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길호 내
4 years ago
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1 KISEP Original rticle J Rhinol (), 7 은행잎추출물 (EGb 76) 에의한 IL-β 유도 유전자발현의억제 연세대학교의과대학이비인후과학교실, 기도점액연구소, 제주대학교의과대학이비인후과학교실 장정현 김정홍 이근완 조창일 전주현 김경수, Suppression of IL-β-induced Gene Expression by Ginkgo biloba Extract(EGb 76) in Human irway Epithelial ells Jung Hyun hang, MD, Jeong Hong Kim, MD, Kun Wayn Lee, MD, hang Il ho, MD, Ju Hyun hun, MD and Kyung-Su Kim, MD, Department of Otorhinolaryngology and The irway Mucus Research Institute, Yonsei University ollege of Medicine, Seoul; and Department of Otorhinolaryngology, heju University ollege of Medicine, Jeju, Korea STRT ackground and Objectives:The purpose of this study is to investigate whether Ginkgo biloba extract (EGb 76) can suppress IL-β-induced gene expression in NI-H9 human airway epithelial cells and to discover what its possible mechanism is. Materials and Methods:NI-H9 human pulmonary mucoepidermoid carcinoma cell line was used. mrn and protein were measured using the RT-PR and Western blot analysis. The activation of mitogen activated protein kinases (MPKs) were determined by means of the Western blot analysis. Results: was induced by treating the NI-H9 cells with ng/ml of IL-β for hours. pre-treatment of μg/ml of EGb 76 significantly suppressed the IL-β induced expression. The inhibition of gene expression by EGb 76 was noted to be suppressed via both the extracellular signal-regulated kinase (ERK) and the p8 MPK pathways in a kinase-specific inhibitor study. onclusion:egb 76 suppresses IL-β-induced gene expression in the human airway epithelial cells. Therefore, it may be considered as a possible anti-hypersecretory agent. KEY WORDS:Ginkgo biloba extract 76 Interleukin-β Mucins Epithelial cells. 서 은행잎추출물중 EGb 76 은아세톤과물을이용한추출과정, 지방친화성분의제거, 활성물질강화, 폴리페놀성분제거등의추출과정을거쳐만들어진다. ) EGb 76 의임상적이용은 965 년 Dr. Willmar Schwabe 가이를이용하여순환장애, 뇌혈관질환등의치료에효과를보았다고발표한이후뇌및말초혈관의혈류량저하, 감각신경질환, 기억력및 론 본논문은 6 학년도연세대학교의과대학교수연구비 (6-6) 지원에의해이루어졌음. 논문접수일 :7 년 월 5 일 / 심사완료일 :7 년 월 5 일교신저자 : 김경수, 5-7 서울강남구도곡동 6-9 연세대학교의과대학이비인후과학교실전화 :() 9-6 전송 :() ydrhinol@yumc.yonsei.ac.kr 인지능저하등의질환에대해효과가있는것으로알려져있다. )) 또한최근연구에의하면항산화기능, 신생혈관억제기능, 세포독작용, OX- 및 inos 의억제작용, 유전자조절기능등의작용으로세포증식억제효과도보인다고한다. )) EGb 76은폐질환에임상효과를보이는데, 그구성성분의하나인 ginkgolide 가천식에효과가있다고한다. 가능한기전으로천식의유발인자인 platelet-activating factor 를억제하는작용과그수용체의억제작용, T 림프구의억제작용등이밝혀져있다. 5)6) 비염을비롯한급, 만성부비동염, 기관지염과기관지천식같은염증성기도질환의경우, 과분비된점액은기도점막의점액섬모운동능을감소시키고이차적인세균감염을유발하여다양한호흡기질환을초래하게된다. 이때점액의과분비는여러종류의사이토카인이나펩타이드, 염증매개 - 9 -

2 5 / J Rhinol (), 7 물질이직 간접적으로관여하여 나 MU8과같은점액유전자의발현을상향조절시켜일어나게되는데, 대표적인염증유발사이토카인인 IL-β 가기도점막상피세포에서과다분비되는경우에기도염증반응이더욱촉발되는것으로알려져있다. 7)8) 또한최근사람정상코점막상피세포및사람폐점액상피양암종세포주 (NI-H9) 에대한연구에서, IL-β에의해유도되는 의과발현이 extracellular signal-regulated kinase(erk)/p8 mitogen activated kinase(mpk), mitogen- and stressactivated protein kinase (MSK), cyclic-mp response element binding protein(re) 신호전달체계의순차적인활성화에의해기도상피세포에서일어나는것임이밝혀진후점액과분비조절을통한염증성기도질환의치료전략에새로운관점을제공하게되었다. 9) 현재까지는사람호흡기상피세포에서점액과분비조절물질로서 dexamethasone 혹은 budesonide 가점액생산및점액유전자의발현을억제한다는연구결과가있으나, )) EGb 76과같은천연추출물성분에의한기도점액과분비조절에대한연구는미흡한실정이다. 이에본연구의목적으로첫째, 폐점액상피양암종세포주인 NI-H9 세포에서 IL-β 에의해 mrn 가유도되는지알아보고둘째, IL-β 유도 mrn 의발현이 EGb 76 에의해억제되는지확인하고셋째, EGb 76 에의한 mrn 발현억제의작용기전을알아보고자하였다. 재료및방법폐점액상피양암종세포주배양 사람호흡기상피세포인사람폐점액상피양암종세포주 (human pulmonary mucoepidermoid carcinoma cell line) 인 NI-H9 세포는 merican Type ulture ollection (Rockville, MD, US) 에서구입하였다. 이세포주는 95% 의공기와 5% 의이산화탄소, 가습화된환경에서 7 의온도로 % fetal bovine serum 과 mm L-glutamine, penicillin ( μg/ml), streptomycin( μg/ml) 이포함된 RPMI- 6 배지 (Gibco RL, Grand Island, NY, US) 에서배양하였다. 분주후밤새배양한다음세포를 시간동안.5% fetal bovine serum 을포함하는 RPMI-6 배지에서배양한후실험하였다. p8 MPK 에대한특이억제제인 S58 등은 albiochem iochemicals(san Diego,, US) 에서, IL-β는 R &D Systems(Minneapolis, MN, US) 에서구입하였고, antiphospho-p/ MPK(Thr /Tyr ) 항체, anti-phospho-p8 MP kinase(thr 8 /Tyr 8 ) 항체, anti-phospho- SPK/c-jun NH-terminal kinase(jnk)(thr 8 /Tyr 85 ) 항체등은 ell Signaling(everly, M, US) 에서구입하였다. mrn 의역전사- 중합효소연쇄반응 (reverse transcriptase-polymerase chain reaction) 분석전체 RN는 Tri-Reagent(Molecular Research enter, incinnati, OH, US) 를이용하여각조건으로배양된세포에서얻었으며전체 RN 에서 cdn 로의역전사는 μg/ μl 의전체 RN 를 random hexanucleotide primer 와 Moloney murine leukemia virus 역전사효소 (Gibco-RL) 를이용하였고, 중합효소연쇄반응은 Perkin-Elmer etus DN Thermal ycler(perkin-elmer, Norwalk, T, US) 를이용하였다. 중합효소연쇄반응에사용한 oligonucleotide 시발체 (primer) 는 의 Genank TM sequence(genank TM accession number J) 에근거하여 5 primer G- TTTTGGGTG; primer GTTTT- TGTGTT 를사용하여 7 bp를증폭하였다. 각반응의대조군으로사용된 β -microglobulin(β M) 의 oligonucleotide primer 는 lontech Laboratories(Palo lto,, US; 5 bp fragment) 에서구입하였다. 의중합효소연쇄반응은 95 에서 초간변성 (denaturation) 과정과 6 에서 6초간결합 (annealing) 반응, 7 에서 6초간연장 (extension) 반응을 5회진행하였고증폭된 PR 산물은 % 한천겔에서전기영동하여 ethidium bromide 용액으로염색하여밴드를관찰하였고, 이를 sequencing 하여염기서열을확인하였다. 확인된밴드의세기는 Scion Image(Scion o., Frederick, MD, US) 를이용하여강도를구한후해당하는 β M의강도로나눈다음, 이수치들중대조군에서의수치를 로하여각실험의수치를비율로나타내어비교하였다. 실험은 회이상시행하여평균과표준편차를구하였으며결과에대한차이는반복측정자료의분산분석법 (repeated measures NOV test) 을이용하였고다중비교 (multiple comparisons) 를추가하여유의수준 p<.5 를유의한것으로하였다. 재료 EGb 76은유유산업 (Seoul, Korea) 에서기증받아사용하였다. ERK 에대한특이억제제 (specific inhibitor) 인 PD9859, Western blot 분석배양된 NI-H9 세포주에대한각실험이후 radioimmunoprecipitation assay buffer(% NP-,.5% sodium

3 장정현등 : 은행잎추출물에의한 억제 / 5 deoxycholate,.% SDS) 를이용하여 cell lysates 를만든다음, 단백질의양을 bovine serum albumin 을이용한 bicinchronic acid protein assay 로측정한후단백질 μg 씩을각 lane 에넣어전기영동을시행하였다. 전기영동은 8% SDS-polyacrylamide gel 을이용하였고, 전기영동후 nitrocellulose 막에전이시킨다음이막을.5% Tween- 이함유된 Tris-buffered saline(tst) 로희석한다음 % nonfat dry milk 로 에서 시간반응시킨후 p-erk (:,), p-p8 MPK(:,), p-jnk(:,) 항체를각각실온에서 시간동안반응시켰다. 또한 단백의발현은 항체 (Santa ruz iotechnology, Santa ruz, )(:,) 를첨가하여반응시켰다. 이후 TST 로세척한다음 :5,으로희석한 horseredish peroxidase 가결합된이차항체 (mersham Pharmacia iotech, Piscataway, NJ, US) 로 시간동안처리하고수차례의세척을시행한후 enhanced chemiluminescence 와자기방사기록법 (autoradiography) 을이용하여띠 (band) 를확인하였다. 한편 nitrocellulose 막을 deprobing 한다음같은방법을이용하여 항체 (Santa ruz iotechnology) 와반응을시켰다. 확인된밴드의세기는 Scion Image(Scion o., Frederick, MD, US) 를이용하여강도를구한후해당하는 의강도로나눈다음, 이수치들중대조군에서의수치를 로하여각실험의수치를비율로나타내어비교하였다. 실험은 회이상시행하여평균과표준편차를구하였으며결과에대한차이는반복측정자료의분산분석법 (repeated measures NOV test) 을이용하였고다중비교 (multiple comparisons) 를추가하여유의수준 p<.5 를유의한것으로하였다. 세포증식분석 NI-H9 세포주를 well 당, 개씩분주하여 96 well plate 에서 6시간동안배양한다음각조건으로실험후세포증식분석을시행하였다. 분석은 ell Titer 96 Q ueous One Solution Proliferation ssay Kit(Promega Inc., Madison, WI, US) 를사용하였다. 방법으로 kit 에포함된 tetrazolium 합성물 ml와 phenazine ethosulfate μl 를섞은후 well당 μl 의혼합용액을첨가하였다. 이후 시간동안 7, 5% O 의환경에서 96 well plate 를배양한후 spectrophotometer(9 nm 파장 ) 로흡광도 (optical density) 를측정하였다. 실험은 회이상시행하여평균과표준편차를구하였으며결과에대한차이는반복측정자료의분산분석법 (repeated measures NOV test) 을이용하였고다중비교 (multiple comparisons) 를추가하여유의수준 p<.5 를유의한것으로하였다. 결 사람호흡기상피세포에서 IL-β에의한 유전자의발현 NI-H9 세포주에,, ng/ml 의 IL-β 를 시간동안각각첨가배양하여 유전자의발현을알아보았다. IL-β 를첨가하지않은대조군의유전자발현과 과 (IL-β, ng/ml)...9 (ng/ml) 6 8 (hours) D 6 8 (Hours) Fig.. Effect of IL-β on gene expression in NI-H9 cells. :onfluent cells were treated with various concentrations of IL-β for hours, and mrn levels of were determined by RT-PR. expression was normalized to the level to expression and is reported as a ratio of to. : of mrn according to the concentration of IL-β. :onfluent cells were stimulated for indicated times with ng/ml IL-β, and mrn levels of were determined as the same method. D: of mrn according to the incubation time with IL-β. The figures shown are representative of three independent experiments. :p<.5 compared with the control.

4 5 / J Rhinol (), 7 비교한상대적비율은,, ng/ml 의 IL-β 를첨가시각각.±.,.±.,.9±.으로나와 ng/ml 이상의농도로 IL-β 를투여시에 유전자의발현이유의하게증가하였고 (p<.5), ng/ml 농도의 IL-β에서가장발현이증가하였다 (Fig., ). 그리고 ng/ml IL-β를시간대별 ( 시간 ) 로첨가배양한후 유전자의발현정도를알아보았다. 대조군인 시간과비교한 6,,, 8시간의유전자발현의상대적비율은각각.5±.,.6±.,.8±..8±.으로나와 시간동안첨가배양한경우 유전자의발현이최대로나타났으며 8시간동안첨가배양한경우발현이감소하였다 (p<.5)(fig., D). 이러한결과로이후실험은 IL-β 를 ng/ml 농도로 시간동안첨가배양하여시행하였다. EGb 76 에의한 유전자발현억제와세포생존율 NI-H9 세포주에 ng/ml IL-β를첨가하기 시간전에, 5,,, μg/ml 의농도로 EGb 76 을투여한후 IL-β 를첨가배양하였다. IL-β 와 EGb 76 을모두첨가하지않은대조군과비교한상대적비율은각각, 5,,, μg/ml 순으로.±.,.6±.5,.±.,.±.,.±. 였다. 결과상 EGb 76 μg/ml의농도부터 유전자의발현이 EGb 76 을첨가하지않은군에비해유의하게억제되었다 (p<.5)(fig., ). 이러한 억제작용이 EGb 76의독작용인가를보기위해세포증식억제정도를관찰하였다. EGb 76 을첨가하지않은대조군과비교한상대적인세포증식억제율은 5,,, μg/ml 에서각각.9±.8,.86±.9,.7±. EGb 76 (μg/ml) ontrol Relative ratio of cell proliferation.5 ontrol 5 EGb 76 (μg/ml). 5 EGb 76 (μg/ml) Fig.. Suppression of gene expression by EGb 76. :NI-H9 cells were pretreated with, 5,,, and μg/ml EGb 76 for hour and then treated with ng/ml IL-β for hours. RT-PR for mrn expression was performed on each group. ompared with the EGb 76-untreated cells, the expression of mrn is significantly suppressed from the treatment with μg/ml EGb 76. : of mrn treated with the various concentration of EGb 76. :The percentage of living cells through cell proliferation assay shows no differences with the EGb 76-untreated cells. The figures shown are representative of three independent experiments. :p<.5 compared with EGb 76-untreated cells. ontrol IL-β only EGb+IL-β.. ontrol IL-β only EGb+IL-β 5 ontrol IL-β only EGb+IL-β.8. KDa D ontrol IL-β only EGb+IL-β Fig.. Suppression of gene and protein expression by EGb 76. :NI-H9 cells were pretreated with μg/ml EGb 76 before hour and treated with ng/ml IL-β(EGb+IL-β) for hours. The expression of mrn is noted as.-fold increase by IL-β, but this increase is significantly inhibited to the level of control group by the pretreatment with EGb 76. :Fold increase of mrn by the treatment with IL-β only and EGb 76+IL-β. :Western blot analysis for protein expression was performed on each group and was employed as the control. The expression of protein ( kda) induced by IL-β is suppressed by the pretreatment with EGb 76. D: of protein by the treatment with IL-β only and EGb 76+IL-β. The figures shown are representative of three independent experiments. :p<.5 compared with IL-βtreated cells.

5 장정현등 : 은행잎추출물에의한 억제 / 5.,.86±.,.5±.5 로측정되어각농도에서유의한세포고사는관찰되지않았다 (Fig. ). EGb 76에의한 유전자및단백발현억제 NI-H9 세포주에 IL-β 첨가배양 시간전에 μg/ ml의 EGb 76 을전처치한다음 ng/ml 의 IL-β 를투여하였다. 유전자의발현은 IL-β 와 EGb 76 을모두첨가하지않은대조군과비교하여 IL-β 에의해.±.5 배증가하였으나, EGb 76 을전처치시에는.±. 배로유의하게발현이억제되었다 (p<.5)(fig., ). Western blot 분석상 IL-β 에의해 단백발현이.8±.6 배유도되나 EGb 76 을전처치한경우에있어서는 단백발현이.±. 배가되어대조군수준으로억제됨을확인하였다 (Fig., D). ERK와 p8 MPK 신호전달계에의한 유전자발현억제 ng/ml IL-β에의해 MPK 신호계중어느 kinase 가활성화되는지를알아보기위해 ERK, p8 MPK, JNK 활성화에대한특이항체 (phospho-specific antibody) 를이용하여 Western blot 분석을시행하였다. 활성화된 ERK 와 p8 MPK 는 IL-β 투여후 분에최대로발현되었으며투여 분후에는인산화가감소되는양상을보였다 (Fig. ). 그러나 JNK 의활성은관찰되지않았다 (data not shown). μg/ml 의 EGb 76 을 시간전에전처치하고 IL-β 를첨가배양한 분후에 p-erk 와 p-p8 MPK 의발현양상을살펴본결과, IL-β 를단독처치한군에비해 p-erk 와 p- p8 MPK 의발현이대조군수준으로억제됨을알수있었다 (Fig. ). 이러한결과로 EGb 76 이 IL-β 에의한 ERK 와 p8 MPK 의활성화를억제하는것을알수있었다. ERK와 p8 MPK 특이억제제에의한 발현억제 ERK 활성화에대한특이억제제인 PD9859 와 p8 MPK 활성화에대한특이억제제인 S58 을각각 μm 의농도로 시간전에전처치한다음 ng/ml 의 IL-β 를 시간동안첨가배양하여 p-erk 와 p-p8 이억제되는가를알아보았다. IL-β 만을처치시 p-erk 와 p-p8 MPK 가모두발현되었다. 그러나 PD9859 로전처치시 p-erk 의발현은억제되지만 p-p8 은변화가없었으며, 또한 S58 으로전처치시 p-erk 는변화가없었으나 p-p8 은발현이억제되었다 (Fig. 5). 이러한결과로각억제제가 ERK 와 p8 의활성을특이하게억제하는것을확인하였다. 다음단계로 ERK와 p8 MPK 경로가 EGb 76에의한 p-erk ERK 5 6 (min) p-erk ERK ontrol IL-β EGb+IL-β p-p8 p-p8 Fig.. Mechanism of gene suppression by EGb 76. :NI-H9 cells were stimulated for the indicated times with ng/ml of IL-β. The phosphorylation of ERK and p8 MPK was detected by Western immunoblot analysis using phopho-specific antibodies. ERK is a positive internal control. The phosphorylation of ERK and p8 MPK is maximally activated at minutes and this effect decreases after minutes. :NI-H9 cells were pretreated with μg/ml of EGb 76 before hour and treated with ng/ml of IL-β(EGb+IL-β). fter minutes incubation, the activation of p-erk and p-p8 MPK is strongly inhibited in EGb 76+IL-β cells compared with IL-β-treated cells. The figures shown are representative of three independent experiments. ontrol IL-β PD+IL-β S+IL-β p-erk ERK p-p8 ontrol IL-β PD+IL-β S+IL-β... ontrol IL-β PD+IL-β S+IL-β Fig. 5. Suppression of gene expression by MPK inhibitors. :NI-H9 cells were separately pretreated for hour with μm PD9859 or μm S58 and then stimulated for hours with ng/ml IL-β. The Western blot assays show that PD9859 (PD+IL-β) and S58 (S+IL-β) clearly inhibit p-erk and p-p8 MPK respectively. :The inhibition of either ERK or p8 MPK pathway with PD9859 or S58 significantly suppresses mrn expression. : of mrn by MPK inhibitors. The figures shown are representative of three independent experiments. :p<.5 compared with IL-β-treated cells.

6 5 / J Rhinol (), 7 발현억제에관여함을확인하기위해같은방법으로실험한후 유전자의발현을보았다. IL-β 와 ERK 나 p8 특이억제제를첨가하지않은대조군과비교한상대적비율은 IL-β 만을첨가배양한경우.±.5, PD9859 를전처치한경우.±., S58 을전처치한경우.±. 로나와, ERK나 p8 MPK 신호전달경로를억제함으로서 IL-β 에의한 발현이유의하게억제되었다 (p<.5)(fig. 5, ). 고찰 기도염증반응에서점액의과분비는부비동염, 비염, 기관지염, 혹은천식등과같은질환의주된병태생리로작용하므로여러사이토카인과점액유전자의상호관련성과신호전달기전에대한연구를통해점액분비를조절할수있는물질의개발이염증성기도질환의발생을억제하고개선하는데중요하다. 이러한취지로본연구에서는호흡기상피세포에서점액유전자의과발현과점액분비증가를유발하는염증성전구사이토카인인 IL-β 에의해유도된 유전자가 EGb 76에의해발현이감소되는가를알아보는것에주안점을두었다. 실험결과배양된 NI-H9 세포주에서 ng/ml 농도의 IL-β 로 시간동안첨가배양시 유전자의발현이유의하게증가하였으며이때 EGb 76 을 μg/ ml의농도로전처치시 유전자의발현이유의하게억제되었으며이러한발현억제는농도의존성이었다. 또한 단백의발현도유의하게억제되었다. 이결과는 dexametasone 에의한 MU와 점액유전자의발현억제나 budesonide 에의한 MU/5 점액유전자와점액단백의생성억제와일치하는결과였다. -) 이러한결과를토대로 EGb 76이점액과분비조절기능을갖고있는물질중하나라고간주할수있으며추후점액과분비조절능력을지닌것으로알려진물질들에대한상호비교연구를통해더욱효과적이고안전한약제를선택할수있을것으로생각한다. 한편, 약제의개발에서중요한점이안정성이다. 본실험에서 유전자와단백의발현을억제하는최소농도인 μg/ml 에서세포증식억제를본결과세포증식억제가일어나지않는것을확인하였다. 그리고안정성에대한백서연구에서 EGb 76 을구강으로투여할경우급성독성을나타내는 LD 5 은 7.7 g/kg 였고, 정맥내로주사할경우 LD 5 은. g/kg 였으며, 복강내로주사할경우 LD 5 은.9 g/kg 였다. ) 본실험에서사용한용량을체중이 7 kg인사 람의예로보면 mg/kg 을혈액내로투여한것이므로백서에서정맥내투여량과비교시약 / 의양으로매우안전하다하겠다. 본실험과같은세포실험은급성독작용에대한것이므로임상적으로사용할경우만성독작용이더욱중요하다하겠다. 쥐와개에매일 ~5 mg/kg 의용량으로 6~7 주동안투여시장기에부작용이보이지않았고간과신장에도부작용이관찰되지않았다. ) EGb 76을장기간복용시신경계, 선조직과눈등에최대 배정도가축척된다는보고를감안할경우, ) 본실험에서사용한용량은최대 mg/kg 의용량이정맥내로투여된것과같으므로상기한동물실험에서의결과와비교시장기간투여에도안전한용량이라고생각한다. MPK 는점액의생성과상피세포의증식및분화, 세포고사와관련된신호전달경로에서중요한효소단백으로서호흡기상피세포에서 IL-β 의자극에의해세포질내 ERK와 p8 MPK 가활성화되고핵내 MSK 과 RE 신호전달경로가활성화되면서 유전자와그단백의합성을상향조절한다고하였다. 5) 본연구에서도 IL-β 투여후 p- JNK 의발현은관찰되지않았으며 (data not shown), IL-β 투여 분경과후에 p-erk 와 p-p8 MPK 의발현이최대로나타났으며이에근거하여 EGb 76 을전처치한후 IL- β투여 분후 ERK 와 p8 MPK 의활성을살펴본결과두활성단백의발현이감소하여이들이 EGb 76에의한 발현에관여함을알수있었다. 또한 ERK 와 p8 MPK 에대한특이억제제를이용하여 유전자발현양상을살펴본결과에서도유의하게 발현이억제되어 ERK 와 p8 MPK 가 EGb 76 에의한 발현에서중요한신호전달경로임을확인할수있었다. 한편호흡기상피세포에서 IL-β에의한 유전자의발현에있어서 ERK와 p8 MPK 경로외에상위신호전달경로로 PK(protein kinase ) 와하위신호전달경로로 OX- 와 PGE 가관여한다는보고가있으므로, 6) 향후이들신호전달물질과의연관성을비롯하여다른경로에의한 MU- 5 발현억제의가능성에도추가연구가필요할것으로생각한다. 결론 본연구로사람호흡기상피세포인 NI-H9 세포주에서 IL-β 에의해유도된 유전자와단백의발현이 EGb 76 의투여에의해유의하게억제되며, ERK 와 p8 MPK 가 EGb 76의신호전달계로관여함을알수있었다. 이러한결과를바탕으로 EGb 76 이기도점액과분비조절

7 장정현등 : 은행잎추출물에의한 억제 / 55 에대한치료제로서의가능성을보인다고생각한다. 중심단어 : 은행잎추출물. REFERENES ) Smith JV, Luo Y. Studies on molecular mechanism of Ginkgo biloba extract. ppl Microbiol iotechnol ;6():65-7. ) Michel PF. The doyen of trees: the Ginkgo biloba. Presse Med 986; 5():5-. ) DeFeudis FV. Ginkgo biloba extract (EGb 76): Pharmacological activities and clinical applications. Paris: Elsevier;99. p.-8. ) Mutoh M, Takahashi M, Fukuda K, Matsushima-Hibiya Y, Mutoh H, Sugimura T, et al. Suppression of cyclooxygenase- promoterdependent transcriptional activity in colon cancer cells by chemopreventive agents with a resorcin-type structure. arcinogenesis ; : ) DeFeudis FV. Ginkgo biloba extract (EGb 76): Pharmacological activities and clinical applications. Paris: Elsevier;99. p ) Meade J, Heuer H. PF antagonism as an approach to the treatment of airway hyperreactivity. m Rev Respir Dis 99;:S ) Lee JG, Moon HJ, Kim SS, Kim W, Yoon JH. Expression and regulation of MU8 & by various cytokines in normal human nasal epithelial cells. Korean J Otolaryngol ;:6-5. 8) Gray T, oakley R, Hirsh, Thornton D, Kirkham S, Koo JS, et al. Regulation of mucin secretion and airway surface liquid metabolism by IL-β in human bronchial epithelia. m J Physiol Lung ell Mol Physiol ;86:L-. 9) Song KS, Lee WJ, hung K, Koo JS, Yang EJ, hoi JY, et al. Interleukin-β and tumor necrosis factor-α induce overexpression through a mechanism involving ERK/p8 mitogen-activated protein kinases-msk-re activation in human airway epithelial cells. J iol hem ;78:-5. ) Kai H, Yoshitake K, Hisatsune, Kido T, Isohama Y, Takahama K, et al. Dexamethasone suppresses mucus production and MU- and MU-5 gene expression by NI-H9 cells. m J Physiol 996;7:8-8. ) Kim YD, ho JS, hang KY, Sin JH, Song SY, Yoon SK. udesonide down-regulates IL-β-mediated MU/ genes expression and mucin secretion in human airway epithelial cells. Korean J Otolaryngol ;5:87-7. ) Kim YD, Kwon EJ, Kwon TK, aek SH, Song SY, Suh JS. Regulation of IL-β-mediated MU gene in NI-H9 human airway epithelial cells. iochem iophys Res ommun ;7:-6. ) DeFeudis FV. Ginkgo biloba extract (EGb 76): Pharmacological activities and clinical applications. Paris: Elsevier;99. p.-6. ) Webster RP, Gawde MD, hattacharya RK. Protective effect of rutin, a flavonol glycoside, on the carcinogen-induced DN damage and repair enzymes in rats. ancer Lett 996;9: ) Yoon JH, aek SJ. Molecular targets of dietary polyphenols with anti-inflammatory properties. J Yonsei Med 5;6: ) Kim YD, ai H, Woo HJ. Interleukin-β-mediated gene expression and mucin secretion via PK-ERK/p8-OX--PGE in human airway epithelial cells. Korean J Otolaryngol ;6: 7-.

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Microsoft Word doc KISEP Rhinology Korean J Otolaryngol 2006;49:307-12 사람정상코점막상피세포에서겔형성점소 (Gel-Forming Mucin) 분비에대한 Prostaglandin E 2 의효과 김진국 1 김창훈 2,3 김규보 2 장현종 1 김현직 2 윤주헌 2,3,4 Effect of Prostaglandin E 2 on Gel-forming