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Korean Society for Biotechnology and Bioengineering Journal 31(1): 14-19 (2016) http://dx.doi.org/10.7841/ksbbj.2016.31.1.14 ISSN 1225-7117 / eissn 2288-8268 총설 항산화및미백화장품원료로서의땅콩새싹추출물에관한연구 윤미연 * A Study on Peanut Spouts Extract as the Anti-oxidant Activity and the Skin Whitening Cosmetic Ingredients Mi Yun Yoon* Received: 15 February 2016 / Revised: 18 March 2016 / Accepted: 21 March 2016 2016 The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering Abstract: To investigate the effect of peanut sprout extract on skin care, we measured anti-oxidant activity and whitening action. As a result of measuring DPPH radical scavenging activity to examine independent anti-oxidation of peanut sprout extract, there was strongly scavenging activity. Fluorescent material DCF-DA was used to measure hydrogen peroxide created in RAW 264.7 cells, and all concentration dependently decreased ROS production. As a result of measuring nitric oxide to examine anti-inflammation of peanut sprout extract, there was strongly inhibited nitric oxide production in RAW 264.7 cells. Tyrosinase activation was found to inhibited dose-dependant. Melanin production was also prevented dose-dependant. Therefore, it is expected to be used effectively in development of functional cosmetic materials. Keywords: Peanut spouts, Anti-oxidant, Anti-inflammatory, Whitening, Cosmetic 1. INTRODUCTION 최근중국을비롯하여동남아시아화장품시장은한류열풍으로인하여한국화장품의선호도가높아지면서국내화장품업계는호황을이루고있다. 그동안아시아시장에서외국브랜드에비해인지도가낮았던한국화장품브랜드의신뢰 동남보건대학교피부미용과 Department of Cosmetology, Dongnam Health College, Suwon 440-714, Korea Tel: +82-31-249-6576, Fax: +82-31-249-6570 e-mail: ymy@dongnam.ac.kr 도가높아지면서 K- 뷰티 가화제가되고있다. 이러한현상은이미포화상태인국내화장품산업이세계시장에발맞추기위해업계간선의의경쟁과발전을하게되는원동력이되고있다. 화장품은단순히피부를보호하기위해사용되는기초적인단계에서피부를보호하기위한기능성화장품으로발전해왔으며기능성화장품에대한이미지는과거희소성에서점차적으로보편화되고있다. 또한주술적, 종교적, 사회적신분또는계급을나타내기위한목적이나동물이나태양으로부터보호를위해사용한화장품의목적에서현대에이르러서는신체의청결을유지, 자신의미화, 심리적만족수단그리고더나아가서는피부의생기기능활성등의목적으로화장품이사용되고있다 [1]. 특히화장품역사를볼때공통적으로추구했던미적본능이피부미백이다. 미백은한국과일본등특히동양에서많은관심을받고있으며주름방지와더불어가장중요한피부연구의한분야이다. 땅콩은콩과에속하는일년생의초본식물로고온에서잘자라고우리나라, 중국, 인도, 미국등세계각국에서재배되며단백질, 지방, 비타민, 무기질등다양한영양성분을함유한양질의유지작물이다 [2]. 새싹채소는종자에서싹이나와잎이약 1~3 개달린어린채소를말하며종자에서싹이트는시기에자신의성장을위하여영양소등이로운물질을생합성하므로, 새싹채소의비타민 무기질함량은다자란채소의 3~4 배에이른다. 이처럼땅콩의싹이발아할때외부의자극으로부터자신을보호하기위해 resveratrol (3,5,4'-transtrihydroxystilbene) 을생산하게되는데땅콩종자상태에서는거의없던 resveratrol 성분이싹이발아되면서 90 배이상증가된것으로보고되었다 [3]. Resveratrol 은폴리페놀 (polyphenol) 의일종으로박테리아나균류같은외부환경의변화에식물체스스로를보호하기위해자연적으로생성되는항

항산화및미백화장품원료로서의땅콩새싹추출물에관한연구 15 독성물질인 phytoalexin 에속한다 [4]. Resveratrol 의생리활성으로는대식세포 (macrophage) 의염증조절인자로알려진 inducible nitric oxide synthase (inos) 나 cyclooxygenase-2 (COX-2) 발현을억제하여항염증작용을하며 [5], 항산화및항균작용 [6] 이대표적이다. 땅콩새싹은알츠하이머 (Alzheimer's disease), 암 (cancer), 심혈관질환같은각종질병을예방하는식물로알려져있으며, 최근연구에선당뇨병예방및합병증의일부를감소시키는데효능이있고, 당뇨병쥐에서산화스트레스및신장기능장애를감소시켰다 [7]. 이전연구에서천연폴리페놀화합물 (polyphenol compound) 인 resveratrol 을다량함유하고있는땅콩새싹추출물의항산화효과및항염증작용등이보고되어왔으나티로시나제 (tyrosinase) 와관련한미백작용에대한연구는미비한실정이다. 따라서본연구는땅콩새싹을에탄올추출하여항산화및티로시나제활성및멜라닌 (melanin) 생성을측정하여피부미백화장품소재로서의가능성을검토하였다. 2. MATERIALS AND METHOD 2.1. 시약 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT), Tyrosinase, L-DOPA, L-tyrosine은 Sigma Chemical Co. (St. Louis. Mo. USA) 로부터구입하였다. 2',7'-dichlorofluorescin diacetate (DCF-DA) 는 Molecular Probe Co. (Eugene, OR, USA) 에서구입하였다. B16F10 melanin 세포, RAW 264.7 세포는서울대학교세포주은행으로부터구입하였다. 2.2. 실험재료본연구의실험재료로사용한땅콩새싹은 1 kg 의전초를수세한다음시료에 95% ethanol 용액 4 배를가한다음실온에서 7 일동안침적시켜얻어진상층액을 3M filter paper 를이용하여정제하고, 정제된추출물을 rotary evaporator 를이용하여농축한뒤 heating block 을이용하여남아있는 ethanol 을모두날리고최종 3.7 g 의추출물 (extract) 을얻어시료로사용하였다. 2.3. 세포배양 B16F10 melanin 세포와 RAW 264.7 세포는 10% fetal bovine serum 과 penicillin/streptomysin (100 IU/ 50 μg/ml) 을함유한 Dulbecco's modified eagle's medium (DMEM) 용액으로 37 o C 로유지되는 5% CO 2 incubator 에서배양하였다. 2.4. MTT 를이용한세포독성측정땅콩새싹추출물의세포독성을확인하기위하여 MTT 법을하였다. B16F10 melanin 세포를사용하였으며, 24 well plate 에 well 당 1 10 4 의세포수로분주하고시료를농도별로가한후 48 시간동안 37 o C, CO 2 배양기에서배양하였다. 48 시간후배양용액을버리고, Krebs 용액 (mm : NaCl 137, KCl 2.7, Na 2 HPO 4 0.4, MgCl 2 0.5, HEPES [ph 7.4] 10, CaCl 2 1.8, 포도 당 5) 에녹인 MTT 용액 500 μg/ml 을각 well 에 1 ml 씩가하고어두운곳에서 4 시간배양후상층액을버리고, DMSO 를각 well 에 1 ml 를가하여 MTT formazan 을용해시켰다. 실온에서 15 분간 MTT formazan 을완전히용해후 570 nm 에서흡광도를측정하였다. 동일한조건으로 4 회반복적으로실험하여평균값을측정하였다. 2.5. DPPH radical 소거정량 96 well plate 에에탄올에녹인 0.1 mm 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 용액 180 μl 와땅콩새싹추출물을농도별로 20 μl 씩가하고어두운상태로 37 o C 에서 30 분간배양한후 FL 600 분광형광계 (BioTek, Winooski, VT, USA) 를이용하여 517 nm 에서흡광도를측정하였다. 동일한조건으로 4 회반복적으로실험하여평균값을측정하였다. 2.6. 세포내산화스트레스생성측정 DCF-DA 가 RAW 264.7 세포내로들어가서세포내에서생성된자유라디칼과반응하여형광물질인 DCF 로산화되는원리를이용하여측정하였다. RAW 264.7 세포를 10 ml 의 Krebs buffer 에분산시킨후, 20 μm DCF-DA 를가하고 30 분간어두운곳에서배양하였다. DCF-DA 가없는 Krebs buffer 로한번세척한후원심분리하여세포를추출하였다. 1 10 4 cells/ml 로소분하고시료를농도별로전처치한후 silica 1 mg/ml 를가하여 30 분간 H 2 O 2 생성을유도하였다. 원심분리후 cell pellet 을 200 μl 의 Krebs buffer 에재분산시켜 96 well plate 에옮긴후형광도 (Ex 485 nm, Em 535 nm) 를측정하였다. 동일한조건으로 4 회반복적으로실험하여평균값을측정하였다. 2.7. 세포내 NO 생성측정 RAW 264.7 세포를 24 well plate 에 1 10 6 cells/ml 로각 well 당 1 ml 씩분주하였다. 96 well plate 에세포배양상등액 100 μl 와 Griess 시약 (1% sulfanilamide in 5% phosphoric acid + 1% α-naphthylamide in H 2 O) 150 μl 를혼합한후, 5 분동안반응시켜 ELISA microplate reader (MQX200R, BioTek, Winooski, VT, USA) 를이용하여 540 nm 에서흡광도를측정하였다. 검량선작성을위해 sodium nitrite (NaNO 2 ) 를표준품으로사용하여비교하였다. 동일한조건으로 4 회반복적으로실험하여평균값을측정하였다. 2.8. 실험관내에서 tyrosinase 활성측정 Tyrosinase 활성기질은 L-DOPA 를사용하였다. L-DOPA 는 2 mg/ml 를 potassium phosphate buffer (0.1 M, ph 6.8) 로완전히녹이고 tyrosinase 는 3000 units/ml 농도로준비하였다. Tyrosinase 90 μl 에농도별로희석한땅콩새싹추출물 10 μl 를시험관에넣고잘섞어준뒤 96 well plate 에 40 μl 씩분주하고 L-DOPA (2 mg/ml) 를 200 μl 를넣고 37 o C 에서 1 시간반응시킨후 475 nm 에서흡광도를측정하였다. 동일한조건으로 4 회반복적으로실험하여평균값을측정하였다.

16 Korean Society for Biotechnology and Bioengineering Journal 31(1): 14-19 (2016) Fig. 1. The cytotoxicity of peanut sprout extract. Results are means ±SD from 4 separate experiments. Fig. 2. Anti-oxidant activities of peanut sprout extract in the DPPH radical scavenging activity assay. Results are means±sd from 4 separate experiments. *p<0.05: Significantly different from control. 2.9. B16F10 melanin 세포에서 melanin 생성억제측정 B16F10 melanin 세포를 6 well plate 에 3 ml 로분주한후 10% FBS 이함유된 phenol red-free DMEM 용액에서 12 시간동안배양하였다. 그리고시료를각각의농도로 37 o C 에서 10 분간배양하여전처치한후, 1 μm 의 α-msh (melanocyte stimulating hormone) 를처치하여 37 o C 에서 72 시간동안배양하였다. 배양이끝나고난후 1% (w/v) Triton X-100 을함유한 10 mm sodium phosphate buffer (ph 6.8) 를 100 μl 를가하고 5 분간 shaking 한후시험관으로옮기고이를 10,000 rpm 에서 5 분간원심분리하여얻은 cell pellet 에 1 N NaOH 100 μl 와증류수 200 μl 를가하고 60 o C 에서 1 시간배양하여멜라닌을완전히녹인후 96 well plate 에 200 μl 를옮기고 405 nm 에서흡광도를측정하였다. 동일한조건으로 4 회반복적으로실험하여평균값을얻어멜라닌표준품으로얻은검량선을이용하여각 well 에서생성된멜라닌양을산출하였다. 2.10. 자료분석및통계적검정실험결과는평균 ± 표준편차로표기하였으며, 실험성적은 non-paired student's t-test 로검정하였다. 3. RESULTS AND DISCUSSION 3.1. 세포독성측정땅콩새싹추출물의세포독성을알아보기위하여 MTT 를통해관찰하였다. B16F10 melanin 세포에땅콩새싹추출물 25, 50, 100 μg/ml 농도로처리하여관찰한결과농도에따라세포독성이나타나지않았으며 (Fig. 1), 최고농도인 100 µg/ ml 에서 98% 세포생존율을나타냄으로써인체에적용하였을때안전성에있어효과적인물질이라사료된다. 3.2. 시험관내에서의항산화작용천연식물에다량함유되어있는페놀성화합물 (phenolic compounds) 은항산화, 항균, 항암등다양한생리활성효과가 있다고보고되고있으며, 특히항산화제로많이응용되고있다 [8]. 이러한페놀성화합물의항산화제는과산화지질 (lipid peroxide radical) 에수소공여체로작용하여연쇄반응을종결시키게된다. 이와같이생체막에서수소공여체로써작용하는항산화활성은 DPPH 를이용한자유라디칼소거활성을통해확인할수있다 [9]. 항산화, 항암작용에우수한 resveratrol 을다량함유하고있는땅콩새싹추출물의자체적인항산화작용을알아보기위하여 DPPH radical 소거활성을측정하였다. 땅콩새싹추출물 25 μg/ml 에서는미미한소거활성을나타내었으나 50 μg/ml 에서는 15%, 100 μg/ml 에서는 28% 항산화활성을나타내었다 (Fig. 2). 식물추출물의 DPPH radical 소거에의한전자공여능력 (electron donating ability) 이페놀류나플라보노이드물질에의하여항산화활성을나타내는것으로볼때 [10], 땅콩새싹추출물에서항산화활성을나타낸것이땅콩새싹구성성분인페놀화합물등의항산화물질의상호작용에의한것으로사료되며땅콩새싹추출물자체의항산화효능이있는것으로사료된다. 3.3. RAW 264.7 세포에서 reactive oxygen species (ROS) 소거활성시험관내에서땅콩새싹추출물자체가자유라디칼소거활성을나타내고있는것을확인하였고, 이실험에서는 DCF- DA 형광물질을이용하여세포내에서생성되는자유라디칼을측정하였다. ROS 는슈퍼옥사이드 (superoxide), 하이드록시라디칼 (hydroxyl radical), 과산화수소를포함한활성산소종 (reactive oxygen species) 으로써인체는호흡과정을통해끊임없이활성산소가생성되고있다. 또한 ROS 는세포내 DNA 의변형, 단백질산화 (protein oxidation), 지질과산화 (lipid peroxidation) 등의손상을나타내어암, 당뇨병, 동맥경화, 염증등의다양한질병을유발하고 [11,12], 염증및노화의진행을가속화시킨다. 최근연구에서 ROS 가피부경화증과밀접한관련이있다고보고되고있다 [13]. Stimulant 로사용한 silica 1 mg/ml 은 43% 자유라디칼을생

항산화및미백화장품원료로서의땅콩새싹추출물에관한연구 17 Fig. 3. Effect of peanut sprout extract on intracellular free radical generation in RAW 264.7 cells. Results are means±sd from 4 separate experiments. *p<0.05: Significantly different from silica. Fig. 4. Effect of peanut sprout extract on intracellular NO generation in RAW 264.7 cells. Results are means±sd from 4 separate experiments. *p<0.05: Significantly different from LPS. 성하였으며, 땅콩새싹추출물은각각농도의존적으로억제하였다. 특히최고농도인 100 μg/ml 에서 31% 로강하게억제하였다 (Fig. 3). 이러한결과는땅콩나물뿌리추출물의에틸아세테이트분획의경우 L-ascorbic acid 와유사한활성산소소거활성을나타낸연구 [9] 를뒷받침할수있다. 또한 resveratrol 이농도에따라 ROS 생성을감소시킨연구 [14] 에의거하여땅콩새싹이함유하고있는다양한성분중에 resveratrol 에의해활성산소를억제하는결과를나타낸것을알수있었으며땅콩새싹추출물을이용한항산화및항노화화장품소재로써가능성이있는것으로사료된다. 3.4. RAW 264.7 세포에서 Nitric Oxide (NO) 생성억제활성 NO 는일종의자유라디칼로서많은세포에서중요한 2 차전달자역할을담당하고있으며 [15], 세포막을쉽게통과할수있는성질이있어생체내에서매우다양한작용을한다 [16]. 또한생체내에서 L-arginine 으로부터 nitric oxide synthase (NOS) 에의해합성된다. 염증반응은숙주방어시스템에서, interferon-γ 와세균성 lipopolysaccharide (LPS) 와같은염증성물질에의해활성화된대식세포가염증성사이토카인의주요매개체를대량으로생산하는것으로알려져있다 [17]. 이러한염증반응은감염으로부터몸을보호해주는역할을하지만과도한염증반응은피부노화및주름에직접적인영향을주게되며, 자가면역질환의주요메커니즘과대부분의염증성질병의공통적인특징을가지고있다. 따라서염증반응을억제하는것이질환을치료하는중요한열쇠가되고있다 [18]. NOS 는 NG-monomethyl-L-arginine (NGMMA) 과같은기질유사체에의해경쟁적으로억제될수있으며 cnos (constitutive nitric oxide synthase) 와 inos 로나눌수있다. cnos 는칼슘과칼모듈린 (calmodulin) 이의존성으로지속적으로 NO 를분비해항상성을유지하고, inos 는 LPS 와염증성사이토카인의자극으로인해장시간대량의 NO 를생성한다. 이때생성된 NO 는염증반응을심화시키기때문에 NO 생성저해 능을측정하는것이대표적인항염증연구에사용되고있다. 땅콩새싹추출물을 25, 50, 100 μg/ml 농도별로 LPS 로자극받은 RAW 264.7 세포에첨가하여 NO 생성저해를관찰하였으며, 농도의존적으로 NO 생성이감소되는것을볼수있다 (Fig. 4). 이러한결과는땅콩새싹의주성분으로알려진 resveratrol 이폴리페놀계파이토알렉신 (phytoalexins) 의작용으로항염증작용이우수한것으로알려져있고 [19], 특히포도, 땅콩의열매에서발견되는 resveratrol 은대식세포, 지방세포와기질혈관세포에서항염증효과를나타내고있는기존연구와유사하다 [20]. 따라서땅콩새싹추출물에포함되어있는다수의성분중 resveratrol 의작용에의해 NO 의생성을억제한것으로사료되며 NO 에의한염증반응으로나타나는피부노화및주름생성을지연시킬수있는화장품소재로써의가능성이있는것으로사료된다. 3.5. Tyrosinase 활성땅콩새싹은폴리페놀화합물인 resveratrol 을함유하고있는대표적인식물이다 [9]. 이미많은연구에서 resveratrol 의항멜라닌생성에대한효과를입증하였으며 [21], 특히 tyrosinase-related protein (TPR-1, TPR-2) 그리고 microphthalmiaassociated transcription factor(mitf) 에관여하는 tyrosinase 활성을강하게억제하는것으로보고되었다 [22]. 표피의과색소침착은과도한멜라닌합성에의해발생하며 tyrosinase 는멜라닌생성의결정적인역할을하는효소로써 L-DOPA 에의해멜라닌을합성한다 [23]. 따라서티로시나제억제제는피부색소침착을미연에예방할수있는피부미백화장품소재로써사용이가능하다. 땅콩새싹추출물이 tyrosinase 활성에어떠한영향을미치는지알아보기위해 L-DOPA 를이용하여정제한 tyrosinase 활성을측정하였다. 대조약물로사용한알부틴은대표적인 tyrosinase 억제로알려져있으며 100 μg/ml 에서 35% 효소활성을억제하였으며, 땅콩새싹추출물은각각 6%, 15%, 23% 로농도의존적으로 tyrosinase 활성을억제하였다 (Fig. 5). 이러한결과는땅콩새싹식물에함유되

18 Korean Society for Biotechnology and Bioengineering Journal 31(1): 14-19 (2016) Fig. 5. Effect of peanut sprout extract on purified tyrosinase activity in mushroom tyrosinase. Results are means±sd from 4 separate experiments. *p<0.05: Significantly different from arbutin. 어있으며, tyrosinase 활성을억제하는것으로입증된 resveratrol 및다량의폴리페놀화합물에의한것으로사료되며, 땅콩새싹추출물을활용한 tyrosinase 억제제로써피부미백제개발이가능할것으로사료된다. Fig. 6. Inhibitory activity of peanut sprout extract on melanin synthesis in α-msh stimulated in B16F10 melanin cells. Results are means±sd from 4 separate experiments. *p<0.05: Significantly different from arbutin. 3.6. 멜라닌생성저해멜라닌은표피의기저층에서멜라닌세포에의해생성되며피부의색을결정짓는중요한역할을한다. 멜라닌을형성하는멜라닌세포는세포질내에서멜라노좀을형성하며, 멜라노좀은각질형성세포의각화현상에의해색소가과립형태로운반된다 [24]. 또한멜라닌은자외선으로부터피부를보호하는기능을갖고있지만비정상적인생성은피부에과색소침착을유발하게된다 [25]. 이렇듯멜라닌합성은효소반응과화학적반응에의해복잡하게생합성되는데, 피부가자외선에노출되면 α-msh 를분비하는각질형성세포가자극을받아멜라닌생성을유도한다. 최근연구에서 resveratrol 이멜라닌생성을억제하는결과가나타났으며 [26], resveratrol 을함유하고있는땅콩새싹식물에대한연구는미미한실정이다. 따라서 α-msh 로유도된 B16F10 melanin 세포에서땅콩새싹추출물이멜라닌생성에어떠한영향을미치는지관찰하였다. 대조군으로사용한알부틴 100 μg/ml 에서 58% 멜라닌생성을억제하였으며, 땅콩새싹추출물은 25 μg/ml 농도에서는이렇다할결과를나타내지않았으나 50, 100 μg/ ml 에서는농도의존적으로멜라닌생성을억제하는경향을나타내었으며, 최고농도인 100 μg/ml 에서 26% 억제하는것으로나타났다 (Fig. 6). 이러한결과는멜라닌생성에관여하는 tyrosinase 활성억제효과와유사한결과를나타내었으며, 땅콩새싹추출물이멜라닌세포에도직접적으로영향을미치는것을알수있다. 또한 Lee 등 [22] 의연구에서밝힌 resveratrol 의멜라닌생성저해효과를뒷받침할수있으며땅콩새싹추출물에함유되어있는다량의페놀화합물을비롯한 resveratrol 의작용에의한것으로판단되어진다. 따라서땅콩새싹추출물이천연물을이용한피부미백화장품소재로써의개발가능성이있는것으로사료된다. 4. CONCLUSION 본연구는폴리페놀화합물을포함하고있고특히항산화및항염, tyrosinase 활성억제에효능이있는것으로알려진 resveratrol 성분을포함하고있는땅콩새싹식물을에탄올추출하여항산화, 항염및미백작용에미치는영향을관찰함으로써추후항노화, 미백과관련된기능성화장품의원료로써의활용방안을모색하고자하였다. 연구의결과는다음과같다. B16F10 melanin 세포를이용하여세포독성을실험한결과최고농도인 100 μg/ml 에 98% 세포생존율을나타냄으로써안전성에있어효과적인물질이라사료된다. 땅콩새싹추출물의자체적인항산화작용을알아보기위하여 DPPH radical 소거활성을측정한결과땅콩새싹추출물 25 μg/ml 에서는미미한소거활성을나타내었으나 50 μg/ml 에서는 15%, 100 μg/ml 에서는 28% 항산화활성을나타내었다. DCF-DA 형광물질을이용하여세포내에서생성되는자유라디칼을측정한결과, 농도의존적으로억제하였으며특히최고농도인 100 μg/ml 에서 31% 로강하게억제하였다. 대표적인염증매개물질인 LPS 를이용하여 NO 생성을관찰한결과, 농도의존적으로 NO 생성을억제하였다. 땅콩새싹추출물이멜라닌합성과정에관여하는 tyrosinase 활성에어떠한영향을미치는지알아보기위해정제한 tyrosinase 활성을관찰한결과땅콩새싹추출물에서농도의존적으로효소활성을억제하였으며최고농도인 100 μg/ml 에서는 23% 억제하였다. 땅콩새싹추출물의멜라닌세포에의한멜라닌생성을관찰한결과농도의존적으로멜라닌생성을억제하였다. 이상의결과를종합해볼때땅콩새싹추출물은항산화및항염, 미백작용이우수하므로기능성화장품소재개발에있어서효과적으로활용이가능할것으로사료된다.

항산화및미백화장품원료로서의땅콩새싹추출물에관한연구 19 REFERENCES 1. Song, J. S. and Y. A. Kim (2009) A study on the future market prospect of domestic functional cosmetics industry focused on the cosmeceutical Products. J. Korean Soc. Design Cult. 15: 258-271. 2. Kang, H. I., S. J. Kim, K. W. Park, J. S. Kang, and K. I. Seo (2010) Antioxidative effects of peanut sprout extracts. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 39: 941-946. 3. Lee, M. J., Y. K. Cheong, H. S. Kim, K. H. Park, H. S. Doo, and D. Y. Suh (2003) trans-resveratrol content of varieties and growth period in peanut. J. Korean Crop. Sci. 48: 429-433. 4. Kim, Y. A., S. Y. Lim, S. H. Lee, K. Y. Park, W. H. Lee, and Y. H. Choi (2004) Induction of Cdk inhibitor p21 and inhibition of cyclooxygenase-2 by resveratrol in human lung carcinoma A549 cells. J. Life Sci. 14: 800-808. 5. Bhat, K. P. and J. M. Pezzuto (2002) Cancer chemopreventive activity or resveratrol. Ann. NY Acad. Sci. 957: 210-229. 6. Filip, V., M. Plockova, J. Smidrkal, Z. Spickova, K. Melzoch, and S. Schmidt (2003) Resveratrol and its antioxidant and antimicrobial effectiveness. Food Chem. 83: 585-593. 7. Sharma, S., M. Anjaneyulu, S. K. Kulkarni, and K. Chopra (2006) Resveratrol, a polyphenolic phytoalexinm attenuates diabetic nephropathy in rats. Pharmacology 76: 69-75. 8. Azuma, K., M. Nakayama, M. Koshica, K. Lppoushi, Y. Yamaguchi, K. Kohata, Y. Yamaguchi, H. Ito, and H. Higashio (1999) Phenolic antioxidants from the leaves of Corchorus olitorius L. J. Agric. Food Chem. 47: 3963-3966. 9. Jo, N. R., C. I. Park, C. W. Park, D. H. Shin, Y. C. Hwang, Y. H. Kim, and S. N. Park (2012) Cellular protective effects of peanut sprout root extracts. Chem. Eng. 23: 183-189. 10. Kang, Y. H., Y. K. Park, and G. D. Lee (1996) The nitrite scavenging and electron donating ability of phenolic compounds. Korean J. Food Sci. Technol. 28: 624-630. 11. Ames, B. N., M. K. Shingenaga, and T. M. Hagen (1993) Oxidants, antioxidants, and the degenerative diseases of aging. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 7915-7922. 12. Beckman, K. B. and B. N. Ames (1979) The free radical theory of aging matures. Physiol. Rev. 59: 527-605. 13. Bourji, K., A. Meyer, E. Chatelus, J. Pincemail, E. Pigatto, J. O. Defraigne, F. Singh, C. Charlier, B. Geny, J. E. Gottenberg, L. Punzi, F. Cozzi, and J. Sibilia (2015) High reactive oxygen species in fibrotic and nonfibrotic skin of patients with diffuse cutaneous systemic sclerosis. Free Radic. Biol. Med. 87: 282-289. 14. Hong, S. H., H. J. Lee, E. J. Sohn, H. S. Ko, B. S. Shim, K. S. Ahn, and S. H. Kim (2013) Anti-nephrolithic potential of resveratrol via inhibition of ROS, MCP-1, hyaluronan and osteopontin in vitro and in vivo. Pharmacol. Rep. 65: 970-979. 15. Lowenstein, C. J. and S. H. Snyder (1992) Nitric oxide, a novel biologic messenger. Cell 70: 705-707. 16. Lee, S. C., D. H. Kim, and H. W. Lee (1998) Roles of nitric oxide in the ultraviolet B-induced inflammatory response of the mouse skin. Korean J. Invest. Dermatol. 5: 127-132. 17. Hwang, S. M., C. H. Chen, S. S. Chen, and J. C. Chen (2000) Chitinous materials inhibit nitric oxide production by activated RAW 264.7 macrophages. Biochem. Biophys. Res. Commun. 271: 229-233. 18. Zhu X, Q. Liu, M. Wang, M. Liang, X. Yang, X. Xu, H. Zou, and J. Qiu (2011) Activation of Sirt1 by resveratrol inhibits TNF-α induced inflammation in fibroblasts. PLoS One 6: e27081. 19. Zhang, X., A. Jiang, B. Qi, Z. Ma, Y. Xiong, J. Dou, and J. Wang (2015) Resveratrol protects against Helicobacter pylori-associated gastritis by combating oxidative stress. Int. J. Mol. Sci. 16: 27757-27769. 20. Kjær, T. N., K. Thorsen, N. Jessen, K. Stenderup, and S. B. Pedersen (2015) Resveratrol ameliorates imiquimod-induced psoriasislike skin inflammation in mice. PLoS One 10: e0126599. 21. Ohguchi, K., T. Tanaka, T. Ito, M. Iinuma, K. Matsumoto, Y. Akao Y. Nozawa (2003) Inhibitory effects of resveratrol derivatives from dipterocarpaceae plants on tyrosinase activity. Biosci. Biotechnol. Biochem. 67: 1587-1589. 22. Lee, T. H., J. O. Seo, S. H. Baek, and S. Y. Kim (2014) Inhibitory effects of resveratrol on melanin synthesis in ultraviolet B-induced pigmentation in guinea pig skin. Biomol. Ther. 22: 35-40. 23. Peng, L. H., S. Liu, S. Y. Xu, L. Chen, Y. H. Shan, W. Wei, W. Q. Liang, and J. Q. Gao (2013) Inhibitory effects of salidroside and paeonol on tyrosinase activity and melanin synthesis in mouse B16F10 melanoma cells and ultraviolet B-induced pigmentation in guinea pig skin. Phytomedicine 20: 1082-1087. 24. Riley, P. A. (1997) Melanin. Int. J. Biochem. Cell Biol. 29: 1235-1239. 25. Rees, J. L. (2003) Genetics of hair and skin color. Annu. Rev. Genet. 37: 67-90. 26. Liu Q., C. T. Kim, Y. H. Jo, S. B. Kim, B. Y. Hwang, and M. K. Lee (2015) Synthesis and biological evaluation of resveratrol derivatives as melanogenesis inhibitors. Molecules 20: 16933-16945.