동의사 r 상신편 과 東 醫 譯 世 保 元 의 新 定 少 陰 A..ÅÐ 病 應 用 要 藥 二 十 四 方 기재된 + 二 味 寬 中 場, 吳 菜 莫 附 子 理 中 揚 으로 하였으며 - 貼 의 처방 내용 다음과 같다 ( T a b l e 1. 2 ). 처방에 사용 되는 약재들을 c u t t i n g m i l l 로 세절한 다음 각 처방의 2 0 0 g 분량의 한약재를 2 L 의 증 류수로 3 시간 동안 열수 추출하였다. 추출액 은 거즈로 거른 다음 원심분리 및 여과지로 여과하였으며. 추출액을 s o t 하에서 회전감 압농축기로 농축하였다. 농축된 시료는 동결 건조기로 완전 건조를 하여 얻어진 분말을 필 요에 따라 농도를 조절하여 사용하였다. T 능 h I e 1. T h e c o I I 1 X > n e n t s o f Q r o : y u b Q j a i j u n 양 t a n g ( 吳 菜 英 附 子 理 中 꿇. O B T ) 뻐 O O I N m A i흉 터끼 i 乾 훌 抱 흠 桂 B 혐 藥 陳 皮 납 草 꼈 吳 菜 횟 小 햄홈 古 紙 附 子 훨 T O t 쇠때뻐 l O t S c i e n r 퍼 c N a m e R A D I X G I N S E i ' J G R H I W 뻐 A T R A C I Y L O D l S M A C ] α : E P 바LAE 삐 i l W M A 7 1 N G 뻐태 I S S I α A 1 1 1 M C O R ' π X 마 N A M a. 뻐 R A D I X P A E O N I A E L A C T I F L O R A E P태 l 다 R P I U M a 대 I N O B l I l S R A D I X 태U 0 1 J S F R U 0 1 J S G L Y Iα뻐매 i l l E V O D I A E R ) 돼 I C U I l 앞따 N P S O R 따 A E 뻐 D I X A C O }, 1 f! l w - 에 j에 % 뼈 - T닙 h I e 2. π 1 e ( X n r p o n e n t s o f S i p y i I r i g 뻐 r U u n g - t a n g ( 十 二 味 寬 中 뚫. S G T ) H e 뼈 I N 빠 터 何 首 烏 何 首 烏 * 훌훌 T o t a l 乾 훌 陳 皮 춤 皮 香 附 子 益 智 t 原 朴 얻 實 木 좁 大 I 皮 大 훌 a m o u n t 2. 實 뚫 方 法 S마n r i f i c N a m e R A D I X α N A N C H I W l l J O R D I I R A D I X P O L Y G O 베 빠 凡 끼F L O R I 빠ZJJ 뻐 A L P 매 I A E O F F l a N A R U M 뻐ZJJ 뻐 Z I N G I B E R I S S I C C A T I J M P태 l 다 R P I U M a 깨 I N O B U l S P태 l다rpium a T R l N O B I L I S V I R l D E F R U O U S 뻐 Z J J 뻐 αp태 l A L P I N I A E O X Y P H Y l l A E C O R ' π X M A G N O L I A E F R U O U S I뻐 A 1 1 J R U S P O N a 삐 R A D I X P E R I C A R P I U M S A U S S U R E A 1 ) 시료의 처치 및 실험군 뻐 E C A E F R U O U S Z l Z Y P H i J U J U 빠 W i! 빙 u ( g ) 급성 독성실험을 위하여 정상군은 독성물질 투여나 시험물질의 균질액을 급여하지 않고 생리식염수만을 경구 투여하였으며. C C 1 4 단 독 투여군인 대조군은 생리식염수를 경구투여 하면서 독성물질인 사염화탄소를 복강 투여하 였다. 사염화탄소는 c o r n o i l 에 I : I ( V I V ) 의 비율로 혼합하여 체중 k g 당 1 m l 의 용 량을 1 회 복강 투여하여 간 독성을 유발시켰 다. 吳 菜 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T ) 의 열수추출물 투여군인 O B T 5 0 0 과 S O T 5 0 0 은 각각 체중 k g 당 5 0 0 m g 에 해 당하는 농도로 1 일 1 회씩 7 일 동안 경 구 투여하였다. 5 0 0 m g 의 농도는 예비 실험을 통하여 유효 농도를 검색하여 결정하였다. 검 액의 최종 투여 후 사염화탄소를 체중 k g 당 1 m l 의 용량을 복강주사로 투여하였다. 사염 화탄소 투여 후 2 4 시간 사육한 흰쥐를 2 0 % 4 6 6-9 2 -

. - + 二 味.. ; 용과 훌맺 附 子 f 中 훌의 R l J ' I i l 1 U t F I I! 에 대한 연구 - u r e t h a n e 으로 마취한 다음 심장천자로 혈액 을 채취하였다. 채혈 후 개복하여 간을 적출 하였으며 실험군의 동물 수는 각각 6 마리 씩 사용하였다. 만성적 독성실험을 위하여 대조군 즉 실험 군 I 은 C C 1 4 ( O. 4 g / k g o f b o d y w e i g h t ) 를 m i n e r a l o i l 에 녹여 1 주에 3 회씩 8 주 동 안 복강 주사하였다. 실험 군 I I 는 C C l 4 와 L - N A M E O O O 뼈 / k g, P. o., 1 일 2 회 ) 를. 실험군 I I I 은 C C l 4 와 A G ( 4 g / U, 실험군 I V 는 C C l 4 와 L - a r g i n i n e ( S O O 뼈 / k g. p. O.. 1 일 2 회 ) 을 처치하였으며. 실험군 V, V I. V I I 은 L - N A M E. L - a r g i n i n e. A G 를 v e h i c l e 로 동일하게 투여하였다. 또한 吳 菜 莫 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 열수추출 물 5 0 0 뼈/ k g / d a y 을 물에 녹여 경구 투여 하 였다. 2 ) 간세포독성 및 한약추출물의 방어효과 분석 C D 혈청의 간 기능 지표효소 측정 채취한 혈액은 실온에서 3 0 분 간 방치한 후 3, 0 0 0 r p m 에서 1 5 분 간 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 혐의 a s p a r t a t e a m i n o t r a n s f e r a s e ( A S T ). 외밍꾀 n e a m i n o t r a n s f e r a s e ( A L T ), Y - G T P. 그리고 a l k a l i n e p h o s p h a t a s e ( A L P ) 는 혈청 자동분석기 ( H i t a c h i - 7 1 5 0. H i t a c h m e d i c a l C o. ) 로 측정하였다. @ 간 조직의 M i c r o s o m e 분리 B a n s a l 1 2 ) 등의 방법에 따라 적출한 흰쥐 의 간을 잘게 썰고, 1 5 0 m M K C I 을 함유한 3 0 m M H e p e s 완충액 ( p H 7. 4 ) 으로 5 배 희석하여 끌질화한 다응 원심분리관에 넣고 7 0 0 g 로 2 0 분 동안 원심 분리하였다. 상등 액은 원심분리 및 초고속원심분리과정을 거쳐 최종 p e l l e t 을 얻었으며 H e p e s 완충액으로 재균질화하여 m i c r o s o m e 분획 을 얻었다. M i c r o s o m e 을 분리하는 전 과정은 4. C 하에 서 수행하였으며 시료는 - 7 0 " C 에 보관하면서 각종 실험에 사용하였다. @ 단백질 정량 B o v i n e s e r u m a l b u m i n ( B S A ) 을 표준 물질로 사용하여 L 1 3 ) o w r y 등의 방법에 따라 단백질 농도를 측정하였다. @ 간 조직의 T B A 반응성물질의 함량측정 M i c r o s o m a l m e m b r a n e 의 지 질과산화 정 도를 비교하기 위하여 시험관에 m i c r o s o m e 을 넣은 후 0. 1 m M N A D P H 와 A D P - F e 2 + ( 0. 5 m M A D P, 0. 0 2 m M F e 2 + ) 를 첨가하 고 3 T C 에서 3 0 분 간 반응시켰다. 반응액은 S u e m a t s u 1 4 ) 등의 방법에 따라 5 3 2 n m 에서 홉광도를 측정으로 t h i o b a r b i t u r i c a c i d 반 응성물질의 함량을 결정하였다. @ 간의 이물질대사효소 활성측정 C y t o c h r o m e P 4 5 0 의 함량은 O m u r a 와 S a t o l S ) 등의 방법 을 따랐으며 간 m i c r o s o m e 단백질이 1. 0 m g / m l 의 농도가 되도록 3 0 m M H e p e s 완충액 ( p H 7. 4 ) 으로 회석하여 측정 하였다. C y t o c h r o m e P 4 S 0 은 파장 4 5 0 n m 와 4 9 0 n m 에서의 홉광도 차이로 환산하 였으며, c y t o c h r o m e P 4 5 0 r e d u c t a s e 의 활 성도는 W i l l i a m 와 K 1 6 ) a m m 등의 방법에 따 라 5 5 0 n m 에서 3 분 간 홉광도 변화를 측정 하여 m M 홉광계수 2 1 m 1 1 l c m - 1 를 이용하 여 c y t o c h r o m e c 의 환원속도로 계산하였다. @ 혈 청 내 N i t r i t e + N i t r a t e 분석 혈청내의 N O - 2 + N O - 3 의 수준은 G r i e s 반응 7 ) 에 기초하여 실시하였다. 혈액을 채취한 후 바로 1 0 분 동안 4, 0 0 0 r p m 에서 원심분 리를 실시하였다. 혈청을 분리하여 분석하기 전까지 - 7 0. C 에 보관하였다. 혈청과 p o t a s s i u r n p h o s p h a t e 완충액을 동량으로 하여 u l t r a f i l t e r ( u l t r a f r e e M C m i c r o c e n t r i f u g e d e v i c e. U F C : M i l l i p o r e ) 에 넣고 2, 0 0 0 g 에서 4 5 분 동안 원심분리하여 1 0 k D a 보다 큰 것은 - 9 3 -

- 사상체질의학회지 제 1 5 권 제 1 호 2 0 0 3 - 제거하고 원심분리된 것을 분석에 사용하였 다 n i t r a t e s 는 분석 을 위하여 양적 으로 n i t r i t e s 로 전환하였다. n i t r a t e f m f n i t r i t e 로 전환시키는 것은 c o e n z y m e ( N A D P H, F A D ) 을 이용하여 하였다. i n c u b a t i o n 단계 에서 n i t r a t e r e d u c t a s e 의 존재 하에 실시 하 였다. N - 1 - ( N a p h t h y l ) e t h y l e n e d i a m i n e d i h y d r o c h l o r i d e, s u l f a n i l a m i d e 와 i n c u b a t i o n 용액을 1 : 1 : 2 ( v / v ) 로 혼합하고 이 혼합액을 5 분 동안 약한 불빛 아래의 실온에서 배양한 후 5 4 0 n m 에서 측정하였다 1. 0 m M 의 s o d i u r n n i t r i t e 가 n i t r i t e 결정 을 위 한 표준 으로 사용되 었으며, 8 0 m M 의 p o t a s s i u m n i t r i t e 가 n i t r a t e 의 결정 을 위 한 표준으로 사용되었다. 2 M s o d i u m t h i o s u l f a t e 와 1 N s o d i u m h y d r o x i d e 를 첨가하여 반응을 정지시켰다. h y d r o x y p r o l i n e 으로부터 나온 산화물은 샘 플을 끓여서 p y r r o l e 로 전환하였다. p y r r o l e 을 함유한 샘플은 E h r l i c h s r e a g e n t 로 3 0 분 동안 배양한 후 5 6 0 n m 에서 홉광도를 측 정하였다. 표준검량으로는 이미 알려진 간조 직의 양을 참고로 유산 간조직을 이용하였다. 3 ) 통계학적 분석 실험결과는 각 군의 m e a n t S E 로 표기하였 으며. 정상군 및 대조군과 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 뚫 中 場 ( S G T ) 추출물 투여군 과의 상호비교는 A N O V A 와 S t u d e n t ' s t - t e s t 로 교차 검정하여 유의성을 P ( 0. 0 5 이하의 경우 유의한 차이가 있다고 판정하였다. @ 만성적 간 손상의 지질과산화와 당원함 량의 측정 지질과산화는 간균질액의 M D A를 측정하였 으며 O h k a w a l 7 ) 등의 t h i o b a r b i t u r i c a c i d 법을 이용하여 측정하였다. 당원 측정을 위하 여 a n t h r o n e 시약을 이용하여 간조직 절편 을 채취하였다 1 8 ) 단백질 정량은 B r a f o r d 6 ) 방법으로 시행하였다. @ 콜라젠 측정 콜라젠 농도는 간조직의 h y d r o x y p r o l i n e 을 정 량하여 측정하였다 1 9 >. S o d i u m a c e t a t e / c i t r i c a c i d b u f f e r. p H 6. 0. C h l o r a m i n e - T s o l u t i o n, s o d i u m t h i o s u l f a t e, E h r l i c h ' s r e a g e n t 를 사용하였다. 신선한 간조직 1 0 0 뼈을 병에 넣고 2 m L 의 6 N H C I 을 첨가하고 용입한 후 1 0 0 " C에서 2 4 시간 동안 가수분해하였다. 그 다음 2 4 시간 동안 5 0. e 에서 증발 시킨 후 3 m L 의 s o d i u m a c e t a t e / c i t r i c a c i d b u f f e r 로 재현탁하고 활성탄 0. 5 g 을 첨가하 여 혼합한 후 5, 0 0 0 g 에서 1 0 분 동안 원심 분리 하였다. h y d r o x y p r o l i n e 산화는 1 m L 의 0. 0 5 M c h l o r a m i n e T 를 첨가하여 개시 하였다. 혼합액을 실온에서 2 0 분 방치한 후 m. 實 驗 結 果 1. 吳 좋횟 附 子 理 中 場 ( O S T ) 과 + 二 味 寬 中 楊 ( S G T ) O I A S T, A L T. A L P 와 지 질과산화에 미쳐는 영향 정상군의 A S T 와 A L T 활성은 1 1 7 와 4 5 l u l L 인데 반해 사염화탄소 단독 투여군은 1, 8 7 6 와 6 3 8 l u l L 으로 나타내어 사염화탄 소의 단독 투여군은 정상군에 비해 A S T 와 A L T 의 활성도가 각각 1 7 배와 1 5 배로 증 가되었다 ( T a b l e 3 ). 또한 간장질환 및 담도 계 질환의 지표로 사용되는 담도계 효소 A L P 도 정상군이 5 1 0 l U l L 인데 반해 대조 군은 8 3 8 l u l L 으로 1. 5 배 증가되었다. 이 러한 결과로 사염화탄소의 투여에 의해 간 손 상이 유도되었음을 확신할 수 있었다. 반연 낯 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 추출물 및 사염화탄소를 모두 투여한 O B T 5 0 0 과 S G T 5 0 0 실험군들에서 A S T 의 활성이 각 각 6 9 7 과 7 2 4 l U l L 으로 대조군인 사염화탄 소 단독 투여군 0, 8 7 6 l U l L ) 에 비해 현저한 감소를 나타내었으나 정상군 0 1 7 l U l L ) 의 - 9 4 -

- + 二 味 寬 中 윷과 훌찢 附 子 f 몇 ' * ' 훌의 R 1 1 1 1 1 t 용 i l f F 用 에 대한 연구 - 수준까지 회복되지는 못하였다. 또한 모든 실 험군에서 A L T 의 활성도는 각각 2 8 7. 3 5 4 l u l L 으로 대조군인 사염화탄소 단독 투여군 ( 6 3 8 l U l L ) 에 비해 유의한 감소를 나타내었 으나 A S T 와 마찬가지로 정상군 ( 4 5 l U l L ) 의 수준까지는 회복되지 못하였다. 반면 a l k a l i n e p h o s p h a t a s e ( A L P ) 는 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T ) 추출물의 투여군들에서 각각 6 0 3. 6 7 3 l U l L 의 수준으로 정상군과 유사한 수준으로 회복 되었음을 알 수 있었다 ( T a b l e 3 ). 또한 위에 서 얻어진 혈청의 간 기능 지표 효소들의 결 과를 뒷받침하기 위하여 간 조직의 l i p i d p e r o x i d a t i o n 을 측정하였다. 정상군의 M D A 함량은 0. 2 1 n m o l / m g p r o t e i n 을 나타낸 반 면 사염화탄소의 단독 투여군은 0. 4 9 n m o l / m g p r o t e i n 으로 정상군에 비해 유의 한 증가를 나태뀌었다. 吳 菜 鄭 얘 子 理 따웠 O B T 5 0 0 ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T 5 0 0 ) 추출물을 투여한 O B T 5 0 0 과 S O H T 5 0 0 실험군은 각각 0. 3 0. 0. 3 2 n m o l / m g p r o t e i n 으로 모든 실험군들 이 사염화탄소를 투여한 대조군에 비해 유의 한 감소를 나타내면서 정상군과 유사한 수준 으로 회복시킴을 관찰하였다 ( T a b l e 3 ). T a b l e 3. E f f e c t s o f t h e w a t e r e x t r a c t o f O s u y u b u j a i j u n g - t a n g ( O B T ) a n d S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g ( S G T ) o n A S T. A L T. A L P a n d l i p i d p e r o x i d a t i o n i n c a r d o n t e t r a c h l o r i d e - i n t o x i c a t e d r a t s E x p e r i m e n 때 G r α I P S S e r u m B i o c h e m i 때 P a r a m e r e r 에 l U l L ) l i p i d p e r o x i d a t i o n 뻐 r A L T A L P ( 0 0때 M D N m g p r o r 뼈 ) N o r m a l 1 1 7! l 8 4 5! 6 l O W O. 2 l t O. O l C 0 4 1, 8 7 6! 4 8 1 6 3 8! 2 9 1 8 3 8 션 I I 0. 4 9! O. 0 5 O B T 5 0 0 ( f ) 7 션 I I I 2 8 7! 2 4 1 1 6 0 3 m 2 S G n o o 7 2 4! 3 0 1 1 3 5 4! 2 0 1 l 6 7 3 t W A 뼈 2 M v 뼈 m씨 2 T h e w a t e r e x t a c t s o f O s u y u b 띠 a U u n g - t a n g ( O B T 5 0 0 : O B T w a t e r e x t r a c t s 5. 0 0 m 밍 k g b o d y w e i g h t ) a n d S i p y i m i g u a I 1 i t r n g - t a n g ( S O T 5 0 0 : 않 I w a t e r e x t r a c t s 5 0 0 m g / k g b o d y w e i g h t ) m i x e d i n s a l i n e w e r e g i v e n o r a l l y f o r 7 d a y. N o r m a l a n d c o n t r o l ( C C I 4 ) a n i m a l s w e r e s a l i n e t r e a t m e n t. A f t e r 2 4 h r a d m i n i s t r a t i o n o f C C l 4. a l l a n i m a l s w e r e s a c r i f i c e d, a n d l i v e r w a s q u i c k l y r e m o v e d a n d w e i g h t e d. t h e v a l u e s a r e e x p r e s s e d a s m e a n :! : S E o f e i g h t r a t s i n e a c h g r o u p. 1. S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e n o r m a l g r o u p ( p ( 0. 0 5 ). 2 : S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e C C l 4 g r o u p ( p ( 0. 0 5 ). 2. 한약추출물이 c y t o c h r o m e P 4 5 0 메 미치는 영향 간 독성물질인사염화판소는 l i p i d p e r o x i d a t i o n 및 l i v e r n e c r o s i s 를 유발하며 c y t o c h r o m e P 4 5 0 및 그와 연관된 효소의 파괴로 효소 활 성도가 현저히 감소되는데. 본 연구 결과에서 도 사염 화탄소의 단독투여 군의 c y t o c h r o m e P 4 5 0 과 P 4 5 0 r e d u c t a s e 는 0. 5 6 n m o l e / m g p r o t e i n 및 2 5. 7 n m o l e s / m i n / m g p r o t e i n 으 로 정 %깐균 ( 0. 8 0 n m o l e / m g p r o t e i n 및 4 5. 4 n m o l e s / m i n / m g p r o t e i n ) 에 비해 유의한 감소가 확인되었다. 반면 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T ) 추출물을 투여 한 실험군들에서는 각각의 두 가지 효소 값이 0. 7 1 n m o l e / m g p r o t e i n 및 3 8. 2 n m o l e s l r n i n / m g p r o t e i n 과 0. 6 8 n m o l e / m g p r o t e i n 및 3 5. 8 n m o l e s / m i n / m g p r o t e i n 내외로 대조군에 비해 모두 유의한 증가를 나타내었 으나 정상군의 수준으로 회복되지는 않았다 ( T a b l e 4 ). - 9 5

- 시상채질의학회지 제 1 5 권 제 1 호 2 0 0 3 - T a b l e 4. E f f e c t s o f t h e w a t e r e x t r a c t o f O s u y u b u j a y i j u n g - t a n g ( O B T ) a n d S i p y i m i g u a n j u n g - t a n g ( S G T ) o n l i v e r m i c r o s o m a l c y t o c h r o m e P 4 5 0 a n d P 4 5 0 r e d u c t a s e i n c a r b o n t e t r a c h l o r i d e - i n t o x i c a t e d r a t s E n z y m e A c t i v i r y 써 G r o 뼈 I C y t α h r o m e 얘 5 0 P 4 5 0 r e d u c t a s e ( r u n 이해' m g o f p r o t e i n ) ( r u n o l e 싱띠미 m g o f p r o t e i n ) 짧 r u n e n N o n n a l 0. 8 0 t O. 0 7 4 5. 4 : 1 : 4. 2 c e l t 0. 5 6 t O. 0 5 4 1Á- 2 5. 7 O B T 5 o o 0. 7 1 t oåì 1 2.2 J얘 / 8 J SGT500 O.68iO.08 3 5. 8 i 3. 1 1 보였다 ( F i g. 1 ). N O 합성저해제인 L - N A M E 와 a m i n o g u a n i d i n e ( A O ) 을 투여 한 군에서 는 이러한 N O 대안 f 물의 혈청 내 증가가 억 제되었다. 또한 L - N A M E 와 a m i n o g u a n i d i n e ( A G ) 의 투여는 N O - 2 + N O - 3 의 혈청 내 정 상적인 농도를 감소시켰다 ( F i g. 1 ). 또한 吳 茶 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T ) 만을 투여한 O B T S O O 군과 S O T S O O 군에서는 N O 생성을 약간 상승시켰으나 유의성있는 결과를 보이지 않았으며. 사염화탄소와 吳 * 英 附 子 理 中 揚 ( G B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T ) 을 함께 투여 한 C C l 4 + O B T S O O 군과 C C l 4 + S G T S O O 군에서도 사염화탄소로 인한 N O 생성의 증가에 큰 영향을 보이지 않았다 ( F i g. 1 ). T h e w a t e r e x t r a c t s o f O s u y u b u j a y i j u n g - t a n g ( O B T 5 0 0 : O B T w a t e r e x t r a c t s S O O m g / k g b o d y w e i g h t ) a n d S i p y i m i g u a r U u n g - t a n g ( S G T S O O : S O T w a t e r e x t r a c t s S O O m g / k g b o d y w e i g h t ) m i x e d i n s a l i n e w e r e g i v e n o r a l l y f o r 7 d a y s. A f t e r 2 4 h r a d m i n i s t r a t i o n o f C C k a l l a n i m a l s w e r e s a c r i f i c e d. a n d l i v e r w a s q u i c k l y r e m o v e d a n d w e i g h t e d. L i v e r m i c r o s o m e f r a c t i o n s w e r e p r e p a r e d b y c e n t r i f u g a t i o n a c c o r d i n g t o t h e m e t h o d o f B a n s a l e t a 1. [ 2 ]. T h e v a l u e s a r e e x p r e s s e d a s m e a n 土 S D o f e i g h t r a t s i n e a c h g r o u p. 1 : S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e n o r m a l g r o u p ( p ( O. O S > ' 2 : S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e C C l 4 g r o u p ( p ( O. O S L 3. 한약 추출물이 N O 생성에 미치는 영향 사염 화탄소와 L - a r g i n i n e 을 만성적으로 투 여한 실험군에서 N O 의 최종 산물인 N O - 2 + N O - 3 의 혈청 내 수준이 3 배 가까이 증 가하였으며. 사염 화탄소와 L - a r g i n i n e 을 동 시에 투여한 군에서는 더욱 증가하는 양상을 1 2 ) 를 Ç< 1 0 0 2 I D (혜 l댐 (해 g a : > o 엎영 앓싹 < 9 ' (¾ } T 繼 $ 혔 < : 9 ' (혀 용짧 F i g. 1. N O e n d p r o d u c t s e x p r e s s e d a s N O - 2 + N O - 3 c o n c e n t r a t i o n i n s e r u m f r o m r a t s t r e a t e d c h r o n i c a l l y w i t h C C l 4 a n d w i t h L - N A M E. O B T 5 0 0. S G T 5 0 0 a n d L - N A M E. L - a r g i n i n e ( L - A R G ) o r O B T 5 0 0. S O T 5 0 0 a l o n e o r i n c o m b i n a t i o n w i t h C C l 4. E a c h b a r r e p r e s e n t s t뼈 r r e a n 土 S머 / 1 : a l l d e t e n n i n a t i o n s w e r e p e r f o r m e d i n d u p l i c a t e a s s a y s w i t h s a m p l e s o b t a i n e d f r o m t e n d i f f e r e n t - 9 6 -

- + 二 味 훌 中 훌과 吳 훌햇 附 f 훌 中 훌의 R J ; t i l f 용 : t f F l I J 에 대한 연구 - a n i m a l s. K e y : ( a ) s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e c o n t r o l. p < 0. 0 5 : a n d ( b ) s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e C C l 4 -! I X )! I X ) ( 빼어 t r e a t e d g r o u p. p < 0. 0 5. 4. 한약추출물과 N O 질과산화 및 c o l l a g e n 는영향 생성 억제제가 생생매 지 미쳐 를 쇠 칙* g ( Z m s a p t a 틀 김 그p a a n a a ) ( 찌 ( 혀 사염화탄소를 만성적으로 투여하면 지질과 산화의 정도가 2 배정도 증가하는 결과를 보 였으며. N O 생성 억제제인 L - N A M E 을 동 시에 투여하면 이러한 경향을 더욱 강화시켰 다. L - a r g i n i n e. L - N A M E 만을 투여한 군 에서는 지질과산화가 증가하지 않는 것을 확 인하였다 사염화탄소와 L - a r g i n i n e 을 함께 투여한 군에서도 L - a r g i n i n e 이 지질과산화에 특별한 효과를 보이지는 않았다 ( F i g. 2 ). 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T ) 을 투여한 O B T 5 0 0 군과 S O T 5 0 0 군에서 는 사염화탄소로 결과를 보였다 ( F i g. 증가한 지질과산화를 억제하는 2 > ' 사염화탄소의 만성적 투여로 간의 콜라젠 양은 2 배 정도 증가하는 결과를 보였으며, L - N A M E 을 동시에 투여하여도 유의성있는 콜라젠의 증가를 나타내지는 않았다. 그러나 L - a r g i n i n e 은 사염 화탄소로 유발된 섬유화과 정을 부분적으로 억제하는 효과를 보였지만 유의성을 확인할 수는 없었다. 반면에 L - a r g i n i n e 만을 투여한 군에서는 간의 콜라 젠 양이 증가하는 것을 볼 수 있었다 ( F i g. 3 >. 또한 사염화탄소와 낯 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T ) 을 함께 투여한 C C l 4 + O B T 5 0 0 군과 C C l 4 + S O T 5 0 0 군에서 는 사염화탄소로 유발된 콜라젠 생성의 증가 를 억제하는 결과를 보였으며. 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T ) 만을 투여 한 O B T 5 0 0 군과 S O T 5 0 0 군에서는 콜라젠 생성의 증가에 영향을 미치지 않았다 ( F i g. 3 > ' m g $ @ $ g m o e 언와ι잊 t # o > 쩍 0 > 짧 $ 繼 F i g. 2. E f f e c t o f L - N A M E. A G. L - a r 밍띠 n e ( L - A R G ) o r O B T 5 0 0. S G T 5 0 0 o n C C 1 4 - i n d u c e d M D A f o r m a t i o n i n l i v e r h o m o g e n a t e s. E a c h b a r r r e p r e s e n t s t h e m e a n 土 S E M : a l l d e t e r m i n a t i o n s w e r e p e r f o r m e d i n d u p l i c a t e a s s a y s w i t h s a m p l e s o b t a i n e d f r o m t e n d i f f e r e n t a n i m a l s. K e y : ( a ) s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e c o n t r o l. p < 0. 0 5 : a n d ( b ) s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e C C I 4 - t r e a t e d g r o u p. p < 0. 0 5. @ 8 0 - = - 즈 7 0 - @ 6 0 0 i -' " 5 느.. ' " ( -. ) " : 3 : 0 - o " " " 2 0 울 1 0 ( o j ( 하, c, \. _ \..,.,.. c P " 깅 ;. \ : - ( j V " ι c κ 강 F i g. 3. C o l l a g e n c o n t e n t d e t e r m i n e d i n l i v e r s f r o m r a t s i n t o x i c a t e d w i t h C C 1 4 a n d t r e a t e d w i t h L - N A M E. L - a r g i n i n e ( L - A R G ) o r O B T 5 0 0. 이 ( b ) S G T 5 0 0. E a c h b a r r e p r e s e n t s t h e : t S E M : a l l d e t e r m i n a t i o n s w e r e m e a n ( 0 ) 0 ) -, ι씬β. d b " ' : 영상 o f / ' 좋 o f / '. o J > ' - 9 7

- 사상 j j l 질의학회지 제 1 5 권 제 1 호 2 0 0 3 - p e r f o r m e d i n d u p l i c a t e a s s a y s w i t h s a m p l e s o b t a i n e d f r o m t e n d i f f e r e n t a n i m a l s. K e y : ( a ) s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e c o n t r o l. p < 0. 0 5 : a n d ( b ). s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e C C I 4 - : @ @ ( - @ U i - - u = : - i. 이 ( a ) ( b b t r e a t e d g r o u p. p < 0. 0 5. 흐S @ - i a ~ @ E ), 5. 한약추출물과 N O 생성 억제제가 당 원 및 빌리루빈 생성에 미쳐는 영향 사염화탄소의 투여로 당원의 함량은 정상수 준의 3 0 % 정도로 감소하였으며, 사염화탄 소와 L - N A M E 을 동시에 투여 하면 1 5 % 수준까지 감소하였다. 반면에 L - a r g i n i n e. N A M E 만을 투여한 군에서는 별다른 변 화를 보이지 않았으며. 사염화탄소와 L - a r g i n i n e 을 동시에 투여한 군에서는 당원의 감소가 억 제되는 효과를 보였다 ( F i g. 4 ). 吳 茶 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 揚 ( S G T ) 과 사염화탄 소를 함께 투여 한 C C I 4 + O B T 5 0 0 군과 C C I 4 + S G T 5 0 0 군에서는 당원의 감소가 억 제되었으며. 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) ( J Y H 5 0 0 ) 만을 투여한 군에 서는 사염화탄소로 감소한 당원을 증가하는 결과를 보였다 ( F i g. 4 ). 사염화탄소의 투여로 빌리루빈의 양은 6 정도 중가하였으며 L - N A M E 을 동시에 투여 한 군에서는 별다른 변화를 보이지 않았다. L - a r g i n i n e 과 L - N A M E 만을 투여한 군에서 는 정상 수준과 차이가 없었으며. L - a r g i n i n e 의 투여는 사염화탄소로 유발된 빌리루빈의 증가를 약간 억제하는 효과를 보였다 ( F i g. 5 ). 또한 사염화탄소와 함께 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 을 투여한 C C I 4 + O B T 5 0 0 군과 C C I 4 + S G T 5 0 0 군에서는 빌리루빈의 생성이 억제되는 양상을 보였고. 吳 菜 莫 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 만을 투여한 군에서는 별다른 영 향을 미치지 않았다 ( F i g. 5 ). 배 ι Q ι - v 9 0 0 ζ t ν 6 ε 한써 휠 # ι 5 강 힘 # F i g. 4. G l y c o g e n c o n t e n t d e t e r m i n e d i n l i v e r s f r o m r a t s i n t o x i c a t e d w i t h C C 1 4 a n d t r e a t e d w i t h L - N A M E. L - a r g i n i n e ( L - A R G ) o r O B T 5 0 0. S G T 5 0 0. E a c h b a r r e p r e s e n t s t h e m e a n :! : S E M : a l l d e t e r m i n a t i o n s w e r e p e r f o r m e d i n d u p l i c a t e a s s a y s w i t h s a m p l e s o b t a i n e d f r o m t e n d i f f e r e n t a n i m a l s. K e y : ( a ) s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e c o n t r o l. p < 0. 0 5 : a n d ( b ) s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e C C l 4 - t r e a t e d g r o u p. p < 0. 0 5. ( = E그 r그 - a 느 = m z n? w 애 % 애 8 6 o ρ. 앙 # # # j ) ' - o o -,. p 0 -. p r :! : F i g. 5. C o n c e n t r a t i o n o f b i l i r u b i n s d e t e r m i n e d i n s e r u m f r o m r a t s i n t o x i c a t e d W i t h C C 1 4 a n d t r e a t e d w i t h L - N A M E. L - a r g i n i n e ( L - A R G ) o r O B T 5 0 0. S G T 5 0 0. E a c h b a r r e p r e s e n t s t h e m e a n S E M : 외 I d e t e r m i n a t i o n s w e r e p e r f o r m e d i n d u p l i c a t e a s s a y s w i t h s a m p l e s o b t a i n e d f r o m t e n d i f f e r e n t 킹 1 i m a l s. K e y : ( a ) s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f rα n t I E a : r t r d. p < 0. a 5 : a n i ( b ) c a r t l y d i f f e r e n t f r o m t h e C C l 4 - t r e a t e d g r o u p. p < 0. 0 5. ι - 9 8 -

- + 二 味 훌 中 훌과 吳 홍 9 U t F H 中 漫 의 R구 I J H I 않 f t l f l 에 대한 연구 - 6. 한약추출물과 N O 생성억제제가 혈 청효소활성에 미치는 영향 A L T. A L P 와 Y - O T P 동의 혈청 내 효소 활성은 사염화탄소의 투여로 2 배 정도 증가 하였고. L - N A M E 을 동시에 투여 한 군에서 는 더욱 상승하는 효과를 보였다 ( T a b l e 5 ). 반 면에 L - a r g i n i n e 과 L - N A M E 만을 투여한 군에서는 별다른 변화를 나타내지 않았으며, 사염화탄소의 E x p e r i m e n tåð G r o u p s 투여로 증가된 효소활성의 증가 가 L - a r g i n i n e 의 투여로 억제되지는 않았다 ( T a b l e 5 ). 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T 5 0 0 ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T 5 0 0 ) 의 투여는 사염화탄 소로 유발된 혈청효소활성의 S e r u m B i¾ e ` c a! pµl m e t m ( l N,¹ ) 뻐빼e µl I I r a m¾ g È n o V L. m i n ) 때때ne 織 때않J 증가를 억제하였 으며. 吳 菜 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S O T ) 만의 투여는 효소활성에 영향을 미 치지 않았다 ( T a b l e 5 ). T a b l e 5. E f f e c t s o f t h e w a t e r e x t r a c t o f O s u y u b u j a y i j u n g - t a n g ( O B T ) a n d S i p y i m i g u a I ' \ i u n g - t a n g ( S G T ) o n e n z y m e a c t i v i t i e s o f a l a n i n e a m i n o t r a n s f e r a s e a l k a l i n e p h o s p h a t a s e. a n d Y - g l u t a m y l t r a n s p e p t i d a s e d e t e r m i n e d s e r u m f r o m t h e l i v e r c h r o n i c a l l y d a m a g e d r a t s i n d u c e d b y t h e c h r o n i c a d m i n i s t r a t i o n o f c a r b o n t e t r a c h l o r i d e 織 뚫) C o n t n o l.0씨~때,ι 1 2 2 i 8. 1 9. 6 f 1. 3 C G 4 n l uå` 7 4. 3! 5 f15.\ 시 η 1 5. 7 : t l. 6 C 0 4 + L - N A M E 8 7. 4! 6. 3 1 2 9 5. 4 i 2 L 9 1 1 9. 8 :! 1. 5 ' L. N A M E m l¾ð 1 3 6. 8 i l 2. 8 1 1. 4 t 2. 0 c o + L. A R G, 1 7 0. 7 ι9써께 1 6. 1 H. 7 1 L. A R G U씌 48.5 1 3 0. H 8. 9 9. 9! L 0 C 0 4 + 0 8 1 5 0 0 1. 3 2Å ` 5. 2. JÁ< l q I \. 7 i l l O B T 5 o o 씨껴453 I 2 6. 7 i 1 0. 7 l O. m 5 C 0 4 + S G T 5 0 0 I IÁÄ 4 9. 6. Ì 1 4 1. 9 i 9 1 1. 9 U. r S G T 5 0 0 4 4. 8! 4. 0 1 2 6 6! 9 5 1 0 3 U l ' T h e w a t e r e x t r a c t s o f O s u y u b u j a y i j u n g - t a n g ( O B T 5 0 0 : O B T w a t e r e x t r a c t s 5 0 0 b o d y \ l e i 양 1 t ) a n d S i p y i m i g u a n j u n g t a n g ( S O T 5 0 0 : S O T w a t e r e x t r a c t s 5 0 0 m g / k g b o d y w e i g h t ) m i x e d i n s a l i n e w e r e g i v e n o r a l l y f o r 8 w e e k s. T h e e n z y m e a c t i v i t i e s d e t e r m i n e d i n s e r u m f r o m r a t s i n t o x i c a t e d w i t h C C k T h e v a l u e s a r e e x p r e s s e d a s m e a n 土 S D o f e i g h t r a t s i n e a c h g r o u p. 1 : S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e n o r m a l g r o u p ( p ( 0. 0 5 ). 2 : S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e C C l 4 g r o u p ( p ( 0. 0 5 ). 東 醫 꿇 世 保 元 의 I V. 考 察 병증론은 기존 病 효 觀 을 사 상체질병증관으로 재조명하였는데 소음인 병 증은 크게 賢 受 熱 表 熱 病 과 몹 受 寒 훌훌 寒 病 으로 대별된다 2 이. 소음인 몹 受 寒 훌훌 寒 病 은소음인이 8 뿔.! J 한 특정을 지니므로 항상 牌 陽 이 부족하 여 생긴 陰 實 之 氣 의 輕 重 에 의해 太 陰 證 과 少 陰 證 으로 구별된다. 整 需 된 陰 實 之 氣 를 내려 주는 것을 근본으로 하여 태음증은 溫 氣 가 寒 氣 를 밀어내는 것으로 溫 氣 를 陰 을 내려주는 溫 몹 緣 陰 法 이고 도와주면서 훌 少 陰 證 은 심부 에 영향이 미친 상태이므로 牌 氣 를 도와주면 서 降 陰 시키는 健 牌 降 陰 法 이다. 훌 病 證 太 陰 證 을 치료하는 十 二 味 寬 中 場 은 면 何 首 烏. i f f i 何 首 烏, 良 賣. 乾 훌, 陳 皮. 좁 皮. 香 附 子, 益 智 仁. 庫 朴. t 只 實, 木 香. 大 題 皮 로 구성되는 소음인의 I I 명 氣 理 氣 之 했 j 이며 四 鼓 港 효, 小 便 不 快. 陽 道 不 興 에 사용되는 처방이다. 짧 病 證 少 陰 證 을 치료하는 吳 茶 莫 附 子 理 中 場 은 A 參, 白 끼 t. 乾 훌. 官 桂. 白 杓 藥. 陳 皮. i t 草. 吳 菜 횟, 시 圓 좁. 破 古 紙. 附 子 로 구성된 처방이다 상기의 주치증들이 간장질환의 증상들과 비 슷한 면이 많고 근래 들어 한약이 간에 미치 는 영향에 대한 연구가 많이 진행되고 있어 소음인에게 다용되는 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) - 9 9 -

- 사상채질의학회지 제 1 5 권 제 1 효 2 0 0 3 - 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 이 간 기능에 미치는 영향을 알아보기 위하여 사염화탄소로 급성 간 독성을 유발한 흰쥐를 사용하여 실험하였 다. 吳 菜 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 물 추출물을 7 일 동안 흰쥐에 경 구 투여하였으며 간 독성물질로 잘 알려진 사 염화탄소를 1 회 복강 투여함으로써 급성 간 손상을 유도하여 吳 茶 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 漫 ( S G T ) 물 추출물이 손상된 간 의 기능 회복에 미치는 영향을 조사하였다. 생체내에서 간은 영양물질들의 물질대사를 담당하는 동시에 해독작용을 수행하는 중요한 장기이다. 간 기능과 관련된 t r a n s a m i n a s e 들은 아미노기 전이 반응을 촉매하는 효소의 총칭으로 체내에 널리 존재하는 효소이다. A s p a r t a t e a m i n o t r a n s f e r a s e ( A S T ) 와 a l a n i n e a m i n o t r a n s f e r a s e ( A L T ) 는 모든 장기에 존재하나 A S T 의 경우 간. 심장, 골격 근에 많이 존재하는 반면 A L T 는 간세포에 특이적으로 높게 존재하는 것이 특정이다. 혈 청 A S T 와 A L T 활성은 간세포의 변성이나 괴사를 반영하는 효소로서 간 조직 손상시 다 량 혈중으로 유출된다 2 J ) 간 기능이 손상되면 혈액내 총 단백질 또는 a l b u m i n 수치가 감 소하고 A S T. A L T 및 A L P 가 상승되며. b i l i r u b i n 및 Y - G T P 활성 등이 증가하는 것 으로 알려져 있다 2 2. 2 3 ) 본 실험에서 사용한 사염화탄소는 간 독성 유발물질로 잘 알려진 화학물질로써 f r e e r a d i c a l 생성에 의해 간 손상이 유발되는 것으로 2 4 ) 간 질환 연구에 많 이 이용되고 있다. 정상군의 A S T 와 A L T 활 성은 1 1 7 와 4 5 l U l L 인데 반해 사염화탄소 단독 투여군은 1. 8 7 6 와 6 3 8 l U l L 으로 나타 내어 사염화탄소의 단독 투여군은 정상군에 비해 A S T 와 A L T 의 활성도가 각각 1 7 배와 1 5 배로 증가되었다 ( T a b l e 3 ). 이러한 결과 는 간 기능의 지표로 사용되는 A S T 와 A L T 의 값이 독성물질에 노출되었을 때 증가하는 경향과 매우 잘 일치하고 있다 1 9. 2 5 ) 또한 간 장질환 및 담도계 질환의 지표로 사용되는 담 도계 효소 A L P 도 정상군이 5 1 0 l u l L 인데 반해 대조군은 8 3 8 l u l L 으로 약 1. 5 배 정 도 증가되었다. 이러한 결과는 사염화탄소의 투여시 일반적으로 혈청내 효소들 ( A S T, A L T, A L P 등 ) 의 활성도가 급격히 증가된다 는 보고 2 6. 2 7 ) 와 일치하여 사염화탄소의 투여 에 의해 간 손상이 유도되었음을 확신할 수 있었다 ( T a b l e 3 ). 반면 사염 화탄소와 낯 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 을 함께 투여 한 C C l 4 + O B T 5 0 0 군과 C C l 4 + S G T 5 0 0 군에서는 A S T 의 활성이 대조군인 사염화탄소 단독 투여군에 비해 현저한 감소 를 나타내었으나 정상군의 수준까지 회복되지 는 못하였다. 또한 모든 실험군에서 A L T 의 활성도는 대조군인 사염화탄소 단독 투여군에 비해 유의적인 감소를 나타내었으나 A S T 와 마찬가지로 정상군의 수준까지는 회복되지 못 하였다. 반면 a l k a l i n e p h o s p h a t a s e ( A L P ) 는 낯 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 추출물의 투여군들에서 정상군과 유 사한 수준으로 회복되었음을 알 수 있었다 ( T a b l e 3 ). 본 실험결과는 간 기능 향상효과가 있는 것으로 알려진 F r u c t u s s c h i s a n d r a e l 7 ) &따 ' a c h i r a 떠 ' Z T ) 그리고 T e l 때 i u m s t싫. 2 8 ) s l a n u m 의 투여로 인해 증가된 이들 효소의 활성이 유의하게 감소된다고 보고한 결과와 일치함을 보여준다. 이상의 결과들에서 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 추출물이 사 염화탄소 투여에 의해 증가된 혈청의 간기능 지표들 ( A S T, A L T. A L P ) 의 활성을 현저히 감소시키는 결과를 볼 때 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 추출물은 사염 화탄소에 의해 유도된 간세포 손상을 어느 정 도 회복시키는 효과가 있음을 시사해준다. 간 독성 물질인사염화판소는독성 중죠버μ안별인 t r i c h l o r o r r e t h y l ( α b ), t r i c h l o r o r r e t h y l p e r o x y ( α 1 3 0 2 ), 혹은 c h l o r i n e ( C D 과 같은 f r e e r a d i c a l 을 형성하여 l i p i d p e r o x i d a t i o n 을. 증가시 킬 뿐만 아니 라, c y t o c h r o m e P 4 5 0 의 파괴로 인하여 l i v e r m i c r o s o m a l c y t o c h r o m e 1 0 0

- + 二 味 를 中 훌과 吳 홍햇 附 子 f 훌 용의 R 여빼 I 훌훌 I f f l l J 에 대한 연구 - P 4 5 0 과 연관된 효소들이 급격히 감소되 며 결 국에는 l i v e r n e c r o s i s 를 유발한다 2 9-3 0 > 따 라서 위에서 얻어진 혈청의 간 기능 지표 효 소들의 결과를 뒷받침하기 위하여 간 조직의 l i p i d p e r o x i d a t i o n 및 이물질대사효소들의 활성을 측정하였다. 간 조직의 지질과산화 지 표로 이용되는 t h i o b a r b i t u r i c a c i d ( T B A ) 반응성 물질의 함량은 N A D P H 와 A D P - F e 2 + 를 첨가하여 지질과산화 반웅을 유도한 후 m a l o n d i a l d e h y d e ( M D A ) 생성 량을 측정 하 였다. 사염화탄소의 단독 투여군은 M D A 함 량이 정상군에 비해 유의한 증가를 나타내었다. 이는 사염화탄소가 체내에서 f r e e r a d e i c a l 을 형성하도록 유도하고 그로 인해 세포막의 불포 화지방산을 산화시킴으로써 막 기능을 파괴하게 된다 3 1 ) 즉 사염화탄소 투여군의 간 r r u c r o s o m e 에서 지질과산화 생성물이 증가되었다는 것을 암 시해 준다 반면 吳 茶 莫 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 훨 中 場 ( S G T ) 추출물을 투여한 C C l 4 + O B T 5 0 0 군과 C C l 4 + S G T 5 0 0 군에서는 사염화탄소 만을 투여한 대조군에 비해 유의 한 감소를 나타내면서 정상군과 유사한 수준 으로 회복시킴을 관찰하였다 ( F i g. 1 ). 사염 화탄소는 지질과산화의 지표인 M D A 수준을 증가시키며 반면 간 기능 회복효과가 있는 S c h i s a n d r a c h i n e n s i s 의 추출물 1 7 ) 이나 Q - t o c o p h e r o I 3 2 ) 을 처리한 경우 증가된 M D A 수준을 감소시키는 것을 보여주었으며. 이는 吳 茶 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 사염화탄소로 유도되는 M D A 수준을 감소시키 는 본 실험결과와 일치함을 보여주었다. 본 연구에서 낯 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 추출물을 투여한 경우 지질과 산화물 생성을 억제하는 것은 吳 菜 莫 附 子 理 中 場 ( G B T ) 과 十 二 味 寬 中 楊 ( S G T ) 의 약재 조성 물 ( T a b l e 1. 2 ) 중 항산화 활성이 높은 인삼 3 3 ) 및 백작약 3 4 ) 등이 포함되어 있으므로 이 들의 항산화 작용으로 간 조직의 산화적 손상 이 방지되는 것으로 사료된다. 간 독성물질인사염화판소는l i p i d p e r o x i d a t i o n 및 l i v e r n e c r o s i s 를 유발해 c y t o c h r o m e P 4 5 0 및 그와 연관된 효소의 파괴로 효소 활 성도가 현저히 감소되는데, 본 연구 결과에서 도 사염 화탄소의 단독투여 군의 c y t o c h r o m e P 4 5 0 과 P 4 5 0 r e d u c t a s e 는 정상군에 비해 유의한 감소가 확인되었다. 반연 사염화탄소 와 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 傷 ( S G T ) 을 함께 투여한 C C l 4 + O B T 5 0 0 군 과 C C l 4 + S G T 5 0 0 군에서는 두 가지 효소 값이 대조군에 비해 모두 유의한 증가를 나타 내었으나 정상군의 수준으로 회복되지는 않았 q ( T a b l e 4 ). 이외에도 수컷 w i s t a r r a t 에 서 C C l 4 를 투여한 경우 c y t o c h r o m e P 4 5 0 및 b 5 가 모두 감소되었으나 e u g e n o l 을 처리 한 경우 이들 p h a s e I c o m p o n e n t 의 감소를 유의하게 억제하였고 C C l 4 에 의해 유도된 m i c r o s o m a l l i p i d 에 대 한 손상 및 T B A R S 의 축적 에 의 한 p e r o x i d a t i v e d a m a g e 에 대 해 보호효과를 나타낸 연구결과가 있다 1 8 ) 또 한 송악- ( H e d e r a r h o m b e a ) 추출물의 투여시 사염 화판소의 독성으로 감소되었던 c y t o c h r o m e P 4 5 0 의 7 - e t h o x y r e s o r u f i n - o - d e e t h y l a t i o n ( E R O D ) 및 7 - b e n z y l o x y r e s o r u f i n - O - d e a l k y l a t i o n ( B R O D ) 활성이 회복됨을 보고한 바 있다 3 5 ) 이러한 연구결과와 마찬가지로 본 실험에 서도 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 楊 ( S G T ) 추출물의 투여는 해독작용에 관여 하는 이물질대사효소의 활성을 증가시켜 간 보호 효과를 나타내는 것으로 사료된다. 이상 의 결과를 종합해 볼 때 사염화탄소의 투여로 급성으로 유발한 간손상에 吳 菜 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 물 추출물은 항산화 효과가 탁월하므로 이물질대사효소 ( c y t o c h r o m e P 4 5 0 및 P 4 5 0 r e d u c t a s e ) 의 수준을 정상적인 수준으로 회복시키는 동 시에 f r e e r a d i c a l 의 소거작용으로 지질과산 화물 생성을 억제하여 간 보호효과를 나타내 는 것으로 판단된다. 또한 본 연구에서 사용 된 투여 농도들 중에 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 물 추출물 5 0 0-1 0 1 -

- 사상채질의학회지 제 1 5 권 제 1 호 2 0 0 3 - m g / k g 투여한 경우 간기능 지표효소들의 회 복이 좋게 나타났으므로. 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 물 추출물은 5 0 0 m g / k g 의 농도가 사염 화탄소로 유발된 급성 간손상의 회복에 가장 좋은 것으로 판단 된다. 반웅성 산소중간대사산물은 간손상을 유발 시키는 중요한 요인이다 3 6 ) 반응성 산소중 간대사산물은 확을 이루지 못하는 전자를 가 지는 물질로서 프리래디칼로 작용한다. 즉 s u p e r o x i d e a n i o n. h y d r o g e n p e r o x i d e. h y d r o x y l r a d i c a l 퉁이다. 이러한 물질은 세 포막과 D N A 의 손상 및 지 질과산화반웅으로 인하여 간세포의 손상과 죽음을 유발하는 작 용과 관련이 있다 3 7. 3 9 ) N O 는 항산화제로서 역할을 하며. s u p e r o x i d e a n i o n 및 다른 래 디칼과 반응하여 독성이 적은 물질을 전환한 다는 보고가 있다 4 0. 4 1 ) 사염화탄소의 간손상 은 탄소와 염소 결합의 단절과 세포막의 지질 의 과산화성 분해로 유발되는 것으로 인식된 다. 사염화탄소로 유발한 간경화의 모텔은 인 간의 여러 가지 원인으로 인한 간경화와 유사 한 특성을 지니므로 인간의 간경화 질환에 적 절한 간경화모델로 여겨진다 4 2 ) 따라서 본 연 구에서는 N O 합성 억제와 전구물질을 사용 하여 N O 생성조절이 사염화탄소로 유발된 간경화모델에 어떠한 영향을 미치는 지를 관 찰하였으며, 앞의 급성 간손상 모텔에서 예상 되는 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 항산화효과등이 이러한 모델에 미치는 만성적인 간손상에 보호효과를 보이는 지를 관찰하고 N O 와 관련된 기전을 이해하 고자 하는 것이다. 실험결과들은 N O가 만성적인 사염화탄소 로 유발된 간독성을 억제하는 효과를 보였다. 즉 N O가 s u p e r o x i d e a n i o n 및 다른 프리 래디칼과 반응하여 독성이 낮은 다른 래디칼 로 전환시킨다는 보고와 일치하는 결과라고 볼 수 있다 4 0. 4 1 ) 사염화탄소의 간독성의 결과 로 신속하고 광범위한 세포막지질의 과산화가 나타나며. 이러한 사실은 이미 광범위하게 입 증되었다 4 3 ) 따라서 본 연구의 결과에서도 사 염화탄소는 지질과산화를 증가시켰고. N O 합 성억제제인 L - N A M E 은 이러한 경향을 강화 시킨 것으로 보인다. 산화적 스트레스로부터 조직과 세포의 손상 및 염증을 방어하는 작용 은 조직과 세포에 분포하는 m e t a l l o t h i o n e i n 의 래디칼 청소작용 J ] 부분적으로 기인한다는 것 이 일반적인 학설이다 : 4 4 ) 이 m e t a l l o t h i o n e i n 이 N O의 생성에 중요한 역할을 한다고 알려졌 다 4 5 ) 사염화탄소와 L P S 의 단회 투여로 간 손상과 N O 의 과다생성이 유도된다는 보고가 되었다 4 6 ) 이 러한 보고는 N O 의 독성효과를 나타내는 것이지만. N - m o n o m e t h y l a r g i n i n e 으로 유도한 N O 의 합성억제는 같은 모텔에서 간손상을 증가시켰다 4 6 ) 이러한 결과는 N O 가 간보호물질로 작용한다는 것을 시사하는 것이 며 3 6 ) C C b 로 유도된 산화적 스트레스와 지 질과산화 및 간손상과 관련된 것으로 알려진 T N F - a 에 의하여 간손상이 진행되는 것으로 보여진다 4 7 ) 낯 菜 횟 附 子 理 中 j 易 W B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 물 추출물 5 0 0 m g / k g 를 투여한 실험군에서는 사염화탄소로 인한 N O 생성의 증가를 감소시키지 않았으며. 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 물 추출물 5 0 0 m g / k g 만을 투여한 실험군 에서도 N O 생성에 별다른 영향을 미치지는 않았다 ( F i g. 1 ). 이러한 결과는 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 항산화 효과가 N O 생성과는 직접적인 관련은 적은 것으로 생각된다. A L P 는 간세포의 왼형질막의 e c t o e n z y m e 이다. 혈청 내의 A L P 증가는 간세포막의 손 상울 알려주는 지표인 것이다 4 8 ) Y - G T P 는 간세포 원형질막에 함유된 효소이며. 이 효소 의 혈청 내 분비 역시 간세포 손상의 지표가 되는 것이다 4 9. 5 이. A L T 는 간세포의 세포질 효소이다. 혈청 내 이 효소의 증가는 간세포의 원형질막의 투과성이 증가된다는 것을 의미하 므로 세포의 사망과 관련이 있는 것이다 5 0 ) 이 1 0 2 -

- + 二 1! t ' J [ 中 훌과 중햇 附 子 f 훌 中 훌의 R j j l l 1 f i l t F 用 에 대한 연구 - 러한 효소들의 혈청 내 활성의 증가가 사염화 탄소의 만성적인 투여로 유도되고. N O 합성 억제제인 L - N A M E 을 동시에 투여하면 이러 한 경향이 증가하는 것은 N O 의 간세포보호 기능을 간접적으로 나타내는 것이다. N O 합 성의 유도는 간 재관류모텔에서 재관류 손상 을 최소화하며 5 1. 5 2 ) N O 생성의 억제는 d i m e t h y I - n i t r o s a m i n e 으로 유도된 간손상 을 증가시킨다는 보고도 있다 5 3 ) 본 연구에서 나타내는 결과는 이러한 보고들과 틀리지 않 으며. N O 의 간세포 보호작용을 나타내는 결 과를 보여준 것이다. 그러나 만성적인 간손상 모텔에서 吳 菜 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 물 추출물의 투여로 이러한 간기능 지표인 혈청 내 효소활성이 억제되지 만 N O 관련성을 정확하게 설명할 수는 없다 ( F i g. 2. T a b l e 5 ). 당원은 간 에너지의 주요 원천이다. 당원을 원천으로 에너지가 필요한 간기능을 수행한 다. 사염화탄소로 유발된 만성 간손상은 간세 포막 변화를 유도하는데 콜레스테롤 함량과 콜레스테롤/ 인지질 및 c A M P 함량을 증가시 켜서 간세포막을 변화시킨다 3 9 ) c A M P 가 증 가하면 당원 함량이 떨어지게 되게 된다. 한 편 N O 는 간의 탄수화물대사를 변화시킨다 5 4 ) 또한 g u a n y l c y c l a s e 를 활성화시키며, 차례로 c G M P 는 c G M P 자극에 의한 c A M P p h o s p h o d i e s t e r a s e 에 의 해서 c A M P 가 가수 분해되는 것을 자극하며, 이것은 당원파괴를 류가 협착되는 결과를 초래한다. 결과적으로 문맥고혈과 내재성 외인성 대사산물의 처리가 되지 않아 간기능 부전에 빠지게 된다. 콜라 젠은 섬유성 조직의 주요 요소이므로 콜라젠량 을 측정하여 사염화탄소로 미치는 N O의 효과를 관찰하였다. L - a r g i n i n e 유발된 간섬유화에 은 부분적으로 사염화탄소독성에 의한 간 섬 유화의 증가를 억제하는 효과를 보였다. 또한 L - a r g i n i n e 만을 투여한 군에서는 콜라젠 양 이 증가하였다. 이러한 결과는 N O 의 분비 증 가는 m e s a n g i a l 세포와 배양한 혈관근육세포 에서 콜라젠을 증가시키며 5 5. 5 6 ) L - a r g i n i n e 의 투여는 T G F - P 의 발현을 증가시키고 이것 은 세포외 기질 침착을 유발하고 섬유화를 증 가 시킨다는 보고와 일치한다 5 7 ) 이러한 기전 에 吳 菜 莫 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 물 추출물 5 0 0 m g / k g 의 투여는 콜라젠의 생성 억제 효과를 보이므로, 이러한 기전을 통하여 이루어지는 것으로 추측할 수 는 있지만, 직접적인 효과 기전에 대해서는 추가적인 연구가 있어야 할 것이다 ( F i g. 3 ), 결론적으로 사염화탄소 투여로 혈청 내의 N O - 2 + N O - 3 농도를 증가시키고 L - a r g i n i n e 은 유사한 결과를 보였다. 이 두가지 화합물 을 동시에 처리하였을 때는 더욱 증가하는 양 상을 보였다. 이것은 L - a r g i n i n e 이 섬유화를 억제하는 효과를 반영하며 이것은 일반적인 간기능과 관련이 있으며. 특히 빌리루빈과 탄 수화물대사와 관련이 있다. 한편 L - a r g i n i n e 방지한다. 본 연구에서는 N O 합성억제는 당 투여는 막 지질과산화를 억제하지는 못하였고 원고갈을 촉진시키고 L - a r g i n i n e 은 당원고갈 을 억제하는 효과를 보였다. 또한 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 물 추 출물 5 0 0 m g / k g 투여는 당원고갈을 억제하 는 효과를 보였다 ( F i g. 4 ). 간섬유화는 만성 간질환의 중요한 현상이다. 정상적인 간 실질 이 결합조직으로 대치되고 간의 정상적 구조 를 파괴하며 기능을 손상시킨다. 간섬유화의 중요한 결과는 간동양 주위의 결합조직의 침 혈청내로 효소의 분비를 억제하지는 못하였 다. 그러나 吳 菜 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 물 추출물의 만성적 간손 상에 대한 보호효과는 N O 생성과 간접적으 로 관련할 것으로 추측되지만 만성적 간손상 의 효과를 분명하게 나타내므로 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 간기능 보호작용에 대한 연구는 N O 생성 외에 다른 보호 기전에 대한 연구를 할 필요가 있을 것 착과 혈관확산 장벽의 파괴 및 동양혈관의 혈 이다. L - a r g i n i n e 의 투여로 유도된 N O 생 1 0 3 -

- 사상체질의학회지 제 1 5 권 제 1 호 2 0 0 3 - 성 증가는 지질 프리래디칼을 청소하기에 충 분하지 못하였으며, 이것은 N O가 매우 짧은 활동기를 가진 친수성 화합물이기 때문 일 것 으로 생각된다. 이 경우에 지질과산화에 의하 여 발생하는 왼형질막 손상은 막성 효소인 A L P 와 Y - G T P 및 세포질 효소인 A L T 를 혈 청 내로 방출하는 것이다. 간략하게 요약하면 본 연구 결과는 내인성 N O는 만성적인 사염 화탄소의 투여로 유발되는 간세포 손상을 억 제하는 역할을 하며, 이것은 프리래디칼독성 을 감소시키며 간의 탄수화물대사를 조절하고 콜라젠 생성을 억제하는 기능을 통하여 이루 어지게 된다는 것이다. 또한 吳 훗횟 附 子 理 中 傷 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 揚 ( S G T ) 의 투여는 이 러한 기전에 간접적으로 역할을 할 것으로 생 각된다. 이상의 실험결과로 少 陰 A 훌 病 證 에 사용되 는 十 二 味 寬 中 場. 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 이 독소에 의한 간손상을 억제하는 효과가 높은 것으로 나타났다. 추후 각각의 약물에 대한 기전의 구명 및 성분에 대한 연구가 별도로 필요하 며. 이에 따른 유효성분에 대한 실험도 진행 하여 기전을 구명해야 할 것으로 사료된다. v. 績 를 A 률빼 1. 사염화탄소의 투여는 간 손상을 유발시 켰으며. 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 추출물을 전 처리한 흰쥐에서는 사염화탄소 단독 투여군인 대조군에 비해 A S T. A L T. A L P 의 유의한 감소양상이 관찰 되었다. 2. 사염화탄소의 투여로 m i c r o s o m e 의 지질과 산화가 유도되었으며 이물질대사효소 ( c y t o c h r o m e P 4 5 0 및 P 4 5 0 r e d u c t a s e ) 의 유의한 감소 를 확인되었다. 吳 菜 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 揚 ( S G T ) 추출물의 경구투여는 간 의 지질과산화 지표인 m i c r o s o m e 의 T B A R S 생성을 억제하였으며 c y t o c h r o m e P 4 5 0 및 P 4 5 0 r e d u c t a s e 활성도가 대조군에 비해 유의한 증가로 정상수준으로 회복을 하였다. 3. 吳 茶 횟 附 子 理 中 場 W B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 는 혈청 내의 N O - 2 + N O - 3 의 수 치를 상승시켰다. 그러나 N O 합성 억제제인 L - N A M E 은 이러한 상승효과를 억제하였다. 4. 사염화탄소를 투여한 대조군의 간 조직 에서 지질과산화와 콜라젠 농도가 증가하였으 며. L - N A M E 투여군은 이러한 효과를 증가 시켰다. 그러나 吳 茶 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 을 투여한 군에서는 지질. 과산화와 콜라첸의 생성이 억제되는 결과를 보였다 5. 사염화 탄소 투여 후 A L T. A L P. Y - G T P 등의 혈청 내 효소 활성 및 빌리루빈 양은 2 배 내지 5 배 정도 증가하였으며. L - N A M E 투여군에서는 이러한 효소 활성의 경향을 더욱 강화시켰다. 이상의 실험 결과를 살펴보면 吳 茶 英 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 은 혈청 내 효소 활성을 억제하였으며. 이러한 결과는 N O가 산화적 간 손상을 보호하는 효과를 보 여 주었으며, 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 W B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 추출물의 투여는 사염화탄 소의 투여에 따른 생화학적 지표들의 변화를 억제하는데. 이러한 실험결과에서 吳 菜 횟 附 子 理 中 場 ( O B T ) 과 十 二 味 寬 中 場 ( S G T ) 의 추출 물은 사염화탄소로 유도한 간 독성에 대하여 해독작용 및 간 보호효과가 있는 것으로 판단 된다. 1 0 4 -

- + 二 味 를뿌앓과 중핏 附 子 f 몇 中 훌의 R구협 1 1 i I 作 用 에 대한 연구 - 參 考 文 廠 1. 한상모 외 1 0 인 : 동의학개론. 서울, 여 강출판사. p p. 8 4-8 6. 2 원지상 : 동의사상신편. 서울. 문우사. 1 9 7 4 p. 7 0. 3 전국한의과대학사상의학교실 : 사상의 학. 서울, 집문당. 1 9 9 2. p 5 3 1. 5 3 0. 4. 박석언 : 동의사상대전. 서울. 의도한국 사. 1 9 7 5. p 2 0 3. 5. 홍순용 이을호 : 사상의학원론, 서울. 행림출판사. 1 9 9 4. 2 3 3. 6. O z a w a. N. a n d E. P. G u e n g e r i c h. 1 9 8 3. E v i d e n c e f o r t h e f o r m a t i o n o f a n S - ( 2 - N 7 - g u a n y l - e t h y I ) g l u t a t h i o n e a d d u c t i n g l u t a t h i o n e - m e d i a t e d b i n d i n g o f t h e c a r c i n o g e n 1. 2 - d i b r o m o e t h a n o l t o D N A. P r o c. N a t l. A c a d. S c i. 7 8. 7 1 2 4-7 1 2 8. 7. C l o s a. D.. M. T o r r e s. G. H o t t e r. G. B i o q u e. O. S. μ o n. E. G e l p i, J. R o s e l l o - C a t a f a u. 1 9 9 7. P r o s t a n o i d s a n d f r e e r a d i c a l s i n C C l 4 - i n d u c e d h e p a t o t o 잉 c i t y i n r a t s : e f f e c t o f a s t i l b i n. P r o s t a g l a n d i n s L e u k o t E s s e n t F a t t y A c i d s 5 6. 3 3 1-3 3 4. 8. S a r a s w a t. B.. P. K. V i s e n. G. K. P a t n a i l a n d B. N. D h a w a n. 1 9 9 7. P r o t e c t i v e e f f e c t o f p i c r o l i v. a c t i v e c o n s t i t u e n t o f P i c r o r h i z a k u r r o o a. a g a i n s t o x y t e t r a c y c l i n e i n d u c e d h e p a t i c d a m a g e. I n d i a n J. E x p. B i o I. 3 5. 1 3 0 2-1 3 0 5. 9. L e e. J - W.. H. J e o n g. M - D. H a n. S - J. B a e l ι V - S o K i m a n d S - M. K a n g. 1 9 9 6. E f f e c t o f G 0 0 9 o n C C l 4 - i n d u c e d h e p a t i c i n j u r y a n d l i p i d p e r o x i d a t i o n i n r a t s. K o r e a n. J. P h a r m a c o g n. 2 7. 1 5 9-1 6 6. 1 0. L e e. J - S.. N - Y. K i m. K - H L e e. G - S. K i m. H - J P a r k. J - W C h o i a n d S - H. K i m. 2 0 0 0. E f f e c t s o f f l o w e r o f P u e r a r i a l o b a t a o n l i p i d p e r o x i d a t i o n a n d a c t i v i t i e s o f a l c o h o l m e t a b o l i c e n z y m e s i n a l c o h o l - t r e a t e d r a t s. J. K o r e a n S o c. F o o d S c i. N u t r. 2 9. 9 3 5-9 4 2. 1 1. K i m. S. Y.. H. P. K i m. M. K. L e e. S. H. K i m. H. M. H a n. A. M o o n. H. H u h a n d Y. C. K i m. 1 9 9 3. E f f e c t s o f b e t a i n e o n t h e C C 1 4 - i n d u c e d t o x i c i t y i n p r i m a r y c u l t u r e d r a t h e p a t o c y t e s. Y a k h a k H o e j i 3 7. 4 9 9-5 0 3. 1 2. B a n s a l. S. K.. J. L o v e a n d H. L. G u r t o o. 1 9 8 3. H i g h p r e s s u r e l i q u i d c h r o m a t o g r a p h i c s e p a r a t i o n o f m u l t i p l e f o r m s o f c y t o c h r o m e P - 4 5 0. B i o c h e m. B i o p h y s. R e s. C o m m u n. 1 1 7. 2 6 8-2 7 4. 1 3. L o w r y. O. H.. H. J. R o s e b r o u g h. A. L. F a r r a n d R. J. R a n d a l l. 1 9 5 1. P r o t e i n m e a s u r e m e n t w i t h t h e F o l i n - p h e n o l r e a g e n t. J. B i o i. C h e m. 1 9 3. 2 6 5-2 7 5. 1 4. S u e m a t s u. T.. T. K a m a d a. H. A b e. S. K i k u c h i a n d K. Y a g i. 1 9 7 7. S e r u m l i p o p e r o x i d e l e v e l s i n p a t i e n t s s u p p e r i n g f r o m l i v e r d i s e a s e. C l i n. C h i m. A c t a. 7 9. 2 6 7-7 7 0. 1 5. O m u r a. T. a n d R. S a t o. 1 9 6 4. T h e c a r b o n m o n o x i d e - b i n d i n g p i g m e n t o f l i v e r m i c r o s o m e s. 1. E v i d e n c e f o r i t s h e m o p r o t e i n n a t u r e. J. B i o I. C h e m. 2 3 9. 2 3 7 0-2 3 7 8. 1 6. W i l l i a m. C. H. J r. a n d M. K a m i n. 1 9 6 2. M i c r o s o m a l N A D P H c y t o c h r o m e c r e d u c t a s e o f l i v e r. J. B i o I. C h e m. 2 3 7. 5 7 8-5 9 5. 1 7. K o. K. M... S. P. I P. M. K. T. P o o n. S. S. W u. C. T. C h e. K. H. N g a n d Y. C. K o n g. 1 9 9 5. E f f e c t o f a l i g n a n - e n r i c h e d f r u c t u s S c h i s a n d r a e e x t r a c t o n h e p a t i c g l u t a t h i o n e s t a t u s i n r a t s : P r o t e c t i o n 1 0 5

- 사상채질의학회지 제 1 5 권 제 1 효 2 0 0 3 - a g a i n s t c a r b o n t e t r a c h l o r i d e t o x i c i t y. P l a n t a M e d. 6 1. 1 3 4-1 3 7. 1 8. K u r n a r a v e l u. P.. D. P. 않 k s h i n a r r o o π h y. S. S u b r a m a n i a m. H. D e v a r a j a n d N. S. D e v a r a j. 1 9 9 5. E f f e c t o f e u g e n o l o n d r u g - m e t a b o l i z i n g e n z y m e s o f c a r b o n t e t r a c h l o r i d e - i n t o x i c a t e d r a t l i v e r. B i o c h e m. P h a r m a c o l. 4 9. 1 7 0 3-1 7 0 7. 1 9. M a s e v i c h. T. G. a n d L. G.. 2 0 0 0. C h r o n i c h e p a t i t i s : i n d i c a t o r s o f d i s e a s e a c t i v i t y. T e r. A r k h. 7 2. 1 7-1 8. 2 0. 김정회 송정모 : 소음인 병증 및 처방에 나타난 계지탕의 변용에 대한 고찰. 사상의학 회 지. I I ( 1 ). 1 9 9 9. 2 1. T a k e d a. Y.. A. I c h i h a r a. H. T a n i o k a a n d H. I n o v e. 1 9 6 4. T h e b i o c h e m i s t r y o f a n i m a l c e l l s. t h e e f f e c t o f c o r t i c o s t e r o i d s o n l e a k a g e o f e n z y m e f r o m d i s p e r s e d r a t l i v e r c e l l. J. B i o l. G h e m. 2 3 9. 3 5 9 0-3 5 9 6. 2 2. D i n m a n. B. D.. E. A. H a m d i n. C. F. F o x. W. J. F r a j o l a. 1 9 6 3. C C l 4 t o x i c i t y. I I I. H e p a t o s t r u c t u r a l a n d e n z y m e c h a n g e. A r c h. E n v i r o n. H e a l t h 7. 6 3 0-6 4 6. 2 3. Z i n k I e. J. G.. J. G. V o s. J. A. M o o r e a n d B. N. G u p t a. 1 9 7 3. H e m a t o l o g i c a n d c l i n i c a l c h e m i s t r y e f f e c t o f 2. 3. 7. 8 - t e t r a c h l o r o d i b e n z o - p - d i o x i n i n l a b o r a t o r y a n i m a l s. E n v i r o n. H e a l t h P e r s p e c t i v e s 9. 1 1 1-1 1 8. 2 4. H o r v a t h. T.. E. K a r g e. T. J a v o r a n d W. K l i n g e r. 1 9 8 7. E f f e c t s a l l o p u r i n o l. ( + ) τ y 때없 n o l - 3 a n d d i h y d r o q u i n o l i n e - t y p e a n t i o x i d a n t s o n r a t h e p a t i c m i c r o s o m a l c y t o c h r o m e P - 4 5 0 a n d m o n o o x y g e n a s e s. I n t. J G J j n. P h a r m a c o l. T h e r. T o x i e o l. 2 5 2 0 1-2 0 3. 2 5. C o h e n. J. A. a n d M. M. K a p l a n. 1 9 7 9. T h e S o o T / S G P T r a t i o - a n i n d i c a t o r o f a l c o h o l i c l i v e r d i s e a s e. D i g. D i s. S c i. 2 4. 8 3 5-8 3 8. 2 6. B e r m a n. E.. D. E. H o u s e. J. W. A l l i s a n d J. E. S i m m o n s. 1 9 9 2. H e p a t o t o x i c i n t e r a c t i o n s o f e t h a n o l w i t h a l l y l a l c o h o l o r c a r b o n t e t r a c h l o r i d e i n r a t s. J. T o x i c o l. E n v i r o n. H e a l t h 3 7. 1 6 1-1 7 6. 2 7. M u k h e r j e e. S.. A. S u r a n d B. R M a i t i. 1 9 9 7. H e p a t o p r o t e c t i v e e f f e c t o f S w e r t i a c h i r a t a o n r a t. I n d i a n J. E x p. B i o l. 3 5. 3 8 4-3 8 8. 2 8. R a s h e e d. R A.. B. H. A l i a n d A. K. B a s h i r. 1 9 9 5. E f f e c t o f T e u c r i u m s t o c k s i a n u m o n p a r a c e t a m o l - i n d u c e d h e p a t o t o x i c i t y i n m i c e. G e n. P h a r m a c o l. 2 6. 2 9 7-3 0 1. 2 9. C a s t r o. J. A.. H. A. S a s a m e. H. S u s s m a n a n d J. R G i l l e t t e. 1 9 6 8. D i v e r s e e f f e c t s o f S K F 5 2 5 - A a n d a n t i o x i d a n t s o n c a r b o n t e t r a c h l o r i d e - i n d u c e d c h a n g e s i n l i v e r m i c r o s o m a l P - 4 5 0 c o n t e n t a n d e t h y l m o r p h i n e m e t a b o l i s m. L i l 농 S c i. 7. 1 2 9-1 3 6. 3 0. R e c k n a g e l. R O. a n d E. A. G i e n d e. ( 1 9 7 3 ). C a r b o n t e t r a c h l o r i d e h e p a t o t o x i c i t y : A e x a m p l e o f l e t h a l c l e a v a g e. G R G G r i t. R e v. T o x i c o l. 2. 2 6 3-2 9 7. 3 1. R e c k n a g e l. R. O. 1 9 6 7. C a r b o n t e t r a c h l o r i d e h e p a t o t o x i c i t y. P h a r m a c o l. R e v. 1 9. 1 4 5-2 0 8. 3 2. P a d r o n. A. G.. E. G. D. D e T o r a n z o a n d J. A. C a s t r o. 1 9 9 6. D e p r e s s i o n o f l i v e r m i c r o s o m a l g l u c o s e 6 - p h o s p h a t a s e a c t i v i t y i n c a r b o n t e t r a c h l o r i d e - p o i s o n e d r a t s. P o t e n t i a l a y n e r g i s t i c e f f e c t s o f l i p i d p e r o x i d a t i o n a n d o f c o v a l e n t b i n d i n g o f h a l o a l k a n e - d e r i v e d f r e e r a d i c a l s t o c e l l u l a r c o m p o n e n t s i n t h e p r o c e s s. J. F r e e R a d. B i o l. M e d. 2 1. 8 1-8 7. 3 3. P a i l ι T. H.. J. T. H o n g a n d S. Y. 1 0 6 -

- + 二 i > ; f ; ' j [ 中 훌과 吳 훌헛 附 子 f 훌 c t ' 의 I f f t J i l i l I훌! 1 f t 用 에 대한 연구 - H o n g. 1 9 8 2. S t u d i e s o n t h e a n t i o x y g e n i c s u b s t a n c e s i n P a n a x g i n s e n g r o o t s. K o r e a n J F o o d S c i. T e c h n o l. 1 4. 1 3 0-1 3 5. 3 4. L i m. D - K. U. C h o i a n d D - H. S h i n. 1 9 9 6. A n t i o x i d a t i v e a c t i v i t y o f e t h a n o l e x t r a c t f r o m K o r e a m e d i c i n a l p l a n t s. K o r e a n J. F o o d S c i. T e c h n o l. 2 8. 8 3-8 9. 3 5. H o n g. Y - S.. H - L. K i m. V - S o P a e a n d S - S. P a r k. 1 9 9 5. C h e m o p r o t e c t i v e e f f e c t o f m e t h a n o l e x t r a c t o f H e d e r a r h o I n b e a l e a v e s o n t h e r e v e r s a l o f c y t o c h r o m e P - 4 5 0 a c t i v i t i e s i n d u c e d b y c a r b o n t e t r a c h l o r i d e. J A p p l. P h a r I n a c o l. 3. 2 4 5-2 5 0. 3 6. M u r i e l P. P e r o x i d a t i o n o f l i p i d s a n d l i v e r d a m a g e. I n : A n t i - o x i d a n t s. O x i d a n t s. a n d F r e e R a d i c a l s ( E d s. B a s k i n S I a n d S a l e m H ), p p. 2 3 7-2 5 7. T a y l o r & F r a n c i s. W a s h i n g t o n. D C. 1 9 9 7. 3 7. A r t h u r M J P. R e a c t i v e o x y g e n i n t e r m e d i a t e s a n d l i v e r i n j u r y - J H e p a t o l 6 : 1 2 5-1 3 1. 1 9 8 8. 3 8. T r i b b l e D L. A w T Y a n d J o n e s D P. T h e p a t h o p h y s i o l o g i c a l s i g n i f i c a n c e o f l i p i d p e r o x i d a t i o n i n o x i d a t i v e c e l l i n j u r y. H e p a t o l o g y 7 : 3 7 7-3 8 6. 1 9 8 7. 3 9. M u r i e l P a n d M o u r e l l e M. C h a r a c t e r i z a t i o n o f m e m b r a n e f r a c t i o n l i p i d c o m p o s i t i o n a n d f u n c t i o n o f c i r r h o t i c r a t l i v e r. R o l e o f S - a d e n o s y l - L - m e t h i o n i n e. J H e p a t o l 1 4 : 1 6-2 1. 1 9 9 2. 4 0. M c C a l l T B. B o u g h t e n - S m i t h N K. P a l m e r R M J. W h i t t l e B J R a n d M o n c a d a S. S y n t h e s i s o f n i t r i c o x i d e f r o m L - a r g i n i n e b y n e u t r o p h i l s. R e l e a s e a n d i n t e r a c t i o n w i t h s u p e r o x i d e a n i o n. B i o c h e m J 2 6 1 : 2 9 3-2 9 6. 1 9 8 9. 4 1. K a n n e r J. H a r e l S a n d G r a n i t R. N i t r i c o x i d e a s a n a n t i x i d a n t. A r c h B i o c h e m B i o p h y s 2 8 9 : 1 3 0-1 3 6. 1 9 9 1. 4 2. P e r e z T a m a y o R. I s c i r r h o s i s o f t h e l i v e r e x p e r i m e n t a l l y p r o d u c e d b y C C I 4 a n a d e q u a t e m o d e l o f h u m a n c i r r h o s i s? H e p a t o l o g y 3 : 1 1 2-1 2 0. 1 9 8 3. 4 3. R e c k n a g e l R O a n d G l e n d e E A. C a r b o n t e t r a c h l o r i d e h e p a t o t o x i c i t y : A n e x a m p l e o f l e t h a l c l e a v a g e. C R C C r i t R e v T o x i c o l 2 : 2 6 3-2 9 7. 1 9 7 3. 4 4. S a t o M a n d B r e m m e r 1. O x y g e n f r e e r a d i c a l s a n d m e t a l l o - t h i o n e i n. F r e e R a d i c B i o i M e d 1 4 : 3 2 5-3 3 7. 1 9 9 3. 4 5. A r i z o n o K. K a g a w a S. H a m a d a H a n d A r i y o s h i T. N i t r i c o x i d e m e d i a t e d m e t a l l o t h i o n e i n i n d u c t i o n b y l i p o p o l y s a c c h a r i d e. R e s C o m m u n M o l P a t h o l P h a r m a c o l 9 0 : 4 9-5 8. 1 9 9 5. 4 6. C h a m u l i t r a t W. J o r d a n S J a n d M a s o n R P. N i t r i c o x i d e p r o d u c t i o n d u r i n g e n d o t o x i c s h o c k i n c a r b o n t e t r a c h l o r i d e - t r e a t e d r a t s. M o l P h a r m a c o l 4 6 : 3 9 1-3 9 7. 1 9 9 4. 4 7. C h a m u l i t r a t W. B l a z k a M E. J o r d a n S J. L u s t e r M I a n d M a s o n R P. T u m o r n e c r o s i s f a c t o r - Q a n d n i t r i c o x i d e p r o d u c t i o n i n e n d o t o x i n - p r i m e d r a t s a d m i n i s t e r e d c a r b o n t e t r a c h l o r i d e. L i f e S c i 5 7 : 2 2 7 3-2 2 8 0. 1 9 9 5. 4 8. K a p l a n M M. S e r u m a l k a l i n e p h o s p h a t a s e - A n o t h e r P i e c e i s a d d e d t o t h e p u z z l e. H e p a t o l o g y 6 : 2 2 6-2 2 8. 1 9 8 6. 4 9. P l a a G L a n d H e w i t t W R. D e t e c t i o n a n d e v a l u a t i o n o f c h e m i c a l l y i n d u c e d l i v e r i n j u r y. I n : P r i n c i p l r s a n d M e t h o d s o f T o x i c o l o g y { E d. H a y e s W ). 1 0 7

- 사상채젊의학회지 재 1 5 권 제 1 호 2 0 0 3 - p p. 4 0 7-4 4 5. R a v e n P r e s s. N e w Y o r k. 1 9 8 2. 5 0. B u l l e F. M a v i e r P. Z a f r a n i E S. P r e a u x A - M. L e s c s M - C. S i e g r i s t S. D h u m e a u x D a n d G u e l l a e n G. M잉딩 m잉 n o f Y - g l u t a m y l t r a n s p e p t i d a s e r e l e a s e i n s e r u m d u r i n g i n t r a h e p a t i c a n d e x t r a h e p a t i c c h o l e s t a s i s i n t h e r a t : A h i s t o c h e m i c a l. b i o c h e m i c a l a n d m o l e c u l a r a p p r o a c h. H e p a t h o l o g y 1 1 : 5 4 5-5 5 0. 1 9 9 0. 5 1. J o n e s S M a n d T h u r m a n R C. L - A r g i n i n e m i n i m i z e s r e p e r f u s i o n i r i j u r y i n a l o w f l o w. r e f l o w m o d e l o f l i v e r p e r f u s i o n. H e p a t o l o g y 2 4 : 1 6 3-1 6 8. 1 9 9 6. 5 2. K o b a y a s h i H. N o n a m i T. K u r o k a w a T. T a k e u c h i Y. H a r a d a A. N a k a o A a n d T a k a g i H. R o l e o f e n d o g e n o u s n i t r i c o x i d e i n i s c h e m i a - r e p e r f u s i o n i r i j u r y i n r a t l i v e r. J S u r g R e s 5 9 : 7 7 2-7 7 9. 1 9 9 5. 5 3. N a g a s e S. I s o b e H. A y u k a w a K. S a k a i H a n d N a w a t a H. I n h i b i t i o n o f n i t r i c o x i d e p r o d u c t i o n i n c r e a s e s d i m e t h y l n i t r o - s a m i n e - i n d u c e d l i v e r i r i j u r y i n r a t s. J H e p a t o l 2 3 : 6 0 1-6 0 4. 1 9 9 5. 5 4. B o r g s M. B o l l e n M. K e p p e n s S. Y a p S H. S t a l m a n s W a n d V a n s t a p e l F. M o d u l a t i o n o f b a s a l h e p a t i c g l y c o g e n o l y s i s b y n i t r i c o x i d e. H e p a t o l o g y 2 3 : 1 5 6 4-1 5 7 1. 1 9 9 6. 5 5. T r a c h t m a n H. F u t t e r w e i t S a n d S i n g h a l P. N i t r i c o x i d e m o d u l a t e s t h e s y n t h e s i s o f e x t r a c e l l u l a r m a t r i x p r o t e i n s i n c u l t u r e d r a t m e s a n g i a l c e l l s. B i o c h e m B i o p h y s R e s C o m m u n 2 0 7 : 1 2 0-1 2 5. 1 9 9 5. 5 6. K o l l p a k o v V. G o r d o n D a n d K u l i k T J. N i t r i c o x i d e - g e n e r a t i n g c o m p o u n d s i n h i b i t t o t a l p r o t e i n a n d c o l l a g e n s y n t h e s i s i n c u l t u r e d v a s c u l a r s m o o t h m u s c l e c e l l s. C i r c R e s 7 6 : 3 0 5-3 0 9. 1 9 9 5. 5 7. N a r i t a 1. B o r d e r W A. K e t t e l e r M. R o u s l a h t i E a n d N o b l e N A. L - A r g i n i n e m a y m e d i a t e t h e t h e r a p e u t i c e f f e c t s o f l o w p r o t e i n d i e t s. P r o c N a t l A c a d S c i U S A 9 2 : 4 5 5 2-4 5 5 6. 1 9 9 5. 1 0 8